植物组织培养复习材料
一、名词解释。
1、植物组织培养(plant tissue culture)：植物的离体器官、组织或细胞在人工制备的培养基上进行无菌培养，并在人工控制的环境条件下，使其发育成完整植株的科学技术
2、脱分化（dedifferentiation）：指失去分裂能力的细胞回复到分生性状态并进行分裂，形成无分化的细胞即愈伤组织的现象。
3、再分化（redifferentiation）：愈伤组织形成不定芽或不定根或胚状体。
4、外植体(explant)：植物组织培养过程中从活体植株上切去下来的用于离体培养的一切材料。（如器官、组织、细胞、原生质体、种子等）
5、愈伤组织(callus)：原本指植物在受伤后于其伤口表面形成的一团薄壁细胞。在组培中，则指人工培养基上由外植体形成的一团无序生长的薄壁细胞。
6、器官发生：胚胎时期由胚层器官原基发育成器官的过程。包括细胞分化和器官形成。
7、胚状体发生：在植物细胞、组织或器官体外培养过程中，由一个或一些体细胞经过胚胎发生和发育过程，形成的与合子胚相类似的结构。可进一步发育成植株。
8、细胞全能性（cell totipotency）：指植物的每一个细胞都携带有一完整的基因组，并具有发育成完整植株的潜在能力。
9、细胞分化：一个尚未特化的细胞发育出特征性结构和功能的过程。
10、极性：细胞（也可指器官或植株）内的一端与另一端在形态结构和生理生化上的差异。
11、试管苗：通过组织培养产生的植株。
12、看护培养：是指用一块活跃生长的愈伤组织来看护单个细胞，使其持续分裂和增殖的一种培养方法。这块愈伤组织被称为看护组织。
13、固相化培养：将细胞或原生质体固着在琼脂糖、藻（月元）酸盐或多聚赖氨酸中，然后将他们放入液体培养基中震荡培养。这种培养方法既利用了振荡培养室营养物质和气体易于交换的优点，有利用了固相化使细胞免受振荡时剪切力的作用。
14、悬浮细胞培养：将单个游离细胞或小细胞团在液体培养基中进行培养增值的技术。适用于大规模的培养，使细胞工程的基本平台。
15、植板效率=（每个平板中新形成的细胞团数/每个平板中接种的细胞数）*100
16、实验室的组成及功能：1.基本实验室（1）准备室（2）接种室（3）培养室2.辅助实验室（1）细胞学实验室（2）摄影室及暗室（3）生化分析室（无菌操作室、化学实验室、培养室、细胞学观察室、暗室）。
17、植物种质：物亲代通过生殖细胞或体细胞传递给后代的遗传物质，植物种质资源即为携带各种不同遗传物质的植物总称。
18、玻璃化现象：指试管苗的一种生长失调症状，当植物材料进行离体繁殖时，有些培养物的嫩茎、叶片往往会出现半透明状和水渍状，这种现象称为玻璃化。其苗称为玻璃化苗。
19、基本培养基：包括大量元素和微量元素（无机盐类）、维生素和氨基酸，还有糖和水等。
20、完全培养基：在基本培养基基础上，根据各种不同试验要求，添加各种植物生长调节物质以及其他复杂有机附加物，包括有些成分尚不完全清楚的天然提取物。21、外植体褐变：在组织培养过程中，外植体向培养基中释放褐色的物质（醌类）致使培养
基逐渐变成褐色，培养材料也随之变成褐色而逐渐死亡的现象。
22、微体快繁：利用植物组织培养技术进行的一种营养繁殖方法。
23、微体嫁接：把极小（小于0.2mm）的茎尖作为接穗嫁接到实生木上，然后将嫁接后的砧木接种到新培养基上培养。
24、敏感植物：有些植物对病毒极为敏感，一旦感染病毒就会在其叶片乃至全株上表现特殊的病斑，如马铃薯病毒—千日红、黄烟花、心烟叶、毛叶蔓陀罗。菊花病毒—矮牵牛。
25、固相化的方法：凝胶包埋、表面吸附、网格及泡沫固定、膜固定。
26、悬浮细胞培养:将单个游离细胞或小细胞团在液体培养基中进行培养增殖的技术。
27、固相化细胞培养：把细胞固定在一种惰性基质，如琼脂、藻盐酸、聚丙烯酰胺、纤维或膜上面或里面，细胞不能运动，而营养液可以在细胞间流动，供应其营养。
28、条件培养：在选用的培养基中，加入一定量以生长过组织或细胞的培养液（离心去除组织或细胞）称条件培养液。用条件培养液培养细胞，即使接种的细胞密度低于最低有效密度，这些细胞也能生长和分裂。
30、再分化培养：
31、液体培养：指在进行培养时，培养基中不加琼脂等凝固剂，一般需要通过振荡等方法解决培养基的通气情况。
32、细胞培养：指从植物体中分离了单细胞，无人工条件下进行培养，使其生长增殖，甚至发育成完整植株的技术。
33、无病毒苗：指不含该种植物主要危害病毒的苗木。
34、原生质体融合：指使分离下来的不同亲本的原生质体，在人工控制的条件下，像性细胞受精作用那样互相融合成一体，又称体细胞杂交。
35、胚状体：体细胞在一定条件下所诱导形成的胚称为体细胞胚，即胚状体
36、原生质体：指去掉细胞壁的由质膜包裹有生命活力的裸细胞。
37、单倍体植株：只含有配子体染色体组数的植株。
38 人工种子：指通过组织培养技术，将植物的体细胞诱导在形态上和生理上均与合子胚相似的体细胞胚，然后将它包埋于有一定营养成分和保护功能的介质中，组成便于播种
的类似种子的单位。
39、离体授粉：将未授粉的胚珠或子房从母体上分离下来,进行无菌培养,并以一定的方式授以无菌花粉,使之在试管内实现受精的技术,又称为离体受精或试管受精
40、植物生长调节剂：植物中调节生长及其他功能的激素类物质。主要分为三类：植物生长素类、细胞分裂素类和赤霉素类。
41、器官培养：指植物的根、茎、叶、花器和幼小果实的无菌培养。
42、植物胚胎培养：指对植物的胚、胚胎、胚珠和子房的培养。
二、不定项选择（每题2 分，共10分）
１、下列不属于生长素类的植物激素是__ _A D______。
A Kt；
B IAA；
C NAA；
D ZT
２、影响培养基凝固程度因素有_ _ABCD____。
A 琼脂的质量好坏；
B 高压灭菌的时间；
C 高压灭菌的温度；
D 培养基的PH
３、第一次提出植物细胞具有全能性的理论概念的科学家是：B
A Morel；
B Haberland；
C Schleiden；
D White
４、下列不属于大量元素的盐是___C_ _____。
A NH4 NO3；
B KNO3；
C Zn SO4 .7HO2；
D MgSO4 .7HO2
５、下列实验中可能获得单倍体植株的是__ _BCD_____。
A 小麦的茎尖培养；
B 番茄花药培养；
C 玉米胚乳培养；
D 玉米花粉培养
6、活性炭在组织培养中的作用有__ ABC____。
A 吸附有毒物质；
B 减少褐变，防止玻璃化；
C 创造黑暗环境，增加培养基的通透性，利于根的生长；
D 增加培养基中的养分
7、下列具有细胞全能性的细胞是：_ ABCD___。
A 成熟的老细胞；
B 幼嫩的组织细胞；
C 愈伤组织细胞
D 番茄的受精合子
8、下列培养基中____C ___无机盐的浓度最低。
A MS 培养基；
B B 培养基；
C White 培养基；
D N6 培养基
9、从单个细胞或一块外植体形成典型的愈伤组织，大致经历_ __ACD__三个时期。
A 诱导期；
B 潜伏期；
C 分化期；
D 分裂期
10、植物组织培养的特点是_ ABCD__：
A 培养条件可人为控制；
B 生长周期短，繁殖率高；
C 管理方便；
D 取材少
11、高温易被破坏分解的植物激素是___ABD___。
A IAA；
B GA；
C NAA；
D Zt
12、同一植株下列__ _B___部位病毒的含量最低。
A 叶片细胞；
B 茎尖生长点细胞；
C 茎节细胞；
D 根尖生长点细胞
13、在原生质体的培养中，渗透稳定剂的作用是--A--- ：
A 稳定原生质体的形态而不使其被破坏
B 支持作用
C 提供营养
D 调节PH 值
14、下列实验中不可能获得单倍体植株的是__AC_____。
A 水稻茎尖培养；
B 草莓花药培养；
C 玉米叶片培养；
D 棉花胚乳培养
15、适合花粉培养的最适时期是---B--：
A 单核早期
B 单核靠边期
C 二核期
D 三核期
16、IAA需要用___ C____法灭菌。
A 灼烧灭菌；
B 干热灭菌；
C 过滤灭菌
D 高压湿热灭菌
17、能打破种子休眠，促进种子、块茎、鳞茎等提前萌发的激素是---AB----：
A GA；
B IAA；
C NAA；
D ZT
18、下列实验中可能获得单倍体植株的是__ BCD____。
A 小麦的茎尖培养；
B 番茄花药培养；
C 玉米胚乳培养；
D 玉米花粉培养
19、下面属于处于愈伤组织分裂期的特征是__ ABCD____。
A 细胞分裂加快
B 正在分裂的细胞体积小，内无液泡
C 细胞的核和核仁增至最大
D 细胞中的RNA 含量减少，而DNA 含量保持不变
20、赤霉素（GA）需要用____C_ ____法灭菌。
A 灼烧灭菌；
B 干热灭菌；
C 过滤灭菌
D 高压湿热灭菌
21、第一次提出植物细胞具有全能性的理论概念的科学家是___ B_____：
A Morel ；
B Haberland ；
C Schleiden ；
D White
22下列那种方法不能脱除感染植株体内的病毒AC
①茎段培养；②微茎尖培养；③愈伤组织的继代培养；④珠心胚培养
23．适合外植体材料表面消毒的方法是 B
①高压蒸汽；②适宜浓度的消毒剂浸泡；③紫外线消毒；④熏蒸消毒
24、经高温灭菌后。培养基的pH会A
A 降低
B 升高
C 不变
D 不能确定
25、在植物组织培养中，培养基的PH值一般为B
A 低于5.0
B 5.5—5.8
C 6.0—7.0
D 高于7.0
26、下列有关细胞全能性的含义，正确的是C
A 每个生物体内的所有细胞都具有相同的功能
B 生物体内的任何一个细胞可以完成该个体的全部功能
C 生物体的每一个活细胞都具有发育成完整个体的潜能
D 生物体的每个细胞都经过产生、分裂、分化、生长、衰老、死亡的全过程
27、下列那种方法不能脱除感染植株体内的病毒（AC）
A 茎段培养；
B 微茎尖培养。
C 愈伤组织的继代培养；
D 珠心胚培养。
28、下列不属于生长素类的植物激素是___ A______。
36、根据培养的材料，植物组织培养分：___愈伤组织培养__、___器官培养__、__
细胞培养___、__原生质培养___等类型。
37、组织培养植株再生的途径：__直接产生不定芽___和_通过愈伤组织形成不定芽____。
38、植物组织培养的发展分为三个阶段：___萌芽阶段__、__奠基阶段___和_快速发展和应用阶段____阶段。
40、外植体污染原因从病源分面主要有真菌和细菌两大类
41、糖在植物组织培养中是不可缺少的，它不但作为离体组织赖以生长的碳源，
而且还能维持培养基渗透压
42、外植体灭菌一般先用酒精，再用升汞浸泡
43、由愈伤组织后成大致经历诱导期、分裂期、分化期、三个时期。由愈伤组织再
生植株有两条途径和
45、常用的生长素有 IAA、 2，4-D、IBA NAA等，常用的细胞分裂素KT、ZT 、6-BA
46、防褐变的措施：选取适宜的外植体和培养条件、剪切时尽量减少伤口面积、剪切口尽量平整、连续转移（继代培养）、加入抗氧化剂
47、植物常用脱毒方法：热处理脱毒原理、茎尖培养脱毒原理、化学药剂处理、冷处理原理、原生质体，愈伤组织培养法、花药培养、
24．细胞的全能性，可以通过成熟细胞的脱分化和再分化过程体现√
25．铁盐，常用乙二胺四乙酸铁螯合物，以防被氧化为不溶的氢氧化铁.√
26. 用茎尖分生组织脱毒培养时，茎尖外植体大小与脱毒效果成反比。X
30 对于含有琼脂糖的培养基而言，在pH值高于6.5时，培养基不能很好地凝固；低于5.0时，培养基会变硬.X
31 由性细胞发育而成的胚叫做胚状体，而由体细胞发育而成的胚叫做合子胚X
五、简答题（每题5分，共15分）
1、培养基一般包括哪些基本成分?
答：培养基的成份有：（1）无机营养：包括：氧(O)、碳(C)、氢(H)、氮(N)、钾(K)、磷(P)、镁(Mg)、硫(S)和钙(Ca)等大量元素；铁（Fe ）、铜（Cu）、锌（Zn ）、锰（Mn ）、钼（Mo ）、硼（B ）、碘（I）、钴（Co）、氯（Cl）、钠（Na ）等微量元素（2）有机营养：氨基酸、天然提取物、维生素、糖类（3）植物生长调节物质：主要包括生长素类和细胞分裂素类。（4）其他：包括水、活性炭、琼脂等。
2、培养基、培养器皿和植物材料通常怎样灭菌?
答：培养基一般采用湿热灭菌，如果培养基中的有些成分高温易分解，则可采用过滤灭菌.培养器皿可采用湿热灭菌或干热灭菌。
植物材料一般采用药剂浸泡灭菌，具体操作如下：
（1）外植体的预处理，对植物组织进行修整，去掉不需要的部分，并将外植体用流水冲洗干净。
（2）用70%的酒精浸润材料30s 左右。
（3）用灭菌剂浸泡灭菌，灭菌时不时搅动，使植物材料与灭菌剂有良好的接触，若灭菌
过程中加入数滴吐温，则灭菌效果更好。
（4）植物材料用无菌水冲洗3--5 次，以除去灭菌剂。
3、提高商品化生产效率：1.节约能源 2.减少劳务开支 3.扩大生产规模 4.节约生产材料补：降低商业化生产成本提高经济效益：
4、针对试管苗生产所需的费用，应采取相应措施降低生产成本，增强产品竞争力，提高试管苗经济效益。
5、诱导体胚的条件:1．外植体：①产生部位：尤其胚、下胚轴、幼根、花序轴组织、未成熟的子房等；②生理状态：采用外植体增殖能力较强时候的状态；③基因型。
2.培养基：特别重要的是培养基中的生长素和N源。N源：还原态氮/硝态氮适宜比值。
3.生长调节剂：①生长素：所有生长素中，2,4-D被证明是极有效的。
体胚发生2个阶段：胚的分化，胚性细胞的形成（需2,4-D）；胚状体的发育（低或去除2,4-D）。2,4-D会诱导乙烯的产生，导致纤维素酶等活性升高，引起胚性细胞团的破坏。
②细胞分裂素：细胞分裂素与生长素配合促进诱导体胚形成。
③赤霉素和脱落酸：GA、ABA抑制体胚形成，但ABA可促进胚状体的正常发育，防止畸形胚的产生，尤其是对体胚成熟特别重要。细胞再分化：是指脱分化的分生细胞重新恢复分省能力，沿着正常的发育途径形成具有特定结构和功能的细胞。
6、组培实验室的组成，基本设备和功能
答：组织培养实验室基本组成：（1）无菌操作室（2）化学实验室（3）培养室（4）细胞学观察室（5）暗室（6）驯化移栽室；无菌操作室基本设备有超净工作台、紫外灯、小搁架。无菌操作用的器具，主要进行无菌操作；化学实验室基本设备有干燥箱、电子天平、量筒、吸管、烧杯、高压灭菌装置等，主要用于配置好培养基；培养室设备有固定式培养架、旋转式培养架、转床、摇床、控温、控光设备，是将接种到试管等的培养材料进行培养生长的场所。细胞学观察室有显微镜、解剖镜、及照相设备，用于观察，记录培养材料的生长情况及结果；暗室用于实验室材料的摄影记录，有放大机、暗箱、上光机等设备；驯化移栽室用于试管苗移栽，有弥雾装置、遮阴网、移植床等。
7、培养基的配制
答：配制培养基时应做好下列准备工作：（1）实验用具的准备（2）试剂、药品的准备（3）根据培养基的配方、母液扩大倍数及需要配制的培养基体积计算所需的各种母液及其他附加物的量。具体操作如下：1，取规定数量糖原和凝固剂，加热使之溶解 2，根据计算所需量依次加入大量元素、微量元素、铁盐、有机物、生长调节物质母液及其他特殊附加物，搅拌均匀 3，加水定容至规定体积
8、无菌操作技术
答：无菌操作技术分为物理灭菌—干热、湿热、射线处理，物理除菌—过滤，化学方法—消毒剂、抗菌素灭菌。注意事项：（1）瓶口要清洗干净（2）培养瓶上的标记要擦净（3）冬季用热水溶解洗衣粉后再洗（4）洗过玻璃器皿要沥干或烘干（5）移液管之类的量具和计量仪器不直接烘烤。实验室一般使用高压灭菌锅，是在0.105mpa压力下，锅内温度达到121℃，在此水蒸气温度下，可以很快杀死各种细菌及其高度耐热的芽孢。
9、热处理脱毒法
答：原理：（1）高于正常温度的环境（35℃~40℃）时，组织内部的病毒部分或全部钝化（2）热处理使病毒失去传染力。方法：1，适用于离体材料和休眠器官的处理。在50℃左右温水浸渍10min至数小时2，热空气法：盆栽植物移入温热疗室，35~40℃，适合茎尖，处理时间短则几十分钟，长可达数月。局限性：1并非所有的病毒都对热处理敏感 2 延长热处理时间，也可能会钝化，植物组织中的抗性因子 3处理后只有一小部分植株能存活。
10、快繁中几大难题及解决方法
答：影响快繁的方法有内因有外因。因主要是外植体的选取，应该在春夏、早秋时根据外植体基因型和生理、发育等方面选取0.5~1cm的。外因，首先是污染，防止污染应从以下几方面考虑：（1）选择植物材料（2）严格消毒灭菌（3）合理安排繁殖程序（4）规范操作 2，褐变问题，克服外植体产生褐变的措施有（1）选择适合的外植体和培养条件（2）连续转移（继代培养）（3）加入抗氧化剂；3，玻璃化，控制和克服玻璃化的措施有（1）使用透气好的封口材料（2）光照（3）温度（4）提高琼脂的量（5）硝态和氨态的比例提高（6）继代培养时，降低ck/IAA，增加乙烯醇等（7）抗逆性的锻炼。
原球茎：缩短的呈珠粒状的，由胚性细胞组成的，类似嫩茎的器官
11、植物组织培养的应用及意义：
理论研究(在遗传、生理、生化、病理等研究上的应用)；快繁；脱毒；遗传育种（单倍体育种、突变育种、抗性选育、体细胞杂交）；次生代谢产物生产（主要用于药物、食品、调料、香精、颜料等领域）；种质资源保存和交换；人工制种。
13、植物遗传转化的方法：
1.通过载体系统：病毒、细菌质粒
2.非载体介导：种质系统（自身生殖系统细胞，如花粉）、直接转化系统（基因枪、超声波）。
14、原生质体融合的原理和方法
答：植物原生质体最大特性是去掉细胞壁的裸细胞无论来源如何都具有彼此融合的能力 1.自发融合 2.诱发融合：a，NaNO?处理 b，高PH值—高浓度钙离子处理 c，聚乙二醇（PEG）处理 d，电融合 3.化学融合
15、外植体消毒应注意的问题：
1.要考虑药剂对各类菌类的杀灭效果，从中选出最有效的杀菌剂；
2.考虑植物材料对杀菌剂的忍耐力。
17、快繁的基本程序：
1.稳定无菌培养体系的建立时期；
2.稳定培养系的增殖、生长和健壮时期；
3.诱导茎芽生根形成小苗时期；
4.生根小苗移栽和驯化时期；
5.商品苗培育时期。
18、植物离体快繁中常见的问题：
污染、遗传稳定性、玻璃化、褐化、黄化等
19、克服外植体褐变：
选取适宜的外植体和培养条件；剪切时尽量减少伤口面积，剪切口尽量平整；连续转移（继代培养）；加入抗氧化剂。
20、玻璃化苗产生原因：
乙烯过饱和，引起解氨酶活性降低，阻碍木质化进程；细胞激动素或铵离子的过剩也是一种原因；植物的磷酸戊糖代谢途径与玻璃苗产生也有关。
22、控制玻璃化苗的措施：
1.使用透气性好的封口材料，尽可能降低培养容器中空气的湿度，改善氧气的供应情况。
2.选择合适的激素种类和浓度，注意生长素和分裂素的配合，尽量兼顾繁殖系数。
3.采用固体培养基，适当增加琼脂含量，降低培养基中的水势。
4.高温季节培养室要有降温措施，避免培养基温度的突然升高。
5.改变供氮形态。
6.在培养基中适量地添加间苯三酚或根皮苷、青霉素G钾、活性炭、聚乙烯醇均可以有效的抑制玻璃苗的产生。
7.适当地延长光照培养皿的时间或增加自然光照，提高光照的强度，有利于克服玻璃化。
8.适当提高培养基中无机盐的含量。
23、不定芽与体胚芽比较：
1）体细胞胚最根本的特征是具有两极性（2）体胚的维管组织与外植体的该组织无解剖结构上的联系，而不定芽或不定根往往总与愈伤组织的维管组织联系（3）体细胞胚维管组织的分布是独立的“Y”字形，而不定芽的维管组织无此现象。
24、茎尖培养脱毒的原理：
1.病毒在植物体内分布不均匀，越接近顶端分生组织，病毒浓度越稀；
2.病毒DNA分子与细胞分装蛋白质合成竞争，在迅速合成的植物细胞中正常合成的蛋白质占优势；
3.病毒的复制赶不上细胞分裂的速度。关键：通常茎尖培养脱毒的效果与茎尖的大小呈负相关，与成活率呈正相关。操作程序：外植体表面灭菌，在解剖镜下，经无菌操作切取小茎尖，接种到备用培养基土培养，并及时观察记录培养结果。
25、在植物组织培养中细胞分裂素和生长素各有什么作用？
答：生长素能促进细胞的纵向伸长，它的作用具有两重性：既促进生长，又能抑制
生长、甚至杀死植物；既促进发芽，又会抑制发芽；既能防止落花落果，又可疏花疏果。
这取决于浓度、细胞的年龄和器官的种类。一般低浓度促进生长，中浓度抑制生长，高浓度则杀死植物。
细胞分裂素能促进细胞分裂和扩大、延迟衰老和保鲜、诱导芽的分化、促进侧芽发
育，防止果树生理落果、打破种子的休眠，促使其发芽等作用。
26、什么是看护培养?其具体的方法是什么？
答：看护培养指用一块生长活跃的愈伤组织来看护单个细胞或其他培养物，使其生长和增殖的方法。
具体方法：1、将生长活跃的愈伤组织放入灭过菌的固体培养基上，并在愈伤组织上放一片无菌滤纸片。
2、将该愈伤培养过夜。
3、将单细胞或其他培养物放于滤纸片上面，移入培养室培养。
27、培养基、培养器皿和植物材料通常怎样灭菌?
答：植物材料一般采用药剂浸泡灭菌，具体操作如下：
1、外植体的预处理，对植物组织进行修整，去掉不需要的部分，并将外植体用流水冲洗干净。
2、用70%的酒精浸润材料30s 左右。
3、用灭菌剂浸泡灭菌，灭菌时不时搅动，使植物材料与灭菌剂有良好的接触，若灭菌过程中加入数滴吐温，则灭菌效果更好。
4、植物材料用无菌水冲洗3--5 次，以除去灭菌剂。培养基和培养器皿可采用湿热灭菌，培养器皿也可采用干热灭菌，有些培养器械也可采用洒精灯火焰灼烧。
29、NAA 的中文名称是什么？有何作用和特点？
答：NAA 的中文名称是荼乙酸，是植物生长素的一种。
作用和特点为：促进植物细胞纵向伸长，促进植物细胞脱分化，促进根的生长。除此以外还具有植物生长素类有一般性质：它的作用具有两重性：既促进生长，又能抑制生长、甚至杀死植物；既促进发芽，又会抑制发芽；既能防止落花落果，又可疏花疏果。这取决于浓度、细胞的年龄和器官的种类。一般低浓度促进生长，中浓度抑制生长，高浓度则杀死植物。
30、实验室设备：
1.恒温箱、生化培养箱、光照培养箱、人工气候箱和植物生长箱
2.烘箱
3.空调、加热器
4.灭菌设备
5.冰箱和冰柜
6.振荡和旋转培养机
7.天平 8.酸度计 9.显微镜 10水浴锅 11.蒸馏水制造装置 12.超净工作台
31、无菌操作技术：
1.常用灭菌方法及其使用范围（湿热灭菌、干热灭菌、过滤灭菌、射线灭菌、药剂灭菌）
2.培养基灭菌
3.植物材料的灭菌
4.接种
15、培养基的制备：1.母液的配制与保存 2.培养基的配制 3.培养基的灭菌 4.培养基的保存
32、培养基的制备：
1.母液的配制与保存
2.培养基的配制
3.培养基的灭菌
4.培养基的保存
33、高压蒸汽灭菌锅操作程序：
将分装好的培养基放入高压蒸汽灭菌锅的消毒桶内，灭菌锅内添加适量的水，盖好灭菌锅盖，对角拧紧螺丝；检查一下放气阀有无故障，然后关闭放气阀，打开电源加热，当压力表指针达0.05mpa时，打开气阀，排出锅内空气，再关闭气阀，此时锅内取而代之的是水蒸气，当高压锅内温度达121℃，压力为0.105mpa时保持此压力灭菌约15~20min，然后切断电源，缓缓打开放气阀放气，待高压锅压力表指针恢复到零后，开启压力锅并取出培养基，室温下冷却。
34、为什么要有一定的细胞起始浓度？
答：细胞能够合成某些对进行分裂所必须的化合物，只有当这些化合物的内生浓度达到一个临界点以后，细胞才能进行分裂，当细胞密度处于临界点密度以下是永远达不到这种平衡状态，因此细胞也就不能分裂。
22、体细胞杂交按所用亲本原生质体的性质可分为3类：体细胞杂交(用双亲体细胞原生质
体或其衍生系统进行诱导融合)；配子间细胞杂交（用双亲的性细胞原生质体作为融合亲本进行融合、培育、筛选、鉴定等过程）；配子和体细胞杂交（一个融合亲本为性细胞原生质体，另一个为体细胞原生质体间的杂交过程）。
35、体细胞杂交按所用亲本原生质体的性质可分为3类：
体细胞杂交(用双亲体细胞原生质体或其衍生系统进行诱导融合)；配子间细胞杂交（用双亲的性细胞原生质体作为融合亲本进行融合、培育、筛选、鉴定等过程）；配子和体细胞杂交（一个融合亲本为性细胞原生质体，另一个为体细胞原生质体间的杂交过程）。
36、固相化细胞培养的优点：
1.有利于次级代谢产物的积累；
2.细胞经包埋后，可以减小剪切力的损伤，有利于产物合成和分泌；
3.有利于进行连续培养和生物轻化等。
37、简述植物组织培养的理论依据？
植物组织培养的理论依据是细胞全能性学说，即植物体的每一个细胞都携带有一套完整的
基因组，并具有发育成为完整植株的潜在能力。
38、植物组织培养有哪些特点？
1）培养条件可以人为控制
（2）生长周期短，繁殖率高：
（3）管理方便，利于工厂化生产和自动化控制：
39、培养基的种类？太多了自己去书上找
40、植物组织培养主要应用于哪些方面？
1）快速繁殖运用组织培养的途径，一个单株一年可以繁殖几万到几百万个植株；
（2）种苗脱毒针对病毒对农作物造成的严重危害，通过组织培养可以有效地培育出大量的无病毒种苗；
（3）培育和创制新品种利用组织培养可以使难度很大的远缘杂交取得成功，从而育成一些罕见的新物种；
（4）大量生产次生代谢物质通过植物细胞培养获得的生物碱、维生素、色素、抗生素以及抗肿瘤药物不下50多个大类，其中已有30多种次生物质的含量在人工培养时已达到或超过亲本植物的水平。植物细胞次生物质的研制与生产硕果累累，后来居上。
（5）植物种质资源的离体保存植物组织培养结合超低温保存技术，可以给植物种质保存带来一次大的飞跃。因为保存一个细胞就相当于保存一粒种子，但所占的空间仅为原来的几万分之一，而且在-193度的液氮中可以长时间保存，不像种子那样需要年年更新或经常更新。
（6）人工种子人工种子便于贮藏和运输，适合机械化播种；繁殖速度快，不受季节和环境限制，利于工厂化生产；体细胞胚由无性繁殖体系产生，可以固定杂种优势。
41、培养基一般成分与作用？同39 自己找
42、植物胚胎培养的意义
1,克服杂种胚的败育,获得稀有杂种 2,获得单倍体和多倍体植株 3,打破种子休眠,促进胚萌发 4,快速繁殖良种,缩短育种周期 5,克服种子生活力低下和自然不育性,提高种子发芽率 6,提高后代抗性,改良品质 7,种子活力的快速测定 8,种质资源的搜集和保存 9,研究胚胎发育的过程和控制机制
43、茎尖培养的特点
44、无病毒苗培育的意义
采用生物、物理、化学等途径防治病毒病收效甚微，甚至毫无成效。自从50年代发现通过组织培养的方法可以脱除严重患病毒植物的病毒种类，提高产量、质量后（如草莓可增产20～50％，植株结果多，单果重增加，上等果比例提高。菊花切花品种的脱毒株，表现出株高增加，切花数增多，花朵大，切花较重）。因此到60至70年代组织培养的技术在花卉、蔬菜和果树等得到广泛的应用。
用组织培养方法生产无毒苗，?是一个积极有效的途径，由于排除了使用药剂，所以对减少污染，防止公害，保护环境都有积极的意义。
45、茎尖培养脱毒的原理
1.病毒在植物体内分布不均匀，越接近顶端分生组织，病毒浓度越稀；
2.病毒DNA分子与
细胞分装蛋白质合成竞争，在迅速合成的植物细胞中正常合成的蛋白质占优势；3.病毒的复制赶不上细胞分裂的速度。关键：通常茎尖培养脱毒的效果与茎尖的大小呈负相关，与成活率呈正相关。操作程序：外植体表面灭菌，在解剖镜下，经无菌操作切取小茎尖，接种到备用培养基土培养，并及时观察记录培养结果。
1、任选一种植物为例，论述其工厂化生产工艺流程
2、简述植物组织培养的发展趋势？
3、请论述植物组织培养的三大难题及解决办法
4、简述我国植物组织培养的进展及前景？
5、植物单倍体育种过程意义
6、花药与花粉培养的异同？
7、植物转基因的意义
8、植物离体授粉的意义
9、植物脱毒的方法与原理及应用
最后七道题很重要
植物组织培养的基本步骤 成熟细胞离体——（脱分化）——分生细胞——（分裂）——愈伤组织——（再分化）——形态建成————完整植株。 培养基的主要成分 【水分】 【无机盐】1.大量元素：N，P，K，Ca，Mg，S（由相关的无机盐提供） 2.微量元素：Fe，B，Cu，Mn，Mn，Zn，Co 【有机营养成分】1.糖类 2.维生素 3.氨基酸 4.肌醇 5.天然有机物【植物生长调节剂】1.生长素 2.细胞分裂素 3.其他生长调节剂 【凝固剂】琼脂 【其他物质】1.活性炭 2.抗生素 3.抗氧化物质 4.硝酸银 培养基和组织培养用具的灭菌方式 【培养基，无菌水】高压蒸汽灭菌，0.105MPa灭菌15~30分钟 【移栽基质】曝晒，甲醛熏蒸或高压蒸汽灭菌0.14MMPa灭菌1~2h 【接种室，缓冲室】紫外线灯照射30min，或气雾消毒剂 【超净工作台】紫外线灯30min，之后打开风机过滤除菌 【外植体】不同的化学消毒剂浸泡消毒 【接种工具】70%乙醇浸泡或擦拭，之后用火焰灼烧灭菌 【培养室】3%来苏尔喷雾，或甲醛，气雾消毒熏蒸 【皮肤】先用肥皂洗手，接种前用70%乙醇擦拭 【瓶口，管口】70%乙醇擦拭，用火焰封口
【培养瓶表面】70%乙醇擦拭 【台面，桌面】70%乙醇擦拭或喷雾消毒 植物外植体的灭菌方式 【茎尖，茎段，叶片】1. 用70%乙醇浸泡30秒，再用无菌水冲洗1次。 2.用2%次氯酸钠浸泡15min或0.1%升汞浸泡5~10min。 3.若材料有绒毛，最好在消毒液中加入几滴吐温。 4.消毒时要不断震荡，使植物材料与消毒剂充分接触。 5.最后用无菌水冲洗3~5次。 【果实】1.用乙醇迅速漂洗一下，再用无菌水冲。 2.用2%次氯酸钠浸泡10min，用无菌水冲洗2~3次。 【种子】用10%次氯酸钠浸泡20~30min，或0.1%升汞消毒5~10min，然后再用无菌水冲洗3~5次。 【花蕾】1.用70%乙醇浸泡10~15秒，无菌水冲洗一次。 2.在漂白粉中浸泡10min，用无菌水冲洗2~3次。 【根及地下部器官】用0.1%升汞浸泡5~10min 或用次氯酸钠浸泡10~15min，再用无菌水冲洗3~5次。 【消毒后的外植体应及时按照无菌操作技术接种在适宜的培养基上】
专题三植物的组织培养技术 一、选择题 1.用菊花的茎尖植物组织培养可培育出试管苗。下面关于这一过程的说法正确的是 () A.进行培养时，一次性加足营养物质以防止污染 B.整个培养过程应在光下进行，有利于长叶 C.要根据培养过程的实际情况，更换培养基 D.整个培养过程都应在密闭条件下进行，以免杂菌的污染 解析：进行植物组织培养时，外植体不能进行光合作用，因此培养基中要加入有机物。一般来说，从接种外植体到出现愈伤组织，需要经过2周时间。2周以后，由于培养基中的营养成分已接近耗尽，必须更换培养基，进行继代培养。20 d以后，可以根据愈伤组织的大小，决定是继续进行继代培养，还是进行试管苗培养。如果愈伤组织长到直径为1～1.5 cm时，即可以进行试管苗培养，否则还需要进行第二次继代培养。首次培养愈伤组织时，恒温箱的门应该关闭，不必见光，因为在无光条件下愈伤组织长得更快。在愈伤组织进行继代培养期间，可将恒温箱的门打开，让愈伤组织见光。愈伤组织见光后，颜色可以转为绿色，试管苗应该进行见光培养。 答案：C 2.下列关于花药离体培养过程的叙述中正确的是() A.花药培养成功与否与材料选择无关 B.花药培养成幼苗后，一定不能分瓶培养 C.花药培养成幼苗的过程中，除了适宜的温度、pH等，还要注意照光 D.一般地讲，材料选在单核期时花药培养成功率最高 解析：花粉植株能否培育成功受多种因素影响，其中材料的选择与培养基组成是主要影响因素；当培养获得愈伤组织或幼小植株时必须分瓶培养，才能诱导愈伤组织或幼苗分化；从花粉到幼苗阶段，由于无叶绿体，所以不需照光；对一般植物来讲，选择单核期往往成功率最高。 答案：D 3.关于花药培养产生花粉植株的途径，下列叙述错误的是() A.主要由培养基中激素的种类及用量决定途径 B.花粉经脱分化形成胚状体，再分化成丛芽，然后诱导生根 C.产生胚状体是花药离体培养中特有的途径 D.花粉先形成愈伤组织再诱导分化成植株
植物组织培养考试复习题 植物组织培养 绪论P1 第一章植物组织培养的基本原理P3 第二章植物组织培养的基本原理P6 第三章植物器官和组织培养P口 第四章胚胎培养及离体授粉P16 第五章花药和花粉培养P20 第六章植物细胞培养P24 第八章原生质体培养P27 第九章植物离体繁殖P30 第十章无病毒苗木培育P33 植物组织培养基本操作P35 1 绪论 植物组织培养的概念植物组织培养是在无菌和人工控制的环境条件 下，利用适当的培养基，对离体的植物器官、 由于培养的植物材料已脱离母体，乂称为植物离体培养(Plant culture in vitro)o 广义：对植物的器官、组织、细胞及原生质体进行离体培养技术植物组织培养
狭义：对植物的组织(分生组织、表皮组织、薄壁组织等)及培养产生 的愈伤组织进行离体培养。 1.无菌：使培养器皿、器械、培养基和培养材料等处于无真菌、细菌、病毒等微生物的状态，以保证培养材料在培养器1111中正常生长和发育。 2.人工控制的环境条件：对光照、温度、湿度、气体等条件进行人工 控制，以满足植物培养材料在离体条件下的正常生长和发育。 3.外植体：由活体（in vivo）植物体上提取下來的，接种在培养基上的无菌细胞、组织、器官等。（植物组织培养中，使用的各种器官、组织和 细胞统称为外植体。） 4.愈伤组织：外植体因受伤或在离体培养时，其未分化的细胞和已分 化的细胞进行活跃的分裂增殖而形成的一种无特定结构和功能的组织。 （在人工培养基上由外植体上形成的一团无序生长状态的薄壁细胞。）植物组织培养的特点 植物组织培养的主要特点是采用微生物学的实验手段来操作植物离体 的器官、组织和细胞。具体特点表现在： 1）组织培养的整个过程都是在无菌条件下进行的，外植体、培养基、接种环境都须经过无菌处理。 2）组织培养在多数情况下是利用成分完全确定的人工培养基进行的, 除少数特殊情况（进行营养缺陷型突变细胞的筛选）夕卜，素、微量元素、有机物和植物激素，培养基的PH和渗透压也是人为设定的。因此，在组织下也能再生完整植株。14）组织培养物通过连续继代培养可以不断增殖，
1.植物组织培养按培养对象分为______ 、 _______ 、________ 、 ________ 、________ 等几种类型。 2.一个己停止分裂的成熟细胞转变为分生状态，并形成耒分化的愈伤组织的现象称为 n tv 3.不同的灭菌剂其灭菌的机理一般不一样，次氯酸钙和次氯酸钠都是利用分解产生 _________ 来杀菌的；升汞是靠 ________ 来达到灭菌日的。 4.去除植物病毒的主耍方法是 _____ 和_______ 两种方法，当把二者结合起來脱毒效 果最好 5.在通过微茎尖培养脱毒时，外植体的大小应以成苗率和脱毒率综合确定，一般以 __________ mm、带 ________ 个叶原基为好。 6.White培养基________ 浓度低，适合生根培养。 7.一个已停止分裂的成熟细胞转变为_________ 状态，并形成_________ 的现象称为“ 脱分化”。 8.BA/NAA的高低决定了外植体的发育方向，比值低时促进 ________ 的生长，这时 _________ 占主导地位；比值高促进_________ 的生长，这时 _________ 占主导地位。 9.进行植物组织培养最基本的前提条件是 _____ 。 1、植物组织培养的理论基础是植物细胞全能性。 2、组织培养实验室必要的设备有超净工作台、高压灭菌器、空调机、夭平、显微镜、蒸饱水发生器等。 3、糖在植物组织培养中是不可缺少的，它不但作为离体组织赖以生长的碳源，而且还能维持培养菇渗透压 4、培养基灭菌一般在-108 kPa的压力下,锅内温度达121 °C ,维持20-30 min o 5、在离体叶培养中，6?BA和KT利于芽的形成:24D利于愈伤纟FI织的形成 6、在离体叶组织脱分化和再分化培养屮，茎和芽的分化主要有4个途径：方?接产生不泄芽、由愈伤组织产工不定芽、胚状体形成、形成球状体或小鳞茎等途径。 7、目前培育无病毒苗最广泛和最重要的一个途径是茎尖培养脱毒。 8、花药培养前的预处理:低温冷藏是最常用的方法。 1、植物组织培养的发展分为三个阶段：萌芽阶段、奠基阶段和快速发展和丿、'、/「用阶段。 2、培养基最常用的碳源是蔗糖,使用浓度在1%?5%常用 _3_%o 3、培养基的种类按其态相不同分为固体培养基与液体培养基，其火菌方法一般采用壷热消毒灭菌方法。 4、 pll的大小会影响琼脂的凝固能力，一般当pll大于6.0时，，培养基将会 ___________ ,低于5.0时，琼脂不能很好地凝同。 5、一般情况下，生长索/细胞分裂素的比值高，有利于根的形成和愈伤组织的形成:比值低有利于芽的形成。
0．填空 1.根据培养的材料,植物组织培养分:愈伤组织培养、(器官培养、细胞格养、原生质体培养(悬浮培养 2.植物组织培养的发展分为三个阶段:萌芽阶段、奠基阶段，快速发展和快速发展和应用阶段 3，1902年,Haberlandt提出了植物细胞“全能性”学说,1934年, White出版了《植物组织培养手册》培养等类型从而使植物组织培养为一门新兴学科。 一．填空、 1，组织培养实验室必要的设备有超净工作台、高压灭菌器、调机、_天平、显微镜、_蒸馏水，发生器，酸度计 养基成分主要包括①无机营养成分、②有机营养成分)、_③植物生长调节物质、_④碳水化合物、⑤其它物质 3、培养基最常用的碳源是_蔗糖,使用浓度在1%-5%常用3% 4、糖在植物组织培养中是不可缺少的,它不但作为离体组织棱以生长的碳源而且还能维持培养基渗透压 5、在固体培养时琼脂是使用最方便、最好的凝固剂和支持物般用量6-10g/L之间 6.驯化的目的:在于于提高试管苗对外界环境条件的适应性,提高其光合作用的能力,促使试健壮,提高苗的移裁成活 7、生长素/细胞分裂素的高低决定着外植体的发育方向,其比值高:有利于根的形成和愈伤组织的形成:低:有利于芽的形成 8、培养基灭菌一般在108kPa的压力下,锅内温度达_121℃C,维持_20-30min、 9.选择外植体时应选择①选择优良的种质、②选健壮的植株、③选最适的时期和④选取适宜的大小。 10、诱导胚状体比诱导芽的优点:(1)数量多、(2)速度快、_(3)结构完整 11、试管苗的生态环境:高温且恒温、高湿、弱光、无菌 12、培养基中加入活性炭的目的:利用其吸附能力,减少一些有害物质的影响大 13、筛选培养基的方法:单因子试验法、多因子试验法、广谱实验法 14、植物培养技术:灭菌、接种种、培养、驯化四个环节 15、试管苗的驯化注意:基质、温、光、水、肥、气的综合管理 二．填空 1.绝大多数培养植物再生植株时都先经过愈伤组织阶段 2.愈伤伤组织形成大致经历诱导期、分裂期一和分化期三个时期 3、愈用植物生长调节物质时要注意:种类和浓度生长素和细胞分裂素的比值4.愈伤组织的形态发生方式主要有不定芽方式和胚状体方式 5.组织培养细胞再分化包括四个水平:细胞水平的再分化、组织水平的再分化、器官水平的再分化(器宣发生)和植株水平的分化 三．填空: 1.植物器官培养主要是指植物的根、茎、叶、花器和幼小果实的无菌培养。 2、茎尖培养根据培养目的和取材大小分为茎尖分生组织培养和普通茎尖培养两种类型。前者主要是对茎尖长度不超过,最小只有几十微米的茎尖进行培养,目的是获得无病毒植株:后者是对几毫米乃至几十毫米长的茎尖、芽尖及侧芽的培养,目的是离体快繁 3.不定芽产生的途径一是从外植体上直接产生二是从由外植体诱导产生的愈伤组织上产生 4.离体叶培养是指包括叶原基、叶栖、叶鞘、叶片、子吐等叶组织的无菌培养 5.在离体叶培养中,6-BA和KT利于芽的形成;24D利于愈伤组织的形成 四．填空 1、胚胎培养包括幼胚培养、成熟胚培养、胚乳培养、胚珠培养以及子房培养 2、离体胚的培养分为二种类型:。成熟胚培养和_幼胚培养六
组培复习材料 一、名词解释 1、培养基：是离体植物（外植体）赖以生长、分化的基础，是根据植物的需求，人工配制的含有各种营养成分的营养液。 2、液体培养：把细胞或生物体的一部分，置于液体培养基中使其发育，并不断振荡，使之均匀地在悬浊液中进行培养的一种方法。 3、种子培养：是成熟种子和发育不全的未成熟种子的无菌培养。 4、叶培养：从母体植株上将叶组织（包括叶原基在内）切下，放在无菌的人工条件下使其生长发育形成植株的技术。 5、热处理脱毒：在一定范围内，用高温处理可部分或完全钝化植物组织中的某些病毒而不伤害或很少伤害植物本身的脱毒方法。 6、花药培养：是把花粉发育到一定阶段的花药接种到培养基上，来改变花粉的发育程序，使其分裂形成细胞团，进而分化成杯状体，然后再生植株，或形成愈伤组织，由愈伤组织再分化成植株。 7、连续培养：是利用特别的培养容器进行大规模细胞培养的一种培养方式。（培养过程中，不断注入新鲜培养基，排掉等体积用过的培养基，或者抽取悬浮培养物，使培养物的营养物质得到不断补充，从而保持其恒定体积的培养。—— 8、分批培养：指把细胞分散在一定容积的培养基中进行培养，建立单细胞培养物的培养方式。（细胞生长在固定体积的培养基中，当主要营养物质耗尽时，细胞的分裂和生长即停止。） 二、简答题 1、MS培养基特点。 答：MS培养基是Murashige和Skoog于1962年为烟草细胞培养设计的，其特点是无机盐和离子浓度较高，是较稳定的离子平衡溶液，具有高含量的氮、钾，尤其是硝酸盐用量大，还有一定数量的铵盐，其养分的数量和比例合适，不需要添加更多的有机附加物，就能满足植物组织对矿质营养的要求，加速愈伤组织和培养物的生长，当培养物就不转移时仍可维持其生存。目前应用最广泛。 2、植物组培生产特点。 答：①和传统的生产方式相比，具有不占耕地、生产不受季节限制而且能够整年连续进行、不受灾害性天气和病虫害影响的特点； ②具有人为可控性，可采用更适合于植物生长的“培养基”代替土壤提供养分和生长调节物质；
植物组织培养综合测试题 一、填空题（每空0.5分） 1. 植物组织培养按培养对象分为_______、_________、_________、__________、__________等几种类型. 2. 在分离原生质体的酶溶液内，需要加入一定量的_______其作用是保持原生质体膜的稳定，避免破裂. 3. 1902年德国植物生理学家Haberlandt第一次提出植物_______的理论概念；1943年White提出植物细胞“_________”学说，并出版了《植物组织培养手册》，从而使植物组织培养成为一门新兴的学科。 4. 用烘箱迅速干燥洗净后的玻璃器皿时温度可以设在_________℃的温度范围内，而若用它高温干燥灭菌则需在_________℃的温度下1-3小时；烘干植物材料的温度是_________℃. 5. 细胞全能性是指植物的每个细胞都具有该植物的__________和__________的能力。
6. 1962年，Murashige和Skoog为培养烟草花叶细胞设计了__________培养基，其特点是__________浓度较高，且为较稳定的__________。 7. 7.6-BA / NAA的高低决定了外植体的发育方向，比值低时促进__________的生长，这时__________占主导地位；比值高促进__________的生长，这时__________占主导地位. 8. 植物组织培养按培养的方式分为_______培养和_______培养. 9. 组织培养的特点是：_______、_______、_______. 10. 1962年印度Guha等人成功地培养毛叶曼陀罗花药获得_________，这促进了花药和花粉培养的研究。 11. 在组织培养中，不耐热的物质用__________法灭菌，而培养基常用__________法灭菌. 12. 6-BA / NAA的高低决定了外植体的发育方向，比值__________促进根的生长，这时__________占主导地位；比值__________促进芽的生长，这时__________占主导地位。 13. 在组织培养中，非洲菊是靠__________的方式进行繁殖的，而蝴蝶兰是以 __________的方式进行快繁的。
植物组织培养知识点总结第一、二章 1植物组织培养概念、分类、应用、创始人、奠基人 2实验室各分室名称、主要设备、主要功能 3无菌操作技术流程 4表面消毒剂种类及作用效果 5培养基成分及各成分的作用 6植物组织培养三大难题 7那些成分要抽滤灭菌 第三、四章 8植物细胞全能性原理 9名词解释：愈伤组织、脱分化、体细胞胚、人工种子 10体细胞胚的特点 11愈伤组织形成发育的三个时期，两种类型，良好愈伤组织的特点 12植物离体微繁，一般过程，各阶段注意事项 13褐变，影响褐变的因素，克服褐变的措施；玻璃化，无糖培养技术第五、六、七章 14植物脱毒方法、原理 15脱毒率包括两种方面含义 16人工诱导单倍体的三种途径 17花药培养得到的再生植株倍性如何，为什么 18花药培养的应用，花药培养力，一般培养过程。 19离体幼胚培养，胚发育有几种类型各有何特点 20离体授粉离体受精 21简述胚乳培养的意义
第八、九章 22原生质体概念，两种分离方法，纯化方法。 23酶法分离植物原生质体的酶液组成及作用 24简述植物原生质体培养基的特点 25原生质体融合，融合的主要方法 26体细胞杂交过程 27融合产物的种类及特点 28植物细胞无性系变异，特点 29提高植物细胞无性系变异频率的方法 30细胞突变体的类型及对应的筛选方法 植物组织培养知识点总结 第一、二章 1植物组织培养概念、分类、应用、创始人、奠基人 概念：是一种将植物的器官、组织或细胞在适当的培养基上进行无菌培养，并重新再生细胞或植株的技术。 分类：（1）按外植体来源和特性分：植株培养胚胎培养器官培养组织或愈伤组织培养细胞或原生质体培养；（2）按培养方法分：固体培养液体培养固体液体两相培养 应用：（1）克服远缘杂交中杂种不育性，种子无活力或配发育不全的植物获得后代，一年多代育种（2）培育三倍体（3）单倍体育种（4）提高突变频率，筛选变异类型（5）经过细胞融合得到体细胞杂种（6）种质资源保存 2实验室各分室名称、主要设备、主要功能 化学实验室（准备室）
第1章复习测试题 二、填空题 1．根据外植体的不同，一般可以将植物组织培养分为：植株培养、胚胎培养、器官培养、组织培养、细胞培养和原生质体培养。 2．在植物组织培养中，外植体脱分化后，再分化形成完整植株的途径有两条：一是器官发生途径，二是胚状体途径。 3．通过器官发生再生植株的方式有三种：第一种最普遍的方式是先分化芽，再分化根；第二种是先分化根，再分化芽，这种方式中芽的分化难度比较大；第三种是在愈伤组织块的不同部位上分化出根或芽，再通过维管组织的联系形成完整植株。 4．体细胞胚发生的途径可分为间接途径和直接途径。 5．植物组织培养的整个历史可以追溯到19世纪末和20世纪初。一个多世纪来，植物组织培养的发展大致可以分为探索、奠基和迅速发展三个阶段。 6．在Schleiden和Schwann所发展起来的细胞学说推动下，1902年德国植物生理学家G．Haberlandt提出了细胞全能性的设想，并成为用人工培养基对分离的植物细胞进行培养的第一人。 7．White、Gautheret和Nobecourt在1939年确立的植物组织培养的基本方法，成为以后各种植物组织培养的技术基础，他们三人被誉为植物组织培养的奠基人。 8．1958年英国人Steward等将胡萝卜髓细胞培养成为一个完整植株，首次通过实验证明了植物细胞的全能性，成为植物组织培养研究历史中的一个里程碑。 9．1960年Cocking等人用酶分离原生质体获得成功，开创了植物原生质体培养和体细胞杂交工作。同年Morel培养兰花的茎尖，获得了快速繁殖的脱毒兰花。其后，国际上相继把组织培养技术应用到兰花的快速繁殖上，建立了“兰花工业”。 10．花药培养在20世纪70年代得到了迅速发展，获得成功的物种数目不断增加，其中包括很多种重要的栽培物种。烟草、水稻和小麦等的花培育种在我国取得了一系列举世瞩目的成就。 三、是非题 （×）1．从理论上说，所有的植物细胞与组织材料都能培养成功，其培养的难易程度基本相同。 （√）2．愈伤组织是一种最常见的培养类型，因为除了茎尖分生组织培养和少数器官培养外，其它培养类型都要经历愈伤组织阶段才能产生再生植株。 （√）3．在组织培养中可采用愈伤组织诱变、花粉培养诱变等方法来进行植物育种等。 （×）4．单倍体育种已成为改良植物抗病、抗虫、抗草、抗逆性、品质等特性的新的重要手段。 （√）5．利用植物组织或细胞大规模培养，可以从中提取所需的天然有机物，如蛋白质、脂肪、糖类、药物、香料、生物碱、天然色素以及其它活性物质。 四、选择题 1．在A中培养物生长过程中排出的有害物质容易积累，由此造成自我毒害，所
植物组织培养期末复习资料 一、名词解释 1.植物组织培养：是指在无菌和人工控制的环境条件下，利用适当的培养基， 对离体的植物器官、组织、细胞及原生质体进行培养，使其再生细胞或完整植株的技术。又称为植物离体培养、微型培养、试管培养。 2.愈伤组织：是指外植体因受伤或在离体培养时，其未分化的细胞和已分化的 细胞进行活跃的分裂增殖而形成的一种无特定结构和功能的组织。 3.细胞全能性：指植物的每一个具有完整细胞核的活细胞，具有该植株的全部 遗传信息，在一定条件下发育成完整植株的潜在能力。 4.胚状体：指在植物组织培养过程中，由细胞诱导分化形成的胚状结构，其功 能类似于合子胚，可进一步再生成一个完整植株。 5.器官离体培养：是指对植物某一器官的全部或部分或器官原基进行离体培养 的技术。 6.胚胎培养：指对植物的胚、子房、胚珠和胚乳进行离体培养，使其发育成完 整植株的技术。 7.花药培养：是将花粉发育至一定阶段的花药接种到人工培养基上进行培养， 以形成花粉胚或愈伤组织进而分化成植株的技术。 8.花粉培养：是将花粉从花药中分离出来进行离体培养的过程。 9.细胞培养：是指对植物器官或愈伤组织上分离出的单细胞（或小细胞团）进 行培养，形成单细胞无性系或再生植株的技术。 10.原生质体培养：在人工控制条件下，将原生质体进行培养，使其形成完整植 株的技术 11.原生质体融合：也称体细胞杂交，指通过物理化学方法使原生质体融合，经 培养获得具有双亲全部或部分遗传物质的后代的方法 12.植板率：已形成细胞团的百分数（即每100个铺在平板上的细胞中有多少个 能长出细胞团） 13.脱分化〔dedifferentiation〕:指在离体培养条件下，已分化的细胞、组织 和器官在人工诱导条件下，失去原来的结构和功能而恢复分生能力，回复到分生组织状态的过程。（掌握） 14.再分化（redifferentiation):指在离体培养条件下，经脱分化的组织或细胞 在一定的培养条件下可转变为各种不同的细胞类型，形成完整植株的过程。 （掌握） 15.初代培养：指外植体来源于母本植株的最初培养 16.继代培养：将初代培养得到的培养体移植于新鲜培养基中，这种反复多次的 移植培养称为继代培养。 17.胚状体发生（embryoid）：指在组织培养中，由一个非合子细胞(体细胞)，经 胚胎发生和胚胎发育过程（经过原胚、球形胚、心形胚、鱼雷胚和子叶胚5个时期），形成具有双极性的胚状结构。 18.污染：植物组织培养过程中培养基和培养材料滋生杂菌，导致培养失败的现 象 19.玻璃化：试管植物的玻璃化是指试管苗外观形态呈半透明、水渍状的生长异 常现象，一旦形成玻璃苗，植株的增值系数即明显下降，既不能再用于后续的生根或继代增殖培养，移栽也难以成活。
试卷编号NO： 高等函授教育《植物组织培养》试题 学号：姓名： 一名词解释：（10*2分=20分） 1、植物细胞组织培养 2、细胞全能性 3、脱分化 4、外植体 5、试管苗驯化 6、间接不定芽发生 7、双极性 8、微体嫁接 9、人工种子 10、体细胞无性系变异 二填空：（30*1分=30分） 1、目前植物组织培养应用最广泛的方面是 和。 2、由脱分化的细胞再分化出完整植株有两种途径，一种叫做，另一种叫做。 3、培养用具的常用灭菌方法有、、 。 4、某些生长调节物质及抗生素、酶类物质遇热不稳定，对其灭菌时不能进行，而要进行。 5、一般来说，黑暗条件下有利于的增殖，而往往需要一定的光照。 6、植物离体授粉技术通常包括、、 三个方面。 7、一般液体培养的继代时间较短，继代一次；而固体培
养继代时间可以长些，继代一次。 8、外植体器官发生的三种途径包括、、。 9、从再生植株倍性来看，小孢子培养通常产生植株，胚 培养通常产生植株，通常产生三倍体植株。 10、脱毒苗鉴定与检测的主要方法有、、 、。 11、在生长素中，对于许多作物花粉的启动、分裂、形成愈伤组织和胚状体起着决定性作用，但是对却有抑制作用。 12、用平板培养法培养单细胞或原生质体时，常用 来衡量细胞培养效果。 13、用药剂处理是诱导染色体加倍的传统方法。 三计算题（1*10分=10分） 某培养基的配方是MS＋BA 2.0mg/L＋NAA 0.5mg/L＋2.5%蔗糖＋0.7％琼脂粉。MS母液的浓度分别是：大量元素２０倍，微量元素500倍，铁盐100倍，有机物５０倍；BA母液浓度1.0 mg/ml ，NAA母液浓度0.1mg/ml。要配制400ml 该培养基，需要吸取各种母液各多少ml？分别称取蔗糖、琼脂粉各多少克？（要求写出计算步骤）四简答题（5*5分=25分） 1、造成组织培养过程中发生污染的原因有哪些？如何有效控制污染？ 2、简述外植体消毒的一般步骤。
1 1.细胞的全能性：指植物体的任何一个有完整细胞核的活细胞都具有该植物的全套遗传基因和产生完整植株的潜在能力。 2.分化：指细胞、组织、器官或整株植物从分生组织或幼小状态发育为成熟状态的过程，并在生理、形态上发生的变化。其最大的特征是失去分裂能力。 3.脱分化：植物离休的器官、组织、细胞在人工培养基上，经过多次细胞分裂而失去原来的分化状态，形成无结构的愈伤组织或细胞团的过程，使其回复到胚性细胞的状态。其特征是已失去分裂能力的细胞重新获得了分裂能力。 4.再分化：指由脱分化的细胞再度分化成另一种或几种类型的细胞、组织、器官，甚至最终再生成完整的植株的过程。 5.试管苗：指在无菌离体条件下，对植物组织、细胞、器官进行组培所获得的的再生植株。 6.根芽激素理论：根和芽的分化由生长素和细胞分裂素的比率所决定，这一比率高时促进生根，比率低时促进茎芽的分化，比率适中时，组织则倾向于以一种无结构的方式生长。通过改变培养基中这两类生长调节物质的相对浓度可以控制器官的分化。 7.污染：批在组培过程中，由于真菌、幼苗等微生物的侵染，在培养容器内滋生大量的菌斑，使试管苗不能生长和发育的现象。 8.褐变：指在组培过程中，培养材料向培养基中释放褐色物质，致使培养基逐渐变成褐色，培养材料也随之慢慢变褐而死亡的现象。 9.玻璃化现象：指试管苗因生理失调而引起的嫩茎、叶片出现半透明状和水渍状的现象。 10.无菌操作：亦称接种。指将经过表面灭菌后的植物材料在无菌环境中切碎或分离出器官、组织或细胞转移到无菌培养基上的过程。由于整个过程均在无菌条件下进行，所以将这个过程称为无菌操作。 11.植物组织培养：指在无菌条件下，将离体的植物器官(如叶、花、未成熟的果实、种子)、组织(如形成层、花药组织、胚乳)、胚胎(如成熟和未成熟的胚)、细胞或原生质体，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，使其长成完整的植株或生产具有经济价值的其他产品。
植物组织培养复习题 植物组织培养复习题（习题） 一、名词解释 愈伤组织：在培养基上由培养物产生的无序生长且没有一定结构的薄壁细胞团。 外植体：在组织培养中，由植物体上取下来进行离体培养的那部分组织或器官 脱分化：由高度分化的植物器官，组织或细胞经过离体培养，产生愈伤组织的过程。 半连续培养：利用培养罐进行大量细胞培养的一种方式。 无性系变异：由任何形式的细胞培养所产生的植株所表现出来的差异。 胚状体：在离体植物细胞、组织或器官培养过程中，由一个或一些体细胞，经过胚胎发生和发育过程，形成的与合子胚相类似的结构。 看护培养：用同种或异种材料的愈伤组织作为看护组织培养细胞的一种方法。 无融合生殖：由配囊中卵细胞以外的其他细胞发育成的单倍体植株。 种质：亲代通过生殖细胞活体细胞直接传递给子代并决定固有生物性状的遗传物质。 悬浮培养：将游离的植物单细胞或小细胞团，按一定的细胞密度在受到不断拉动或摇动的液体培养基中进行培养的一种方式。 早熟萌发：在培养后迅速萌发为幼苗，不继续进行胚状生长，超过正常发育阶段。 选择压：在2个相对性状之间，一个性状被选择而生存下来的优势。 细胞全能性：任何有完整细胞核的植物细胞具有全部的遗传信息，在一定条件下，均具有分化，发育成完整植株的潜在能力。 条件培养基：在培养集中加入高密度的细胞进行培养，经过一段时间后，这些细胞向培养基中分泌一些促进细胞生长的活性物质，使培养基条件化，使原来在合成培养基上不能分裂的细胞发生分裂。 离体授粉：将未授粉的胚珠，子房或柱头从母体上分离下来，进行无菌培养，并通过一定的方式授给菌花粉，使其在试管内实现受精的技术。 同步化培养：培养基中大多数细胞都能同时通过细胞周期的各个阶段。
课题2月季的花药培养 ［学业水平层次（A）］ 1. 被子植物花粉的发育阶段顺序正确的是（） A. 小孢子四分体时期T双核期T单核居中期T单核靠边期T花粉粒 B. 小孢子母细胞T单核靠边期T单核居中期T双核期T花粉粒 C. 小孢子母细胞T小孢子四分体时期T单核居中期T单核靠边期T双核期T花粉粒 D. 小孢子四分体时期T小孢子母细胞T双核期T单核期T花粉粒 【解析】小孢子母细胞经过减数分裂形成四个小孢子，称小孢子四分体时期，然后经 过单核居中期、单核靠边期、双核期到花粉粒。 【答案】C 2. （2015 ?临沂高二检测）下图中①②③④代表产生花粉植株的过程或中间结构，其中 在两种途径中代表的内容不相同的是（） A.①② B.①④ C.②③ D.③④ 【解析】由题图可知，①过程为脱分化过程，两途径是完全相同的，②为愈伤组织或 胚状体，是不同的。若②为胚状体，则③为分化；若②为愈伤组织，则③为再分化，因此③ 也是不同的。④均为丛芽，是相同的。 【答案】C 3. 选择花药时，一般要通过镜检来确定花粉的发育时期，下列说法正确的是（） A. 确定花粉发育时期最常用的方法是焙花青一铬矶法 B. 对某些植物的花粉细胞核不易着色时采用醋酸洋红法 C. 焙花青一铬矶法能将细胞核染成蓝黑色 D. 醋酸洋红法和焙花青一铬矶法染色过程完全一样 【解析】在选择花药时，镜检确定花粉的发育时期中，最常用的方法为醋酸洋红法； 对于某些植物的花粉细胞，因细胞核不易着色，可采用焙花青一一铬矶法；焙花青一一铬矶 法可将细胞核染成蓝黑色，醋酸洋红法与焙花青一一铬矶法染色过程不同，前者需将花药用 镊柄捣碎，后者在染色前需用卡诺氏固定液固定。 【答案】C 4?某名贵花卉用种子繁殖会发生性状分离，为了防止性状分离并快速繁殖，可以利用
植物组织培养知识点总结第一、二章 1 植物组织培养概念、分类、应用、创始人、奠基人 2 实验室各分室名称、主要设备、主要功能 3 无菌操作技术流程 4 表面消毒剂种类及作用效果 5 培养基成分及各成分的作用 6 植物组织培养三大难题 7 那些成分要抽滤灭菌 第三、四章 8 植物细胞全能性原理 9 名词解释：愈伤组织、脱分化、体细胞胚、人工种子 10 体细胞胚的特点 11 愈伤组织形成发育的三个时期，两种类型，良好愈伤组织的特点 12 植物离体微繁，一般过程，各阶段注意事项 13 褐变，影响褐变的因素，克服褐变的措施；玻璃化，无糖培养技术 第五、六、七章 14 植物脱毒方法、原理 15 脱毒率包括两种方面含义 16人工诱导单倍体的三种途径 17花药培养得到的再生植株倍性如何，为什么 18 花药培养的应用，花药培养力，一般培养过程。 19 离体幼胚培养，胚发育有几种类型？各有何特点？ 20 离体授粉离体受精 21 简述胚乳培养的意义 第八、九章 22 原生质体概念，两种分离方法，纯化方法。 23 酶法分离植物原生质体的酶液组成及作用 24 简述植物原生质体培养基的特点 25 原生质体融合，融合的主要方法 26 体细胞杂交过程 27 融合产物的种类及特点 28 植物细胞无性系变异，特点 29 提高植物细胞无性系变异频率的方法 30 细胞突变体的类型及对应的筛选方法 植物组织培养知识点总结
第一、二章 1 植物组织培养概念、分类、应用、创始人、奠基人 概念：是一种将植物的器官、组织或细胞在适当的培养基上进行无菌培养，并重新再生细胞或植株的技术。 分类：（1）按外植体来源和特性分：植株培养胚胎培养器官培养组织或愈伤组织培养细胞或原生质体培养；（2）按培养方法分：固体培养液体培养固体液体两相培养 应用：（1）克服远缘杂交中杂种不育性，种子无活力或配发育不全的植物获得后代，一年多代育种（2）培育三倍体（3）单倍体育种（4）提高突变频率，筛选变异类型（5）经过细胞融合得到体细胞杂种（6）种质资源保存 2 实验室各分室名称、主要设备、主要功能 化学实验室（准备室） 无菌操作室（接种室） 培养室 高压灭菌室 细胞学实验室 3 无菌操作技术流程 4 表面消毒剂种类及作用效果 漂白粉饱和溶液 10-30m 效果很好 氯化汞 0.1-0.2% 3-12m 效果最好 酒精 70-75% 10-30s 效果好 5 培养基成分及各成分的作用 水提供水分，营造环境 无机盐大量微量提供细胞生长所需元素 有机化合物碳源：提供能源、维持渗透压；维生素参与代谢；氨基酸，促进芽根胚状体生长和分化 植物生长调节物质调节细胞生长 天然复合物 其他成分活性炭吸附；抗生素防止内生菌污染 6 植物组织培养三大难题 污染褐变玻璃化 7 那些成分要抽滤灭菌 热不稳定成分如：IAA ABA ZT GA3 第三、四章 8 植物细胞全能性原理 植物的每一个细胞都具有该植物的全部遗传信息和发育成完整植株的能力。 9 名词解释：愈伤组织、脱分化、体细胞胚、人工种子 愈伤组织：原指植物体的局部受到创伤刺激后，在伤口表面新生的组织。它由活的薄壁细胞组成，可
《绪论》复习题及参考答案 一、填空： ★1、根据培养的材料，植物组织培养分：愈伤组织培养、器官培养、细胞培养、原生质体培养、悬浮培养等类型。 2、植物组织培养的发展分为三个阶段：萌芽阶段、奠基阶段和快速发展和应用阶段。 3、1902年，Haberlandt提出了植物细胞“全能性”学说，1934年，White出版了《植物组织培养手册》从而使植物组织 培养为一门新兴学科。 二、名词解释： ★1、植物组织培养(plant tissue culture)：是指通过无菌和人工控制的环境条件下，利用适当的培养基，对离体的植物器官、组织、细胞及原生质体进行培养，使其再生细胞或完整植株的技术。由于培养材料已脱离了母体，又称为植物离体培养（Plant culture in vitro）。 2、脱分化（dedifferentiation）：由高度分化的植物器官、组织或细胞产生愈伤组织的过程，称为植物细胞的脱分化。 3、再分化（redifferentiation）：脱分化产生的愈伤组织继续进行培养又可以重新分化成根或芽等器官，这一过程称为植物细胞的再分化。 ★4、外植体(explant)：由活体（in vivo)植物体上切取下来的，用于组织培养的各种接种材料。包括各种器官、组织、细胞或原生质体等 ★5、愈伤组织(callus)：原指植物在受伤之后于伤口表面形成的一团薄壁细胞，在组培中则指在离体培养过程中形成的具有分生能力的一团不规则的薄壁细胞，多在植物体切面上产生。 三、问答题： 1、简述植物组织培养的理论依据？ 植物组织培养的理论依据是细胞全能性学说，即植物体的每一个细胞都携带有一套完整的基因组，并具有发育成为完整植株的潜在能力。 ★2、植物组织培养有哪些特点？ （1）培养条件可以人为控制 （2）生长周期短，繁殖率高： （3）管理方便，利于工厂化生产和自动化控制： ★3、植物组织培养的分类？ （1）根据培养对象不同：组织培养、器官培养、胚胎培养、细胞培养、原生质体培养等； （2）根据培养物培养过程：初代培养、继代培养； （3）根据培养基的物理状态：固体培养、液体培养。 ★4、植物组织培养主要应用于哪些方面？ （1）快速繁殖运用组织培养的途径，一个单株一年可以繁殖几万到几百万个植株； （2）种苗脱毒针对病毒对农作物造成的严重危害，通过组织培养可以有效地培育出大量的无病毒种苗； （3）培育和创制新品种利用组织培养可以使难度很大的远缘杂交取得成功，从而育成一些罕见的新物种； （4）大量生产次生代谢物质通过植物细胞培养获得的生物碱、维生素、色素、抗生素以及抗肿瘤药物不下50多个大类，其中已有30多种次生物质的含量在人工培养时已达到或超过亲本植物的水平。植物细胞次生物质的研制与生产硕果累累，后来居上。 （5）植物种质资源的离体保存植物组织培养结合超低温保存技术，可以给植物种质保存带来一次大的飞跃。因为保存一个细胞就相当于保存一粒种子，但所占的空间仅为原来的几万分之一，而且在-193度的液氮中可以长时间保存，不像种子那样需要年年更新或经常更新。 （6）人工种子人工种子便于贮藏和运输，适合机械化播种；繁殖速度快，不受季节和环境限制，利于工厂化生产；体细胞胚由无性繁殖体系产生，可以固定杂种优势。 第1章《实验室及基本操作》复习题及参考答案 一、填空： 1、组织培养实验室必要的设备有超净工作台、 等。 ★2、培养基成分主要包括①无机营养成分、 质。
(1) 什么是植物组织培养? 植物组织培养是在无菌条件下，将植物体的任何一部分，如植物器官、组织、细胞以及原生质体等，培养在人工配制的培养基上，并给予合适的培养条件（包括营养、激素、温度、光照、湿度），使之发育成完整植株的过程。 （广义）又叫离体培养：指从植物体分离出符合需要的组织、器官或细胞、原生质体等，通过无菌操作，在人工控制条件下进行培养以获得再生的完整植株或生产具有经济价值的其他产品的技术。 （狭义）组织培养：指用植物各部分组织，如形成层、薄壁组织、叶肉组织、胚乳等进行培养获得再生植株，也指在培养过程中从各器官上产生愈伤组织的培养，愈伤组织再经过再分化形成再生植物。 (2) 什么是"外植体"? 从植物体上分离下来的用于离体培养的材料称为外植体。 (3) 按照外植体的不同，植物组织培养可以分成几类? 可以分成5类 1、植株培养 2、器官培养（胚，花药，子房，根、茎和叶） 3、组织培养（各种组织、愈伤组织） 4、原生质体培养 5、细胞培养（愈伤组织分离或花粉单细胞或很小的细胞团) (4) 植物组织培养有哪些特点? ①培养条件可以人为控制 ②生长周期短，繁殖率高 ③管理方便，利于工厂化生产和自动化控制 (5) 你认为植物组织培养技术在当前的农业生产上有什么价值?为什么? （一）快速繁殖种苗 用组织培养的方法进行快速繁殖是生产上最有潜力的应用，包括花卉观赏植物、蔬菜、果树、大田作物及其他经济作物。快繁技术不受季节等条件的限制，生长周期短，而且能使不能或很难繁殖的植物进行增殖。 （二）无病毒苗的培养 植物在生长过程中几乎都要遭受到病毒病不同程度的危害，有的种类甚至同时受到数种病毒病的危害，尤其是很多园艺植物靠无性方法来增殖，若蒙受病毒病，代代相传，越染越重，甚至会造成极严重的后果。 （三）在育种上的应用 植物组织培养技术为育种提供了许多手段和方法，使育种工作在新的条件下更有效的进行 （四）人工种子 人工种子，是指植物离体培养中产生的胚状体或不定芽，被包裹在含有养分和保护功能的人工胚乳和人工种皮中，从而形成能发芽出苗颗粒体。 （五）工厂化育苗 是指以植物组织培养为基础，将外植体接种在人工配制的培养基上，通过控制环
植物组织培养 知识点一：《植物组织培养概述》 概述 一、名语解释 植物组织培养细胞全能性细胞分化细胞脱分化细胞再分化 器官发生状体发生 二、填空 1、组织培养的理论依据是：（） 2、植物组织培养的类型有：（）、（）、（）、（）、（）等。 3、1943年，（）提出了植物细胞（），并出版了《植物组织培养手册》，从而使植物组织培养为一门新兴学科。 答案： 1、细胞全能性学说 2、愈伤组织培养、器官培养、胚培养、细胞培养，原生质体培养 3、white，“全能性”学说 三、简答题 1、简述植物组织培养的理论依据？ 2、植物组织培养的类型？ 答案： 1、植物组织培养的理论依据是细胞全能性学说，即植物体的每一个细胞都携带有一套完整的基因组，并具有发育成为完整植株的潜在能力。 2、愈伤组织培养、器官培养、胚培养、细胞培养、原生质体培养。 四、论述题 论述组织培养在农业上的应用。 知识点二：植物组织培养实验室的基本设备和操作技术 一、名词解释 植物生长调节物质外植体外植体污染外植体褐变玻璃化现象 二、填空 1、组织培养实验室必要的设备有（）、（）、（）、（）、（）、（）、（）、（）。 2、实验室中常用移液管容量有（）、（）、（）、（）、（）、（）。 3、培养基成分主要包括（）、（）、（）、（）、（）、（）、（）。 4、糖在植物组织培养中是不可缺少的，它不但作为离体组织赖以生长的（），而且还能（）。 5、琼脂在固体培养时，是作为培养基的（），一般用量为（）。 6、常用的生长素有（）、（）、（）、（）等，常用的细胞分裂素（）、（）、（）。 7、外植体污染原因从病源分面主要有（）和（）两大类。 8、防褐变的措施有（）、（）、（）、（）。 9、驯化的目的（）。 10、外植体灭菌一般先用（），再用（）浸泡（） min。
考试重点（大部分是课后作业）： 题型：填空，判断，名词解释，问答 （1）植物组织培养地广义和狭义概念？ 答：广义概念是指对植物地器官，组织，细胞及原生质体进行离体培养地技术. 狭义概念是指对植物地组织（如分生组织，表皮组织、薄壁组织等）及其培养产生地愈伤组织进行离体培养地技术. （2）植物组织培养分类及其主要特点？ 答：根据外植体来源和培养对象不同，植物组织培养地研究类型可以分为种，分别是器官培养，组织培养，细胞培养，胚胎培养，原生质体培养. 主要特点：⑴无菌条件；⑵成分完全确定地人工培养基；⑶起始材料处于离体状态；⑷克隆； ⑸组培苗叶片表面一般都缺乏角质层或蜡质层，且气孔都是张开地；⑹环境温度、光照强度和时间等都是人为设定地； （3）植物组织培养地应用及展望？ 答：应用：植物离体快繁，无病毒苗木培育，培育新品种或创制新品种，次生代谢物生产，种质资源保存及制作人工种子. 展望：组培容器大型化，组培技术简单化，组培环境自然化 （4）细胞全能性、脱分化、再分化概念？ 答：细胞全能性：离体细胞在适当条件下分化形成再生植株地能力. 脱分化：也称去分化，是指在离体培养条件下生长地细胞、组织或器官经过细胞分裂或不分裂逐渐失去原来地结构和功能而恢复分生状态，形成无组织结构地细胞团或愈伤组织或成为未分化细胞特性地细胞地过程. 再分化：是指离体培养地植物细胞和组织可以由脱分化状态重新进行分化，形成另一种或几种类型地细胞、组织、器官，甚至形成完整植株地过程. （5）植物激素配比模式？ 答：生长素细胞分裂素：高有利于根地形成；中无定向结构生长；低有利于芽苗生长； （6）体细胞胚胎发生地概念、方式、机理和特点？ 答：概念：植物离体培养细胞产生胚状体地过程. 方式：直接途径：从外植体某些部位地胚性细胞直接诱导分化出体细胞胚胎. 间接途径：外植体先脱分化形成愈伤组织，再从愈伤组织地某些细胞分化出体细胞胚胎. 机理： 特点：①双极性；②（与母体组织或外植体地维管束系统无直接联系，处于较为孤立状态，）即存在生理隔离. *（）胚状体发生途径与器官发生途径形成植株地区别. 答：①最根本地特征是具有两极性，即在发育地早期阶段，从其方向相反地两端分化出茎端和根端，而不定芽和不定根都为单向极性.