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分子实验室实验方法小窍门

分子实验室实验方法小窍门
分子实验室实验方法小窍门

平时在实验室最常听到的一句话就是“今天某某试验没做好是为什么?今天某某试验没出结果是什么原因?今天某某试验为什么会是这样的呢?” 等等。然后仔细一查找原因,往往是由于操作上面的不认真,或是一些小小的细节没有注意到。以下是集各路朋友的一些经验,与大家分享:

1跑page胶的时候,小电压跑会避免高电压产生的热量尔导致的胶层变形。低电压泳道会比大电压泳道跑的直一些,且分离效果更高,有利于分子量相差不大的蛋白分离。

2. 提取质粒的时候,最后一步的酒精挥发很关键,基本上是其后续的酶切反应的决定性因素。所以这一步尽量挥发长一点时间,最好是空调吹热风,或是37度温箱放长一点的时间,我试过室温过夜,酶切很好。

3. 做WESTERN BLOT 的时候,大家往往会摸索一抗、二抗的浓度,封闭时间,曝光时间等等,而每次变换其中的一个条件就需要从新跑胶、转膜,甚至重新提蛋白,这样会浪费大量的时间。其实完全没有必要这样。一次转膜后,将PVDF膜晾干,裁减成小块,保存起来,用的时候取出一块,没有任何影响。这对于摸索条件的战友来说,节约了大量的时间。

4. 有关缓冲液和培养基配置

1)将缓冲液配方中的成分分别以10-100倍配成母液储存,需要的时候只需将相应的母液混合,补加水稀释即可

2)配培养基时通常会忘记各成分的量,如配LB时的三个成分不记得到底哪个是5g,哪个要10个,因此可以在常用的试剂瓶的标签上注明所需的量,如配LB时,在NaCl瓶外注明10g/L, yeast 5 g/L, tryton 10 g/L等,很方便,不需要每次配之前临时翻书

5. 有关PCR主反应液配置:

在做克隆鉴定的时候经常需要在酶切鉴定前进行PCR鉴定,每次配置PCR反应液很繁琐,可以将其配置类似kit的形式,按你需要的反应体系列表,然后放大100倍配置100×主反应液(100次反应),其中含buffer,Mg2+,dNTPs,但不含引物和Taq酶,然后可以10×分装或一管储存在-20度,在需要的时候拿出融开,然后按所需的PCR反应个数吸取相应的倍数,再补加相应反应倍数的Taq和引物,混匀后分装,这样做的好处如下:

1)可极大的节省宝贵的时间,可早点收工,看球

2)避免每次反应加样不均的可能

3)大大减少PCR假阳性的产生

6. 有关酶切反应液的配置:

在做酶切时,也可以象PCR一样配置主反应液,每次反应前先列好反应的体系,算好需要的反应数,然后按所需反应的体系按所需反应数放大,加入buffer、酶、水,质粒栏空缺,然后混合后按除质粒DNA的体积分装,然后再在每管中加入相应体积的质粒DNA酶切,这样做的好处如下,特别是当同时有10几个阳性克隆需要鉴定时尤为明显:

1)各反应成分均一

2)可大大减少限制型内切酶的使用

3)节省时间

7. 有关SDS-PAGE:

1)可将SDS-PAGE的积层胶,分离胶预先配好大体积如100ml储存在4度冰箱(注:10%AP,TEMED不加,切记!!!),每次配置时只需吸取相应体积的预制胶加入AP,TEMED即可,

没必要每次制胶时候翻分子克隆,特别方便,而且,这样的预制胶可储存半年以上,不失为偷懒的绝佳方法;更关键的是可大大减少与丙稀酰胺的接触,因此大大减少中毒的机会。

2)电泳时虽然小电泳分离效果要好一些,但2小时以上的等待的时间实在是痛苦,因此可以提高电泳至150V,但需要将整个电泳槽放在放满冰水的脸盆里散热,这样跑出来的胶分离效果丝毫不比低电压来的差,关键是时间大大节省,不需1h即可看结果了

8. 实验中小窍门我想能够分成两类:一类是“非常规”操作;一类是常规操作过程中一些省时省事手段。

前一类,我举个例子:有时候第一天涂的转化平板、次日早晨转化子可能长成的菌落比较大(1~2毫米以上,BL21就长得快),下一步转化子做质粒鉴定。这个情况下可以直接挑取一块菌苔(勿带出培养基),50微升酚/氯仿悬浮菌体,放置两分钟,加40微升TE抽提,上层TE吸出后再氯仿抽提一次,吸取上层TE即是质粒提取液。提取的质粒可以直接用于电泳和酶切。这样操作,可以省去转接液体试管的培养步骤,至少节省6~8小时的时间。但是,要在各步骤都控制得很好的情况下才能保证提取和酶切的效果,不同的实验室或者操作者未必能够很方便地重复----其实,其它的一些“小窍门”也是如此。

后一类的小窍门则在实验室中无处不在。如:平行作不同样本的PCR,模板DNA加量一样,配置PCR体系可以一起配制后分装----这点做过试验的都知道,但是配制的时候配制量可以比预期分装量稍多一点(如用100微升则配110微升),这样可以避免有时候分装不够的尴尬,因为不同特别是大小不同的枪,会有误差。再比如:楼上有站友说的sds-page胶预配(APS和TEMED、或者后者先不加)的问题,实际上时间放置过长肯定影响效果,如果要在一天内连续地跑两次板,何尝不可?又比如,配sds-page胶的时候,上层胶和下层胶可以只用一个大枪头:先取胶,次取水,取6.8的tris后再取8.8的tris,省时省料。20021108站友开的这个帖子很好,在上上层楼的帖子说得也有道理。但我想,“窍门”和“偷懒”不应该是因果关系。其实,不管是那一类的小窍门,都是在充分地理解实验各步骤的原理、经过多次试验积累、再加上一点点思索然后尝试的结果。知其然知其所以然和勤于思考敢于探索,是根本。否则,别人的小窍门对你也未必能够有用。才进实验室的新手,务必要先练好规范扎实的操作,然后才能弄“窍门”。本末倒置,贻害无穷。

9. 我一直是把SDS-PAGE的积层胶,分离胶预先配成mixture,APS制胶时加入,半年内使用,绝对没有问题,我保证。

10. 做SDS-PAGE的时候,除了蛋白量上样一致,最好体积也一致,这样跑出来的胶各个泳道之间的band能做到一样宽,方便后面的比较,特别是WB。做法就是拿1X的上样缓冲补全要加的样做到体积一致,否则跑出来会有的宽有的窄,特别是上样体积相差较大的。11. 在把蛋白胶做成干胶时,很多时候会因为有气泡使胶裂掉,我的经验是在做胶时加上层膜前在胶上多加些水就不容易进气泡了,还有就是高温烘胶,我喜欢放到60度烘箱里烘,这样水分蒸发速度快,即使有一些小的气泡也不会有影响,呵呵,这是经验之谈,我从来都没失手过,大家可以试试

12. 做大肠表达时确定蛋白是否表达一般要煮样做诱前诱后检测,但很多时候煮出来的很黏影响跑胶效果.我发现如果现用8M Urea重悬细菌再煮效果会有极大改善.

注:不能用Gu-HCl代替

13. 我也推荐几个偷懒的方法

1 做SDS-PAGE跑胶通常都是现配现用,但配胶要>1h,所以如果想第二天睡个懒觉而又不耽误跑胶可以于前一天晚上做好浓缩胶和分离胶,待凝聚后不要拔下梳子,把含胶玻璃板从制胶槽取下,用保鲜膜包上,注意玻璃板上下两边缘会有气体,所以需要加一点电泳缓冲液以避免胶内水分蒸发.然后放4度过夜.第二天直接拔下梳子行后续.国外好多公司出售脚既是如此,可

以保存上星期.

2 配置分离胶或者非变性胶时因胶凝时收缩可导致加样孔变浅.可以将加剩的胶放入4度以降低凝聚速度,而将凝胶放入37度促聚,并随时用4度加剩的胶补充下降的胶面.另外将胶横放与水平面成~10度角也可以减少收缩的影响.

3 推荐一个节约抗体/时间的做法:

同时跑2块胶,同时转膜,然后两块膜背靠背放入同一封口膜同时封闭,同时一抗二抗(最好是用转轮,这样效果好.如果是摇床,隔一段时间帮它们翻个身以保证两张膜的正面都有机会与液体充分接触.一起洗膜(可以稍微加强洗膜也可以不做.我最多一张盘子里放4张膜而没有影响洗膜).可分别或同时压片.这样就可以节约一半抗体和接近一半时间而不会影响结果.

或者另外一个就是孵育后的抗体不要扔,好的抗体可以反复做好几张膜呢.但每次都会减弱,效果不如上面一种方法.

14.做western blotting 转膜时,胶放在转膜缓冲液中一段时间,待胶在含有甲醇的缓冲夜中缩小的差不多后装好转膜装置,我的经验是把膜印在胶上直接在膜上画出预染maker条带,方便的很。因为很多时候跑电泳时胶上的预染maker很清楚,等转膜后就不是分辨的很清楚了。不过要注意画好预染maker后就不要使胶和膜发生对位移动了,以防maker失去参照价值。

15. 超滤最合适用于蛋白的浓缩,更换缓冲液和除盐,对于按照分子量进行初分离的效果不是很好,理论和现实是有很大差别的^_^

16. 关于Western Blot

1)器具的清洁非常重要,开始做前,为了安全,尤其是装胶的厚薄玻璃板,可以先用中性洗涤剂和自来水反复冲洗,确保无洗涤残液后用蒸馏水冲洗2-3遍,然后用去离子水冲洗一遍。最后用95%酒精再擦一遍后晾干备用。

2)配胶最好现用现配,先配下层胶(分离胶),后配上层胶(浓缩胶或积层胶),而且在临灌胶前加APS并迅速混匀,即用移液枪抽吸与注入1-2次即可。

17跑蛋白page的时候,一开始用加样针,太麻烦,发现用20ul枪+普通小白枪头点,非常省事。另外,点样时有可能看不清孔在哪,看远离你的那面胶,孔有反光的。点样也点你对面的那块胶,省的总低头,干咱这行的容易得颈椎呀,爱惜自己。

18. 垂直电泳时,可在电泳糟中放入青霉素小瓶等,可自然使液面提高而不影响电泳,又很节约电泳缓冲液。

19. 我们有时要沉淀东西时,由于沉淀量很少,离心完之后不知道到底有没沉淀下来东西,由于量很少,不好观察,所以离心时建议按特定的方向放置离心管,这样你就可以在离心之前确定沉淀该沉淀到管子的大致部位,这样离心后就可直接观察那有没有沉淀,避免满管子找,另外看沉淀时可以对光看,这样就是颗粒状的细小沉淀也能看见的。

20. 大家都知道PMSF有剧毒,以前都是知道浓度和要配的体积的基础上,算出要称多少毫克的PMSF,其实也可以先称PMSF,称多少算多少,再调整异丙醇的体积,到达你所要的浓度。这样就避免了你长时间和它接触。

21. 跑好SDS-PAGE胶的一些体会。

1. 清洗好玻璃板,不要偷懒,很多时候跑完电泳撬胶时会因为玻璃板不干净胶粘在板上把胶撬破。

2. 配胶时不要反复用枪混,稍微摇混就可以了,用枪混多次会导致胶凝不好影响电泳图的分辨率。

3. AP分装成500微升一管保存放-20度,避免AP用太久失效。

4. 倒胶时把玻璃板中的水用滤纸尽量吸干,因为微量的水存在会影响配的胶浓度。

5. 尽量不用过夜放室温或者四度的胶,也回影响胶的分离效果。

6. 电泳完撬胶时根本不需要用撬胶板,在一平皿里装好水,把有胶一面的放在水中晃动几次胶很容易就脱落下来,一点没有问题,方便的很。

7. 点样时样品别忘了离心这步,因为上样含有固体沉淀会影响电泳图分辨效果。

8. 尽量在冰浴状态下跑。

22. 做2-DE做的比较多,总结了几个小窍门:

1.一向电泳时,盐离子容易聚在胶槽的两侧.剪一小段IPG胶条放在两侧,构成盐桥,电压就容易上去了.避免一向电泳不好影响最后实验结果.

2.SDS-PAGE时,在灌胶之前,一般大家都会用凡士林封底, 在SDS-PAGE

电泳之前又必须把凡士林搽干净,很是麻烦,我的经验是:不用凡士林,取少量未加Ap的分离胶,按比例加2倍量的Ap,然后灌入板间,等上几分钟,待胶凝固后就可以接着灌分离胶了.方面,效果好!

23. 蛋白质纯化时,蛋白质降解可能与超声破菌保持冰浴有关,之前建议加pmsf,建议在上柱子洗脱的时候也加pmsf(蛋白降解抑制剂),一定要用之前再加。

24. 做透析的时候,拿一个5ml的枪头或者是其他类似的东西,剪短,穿过个塑料泡沫之类的面积比烧杯大东西,然后把透析带一端扎紧,另一端开口绑紧在5ml枪头下端,扎紧得那端也可以弯过来绑成u字型。这样就可以用1ml的枪穿过5ml的枪头的孔,另一只手调整透析带,来加样取样,省去了总绑透析带的麻烦,对同一个蛋白大量多次透析非常方便25. 第一次发贴说一下自己的小经验,希望版主能给我一分,每次看到好东西因为没分都没法下,好羡慕有分的人啊。当然也不能不劳而获,说一下自己的实验技巧给大家分享。

1. 配SDS-PAGE胶时,用枪头混匀比较麻烦,而且费时费力,效果也不好。可以剪一小段夹文件的那种曲针做转子放到配胶的小烧杯里,在磁力搅拌器上边搅边加入各溶液,这样加完也就混匀了,直接灌胶即可。

2. 上面的站友也说过,上样用黄枪头就行,我也一直在用,根本不用注射器,方便的很,建议大家也试试。

3.电泳后考马斯亮蓝染色一般要1h到2h,脱色也要2h左右,麻烦的很。现在给大家说一个简单的方法,是我从一个师姐那里学到的。

加入染色液后,先放入微波炉里加热5-10秒,使染色液微热即可(千万不要加热太久,否则冰醋酸就挥发了)。然后放水平摇床上摇20分钟,最多半小时就染好了。

脱色也很简单,不用脱色液,直接用去离子水,放微波炉里煮沸5分钟左右,然后将水倒掉,再换上新的去离子水煮,这样反复几次,就可以了。效果可能比正常的脱色稍差一点点,不如那样清楚,只要电泳时比平时多上1/5的样品就可以了,关键是这样省时省材料(用不着含甲醇和冰醋酸的脱色液)。方便快捷!

放心,反复煮胶不会把胶煮坏的。

26. 我也说说我的小经验。可能大家都知道,请别笑话我。

1、配胶时一定要掌握好时间,不要因为过度赶时间,而造成以后的条带粗大,压不成条带,且消耗很多试剂和时间。

2、加样时,冲洗加样器可用双蒸水,用电泳液会使加样器中有很多的泡沫。或许是因为SDS 的原因吧?

3、对于大分子蛋白质,转膜过夜更好。滤纸的张数可以适当减少。

4、在跑样时同时加入MARKER有助于正确识别所需的蛋白位置,减少NC膜的消耗。

5、一抗、二抗的浓度不要太高。

6、做ECL显影时,根据荧光的亮度调整时间。泡完显影液,胶片应用水洗一下,以减少定影液变黄。

7、和有经验的同学交流,也是非常重要的。知识的交流绝对有助于试验的成功。

这是我目前的一点拙见。

27. 推荐一个省质粒试剂盒硅胶柱与溶液的方法:

所有试剂使用手提质粒自己配置的溶液一、溶液二、溶液三(代替试剂盒的solution1、2、3),然后一比一的与饱和碘化钾或碘化钠(代替结合缓冲液)混合,就可以让质粒在硅胶上结合,而试剂盒的硅胶柱可以重复使用,没有试剂盒溶液量的限制,只要是一样的质粒我想提几管就提多少。

顺便说一句硅胶柱也可以用自己买的硅胶粉末代替,离心后倒掉硅胶柱上面的上清就可以,用起来不象柱子方便。效果比手提的要好要快。

28. 做WB时,样品比较多, 又怕放时间长了对蛋白样品不好,而且确定以后肯定要做某个抗体,只是一时没有决定.那么你可以选择先做SDS-PAGE,并转膜. 然后把PVDF膜凉干, 放四度保存. 以后拿出来封闭后,加抗体就行了. 蛋白在膜上,且已经分离, 比保存在BUFFER里面的蛋白肯定更可靠。呵呵

29. 今天作his纯化的时候,又琢磨了一个窍门,与大家分享。我得样品比较多,几百ml,而柱子不够大,只有10几ml,跑来跑去的上样,还总得记着,太麻烦了。于是,我就刷干净了一个烧杯,装了我的样品,找了一个细胶皮管,当连通器,就像鱼缸换水一样,用5ml 枪在一头一吸,液体流出来,放到纯化柱里,调好烧杯的位置,两个液面一样平了,呵呵,上了好几个小时了,没有问题,现在调低速度,过夜上样:)

30. 能导致PAGE胶不凝的原因主要有三个:

1、配胶中用到的主要试剂的配置。

主要就是30%的丙稀酰胺的配置。粉末状的丙稀酰胺和甲叉丙稀酰胺使用不应该超过一年,因为丙稀酰胺会吸潮水解,这样以来丙烯酸的含量就会加大,从而导致page胶不凝。

2、温度。

温度高时凝固快,但是亦不宜过高,因为温度变化会影响交连物的孔径大小。所以温度在25度最为合适。

3、氧气。

氧气是凝固的终止剂,所以不能让胶中出现气泡。

虽然都是些看起来听低级的错误,但是不注意还是会犯。

31. 我做2维蛋白电泳,也有些心得:

1、向电泳玻璃板内加入胶条时,先在缝隙中加入配好的溴芬兰缓冲液,要加满,再将胶条贴后面玻璃板壁用薄塑料片将胶条缓缓推下至凝胶上缘,这样可以很好的避免胶条下形成空气泡。

2、能做出好的图谱已经很不容易了,如果在扫图时撕破实在可惜,所以扫图要小心,将凝胶转移到扫描仪时可以用塑料隔片在下面托着,同时保持有些水,这样就安全多了。

32. 凑个热闹说两句吧

1、sds-page胶如果配好装好倒入内槽液以后,发现内槽液稍有渗漏,可以把外槽液多加一些,加满,加到与内槽液相齐,这样就可以继续正常跑胶,不用浪费已经加进去的内槽液

2、至于染色脱色的问题,我们这里一直是染色:加热半分钟,摇20分钟;如果染液不是新

配的,就加热半分钟摇十分钟,凉透了再重复一次即可

脱色也一直是用去离子水煮两三次即可

3、不知道大家都是怎么做酶切的,我的体会是,酶切质粒时,两个酶分别单酶切比直接双酶切效果要好很多。我有一次双酶切两次都没连出来,后来分步单酶切,连接效率几乎100%。可以第一个酶切完后直接把体系热失活,(根据酶说明书上一般是65度20min)然后直接向里面补第二个酶

或者第一个切完后用氯仿抽提,把蛋白提出

或者中间做一次回收,这个就要考虑回收效率和损失的问题了,但是这样除蛋白最彻底

前两个方法我们这都是有人做过的,已经都很好用了

33. 俺也来说说关于Bradford法蛋白浓度定量和DTNB法巯基浓度定量的一点体会:

我是做蛋白修饰巯基后,通过这两种方法的定量来间接反应修饰的程度。一路摸索过来,也有半年有余;最大的体会就是不要急于求成,直接实验,首先检测修饰体系是否对方法有影响,修饰基团是否会在595nm和412nm下有特定的吸收,修饰后修饰试剂本身是否会有变化,对蛋白整体结构造成影响,其次再谈具体修饰比例和程度。对于巯基浓度测定方法,有四种(Anal Biochem. 1998 Dec 1;265(1):8-14),而DTNB本身虽然灵敏度不高,但是重复性和抗干扰是最佳的了。

34. 考马斯亮蓝染色后的脱色,如在脱色液中加数张捏成条状的Kimwipes纸(国外实验室常用,相当我们的擦镜纸,全棉纤维制造),由于染料吸附到纸纤维上,脱色加速。待纸着色较深时,更换新纸条,不用换液。我想脱脂棉或纱布也是一样的。但滤纸等可能不行,会溶掉。

半贴壁细胞如SP/0或杂交瘤细胞传代时,不用吹打或刮落。先将上清吸出,适当拍打培养瓶(当然是塑料瓶,玻璃瓶拍碎了别找我),即可见贴壁细胞脱落,加培养基混悬即可。注意,过力拍打培养瓶会裂,特别是瓶颈。

35. 一向电泳时,盐离子容易聚在胶槽的两侧.剪一小段IPG胶条放在两侧,构成盐桥,电压就容易上去了.避免一向电泳不好影响最后实验结果.

36. 我也推荐几条:

1、关于20021108战友的说法,我觉得我们制备好了一批感受态,最好马上转化一种已知质粒,与此同时,取一点感受态接种到含抗性的固/液体培养基培养来做对照。这样第二天即可以知道这批感受态是否还有外源质粒,又可以知道这批感受态转化效率的高低。如果合格,那以后就可以放心使用!因为我也曾经遇到其实是因为感受态不好而导致试验不成功,但是当时不知道,结果费时费力。

2、做克隆挑斑时,我们可以在将沾有菌体的牙签丢到试管前,在一块相应抗性的平板上点一下,标注清楚,培养时间稍长一点,待长成较大菌落后收取。以后需要哪一个菌,就在平板上挑取。这样既方便快捷,又可以保证菌的一致。

3、抽提质粒时,加入Sloution II和III后要求轻柔混匀。我个人觉得不用这样,只要不是非常剧烈,可以快速混匀。尤其可以运用在一次抽提多管质粒的时候,这样可以快速,而且效果一点也不差。

4、抽提质粒时,用无水乙醇沉淀的时间可以由实验操作者来决定,如果时间充裕可以30min,否则8-10min也可以。至于温度,个人觉得-20度好于常温。如果加入可醋酸钠,会较容易形成盐类杂质,所以时间短一些更好!

今天想到这些,先写到这里,以后想到了在上来与大家分享。希望我的小经验对大家有所帮助!

37. 首先声明:实验中的一些技巧要用在首先对基本的操作有深刻了解的基础上,在力求省时、省力、节约成本等的同时,实验的准确性是最重要的。

对大多数做蛋白的战友们来说,培养细胞应该是不陌生的,我这里谈一个培养细胞的小技巧,大家知道,对于一定的空间(如某种尺寸的细胞培养瓶)来说,细胞数目太多或者太少都不利于其生长,太多了就要消化,太少了要换一个小点儿的培养瓶,我的做法是:如果细胞数目太少,可以不必去找小一点儿的培养瓶,可把原来的培养瓶由原来的平放改为竖着放,这样底部的空间就小了,有利于细胞的生长,当细胞数目增加到一定程度的时候还可以在平过来,避免了来回换培养瓶而增加污染的机会(对没有小培养瓶的更实用)。

个人体会,仅供参考。

38. 说说关于SDS-PAGE的几个小经验

1、做好胶后,把所有的加样孔都加上样,这样可以防止边缘的样品脱尾。

2、高电压/高电流电泳时,可以把电泳槽放到4度冰箱中进行电泳,省时省力,1hr搞定。

3、胶考染时间40min,放在凝胶摇床上(没有胶床可以放到28度普通摇床上,但要控制好摇床速度)缓缓摇动,使染色均匀,同时可提高检测的灵敏度,根据我的经验可以达到银染的级别,就是脱色时间比较长,一般需要脱色2-3d,夏天的时候要勤换脱色液,防止变臭哦

39. 质粒小提如果是用作鉴定或酶切,不必进行酚仿抽提,将溶液1.2.3 离心后的清液移入一个新的1.5ml离心管中,再次离心3-5分钟,小心取出上清液后,直接沉淀,不必担心DNA 切不开,我已经这样使用一年多,没出过什么问题。当然这样的质粒不很干净,但是做鉴定足够了。尤其是实验室女同胞们,可以减少酚仿的侵害,而且节省时间。

实验室安全考试题目及答案

1、[判断题]只要接线板质量符合要求,就可以随意串联很多个,不影响使用。(分值)你的答案:错误 2、[判断题]国务院于2004年11月12日颁布的《病原微生物实验室生物安全管理条例》,是建立实验室生物安全管理体系所依据的主要法规。(分值) 你的答案:正确 3、[判断题]购买放射性核素必须向同位素实验室负责人申请,办理登记手续。购买、领取、使用、归还放射性同位素时应正确登记、认真检查,做到帐物相符。(分值)你的答案:正确 4、[判断题]生物实验室里可以烹煮食物、聚餐,学生可以在实验室留宿。(分值)你的答案:错误 5、[判断题]学生进入生化医药类实验室可以不穿统一的实验服(白大褂)。(分值)你的答案:错误 6、[判断题]操作人员在接触过传染性物质和动物之后必须洗手、不用消毒。(分值)你的答案:错误 7、[判断题]在遗传学等实验中接触的秋水仙素是致癌物质,实验中可以让少量药品接触到皮肤上。(分值) 你的答案:错误 8、[判断题]H2S无色,臭鸡蛋味,难溶于水,抑制酶的活性,使组织内窒息。(分值) 你的答案:错误 9、[判断题]湿热灭菌最高温度通常为121℃,时间为15min。(分值) 你的答案:正确标准答案:错误 10、[判断题]可见光能复活生物体中的光复活酶,使形成的二聚体拆开复原。所以采用紫外光灭菌时,不能同时开启日光灯和紫外灯。(分值) 你的答案:正确 11、[判断题]电分强电和弱电,弱电开关等元件不能用在强电电路。(分值) 你的答案:正确 12、[判断题]电路保险丝熔断,短期内可以用铜丝或铁丝代替。(分值) 你的答案:错误 13、[判断题]电动工具的电源引线必须保证接地可靠。(分值) 你的答案:正确

实验室废弃物处置规定

一、目的 为加强实验室危险废弃物的处置管理,防止污染环境,实现实验室危险废弃物处置管理的制 度化、规范化制定本制度。 二、范围 本制度中所称的实验室危险废弃物,是指实验室在检测、研发活动等过程中所产生的危险废 液、危险固废及其污染物。 三、实验室危险废弃物管理 3.1制定实验室危废处理值班人员表,值班人员负责档期废弃物处理回收工作 3.2实验室危险废弃物处置包括收集、暂存、转移及处理等环节工作。各负责人必须将废弃 物收集、暂存于固定容器内,并定期将暂存的危险废弃物进行处理或转交给其他处理部门。 3.3实验室必须将日常工作中涉及的危险废弃物处置知识和技能列入上岗培训内容中,对新 到岗人员进行培训和考核。 3.4当期负责人对危险废弃物的收集、暂存、转移、处理及其记录进行监督检查, 3.5实验室所有人员必须严格按本办法的规定处置危险废弃物,不得随意倾倒、丢弃和私自 处理。违规操作行为一经发现,实验室将对直接责任人和相关负责人一并处罚。 3.6危险废弃物应严格存放在指定的收集容器或空间中,写明废弃物名称、主要成分及特性, 并保持清晰醒目。不具相容性的废弃物应分别收集,不相容废弃物的收集容器不可混贮。 严禁将危险废弃物与生活垃圾混装混放。 3.7危险废弃物收集容器应存放在符合安全与环保要求的专门房间及室内特定区域,要避免 高温、日晒、雨淋,远离火源及人员密集的场所。存放危险废 弃物的房间及室内特定区域应张贴危险废弃物标签,存放人员要做好收集或存放记录 3.8实验室人员向收集容器倾倒、存放危险废弃物时应认真填写《废弃物收集登记表》,填写内容包括废弃物的名称、主要成分、数量、存放时间、存放人姓名等信息。

[灭火的基本方法]灭火的基本方法有些

[灭火的基本方法]灭火的基本方法有些 按照燃烧原理,灭火的一般方法是将灭火剂直接喷撒到燃烧的 物体上。或者将灭火剂喷撒在火源附近的物质上,使其不因火焰热辐射作用而形成新的火点。今天为大家推荐灭火的基本方法。 冷却法。 冷却法是将灭火剂直接喷射到燃烧的物体上,以降低燃烧的温 度于燃点之下,使燃烧停止。或者将灭火剂喷洒在火源附近的物质上,使其不因火焰热辐射作用而形成新的火点。冷却法是灭火的一种主 要方法,常用水和二氧化碳作灭火剂冷却降温灭火。灭火剂在灭火过程中不参与燃烧过程中的化学反应,因此这种方法属于物理灭火方法。 窒息法。 窒息法是阻止空气流入燃烧区或用不燃物质冲淡空气,使燃烧 物得不到足够的氧气而熄灭的灭火方法。具体方法包括: 用沙土、水泥、湿麻袋、湿棉被等不燃或难燃物质覆盖燃烧物; 喷洒雾状水、干粉、泡沫等灭火剂覆盖燃烧物;

用水蒸气或氮气、二氧化碳等惰性气体灌注发生火灾的容器、设备; 密闭起火建筑、设备和孔洞; 把不燃的气体或不燃液体(如二氧化碳、氮气、四氯化碳等)喷洒到燃烧物区域内或燃烧物上 隔离法。 隔离法是将正在燃烧的物质和周围未燃烧的可燃物质隔离或移开,中断可燃物质的供给,使燃烧因缺少可燃物而停止。具体方法有: 把火源附近的可燃、易燃、易爆和助燃物品搬走; 关闭可燃气体、液体管道的阀门,以减少和阻止可燃物质进入燃烧区; 设法阻拦流散的易燃、可燃液体; 拆除与火源相毗连的易燃建筑物,形成防止火势蔓延的空间地带。

化学抑制法。 化学抑制法是指使灭火剂参与到燃烧反应过程中去,使燃烧过程中产生游离基消失,而形成稳定分子或低活性的游离基,使燃烧反应因缺少游离基而停止。 1.泡沫灭火器:适用AB类火灾,分为化学泡沫和机械泡沫两种,其中化学泡沫使用时颠倒使用,现已淘汰,而机械泡沫使用方法同于粉灭火剂。缺点:造成污染,不可使用于C类火灾,每四个月检查一次,药剂一年更换。 2.二氧化碳灭火器适BC类火灾,使用方法:a)拔出保险插销: b)握住喇叭喷嘴和阀门压把;c)压下压把即受内部高压喷出。每三个月检查,重量减二》需重新灌充。缺点:使用人员极易冻伤。 3.干粉灭火器:分为ABC和BC干粉两种,其中适用ABC类火灾,使用方法:a)拔掉保险销;b)喷嘴管朝向火焰,压下阀门压把即可喷出。三个月检查压力表(1.2Mpa)药剂有效时限三年。

化学分析实验室标准物质管理指南

1. 范围 本标准规定了化学分析实验室中管理标准物质的程序和要求。 本标准适用于天津市化学分析实验室的标准物质管理。 2. 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件。 凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。 ?GB/T 15000 标准样品工作导则 ?GB/T 27025-2008 检测和校准实验室能力的通用要求 ?JJF 1342-2012 标准物质研制(生产)机构通用要求 ?JJF 1343-2012 标准物质定值的通用原则及统计学原理 3. 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 标准物质 reference material;RM 具有足够均匀和稳定的特定特性的物质,其特性被证实适用于测量中或标称特性检查中的预期用途。 3.2 有证标准物质 certified reference material;CRM 附有由权威机构发布的文件,提供使用有效程序获得的具有不确定度和溯源性的一个或多个特性量值的标准物质。 3.3 标准溶液 standard solution 由用于制备该溶液的物质而准确知道某种元素、离子、化合物或基团浓度的溶液。 注:本文件中的“标准溶液”指CRM经溶解或稀释后配制而成的溶液。

4. 管理要求 4.1 一般要求 4.1.1 化学分析实验室(以下简称“实验室”)应有标准物质管理人员。标准物质管理人员负责统筹管理标准物质的购买、验收、保存、使用、期间核查和报废等工作。 4.1.2 实验室应有运输、贮存和使用标准物质的相关程序,以防止污染或损坏。 4.1.3 实验室应有标准物质的管理记录。标准物质的管理记录应至少保存 3 年,或按相关规定的期限保存。 4.2 有证标准物质(CRM)的选择与购买 4.2.1 实验室选择和购买 CRM,应符合 GB/T 27025-2008 中 4.6 的要求。实验室应优先选择《中华人民共和国标准物质目录》中所列出的 CRM,如果目录中没有实验室需要的 CRM,也可选择国内有关行业部门或国外生产组织提供的 CRM。 4.2.2 实验室应确保所选购的 CRM 应满足下列要求: 1.有明确的溯源性和不确定度声明; 2.CRM 的制备、定值及认定符合 JJF 1342-2012、JJF 1343-2012 和 GB/T 15000 给出的 有效程序。 4.2.3 CRM 特性值的不确定度水平应与测量中的限度要求相匹配。 4.2.4 对出售 CRM 的供应商进行定期评价和资质核查。 4.2.5 属于危险化学品或易制毒化学品的 CRM,其购买应符合国家相关规定。 4.3 有证标准物质(CRM)的验收 4.3.1 收到 CRM 后,实验室应进行下列检查并填写验收记录: 1.运输条件是否符合要求; 2.包装、外观是否正常,标识是否清晰完整; 3.有无证书,是否在证书声明的有效期内。 4.3.2 如发现异常情况,应及时与供应商联系。验收合格后,标准物质管理人员应赋予 CRM 明确的标识。实验室完成 CRM 的验收后,应建立 CRM 档案,包括证书、验收记录等。

实验室发生火灾时的灭火方法

编号:SM-ZD-26437 实验室发生火灾时的灭火 方法 Through the process agreement to achieve a unified action policy for different people, so as to coordinate action, reduce blindness, and make the work orderly. 编制:____________________ 审核:____________________ 批准:____________________ 本文档下载后可任意修改

实验室发生火灾时的灭火方法 简介:该方案资料适用于公司或组织通过合理化地制定计划,达成上下级或不同的人员 之间形成统一的行动方针,明确执行目标,工作内容,执行方式,执行进度,从而使整 体计划目标统一,行动协调,过程有条不紊。文档可直接下载或修改,使用时请详细阅 读内容。 实验室发生火灾虽然比较少,但一旦发生就会对实验室仪器设备和人身安全造成损失。为了减少火灾带来的损失,必须充分认识灭火的危险性,重视掌握灭火方法和逃生技巧,并能熟练使用灭火器材,将火灾损失控制在最小程度。 燃烧必须同时具备三个条件,即可燃物、助燃物、点火源。因此,只要能消除燃烧条件中的任何一个条件,即消除可燃物或将可燃物的浓度降低到安全范围,或者隔离氧气或充分减少氧气量,或者把可燃物冷却到燃点以下,燃烧就会终止。 1.隔离灭火法 将可燃物与引火源或氧气隔离开来,可防止燃烧继续扩大。比如,在燃烧过程中,关闭相关的阀门和电源开关,将燃烧区附近的可燃物搬离现场。隔离灭火法的主要工具是四氯化碳灭火剂,它能蒸发冷却可燃物和稀释氧浓度。四氯化

实验室废弃物处理方法

实验室废弃物处理方法 为防止实验室的污染扩散,污染物的一般处理原则为: 分类收集、存放,分别集中处理。尽可能采用废物回收以及固化、焚烧处理,在实际工作中选择合适的方法进行检测,尽可能减少废物量、减少污染。废弃物排放应符合国家有关环境排放标准。 化学类废物 一般的有毒气体可通过通风橱或通风管道,经空气稀释排出。大量的有毒气体必须通过与氧充分燃烧或吸收处理后才能排放。 废液应根据其化学特性选择合适的容器和存放地点,通过密闭容器存放,不可混合贮存,容器标签必须标明废物种类、贮存时间,定期处理。一般废液可通过酸碱中和、混凝沉淀、次氯酸钠氧化处理后排放,有机溶剂废液应根据性质进行回收。 含汞废液的处理 排放标准3:废液中汞的最高容许排放浓度为 0.05mg/L(以Hg计)。 处理方法: ①硫化物共沉淀法: 先将含汞盐的废液的pH值调至8-10,然后加入过量的Na2S,使其生成HgS沉淀。 再加入FeS04(共沉淀剂),与过量的S2-生成FeS沉淀,将悬浮在水中难以沉淀的HgS微粒吸附共沉淀.然后静置、分离,再经离心、过滤,滤液的含汞量可降至 0.05mg/L以下。[2] ②还原法:

用铜屑、铁屑、锌粒、硼氢化钠等作还原剂,可以直接回收金属汞。 含镉废液的处理 ①氢氧化物沉淀法: 在含镉的废液中投加石灰,调节pH值至 10.5以上,充分搅拌后放置,使镉离子变为难溶的Cd(OH)2沉淀.分离沉淀,用双硫腙分光光度法检测滤液中的Cd离子后(降至 0.1mg/L以下),将滤液中和至pH值约为7,然后排放。 ②离子交换法: 利用Cd2+离子比水中其它离子与阳离子交换树脂有更强的结合力,优先交换. 含铅废液的处理 在废液中加入消石灰,调节至pH值大于11,使废液中的铅生成Pb(OH)2沉淀.然后加入Al2(S04)3(凝聚剂),将pH值降至7-8,则Pb(OH)2与Al(OH)3共沉淀,分离沉淀,达标后,排放废液。 含砷废液的处理 在含砷废液中加入FeCl3,使Fe/As达到50,然后用消石灰将废液的pH 值控制在8-10。利用新生氢氧化物和砷的化合物共沉淀的吸附作用,除去废液中的砷。放置一夜,分离沉淀,达标后,排放废液。 含酚废液的处理 酚属剧毒类细胞原浆毒物,处理方法: 低浓度的含酚废液可加入次氯酸钠或漂白粉煮一下,使酚分解为二氧化碳和水。

常见灭火器适应火灾类型及使用方法(最新版)

( 安全管理 ) 单位:_________________________ 姓名:_________________________ 日期:_________________________ 精品文档 / Word文档 / 文字可改 常见灭火器适应火灾类型及使 用方法(最新版) Safety management is an important part of production management. Safety and production are in the implementation process

常见灭火器适应火灾类型及使用方法(最 新版) 灭火器是火灾扑救中常用的灭火工具,在火灾初起之时,由于范围小,火势弱,是扑救火灾的最有利时机,正确及时使用灭火器,可以挽回巨大的损失。灭火器结构简单,轻便灵活,稍经学习和训就能掌握其操作方法。目前常用的灭火器有泡沫灭火器、二氧化碳灭火器、干粉灭火器以及1211灭火器等。 (一)灭火器的灭火作用、灭火范围 1、泡沫灭火器 泡沫灭火器的灭火作用表现在:在燃烧物表面形成的泡沫覆盖层,使燃烧物表面与空气隔绝,起到窒息灭火的作用。由于泡沫层能阻止燃烧区的热量作用于燃烧物质的表面,因此可防止可燃物本身和附近可燃物的蒸发。泡沫析出的水对燃烧物表面进行冷却,泡

沫受热蒸发产生的水蒸气可以降低燃烧物附近的氧的浓度。 泡沫灭火器的灭火范围:适用于扑救木材、棉、麻、纸张等火灾,也能扑救石油制品、油脂等火灾;但不能扑救水溶性可燃、易燃液体的火灾,如醇、酯、醚、酮等物质的火灾。 2、干粉灭火器 干粉灭火器的作用表现在:一是消除燃烧物产生的活性游离子,使燃烧的连锁反应中断;二是干粉遇到高温分解时吸收大量的热,并放出蒸气和二氧化碳,达到冷却和稀释燃烧区空气中氧的作用。 干粉灭火器的灭火范围:适用于扑救可燃液体、气体、电气火灾以及不宜用水扑救的火灾。ABC干粉灭火器可以扑救带电物质火灾。 3、二氧化碳灭火器 二氧化碳灭火器的灭火作用表现在:当燃烧区二氧化碳在空气的含量达到30%-50%时,能使燃烧熄灭,主要起窒息作用,同时二氧化碳在喷射灭火过程中吸收一定的热能,也就有一定的冷却作用。 二氧化碳的灭火范围:适用于扑救600伏以下电气设备、精密

实验室废弃物处理办法

实验室废弃物处理办法 为规范和加强我校实验室废弃物管理工作,确保实验室安全,防止实验室废弃物污染校园环境、危害公共安全,依据《中华人民共和国固体废物污染环境防治法》、《废弃危险化学品污染环境防治办法》等国家有关法律、法规,并根据我校实际情况,制定本办法。 第一条实验室废弃物的管理实行学校、院系二级单位共同管理。 第二条实验室建设与设备管理处是学校实验室废弃物归口管理部门,负责对全校各单位教学、科研、生产所产生的各类实验废弃物分类贮存进行监督管理,配合环保部门对危险化学品废物进行集中处理,每年根据实际情况安排处理次数。 第三条产生实验室废弃物的院、系由单位安全负责人负责此项工作,并指定专人负责危险化学品废物的处理工作,同时负责组织本单位实验室危险废弃物收集、存放场地和相应设施,以及按规范要求完成实验室危险废弃物的收集、存放和处理。 第四条实验室建设与设备管理处根据各单位提供的拟处理的各类实验废弃物的信息,与环保部门联系,并及时通知各部门做好相应的准备,配合环保部门做好处理实验室废弃物的相关工作。 第五条各单位或实验室不得将危险废弃物(含沾染危险废物的实验用具)混入生活垃圾和其他一般废物中存放;不得将化学危险废弃物、放射性废弃物及实验动物尸体等混合收集、存放、处理;严禁随意倾倒、堆放、丢弃、遗撒实验室废弃物。

第六条实验室危险废弃物应按照不同类别分类收集与存放。 化学危险废弃物: (一)化学废液按化学品性质和化学品的危险程度分类进行收集,使用专用废液桶盛装,不同类别或会发生异常反应的危险废弃物不能混放,化学废液收集时,必须进行相容性测试;废液桶上须贴标签,并做好相应记录。 (二)固体废弃物和瓶装废弃物和一般化学品先用专用塑料袋收集,再使用储物箱统一存放,储物箱上须贴标签,并做好相应记录。 (三)剧毒化学品管理要实行严格的安全管理制度;剧毒废液和废弃物要明确标示,并严格按相关规定收集和存放。 (四)一般化学品应在原瓶内存放,保持原有标签,必要时注明是废弃化学品。 (五)一般化学废液通常分为一般有机物废液和无机物废液,各实验室应预先了解废液来源,分别收集和存放,并张贴标签明确标注。不清楚废液来源和性质时禁止混放;废液桶上应张贴标签明确标识。 生物危险废弃物: (一)未经有害生物、化学毒品及放射性污染的实验动物尸体、肢体和组织须用专用塑料密封袋密封,再放置专用冰室或冰箱冷冻保存,并做好相应记录。 (二)经有害生物、化学毒品及放射性污染的实验动物尸体、肢体和组织须先进行消毒灭菌后,再用专用塑料密封袋密封,贴上有害生物废弃物标志,放置专用冰室或冰箱冷冻保存,并做好相应记录。

实验室安全考试模拟题

实验室安全考试模拟题 一、判断题 1.教师应学习研究有关实验室安全的知识,同时在理论教学和实验中对学生进行安全知识教育、教会学生如何正确使用实验设备和实验操作,教会学生在突发事故发生时如何自我保护、相互救援、安全撤离。 选项A:正确 选项B:错误 2.大火封门无路可逃时,可用浸湿的被褥、衣物堵塞门缝,向门上泼水降温,以延缓火灾蔓延时间,呼叫待援。 选项A:正确 选项B:错误 3.发生危险化学品事故后,要对负有责任的主管人员和其他直接责任人员依法给予降级或者撤职的行政处分;触犯法律的,要依法追究刑事责任。 选项A:正确 选项B:错误 4.电气线路着火,要先切断电源,再用干粉灭火器或二氧化碳灭火器灭火,不可直接泼水灭火,以防触电或电气爆炸伤人。 选项A:正确 选项B:错误 5.不要向浓酸特别是浓硫酸中注水,以免过量放热发生危险。 选项A:正确 选项B:错误 6.对产生少量有毒气体的实验应在通风橱内进行。通过排风设备将少量毒气排到室外(使排出气在外面大量空气中稀释),以免污染室内空气。产生毒气量大的实验必须备有吸收或处理装置。 选项A:正确 选项B:错误 7.做需要搅拌的实验时,找不到玻璃棒,可以用温度计代替。 选项A:正确 选项B:错误 8.在使用汞的装置下面应放一搪瓷盘,以免不慎将汞洒在地上。 选项A:正确 选项B:错误 9.只要不影响实验,可以在实验室洁净区域铺床睡觉。 选项A:正确

选项B:错误 10.各课题组长是各自实验室的安全责任人,根据各自实验室的工作特点制订具体的安全操作细则,落实学校和系各项安全措施,经常对学生等有关人员进行安全教育,并设立组内安全员。 选项A:正确 选项B:错误 11.学生、新工作人员进实验室之前要参加安全教育和培训,经院系、实验室培训、考核合格后方可进入实验室工作;学生要在导师指导下开展实验研究。 选项A:正确 选项B:错误 12.实验室工作必须保持严肃、严密、严格、严谨;室内保持整洁有序,不准喧哗、打闹、抽烟。 选项A:正确 选项B:错误 13.化学危险品使用过程中一旦出现事故,应及时采取相应控制措施,并及时向有关老师和部门报告。 选项A:正确 选项B:错误 14.NaCN、KCN、As2O3、HgO、Na3P、BaCl2、BaSO4、BeO、BeCl2、V2O5都是剧毒化学试剂。选项A:正确 选项B:错误 15.全国消防宣传日是每年的11月9日。 选项A:正确 选项B:错误 16.臭氧、过氧化合物属于爆炸化合物。 选项A:正确 选项B:错误 17.灭火器应定期进行检验。 选项A:正确 选项B:错误 18.实验室工作人员对所从事实验的性质应比较了解,并严格按照实验程序和操作规程进行实验,对实验中可能出现的情况要有心理准备,一旦出现问题要有应对措施、低年级学生进行危险性较大的实验时应在导师直接指导下进行。 选项A:正确 选项B:错误

学校实验室废弃物处理制度

学校实验室废弃物处理制度 做好有害、有毒废弃物的处理工作,不仅保障广大师生员工的身体健康, 还能维护实验室、校园环境,使我校成为真正意义上的绿色学校。为将有害、有毒、废弃物的处理工作落到实处,特制定以下管理规定: 一、实验室废弃物的定义 实验室废弃物是指实验过程中产生的三废(废气、废液、废固)物质,实验用剧毒物品(麻醉品、药品)残留物等。 二、教师的职责 实验教师和任课教师必须树立环境保护意识,严格遵守国家环境保护工作的有关规定,对进入实验室的学生必须进行废弃物处理原则和规定的宣传、教育。 三、对三废(废气、废液、废固)处理的一般规定 1、废气 实验室应有符合通风要求的通风橱,实验过程中会产生少量有害废气的实验应在通风橱中进行,产生大量有害、有毒气体的实验必须具备吸收或处理装置。 2 、废液 学校实验室废液是指主要来自化学性实验室、生化性实验室及物理性实验室,或校內医务室等场所产出的各类废弃溶液。一般的实验室废液可分为: ①有机溶剂废液(如甲苯、乙醇、冰乙酸、卤化有机溶剂废液等); ②无机溶剂废液(如重金属废液、含汞废液、废酸、废碱液等)。 实验过程中,不能随意将有害、有毒废液倒进水槽及排水管道。不同废液在倒进废液桶前要检测其相容性,按标签指示分门别类倒入相应的废液收集桶中,禁止将不相容的废液混装在同一废液桶内,以防发生化学反应而爆炸等危害。每次倒入废液后须立即盖紧桶盖。特别是含重金属的废液,不论浓度高低,必须全部回收。 3、废固 不能随意掩埋、丢弃有害、有毒废渣、废固,须放入专门的收集桶中。盛装过危险物品的空器皿、包装物等,必须完全消除危害后,才能改为他用或弃用。 四、实验用剧毒物品(麻醉品、药品)的处理规定 1 、实验用剧毒物品(麻醉品、药品)的残渣或过期的剧毒物品由各实验室统一收存,妥善保管,报有关部门统一处理。 2 、盛装、研磨、搅拌剧毒物品(麻醉品、药品)的工具必须固定,不得挪作他用或乱扔乱放,使用后的包装必须统一存放、处理。 五、过期药剂的处理

家庭常用灭火方法(2021)

Safety issues are often overlooked and replaced by fluke, so you need to learn safety knowledge frequently to remind yourself of safety. (安全管理) 单位:___________________ 姓名:___________________ 日期:___________________ 家庭常用灭火方法(2021)

家庭常用灭火方法(2021) 导语:不安全事件带来的危害,人人都懂,但在日常生活或者工作中却往往被忽视,被麻痹,侥幸心理代替,往往要等到确实发生了事故,造成了损失,才会回过头来警醒,所以需要经常学习安全知识来提醒自己注意安全。 家里一旦以生火灾,首先不能慌乱,其次要采取科学方法灭火。现介绍几种常用的灭火方法: 1、冲水冷却法将水直接喷射到燃烧物上,熄灭火焰,或将水喷到附近未燃烧的可燃物上,使可燃物免受火焰热辐射的威胁,避免燃烧。 2、隔绝空气法用湿棉被等难燃物或不燃物覆盖在燃烧物表面上,隔绝空气,将火熄灭。 3、防止蔓延法将火附近的易燃物和可燃物,从燃烧区转移走;将可燃物和助燃物与燃烧区隔离开;防止正在燃烧物品飞散,以阻止燃烧蔓延。 初起阶段的火灾,如果发生在家里,可用浸湿的棉被、麻袋等去覆盖,也能使火熄灭。这是为什么呢? 我们在家里烧菜的时候油锅着火了。只要迅速用锅盖盖住油锅,然后把锅端开就没事了。这是因为锅盖将着火的油和空气隔开了,油得不到足够的空气,也就得不到必要的氧气,没有氧气,油就不能继

续燃烧。同样道理,用浸湿的棉被、麻袋等去覆盖着火的燃烧物,并将燃烧的东西全部盖住,也是为了阻止氧气的进入,使火熄灭。但对付初起的火灾,关键在于“快”,不能使火有扩大蔓延的机会。 XX设计有限公司 Your Name Design Co., Ltd.

常见灭火技巧与方法

常见灭火技巧与方法 (一)基本灭火原理 物质燃烧必须同时备三个条件:可燃物、助燃物、引火源,当其中一个条件被去掉时,就不能发生燃烧。由此归纳出四种基本的灭火原理。1.冷却灭火 冷却灭火主要是喷水或使用其他有冷却作用的灭火剂。由于可燃物质着火必须具备一定的温度和足够的热量,灭火时,将具有冷却降温和吸热作用的灭火剂直接喷射到燃烧物体上,以降低燃烧物质的温度。当其温度降到燃烧所需最低温度以下时,火就熄灭了。也可将水喷洒在火源附近的可燃物质上,使其温度降低,防止将火源附近的可燃物质烤着起火。 冷却灭火方法是灭火的常用方法,主要用水来冷却降温。一般物质如木材、纸张、棉花、布匹、家具、麦草等起火,都可以用水来冷却灭火。 2.窒息灭火 窒息灭火就是阻止空气进入燃烧区不让火接触到空气,让氧气与燃烧物隔绝使火熄灭。根据着火时需要大量空气这个条件,灭火时采用捂盖的方式,使空气不能进入燃烧区或进入很少。常用方法: ●向燃烧区充入大量的氮气、二氧化碳等不助燃的惰性气体,减少空气量。 ●封堵建筑物的门窗,燃烧区的氧一旦被耗尽,又不能补充新鲜空气,火就会自行熄灭。 ●用石棉毯、湿棉被、湿麻袋、砂土、泡沫等不燃烧或难燃烧的物品覆盖在燃烧物体上,以隔绝空气使火熄灭。 3.隔离灭火 隔离灭火就是将燃烧物与附近有可能被引燃的可燃物分隔开,燃烧就会因缺少可燃物而熄灭。这也是一种常用的灭火方法。 ●灭火时迅速将着火部位周围的可燃物移到安全地方。 ●将着火物移到没有可燃物质的地方。

●关闭可燃气体、液体管道的阀门,减少和中止可燃物质进入燃烧区域。 ●拆除与火源相毗连的易燃建筑,形成阻止火势蔓延的空间地带。 4.抑制灭火 抑制灭火是将化学灭火药剂喷入到燃烧区,使之参与燃烧的化学反应,而使燃烧反应停止。一般用于扑救计算机等精密仪器设备、家用电器、档案资料和各种可燃气体火灾。但灭火后要采取降温措施,防止发生复燃。以上四种灭火方法,既可单独采用,也可综合使用。 (二)初期灭火原则 生活中,我们随时都有可能遭遇火灾,一旦遇到火灾,无论是在家里,还是在学校、商场,我们要做的只有三件事: 1、及时报警发现火情后,要及时发出警报,通知他人。这样既可以唤起别人的警惕,及时采取措施,还可以寻求他人的帮助,有利于尽快将火扑灭。通知他人时,可以大声呼喊"着火啦",如果因紧张喊不出声音,可以敲打壶、碗、盆等可发出响声的东西,以引起别人的注意。 在通知他人的同时,还应及时报警。因为火势的发展往往是难以预料的,不同的火源应采取不同的扑救方法。如果扑救方法不当有可能酿成无法控制的火灾。所以,发现火灾,要及时报警。 2、尽力灭火火灾初期阶段,火势尚小,如果能够正确及时地采取扑救措施,将火消灭在萌芽状态,就可避免人员伤亡和财产损失。我们这里所说的灭火是指初期灭火。所谓初期灭火是指火只在地面等横向蔓延期间,或者在火蔓延到窗帘、隔扇等纵向表面之前即进行灭火。火焰一旦蔓延到纵向表面,就会很快到达顶棚,那时就需要消防队扑救了。灭火时要充分利用配备的灭火器具或就地取材灵活运用身边的东西,如:用坐垫、褥垫、浸湿的扫帚等拍打火,用毛毯盖火,把窗帘撕下、用脚踩灭火等等。 需要提醒的是:未成年人不可贸然参加灭火。 3、尽快逃生如果火已经开始扩大蔓延,那就必须立即沿着疏散标志尽快疏散逃生,火灾留给专业消防队员扑救。疏散时,如果能来的及就把正在

金宁中小学试验室废弃物处理办法

金寧中小學實驗室廢棄物處理辦法 一、訂定本辦法依據: 1.教育部頒布實驗室廢棄物管理作業規範。 二、目的: 1.提高師生重視環保意識、教育學生如何處理實驗廢棄物。 2.減少廢棄物污染改善實驗教學環境。 3.建立本校實驗室廢棄物之處理(含收集、分類、貯存、紀錄、申報、資料建檔、註銷)程序與守則,作為管理依據。 三、工作權責劃分: 1. 實驗室廢棄物處理作業負責人(中高年級自然科老師): (1)資料建檔及註銷: (a)分類建檔。 (b)廢棄物傾倒、貯存查核。 (c)申報表彙整存查。 (d)報廢及過期化學品註銷。 (2)規劃本校實驗室廢棄物管理作業規範及實驗廢棄物處理辦法。 (3)負責本校實驗廢棄物盤查作業規劃、執行及盤查報告之彙整、陳核。 (4)實驗廢棄物委外處理。 (5)需參加有關「處理實驗室廢棄物」之研習活動。 2. 實驗室管理人: (1)負責實驗廢棄物之分類收集、標示、貯存、處理部分可先處理之廢棄物及申報等事宜。 (2)清理並分類儲存所申報之實驗廢棄物。 (3)廢棄物分類傾倒、貯存之運作與安全管理。 (4)貯存容器之分類回收及再利用。 (5)需參加有關「處理實驗室廢棄物」之研習活動。 3..實驗任課教師:

(1)指導學生正確分類、傾倒,及如何處理及時所產出廢棄物。 (2)廢棄物溢出或意外發生之緊急處理。 (3)需參加有關「處理實驗室廢棄物」之研習活動。 四、處理要點: 1.實驗廢棄物產出:教師指導學生分類傾倒。 2.廢棄物分類收集、標示、貯存: (1)實驗前準備實驗廢棄物小容量貯存容器(有容量指示線),貼上「種類」標示。(2)收集、標示: (a)實驗廢棄物產出,經教師指導學生依分類傾倒入各貯存容器內。 (b)實驗週內各班做完該實驗,實驗室管理人量測總收集量,紀錄于「廢棄物傾倒紀錄表」內(附件一),倒入大容量貯存桶內,貯存桶需註明「種類」、貼「實驗室廢棄物」標示(如附件二)。 (3)貯存: (a)貯存容器需註明「種類」、貼「實驗室廢棄物」標示及置於盛盤內防溢。 (c)採分類分區集中貯存,「貯存區」需貼標示,附近配製適當消防砂及滅火器。3.實驗廢棄物之申報: (1)實驗室管理人填寫「實驗廢棄物申報表」(附件三),檢附「廢棄物傾倒紀錄表」,每一貯存桶各一份彙集申報,交予廢棄物作業負責人,進行申報資料核對工作。 (2)申報資料核對:項目包括貯存地點、廢棄物標示、實驗室管理人簽名、廢棄物傾倒紀錄等資料。若申報資料不完整,可要求補正。 (3)接到實驗廢棄物申報表一日內,確認申報資料完整性,通知實驗室二日內收集完畢。 4. 實驗廢棄物之處理: 可以合法袋處理、廢棄物再利用、或廢棄物交換等依事業廢棄物管理辦法方式處理。5.資料建檔及註銷: (1)廢棄物作業負責人將待處理及已處理之實驗廢棄物資料分類建檔,及實驗廢棄物申報表彙整存查。 (2)報廢及過期化學品之註銷。 五、本辦法陳校長核定後實施,修正時亦同。

实验室控制GMP实施指南

实验室控制系统GMP 实施指南 目录 目录 1 前言 (1) 2 目的 (2) 3 范围 (3) 4 指南内容结构 (4) 5.质量控制实验室总体描述 (5) 5.1 职责 (5) 5.2 布局 (5) 5.2.1 原则 (5) 5.2.2 要求 (5) 5.3 人员 (6) 5.3.1 组织架构 (6) 5.3.2 资质要求 (6) 5.3.3 培训 (6) 5.4 文件系统 (7) 5.4.1 分类 (7) 5.4.2 要求 (7) 6 取样 (10) 6.1 6.2 6.3 6.4 定义 (11) 应用范围 (12) 要求 (12) 6.3.1 人员 (12) 6.3.2 取样器具 (12) 6.3.3 样品容器 (13) 6.3.4 取样间 (13) 流程实施 (13) 6.4.1 取样方案 (13) 6.4.2 取样 (14) 6.4.3 标识 (14) 6.4.4 取样记录 (14) 6.4.5 取样的异常处理 (14) 6.4.6 留样 (15) 7 试剂及试液的管理 (17) 7.1 定义和应用范围 (17) 7.2 要求 (17) 7.2.1 采购接收和标识 (17) 7.2.2 储存和使用 (18) 7.2.3 试剂使用效期的管理 (18) 7.2.4 报废 (18) 7.2.5 文件管理 (18) 8 标准品/对照品 (19) 8.1 定义 (19) 8.2 分类 (19) 8.3 应用范围 (20) 8.4 要求 (20) 8.4.1 接收 (20) 8.4.2 标识 (20) 8.4.3 标准溶液的稳定性研究 (20) i 更多免费资料下载请进:https://www.doczj.com/doc/e66206667.html,好好学习社区

实验室安全考试试题及答案

实验室安全考试 1、[判断题] 身上着火被熄灭后,应马上把粘在皮肤上的衣物脱下来。(分值) 你的答案:错误 2、[判断题] 若被火场浓烟所困,应迅速起身跑出火场。(分值) 你的答案:错误 3、[判断题] 实验室发生火警、火灾时,应立即采取措施灭火,并报保卫处或119。(分值) 你的答案:正确 4、[判断题] 以下情况不宜进行游泳锻炼:患心脏病、高血压、肺结核和身体虚弱的人;严重沙眼、传染性皮肤病、细菌性肠炎等人;病刚好或发烧头疼、伤风感冒、过度疲劳、饥饿时;饭后45—60分钟和剧烈运动后不久;女生月经期不宜下水。(分值) 你的答案:正确 5、[判断题] 生物实验中的一次性手套及沾染EB致癌物质的物品,可以丢弃在普通垃圾箱内。(分值) 你的答案:错误 6、[判断题] 生物类实验室废弃物(包括动物残体等),可以丢弃在普通垃圾箱内。(分值) 你的答案:错误 7、[判断题] 生物危害的标识是:(分值) 你的答案:正确 8、[判断题] 发生病原微生物被盗、被抢、丢失、泄漏,承运单位、护送人、保藏机构和实验室的设立单位未依照中华人民共和国卫生部《病原微生物实验室生物安全管理条例》的规定报告,造成传染病传播、流行或者其他严重后果的,由实验室的设立单位或者承运单位、保藏机构的上级主管部门对主要负责人、直接负责的主管人员和其他直接责任人员,依法给予撤职、开除的处分;构成犯罪的,依法追究刑事责任。(分值) 你的答案:正确 9、[判断题] 使用激光扫描仪预览和扫描资料时,可以不盖上扫描仪盖子。(分值) 你的答案:错误 10、[判断题] 测试数据应进行异地备份。(分值) 你的答案:正确 11、[判断题] 早晨、中饭、晚上等几个人员稀少的时间段,要特别注意随手关门,确保实验室财产和个人物品的安全。(分值) 你的答案:正确

实验室废弃物处理制度

三废处理规定 编号:002- 2014 1为了加强实验室废弃物和染菌器材处理的安全管理,防止疾病传播,保护环境,保障人体健康,根据《中华人民共和国传染病防治法》、《中华人民共和国环境保护法》、《医疗废物管理条例》及《医疗卫生机构医疗废物管理办法》等法律法规的规定,制定本制度。 2本制度所称实验室废弃物包括各类废弃的健康相关产品、生物样品、中毒样品、终止保存的菌(毒)种、一次性注射器及其他实验废弃物等。本制度也适用于可重复使用的染菌器材的处理。 3实验室废弃物采取分类收集处置的原则,由产生废弃物的科室、技管科在各自职责范围内共同管理。 4各类废弃物的处理 4.1各类食品、饮用水、卫生用品等检验后其结果符合国家相关标准或虽不符合但其不会引起环境污染,按体系文件规定的保存期满后,液体类经稀释后由下水道排放,固体类经毁形后按生活垃圾倾倒在中心集中的垃圾存放地,统一清运处理。 4.2实验室产生的感染性废物、病理性废物、损伤性废物、药物性废物、化学性废物等医疗废物,按下列方法处理: 4.2.1所有污染材料应放置在防渗漏的容器中高压灭菌。 4.2.2感染性废物、病理性废物、损伤性废物、药物性废物、化学性废物应分类收集,盛装医疗废物的包装物或容器应符合《医疗废物专用包装物、容器标准和警示标识规定》,且无破损、渗漏和其他缺陷。 4.2.3细菌性食物中毒样品和病毒阳性标本经121℃压力蒸汽灭菌30后,按感染性废物收集处理。 4.2.4染菌玻璃试管、玻璃吸管、滴管、镊子等:经121℃压力蒸汽灭菌20后,对试管进行清洗、晾干。 4.2.5染菌的一次性平皿、移液头等:经煮沸30后,按感染性废物收集处理。 4.2.6病毒类病源性培养物经121℃压力蒸汽灭菌30后,按感染性废物收集处理。

常见的四种基本的灭火方法

常见的四种基本的灭火方法 以下是四种灭火的基本方法 1、隔离灭火法 就是将火源处或其周围的可燃物质隔离或移开,燃烧会因缺少可燃物而停止。如将火源附近的可燃、易燃、易爆和助燃物品搬走;关 闭可燃气体、液体管路的阀门,以减少和阻止可燃物质进入燃烧区; 设法阻拦流散的液体;拆除与火源毗连的易燃建筑物等。 2、窒息灭火法 就是阻止空气流入燃烧区或用不燃物质冲淡空气,使燃烧物质得不到足够的氧气而熄灭。如用不燃或难燃物捂盖燃烧物;将水蒸气或 情性气体灌注容器设备;封闭起火的建筑、设备的孔洞等。 3、冷却灭火法 就是将灭火剂直接喷射到燃烧物上,以增加散热量,降低燃烧物的温度于燃点以下,使燃烧停止;或者将灭火剂喷洒在火源附近的物 体上,使其不受火焰辐射热的威胁,避免形成新的火。 4、抑制灭火法(化学灭火法) 就是使灭火剂参与到燃烧反应过程中去,使燃烧过程中产生游离基消失,而形成稳定分子或低活性的游离基,使燃烧反应因缺少游 离基而停止。 附:常用的灭火材料——水 (1)水 水是最常用和使用最方便的灭火剂。它通常经液态、雾态和汽态形式使用和起作用,主要可降低火场的温度和隔绝空气。其消防设 施有消火栓、雨淋、雨雾、水斗、喷雾器、水蒸汽喷咀和消防车等。 (2)用水灭火的禁用场所

1、忌水物质,遇水放热的物质,如钾、钠、铅粉、电石等。这 些物质能与水作用生成可燃气体,形成爆炸混合物; 2、铁水、钢水及灼热物体。能使水迅速蒸发引起强烈爆炸; 3、可燃易燃液体火灾。它使可燃液体浮于水面,扩大燃烧面积; 4、电气火灾。水能导电,易造成触电和短路事故; 5、精密仪器、贵重文物资料、档案的火灾。用水扑救,会使其 毁掉。 简单的灭火器材 1、灭火器 (1)、使用方法 用手握住灭火器提把,平稳、快捷地提往火场。使用前,应将灭火器上下颠倒几次,使筒内干粉松动,在安全距离下,拔出保险销,一手握住开启压把,另一只手握住喷管,喷嘴对准火源根部喷射。 喷射时,应采取由近而远、由外而里的方法。 (2)、注意事项 灭火时,人应站在上风处。不要将灭火器的盖与底对着人体,以免盖、底弹出伤人。不要同时与水一起喷射,以免影响灭火效果。 扑救电器火灾时,应先切断电源,防止人员触电。持喷筒的手应握 在胶质喷管处,防止冻伤。 2、室内消防栓 使用方法:首先打开箱门,然后迅速取下挂架上的水带和弹簧架上的水枪,将水带接口连接在消火栓接口上,(按动启泵按钮,此时 消火栓箱上的红色指示灯亮,给控制室和消防泵送出火灾信号)按逆 时针方向旋转消火栓手轮,即可出水灭火。

实验室常用的灭火方法灭火器的类型有哪些.doc

实验室常用的灭火方法_灭火器的类型有哪些 常用灭火剂除水以外,还有泡沫、卤代烷、二氧化碳、干粉等.均可分别用以扑救各种不同性质的火灾。下面是我为大家整理的几种实验室常用的灭火方法,希望对您有所帮助。 实验室常用的灭火方法 实验室常用的灭火方法(一) 冷却灭火法 这种灭火法的原理是将灭火剂直接喷射到燃烧的物体上,以降低燃烧的温度于燃点之下,使燃烧停止。或者将灭火剂喷洒在火源附近的物质上,使其不因火焰热辐射作用而形成新的火点。冷却灭火法是灭火的一种主要方法,常用水和二氧化碳作灭火剂冷却降温灭火。灭火剂在灭火过程中不参与燃烧过程中的化学反应。这种方法属于物理灭火方法。 实验室常用的灭火方法(二) 隔离灭火法 隔离灭火法是将正在燃烧的物质和周围未燃烧的可燃物质隔离或移开,中断可燃物质的供给,使燃烧因缺少可燃物而停止。具体方法有: 1、把火源附近的可燃、易燃、易爆和助燃物品搬走; 2、关闭可燃气体、液体管道的阀门,以减少和阻止可燃物质进入燃烧区; 3、设法阻拦流散的易燃、可燃液体; 4、拆除与火源相毗连的易燃建筑物,形成防止火势蔓延的空间地带。

实验室常用的灭火方法(三) 窒息灭火法 窒息灭火法是阻止空气流入燃烧区或用不燃烧区或用不燃物质冲淡空气,使燃烧物得不到足够的氧气而熄灭的灭火方法。具体方法是: 1、用沙土、水泥、湿麻袋、湿棉被等不燃或难燃物质覆盖燃烧物; 2、喷洒雾状水、干粉、泡沫等灭火剂覆盖燃烧物; 3、用水蒸气或氮气、二氧化碳等惰性气体灌注发生火灾的容器、设备; 4、密闭起火建筑、设备和孔洞; 5、把不燃的气体或不燃液体(如二氧化碳、氮气、四氯化碳等)喷洒到燃烧物区域内或燃烧物上 实验室常用的灭火方法(四) 干粉灭火器 主要用来扑灭易燃液体或电气用具失火。 水剂灭火器 主要用来扑灭木材、布料等的失火。严禁用来扑灭未截断电源的电器失火,或易燃液体(如汽油、酒精和食用油)的失火。显像管、电视机或电脑屏幕失火,即使截断电源,也不能使用水剂灭火器。 二氧化碳灭火器 可用来扑灭各类失火,但不适宜油炉失火或小火。 泡沫灭火器 专用于扑灭易燃液体失火。 挥发液体灭火器

高中实验室废弃物处理方法

满洲里市第一中学易燃、易爆、有毒危险品管理制度 一、易燃、易爆危险化学品要有专人负责保管。并在用毕后及时上报所耗药品,剩余药品及时上缴。 二、易燃、易爆药品应分类存放,存入专用危险品仓库或专柜,加锁防范。互相发生化学作用的药品应隔开存放。并按公安局和防疫部门的相关规定进行管理、备案。 三、应经常检查和通风,防止因变质、分解造成自燃和爆炸事故。在搬运时,要轻拿轻放,防止震动、撞击、重压、倾倒和摩擦。遇水易发生爆炸、燃烧的化学物品,不准放在潮湿或易积水、漏水的地点,要放在干燥处存放。受阳光照射容易引爆的化学物品,要存在阴凉避光地点进行存放。要确实做好化学危险品的防盗、防潮、防腐蚀和防暴晒等安全工作,高温、潮湿季节尤应注意。 四、危险药品仓库(或柜)周围和内部严禁有火源。 五、用不上的危险药品,应及时调出,变质失效的要及时上报有关部门进行销毁,销毁时要注意安全,不得污染环境。 六、危险有毒药品,用后剩余部分应随时存入危险药品库(或柜)。 七、教学实验室领用、保管、使用易燃、易爆、危险化学药品由实验室专职技术人员负责;实验课期间实验指导教师也要对其安全负责。 八、领用剧毒药品时,要经主管领导批准,领用时要进行登记、签名、注明用途和用量。 九、领取易燃易爆有毒危险化学药品时,要做到随用随领,领、用、剩、废、耗的数量必须详细记录,用剩数量及时退库。 十、各实验室要加强化学废液和废物的处理和收存工作。空的试剂瓶要集中收藏,不得到处乱扔乱放。废液和废物要分门别类的进行收存,杜绝把化学废液和废物往下水道或其他地方乱倒乱放的情况出现。 满洲里市第一中学理化生实验室废弃物处置管理制度 第一条为保障学校实验教学的顺利进行,保障教师、学生的身体健康,保护环境,结合学校实际,特制定本办法。 第二条实验室废弃物是指实验过程中产生的三废物质(废气、废液、废渣)、实验用有毒物品残留物和生物实验动物尸体及器官等。 第三条全体师生员工要牢固树立环保意识,重视执行环保管理制度,不能随意掩埋、丢弃有毒、有害废物,不能随意倾倒有毒、有害废液,实验室工作人员要熟知废弃物处理原则和规定。 第四条学校实验室负责组织全校有毒、有害废液、废固的集中处理工作,负责监督、检查实验室废弃物管理情况。 第五条各科实验员人负责有毒、有害废液、废固的处置与管理工作,保证学校环境安全;各使用班级必须指定专人负责收集、存放、监督、检查有毒、有害废液、废固的管理工作。

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