Overexpression of Cbfa1 Enhances Differentiation of Dental
Follicle Cells into Cementoblasts1
Pan Keqing, Sun Qinfeng?, Ge Shaohua, Li Shu, Wang Yan,Yang Pishan* Department of Periodontology, School of Dentistry, Shandong University, Jinan, China (250012)
E-mail: yangps@https://www.doczj.com/doc/e34938637.html,
Abstract
Core binding factor α1 (Cbfa1) is a runt domain transcription factor that is essential for bone formation and tooth development. It is hypothesized that forced expression of Cbfa1 in dental follicle cells (DFCs) can stimulate DFCs differentiation into cementoblast-like cells in vitro. In this study we investigated the function of Cbfa1 on DFCs by retroviral system, real-time RT-PCR, Western blot and mineralization assay. Real-time PT-PCR analysis indicated that cementoblast-related genes were expressed in DFCs, including osteopontin, type I collagen, bone sialoprotein, osteocalcin and cementum attachment protein, cementum-derived protein. Overexpression of Cbfa1 in DFCs enhanced the expression of these genes. Mineralization assay also showed that Cbfa1 increased the mineralization nodules formation. The results suggest that Cbfa1 plays an important role in the differentiation of DFCs into cementoblast-like cells by increasing the expression of cementoblast-related genes.
Keywords: Cbfa1, dental follicle cells, differentiation, overexpression, cementoblasts.
1. INTRODUCTION
Cementum is the calcified connective tissue that covers the tooth root surface, and there is accumulating evidence that cementum formation is critical for appropriate maturation of periodontium, both in development and regeneration of periodontal tissue. Cementogenesis is initiated after root dentin formation and regulated by the interaction between Hertwig`s epithelial root sheath and dental follicle mesenchymal cells. Dental follicle is a loose connective tissue derived from ectomesenchyme surrounding the enamel organ and the dental papilla of the developing tooth germ prior to eruption. It is thought that during development of the periodontium, dental follicle cells (DFCs), when triggered appropriately, have the capacity to differentiate into periodontal ligament fibroblasts, cementoblasts and osteoblasts. However, this dogma has never been proven.
Many factors are involved in regulating periodontal development and cementum formation, including adhesion and chemotactic factors, such as fibronectin, OPN, BSP; growth factors, such as BMPs, FGFs and transcription factors, such as Cbfa1. Among these factors, Cbfa1 is a new known factor that may be important for cementum formation without little direct research (Zou et al., 2003).
Cbfa1 (also known as Runx2, OSF2, AML3, Pebp2αA) is a master transcription factor for skeletal development. Furthermore, it has also been identified as essential for tooth formation (Ducy et al., 1999; D`Souza et al., 1999). Cbfa1 deficient mice exhibit an arrest of molar tooth development at the early cap stage (D`Souza et al., 1999). Mutations of Cbfa1 gene cause cleidocranial dysplasia (CCD), an autosomal dominant disorder in human and mice characterized by defective bone formation (Mundlos et al., 1997). In addition, CCD also shows dental defects including multiple supernumerary teeth, delayed eruption of permanent dentition and so on (Hitchin, 1975; Jensen and Kreiborg, 1990). The dental abnormalities suggest that Cbfa1 plays an important role in formation of the dentition. Cbfa1 express in both dental papilla and dental sac (D`Souza et al., 1999) throughout the development
1This was supported by Doctoral Foundation (20050422044).
?contribute equally
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of the tooth, including formation of the periodontium. Cementoblasts, cementocytes, periodontal tissue, osteoblasts, and osteocytes all express Cbfa1 (Broncker et al., 2001). These data suggest a potential involvement of the gene in the differentiation of odontoblasts and lining cells in the periodontal space and the development of periodontal tissues. However, the function of Cbfa1 on periodontal tissues, especially on the differentiation of DFCs still remains unclear.
In this study, we hypothesized that DFCs cultured in vitro had cementoblast phenotype and observed whether Cbfa1 could promote differentiation of DFCs along the cementoblast pathway by gene transfection.
2. MATERIALS & METHODS
2.1 Cell Culture
The retroviral packaging cell line PT67 (Clontech, CA, USA) and the murine fibroblast cell line NIH3T3 preserved in our laboratory were maintained in α-minimum essential medium (αMEM, HyClone, Logan, UT, USA) containing 10% (v/v) fetal bovine serum (FBS, HyClone).
DFCs were obtained from BALB/c mice at embryo 24~26 post development, where day 0 is defined as vaginal plug date. Selection of this time point for isolation of DFCs was based on root formation (cementogenesis) had not been initiated. The method used for cell isolation was similar to that previously reported (Wise et al., 1992).Briefly, under a dissecting microscope, first molars were removed and then subjected to 1% trypsin at 4℃ for 1.5 hours. Then the loose dental follicle tissue were got from the surrounding of the enamel organ and the dental papilla and cultured in αMEM containing 20% FBS. Epithelial cells did not survive in this media, as determined by lack of expression for specific keratins.
2.2 Construction of Recombinant Retroviral Plasmid Vector
Cbfa1 gene was obtained using PCR method from plasmid pCMV5-Cbfa1 (kindly provided by Ducy P, Department of Molecular Genetics, University of Texas M. D. Anderson Cancer Center) encoding full-length mouse Cbfa1 cDNA with MASNSL as the N-terminal sequence（Ducy et al.,1997; Thirunavakkarasu, et al., 1998), The PCR primers are: 5’-ctcgagatgGCGTCAAACAGCCTCT T-3’ and 5’-ACGCGTtcaatatggccgccaaaca-3’. The PCR product was cloned into the vector pIRES (Clontech), resulting a plasmid pIRES-Cbfa1. Then the plasmid was digested and a 2.2kb fragment Cbfa1-IRES was purified and cloned into pLEGFP-N1 (Clontech), resulting the plasmid pLEGFP- IRES-Cbfa1. Another enhanced Cbfa1 plasmid which deletion the VWRPY motif was constructed similarly, but the primer are: 5’-ctcgagatggtggagatcatcgcggacct-3’ and 5’-ACGCGTttacaaaacag ttggggaactg-3’. The new recombinant plasmid vectors were transferred into the E Coli (DH5α) strain，prepared in small scale and analyzed using restriction endonuclease analysis and DNA sequencing analysis to confirm the Cbfa1 sequence without any errors.
2.3 Transfections, Infections and Determination of Viral Titer
The packaging cells PT67 were plated on a 6-well plate and transfected with 10μg plasmid DNA by LipofectamineTM 2000(Invitrogen, Carlsbad, CA, USA). Green fluorescence was observed under confocal microscope 48 hours after transfection. To obtain stable virus-producing cell lines, the transfected packaging cells were cultured in selection medium containing G418 (400ug/ml, Takara, Tokyo, Japan) for two weeks. The medium from packaging cells containing virus were collected,
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filtered through a 0.45μm filter, and then stored at -80?C.The recombinant retrovirus was tested by PCR. Viral titer was determined indirectly by NIH3T3 as described (Kwon et al., 2003).
For transduction, DFCs were seeded 24h before infection. The medium from packaging cells containing virus was added to DFCs in presence of polybrene (6g·L-1, Sigma, St. Louis, MO, USA). Three to six serials infection were performed to increase the efficiency of infection. The stable transfected DFCs were chosen by G418 (300ug/ml) and collected for the following experiments.
Real-Time Reverse-Transcriptase Polymerase Chain Reaction
Total RNA was extracted separately from DFCs and DFCs infected with pLEGFP-N1, pLEGFP-IRES-Cbfa1, and the enhanced pLEGFP-IRES-Cbfa1 with TRIzol reagent (Takara). 1μg total RNA from the sample preparation was reverse transcribed with oligo dT-adaptor primer (Fermentas, MBI, EU) according to the manufacturer’s instructions.
For real-time PCR, the LightCycler FastStart DNA Master SYBR Green I (Roche Applied Science, Mannheim, Germany) was used. Primers were listed in Table. The LightCycler PCR reaction mix was prepared according to manufacturer’s instruction. After a denaturation step at 95°C for 10 min, temperature cycling was initiated. Each cycle consisted of denaturation at 95°C for 10s, annealing at 59°C for 5s, and extention at 72°C for 10s. 45 cycles were performed. The amount of mRNA was calculated for each sample from the standard curve using the instrument software (LightCycler Software 4.0 LightCycler 2.0 Roche). Results were expressed as the ratio of the amount of tested mRNA normalized by β-actin mRNA .
2.4 Western Blotting
Cells were harvested by enzyme digestion and washed twice with PBS. Samples of protein were separated by SDS-PAGE, transferred to nitrocellulose membrane, and probed with goat anti-Cbfa1 antibody (1:500, Santa Cruz, CA, USA), then followed by horseradish-peroxidase-conjugated rabbit anti-goat IgG (1:10,000, Sigama), detected by DAB. The reference protein (β-actin) was used as internal control.
2.5 Mineralization Assay
Cells were plated at density of 1x104 cells/well in 24-well plates in αMEM. After 24 hours, the media was changed to mineralizing media (αMEM containing 10% FBS, 50μg/mL ascorbic acid, 10nM dexamethasone, and 10mM ?-glycerophosphate). Biomineralization assays were performed on week 2, 3 and 4 with von Kossa staining (Puchtler and Meloan, 1978). Experiments were performed 3 times.
3. RESULTS
3.1 Construction and Identification of Recombinant Plasmid
The result of recombinant retroviral plasmid vector pLEGFP-IRES-Cbfa1 identified by restriction endonuclease was shown in Fig. 1 A and the sequence of Cbfa1 was consistent with that in GeneBank. We concluded that the recombinant retroviral plasmids were constructed successfully.
3.2 Retroviral Infection of DFCs
The retrovirus produced by PT67 was added to infect DFCs. After serials infection and antibiotic selection, stable overexpressing Cbfa1 cells were obtained. Green fluorescence could be observed under confocal microscope with no significant morphology change (Fig. 1B). Real-time PT-PCR
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analysis confirmed that the transfected cells were overexpressing (5- to 10-fold) Cbfa1 gene compared with control cells (Fig. 1C). The presence of Cbfa1 in cell extract was detected by Western blotting. Positive results were seen only in the Cbfa1 overexpressing cells (Fig. 1D).
3.3 Cbfa1 Overexpression and Changes in Gene Expression
We next focused on the expression of cementoblast-related genes with the overexpressing of Cbfa1 including Col I, ALP, OPN, BSP and OC. These cementoblast-related proteins have also been implicated in the process of cementogenesis. Cementoblast-specific markers CAP and CP23 had also been detected. Real-time PT-PCR analysis (Fig. 2) demonstrated that all of them were expressed in DFCs, and overexpressing of Cbfa1 enhanced their expression. Interestingly, ALP expression was not much affected.
3.4 Cbfa1 Overexpression and Induction of Mineralization
Finally an in vitro nodule formation assay was carried out to determine whether the up-regulation of cemetoblast-related genes transcription resulted in a mineralized matrix formation. Nodule formation has been considered to be an important feature for mineralization. It was observed that overexpression of Cbfa1 stimulated the onset of mineralization in DFCs, the size of the nodule formed (Fig. 3) was significantly larger than that of the wild DFCs.
4. DISCUSSION
Retroviruses are the only vectors that integrate their genes efficiently into the genome of the target cells and provide long term expression of the transgenes (Limon et al., 1997). So retroviruses were chosen in this study as a tool to transfer Cbfa1 into DFCs. Resistance gene allows to choose stable transfected cell by G418, and the expression of EGFP offers a direct observation of the transfection. What is more, IRES allows Cbfa1 and EGFP gene to express at high level without any disturbance. Fluorescence microscope observation, real-time PT-PCR and western blot analysis all confirmed that Cbfa1 was overexpressing in transduced cells. Retroviral vectors resulted in the stable integration of Cbfa1 gene into the DFCs genome and long term expression without obsolete biological characteristic changes.
Our data showed that cementoblast-related genes were expressed in DFCs, including OPN, Col I, OC, BSP, ALP, CP23 and CAP, and overexpressing of Cbfa1 increased the expression of these genes. Because these genes are associated with cementoblast, our results indicated that DFCs had the potency to differentiate into cementoblast, and transfection of Cbfa1 strengthened this differentiation potentiality.
Many studies display that Cbfa1 can induce the expression of various bone matrix genes, such as Col I, OPN, BSP ,OC and ALP in mesenchymal cells and nonosteoblast cells (Banerjee et al., 1997; Ducy et al., 1997; Harada et al., 1999; Lee et al., 2000; Prince et al., 2001).We also observed the same results in DFCs. Cbfa1 remarkably enhanced expression of OPN (10 fold) which is one of the early-stage markers of osteoblast differentiation, while only slightly increased the expression of BSP(1.5 fold) and OC (2 fold) which are markers of mature cementoblast. This implied that Cbfa1 might play more roles in the differentiation of DFCs into cementobalst at early-stage than in later-stage. Cbfa1 also significantly increased Col I (6 fold), which is the most abundant protein of cementum, known to promote cell attachment and maintain the framework for mineral deposition (Jikko, et al., 1999). In
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contrast to our prediction, Cbfa1 failed to increase the expression of ALP which regulates formation of cementum. Perhaps the result in this study was associated with the different cell types and/or the different stages of cell differentiation. For example, human cementoblasts exhibit lower ALPase activity, whereas mouse cementoblasts have higher activity (Grzesik et al., 1998; D’Errico et al., 1999; Hou et al., 1999). The real mechanism about the inhibition of ALP expression by Cbfa1 in DFCs needs further studies.
Besides above cementoblast-related genes，we also detected cementoblast-specific genes, CAP and CP23. CAP (Saito, et al., 2001) and CP23 (Arzate, et al., 2002) are synthesized by cementoblasts and restricted periodontal ligament cell population. They have been implicated in regulating the mineral substance deposition rate, composition, and morphology of hydroxyapatite crystals f and they are capable of recruiting putative cementoblastic populations (Pitaru et al., 1992; Alvarez et al., 2003). It is believed that CAP and CP23 are specific proteins in cementum. Our results showed that both CAP and CP23 mRNA expressed in DFCs though the quantities were very low. Interestingly, Cbfa1 could promote their expression. This offered further direct proof for the theory that DFCs had the ability to differentiate into cementoblast.
Mineralization assay demonstrated that Cbfa1 overexpressing cells differentiated to synthesize functional matrix, depose collagenous extracellular matrix accompanied by increasing the expression of OPN, Col I, OC and BSP. This is consistent with the evidence that OC, BSP, and OPN have affinity for the mineralization (Hunter et al., 1994). They control the nucleation, crystal growth and mineral maturation of the apatite crystals. Col I defines the framework for mineral deposition (George and Hao, 2005). We inferred that overexpression of Cbfa1 in DFCs might provide a microenvironment that favored calcium crystallization mainly by increasing the expression of cemetoblast-related genes.
At the same time, we also had constructed Cbfa1 enhanced plasmid by deletion of the terminal five amino acids (the VWRPY motif) —part of the repression domain. Results showed that the enhanced Cbfa1 seemed to have more transcription activity. The expression of OPN, Col I and mineralization nodules in DFCs transfected by enhanced Cbfa1were more than that in the DFCs transfected by the full length Cbfa1.Notably, their functions on the cementoblast-specific genes—CAP and CP23 seemed different. The full length Cbfa1 enhanced more CAP expression while the enhanced Cbfa1 seemed to have more effect on CP23. These might owe to the important VWRPY motif of Cbfa1. It is believed that the VWRPY motif may bind the corepressor proteins of TLE or Grg family (Mclarren, et al., 2001). The down-regulation of TLE/Grg expression is a potential mechanism for relief of Cbfa1 repression during cell differentiation (Javed, et al., 2000). In DFCs, overexpressing Cbfa1 could enhance its transcription ability by deletion of the VWRPY motif.
This investigation illustrated that overexpression of Cbfa1 in DFCs had increased the expression of cementoblast-related genes, which suggested that Cbfa1 might promote the differentiation of DFCs into cementoblasts. However, the real mechanisms how Cbfa1 regulating DFCs differentiation needs further studies in vivo.
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REFERENCES
Alvarez Pérez MA, Pitaru S, Alvarez Fregoso O, Reyes Gasga J, Arzate H (2003). Anti-cementoblastoma-derived protein antibody partially inhibits mineralization on a cementoblastic cell line. J Struct Biol 143:1–13.
Arzate H, Jiménez-García LF, Alvarez-Pérez MA, Landa A, Bar-Kana I, Pitaru S(2002). Immunolocalization of a human cementoblastoma conditioned medium-derived protein, J Dent Res 81:541–546.
Banerjee C, McCabe LR, Choi JY, Hiebert SW, Stein JL, Stein GS, et al. (1997). Runt homology domain proteins in osteoblast differentiation: AML3/CBFA1 is a major component of a bone-specific complex. J Cell Biochem 66: 1–8. Bronckers AL, Engelse MA, Cavender A, Gaikwad J, D'Souza RN (2001). Cell-specific patterns of Cbfa1 mRNA and protein expression in postnatal murine dental tissues. Mech Dev 101: 255–258.
D’Errico JA, Ouyang H, Berry JE, MacNeil RL, Strayhorn C, Imperiale MJ, et al. (1999). Immortalized cementoblasts and periodontal ligament cells in culture. Bone 25:39–47
D'Souza RN, Aberg T, Gaikwad J, Cavender A, Owen M, Karsenty G, et al. (1999). Cbfa1 is required for
epithelial–mesenchymal interactions regulating tooth development in mice. Development 126: 2911–2920.
Ducy P, Zhang R, Geoffroy V, Ridall AL, Karsenty G (1997).Osf2/Cbfa1: a transcriptional activator of osteoblast differentiation. Cell 89:747-754.
Ducy P, Starbuck M, Priemel M, Shen J, Pinero G, Geoffroy V, et al.（1999）. A Cbfa1-dependent genetic pathway controls bone formation beyond embryonic development. Genes Dev 13: 1025–1036.
George A, Hao J(2005). Role of phosphophoryn in dentin mineralization.Cells Tissues Organs 181:232-40
Grzesik WJ, Kuzentsov SA, Uzawa K, Mankani M, Robey PG, Yamauchi M (1998). Normal human cementum-derived cells: Isolation, clonal expansion, and in vitro and in vivo characterization. J Bone Miner Res 13:1547–1554. Harada H, Tagashira S, Fujiwara M, Ogawa S, Katsumata T, Yamaguchi A, et al.(1999). Cbfa1 isoforms exert functional differences in osteoblast differentiation. J Biol Chem 274:6972–6978.
Hitchin AD (1975). Cementum and other root abnormalities of permanent teeth in cleidocranial dysostosis. Br Dent J 139: 313–318.
Hou LT, Liu CM, Chen YJ, Wong MY, Chen KC, Chen J, et al. (1999). Characterization of dental follicle cells in developing mouse molar. Arch Oral Biol 44:759–770.
Hunter GK, Kyle CL, Goldberg HA(1994). Modulation of crystal formation by bone phosphoproteins: structural specificity of the osteopontin-mediated inhibition of hydroxyapatite formation. J Biochem 300: 723–728.
Javed A, Guo B, Hiebert S, Choi JY, Green J, Zhao SC, et al.(2000). Groucho/TLE/R-esp proteins associate with the nuclear matrix and repress RUNX (CBF (alpha)/AML/PEBP2 (alpha) dependent activation of tissue-specific gene transcription. J Cell Sci 113: 2221–2231.
Jensen BL, Kreiborg S(1990). Development of the dentition in cleidocranial dysplasia. J Oral Pathol Med 19: 89–93. Jikko A, Harris SE, Chen D, Mendrick DL, Damsky CH (1999). Collagen integrin receptors regulate early osteoblast differentiation induced by BMP-2. J Bone Miner Res 14:1075-1083.
Kwon YJ, Huang G, Anderson WF, Peng CA, Yu H (2003). Determination of infectious retrovirus concentration from colony-forming assay with quantitative analysis. J Virol 77:5712-5720.
Lee KS, Kim HJ, Li QL, Chi XZ, Ueta C, Komori T, et al.(2000). Runx2 is a common target of transforming growth factor beta-1 and bone morphogenetic protein 2, and cooperation between Runx2 and Smad5 induces
osteoblast-specific gene expression in the pluripotent mesenchymal precursor cell line C2C12. Mol Cell Bio
20:8783–8792.
Limon A, Briones J, Puig T, Carmona M, Fornas O, Cancelas AJ, et al. (1997). High-titre retroviral vectors containing the enhanced green fluorescent protein gene for efficient expression in hematopoietic cells. Blood 90: 3316-3321. McLarren KW, Theriault FM, Stifani S (2001). Association with the nuclear matrix and interaction with Groucho and RUNX proteins regulate the transcription repression activity of the basic helix loop helix factor Hes1. J Biol Chem 276: 1578–1584.
Mundlos S, Otto F, Mundlos C, Mulliken JB, Aylsworth AS, Albright S, et al.(1997). Mutations involving the transcription factor CBFA1 cause cleidocranial dysplasia. Cell 89: 773–779.
Pitaru S, Savion N, Hekmati H, Olsen S, Narayanan AS (1992). Binding of a cementum attachment protein to extracellular matrix components and to dental surfaces. J Periodont Res 27:640–646.
Prince M, Banerjee C, Javed A, Green J, Lian JB, Stein GS, et al. (2001). Expression and regulation of Runx2/Cbfa1 and osteoblast phenotypic markers during the growth and differentiation of human osteoblasts. J Cell Biochem
80:424–440.
Puchtler H and Meloan SN (1978). Demonstration of phosphates in calcium deposits: a modification of von Kossa’s reaction. Histochemistry 56:177–185.
Saito M, Iwase M, Maslan S, Nozaki N, Yamauchi M, Handa K, et al. (2001). Expression of cementum-derived attachment protein in bovine tooth germ during cementogenesis. Bone 29:242–248.
Wise GE, Lin F, Fan W (1992). Culture and characterization of dental follicle cells from rat molars. Cell Tissue Res 267:483-492.
Zou SJ, D'Souza RN, Ahlberg T, Bronckers AL(2003). Tooth eruption and cementum formation in the Runx2/Cbfa1 heterozygous mouse. Arch Oral Biol 48:673-677.
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Table. Specific Primers Used for Real-time RT-PCR
Gene Primer
sequence Tm(℃) Size(bp)Accession number
Cbfa1
5`- T A T G G A G T G C T G C T G G T C T G-3` 60.01
150 NM_009820
5`-T G A C T G G A A G A G C G G A G A G T-3` 60.14 Col I
5`-G T T C G G G C T G A T G T A C C A G T-3` 60.00 151 NM
_007742
5`-A A G C A G G A G G G C A A T A A G G T-3` 60.10 OC
5`- T A G G C G G T C T T C A A G C C A T A-3` 60.73 152
NM_00103229
8
5`- T C T G A T G A G A C C G T C A C T G C-3` 59.99
OPN
5`- A G G T C C T C A T C T G T G G C A T C-3` 60.08
170 AF515708
5`- G A A G C A G G T G C A G A A G G A A C-3`60.00
BSP
5`- A C T C A A C G G T G C T G C T T T T T -3` 59.92
154 NM_008318
5`-A A C C C A G A C A C A A G C A T T C C-3` 59.97
ALP
5`-G A G A G C G A A G G G T C A G T C A G -3`60.14
151 X13409
5`- C C T G G C T C A C C T T C T A C G A C -3` 59.87
CAP
5`- C C T C A A G C A A G G C A A A T G T C -3` 60.78
156 AY455942
5`- G G C G A T G C T C A A C C T C T A A C -3` 59.84 CP23
5`- G A T A C C C A C C T C T G C C T T G A -3` 60.07 158
NM_00104821
2
5`-C C C T G A A G T A C C C C A T T G A A-3` 59.78
β-actin
5`-C T T T T C A C G G T T G G C C T T A G--3` 59.74
158 NM_007393
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Figure 1.DFCs stably overexpressing Cbfa1. Cbfa1 recombinant retroviral plamids were constructed, restriction endonuclease analysis showed they were correct (A). DFCs were transfected by Cbfa1 retrovirus produced by PT67, and selected by G418. The stably transfected DFCs displayed no significant changes compared with the wild DFCs, green fluorescence could be observed under confocal microscope (B). The stably transfected DFCs were collected for Real-time PT-PCR and Western blot analysis. Real-time PT-PCR confirmed that the transfected cells overexpressing (5- to 10-fold) Cbfa1 gene (C) and Cbfa1 antibody positive results were seen only in recombinant retrovirus transduced
cells by Western blotting (D).(DFCs: dental follicle cells, Cbfa1: core binding factor a1)
Figure 2. Real-time PT-PCR analysis of various marker genes. Total RNA was isolated from DFCs and DFCs infected by retrovirus. Real-time PT-PCR was performed as materials & methods. Primers were used for ALP, OC, OPN, BSP, CAP, CP23 and Col I. Results were expressed as the ratio of the amount of tested mRNA normalized by β-actin mRNA.
(ALP:alkaline phosphatase, OC:osteocalcin, OPN: osteopontin, BSP:bone sialoprotein, Col I: type I collagen,
CAP:cementum-derived attachment protein, CP23 :cementum-derived protein)
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Figure 3.Effect of Cbfa1 on mineral nodule formation. DFCs were cultured in mineralizing media. von Kossa staining was performed to evaluate the mineral nodules formation on week 2, 3, 4. The nodule was microphotographed with
Olympus camera (A). Cbfa1 increased the mineralized nodule formation (B).
牙的发育异常模拟试题 一、A1 1、下列哪种是釉质形成缺陷症的遗传类型（） A、常染色体显形遗传 B、常染色体隐性遗传 C、X性连锁显形遗传 D、X性连锁隐性遗传 E、以上都是 2、氟牙症的病理变化是（） A、牙本质矿化不良 B、牙釉质矿化不良 C、牙本质表面矿化不足 D、牙釉质表面矿化不足 E、釉牙本质界弧形结构模糊 3、釉质形成不全主要是由于（） A、成牙骨质细胞出现了变化 B、成牙本质细胞出现了变化 C、成釉细胞出现了变化 D、缩余釉上皮出现了变化 E、釉小皮出现了变化 4、关于釉质发育不全的病理变化的描述中错误的是 A、釉梭数目增多 B、柱间质增宽 C、釉柱横纹及生长线明显 D、釉丛数目增多 E、釉板数目增多 二、B 1、A.釉质发育不全 B.氟牙症 C.四环素牙 D.牙本质发育不全症 E.牙骨质发育不全症 <1> 、在牙齿发育阶段，如果饮用水中氟含量高于百万分之一，或经其他途径摄入过多的氟，可导致釉质形成不全和钙化不全的是 A、 B、 C、 D、 E、 <2> 、在牙的发育阶段，由于局部和全身因素造成釉质结构异常的是 A、
C、 D、 E、 答案部分 一、A1 1、 【正确答案】E 【答案解析】釉质形成缺陷为遗传性的釉质发育异常。遗传类型包括常染色体显性遗传、常染色体隐性遗传、X染色相关型（X性连锁显性遗传、X性连锁隐性遗传）。 【该题针对“第七单元单元测试”知识点进行考核】 【答疑编号100055160】 2、 【正确答案】B 【答案解析】首先应该明确的是，氟牙症是指牙齿发育期间经常饮用含氟量较高的水或食物所致的一种特殊的釉质发育不全。是牙釉质上的病变。此题选项C是不能选择的。如果是题目之间有疑问，请将原题干给出，以便针对试题给出解析。光镜观察：由于氟结合钙，形成钙氟磷灰石以取代羟磷灰石，高氟中毒后成釉细胞受到损害，形成有缺陷的釉基质。釉质矿化不良，尤其是在釉柱之间及有机物较多的薄弱处。但釉质表层过度矿化，釉柱方向不规则，釉牙本质界的弧形结构较正常牙更加明显。表层钙化良好，其深方的表层下区存在弥漫性的矿化不良。氟中毒受害者的柱间区发育不全，或完全消失。严重的氟牙症，除釉柱间区消失外，釉柱表面粗糙，且有凹陷缺损及棕色色素沉着。 【该题针对“第七章单元测试,第七单元单元测试,氟牙症的病理变化是”知识点进行考核】 【答疑编号100055159】 3、 【正确答案】C 【答案解析】任何作用于牙发育过程中的局部或全身性不良因素都可导致牙釉质结构的异常发育，因此形成牙结构异常的原因是多方面的，主要有： 局部因素：感染、创伤、放射治疗以及一些特发性疾病都可影响正在发育的牙胚，尤其成釉细胞的结构和功能。 全身因素：包括全身因素或系统性疾病及遗传性因素两方面。前者，无论先天性因素（如病毒感染、母亲疾病等）、新生儿异常（如低钙血症、新生儿溶血、早产等），或出生后一些急、慢性疾病、氟离子的影响等；后者，包括一些导致局部牙发育异常或伴有全身异常的基因突变、染色体易位等，这些都可成为导致牙釉质结构发育异常的致病因素。 当然，成釉细胞损伤的时间与釉质缺损的表现和位置密切相关，损伤的原因并不重要，因为不同的位置和各种刺激都可导致相似的临床表现。 【该题针对“第七单元单元测试”知识点进行考核】 【答疑编号100055157】
2012年医考真题（一单元）题目及部分答案（答 案仅供参考） 1.维持蛋白质二级结构稳定的主要化学键是 C A．盐碱B 肽键C 氢键D 疏水键E 二硫键 2.下列有关酶原及原激活的叙述，错误的是 D A 酶原是酶的前体B酶原没有催化活性 C 酶原具备必须基团 D 酶原的活性中心没有形成 E酶原激活是一个非催化过程 3 运输内源性胆固醇至肝外组织的脂蛋白是 B A CM B HDL C IDL D LDL E VLDL 4 含稀有碱基最多的核酸分子是 A DNA B DNA C RNA D TRNA E MRNA 5 遗传密码的特异性是指 D A所有生物可试用同一套密码子B一个密码子可代表多个氨基酸 C 几种密码子可代表同一氨基酸 D 甲硫氨酸密码可作为起始密码子 E 密码子与反密码子之间不严格配对 6.应用毛果芸香碱使分泌明显增加的腺体是 C A 乳腺 B 甲状腺 C 肾上腺 D 唾液腺 E 支气管腺体 7.普鲁卡因的临床应用不包括 A A表面麻醉B 浸润麻醉C 传到麻醉D 蛛网膜下腔麻醉E 硬膜外麻醉 8.治疗焦虑症宜选用的药物是 A A地西泮B氯丙嗪C 哌替啶D 布洛芬E 苯巴比妥 9属于血管紧张素转化酶抑制 D A普萘洛尔B C 硝苯地平D 卡托普利E 维拉帕米 10.试用糖皮质激素治疗的主要休克是 A A 感染性休克 B 心源性休克 C 肺源性休克 D 神经源性休克 E 低血容量性休克 11治疗沟螺旋体感染的首选药物是 D A氟霉素B红霉素C 甲硝锉D 青霉素G E 庆大霉素 12.下颌切牙与上颌切牙的区别中，不正确的是 C A下颌切牙牙冠窄小，唇面光滑B下颌切牙牙根窄而扁 C下颌切牙的切脊在牙体长轴唇侧D 下颌切牙舌侧无明显边缘嵴，舌窝较浅 E 下颌切牙可能有唇舌二根管 13.根管最狭窄处距根尖孔 C A 0mm-0.1mm B0.2mm-0.4mm C 0.5mm-1.0mm D1.1mm-1.5mm E1.6mm-2.0mm 14.不属于牙尖交错和的特点的是 D A 可称为正中和B颌面接触面积最广泛C 合力分散，避免D 全部为一个牙与 E有正常的复合覆盖关系 15.牙体长轴近远中向较直立的是 B A第一前磨牙B第二前磨牙C 第一磨牙D 第二磨牙E 第三磨牙
牙体牙髓病试题一,单选题(每题 2 分,共 50 分) 1.下列哪项不是急性龋的特点 A,多见于儿童及青年人 B,病变组织颜色浅 C,病变进展快 D,质地软而湿 E,去腐时必须用钻取出 2.龋病导致的牙体硬组织缺损,可由以下那种方法治疗 A,药物治疗 B,自行修复 C,充填治疗 D,再矿化疗法 E,以上方法均可以 3.下列龋病类型哪种是按损害程度分类的 A,急性龋 B,慢性龋 C,中龋 D,静止龋 E,窝沟龋 4.静止龋主要是在下列何种情况下产生的 A,机体抵抗力增加 B,牙齿再矿化能力增加 C,牙面产生龋的环境消失 D,口内致龋病菌减少 E,牙齿的抗酸力增加 5.恒牙龋病的最好发部位是 A,磨牙合面窝沟 B,后牙邻面 C,后牙颈部 D,后牙颊面 E,前牙邻面 6.恒牙龋病的最好发牙位为 A,下颌第一,二磨牙 B,上颌第一,二磨牙 C,前磨牙 D,上前牙 E,以上牙位依次好发 7.下列各项中,哪一项不是深龋的临床表现
A,冷热刺激痛 B,食酸甜食物敏感 C,自发痛 D,食物嵌塞痛 E,牙髓活力测试正常 8.深龋备洞时,下列哪项措施是错误的 A,洞底平,侧壁平直,两者相垂直 B,去尽腐质 C,保护牙髓 D,洞缘线圆钝 E,尽量保留健康牙体组织 9.复合树脂充填时,不宜用氧化锌丁香油糊剂垫底是因为 A,可致树脂性质改变 B,影响树脂聚合 C,影响树脂与牙粘接 D,抗压强度不足 E,使树脂色泽改变 10.下列哪个时期生活在高氟区,可造成氟牙症发生 A,0～7 岁 B,8～15 岁 C,16～22 岁 D,23～30 岁 E,31 岁以后 11.为防止四环素牙的发生,哪些人不宜使用四环素类药物 A,妊娠期和哺乳期妇女 B,3 岁以下小儿 C,妊娠期,哺乳期妇女和 8 岁以下儿童 D,8 岁以上儿童 E,所有人 12.牙隐裂检查时最有帮助的检查是A,视诊 B,探诊 C,X 线 D,涂碘染色 E,温度测验 13.Black 窝洞分类的是根据 A.窝洞所在的部位 B.牙的解剖形态 C.龋洞发生的部位 D.不同牙位功能 E.充填材料性质 14.患者 18 岁,右下大牙不适就诊.查:右下第二前磨牙颊侧根部瘘管,合面 ,X 中央尖出现圆形黑环,叩诊(+) 线片示其根尖孔未形成,根尖暗影.牙髓感染途径为 A,深龋 B,畸形中央尖 C,血源性感染 D,逆行性感染 E,创伤 15.患者,女,右侧后牙咀嚼酸痛 3 个月余.查:右下第一磨牙合面近中釉质磨 .该牙最佳治疗损明显,探酸,叩诊(-) A,调合 B,牙髓治疗 C,全冠修复 D,脱敏治疗 E,充填治疗 16.引起牙髓病的病因的主要因素为A,细菌感染 B,物理因素 C,化学因素D,免疫因素 E,特种因素 17.引起牙髓感染的主要途径为 A,暴露的牙本质小管 B,牙髓暴露 C,牙周袋途径 D,血源感染 E,以上都是 18.温度刺激出现疼痛,但刺激去除后疼痛即可消失,可能为 A,牙髓正常 B,牙髓坏死 C,可复性牙髓炎 D,牙髓钙化 E,慢性牙髓炎 19.若诊断为逆行性牙髓炎,检查最重要的是 A,牙龈出血 B,龈下牙石 C,牙周溢脓 D,深牙周袋 E,深的龋洞
考试试题总汇 口腔组织病理学 多形性腺瘤在小涎腺多见于 A．唇部 B．颊部 C．舌部 D．腭部 E．牙龈 正确答案：D 牙源性角化囊肿衬里上皮的组织来源可能是A．结合上皮 B．缩余釉上皮 C．上皮根鞘剩余 D．牙板上皮剩余 E．牙乳头 正确答案：D 牙源性角化囊肿的发生多为 A．上颌单发 B．下颌单发
C．上颌多发 D．下颌多发 E．上下颌无差异 正确答案：B 釉质中的有机物和水占其总重量的 A．1％ B．2％ C．3％～4％ D．5％ E．6％～10％ 正确答案：C 按世界卫生组织对口腔鳞癌的分级方法，角化珠多见、多形性较轻者应为A．I级鳞癌 B．Ⅱ级鳞癌 C．Ⅲ级鳞癌 D．Ⅳ级鳞癌 E．Ⅴ级鳞癌 正确答案：A 含牙囊肿有以下病理改变，除了 A．囊壁较薄
B．衬里上皮为角化的复层鳞状上皮 C．上皮只有2～3层扁平或矮立方形细胞组成D．无明显上皮钉突 E．囊壁中偶尔可见牙源性上皮岛 正确答案：B 腺样囊性癌的细胞成分主要为 A．腺上皮细胞和肌上皮细胞 B．鳞状细胞和肌上皮细胞 C．肌上皮细胞和纤维细胞 D．粘液细胞和导管内衬上皮细胞 E．粘液细胞和软骨样细胞 正确答案：A 粘液表皮样癌的细胞组成是 A．表皮样细胞、腺上皮和粘液细胞 B．表皮样细胞、软骨样细胞和中间细胞C．腺上皮细胞、粘液细胞和中间细胞 D．表皮样细胞、粘液细胞和中间细胞 E．粘液细胞、软骨样细胞和中间细胞 正确答案：D 上皮异常增生可表现下列变化，除了
A．上皮基底细胞极性消失 B．基底细胞液化变性 C．上皮钉突呈滴状 D．有丝分裂相增加 E．细胞核浓染 正确答案：B 釉柱的直径平均为 A．4～6μm B．2～3μm C．7～9μm D．0．5～1μm E．10～12μm 正确答案：A 关于牙骨质，以下哪项是错误的 A．与密质骨相似 B．牙骨质细胞有许多细长的胞浆突起C．细胞性牙骨质和无细胞牙骨质可交替排列D．细胞性牙骨质常位于近牙颈部 E．牙骨质呈板层状 正确答案：D
牙体病学题库（选择填空题） 单项选择题 1．影响龋病发生的因素有： A 细菌 B 易感牙面 C 食物 D 一定的时间 E 以上因素都有 2．浅龋的最常使用的常规诊断方法是( ) A X线片检查B探诊C显微放射摄影法D氩离子激光照射E冷热诊 3. 隐裂发生最多的牙齿是( ) A 前磨牙B第一磨牙C上颌第一磨牙D上颌第二磨牙E下颌第二磨牙4．X线检查一般不使用于( ) A He面龋B深龋C牙折D慢性根尖周炎E牙髓疼痛5．最适宜作直接盖髓剂的药物是( ) A EOE B氢氧化钙糊剂 C 抗菌素糊剂 D抗菌素加激素糊剂 E 1-2%聚甲醛 6．额外牙最多发生的部位是( ) A 下颌两中切牙之间B上颌两中切牙中间C上颌两双尖牙之间 D 上颌第二磨牙远中侧E下颌第三磨牙远中侧 7. 恒牙列中患龋的频率最高的是（） A下颌第一前磨牙B下颌第二前磨牙C上颌第一前磨牙 D上颌第二前磨牙E以上都不是 8. 临床记录中，舌面为（） A Ｌa B L C M D D E O 9.目前认为菌斑中最主要的致龋菌是（）
A乳酸杆菌B血链球菌C大肠杆菌D葡萄球菌E变形链球菌10.釉珠附着在（） A根尖牙骨质表面 B 髓腔内壁C近颈部牙骨质表面 D 根管内壁E牙冠表面 11. 畸形中央尖最好发于（） A下颌第一磨牙B下颌第二磨牙C下颌第三磨牙 D下颌第二前磨牙E下颌第一前磨牙 12. 制备倒凹是为了（） A 获得良好的抗力形 B 便于垫底 C 便于充填 D 获得良好的固位形 E 便于放置盖髓剂、 13. 龋损的好发牙面居首位的是（） A 咬合面 B 近中邻面 C 前牙唇面 D 远中邻面 E 颊面 14. 临床上Ⅵ类洞指的是（） A 所有牙面发育点裂隙沟的龋损所备成的窝洞 B发生于后牙邻面的龋损所备成的窝洞 C前牙邻面未累及切角的龋损所备成的窝洞 D发生在前牙切脊和后牙牙尖等自洁区的龋损所备成的窝洞 E以上均是 15.下列各项中哪项不是深龋的临床表现( ) A 冷热刺激痛 B 食酸甜食物敏感 C 自发痛 D 食物嵌塞痛 E 牙髓活力测定正常 16. 诊断邻面龋最准确的方法是( )
0釉质细胞外基质蛋白与釉质的发育有关,主要有：釉原蛋白、非釉原蛋白、蛋白酶三类。 1基底层细胞及靠近基底层的棘细胞被称为上皮的生发层。 2上皮细胞之间的连接形式:桥粒,缝隙连接,紧密连接。 3基底膜由透明板,致密板,网板(锚纤维) 组成。 4硬腭分：牙龈区、中间区、脂肪区、腺区 5涎腺组织实质由腺上皮细胞形成分泌单位与导管；间质由纤维结缔组织形成的被膜、叶间或小叶间隔组成。 6外分泌腺作用：润湿粘膜，溶解食物，促进消化。 7牙周组织包括：牙骨质，牙周膜，牙槽骨，牙龈。 8牙龈可分游离龈，附着龈和牙间乳头，组织结构两层：上皮层（牙龈上皮，龈沟上皮，结合上皮）和固有层（龈牙组，牙槽龈组，环形组，牙骨膜组，越隔组5组胶原纤维）。 9龈沟正常深度约0.5-3mm,平均1.8mm(>3mm牙周袋) 10牙周膜主纤维束分：牙槽脊组，水平组，斜行组，根尖组，根间组5组 11牙周膜中的细胞组成有:成纤维细胞，成牙骨质细胞，上皮剩余（Malassez上皮剩余），成骨细胞，破骨细胞，未分化间充质细胞 12牙槽骨分：固有牙槽骨（筛状板/硬骨板/骨束），密质骨，松质骨（骨小梁和骨髓）。 13 新生线多见于乳牙和第一恒磨牙，为加重的生长线。 14 牙本质由牙本质小管，成牙本质细胞突起，细胞间质组成。 15 牙的发育过程包括牙胚的发生，组织形成，萌出。 16 每根釉柱有四个成釉细胞（来源于内釉上皮层）参与形成，一个形成头部，三个相 邻cell形成颈部和尾部。 17 颈环处内外釉上皮桶状增生形成上皮根鞘，上皮根鞘根向增长，向牙髓方向弯曲约 45度角，形成一盘状结构，称上皮隔（多根牙的形成由其发育决定）。 2.釉面横纹( Perikymata) 位置:指唇侧及二侧缘釉质表面 形态:平行排列的与牙长轴垂直的浅凹线纹.间隔为30-100μm宽，在牙颈部尤为明显 本质:牙齿节律性发育的现象,是釉质生长线达到釉质表面的表现. 3. 釉质的基本结构——釉柱(enamel rod) 釉柱是细长的柱状结构，直径平均为4-6μm ，起自釉质牙本质界，贯穿釉质全层 ?LM: 横断:鱼鳞状;纵断:细长柱状,其上可见釉柱横纹. ?EM:纵断:柱状,可见间断性收缩.;横断:球拍状; 分头部、尾部 ?釉柱鞘：由于晶体排列在头部与相邻尾部之间存在间隙，为柱间隙，EM下构成了头部弧形边界。 4.釉丛 位置:起自釉牙本质界,伸向釉质 形状:草丛状,占釉质高度的1/4-1/3. 性质:钙化不良而蛋白含量较多的釉柱在不同平面及不同方向重叠投射形成的, 形成于成牙本质细胞突起形成和釉质开始沉积阶段，可能与釉质牙本质粘着有关。 5.釉梭
口腔组织病理学牙源性肿瘤练习题 一、A1 1、下列有关骨化纤维瘤的特点中不正确的是 A、女性较为多见 B、主要发生于10～39岁 C、不同组织学亚型的发病年龄有差异 D、边界不清 E、随着肿瘤增大可引起牙移位 2、边界清楚、由富于细胞的纤维组织和表现多样的矿化组织构成的病变，且有JTOF和JPOF两种组织学病变的疾病为 A、牙源性钙化上皮瘤 B、牙源性角化囊性瘤 C、骨化纤维瘤 D、成釉细胞瘤 E、牙瘤 3、早期无症状，随着肿瘤增大，可由于颌骨膨隆引起牙移位、关系紊乱和颌面部变形。X线表现为境界清楚的、单房性密度减低区，由于伴有硬组织形成，在病变的中央区域常见不透光区，此为以下哪种疾病的临床表现 A、骨化纤维瘤 B、成牙骨质细胞瘤 C、牙源性纤维瘤 D、舌下囊肿 E、皮样囊肿 4、肿瘤由结缔组织构成，钙化结构很多样，骨小梁可相互连接成网；常见无细胞的嗜碱性类牙骨质沉积物，此为以下哪种疾病的病理表现 A、舌下囊肿 B、成牙骨质细胞瘤 C、牙源性纤维瘤 D、骨化纤维瘤 E、皮样囊肿 5、以下哪项属于恶性牙源性肿瘤 A、成釉细胞瘤 B、牙源性角化囊性瘤 C、多形性腺瘤 D、腺样囊性癌 E、成釉细胞癌
6、关于成釉细胞癌-原发型的说法不正确的是 A、是一种少见的原发性牙源性恶性肿瘤 B、肿瘤具有成釉细胞瘤的某些组织学特征 C、无浸润性，包膜完整 D、细胞异型性和核分裂增加 E、表现明显分化不良 7、以下哪项不是成釉细胞癌-原发型的组织学特点 A、核分裂 B、细胞多形性 C、无神经症状 D、局部坏死 E、神经周浸润及核深染 8、由先存的良性成釉细胞瘤发展而来的成釉细胞癌是 A、成釉细胞癌-原发型 B、成釉细胞癌-继发型（去分化） C、成釉细胞瘤-滤泡型 D、成釉细胞瘤-丛状型 E、成釉细胞瘤-棘皮瘤型 9、具有良性组织学表现、但发生了转移的成釉细胞瘤称为 A、恶性成釉细胞瘤 B、成釉细胞瘤-滤泡型 C、成釉细胞瘤-颗粒细胞型 D、成釉细胞瘤-基底细胞型 E、角化成釉细胞瘤 10、其“恶性”主要表现在临床行为，而不在组织学特点的恶性上皮性牙源肿瘤是 A、成釉细胞癌-原发型 B、成釉细胞癌-继发型 C、成釉细胞癌-去分化型 D、牙源性角化囊性瘤 E、转移性（恶性）成釉细胞瘤 11、被称为黏液瘤或黏液纤维瘤的是以下哪项 A、成釉细胞纤维瘤 B、圆柱瘤 C、沃辛瘤 D、牙瘤 E、牙源性黏液瘤 12、牙源性黏液瘤的好发部位
19级口腔组织病理学（专升本）复习资料 一、单选题 A型题（只有一个正确） 1、釉质结构的临床意义不正确者为：（） A 劈裂釉质时，应和釉柱走行一致 B 矫正牙齿，带环粘固前应酸蚀釉质 C 氟可使釉质晶体更稳定，防龋 D 制备洞型时，应保留失去牙本质支持的悬空釉柱 E 乳牙进行酸蚀处理时，应适当延长酸蚀时间 2、关于修复性牙本质的结构特点，错误的是：（） A．牙本质小管明显弯曲B．牙本质小管数目较少C．牙本质小管钙化程度高 D．可形成骨样牙本质E．仅沉积在受刺激牙本质小管的髓腔侧 3、由神经嵴细胞形成的硬组织，不包括（） A．釉质B．牙本质C．牙骨质D．颌骨E．面部软骨 4、生理情况下，牙齿发育完成以后形成的牙本质是：（） A．原发性牙本质B．继发性牙本质C．修复性牙本质D．球间牙本质E．透明牙本质5、腭裂是（） A．两侧侧腭突未联合或部分联合 B．两侧侧腭突未融合或部分联合 C．一侧侧腭突和对侧侧腭突及鼻中隔未联合或部分联合 D．一侧侧腭突和对侧侧腭突及鼻中隔未融合或部分融合 E．一侧侧腭突与鼻中隔未联合或部分联合 6、骨吸收陷窝常见的细胞为：（） A，骨细胞B．成骨细胞C．破骨细胞D．巨噬细胞E．嗜中性白细胞 7、MALASSEZ氏上皮剩余是（） A．牙板的残留部分B．缩余釉上皮的残留部分C．上皮根鞘的残留部分 D．成釉器的星网层和中间层细胞演变而成E．口腔上皮伸入的部分 8、牙源性角化囊肿典型的病理改变，错误的为（） A．囊壁上皮角化B．棘层细胞内水肿 C．可含产黏液细胞D．基底细胞核呈栅栏样排列 E．衬里上皮呈波状或皱褶状 9、牙周膜中不含（） A．成纤维细胞B．牙骨质细胞C．上皮剩余D．破骨细胞E．成骨细胞 10、成釉细胞来自于（） A.内釉上皮 B.外釉上皮C．釉小皮D．缩余釉上皮E．星网状层 11、不是根尖肉芽肿内上皮团及上皮条索来源的是（） A．牙周袋袋壁上皮B．经瘘道长入的上皮C．Malassez上皮剩余 D．呼吸道上皮E．牙板上皮剩余 12、舌背粘膜的组织学特点，错误的是（） A．有许多乳头B．含有味蕾C．无粘膜下层
一、龋病 一、A1 1、引起龋病的前三位糖类是 A、蔗糖、葡萄糖、麦芽糖 B、葡萄糖、蔗糖、乳糖 C、乳糖、麦芽糖、果糖 D、麦芽糖、乳糖、果糖 E、果糖、山梨糖、木糖醇 2、在口腔中被视为细菌微生态环境的是 A、软垢 B、唾液 C、龈沟液 D、牙菌斑 E、釉质表面的获得性膜 3、菌斑与龋病的发生以下哪种说法较正确 A、有牙菌斑者就一定患龋 B、牙菌斑与患龋率无关 C、牙菌斑多，患龋率高 D、牙菌斑多，患龋率低 E、牙菌斑少，患龋率高 4、唾液具有缓冲功能的最重要的物质是 A、重碳酸盐 B、磷酸盐 C、氯化物 D、钠离子 E、钾离子 5、目前预防龋病效果最好的糖的代用品是 A、糖精 B、山梨醇 C、木糖醇 D、甘露醇 E、蛋白糖 6、菌斑的获得性膜结构的功能不包括 A、修复或保护釉质表面 B、影响微生物对牙面的附着 C、为菌斑微生物提供营养 D、为釉质提供有选择的渗透性 E、利于抗生素发挥作用 7、菌斑的组成成分最多的是
A、无机物 B、糖类 C、蛋白质 D、脂肪 E、水 8、变形链球菌致龋过程中所涉及的最重要的物质是 A、葡糖基转移酶 B、葡萄糖 C、果糖 D、蛋白质 E、蔗糖 9、菌斑中碳水化合物的主要成分是 A、葡萄糖 B、半乳糖 C、岩藻糖 D、核糖 E、阿拉伯糖 10、患者因上前牙有洞要求治疗，无自发痛。査上颌两切牙近中邻面龋，探敏，冷测一过性疼痛，去除刺激可缓解，热测同对照牙。诊断为深龋，该牙当日的最佳处理为 A、氧化锌丁香油糊剂安抚 B、氢氧化钙光敏树脂充填 C、光敏树脂充填 D、玻璃离子水门汀充填 E、牙髓治疗 11、牙本质龋充填时，对牙髓刺激最大的材料是 A、水门汀类 B、氧化锌丁香油糊剂 C、银汞合金 D、复合树脂 E、玻璃离子 12、下列哪一项不是银汞合金的特点 A、对牙髓有刺激 B、硬度大 C、耐磨性强 D、可塑性大，操作方便 E、抗压强度大 13、用银汞合金充填中龋或深龋，需要垫底，是因为银汞合金具有 A、膨胀性 B、流动性
口腔组织病理学牙的发育练习题 一、A1 1、残余的牙板上皮可成为牙源性上皮性肿瘤或囊肿的来源，也可能被重新激活形成 A、马牙 B、上皮珠 C、上皮根鞘 D、多生牙 E、异形牙 2、缩余釉上皮形成于 A、釉质形成时期 B、牙本质形成时期 C、牙根形成时期 D、釉质发育完成后 E、牙齿萌出时 3、牙髓细胞的来源为 A、成牙本质细胞 B、成釉细胞 C、牙囊 D、牙乳头的未分化间充质细胞 E、成牙骨质细胞 4、缩余釉上皮的形成与下列的哪种细胞无关 A、内釉上皮 B、外釉上皮 C、成釉细胞 D、中间层 E、成牙本质细胞 5、在牙齿萌出过程中，牙齿进入口腔之前，牙冠表面覆盖的结构是 A、马拉瑟上皮剩余 B、牙龈上皮 C、Serre上皮剩余 D、缩余釉上皮 E、釉小皮 6、根部牙本质的形成取决于 A、成釉器 B、牙乳头 C、牙囊
E、上皮隔 7、牙根形成的多少取决于 A、成釉器 B、牙乳头 C、牙囊 D、上皮根鞘 E、上皮隔 8、当牙冠发育完成时，牙根处的内釉上皮和外釉上皮在颈环处增生，这些增生的双层细胞称为 A、Malassez上皮剩余 B、Serre上皮剩余 C、上皮隔 D、上皮根鞘 E、结合上皮 9、在牙根形成过程中，上皮根鞘、牙乳头、牙囊由外向内的关系依次为 A、上皮根鞘、牙乳头、牙囊 B、牙囊、牙乳头、上皮根鞘 C、牙乳头、上皮根鞘、牙囊 D、牙囊，上皮根鞘、牙乳头 E、上皮根鞘、牙囊、牙乳头 10、上皮隔的形成是上皮根鞘向根尖孔处生长弯曲多少角度形成 A、90° B、60° C、50° D、45° E、30° 11、根尖孔的形成与下列哪项有关 A、上皮根鞘 B、成釉器 C、牙囊 D、牙乳头 E、上皮隔 12、单根牙的形成中，下列哪项组织能够诱导牙髓细胞形成成牙本质细胞 A、上皮隔 B、上皮根鞘 C、牙囊 D、牙乳头
牙体牙髓龋病相关名词解释整理 1． Dental caries：dental decay龋病。是在以细菌为主的多种因素影响下，牙体硬组织发生的慢性进行性破坏的一种疾病。 2． Precalence rate：患病率即指患龋率。表示病程长的龋病存在或流行的频率，是在调查点或检查时点，一定人群中患龋情况。 3． Incidence rate：发病率。表示在某一特定观察期间内，可能发生龋病的特定人群新发病的频率。 4． DMF：decayed-mising-filled，龋失补指数。龋齿数、因龋失牙数、因龋补牙数的总和。是一种不可逆指数，能反应一个人终身龋病的经历。分为DMFS，DMFT。DMFT受检人群中每个个体罹患龋齿的牙数，DMFS相对DMFT更能反映龋病流行的严重程度。儿童乳牙龋病记录用dmf。 5． Oral ecosystem：口腔生态系。口腔内正常菌群之间，正常菌群与宿主之间相互依存、相互作用所构成的生态系。分为颊粘膜上皮生态系、舌背部生态系、龈上菌斑生态系、龈下菌斑生态系。 6． Dental plaque：牙菌斑。堆积在牙表面或其他硬的口腔结构上，不能被中度水喷冲去的细菌团块。其结包括：菌斑-牙界面、中间层、菌斑表层；可分为龈上菌斑和龈下菌斑。可导致龋病或牙周病。 7． Biofilm：生物膜。微生物群落与细胞外基质相互连接而在介质表面行成的生态环境。是有通道和空隙的开放性立体结构。
8． Acquired pellicle：获得性膜。唾液蛋白或糖蛋白吸附至牙面所形成的生物膜。也可位于各种修复材料以及义齿表面。 9． Oral normal flora：口腔正常菌丛。寄生在健康人体各特殊部位或表面的生物群别称为正常菌丛或固有菌丛。口腔菌丛是人体各菌丛中最复杂的一种。 10. biomineralization：生物矿化。是指生物体内钙磷等无机离子在多种生物因子调控下通过化学反应产生难溶性盐，并与有机基质结合，形成机体矿化组织。分为生理性和病理性。 11. 仿生矿化：体外模拟体内环境，利用生物矿化机制的矿化。 12. 钙三角理论：是氟抗龋的最核心机制。氟磷灰石晶体中，氟离子与三个钙离子组成的三角形在同一个平面上，其负电荷与钙离子形成强烈静电引力，从而增加晶体结构稳定性，降低釉质溶解度，增加釉质对有机酸的抵抗力。 13. 四联因素学说：龋病是一种多因素疾病，宿主、微生物、和饮食以及时间相互作用导致龋病发生，也就是说，龋病发生要求有敏感的宿主、口腔致龋菌群的作用以及适宜的底物，且这些底物必须在口腔滞留足够时间。 14. Miller化学细菌学说：龋病是由两个阶段组成的化学细菌过程，先是细菌发酵产生的酸使组织脱矿、软化，然后细菌分泌的蛋白溶解酶使软化残存物溶解。釉质中缺乏第二阶段。 15．Glucosyltransferases，GTF：葡糖基转移酶。是变异链球菌的一种胞外葡聚糖合成酶，也是致龋菌主要的抗原物质之一。主要作用是介导细菌间的凝集和粘附于
一、A1型题：每一道考试题下面有A、B、C、D、E五个备选答案。请从中选择一个最佳答案，并在答题卡上将相应题号的相应字母所属的方框涂黑。 1．上皮性根尖肉芽肿转化成根尖囊肿的途径不包括 A．增生的纤维组织包绕脓肿而形成 B．增生的上皮中心部分因营养障碍，液化变性而形成 C．增生的上皮被覆脓腔，当炎症减轻后形成 D．增生的上皮包裹肉芽组织，发生退变坏死后形成 E．B+C+D 正确答案:A 2．朗格汉斯细胞电镜下称为明细胞是因为 A．电镜下朗格汉斯细胞胞浆电子密度较高 B．电镜下朗格汉斯细胞胞浆电子密度较低 C．电镜下朗格汉斯细胞胞浆中朗格罕颗粒少 D．电镜下朗格汉斯细胞胞浆中朗格罕颗粒多 E．电镜下朗格汉斯细胞胞浆中各种细胞器均被破坏 正确答案:B 3．下列哪一项不属于一般型成釉细胞瘤的分类 A．周边型 B．滤泡型 C．丛状型 D．颗粒细胞型 E．棘皮瘤型 正确答案:A 4．下列哪项不是疣状癌与鳞状细胞癌的区别点 A．细胞轻度异形 B．生长方式为局部推进 C．生长缓慢 D．转移发生在后期 E．部分肿瘤可不发生转移 正确答案:A 5．球状上颌囊肿诊断条件不包括 A．囊肿位于上颌恒侧切牙和尖牙之间 B．邻近牙齿为活髓牙 C．呈边界清楚的倒置的梨形放射透光区 D．有时可见含有未萌出牙的牙冠 E．组织学上可能是牙源性囊肿 正确答案:D 6．牙周膜最薄处位于
A．牙根颈1／3 B．牙根中l／3 C．牙根尖1／3 D．根尖处 E．以上均错 正确答案:B 7．关于牙周炎描述哪项是错误的 A．是一种由细菌微生物引起的牙周组织炎症性破坏性疾病 B．临床特征是：牙龈出血、牙齿松动、牙周溢脓 C．主要病理改变是：结合上皮破坏向根方移位，牙周袋形成，牙槽骨吸收D．所有牙周炎的发展均为一种持续性缓慢过程 E．晚期牙齿松动、脱落 正确答案:D 8．牙槽骨吸收处的Howship陷窝内的细胞是 A．成纤维细胞 B．成牙骨质细胞 C．成骨细胞 D．破骨细胞 E．未分化间充质细胞 正确答案:D 9．决定牙周炎进展和结局的主要因素是 A．细菌微生物 B．食物因素 C．宿主因素 D．时间因素 E．环境因素 正确答案:C 10．关于骨纤维异常增生症描述哪项是错误的 A．病变内有囊腔形成 B．病变包膜完整 C．病变内有大量成纤维细胞 D．病变内有大量纤维组织 E．病变内有新骨形成 正确答案:B 11．根据半多能双储备细胞理论，多形性腺瘤来源于 A．腺上皮细胞 B．肌上皮细胞 C．闰管细胞 D．闰管储备细胞
牙体牙髓病学一、龋病 一、A1 1、以下有关磷酸锌粘固剂的论述中，不恰当的是 A、对牙髓有一定的刺激 B、可作为垫底材料 C、可用于粘固嵌体、桥、冠 D、深龋洞可直接用磷酸锌粘固粉垫底 E、粉末中的主要成分是氧化锌 2、以下有关氧化锌粘固剂的论述中，不恰当的是 A、比较软，有一定的安抚作用 B、可作暂封材料 C、对牙髓的刺激性极小 D、树脂类材料充填可用氧化锌粘固剂作为垫底材料 E、有镇痛的作用 3、以下有关聚羧酸锌粘固剂的论述中，不恰当的是 A、对釉质和牙本质都有较大的黏着力
B、能刺激修复性牙本质的形成 C、可作为垫底材料 D、聚羧酸锌粘固剂在唾液中的溶解度大于磷酸锌粘固剂 E、对牙髓的刺激性较小 4、以下有关氢氧化钙制剂的论述中，不恰当的是 A、对牙髓的刺激性小 B、可促进修复性牙本质的生成 C、有一定的抗菌、抗炎性能 D、溶解度是垫底材料中最大者 E、有良好的隔垫性，能隔绝电的传导 5、能够影响银汞合金性能的因素是 A、汞与合金粉的比例 B、水分是否进入银汞合金 C、充填压力的大小 D、研磨时间的长短 E、以上说法均正确 6、以下有关复合树脂的论述中，不恰当的是
A、无机填料是决定复合树脂物理性能和临床应用的关键成分 B、树脂基质是复合树脂的主要聚合成分 C、最常用的树脂基质是丙烯酸酯类 D、临床上每层充填和固化的材料厚度不超过2mm E、化学固化复合树脂为目前主流的复合树脂 7、以下有关玻璃离子体的论述中，正确的是 A、又称玻璃离子粘固剂 B、又称玻璃离子水门汀 C、玻璃离子体可释放氟离子 D、光固化型玻璃离子体具有化学固化和光固化双重固化机制 E、以上说法均正确 8、含有氟并具有一定防龋作用的材料是 A、聚羧酸锌黏固粉 B、复合树脂 C、玻璃离子黏固粉 D、磷酸锌黏固粉 E、氧化锌丁香油黏固粉
1．Resistance form 抗力形：是使修复体和余留牙结构构成足够抗力，在承受咬合力时，不折裂的形状。 2.Secondary caries 继发龋，龋病治疗后由于充填物边缘或窝洞周围的牙体组织破裂形成菌斑滞留区或修复材料与牙体组织不密合，留有小的缝隙，这些都可能成为致病条件产生龋病，称为继发龋。 3.Retrograde pulpitis 逆行性牙髓炎，袋内的细菌及毒素通过根尖孔或侧副根管逆行进入牙髓，引起根部牙髓的慢性炎症，也可由局限的慢性牙髓炎急性发作。 4．Dentine hypersensitivity 牙本质过敏症：又称过敏性牙本质，是牙在受到外界刺激，如温度（冷、热）、化学物质（酸、甜）以及机械作用（摩擦或咬硬物）等所引起的酸痛症状。5．Root canal therapy 根管治疗：是治疗牙髓病及根尖周病首选的方法，它是彻底清理根管内炎症和坏死物质、扩大成形根管，并对根管进行适当消毒、最后严密充填根管，以除去根管内感染性内容物对根尖周组织的不良刺激，防止根尖周病的发生或促进根尖周病的愈合。 1. Biological width 生物学宽度（1）：龈沟底与牙槽嵴顶之间的恒定距离（2），包括结合上皮和牙槽嵴顶上方的结缔组织（1），约2mm（1）。 2. 非附着性龈下菌斑 位于附着性龈下菌斑表面（1），直接与龈沟上皮或袋内上皮接触（1.5），是
牙周炎的“前沿地带”(1.5)，主要由Gn厌氧菌、螺旋体组成(1) 窝洞：采用牙体外科手术的方法去除龋坏组织，并按要求备成的洞型，窝洞具有一定的形状，能容纳和支持填充材料，达到恢复牙齿外形和功能的目的。 残髓炎：属于慢性牙髓炎，临床特点常表现为自发性钝痛、放散性痛、温度刺激痛。发生在经牙髓治疗后的患牙，由于残留了少量炎症根髓或者多根牙遗漏了未作处理的根管。 主尖锉：在根管预备中，选用合适根管粗细，既能深入牙本质牙骨质界又有摩擦感的锉叫初尖锉，根管预备一般预备到到比初尖锉大三个号，叫主尖锉。 牙本质过敏症：又称过敏性牙本质，是牙在受到外界刺激，如温度、化学、机械刺激所引起的酸痛症状。其特点是发作迅速、疼痛尖锐、时间短暂。牙本质过敏不是一种独立的疾病，而是各种牙体疾病所共有的症状，发病高峰在40岁左右。继发龋：龋病治疗后，由于充填物边缘或窝洞周围牙体组织破裂，形成菌斑滞留区，或修复材料与牙体组织不密和，留有小的缝隙或存在微渗漏，或原有的病变组织未去净就进行了充填，形成致病条件再发生的龋病。 Wedge-shaped defect：楔状缺损：牙齿唇、颊侧颈部硬组织发生缓慢磨耗所致的楔壮的缺损。 Smear layer：污染层：切削牙体组织产生的热是有机质变性，变形的有机质和切削下来的牙本质粉末，牙本质小管溢出液、唾液和细菌等混合，在钻磨压力下吸附于洞壁而形成。 逆行性牙髓炎：牙周病时深牙周袋中的细菌通过根尖孔或侧支根管进入牙髓引发炎症，这种经亚洲途径发生的逆行感染称逆行性牙髓炎。 抗力形：抗力形是使充填体和余留的牙体组织获得足够的抗力，在承受咬合力时
1. 多形性腺瘤在小涎腺多见于 A．唇部 B．颊部 C．舌部 D．腭部 E．牙龈 2. 牙源性角化囊肿衬里上皮的组织来源可能是 A．结合上皮 B．缩余釉上皮 C．上皮根鞘剩余 D．牙板上皮剩余 E．牙乳头 3. 牙源性角化囊肿的发生多为 A．上颌单发 B．下颌单发 C．上颌多发 D．下颌多发 E．上下颌无差异 4. 釉质中的有机物和水占其总重量的 A．1％ B．2％C．3％～4％ D．5％ E．6％～10％ 5. 按世界卫生组织对口腔鳞癌的分级方法，角化珠多见、多形性较轻者应为A．I级鳞癌 B．Ⅱ级鳞癌 C．Ⅲ级鳞癌 D．Ⅳ级鳞癌E．Ⅴ级鳞癌 6. 含牙囊肿有以下病理改变，除了 A．囊壁较薄 B．衬里上皮为角化的复层鳞状上皮 C．上皮只有2～3层扁平或矮立方形细胞组成 D．无明显上皮钉突 E．囊壁中偶尔可见牙源性上皮岛 7. 腺样囊性癌的细胞成分主要为 A．腺上皮细胞和肌上皮细胞 B．鳞状细胞和肌上皮细胞 C．肌上皮细胞和纤维细胞 D．粘液细胞和导管内衬上皮细胞 E．粘液细胞和软骨样细胞 8. 粘液表皮样癌的细胞组成是 A．表皮样细胞、腺上皮和粘液细胞 B．表皮样细胞、软骨样细胞和中间细胞 C．腺上皮细胞、粘液细胞和中间细胞 D．表皮样细胞、粘液细胞和中间细胞 E．粘液细胞、软骨样细胞和中间细胞 9. 上皮异常增生可表现下列变化，除了 A．上皮基底细胞极性消失
B．基底细胞液化变性 C．上皮钉突呈滴状 D．有丝分裂相增加 E．细胞核浓染 10. 釉柱的直径平均为 A．4～6μm B．2～3μm C．7～9μm D．0．5～1μm E．10～12μm 11. 关于牙骨质，以下哪项是错误的 A．与密质骨相似 B．牙骨质细胞有许多细长的胞浆突起 C．细胞性牙骨质和无细胞牙骨质可交替排列 D．细胞性牙骨质常位于近牙颈部 E．牙骨质呈板层状 12. 腺样囊腺癌预后最差的组织学类型为 A．管状型 B．筛孔型 C．小条索型 D．乳头状型 E．实体型 13. 关于白斑，以下哪项是错误的 A．是指在粘膜表面发生的白色斑块，不能擦掉 B．在临床和病理上可诊断为其他疾病的病变也可称为白斑C．上皮单纯性增生属于良性病变 D．白斑属癌前病变 E．白斑可表现不同程度的上皮异常增生 14. 关于口腔鳞状细胞癌，以下哪项是错误的 A．是口腔中最常见的恶性肿瘤 B．男性多于女性 C．以口底鳞癌最多 D．血道转移较少见 E．口腔后部鳞癌较易转移 15. 关于牙本质龋，以下哪项是错误的 A．与釉质龋相比，其发展较快 B．常形成一底向内，顶向外并稍圆突的三角形病损C．细菌侵入层可形成串珠状细菌破坏灶 D．脱矿层尚无细菌侵入 E．病变相应的髓腔壁上可形成修复性牙本质 16. 高分化粘液表皮样癌的病理特点是 A．中间细胞多 B．粘液细胞占50％以上 C．表皮样细胞多 D．中间细胞形成团块 E．核分裂多
口腔颌面外科学相关专业知识-2 (总分：100.00，做题时间：90分钟) 一、 (总题数：20，分数：40.00) 1.以下是Arcon型架特点的是 A．髁导盘位于上颌体，髁球位于下颌体 B．髁导盘位于下颌体，髁球位于上颌体 C．是一种全可调的架 D．模拟开闭口时，颌间距离的改变会导致髁导斜度的改变 E．不可以在架上升高或降低颌间距离 （分数：2.00） A. √ B. C. D. E. 解析： 2.深龋的检查应特别注意 （分数：2.00） A.叩诊的反应 B.龋坏的部位 C.龋洞的深度 D.探穿髓孔有无√ E.洞内温度测验 解析：[解析] 深龋的检查应注意探明是否有穿髓孔。因为龋达牙本质深层时，病原刺激物可以通过牙本质小管刺激牙髓组织，而且不表现任何临床症状。因此检查深龋时，探明是否有穿髓孔和牙髓的情况是重要的，其他选项不具有特异性。 3.下列有关牙内吸收的表述不对的是 （分数：2.00） A.牙冠可呈粉红色 B.牙髓温度测验可正常 C.叩诊疼痛明显√ D.X线片见髓腔内局限性不规则膨大透射影 E.正常牙髓组织变为肉芽组织 解析：[解析] 牙内吸收叩诊呈不适感或同正常对照牙。 4.下列间接盖髓的适应证中，不正确的是 （分数：2.00） A.深龋 B.深龋引起的可复性牙髓炎 C.活髓牙全冠牙体预备后 D.深龋洞，夜间偶有隐痛√ E.外伤冠折未露髓 解析：
5.急性龋的临床表现为 （分数：2.00） A.多见于中、老年人 B.病变进展较平稳 C.龋坏牙本质着色深 D.龋洞内腐质湿软√ E.进展与全身情况无关 解析：[解析] 该题考查的知识点是急性龋的临床特征。急性龋一般多见于儿童或青年人，病变进展较快，病变组织颜色较浅，质地较软且湿润，有些严重全身性疾病的患者由于唾液分泌减少或未注意口腔卫生可出现急性龋中的一种特殊类型，即猖獗龋。由此可见答案为D。 6.与继发龋的发生无关的是 （分数：2.00） A.牙体组织折裂 B.充填不密合 C.龋坏组织未去尽 D.未进行窝洞垫底√ E.以上均是 解析：[解析] 该题考查的知识点是继发龋产生的原因。龋病治疗后由于充填体边缘或窝洞周围牙体组织破裂，形成菌斑滞留区，或修复材料与牙体组织不密合，留有小的缝隙，这些都可能成为致病条件，产生继发龋。也可因治疗时未将病变组织除尽，以后再发展而来，这种继发龋比较隐蔽，不易被查出。窝洞是否垫底与充填后牙髓症状出现可能有关，与继发龋出现与否无因果关系。 7.牙髓充血与急性浆液性牙髓炎的鉴别要点是 （分数：2.00） A.有无探痛 B.有无叩痛 C.有无自发性痛√ D.有无温度刺激痛 E.有无化学刺激痛 解析：[解析] 自发痛、夜间痛等是不可复性牙髓炎的特征性表现，而牙髓充血亦即可复性牙髓炎没有自发痛出现。 8.牙骨质龋属于 （分数：2.00） A.浅龋√ B.慢性龋 C.中龋 D.深龋 E.继发龋 解析：[解析] 该题考查的知识点是龋病的病变程度，牙骨质龋为浅龋。其他有关病变程度的干扰答案都不正确，或者是有关不同类型的龋病。 9.全冠牙体制备的要求，下列错误的是 （分数：2.00） A.两邻面应近于平行 B.颊、舌面应无倒凹，最大周径降至龈缘 C.轴、线角应清楚分明呈直角√ D.缘、轴角应圆钝 E.龈缘线相连应一致 解析：
第二章牙的发育 第一节牙胚的发生和分化 牙板：在胚胎第5周，原口腔上皮局部增生形成原发性上皮带。上皮带继续增生分裂，在唇（颊）侧形成前庭板，在舌侧形成牙板。 一、成釉器的发育 （一）蕾状期： 牙板末端的上皮细胞迅速增生，形成圆形或卵形的上皮芽，如同花蕾，称为牙蕾。 牙蕾细胞类似基底细胞，周围有间充质细胞增生。 （二）帽状期： 上皮芽继续生长，体积增大，底部凹陷，形状如帽子。外周的间充质细胞也增生聚集。此时的成釉器分化成三层细胞：外釉上皮层；内釉上皮层和星网状层。 （三）钟状期： 随着成釉器的长大，上皮凹陷加深，形如钟状。外周的间充质细胞也继续增生。 此期的成釉器分化为四层：外釉上皮层；内釉上皮层；星网状层；中间层。 1.外釉上皮层：是一层立方上皮，借牙板与口腔上皮相连。外釉上皮与内釉上皮相连处称为颈环。 2.内釉上皮层：由单层上皮细胞组成，排列在成釉器的凹面的基底膜上，与牙乳头相邻。 3.星网状层：位于内外釉上皮之间。细胞呈星形，有较长的突起。细胞间充满富含蛋白的粘液样液体，有营养保护作用。 4.中间层：在内釉上皮与星网状层之间的2~3层扁平细胞。与釉质形成有关。 5.釉结、釉索： 釉结为内釉上皮局部增生。 釉索是由釉结向外釉上皮走行的一条细胞条索。 以上均为暂时性结构。 二、牙乳头 牙乳头细胞为成釉器包围的未分化的间充质细胞。 在内釉上皮细胞的诱导下，牙乳头外层细胞分化为高柱状的成牙本质细胞。 牙乳头是决定牙形态的重要因素。并形成牙髓。 三、牙囊 牙囊由成釉器外周的间充质细胞呈环形排列而成。 牙囊发育成牙骨质，牙周膜和固有牙槽骨。 第二节牙体组织的形成 一、牙本质的形成 在成釉细胞的诱导下，牙乳头的间充质细胞分化为成牙本质细胞。 随后，成牙本质细胞分泌牙本质基质，并合成I型胶原。 最早形成的牙本质基质称为罩牙本质。罩牙本质基质的胶原纤维粗大。 牙本质的矿化形态是球形矿化，形成钙质小球。球形矿化遗留的未矿化的基质称为球间牙本质。 除罩牙本质外，其余大部分的原发性生理性牙本质成为髓周牙本质。髓周牙本质的胶原纤维比较少，并相互交织与小管垂直。 二、釉质的形成 釉质矿化分四期：
班级：________________ 姓名：________________ 学号：________________ _ _ _____ _ _____ _ _____ _ _____ _ _____ _ _____ _ _____ _装_ _ _ _ _订_ _ _ _ _线_ _ _（装订线内禁止填写答案）_ _____ _ _____ _ _____ _ _____ _ _____ _ _____ _ _____ _ _____ _ _____ 《牙体牙髓病学》考试样题 本卷满分 100 分 考试时间为 90 分钟 一、单选题(四选一),以下各题，每题有四个选项，其中有且只有一个选项是正确的，请选择正确答案填入括号中。 (本大题共7小题,7分) 1. 猛性龋是（ ） A ．多数或全口牙发生急性龋 B ．龋坏进展较快 C ．龋坏发生的牙面广泛 D ．以上全是 【答案】D 2. 患龋率最高的恒牙是（ ） A ．下颌第一磨牙 B ．上颌第一磨牙 C ．下颌第二磨牙 D ．上颌第二磨牙 【答案】A 3. 牙颈部洞应用下列哪种固位形（ ） A.侧壁固位 B.潜凹固位 C.鸠尾固位 D.支架固位 【答案】B 4. 根尖手术中发生术后并发症少，没有疤痕的瓣膜设计不包括（） A ．全厚粘膜骨膜瓣 B ．斜方形瓣 C ．三角形瓣膜 D ．扇形瓣膜 【答案】D 5. 下列哪项为根尖手术禁忌症（ ） A ．根管治疗反复失败，症状不消失 B ．牙周组织过少 C ．根管钙化不通 D ．广泛的根尖周骨质破坏 【答案】B 6. 下列哪些步骤不是牙本质钉修复和根管钉修复的共有步骤？（） A.根管治疗 B.钉道预备 C.钉就位 D.充填材料修复 【答案】A 7. 下列哪个不是纤维桩修复的优点（） A.美观性好