子学习情境4 青霉素发酵
任务一青霉素的结构和理化性质
一、β-内酰胺类抗生素特性和作用机制
1.结构特性
都含有一个四元的内酰氨环，并通过N与相邻的碳原子和另外一个杂环相稠合。
2.物理性质
白色或黄色无定型或结晶性固体。熔点不明显，具有旋光，酸性形式易溶于有机溶剂，盐易溶于极性溶剂，特别是水。
3.化学性质
化学性质活泼，由于稠环的作用，青霉素的内酰胺环很易开环，头孢菌素相对稳定。
4.作用机制
通过抑制肽聚糖转肽酶及D-丙氨酸羧肽酶的活性抑制肽聚糖的合成，从而干扰细胞壁的合成。
二发展概况
1929 Fleming 首先发现青霉素可抑制葡球菌的生长，但并未获得足够重视
1940Florey Chain青霉菌发酵液中提取出了青霉素
1945 意大利Brotzu 发现头孢菌素C
1958后人工合成半合成青霉素、头孢菌素
陆续发现头霉素、克拉维酸、硫霉素、单环β-内酰胺
三常用的β-内酰胺类抗生素
（一）青霉素：
苄青霉素、青霉素V、氨苄西林、替卡西林、甲氧西林、氯唑西林
(一)头孢菌素
头孢菌素C、头霉素C、头孢力行、头孢克洛、头孢唑啉、头孢西丁、头孢他啶
（一）新型β-内酰胺
四、天然存在的青霉素
青霉素是一族化合物的总称。
分子式：
R为侧链，根据R基不同
青霉素G C6H5CH2-
青霉素X HOC6H4CH2-
青霉素F CH3CH2CH=CHCH2-
青霉素K CH3(CH2)6-
双氢青霉素F CH3(CH2)4-
青霉素V C6H5OCH2-
五、青霉素的理化性质
（一）稳定性
干燥纯净的青霉素盐很稳定，有效期都在三年以上，并且对热稳定，如结晶青霉素钾盐在150O C加热1.5小时效价不降低。
青霉素水溶液PH=5-7较稳定。最稳定的PH为6-6.5。
（一）溶解度
青霉素在水中溶解度小，易溶于有机溶剂
青霉素盐易溶于水、甲醇
（二）降解反应
青霉素遇酸、碱、加热易开环，倒是抗菌活性丧失。
详见课本
（三）紫外吸收光谱
在252nm 257nm 264nm具有弱的吸收峰
（四）过敏反应
任务二发酵法工艺过程
现代抗生素生产绝大多数采用发酵法生产，虽然种类繁多，但其基本过程大致相同。
菌种――孢子制备――种子制备――发酵――发酵液的预处理及过滤――提取及精制――成品检验――成品包装――出厂检验。
一般说，从孢子制备到发酵属于“生物合成”范围
从预处理到提取精制属于化工范围
一生产菌种
菌种是发酵生产的基础，必须产量高、性能稳定、容易培养。为防止菌种衰退，要合理保藏。一般保存在沙土管或冷冻于干燥管中。一般使用期为１－２年，不断纯化淘汰变异菌种。有条件的可以菌种选育，不断提高产量。
二、 孢子制备
孢子制备是发酵工序的开端，孢子的质量、数量对以后菌丝体的生长繁殖有很大的影响。不同菌种的孢子制备工艺是不同的。 （一）.放线菌类
培养基：人工合成固体培养基，C 源N 源不要太丰富。以利于产生大量孢子 温度：大多28 土 1C O 部分菌种30 C O 或者37 时间：（因菌种不同而异）一般4-7天 保存：2-4 C O 冰箱保存一周左右 放线菌发酵生产的工艺过程如下：
采用哪一代的斜面孢子
接入液体培养，视菌种特性而定。采用母斜面孢子接人液体
培养基有利于防止菌种变异，采用子斜面孢子接入液体培养基可节约菌种用量。菌种进入种子罐有两种方法。一种为孢子进罐法，即将斜面孢子制成孢子悬浮液直接接人种子罐。此方法可减少批与批之间的差异，具有操作方便、工艺过程简单、便于控制孢子质量筹优点，孢子进罐法已成为发酵生产的一个方向。另一种方法为摇瓶菌丝进罐法，适用于某些生长发育缓慢的放线菌，此方法的优点是可以缩短种子在种子罐内的培养时间。 （二）.霉菌类
培养基：天然培养基（大米、小米、麦麸）
工艺过程：沙土管----斜面-----亲米----生产米----种子罐
首先将保存于沙土管中或冷冻管中的菌种孢子接种在斜面上，恒温培养，孢子成熟后制作成孢子悬浮液然后接种到大米或小米等培养基上，恒温成熟后称为“亲米”，由亲米再转至大米或小米培养基上，培养成熟后称为“生产米”，用生产米介入种子罐内，培养温度一般为25-28度，培养时间一般为4-14天。 （三）.细菌类 培养温度：37C O 少数为28 C O
培养
时间：多数1-2天 有的芽孢需要5-6
天，甚至十多天
（四）影响孢子质量的因素及其控制
1、原材料质量的影响
多数抗生素产生菌对原材料敏感。
如：四环素斜面孢子与小麦麸皮质量关系密切，小麦的产地、品种、加工方法、成份用量对孢子质量均有影响。青霉素的大米孢子，由于大米产地、颗粒大小、均匀程度不同
如：琼脂的牌号不同对孢子的质量也有影响。原因是不同的琼脂含有不同的无机离子。
如：水质。污染，硬度大。人工调节
2、.培养条件的影响
1.温度：
如：链霉素（灰色链霉菌）斜面孢子，在26.5—27.5 C O正常生长，超过28就不能正常生长。
土霉素产生菌在36.5-37 C O，超过37C O，孢子早熟易老化
2.相对湿度
北方控制在40-45%，南方控制在35-42%
（三）冷藏时间的影响
总的原则是易短不易长，一般不超过7天。
（四）孢子龄及孢子量的影响
过于年轻的孢子经不起冷藏，过于衰老的孢子生产能力下降，控制在孢子成熟、孢子量多、效价正常时为宜。
孢子量过多或过少，对发酵也是不利的。
小结：本节介绍了青霉素的结构和作用机理。介绍了发酵生产抗生素的菌种制备过程和孢子培养过程。
三、种子制备
种子制备是将固体培养基上培养出的孢子或菌体转入到液体培养基中培养，使其繁殖成大量菌丝或菌体的过程。
(一)摇瓶种子制备
某些孢子发芽和菌丝繁殖速度缓慢的菌种，需将孢子经摇瓶培养成菌丝后再进人种子罐，这就是摇瓶种子。目的就是让孢子发芽长成健壮的菌丝。
摇瓶种子进罐，常采用母瓶、子瓶两级培养，有时母瓶种子也可以直接进罐。
培养基：其培养基配方和培养条件与种子罐相似，要求比较丰富和完全，易被菌体分解利用，氮源丰富有利于菌丝生长。原则上各种营养成分不宜过浓，子瓶培养基浓度比母瓶略高，更接近种子罐的培养基配方。
（二）种子罐种子制备
孢子悬浮液或摇瓶种子接入种子罐后，在罐内繁殖成为大量菌丝的过程，从而缩短了发酵罐繁殖菌丝的时间，增加了抗生素合成时间。
1 种子罐级数
因抗生素品种不同，可分为一级种子、二级种子、三级种子。
a一级种子（二级发酵）：
将孢子或摇瓶种子接种到体积较小的种子罐中，培养繁殖成为大量菌丝体，然后接种到发酵罐发酵。这样的种子称为一级种子，利用一级种子进行发酵的过程称为二级发酵。
如：青霉素、四环素、头孢菌素
b二级种子（三级发酵）
将制备的一级种子接入体积较大的种子罐，培养繁殖更多的菌丝，然后转入发酵罐发酵。
如：红霉素、卡那霉素、庆大霉素
c.三级种子（司级发酵）
如：链霉素
2.种子罐级数的确定
根据菌种生长特性、孢子发芽及菌体繁殖速度，以及所采用发酵罐的容积而定。生长快的细菌，种子用量比例少，种子罐相应也少，生长慢的菌种种子罐级数要多。
种子罐的级数越少，越有利于简化工艺，并可减少染菌机会。改变种子罐的培养条件，加速了孢子发芽及菌体的繁殖，也可相应地减少种子罐的级数。
3.接种龄和接种量
a.接种龄
接种龄是指种子罐中培养的菌丝体开始移入下一级种子罐或发酵罐时的培养时间。
接种龄以菌丝体处于生命力极为旺盛的对数生长期，且培养液中菌体量还未达到最高峰时，较为合适。
过于年轻的种子会出现前期生长缓慢、发酵周期延长、产物开始形成的时间推迟，甚至会因菌丝量过少而在发酵罐内结球，造成异常发酵。过老的种子会引起生产能力下降而菌丝过早自溶。
嗜碱性芽孢杆菌产生碱性蛋白酶的接种龄试验情况，以12h为接种龄所得的酶活力最高。
接种量
接种量是指移入的种
子液体积和接种后培养液体
积的比例。
大多数抗生素最适接
种量为7%~15%，有时可增加
到20%~25%
接种量的大小取决于菌种在发酵罐中生长繁殖的速度。采用较大的接种量可以缩短菌丝繁殖时间，使抗生素的形成提前到来。但是，如果接种量过多，往往使菌丝生长过快，培养液黏度增加，造成溶解氧不足，影响产物的合成。
如：嗜碱性芽孢杆菌生产碱性蛋白酶1%接种量产酶活力最高，在0.5%~4%接种量之间虽有差别，但影响不大，一旦超过4%则产量明显下降。
(三)、影响种子质量的因素及其控制
种子质量主要受孢子质量、培养基、培养条件、种龄和接种量等因素的影响。
1.培养基
a营养成分丰富
培养基营养成分应适合种子培养的需要，易于被菌体吸收和利用氮源和维生素含量较高，可使菌丝粗壮并具有较强的活力。
b.尽量与发酵罐接近
要尽可能地和发酵培养基接近，入罐后容易适应发酵罐的培养条件。
c.要略稀薄
发酵培养基一般比较浓，而种子培养基以略稀薄为宜。
d.pH值要比较稳定
pH值的变化会引起各种酶活力的改变，对菌丝形态和代谢途径影响很大。
2．培养条件
a.温度
种子培养应选择最适温度。
b.通气搅拌
培养过程中通气搅拌的控制很重要，各个不同时期的需氧量不同，一般前期需氧量较少。
后期需氧量较多。
在青霉素生产的种子制备过程中，充足的通气量可以提高种子质量。例如，将通气充足和通气不足两种情况下得到的种子都接入发酵罐内，它们的发酵单位可相差1倍。通气搅拌不足可引起菌丝结团、菌丝粘壁等异常现象。
c.消泡
生产过程中，有时种子培养会产生大量泡沫而影响正常的通气搅拌，此时应严格控制，甚至可考虑改变培养基配方，以减少发泡。
d.补料
在种子罐培养一定时间后，补入一定量的种子培养基，结果种子质量有所提高，菌丝团明显减少，菌丝粗壮，发酵单位增高。
3.种子异常分析
在生产过程中，种子质量受各种各样因素的影响，种子异常的情况时有发生，会给发酵带来很大的困难。种子异常往往表现为菌种生长发育缓慢或过快、菌丝结团、菌丝粘壁三个方面。
a．菌种生长发育过快或过慢
菌种在种子罐生长发育缓慢或过快和孢子质量以及种子罐的培养条件有关。生产中，通入种子罐的无菌空气的温度较低或者培养基的灭菌质量较差是种子生长、代谢缓慢的主要原因。生产中，培养基灭菌后需取样测定其pH值，以判断培养基的灭菌质量。
b．菌丝结团
在液体培养条件下，繁殖的菌丝并不分散舒展而聚成团状称为菌丝团。这时从培养液的外观就能看见白色的小颗粒，菌丝聚集成团会影响菌的呼吸和对营养物质的吸收。如果种子液中的菌丝团较少，进入发酵罐后，在良好的条件下，可以逐渐消失，不会对发酵产生显著影响。如果菌丝团较多，种子液移入发酵罐后往往形成更多的菌丝团，影响发酵的正常进行。
菌丝结团与搅拌效果差、接种量小有关，一个菌丝团可由一个孢子生长发育而来，也可由多个菌丝体聚集一起逐渐形成。
c．菌丝粘壁
菌丝粘壁是指在种子培养过程中，由于搅拌效果不好，泡沫过多以及种子罐装料系数过小等原因，使菌丝逐步粘在罐壁上。其结果使培养液中菌丝浓度减少，最后就可能形成菌丝团。以真菌为产生菌的种子培养过程中，发生菌丝粘壁的机会较多。
四、发酵过程的控制
（一）温度变化及其控制
1、温度对发酵的影响
温度影响微生物的生长发育和代谢活动。因为一切代谢活动都依赖于酶。而酶的活力只有在最适才能发挥。温度低于最适范围，菌体生长缓慢；高于最适范围，酶易过热失活，使菌体自溶，发酵周期缩短，影响抗生素产量。
发酵最适温度低于最适生长温度几度。
如：产黄青霉菌最适温度为27-28O C,分泌青霉素的最适温度为26 O C
小单胞菌………………34-36 O C,分泌庆大霉素………………32-34 O C
温度不仅影响菌体生长与合成速度，甚至影响合成方向
例如，
<30 O C 金霉素
金色链霉菌
>35 O C 四环素
2、发酵最适温度的选择
所谓最适温度是指最适于产生菌生长或合成抗生素的温度。
注意：
a.抗生素在发酵周期内一般不能只选择一个最适温度。
“马克思主义矛盾论”例如，青霉素产生菌生长最适温度为30℃，但产生青霉素的最适合成温度是24.7℃。在生长初期，抗生素还未开始合成，以促进菌丝体生长繁殖为目的，应该选择最适生长温度；当菌丝浓度达到一定程度，到了抗生素分泌时，生物合成成为主要方面，就应该满足生物合成的最适宜温度。
如：发酵前期保持在28℃，40h之后改为27-27.5℃，放罐前24h，在增加到28℃，链霉素产量明显增加。
b.发酵温度的选择还需参考其他发酵条件灵活掌握
如：通气条件较差，一般温度较低为宜。因为温度较低可以相应增加氧的溶解度，菌丝生长速度也可减慢，从而弥补发酵供氧不足。
(二) PH的影响及控制
酶活力
PH
抗生素产生菌的最适PH一般在5-8，但是不同菌种的PH也不一样。
了解了菌种的PH范围，就要进一步调节，方法如下：
1.根据菌种特性和培养
基性质，选择适当的培
养基成分和配比，有些
成分可以中间补料时
补充调节.
如：青霉素发酵中，根据
青霉素产生菌的代谢需要，用改变加糖率来控制PH比固定加糖率通过加酸、碱调节PH可以提高产量25%
2.加入适当的缓冲剂，以控制培养基PH的变化。常用的缓冲剂是碳酸钙和磷酸钙。其中碳酸钙便宜，方便、效果好。主要作用是中和各种酸，防止PH急剧下降。
3.在发酵过程中出现PH过高和过低时，可以直接用酸碱调节。
（三）通气与搅拌
1、通气搅拌对抗生素发酵的影响
一般情况下，产生菌在发酵过程中的需氧量为20-25毫克分子/升.小时，氧在发酵液中的溶解度为1个大气压下0.2毫克分子/升，随溶质浓度升高溶解度度还会下降，如果不及时通氧，微生物只能维持正常呼吸15-30秒，然后呼吸就收到了抑制，远远不能满足发酵菌的需要。因此需要通入无菌空气，并且通过搅拌与培养既充分混合，增加通气效果。
发酵产生菌对氧的需求量取决于下列两个因素：单位体积培养液中菌的浓度和军的呼吸强度（单位重量菌丝体在单位时间内的好氧量Qo2 ）幼龄菌呼吸强度最大，随菌龄增长稍微下降，然后急剧下降。
发酵前期：早期菌量少，需氧量不大，进入对数生长期，菌丝浓度急剧增加，呼吸极为旺盛。达到最高。
发酵中期：细菌生长稳定抗生素开始合成，呼吸强度减弱，为继续维持细胞活动和抗生
素的合成，通气搅拌还须保持在一定水平。
发酵后期：菌丝逐渐趋向自溶，可适当降低空气流量或降低搅拌转速。
2、影响发酵过程中供养的因素
a.生产菌种
不同品种的抗生素产生菌对氧的需求是不同的。
如：青霉素80最大摄氧率40毫克分子/升.小时
链霉素12h 45
四环素12h 37
制霉菌素73h 25
灰黄霉素24h 8
新霉素138h 16
b.培养基
增加培养基成分的浓度，可是产生菌的摄氧率增加。
如：链霉素大罐发酵70h后补糖，补前摄氧率34.3毫克分子/升.小时，补后78h为40.9毫克分子/升.小时。
c.菌丝浓度
菌丝浓度大，需氧量就越高。
d.种子的质和量
接种量大，生长快，菌丝浓度高，需氧就多。年轻菌丝呼吸强度较高。
e.泡沫和消沫剂
使用动植物油脂作为消沫剂有利于溶氧。
f.其他因素
有毒产物的积累，如CO2不及时排出对溶氧是不利的。
3.影响发酵过程中供氧的因素
a.搅拌
搅拌改善通气的机理
不利方面：耗能、影响某些微生物的菌丝形态，功率过高时甚至会造成细胞损伤。
b.空气流速
空气流速能影响通气效率，通气效率随空气量的增加而增加。随着空气流速的增大，大气泡造成发酵液更大的湍流，空气流速过大能使搅拌叶轮发生过载，即叶轮不能分散空气，此时气流形成大气泡在轴的周围溢出，因此当空气流速超过过载速度后，通气效率不再增加。
c.发酵液的物理性质
军体本身的代谢和繁殖会影响到发酵液的物理性质，比如表面张力、黏度、离子浓度，而这些变化会影响到气体的溶解度显著影响通气效率。
(四) 发酵过程中的代谢与控制
发酵过程应及时掌握产生菌生长代谢、培养基的性质含量等状况，所以必须进行发酵过程中的中间分析。
1、中间分析项目
分析项目：抗生素效价、Ph值、糖含量、氨基氮和氨氮、磷浓度、菌丝浓度、黏度。
a抗生素效价单位
一般采用化学测定法和生物测定法。
（1）.化学测定法以抗生素化学结构为基础，通过一定的化学反应进行测定。
优：简单迅速，可在较短的时间内得到结果。
缺：准确度差，易受杂质和类似化合物的干扰。
（2）.生物测定法
以抗生素的抑菌和杀菌作用为基础。方法复杂，需要无菌操作，且有操作和生物误差。此法在中间测定一般不采用。大多用于放罐样品和出厂成品的检验。
b.PH
PH试纸、酸度计
c.糖含量
(1).总糖是指发酵液中各种糖的总量，它是分析及计算发酵过程中汤消耗的主要数据。方法：把含糖的发酵液用酸水解，使多糖和双塘变成G,然后测定其还原糖的总含量。
（2）.还原糖是发酵液中含有醛基的单糖，通常指G。因为葡萄糖能直接被微生物利用，参与发酵代谢及抗生素的合成，因此还原糖的变压可以直接反映产生菌的代谢状况。克/100ml d.氨基氮和氨氮
氮源物质的变化也反映发酵菌的生长状况，生产商一般测定氨基氮（NH2-N）和氨氮(NH3-N).这两种形式都可以用甲醛法测定。毫克/100毫升微克/毫升
e磷含量
微生物代谢活动对磷的要求很高。磷的供应以磷酸盐为主，以有机磷为辅。
f.菌丝浓度和黏度
菌丝浓度，单位体积发酵液中的菌丝数量。
粘度的测定可以用旋转式粘度计，单位为厘泊。发酵液的黏度由1厘泊到500厘泊不等。
简单方法：用一根0.5米长直径0.8cm的玻璃管，吸取一定量的发酵液，用马表记录其留出速度
2.中间补料与代谢控制
a.中间部料的意义与原则
中间补料：在发酵过程中补充某些营养物料，以满足产生菌在培养过程中，特别是中期的生化代谢活动和合成抗生素的需要。
原则：控制和引导抗生素产生菌在培养过程中，特别是中期的色花代谢活动，使其向着有利于抗生素合成和分泌的方向进行。
意义：1.控制中期代谢
2.延长抗生素分泌期
3.推迟菌体自溶期
4.维持抗生素较高的增长幅度。
b补料内容
1.补充C源和能源物质
如：液化淀粉、糊精、饴糖（麦芽糖）、G
2.补充N源物质
如：酵母粉、蛋白胨、玉米浆、尿素、硫酸铵、氯化铵、硝酸钠、硝酸钾、氨水
3.补充无机盐、微量元素、前体和促进剂
如：磷酸盐、硫酸锌、硫酸锰、氯化钴、氯化钙、硫酸钠、促进剂
4.补全料和补水
c补料的控制
补糖的控制
0-补糖时机的控制
补糖时间对抗生素的产量有很大影响，过早补糖，刺激菌体生长，加速糖的利用，过迟补糖，菌体已经受到部分损害，补糖只能干扰代谢，不能提高产量。
举例：四环素发酵补G
62h 后补糖产量6000单位/毫升
20h ………………6000 单位/毫升
45h…………………10000单位/毫升
1-补糖方式和补糖指标
以还原糖作为指标，如四环素发酵还原糖0.8-1.5%
以总糖作为指标，如土霉素发酵前期5-6%，中期4-5%，后期3-4%，放罐1-2%
补糖方式：小量间隙多次补入、小量连续滴加补入、大量多次补入、大量少次补入。
5.通氨及补氮
作用：调节PH和补充无机氮源，从而控制产生菌的代谢活动
方法：少量间隙添加或少量自动流加
氨水：工业用20%氨水（快速）尿素（慢速）
6.补充无机元素和促进剂、前体
（五）发酵过程中泡沫的产生和控制
1、泡沫的产生及其对发酵的影响
原因：1.机械搅拌
2.培养基内本身含有发泡性物质
危害：1.装料系数减少
2.泡沫顶罐增加染菌机会
3.影响通气搅拌，引起异常发酵
2、泡沫的性质
泡沫是气体分散于液体中的一种胶体系统，气泡间被一层液膜隔开彼此不相联通。分散相是无菌空气和代谢气体，连续向是发酵液。
泡沫类型：
1.存在于发酵液的液面上，界面明显、容易破灭
2.界面不明显、泡沫较稳定，不易破碎
3、影响泡沫消长的因素
a.与通气搅拌的距离程度有关
前期接种后加大空气流量和全开搅拌，泡沫产量增加，甚至无法控制，前期空气流量不需要太大，应先开小流量，逐步加大，待菌丝达到一定程度在加大流量，然后开搅拌并加消沫剂。
b.与培养基的配比及原材料组成有关
天然原料浓度大的培养基，黏度大，产泡多而持久。如葡萄糖、黄豆饼粉、蛋白胨、玉米浆、花生饼粉、酵母粉
合成培养基不易产生泡沫。
c.与菌种、种子质量、菌丝阶段、接种量有关
生长速度越快，泡沫越少。原因是菌丝大量繁殖，含氮物大量消耗利用，甚至可以提高罐温，促进菌丝生长繁殖、以便减少泡沫的干扰。
4、泡沫的消除
a.机械消沫
机械消沫主要靠机械引起的强烈振动或压力变化促使气泡破裂。
罐内消沫，搅拌轴上方装消沫桨，效率不高
罐外消沫，将泡沫引出罐外，通过喷嘴的加速作用或利用离心力消除泡沫
优点：不加入外界物料，节省原料，减少染菌的机会。
缺点：效果差、需要一定设备、消耗动力，不能从根本上消除因其泡沫稳定的因素。b.消沫剂消沫（化学消沫）
加入某些活性物质，降低泡沫的局部表面张力使泡沫破裂的方法。
机理：
1.当泡沫表层存在着表面活性物质而形成双电层时可以加入一种有相反电荷的表面活性剂，降低他的机械强度。
2.具有较大的表面黏度时，可加入某些分子内聚力较小的物质，以降低液膜的表面黏度。
优点：消沫效果好、作用迅速
缺点：有的具有毒性，残留在发酵液中增加提炼的麻烦，有的影响溶解氧的传递，影响通气搅拌的效果，成本增加。
（1）天然油脂类
玉米油、米糠油、鱼油、蛹油，豆油、棉籽油、菜籽油、猪油
天然油脂消沫效率不高，用量很大。
（2）化学合成类消沫剂
a.泡敌：聚氧丙烯甘油（GP型）聚氧乙烯氧丙烯甘油（GPE型）
用量：0.02-0.035% 性能稳定、能耐受高温高压灭菌、操作简便、用量少、成本低，易掌握。
b.十八醇：青霉素发酵使用
c.聚乙二醇：适用于霉菌发酵
d硅酮类：对微酸性抗生素发酵效果差，适用于碱性抗生素如链霉素、新霉素。
任务三青霉素发酵工艺及过程
（一）、菌种
黄孢子丝状菌
丝状菌
绿孢子丝状菌
产黄青霉菌
球状菌绿孢子球状菌
白孢子球状菌
（三）、发酵工艺过程及要点
1、种子
丝状菌的生产菌种保藏在砂土管中。由砂土孢子接入拉氏培养基的目瓶斜面上，经25O C 培养6-7天，长成绿色孢子，只成孢子悬浮液，接入装有大米的茄子瓶中，经25O C，相对湿度50-45%，培养6-7天，制成大米孢子，真空干燥。
生产时按一定接种量移入种子罐内，25O C培养40-45小时，菌丝浓度达40%以上，菌丝形态正常，即按10-15%的接种量移入繁殖罐内。经25O C培养13-15小时，菌丝体积40%以上，残糖1.0%.发酵罐接种量为30%
球状菌的生产种子由冷冻管孢子经0.5-1.0%的玉米浆的原始亲米孢子，移入罗氏瓶25O C 培养3-4天生产大米孢子（生产米）。将生产米接入含花生饼粉、玉米胚牙粉、G、饴糖为主的种子罐内，28O C培养50-60小时，当PH由6.5-6.0下降至5.5-5.0，菌丝呈菊花团状，每毫升球数为6-8只
2 发酵培养基
a.碳源
主要碳源为葡萄糖母液和工业用葡萄糖
b.氮源
玉米浆、花生饼粉、麸质粉、玉米胚牙粉、尿素
c前体
苯乙酸、苯乙酰胺作为前体，具有毒性，任何时候浓度不能大于0.1%
d无机盐
0-S和P 青霉素的液泡中含有S和P，青霉素的生物合成也需要硫。据报道，硫浓度降低时青霉素的产量减少三倍，磷浓度降低时青霉素的产量减少一倍。
1-Ca Mg K 阳离子总浓度以300毫克当量/升
钾 30% 钙 20% 镁41%
③铁离子铁离子对细胞具有毒害作用
3.培养条件控制
菌丝生长繁殖期：糖及含氮物质被迅速利用
球状菌：菌丝发育为球状，菌体浓度迅速增加
丝状菌：菌丝分支旺盛，菌丝浓度迅速增加
青霉素分泌期：菌丝生长趋势减弱，需添加G、花生饼粉、尿素。青霉素分泌旺盛球：PH6.6-6.9 球体不可太松，也不可太紧
丝：PH6.2-6.4 脂肪粒消失，中小型空胞
菌丝自溶期：菌体衰老走向自溶PH上升青霉素分泌下跌
球：球体破裂
丝：大型空胞增加并逐渐扩大自溶
a.加糖控制
丝：残糖控制在0.6%左右，PH上升以后开始加糖。
加糖控制：0-72小时0.6-0.8% 72小时放罐0.8-1.0%
加糖率每小时0.07-0.15% 每两小时加一次
球：当Ph高于6.5，约20之后开始加糖，根据PH高低酌情。
b.补料及添加前体
丝：接种后8-12小时，发酵液浓度40%左右开始补料发酵单位上升至2500U/ml开始补前体，每4小时补一次
使苯乙酰胺浓度为0.05-0.08%
球：因发酵基础培养基中没有前体，在10小时左右开始加入尿素、氨水和苯醋酸的混合料，每3小时加一次
c.PH控制
主要通过加G控制PH
丝: PH6.2-6.4
球：PH6.7-7.0
d.温度控制
青霉菌最适生长温度高于最适分泌温度
丝和球都是变温培养，且前期罐温高于后期
丝球
种子罐温25o c 28 o c
酵罐温26 o c -24 o c -23 o c -22 o c 26 o c -25 o c -24 o c
e.通气与搅拌
通气比为1：1.1-0.8（V/V/M）
丝：种子罐转速〉发酵罐转速
球：种子罐转速〈发酵罐转速
f.泡沫与消沫
过去：天然油脂如豆油、玉米油
现在：GPE PAGE
任务四青霉素提炼工艺
一、提炼工艺流程
二、提炼工艺要点
青霉素不稳定，整个提炼过程应
在低温干燥条件下进行。
（一）发酵液的预处理
发酵液放罐后，首先要冷却，
因为青霉素在低温时比较稳定。
由于菌丝较粗，一般较容易过滤，
目前采用鼓式过滤机及板框过滤
机过滤。为了加快滤速，缩短工
时，可利用发酵菌液的菌体作为
板框压滤机中的助滤剂。作为助
滤剂的发酵液一般不超过1/3。
由于发酵液中含有过剩的碳
酸钙，在酸化时会有部分溶解，
使钙例子呈游离状态，在酸化萃取时，遇到大量的硫酸根离子，会形成硫酸钙沉淀，故酸化PH应该控制的高一些，一般为4-5之间。
（二）影响青霉素提取的因素
1. PH
一般从滤液萃取到醋酸丁酯时，PH选择在1.8-2.2。从丁酯反萃取到水相时，Ph选择在6.8-7.2
青霉素在酸性条件下极易水解破坏，生成青霉素酸，但是只有在酸性条件下才能转移，这是个矛盾。目前生产上采用上述PH，转移比较完全而且破坏比较少。
从有机相转移到水相时，选择上述PH也合适，如果碱性较强则易发生碱性水解，而且杂质也容易转移到水相中。
2.温度
要求提取在低温下进行（一般要求在10 o c以下）
3.时间
青霉素在提取过程中停留时间越短越好，因此要求操作熟练设备良好，不发生故障。酸化提取时速度应快一些，使青霉素尽快的转移到醋酸丁酯中，碱化提取时速度可放慢些，因
为青霉素在中性条件下半衰期要长一些，破坏情况要缓和一些。
4.萃取方式和浓缩比
生产上一般采取二级逆流萃取方式。浓缩比的选择也很重要，一般选择滤液体积的25-30%
如果丁酯用量太多，虽然萃取完全，收率高，但达不到结晶浓度要求，反而增加溶媒的耗用量。如果丁酯用量太少，则萃取不完全，影响收率。
（三）结晶
以青霉素钾盐为例
1.水分的影响
水分应控制在0.9%以下。
2.温度的影响
温度高时结晶速度快，晶体细小，温度低时结晶速度慢，晶体颗粒粗大。一般污染数在0.5%以下，结晶温度控制在10-15 o c
污染数在0.5%以上，结晶温度控制在15-20 o c
3.污染数高低对结晶的影响
要求污染数在0.5%左右，污染数高反应速度降低，晶体大，收率低
污染数低，反应速度快，结晶颗粒小。
管理学原理-阶段测评1 一、单选题共30 题 题号: 1 本题分数:2 分 管理者的层次划分是指( ) A、表层、里层 B、上层、中层、基层 C、内层、外层 D、深层、浅层 标准答案：B 题号: 2 本题分数:2 分 人际关系学说和行为科学理论形成于( ) A、20世纪初 B、20世纪30年代至50年代 C、20世纪70年代末80年代初 D、20世纪90年代以后 标准答案：B 题号: 3 本题分数:2 分 国际著名跨国公司在中国设立子公司，中国企业走出国门在外国设分部，加入各种区域性联盟和全球组织，是指( ) A、经济环境 B、政治和法律环境 C、全球化环境 D、社会文化环境 标准答案：C 题号: 4 本题分数:2 分 在计划工作中，制定“弹性计划”是运用计划工作的( ) A、灵活性原理 B、许诺原理 C、限定因素原理 D、改变航道原理 标准答案：A 题号: 5 本题分数:2 分 在目标管理中，上下级的目标之间通常是一种___的关系。( ) A、目的—手段 B、手段—目的 C、命令—实施 D、实施—命令标准答案：A 题号: 6 本题分数:2 分 按决策的___来分类，决策可分为战略决策和战术决策。( ) A、对象的内容 B、依据 C、范围 D、人数 标准答案：C 题号: 7 本题分数:2 分 学习和研究管理学的总的方法论指导是( )
A、系统方法 B、理论联系实际的方法 C、唯物辩证法 D、比较分析法 标准答案：C 题号: 8 本题分数:2 分 管理的主体是( ) A、战略 B、员工 C、管理者 D、信息 标准答案：C 题号: 9 本题分数:2 分 管理的载体是( ) A、技术 B、组织 C、工作 D、员工 标准答案：B 题号: 10 本题分数:2 分 管理学中的原理和方法适用于各种类型组织，说明管理学具有( ) A、一般性 B、多科性 C、历史性 D、实践性 标准答案：A 题号: 11 本题分数:2 分 认为没有“放之四海而皆准”的普遍适用的“最好的”管理学派是( ) A、权变理论学派 B、社会合作学派 C、管理科学学派 D、管理过程学派 标准答案：A 题号: 12 本题分数:2 分 泰罗的科学管理理论研究的中心问题是( ) A、提高管理水平 B、提高员工积极性 C、提高劳动生产率 D、提高产品合格品率 标准答案：C 题号: 13 本题分数:2 分 提出重视人的因素是( )A、条件反射试验B、霍桑试验C、铁锹试验D、工厂照明试验标准答案：B 题号: 14 本题分数:2 分 韦伯认为，组织的有序来源于作为其基础的( ) A、制度 B、管理 C、权力 D、职位 标准答案：C 题号: 15 本题分数:2 分
营运资金管理理论基础 本篇论文目录导航： 【题目】苏宁云商营运资金管理政策分析 【第一章】苏宁云商营运资金管控模式研究绪论 【第二章】营运资金管理理论基础 【第三章】苏宁云商运营资金管理概述 【第四章】苏宁电子商务营运资金管理分析 【第五章】苏宁云商营运资金管理存在的问题及优化建议 【结论/参考文献】苏宁云商营运资金控制措施研究结论与参考文献第二章营运资金管理理论基础 2.1 营运资金及营运资金管理的概念界定 2.1.1 营运资金的概念 营运资金又称营运资本，简单的解释是企业日常经营过程中用来周转日常运营的资金总称。企业在开展经济活动中为了详细反映在会计期间企业的经营过程和经营成果便使营运资金的概念应运而生。然而，随着对营运资金概念研究目前对营运资金的概念主要有以下三种界定： （1）广义的营运资金是指一个企业的所有的流动资产的总称。这是一个具体的概念，它包括企业的现金、应收账款、存货、有价证券等，以上流动资产的共同特点是在一个经营周期内可以转换成现金。 （2）狭义的营运资金是指一个净值，企业将流动资产的总额
减去各类流动负债后的净值。这是一个抽象概念，它不特指某项资产而是最为一个差额使用而从企业的财务策略以及融资结构的角度来研究的，在一定意义上体现了企业短期的偿债能能力。 （3）从财务角度营运资金则被理解为，一个企业在一定时期它的流动资产和流动负债的统称，即流动负债和流动资产关系的总和。但是，在这里的“总和”不是数学中简单的相加，而是一种对流动资产和流动负债关系的反映，因此要研究这种关系就要将企业的流动资产与流动负债看作一个整体来研究。 企业广义的营运资金是指所有流动资产，没有包括应收账款等负债。狭义的营运资金只是狭隘的将流动资产减去和流动负债的净额作为研究。以上都不能全面反映营运资金的整体的营运情况。因此本文定义的资金管理是指一个企业对流动资产和流动负债的共同管理。 2.1.2 营运资金管理的概念 随着我国管理理念以及技术的更新和发展，营运资金管理先后经历了从简单到复杂、从静态到动态的一系列过程。传统的营运资金管理没有把应交税费等负债作为管理对象，只是按要素把营运资金简单地分为存货、应收账款、应付账款三大部分。这是一种营运资金的静态管理方式。王竹泉等（2005）按照企业经营管理的环节，把营运资金分为营销渠道的营运资金、生产渠道的营运资金、采购渠道的营运资金、服务领域的营运资金、投资渠道的营运资金，使得营运资金涵盖企业各个领域并清晰地反映出营运资金对经营活动的服务性
第4章行业分析 第1节行业分析概述 1.行业的含义及与产业的差别[熟悉]: 1．行业的含义 行业是指从事国民经济中同性质的生产或其他经济社会活动的经营单位和个体等构成的组织结构体系。 2．行业与产业的差别 主要是适用范围不一样。构成产业一般具有三个特点，即规模性、职业化、社会功能性。行业虽然也拥有职业人员，也具有特定的社会功能，但一般没有规模上的约定。 2.行业分析的主要任务及其与宏观分析、公司分析的关系[掌握]: 1．行业分析的主要任务 (1)解释行业本身所处的发展阶段及其在国民经济中的地位。 (2)分析影响行业发展的各种因素以及判断其对行业影响的力度。 (3)预测并引导行业的未来发展趋势。 (4)判断行业投资价值。 (5)揭示行业投资风险。 2．行业分析与宏观分析、公司分析的关系 行业分析是对上市公司进行分析的前提，是连接宏观经济分析和上市公司分析的桥梁，是基本分析的重要环节。 3.行业划分的方法[掌握]: （一）道-琼斯分类法 是在19世纪末为选取在纽约证券交易所上市的有代表性的股票而对各公司进行的分类，是证券指数统计中最常用的分类法之一。 道－琼斯分类法将股票分为三类：工业、运输业和公用事业。 （二）标准行业分类法 联合国经济和社会事务统计局制定的，便于各国统计并对比。把国民经济划分为10个门类，对每个门类再划分为大类、中类、小类。 （三）我国国民经济行业的分类 1985年，我国国家统计局明确划分三大产业： （四）我国上市公司的行业分类 1.分类对象及适用范围。《指引》是一个非强制执行的标准。 2.分类方法和原则： 3.编码方法
4.管理机构 （五）上海证券交易所上市公司行业分类调整（了解） 第2节行业的一般特征分析 1.行业的市场结构分析[掌握]: 市场结构——市场竞争或垄断的程度。 四种结构分类：完全竞争、垄断竞争、寡头垄断和完全垄断。 分类的标准是企业数量的多少、进入限制的程度和产品差别。 （一）完全竞争 完全竞争型市场是指竞争不受任何阻碍和干扰的市场结构。 在现实经济中，完全竞争是四种市场类型中最少见的，初级产品的市场类型较接近于完全竞争。 六个特点：（理解记忆，与其他形态对比） （二）垄断竞争 垄断竞争是指既有垄断又有竞争的市场结构。 三个特点是： （三）寡头垄断 （四）完全垄断 完全垄断的市场结构特点： 2.行业集中度的概念及计算方法[熟悉]: (1)概念。其又称行业集中率或市场集中度，是指某行业相关市场内前N家最大的企业所占市场份额(产值、产量、销售额、销售量、职工人数、资产总额等)的总和。 (2)计算方法。一般以某一行业排名前4位的企业的销售额(或生产量等数值)占行业总的销售额的比例来度量，表示为CR4。CR4越大，说明这一行业的集中度越高，市场越趋向于垄断；反之则说明集中度越低，市场越趋向于竞争。集中度是衡量行业市场结构的一个重要指标。 (3)美国贝恩对市场结构进行的分类。根据美国经济学家贝恩和日本通产省对产业集中度的划分标准 3.行业竞争结构分析[掌握]: 1．因素 潜在进入者、替代品、供方、需方以及行业内现有竞争者。 2．影响 (1)从静态角度来看，这五种基本竞争力量的状况及其综合强度决定着行业内的竞争激烈程度，决定着行业内的企业可能获得利润的最终潜力。 (2)从动态角度来看，这五种竞争力量抗衡的结果共同决定着行业的发展方向，共同决定行业竞争的强度和获利能力。但是，各种力量的作用是不同的，常常是最强的某个力量或某几个力量处于支配地位、起着决
管理学原理-阶段测评1 （第1-7页） 1.单选题 1.1 3.0 管理学形成的标志是（A） ? a 泰罗科学管理理论 ? b 法约尔管理过程理论 ? c 韦伯理想行政组织理论 ? d 梅奥的霍桑试验理论 泰罗科学管理理论是管理学形成的标志。 1.2 3.0 从根本上影响组织构建的基本方法以及管理者的管理方式是（C） ? a 管理者素质提高 ? b 经济全球一体化 ? c 技术的变革 ? d 职工能力提高 技术的变革从根本上影响组织构建的基本方法以及管理者的管理方式。 1.3 3.0 管理活动总是在一定社会生产方式下进行的，其中生产力决定了（B） ? a 管理的社会属性 ? b 管理的自然属性 ? c 管理的艺术性 ? d 管理的科学性 管理学有与生产力、社会化大生产相联系的自然属性和与生产关系、社会制度相联系的社会属性，这就是所谓的管理的两重性。 1.4 3.0 个人道德表现为道德价值在于维护传统秩序和受他人期望的影响，表现该人道德发展处于（B） ? a 前惯例阶段 ? b 惯例阶段 ? c 后惯例阶段 ? d 原则阶段 惯例阶段是一个人道德发展存在的第二个阶段，个人道德表现为道德价值在于维护传统秩序和受他人期望的影响。 1.5 在组织所面临的外部环境要素中，属于一般环境中最为活跃、变化最快的环境要素是（C）
? a 竞争者环境 ? b 供应商环境 ? c 科技环境 ? d 顾客环境 科学技术是一般环境中最为活跃、变化最快的环境要素。 1.6 3.0 决定一个组织成败的是（B） ? a 管理层 ? b 顾客 ? c 职工 ? d 技术变革 顾客在某种程度上决定一个组织的成败。 1.7 3.0 人际关系学说和行为科学理论形成于（B） ? a 20世纪初 ? b 20世纪30年代-50年代 ? c 20世纪80年代末 ? d 20世纪90年代末 20世纪30年代-50年代，诞生了“霍桑试验”，人际关系学说和行为科学理论形成。 1.8 3.0 认为“管理就是决策”的学者是（A） ? a 赫伯特.A.西蒙 ? b 小詹姆斯.H.唐纳利 ? c 弗里蒙特.E.喀斯特 ? d 托尼.布洛克特 理解不同人中对管理的定义。 1.9某企业产品合格率目前在93%左右，计划提高产品质量，将合格率提高到96%，这个 96%称为（B） ? a 控制性目标 ? b 突破性目标 ? c 专业目标 ? d 组织目标 注意区分理解目标的分类。 1.10 3.0 通过听取专家意见进行预测的方法是（B）
F o r p e s n a u s e o n y s u d y a n d r e s a c h n o f r c m me r c a u s e 一、用“爱心”创设人际和谐的情境，是激趣乐学的前提。 苏霍姆林斯基曾说过：要像对待荷叶上的露珠一样小心翼翼地保护学生幼小的心灵。晶莹透亮露珠是可爱的、美丽的，却又十分脆弱，一不小心露珠滚落就会破碎，不复存在，所以作为教育工作者，在教学工作中应善待每一位学生，特别是对待那些后进生，就如同对待露珠一样需要教师百倍地加以呵护。用爱心去呵护他们敏感而易受伤的心灵，做好他们转变途中的护卫者和导航灯，如果教师没有良好的情绪，学生对你就会望而生畏，在噤若寒蝉的同时，向你关上了心灵的大门，积极性和主动性也就无从谈起。如果你能对他们多一些温暖和关爱，他们心灵的“高山回音”是会令你满意的。 For personal use only in study and research; not for commercial use 在教学中，教师首先要转变观念，以学习活动的组织者、引导者、参与者的角色参与到学生的学习活动之中，从而营造宽松、和谐的课堂氛围，给学生以安全感。要充分尊重和信任学生，把他们看成知识的主动探索者，创设和谐的氛围，帮助学生树立自信心，促进他们积极主动地学习。给学生关爱，就是增强他们学习积极性，提高学习效率。因此，在教学中我努力做到尊重学生的异见、宽容学生的误见、鼓励学生的创见。鼓励他们独立思考，善于持赞赏的态度正确地评价学生，使学生感觉到如迎春风，如沐春雨。“教学之无小事”，教师在课堂上的一句不经在意的话，一个不在意的眼神都会直接影响学生的心理。对完成训练的学生，给予表扬和鼓励，让学生更有自信。对待那些在训练中遇到困难的学生，也不能选择批评，不要挫伤他们自尊心，而应给予启发开导。记得有一次，我在教学“商不变”的性质时，引导学生从上到下观察15÷5=3 150÷50=3 1500÷500=3这组算式的被除数、除数各是怎样变化的？你发现了什么规律？经过学生一段时间的交流后，我发现班里学习成绩较差、课上从不发言的张猛把手举了起来。我高兴的把他叫起来，但他站在那里支吾了半天也没说出一个字。一些调皮的孩子开始讥笑他，学习好的孩子也埋怨她耽误时间。柳名脸涨的通红，低着头不时拿眼睛溜着老师和同学。从他胆怯的目光中我感觉到他想退却了。
2.
一、问题情境的含义 心理学研究表明〔创，学生最初学习时经历的认知线索直接影响着今后对相关 知识经验的提取，个体具有丰富体验的形象化、条理清楚、联系广泛的图式化 知识更有利于记忆和提取。 1.1情境教学的界定 情境教学的核心是“情境”，从词义上说，“情景”和“情境”之间是有区别的。 “情景”的“景”是具体、直观和吸引人的。“情境”的“境”是指构成和蕴涵在情景 中的那些相互交织的因素及其相互之间的关系，从内涵看，情境要比情景丰富、复杂得多。数学课程着眼于后者，但脱离了数学课程的背景，去区别这两个词，就没有意义了。无论我们谈及“情景”还是“情境”都不是观赏性的停留在表面，而是为了深入进去，研究情景背后的故事，找出与数学有关的线索。因此，在数学课程里(不是生活里)的 “情景与情境”可以看成一回事，这不会引起歧义，也方便广大教师理解。
情境教学的概念，首先由Br。wn.c。11in.Duguid在1989年一篇名为《情境认知与学 习文化》(SituatedCognitionandtheCulture。fLearning)的论文中提出的。他们 认为“知识只有在它们产生及应用的情境中刁‘能产生意义。知识绝不能从它本身所处的环境中孤立出来，学习知识的最好方法就是在情境中进行。”〔1]关于情境教学有各种 不同的表述。教育大辞典中给出这样的定义:情境教学就是运用具体生动的场景，以激 起学生主动的学习兴趣、提高学习效率的一种教学方法「2]。钟启泉教授认为“情境教 学是指创设含有真实事件或真实问题的情境，学生在探究事件或解决问题的过程中自主 地理解知识、建构意义。”〔3」李吉林老师认为:“情境教学就是从‘情’与‘境’ ‘情’与‘辞’、‘情’与‘理’、‘情’与‘全面发展’的辨证关系出发，创设典型 的场景，激起儿童热烈的情绪，把情感活动和认知活动结合起来所创建的一种教学模式。”【4]从本质上说，教学情境就是以直观方式再现书本知识所表征的实际事物或者 实际事物的相关背景。教学情境解决的是学生认识过程中的形象与抽象、实际与理论、 感性与理性、旧知与新知、背景与知识以及问题与思维的关系和矛盾。数学情境教学指 通过创设符合学生身心特点的教学情境，激发他们的认知情感，使学生在愉悦心理体验 的条件下，自主地构建知识体系的高效的教学模式。创设数学情境就是呈现给学生刺激 性的数学信息，引起学生学习数学的兴趣，启迪思维，激起学生的好奇心、发现欲，产 生认知冲突，诱发质疑猜想，唤起强烈的问题意识，从而使其发现和提出数学问题，分 析和探讨数学问题，运用所学知识解决数学问题。 6. 新课程理念下高中数学情景教学的研究冉爱凤 文章首先介绍了情景教学的概念。情景教学是指在教学过程中，教师有目的地创设 或引入一个相关问题的情境，使学生产生身临其境之感，以引起学生一定的心态和情 感体验，扩大学生的知识视野，刺激学生思考的积极性，从而启发、帮助学生掌握、 理解知识，提高分析问题、探求问题、解决问题的能力。并在此基础上介绍了情景教 学的各种理论基础:建构主义学习理论，认知主义学习理论，最近发展区理论。 德国教育家第斯多惠指出:“教学的艺术不在于传授的本领，而在于激励、唤醒、 鼓舞”，创设教学情景也是激励、唤醒、鼓舞的一种艺术。我国古代教育家孔子在其著 作《论语》中指出:“不愤不启，不启不发。”而近代心理学研究也表明:学生课堂思维 是否活跃，主要取决于他们是否具有解决问题的需要。所以，课堂上，教师应善于抓住 学生心愤口J啡的时机，使学生处于“心求追而未得，口欲言而不能”的急需状态，这样能调动起学生的求知欲望。此时，创设问题情景犹如一块石头投入学生的脑海，必会激 起思维的浪花。可见，创设问题情景是教学中的一种重要手段。通过创设情景还可以充
第4章资产负债表分析知识巩固题 一、填空题 1、严格地说，或有负债并不属于（）范畴，因而或有负债并不在（）中体现，但是必须将其在（）中进行披露。 2、会计利润与应纳税所得额之间的数量差异，一般可以分成两类：一类是（），另一类是（）。 3、从成本效益关系的角度来分析，只有当企业的（）（应当为企业的利息和税前利润与企业总资产之比）大于企业的（）时，企业才能在向资金提供者支付报酬以后使企业的净资产得到增加，企业净资产的规模得以扩大。 4、按照财务管理理论，企业筹集资金的用途决定筹集资金的类型：企业增加永久性流动资产或增加长期资产，应当通过（）（包括所有者权益和非流动负债）来解决；企业由于季节性、临时性原因造成的流动资产中的波动部分，则应由（）来解决。 二、单项选择题 1、通常情况下，固定资产的专用性在一定程度上决定固定资产的（）。固定资产的专用性越高，其市场价值的波动性就越大，至少要大大查过通用固定资产。 A 盈利性 B 周转性 C 变现性 D 时效性 E 与其他资产组合的增值性 2、交易性金融资产的计量以公允价值为基本计量属性，无论是在其取得时的初始计量还是在资产负债表日的后续计量。在分析交易性金融资产的质量时，应关注其公允价值这一计量属性，着重分析该项目的（） A 盈利性 B 周转性 C 变现性 D 时效性 E 与其他资产组合的增值性 3、长期股权投资项目的（）呈现出较大的波动性，具体要依据其投资方向、年内所发生的重大变化、投资所运用的资产种类、投资收益确认方法等诸多因素来确定。 A 盈利性 B 周转性 C 变现性 D 时效性 E 与其他资产组合的增值性
4、长期递延资产实质上是按照权责发生制原则资本化的支出，本身没有交换价值，不可转让，因而根本没有（），盈利性的大小要视具体项目情况而定 A 盈利性 B 周转性 C 变现性 D 时效性 E 与其他资产组合的增值性 5、对于预收款项、部分应付账款、其他应付款等，由于某些因素的影响，不必当期偿付，实际上并不构成对企业短期付款的压力，属于（）。 A.非流动性负债 B.非强制性负债 C.非偿付性负债 D.非流转性负债 E.非付现性负债 6、一般认为，应付票据和应付账款的规模代表了企业利用商业信用推动其经营活动的能力，也可以在一定程度上反映出企业在行业中的（）。 A.经营规模 B.采购能力 C.议价能力 D.发展潜力 E.偿债能力 7、一般地说，企业资产的总体规模会在很大程度上反映出该企业的（）。 A.行业选择 B.行业定位 C.生命周期 D.经营风险 E.竞争优势 8、一般地说，企业的资产结构（这里指经营性资产与投资性资产的相对比例）会在很大程度上反映出该企业的（）。 A.财务风险 B.竞争优势 C.生命周期 D.盈利模式 E.行业定位 9、从企业的经营实务来看，最终决定企业短期偿债能力的关键因素往往是（）。 A.流动比率 B.速动比率 C.营运资本 D.资产负债率 E.经营活动现金净流量 10、下列财务指标中不属于营运能力分析比率的是（）
管理学原理-阶段测评4（2014年版） 1.单选题 1.1 3.0 这个人能给他人特殊的利益和奖酬，你知道和他关系密切是有益的（A） 您答对了 ? a 奖励权 ? b 惩罚权 ? c 法定 ? d 专长权 奖励权指的是表扬、晋升、奖金，本题中能给他人特殊的利益和奖酬，指的是奖励权中的奖金。 1.2 3.0 领导行为四分图的纵轴与横轴分别代表（C） 您答对了 ? a 主管人员的权力与非主管人员的权力 ? b 职位权力与任务结构 ? c 体谅和体制 ? d 领导与专制领导 领导行为四分图的纵轴与横轴分别代表体谅和体制。1945年，美国俄亥俄州立大学教授斯多基尔、沙特尔在调查研究基础上把领导行为归纳为“抓组织”和“关心人”两大类。“抓组织”，强调以工作为中心，是指领导者以完成工作任务为目的，为此只注意工作是否有效地完成，只重视组织设计、职权关系、工作效
率，而忽视部属本身的问题，对部属严密监督控制。“关心 人”，强调以人为中心，是指领导者强调建立领导者与部属之间的互相尊重、互相信任的关系，倾听下级意见和关心下级。调查结果证明，“抓组织”和“关心人”这两类领导行为在同一个领导者身上有时一致，有时并不一致。因此，他们认为领导行为是两类行为的具体结合，分为四种情况，用两度空间的四分图来表示。属于低关心人高组织的领导者，最关心的是工作任务。高关心人而低组织的领导者大多数较为关心领导者与部属之间的合作，重视互相信任和互相尊重的气氛。低组织低关心人的领导者，对组织对人都漠不关心，一般来说，这种领导方式效果较差。高组织高关心人的领导者，对工作对人都较为关心，一般来说，这种领导方式效果较好。 1.3 3.0 下列不属于全面质量管理的特点的是（A） 您答对了 ? a 管理的对象是生产人员 ? b 质量管理的过程和围是全面的 ? c 参加质量管理的人员是全面的 ? d 管理质量的方法是全面的 全面质量管理的特点 （1）管理的对象是全面的 （2）质量管理的过程和围是全面的 （3）参加质量管理的人员是全面的 （4）管理质量的方法是全面的 1.4 3.0
创设乐学情境，激发学习兴趣 当前许多教师在"教"与"学"的关系上，主要以教师传授为主，采取填鸭式、注入式的方法，反映在数学教学中则是重灌轻导、重讲轻练，强调一致性，忽视学生个性发展，造成学 生被动学习，对数学学科缺乏兴趣，甚至苦学、厌学，对双基的掌握和能力的培养更无法谈及。为改变这些弊端，我在数学教学中开展了“创设乐学情境，激发学习兴趣”的操作，即通 过教师运用多变的手段，精心设计、创设愉快的学习情境，营造良好的学习氛围，有效地激 发学生的学习动机，使学生自觉自主地学习，提高教学效益。 下面就将我在小学数学教学中的一些具体作法小结如下： 一、创设人际和和谐的情境，是激趣乐学的前提 教学是教师"教"和学生"学"的双边活动，因此创设和谐的师生关系，能最大限度地提高 教学效果。在教学中我非常重视师生人格上的平等，发扬学问中的自由和组织管理上的民主（如在分组教学中大胆让小组长自己主持对学习的讨论），力争体现学生的主体地位，让学 生认识到自己就是学习的主人，从而自觉、自主地学习。 二、创设轻松的学习环境，是激趣乐学的关键 在应试教育的影响下，课堂教学仿佛套上了枷锁。因此只有创造轻松的学习环境，使学 生从应试中解放出来，才能活泼主动地学习。在教学中，我首先减轻了分数对学生的压力， 针对优、中、差三类生建立了分类学习目标，通过注重提问、练习、测查等方式使各类生均 享受到成功的喜悦；其次是不布置家庭作业，尽力使学生在课堂上就掌握所学知识；第三是 运用多变的教学方法，尽可能创造轻松、愉快、和谐的学习环境，使学生轻松地掌握所学知识。 三、创设浓郁的趣味情境，让学生体会到学习兴趣之乐 寓教学于游戏中，符合儿童的身心特点，特别是低年级儿童更喜爱游戏活动。十九世纪 德国著名教育家弗里克．福培尔曾说过，小孩的工作就是游戏。因此，在教学中适当彩游戏 的方式，学生十分欢迎，兴趣更浓，教学效果也更好。如在低年级教学中用开火车、开房门、找朋友、夺红旗、放鞭炮等游戏，使学生在轻松、愉快的气氛中学到了数学知识。 四、创设主动参与的情境，让学生体会到参与之乐 在数学教学中，根据学生的"好奇心"，充分发动学生动手实践或亲身制作学具是提高学 习兴趣的一种方法，它会使学生在实践操作中发现问题，手脑并用，通过自身的探索后获得 成功，体验到参与之乐。如在教学《长方体的表面积》时，可让学生在先课前自制一个长方体，通过各种感官理解什么是长方形的表面积，然后让学生把模型拆开，成显一个组合图形，让学生动手量出长方体的长、宽、高，引导学生仔细观察，鼓励学生用多种方法来计算长方 体的表面积，师最后通过比较、分析、归纳，得出长方形的表面积公式，学生不仅兴趣更浓，积极性高，而且通过亲身参与，印象更加深刻，记忆更加牢固。 五、创设探索、研究的情境，让学生体会到求知之乐 即：创设问题的情境，让学生带着疑问，在师的诱导下探索研究，从而激起学生求知的 需要。如：师在教学"能被 2.5整除的数"这课时，在导入新课时，师让学生任意说一个整数，师马上就能说是否能被2.5整除，这一现象使学生感到十分惊奇、羡慕，就急于知道这是为 什么，于是在师的诱导下，逐步发现能被2.5整除数的特征"，从而体验到了求知之乐。 六、创设竞争的情境，让学生得到进取之乐
第四章行业分析 第一节行业分析概述 一、单选题(以下备选答案中只有一项最符合题目要求) 1．行业是指从事国民经济中( )的经营单位和个体等构成的组织结构体系。 A．同类型产品生产B．同性质的经济社会活动 C．同性质的生产活动D．同性质的生产或其他经济社会活动 [答案] D 2．下列各项中，( )不是构成产业的特点。 A．规模性B．专业性C．职业化D．社会功能性 [答案] B [解析] 构成产业一般具有三个特点：①规模性，即产业的企业数量、产品或服务的产出量达到一定的规模；②职业化，即形成了专门从事这一产业活动的职业人员；③社会功能性，即这一产业在社会经济活动中承担一定的角色，而且是不可缺少的。 3．下列( )行业不能构成一个产业。 A．建筑业B．服务业C．国家机关D．金融业 [答案] C [解析] 行业虽然也拥有职业人员，也具有特定的社会功能，但一般没有规模上的约定，比如，国家机关和党政机关行业就不构成产业。 4．行业经济活动是( )的主要对象之一。 A．微观经济分析B．中观经济分析C．宏观经济分析D．技术分析 [答案] B [解析] 行业经济活动是介于宏观经济活动和微观经济活动中的经济层面，是中观经济分析的主要对象之一。 5．关于行业分析，下列论述不正确的是( )。 A．行业分析是对上市公司进行分析的前提 B．行业分析是连接宏观经济分析和上市公司分析的桥梁 C．行业分析是基本分析的重要环节 D．行业分析是投资成功的保障 [答案] D [解析] 行业分析是对上市公司进行分析的前提，也是连接宏观经济分析和上市公司分析的桥梁，是基本分析的重要环节。行业是决定公司投资价值的重要因素之一。 6．道一琼斯指数中所选取的工业类股票公司有( )家。 A．10 B．15 C．25 D．30 [答案] D [解析-l在道一琼斯指数中，工业类股票取自工业部门的30家公司，包括了采掘业、制造业和商业；运输业类股票取自20家交通运输业公司，包括了航空、铁路、汽车运输与航运业；公用事业类股票取自6家公用事业公司，主要包括电话公司、煤气公司和电力公司等。 7．联合国《国际标准行业分类》将每个门类又划分为( )。 A．大类、中类、小类B．A类、B类、C类 C．甲类、乙类、丙类D．Ⅰ类、Ⅱ类、Ⅲ类 [答案] A 8．在《国际标准行业分类》中，制造业部门被分为( )个大类。 A．8 B．9 C．10 D．11 [答案] B [解析] 《国际标准行业分类》中制造业部门分为食品、饮料和烟草制造业等9个大类。 9．在《国际标准行业分类》中表示某小类的若干位数代码中，( )位数字表示该小类所属的中类。
第三节情境认知学习理论 一、情境认知理论的基本观点 情境认知学习理论由美国心理学家马斯洛和罗杰斯建立并发展。英文叫做Soeial InterdependeneeTheory，由美国的约翰逊兄弟(Johnson，D。W。&Johnson，R。T。)一起发展起来1，这是当代西方学习理论领域研究的热点，这一理论强调个体心理常常产生于构成、指导和支持认知过程的环境之中，而认知过程的本质是由情境决定的，情境是一切认知活动的基础。这一理论还认为，心理与环境的互动不仅发生在高度机械的任务当中，而且也在一些日常任务之中，他们同时把学习的情境分为积极互赖(合作)、消极互赖(竞争)和无相赖(无互动)三种情况，强调知识的学习应建构在真实的活动中，同时强调学习活动与文化的结合，其主要观点包括:①人具有主动建构知识的能力；②学习是个人与情境互动的历程；③学习是从真实活动中主动探索的过程；④学习是共同参与的社会化历程；⑤学习是从周边参与扩展至核心的。 情境学习理论认为知识是在情境中建构、不能与情境脉络相分离。情境学习简单的说，情境认知与学习理论认为知识和情境活动相联系，将重点放在学习者的积极参与上，并要求学习者在不同情境中进行知识的意义协商。 二、情境认知理论对CSCL的支持 在基于情境认知理论的CSCL 学习中，学生不再是外部信息刺激的被动接受者和知识的被灌输对象，而是学习信息加工的主体和知识意义的主动建构者；教师也不再单纯是知识的传授者与灌输者，更是学生意义建构的帮助者、引导者与促进者；教材等教学资源不只是教师传递知识的载体，它所提供的知识也是学生主动建构意义的利用对象；教学媒体则是用来创设情境、进行协同学习和会话交流的工具。基于情境认知理论的CSCL可以有效组织教师、学生、教学资源和教学媒体等教学要素，让学生在教师的组织、引导和帮助下能有效地发挥自己的主动性、积极性和首创精神，参与到真实的情境中，通过自主学习、小组协作来理解和掌握知识，并运用所学的知识有效地进行意义建构。 第四节分布式学习认知理论 一、分布式学习理论的基本观点 分布式学习认知理论认为，知识是在人类社会范围内建构起来的，并被不断1魏洪伟，邸佳奇，孙惠杰.移动学习理论研究与实践[J].计算机工程与科学，2009，（9）：第136页。
小学经典古诗文诵读教学“趣赏乐学”的课堂模式【内容摘要】： 经典诵读是语文教学的重要内容,对学生的人生有着很大的影响。为了有效地提高和落实诵读的效果，要创设浓浓的诵读氛围，要培养学生，尤其是农村小学生诵读经典古诗文意义重大。经过探索，我们初步形成了农村小学经典古诗文诵读教学“趣赏乐学”的课堂模式：创设情境，激趣导入；反复诵读，感悟交流；交流质疑，拓展创新。 【关键词】：创设情境、激趣导入；反复诵读、感悟交流；交流质疑、拓展创新 【正文】： 诵读古代诗词，有意识的在积累、感悟运用中，提高自己欣赏品味和审美情趣；新试行的《小学语文新课程标准》提出第一学段背诵优秀诗文50篇（段），第二学段为50篇（段），第三学段为60篇（段）,而且在其附录的“古诗词背诵推荐篇目”就有70首。可见在背诵优秀诗文总量上是相当大的,《课程标准》在每一学段都提出让学生诵读优秀诗文，注意通过语调、韵律、节奏等品味作品的内容和情感。我校在2010年9月开展了《农村小学经典古诗文诵读探究》这一课题的探究。几年的实践探索，我们初步形成了农村小学经典古诗文诵读教学“趣赏乐学”的课堂模式：创设情境，激趣导入——反复诵读，感悟交流——交流质疑，拓展创新。 一、创设情境，激趣导入。 兴趣是学习最好的老师，如何创设情境，激趣导入呢？教师可针对学生的实际，根据古诗词的类别、写作背景以及诗词所要表达的思想感情来灵活创设情境，可采用猜谜语、讲故事、提问题、表演、音乐激趣等方法精心引导，激发学生的学习兴趣。 如，我在教学古诗《送元二使安西》时，先给学生出一个谜语，谜面是一首歌曲《朋友》，谜底是一个人物，要求学生边聆听歌曲边思考。歌曲播放完毕，学生争先恐后，各抒己见，有的说是苏轼，有的说是杜甫……学生兴趣盎然转入古诗的学习，整节课学生学习的积极性都很高，教学效果可想而知。另，我在教学生赏析思乡类古诗词时也采用了音乐激趣法，可谓“诗
第一分部财务管理部分 第四章营运资金管理 【基本要求】 1．掌握营运资金的含义与特点 2．了解现金的持有动机与成本，掌握最佳现金持有量的计算及回收管理 3．掌握应收账款的作用与成本，掌握信用政策的制定及收账政策的制定 4．掌握存货的功能与成本，掌握存货的控制方法 5．熟悉短期筹资的特点及短期银行借款、商业信用、短期融资券、应收账款转让等短期负债筹资的含义及优缺点 【考试内容】 一、营运资金内容 （一）营运资金的含义 营运资金又称循环资本，是指一个企业维持日常经营所需的资金，通常指流动资产减去流动负债后的差额。用公式表示为： 营运资金总额＝流动资产总额-流动负债总额 （二）营运资金的特点 营运资金的特点体现在流动资产和流动负债的特点上。 1．流动资产的特点 2．流动负债的特点 （三）营运资金的周转 1．存货周转期，是指将原材料转化成产成品并出售所需要的时间； 2．应收账款周转期，是指将应收账款转换为现金所需要的时间； 3．应付账款周转期，是指从收到尚未付款的材料开始到现金支出之间所用的时间。 二、现金的管理 （一）现金管理的意义 （二）现金的成本 （三）最佳现金持有量的确定 1．成本分析模式 2．存货模式
（四）现金回收的管理 现金回收管理的目的是尽快收回现金，加速现金的周转。 现金回收主要采用的方法有邮政信箱法和银行业务集中法两种。 1．邮政信箱法又称锁箱法，是西方企业加速现金流转的一种常用方法。企业可以在各主要城市租用专门的邮政信箱，并开立分行存款户，授权当地银行每日开启信箱，在取得客户支票后立即予以结算，并通过电汇将货款拨给企业所在地银行。该方法缩短了支票邮寄及在企业的停留时间，但成本较高。 2．银行业务集中法。这是一种通过建立多个收款中心来加速现金流转的方法。在这种方法下，企业指定一个主要开户行（通常是总部所在地）为集中银行，并在收款额较集中的若干地区设立若干个收款中心；客户收到账单后直接汇款到当地收款中心，中心收款后立即存入当地银行；当地银行在进行票据交换后立即转给企业总部所在地银行。该方法缩短了现金从客户到企业的中间周转时间，但在多处设立收账中心，增加了相应的费用支出。为此，企业应在权衡利弊得失的基础上，做出是否采用银行业务集中法的决策，这需要计算分散收账收益净额。 分散收账收益净额＝（分散收账前应收账款投资额-分散收账后应收账款投资额）×企业综合资金成本率-因增设收账中心每年增加费用额 （五）现金支出的管理 现金管理的另一个方面就是决定如何使用现金。企业应建立采购与付款业务控制制度，并且根据风险与收益权衡原则选用适当方法延期支付账款。 与现金收入的管理相反，现金支出管理的主要任务是尽可能延缓现金的支出时间。延期支付账款的方法一般有以下几种： 1．合理利用“浮游量”。所谓现金的“浮游量”，是指企业账户上现金余额与银行账户上所示的存款余额之间的差额。 2．推迟支付应付款。企业可在不影响信誉的情况下，尽可能推迟应付款的支付期。 3．采用汇票付款。在使用支票付款时，只要持票人将支票存入银行，付款人就要无条件地付款。但汇票不是“见票即付”的付款方式，这样就有可能合法地延期付款。 三、应收账款的管理 （一）应收账款的成本 1．机会成本
第四章市场营销环境分析 第一节市场营销环境 一、市场营销环境及其发展趋势 1、市场营销环境的涵义是指影响企业与目标顾客建立并保持互利关系等营销管理能力的各种角色和力量。 2、它可分为宏观环境和微观环境。 3、环境发展趋势基本上分为两大类：一类是环境威胁，另一类是市场营销机会。 4、分析市场营销环境的方法。 企业可以用“环境威胁矩阵”和“市场机会矩阵”来加以分析、评价。环境威胁矩阵的纵坐标是“出现威胁的概率”；横坐标是“潜在严重性”，表示盈利减少程度。市场机会矩阵的纵坐标是“成功的概率”；横坐标是“潜在吸引力”，表示潜在盈利能力。 5、理想业务、冒险业务、成熟业务、困难业务的涵义。 用用“环境威胁矩阵”和“市场机会矩阵”来分析和评价企业所经营的业务，可能会出现以下四种不同的结果： 1）理想业务，即高机会和低威胁的业务。 2）冒险业务，即高机会和高威胁的业务。 3）成熟业务。即低机会和低威胁的业务。 4）困难业务，即低机会和高威胁的业务。 二、企业对机会和威胁的反应 (一) 对机会的反应。对企业所面临的市场机会，必须慎重地评价其质量。 (二) 对威胁的反应。企业对所面临的主要威胁有三种可能选择的对策： 1、反抗。即试图限制或扭转不利因素的发展。 2、减轻。且通过调整市场营销组合等来改善环境适应，以减轻环境威胁的严重性。 3、转移。即决定转移到其他盈利更多的行业或市场。 第二节市场营销微观环境 微观环境的涵义：是指对企业服务其顾客的能力构成直接影响的各种力量，包括企业本身及其市场营销中介、市场、竞争者和各种公众，这些都会影响企业为其目标市场服务的能力 一、企业 企业本身包括市场营销管理部门、其他职能部门和最高管理层。 二、市场营销中介 1、供应商的涵义向企业供应原材料、部件、能源、劳动力和资金等资源的企业或组织。 2、商人中间商：从事商品购销活动，并对所经营的商品拥有所有权的中间商，如批发商、零售商等。 3、代理中间商的涵义：协助买卖成交、推销产品，但对所经营的产品没有所有权的中间商，如经纪 人、制造商代表等。 4、辅助商的涵义：辅助执行中间商的某些职能，为商品交换和物流提供便利，但不直接经营商品的企业或机构，如运输公司、仓储公司、银行、保险公司、广告公司、市场调研公司、市场营销咨询公司等。 三、市、场 1、市场营销学是根据购买者及其购买目的进行市场划分的。
管理学原理-阶段测评1（2014年版） 1.单选题 1.1 管理过程学派强调的是（A） 您答对了 a管理是让别人同自己去实现既定目标的过程b管理的核心是提高劳动生产率 c在管理中要重视人的因素d要建立正式的、非人格化的组织体系 管理过程学派的研究对象就是管理的过程和职能。他们认为，管理就是在组织中通过别人或同别人一起完成工作的过程。 1.2 认为“管理就是决策”的学者是（A） 您答对了 a西蒙b小詹姆斯c弗里蒙特d托尼·布洛克特 作为管理学科的一个重要学派，决策理论学派着眼于合理的决策，即研究如何从各种可能的抉择方案中选择一种“令人满意”的行动方案。赫伯特·西蒙是决策学派的主要代表人物。该学派吸收了系统理论、行为科学、运筹学和计算机科学等学科的研究成果，在二十世纪七十年代形成了一个独立的管理学派。 1.3 教育水平属于外部环境的（C）因素 您答对了 a政治b经济c社会d技术 政策相关的的是政治环境、与经济相关的是经济环境、与社会发展相关的是社会因素 1.4 个人道德表现为道德价值在于维护传统秩序和受他人期望影响、表明该人道德发展处于（A） 您答对了 a前惯例阶段b惯例阶段c后惯例阶段d原则阶段 前惯例阶段是根据行为的直接后果来进行推理。前习俗水平包括道德发展的第一阶段和第二阶段，都纯粹只是关心自己，表现出利己主义倾向。 在第一阶段，个体关注行为的直接后果与自身的利害关系。 在第二阶段，个体持“对我有何益处”的立场，将正确的行为定义为对自己最有利的行为。第二阶段的道德推理，显示对其他人的需要兴趣有限，而只关注自己是否得到更多的利益，第二阶段的观点经常被视为道德相对主义 1.5 法约尔被誉为（A）之父。 您答对了 a管理过程b科学管理c组织管理d人事管理 法约尔被誉为管理过程理论之父 1.6 容器制造商处于（A）环境 您答对了 a简单和稳定的环境b复杂稳定的环境c简单和动态的环境d复杂动态环境 简单和稳定的环境：标准挂衣架制造商、容器制造商、啤酒经销商 复杂稳定的环境：医院、大学、保险公司、汽车制造商 简单和动态的环境：唱片公司、玩具制造商、时装加工商
1.情景教学法研究的国外发展现状 情景教学法创设之初，其代表人物英国学者霍恩比和帕尔默认为口语是语言的基础，结构是讲话能力的核心，应在情景中通过口头练习来学习语言结构，强 调语言在情景中的应用。英国学者霍恩比在1954年的《成人牛津英语教程》中，极其详细的分析了情景教学法的应用。在他的著作《结构性词汇和句型的教学》 中，也非常细致的阐述了如何在教学过程中运用情景教学模式，他认为把实践活 动加入到情景教学过程中可以提升课堂教学效果。 自上个世纪九十年代以来，运用情景教学法引导课堂进程引入了大部分的英语教材中。例如《新概念英语》，正是因为使用了情景教学方法，这本教材才被 世界各国大部分的学校所采用。随着教育的发展，情景化教学模式趋于成熟和系 统化。例如苏霍姆林斯基所强调的自然情景的教育作用，为了使学生能在愉快的 气氛中获得知识，他经常带领孩子们去观察和体验大自然，发展学生的想象力和 审美能力，激发他们的学习兴趣。为了更好实现这样的教学目的，他还特地为孩 子们制作了长达300多页的《大自然的书》，书中的每一页都能通过生动鲜明的 情景激发孩子们的学习兴趣(丘燕萍，2015)。1996年希拉里·麦克莱伦通过整 理美国《教育技术》专栏中的论文，出版了《情境学习的观点》一书，该书被视 为情景认知学习理论研究的阶段性成果，涵盖了理论与实践的研究，并在此后的 发展中逐渐渗透到教育研究的各个领域。 通过对国外情景教学研究成果的整理和研究发现，纵然情景教学法在国外发展的过程中形成了很多优秀的成果，但是为了适应不断发展的教育形式，情景教 学法的内容仍需完善，可查询的情景教学法应用于具体教学模块的研究仍较少， 并且在研究过程中，应不只拘泥于单纯的情景教学法的研究，也要注重情景教学 法的理论和实践方法的结合，还应结合不断变化的教育形式，加入更多的创新因 素进行更广泛的研究。（情景教学法在高中英语情态动词教学中的应用研究） 2.国外关于情景教学法的研究 情景方法在20世纪_50年代受到欢迎，20世纪50年代初，研究情景教学方法的 主要代表人物霍恩比出版了许多英语教学杂志，后来情景方法变得普遍。 美国教育家Dowey C 1992)对情景进行了有益的探索研究。他认为在教学过程 中应该根据教学目的设置教学情景。Dowey C 1993)推出了情景法即暗示性教学，并 且九年后在保加利亚取得了惊人的教学成果。暗示性教学的资源是语言情景教学。其 目的是为了创造更高的动力，激发学生的潜力，试图为来自世界各地的学生组织各种 无意识因素、无国界的沟通(柯芳美，2000:134-136) o 随着建构主义学习理论的出现，情景方法有了很大的发展理论基础。建构主义学 习理论是人们根据他们的经验来获得知识和意义，所以建构主义学习可以在某些情景 下被视为意义建设的过程。教师们担任协调人，其职责是帮助学生形成自己的理解。 这种现代西方学习理论的问题就是情景的实现与学习。这种理论认为所有的研究应该 基于情景和获得的知识。更多的研究表明，在具体情景下获得的知识是有用的。 20世纪80年代初，Richards, J. C. &Rodgers T. S. (1999 )出版的书The School of Language and Teaching中，两位作者总结了情景教学方法的特点。为了避免混 淆，他们采用情景语言教学(SLT)。从八十年代中期到现在，情景教学方式得到越来 越多的改善和发展。 3，国外关于情景教学法的研究现状