人体胃细胞7天更新一次; 皮肤细胞28天左右更新一次; 肝脏细胞180天更换一次; 红血球细胞120天更新一次; 在一年左右的时间，身体98%的细胞都会被重新更新一次。而骨细胞更新需要7年。所以，不管你要美容、减肥、改善亚健康的问题，都需要耐心，要坚持!!给身体一点时间，改变自己!用科学的方法，针对性的配方。让自己越来越健康，越来越美丽! 什么是调整反应?
调整反应，中医称之为“瞑眩反应”，在保健及调理过程中，必然会有各种各样的调整反应。《书经》称“药不瞑眩,厥疾勿瘳”，其意为服药后,若人体没有明显的反应,则疾病难以被治愈。我们体会,虽服药愈病并非均有明显反应,但若药后有较明显反应者常收效较好。 一、皮肤痒 糖尿病，血糖不稳定，肾病，肝胆类疾病，寄生虫病，肿瘤，内分泌紊乱的必然反映，是大量废物，病毒从皮肤排泄的表现。 1、白细胞吞噬能力增强，皮部组织出现奇痒，病变部位气血流通了。 2、肾功能不好，气滞血淤的人，会反映皮肤奇痒无比，是皮肤无法应对大量毒素的排出。 3、皮肤出现小红肿，小红块，风疹块，呕吐，是胆囊炎，胆汁返流性疾病的一种表现，人体血液、体液内的废物在皮肤弱酸环境中的反映。皮肤承受不了调节，产生各种新的瘀堵，这是暂时的。 4、皮肤溃烂，流水，脱皮，局部肿大，是皮肤微循环瘀堵，流通不畅的一种表现，是原来瘀堵和病变的局部被打通了。
5、淋巴痛，咽喉红肿，口腔内痒，咳嗽，这是淋巴结，咽喉，等有疾病或瘀堵，病毒结合物，废物体，淤血点，粘膜内废物开始松动或分解，疏通。 6、头皮痒、头屑多，这是典型的肾阳虚反映，原来瘀堵在头皮的毛囊内脂肪和废物被大量排出后产生的适应感觉 二、各种疼痛 各种疼痛，是由于血流量增强，硬化萎缩，瘀堵的微血管开始恢复弹性，后面推，前面堵，会牵拉周围的组织，就会反映疼痛，有的人反应强烈，有的人反应弱; 1、局部肌肉酸痛，胀痛，刺痛，这是肌肉微循环严重堵塞。 2、关于胯骨，颈椎，腰椎，酸痛，刺痛，痛无定处，这是关节炎，风湿性，类风湿性、股骨头炎的一种表现，越痛说明越严重。 3、意想不到的局部出现疼痛，说明这个部位有淤积。 4、全身无力，全身酸痛，或者发烧，这是月风病，风湿类疾病，心脏病，痛风病的反映，巨噬细胞吞噬病毒的能力增强了，机体应变能力差，暂时不能适合新的平衡。
细胞周期调控的研究进展 高燕,林莉萍,丁健 * (中国科学院上海生命科学研究院药物研究所,国家新药研究重点实验室, 中国科学院研究生院,上海 201203 摘要 :细胞周期是一种非常复杂和精细的调节过程,有大量调节蛋白参与其中。此过程的核心是细 胞周期依赖性蛋白激酶 (CDKs。 CDKs 的激活又依赖于另一类呈细胞周期特异性或时相性表达的细胞周期蛋白 (cyclins,而 CDKs 调节的关键步骤是细胞周期检查点。 PLKs 是多种细胞周期检查点的主要调节因子, Aurora 蛋白激酶主要在细胞有丝分裂期起作用。本文就上述因素在细胞周期进程中的作用作一综述。 关键词 :细胞周期;调控;细胞周期检查点中图分类号:Q253文献标识码:A A review: cell cycle regulation GAO Yan, LIN Li-Ping, DING Jian* (State Key Laboratory of Drug Research, Shanghai Institute of Materia Medica, Shanghai Institues for Biological Sciences, Chinese Academy of Sciences, Graduate School of the Chinese Academy of Sciences, Shanghai 201203, China
Abstract: The cell cycle is a complex and elaborate process involving numerous regulatory proteins as directors.Central to this process are the cyclin-dependent kinases (CDKs, which are activated in a cyclin-dependentmanner at special points of the cell cycle. Cyclin protein levels rise and fall during the cell cycle and in the waythey periodically activate CDKs. Furthermore, the cell cycle checkpoint is also discussed as a key process inthe regulation of CDKs. PLKs are important mediators for various cell cycle checkpoints, while Aurora kinaseshave emerged as essential regulators of cell division. Here, we reviewed the effects of above factors on cellcycle regulation. Key words: cell cycle; regulation; cell cycle checkpoint 收稿日期 :2005-01-22; 修回日期 :2005-03-09 作者简介 :高燕 (1974— ,女,博士研究生;林莉萍 (1962— ,女,博士,副研究员;丁健 (1953— ,男, 研究员,博士生导师, *通讯作者。 文章编号 :1004-0374(200504-0318-05 1概述 细胞周期是指一次有丝分裂结束到下一次有丝分裂的结束 , 细胞由一个分裂为两个子细胞。细胞的分裂由两个连续的过程组成, 即 DNA 复制及染色体的分离。一个细胞周期包括准备阶段的间期和有丝分裂期 (图 1 。间期包括 G 1、 S 和 G 2期。 G 1期时,细胞为遗传物质 DNA 的合成作准备,而 DNA 的合成是在 S 期完成。 G 2期主要完成蛋白质的合成,为细胞进入有丝分裂期作准备。有丝分裂期 (M期又分为前期、中期、后期和末期,以完成染色体的凝集,中心粒移至细胞核对立的两极,核仁解体,核膜消失 (前期 ; 纺锤体形成和染色体排列于其间 (中期 ; 姐妹染色单体分开并移向两极 (后期 ; 子核形成和胞质分裂 (末期。另外, G 1期的 319
细胞生长状况有关指标的检测方法 一、细胞计数 这是细胞培养中常用的基本技术之一。所用材料为细胞计数板。巴氏吸管和显微镜。步骤如下。 l 取清洁计数板和专用盖玻片，用丝绸布轻轻擦干。 l 取细胞悬液0.3ml，加入0.9结晶紫染液，混匀后滴半滴于细胞计数板内，以充满不外溢为宜。也可直接将细胞悬液在一侧滴加到盖玻片中，不要溢出，也不要过少或出现气泡。 l 在显微镜下用10X物镜观察计数四角大方格中的细胞数。代入下式得出细胞密度。 细胞数（ml）=（4大格细胞数之和/4）×104×稀释倍数 台盼蓝染色法可计算出活细胞和死细胞数以测定细胞存活百分率。一般0.5%-1.0%的台盼蓝染液可使死细胞染成蓝色，活细胞不着色。此外还可用0.02%的藻红b染液将死细胞或受损细胞染成红色，或用0.05%的苯胺黑染液将死细胞染成黑丝。 细胞存活率=[4大格活细胞数/（4大格活细胞数+4大格死细胞数）]×100% 在进行细胞计数操作时，必须把细胞悬液准备好，细胞应分散良好，并充分混匀，若出现较多细胞团或细胞数少于200个/10mm2或多于500个/100mm2时，需重制细胞悬液，重新计数。 二、细胞生长曲线和生长倍数 细胞生长曲线是细胞培养实验中最基本的指标，是测定细胞绝对增值数值和生长繁殖基本规律常用的简便方法。常用的方法为：在同一规格的培养瓶中，接种等量的同一代细胞，经培养后每隔24h取出几瓶细胞进行计数，以培养时间为横坐标，不同时刻的细胞数的对数为纵坐标，标出各点并连成线，即为该细胞的生长曲线，可反映出细胞生长的动态。 测定生长曲线的另一种方法是用96孔/24孔细胞培养板，分7组，每组3孔，培养1周（7天），期间逐日检测一组，计数，最后把7天中的细胞数值绘成图，即为细胞生长曲线。 也可采用MTT法来进行生长曲线测定。 标准的细胞生长曲线近似“S”形，一般在传代后第一天细胞数有所减少，经过一段时间的潜伏期，再进入对数生长期，达到平台期后生长稳定，最后衰老。
细胞研究进展概述——干细胞技术 20092358 谢芬霏16120901 生物技术 摘要：干细胞是人体及各种组织细胞的最初来源，具有高度自我复制、高度增殖和多项分化的潜能。干细胞的研究正在向现代生命科学和医学等各个领域交叉渗透，干细胞的研究也成为了生命科学的热点，本篇就几个干细胞的研究方向的进展展开一些介绍。 关键词：干细胞；多能性；神经干细胞；造血干细胞 引言： 干细胞是一类具有自我复制能力的多潜能细胞，在一定条件下，它可以分化成多种功能细胞。根据干细胞所处的发育阶段分为胚胎干细胞(embryonic stem cell，ES细胞)和成体干细胞(somatic stem cell)。根据干细胞的发育潜能分为三类：全能干细胞(totipotent stem cell,TSC)、多能干细胞（pluripotent stem cell）和单能干细胞（unipotent stem cell）。干细胞(Stem Cell)是一种未充分分化，尚不成熟的细胞，具有再生各种组织器官和人体的潜在功能，医学界称为“万用细胞”。干细胞的形态上具有共性，通常呈圆形或椭圆形，细胞体积小，核相对较大，细胞核多为常染色质，并具有较高的端粒酶活性。胚胎干细胞(Embrtibuc stem cell)的发育等级较高，是全能干细胞（Totipotent stem cell），而成体干细胞的发育等级较低，是多能干细胞或单能干细胞。据最新研究发现，成体干细胞可以横向分化为其他类型的细胞和组织，为干细胞的广泛应用提供了基础。在胚胎的发生发育中，单个受精卵可以分裂发育为多细胞的组织或器官。在成年动物中，正常的生理代谢或病理损伤也会引起组织或器官的修复再生。胚胎的分化形成和成体组织的再生是干细胞进一步分化的结果。胚胎干细胞是全能的，具有分化为几乎全部组织和器官的能力，而成体组织或器官内的干细胞一般认为具有组织特异性，只能分化成特定的细胞或组织。 1 胚胎干细胞 1.1 胚胎干细胞的概念和生理学特性 胚胎干细胞（Embryonic Stem cell，ES细胞）。胚胎干细胞当受精卵分裂发育成囊胚时，内层细胞团（Inner Cell Mass）的细胞即为胚胎干细胞。胚胎干细胞具有全能性，可以自我更新并具有分化为体内所有组织的能力。胚胎干细胞的生物学特性有：①全能性，在体外培养的条件下, 胚胎干细胞可以诱导分化为机体的任何组织细胞。全能性的标志是细胞表面有胚胎抗原和Oct4蛋白【1】。②无限增殖性。胚胎干细胞在体外适宜条件下, 能在未分化状态下无限增殖。③胚胎干细胞具有种系传递的功能。④胚胎干细胞易于进行基因改造操作。⑤细胚胎干胞保留了正常二倍体的性质且核型正常。早在1970年Martin Evans已从小鼠中分离出胚胎干细胞并在体外进行培养【2】，而人的胚胎干细胞的体外培养直到最近才获得成功。进一步说，胚胎干细胞（ES细胞）是一种高度未分化细胞。它具有发育的全能性，能分化出成体动物的所有组织和器官，包括生殖细胞。研究和利用ES细胞是当前生物工程领域的核心问题之一。ES细胞的研究可追溯到上世纪五十年代，由于畸胎瘤干细胞（EC细胞）的发现开始了ES细胞的生物学研究历程。目前许多研究工作都是以小鼠ES细胞为研究对象展开的，如：德美医学小组在去年成功的向试验鼠体内移植了由ES细胞培养出的神经胶质细胞。此后，密苏里的研究人员通过鼠胚细胞移植技术，使瘫痪的猫恢复了部分肢体活动能力。随着ES细胞的研究日益深入，生命科学家对人类ES细胞的了解迈入了一个新的阶段。在98年末，两个研究小组成功的培养出人类ES细胞，保持了ES细胞分化为各种体细胞的全能性。这样就使科学家利用人类ES细胞治疗各种疾病成为可能。然而，人类ES 细胞的研究工作引起了全世界范围内的很大争议，出于社会伦理学方面的原因，有些国家甚至明令禁止进行
细胞周期的划分及各期特点 【摘要】本文主要是对细胞周期的划分进行简单描述，对细胞周期各个时期的特点进行归纳整理。 【关键词】细胞周期；蛋白质； DNA； 细胞增殖周期，简称细胞周期(cell cycle)，是指连续分裂的细胞从一次有丝分裂结束到下一次有丝分裂完成所经历的整个过程。一个细胞周期包括两个阶段：分裂间期和分裂期，分裂间期分G1、S和G2期。分裂期又分为分裂前期、分裂中期、分裂后期和分裂末期。细胞在分列前，必须进行一定的物质准备。在细胞分裂期中，不仅要进行DNA复制，还要进行RNA和蛋白质的合成。 1.分裂间期 间期分为DNA合成前期（G1期）、DNA合成期（S期）、DNA合成后期（G2期）三个阶段。 1.1 G1期 是指从有丝分裂完成到DNA复制之前的这段时间，又称DNA合成前期。G1期是一个生长期，在这一时期主要进行RNA和蛋白质的生物合成，并且为下阶段S期的DNA合成做准备。 在这一时期mRNA、rRNA、tRNA的合成加速，导致结构蛋白和酶蛋白的形成。G1期又分为G1早期和G1晚期两个阶段；细胞在G1早期中合成各种在G1期内所特有的RNA和蛋白质，而在G1晚期至S期则转为合成DNA复制所需要的若干前体物和酶分子，包括胸腺嘧啶激酶、胸腺嘧啶核苷酸激酶、脱氧胸腺嘧啶核苷酸合成酶等，特别是DNA聚合酶急剧增高。这些酶活性的增高对于充分利用核酸底物，在S期合成DNA是不可少的条件。 在此期中，细胞要发生一系列生物化学变化，其中最主要的是要合成一定数量的RNA和某些专一性的蛋白质。有些学者把这种蛋白质称为触发蛋白（trigger protein）,触发蛋白的积累有助于细胞通过G1期的限制点进入S期。这种蛋白又称为不稳定蛋白，简称U蛋白。此外，在G1期中还有Hl组蛋白的磷酸化，脱氧核苷的库存增加等变化。Groppi和Coffino发现，G1期也有组蛋白的合成。在G1期中产生了一种称为抑素的物质，与细胞停留在G1期有关。抑素是一种水溶性物质，具有不可透析性、热不稳定性和能为乙醇沉淀等性质，Honk等人为，肿瘤细胞之所以无节制的加速繁殖，是由于对抑素的敏感性降低了。 1.2 S期
人的寿命与细胞分裂周期和代谢周期 这是美国学者海尔弗利在1961年提出来的。他根据实验研究发现动物胚胎细胞在成长过程中，其分裂的次数是有规律的，到一定阶段就出现衰老和死亡。这与细胞分裂的次数和周期有关。二者相乘即为其自然寿命。海尔弗利的具体实验情况是这样的：他将婴儿的细胞放在培养液中一次又一次地分裂，一代又一代地繁殖，但当细胞分裂到50代时，细胞就全部衰老死亡。他又在大量实验资料的基础上，提出根据细胞分裂的次数来推算人的寿命，而分裂的周期大约是2．4年，照此计算；人的寿命应为120岁。鸡的细胞分裂次数是25次，平均每次分裂的周期为一年零两个月，其寿命为30年。小鼠细胞的分裂次数是12次，分裂周期为3个月，其寿命为3年。 人体的自然寿命约120岁，而组成人体组织的细胞寿命有显著差异，根据细胞的增殖能力，分化程度，生存时间，可将人体的组织细胞分为四类： ①更新组织细胞：执行某种功能的特化细胞，经过一定时间后衰老死亡，由新细胞分化成熟补充，如上皮细胞、血细胞，构成更新组织的细胞可分为3类：a干细胞，能进行增殖又能进入分化过程。b过渡细胞，来自干细胞，是能伴随细胞分裂趋向成熟的中间细胞，c 成熟细胞，不再分裂，经过一段时间后衰老和死亡。 ②稳定组织细胞：是分化程度较高的组织细胞，功能专一，正常情况下没有明显的衰老现象，细胞分裂少见，但在某些细胞受到破坏丧失时，其余细胞也能进行分裂，以补充失去的细胞，如肝、肾细胞。 ③恒久组织细胞：属高度分化的细胞，个体一生中没有细胞更替，破坏或丧失后不能由这类细胞分裂来补充。如神经细胞，骨骼细胞和心肌细胞。 ④可耗尽组织细胞：如人类的卵巢实质细胞，在一生中逐渐消耗，而不能得到补充，最后消耗殆尽。 细胞的生命周期：连续分裂的细胞，从一次分裂完成时开始到下一次分裂完成时为止。细胞周期包括细胞分裂期和分裂间期（前、中、后、末）。 人体的细胞众多，各自的生活周期都是不一样的。 人体各种细胞的生命周期 据英国《每日邮报》报道，很多人担心衰老，但很少有人意识到，不管你的寿命多长，你身体的某些部分其实只有几周甚至几天的寿命。这是因为它们在不断进行自我更新。以下就是身体各部位的寿命： 1.肠细胞的寿命：2-3天 肠上分布着肠绒毛，这些肠绒毛是小的手指状的触角，可增大表面积帮助肠吸收营养。巴特与伦敦医院的免疫学教授汤姆·麦克唐纳德解释说，它们更新速度极快，每2到3天更新一次。这是因为它们经常暴露在化学物如分解食物的高腐蚀性胃酸中，因此它们通常饱受折磨。肠的其他部分通过一层粘液进行自我保护，虽然这种屏障无法长久抵御胃酸，所以，这些位置的细胞的自我更新频率为3到5天。 2.味蕾细胞的寿命：10天 英国牙医协会的科学顾问达明·维穆斯莱教授解释说，舌头上有大约9000个味蕾，帮助我们感受甜、咸、苦或者酸味。味蕾本身是舌头表面细胞的集合，每个味蕾有大约50个味觉细胞。味蕾一般只需要10天到2周便会自我更新一次。但是，任何引起发炎的因素如感染或者吸烟都会损害味蕾，影响它们的更新，减弱它们的敏感性。 3.肺细胞的寿命：2-3周 英国肺脏基金会副主席基思·普罗斯解释说，肺细胞不断自我更新。但是，肺有不
人体各大器官细胞的更新周期 肝细胞的寿命只有5个月 由于血液供应充足，肝脏自我恢复和再生的能力惊人。这意味着它把毒素排出体外的重要工作可以继续下去。如果你奇怪为什么就连酒鬼的肝功能有时候也会提高，这是因为肝细胞只有150天左右的寿命。英国莱斯特皇家医院的肝脏外科医生大卫·劳埃德解释说：“我可以在一次手术中切除患者肝脏的70%，只要两个月的时间，大约90%的肝就会长出来。” 但是，酗酒者的软组织细胞（肝脏的主要细胞）可能会逐渐受损，形成疤痕组织，也叫硬化。因此，虽然健康的肝可以不断自我更新，而硬化损伤是永恒的，有时甚至是致命的。 味蕾的寿命仅仅10天 英国牙医协会的科学顾问达明·维穆斯莱教授解释说，舌头上有大约9000个味蕾，帮助我们感受甜、咸、苦或者酸味。味蕾本身是舌头表面细胞的集合，每个味蕾有大约50个味觉细胞。味蕾一般只需要10天到2周便会自我更新一次。但是，任何引起发炎的因素如感染或者吸烟都会损害味蕾，影响它们的更新，减弱它们的敏感性。 大脑的寿命和你自己的寿命相同 英国巴特与伦敦医院的神经外科专家约翰·瓦德莱指出，能持续终身的大多数细胞是在大脑中发现的。瓦德莱说：“我们的脑细胞约有1000亿个，出生时数量已固定，我们大脑的大部分不会随老化而自我更新。” 事实上，我们的确会损失细胞，这就是患上痴呆症的根本原因以及头
部受伤破坏性很大的原因。瓦德莱说：“但是，大脑有两个部位的细胞会自我更新，支配我们嗅觉的嗅球和用于学习的海马状突起。” 脑细胞处在一种连续不断地死亡且永不复生增殖的过程，死一个就少一个，直至消亡殆尽。这是一种程序性死亡，也叫凋亡。人到20岁之后,脑细胞就开始以每天10万个速度递减，减少的都是那些闲置的，呀不经常通电的，也就是不用的，爱因斯坦的大脑利用为11%，平常人一般3--6%吧 心脏干细胞的寿命是20年 之前人们一直以为心脏不能自我更新。但是，纽约医学院的一项研究发现，心脏上布满不断自我更新的干细胞，它们一生中至少更新2到3次。 肺表面细胞的寿命大约是2到3周 国肺脏基金会副主席基思·普罗斯解释说，肺细胞不断自我更新。但是，肺有不同的细胞，它们的更新速度不同。位于肺部深处的用来交换氧气和气体的气泡或者气囊细胞更新过程稳定，需要约1年的时间。与此同时，肺部表面的细胞必须每隔2到3周进行自我更新。普洛斯博士说：“它们是肺的第一道防线，因此必须快速更新。”肺气肿会阻止这种更新，因为这种病源自气泡的破坏，肺壁上形成了永久性的“洞”。 眼睛的寿命也和你的寿命相同 眼睛是身体中为数较少的在你的生命期间不会改变的身体部分之一。眼部唯一不断更新的部位是角膜。英国视光师学院的院长罗伯·霍根表示，如果角膜受损，它能在24小时内复原。霍根说：“角膜必须有一个平滑的
Modfit分析细胞周期指南 本指南只提供在guava流式细胞分析仪上使用细胞周期模块分析后产生的数据,其它请参阅产品使用说明书,本指南仅供参考。 一.概述 细胞周期的概念:细胞由一次分裂结束到下一次分裂结束,都要经历相同的变化阶段(即G1→S→G2→M )周而复始地进行活动,细胞的这种生长、分裂循环即称为细胞周期(cell cyc1e)。一个细胞周期包括有丝分裂期(M)与分裂间期(G1、S、G2)。尽管在各种细胞中各期所占时间都不尽相同,但相对而言M期最短,S期却较长。 分裂间期: 1 、G1期,前一次有丝分裂完成到S期开始。各种与DNA复制有关的酶明显增多,线粒体、叶绿体、核糖体增多,内质网在更新扩大,高尔基体、溶酶体都增加,中心粒彼此分离、复制。 2、S期:DNA、组蛋白合成 3、G2期, S期结束后到有丝分裂开始。由上可以瞧出G2期、S期、M期反映了细胞的增殖活性,特别就是G2期、S期(因M期较短)。因而,G2/M％+S％反映了细胞增殖能力。二者有无差别要进行统计检验。 细胞周期阻滞:对于生殖细胞及保持增殖能力的细胞(如干细胞),由于细胞不断的增殖, 细胞总就是处于从G1 、S、G2 与M 期的连续的细胞周期中。在细胞周期的各阶段, 细胞分别进行着DNA 复制、蛋白质合成及细胞分裂等重要的生理活动。每一阶段都就是下一阶段的准备期, 真核细胞可以在启动下一个周期前监测与一个细胞周期顺利完成相关的生化事件,这包括各种体内外因素威胁下游事件进行时可逆地将细胞周期阻滞在特定的生理阶段的能力,而这种特定的生理阶段称为检定点(checkpoint) 。只有前一阶段的生理活动完成后,才能通过称为检定点的阶段,进入周期的下一步,一些突发事件引发的细胞反应能影响驱动细胞周期前进的因子,从而使细胞周期停滞在检定点, 这被称为细胞周期阻滞(cell cycle arrest)。 比较相应的细胞G1 、S、G2 期差异有无统计学意义,才能说有无细胞周期阻滞。 第一张图:增值率S(合成期)＋G2/M(合成后期/分裂期):21、7％ 第二张图:增值率S(合成期)＋G2/M(合成后期/分裂期):19、6％ 据此分析两者的增值没有明显的差别。虽然第二张图比第一张图的S期有所增高,但G2期下
细胞周期 1 [提示] 选择题 1．下列那种不是高等哺乳动物细胞的增殖方式（）。 A．无丝分裂 B．有丝分裂 C．减数分裂 D．出芽生殖 E．以上都不是 2．有性生殖个体形成生殖细胞的特有分裂方式为（） A．无丝分裂 B．有丝分裂 C．减数分裂 D．出芽生殖 E．对数分裂 3．哺乳动物细胞周期各时期中，（）是细胞生长的主要阶段，在周期时间中占的比例最大 A．DNA合成前期 B．DNA合成期 C．DNA合成后期 D．有丝分裂前期 E．有丝分裂中期 4．（）是细胞有丝分裂开始的标志。 A．染色质组装成染色体 B．有丝分裂器的形成 C．核被膜和核仁的消失 D．收缩环的形成 E．核被膜的重建 5．染色体上有（），是动粒微管和染色体连接的部位。 A．端粒 B．随体 C．动粒 D．染色体长臂 E．染色体短臂 6．有丝分裂中期发生的主要事件有（）。 A．染色质组装成染色体 B．有丝分裂器的形成 C．核被膜和核仁的消失 D．收缩环的形成 E．核被膜的重建 7．目前认为核被膜破裂是由于核纤层蛋白（）的结果。 A．去磷酸化 B．磷酸化
C．水解 D．羟基化 E．脱氨基 8．关于细胞周期限制点的表述，错误的是（）。 A．限制点对正常细胞周期运转并不是必需的 B．它的作用是细胞遇到环境压力或DNA受到损伤时使细胞周期停止的"刹车"作用，对细胞进行进入下一期之前进行"检查"。 C．细胞周期有四个限制点：G1/S、S/G2、G2/M和M/ G1限制点 D．最重要的是G1/S限制点 E．G2/M限制点控制着细胞增殖活动的进程，是细胞增殖与否的转折点。 9．下列说法，错误的是（） A．周期素蛋白与cdk以周期素蛋白–cdk复合体的形式发挥作用 B．周期素蛋白是该复合物的调节亚单位，cdk是催化亚单位 C．cdk催化细胞周期下游丝氨酸/苏氨酸（serine/threonine, Ser/Thr）蛋白的磷酸化D．周期素蛋白专门结合cdk来调节cdk对蛋白磷酸化的能力 E．CKI能竞争性地与cdk结合，抑制其活性。 10．下列说法正确的是（）。 A．周期素蛋白在细胞周期的不同阶段表达，具有细胞周期时相的特异性 B．分裂间期素蛋白包括D、E、A C．分裂期周期素蛋白为周期素蛋白B和E D．周期素蛋白A是Ｇ1期进展的限速调节因子 E．周期素蛋白独立具有推动细胞周期进展的作用 11．哺乳动物细胞首要的检查点是： A．R点 B．G2期检查点 C．M期检查点 D．S期检查点 E．以上都不是 12．正常细胞生命活动中可能发生的细胞周期时相顺序是： A．G1→M→G2→S→G1 B．G1→G2→M→S→G1 C．G1→S→G2→M→G0 D．G0→M→G0 E．G0→S→G0 13．染色体向极运动过程中会发生： A．极微管负极解聚 B．极微管正极解聚 C．对侧极微管重叠部产生反向滑动 D．对侧极微管重叠部产生同向滑动 E．纺锤体长度不变 14．MPF 的分子组成是： A．CDK2和cyclinB B．CDK1和cyclinB C．CDK2和cyclinA
o a b c d e f 图1 o a b c d e f 图2 o a b c d e f 图3 o a b c d e f 图4 细胞周期 1．下表数据为实验测得体外培养的某种细胞的细胞周期各阶段时间（单位：小时） 周期 G 1 S G 2 M 合计 时长（h ） 10 7 3.5 1.5 22 根据上表及相关信息，以下说法错误的是 A ．在周期中，细胞核的消失与出现都发生在M 期 B ．在周期中，G 1期主要完成有丝分裂所需蛋白质的合成 C ．若在上述细胞的培养液中加入一定量的DNA 合成抑制剂，处于S 期的细胞会被抑制 D ．若在上述细胞的培养液中加入一定量DNA 合成抑制剂，加入后15小时，除原S 期细胞外其他细胞都被抑制在G 1、S 期交界处 2．若在肿瘤细胞培养液中加入用3 H 标记的胸腺嘧啶脱氧核苷酸，短暂培养一段时间后，洗去3 H 标记的胸腺嘧啶脱氧核苷酸。使在该段时间内已处于DNA 复制期不同阶段的全部细胞中DNA 被3H 标记，而当时处于其它时期的细胞则不带标记。不同时间取样做细胞放射性自显影，找出正处于有丝分裂的分裂期细胞，计算其中带3 H 标记的细胞占有丝分裂细胞的百分数。得到下图（图1～图4中横轴为时间，纵轴为带标记细胞占总细胞数的百分数），下列叙述错误的是 A ．图2中a 点开始检测到带3H 标记分裂期细胞，则o-a 为G 2期时间 B ．图2中b 点带3 H 标记分裂期细胞数开始达到最大值，则a-b 段表示分裂期时间 C ．图3中c 点时，带标记的细胞百分数开始下降，则a-c 段表示S 和分裂期时间 D ．ae 可表示一个完整的细胞周期时间 3．细胞周期包括分裂间期（分为G 1期、S 期和G 2期）和分裂期（M 期）。下图标注了甲动物（体细胞染色体数为12）肠上皮细胞的细胞周期各阶段的时长及DNA 含量。请回答下列问题： （1）若用含放射性同位素的胸苷（DNA 复制的原料之一）短期培养甲动物肠上皮细胞后，处于S 期的细胞都会被标记。洗脱含放射性同位素的胸苷，换用无放射性的新鲜培养液培养，定期检测。预计最快约________h 后会检测到被标记的M 期细胞。 （2）从被标记的M 期细胞开始出现到其所占M 期细胞总数的比例达到最大值时，所经历的时间为________期的时间，处于该期的一个细胞中染色体数目的变化情况是 。 （3）若向甲动物肠上皮细胞培养液中加入过量胸苷，处于S 期的细胞立刻被抑制，而处于其他时期的细胞不受影响。预计加入过量胸苷约________h 后，细胞都将停留在S 期。
《细胞周期》 ★细胞的最终命运： 细胞分裂及生长（相关物质准备）→细胞增殖（受到严密的调控机制所监控）→细胞死亡 ★标准的细胞周期： （从G1期开始，历经S、G2，到M期结束） 一．细胞周期的基本概念： 1.细胞周期：细胞周期是细胞增殖周期的简称，指细胞从分裂结束后开始生长，到再次分裂终了所经历的全过程。 2.细胞周期时间(Tc)：细胞周期时间因细胞类型、状态和环境而异，变异范围大，从0h~数年都可能。 3.细胞的增殖特性（机体细胞的状态）： 1）增殖细胞（周期性细胞）：能够增殖，不断进入 周期完成分裂。 2）暂不增殖细胞（休眠细胞，G0细胞）：长期停 留在G1晚期（G0期）而不越过限制点，未丧失 分裂能力，在适当条件下可恢复到增殖状态。 3）永不增殖细胞（终末分化细胞）：始终停留在 G1期，失去增殖能力直到衰老死亡。 二．细胞周期的研究方法： ★细胞周期模型 细胞周期研究中经常使用一些典型的物种和细胞系统，最常用的模型包括酵母、爪蟾胚胎细胞和哺乳动物体外培养细胞。 ★细胞周期同步化 ——由于实验常常需要设法获得时相均一的细胞群，使样品中的细胞都处于大致相同的细胞周期阶段，所以常需要使细胞周期同步化。 同步化的策略：①诱导同步化；②选择同步化 同步化常用方法：①细胞分裂收获法②代谢抑制法（加入过量胸苷后清洗）③低温培养法 ★3H-TdR（氚标记胸苷）有丝分裂标记法（测定细胞周期的时间） ——应用3H-TdR短期饲养细胞，数分钟至半小时后，将3H-TdR洗脱，置换新鲜培养液并继续培养。随后，每隔半小时或1小时定期取样，作放射自显影观察分析，从而确定细胞周期各个时相的长短。
达肝素钠对A549细胞生长状态及细胞周期的影响(一) 作者：陈克芳陈芳兰黄龙杰 【摘要】目的研究达肝素钠对体外生长的肺腺癌A549细胞活性及细胞周期的影响。方法用6种不同浓度(0、2、10、50、100和500IU/ml)的达肝素钠干预A549细胞的生长，用MTT 方法在4个时间点(6、12、24和36h)检测细胞活性;将经过24h普通培养的A549细胞继续在含有50IU/ml达肝素钠的培养液中培育，以正常培育的细胞作为对照组，将两组细胞24h 后以PI染液染色，用流式细胞仪检测并分析细胞周期。结果达肝素钠降低A549细胞活性，这种作用表现出时间依赖性和浓度依赖性;达肝素钠主要抑制细胞在G1期。结论达肝素钠对A549细胞活性的降低与对细胞周期的抑制作用有关。 【关键词】低分子量肝素;达肝素钠;肺腺癌;细胞周期 肝素及其衍生物的抗细胞增殖作用，目前在平滑肌上进行的研究较多。Guyton等〔1〕报道，不论在体内还是在体外，肝素都能降低平滑肌细胞(SMC)的有丝分裂。其他部位的SMC，如气道及肠道、子宫肌层及子宫肌瘤的生长也能被肝素抑制〔2〕。也有在内皮细胞上进行的关于肝素的抗增殖作用研究，如Khorana等〔3〕报道肝素抗微血管内皮细胞(MVECs)和奇静脉内皮细胞的作用。关于未分级肝素(UFH)或低分子肝素(LMWH)对肺腺癌A549细胞的生长抑制作用，目前较少有文献报道。该研究选用LMWH之一的达肝素钠进行相关研究。 1材料与方法 1.1主要试剂与仪器A549细胞(兰州大学医学院实验中心冻存)。CO2细胞培养箱(Biorad公司);超净工作台(CleanBlench公司);全自动酶标仪(Biorad公司)。RPMI1640培养基(Gibco);达肝素钠(Fragmin)。 1.2实验方法 1.2.1MTT法检测细胞活性将培养的A549细胞用胰酶消化，调整细胞浓度,培养24h。弃去培养基，加入含有所需浓度达肝素钠的RPMI1640培养基，继续培养。实验结束前4h,加入MTT，继续培养。4h后弃去培养基，加入DMSO，避光振荡10min。选择570nm波长，在酶联免疫检测仪上测定各孔的光吸收值(OD)。 1.2.2PI染色法检测细胞周期分布将培养的A549细胞用0.25%的胰酶消化，传代到6孔板的各孔中，培养24h。弃去培养基，加入含有所需浓度达肝素钠的RPMI1640培养基，继续培养。在设定的时间点按组收集细胞。收集的细胞以预冷PBS洗涤2次。离心5min，弃上清。加入含0.5%PI和0.01%RNase染液，重悬细胞，室温避光反应30min。1h内流式细胞仪检测，在488nm激发波长下测定DNA含量，分析细胞周期的分布情况。 1.3统计学分析数据以x±s表示，SPSS11.0统计软件分析,两组间比较用t检验。 2结果 2.1达肝素钠对A549细胞细胞活性的影响用6种不同浓度(0、2、10、50、100和500IU/ml)的达肝素钠干预A549细胞的生长，用MTT方法在4个时间点(6、12、24和36h)检测细胞活性。达肝素钠能降低A549细胞活性，而且这种作用表现出时间和浓度依赖性。在不含达肝素钠的培养基中培育的细胞，其12h和24h的细胞活性基本一致，但24h的细胞活性明显下降，这种下降是由培养基营养成分的耗竭所致，故24h以前的细胞活性值较能准确反应药物对细胞的影响。该数据还显示，用高浓度的达肝素钠(100和500IU/ml)培养细胞24h后，A549细胞活性大部分被抑制，但这种抑制可能与药物的毒性作用有关。50IU/ml达肝素钠在干预细胞生长24h后能抑制大约50%的细胞活性。为避免培养基成分的变化和药物毒性作用对实验结果的干扰，在随后的试验中，选择50IU/ml达肝素钠为干预浓度，测定干预24h后的各项指标。见图1。图1达肝素钠对肺腺癌A549细胞细胞活性的影响 2.2达肝素钠对A549细胞细胞周期的影响为观察达肝素钠对A549细胞周期进展的影响，将经过24h普通培养的A549细胞继续在含有50IU/ml达肝素钠的培养液中培育，以正常培育
细胞周期同步化 在细胞培养过程中，细胞多处于不同的细胞周期时相中，其中有少数细胞在进行有丝分裂活动，其余细胞分别处于G1、S和G2各期。不同时相的细胞对药物干预存在不同反应，会影响实验的重复性，因此，需要获得周期一致性的细胞。利用细胞同步化技术可使细胞大量的处于同一细胞时期，并可获得该时期大量的物质，如细胞中期时的染色体。细胞周期同步化(synchronization)是指为了研究某一时相细胞的代谢、增殖、基因表达或凋亡，借助某种自然或人为的实验手段,使细胞群体中处于细胞周期不同时相的细胞停留在同一时相( 除了G0期的细胞)的现象。细胞同步化本质上包括用一定的方法获得一定数量的同步化细胞群和使细胞进入同步化生长的两层含义。 DNA 合成抑制法是通过抑制DNA合成将细胞同步于同一时期的方法。高浓度TdR(胸腺嘧啶核苷)双阻断法是目前常用的抑制DNA 合成的同步化方法。它可逆地抑制DNA 合成，而不影响其他时期细胞的转运，最终可将细胞群阻断在S 期或G1 /S 交界处。其原理是: Td Ｒ是细胞DNA 合成不可缺少的前体，但向培养基中加入过量TdＲ，可形成过量的三磷酸腺苷，后者能反馈抑制其他核苷酸的磷酸化，从而抑制DNA 合成。它将细胞同步于G1 /S期交界处，同步化程度高，适用于任何培养体系，可将几乎所有的细胞同步化，但是容易产生非均衡生长，个别细胞体积增大。TdＲ双阻断法因为简单易行且可逆，在肿瘤药理方面对细胞周期同步化的实验中得到了广泛的应用。羟基脲、5-氟脱氧尿嘧啶、阿糖胞苷、氨甲蝶呤和高浓度ADR、GDR也属于DNA合成抑制剂，它们与TdR作用相似，均可通过抑制DNA合成达到同步化的目的。 中期阻断法是利用破坏微管的药物将细胞阻断在M期从而得到同一时期细胞的方法，常用的药物有秋水仙素等。秋水仙素通过抑制微管的聚合，进而抑制有丝分裂装置的形成，将细胞阻断于有丝分裂中期然后再释放使细胞达到同步化。中期阻断法非平衡生长问题不明显，但可逆性比较差，当阻断时间过长时，许多细胞产生异常分裂。过去研究中也发现，同步后的细胞的生长能力明显不如撤去阻断剂后得到的S期细胞旺盛。秋水仙胺、Nocodazole也是目前常用的中期阻断剂。 经过同步化之后的细胞可以通过流式细胞术对其周期进行分析。将细胞用PI（碘化丙啶）染液进行染色，使用流式细胞仪对细胞内DNA的相对含量进行测定，可分析细胞周期各时相的百分比。由于细胞的DNA含量在不同时期有显著的差异，因此可以将细胞分成
第十二章细胞增殖与细胞周期 一、单项选择题1．细胞周期中，决定一个细胞是分化还是增殖的控制点（R 点）位于 A. G1期末 B. G2期末 C. M期末 D.高尔基复合体期术 E. S期 2．细胞分裂后期开始的标志是 A. 核仁消失 B.核膜消失 C.染色体排列成赤道板 D.染色体复制E着丝粒区分裂，姐妹染色单体开始分离 3 .细胞周期中，DNA合成是在 A. G1 期 B. S期 C. G2 期 D. M 期E GO 期 4．有丝分裂中，染色质浓缩，核仁、核膜消失等事件发生在 A.前期 B.中期 C.后期 D.末期 E.以上都不是 5．细胞周期中，对各种刺激最为敏感的时期是 A. GO 期 B. G1 期 C. G2 期 D. S期 E. M 期 6．组蛋白的合成是在细胞周期的 A. S期 B. G1 期 C. G2 期 D. M 期E GO 期 7 下列哪种关于有丝分裂的叙述不正确 A.在前期染色体开始形成 B.前期比中期或后期都长 C. 染色体完全到达两极便进入后期 D.中期染色体最粗短 E 当染色体移向两极时，着丝点首先到达 8 着丝粒分离至染色单体到达两极是有丝分裂的 A .前期B.中期 C.后期D.末期E.胞质分裂期 9 细胞增殖周期是指下列哪一阶段 A.细胞从前一次分裂开始到下一次分裂开始为止 B 细胞从这一次分裂开始到分裂结束为止 C 绌胞从这一次分裂结束到下一次分裂开始为止 D. 细胞从前一次分裂开始到下一次分裂结束为止 E 细胞从前一次分裂结束到下一次分裂结束为止 10. 细胞周期中，遗传物质的复制规律是 A.异染色质先复制 B.常染色质先复制 C 异染色质大量复制，常染色质较少复制 D. 常染色质大量复制，异染色质较少复制 E 常染色质和异染色质同时复制 11. 真核生物体细胞增殖的主要方式是 A.有丝分裂 B.减数分裂 C.无丝分裂 D.有丝分裂和减数分裂 E.无丝分裂和减数分裂 12. 从细胞增殖角度看，不再增殖细胞称为 A. G1A态细胞 B. G1B态细胞 C. G1期细胞 D. G2期细胞 E. G0期细胞 13. 在细胞周期中，哪一时期最适合研究染色体的形态结构 A.间期 B.前期 C.中期D后期E.末期 14. 细胞周期的顺序是 A. M期、G1期、S期、G2期B . M期、G1期、G2期、S期 C. G1期、G2期、S期、M期 D. G1期、S期、M期、G2期
慢周期性-是指细胞生长周期较慢，因为生长周期较慢，可以选择细胞纯度较高 慢周期性-是指细胞生长周期较慢，因为生长周期较慢，可以选择细胞纯度较高，活性较好的时间进行进一步处理。生长周期快的细胞很快老化或者自行分化，较难控制最佳状态。 学术术语来源—— 组织块法与酶消化法培养大鼠毛囊干细胞的比较 文章亮点： 1毛囊干细胞是存在于毛囊中的干细胞，目前普遍认为毛囊干细胞定位于毛囊上段的隆突区(Bulge区)，通过自身的分裂增殖产生各种机体所需的细胞，以补充脱落和缺失的细胞。在毛囊干细胞的研究中首先要解决的问题就是细胞的获取和纯化，然而由于缺乏特异性标志，毛囊干细胞的分选和培养扩增是一个棘手的问题。 2 实验首先选用显微分离技术选取了大鼠毛囊干细胞的富集区域，分别用组织块法和两步酶法培养毛囊干细胞，在此基础上运用差速贴壁法分选毛囊干细胞，为毛囊干细胞构建组织工程化皮肤奠定基础。 3 两步酶法获得的细胞生长速度快，获得的细胞量多，而组织块法获得的细胞生长速度较慢，获得的细胞量也少。流式细胞仪分析显示酶消化法获得的细胞PE-CD34表达高于组织块法、FITC-β1整合素表达低于组织块法。总的来说，两种方法均能培养出毛囊干细胞，可根据不同实验需求选择恰当的培养方法。关键词： 干细胞；培养；毛囊干细胞；培养；组织块法；酶消化法；差速贴壁法；生长曲线；表面标志；组织工程皮肤；SD大鼠 主题词： 干细胞；毛囊；细胞培养技术 摘要
背景：研究证实毛囊干细胞比毛囊间表皮干细胞更有增生能力，近年来受到广泛关注，成为种子细胞的研究热点。 目的：比较组织块法和两步酶法培养大鼠毛囊干细胞的生物学特性。 方法：体式显微镜下分离大鼠触须部的毛囊，分别用组织块法和两步酶法培养毛囊干细胞，利用反复差速贴壁法纯化细胞，定期观察细胞生长状况及形态，流式细胞仪检测第3代毛囊干细胞CD34、β1整合素的表达。 结果与结论：两步酶法获得的细胞生长速度快，获得的细胞量多，而组织块法获得的细胞生长速度较慢，获得的细胞量也少。流式细胞仪分析显示酶消化法培养组PE-CD34、FITC-β1整合素的表达分别为(39.52±19.57)%和 (93.46±4.73)%，组织块法培养组相应为(19.20±11.53)%和 (363.57±14.42)%，两组间差异有显著性意义(P < 0.05)。总的来说，两种方法均能培养出实验所需毛囊干细胞，可根据不同实验需求选择恰当的培养方法。
, 内膜系统的膜结构破裂后自己重新封闭起来的小囊泡(主要 是内质网和高尔基体), 是异质性的集合体, 形态、大小及功能常因生物种类和细胞类型不同而异。据微体内含有的酶的不同可分为过氧化物酶体、糖酵解酶体和乙醛酸循环体。在蛋白质合成过程中,同一条mRNA分子能够同多个核糖体结合，同时合成若干条蛋白质多肽链，结合在同一条mRNA上的核糖 叠的多肽链相互作用的蛋白质，能够加速正确折叠的进行或提供折叠发生所需要的微环境。动物体细胞在体外可传代的次数，与物种的寿命有关，它们的增殖能力不是无限的， DNA在核小体连接处断裂成核小体片 色体末端的特殊结构，即染色体末端DNA 序列的多个重复，其作用是保护和稳定染色 RNA 依赖性DNA 聚合酶，为一种核糖核蛋白酶，是合成端粒必需的酶。在双线期中,交叉数目逐渐减少,在着丝粒两侧的交叉向两端移动.这个现象称为 成染色体联会的两条同源染色体互相紧靠，进而缠绕在一起，基质开始附着到染色丝上，成为一条短而粗的染色体。据染色体被拉向两极所受到的力的不同，后期可分为后期A 和后期B,此时的染色体 启动DNA复制的关键因子,是真核细胞DNA M期促进因子。
能够促使染色体凝集，使细胞由G2期进入M 物质多肽的形式合成，其N末端含有作为通过膜时之信号的氨基酸序列。引导前体多肽 是指具有摄取、处理及提呈抗原能力的细胞，能摄取病原体蛋白并将其加工将成短肽段，呈递给T细胞。 ,从中 于高等真核细胞中，是内层核被膜下纤维蛋白片层，纤维纵横排列整齐呈纤维网络状。 成串排列在一起，主要集中在染色体的着丝 DNA和组蛋白构成，是染色质的基本结构 在一定时期的特种细胞的细胞核内, 它由不表达的DNA序列组成， 分裂过程中,核仁出现周期性变化。一般在分裂前期逐渐消失，其纤丝和颗粒成分散失于核质之中；在分裂末期又重新出现。核仁的形成常与特定染色体的一定区域密切相关。 色体片段, 通过次缢痕与染色体主要部分相连。 指染色体组在有丝分裂中期的表型, 是染色体数目、大小、 是卵母细胞进行第一次减数分裂时, 停留在双线期的染色体。含4条染色单体,形似灯刷。 由核内有丝分裂产生的多股染色单体平行排列而成。