第二部分光学显微镜技术
第一章概述
第一节显微镜的作用
人眼对微观世界观察的局限性
光学显微镜是人类探索微观世界的光学精密仪器
光学显微镜的发展在很大程度上决定了人们对生命现象的认识
第二节显微镜的类型
根据照明源的性质
一、光学显微镜：利用可见光（或紫外光）为照明源，一
般有单式及复式显微镜两类。
复式显微镜可分为：
1.普通型：常规使用。
2.特种型：如荧光、相衬显微镜等；供专门观察和研究。
3.高级型：万能显微镜。
4.共焦激光扫描显微镜（Confocal）。
第三节光学显微镜的发展简史
1625年法布尔提出显微镜的概念
1610年伽利略制造出具有物镜、目镜及镜筒的复式显微镜1611年开普勒说明了显微镜的原理
1665年虎克制造出放大140倍的显微镜，提出“Cell”的概念1684年惠更斯制造出双透镜目镜：惠更斯目镜
19世纪阿贝提出显微镜的完整理论
1902年艾夫斯建立了双目镜系统
1935年泽尼克发现了相衬原理，并因此获得诺贝尔奖
20世纪60年代微分干涉衬显微镜问世
20世纪80年代共焦激光扫描显微镜开始应用
第四节显微镜的基本光学原理
一、折射与折射率
光线的折射现象
物质的折射率
二、透镜的性能
凸透镜可以会聚光线
凹透镜可以发散光线
三、透镜的成像质量
象差：是指透镜所形成的象与理想象在形状、颜色等方面存在差异。
色差：由于不同的颜色光线折射率差异而形成的象差。色差的校正（1）采用单色光为光源。
（2）利用透镜的性质。
四、显微镜的成象（几何成象）原理
利用凸透镜成象原理
物镜成象：利用物体在凸透镜一倍焦距以外二倍焦距以内，成倒立的放大的实象。
目镜成象：是利用物体在凸透镜一倍焦距以内，成正立的放大的虚象。
显微镜成象原理：
第二章、显微镜的主要光学技术参数
第一节数值孔径（Numerical Aperture，
NA）
数值孔径（NA）是物镜前透镜与被检物体间介质的折射率（η）和孔径角（u）半数正弦的乘积。
用公式表示：NA= ηsin u/2
数值孔径代表了物镜或聚光镜光通量的大小，是衡量物镜或聚光镜性能高低的重要指标。
同样放大倍数下，数值孔径越大，物镜的性能越高。
干燥系物镜NA<1,一般为0.05-0.95
油浸系物镜一般NA>1,最大为1.4
聚光镜的数值孔径大小，可通过孔径光阑进行调解，一般为0.05-1.4
数值孔径（NA）是显微镜中最重要的技术参数,它几乎决定和影响了其它技术参数。它与分辨率成正比；与有效放大率成正比；与焦深成反比；NA的平方与图象亮度成正比NA值增大视场宽度与工作距离都会相应变小
第二节分辩率（Resolving power）
分辨率—是衡量显微镜性能的另一个重要技术参数。往往用最小分辨距离来表示。
在显微镜的设计中确定，当最小点的衍射斑象的中心刚好落在另一个衍射斑象的边缘，则认为两物点象刚刚能够被分辨；这就是可以分辨的最小距离。
最小分辨距离：δ=λ/NA
其中λ为照射光波长，NA为显微镜物镜的数值孔径
可见显微镜的最小分辨距离是有限的。光学显微镜的最小分辨距离，理论上看约为0.3微米左右。
第三节有效放大率（Magnification）
总放大率M=Mob（物镜放大率）×Moc（目镜放大率）
Mob=△/F1
△为标准镜筒长度160毫米；F1为物镜的焦距
Moc=250/F2
250为人的明视距离，单位为毫米
F2为目镜的焦距
显微镜的“有效放大率”，是在标准筒长下，所使用的物镜数值孔径的500-1000倍。
物镜在显微镜中的重要作用！
第四节焦深
焦深是焦点深度的简称，即在使用显微镜时，当焦点对准某一物体点时，不仅位于该点平面上的各点都可看清楚，而且在此平面上下的一定厚度内，也能看得清楚，这个清晰部分的厚度就是焦深。
焦深大，可看到被检物体的全层；而焦深小，则只能看到被检物体的一薄层。
焦深计算公式：D= K.η/M.NA
其中，K：常数为240微米，
η：被检物体周围的折射率
M：总放大率，
NA：物镜的数值孔径
第五节视场直径
视场直径也称视场宽度或视场范围，是指在显微镜下看到的圆形视场内所能容纳被检物体的实际范围。
视场直径越大，越便于观察。
计算方法：φ= FN /Mob，
φ：视场直径；
FN：视场数（Field Number，是目镜的固定参数，标刻在目镜的外面）；
Mob：物镜放大率
第六节覆盖差
由于盖玻片厚度不标准，而产生的象差，称为覆盖差。
国际上规定，盖玻片的标准厚度为0.17毫米，允许范围在0.16-0.18毫米。物镜外壳上标刻的0.17，即表明该物镜要求的盖玻片厚度。
带校正环的40倍物镜
第七节镜象亮度与视场亮度
镜象亮度是显微镜图象亮度的简称，指在显微镜下所观察到的图象的明暗程度。
镜象亮度与两个因素有关：
1、与物镜的数值孔径的平方成正比。
2、与总放大率的平方成反比。
镜象亮度与视场亮度是两个不同的概念。
视场亮度是指显微镜下整个视场的明暗程度。
第八节工作距离
工作距离：也叫物距，指物镜前透镜的表面到被检物体之间的距离。
一般情况下，物镜的数值孔径越大，其工作距离越小。
第三章显微镜的光学部件
第一节物镜（Objective）
一、物镜的作用、齐焦合轴的概念
二、物镜的分类
1、按物镜前透镜与盖玻片间的介质
（1）干燥系物镜
（2）水浸系物镜
（3）油浸系物镜
2、按物镜放大率的高低
（1）极低倍物镜：放大率< 1×
（2）低倍物镜：放大率在1×—6×
（3）中倍物镜：放大率在6×—25×
（4）高倍物镜：放大率在25×—100×
3、按物镜校正象差的程度
（1）消色差物镜（Achromatic objective，Ach）
（2）复消色差物镜（Apochromatic objective，APO）
（3）半复消色差物镜（Semi Apochromatic objective，FL）（4）平场物镜（Plan objective）
Plan Ach，Plan APO，Plan semi APO，Splan APO
（5）多功能无限远补偿物镜（Universal Infinity system objective）
UIS：UPLAPO（相当于SPLAPO），UPLFL（相当于SPLFL）
（6）特种物镜
A，带校正环物镜（Correction coller ob）
B，带虹彩光阑物镜（Iris diaphragm ob）
C，相衬物镜（Phase contrast ob）
D，无应变物镜（Strain-free ob）
E，无荧光物镜（Non-fluorescing ob）
F，无罩物镜（No cover ob）
G，长工作距离物镜（Long working distance ob）
第二节目镜
1、惠更斯目镜
2、冉姆斯登目镜
3、凯尔勒目镜
4、补偿目镜
5、平场目镜
6、广视场目镜
7、超广视场目镜
8、摄影目镜
9、其它目镜
第三节聚光镜
1、阿贝聚光镜
2、消色差等光程聚光镜
3、摇出式聚光镜
4、极低倍聚光镜
5、特殊聚光镜
（1）暗场聚光镜
（2）相衬聚光镜
（3）偏光聚光镜
（4）微分干涉聚光镜
（5）长工作距离聚光镜
第四节显微镜的照明系统
一、透射式照明
1、中心照明：照明光束的中轴与显微镜的光轴重合
（1）临界照明：
光线经聚光镜后会聚到被检物体上。光线照射不均匀，不适合进行显微照相。
（2）柯勒照明：
其光线经聚光镜后不会聚到被检物体上。光线照射均匀，适合进行显微照相。是研究用显微镜的理想照明方法。
2、斜射照明：
照明光束的中轴与显微镜的光轴不在同一直线上，而是与
光轴形成某种角度斜射到被检物体上。
相衬显微镜（明场斜射）与暗场显微镜（暗场斜射）使用
斜射照明。
二、落射式照明
落射式照明又称“反射式照明”或“垂直式照明”。这种照明的光束来自物体的上方，通过物镜后照射到被检物体上，这样物镜又起着聚光镜的作用。
这种照明法适用于非透明物体。目前，荧光显微镜主要使用落射式照明方法。
第五节显微镜的光轴调节
在显微镜的光学系统中，光源、聚光镜、物镜和目镜的光轴以及光阑的中心必须与显微镜的光轴在同一直线上。
在研究用显微镜使用前，尤其是显微照相前，应进行光轴中心的调节。
1、光源灯丝的调正
2、聚光镜的中心调正
3、孔径光阑的调节
显微观察时，聚光镜的数值孔径应与所用物镜的数值孔径一致。
第四章研究用显微镜
研究用显微镜的设计第一节明场显微镜
明场显微镜是以标本的颜色及其透射率为基础的显微镜。
一般透射式的明视场镜检，标本应经过染色处理，才能达到应有的效果。
在各种显微镜的观察方法中，明场显微镜观察是最常规的一种，在生物学研究中被广泛应用。
明场显微镜的观察效果
OLYMPUS光学显微镜标准操作程序 1、仪器简介 奥林巴斯(OLYMPUS)CX21型光学显微镜由奥林巴斯株式会社生产,光学系统由物镜、目镜、照明装置与光源等组成,倍率包括4倍、10倍、40倍与100倍,总放大倍率为40倍、100倍、400倍与1000倍。 2、光学显微镜原理 光学显微镜就是由两组会聚透镜所组成,小的透镜代表一组焦距很短的透镜组即物镜。太 的透镜代表身一组焦距较长的透镜即目镜。将被观察体置于物镜前的物方熊点的稍外方,物体发出的光线经物镜放大后成一倒立实像于目镜前焦点附近,再经目镜放大后,就获得—个经两次放大的倒立虚像,该虚像成在观察者的明视距离处。 3、基本资料与性能参数 3、1仪器基本性能资料 制造厂家:奥林巴斯折株式会社生产 设备型号:OLYMPUS CX21 基本原理:物理成像原理 3、2仪器工作环境要求 最大相对湿度:最大800%(31℃) 31℃以上的使用环境时,湿之间从80%呈线性下降到50%, 电源电压变动±10%以内 3、3 光学性能参数 倍率:4倍、10倍、40倍,100倍 数值孔径:0、10 0、25 0、65 1、25 工作距离W、D、(mm):22、0 10、5 0、56 0、13 分辨率(um): 3、36 1、34 0、52 0、27 4、设备规格 4、1 光学系统:UIS光学系统(无限远校正光学系统) 4、2 照明系统:内置照明装置,6V20W卤素灯泡,非利普公司制造7388型 4、3 对焦机构:载物台高度调节机制,微调刻度:2、5um/格;微调一圈:0、3mm/圈;全行程盘:20mm;有粗调限位。粗调旋钮松紧度调整。 4、4 物镜转盘:4孔物镜转盘固定(朝前) 4、5 双眼镜筒:视野范围 I8 镜筒倾斜角落30度瞳距调整范围48-75mm。
（一）、显微镜的基本结构： 显微镜构造很复杂,种类很多,但基本结构是由机械和光学两大部分构成,现分述如下： 1、机械部分： 它是为光学部分服务的部件,包括以下九部分： (1)、镜座：显微镜最下面呈马蹄形或园形的部分,起稳定和支持镜身作用. (2)、镜柱：从镜座向上直立的短柱.上连镜臂,下连镜座,可以支持镜臂和载物台. (3)、镜臂：弯曲成马蹄形的部分,便于手持,下端与镜柱相连接的地方有一个倾斜关节,可使镜臂倾斜,便于观察. (4)、载物台：自镜臂下端向前伸出,放置标本用的平台,其中央有一个园孔,叫通光孔.台上有一移动器（老式的左右各有一个压片夹）,用以固定和移动标本. (5)、镜筒：和镜臂上方连接的园筒部分.有的显微镜镜筒内有一抽管,可适当抽长,一般长度是160－170毫米.镜筒上端装有目镜,下端有一个可转动的园盘,叫物镜转换器（或叫物镜旋转盘,固着在镜筒下端,分两层,上层固着不动,下层可自由转动.转换器上有2～4个圆孔,用来安装不同倍数的低倍或高倍物镜）.作用是保护成像的光路与亮度. (6)、调节器（也叫调节螺旋）：为镜壁上两种可转动的螺旋,一大一小,能使镜筒上下移动,调节焦距.大的叫粗准焦螺旋,位于镜臂的上方,可以转动,以使镜筒能上下移动,从而调节焦距,升降镜筒较快,用
于低倍镜对焦；小的叫细准焦螺旋,位于镜臂的下方,它的移动范围较粗准焦螺旋小,升降镜筒较慢,可以细调焦距. (7)、倾斜关节：镜柱和镜臂交界处有一个能活动的关节.它可以使显微镜在一定的范围内后倾（一般倾斜不得超过45°）便于观察.但是在使用临时封片观察时,禁止使用倾斜关节,尤其是装片内含酸性试剂时严禁使用,以免污损镜体. (8)、载物台：从镜臂向前方伸出的金属平台.呈方形或圆形,是放置玻片标本的地方.其中央具有通光孔,在通光孔的左右有一个弹性的金属压片夹,用来压住载玻片.较高级的显微镜,在载物台上常具有推进器,它包括夹片夹和推进螺旋,除夹住切片外,还可使切片在载物台上移动. 2、光学部分：由目镜、物镜、反光镜、聚光器等四部件组成. (1)、目镜：装于镜筒上方,由两组透镜构成,接目镜的作用是把接物镜所形成的倒立实像再放大成为一个虚像.接目镜上刻有5×,8×,10×,15×,25×等符号,表示放大倍数.我们所观察到的标本的物像,其放大倍数是接物镜和接目镜放大倍数的乘积.如接物镜是10×,接目镜是8×,其物像的放大倍数是10×8＝80倍. 在接目镜内两个透镜间的光栏上可装一根剪短的毛发,做为指针,用以指示要观察的材料. (2)、物镜：装在镜筒下端物镜转换器的孔中,一般的显微镜有2～4个接物镜镜头,每个镜头都是由一系列的复式透镜组成的,其上也有放大倍数记号,有4×,10×,40×及100×.4×及10×接物镜是低倍
目录 显微镜的光学、机械系统 (2) 一显微镜的简介 (2) 二显微镜的光学系统 (2) （一）物镜 (2) 1、物镜的分类 (2) 2、物镜的主要参数 (3) 3、物镜的作用 (3) （二）、目镜 (3) 1、目镜的结构 (3) 2、目镜的作用 (3) 3、目镜与物镜的关系 (4) 三）、聚光器 (4) 1、光镜的主要参数 (4) 2、聚光镜的作用 (4) 3、可变光阑 (4) （四）照明光源 (4) 1、天然光源 (5) 2、人工光源 (5) （五）滤光器 (5) 三显微镜的机械系统 (5) （一）底座 (7) （二）镜臂 (7) （三）镜简及齐焦 (7) （四）物镜转换器 (8) （五）调焦机构 (9)
显微镜的光学、机械系统 一显微镜的简介 显微镜是用来看看太小或详细，被人眼看到的物体的工具。“微”小“范围”是指看评价的目的，并在显微镜了这一点，使用灯光和放大镜。 显微镜的最基本的和无处不在的版本是光学显微镜。这是你在高中生物教室和科学项目的圣诞礼物中看到的显微镜。这种显微镜使用的镜头和光放大赤裸裸的人眼观看的对象。有两种类型：简单（一个镜头）和复合（多镜头）。光学像差，包括在颜色折射的差异，使图像模糊观众。更多的镜头，更多的图像清晰度。从底部到顶部，有一个标准的生物显微镜的四个主要组成部分。有一个光源，通常是一个灯泡，在显微镜的基础。上面的光线，是一种透明的托盘对象被视为在于。托盘上面是一个管内含有一个或多个镜头。镜头在管的基础是所谓的物镜。物镜（ES）以上目镜镜头，观众看起来通过图像。有许多使用的其他类型，但是这是最常见的的。例如，电子显微镜可以看对象的细胞结构与磁铁弯曲电子光学显微镜弯与玻璃的光以同样的方式。甚至有些使用的X射线。 二显微镜的光学系统 显微镜的光学系统主要包括物镜、目镜、反光镜和聚光器四个部件。广义的说也包括照明光源、滤光器、盖玻片和载玻片等。 （一）物镜 物镜是决定显微镜性能的最重要部件，安装在物镜转换器上，接近被观察的物体，故叫做物镜或接物镜。 1、物镜的分类物镜根据使用条件的不同可分为干燥物镜和浸液物镜；其中浸液物镜又可分为水浸物镜和油浸物镜（常用放大倍数为90—100倍）。根据放大倍数的不同可分为低倍物镜（10倍以下）、中倍物镜（20倍左右）高倍物镜（40—65倍）。根据像差矫正情况，分为消色差物镜（常用，能矫正光谱中两种色光的色差的物镜）和复色差物镜（能矫正光谱中三种色光的色差的物镜，价格贵，使用少）。（所谓象差是指所成的像与原物在形状上的差别；色差是指所
光学仪器标准精选（最新） G1146《GB/T1146-2009水准泡》 G1185《GB/T1185-2006光学零件表面疵病》 G1224《GB/T1224-1999几何光学术语符号》 G2609《GB/T2609-2006显微镜物镜》 G2831《GB/T2831-2009光学零件的面形偏差》 G2985《GB/T2985-2008生物显微镜》 G3161《GB/T3161-2003光学经纬仪》 G4315.1《GB/T4315.1-2009光学传递函数第1部分：术语、符号》 G4315.2《GB/T4315.2-2009光学传递函数第2部分：测量导则》 G5702《GB/T5702-2003光源显色性评价方法》 G7242《GB/T7242-2010透镜中心偏差》 G7661《GB/T7661-2009光学零件气泡度》 G7895《GB/T7895-2008人造光学石英晶体》 G7896《GB/T7896-2008人造光学石英晶体试验方法》 G9246《GB/T9246-2008显微镜目镜》 G9247《GB/T9247-2008显微镜聚光镜》 G9917.1《GB/T9917.1-2002照相镜头第1部分:变焦距镜头》 G10050《GB/T10050-2009光学和光学仪器参考波长》 G10156《GB/T10156-2009水准仪》 G10810.1《GB10810.1-2005眼镜片第一部分：单光和多焦点镜片》 G10810.2《GB10810.2-2006眼镜镜片第2部分:渐变焦镜片》 G10810.3《GB10810.3-2006眼镜镜片及相关眼镜产品透射比规范及测量方法》G10987《GB/T10987-2009光学系统参数的测定》 G10988《GB/T10988-2009光学系统杂(散)光测量方法》 G11162《GB/T11162-2009光学分划零件通用技术条件》 G11168《GB/T11168-2009光学系统像质测试方法》 G11239.1《GB l1239.1-2005手术显微镜第1部分：要求和试验方法》 G12085.1《GB/T12085.1-2010光学和光学仪器环境试验方法第1部分:术语、试验范围》 G12085.2《GB/T12085.2-2010光学和光学仪器环境试验方法第2部分:低温、高温、湿热》 G12085.3《GB/T12085.3-2010光学和光学仪器环境试验方法第3部分:机械作用力》 G12085.4《GB/T12085.4-2010光学和光学仪器环境试验方法第4部分:盐雾》G12085.5《GB/T12085.5-2010光学和光学仪器环境试验方法第5部分:低温、低气压综合试验》 G12085.6《GB/T12085.6-2010光学和光学仪器环境试验方法第6部分:砂尘》G12085.7《GB/T12085.7-2010光学和光学仪器环境试验方法第7部分:滴水、淋雨》 G12085.8《GB/T12085.8-2010光学和光学仪器环境试验方法第8部分:高压、低压、浸没》 G12085.9《GB/T12085.9-2010光学和光学仪器环境试验方法第9部分:太阳辐射》
显微镜基础知识 第一章：显微镜简史 随着科学技术的进步，人们越来越需要观察微观世界，显微镜正是这样的设备，它突破了人类的视觉极限，使之延伸到肉眼无法看清的细微结构。 显微镜是从十五世纪开始发展起来。从简单的放大镜的基础上设计出来的单透镜显微镜，到1847年德国蔡司研制的结构复杂的复式显微镜，以及相差，荧光，偏光，显微观察方式的出现，使之更广范地应用于金属材料，生物学，化工等领域。 第二章显微镜的基本光学原理 一．折射和折射率 光线在均匀的各向同性介质中，两点之间以直线传播，当通过不同密度介质的透明物体时，则发生折射现像，这是由于光在不同介质的传播速度不同造成的。当与透明物面不垂直的光线由空气射入透明物体(如玻璃)时，光线在其介面改变了方向，并和法线构成折射角。 二．透镜的性能 透镜是组成显微镜光学系统的最基本的光学元件，物镜、目镜及聚光镜等部件均由单个和多个透镜组成。依其外形的不同，可分为凸透镜(正透镜)和凹透镜(负透镜)两大类。 当一束平行于光轴的光线通过凸透镜后相交于一点，这个点称“焦点”，通过交点并垂直光轴的平面，称“焦平面”。焦点有两个，在物方空间的焦点，称“物方焦点”，该处的焦平面，称“物方焦平面”；反之，在像方空间的焦点，称“像方焦点”，该处的焦平面，称“像方焦平面”。 光线通过凹透镜后，成正立虚像，而凸透镜则成正立实像。实像可在屏幕上显现出来，而虚像不能。 三．影响成像的关键因素—像差 由于客观条件，任何光学系统都不能生成理论上理想的像，各种像差的存在影响了成像质量。下面分别简要介绍各种像差。 1．色差（Chromatic aberration） 色差是透镜成像的一个严重缺陷，发生在多色光为光源的情况下，单色光不产生色
光学显微镜标准操作规程 1 目的 规范光学显微镜标准操作规程，确保光学显微镜正确使用。 2 授权操作人员 经培训并通过考核的微生物实验室工作人员。 3 原理 当被观察物体置于镜前的焦点稍远处时，物体反射的光线经物镜放大后成一倒立实像位于目镜前焦点附近，再经目镜放大呈倒立虚像位于观察者的明视距离（约250mm）处。 4 工作环境 相对湿度：10% ~ 85%；运行温度：15 ~ 30℃。 5 操作程序 5.1 准备：将光学显微镜放置在采光好的实验台上，避免振动。向上转动粗调螺旋至一定高度后，将载物片放于载物台上。 5.2 调焦与低倍镜观察：将10×低倍物镜对准镜筒，转动粗调螺旋使物镜下降到快接触标本处后，选择平面反光镜的角度，调整聚光器的上下高度和光栅大小，使目视亮度适宜，再用细调螺旋上下调节焦点，使物像清晰。 5.3 高倍镜观察：转换40×高倍镜对准镜筒，一般不需重新调焦，仅调节细螺旋即可看到清晰物像。 5.4 油镜观察：于革兰氏染色处滴加香柏油一小滴，将玻片放在载物台上。使油镜头（100×）对准镜筒，转动粗调螺旋使之降至与玻
片轻轻接触。然后升高聚光镜使其与载物台平齐，将光栅放至最大，选择凹面反光镜调节角度，使射入光线最强。再转动粗调螺旋使物镜上升，待见到标本中物像后，调节细调螺旋使物像清晰，对标本进行顺序观察。 5.5 收镜：显微镜使用完毕，取下载物片，用擦镜纸将油镜头揩干净（必要是可滴一滴清洁液于擦镜纸上）。用绸布擦拭镜身，将物镜转成“八”字形，镜筒、聚光器下降至最低处，反光镜放水平位，以右手握镜臂，左手托镜座，轻轻放入显微镜箱内。 6 维护及保养 光学系统清洁，一般情况下可用洗耳球吹气、小毛刷刷除仪器表面的灰尘。当光学系统有污染时，可用擦镜纸蘸清洁液擦拭，如被尿、便等污染时可用棉签蘸1%氨水擦拭污染区。 7 应急处理 出现不能解决的故障，应及时联系维修人员并通知微生物负责人。 8 注意事项 8.1 要培养良好的操作习惯，使用螺旋时要注意，当对焦时以转动粗调螺旋为主，尽量少用细调螺旋，以延长机械系统的寿命。在转换高倍镜，特别是油镜观察时，切记粗调螺旋只能将镜头上移而不能下移，以免压碎载物片，碰坏镜头。 8.2 显微镜存放的环境条件应防震、防潮、防尘、防日晒、防温差过大。
利用光学原理把人眼所不能分辨的微小物体放大成像，以供人们提取微细结构信息的光学仪器。 简史 早在公元前1世纪，人们就已发现通过球形透明物体去观察微小物体时可以使其放大成像。后来逐渐对球形玻璃表面能使物体放大成像的规律有了认识。1590年，荷兰和意大利的眼镜制造者已经造出类似显微镜的放大仪器。1610年前后，意大利的伽利略和德国的J.开普勒在研究望远镜的同时，改变物镜和目镜之间的距离，得出合理的显微镜光路结构，当时的光学工匠遂纷纷从事显微镜的制造、推广和改进。17世纪中叶，英国的R.胡克和荷兰的 A.van列文胡克都对显微镜的发展作出了卓越的贡献。1665年前后，胡克在显微镜中加入粗动和微动调焦机构、照明系统和承载标本片的工作台。这些部件经过不断改进，成为现代显微镜的基本组成部分。1673～1677年期间，列文胡克制成单组元放大镜式的高倍显微镜,其中9台保存至今。胡克和列文胡克利用自制的显微镜在动、植物机体微观结构的研究方面取得了杰出的成就。19世纪，高质量消色差浸液物镜的出现使显微镜观察微细结构的能力大为提高。1827 年G.B.阿米奇第一个采用浸液物镜。19世纪70年代，德国人E.阿贝奠定了显微镜成像的古典理论基础。这些都促进了显微镜制造和显微观察技术的迅速发展，并为19世纪后半叶包括R.科赫、L.巴斯德等在内的生物学家和医学家发现细菌和微生物提供了有力的工具。 在显微镜本身结构发展的同时，显微观察技术也在不断创新：1850年出现了偏光显微术，1893年出现了干涉显微术，1935年荷兰物理学家F.泽尔尼克创造了相衬显微术，他为此在1953年被授予诺贝尔物理学奖金。 古典的光学显微镜只是光学元件和精密机械元件的组合，它以人眼作为接收器来观察放大的像。后来在显微镜中加入了摄影装置，以感光胶片作为可以记录和存储的接收器。现代又普遍采用光电元件、电视摄象管和电荷耦合器等作为显微镜的接收器，配以微型电子计算机后构成完整的图象信息采集和处理系统。 工作原理表面为曲面的玻璃或其他透明材料制成的光学透镜可以使物体放大成像。光学显微镜就是利用这一原理把微小物体放大到人眼足以观察的尺寸。近代的光学显微镜通常采用两级放大，分别由物镜和目镜完成。被观察物体AB位于物镜的前方,被物镜作第一级放大后成一倒立的实象A1B1。然后此实像再被目镜作第二级放大，成一虚象A2B2,人眼看到的就是虚像，显微镜的总放大倍率为：显微镜总放大倍率＝物镜放大倍率×目镜放大倍率 放大倍率是指直线尺寸的放大比而不是面积比。在用人眼直接观察的显微镜中,可以在实像面A1B1处放置一块薄型平板玻璃片，其上刻有某种图案的线条，例如十字线。当实像A1B1和这些刻线叠合在一起时,利用这些刻线就能对物体进行瞄准定位或尺寸测量。这种放置在实像面处的薄型平板玻璃片通称分划板。在新型的以光电元件作为接收器的光学显微镜中，电视摄象管的靶面或其他光电元件的接收面就设置在实像面上。 组成
光学显微镜与扫描电镜的区别（二） cyh(2010-07-13 11:59:00) 光源不同： 光学显微镜采用可见光作为光源，电子显微镜采用电子束作为光源。 成像原理不同： 光学显微镜利用几何光学成像原理进行成像，电子显微镜利用高能量电子束轰击样品表面，激发出样品表面的各种物理信号，再利用不同的信号探测器接受物理信号转换成图像信息。 分辨率不同： 光学显微镜因为光的干涉与衍射作用，分辨率只能局限于0.2-0.5um之间。电子显微镜因为采用电子束作为光源，其分辨率可达到1-3nm之间，因此光学显微镜的组织观察属于微米级分析，电子显微镜的组织观测属于纳米级分析。 景深不同： 一般光学显微镜的景深在2-3um之间，因此对样品的表面光滑程度具有极高的要求，所以制样过程相对比较复杂。扫描电镜的景深则可高达几个毫米，因此对样品表面的光滑程度几何没有任何要求，样品制备比较简单，有些样品几乎无需制样。体式显微镜虽然也具有比较大的景深，但其分辨率却非常的低。 应用领域： 光学显微镜主要用于光滑表面的微米级组织观察与测量，因为采用可见光作为光源因此不仅能观察样品表层组织而且在表层以下的一定范围内的组织同样也可被观察到，并且光学显微镜对于色彩的识别非常敏感和准确。电子显微镜主要用于纳米级的样品表面形貌观测，因为扫描电镜是依靠物理信号的强度来区分组织信息的，因此扫描电镜的图像都是黑白的，对于彩色图像的识别扫描电镜显得无能为力。扫描电镜不仅可以观察样品表面的组织形貌，通过使用EDS、WDS、EBSD等不同的附件设备，扫描电镜还可进一步扩展使用功能。通过使用EDS、WDS辅助设备，扫描电镜可以对微区化学成分进行分析，这一点在失效分析研究领域尤为重要。使用EBSD，扫描电镜可以对材料的晶格取向进行研究。 断口分析 研究金属断裂面的学科，是断裂学科的组成部分。金属破断后获得的一对相互匹配的断裂表面及其外观形貌，称断口。断口总是发生在金属组织中最薄弱的地方，记录着有关断裂全过程的许多珍贵资料，所以在研究断裂时，对断口的观察和研究一直受到重视。通过断口的形态分析去研究一些断裂的基本问题：如断裂起因、断裂性质、断裂方式、断裂机制、断裂韧性、断裂过程的应力状态以及裂纹扩展速率等。如果要求深入地研究材料的冶金因素和环境因素对断裂过程的影响，通常还要进行断口表面的微区成分分析、主体分析、结晶学分析和断口的应力与应变分析等。随着断裂学科的发展，断口分析同断裂力学等所研究的问题更加密切相关，互相渗透，互相配合；断口分析的实验技术和分析问题的深度将会取得新的发展。断口分析现已成为对金属构件进行失效分析的重要手段。 断口的宏观和微观观察断口分析的实验基础是对断口表面的宏观形貌和微观结构特征进行直接观察和
用显微镜观察多种多样的细胞 1.实验原理 (1)放大倍数的计算，显微镜的放大倍数等于目镜放大倍数与物镜放大倍数的乘积。 (2)放大倍数的实质：放大倍数是指放大的长度或宽度，不是指面积或体积。 (3)高倍显微镜的作用：可以将细胞放大，更清晰地观察到细胞的形态、结构，有利于区别不同的细胞。 2.操作步骤 [深度思考] (1)如何区分目镜与物镜，其长短与放大倍数之间存在怎样的关系？ 提示目镜无螺纹，物镜有螺纹。物镜越长，放大倍数越大；目镜越长，放大倍数越小。 (2)为什么要先用低倍镜观察清楚后，把要放大观察的物像移至视野中央，再换高倍物镜观察？ 提示低倍镜下视野范围大，而高倍镜下视野范围小，如果直接用高倍物镜观察，往往由于观察的物像不在视野范围内而找不到。因此，需要先用低倍镜观察清楚，并把要放大观察的物像移至视野中央，再换高倍物镜观察。 (3)如何把物像移到视野中央？ 提示物像在视野中偏向哪个方向，装片就向哪个方向移动，简称“偏哪移哪”。 (4)若视野中出现一半亮一半暗；观察花生切片标本材料一半清晰一半模糊不清，出现上述两种情况的可能原因分别是什么？ 提示前者可能是反光镜的调节角度不对；后者可能是由花生切片厚薄不均匀造成的。 (5)若所观察视野中有“污物”，应如何判断“污物”位置？ 提示
[方法技巧] 1.关注显微镜使用的“4”个易错点 (1)必须先用低倍物镜观察，找到要观察的物像，移到视野中央，然后再换用高倍物镜。 (2)换用高倍物镜后，不能再转动粗准焦螺旋，只能用细准焦螺旋来调节。 (3)换用高倍物镜后，若视野太暗，应先调节遮光器(换大光圈)或反光镜(用凹面反光镜)使视野明亮，再调节细准焦螺旋。 (4)观察颜色深的材料，视野应适当调亮，反之则应适当调暗。 2.显微镜下细胞数目的两种计算方法 若视野中的细胞为单行，计算时只考虑长度和宽度；若视野中充满细胞，计算时则要考虑面积的变化。 (1)若视野中为一行细胞，高倍镜下细胞数量与低倍镜下细胞数量之比等于其放大倍数之比的倒数。 (2)若视野中充满细胞，则高倍镜下细胞数量与低倍镜下细胞数量之比等于其放大倍数之比的倒数的平方。 一、选择题 1．下列有关显微镜操作的说法，错误的是 A．标本颜色较深，观察时应选用凹面反光镜反光和大光圈 B．为观察低倍镜视野中位于右上方的细胞物像，应将装片向右上方移动 C．若换用高倍物镜观察，需要先升镜筒，以免镜头破坏玻片标本 D．转换高倍物镜之前，应先将所要观察的物像移到视野正中央 2．下列有关显微镜操作的说法，正确的是（） A．若高倍镜下细胞质流向是逆时针的，则细胞中细胞质的流向应是顺时针的 B．为观察低倍镜视野中位于左下方的细胞，应将装片向右上方移动，再换用高倍镜 C．用显微镜的凹面反光镜反光，观察到的细胞数目更多，但细胞更小 D．如果在低倍镜下看到物象清晰，换用高倍镜后物象模糊，则正确的操作是调节细准焦螺旋 3．下列显微镜操作的方法中，正确的一组是（）
实验一显微镜的构造及使用方法 一、目的要求 1.了解显微镜的构造、性能及成像原理。 2.掌握显微镜的正确适用及维护方法。 二、实验器材 1.显微镜、纱布、绸布 2.酵母菌示教标本 三、普通光学显微镜简介 微生物的最显著的特点就是个体微小，必须借助显微镜才能观察到它们的个体形态和细胞结构。熟悉显微镜并掌握其操作技术是研究微生物不可缺少的手段。 显微镜可分为电子显微镜和光学显微镜两大类。光学显微镜包括：明视野显微镜、暗视野显微镜、相差显微镜、偏光显微镜、荧光显微镜、立体显微镜等。其中明视野显微镜为最常用普通光学显微镜，其它显微镜都是在此基础上发展而来的，基本结构相同，只是在某些部分作了一些改变。明视野显微镜简称显微镜。 （一）显微镜的构造 普通光学显微镜的构造可以分为机械和光学系统两大部分。 图1-1 显微镜构造 1.目镜 2.镜筒 3. 转换器 4. 物镜 5. 载物台 6. 聚光器 7. 虹彩光圈 8. 聚光镜调节钮9.反光镜10. 底座11. 镜臂12. 标本片移动钮 13. 细调焦旋钮14. 粗调焦旋钮15.电源开关16.光亮调节钮17.光源 1.机械系统： （1）镜座Base：在显微镜的底部，呈马蹄形、长方形、三角形等。 （2）镜臂Arm：连接镜座和镜筒之间的部分，呈圆弧形，作为移动显微镜时的握持部分。 （3）镜筒Tube：位于镜臂上端的空心圆筒，是光线的通道。镜筒的上端可插入接目镜，下面可与转换器相连接。镜筒的长度一般为160mm。显微镜分为直筒式和斜筒式； 有单筒式的，也有双筒式的。 （4）旋转器Nosepiece：位于镜筒下端，是一个可以旋转的圆盘。有3~4个孔，用于安
光学显微镜的原理及构造显微镜是人类认识物质微观世界的重要工具，是现代科学研究工作不可缺少的仪器之一。显微镜自1666年问世以来已有300多年的历史了，其间随着科学技术不断发展，显微镜的品种不断增加，结构和性能逐步得到完善和提高。 根据不同的使用用途，光学显微镜可分为普通光学显微镜、暗视野显微镜、相差显微镜、荧光显微镜、倒置显微镜、体视显微镜、偏光显微镜等10多种。目前，世界上许多国家都可以生产光学显微镜，牌名、种类繁杂，其中德国、日本等国制造的显微镜品质、数量占优势，但价格昂贵。 对于现代的光学显微镜，包括各种简单的常规检验用显微镜、万能研究以及万能照相显微镜等，首先要认识其构造及各部件的功能，同时要掌握正确的调试、使用和保养方法，才能在实际应用中面对各种要求时以不同的显微镜检方法，充分发挥显微镜应有的功能，提高常规检验工作效率. 光学显微镜的原理和构造 随着科学技术的发展，显微镜检方法由最传统的明视野、暗视野发展出了相差法、偏光方法；荧光方法也由透射光激发进展为落射光激发，使荧光效率大为提高；微分干涉相衬方法基于偏光方法，而巧妙地利用了微分干涉棱镜，使之能应用于医学与生物学的样品，又能应用于金相样品的分析与检验。 下面以德国ZEISS公司生产的Axioplan万能研究用显微镜，简单介绍万能显微镜的基本组成部件。 1. 显微镜主机体（stand） 显微镜的主机体设计成金字塔形，而底座的截面呈T字形，使显微镜的整体相当稳固。显微镜的光学部件和机构调节部件、光源的灯室、显微照相装置、电源变压稳压器等，都可安装在主机体上或主机体内。 2. 显微镜的底座（base） 底座和主机体通常组成一个稳固的整体。底座内通常装有透射光照明光路系统（聚光、集光和反光）部件，光源的滤光片组，粗/微调焦机构，光源的视场光阑也安装在底座上。 3. 透射光光源（tranilluminator） 透射光光源由灯室（lamp housing）、灯座（lamp socket）、卤素灯（halogen lamp）、集光与聚光系统（lamp collector and lamp condenser）及其调整装置组成。 4. 透射光光源与反射光光源的转换开关（toggle switch） 这是新一代AXIO系列显微镜特有的装置，透射光和反射光可通用。当具有透/反两用的配置时，利用这一转换开关能方便而又迅速的使透射光 和反射光互相转换。在纯透射光的配置中，这一开关就改为电源开关。
OLYMPUS光学显微镜标准操作程序 1.仪器简介 奥林巴斯(OLYMPUS）CX21型光学显微镜由奥林巴斯株式会社生产，光学系统由物镜、目镜、照明装置和光源等组成，倍率包括4倍、10倍、40倍和100倍，总放大倍率为40倍、100倍、400倍和1000倍。 2.光学显微镜原理 光学显微镜是由两组会聚透镜所组成，小的透镜代表一组焦距很短的透镜组即物镜。太的透镜代表身一组焦距较长的透镜即目镜。将被观察体置于物镜前的物方熊点的稍外方，物体发出的光线经物镜放大后成一倒立实像于目镜前焦点附近，再经目镜放大后，就获得—个经两次放大的倒立虚像，该虚像成在观察者的明视距离处。 3.基本资料和性能参数 3.1仪器基本性能资料 制造厂家：奥林巴斯折株式会社生产 设备型号：OLYMPUS CX21 基本原理：物理成像原理 3.2仪器工作环境要求 最大相对湿度：最大800%（31℃） 31℃以上的使用环境时，湿之间从80%呈线性下降到50%， 电源电压变动±10%以内 3.3 光学性能参数 倍率：4倍、10倍、40倍，100倍 数值孔径：0.10 0.25 0.65 1.25 工作距离W.D.(mm)：22.0 10.5 0.56 0.13 分辨率(um): 3.36 1.34 0.52 0.27 4.设备规格 4.1 光学系统：UIS光学系统（无限远校正光学系统） 4.2 照明系统：内置照明装置，6V20W卤素灯泡，非利普公司制造7388型 4.3 对焦机构：载物台高度调节机制，微调刻度：2.5um/格；微调一圈：0.3mm/圈；全行程盘：20mm；有粗调限位。粗调旋钮松紧度调整。 4.4 物镜转盘：4孔物镜转盘固定（朝前） 4.5 双眼镜筒：视野范围 I8 镜筒倾斜角落30度瞳距调整范围48-75mm。
显微镜的重要光学技术参数 在镜检时，人们总是希望能清晰而明亮的理想图象，这就需要显微镜的各项光学技术参数达到一定的标准，并且要求在使用时，必须根据镜检的目的和实际情况来协调各参数的关系。只有这样，才能充分发挥显微镜应有的性能，得到满意的镜检效果。 显微镜的光学技术参数包括：数值孔径、分辨率、放大率、焦深、视场宽度、覆盖差、工作距离等等。这些参数并不都是越高越好，它们之间是相互联系又相互制约的，在使用时，应根据镜检的目的和实际情况来协调参数间的关系，但应以保证分辨率为准。 1．数值孔径 数值孔径简写NA，数值孔径是物镜和聚光镜的主要技术参数，是判断两者（尤其对物镜而言）性能高低的重要标志。其数值的大小，分别标刻在物镜和聚光镜的外壳上。 数值孔径（NA）是物镜前透镜与被检物体之间介质的折射率（n）和孔径角（u）半数的正弦之乘积。用公式表示如下：NA=nsinu/2 孔径角又称"镜口角"，是物镜光轴上的物体点与物镜前透镜的有效直径所形成的角度。孔径角越大，进入物镜的光通亮就越大，它与物镜的有效直径成正比，与焦点的距离成反比。 显微镜观察时，若想增大NA值，孔径角是无法增大的，唯一的办法是增大介质的折射率n值。基于这一原理，就产生了水浸物镜和油浸物镜，因介质的折射率n值大于1，NA值就能大于1。 数值孔径最大值为 1.4，这个数值在理论上和技术上都达到了极限。目前，有用折射率高的溴萘作介质，溴萘的折射率为1.66,所以NA值可大于1.4。 这里必须指出，为了充分发挥物镜数值孔径的作用，在观察时，聚光镜的NA值应等于或略大于物镜的NA值。 数值孔径与其他技术参数有着密切的关系，它几乎决定和影响着其他各项技术参数。它与分辨率成正比，与放大率成正比，与焦深成反比，NA值增大，视场宽度与工作距离都会相应地变小。 2．分辨率 显微镜的分辨率是指能被显微镜清晰区分的两个物点的最小间距，又称"鉴别率"。其计算公式是σ=λ/NA 式中σ为最小分辨距离；λ为光线的波长；NA为物镜的数值孔径。可见物镜的分辨率是由物镜的NA值与照明光源的波长两个因素决定。NA值越大，照明光线波长越短，则σ值越小，分辨率就越高。 要提高分辨率，即减小σ值，可采取以下措施 （1）降低波长λ值，使用短波长光源。 （2）增大介质n值以提高NA值（NA=nsinu/2）。 （3）增大孔径角u值以提高NA值。 （4）增加明暗反差。 3．放大率和有效放大率 由于经过物镜和目镜的两次放大，所以显微镜总的放大率Γ应该是物镜放大率β和目镜放大率Γ1的乘积： Γ=βΓ1 显然，和放大镜相比，显微镜可以具有高得多的放大率，并且通过调换不同放大率的物镜和目镜，能够方便地改变显微镜的放大率。 放大率也是显微镜的重要参数，但也不能盲目相信放大率越高越好。显微镜放大倍率的极限即有效放大倍率。 分辨率和放大倍率是两个不同的但又互有联系的概念。有关系式：500NA<Γ<1000NA 当选用的物镜数值孔径不够大，即分辨率不够高时，显微镜不能分清物体的微细结构，此时即使过度地增大放大倍率，得到的也只能是一个轮廓虽大但细节不清的图像，称为无效放大倍率。反之如果分辨率已满足要求而放大倍率不足，则显微镜虽已具备分辨的能力，但因图像太小而仍然不能被人眼清晰视见。
半导体显微镜 Leica M165C 物质存在的形式多种多样，固体、液体、气体、等离子体等等。我们通常把导电性差的材料，如煤、人工晶体、琥珀、陶瓷等称为绝缘体。而把导电性比较好的金属如金、银、铜、铁、锡、铝等称为导体。可以简单的把介于导体和绝缘体之间的材料称为半导体。 半导体的分类，按照其制造技术可以分为：集成电路器件，分立器件、光电半导体、逻辑IC、模拟IC、储存器等大类，一般来说这些还会被分成小类。此外还有以应用领域、设计方法等进行分类，虽然不常用，但还是按照IC、LSI、VLSI（超大LSI）及其规模进行分类的方法。此外，还有按照其所处理的信号，可以分成模拟、数字、模拟数字混成及功能进行分类的方法。 Leica M165C体视显微镜实拍照片： 徕卡体视显微镜Leica M165C介绍： 徕卡研究级体视显微镜Leica M165C,可外接绘图仪，1倍物镜下放大倍数7.3-120倍，可外接摄像称为电脑型显微镜。多种物镜和光源组合可选。适合电子元器件、半导体、LCD、粉尘颗粒等样品观察分析。
您是否期望拥有一款不仅能够提供完美图像、便于使用，而且还能够重现实验和检验的立体显微镜？如果是，Leica M165 C 高性能立体显微镜完全就是您的理想选择！它是唯一一款能够提供编码 16.5:1 变倍比以及7.3 - 120倍放大倍率 (使用1.0x PlanApo 物镜的立体显微镜。 集成编码将放大倍率和可变光圈位置实时传送到 Leica Application Suite (LAS 软件。刻度条以透明的方式嵌入到实时图像中，在放大倍率发生变化时同步更新。当存储图像时，所有设置随同图像一起保存，以便将来随时调用。 Leica M165 C 显微镜可根据您的需求进行精确定制：全面的人体工学附件、各种不同的 LED 光源以及多种数字摄像头供您选择，对 Leica M165 C 进行定制，使其能够满足材料测试研究的各种应用要求。 为您带来的优势 全复消色差 16.5:1 变倍比，标准放大倍率 7.3 - 120 倍
临床医学认证显微实验室介绍 一、简介： 显微实验室成立于1999年，由原来的组织学与胚胎学、生物遗传学、病理学、医学微生物学、人体寄生虫学的实验室和显微镜室合并组建的一个全新的多方位的形态学实验室，直属于基础医学院管理。1999年12月被江西省教委评为合格实验室。为适应我院教学改革以及学校发展规划的要求，校领导以“高起点、高水平、高效益”的标准在原来显微实验室的基础上整合了人体解剖学教研室的实验教学，于2005年12月组建了赣南医学院“医学形态学实验教学中心”。2007 年该中心被评为“江西省医学形态学实验教学示范中心”，2009年列为中央与地方共建实验室，下达共建专项经费300万元，更新添置了包括数字切片扫描与应用系统在内的一批现代化实验仪器设备。 二、硬件设备： 实验室面积2454.00m2。现有仪器设备2625台（件）、固定资产总价值533.39万元。拥有Motic显微数码互动实验室3套、多媒体实验室7个、小组讨论室3个；组胚学、病理学、寄生虫学标本开放实验室3个；P2生物安全实验室1个；综合显微镜室1个，使其资源得到充分共享，实现了实验教学手段现代化。建立了一个从微观到大体、从胚胎到成年的动态过程；从形态结构到功能，从正常到疾病演变过程的系统化的形态学开放实验室，使形态学科的教学内容紧密结合并具有连贯性，对培养学生形象思维及分析问题的能力起到了重要的作用。 三、实验技术人员队伍： 本室注重师资队伍的提高，不定期选派人员外出学习和进修，参加国内外会议以及在职攻读硕士，科室内坚持集体备课，相互学习，打造一支知识和技能全面、又有专长的队伍，目前，实验室有一支业务较精湛、年龄和职称结构较合理的技术团队。有专职技术人员13人，其中，高级职称4人，中级职称7人，初级职称1人,其他人员1人。 四、科研主要情况和成果： 2007年来我室以第一作者在国家和省级刊物发表科研论文25篇，其中核心期刊
杨拓拓 (苏州大学现代光学技术研究所，江苏苏州215000) 1基本原理 显微镜成像原理及视角放大率 显微镜由物镜和目镜组成。物体AB 在物镜前焦面稍前处，经物镜成放大、倒立的实像A'B'，它位于目镜前焦面或稍后处，经目镜成放大的虚像，该像位于无穷远或明视距离处。 图1-1显微镜系统光路图 牛顿放大率公式： f f x x ''= 'x 是像点到像方焦点的距离，x 是物点到物方焦点的距离。 根据牛顿放大率公式可得物镜的垂轴放大率为 '1'1'11--f f x ?== β 目镜的视觉放大率为： '22250 f =Γ 组合系统的放大率为 '2'121250f f ? -=Γ=Γβ 显微镜系统的像方焦距 ?-=/'2'1'f f f '250 f = Γ 显微镜系统成倒像轴向放大率 ' 1 f
'2'1'2'1/f f x x =β 若物点A 沿光轴移动很小的距离，则通过显微镜系统的像点'2A 将移动很大的距离，且移动 方向相同。 显微系统的角放大率 '2'1'2'1/x x f f =γ 即入射于物镜为大孔径光束，而由目镜射出为小孔径光束。 显微镜的孔径光阑 单组低倍显微物镜，镜框是孔径光阑。 复杂物镜一般以最后一组透镜的镜框作为孔径光阑。 对于测量显微镜，孔阑在物镜的象方焦面上，构成物方远心光路。 显微镜的视场光阑和视场 在显微物镜的象平面上设置了视场光阑来限制视场。由于显微物镜的视场很小，而且要求象面上有均匀的照度，故不设渐晕光阑。 显微镜是小视场大孔径成像，为获得大孔径并保证轴上点成像质量，显微镜线视场不超过物镜的1/20,线视场要求： 1 '120202β?=≤f y 显微镜的分辨率和有效放大率 光学仪器分辨率 瑞利判据：两个相邻的“点”光源所成的像是两个衍射斑，若两个等光强的非相干点像之间的间隔等于艾里圆的半径，即一个像斑的中心恰好落在另一个像斑的第一暗环处，则这两个点就是可分辨的点。当物面在无穷远时，以两点对光学系统的张角可表示两分辨点的距离，其值为：
1. 应激性： （1）遇到危险时，母鸡会发出“咯咯咯”的叫声； （2）避役的体色与变化的环境一致； （3）知了在温度降到24℃以下时停止鸣叫； （4）用黑光灯诱杀鳞翅目昆虫； （5）有一种跳舞草，当它听到优美的乐曲就跳起舞来； （6）鱼铒投入水中，招来许多鱼取食； （7）放在阳台上的花，枝叶向光生长； （8）将菜籽油涂在纸上，引诱菜粉蝶产卵以消灭之； （9）麻雀早晨开始鸣叫； （10）含羞草的小叶受到触动后下垂。 2. 适应性： （1）北极熊具有白色体毛； （2）鱼具有流线型的体型； （3）蝗虫体色与绿草一致； （4）黄蜂身体上有黄黑相间的条纹（警告）； （5）竹节虫的形状与竹节相似； （6）生活在海洋中的乌贼遇到敌害时会喷出墨汁，染黑海水，乘机逃遁； （7）有些植物长期被水淹会造成死亡，但莲和水稻却可以生活在水中。 以下3道例题同学们可以试着做做看： 1. “葵花朵朵向太阳”这种生物现象在形态学上称（），在生理学上称（），在生态学上称（） A. 应激性 B. 遗传性 C. 适应性 D. 向光性 2. 生活在青草丛中的蝗虫体色呈绿色，生活在枯草丛中的蝗虫体色呈灰黄色。这种现象不能说明的是生物的（） A. 应激性 B. 变异性 C. 适应性 D. 多样性 3. 对适应性与应激性的叙述不正确的是（） A. 它们都属于生物的基本特征 B. 它们都是由生物的遗传性决定的 C. 适应性是应激性的一种表现 D. 应激性是适应性的一种表现 一．应激性、适应性产生的原因不同 应激性是受外界刺激（如声音、光、热、食物、重力、化学物质、机械刺激等）产生的反应，是一种动态反应，在比较短的时间内完成。适应性是生物体在发生变异后，经过长期自然选择，需要很长时间才形成的，并通过遗传传给后代，并非生物接受了某种刺激后才产生。二．应激性、适应性两者的关系 应激性、适应性并不是完全对立的，两者在一定条件下，也是统一的。一切生物体都具有应激性，包括原生动物、原核生物（细菌、蓝藻）、病毒等，应激性可以使其趋利避害，适者生存。生物正因为有了应激性，才能对外界环境的刺激发生一定的反应，并对变化的环境条
激光扫描共聚焦显微镜室管理规定 1.进入激光扫描共聚焦显微镜操作室的人员必须阅读并严格遵守以下管理规定 方可进入。 2.实验操作时间以仪器管理人员安排的时间为准。不能如期进行实验的，必须 提前半天告知仪器管理人员，未作说明，超过30分钟未上机者，按违约处理，取消当次实验；不超过30分钟者，实际使用的开机时间一律按使用安排表上的时间填写。 3.所有实验人员必须换鞋后方可进入实验室，并随手关门，需换或加衣服必须 在实验室缓冲区内完成，禁止在实验室内更换，严禁在实验室内饮食。无关人员不得随意进入实验室。 4.进入实验室首先查看空调温度和抽湿机的湿度（仪器的光学系统非常精密， 易受温度和湿度的变化影响，进一步可严重影响仪器性能和软件对硬件的识别）。空调温度＞23o C，湿度显示＞70%均不可开机，打开或调节空调温度，倒掉除湿机的水，等待温度湿度降到合适的度数再开机（本实验室根据设备技术要求严格控制温度在20-23 o C，湿度在40%-60%之间）。 5.查看不间断电源（UPS）是否正常工作。非正常工作下不可开机，并立刻报告 仪器管理人员；若实验过程中发生停电事故，须尽快保存数据并正常关机（UPS 供电不长）。 6.激光扫描共聚焦显微镜价格昂贵，操作复杂，原则上只有仪器管理人员和经 过特殊培训取得上机操作资格的的课题组负责人方可操作。任何人不得随意改动仪器设置。 7.实验过程中密切注意空调温度、如遇空调故障（室内温度高于250C）必须关 机并报告仪器管理人员，潮湿季节需定时检查抽湿机是否水满并及时倒水。 实验过程中发现仪器任何异常情况请立即联系仪器管理人员。
8.物镜的调节要非常小心，不能与载玻片发生碰撞。发生物镜损坏等情况，实 际操作者及所在课题组将承担物镜更换费用，并视具体情况按照实验室相关规定进行处理。若使用了水/油镜，用完后要及时用擦镜纸将水/油擦尽，再用无水乙醇清洗镜头。 9.实验完毕后一定要倒掉抽湿机的水（注意：不可关闭空调），等待仪器冷却 10分钟再用防尘罩遮盖好仪器，并诚实做好仪器的使用登记。如有发现登记不实者,将按摄像监控记录的关机时间为准，并按原价的3倍收取费用。 10.数据统一由仪器管理人员负责拷贝。用户领回其中一份《激光扫描共聚焦显 微镜使用预约申请表/实际使用/经费结算三联表》时，数据由仪器管理人员移交。任何实验人员不得私自拷贝自己或他人的数据，更无权删除或移动电脑上的任何数据。 11.离开实验室时收拾好自己的物品，并将纸屑等废弃品及时带离实验室，保持 实验台的整洁，保持实验室的洁净，关好门，摆放好鞋子，文明离开实验室。 仪器管理人员：李华丽（） 亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室 2014.12