化学分析计量
CHEMICAL ANALYSIS AND METERAGE
第26卷，第4期2017年7月
V ol. 26，No. 4
July 2017
85
doi ：10.3969／j.issn.1008–6145.2017.03.022
血清中尿酸和尿素含量测定的超高效液相
色谱–单四级杆质谱法国际比对*
石莲花，金有训，何海红，全灿，徐蓓，李红梅
(中国计量科学研究院，北京 100029)
摘要 基于单四极杆质谱建立了血清中尿酸、尿素含量准确测定的同位素稀释超高效液相色谱–质谱方法，并以该方法参加了国际物质量咨询委员会(CCQM)组织的“血清中尿酸尿素含量测定”的K 、P 国际比对。血清样品用乙腈除去蛋白质，分别采用C 18反相柱和电喷雾(ESI)负离子模式检测尿酸、CN 正相柱和ESI 正离子模式检测尿素，同位素稀释的单点校准法进行定量，用3种标准物质(GBW 09157，GBW 09169，NIST SRM 909c)进行方法验证，测量比对血清样品(Ⅰ，Ⅱ)获得国际等效一致性。该方法操作简单、
快速准确，适用于血清中尿酸尿素的定量分析。关键词 单四级杆质谱；同位素稀释液相色谱–质谱法；尿酸；尿素；血清；国际比对中图分类号：O657.7 文献标识码：A 文章编号：1008–6145(2017)03–0085–04
Determination of Uric Acid and Urea in Serum by Ultra Performance Liquid
Chromatography–Single Quadrupole Mass Spectrometry for International Comparison
Shi Lianhua, JinYouxun, He Haihong, Quan Can, Xu Bei, Li Hongmei
(National Institute of Metrology, Beijing 100029, China)
Abstract The method to determine uric acid and urea in serum was established by single quadrupole–based isotope dilution ultra performance liquid chromatography–mass spectrometer, which was used for CCQM–K and P international comparison. Acetonitrile was added in the sample for protein precipitation, a C 18 reversed-phase column and electrospray ionization (ESI) negative ion mode was used to determine uric acid, and CN normal-phase column and ESI positive ion mode were used to determine urea, and a single point calibration method for quantitative isotope dilution. This method was veri ?ed with GBW 09157, GBW 09169 and NIST SRM 909c certi ?ed reference materials, and serum samples (Ⅰ，Ⅱ) were measured to obtain international equivalent consistency. The method is simple in operation, rapid and accurate, it is suitable for quantitative analysis of urea in serum uric acid.
Keywords single quadrupole mass spectrometry; isotope dilution high performance liquid chromatography–mass spectrometry; uric acid; urea; serum; international comparison
血清尿酸、尿素是医学临床检查肾功能的重要指标［1］。尿酸是嘌呤代谢物的最终产物，其在血清中的浓度若超过正常值则会引起痛风、肾结石、冠心病等疾病［2–4］；尿素是蛋白质代谢产物，是蛋白质代谢与尿毒症临床诊断的重要指标之一［5］。因此血清尿酸、尿素的准确定量对临床诊断及治疗具有重要意义。
目前血清尿酸、尿素的测定方法［6–8］中，质谱技术因具有快速、准确、灵敏度高等优点而得以广泛应用，其中同位素稀释液相色谱–串联质谱联用(LC–
IDMS ／MS)［9–12］ 、气相色谱–质谱(GC–ID ／ MS)［13–15］
技术，是国际检验医学溯源联合委员会(JCTLM)认可的参考测量方法。近年来，质谱技术发展迅速，一
级和二级质谱性能进一步提升，分辨率和灵敏度、特
异性都有了显著提高。本研究结合同位素稀释技术，建立了操作简便、特异性强、灵敏度高的液相色谱–单四级杆质谱(LC–IDMS)法，可代替前处理繁琐的气相色谱–质谱法(GC–MS)和易被高浓度待测物污染的液相色谱–串联质谱法(LC–MS ／MS)。用此方法参加国际物质量咨询委员会组织的K ，P 国际比对，使用中国计量科学研究院的纯物质标准物质和血清基体标准物质进行了校准和方法验证，使
*国家科技基础专项(2011FY130100)；国家重点研发计划项目(2016YFD0500800)；中国计量科学研究院比对专项(03-AJLSF15)
联系人：石莲花；E-mail: shilh@https://www.doczj.com/doc/ca16699520.html, 收稿日期：2017–04–01
API4000三重四级杆质谱操作SOP 开机： 1．确认主机，机械泵，电脑的电源以及各部件之间的通讯线连接正常。 2．确认气体供应正常： Curtain gas，高纯氮（UHP:99.9999%）, 压力60psi， Gas1&Gas2氮气或零级空气: 100psi， Exhaust gas，无油压缩空气，55psi 3．打开机械泵电源，启动机械泵（API5000有两台机械泵，都要启动） 4．在机械泵启动10min之后，打开质谱主机电源，启动主机。仪器自检无误后进入抽真空状态。 5．打开电脑，打开操作软件Analyst，配置profile并激活。 6．真空压力到达正常稳定值之后，即可进行分析工作。正常的压力值每台仪器稍有区别，注意记录（碰撞气全关的情况下，应该在8E-6torr左右）。 7．开机完成。 关机： 1．短暂的闲置仪器，置于standby状态即可 2．长时间不用（超过几周）或维护仪器，需要彻底关机。 3．首先退出采样程序，将仪器置于standby状态。确保没有流动相进入质谱。 4．关闭质谱主机电源，拔出电源线。 5．至少15min之后，关闭机械泵电源，拔出电源线。 日常使用： 1．检查气体供应，确保压力正常，供应量充足。 2．打开Analyst及其它相关软件。 3．配置并激活profile。 4．查看仪器状态：真空值，有无报错信息。确认仪器正常。 5．编辑新方法或调用现有方法，平衡仪器，让仪器有充分的时间预热，需要约1h。尤其要注意的是要在离子源加热约30min之后再让液相流动相进入质谱。 6．编辑或调用sample batch，开始采样。 7．每天采样结束，都要用50%的甲醇水溶液冲洗喷雾针15min。 8．将仪器切换到standby状态。
尿酸的测定 1.原理： 2尿酸+O2+H20 尿酸酶尿囊素+CO2+H2O 2H2O+4—氨基安替比林+EHSPT 过氧化物酶醌亚胺+4H2O (POD) 2.标本采集与处理： 2.1受检者准备：病人必须空腹12小时，不饮酒24小时后采集血样。 2.2静脉采血：除非是卧床的病人，一般采血取坐位，从肘静脉取血，使用止血带的时间不超过1分钟，穿刺成功后立即松开止血带； 2.3标本应无溶血。如不符合应重新采集 2.4采血管要求:采血时要求使用一次性无菌注射器，一人一管，用后毁形，用500mg/L有效氯浸泡消毒３０分钟，回收、焚烧、做好登记。 3.试剂： 3.1试剂组成： 试剂Ⅰ: 尿酸酶﹥0.6u/ml 过氧化物酶﹥1.8u/ml 4—氨基氨替比林 0.3 mmol/L EHSPT 1.4 mmol/L 试剂Ⅱ: 磷酸缓冲液10mmol/L 3.2标准液：0.297 mmoI/L 3.3质控血清： 应在测量未知样本的同时检测质控物并确保质控在可接受的范围内，并且结果必须在三个标准差范围内。 3.3.1质控品批号及范围:批号022431，范围*±2st和*±3s。 3.3.2保存环境:在2—8℃保存，有效期内稳定。 3.4试剂的贮存与稳定性：
4.仪器：上海迅达公司的半自动生化分析仪XD811。 5.操作程序： 5.1 试剂准备：取试剂Ⅱ5ml加入一瓶试剂1中混合。 5.2 分析参数： 方法：终点法波长： 505nm 温度：37℃比色杯光径：1cm 6.计算方法： 血清尿酸（umol/l）=测定管吸光度/标准管吸光度×标准液浓度 7.操作性能：如异常升高，用生理盐水稀释后重测,结果乘以稀释倍数。 8.参考值：142——416umol/L 9.结果审核： 9.1室内质控结果的判断：对质控结果进行分析是否在控。 9.2对检验结果进行审核，包括检验项目是否漏项，打印是否清楚。 10.临床意义：痛风、急慢性肾小球肾炎、白血病 参考文献：全国临床检验操作规程中华人民共和国卫生部医政司
尿酸（UA）测定试剂盒（尿酸酶-POD法） 适用范围：用于体外定量测定人体血清中尿酸的浓度。 1.1试剂盒包装规格 试剂1：1×25ml，试剂2：1×5ml；试剂1：2×60ml，试剂2：2×12ml； 试剂1：3×40ml，试剂2：3×8ml；试剂1：4×60ml，试剂2：4×12ml； 试剂1：2×400ml，试剂2：1×160ml；试剂1：1×10L，试剂2：1×2L； 试剂1：2×40ml，试剂2：2×8ml。 校准品（选配）：1×1ml，1×3ml。 1.2试剂盒主要组成成分
2.1 外观 液体双试剂：试剂1无色澄清液体；试剂2无色澄清液体。 校准品：无色至淡黄色液体。 2.2 净含量 液体试剂的净含量不得低于标示体积。 2.3 试剂空白吸光度 在37℃、546nm波长、1cm光径条件下，试剂空白吸光度应不大于0.2。 2.4 分析灵敏度 测定浓度为300μmol/L的样本，吸光度变化值（ΔA）应在（0.05，0.25）范围内。 2.5 线性范围 在（0，1100）μmol/L线性范围内，线性相关系数r不小于0.996。
2.6 重复性 重复测试两份高低浓度的样本，所得结果的变异系数（CV%）应不大于4%。 2.7 批间差 不同批号试剂测试同一份样本，测定结果的批间相对极差应不大于6%。 2.8 准确度 相对偏差：相对偏差应不超过±10%。 2.9 校准品溯源性 依据GB/T 21415-2008《体外诊断医疗器械生物样品中量的测量校准品和控制物质赋值的计量学溯源性》的要求，校准品溯源至NIST生产的有证参考物质（SRM913a）。 2.10稳定性 效期稳定性：试剂盒在2℃~8℃下有效期为15个月，取失效期的试剂盒进行检测，试验结果满足2.1、2.3、2.4、2.5、2.6、2.8的要求。
如对您有帮助，可购买打赏，谢谢 尿酸检测方法是什么 导语：现在生活中随着大家生活质量的不断提高，患有尿酸偏高的人群越来越多！有很大一部分患者朋友们，在生活中却不知道该如何检测尿酸的含量，尿 现在生活中随着大家生活质量的不断提高，患有尿酸偏高的人群越来越多！有很大一部分患者朋友们，在生活中却不知道该如何检测尿酸的含量，尿酸检测方法是什么对于患者一定要有所了解，这样才能及时的检查自身的健康问题，及时的发现身体问题，早日就医接受治疗，并尽快康复是很重要的。 如果尿酸任其增长，从而导致痛风病的发生，给自己和家人的日常生活带来很大的不便，那么，今天上海朱建福专家就教大家如何检测自己体内尿酸的含量！ 既然，我们知道了尿酸过高的给自己带来了很严重的后果，那么，在日常生活中我们该如何检查呢？尿酸检测方法是什么呢。 一，痛风患者尿酸常规检查。病程早期一般无改变，累及肾脏者，可有蛋白尿、血尿、脓尿，偶见管型尿;并发肾结石者，可见明显血尿，亦可见酸性尿石排出。 二，痛风患者血常规和血沉作为急性发作期痛风的检查。外周血白细胞计数升高，通常为(10～20)×109/L，很少超过20×109/L。中性白细胞相应升高。肾功能下降者，可有轻和中度贫血。血沉增快，通常小于60mm/h。 三，痛风患者血尿酸测定作为痛风的检查：急性发作期绝大多数病人血清尿酸含量升高。一般认为采用尿酸酶法测定，男性416μmol/L(7mg/dl)，女 性>357μmol/L(6mg/dl)。 四，痛风患者X线摄片检查、CT与MRI检查：沉积在关节内的痛风石，根据其灰化程度的不同在CT扫描中表现为灰度不等的斑点状影像。 五，痛风患者通过尿酸含量测定作为标准：在无嘌呤饮食及未服影响尿酸排泄药物的情况下，正常男性成人血尿酸总量不超过3.54mmol/(600mg/24h)。 了解了上述5点，患者朋友们也可以对日常生活中如何查尿酸有了了解与认识，当得知自己身体出现尿酸很高时，您还是要到正规医院去检查与治疗。 尿酸会因为平时的饮食和药物的食用会产生影响，而且影响是很大的一部分。尿酸检测方法是什么，患者朋友要及时检测，检测结果如果尿酸偏高厉害，建议患者朋友最好再复查一次，也是对自身的身体负责，患者朋友一定要及时治疗，早日得到康复。 生活知识分享
24小时尿酸测定标准操作规程 1 检验申请 检验项目申请：24小时尿酸测定，临床医生根据需要提出检验申请。 2 标本采集与处理 尿样：收集24小时尿样品，可采用二甲苯防腐。 3 方法原理 同血清尿酸的方法原理。 4 试剂及其他用品 同血清尿酸。 5 校准品与校准模式 5.1校准品： Beckman-Coulter SYNCHRON MULTI 校准液，其浓度可溯源至美国国家标准技术研究所（NIST）标准参考材料。 5.2校准类型和校准点数目：线性模式，1个校准点。 5.3校准周期：校准间隔时间不限，试剂换批号使用时或质控结果超过规定的2SD范围，需要定标。 5.4校准液重建方法：Beckman-Coulter SYNCHRON MULTI 校准液即开即用，无需特殊准备。 6 质控品与室内质控规则 6.1质控品采用由Beckman-Coulter公司提供的两个不同水平未定值质控血清。 6.2质控液重建方法：液态质控血清，即开即用，无需特殊准备。 6.3质控品测定：在每一批标本中测定两个水平质控血清各一次。 6.4质控规则：采用Westgard多规则质控规则，由计算机程序进行检索与判断。 6.5如出现失控情况，按室内质控标准操作程序采取各种有效的纠正措施及时纠正，并在确认重新回复到控制状态后开始标本检测。 7 适用仪器 适用AEROSET和C16000全自动生化分析仪器。 8 标本检测步骤 装载试剂→进行校准→进行质控→输入标本检测项目→加载标本→标本测 定→结果复核→报告。 9 主要分析参数 同血清尿酸。 10 结果计算 24小时尿酸总量＝尿酸的相应浓度×24小时体积（L） 11 检验结果的报告及范围 11.1结果的报告
文章导读 血清尿酸是人体中一种提取出来并且稀释过的高分子物质，他是有一定正常范围的，偏高偏低都会导致不同程度的疾病，他往往是一些疾病的早期症状，可能有些人对这个东西不太重视，觉得他只是小问题，严重不到哪里去，实际上，他有可能会养成一个比较大的问题，所以我们应该重视他，那么，血清尿酸偏高严重吗? 正常值: (1) 磷钨酸还原法：男150-420μmol/L;女90-357μmol/L。(2) 尿酸酶-过氧化物酶偶联法：成人90-420μmol/L。 (1) 血尿酸增高： ①慢性肾炎血尿酸明显增高，且较BUN、Cr更显著，出现更早。其他肾病晚期，如肾结核、肾盂肾炎、肾积水等血尿酸亦增高。因肾外因素影响较大，故其升高程度并不与肾功能受损程度成正比。 ②痛风，由核蛋白及嘌呤代谢紊乱所致，血尿酸>595μmol/L。 ③白血病，多发性骨髓瘤，真性红细胞增多症等因核酸代谢分解增加使血尿酸增加。 ④其他：氯仿、四氯化碳、铅中毒、子痫、妊娠反应、剧烈运动等。 (2) 血尿酸减少：较少见，见于恶性贫血、乳糜泻等。 注意事项 (1) 磷钨酸还原法： ①为确保检测结果准确可靠，每次测定应包括质控血清，所得值需在允许范围。 ② WHO推荐的OCV为±5%，RCV为±10%。我国推荐的RCV为7.5%。 ③红细胞中含有多种非特异性还原物质，因此应用血清或血浆作样本。 ④草酸钾与磷钨酸反应，形成不溶性的磷钨酸钾，可造成显色液混浊。因此不能用草酸钾作抗凝剂。 ⑤血清和尿液尿酸在室温可稳定3天。尿液冷藏后，可引起尿酸盐沉淀析出。其解决方法为：将尿液pH调至7.5-8.0，并加热到50℃，使沉淀完全溶解，然后再行测定。 ⑥尿酸在水中溶解度极低，配制标准液时，加碳酸锂加热助溶。如无碳酸锂，可用碳酸
离子阱质谱和四极杆质谱的原理 分析质荷比的原理 四极杆（Quadrupole）：由四根带有直流电压（DC）和叠加的射频电压（RF）的准确平行杆构成，相对的一对电极是等电位的，两对电极之间电位相反。当一组质荷比不同的离子进入由DC和RF组成的电场时，只有满足特定条件的离子作稳定振荡通过四极杆，到达监测器而被检测。通过扫描RF场可以获得质谱图。四极杆成本低，价格便宜，虽然目前日常分析的质荷比的范围只能达到3000，但由于分析器内部可容许较高压力，很适合在大气压条件下产生离子的ESI离子化方式，并且，ESI电离最突出特点是产生多电荷，蛋白质和其他生物分子电喷雾电离所产生的电荷分布一般在3000以下，所以四极杆广泛地与ESI联用。另外，三重四极杆由于可以做多级质谱，定量也方便，使用极为广泛。 离子阱（Ion trap）：由一对环形电极（ring electrod）和两个呈双曲面形的端盖电极（end cap electrode）组成。在环形电极上加射频电压或再加直流电压，上下两个端盖电极接地。逐渐增大射频电压的最高值，离子进入不稳定区，由端盖极上的小孔排出。因此，当射频电压的最高值逐渐增高时，质荷比从小到大的离子逐次排除并被记录而获得质谱图。离子阱质谱可以很方便地进行多级质谱分析，对于物质结构的鉴定非常有用。 我们单位就用的ESI-四极杆分析多肽，请问三重四极杆原理又是什么？ 说来比较复杂，我有相关的文献，需要的话我可以发信给你。 有本英文的书"Practical aspects of ion trap mass spectrometry" Thomas Cairns主编的，很详细，可以到国家图书馆借到。 简单得说，离子阱能囚禁的离子质量与所用射频的频率的平方成反比，与其幅度成反比。通常是固定频率，从小到大扫描幅度，其囚禁的离子以质量从小到大的次序就出来了。 简单得说，离子阱能囚禁的离子质量与所用射频的频率的平方成反比，与其幅度成反比。通常是固定频率，从小到大扫描幅度，其囚禁的离子以质量从小到大的次序就出来了。 ---------------------------------------------------------------- 还有点我不明白：就是SI M scan或MS/MS模式isolating ions时m/z大于要监测的离子的是怎么被eject的？还有Endcap上的tailored RF wav ef orm和resonance eject RF都是什么样的电压，怎么作用的？ “还有点我不明白：就是SIM scan或MS/MS模式isolating ions时m/z大于要监测的离子的是怎么被eject的？” 我来试试看解释一下这个问题 其实加载到四级杆上的DC和RF电压使得四级杆内产生一个变化的电场，而变化的电场又产生变化的磁场（电磁感应现象）。带点离子通过的时候，其实就是切割磁力线的匀速运动。 在选定的m/z下，这个能量场只允许某一个或某一范围内的m/z离子通过。更大的m/z离子因为场给予的能量不足将逐渐减速而从四级杆空隙跑出。更小的m/z离子因场能大于其自身能量，而加速飞离四级杆。 故而最后达到检测器的仅是你选定的m/z离子
一、目的 尿酸为核蛋白与核酸中嘌呤分解代谢的最终产物。内源性尿酸由体内组织核酸分解代谢产生，外源性尿酸则来自于食物中核酸的分解。尿酸除一小部分由肝脏分解破坏外，大部分经肾小球滤过随尿排出体外。肾脏早期病变时，血中尿酸首先升高，有助于肾脏损伤的早期诊断。 二、测定方法 尿酸酶-过氧化物酶偶联法 三、原理 尿酸酶氧化尿酸生成尿囊素和过氧化氢，在过氧化物酶催化下，过氧化氢使3，5-二氯二羟苯磺酸和4-氨基安替比林缩合成红色醌类化合物。在520nm波长读取吸光度。与尿酸浓度成比例。 四、标本 1、静脉抽取病人空腹血，置于洁净干燥试管或含促凝剂的真空管内。 2、采血后应立即送到检验科生化室。 3、样品收到后立即分离血清，不能及时测定的血清应于2—8℃保存。 4、溶血或脂血的标本不能测定。 五、设备及试剂 1、希迈全自动生化仪。 2、上海复星长征公司尿酸试剂。 3、尿酸试剂应贮存于2—8℃冰箱。 六、操作步骤
1、样本的准备：将编好号的样品离心，取血清加入样品杯放到 样品盘的规定位置，再把样品盘放到仪器中相应位置。 2、试剂的检查：每天测定前先检查各种试剂的数量、效期、定 标等情况，确认无误后方可进行测定。 3、操作方法：详见希迈生化仪操作手册。 七、质量控制 每天操作过程中应使用上海复星长征公司的生化质控血清至少做一次室内质控，每年定期参加海南省临检中心所组织的室间质评。 八、干扰因素 遇高浓度维生素C的标本，可使测定结果偏低。 九、参考区间 男性：150—420 umol/l 女性：90—360 umol/l 十、实验室解释 1、血清尿酸测定对痛风诊断最有帮助，痛风患者血清中尿酸 增高，但有时亦会出现正常尿酸值。 2、在核酸代谢增加时，如白血病、多发性骨髓瘤、真性红细 胞增多症等尿酸也会增高。 3、肾功能减退时，尿酸也会增高。 4、在氯仿中毒、四氯化碳中毒及铅中毒、子痫、妊娠反应及 食用富含核酸的食物等，均可引起尿酸增高。 十一、异常结果处理 实验室结果应与临床相符，不符的应复查。 十二、参考文献 1、叶应妩、王毓三主编，全国临床检验操作规程，中华人民共 和国卫生部医政司、南京、第二版、1997。
尿酸测定试剂盒（尿酸酶法） 适用范围：本试剂用于体外定量测定人血清中尿酸[UA]的浓度。 1.1包装规格 1.2主要组成成分 本试剂由试剂1（R1）和试剂2（R2）组成 试剂1（R1）： 磷酸氢二 钠 2.84g/L 磷酸二氢 钾 10.88g/L TBHBA（2,4,6-三溴-3-羟基苯甲酸） 1mmol/L 叠氮 钠0. 5g/L 试剂2（R2）： 磷酸氢二 钠 12.9g/L
磷酸二氢 钠 10.5g/L 4-氨基安替比 林 0.3mmol/L POD 3.5KU/L 尿酸 酶 2. 5KU/L 抗坏血酸氧化酶1KU/L 酶稳定剂 k-80 4g/L 亚铁氰化 钾 0.02g/L 叠氮 钠 0. 5g/L 2.1 外观 试剂盒各组分应齐全、完整、液体无渗漏；外包装完好、无破损，标签完好、字迹清晰；R1试剂应为无色澄清液体，R2试剂应为无色或淡黄色澄清液体。液体试剂不得有沉淀和絮状物。 2.2 净含量 用通用量具测量，液体试剂的净含量应不少于标示值。 2.3 试剂空白 在548nm处测定试剂空白吸光度，应≤0.2A。 2.4 分析灵敏度 测试300umol/L的被测物时，吸光度变化（ΔA）应不低于0.01A。 2.5 准确性 用参考物质对试剂盒进行测试，相对偏差不超过±10%。
2.6 重复性 用三个水平的样本检测，检测结果批内变异系数（CV）应不超过4％。 2.7 线性 2.7.1在[29,1190]umol/L范围内，线性相关系数r应不低于0.990； 2.7.2在[29,119)umol/L范围内绝对偏差不超过±11.9umol/L； [119,1190]umol/L范围内相对偏差不超过±10%。 2.8 批间差 对同一份样品进行重复测定，相对极差≤6％。 2.9 稳定性 该产品在2℃～8℃条件下贮存有效期为12个月，取到效期后的产品进行检测，应符合2.1、2.3、2.4、2.5、2.6、2.7的要求。
血清尿酸UA测定 1 检验目的 指导本室工作人员规范操作本检测项目，确保检测结果的准确。 2 实验原理 尿酸酶分解尿酸生成尿囊素和过氧化氢。 尿酸+2H2O+O2尿酸酶尿囊素+ CO2 + H2O2 在过氧化物酶存在的情况下，4-氨基比林由过氧化氢氧化生成醌二亚胺。 2H2O2+H++TOOSa+4-氨基比林过氧化物酶醌二亚胺+4 H2O 醌二亚胺的颜色深浅与尿酸浓度成正比，可通过测定吸光度的上升来获得。 3 标本： 3.1 病人准备：使用新鲜血清,不使用血浆.在采集血液后2h 分离血清. 3.2 类型：血清，肝素或EDTA血浆，尿液。
3.3 标本存放：血清、血浆的稳定性：20～25℃保存可稳定3天；4～8℃保存可稳定7天；-20℃保存可稳定6个月。对尿液用蒸馏水作1:10稀释后检测，结果乘11后报告。 3.4 标本运输：常温条件下保存运输。 3.5 标本拒收标准：细菌污染的标本。 4 实验材料 4.1 试剂：上海罗氏诊断产品有限公司UA试剂盒,国械注进20142405056 YZB/GER 5724-2014） 4.1.1 试剂组成 R 1 磷酸盐缓冲液：0.05 mol/L，pH 7.8；TOOS：7 mmol/L；脂肪醇聚乙二醇醚：4.8%；抗坏血酸盐氧化酶（EC 1.10.3.3；胡瓜）≥83.5 μkat/L（25℃） R 2 磷酸盐缓冲液：0.1 mol/L，pH 7.8；亚铁氰化钾（Ⅱ）：0.3 mmol/L；4-氨基比林≥3mmol/L；尿酸酶（EC
1.7.3.3；原生节杆菌）≥83.4 μkat/L（25℃）；过 氧化物酶（POD）（EC 1.11.1.7；辣根）≥50μkat/L （25℃） 4.1.2 试剂准备：试剂为即用式。 4.1.3 试剂稳定性与贮存：2-8℃下的保存期限：见试剂标签上的有效期。机上稳定期： 4周 4.1.4 变质指示：当试剂有看得见的微生物生长，有浊度，或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质，不能继续使用。 4.2 校准品：使用罗氏多项生化校准品提供的UA校准品对自动分析仪进行校准。 4.3 质控品：使用正常值、病理值复合控制品。 5 仪器 AU2700生化分析仪，罗氏P800生化分析仪, 西门子ADVIA-2400生化分析仪，东芝TBA-120生化分析仪 6 操作步骤
三重四极杆串联质谱仪技术参数 原装进口 主要用途：用于食品、农产品、环境样品等复杂基质中痕量有机化合物的定量定性分析 1.工作条件 1.1电源:220V，50Hz 1.2温度:操作环境15?C -35?C 1.3湿度:操作状态25-50%, 非操作状态10-95% 2.性能指标 2.1质谱部分 2.1.1 免清洁离子源：整体非镀层惰性，无需拆卸离子源，无需清洗透镜，无需重新调谐，无需重新校正。 *2.1.2无损双灯丝设计，且具有灯丝透镜，保护灯丝，提高灯丝寿命，灯丝电流：0-300uA 2.1.3离子化能量：10-300ev *2.1.4质量分析器：整体、双曲面石英镀金四极杆（首选）；四极杆温度（包括主四级杆及预杆）可独立加热至200℃，免清洗。 2.1.5质量轴分辨率：0.4-4amu 可调； 2.1.6质量轴稳定性：± 0.10u/48小时 2.1.7质量范围：10-1050 m/z 2.1.8侧开式面板，面板控制器可显示质谱状态信息及质谱工作参数的输入 *2.1.9仪器检测限指标 (为仪器验收指标)：(测试的柱子规格为30mx0.25mmx0.25um) 仪器检测限指标(EI MRM IDL)：小于0.5fg 八氟奈 (OFN),2fg OFN连续进样8次 投标时提供应用文章佐证 *2.1.10灵敏度：(测试的柱子规格为30mx0.25mmx0.25um) EI MRM模式：100fg 八氟奈, 信/噪比≥14000:1(272-222 ) EI MRM模式：10fg 八氟奈, 信/噪比≥1400:1(272-222 ) *2.1.11最大扫描速率：≥20000amu/秒 *2.1.12最小MRM驻留时间：≤0.5毫秒 *2.1.13多反应监测采集速度(MRM):≥800 MRM/秒 2.1.14线性加速高压六极杆碰撞反应池，消除“记忆效应”和“交叉污染”；采用氮气作为碰撞气，氦气淬灭技术，去除中性噪音干扰。 2.1.15碰撞池能量范围：0-60ev 连续可调 2.1.16动态范围：全动态范围为106 *2.1.17真空系统：两级分子涡轮泵高真空系统, 空气冷却，无需水冷，分子涡轮泵和质谱
血清尿酸测定作业指导书 1.实验原理 使用TBHBA（2,4,6-三溴-3-羟基苯甲酸）的酶比色测定法。尿酸酶氧化尿酸产生过氧化氢和尿囊素。在过氧化物酶存在下，过氧化氢氧化4-氨基安替比林和TBHBA（2,4,6-三溴-3-羟基苯甲酸），产生红色醌亚胺（Trinder 反应产物）。 尿酸酶 尿酸+ H2O + O2尿囊素+ CO2 + H2O2 过氧化物酶 TBHBA + 4-氨基安替比林+ 2H2O2醌亚胺+ 3H2O 2. 标本： 2.1 病人准备：12小时禁食。 2.2 类型：血清，肝素或EDTA血浆，尿液。 3. 标本存放：血清、血浆的稳定性：20～25℃保存
可稳定3天；4～8℃保存可稳定7天；-20℃保存可稳定6个月。对尿液用蒸馏水作1＋10稀释后检测，结果乘11后报告。 4. 标本运输：常温条件下保存运输。 5. 标本拒收标准：细菌污染的标本。 6. 实验材料 6.1 试剂威特曼尿酸测定试剂盒。试剂1 试剂2 6.1.1试剂准备：试剂为即用式。 6.1.2 试剂稳定性与贮存：试剂保存于2～8℃，若无污染，可稳定至失效期。试剂不可冰冻。开盖后放于仪器的冰箱中可以稳定30天。当546nm处的试剂空白吸光度小于0.5时，试剂可正常使用。 6.1.3 变质指示：当试剂有看得见的微生物生长，有浊度，或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质，不能继续使用。 6.1.4 注意事项：试剂中含叠氮钠（0.95g/L）为防腐剂。不可入口！避免接触皮肤及粘膜。应采取必要的
预防措施使用试剂 6.2 校准品：使用DiaSys公司提供的TruCal U校准品对自动分析仪进行校准，具体参见生化检验校准品和质控品.SOP文件。 6.3 质控品：具体参见生化检验校准品和质控品.SOP 文件。 7. 仪器：奥林巴斯AU2700生化分析仪 8. 操作步骤 8.1 项目基本参数：参见生化检验奥林巴斯AU2700生化分析仪项目测定参数.SOP文件 8.2仪器操作步骤：参见生化检验奥林巴斯AU2700生化分析仪操作规程.SOP文件 9. 检验结果的判断与分析 10.质量控制：在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为未知标本进行分析，以2S为质控警告限，3S为失控限，绘制质控图，判断是否在控。质控规则参见室内质控操作规程.SOP文件。
目录 1. 检测原理 2. 标本采集与处理 2.1 受检者的准备 2.2 静脉采血 2.3 抗凝剂 2.4 标本处理 3. 试剂 3.1 试剂 3.2 校准血清 3.3 试剂与校准血清的稳定性 4. 仪器 5. 操作 6. 计算 7. 操作性能 7.1 精密度 7.2 准确度 7.3 灵敏度 7.4 可报告范围 7.5 特异性 7.6 干扰 8. 参考值 9. 临床意义 附录A: 参数 1. 检测原理
反应生成的醌亚胺在505nm波长有最大吸收，所产生的颜色强度与血清中尿酸含量成正比，再通过与同样处理的尿酸标准溶液比较，经过计算可求出血清中尿酸的含量。试剂中的抗坏血酸氧化酶可排除抗坏血酸对结果的影响，测定尿酸所用的酶反应如下: 尿酸酶 尿酸＋O2 ＋2H2O ------------ 尿囊素＋CO2 ＋2H2O2 过氧化物酶 H2O2＋4-氨基安替比林＋2、4、6-三碘-3-羟基苯甲酸---------------醌亚胺＋H2O 2．标本采集与处理 2.1 受检者的准备： 病人空腹12h，不饮酒24h后采集血样。体检对象抽血前应有两周的的正常状况记录。注意有无应用影响测试项目的药物。此外，对于体检者，采血的季节都应做相关记录，因为样本中各项目的含量有季节性变动，为了前后比较应在每年同一季节检验。应嘱体检对象在抽血前24小时内不做剧烈运动。 2.2 静脉采血： 除非是卧床的病人，一般在采血时取坐位。体位影响水分在血管内外的分布，会影响测试项目的浓度。在采血前至少应静坐5分钟，一般从肘静脉取血，使用止血带的时间不超过1分钟，穿刺成功后立即松开止血带。 2.3 抗凝剂： 血浆使用0.1mg/ml肝素作为抗凝剂。 2.4 标本处理： 血标本室温放置30min～45min后离心分离血清或血浆，在两小时内检测完毕；如两小时内不能检测完毕，将离心分离血清或血浆置洁净试管加盖2-8℃保存。 3．试剂 3.1 试剂： 本科使用湖南永和阳光科技有限责任公司UA试剂盒，为液体双试剂，各组分如下：
虽然现实中使用的四级杆质量选择器大多使用圆柱形，然而理想的质量选择器外形为双曲线形。质量选择器的大小通常在几厘米到几十厘米之间。 四级杆质量选择器的四根极杆被对应的分为两组，分别施加反相射频高压。其中两组电压的表达式分别为： 两组电压只有符号相反。其中U为直流(DC)分量，V为射频(达到发射频率的交流电，RF)分量的振幅(在此处用到的是V_rms而不是Vp-p)。 在通常情况下，U的值为500-2000 V，V为0-3000 V 。[1] 在这样的电场环境下，离子会根据电场进行震荡。然而，只有特定荷质比的离子可以稳定的通过电场。当极杆上的电压被指定时，质量过小的离子会受到很大的电压影响，从而进行非常激烈的震荡，导致碰触极杆失去电荷而被真空系统抽走；质量过大的离子因为不能受到足够的电场牵引，最终导致碰触极杆或者飞出电场而无法通过质量选择器。 质量稳定区间函数 在四级杆质量选择器的硬件中，通常的做法是调整射频工作频率w来选择离子的质量，调整U与V的比值来调整离子的通过率。本节对应的图片可见，三角形区域为该质量的离子稳定的区域。U与V的比值在此体现为斜率。可见，U/V越大，离子的选择精度越高，仪器的解析能力越强，但是能稳定通过的离子数量减小；而U/V比值越小，离子通过的数量多，但是解析度下降。经过权衡之后，大多数四级杆质谱仪的解析能力大约都是1Th，体现在质谱图上就是半峰宽度大约为1Th或者1Da。[3] 值得指出的是，当U值为零，即四级杆上仅施加射频电压时，所有离子均可通过。这样操作的意义是，可以使离子束更加聚拢。通常当作离子镜(Ion Lens)使用。最典型的扩展就是八极杆和六极杆的出现，实际是源自四级杆的基本工作特性。
血尿酸测试仪监测的临床意义 怡成血尿酸检测仪无需专业医护人员，患者足不出户可以独立完成操作。减少了去医院化验的繁琐程序和较高的费用。血尿酸检测仪微量指血，几近无痛；快速显示结果、使患者即时掌握尿酸水平；液晶数字直观显示，无需解读化验单。简单、快捷、方便、准确、便宜。 √血尿酸检测，可以预防痛风的发生以及延缓痛风引起的如痛风性关节炎、痛风性肾病、急性尿酸性肾病、尿酸性肾结石、急性梗阻性肾病，肾功能能障碍，缺血性心脏病等各类并发症的发生； √血尿酸检测，可以有效的提示糖尿病、高血压及心脑血管疾病的危险因素，减少糖尿病、高血压及心脑血管的发生率和合并并发症的出现； √血尿酸检测，可以及时指导病人的饮食生活，防止潜在疾病的发生； √血尿酸的检测，对痛风患者在治疗过程中病情的发展变化具有科学的量化指导作用。 适用于高尿酸血症患者、痛风患者、糖尿病、高血脂症、、高血压、肥胖人群；酗酒、常食富有嘌呤的食物人群及40岁以年中老年人群。 √血尿酸指标的检测对于控制尿酸值正常水平和预防痛风，指导痛风的治疗具有重要意义。 正常人通常每半年检测一次；亚健康人群（酗酒、营养不良、常食富有嘌呤食物者、免疫力低下、缺乏运动等人群）应每三个月检测一次；糖尿病、高血压、高血脂、心脑血管患者通常每一个月检测一次；高尿酸血症（无临床症状）者通常每半个月检测一次；痛风患者通常每周检测一次；
血尿酸的正常值：尿酸酶法检查（医院常规生化检验） 男性150-440μmol/L 女性 95-360μmol/L 高尿酸血症诊断： 男性＞440μmol/L，女性＞360μmol/L，即称为高尿酸血症。 痛风的诊断：①血尿酸检查：男性＞440μmol/L，女性＞360μmol/L； ②关节受累：关节液中出现尿酸盐结晶；X线拍片关节有损害； ③关节内有痛风石； ④痛风肾病：出现尿蛋白，可导致肾功能不全； ⑤尿酸结石：出现血尿、肾绞痛。 高尿酸血症与痛风的关系：目前没有一个具体的数值，多高就引起关节炎，多高就引起肾损害，多高就引起肾结石，但只要超过正常值，就有发生痛风的危险。表现为以下几种情况： ①有的人血尿酸增高，一生始终没有症状； ②随年龄增高，出现痛风的比率增高； ③血尿酸水平越高，出现痛风的比率越高；尿酸水平在420～470μmol/L 者有12%的患者发展为痛风，尿酸值≥536μmol/L者痛风发病率将增 加6倍。 ④高尿酸血症持续的时间越长，出现痛风的比率越高；
尿酸测定试剂盒(尿酸酶法) 适用范围：本试剂盒用于体外定量测定人血清中尿酸的浓度。 1.1 规格 试剂1: 1×60mL，试剂2: 1×20mL； 试剂1: 3×60mL，试剂2: 1×45mL； 试剂1: 1×60mL，试剂2: 1×12mL； 试剂1: 4×60mL，试剂2: 4×20mL； 试剂1: 2×45mL，试剂2: 2×15mL； 试剂1:3×30mL，试剂2:2×15mL； 试剂1:1×4.5L，试剂2:1×1.5L； 试剂1:2×4.5L，试剂2:1×3L。 1.2主要组成成分 试剂1主要组分： 试剂2主要组分： 2.1 净含量 应不低于试剂瓶标示装量。
2.2 外观 试剂1应为无色或浅色澄清液体，试剂2应为无色或淡黄色澄清液体。外包装完好、无破损，标签完好、字迹清晰。 2.3 试剂空白 在500nm-550nm波长下，尿酸测定试剂盒的空白吸光度应不大于0.200。 2.4 分析灵敏度 测试400umol/L的被测物时，吸光度变化（ΔA）应不低于0.0021。 2.5 准确度 使用国家标准品（360012）进行测定，实测值与标示值的相对偏差应在±10%内。 2.6 重复性 批内变异系数（CV）应不大于4％。 2.7 线性 2.7.1在[5，1000]umol/L区间内，线性相关系数r应不低于0.990； 2.7.2[ 5，100）umol/L区间内绝对偏差不超过±10umol/L；[100，1000]umol/L 区间内相对偏差不超过±10%。 2.8 批间差 批间差应不大于6％。 2.9 稳定性 取在2℃～8℃条件下贮存达到12个月后的试剂进行检测，检测结果应符合2.2、2.3、2.4、2.5、2.6、2.7的要求。
中华人民共和国国家环境保护标准 HJ 1049-2019 水质 4种硝基酚类化合物的测定 液相色谱-三重四极杆质谱法 Water quality —Determination of 4 nitrophenol compounds —Liquid chromatography-triple quadrupole mass spectrometry （发布稿） 本电子版为发布稿。请以中国环境出版集团出版的正式标准文本为准。 2019-10-24发布 2020-04-24 实施
目次 前言............................................................................................................................................... i i 1适用范围. (1) 2规范性引用文件 (1) 3方法原理 (1) 4干扰和消除 (1) 5试剂和材料 (2) 6仪器和设备 (2) 7样品 (3) 8分析步骤 (3) 9结果计算与表示 (5) 10精密度和准确度 (6) 11质量保证和质量控制 (7) 12废物处理 (7) 附录A（规范性附录）方法的检出限和测定下限 (8) 附录B（资料性附录）质谱参考条件 (9) 附录C（资料性附录）方法的精密度和准确度 (10) i
前言 为贯彻《中华人民共和国环境保护法》和《中华人民共和国水污染防治法》，保护生态环境，保障人体健康，规范水中硝基酚类化合物的测定方法，制定本标准。 本标准规定了测定地表水、地下水、生活污水和工业废水中4种硝基酚类化合物的液相色谱-三重四极杆质谱法。 本标准的附录A为规范性附录，附录B～附录C为资料性附录。 本标准为首次发布。 本标准由生态环境部生态环境监测司、法规与标准司组织制订。 本标准起草单位：四川省生态环境监测总站。 本标准验证单位：重庆市生态环境监测中心、广元市环境监测中心站、攀枝花市环境监测中心站、泸州市环境监测中心站、宜宾市环境监测中心站和南充市环境监测中心站。 本标准生态环境部2019年10月24日批准。 本标准自2020年4月24日起实施。 本标准由生态环境部解释。 ii
TSQ Quantum Access MAX质谱仪 一、质谱的开关机 开机顺序：总开关→真空开关（大于4小时）→电子开关 关机顺序：仪器置于standby状态→电子开关→真空开关→总开关 Reset键的应用：仪器死机或其它错误 二、调谐和校准 1、校正液：聚酪氨酸136（货号88325）。注意吸取时注射器中气泡 2、ESI源，B档，正离子，调谐液流速5μl/min，并得到稳定的喷雾，注意：管路连接处不要漏液 Fullscan：m/z150~1050，scan time为1.2s 在Control / Scan 模式工具栏上点击Compound Optimization Workspace按钮，调整参数 喷雾电压：3000~3500 鞘气：1~15 辅气：0~5 离子传输毛细管温度270℃ 调谐液流速1 ~15 μL/min 3、聚酪氨酸单体m/z182.082 聚酪氨酸三聚物m/z508.208 聚酪氨酸六聚物m/z 997.398 ?m/z182、508、997三个特征离子峰是否都为主峰（没有高于它们的峰）。 ?每种酪氨酸聚合物的峰高差值是否都在一个数量级之内。 ?聚酪氨酸峰强度是否高于107。 ?信号是否稳定，每次扫描的误差小于15%。 ?质谱峰形是否对称，是否能完全分辨，是否完整。 4、自动调谐：在Tune Master 窗口中点击System Tune and Calibration Workspace 按钮，选Auto Tune-Calibration
三、化合物质谱条件的优化 1、连接：采用三通或六通阀与定量环 2、可自动优化的参数： 喷雾电压：3000~4500，流动相流速0.2~0.4ml/min鞘气30~45，辅气5~15 若采用SRM模式，还需优化碰撞能 3、手动优化的参数：气化器温度（H-ESI离子源），离子传输毛细管温度270~350℃ 信号强度：106为好，不建议超过107，不要低于105 四、工作站Xcalibur Instrument Setup→Sequence Setup Processing Setup Quan Browser 1、仪器方法
血清尿酸TBHBA法测定 实验原理 使用TBHBA（2,4,6-三溴-3-羟基苯甲酸）的酶比色测定法。尿酸酶氧化尿酸产生过氧化氢和尿囊素。在过氧化物酶存在下，过氧化氢氧化4-氨基安替比林和TBHBA（2,4,6-三溴-3-羟基苯甲酸），产生红色醌亚胺（Trinder反应产物）。 尿酸酶 尿酸+H2O+O2尿囊素+CO2+H2O2 过氧化物酶 TBHBA+4-氨基安替比林+2H2O2醌亚胺+3H2O 2.标本： 2.1病人准备：12小时禁食。 2.2类型：血清，肝素或EDTA血浆，尿液。 3.标本存放：血清、血浆的稳定性：20～25℃保存可稳定3天；4～8℃保存可稳定7天；-20℃保存可稳定6个月。对尿液用蒸馏水作1＋10稀释后检测，结果乘11后报告。 4.标本运输：常温条件下保存运输。 5.标本拒收标准：细菌污染的标本。 6.实验材料 6.1试剂申能尿酸测定试剂盒。货号：14130071701试剂1（6×64ml）试剂2（6×16ml） 6.1.1试剂组成
试剂1（R1）： 磷酸盐缓冲液pH7.0100mmol/L TBHBA(2,4,6-三溴-3-羟基苯甲酸)1mmol/L 试剂2（R2）： 磷酸盐缓冲液pH7.0100mmol/L 4-氨基安替比林0.3mmol/L 铁氰化钾10mmol/L 过氧化物酶（POD）≥2000U/L 尿酸酶≥30U/L 6.1.2试剂准备：试剂为即用式。 6.1.3试剂稳定性与贮存：试剂保存于2～8℃，若无污染，可稳定至失效期。试剂不可冰冻。开盖后放于仪器的冰箱中可以稳定30天。当546nm处的试剂空白吸光度小于0.5时，试剂可正常使用。 6.1.4变质指示：当试剂有看得见的微生物生长，有浊度，或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质，不能继续使用。 6.1.5注意事项：试剂中含叠氮钠（0.95g/L）为防腐剂。不可入口！避免接触皮肤及粘膜。应采取必要的预防措施使用试剂 6.2校准品：使用DiaSys公司提供的TruCalU校准品对自动分析仪进行校准，具体参见生化检验校准品和质控品.SOP文件。 6.3质控品：具体参见生化检验校准品和质控品.SOP文件。 7.仪器：奥林巴斯AU1000生化分析仪 8.操作步骤 8.1项目基本参数：参见生化检验奥林巴斯AU1000生化分析仪项
化学分析计量 CHEMICAL ANALYSIS AND METERAGE 第26卷，第4期2017年7月 V ol. 26，No. 4 July 2017 85 doi ：10.3969／j.issn.1008–6145.2017.03.022 血清中尿酸和尿素含量测定的超高效液相 色谱–单四级杆质谱法国际比对* 石莲花，金有训，何海红，全灿，徐蓓，李红梅 (中国计量科学研究院，北京 100029) 摘要 基于单四极杆质谱建立了血清中尿酸、尿素含量准确测定的同位素稀释超高效液相色谱–质谱方法，并以该方法参加了国际物质量咨询委员会(CCQM)组织的“血清中尿酸尿素含量测定”的K 、P 国际比对。血清样品用乙腈除去蛋白质，分别采用C 18反相柱和电喷雾(ESI)负离子模式检测尿酸、CN 正相柱和ESI 正离子模式检测尿素，同位素稀释的单点校准法进行定量，用3种标准物质(GBW 09157，GBW 09169，NIST SRM 909c)进行方法验证，测量比对血清样品(Ⅰ，Ⅱ)获得国际等效一致性。该方法操作简单、 快速准确，适用于血清中尿酸尿素的定量分析。关键词 单四级杆质谱；同位素稀释液相色谱–质谱法；尿酸；尿素；血清；国际比对中图分类号：O657.7 文献标识码：A 文章编号：1008–6145(2017)03–0085–04 Determination of Uric Acid and Urea in Serum by Ultra Performance Liquid Chromatography–Single Quadrupole Mass Spectrometry for International Comparison Shi Lianhua, JinYouxun, He Haihong, Quan Can, Xu Bei, Li Hongmei (National Institute of Metrology, Beijing 100029, China) Abstract The method to determine uric acid and urea in serum was established by single quadrupole–based isotope dilution ultra performance liquid chromatography–mass spectrometer, which was used for CCQM–K and P international comparison. Acetonitrile was added in the sample for protein precipitation, a C 18 reversed-phase column and electrospray ionization (ESI) negative ion mode was used to determine uric acid, and CN normal-phase column and ESI positive ion mode were used to determine urea, and a single point calibration method for quantitative isotope dilution. This method was veri ?ed with GBW 09157, GBW 09169 and NIST SRM 909c certi ?ed reference materials, and serum samples (Ⅰ，Ⅱ) were measured to obtain international equivalent consistency. The method is simple in operation, rapid and accurate, it is suitable for quantitative analysis of urea in serum uric acid. Keywords single quadrupole mass spectrometry; isotope dilution high performance liquid chromatography–mass spectrometry; uric acid; urea; serum; international comparison 血清尿酸、尿素是医学临床检查肾功能的重要指标［1］。尿酸是嘌呤代谢物的最终产物，其在血清中的浓度若超过正常值则会引起痛风、肾结石、冠心病等疾病［2–4］；尿素是蛋白质代谢产物，是蛋白质代谢与尿毒症临床诊断的重要指标之一［5］。因此血清尿酸、尿素的准确定量对临床诊断及治疗具有重要意义。 目前血清尿酸、尿素的测定方法［6–8］中，质谱技术因具有快速、准确、灵敏度高等优点而得以广泛应用，其中同位素稀释液相色谱–串联质谱联用(LC– IDMS ／MS)［9–12］ 、气相色谱–质谱(GC–ID ／ MS)［13–15］ 技术，是国际检验医学溯源联合委员会(JCTLM)认可的参考测量方法。近年来，质谱技术发展迅速，一 级和二级质谱性能进一步提升，分辨率和灵敏度、特 异性都有了显著提高。本研究结合同位素稀释技术，建立了操作简便、特异性强、灵敏度高的液相色谱–单四级杆质谱(LC–IDMS)法，可代替前处理繁琐的气相色谱–质谱法(GC–MS)和易被高浓度待测物污染的液相色谱–串联质谱法(LC–MS ／MS)。用此方法参加国际物质量咨询委员会组织的K ，P 国际比对，使用中国计量科学研究院的纯物质标准物质和血清基体标准物质进行了校准和方法验证，使 *国家科技基础专项(2011FY130100)；国家重点研发计划项目(2016YFD0500800)；中国计量科学研究院比对专项(03-AJLSF15) 联系人：石莲花；E-mail: shilh@https://www.doczj.com/doc/ca16699520.html, 收稿日期：2017–04–01