大蒜总皂苷提取和含量测定方法的研究
罗红1,3,4陈立2,3,4高钰琪2,3,4（1. 第三军医大学高原医学系高原军队卫生学教研室；2. 第三军医大学高原医学系病理生理学教研室，3,高原医学教育部重点实验室，4.全军高原生理与高原病研究重点实验室，重庆，400038）
摘要：目的建立一种大蒜总皂苷含量的测定方法并优选提取条件方法大蒜总皂苷采用乙醇浸提法提取，其中乙醇浓度、提取时间等条件通过L9(34)正交试验进行优选，浸提液通过D101大孔树脂纯化；以人参皂苷Re为对照品，香草醛-高氯酸比色法测定大蒜提取物中总皂苷含量。结果70％乙醇（用量3L/kg蒜粉）、浸泡72小时、提取1次为最优提取条件；人参皂苷对照品在1.67μg/ml～13.33μg/ml范围内与吸光度呈良好线性关系, 回归方程为: A = 0.0138×C - 0.0108( R =0.9995)，平均回收率98.0%,RSD=2.35%。结论该总皂苷测定方法简单，准确性、稳定性、重复性和重现性良好，根据正交设计、以该方法测定总皂苷作为评价指标优选的提取条件可以作为生产工艺参考。
关键词:大蒜、总皂苷、正交试验、人参皂苷Re、比色法
分类号：文献标识码：A
Determination of total saponins in Garlic and their extraction technology
Luohong1,3,4, Chenli2,3,4，Gao-yuqi2,3,4
1Department of High Altitude Military Hygiene，2 Department of Pathophysiology and High Altitude
Physiology,College of High Altitude Medicine, Third Military Medical University,3Key Laboratory Of
High Altitude Medicine(Third Military Medical University),Ministry Of Education,4The key laboratory of
High Altitude Physiology and High Altitude disease, PLA,Chongqing 400038, China.
Abstract Objective To develop a method for content determination and extraction of total saponins in
garlic.Method Ginsenoside Re was used as reference substance, and vanillin-perchloric acid was applied to determine the content of saponins at 544 nm. The total saponins was isolated by alcohol-extracting and purified with D101 macroporous resin. The optimum alcohol-extracting factors were selected by using L9(3 4) orthogonal design. Results The optimum alcohol-extracting method is to soak 1Kg garlic powder in 3L 70% alcohol for 72h. The calibration curve of ginsenoside Re showed good linearity in the range of 1.67μg/ml～13.33μg/ml, and the regression equation was A = 0.0138×C - 0.0108, R2 =0.999,the average recovery of control compound is 98%, RSD=2.35%. Conclusion The determination method is simple, rapid, sensitive and accurate, which can be used for evaluating the extraction quality of total saponins.
key words：garlic total saponins orthogonal design ginsenoside Re Colorimetry 大蒜在全世界普遍种植，是药食同源植物，在人们日常膳食中具有重要地位。大量实验证明，它不但有抗菌、消炎、杀虫等作用，也有降血脂、降血压、抗风湿、抗肿瘤、调节机体免疫力和抗氧化等多种重要生理功效[1,2,3,.4]。大蒜成分复杂，主要有含硫有机化合物、糖类、收稿日期：2009
作者简介：罗红,女,四川大竹人，博士研究生,讲师，发表论文7篇，主要从事高原环境营养与药物方面的研究Tel: (023) 68753714, E-mail:rona764@https://www.doczj.com/doc/cb11125295.html,
作者单位：第三军医大学高原医学系病理生理学教研室
氨基酸类、酶、脂类、维生素、微量元素和皂苷类等多种成分。目前认为其活性成分主要是含硫有机化合物和皂苷类。大蒜中已发现多种皂苷，主要是呋甾皂苷和螺甾皂苷。大蒜皂苷具有降胆固醇、抗真菌、保护心血管系统等生物活性作用[5,6,7,8]。然而，关于大蒜皂苷含量测定的研究很少，大蒜总皂苷含量分析方法亦未见文献报道。本实验以人参皂苷Re为对照品，参考其他植物皂苷含量测定方法〔8,9,10〕，采用香草醛-高氯酸比色法测定大蒜提取物中总皂苷含量（以人参皂苷Re的量计算），并对本方法的可行性进行研究。同时，本实验用乙醇浸提法分离大蒜总皂苷，采用正交试验优选醇提条件，大蒜总皂苷经D101大孔树脂纯化，最后以本实验含量测定方法评价总皂苷提取效率，从而选出大蒜总皂苷的最适提取条件。
材料
1 材料和试剂
蒜粉（山东临沂，批次20070518）、人参皂苷Re(中国药品生物制品检定所，批号110754-200421)，无水甲醇、无水乙醇、正丁醇、冰醋酸、高氯酸和香草醛等均为分析纯，大孔树脂D101(天津海光化工厂)。薄层硅胶G板（50m m×100mm）（青岛海浪硅胶干燥剂厂）。
2 主要仪器
精密电子天平(0.1mg)、恒温水浴锅、漩涡混合器、Synergy HT多功能酶标仪（美国基因有限公司）R-205型旋转蒸发器（瑞士BüCHI）、J-30I冷冻离心机（美国贝克曼）、HLC-1型高效液相紫外监测仪（上海）、FB-2型恒流泵（上海）。
方法
1. 大蒜皂苷含量测定
1.1供试液与样品液的配制
1.1.1 供试品液的配制
500g蒜粉用5～6倍体积的60％乙醇浸提48h×2（充分搅拌均匀），离心取上清，旋转蒸发去乙醇后，样品水溶液过D101大孔树脂柱，蒸馏水洗柱、70％乙醇洗脱样品，高效液相紫外监测仪检测上样和洗脱情况。将洗脱液蒸去乙醇、浓缩，冷冻干燥即得样品。精密称取样品加适量甲醇充分溶解，1000g离心10分钟，取上清作供试品液。
1.1.2 对照品试液的配制
精密称取人参皂苷对照品Re，精确配制成1mg/ml甲醇溶液,作为对照品溶液，4℃保存。
1.2 大蒜总皂苷的检识
1.2.1皂苷的发泡性：样品水溶液如果在震荡后产生持久性泡沫，并且不因加热而消失，则为皂苷类化合物。
1.2.2硫酸反应:取滤液2ml，水浴蒸干，加浓硫酸1～2 滴，观察颜色变化。皂苷类化合物将出现由黄→ 红→ 紫色或绿褐色的颜色变化。
1.2.3氯仿-硫酸反应（salkowski反应）：样品溶于氯仿，沿管壁滴加浓硫酸后，观察颜色反应。苷类物质颜色反应：在氯仿层呈现红或蓝色，硫酸层有绿色荧光出现。
1.3 测定波长的选择
精密吸取供试样品和人参总皂苷对照品溶液各60μL, 以及50μL样品和10μL对照品的混合物，分别置15mL离心管中, 60℃水浴中蒸干甲醇, 精密加入新鲜配制5%香草醛-冰醋酸溶液0.2ml,高氯酸0.8ml, 混匀, 紧盖, 于60℃水浴中加热15min, 取出立即用自来水冷却, 加冰醋酸5ml, 混匀,于500~600nm波长处扫描测定吸光度。
1.4空白干扰试验
精密吸取甲醇60μL置15mL离心管中，步骤同“1.3”，于500~600nm波长处扫描测定吸光度。
1.5 标准曲线的绘制
精密吸取人参皂苷Re对照品(1mg/ml)10μL、20μL、30μL、40μL、50μL、60μL、70μL、80μL置15mL离心管中, 操作方法同“1.3”步骤, 随行试剂为空白。于544nm处测定各吸收波长,绘制标准曲线。
1.6 稳定性试验精密吸取大蒜总皂苷提取物50μL和人参皂苷Re各50μL，每隔10分钟测定其吸光度。
1.7 精密度试验精密吸取人参皂苷Re标准液(1mg/ ml)50μl共7份，分别测定其吸光度。
1.8 重现性试验制备大蒜总皂苷提取物甲醇溶液，精密吸取样品液50μL，测定6份样品，按照标准曲线绘制时的方法显色和测定。
1.9 重复性试验 1.7试验中的1份样品重复测定6次。
1.10 回收率实验精密吸取供试品甲醇液适量，用梯度法精密加入一定量对照品甲醇溶液，按样品测定方法测定，计算加样回收率。
1.11 样品测定
精密称取各批号供试品适量，制备其甲醇溶液，测定其吸光度，并按标准曲线法计算总皂苷含量。
2.提取条件优选
2.1因素水平选择
大蒜总皂苷提取采用乙醇浸提法，考虑乙醇浓度、用量和浸提时间及提取次数为主要影响因素，借助正交设计助手II软件设计和分析实验，L9(34)正交实验优选提取条件，以总皂苷得率为评价指标。所选因素水平见表1。
表1 因素水平表
水平
因素
A
乙醇用量(L/kg蒜粉)
B
乙醇浓度(%)
C
浸提时间(h)
D
提取次数
1 3 50 24 1
2 4 60 48 2
3 5 70 72 3
2.2正交试验
取蒜粉50g, 采用L9(34)正交试验表安排试验，得到的浸提液稀释为1L,按1.1方法纯化总皂苷，D101大孔树脂柱高19.5cm，直径5.3cm，上样速度2mL/min，蒸馏水洗柱速度3.3mL /min，70%乙醇洗脱速度为2mL /min，根据洗脱曲线收集总皂苷，浓缩、冻干。样品过柱流出物重吸附一次。并用本实验建立的方法测定总皂苷含量。
结果
一．大蒜皂苷含量测定方法的建立
1. 检识试验表明，样品具有发泡性、硫酸反应和salkowski反应均为阳性，说明样品中含有甾体皂苷类物质。
2．测定波长的选择
对照品、样品和混合液三种试液显色后均在544nm附近有最大吸收波长,故选择544nm 为测定波长。测定波长定为544nm。见图1。
3．空白干扰试验
溶剂空白在544nm 附近有少量吸收（OD 544nm =0.0139±0.0005,n=6）。 4.标准曲线的绘制
人参皂苷对照品浓度在 1.67μg/ml ～13.33μg/ml 范围内与吸光度呈良好线性关系, 回归方程为: A = 0.0138×C - 0.0108，R2 =0.999。见图2。
5.稳定性试验：一小时内人参皂苷Re 测定值RSD=1. 23％（n=7），大蒜总皂苷提取物测定值RSD=2.1％（n=7）。说明供试样品液和对照品在1小时内测定基本稳定，见图2。 5.精密度试验：RSD=0.84% (n=7)
7.重现性试验：测得样品中总皂苷平均含量为0.3238mg/mg ，RSD=0.83%（n=6）。 8.重复性试验 RSD=1.07%（n=6）。
9.回收率实验 平均回收率为98.0%，RSD=2.57%, (见表2)。 10.样品测定 结果见表3。
图1. 500~600nm 扫描吸收光谱
图2. 对照品标准曲线
00.02
0.040.060.080.10.120.140.160.18480
500
520
540
560
580
600
620
λ/nm
A
人参皂苷Re
样品
溶剂空白
图3. 吸光度时间曲线
样品
样品总皂苷含量( mg)
加入对照品
( mg)
测得量 ( mg)
回收率 (%)
平均回收率(%)
RSD(%) 1 0.02026 0.01429 0.03412 97.0 98.2 2.57
2 0.01562 0.01667 0.0327
3 97.6 3 0.01172 0.025 0.03603 96.3
4 0.009372 0.03 0.0409
5 101.9
表3 样品测定结果 （皂苷含量以人参皂苷Re 计）
样品批次
大蒜总皂苷 （mg ）
皂苷含量(%)
RSD(n=8)
20070628 235 13.14 0.13％ 20070730 380 12.43 0.15％ 20071019
500
10.411
0.19%
二．正交试验
以大蒜总皂苷提取率为考察指标，极差分析（见表4）表明，因素A 的极差最小，数据处理时作为最小误差项，各因素的影响大小依次为：B 、C 、D 、A ，即：乙醇浓度>提取时间>提取次数>乙醇用量，最佳工艺条件：A1B3C3D3；而方差分析（表5）表明：各因素均无显著影响（P>0.05）。
因此，综合考虑成本等因素，大蒜总皂苷醇提工艺条件为A1B3C3D1, 即70％乙醇（用量3L/kg 蒜粉）、浸泡72小时、提取1次。
表4 正交试验结果
因素水平 A B C D 总皂苷得率
（mg/100g蒜粉) 实验1 3 50 24 1 479.6
2 3 60 48 2 453.6
3 3 70 72 3 801.2
4 4 50 48 3 507.6
5 4 60 72 1 531
6 4 70 24 2 491.6
7 5 50 72 2 508.4
8 5 60 24 3 477.2
9 5 70 48 1 612.6
K1 578.13 498.53 482.8 541.07
K2 510.07 487.27 524.6 484.53
K3 532.73 635.13 613.53 595.33
R 68.07 147.87 130.73 110.8
?表5 方差分析表
因素离均差平方
自由度 F 临界值P
和
B 18417.529 2 2.555 19.000
C 26747.582 2 3.711 19.000
>0.05
D 40651.049 2 5.640 19.000
A(误差) 7208.009 2 1.000
讨论
关于大蒜总皂苷含量测定方法还未见文献报道。文献报道的总皂苷含量测定方法主要为比色法和分光光度法，而以比色法最常用，比色法常用显色剂有浓硫酸、香草醛-浓硫酸、香草醛-冰醋酸等[8~11]。比色法是皂苷类成分分析测定中历史较长、应用较普遍的方法，显色反应灵敏，操作简单，成本低廉，不受实验室仪器设备等条件的限制，缺点是显色试剂的专属性较差，但适合于总皂苷的测定。
高效液相色谱法（HPLC）具有分离效能高、分析速度快、自动化程度高、灵敏度高等特点，我们曾尝试用HPLC检测总皂苷含量。由于大蒜皂苷属于甾体皂苷，甾体皂苷在紫外区仅有较弱的末端吸收，容易受到流动相等各种试剂的干扰，使基线不稳，影响定量，测试误差较大，故HPLC检测存在一定的困难。
本实验以人参皂苷Re为对照品，采用香草醛-高氯酸比色法在544nm测定大蒜提取物中总皂苷含量。该方法的原理是通过皂苷和皂苷元与香草醛高氯酸反应，在可见区获得稳定的特征吸收峰。虽然空白干扰试验测得溶剂空白在OD544nm处有少量吸收,但通过设定随行空白对照，以及严格保持实验条件的一致性，包括试剂、反应时间等的一致，消除了空白干扰。结果表明该测定方法精密度、重复性、重现性均良好，平均加样回收率达98％（RSD=2.35%），准确度较高。该方法可以用来测定大蒜总皂苷含量，评价总皂苷的提取效率。虽然由于没有市售大蒜皂苷标准品，以人参皂苷Re为对照品不是特别理想，但该方法仍可作为实验研究或实际生产中大蒜总皂苷质量控制的一种手段。
检识试验表明，样品的发泡性试验、硫酸反应和salkowski反应均为阳性，说明样品中含
有甾体皂苷类物质，用本实验方法可以提取大蒜总皂苷。正交实验结果表明，蒜粉用70％乙醇（用量3L/kg）浸泡72小时、提取1次，然后上D101大孔树脂柱，乙醇洗脱浓度为70％，可以提取分离含量较高的大蒜总皂苷。
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大蒜中大蒜素的提取及含量测定 摘要：大蒜素是大蒜中的主要活性成分，是大蒜破碎后，蒜氨酸在蒜酶催化作 用下产生的一种具有生物活性的有机硫化物，具有抗菌消炎、降血压、降血脂、防癌等作用，可用于多种疾病的防治，在临床上的应用也越来越广泛，作为药物或保健品开发具有广阔前景[1]。大蒜素的提取方法可以分为三类：水蒸气蒸馏法、溶剂萃取及超临界流体萃取[2-3]，但是采用水蒸气蒸馏得到的提取物中大蒜素含量很低，导致提取物的活性很低。超临界萃取法提取率高、品质好，但生产成本高、设备复杂、操作技术难度大[4]。综合考虑在有机溶剂萃取法的基础上，以乙醇为提取剂萃取大蒜素，研究确定了其最佳工艺参数。用硫酸钡沉淀法测定大蒜素的含量。 关键词：大蒜素、提取、含量测定
Extraction and Determination of allicin in garlic (Yunnan Agricultural University College of Basic Science and Information Engineer,Kunming 650201) ABSTRACT： Allicin is the main active ingredient in garlic,crushed garlic alliin in the garlic enzyme catalysis of a biologically active organic sulfides,With antibacterial anti-inflammatory role in lowering blood pressure, lowering blood pressure, anti-cancer,Can be used for the prevention and treatment of many diseases,Clinical application is more and more widely, and has broad prospects for development as drugs or health products .Allicin extraction methods can be divided into three categories:Steam distillation, solvent extraction and supercritical fluid extraction method,However, the extract obtained by steam distillation and the allicin content is low, resulting in low activity of the extracts.Supercritical extraction extraction rate, the quality is good, but the high cost of production, complex equipment operation https://www.doczj.com/doc/cb11125295.html,prehensive consideration on the basis of the organic solvent extraction, ethanol extraction solvent extraction of allicin, research to determine the optimum parameters. Determination of allicin content of barium sulfate precipitation method. Key words: Allicin;Extract ;Content ;determination
大蒜油三种提取方法的比较 提取方法水蒸气蒸馏法溶剂萃取法超临界萃取法优点操作简单，成本低，稳定性好稳定性好收率高，有效成分损失少缺点大蒜辣素受热易分解易损失部分精油，有糖·蛋白质等杂志复杂，设备昂贵 1.直接水蒸气蒸馏法 采用直接水蒸气蒸馏的方法对发酵完毕的蒜泥进行蒸馏，接收馏出液。 直接水蒸气蒸馏法的工艺流程 大蒜一去皮一洗净一晾干一粉碎一发酵一直接水蒸气蒸馏一馏液静置分层一分离一大蒜油一封存一冰箱保存 实验步骤 (1)备料：将大蒜去皮、洗净备用。 (2)粉碎：将干净的去皮大蒜放入粉碎机粉碎成蒜泥。 (3)发酵：加入清水2000mL和蒜泥混匀(料液比为蒜泥：水=1：2)，在 50℃水浴发酵3h。 (4)蒸馏：电热套控温在220～240℃。C之间加热蒸馏，收集馏出液350mL左右。 (5)分离：将馏出液倒入分液漏斗中静置分层，收集下层纯净的大蒜油。 (6)包装：产品密封置于冰箱保存。 各因素对产率的影响 蒸馏中加热温度对大蒜出油的影响 料液比的影响 发酵时间，温度对大蒜出油的影响 蒸馏时间对出油率的影 大蒜粉碎程度对精油提取率的影响 主要仪器与试剂 电热套烧瓶5000ml 温度计蒸馏头直型冷凝管尾接管 大蒜纯化水
实验装置图 2 流动水蒸气蒸馏法 流动水蒸气蒸馏法的工艺流程 大蒜一去皮一洗净一晾干一粉碎一发酵一流动蒸汽的水蒸气蒸馏一馏液静置分层一分离一大蒜油一封存一冰箱保存 实验步骤 (1)备料：将大蒜去皮、洗净备用。 (2)粉碎：将干净的去皮大蒜1．0kg放入粉碎机粉碎成蒜泥。 (3)发酵：加入清水2000mL和蒜泥混匀(料液比为蒜泥：水=1：2)，在50℃ 水浴发酵3h。 (4)蒸馏：共通入750mL～900mL水蒸气，蒸馏时间2h。电热套控温在80—100℃之间保温，收集馏出液400mL～500mL左右。 (5)分离：将馏出液倒入分液漏斗中静置分层，收集下层纯净的大蒜油。 (6)包装：产品密封置于冰箱保存。
实验六异烟肼片的质量分析 实验目的： 1、掌握溶出度的测定方法及溶出量的计算。 2、掌握溴酸钾法测定异烟肼的原理与操作。 3、掌握容量法测定药物片剂的含量计算方法。 4、掌握滴定度、片剂取样量、标示量的概念与计算。 5、掌握容量仪器的正确操作。 实验原理： 1、溶出度是指药物从片剂或胶囊剂等口服固体制剂中溶出的速度和程度。溶出度测定法是将某种固体制剂的一定量分别置于溶出度仪的烧杯中，在（37±0.5）℃恒温下，在规定的转速、溶剂中依法操作，在规定的时间内测定其溶出的量. 2、异烟肼在强酸性介质中可被溴酸钾氧化为异烟酸和氮气，溴酸钾被还原为溴化钾，终点时微过量的溴酸钾可将甲基橙指示剂氧化，使粉红色消失而指示终点。 实验器材： 试药：盐酸、甲基橙指示剂、溴酸钾滴定液（0.01667mol/L）、异烟肼片等 仪器：溶出度测定仪、分光光度计、量筒、容量瓶、酸式滴定管、锥形瓶。 实验内容与方法： 一、性状 本品为白色片。含异烟肼（C6H7N3O）应为标示量的95.0%~105.0%。 二、溶出度检查 取本品，照溶出度测定法，以水1000ml为溶剂，转速为每分钟100转，经30分钟时，取溶液5ml滤过，精密量取续滤液适量，用水定量稀释制成每中含10～20μg的溶液，照分光光度法，在263nm的波长处测定吸收度，按C6H7N3O的吸收系数（E1%1cm）为307计算出每片的溶出量。限度为标示量的60%，应符合规定。 三、含量测定 取本品20片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于异烟肼0.2g），置100ml量
瓶中，加水适量，振摇使异烟肼片溶解并稀释至刻度，摇匀，用干燥滤纸过滤，精密量取续滤液25ml，加水50ml，盐酸20ml与甲基橙指示剂1滴，用溴酸钾滴定液（0.01667mol/L）缓缓滴定（温度保持在18～25℃）至粉红色消失。每1ml溴酸钾滴定液（0.01667mol/L）相当于3.429mg的C6H7N3O。 实验注意事项： 1、指示剂褪色是不可逆的，滴定过程中必须充分振摇，以避免滴定剂局部过浓而引起指示剂提前褪色，可补加1滴指示剂以验证终点是否真正到达。 2、过滤前必须充分振摇，使异烟肼完全溶解。 3、过滤用漏斗、烧杯必须干燥，弃去初滤液。 实验报告： 实验结束后，书写实验报告。 实验指导要点: 1、滴定终点时，过量1滴的溴酸钾与滴定反应生成的溴化钾在酸性溶液中形成溴，氧化破坏指示剂的呈色结构，使其红色褪去。由于指示剂褪色是不可逆的，故在滴定过程中必须充分振摇，以避免由于滴定剂局部过浓引起指示剂提前褪色，可在指示剂褪色时再补加1滴以验证终点是否真正到达。 2、滴定反应的计量关系与滴定度计算。 3、进一步强调容量分析的称量、定量稀释、定量转移和滴定等的正确操作。
比色法测定总皂苷含量 1、仪器 紫外分光光度计、电热恒温水浴锅、电子分析天平、旋转蒸发器、大孔树脂柱(内径0．8 cm，长20 cm)。 试剂 无水甲醇、无水乙醇、正丁醇、冰醋酸、高氯酸和香草醛等均为分析纯；大孔树脂 DM-301、对照品、洋金花药品。 2、方法 2.1 对照品溶液的制备 取对照品 10 mg,加甲醇溶解定容至 10 ml，制成 1 mg／ml对照品溶液。 2.2供试品溶液的制备 取药材粉末(过4号筛)约0．2 g，准确称定，置于150 ml具塞锥形瓶中。精密加入50 ml 甲醇后，准确称重。浸泡60 min，超声提取30 min，再次称重，补加甲醇至超声前重量。过滤，精密移取续滤液25 ml于蒸发皿中，水浴蒸发至干，用5 ml水溶解残留物，所得溶液缓缓通过已处理好的大孔吸附树脂柱(径高比1：5)，以水50 ml洗脱，弃去水液，之后再以50 ml 95％乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，蒸干。用20 ml水分次将残留物溶解转移至60 ml分液漏斗中，用水饱和的正丁醇萃取(4×20 ml)，合并正丁醇层，减压蒸干。残留物用70％甲醇溶解转移至10 ml量瓶中，定容，摇匀，即得。 2．3测定波长的选择 精密移取1．5 ml的对照品及l ml供试品溶液，于70℃水浴蒸发至干，加入5％香草醛一冰醋酸(临用新配)0．2ml，高氯酸0．8 ml，于60℃水浴显色15 min后流水冷却 lO min。加冰醋酸5 ml，摇匀。立即在紫外分光光度计于400～800 nm波长下扫描，同时空白溶液作参比。对照品及供试品的最大吸收波长均在475 nm，故选取475 nm为检测波长。 2．4线性关系考察 精密量取对照品溶液0．60，1．50，2．40，3．30，4．20 ml，置具塞试管中，于70℃水浴蒸发至干，加入5％香草醛-冰醋酸(临用新配)O．2 ml，高氯酸0．8 ml，于60℃水浴显色15min后流水冷却10 min。各加冰醋酸5 ml，摇匀，以同法平行处理的空白溶剂为空白，在475 nm处测定吸光度。以对照品质量c(mg)为横坐标，吸光度A为纵坐标，使用软件OriginPro 7．0进行回归分析，得到回归方程为：A=0．007 4+1．120 83c, r=0．999 97。在0．096—0．672 mg内线性关系良好。 2．5精密度试验 精密吸取对照品溶液1．5 ml，依“2．4”项下方法显色测定吸收度，连续测定5次，结果RSD为0．254％，说明仪器的测试性能良好。 2．6稳定性试验 取对照品和样品溶液，依“2．4”项下方法操作，按不同时间测定吸光度，结果见表1。2．7样品含量测定 取供试品溶液6份，每份精密吸取80 μ L，按“2．3”项的方法显色后，在540nm测定吸光度，计算样品含量。 2．8加样回收率试验 取供试品溶液8份，每份精密吸取80μL，加入0．2mg／mL齐墩果酸溶液50 u I。，按“2．3”项的方法显色后，在540hm测定吸光度，计算加样回收率。
大蒜油的提取工艺 大蒜主要有效成分大蒜油的各种提取方法, 对各种方法的优缺点进行了简要分析。并对大蒜油的提取工艺和应用的发展方向提出展望。大蒜(Allium sativum L.)为百合科葱属植物的地下鳞茎, 自古就被当作天然杀菌剂, 有天然抗生素之称。早在2000 多年前我国就开始种植, 明代李时珍在《本草纲目》中记载:“大蒜性温, 其气熏烈, 通五脏, 达诸窍, 祛寒湿, 避邪恶, 消痈肿, 化积食, 此其功也”。现代研究表明大蒜所含营养成分十分丰富, 每100 g 新鲜大蒜含水分70 g、蛋白质4.4 g、脂肪0.2 g、碳水化合物23 g、粗纤维0.7 g、灰分1.3 g、磷44 mg、铁0.4 mg、硫胺素0.24 mg、核黄素0.03 mg、尼克酸0.9 mg、抗坏血酸3 mg。大蒜中含有17 种氨基酸, 其中8 种是人体必需的。此外, 大蒜还含有硫化丙烯、蒜素及微量元素硒、锌、锗等[1- 2]。 大蒜油也叫大蒜素,是大蒜细胞经破碎后,蒜氨酸在蒜酶的催化作用下裂解生成的硫醚化合物, 具有强烈的 辛辣刺激味[3]。大蒜油是大蒜的主要活性成分, 具有抗菌消炎、提高肌体免疫能力、预防和治疗心血管系统疾病、防癌抗癌和抗衰老的作用[4]。此外, 大蒜油还具有抗单核细胞与血管内皮细胞粘附的作用。长期服用大蒜油, 可以提高细胞免疫力、体液免疫力和非特异免疫能力。由于大蒜油有如此大的作用, 对于大蒜活性成分的提取及应用研究就显得极其重要。本文介绍了近年来大蒜油的提取工艺及应用的一些研究进展。 1 大蒜油的提取工艺 目前, 大蒜油的提取工艺主要有: 水蒸气蒸馏法、溶剂萃取法、超临界萃取法及超声、微波辅助提取等。 1.1 水蒸气蒸馏法 其原理是将水蒸气通入不溶于水或难溶于水但具有一定挥发性的有机物质中( 大蒜油具有一定挥发性) , 使该有机物在低于100 ℃的温度下随水蒸气一起蒸馏出来, 再经进一步分离获得较纯物质。本法的一般工艺流程为:大蒜去皮→洗净→加水捣碎→酶解→水蒸气蒸馏→油水分离→大蒜油 孙淑爱[5]等探讨了蒸馏法提取大蒜油的适宜条件。按照大蒜油的生产步骤和影响因素, 选择大蒜的破碎粒径、蒜酶激活剂—亚铁离子的浓度、发酵温度和蒸馏提取时间这4 个因素, 在三水平下对大蒜油的产率进行比较。结果表明, 大蒜的破碎粒径为0.2 mm、亚铁离子的浓度为10 mmol/L、发酵温度在33 ℃、蒸馏提取时间为120 min 时, 大蒜油的产率最高, 为0.49 %。 水蒸气蒸馏法具有设备简单, 成本低、稳定性好等特点, 是最常用的方法之一。但是因发酵和蒸馏温度相对较高, 蒜氨酸酶的活性下降, 大蒜素有损失, 使出油率较低。而且所得的蒜油有一股熟味, 不够清新。 1.2 溶剂萃取法 大蒜油微溶于水, 易溶于乙醇、苯、乙醚等有机溶剂, 利用这一性质可以用有机溶剂将大蒜油浸提出来。该法得到的大蒜油与水蒸气蒸馏获得的大蒜油没有明显的区别。有机溶剂的选择是关键, 要求该溶剂对大蒜油的溶解性好, 浸提结束后易于分离, 沸点差异显著,不含其它不良气味和溶剂残留。溶剂法的一般流程为:大蒜去皮→洗净→捣碎→酶解→溶剂萃取→蒸馏分离→回收溶剂→大蒜油 陈彬[6]等研究了用乙醚萃取法提取大蒜中的有机硫化物, 采用正交试验法考察了操作条件对提取物得率的影响, 确定了影响产物得率的主要因素为酶解温度、酶解时间、酶解pH、加水量以及离心pH 值。确定的最佳提取条件为: 酶解温度25 ℃, 酶解时间为60 min,酶解pH 值7.0, 加水量100mL, 离心pH 值3.2。实验还发现二次萃取可以减少产物的流失。李瑜[7]等以乙醇为溶剂, 研究了溶剂法提取大蒜油的工艺, 确定的醇提最佳工艺
本科生毕业论文 异烟肼含量测定方法比较 姓名： XXX 指导教师： XXX 院系：化学化工学院 专业：制药工程 学号： 提交日期： 2012-03-30
目录 中文摘要 (3) 外文摘要 (4) 引言 (5) 1．异烟肼简介 (5) 1.1物理化学性质 (5) 1.2药理作用 (6) 1.2.1作用原理 (6) 1.2.2临床应用 (6) 1.2.3 不良反应 (6) 1.3 异烟肼制剂研究发展 (7) 1.4 异烟肼含量测定方法简介 (7) 2.实验部分 (7) 2.1 实验仪器和试剂 (7) 2.1.1 实验仪器 (7) 2.1.2实验试剂 (8) 2.2 实验应用公式 (8) 2.3溴酸钾滴定法 (8) 2.3.1实验原理 (8) 2.3.2试剂溶液配制 (9) 2.3.3异烟肼含量测定 (9) 2.3.4稳定性实验 (9) 2.3.5回收率实验 (10) 2.3.6精密度实验 (10) 2.3.7 结果分析与讨论 (10) 2.4紫外分光光度法 (11) 2.4.1实验原理 (11) 2.4.2试剂溶液配制 (11) 2.4.3 测定波长选择 (11) 2.4.4 标准曲线绘制 (11) 2.4.5稳定性实验 (12) 2.4.6回收率实验 (13) 2.4.7精密度实验 (13)
2.4.8结果分析与讨论 (13) 2.5 钼磷酸杂多蓝分光光光度法 (14) 2.5.1实验原理 (14) 2.5.2试剂溶液配制 (14) 2.5.3实验方法 (14) 2.5.4测定波长选择 (14) 2.5.5 标准曲线绘制 (15) 2.5.6稳定性实验 (16) 2.5.7回收率实验 (16) 2.5.8精密度实验 (16) 2.5.9结果分析与讨论 (17) 3.实验结论 (17) 参考文献 (18) 致谢 (20)
食品研究与开发 ２００８年１月第２９卷第１期 作者简介：张杰（１９７５－），女（汉），讲师，硕士研究生，研究方向：表面活性剂的应用及天然产物的开发。 粮油学报，２００６，２１（２）∶８６－８９ ［２４］胡芳弟，封士兰，张勇，等．ＨＰＬＣ法测定黄芪中黄酮类成分和黄 芪甲苷的含量［Ｊ］．分析测试技术与仪器，２００３，９（３）∶１７３－１７７ ［２５］刘斌，石任兵，姜艳艳，等．ＨＰＬＣ法测定苦参汤有效部位中４种 黄酮类成分含量［Ｊ］．北京中医药大学学报，２００５，２８（６）∶５９－６２ ［２６］郑莹，李绪文，金永日．ＲＰ－ＨＰＬＣ法测定三七叶中黄酮类成分的 含量［Ｊ］．药物分析杂志，２００５，２５（９）∶１０８９－１０９１ ［２７］池静端，何秀峰，刘爱茹，等．ＨＰＬＣ法测定银杏叶中６种黄酮成 分的含量［Ｊ］．药学学报，１９９７，３２（８）∶６２５－６２８ ［２８］马强，张金兰，周玉新，等．高效液相色谱－电喷雾质谱法测定红车 轴草中异黄酮类化合物［Ｊ］．分析化学研究简报，２００６（９）∶２４７－２５０ ［２９］董淮海，陶冠军，王林祥，等．高效液相色谱－电喷雾质谱联用法检 测大豆异黄酮和皂苷［Ｊ］．无锡轻工大学学报，２００２，２１（４）∶４１５－４１９ ［３０］肖贻崧，张廷志，侯镜德．苦竹叶中黄酮类化合物的液相色谱－质谱 联用分析［Ｊ］．宁波高等专科学校学报，２００１，１３（３）∶１２３－１２５ ［３１］陈刚，章慧琴，吴性良，等．毛细管电泳电化学检测葛根和葛藤中 几种黄酮类化合物［Ｊ］．复旦学报：自然科学版，２００４，４３（４）∶６７２－ ６７５ ［３２］吴婷，管月清，郑双杰．毛细管电泳－电化学检测益母草及其冲剂 中的黄酮类化合物［Ｊ］．分析科学学报，２００６，２２（４）∶４０６－４０８ 收稿日期：２００７－０６－０５ 大蒜（ＡｌｌｉｕｍｓａｔｉｖｕｍＬ．）为百合科葱属植物的地下鳞茎，自古就被当作天然杀菌剂，有天然抗生素之称。早在２０００多年前我国就开始种植，明代李时珍在《本草纲目》中记载：“大蒜性温，其气熏烈，通五脏，达诸窍，祛寒湿，避邪恶，消痈肿，化积食，此其功也”。现代研究表明大蒜所含营养成分十分丰富，每１００ｇ新鲜大蒜含水分７０ｇ、 蛋白质４．４ｇ、脂肪０．２ｇ、碳水化合物２３ｇ、 粗纤维０．７ｇ、灰分１．３ｇ、磷４４ｍｇ、铁０．４ｍｇ、硫胺素０．２４ｍｇ、核黄素０．０３ｍｇ、尼克酸０．９ｍｇ、抗坏血酸３ｍｇ。大蒜中含有１７种氨基酸，其中８种是人体必 需的。此外，大蒜还含有硫化丙烯、蒜素及微量元素硒、锌、锗等［１－２］。 大蒜油也叫大蒜素，是大蒜细胞经破碎后，蒜氨酸在蒜酶的催化作用下裂解生成的硫醚化合物，具有强烈的辛辣刺激味［３］。大蒜油是大蒜的主要活性成分，具有抗菌消炎、提高肌体免疫能力、预防和治疗心血管系统疾病、防癌抗癌和抗衰老的作用［４］。此外，大蒜油还具有抗单核细胞与血管内皮细胞粘附的作用。长期服用大蒜油，可以提高细胞免疫力、体液免疫力和非特异免疫能力。由于大蒜油有如此大的作用，对于大蒜活性成分的提取及应用研究就显得极其重要。本文介绍了近年来大蒜油的提取工艺及应用的一些研究进展。 张杰 （临沂师范学院化学化工学院，山东临沂２７６００５） 大蒜油的提取工艺研究进展 摘 要：综述了大蒜主要有效成分大蒜油的各种提取方法，对各种方法的优缺点进行了简要分析。并对大蒜油的提 取工艺和应用的发展方向提出展望。关键词：大蒜；大蒜油；提取；研究进展 ＲＥＳＥＡＲＣＨＡＤＶＡＮＣＥＳＯＦＥＸＴＲＡＣＴＩＯＮＴＥＣＨＮＯＬＯＧＹＯＦＧＡＲＬＩＣＯＩＬ ＺＨＡＮＧＪｉｅ （ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＣｈｅｍｉｓｔｒｙａｎｄＣｈｅｍｉｃａｌＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，ＬｉｎｙｉＮｏｒｍａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｌｉｎｙｉ２７６００５，Ｓｈａｎｄｏｎｇ，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｈｉｓａｒｔｉｃｌｅｓｕｍｍａｒｉｚｅｄｔｈｅｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙｏｆｇａｒｌｉｃｏｉｌｆｒｏｍｇａｒｌｉｃ．Ａｎｄｔｈｅａｄｖａｎｔａｇｅａｎｄｄｉｓ－ａｄｖａｎｒａｇｅｏｆａｌｌｔｈｅｓｅｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｍｅｔｈｏｄｓｗｅｒｅａｎａｌｙｚｅｄ．Ｔｈｅｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｏｆｔｈｅｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙａｎｄａｐ－ｐｌｉｃａｔｉｏｎｏｆｇａｒｌｉｃｏｉｌｗｅｒｅａｌｓｏｉｎｃｌｕｄｅｄ． Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ｇａｒｌｉｃ；ｇａｒｌｉｃｏｉｌ；ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ；ｒｅｓｅａｒｃｈａｄｖａｎｃｅ !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 综述 １５８
总皂苷检测方法-总皂苷含量测定法（香草醛法）：实验流程图2017.10 【文献】Xican Li, Qiuping Hu, Shuxia Jiang, Fei Li, Jian Lin, Lu Han,Yuling Hong, Wenbiao Lu, Yaoxiang Gao, Dongfeng Chen. Folium Sennae Protects against Hydroxyl Radical-induced DNA Damage via Antioxidant Mechanism: An in vitro Study. Botanical studies. 2014; 55:16. 【简介】皂苷广泛存在于中药及其他植物中，而且化学结构大同小异的皂苷往往同时存在。为了测定这些皂苷的总含量，便建立了总皂苷的检测方法。总皂苷的检测多使用分光光度法，并以某种标准品绘制工作曲线，依该曲线所建立的回归方程，计算其含量。 【溶液配制】 1.香草醛-冰醋酸溶液（测试液）配制：精密称取25mg香草醛，加冰醋酸定容至5mL。即制成5mg/mL 香草醛-冰醋酸测试液。 2.样品液配制：将待检测的样品用甲醇溶解，配成约5mg/mL的样品液。具体浓度视样品的溶解度而定， 但是必须有精确的数据。 3.齐墩果酸标准品溶液配制：精密称取齐墩果酸1mg，加甲醇定容至5mL，配成0.2mg/mL齐墩果酸标 准品溶液。（也可以使用其他的皂苷物质，如人参皂苷Rg3。但必须是纯的化合物） 4. 高氯酸：分析纯试剂。 5. 冰醋酸：即纯的无水乙酸（分析纯） 【检测方法与实验流程图】 【标准曲线绘制】（齐墩果酸） 取上述齐墩果酸溶液x μL （x=0，40，80，120，160，200），依“实验流程图”，在70℃水浴15mim 后呈桃红色。以第一份溶液（x=0）作为空白对照，测A540nm值。以“产物混合物”时的齐墩果酸的质量，为横坐标，A540nm值为纵坐标，绘制标准曲线。以此标准曲线计算，得线性回归方程。 【样品液的测定】 将上述“实验流程图”中的“齐墩果酸标准品溶液”换成样品液，进行实验，并测定其A540nm值。将此A540nm代入线性回归方程，即可计算出其总皂苷的含量（以齐墩果酸计）。 【说明】 1.此法是以齐墩果酸为标准品测得总皂苷的含量。所以，其结果应表示为，如：“某某提取物中含 有0.12mg/g的总皂苷（以齐墩果酸计）”。这并不意味着该提取物中真的就含有齐墩果酸。 2.“实验流程图”中，在“彻底挥干溶剂”一步中，如果溶剂挥干不彻底，哪怕是有一点点，都 会干扰。水也要彻底挥干。 1
大蒜素的介绍 大蒜( A lli um sa ti vum L)为单叶子植物百合科葱属植物蒜的 鳞茎, 在我国已有2000多年的种植历史, 我国是世界上生产大 蒜的主要国家之一, 目前我国大蒜种植面积约占世界的40 % - 50%,山东金乡、苍山、河南中牟、江苏徐州等地已成为我国重要 的大蒜出口基地, 年出口大蒜约25万吨。大蒜营养丰富, 每 100g克新鲜大蒜中含: 蛋白质4 1 4g、脂肪012g、碳水化合物23g、 钙5mg、铁0 、4m g、硫胺素0 、24mg、核黄素0 、03m g、烟酸0 、9mg、维生素C 3m g、粗纤维0 、7g、大蒜油0 、2g ,还含有30多种挥发性 含硫化合物。 大蒜素( A lli m i n)又称大蒜油, 是从大蒜球茎中分离出的一 种化合物, 具有强烈的辛辣刺激味。大蒜素是大蒜的主要活性 成分, 具有抗菌消炎、降血压、降血脂、抑制血小板聚集、减少冠 状动脉硬化、抑制体内N - 亚硝胺合成, 防癌治癌、抗病毒等多 种功效。大蒜素可用于医药, 对呼吸道、消化道、脑膜炎、肠道疾 病, 有效率达80% - 95%;还可用于兽药、农药和食品添加剂等。 近年来, 大蒜素在养殖业中已被开发利用, 饲料中大蒜素可作为 杀菌剂、杀虫剂等。研究发现,这些功能和大蒜中的含硫氨基酸 及其分解后形成的一系列含硫化合物有关, 目前对大蒜素的提 取和应用已成为大蒜研究的热点。 大蒜素的提取 目前, 大蒜素的提取工艺主要有: 水蒸气蒸馏法、溶剂萃取 法、超临界CO2萃取法、真空微波辅助萃取法等。 1、水蒸气蒸馏法 其原理是将水蒸气通入不溶于水或难溶于水但具有一定挥 发性的有机物质中(大蒜油具有一定挥发性) ,使该有机物在低 于100e 的温度下随水蒸气一起蒸馏出来, 再经进一步分离获得 较纯物质。本法的一般工艺流程为: 大蒜去皮y 洗净y加水捣 碎y酶解y水蒸气蒸馏y油水分离y大蒜油[ 1] 。 孙淑爱[ 2] 等探讨了蒸馏法提取大蒜油的适宜条件。按照大 蒜油的生产步骤和影响因素, 选择大蒜的破碎粒径、蒜酶激活 剂) 亚铁离子的浓度、发酵温度和蒸馏提取时间这4个因素,在 三水平下对大蒜油的产率进行比较。结果表明, 大蒜的破碎粒 径为0 、2 mm、亚铁离子的浓度为10 mmo l/L、发酵温度在33e 、 蒸馏提取时间为120 m i n时,大蒜油的产率最高为0、49 %。 水蒸气蒸馏法具有设备简单、成本低、稳定性好等特点, 是 最常用的方法之一。但是因发酵和蒸馏温度相对较高, 蒜氨酸 酶的活性下降,大蒜素有损失,使出油率较低, 而且所得的大蒜 油有一股熟味,不够清新。
大蒜素对食品中霉菌的抑制研究进展 阎培玲 湖北理工学院化学与材料工程学院湖北黄石 435000 摘要：食品储存过程中易被霉菌，从而影响食品质量，是食品保鲜及储运应中重点考虑的问题。大蒜对多种病原微生物均有抑制作用，其主要抗菌生物活性成分是大蒜素，具有广谱抗菌性而得到了广泛应用。本文综述近年来大蒜素的应用，重点介绍大蒜素的抑菌机制及其抗菌活性，并介绍在大蒜素抗菌活性方面的最新研究成果，展望大蒜素作为天然防腐剂的应用前景。 关键词：霉菌大蒜素抑菌机制抗菌活性防腐剂 Research progress of the inhibition of garlic to leaf mold in foods Yan Peiling Department of Chemical and Materials Engineering of Hubei Polytechnic University Huangshi 435000 China Abstract:Foods are easily infected by mold in the reservation and food quality is effected greatly, so mold shoud be the biggest problem in food fresh keeping and storage. Many kinds of pathogenic microorganisms can be inhibited by garlic, the antimicrobial component is allicin which has been extensively used because of resistance of wide spectrum. In this context the application of allicin is reviewed, the bacteriostatic machanism and stability are especially focused on. The latest researcher findings are also introduced. Finally，the application prospect of allicin as natural preservatives is forecasted. Keywords：mold；allicin；pathogenic microorganism；antibiotic activity；preservative 一、食品中的霉菌 霉菌是丝状真菌的俗称，即“发霉的真菌”，它们往往能形成菌丝繁茂的菌丝体，又不像蘑菇那样产生大型的子实体。在潮湿温暖的地方，很多多物品上长出一些肉眼可见的绒毛状、絮状或蜘蛛网状的菌落，即为霉菌。霉菌繁殖迅速，
大蒜油提取工艺介绍 大蒜油是大蒜中的特殊物质，呈现明亮透明琥珀色的液体，它是大蒜中抽取而得最重要的物质，此精油含很重要的活性硫化物，它对一般健康及心脏血管的健康很有帮助。 一、大蒜的基本功效 1、体内循环系统的天然强壮剂——降低胆固醇及血脂，增强血管弹性，减低血小板凝集而促进血液循环，能预防血栓、高血压等心血管疾病。 2、预防感冒，并适用于发烧、止痛、咳嗽、喉痛及鼻塞等感冒症状。 3、激活胃肠粘膜，健胃整肠，促进食欲，加速消化。 4、能调节血糖，预防糖尿病发作。 二、大蒜的提取工艺 1. 水蒸气蒸馏法 其原理是将水蒸气通入不溶于水或难溶于水但具有一定挥发性的有机物质中（大蒜油具有一定挥发性），使该有机物在低于100℃的温度下随水蒸气一起蒸馏出来，再经进一步分离获得较纯物质。本法的一般工艺流程为：大蒜去皮→洗净→加水捣碎→酶解→水蒸气蒸馏→油水分离→大蒜油。 水蒸气蒸馏法具有设备简单，成本低、稳定性好等特点，是最常用的方法之一。但是因发酵和蒸馏温度相对较高，蒜氨酸酶的活性下降，大蒜素有损失，使出油率较低。而且所得的蒜油有一股熟味，不够清新。 2.超临界CO2 萃取法超临界流体萃取技术，是一种新型的萃取分离技术。该技术是利用流体在临界点附近某一区域内，与待分离的溶质有异常相平衡行为和传递性能、且对溶质溶解能力随压力和温度改变、并在相当宽的范围内变动这一特性而达到溶质分离的一项技术。因CO2无毒性，价格便宜，常被作为萃取剂。超临界CO2萃取大蒜油一般流程为：大蒜去皮→洗净→捣碎→装填萃取柱→密封→超临界萃取→降压→大蒜油。
3.亚临界低温萃取 亚临界低温提取技术，是以亚临界状态的低级烷烃或低沸点化合物为溶媒，在低温和一定的压力下，与溶质在系统内相继经过浸提、蒸发脱溶、压缩、冷凝回收等过程，从天然产物中提取目标组分的一种新型绿色分离技术。亚临界低温萃取大蒜油的一般流程：大蒜去皮→破碎→亚临界低温萃取→脱溶→大蒜油 4.微波辅助提取法 微波是一种频率范围在300MHz～300000MHz的电磁波，极性分子在微波电场的作用下，以每秒24.5亿次的速率不断改变其正负方向，使分子高速的碰撞和摩擦而产生高热。为加快大蒜素的浸出速度并提高浸出效率，不少研究者采用微波辅助提取的手段，结果表明效果显著。 三、大蒜油的应用范畴 大蒜油是一种广谱抗菌物质，具有活化细胞、促进能量产生、增加抗菌及抗病毒能力、加快新陈代谢、缓解疲劳等多种药理功能。因此，在很多领域都有广泛的应用。在医疗方面,大蒜素可用于治疗感染性疾病、消化系统疾病、口腔疾病、心脑血管疾病等，且具有防衰老、防金属中毒、防癌抗癌等作用。在养殖方面,大蒜素对动物有明显的诱食作用，且在体内具有杀菌、抗氧化作用，并能增强动物免疫功能。在各种动物饲料中添加大蒜素，可提高动物的采食量和饲料转化率，提高动物的成活率，减少发病率，并能改善动物产品肉质，是一种极有应用价值的饲料添加剂。在种植方面，大蒜素可用于对农作物害虫和线虫的防治。一些企业看好大蒜素的开发前景，为了使用方便、增加疗效，已经研制出大蒜素、大蒜素注射液、大蒜素胶丸、大蒜素泡腾片、大蒜油微囊、大蒜油气雾剂、大蒜酊、大蒜液、大蒜糖浆、大蒜片、大蒜灌肠液、大蒜注射液等。
作者简介:冯亮(1980-),男,正攻读药剂学专业的博士学位。3通讯作者(C orrespondent author ),jxh1013@https://www.doczj.com/doc/cb11125295.html, 三七总皂苷中各组分含量测定方法的改进 冯 亮,蒋学华3,叶利民 (四川大学华西药学院,四川成都610041) 摘要:目的 用薄层扫描法(T LSC )和高效液相色谱法(HP LC )测定三七总皂苷中人参皂苷Rb 1(Rb 1)、人参皂苷Rg 1(Rg 1)和三 七皂苷R 1(R 1)3种主要成分的含量,并对两种方法进行比较,为修订质量标准中含量测定方法及含量限度提供依据。方法 T LSC 法用正丁醇-乙酸乙酯-水(4∶1∶5)上层溶液为展开剂,27%硫酸无水乙醇溶液为显色剂,测定波长λs =535nm ,λR =460nm ;HP LC 法用C 18色谱柱,以乙腈-水线性梯度洗脱,0min (25∶75)～15min (45∶55);流速1.5ml ?min -1;测定波长200nm 。结 果 T LSC 法测得三七总皂苷原料中Rb 1、Rg 1、R 1的含量分别为31.07%、23.30%、9.35%;HP LC 法测得三七总皂苷原料中Rb 1、 Rg 1、R 1含量分别为30.46%、22.65%、5.83%。结论 HP LC 法能将多种皂苷很好地分离并检测,简便快速,减少了误差。其准 确度和测定结果的稳定性均优于T LSC 法。 关键词:薄层扫描法;高效液相色谱法;三七总皂苷;人参皂苷Rb 1;人参皂苷Rg 1;三七皂苷R 1中图分类号:R927 文献标识码:A 文章编号:1006-0103(2006)02-0187-03 Improvement of determination method of the main components in Panax notoginseng saponions FE NGLiang ,J I ANG Xue -hua 3,YE Li -ming (West China School o f Pharmacy ,Sichuan Univer sity ,Chengdu 610041,China ) Abstract :OBJECTIVE T LSC and HP LC were adopted to determine the contents of ginsenoside Rb 1,ginsenoside Rg 1and sanchinoside R 1in Panax notoginseng saponions.And results of the tw o methods were compared ,which could provide the basis of revising the determination method in quality standard.METH ODS T LSC has been established with the upper layer of the mixture of butanol -ethyl acetate -H 2O (4∶1∶5)as developing s olvent ,and 27%sulphuric acid ethanol s olution as coloring reagent ,λs =535nm ,λR =460nm.HP LC was adopted with C 18column ,acetonitrile -H 2O (25∶75at 0min and 45∶55at 15min ,linear gradient elution )was used as m obile phase and detective wave 2length was set at 200nm.The flow rate was 1.5ml ?min -1.RESU LTS The content of ginsenoside Rb 1,ginsenoside Rg 1and sanchinoside R 1in Panax notoginseng saponions determined by T LSC was 31.07%,23.30%and 9.35%;and that determined by HP LC was 30.46%,22.65%and 5.83%,respectively.CONC L USION HP LC could separate and determine various components in Panax notoginseng saponions and determine them.Its accuracy and stability are better than T LSC. K ey w ords :T LSC ;HP LC ;Panax notoginseng saponions ;G insenoside Rb 1;G insenoside Rg 1;Sanchinoside R 1C LC number :R927 Document code :A Article I D :1006-0103(2006)02-0187-03 三七是五加科人参属植物Panax notoginseng (Burk.) F.H.Chen 的干燥根;含有皂苷、多糖、氨基酸等多种化学成分。其中三七总皂苷(Panax noto 2 ginseng saponions )为其主要的有效成分,具有活血化 淤的功效。三七总皂苷含有人参皂苷Rb 1、Rb 2、Rc 、Rd 、Re 、R f 、Rg 1、Rg 2、Rh 1和三七皂苷R 1、R 2、R 3、R 4、R 6等20余种皂苷成分,均属达玛烷型(Dammarane type )四环三萜皂苷。其中人参皂苷Rb 1(Rb 1)、人参 皂苷Rg 1(Rg 1)是三七总皂苷中含量最高的两个成分,而三七皂苷R 1(R 1)则是三七总皂苷的特征化合物[1]。对于三七总皂苷原料及其口服制剂,文献[2]规定采用比色法测定总皂苷含量。而比色法在操作过程中存在操作烦琐、影响因素多及重复性差等问题[3],尤其是不能分别测定三七总皂苷中各主要成 分的含量。为此,特建立了薄层扫描法(T LSC )测定 三七总皂苷原料中Rb 1、Rg 1和R 1的含量[4];同时建立了HP LC 含量测定法,并与T LSC 法进行比较,为重新修订质量标准中含量测定方法及含量限度提供依据。 1 实验部分 1.1 仪器与试药 LC -9A 高效液相色谱仪,SPD -6AV 紫外检测 器(日本岛津);CS -930薄层扫描仪;Dikma Diam on 2sil C 18色谱柱(200mm ×4.6mm ,5μ m ,美国Dikma 公司);硅胶G 板(大连化物所)。Rb 1、Rg 1和R 1对照 品(中国药品生物制品检定所);三七总皂苷(云南特 安钠制备厂);乙腈(色谱纯,美国Dikma 公司);水(超纯水);其余试剂均为分析纯。1.2 T LSC 法1.2.1 含量测定 取三七总皂苷样品约50mg ,精 华西药学杂志 W C J ?P S 2006,21(2):187～189
大蒜素的加工工艺 一、备料。选成熟、干燥、无虫蛀、无霉烂的蒜头，去蒂、分瓣、剥内衣，用清水漂洗，除去杂质及不合要求的蒜粒。 二、破碎、烘干。用粉碎机把蒜粒加工成糊状。将蒜糊放入烘箱，以文火烘干，温度控制在60～65℃，烘6～8小时，每2小时翻动1次，使蒜糊受热均匀。 三、磨粉咯干蒜块用粉碎机磨成粉，过80～100目筛。 四、浸泡除臭。蒜粉放入30～40℃酒内密封浸泡6小时除臭(蒜 粉与酒)比例为(1：3)。 五、分离。采用抽滤法，将上层的溶液取出，即为无臭蒜素原液。 六、工艺流程 选料→清洗去皮→活性催化剂浸泡→漂洗→打浆→脱水→烘干→粉碎→筛制→质量检测→成品包装 七、超临界CO2流体萃取技术是一种新型的提取、分离技术，也是“十五”期间重点推广的高新技术之一。与常规的溶剂提取相比，具有操作条件温和、无溶剂残留、能最大限度地保留原料的有效成 分等优点，被广泛地应用于食品领域，用于提取、制备各种高附加 值的食品。该项目以大蒜为原料，采用乙醇浸出与超临界CO2提纯 相结合的方法提纯大蒜素，保持了两者原有长处而回避了它们的短处，可以实现大蒜素的超临界CO2连续萃取提纯操作。工艺技术如下。 (1)乙醇提取蒜液。大蒜头去皮、切片，乙醇浸泡、分离出乙醇 蒜液，作为超临界CO2萃取的原料。乙醇蒜液含1.2~2.2mg大蒜素 /ml。
(2)超临界CO2提纯大蒜素。将乙醇蒜液由液体泵加入萃取釜， 来自钢瓶的CO2由高压计量泵送至萃取釜提取大蒜素，然后按顺序 通过一级减压阀、闪蒸釜、二级减压阀，回收CO2，萃取结束后， 分别从萃取釜和闪蒸釜中取出萃取残液和大蒜素。采用乙醇浸提与 超临界CO2萃取相结合的技术萃取大蒜素，提取率可达到92%以上，大蒜素纯度达84%，与新鲜蒜汁相当，因此，采用超临界CO2提取 工艺可使萃取物保持大蒜原有新鲜风味和药用成份。 功效 (1)防治高血压、高血脂、高血糖、冠心病、脑动脉硬化引起的 头晕、头痛以及中风偏瘫后遗症等心脑血管疾病; (2)消炎、杀菌、灭病毒，提高免疫力，能调理肠胃、预防感冒 和肺部感染; (3)抗突变，刺激免疫活性细胞产生干扰素，清除或阻止致癌物质，抑制细胞恶性增殖，预防肿瘤。 作用 (1)降低胆固醇结晶，降低血脂。 (2)有效抵抗钙离子沉积，降低外周血管阻力，降低血压。 (3)能软化血管，防止血管粥样硬化，防止血管破裂。 (4)有效改善心肌缺血，防止心绞痛、冠心病的发生。 (5)预防血栓形成，降低心肌梗塞和脑栓塞的发生。 (6)提高肌体体液免疫能力，预防肿瘤细胞的生长和发生。 (7)具有消炎杀菌的功能，可以预防感冒和胃肠炎。