实验一莠去津室内毒力测定及对玉米的安全性 一、实验目的 1.掌握土壤喷雾法测定除草剂室内毒力的方法。 2.明确实验数据统计分析及评价方法。 3.学习设计和评价除草剂对某种供试杂草毒力大小的方法。 4.学习评价除草剂对作物安全性的方法。 二、实验原理 1.莠去津（Atrazine）是系瑞士汽巴-嘉基（Ciba-Geigy）公司开发的一种三氮苯类除草剂。 2.防治对象：防治大多数一年生阔叶与禾本科杂草，对阔叶杂草的防效优于禾本科杂草。 3.作用机制：通过抑制光合作用而使杂草死亡。 4.使用时期：莠去津是玉米专用高活性除草剂品种，可用于作物播种后杂草出苗前进行土壤封闭处理，也可以在作物出苗后进行茎叶喷雾处理。用量为苗前每公顷1500~1875g，苗后1350~1875g。 莠去津以防治阔叶杂草为主，因此与禾本科除草剂混用可显著扩大杀草谱。 三、实验材料 1.除草剂 莠去津38%水悬浮剂（吉林金秋农药有限公司） 2.喷雾器 3.供试植物材料 作物：玉米（Zea mays L.） 杂草：苍耳（Xanthium sibiricum Patrin.） 稗草（Echinochloa crusgalli（L.）Beauv.） 4.试验器材 营养钵、烧杯、量筒、注射器、米尺、标签、记号笔等。 四、实验内容 1.植钵中播种定量的玉米、苍耳和稗草，覆0.5cm厚表土，镇压，淋水后置于室温正常管理。 2.设计药剂浓度 表 1 试验设计 处理号除草剂（g a.i./hm2） 1 2 3 4 5 38%莠去津水悬浮剂 38%莠去津水悬浮剂 38%莠去津水悬浮剂 38%莠去津水悬浮剂 清水对照 1500 1875 2800 3750 3.播种后进行喷药处理，喷药液量为300L/hm2，每处理4次重复。处理后置于室温正常管理。处理后观察并记录杂草出苗和生长发育情况及玉米的出苗和生长发育情况。 4.数据处理
6种杀菌剂对纹枯病菌的室内毒力测定 Virulence Test of Six Fungicides Against Rhizoctonia spp CHEN Fang-xin QI Yong-xia DING Ting （College of Plant Protection，Anhui Agricultural University，Hefei Anhui 230036） Abstract The virulences of diniconazoleon，procymidone，triadimefon，carbendazim，iprodione and prochloraz against Rhizoctonia spp were tested by mycelial growth rate method.The results showed that the EC50 of triadimefon against Rhizoctonia spp was the smallest，and the EC50 against Rhizoctonia solani，Rhizoctonia cerealis and Rhizoctonia solani was 0.174 3 mg/L，0.195 8 mg/L and 0.194 0 mg/L respectivly. 由于生产水平的提高和耕作制度的改变，纹枯病已成为水稻、小麦和玉米等禾谷类作物的主要病害之一。纹枯病菌主要以菌核在土壤中越冬，也能以菌丝体和菌核在寄主残体上越冬，成为翌年的初侵染源。上年或上季作物收获后遗留田间的菌核数与当年或当季发病程度关系密切[1-3]。水稻纹枯病是水稻三大病害之一，在世界范围内每年造成超过10万t的产量损失，严重时甚至减产50%[4-6]。小麦纹枯病在我国近20个省（市）都有不同程度的发生和危害，一般减产5%～10%，重者减产20%～40%，甚至颗粒无收[7-9]。近年来，由于玉米种植面积的扩大和高产密植技术的推广，玉米纹枯病的发展蔓延逐渐加快，由该病导致的损失一般为10%～20%[10]。
几种植物源杀虫剂的室内毒力测定 试验方案 方案一、触杀作用的测定（点滴法） 1 材料 1.1 实验用具 1.电子天平； 2.微量点滴器（或毛细管微量点滴器）； 3.培养皿； 4.平头镊子； 5.容量瓶（10ml、25 ml、50 ml、100 ml）； 6.移液管； 7.滤纸； 8.烧杯； 9.计算纸；10.养虫盒；11.无毒饲料 1.2 供试药剂 甘肃联信新材料科技有限公司提供哦五种植物源杀虫剂（注意：实验所用药剂必须为原药） 1.3供试溶剂：丙酮 1.4供试昆虫：3－4龄菜青虫(Pieris rapae)/小菜蛾幼虫（Heliothis armigera） 2 实验方法与步骤 2.1预备试验 用丙酮将药剂分别稀释成5000μg/ml、500μg/ml、50μg/ml、5μg/ml、0.5μg/ml,每头试虫点滴药量1.75μl，每浓度处理试虫不少于30头，待药剂干了以后，把5－8头试虫盛于装有无毒甘蓝叶片的培养皿中，作好标记，经24小时后检查试虫的生存及死亡头数，计算其死亡率，从这些浓度中找出合适的浓度，即以试虫死亡10％－20％浓度为最低浓度，死亡80％－90％的浓度为最高浓度，在这个浓度范围内按等差级数或等比级数，设置5－7个适宜浓度进行试验，根据预备试验结果进行试验设计 2.2实验设计 （1）药剂配制：在电子天平上称取待测药剂(当药剂为固体时)或用移液管移取(液体)，用容量瓶稀释为一系列浓度，如本实验设置5个浓度，即50×、100×、200×、400、800×，每个浓度为一个处理，以丙酮为对照CK，每处理重复4次，每重复处理试虫10头，共40头，总计240头。 （2）试虫称重：将要处理的供试昆虫每10头为一组，在电子天平上称取总重量，然后求出平均体重，放入培养皿内，作好标记。 （3）微量点滴器的标定：微量点滴器在使用前首先要进行标定，标定的目的是测微尺每转动一格所推出的药量点滴在滤纸上的药斑大小一致，准确计算出每转动一格所推出的药量。 （4）试虫处理：将试虫置于微量点滴器针头下方，转动测微尺，将丙酮或药剂
29种常用杀菌剂对番茄枯萎病菌和青枯病菌的室内毒力测定 摘要：在实验室内，采用菌丝生长速率法测定了29种杀菌剂对番茄枯萎病菌的抑菌效果，采用纸碟法测定了29种杀菌剂对番茄青枯病菌的抑菌效果。结果表明，有10种杀菌剂对番茄枯萎病菌的毒力较强（Ec50值 相对抑制率计算公式如下： 抑菌率=对照菌落直径-处理菌落直径对照菌落直径-菌饼直径×100%。 1.2.2杀菌剂对番茄青枯病菌的毒力测定方法菌液的制备：将番茄青枯病菌在LB斜面上活化，移入50mLLB培养液中，在28℃下振荡（150r/min）培养过夜。用无菌水将番茄青枯病菌菌液稀释至浓度约为106cFU/mL，备用。 纸碟测定方法参照文献[12-15]：将29种杀菌剂分别制成浓度为1000、100、10、1mg/L，吸取20μL在LB平板中央，每处理重复3皿。设清水对照。用上述番茄青枯病菌稀释液（106cFU/mL）喷雾后，28℃培养过夜，调查抑菌圈直径，计算相对抑制率。应用Excel软件处理系统求出各单剂毒力回归方程、Ec50值及相关系数。 2结果与分析 2.1杀菌剂对番茄枯萎病菌的毒力测定 采用菌丝生长速率法测定了29种杀菌剂对番茄枯萎病菌的抑菌效果。 2.2杀菌剂对番茄青枯病菌的毒力测定 采用纸碟法测定了29种杀菌剂对番茄青枯病菌的抑菌效果。结果表明，有3种杀菌剂对番茄青枯病菌有较强的毒力，其Ec50值均小于10mg/L（表3、图2），其中3%中生菌素的毒力最强，Ec50值为3.3742mg/L。其余26种杀菌剂对番茄青枯病菌不表现毒力。 表33种杀菌剂对番茄青枯病菌的室内毒力测定结果 药剂名称毒力回归方程相关系数 （r）Ec50 （mg/L）3%中生菌素y=7.10x+1.250.96823.374280%代森锰锌y=5.58x+0.830.97565.58872%春雷霉素y=4.11x+1.210.94198.3587 3结论与讨论 番茄具有较高的营养价值，深受广大消费者的喜爱。番茄是江苏省重要的蔬菜品种，年种植面积达到5.33万hm2，其中70%以上为设施栽培。近年来，番茄的价格保持稳定并呈现上升趋势，番茄市场价格一般为4～5元/kg，最高市场价达到20元/kg，番茄种植效益优势十分明显。番茄已成为江苏省发展现代高效农业的优选作物，番茄产业的发展对促进江苏省“农业增效、农民增收”发挥着重要的作用。 随着设施番茄连续种植年代的增加，由枯萎病菌、青枯病菌引起的土传病害连作障碍日趋严重，已成为设施番茄安全生产的主要瓶颈。目前生产上防治番茄枯萎病、青枯病主要依靠化学农药，但防治效果并不理想。我们通过实地调查和研究分析发现，主要有以下原因：（1）农户不了解病菌侵染时期，不能做到适时用药。番茄枯萎病和青枯病是系统性病害，病原菌长期存活在土壤的病残体上，在番茄苗期定植时，从根部的伤口侵入，存活在番茄组织的木质部和韧皮部内，大量繁殖后导致番茄植株失水死亡。防治番茄枯萎病和青枯病必须在苗期定植时用药，一旦错过防治适期，病原菌侵入番茄植株体内，使用药剂也不会有防治效果。（2）农户不了解药剂的杀菌范围，不能做到对症下药。农户认为杀菌剂能够包治百病，手边有什么药剂就用什么药剂。我们从7个示范基地收集了29种药剂，试验结果表明，只有10种杀菌剂对番茄枯萎病菌生长有抑制作用，3种杀菌剂能有效抑制番茄青枯病菌繁殖，大部分杀菌剂可能对番茄的其他病害有防控效果，但是对枯萎病和青枯病基本没有防治作用。表明要有效地防控番茄枯萎病和青枯病，必须适时用药和对症下药。
辽宁农业科学2015（3）：70 72 Liaoning Agricultural Sciences 文章编号：1002－1728（2015）03－0070－03doi：10．3969/j．issn．1002－1728．2015．03．022 9种杀菌剂对花生白绢病菌的室内毒力测定*谢瑾卉，朱茂山 （辽宁省农业科学院植物保护研究所，辽宁沈阳110161） 摘要：为筛选出安全有效的花生白绢病防治药剂。在室内离体条件下采用菌丝生长速率法测定9种杀菌剂对花生白绢病菌的毒力活性。9种杀菌剂对花生白绢病菌表现出不同的毒力活性。10%已唑醇EC毒力最强， EC 50 为0．0989μg/ml；50%咯菌腈WP、25%苯醚甲环唑EC、25%吡唑醚菌酯EC毒力作用较强，EC50分别为 0．1223、1．3823、1．5371μg/ml；50%嘧菌环胺WG毒力最弱，EC 50 为84．7805μg/ml。 关键词：花生白绢病菌；毒力测定；杀菌剂 中图分类号：S481+．9文献标识码：B 花生是我国四大油料作物之一，产量位居全球第一，是我国净出口创汇农作物品种之一。辽宁省是我国重要的优质花生产区及出口基地，近年来辽宁省花生种植面积急剧扩大，受气候、品种及栽培管理方式等因素影响，花生白绢病的发生逐年加重，成为制约辽宁花生产量和品质的重要因素。花生白绢病由齐整小核菌（Sclerotium rolfsii Sacc．）引起，S．rolfsii是一种土传性真菌，能侵染农作物、杂草和木本植物等，有广泛的寄主范围［1，2］。花生白绢病是世界范围内普遍发生的一种土传病害，温暖湿润地区尤为严重［3］。在美国及印度为害严重，美国佐治亚州每年由花生白绢病造成的经济损失高达3680万美元［4］。我国各个花生产区都有花生白绢病的分布和为害［5〗。杨家珍报道，1957 1959年，安徽省花生白绢病爆发，发病面积连续三年达到70%以上［6］。1977年，广东省就有关于花生白绢病症状、病原、病害流行及防治方法的报道［7］。2007年辽宁省兴城市爆发疑似花生白绢病，发病株率为10% 40%［8］。目前有关花生白绢病菌室内毒力测定的报道较少，本研究采用9种安全高效杀菌剂进行花生白绢病菌室内毒力测定，以期为生产上病害的防治提供依据。 1材料与方法 1.1供试病原菌 供试病原菌从2014年7月采自辽宁省兴城地区的花生白绢病病样上分离获得，经形态鉴定及回接试验鉴定为花生白绢病菌（Sclerotium rolfsii Sacc．）。 1.2供试药剂 供试药剂共9种，药剂名称、生产厂家及试验浓度详见表1。 1.3供试药剂对病原菌的毒力测定 毒力测定试验于2014年8月至11月进行。将分离得到的花生白绢病病原菌株接种于PDA平板上，28?培养4d，备用。采用菌丝生长速率法进行病原菌的毒力测定。用无菌水将各供试药剂配成10000μg/ml的母液，将供试药剂加入预先溶化且冷却至50?左右的PDA培养基中，摇匀，制成不同浓度梯度的含药平板，经过预试验测定，每种药剂的浓度所对应的抑制率均在5% 95%之间。加入等量无菌水的PDA培养基作空白对照（CK）。取培养好的花生白绢病菌株，打成直径为5mm的菌饼，将菌饼转接于含毒培养基中央。每种药剂设5个不同浓度的处理，共3次重复。28?恒温培养4d，对照的菌落（CK）接近长满培养皿时，采用“十”字交叉法，测量各个处理下的菌落直径，计算平均值，得出抑制率。利用统计软件SPSS19．0进行统计分析。将菌丝生长抑制率换算成生物统计几率值（y），药剂浓度换算成以10为底的对数（x），根据浓度对数与机率值回归法，得到线性回归方程y =a+b x，进行差异显著性分析。计算9种供试药剂对花生白绢病菌的抑制中浓度EC50，机率值与浓度对数之间回归的相关系数r值，比较各供试药剂的抑制效果并通过回归方程的斜率比较花生白绢病菌对各供试药剂的敏感性。 1.4计算公式 抵制率= （对照菌落直径－5mm）－（处理菌落直径－5mm） 对照菌落直径－5mm ?100% *收稿日期：2015－05－11 作者简介：谢瑾卉（1987－），女，辽宁沈阳人，硕士，研究实习员，主要从事油料作物病害研究。E-mail：seaside2008@yeah．net
七种杀菌剂对番茄早疫病病原菌室内毒力测定 方案，为番茄早疫病的防治提供科学依据，制定出切实可行的防治措施。 1 材料与方法 1.1 材料 1.1.1 供试菌株番茄早疫病病原菌株采集于豫北地区番茄种植大棚中的病果，经组织分离、纯化获得病原菌[10]。 1.1.2 试验药剂50%异菌脲（病可丹）可湿性粉剂为山东鑫星农药有限公司生产，50%氯溴异氰尿酸（比秀）可湿性粉剂为以色列海法作用保护有限公司生产，80%丙森锌（好锌泰）水分散粒剂为陕西美邦农药有限公司生产，10%苯醚甲环唑（病可丹）水分散粒剂为山东鑫星农药有限公司生产，50%醚菌酯（信赖）可湿性粉剂为陕西美邦农药有限公司生产，3 2.8%烷基腈氧基醌（凯银）水分散粒剂、35%腐霉利悬浮剂为宜宾川安高科农药有限责任公司生产。 1.2 方法 1.2.1 杀菌剂单剂毒力测定将7种杀菌剂单剂与PDA培养基充分混匀，配制成0.01、0.05、0.10、0.50、1.00、5.00 mg/L系列浓度的平板。采用菌丝生长速率法测定，用5 mm打孔器在培养6 d后的番茄早疫病菌平板上打孔，用镊子取菌丝面向下接种在含药PDA培养基上，每皿1个菌碟，28 ℃倒置培养，以去离子水作为对照组，每个处理设3次重复，于接种后第3天检查菌丝生长情况并用十字交叉法测量菌落生长直径，通过菌丝生长抑制率值和各药剂浓度对数值间的线性回归性进行分析，求出各菌株EC50并计算相对抑菌率。抑菌率计算方法为每个菌落使用十字交叉法测量2次，取其平均数作为菌落的大小。计算7
种杀菌剂对菌丝生长的抑制百分率，公式如下： 菌落增长直径=菌落测量直径-菌盘直径 抑菌率=（对照菌落增长直径-含药培养基上菌落增长直径）/对照增长菌落直径×100%[11]以浓度对数为横坐标（x），相对抑制率几率值为纵坐标（y），求出各药剂对供试菌株的毒力回归曲线方程y=a+bx、相关系数r与有效抑制浓度（EC50）。根据EC50分析比较不同杀菌剂对供试病菌菌丝生长的影响[12]。 1.2.2 复配剂的毒力测定选择抑菌活性较好的异菌脲、苯醚甲环唑、醚菌酯、腐霉利4种农药按其单剂浓度梯度两两配制成1∶1、1∶2、2∶1的含药平板，以去离子水作为对照组，每处理设3次重复。分别以异菌脲、醚菌酯、苯醚甲环唑为标准药剂，根据供药试剂，计算各复配剂的实际毒力指数、理论毒力指数、联合毒力。根据共毒系数的大小评价复配剂的增效作用，并确定最佳配比。 毒力指数（TI）=（单剂标准药剂EC50/供试药剂EC50）×100 混剂实际毒力指数（ATI）=（标准药剂EC50 / 混剂EC50）×100 混剂理论毒力指数（TTI）=单剂A的TI×PA+单剂B的TI×PB（PA和PB分别为混剂中有效成分的百分含量） 共毒系数（CTC）=（混剂的实测毒力指数/混剂的理论毒力指数）×100 根据共毒系数类型的划分标准[13]，CTC≥170为明显增效，120≤CTC2 结果与分析 2.1 单剂抑菌率测定 异菌脲、氯溴异氰尿酸、丙森锌、苯醚甲环唑、醚菌酯、烷基腈氧基醌、腐霉利单剂在试验浓度下对茄链格孢属菌菌丝生长抑制率分别为76.15%～100%、8.76%～17.97%、2.01%～70.92%、71.82%～100%、51.35%～71.59%、42.46%～93.87%、32.16%～91.76%（图1，表1）。
梨黑斑病又称裂果病，是梨树的三大病害之一，由 真菌的链格孢菌（Alternaria alternate （Fr.）Keissl ）侵染所 引起[1]。侵染可分为春季分生的新孢子引起的初次侵染 和由初次侵染后在田间引起再侵染两部分组成[2]。梨树 花期和幼果期是该病潜伏侵染时期，在果实贮藏期间 最易发病并且不易控制和防范[3]。 链格孢菌属半知菌亚门链格胞属。病斑上的黑霉是病菌的分生孢子梗和分生孢子。分生孢子梗褐至黄褐色，丛生，基部稍粗，上端略细，有分隔。孢子脱落后有胞痕。分生孢子串生，倒棍棒形，有纵横分隔，成熟的孢子褐色。在20~30℃之间病原菌能生长,pH 值限定4~12。在相对湿度为50%~100%时孢子可萌发，在水滴82019年3月2019（2）北方果树NORTHERN FRUITS DOI:10.16376/https://www.doczj.com/doc/c49313989.html,ki.bfgs.2019.02.003 中图分类号：S436.612.1+4文献标识码：B 文章编号：1001－5698（2019）02－0008－03 五种杀菌剂对梨黑斑病的室内毒力测定 梁魁景，侯晓杰，高小宽，张志强，欧阳汝欣 （衡水学院生命科学系，河北衡水053000） 收稿日期：2018-12-20 基金项目：2018年度高层次人才科研启动基金项目（2018GC13）；衡水学院校级项目（项目编号：2018LX15） 作者简介：梁魁景（1983-），男，硕士，讲师，主要从事园林植物病虫害防治研究，（电子信箱）zwbh201011@https://www.doczj.com/doc/c49313989.html, 。摘要：梨黑斑病由链格孢菌（Alternaria alternata ）引起，是目前梨果采后贮藏和运输过程中的主要疾病之 一。为筛选出防治梨黑斑病病的高效药剂，作者调查了衡水地区常用的农药并最终确定5种有效杀菌剂，分别是10%中生·寡糖素、60%多菌灵、32.5%苯甲·嘧菌酯、1.8%辛菌胺醋酸盐、15%络氨铜。用这5种药剂对菌丝进行室内毒力测定。经测定发现，这5种药剂对梨黑斑病病原菌的生长都有一定的抑制作用，其中效果最好的是15%络氨铜，药剂浓度为1000mg/L 时，平均菌落生长量为0.5mm ，抑制率达到92.25％，EC 50为0.652mg/L ；其次为1.8%辛菌胺醋酸盐；60％多菌灵抑菌效果最差，药剂浓度达到1000mg/L 时，平均菌落生长量为3.4mm ，EC 50为681.719mg/L 。 关键词：梨黑斑病；杀菌剂；室内毒力测定 Determination of Indoor Toxicity of Five Fungicides on Alternaria alternata Disease of Pear Fruits LIANG Kui-jing ，HOU Xiao-jie ，GAO Xiao-kuan ，ZHANG Zhi-qiang ，OUYANG Ru-xin （College of Life Science ，Hengshui University ，Hengshui Hebei 053000，China ） Abstract ：Pear black spot disease is caused by Alternaria alternata and is one of the main diseases during the postharvest storage and transportation of pear fruit.In order to screen out high efficiency agents for preventing and treating pear black spot disease ，the authors investigated the commonly used pesticides in Hengshui area and finally identified five effective fungicides ，namely10%Zhongsheng ·oligosaccharide ，60%carbendazim ，and 32.5%benzophene.Azoxystrobin ，1.8%octosamine acetate ，15%copper amide.The mycelium was assayed for indoor virulence using these five agents.It was found that these five agents have a certain inhibitory effect on the growth of P.sylvestris pathogens.The best effect is 15%lycopene copper.When the concentration is 1000mg/L ，the average colony growth is 0.5.Mm ，reaching 92.25%，EC 50is 0.652mg/L ；followed by 1.8%octosamine acetate ；60%carbendazim bacteriostatic effect is the worst ，when the concentration of the drug reaches 1000mg/L ，the average colony growth is 3.4mm ，The EC 50is 681.719mg/L.Key words ：Pear Black Spot ；Fungicide ；Indoor Toxicity