第1章UG NX 6操作基础
Unigraphics （简称UG）是美国Siemens公司推出的一套集CAD/CAE/CAM为一体的三维机械设计平台，也是当今世界广泛应用的计算机辅助设计、分析和制造的软件之一，广泛应用于汽车、航空航天、机械、消费产品、医疗器械和造船等行业，它为制造行业产品开发的全过程提供可靠的解决方案，功能涉及概念设计、工程设计、性能分析以及制造加工等。
UG NX 6入门基础
常用工具
文件操作
对象操作
坐标系操作
视图和布局
图层操作
表达式语言
【表达式】对话框
部件间的表达式
台灯的染色
拨盘的生成
凸台形零件的建立
本章要点本章案例
U G N X 6三维造型实例图解
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1.1 UG NX 6入门基础
1.1.1 UG 软件的特点及模块介绍
UG 是美国Siemens 公司推出的一套集CAD/CAM/CAE 于一体的软件系统，是当今世界上最先进的计算机辅助设计、分析和制造软件之一，它的功能覆盖了从概念设计到产品生产的整个过程，并且广泛地运用在汽车、航天、模具加工及设计和医疗器械行业等方面。它提供了强大的实体建模技术和高效的曲面建构能力，能够完成最复杂的造型设计，与装配功能、2D 出图功能、模具加工功能及PDM 之间的紧密结合，使UG 在工业界成为一套无可匹敌的高级CAD/CAM 软件系统。CAD 功能实现了目前制造行业中常规的工程分析、设计和绘图功能的自动化。用户能够方便地绘制出任何复杂的实体以及造型特征。UG 的各项功能都是通过各自的应用模块来实现的，这些功能模块都可以在【开始】菜单中找到，如图1-1所示。下面对UG NX 6软件的几个主要应用模块以及功能作简单介绍。
图1-1 【开始】菜单
1．基本环境
基本环境是启动UG 运行的第一个模块，是其他应用模块的公共运行平台。它支持打开已存的部件文件、建立新的部件文件、绘制工程图以及输入、输出不同格式的文件等操作，也提供图层控制、视图定义和屏幕布局、表达式和特征查询、对象信息和分析、显示控制和隐藏以及再现对象等操作。
2．建模模块
实体建模集成了基于约束的特征建模和显性几何建模两种方法，提供符合建模的方案，使用户能够方便地建立二维和三维线框模型、扫描和旋转实体、布尔运算及其表达式。实体建模是特征建模和自由形状建模的必要基础。
特征建模提供对建立和编辑标准设计特征的支持，常用的体素建模方法包括圆
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柱、圆锥、球、圆台、凸垫及孔、键槽、腔体、倒圆和倒角等。为了基于尺寸和位置的尺寸驱动编辑以及参数化定义特征，特征可以相对于任何其他特征或对象定位，也可以被引用复制，以建立特征的相关集。
自由形状建模能够进行复杂曲面和实体模型的设计，它是实体建模和曲面建模技术功能的合并，包括沿曲线的扫描、用一般二次曲线创建二次曲面体以及在两个或更多的实体间用桥接的方法建立光滑曲面，也可以采用逆向工程，通过曲线/点网格定义曲面，通过点拟合建立模型，还可以通过修改曲线参数或通过引入数学方程控制和编辑模型。
用户定义的特征提供一种交互方法，使用户基于自定义特征的概念去捕捉和存储部件，还可以利用一个已存在的参数化实体模型定义特征变量、建立参数间关系以及设置默认值等。
3．装配建模
装配建模是用于产品的模拟装配，支持“由底向上”和“由顶向下”的装配方法。装配建模的主模型可以在总装配的上下文中设计和编辑，组件以逻辑对齐、贴合和偏移等方式被灵活地配对或定位，改进了性能并减少了存储的需求。参数化的装配建模可以为描述组件间的配对关系，以及部件之间共享建模参数，是产品开发的并行工作。
4．制图模块
制图模块是用实体模型自动生成平面工程图，也可以利用曲线功能绘制平面工程图。在模型上的改变，工程图将被自动更新。制图模块提供自动的视图布局（包括基本视图、剖视图、向视图和细节视图等），可以自动或手动标注尺寸，还可以自动绘制剖面线、形位公差和表面粗糙度标注等。利用装配模块创建的装配信息可以方便地建立装配图，包括快速地建立装配图剖视图和爆炸图等。
1.1.2 UG 产品设计概述
UG 公司于1991年并入美国EDS 公司，它集成了美国航空航天和汽车工业的经验，成为机械集成化CAD/CAE/CAM 主流软件之一，是知识驱动自动化技术领域中的领先者，实现了设计优化技术与基于产品和过程的知识工程的结合，UG 具有以下优势：
（1）UG 是一个完全参数化软件，为零部件的系列化建模、装配和分析提供基础支持。
（2）UG 为机械设计、模具设计以及电器设计单位提供一套完整的设计、分析和制造方案。
（3）UG 可以管理CAD 数据以及整个产品开发周期中所有相关数据，实现逆向工程和并行工程等先进设计方法。
（4）UG 可以创建包括自由曲面在内的复杂模型，有强大的装配功能，并在
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装配模块中运用了引用集的设计思想。
1.1.3 UG NX 6工作环境及设置
本节介绍UG 的主要工作界面及各部分功能，了解这些部分的位置和功能之后才能有效地进行设计工作。UG NX 6主工作区如图1-2所示，包括标题栏、菜单栏、工具栏、工作区、快捷菜单、资源栏、坐标系、提示栏、状态栏等。
图1-2 UG 工作环境
● 标题栏
标题栏用来显示软件名称、版本号以及当前的模块和文件名等信息，如果对部件已经做了修改，但还没进行保存，其后面还会显示“（修改的）”提示信息。
● 菜单栏
菜单栏包括了本软件的主要功能，直接显示在图形窗口顶部标题栏下。菜单栏选项被称为菜单标题，每一项对应一个UG NX 6的功能类别。它们分别是【文件】菜单、【编辑】菜单、【视图】菜单、【插入】菜单、【格式】菜单、【工具】菜单、【装配】菜单、【信息】菜单、【分析】菜单、【首选项】菜单、【窗口】菜单和【帮助】菜单。每个菜单中会显示所有与该功能有关的命令，如图1-3所示。有些命令在菜单中并不显现，可到相应的工具栏中查找。
● 工具栏
UG NX 6有很多工具栏，当启动默认设置时，系统只显示其中的几个，工具栏是一行图标，每个图标代表一个功能。工具栏与菜单中的命令相对应，执行相同的功能，可以使用户避免在菜单栏中查找命令的繁琐，方便操作。UG 各功能模块提供了许多使用方便的工具栏，用户还可以根据自己的需要及显示屏的大小对工具栏
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图标按钮进行设置。
● 工作区
工作区是绘图的主区域。 ● 对话框、提示栏与状态栏
在UG 中选择一个菜单命令或单击某个图标按钮时，会弹出相应的对话框，有的对话框还存在多个下级对话框。这些对话框一般用来设置参数、输入文本或执行某项功能等。大多数对话框底部有【确定】、【应用】和【取消】按钮，例如【边倒圆】对话框中各按钮的含义说明如图1-4所示。
图1-3 【文件】菜单 图1-4 【边倒圆】对话框
提示栏默认在界面的左上方，显示关于当前选项期待输入的提示信息，这些信息指示下一步需要采取的动作。
状态栏默认在界面的右上方，用于显示系统状态及功能执行情况。在执行某项功能时，其执行结果会显示在状态栏中。
在执行各种功能操作时，应注意提示栏和状态栏中的相关信息。通过这些信息可以知道下一步应如何进行操作及相关操作的结果，以便作出正确的选择。
● 坐标系
UG 中的坐标系分为工作坐标系（WCS ）和绝对坐标系（ACS ），其中工作坐标系是用户在建模时直接应用的坐标系。
● 快捷菜单
快捷菜单在工作区中右击鼠标即可打开，其中含有一些常用命令及视图控制命令，可以方便绘图工作。
1.1.4 鼠标及快捷键的应用
1．鼠标的用法
标准鼠标键包括鼠标左键、鼠标中键和鼠标右键。鼠标各键的常用功能如
七政四余天星择日V1.0.0讲义(1) 一、个人命宫之求法： 命宫是天星择日的重点，是判断吉凶祸福的基础，是造命求富求贵的先决条件。择日家所用查个人命宫的方法，不同于子平命理家推命宫之法。 择日家所用之法，是把太阳加到生时，顺数到卯，卯上即是命宫。 求太阳所在何方的方法有二，一是以每月的中气为准，查万年历，凡主人生日是在交过当月中气后，则该月的六合处为月将，即为太阳在方；若未交中气，则仍按上个月推算太阳在方，此为简法；二是查看弧角星盘上的太阳在何方，更为精准。 如1965年巳月小满后出生，生时为卯，申方为太阳所在方，加到生时卯上，卯上为申，即为命宫在申；如生于午时，即将太阳申加到午上，顺数到卯，卯上为巳，即安命巳宫。 个人命宫度数算法有二：1、生日在当月中气后几天即为几度。 2、命宫度数=（太阳在弧角星盘躔度+15度）除以2 二、个人命宫求出后，则其它十一宫依次逆排为财宫、兄弟宫、田宅宫、子女宫、奴仆宫、婚姻宫、疾厄宫、迁移 宫、官禄宫、福德宫、相貌宫。 三、七政四余天星择日基础 1、七政四馀解释： 七政四馀乃是天文学之中高等数学与理论，以日、月、星、辰为主论,用以七政四馀之星曜交会与其三合、四正，在十二宫中之吉凶，判断日课之好坏等. 七政者为太阳、月亮、金、木、水、火、土星等。四馀者为孛、罗、计、气等星。 以下是各星之性质简略介绍： 太阳：天主、皇帝（万宿之主）有君父之威严，如得到其守照、正照拱照、夹照等，必得福寿无彊，可消灾解难。择日方面，如果得到太阳到向、到座、到方，三方拱照，都会锦上添花，吉神会发挥其好的作用，而凶煞会因为它之威严，而会收歛的。书云：「请君尊用太阳照，三合对宫福禄坚」。太阳每日平行五十九分零八秒左右（秒以下不计）太阳每月中气过一个宫限（三十度），一年行完十二宫，太阳入午宫为归垣，行经房、虚、昴、星等日宿为升殿。 太阴：后妃之象，有母仪、温柔、聪明、可爱，继太阳之后，晚上给人照耀，它能运用其宽仁慈爱，化解凶煞，普化吉祥。命中得到太阴、守、正、拱、夹等，必定主聪明、秀丽、福泽无双。择日如果得到太阴、到山、到向、到方等，亦是最佳。太阴有温柔之一面，所以喜其到座。吉多凶少。太阴每日平行十三度。十分卅五秒，约两日半可以行一宫限，一个月行十二宫，又一宫少些，与太阳会合，叫朔（初一到一百八十度，与太阳对宫，叫望（十五、十六、十七）等。入未宫叫归垣、行经、心、危、毕、张等，月宿为升殿。 土星：名叫镇星，乃是中央戊己土之精华，其色是"黄"其风格有道德之一面，主成长与养育之能力，是五星中移动最慢之星，故有"沉滞"之气。行度有顺、逆、伏、留，如果其顺行会有福力，富贵兴隆，如果逆行会有灾难，如瘟疫、黄肿等，光影前后九度，每日平行两分左右，约廿八个月过一宫，廿八年才行完十二宫，每一年坐镇一个星宿，故廿八年才可坐镇完成廿八星宿（镇星之名故由此来）。入子、丑宫叫归垣、行经、氐、女、胃、柳等土宿叫升殿。 木星：名叫岁星，是东方木之精华，色青，性质本为仁厚，应在东方青龙之位，其主生生不息之权力，行度有迟、有快、有顺、有逆、有伏、有留，当其顺行轨道时有福力，逆行轨道之时会生祸患。当与太阳会局，叫做文昌大会，主出状元、宰相等。（县长、部长、博士、硕士之位）是掌管图书、文艺之部份，又主秀拔，青出于蓝。光影前后九度，每日平行四度五十九秒，每年行一宫限，十二年行完十二宫，故名岁星。如果入寅、亥二宫为归垣、行经、角、斗、奎、井等四木宿为升殿。 火星：名叫荧惑，是南方火光耀之精，赤色，应在南方朱雀位，在夏令叫得时，（火旺）性质主礼，舒长权力，行度有迟、疾、顺、逆、伏、留。顺行轨道时会有福力，逆行轨道亦是有祸患（主瘟疫、血症等），光影前后九度，遇到木宫叫恩星，遇到土宫叫用星，会有好表现，遇到水星叫做难星，遇到金星叫做仇星，难发挥好作用。每日平行卅一分廿六秒左右两个月行一宫，两年行完十二宫，入卯、戍二宫为归垣、行经、尾、觜、
七政四余天星择日高级班授课讲义(2) 岳鼎竣 一．七政四余吉凶格 （一）七政四余贵格解 1：辰星居垣水星在巳申两宫。 2：水星升殿水星躔萁壁参轸四水宿。 3：金水相涵冬生金寒水冷多降，昼夜皆吉。 4：玄武持旗亥子二月，水星与日同宫。 5：金水从阳金水掌吉神居垣殿，昼生者奇。 6：双鱼戏水水星同命在亥宫度。 7：水附阳光日月水星同宫。 8：水日会合水星与日同宫度。 9：水土朝北水星与土星同在亥宫或子宫。 10：水润金明水星和金星同在辰宫。 11：水清宝瓶水星在子宫虚度。 12：五星循环木火土金水五星循环拱诸位。 13：水涵蟾魄水星与月同在未宫。 14：水火既济水星在子宫，火星在午宫。 15：水土相会水星与土星同在申宫。 16：水临双女水星在巳宫。 17：一星伴月水星与太阴同宫。 18：镇星居垣土星在子丑二宫。 19：土星升殿土星躔氐女胃柳四宿度。 20：火土得牛火星与土星同在丑酉二宫。 21：土金坚实秋冬土埋金寒，余月土星与金星同宫。 22：土罗相会土星与罗候同在辰宫。 23：勾陈镇殿辰戍丑未月土星与太阳同宫。 24：土宜见水土星与水星同在子宫。 25：土荧相会土星与火星同在丑宫。 26：土日合照土星与太阳同在戍宫。 27：土好宝瓶土星在子宫虚度。 28：火月同宵火月同在子丑二宫。 29：太阴朝斗月在丑宫斗宿。 30：火土高强火星与土星同宫，而夏生者土燥火炎为忌，余月吉。 31：五星连珠五星连续无间，顺度垣生者奇。 32：土号太常土星在丑宫。 33：土归郑国土星在辰宫亢宿。 34：太阳升殿太阳在寅宫房宿。 35：岁星居垣木星在寅亥二宫。 36：木星升殿木躔角斗奎井四宿度。 37：向阳花木木为宫恩命令顺行，日昼生春夏者佳。 38：木火文明冬春月，木火二者同宫。 39：木气连枝木气孛在寅亥二宫。
引物设计和Primer-BLAST的应用 Lv Peng 2015.11.18
CONTENT 1.PCR-引物设计目的 2.引物设计原则 3.设计引物软件 4.在线设计工具 5.probeBase 简介
1.1PCR（Polymerase Chain Reaction） 聚合酶链式反应 1971 Khorana 提出设想 1985 Kary Mullis 发明了PCR 1986年5月 Mullis在冷 泉港实验室 做专题报告 冷泉港实验室（The Cold Spring Harbor Laboratory，缩写CSHL），又译为科尔德斯普林实验室。
几不同的PCR技术 1.扩增已知序列两侧DNA的PCR：反向PCR（Inverse PCR，IPCR）、锚定PCR（anchored PCR）、RACE（Rapid Amplification of cDNA Ends）、连接介导的PCR（ligation-mediated PCR，LM-PCR）； 2.检测有限量稀有靶序列，即一对引物扩增产物不足以以通过凝胶电泳观察到的时：巢式PCR（nested PCR）； 3.快速、灵敏、特异而准确定量的PCR：实时荧光定量PCR （real-time quantitative PCR，RQ-PCR）。
特性 优化 碱基组成 （G+C ）含量应在40%-60%，4种碱基要分布均匀；长度 一般为18-27个核苷酸长度。上下游引物长度差别不能大于3bp ；重复和自身互补序列 不能有大于3bp 的反向重复序列或自身互补序列存在；上下游引物互补性一个引物的3’末端序列不能结合到另一个引物的任何位点上； 解链温度（Tm ） 两个引物的Tm 值相差不能大于5℃，扩增产物与引物的Tm 值相差不能大于10℃3’末端 引物3’末端碱基尽量为G 或C ，不能使3’末端有NNGC 或NNCG 序列引物序列不要有局部的GC rich 或AT rich （特别是3’端），避开T/C 或A/G 的连续结构 1.2引物设计原则 引物特性及优化设计
利用IN T ERN ET设计PCR引物举例 周咏东 华西医科大学附属第一医院眼科(610041) 国际互联网上信息资源十分丰富,给人们的生活、学习和工作带来了极大的方便。过去,需要设计PCR引物时,研究人员需要查阅大量文献,有时因无法查到原文,或无相关报道,会使研究工作一开始就不能顺利开展。笔者在科研中发现,有许多科研人员未能掌握I NT ERN ET上有关引物设计的共享资源,故结合实际应用经验予以介绍。使你的科研工作如虎添翼。 IN T ER NET上设计引物,分为两个步骤: 1 检索待扩增基因的DN A序列 首先接入IN T ERN ET,然后键入网址:w w w.ncbi.nlm. nih.g ov便进入了美国国家医学图书馆的生物技术信息中心的主页。在“Sear ch”右边的检索框内选择“G enBank”,然后在“fo r”右边的框内键入你检索的基因序列名,如“human Bcl-2cDN A sequence”,点击“Go”,检索就开始了。 出现的下一网页是“Cur rent Q uery”即告诉你检索出相关文献的数目。如你对结果不满意,该网页下半部分有“A dd T er m(s)to Q uer y”和“M o dify Cur rent Q uer y”两栏供你重新检索;如你对检检索结果满意,即可点击“Retr iev e XX”(X X 为查出的文献数)。接着即显示了刚才调出的文献名。你可选择一篇最符合的,然后将“Display”键右边的框内选择为FA ST A r epor t”(这是下一步设计引物所规定的),点击“D is-play”健,你要的序列就显示出来了。 最后,将这段序列全选,在“编辑”栏中点击“复制”,将此窗口最小化,重开窗口,进入下一步骤。 2 引物的设计 在新开的窗口中,健入网址w ww.g eno me.w https://www.doczj.com/doc/c26779669.html, 你即进入了“Whitehead Instit ut e for Bio medical R eser ch/ M IT Cent er for Genome Resear ch”的主页。在主页中先找到“G enome Center Softw ar e”标题,在其中的标题为“Ex peri-mental W eb-based Softw ar e”中,点击“W WW.P rimer P ick-ing(Pr imer3)”,此项,我们将用此网上软件设计引物。 网页上显示为“P r imer3o ld V ersio n”及“Click Her e T o T r y N ex t Ver sio n”,这两个版本大同小异,随便用哪一个。关键是在“Paste sour ce sequence belo w”文字下方的大空框内,粘贴上第一步查出的那段序列。然后根据自己的要求,对列出的各项引物设计指标作相应变动,否则为默认。确认指标设定完毕后,点击粘贴序列框下方的“Pick Pr imer s”键,你即得到了所需的引物,显示在“P rimer3O utput”网页上,共有5对,你可按需任选其一。 通过上述两个步骤,你如愿以偿,是不是很简便、快捷?快动手试一试吧!。 编辑 陈小娜 2.1.2非标准数字影像设备上网直接接入模块 该模块用于解决一部分带有数字网络接口,但又仅符合生产厂家内部标准的设备上网问题。以往,生产数字影像设备的众多厂家由于没有统一的上网标准,使医院相当一部分数字影像设备难以上网,因此,该模块须克服许多困难和问题,在实践中逐渐地、局部性地予以实现和完善。 2.1.3 非标准数字影像设备上网间接接入模块 此模块专用于对医院过去引进的,生产厂商根本就没提供上网接口的一部分早期非标准数字影像设备,通过对影像重新A/D的方法让它们间接上网。 2.2 数字影像会诊中心模块 建立医院数字影像局域网与PA CS系统,其核心意义在于能够方便地汇集各种各类检查的数字影像,提供给专家进行综合会诊。因此,在PA CS局域网基础上,建立硬件设施过硬、图像显示清晰、显示技术优良,能同时方便地显示各种数字诊断影像的数字化影像会诊中心,在很大程度上将代表整个项目的临床诊断价值与水平。2.3 数字影像局域网网络工程模块 网络工程模块包括:网络服务器、数据存储与管理软件系统模式、网络布局与工作站分布、网络构架与布线等等。此部分模块归属于计算机Intr anet信息网络工程范畴,对当前医院影像局域网In-tr anet的软硬件性能指标及设备系统的可扩展性具有决定性的作用。 2.4 各工程模块的信息流与局域网系统P ACS软件模块 如果说硬件是骨架,软件就是血液。建立了良好的硬件平台以后,必须要建立合理的网络信息流向和配以优良的PA CS 软件系统,才能保证整个系统能够正常运行。因此,这是建立数字影像会诊中心时,必须很好建立的又一个重要模块。 总之,医院建立数字影像局域网,并逐步过度到最终院际广域网连接已是二十一世纪医院计算机网络发展的必然趋势。我们必须紧跟这一时代发展潮流,扎扎实实从手上工作做起,理清各个系统模块关系,做好各方面技术储备,为医院建立数字影像局域网及P A CS系统作好准备。 编辑 杨立新 142?医学信息2001年3月第14卷第3期 Internet应用●
五行者，金木水火土謂之五星也，七政者日月加五星也，日為太陽，月為斗母即太陰也。 金星為太白星(又名賊星，日沒能見45度至46度處)木星為歲星，火星為熒惑，土星為鎮星，水星為辰星。 金星其為西方，其令為秋，其德為義(金水二星能行東西方天上少見朝東暮西速落)。 木星其為東方，其令為春，其德為仁。 水星其為北方，其令為冬，其德為智。 火星其為南方，其令為夏，其德為禮。 土星其為中央，令為四季，其德為信。 四餘者，為有氣無形之星球也。 紫氣屬木，為木星之餘氣。 月孛屬水，為水星之餘氣。 羅喉屬火，為火星之餘氣(又名天首星。) 計都屬土，為土星之餘氣(又名天尾星，羅計相差180度，即是在對宮)。 天星擇日需立二個盤，一為天盤，一為地盤。 天盤即立命宮，天盤時時動，即每一宮位為一食辰動盤。 所有天星之用神星，宜對命宮構成有效之感應。 其為30度、60度、90度、120度、180度才有效。 用神星若在150度，則天星擇日是用不上的，即無效之宮位。 另一為地盤，又稱之為靜盤，即用神星對某一山頭構成所說過效之度數。 天星擇日與其它門派有很大差異，不怕沖煞主命及山頭雜煞。 故之，验日者，日課是用三合法，我們验日時亦需用三合法验之。用三元法，我們亦用三元法验之，用天星法亦需用天星法验之。 否則各門各法難以相合，東說西不宜，西說南不宜，就會天下大亂。各法皆有其規格，反正有合一法即可，各有千秋，有一俗話說，地理爭到死，即謂各法不一，三合說三元不對，三元說三合不對。其實是我們單學一法，不知尚有多法，是我們不會而非其法不對矣。 不知是那一戊辰年，應百年以上 戊辰木、乙丑金、癸酉金、庚申木，丑山安葬斯課古人所選柱中犯傍陰府乙庚雙全，八座方時犯山方殺。但七政天星課中妙逢五星守垣，日月夾命山，又四餘包七政之吉格也。 立命宮說 蓋陰陽晝夜時刻分僅在於日，日出則明而為晝，以行化于天日入則晦而為夜，於是造命立於"卯"者，乃取日出發生之義，葬立於"酉"則取日入兒成胎之義，造葬兩者勿誤也。如秋分後，太陽在辰宮，若取午時用事，辰宮呼午，至卯止於丑宮，即命宮也。七政天星課安葬則在未宮也。 上述命宮是天星擇日必用之道，動盤是以時辰定命宮，而命宮需有七政四餘之用神天星守照、夾照、輔照、關照、合照、拱照。 靜盤即是二十四山內之十二宮，亦需得到用神星之臨照，如上面圖丑山未向一靜一動需配合得宜，則不忌二十山之雜殺矣。 一宮=二山，一山=15度，一宮=30度，1度=60分，1分=60秒，1秒=60微，1微=60籤。
天星择日法基本功１、七政四余 中国七政四余占星法源远流长，但真正达到计算精确时，是在明末清初，西洋传入的弧角天星择日学被溶入中国七政四余占星学之后，在择日界一般称之为七政四余天星择日法，又称弧角天星择日法。清康雍年间风水择日明师青江子就是精于天星择日，运用七政四余择日催丁，也可以预定出生人之八字，可见天星择日有研究。 ２、弧角天星的释意 1﹒假想有一天球模型,球中央代表地球，天球即由其无限延伸而形成。2﹒观测者的头顶无限延伸于天球上，即是天顶Z，即相对点为天底Z′。3﹒地球的北极点无限延伸至天球,即是天球北极P，而其相对点P′为天球南极。 4﹒由地球看天球，在夜晚可看到天球上镶满星球，假设我们要观测的是S(星) ，其所在天球经圈或时圈为PSP′。 5﹒观测者所在地球的地平方位圈，向天球无限延伸即是NSEW。 6﹒地球的赤道圈，向天球无限延伸为天球赤道圈为QEQ′W。
7﹒透过这种天球模型，利用球面三角学的数学计算，可轻易求出大阳到山时刻、太阳日出日落时刻、大阳高度、太阳方位角以及占星学宫位系统的各宫宫始点，以及其它行星的位置，其中SPZ的区域，即是天球球面界定而成的弧角，故有关算法在天星择日中称之为「弧角天星」。 ３、弧角天星流传不广的原因 弧角天星择日学是中国择日界视为位阶最高的一种，但仅在宫廷使用，一般民间不易窥知。清．光绪年间陈丽中出版《御览天象渊源》，1-4为钦天监实务，但内容艰深即使是饱学之士，也难以入门，而民间虽有薛风祚传自来华教士穆尼阁的《天步真原》，其中卷二，即在计算弧角天星的天宫图及行星的位置，但处处需要查对数表及行星位置的星历表，在当时中国尚未有球面天文学的观念，想象得到有心之士欲学习，也必然挫折再三。而民间又鲜有精通之士，即使有也大多处于略知计算步骤而已，且错讹颇多，误差甚大，这绝非夸张，可请问从事弧角天星择日的业界人士，所计算的宫位系统到底是那一种宫位系统便知。 就是上述原因，弧角天星择日，仅受择日界人士崇仰，而如无明师言传口授，纵使智过万人，却也难如登天，此种情形下，天星择日自然不可能广泛流传。 有鉴于此，岳鼎竣先生投入大量的精力与财力，依据师传，同时又参照国内外最成熟的天文学成果，开发出国内首款七政四余弧角星盘
政四余天星择日弧角天星择日立命宜忌 一：用星释义 天星择日的用星主要是节气调候五星。 冬至多寒用星是火罗土（或太阳），夏至多热用星是水孛金（或太阳）。 春分秋分节气平分，气候适宜，五星皆可用。春金用土计，秋木用水孛。 凡用星得令，入垣升殿，与命宫山向拱夹守照有情，主得富贵。用星休囚，落陷怒宫，更与命宫山向相刑，则所求艰难，福禄无望。 天星择日尚有命宫用星和山家用星。 山家用星见《讲义二》。 现再把命宫用星解释一下： 生我者为恩，我生者为用，我克者为仇，克我者为难。 各命宫的恩用仇难详解如下：
寅亥立命属木，水孛为恩，火罗为用，金星为难，土计为仇； 卯戍立命属火，木气为恩，土计为仇用，水孛为难，金星为仇； 辰酉立命属金，土计为恩，水孛为用，火罗为难，木气为仇； 巳申立命属水，金星为恩，木气为用，土计为难，火罗为仇； 午宫立命属太阳，金水为恩，火罗为用，木气为难，土计为仇； 未宫立命属太阴，金星为恩，木气为用，土计为难，火罗为仇。 二：忌星释义 天星择日的忌星主要是节气当令五星。旺令之时忌见当旺之星为难星（夹守照相刑），夏天炎热忌见火罗，冬天寒冷忌见水孛，春天木旺木为难星必灾，秋天金强为难星必祸。凡用星要得时，忌星要失时。用星得时，造福求吉如愿以偿，忌星得时，造福求吉反祸。忌星失时居宫失陷，又与坐山方向命宫成吉角拱照，便不能为祸。
三：四时立命宜忌 夏时以水孛为用星，立命卯戍二宫属火，以难为用多颠倒，主得富贵而孤独或出不长寿之人。立命子丑二宫属土，以恩为忌寿而贫，出人虽长寿，但终生贫穷，怀才不遇，钱山难救邓通穷。立命辰酉二宫属金，以难为忌身不保，不要想指望升官发财，保住性命就不错了。立命巳申二宫属水，以恩为用真至宝，这是真正的富贵格局。立命寅亥二宫属木，也是以恩为用的富贵格局。 冬天时节金寒水冷用星是火罗。立命子丑二宫属土，以恩为用真至宝，富贵尊荣，称心如意，有长安花满任扬鞭之象。立命卯戍二宫属火亦以恩为用。立命辰酉二宫属金，以难为用多颠倒，主得富贵孤独到老。立命巳申二宫属水，以恩为忌寿而贫。立命寅亥二宫属木，亦以恩为忌寿而贫。 春分前，天气偏寒，宜用火罗土，春分后，天气转热，兼用水孛。秋分前多热宜用水孛，秋分后转寒用火罗土。 四：宫星妙合 宫是命宫，星是用星。命宫五行得用星相生比和是谓宫
核酸环介导等温扩增技术（LAMP）引物设计与实例Time：2009-12-07 PM 14:52 Author:bioer Hits: 1459 times 烟头整理 LAMP的特点 LAMP与以往的核酸扩增方法相比具有如下优点： (1)操作简单 LAMP核酸扩增是在等温条件下进行，对于中小医院只需要水浴锅即可，产物检测用肉眼观察或浊度仪检测沉淀浊度即可判断。对于RNA的扩增只需要在反应体系中加入逆转录酶就可同步进行(RT-LAMP)，不需要特殊的试剂及仪器。 (2)快速高效 因为不需要预先的双链DNA热变性，避免了温度循环而造成的时间损失。核酸扩增在l h内均可完成，添加环状引物后时间可以节省1/2，多数情况在20-30 rain均可检测到扩增产物。且产物可以扩增至109倍，达0.5 mg/mL。应用专门的浊度仪可以达到实时定量检测。 (3)高特异性 由于是针对靶序列6个区域设计的4种特异性引物。6个区域中任何区域与引物不匹配均不能进行核酸扩增。故其特异性极高。 (4)高灵敏度 对于病毒扩增模板可达几个拷贝，比PCR高出数量级的差异。 缺点： 由于LAMP扩增是链置换合成，靶序列长度最好在300 bp以内。>500 bp则较难扩增。故不能进行长链DNA的扩增。由于灵敏度高。极易受到污染而产生假阳性结果。故要特别注意严谨操作，以及在产物的回收鉴定、克隆、单链分离方面均逊色于传统的PCR 方法。 引物设计实例 LAMP引物设计的在线网站(http://primerexplorer.jp/e/)，只要导入靶基因就能自动生成成组引物。 以某一微生物的鞭毛基因为例讲解一下LAMP引物设计的过程： 首先单击浏览按钮选择靶基因序列文件，靶序列默认的是小于22 kbp。支持三个类型的文件，普通文本格式（仅含序列）, FASTA格式和GenBank 格式文件。
The central role of UDPGDH played in capsule and other polysaccharides synthesis. KPS, capsule polysaccharide; LPS,lipopolysaccharide 简并引物设计方法 （1）利用NCBI搜索不同物种中同一目的基因的蛋白质或cDNA编码的氨基酸序列因为密码子的关系，不同的核苷酸序列可能表达的氨基酸序列是相同的，所以氨基酸序列才是真正保守的。首先利用NCBI的Entrez检索系统，查找到一条相关序列即可。随后利用这一序列使用BLASTP（通过蛋白查蛋白），在整个NR数据库中查找与之相似的氨基酸序列。 （2）对所有的序列进行多序列比对将搜索到的同一基因的不同氨基酸序列进行多序列比对，可选工具有Clustal W/X，也可在线分析。所有序列的共有部分将会显示出来。“*”表示保守，“：”表示次保守。 （3）确定合适的保守区域设计简并引物至少需要上下游各有一个保守区域，且两个保守区域相距50~400个氨基酸残基为宜，使得PCR产物在150~1200bp 之间，最重要的是每一个保守区域至少有6个氨基酸的保守区，因为每条引物至少18bp左右。 若比对结果保守性不是很强很可能找不到6个氨基酸序列的保守区，这时可以根据物种的亲缘关系，选择亲缘关系近的物种进行二次比对，若保守性仍达不到要求，则需进行三次比对，总之，究竟要选多少序列来比对，要根据前一次的结果反复调整。最终目的就是有两个6个氨基酸且两者间距离合适的保守区域。 （4）利用软件设计引物当得到保守区域后，就可以利用专业的软件来设计引物了，其中Primer 5.0 支持简并引物的设计，将参与多序列比对的序列中的任一条导入Primer 5.0 中，将其翻译成核苷酸序列，该序列群可用一条有简并性的核苷酸链来表示（其中R=A/G，Y=C/T，M=A/C，K=G/T，S=C/G，W=A/C/T，B=C/G/T，V=A/C/G，D=A/G/T，N=A/C/G/T，该具有简并性的核苷酸链必然包含上一步中找到的氨基酸保守区域的对应部分，在Primer 5.0 中修改参数，令其在两个距离合适的保守的nt区域内寻找引物对，总之要保证上下游引物都落在该简并链的保守区域内，结果会有数对，分数越高越好。 （5）对引物的修饰若得到的引物为： 5-NAGSGNGCDTTANCABK-3 则简并度=4×2×4×3×4×3×2=2304，很明显该条引物的简并度很高不利于PCR，可以通过次黄嘌呤代替N（因为次黄嘌呤可以很好的和4种碱基配对）和根据物种密码子偏好这两种方法来降低简并度。 这样设计出来的简并引物对，适用于比对的氨基酸序列所属物种及与这些物种分类地位相同的其他物种。 简并引物设计原则
1-2890(引物1) #1: Product of length 640 (rating: 171) Contains region of the molecule from 1 to 640 Tm: 72.1 C TaOpt: 48.8 C GC: 32.3 Sense Primer: CCTGGTTAATCCAAATCAC Similarity: 100.0% Length: 19 Tm: 44.1 C GC: 42.1 dH: -142.0 kcal/mol dS: -372.4 cal/mol dG: -29.2 kcal/mol Antisense Primer: GACAGGCCCTAATTAAGTT Similarity: 100.0% Length: 20 Tm: 45.0 C GC: 42.1 dH: -158.0 kcal/mol dS: -418.4 cal/mol dG: -31.5 kcal/mol Tm Difference: 0.9 GC Difference: 0 #1: Product of length 540 (rating: 171) Contains region of the molecule from 1 to 540 Tm: 72.2 C TaOpt: 49.4 C GC: 33.1 Sense Primer: CCTGGTTAATCCAAATCACT Similarity: 100.0% Length: 20 Tm: 45.8 C GC: 40.0 dH: -149.8 kcal/mol dS: -393.2 cal/mol dG: -30.8 kcal/mol Antisense Primer: ATAAGATTTGAGGTCAGCCA Similarity: 100.0% Length: 20 Tm: 46.4 C GC: 40.0 dH: -147.7 kcal/mol dS: -386.3 cal/mol dG: -30.7 kcal/mol Tm Difference: 0.6 GC Difference: 0.0 1-2890(引物2) #1: Product of length 603 (rating: 171) Contains region of the molecule from 514 to 1116 Tm: 73.9 C TaOpt: 50.3 C GC: 37.0 Sense Primer: TTGAAGATGGCTGACCT Similarity: 100.0% Length: 18 Tm: 42 C GC: 47.1 dH: -129.6 kcal/mol dS: -335.0 cal/mol dG: -27.9 kcal/mol Antisense Primer: GGAGGCCCTTTAACTTAA
天星择日法基本功 １、七政四余 中国七政四余占星法源远流长，但真正达到计算精确时，是在明末清初，西洋传入的弧角天星择日学被溶入中国七政四余占星学之后，在择日界一般称之为七政四余天星择日法，又称弧角天星择日法。清康雍年间风水择日明师青江子就是精于天星择日，运用七政四余择日催丁，也可以预定出生人之八字，可见天星择日有研究。２、弧角天星的释意 1﹒假想有一天球模型,球中央代表地球，天球即由其无限延伸而形成。 2﹒观测者的头顶无限延伸于天球上，即是天顶Z，即相对点为天底Z′。 3﹒地球的北极点无限延伸至天球,即是天球北极P，而其相对点P′为天球南极。 4﹒由地球看天球，在夜晚可看到天球上镶满星球，假设我们要观测的是S(星) ，其所在天球经圈或时圈为PSP′。 5﹒观测者所在地球的地平方位圈，向天球无限延伸即是NSEW。 6﹒地球的赤道圈，向天球无限延伸为天球赤道圈为QEQ′W。 7﹒透过这种天球模型，利用球面三角学的数学计算，可轻易求出大阳到山时刻、太阳日出日落时刻、大阳高度、太阳方位角以及占星学宫位系统的各宫宫始点，以及其它行星的位置，其中SPZ的区域，即是天球球面界定而成的弧角，故有关算法在天星择
日中称之为「弧角天星」。 ３、弧角天星流传不广的原因 弧角天星择日学是中国择日界视为位阶最高的一种，但仅在宫廷使用，一般民间不易窥知。清．光绪年间陈丽中出版《御览天象渊源》，1-4为钦天监实务，但内容艰深即使是饱学之士，也难以入门，而民间虽有薛风祚传自来华教士穆尼阁的《天步真原》，其中卷二，即在计算弧角天星的天宫图及行星的位置，但处处需要查对数表及行星位置的星历表，在当时中国尚未有球面天文学的观念，想象得到有心之士欲学习，也必然挫折再三。而民间又鲜有精通之士，即使有也大多处于略知计算步骤而已，且错讹颇多，误差甚大，这绝非夸张，可请问从事弧角天星择日的业界人士，所计算的宫位系统到底是那一种宫位系统便知。 就是上述原因，弧角天星择日，仅受择日界人士崇仰，而如无明师言传口授，纵使智过万人，却也难如登天，此种情形下，天星择日自然不可能广泛流传。 有鉴于此，岳鼎竣先生投入大量的精力与财力，依据师传，同时又参照国内外最成熟的天文学成果，开发出国内首款七政四余弧角星盘天星择日专业软件，也堪称世界华人首款权威标准天星择日专业软件，适用于任何经纬度的地区，使大量繁琐复杂的天文弧角函数计算，变成弹指一挥间的现实，精准高效，填补了天星择日学的空白，诚为广大崇爱七政四余天星择日者的福音。 明朝蒋大鸿先师说：“诸家选择尽荒唐，斗首元辰失主张；奇遁演禽皆倒乱，不经神授莫猜详”“故有仙人造命诀，不是干支子平法；浑天宝照候天星，此是杨公亲口诀。不怕三煞及太岁，阴府空亡俱抹煞；年克压命有何妨，退煞金神皆乱发。”４、中国七政四余择日学的步骤
PCR引物设计与分析 摘要：本文简单的介绍了PCR技术以及PCR引物设计原则和技巧，并以一段序列为例，介绍两种引物设计软件的使用方法。一般性引物自动搜索可采用“Premier Primer 5”软件，而引物的评价则可采用“Oligo 6”软件。 关键词：PCR；引物设计；软件； 1PCR 聚合酶链式反应（英文全称：Polymerase Chain Reaction），简称PCR。聚合酶链式反应（PCR）是体外酶促合成特异DNA片段的一种方法，由高温变性、低温退火（复性）及适温延伸等几步反应组成一个周期，循环进行，使目的DNA 得以迅速扩增，具有特异性强、灵敏度高、操作简便、省时等特点。它不仅可用于基因分离、克隆和核酸序列分析等基础研究，还可用于疾病的诊断或任何有DNA,RNA的地方。 PCR又称无细胞分子克隆或特异性DNA序列体外引物定向酶促扩增技术。 类似于DNA的天然复制过程，其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR由变性--退火（复性）--延伸三个基本反应步骤构成：①模板DNA的变性：模板DNA经加热至90~95℃一定时间后，使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离，使之成为单链，以便它与引物结合，为下轮反应作准备；②模板DNA与引物的退火（复性）：模板DNA经加热变性成单链后，温度降至55~60℃，引物与模板DNA单链的互补序列配对结合；③引物的延伸：DNA模板--引物结合物在DNA聚合酶的作用下，于70~75℃，以dNTP为反应原料，靶序列为模板，按碱基配对与半保留复制原理，合成一条新的与模板DNA链互补的半保留复制链重复循环变性--退火--延伸三过程，就可获得更多的“半保留复制链”，而且这种新链又可成为下次循环的模板。每完成一个循环需2～4分钟，2～3小时就能将待扩目的基因扩增放大几百万倍。 参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+。引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列，就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。 2引物设计原则及注意
[原创]七政四余,天星择日选吉必备 陈飞龙/文 七政四馀，乃是天文学之中高等数学与理论，是择日学最高境界。其以日、月、星辰为主论。用以七政四馀之星曜交会与其三合、四正，在十二宫中之吉凶，判断人生之祸福休咎，寿夭穷通等，准确非常。 七政者为太阳、月亮、金、木、水、火、土星等。四馀者为孛、罗、计、气等星。 各星性质： 1、太阳：天主、皇帝（万宿之主）有君父之威严，如得到其守照、正照拱照、夹照等，必得福寿无彊，可消灾解难。择日方面，如果得到太阳到向、到座、到方，三方拱照，都会锦上添花，吉神会发挥其好的作用，而凶刹会因为它之威严，而会收歛的。书云：「请君尊用太阳照，三合对宫福禄坚」。太阳每日平行五十九分零八秒左右（秒以下不计）太阳每月中气过一个宫限（三十度），一年行完十二宫，太阳入午宫为归垣，行经房、虚、昴、星等日宿为升殿。 太阳代表国家之元首，地区领导、国务卿、阁揆、总督等，但凡在行政机构内掌握控制权力者，均受「日」之管辖。但其属为黄金业务，如商家、经济学家、企业家等。 2、太阴：后妃之象，有母仪、温柔、聪明、可爱，继太阳之后，晚上给人照耀，它能运用其宽仁慈爱，化解凶煞，普化吉祥。命中得到太阴、守、正、拱、夹等，必定主聪明、秀丽、福泽无双。择日如果得到太阴、到山、到向、到方等，亦是最佳。太阴有温柔之一面，所以喜其到座。吉多凶少。太阴每日平行十三度。十分卅五秒，约两日半可以行一宫限，一个月行十二宫，又一宫少些，与太阳会合，叫朔（初一到一百八十度，与太阳对宫，叫望（十五、十六、十七）等。入未宫叫归垣、行经、心、危、毕、张等，月宿为升殿。 太阴代表普通的巿民、妇孺及公共事业。其属性为粮油食品、与及能运用自然界所赋予的权力等。 3、土星：名叫镇星，乃是中央戊己土之精华，其色是"黄"其风格有道德之一面，主成长与养育之能力，是五星中移动最慢之星，故有"沉滞"之气。行度有顺、逆、伏、留，如果其顺行会有福力，富贵兴隆，如果逆行会有灾难，如瘟疫、黄肿等，光影前后九度，每日平行两分左右，约廿八个月过一宫，廿八年才行完十二宫，每一年坐镇一个星宿，故廿八年才可坐镇完成廿八星宿（镇星之名故由此来）。入子、丑宫叫归垣、行经、氐、女、胃、柳等土宿叫升殿。 土星主管农人、老人、矿工等。其属性为建筑业、地产、建筑物、仓库船坞、矿产、制造及纺织业等类别。天王：主管建、破损、工业、社团与社交等事项。其属性为金属、铁路、汽车、电池、机器、飞车、百货、公共交通如（电车、火车、航空等）、公共事业如（电话、电灯等）。 4、木星：名叫岁星，是东方木之精华，色青，性质本为仁厚，应在东方青龙之位，其主生生不息之权力，行度有迟、有快、有顺、有逆、有伏、有留，当其顺行轨道时有福力，逆行轨道之时会生祸患。当与太阳会局，叫做文昌大会，主出状元、宰相等。（县长、部长、博士、硕士之位）是掌管图书、文艺之部份，又主秀拔，青出于蓝。光影前后九度，每日平行四度五十九秒，每年行一宫限，十二年行完十二宫，故名岁星。如果入寅、亥二宫为归垣、行经、角、斗、奎、井等四木宿为升殿。 木星，乃主管有关宗教、法律界、法官、律师、慈善及福利事业。其属性为金融界、银行界、证券、保险、报业界、企业界、印染业及纤维等。 5、火星：名叫荧惑，是南方火光耀之精，赤色，应在南方朱雀位，在夏令叫得时，（火旺）性质主礼，舒长权力，行度有迟、疾、顺、逆、伏、留。顺行轨道时会有福力，逆行轨道亦
政四余天星择日弧角天星择日立命宜忌 一:用星释义 天星择日的用星主要就是节气调候五星。 冬至多寒用星就是火罗土(或太阳),夏至多热用星就是水孛金(或太阳)。 春分秋分节气平分,气候适宜,五星皆可用。春金用土计,秋木用水孛。 凡用星得令,入垣升殿,与命宫山向拱夹守照有情,主得富贵。用星休囚,落陷怒宫,更与命宫山向相刑,则所求艰难,福禄无望。 天星择日尚有命宫用星与山家用星。 山家用星见《讲义二》。 现再把命宫用星解释一下: 生我者为恩,我生者为用,我克者为仇,克我者为难。 各命宫的恩用仇难详解如下: 寅亥立命属木,水孛为恩,火罗为用,金星为难,土计为仇; 卯戍立命属火,木气为恩,土计为仇用,水孛为难,金星为仇; 辰酉立命属金,土计为恩,水孛为用,火罗为难,木气为仇; 巳申立命属水,金星为恩,木气为用,土计为难,火罗为仇; 午宫立命属太阳,金水为恩,火罗为用,木气为难,土计为
仇; 未宫立命属太阴,金星为恩,木气为用,土计为难,火罗为仇。 二:忌星释义 天星择日的忌星主要就是节气当令五星。旺令之时忌见当旺之星为难星(夹守照相刑),夏天炎热忌见火罗,冬天寒冷忌见水孛,春天木旺木为难星必灾,秋天金强为难星必祸。凡用星要得时,忌星要失时。用星得时,造福求吉如愿以偿,忌星得时,造福求吉反祸。忌星失时居宫失陷,又与坐山方向命宫成吉角拱照,便不能为祸。 三:四时立命宜忌 夏时以水孛为用星,立命卯戍二宫属火,以难为用多颠倒,主得富贵而孤独或出不长寿之人。立命子丑二宫属土,以恩为忌寿而贫,出人虽长寿,但终生贫穷,怀才不遇,钱山难救邓通穷。立命辰酉二宫属金,以难为忌身不保,不要想指望升官发财,保住性命就不错了。立命巳申二宫属水,以恩为用真至宝,这就是真正的富贵格局。立命寅亥二宫属木,也就是以恩为用的富贵格局。 冬天时节金寒水冷用星就是火罗。立命子丑二宫属土,以恩为用真至宝,富贵尊荣,称心如意,有长安花满任扬鞭之象。立命卯戍二宫属火亦以恩为用。立命辰酉二宫属金,以难为用多颠倒,主得富贵孤独到老。立命巳申二宫属水,以恩为
DNA测序结果分析比对（实例） 关键词：dna测序结果2013-08-22 11:59来源：互联网点击次数：14423 从测序公司得到的一份DNA测序结果通常包含.seq格式的测序结果序列文本和.ab1格式的测序图两个文件，下面是一份测序结果的实例： CYP3A4-E1-1-1(E1B).ab1 CYP3A4-E1-1-1(E1B).seq .seq文件可以用系统自带的记事本程序打开，.ab1文件需要用专门的软件打开。软件名称：Chromas 软件Chromas下载 .seq文件打开后如下图： .ab1文件打开后如下图： 通常一份测序结果图由红、黑、绿和蓝色测序峰组成，代表不同的碱基序列。测序图的两端（下图原图的后半段被剪切掉了）大约50个碱
基的测序图部分通常杂质的干扰较大，无法判读，这是正常现象。这也提醒我们在做引物设计时，要避免将所研究的位点离PCR序列的两端太近（通常要大于50个碱基距离），以免测序后难以分析比对。 我的课题是研究基因多态性的，因此下面要介绍的内容也主要以判读测序图中的等位基因突变位点为主。 实际上，要在一份测序图中找到真正确实的等位基因多态位点并不是一件容易的事情。一般认为等位基因位点假如在测序图上出现像套叠的两个峰，就是杂合子位点。实际比对后才知道，情况并非那么简单，下面测序图中标出的两个套峰均不是杂合子位点，如图并说明如下：
说明： 第一组套峰，两峰的轴线并不在同一位置，左侧的T峰是干扰峰；第二组套峰，虽两峰轴线位置相同，但两峰的位置太靠近了，不是杂合子峰，蓝色的C峰是干扰峰通常的杂合子峰由一高一略低的两个轴线相同的峰组成，此处的序列被机器误判为“C”，实际的序列应为“A”，通常一个高大碱基峰的前面 1~2个位点很容易产生一个相同碱基的干扰峰，峰的高度大约是高大碱基峰的1/2，离得越近受干扰越大。 一个摸索出来的规律是：主峰通常在干扰峰的右侧，干扰峰并不一定比主峰低。最关键的一点是一定要拿疑似为杂合子峰的测序图位点与测序结果的文本序列和基因库中的比对结果相比较；一个位点的多个样本相比较；你得出的该位点的突变率与权威文献或数据库中的突变率相比较。 通常，对于一个疑似突变位点来说，即使是国际上权威组织大样本的测序结果中都没有报道的话，那么单纯通过测序结果就判定它是突变点，是并不严谨的，因一份 PCR产物中各个碱基的实际含量并不相同，很难避免不产生误差的。对于一个未知突变位点的发现，通常还需要用到更精确的酶切技术。 (责任编辑：大汉昆仑王)
LAMP原理及引物设计与实例 ．LAMP引物的设计 LAMP引物的设计主要是针对靶基因的六个不同的区域，基于靶基因3' 端的F3c、F2c和Flc区以及5' 端的Bl、B2和B3区等6个不同的位点设计4种引物。 FIP(Forward Inner Primer)：上游内部引物，由F2区和F1C区域组成，F2区与靶基因3’端的F2c区域互补，F1C区与靶基因5' 端的Flc区域序列相同。 F3引物：上游外部引物(Forward Outer Primer)，由F3区组成，并与靶基因的F3c区域互补。 BIP引物：下游内部引物(Backward Inner Primer )，由B1C和B2区域组成，B2区与靶基因3' 端的B2c区域互补，B1C域与靶基因5' 端的Blc区域序列相同. B3引物：下游外部引物(Backward Outer Primer )，由B3区域组成，和靶基因的B3c区域互补。 2．扩增原理 60-65℃是双链DNA复性及延伸的中间温度，DNA在65℃左右处于动态平衡状态。因此，DNA在此温度下合成是可能的。利用4种特异引物依靠一种高活性链置换DNA聚合酶。使得链置换DNA合成在不停地自我循环。扩增分两个阶段。 第1阶段为起始阶段，任何一个引物向双链DNA的互补部位进行碱基配对延伸时，另一条链就会解离，变成单链。上游内部引物FIP的F2序列首先与模板F2c结合（如图B所示），在链置换型DNA聚合酶的作用下向前延伸启动链置换合成。外部引物F3与模板F3c结合并延伸，置换出完整的FIP连接的互补单链（如图C所示）。FIP上的F1c与此单链上的Fl 为互补结构。自我碱基配对形成环状结构（如图C所示）。以此链为模板。下游引物BIP与B3先后启动类似于FIP和F3的合成，形成哑铃状结构的单链。迅速以3' 末端的Fl区段为起点。以自身为模板，进行DNA合成延伸形成茎环状结构。该结构是LAMP基因扩增循环的起始结构。 第2阶段是扩增循环阶段。以茎环状结构为模板，FIP与茎环的F2c区结合。开始链置换合成，解离出的单链核酸上也会形成环状结构。迅速以3’末端的B1区段为起点，以自身为模板。进行DNA合成延伸及链置换．形成长短不一的2条新茎环状结构的DNA，BIP引物上的B2与其杂交。启动新一轮扩增。且产物DNA长度增加一倍。在反应体系中添加2条环状引物LF和LB，它们也分别与茎环状结构结合启动链置换合成，周而复始。扩增的最后产物是具有不同个数茎环结构、不同长度DNA的混合物。且产物DNA为扩增靶序列的交替反向重复序列。 https://www.doczj.com/doc/c26779669.html,MP的特点 LAMP与以往的核酸扩增方法相比具有如下优点： (1)操作简单，LAMP核酸扩增是在等温条件下进行，对于中小医院只需要水浴锅即可，产