兔抗人红细胞免疫血清的制备
摘要：目的制备兔抗人红细胞免疫血清并鉴定其效价。方法将经过生理盐水洗涤、离心、去上清后配成的红细胞悬液皮下多点（10处）注射于家兔靠近淋巴结处，在20天内经过免疫间隔时间的不同后，心脏采血并分离血清，倍比稀释、经过灭火补体与不灭活补体的凝集试验和溶血试验来判断兔抗人红细胞免疫血清的效价。结果凝集试验在(++)1:64抗血清稀释处出现凝集,溶血试验在1:512稀释处出现少量凝集。结论在凝集试验中抗血清的效价为1:64.
关键词：兔抗人红细胞血清凝集试验
抗体分子是生物学和医学领域用途最广泛的蛋白质分子，抗体作为疾病预防、诊断和治疗的重要生物制剂已有百余年历史。抗体在医药生物技术领域中的应用日趋广泛，地位越来越重要，而抗体的制备技术也是众多研究者们关注的问题，目前制备多克隆抗体主要是通过免疫动物所得，但是怎样才能制备得到高效价的抗体呢，免疫血清效价的高低受多重因素的的影响，免疫的途径及免疫的时间不同和分离的彻底与否都会影响抗血清的效价。本组通过免疫时间的不同来免疫家兔，并用凝集实验和溶血试验来判断抗体效价，快速经济的制备抗血清制备方法为实验教学使用提供帮助，更好的了解和加深抗原抗体反应及抗体效价的鉴定和影响因素。
1 材料和方法
1.1实验对象选用健康、适龄、健壮、无感染的家兔
1.2实验材料生理盐水人红细胞采血针止血带碘液酒精棉签真空管
水平式离心机水浴箱注射器试管吸管
实验分组三个大组（1个班一个大组）4人一组
实验过程和方法
一、颗粒性抗原的制备（2%~5%RBC的制备）
（1）静脉采血2-3ml，注入抗凝管中，轻轻混匀。
（2）洗涤RBC 将上述抗凝血移至10ml试管中，加入NS 6-7ml，混匀，2500r/min离心5min,去上清。重复上述操作三次，最后一次去上清后，将红细胞配制成2%~5%的RBC悬液。
二免疫家兔
2、取上述RBC悬液1ml免疫家兔。免疫部位：静脉、皮内、皮下等。每只兔子免疫8~10点，每点0.1ml左右。每隔2~4天免疫一次。
1班免疫时间表：从11月1日起开始免疫共20天每隔2天免疫一次
第一次：11月1日第二次：11月4日第三次：11月7日
第四次：11月10日
第五次：11月13日第四次：11月16日第七次：11月19日2班免疫时间表:每隔3天免疫一次
第一次：11月2日第二次：11月6日第三次：11月10日第四次：11月14日
第五次：11月18日第六次：11月21日
3班免疫时间表：每隔4天免疫一次
第一次：11月3日第二次：11月8日第三次：11月13日
第四次：11月18日第五次：11月22日
三、对已免疫的家兔心脏采血和分离血清
3、心脏采血10ml，凝固后，分离血清（2000转/min,5分钟)。
4、取两支小试管并以A、B标记之，将上述血清一半加入A管，另一半加入B管。将A管置于56℃水浴箱30分钟（灭活补体）。
5、抗血清效价的鉴定。
凝集试验和溶血反应
凝集反应实验原理指颗粒性抗原(RBC)与相应抗体特异结合，在适当电解质存在下，形成肉眼可见的凝集现象
试管凝集试验过程 1.取洁净小试管10支，排列于试管架上，依次编号。
2.向各管中加入生理盐水200ul。
3.向第一支试管中加入A管血清200ul，充分混匀，吸出200ul放入第二管，混匀后取出200ul加入第三管中，如此类推直至第七管，混匀后取出200ul弃去。第10管不加血清，为生理盐水对照管。至此，第1~9管的血清稀释度分别为：1：2，1：4，1：8……1：512。这种稀释方法称为连续倍比稀释法，为免疫试验中常用的稀释方法。
4.向每管加入200ul 2%RBC悬液，此时每管的液体总量为400ul ，血清稀释度又增加1倍。
5.摇匀，置37 ℃30min。(取出试管1500r/s 30秒)观察结果。
试管凝集操作程序(倍比稀释法)
管号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
NS 200 200 200 200 200 200 200 200 200 200
血清 200 200 200 200 200 200 200 200 200 200 RBC 200 200 200 200 200 200 200 200 200 200
终稀释度1/4 1/8 1/16 1/32 1/64 1/128 1/256 1/512 1/1024
----
[结果判断
选择适当的光暗对比背景，先不要振摇，观察管底凝集物的范围和上清液的浊度。然后轻轻摇动试管，注意观察凝集颗粒的大小、均匀度等。每一试管的观察，都应与对照管进行比较。盐水对照管诮无凝集现象，轻轻摇动试管则RBC分散成均匀混浊；而凝集块则沉于管底，轻摇时不易散开，凝集程度通常以“+”表示：
“4+”很强，全部RBC凝集，凝集块全部沉于管底，液体澄清。
“3+”强，RBC大部分凝集并沉于管底，液体稍混浊。
“2+”中等强度，RBC大约一半凝集，液体较混浊。
“+”弱，仅少量RBC凝集，液体明显混浊。
“--”不凝集，液体混浊与对照管相同。
只要待测血清管出现“2+”以上的凝集现象，即可判断为反应阳性；以出现“2+”凝集的最大稀释度为待测血清的抗体效价。
溶血试验
实验原理溶血反应是指补体参与的抗体致红细胞的溶解反应.
参与反应的成分有红细胞、抗红细胞抗体，也称溶血素、补体。
溶血反应实验过程 1.取洁净小试管8支，排列于试管架上，依
次编号。
2.向各管中加入生理盐水200ul
3.向第一支试管中加入血清200ul，充分混匀，吸出200ul放入第二管，混匀后取出200ul加入第三管中，如此类推直至第七管，混匀后取出200ul弃去。第八管不加血清，为生理盐水对照管。至此，第1~7管的血清稀释度分别为：1：2，1：4，1：8……1：128。这种稀释方法称为连续倍比稀释法，为免疫试验中常用的稀释方法。
4.向每管加入200ul 2%RBC悬液，此时每管的液体总量为400ul ，血清稀释度又增加1倍。
5.摇匀，置37 ℃30min。观察结果。
管号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 NS 200 200 200 200 200 200 200 200 200 200
血清 200 200 200 200 200 200 200 200 200 200 RBC 200 200 200 200 200 200 200 200 200 200
终稀释度1/4 1/8 1/16 1/32 1/64 1/128 1/256 1/512 1/1024 ----
--观察结果时，应先观察对照管结果是否正确。对照管应不溶血，在对照管结果全部正确前提下观察待测血清管的结果，以出现完全溶血作为抗体的效价。
6 结果
经统计1、2班凝集试验抗血清最高效价为1:512。
本班本组凝集试验结果：在1:4~~1:128血清稀释度处均出现凝集现象，1:128稀释度处仅有少量凝集为“+”而1：64处有一半凝集，液体较浑浊，而空白对照管中无凝集现象产生，通过目测，“++”为稀释度1:64处，则抗血清的效价为1:64。
7讨论
本班鉴定的抗血清效价都比1、2班的都低，造成这样的结果可能是因为
1、免疫间隔时间较长，是家兔机体产生的抗血清较少
2、免疫部位的不同以及免疫不到位
3、操作过程不够认真，分离得到的抗血清不够纯
4、凝集试验过程中灭火补体时间不够，导致部分被溶血而使凝集的很少
5、免疫兔子腹部淋巴结时，针头穿进腹膜下进到腹腔而使部分血清被消化排除使家兔的免疫应答减弱而产生的抗体少
6、免疫兔子时针头穿破皮肤而未发觉造成血清注射量减少造成抗体产生减少
参考文献
何艳嫦钟俊东兔抗人血清制备与效价的鉴定广东佛山市第一人民医院检验科528000
张红霍宏健免疫血清制备及应用白城医学高等专科学校吉林白城137000
覃艳春陆金兰陆吉利韦启后免疫血清制备方法改良初探右江民族医学院学报广西百色2005-12 第27卷第6期
张美英马梦泽富玥聂智华李丽娜包头医学院报2012年01期
小鹅瘟的症状及原因 小鹅瘟又称鹅细小病毒感染，是由鹅细小病毒引起雏鹅和雏番鸭的一种急性或亚急性的败血性传染病。该病主要侵害4—20日龄雏鹅，以传播快、高发病率为特征，是当前危害养鹅业的主要病毒性传染病。 小鹅瘟的症状：潜伏期为3～5天，根据病程经过，可分为三种类型：（1）最急性型：7日龄以内的雏鹅感染常呈最急性，往往不显任何症状而突然死亡。（2）急性型：15日龄以下发病的雏鹅一般为急性。病鹅精神萎顿，缩头松毛，步行艰难，离群独处，打瞌睡，继而食欲废绝，喜饮水，严重下痢，排灰白或淡黄绿色并混有气泡的稀粪。鼻孔流出浆液性分泌物，摇头，口角有液体甩出，呼吸用力，喙端色泽变暗，嗉囊中有多量气体或液体；有些病雏临死前出现神经症状，颈部扭转，全身抽搐，两腿麻痹，1～2天内衰竭死亡。（3）亚急性型，15日龄以上的雏鹅表现为亚急性，以精神萎顿、消瘦、拉稀为主要症状，少食、病程长，有的可自愈但生长不良。 小鹅瘟的原因：诊断本病主要发生于3周龄内的雏鹅，病理变化特征为纤维素性浮膜性肠炎等有助于临床诊断。确诊需进行病毒分离或血清学试验，如琼脂扩散试验可作出较准确的诊断。
【天健鹅瘟清用法用量】肌肉注射；未经免疫的雏鹅可用小鹅瘟高免血清进行预防和治疗。预防时，每只雏鹅皮下注射血清0.5毫升；治疗时，15日龄以下每只注射1毫升，15日龄以上每只注射2毫升天健鹅瘟清，一针治愈。 小鹅瘟预防注射疫苗：母鹅开产前1个月，每羽注射小鹅瘟疫苗1毫升，2周后所产种蛋孵出的雏鹅免疫保护率可达95%以上；免疫血清疗法：雏鹅出壳3～5天内，皮下或肌注小鹅瘟免疫血清，预防量每羽0.5毫升，治疗量1毫升；加强饲养管理：推广自繁自养，搞好种蛋消毒，严格执行卫生防疫制度，加强饲养管理，发现病鹅及时隔离治疗，防止污染环境。 养鹅日常管理首先应注意日常管理要有规律，建立鹅的条件反射、减少各种应激反映。包括喂食、清扫圈舍、关、放鹅、下水洗浴、刷洗饮食用具、卫生消毒、光照及拣蛋等等操作时间顺序，要规律化、制度化，程序一旦定下来不可随意改动，但可随季节昼夜长短变化逐渐调整。注意保证各日龄鹅的适宜温度、密度。
免疫原和抗血清制备 题库2-1-8
问题： [单选,A2型题,A1A2型题]制备抗血清时，抗体产生不包括以下哪一个阶段（） A.静止期 B.指数期 C.稳定期 D.下降期 E.活跃期 抗血清产生阶段分为静止期（约2天，血中尚无抗体）；指数期（4天左右，抗体迅速上升）；稳定期（2~4周，抗体保持一个稳定的水平）；下降期（约几个月后，抗体缓慢下降）4个阶段。
问题： [单选,A2型题,A1A2型题]属于颗粒性抗原的是（） A.白蛋白 B.球蛋白 C.脂多糖 D.DNA E.血小板 血小板为颗粒状的物质，属于颗粒性抗原，其余四种均为可溶性抗原。
问题： [单选,A2型题,A1A2型题]首次与第二次免疫接种的时间间隔最好为（） A.1周内 B.10~20天 C.7~10天 D.20~30天 E.30天以上 初次免疫与第二次免疫的间隔时间多为2~4周，再次免疫后两周内进行。(私人电影 https://www.doczj.com/doc/a716055630.html,/)
问题： [单选,A2型题,A1A2型题]佐剂的生物学作用不包括（） A.增加抗体的滴度 B.增强免疫原性 C.引起迟发型超敏反应 D.改变抗原的特异性 E.增强迟发型超敏反应 免疫佐剂是指与抗原一起或先于抗原加入机体后，能增强机体对该抗原的免疫应答能力，或改变免疫应答类型的辅助物质，不能改变抗原特异性。
问题： [单选,A2型题,A1A2型题]纯化抗原的鉴定，不包括（） A.免疫活性鉴定 B.效价鉴定 C.纯度鉴定 D.含量鉴定 E.理化性质鉴定 纯化抗原的鉴定主要对纯化抗原的含量、理化性质、纯度及免疫活性进行鉴定。
小鹅瘟灭活疫苗（TZ10株）的研制 小鹅瘟是导致雏鹅死亡的常见疾病之一,可造成巨大经济损失,严重危害养鹅业的发展。现有弱毒活疫苗和小鹅瘟抗体的广泛应用,在我国小鹅瘟疫病防控过程中发挥了巨大的作用。 但活毒疫苗存在毒力返强的潜在危害,从而限制了其生产应用,因此研究小鹅瘟灭活疫苗显得尤为重要。本研究对小鹅瘟分离毒株的生物学特性进行了系统研究,筛选出免疫原性好、繁殖滴度高的小鹅瘟野毒株作为灭活疫苗候选株,并开展了生产工艺、乳化工艺和免疫效力研究工作,以期制备出安全、高效的小鹅瘟灭活疫苗,为我国小鹅瘟疫病的防控和净化提供有力工具。 1、小鹅瘟病毒疫苗候选株的筛选为了研制与当前小鹅瘟流行株匹配的疫苗,本研究对从2009～2011年江苏省养鹅地区疑似小鹅瘟的临床样品中共分离了 5株鹅细小病毒(GPV),同时对分离株进行VP3基因测序并绘制遗传进化树,序列分析结果表明GPV分离株与国内大部分分离株属于同一分支,明显不同于国内疫苗株SY61和台湾主要分支。对获得的毒株经有限稀释法纯化,并对纯化后的病毒进行繁殖性能、毒力、特异性及免疫原性等进行了测定,5株病毒均属于强毒株,其中 Gosling plague virus/taizhou/10(TZ10)株病毒含量最高(F10 代:105.0ELD50/0.2ml以上),且其灭活抗原免疫鹅4周后的抗体水平最高,因此确定以TZ10株作为小鹅瘟疫苗候选株。 按照农业部颁发的《兽用生物制品(毒、虫)种种子批建立实验技术指导原则》各项要求,对纯化后的TZ10株F0代毒在鹅胚中连续传至30代,并分别对不同代次种毒进行了 AGP、鹅胚半数致死量(ELD50)测定、免疫原性、特异性实验及纯净性检验,建立了符合规定的小鹅瘟病毒TZ10株的基础种子批(F16～F20种毒)、
第三章免疫原和抗血清的制备 第一节免疫原的制备 免疫原指能诱导机体产生抗体或致敏淋巴细胞，并能在体内外与抗体或致敏淋巴细胞发生特异性反应的物质。 一、颗粒性抗原的制备 细胞、细菌、寄生虫等皆为颗粒性抗原。 细胞抗原（如绵羊红细胞）一般情况下经生理盐水或其他溶液洗净，配制一定浓度即可。 细菌抗原多用液体或固体培养物，经集菌后处理。 颗粒性抗原大多用静脉内注射免疫法。 二、可溶性抗原的制备和纯化 （一）组织和可溶性抗原的粗提 蛋白质、糖蛋白、脂蛋白、酶、补体、细菌毒素、免疫球蛋白片段、核酸等皆为良好的可溶性抗原。 1.组织匀浆的制备通常需要先将来源于人和动物的组织和细胞破碎，再经一定的方法纯化，才能获得所需的抗原。细胞破碎方法有： （1）高速组织捣碎机法； （2）研磨法：组织匀浆液要离心沉淀，沉淀物为组织和细胞碎片，上清液为提取可溶性抗原的材料。 2.细胞的破碎除上述机械捣碎获取外，尚有酶处理法，常用胃蛋白酶或胰酶，可获得游离的单个细胞。 细胞抗原分膜蛋白抗原、细胞质抗原（主要为细胞器）、细胞核与核膜抗原，制备这些抗原前均需将细胞破碎，方法有： （1）反复冻融法：-20℃冷冻，30～37℃融化 （2）超声破碎法 （3）自溶法 （4）酶处理法：胃蛋白酶或胰酶 （5）表面活性剂处理法：十二烷基硫酸钠 3.免疫球蛋白片段的制备五种免疫球蛋白都具抗原性，皆可提取及纯化，但如分解成片段（如Fab 片段、Fc片段、轻链片段等）作为免疫原可制备出分辨力更高的特异性抗血清。制备方法有：（1）非共价键解离法：改变pH环境或用变性剂 （2）共价键解离法 （3）溴化氰裂解法 （4）酶解法：木瓜蛋白酶、胃蛋白酶或胰蛋白酶.木瓜酶可将IgG裂解成2个Fab片段及1个Fc片段；
小鹅瘟特效药-饮水小鹅瘟卵黄抗体-鹅毒消 产品特点： 1、采用国际先进的抗体包被技术，解决了抗体口服易破坏与难吸收的难题，是国内首家推出的可口服的小鹅瘟、鹅副粘病毒两联卵黄抗体。 2、口服给药，有效控制传统注射治疗带来的应激反应与交叉感染；大大减低治疗成本与提高治疗率。 3、抗体效价含量高（小鹅瘟抗体1：32个效价、鹅副粘病毒抗体1：32个效价），能达到一次治愈的效果。 【兽药名称】商品名：鹅毒消 通用名：清解合剂 【主要成分】石膏、金银花、玄参、黄芩、生地黄、卵磷脂包被免疫球蛋白 【性状】本品为红棕色液体；味甜、微苦。 【药理作用】本品中的免疫球蛋白采用卵磷脂包被技术，从而彻底解决免疫球蛋白口服易破坏与难吸收的问 题，避免免疫球蛋白被胃液破坏，而直接被肠道组织吸收。特异性免疫球蛋白（IGg）可迅速中 和并清除血液中的特定病毒，使各组织器官内的病毒凋亡，阻碍病毒在机体细胞内的复制，协助 机体排除病毒，继而从根本上使机体摆脱病毒侵害，恢复正常功能。 【功能主治】本品主要针对小鹅瘟、鹅副粘两种病毒性疾病有特效。其临床表现为：病鹅普遍出现下痢、口吐 粘液、采食量减少或废绝，但饮水量增加，有时出现扭颈、转圈、仰头等神经症状，精神不振， 眼角有分泌物，眼脸周围湿润，蹲地，单脚时时提起，体重迅速减轻，行动无力。剖检可见肠道 的血管怒张，十二指肠的粘液增多，粘液呈橘黄色，胆囊明显膨大增粗，肠壁变薄，里面有容易 剥离的凝固性栓子；肝脏肿胀，呈棕黄色，胆囊明显肿大，充满蓝绿色胆汁；胰腺颜色变暗，个 别的胰腺出现小白点；心肌颜色变淡，肾脏肿胀，法氏囊质地坚硬；内部有纤维性渗出物；有神 经症状的可见脑膜下血管充血。 【用法用量】混饮：鹅、鸭：按本品每瓶用于治疗250kg体重（或按成禽500羽、雏禽1000羽）的用量计算，预 防量减半。 【注意事项】1、集中饮水，2小时之内饮完。投药前酌情控水2-3小时；重症隔天可酌情重复使用一次。 2、久置会出现分层现象，摇匀后使用，不影响疗效。 3、有继发感染时可配合相应抗生素与抗病毒药物同时使用。忌与酸性药物混
小鹅瘟病毒 基本介绍 鹅细小病毒（Goose Parvoviruse,GPV）是小鹅瘟（Gosling Plague,GP）的病原，1956年我国学者方定一于扬州首次发现并分离到GPV。GPV属于细小病毒科细小病毒属成员，GPV可引起雏鹅急性或亚急性的败血性传染病。 1、形态 病毒颗粒直径20～25nm。 2、理化特征 病毒浓缩：在0.5 M N a C I 的条件下,6 % P E G 能将绝大部份病毒沉降下来。氯仿处理与P E G 沉淀相结合,可使96.4 % 的杂质蛋白被排除。 层析纯化：病毒经P E G 沉淀和蔗糖密度梯度离心后,再经CsC I平衡密度涕度离心,出现两条沉淀带,主带位于1.3 1 ~ 1.3 5g/ml。电镜观察发现大量病毒粒子,有空心和实心两种,大小为 2 0 ~2 2 n m。另一区带极小,密度1.4 2 g / m l左右,但在电镜下未发现病毒粒子。 抵抗力：不能凝集禽类、哺乳动物和人类的红细胞，病毒对外界因素的抵抗力很强，能抵抗乙醚、氯仿、胰蛋白酶、pH3和56℃3h 作用处理。
方定一等先后用SYG61-3和SDG65-1毒株鹅胚绒尿液进行试验，结果经氯仿、乙醚、胰酶、pH3处理的绒尿液试验组接种鹅胚，和未经处理的绒尿液对照接种鹅胚无差异。证明鹅胚绒尿液中的小鹅瘟病毒能抵抗氯仿、乙醚、胰酶、pH3的作用。 结果经56℃作用3小时，仍然使鹅胚致死，但死亡时间较原来病毒延长至96-120小时；置-7℃冰箱内10个月也使鹅胚致死，但死亡时间延长至96-112小时。在0℃下用真空抽气干燥的病毒和-7℃真空中贮存10个月的病毒，对鹅胚致死的时间并无差异；置-20℃冰箱2年仍能使鹅胚致死。 3、抗原性 抗原分析表明，国内外所有GPV分离株属于同一个血清型，目前研究表明GPV 只有一个血清型。 4、培养特性 GPV可在鹅胚、鸭胚上适应和培养。 （1）鹅胚：小鹅瘟病毒存在于病鹅的内脏组织、肠管、脑及血液中。用上述病理材料接种于鹅胚（12-13日龄）均能分离到病毒。鹅胚在接种之后3-7天内死亡。在鹅胚连续通过多代以后，对胚体致死的时间可以稳定在3天左右。我们发现鹅胚和雏鹅对病毒的易感性有很大差异，免疫母鹅所产卵的胚和雏鹅对病毒有抵抗力。 （2）细胞培养：先后用5个鹅胚传代毒株感染鹅胚成纤维细胞、鹅胚肝细胞、鹅胚肾细胞、鸭胚成纤维细胞、鸭胚肝细胞、鸡胚成纤维
临床医学检验技术（士）-免疫原和抗血清制备 1、根据抗原分子大小进行纯化分离的方法为 A.盐析沉淀法 B.有机溶剂沉淀法 C.凝胶过滤 D.离子交换层析 E.亲和层析 2、根据抗原分子所带电荷不同进行纯化分离的方法为 A.盐析沉淀法 B.有机溶剂沉淀法 C.凝胶过滤 D.离子交换层析 E.亲和层析 3、制备鞭毛抗原选择 A.100℃加温2～2.5小时 B.用0.3%～0.5%甲醛处理 C.56℃加热30分钟 D.-20℃反复冻融 E.灭菌后加入0.5%～1.0%氯化钙溶液
4、去除菌体鞭毛抗原选择 A.100℃加温2～2.5小时 B.用0.3%～0.5%甲醛处理 C.56℃加热30分钟 D.-20℃反复冻融 E.灭菌后加入0.5%～1.0%氯化钙溶液 5、制备毒素抗原选择 A.100℃加温2～2.5小时 B.用0.3%～0.5%甲醛处理 C.56℃加热30分钟 D.-20℃反复冻融 E.灭菌后加入0.5%～1.0%氯化钙溶液 6、制备可溶性抗原选择 A.100℃加温2～2.5小时 B.用0.3%～0.5%甲醛处理 C.56℃加热30分钟 D.-20℃反复冻融 E.灭菌后加入0.5%～1.0%氯化钙溶液
7、可将IgG裂解成一个Fc和两个Fab片段的酶是 A.木瓜蛋白酶 B.胃蛋白酶 C.胰蛋白酶 D.限制性核酸内切酶 E.β-内酰胺酶 8、可将IgG裂解成F(ab”)2和数个小片段的酶是 A.木瓜蛋白酶 B.胃蛋白酶 C.胰蛋白酶 D.限制性核酸内切酶 E.β-内酰胺酶 9、可将IgG裂解成不规则肽链的酶是 A.木瓜蛋白酶 B.胃蛋白酶 C.胰蛋白酶 D.限制性核酸内切酶 E.β-内酰胺酶 10、免疫小鼠的采血方法常为
免疫原和抗血清制备 题库9-0-8
问题： [单选]关于免疫程序的说法正确的是（） A.在一定剂量范围内，免疫原剂量越大，产生的抗体效价越高 B.初次免疫一般选择皮下接种 C.加强免疫一般选择皮内接种 D.首次免疫后应该很快进行第2次抗原注入 E.第1次与第2次免疫间隔时间以7～10天为好 初次免疫一般选择皮内接种，加强免疫一般选择静脉接种，首次免疫后因机体正处于识别抗原和进行B细胞活化增殖阶段，如果很快进行第2次注入抗原，极易造成免疫抑制。第1次与第2次免疫间隔时间以10～20天为好，第3次及以后的间隔一般为7～10天。
问题： [单选]抗血清的鉴定包括（） A.抗体特异性鉴定 B.抗体效价的鉴定 C.抗体纯度的鉴定 D.抗体亲和力的鉴定 E.以上均是 抗血清的鉴定包括抗体特异性鉴定、抗体效价的鉴定、抗体纯度的鉴定、抗体亲和力的鉴定四个方面。
问题： [单选]免疫动物常用的完全福氏佐剂是（） A.石蜡油，羊毛脂，卡介苗 B.石蜡油，羊毛脂 C.石蜡油，羊毛脂，抗原 D.羊毛脂，卡介苗，抗原 E.石蜡油，卡介苗 最常用于免疫动物的佐剂是福氏佐剂，分为福氏完全佐剂和福氏不完全佐剂两种。福氏完全佐剂可提高佐剂的性能，是在不完全福氏佐剂（石蜡油+羊毛脂）的基础上加入卡介苗而制成。 https://www.doczj.com/doc/a716055630.html,/ 电脑游戏排行榜
问题： [单选]制备可溶性抗原选择（） A.100℃加温2～2.5小时 B.用0.3%～0.5%甲醛处理 C.56℃加热30分钟 D.-20℃反复冻融 E.灭菌后加入0.5%～1.0%氯化钙溶液
抗体的制备方法与原理 一、抗血清的制备 有了质量好的抗原，还必须选择适当的免疫途径，才能产生质量好（特异性强和效价高）的抗体。 （一）用于免疫的动物 作免疫用的动物有哺乳类和禽类，主要为羊、马、家兔、猴、猪、豚鼠、鸡等，实验室常用者为家兔、山羊和豚鼠等。动物种类的选择主要根据抗原的生物学特性和所要获得抗血清数量，如一般制备抗r-免疫球蛋白抗血清，多用家兔和山羊，因动物反应良好，而且能够提供足够数量的血清，用于免疫的动物应适龄，健壮，无感染性疾患，最好为///雄性，此外还需十分注意动物的饲养，以消除动物的个体差异以及在免疫过程中死亡的影响。若用兔，最好用纯种新西兰兔，一组三只，兔的体重以2～3kg为宜。 （二）免疫途径 免疫途径有多种多样，如静脉内、腹腔内、肌肉内、皮内、皮下、淋巴结内注射等，一般常用皮下或背部多点皮内注射，每点注射0.1ml左右。途径的选择决定于抗原的生物学特性和理化特性，如激素、酶、毒素等生物学活性抗原，一般不宜采用静脉注射。 （三）佐剂 由于不同个体对同一抗原的反应性不同，而且不同抗原产生免疫反应的能力也有强有弱，因此常常在注射抗原的同时，加入能增强抗原的抗原性物质，以刺激机体产生较强的免疫反应，这种物质称为免疫佐剂。 佐剂除了延长抗原在体内的存留时间，增加抗原刺激作用外，更主要的是，它能刺激网状内皮系统，使参与免疫反应的免疫活性细胞增多，促进T细胞与B细胞的相互作用，从而增强机体对抗原的细胞免疫和抗体的产生。 常用的佐剂是福氏佐剂（Freund adjuvant）,其成分通常是羊毛脂1份、石腊油5份，羊毛脂与石腊油的比例，视需要可调整为1：2～9（V/V），这是不完全福氏佐剂，在每毫升不完全佐剂加入1～20mg 卡介苗就成为完全佐剂。 配制方法：按比例将羊毛脂与石蜡油置容器内，用超声波使之混匀，高压灭菌，置4℃下保存备用。免疫前取等容积完全或不完全佐剂与免疫原溶液混合，用振荡器混匀成乳状，也可以在免疫前取需要量佐剂置乳钵中研磨，均匀后再边磨边滴加入等容积抗原液（其中加卡介苗3～4mg/ml或不加），加完后再继续研磨成乳剂，滴于冰水上5～10min内完全不扩散为止。为避免损失抗原，亦可用一注射器装抗原液，另
小鹅瘟和雏鹅新型病毒性肠炎的防冶方法 小鹅瘟和雏鹅新型病毒性肠炎是雏鹅的多发病，严重影响雏鹅的育成率，降低饲养效益甚至造成全群死亡。因此，必须重视这两种疾病的防治。 下面畜牧堂详细的介绍一下： 一、小鹅瘟病 1.主要症状 该病潜伏期4～5天，按病程长短和日龄大小可分最急性型、急性型、亚急性型三种。 ①最急性型小鹅瘟病多发于日龄较小的雏鹅，突然死亡无先期症状。 ②急型:多发于5~15日龄雏鹅，病程2~3天，雏鹅精神萎缩，不食，饮水不减，鼻孔出现浆液性分泌物，呼吸力、摇头，排出灰色、鹅黄色、绿色混有气泡的稀粪，啄端颜色变暗 ③亚急性型：多发于15日龄以上雏鹅，病程3～5天，病状较轻，少食、拉稀、精神萎顿，少数能康复，但生长发育不良。 2.防治措施 ①预防 （1）严禁从疫区引进种蛋、雏苗和种鹅；对入孵的种蛋严格消毒，孵化场应定期消毒。 （2）购进种鹅要隔离饲养20天以上，确认无小鹅瘟发生后再混群饲养。 （3）母鹅在开产前1个月全面进行小鹅瘟弱毒苗注射，每只用量为0.5毫升。 （4）对病死鹅要深埋或焚烧，对感染场地要彻底消毒。 ②治疗 （1）对已发病雏鹅群作紧急预防注射，每只0.5～1.0毫升小鹅瘟抗血清。 (2)发病雏鹅各注射2~3ml鹅瘟血清治疗，保护率为40~50%，重症病例第二次注射。 二、雏鹅新型病毒性肠炎 1.主要症状 ①最急性型：多发生在3～7日龄雏鹅，无前期症状，常昏睡哀弱倒地死亡，病程1天。
②急性型：雏鹅新型病毒性肠炎多发生于8～15日龄雏鹅，雏鹅精神不振，离群，昏睡不食，饮水不减，腹泻，排淡黄色、绿色、灰白色样的稀便，常混有气泡，恶臭味。病鹅呼吸力大，鼻腔排出少量液体分泌物，结束色暗，腿瘫无法站立、抽搐和死亡，3-5天。 ③慢性型：多发于15日龄雏鹅，精神萎顿、腹泻，常因营养不良而死亡。 2.防治措施 ①免疫接种：种鹅产蛋前注射雏鹅新型病毒性肠炎～小鹅瘟二联弱毒苗，作二次免疫，在5～6个月内可使后代雏鹅获得母源抗体保护，不发生雏鹅新型病毒性肠炎和小鹅瘟，是预防雏鹅新型病毒性肠炎的最有效方法。对于新孵化的1日龄鹅，采用新型病毒肠炎疫苗口服免疫，3天可产生部分免疫，5天可产生100%免疫保护。 ②高免血清防治：对已发病的雏鹅群，使用"雏鹅新型病毒性肠炎高免血清"或"雏鹅新型病毒性肠炎～小鹅瘟二联高免血清"皮下注射1.0～1.5毫升，治愈率可达60～100%。 想了解更多关于养殖管理的技术，请关注畜牧堂！“畜牧堂”APP，为我国广大养殖户提供“互联网+”畜牧养殖的整体解决方案，帮助农户勤劳致富，助力我国畜牧养殖事业的快速健康发展。
项目一免疫血清的制备与提纯 一、免疫血清的制备 (Preparation of antiserum) 【实验原理】 将适当的免疫原物质注入动物体内，经一段时间动物血清中可出现大量特异性抗体，这种含抗体的血清称为抗血清(或免疫血清)。它在血清学检测中有广泛应用。理想的抗血清的产生主要取决于抗原的纯度和免疫原性，以及动物的应签性。同时免疫接种时的免疫途径、抗原剂量、有无佐剂、注射次数及间隔时间等因素均可影响抗血清的质量。制备的抗血清可直接用于某些实验，也可从中提取特异性抗体或某一组分。 下面介绍几种常用的免疫血清制备方法，免疫动物均选用家兔，这是因为：(1)其产生的血清量足够实验应用并容易驯养；(2)为采血、注射用耳血管很容易找到；(3)用兔子作免疫接种的资料较多，可方便利用；(4)能产生高效价抗体，并且可用常用的沉淀反应、凝集反应或溶血、溶菌反应等试验方法进行鉴定。 【试剂和器材】 1．免疫动物2～3kg健康雄性家兔。 2．免疫原绵羊红细胞(SRBC)、OX19变形杆菌、人IgG(SPA菌体吸附)、正常人混合血清、牛血清白蛋白(BSA)、聚丙烯酰胺凝胶分离的蛋白质抗原。 3．佐剂完全和不完全福氏(Freund)佐剂。 4．其它试剂生理盐水、70%酒精等。 5．器材注射器及针头、棉球、三角烧瓶、玻璃珠、试管、吸管、柯氏瓶(扁瓶)、Luer-lock(双联)注射器、止血钳、手术剪、手术刀等，以上器材均应高压灭菌或消毒后使用；离心机、液体旋转混合器、温箱、水浴箱、冰箱等。 【步骤和方法】 (一)溶血素的制备 1．制备抗原取脱纤维羊血或用阿氏(Alsever)液保存的绵羊红细胞(采血方法见附录常用实验动物采血方法)，用生理盐水洗３次，每次加2～3倍生理盐水，离心2000r/min 10min，弃上清。最后一次按压积用生理盐水配成10%SRBC悬液，放４℃保存备用。 2．免疫动物家兔耳缘静脉注射10%SRBC悬液1ml，间隔3天，连续7次，末次免疫后2周，由耳静脉取血1ml(取血方法见附录常用实验动物采血方法)，分离血清，测定溶血素效价(见补体结合试验)，当效价≥1:2000则可放血收集血清，此法效价可达1:6000~1:10000。 3．分离血清颈动脉放血(见附录常用实验动物采血方法)，用无菌三角瓶收集血液，等血液凝固后立即轻轻剥离(这是获得大量血清的关键步骤)，放室温2~4h，离心2500r/min 10min，收集血清。放4℃过夜虽可获得更多血清，但通常更容易溶血。加入等量甘油，分装，置-20℃保存。 (二)细菌抗血清的制备 1．抗原制备将OX19变形杆菌接种柯氏瓶普通琼脂培养基，37℃培养18~24h，用无菌生理盐水将菌苔洗下，吸到有玻璃珠的无菌三角烧瓶中，加入甲醛使终浓度为0.5%，充分振荡使细菌均匀分散。置4℃24h(或3～5天)杀菌固定，通过无菌试验证实无活菌存在。应用时同麦氏(Mcfarland) 细菌标准比浊管比浊，将菌液用无菌生理盐水稀释到10亿/ml，置4℃备用。
第七章免疫与血清学基本技术 第一节免疫学基本知识 一、抗原 抗原是指能与T细胞及B细胞的受体结合，促使其增殖、分化，产生抗体或致敏淋巴细胞，并与之结合，进而发挥免疫效应的物质。 抗原一般具有两个重要特性： 一是免疫原性，即抗原刺激机体产生免疫应答，诱生抗体或致敏淋巴细胞的能力； 二是抗原性，即抗原与其诱生的抗体或致敏淋巴细胞有特异性结合的能力。 既有免疫源性又有抗原性的物质为完全抗原，而只有抗原性无免疫源性的物质称为半抗原。 决定Ag特异性的最小化学亚单位称为决定簇（又称表位）。 依其与胸腺关系又分胸腺依赖抗原（TD-Ag）和胸腺非依赖抗原（TI-Ag）。 绝大多数蛋白质抗原如病原微生物、血细胞、血清蛋白等均属于TD-Ag。 抗原的免疫源性是异物性，抗原的特异性是免疫应答中最重要的特点，也是免疫学诊断和免疫学防治的理论依据。 人类血型抗原有A和B抗原，它们刺激机体产生抗A和抗B抗体。 人类血型抗原是同种异型抗原（同一种属不同个体间的遗传标记不同）。 器官移植所产生的排异反应，也是因同种异型抗原所致。 佐剂在免疫中常常采用，它主要的机制是增强机体对Ag的免疫应答。 二、抗体 抗体是抗原刺激机体由B细胞产生的，本质是免疫球蛋白（Ig）。 Ig的基本结构是： 4条肽链（2条轻链-L链、2条重链-H链）由二硫键连接。 L链分为可变部位（V）和恒定部分（C），即VL+CL。 H链也分为可变部位（V）和恒定部分（C），即VH+CH，但CH部分又分为CH1、CH2、CH3。IgM 和IgE还有CH4部分。 CH1与CH2区之间为绞链区。 如果用木瓜酶水解后，将IgG水解2Fab和Fc。Fab是Ig与Ag结合部位，Fc是可结晶部分。 用胃蛋白酶水解IgG，可分为F(ab?)2和Fc部分，F(ab?)2是两个Fab连在一起的部分。 Ig的分类是依据H链的结构特点，主要依Fc部分（CH）。Ig分为五大类：IgG、IgM、IgA、IgE、IgD。Ig同种型是指H链所具有的的特性。 同一类Ig分型依据L链结构特点，可分为κ和λ型。Ig的Fc段部分可与某些细胞的Fc受体结合，如巨噬细胞等。 F(ab?)2部分是与Ag结合部，VH+VL是F(ab?)2中的高变区，直接与Ag能结合的部位。 人类5种Ig各具特色，IgM分子量最大，免疫应答早期产生的Ab只要为IgM。 IgG在血清中含量最高，而且是唯一能通过人类胎盘的Ig。 IgA经J链连接，可形成多聚IgA。 多聚IgA与分泌片结合后，能抵抗蛋白酶的水解作用。 有人称具备局部Ab。IgE可与肥大细胞膜上Fc受体结合。 三、抗原抗体反应 每一种抗原物质都能在具有免疫功能的机体中遇到与其相应的免疫细胞，结合在其表面受体上，激发产生相应的抗体，并且能够与这种抗体特异性地结合。 抗原与抗体的结合为非共价结合。 其分子空间结构的互补性，决定了结合部位原子间的接近程度，使各种弱作用键充分发挥作用，形成相对稳定的结合。
抗血清的制备 有了质量好的抗原，还必须选择适当的免疫途径，才能产生质量好（特异性强和效价高）的抗体。 用于免疫的动物 作免疫用的动物有哺乳类和禽类，主要为羊、马、家兔、猴、猪、豚鼠、鸡等，实验室常用者为家兔、山羊和豚鼠等。动物种类的选择主要根据抗原的生物学特性和所要获得抗血清数量，如一般制备抗r-免疫球蛋白抗血清，多用家兔和山羊，因动物反应良好，而且能够提供足够数量的血清，用于免疫的动物应适龄，健壮，无感染性疾患，最好为///雄性，此外还需十分注意动物的饲养，以消除动物的个体差异以及在免疫过程中死亡的影响。若用兔，最好用纯种新西兰兔，一组三只，兔的体重以2～3kg为宜。 免疫途径 免疫途径有多种多样，如静脉内、腹腔内、肌肉内、皮内、皮下、淋巴结内注射等，一般常用皮下或背部多点皮内注射，每点注射0.1ml左右。途径的选择决定于抗原的生物学特性和理化特性，如激素、酶、毒素等生物学活性抗原，一般不宜采用静脉注射。 佐剂 由于不同个体对同一抗原的反应性不同，而且不同抗原产生免疫反应的能力也有强有弱，因此常常在注射抗原的同时，加入能增强抗原的抗原性物质，以刺激机体产生较强的免疫反应，这种物质称为免疫佐剂。 佐剂除了延长抗原在体内的存留时间，增加抗原刺激作用外，更主要的是，它能刺激网状内皮系统，使参与免疫反应的免疫活性细胞增多，促进T细胞与B细胞的相互作用，从而增强机体对抗原的细胞免疫和抗体的产生。 常用的佐剂是福氏佐剂（Freund adjuvant）,其成分通常是羊毛脂1份、石腊油5份，羊毛脂与石腊油的比例，视需要可调整为1：2～9（V/V），这是不完全福氏佐剂，在每毫升不完全佐剂加入1～20mg卡介苗就成为完全佐剂。 配制方法：按比例将羊毛脂与石蜡油置容器内，用超声波使之混匀，高压灭菌，置4℃下保存备用。免疫前取等容积完全或不完全佐剂与免疫原溶液混合，用振荡器混匀成乳状，也可以在免疫前取需要量佐剂置乳钵中研磨，均匀后再边磨边滴加入等容积抗原液（其中加卡介苗3～4mg/ml或不加），加完后再继续研磨成乳剂，滴于冰水上5～10min内完全不扩散为止。为避免损失抗原，亦可用一注射器装抗原液，另一注射器装佐剂，二者以聚乙烯塑料管连接，然后二者来回反复抽吸，约数十分钟后即能完全乳化。检查合格后即以其中一注射器作注射用。 免疫方法
小鹅瘟的发病规律及防治技术 摘要介绍了小鹅瘟的临床症状、诊断要点及防治措施。 关键词小鹅瘟；诊断；防治 小鹅瘟（GP）又称鹅细小病毒感染（Goose Parvovirus Infection）、雏鹅病毒性肠炎（Gosling Viral Enteritis），由鹅细小病毒引起的一种烈性、败血性传染病，全国各养殖区均有发生。雏鹅群感染小鹅瘟后，传播迅速，死亡率高，新疫区往往高达100%，严重影响了我国养鹅业的发展。 1 发病规律 绝大多数发生于雏鹅，多为7~20日龄，发病率和死亡率均在90％以上。15日龄以上的雏鹅病情比较缓和，20日龄以上的雏鹅发病比较少见，有些可能自行康复。成年鹅和其他家禽无易感性。带毒鹅和病鹅的粪便及分泌物是主要的传染源，消化道和呼吸道是主要的传播途径。该病的流行具明显的季节性，在高度集中的孵化地区呈一定的周期性。 2 流行病学 小鹅瘟病毒对鹅有特异性致病作用，而对鸭、鸡、鸽、鹌鹑等禽类及哺乳动物则无致病性。在自然情况下，多发生于出壳后20日龄左右的雏鹅，传染快且病死率高，其中5~15日龄雏鸡为多发日龄，成年鹅感染后不发病，但可成为带毒者，将病毒通过种蛋传给下一代。患鹅日龄越小，死亡率越高，10日龄内死亡率可达100％，15日龄以上发病较为缓和，部分可自行康复。但据近年有关报道，发病日龄已延至30~60日龄，甚至有73日龄的报道。该病主要通过消化道传播，病鹅和带毒鹅为主要传染源。被病毒污染的饲料、饮水、垫草、工具等都是该病的传播途径，也可通过种蛋垂直传播。该病流行具有周期性，大流行后1~2年内不发病。 3 临床症状 该病潜伏期一般3~5 d。根据病程经过，可分为最急性、急性和亚急性3种。 3.1 最急性最急性小鹅瘟多发生于1周龄以内的雏鹅，发病突然，死亡和传播迅速，无前驱症状。易感雏鹅的发病率可达100%，病死率高达95%以上，患雏出现精神沉郁后数小时内即表现衰弱，倒地两腿划动并迅速死亡，或在昏睡中衰竭死亡。死亡雏鹅喙端、爪尖发绀。 3.2 急性急性型发病多见于5~15日龄小鹅，病程1~2 d，主要表现为拉白
免疫原和抗血清制备 题库1-1-8
问题： [单选,A2型题,A1A2型题]纯化抗原的鉴定方法一般不用（） A.凝集反应 B.SDS-Page电泳 C.酚试剂法 D.免疫电泳法 E.免疫扩散法 纯化抗原的鉴定方法包括SDS-Page电泳、酚试剂法、免疫电泳法和免疫扩散法，但是通常纯化抗原是可溶性抗原，通常不用凝集反应进行鉴定。
问题： [单选,A2型题,A1A2型题]以下哪一个是对半抗原的正确描述（） A.只有和载体结合后才能和抗体分子结合 B.是大分子 C.是多肽 D.没有免疫原性 E.只能诱生体液免疫应答 半抗原是只有抗原性而无免疫原性的物质。其可与抗体或致敏淋巴细胞特异性结合，但不能单独诱发免疫应答，在体内单独存在时不引起抗体产生，当其与蛋白质或胶体颗粒结合后，则可引起抗体形成。半抗原可与其特异性抗体结合。如细菌的多糖和类脂质等。在半抗原与蛋白质结合物中，一般是蛋白质使结合物具有抗原性，而半抗原则决定结合物的抗原特异性。
问题： [单选,A2型题,A1A2型题]颗粒性抗原的免疫方法大多为（） A.皮内注射免疫法 B.肌内注射免疫法 C.口服免疫法 D.静脉内注射免疫法 E.表皮涂抹免疫法 各种细胞、细菌、寄生虫等皆为颗粒性抗原。细胞抗原（如绵羊红细胞）一般情况下经生理盐水或其他溶液洗净，配制一定浓度即可。细菌抗原多用液体或固体培养物，经集菌后处理。颗粒性抗原大多用静脉内注射免疫法，较少加佐剂做皮内注射。 (英雄联盟段位 https://www.doczj.com/doc/a716055630.html,/)
问题： [单选,A2型题,A1A2型题]粗提抗血清最简便的方法是（） A.超速离心 B.硫酸铵盐析法 C.亲和层析 D.离子交换层析 E.超声破碎法 粗提抗血清最简便的方法是硫酸铵盐析法。
鹅的常见病与防治 一、小鹅瘟 小鹅瘟是由小鹅瘟病毒引起的雏鹅的急性败血性的传染病。特征症状是严重下痢，典型病变为小肠粘膜渗出性炎症，大处理坏死和凝固物形成腊肠样栓状物都塞肠管。 本病主要侵害3—25日龄雏鹅，日龄越小损失越大，3—15日龄为高发日龄，发病率和死亡率随时日龄增大而降低；15日龄以上的雏鹅，症状较缓和，部分可自愈；25日龄以上的很少发病；成年鹅感染后不显症状，成为带毒者。 主要传染源是病雏鹅和带毒成年鹅，病鹅的排泄物污染饲料、饮水、用具及场地，健康鹅饮食经消化道传染，带毒的种蛋用于孵化更易传染。 l.症状：7日龄以内的雏鹅感染后常为最急性，病程仅此天左右，大多不显症状突然死亡；15日龄以内为急型，病症为吃食减少、精神沉郁、缩颈、离群呆立、不愿活动、羽毛松乱，继而不吃，严重下痢，排出黄白色或黄绿色混有气泡的水样粪，鼻分泌液增多，喙、蹼呈青紫色，死前全身由于抽搐或摊痪，有神精症状，病症程1—2天；15日龄以上雏鹅多为恶急性，主要症状多是精神萎顿，不愿活动，少食或不食，下痢、消瘦。 2.病变：最急性的特征病变是十二指肠粘膜充血，呈弥漫红色，小肠中、下段特别是回盲部极度膨大，像香肠一样的坚实，切开肠管可见腊肠样状的栓子，凝固物堵塞肠腔。亚急性型病例的主要病变除肠管栓子外，肝脏肿大呈深紫色，胆囊膨大，脾脏充血。 3.预防：本病目前尚无有效物治疗，及时用小鹅瘟血清治疗，治愈率可达50%左右。采取预防措施能有效控制本病的发生和流行，应加强对种鹅和雏鹅的预防接种工作。 种鹅的免疫程序 由于小鹅瘟发病率和死亡率的高低与种鹅的免疫直接相关，因此应特别重视和加强种鹅的免疫接种工作。种鹅应于开产前1个月进行首免，用灭菌生理盐水将疫苗做20倍稀释，每只鹅皮下或肌肉注射1.0亳升。如有条件应定期对种鹅群进行免疫监测，以便及时了解掌握其抗体水平的消长状况。 雏鹅的免疫程序 对来源于免疫监测达标种鹅群的种卵，其孵出的雏鹅应于出壳后7—10天接种小鹅
小鹅瘟病毒 小鹅瘟(又称鹅细小病毒感染)是由鹅细小病毒引起雏鹅的 一种高度接触性、急性败血性传染病。本病主要侵害4～20日 龄的雏鹅，以严重下痢和渗出性肠炎为特征。 1 病原学 鹅细小病毒为细小病毒科细小病毒属成员。 病毒存在于病雏内脏组织、肠管、脑及血液中。病毒对外 界环境因素具有很强的抵抗力，在一15～一20℃下能存活4年，56℃3小时不会被完全灭活，但病毒对2％～5％氢氧化钠、10%～20%的石灰乳敏感。 2 流行病学 传染源为病雏鹅及带毒鹅。主要经消化道感染，也可垂直 传播。 白鹅、灰鹅、狮头鹅以及其他品系的雏鹅易感。番鸭也易感，其他禽类及哺乳类动物不易感。 本病一年四季均可发生，但主要发生于育雏期间。雏鹅发 病率和死亡率与日龄、母源抗体水平有关。 3 临床症状 自然感染潜伏期为3～5天。 临床上可分最急性型、急性型、亚急性型三型。
最急性型：多见于流行初期和1周龄内雏鹅，发病突然， 快速死亡。 急性型：多发生于l～2周龄雏鹅，或由最急性转化而来。具典型的消化系统紊乱和神经症状特征。主要表现为离群、嗜睡，两肢麻痹或抽搐；下痢，排灰白色或淡黄绿色、浑浊稀便；眼和鼻有多量分泌物，病鹅不时甩头，食道膨大有多量气体和 液体。病程1～2天，多取死亡转归。 亚急性型：多见于2周龄以上雏鹅或流行后期发病的雏鹅，病程3～7天，部分能自愈。 【天健鹅瘟清用法用量】肌肉注射；未经免疫的雏鹅可用 小鹅瘟高免血清进行预防和治疗。预防时，每只雏鹅皮下注射 血清0.5毫升；治疗时，15日龄以下每只注射1毫升，15日龄以上每只注射2毫升，一针治愈。 4 病理变化 特征病变在消化道，尤其是小肠急性浆液性一纤维素性炎症。剖检可见肠黏膜发炎、坏死，呈片状或带状脱落，与大量 纤维素性渗出物凝固，形成栓子，质地坚实似香肠样。最急性 型仅见小肠黏膜肿胀充血，上覆有大量淡黄色黏液。亚急性病 例还可见肝、脾、胰肿大充血。 5 诊断 5.1 根据临床症状和病理变化可做出初步诊断，确诊需进一 步做实验室诊断。 5.2 实验室诊断
---------------------------------------------------------------最新资料推荐------------------------------------------------------ 常见鹅病防治技术 2010-08-16 14:31:04 来源： 阳光畜牧网浏览： 489 次（一）小鹅瘟小鹅瘟又名德斯氏病，是雏鹅的一种高度接触性传染病，主要侵害出壳后 4-30 日龄，传播快，死亡率高，据方定一教授首次报导， 1956 年发生于江苏杨州市郊，大批流行，随后在广西广东、浙江、安徽等省发生，普及全国各养鹅地区，世界有几个国家对该病作了报导，但他们将该病误认为鹅流感，方定一在 1961 年分离到病毒，测得其直径为 20-25 纳米，称做小鹅瘟病毒，匈牙利地尔斯在 1971 年建议将其称做为鹅细小病毒。 [病原]小鹅瘟的病原体是鹅细小病毒(细小病毒科、细小病毒属)完整的病毒颗粒呈六角形，没遂膜，有 32 个壳粒，直径为2022 纳米，病毒的基因为单股线状 DNA，鹅细小病毒对理化因素抵抗力很强，可耐受56℃30 分钟加热处理，鹅细小病毒在不同条件下可抵抗多种化学物质的处理，在-20℃冰冻下至少能存活 2 年。 鹅细小病毒存在于病雏的各内脏组织、肠、脑及血液中，经免疫荧光直接染色证明，各脏器的检出率依次为肾、胰、肝脾、心肺、脑，以肾、胰、肝检出机会最多，也就是肾、胰、肝含病毒最多。 初次分离将病毒接种于 12-14 日龄鹅胚，鹅胚经 5-7天死亡。 1 / 18
[流行病学]本病在自然传染的情况下只感染雏鹅，鸭和鸡不感染。 最早发病的雏鹅为 3-5 日龄， 7-10 日龄发病率和死亡率最高，以后又逐渐下降，死亡率一般为 70-95％，最高达 100％， 20 日龄的鹅发病率较低，一月以上的鹅极少发病，年龄越小，死亡率越高，年龄越大，死亡率越低。 被感染的鹅经粪便排出大量病毒，污染饲料、水源、垫料和各种管理用具，经消化道引起本病迅速传播，该病的发生大部分由垂直传播引起，成年鹅发生亚临诊感染并成为鹅细小病毒的携带者，经所产的蛋可将病毒传播给孵化室的易感雏鹅。 [临床症状]本病分为最急性、急性、亚急性三种。 1、最急性： 出壳 3-5 天发病，发现即衰竭、倒地划动直至死亡。 2、急性： 6-15 天发病，精神萎顿，虽能采食，但将啄得之草随即甩去，有的拒食，行动落后，瞌睡，口渴，排灰白色、淡黄绿色米汤样稀粪，并混有气泡，肛门突出，周围被毛潮湿并粘有污物，呼吸困难，鼻孔流出浆液性渗出物，啄端色泽变暗，蹼呈暗灰色，病程 1-2 天，临死前可出现两腿麻痹或抽搐， 15 日龄以上的雏鹅病程一般为 2-5 天。 3、亚急性： 萎顿，消瘦拉稀便秘，少数幸存者则生长不良。
免疫血清学实验室设置标准 免疫血清学实验室，应按照《临床实验室管理办法》基本要求设置，并符合《病原微生物实验室生物安全管理条例》、《临床实验室生物安全通用要求》。鉴于基层医疗机构检测条件的局限性，原则上不建议一级医院设置免疫血清学实验室，若条件达到《临床实验室管理办法》的基本要求，具备相应的检测能力和质量保证，可在上级卫生主管部门医学检验质量控制中心督导下开展相应的工作（梅毒血清学检查、HIV血清学检查以及病原体核酸检查实验室另有相关标准）。 一、设置基本要求。按照《临床实验室管理办法》第十条医疗机构应当保证临床实验室具备与其临床检验工作相适应的专业技术人员、场所、设施、设备等条件。 1、人员：《临床实验室管理办法》第十二条医疗机构临床实验室专业技术人员应当具有相应的专业学历，并取得相应专业技术职务任职资格。（免疫血清学实验室工作人员一般除上述要求外应当具有至少两年以上相关专业工作经验，这个要求虽没有明确的规定，但在设有免疫血清学实验室的单位都是这样执行的。） 2、场所：《临床实验室管理办法》第三十七条医疗机构临床实验室的建筑设计应当符合有关标准，并与其生物安全防护级别相适应。（1）通风；（2）非手触式的洗手洗眼装置；（3）合理的分区等。 3、设备：《临床实验室管理办法》第三十八条医疗机构临床实
验室应当按照生物防护级别配备必要的安全设备和个人防护用品，保证实验室工作人员能够正确使用。（1）酶标仪；（2）洗板机；（3）生物安全柜；（4）护眼镜等其他相关设备。 二、质量保证。按照《临床实验室管理办法》第十一条医疗机构临床实验室应当建立健全并严格执行各项规章制度，严格遵守 相关技术规范和标准，保证临床检验质量。第二十七条医疗机 构临床实验室定量测定项目的室内质量控制标准按照《临床实验 室定量测定室内质量控制指南》（GB/20032302-T-361）执行。 第二十八条医疗机构临床实验室应当参加经卫生部认定的室间 质量评价机构组织的临床检验室间质量评价。第三十条医疗机 构临床实验室应当将尚未开展室间质量评价的临床检验项目与其 他临床实验室的同类项目进行比对，或者用其他方法验证其结果 的可靠性。临床检验项目比对有困难时，医疗机构临床实验室应 当对方法学进行评价，包括准确性、精密度、特异性、线性范围、稳定性、抗干扰性、参考范围等，并有质量保证措施。 特别说明的是，目前我县有些乡镇医院免疫血清学实验应用 金标卡式快速诊断方法，该方法尽管对实验室要求条件无依据， 很明确的一点就是检测敏感性要低于常规ELISA法，因此，单纯应用金标卡式快速诊断方法易造成漏诊误诊，在二级以上医院实 验室一般用其验证阳性结果，不单独用于临床实验室诊断。 三、符合院感要求。按照《临床实验室管理办法》第四十二条医疗机构临床实验室应当按照《医疗废物管理条例》和《医疗卫生
免疫原和抗血清制备 题库3-0-8
问题： [单选,A2型题,A1A2型题]适用于诊断试剂的抗血清来源，其代表性的动物是（） A.豚鼠 B.马 C.狗 D.家兔 E.小鼠 抗血清分为R型和H型，R型抗血清是用家兔及其他动物免疫产生的抗体，抗原抗体反应比例合适范围较宽，适用于诊断试剂；H型抗血清是用马等大型动物免疫产生的抗体，抗原抗体反应比例合适范围较窄，一般作为免疫治疗。
问题： [单选,A2型题,A1A2型题]血清蛋白按分子大小进行凝胶过滤，下列结果正确的是（） A.第1组包括IgM和血清黏蛋白 B.第2组主要是IgG C.白蛋白主要存在于第2组 D.第3组包括脂蛋白和转铁蛋白 E.免疫球蛋白存在于同一组 血清蛋白的分级分离常用凝胶过滤法，按分子大小可分为3组：第1组包括IgM和一些脂蛋白；第2组主要是IgG和较少量的IgA、IgD、IgE等；第3组主要是白蛋白、血清黏蛋白、转铁蛋白等。
问题： [单选,A2型题,A1A2型题]细菌的菌体抗原常规的制备方法（） A.75%乙醇处理 B.100℃加温2h处理 C.0.85%氯化钠处理 D.1%氯化钙处理 E.2%氯仿处理 出处：安徽11选5 https://https://www.doczj.com/doc/a716055630.html,;
问题： [单选,A2型题,A1A2型题]影响抗原抗体反应的因素有（） A.温度 B.电解质 C.pH D.适当振摇 E.以上全是
问题： [单选,A2型题,A1A2型题]蛋白质抗原首次免疫接种后，最好间隔多长时间进进行第二次免疫（） A.7～10d B.10～20d C.20～30d D.30～60d E.3个月