基础生物化学实验论文
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常见蔬菜营养成分对比分析及营养价值——以大青椒、小青椒的还原糖、维生素c含量的分析为例
【摘要】糖类是构成植物体的重要组成成分，是新陈代谢的主要原料和贮存物质。维生素c则是人类营养中最重要的维生素之一。不同的蔬菜中糖和维生素c的含量不同，对人的营养价值也有差别。因此可通过对常见蔬菜可溶性糖和维生素c 的测定，了解和鉴定其品质的优劣，并进一步熟悉其营养价值。本论文以马铃薯和小青椒为例，分别运用3,5-二硝基水杨酸比色法和2,6-二氯酚靛酚滴定法测定其中还原糖和维生素c的含量。
【关键词】蛋白质维生素c 3,5-二硝基水杨酸 2,6-二氯酚靛酚营养价值0前言：
维生素C（Vitamin C ，Ascorbic Acid）又叫L-抗坏血酸，是一种水溶性维生素。食物中的维生素C被人体小肠上段吸收。一旦吸收，就分布到体内所有的水溶性结构中，正常成人体内的维生素C代谢活性池中约有1500mg维生素C，最高储存峰值为3000mg维生素C。正常情况下，维生素C绝大部分在体内经代谢分解成草酸或与硫酸结合生成抗坏血酸-2-硫酸由尿排出；另一部分可直接由尿排出体外。
还原糖（reducing sugar ）：羰基碳（异头碳）没有参与形成糖苷键能够还原斐林(H.von Fehling)试剂或托伦斯(B.Tollens)试剂(银氨溶液)的糖称为还原糖，所有的单糖，不论醛糖、酮糖都是还原糖。大部分双糖也是还原糖，蔗糖例外。斐林试剂是含Cu2+络合物的溶液，被还原后得到砖红色Cu2O的沉淀。托伦斯试剂被还原后（银镜反应）能生成单质银，在试管壁上可看到“银镜”。分子结构中含有还原性基团（如游离醛基`半缩醛羟基或游离羰基）的糖，叫还原糖。如葡萄糖、果糖、麦芽糖、乳糖。
链状果糖含有游离的羰基，环状果糖含半缩醛羟基，所以果糖也属于还原糖。1材料与方法：
1.1实验材料
蔬菜:大青椒，小青椒（市售）
1.2实验试剂及器材
2％的草酸溶液 3,5-二硝基水杨酸 6mol/L HCL和NaOH各100ml
天平组织捣碎机容量瓶刻度吸管锥形瓶碱式滴定管分光光度计大离心管恒温水浴锅沸水浴试管若干具塞玻璃刻度试管
1.3实验原理
3,5-二硝基水杨酸比色法：还原糖在碱性条件下加热被氧化成糖酸及其他产物，3,5-二硝基水杨酸则被还原为棕红色的3-氨基-5硝基水杨酸。在一定范围内，还原糖的量与棕红色物质颜色的深浅成正比关系，利用分光光度计，在540
纳米波长下测定光密度值，查对标准曲线并计算，便可求出样品中还原糖含量。
2,6-二氯酚靛酚滴定法：2,6-二氯酚靛酚是一种染料，在碱性条件下为蓝色，在酸性条件下为红色，抗坏血酸具有极强还原性，能使2,6-二氯酚靛酚还原褪色。
当用2,6-二氯酚靛酚滴定含有抗坏血酸的酸性溶液时，滴下的2,6-二氯酚靛酚被还原为无色，当溶液中的抗坏血酸全部被氧化成脱氢抗坏血酸时，滴入的2,6-二氯酚靛酚立即使溶液显红色。因此利用这种染料滴定时，溶液为淡红色即为终点，根据染料消耗量即可计算出样品中还原性抗坏血酸的含量。
1.4实验方法及步骤
1.4.1还原糖含量的测定
1.还原糖的提取准确称取样品0.5克，用少量蒸馏水研磨成匀浆，然后加入蒸馏水定容至50ml，混匀，置于50摄氏度恒温水浴中保温十分钟，使还原糖浸出。将浸出液转移到50ml离心管中，在4000r/min下离心10min，沉淀可用20ml蒸馏水洗一次，再离心，将两次离心得上清液搜集在100ml的容量瓶中，用蒸馏水定容至刻度，混匀，作为还原糖待测液。
2.显色和比色取4支20ml具塞刻度试管，编号，按下表所示假如待测液和显色剂。加热，定容和比色。
还原糖含量的测定
管号还原糖待测液
ml
总糖待测液
ml
蒸馏水
ml
DNS
ml
光密度
值
葡萄糖含
量
7 0.5 1.5 1.5
8 0.5 1.5 1.5
9 1 1 1.5
10 1 1 1.5
3.数据整合及处理
提取液总体积
查曲线所得葡萄糖毫克数×————————
测定取用体积
还原糖（％）=——————————————————————×100
样品毫克数
根据同样的方法对小青椒进行还原糖的含量测定
实验数据统计
样品种类
OD值
第一组第二组第三组平均值
大青椒0.446 0.423 0.545 0.472
小青椒0.411 0.402 0.533 0.452
查表得葡萄糖毫克：大青椒：0.77mg
小青椒：0.75mg
计算所得还原糖含量:大青椒：2.738％
小青椒：2.423％
1.4.2维生素c含量的测定
1.样品中VC的提取称取新鲜蔬菜5克，加少量2％的草酸溶液，用组织捣碎机打成匀浆，移入50ml容量瓶，用2％的草酸溶液定容至刻度，摇匀后静置备用。
1.2,6-二氯酚靛酚溶液的标定
2.样品的滴定准确吸取样品提取液（上清液或滤液）两份，每份20.0ml,分别放入两个100ml锥形瓶中，滴定并记录染料所用体积，记为V.
3.数据整合及处理
取两分样品染料所用平均值，代入计算
V×T×G×A
抗坏血酸含量（mg/100g样品）=———————×100
W×G1×A1
式中 V————滴定样品提取液所消耗燃料平均值，ml
T————每一毫升染料所能氧化抗坏血酸质量,mg
G————匀浆总质量，g
G1————制备提取液取用匀浆质量，g
A————样品提取液定容体积，ml
A1————滴定时吸取的样品提取液体积，ml
W————样品质量，g
根据同样的方法对小青椒进行维生素c的含量测定
实验数据统计
样品种
大青椒小青椒类
组别实验组对照度实验组对照度
第一次 2.06 0.06 2.24 0.08 第二次 1.45 0.06 1.53 0.08 第三次 1.89 0.06 2.07 0.08
代入计算得：
抗坏血酸含量：大青椒：158mg
小青椒：171.28mg
1.5实验数据分析比较
还原糖含量比较
维生素c含量比较
根据实验数据及比较，大青椒还原糖含量高于小青椒，VC含量低于小青椒。
实验注意事项：
1.维生素c含量测定的实验中，对滴定终点的判断会影响到实验数据的准确程度，此次试验中滴定终点的颜色为浅粉色，刚开始滴时，可以适当快些，但要注意充分摇匀，到最后是要逐滴滴加，并充分震荡。
2.实验前，所用仪器要清洗干净，消除上次实验残留物质的影响，保证实验数据的准确性。
3.在使用分光光度计时，要先用零号试管校准。
4.还原糖的测定中，会涉及到两次水浴，水浴时一方面要保证水浴的温度，另一方面，要保证水浴时间的充分。
2.营养分析
维生素C又名抗坏血酸，是人体不可缺少的重要维生素。它参与人体内氧化还原过程，分布于全身各组织，以肾上腺皮质、脑垂体等组织内含量最高，其次是肝、肾组织，脂肪组织内含量最少。它能够增强对感染的抵抗力，促进骨骼正常发育及伤口愈合，特别能刺激造血机能，对红细胞的成熟起一定的作用。如果缺乏维生素C时，会患坏血病，出现皮肤、牙龈等部位出血及鼻衄、便血等症状。
辣椒原产于南美洲，由印第安人首先栽培，清初始传入我国。虽然辣椒在我国仅300多年的历史，但是，经过各地的精心嫁接栽培，品种之多已居世界首位。诸如北京柿子椒、湖南灯笼椒、南方佛手椒、陕西与河北的羊角椒。小青椒富含维生素C。据测定，每500克小青椒含维生素C525毫克，比西红柿高9倍，比大白菜高3倍，比茄子高35倍，比白萝卜高2倍。它还富含蛋白质、脂肪、糖、矿物质等。
3.讨论
1.解热、镇痛：辣椒辛温，能够通过发汗而降低体温，并缓解肌肉疼痛，因此具有较强的解热镇痛作用
2.预防癌症：辣椒的有效成分辣椒素是一种抗氧化物质，它可阻止有关细胞的新陈代谢，从而终止细胞组织的癌变过程，降低癌症细胞的发生率
3.增加食欲、帮助消化：青椒、辣椒强烈的香辣味能刺激唾液和胃液的分泌，增加食欲，促进肠道蠕动，帮助消化
4.降脂减肥：辣椒所含的辣椒素，能够促进脂肪的新陈代谢，防止体内脂肪积存，有利于降脂减肥防病。
5.青椒含有抗氧化的维生素和微量元素，能增强人的体力，缓解因工作、生活压力造成的疲劳。
6.它含有丰富的维生素C、维生素K，可以防治坏血病，对牙龈出血、贫血、血管脆弱有辅助治疗作用。
4.参考文献
1.杨华史书侠，《化学与生物物理进展》2000，160~167
2.王海群，《中国科技期刊研究》2007年第二期，52~55
3.《基础生物化学实验（第二版）》北京：高等教育出版社
4.《中国蔬菜》2007年10期
5.任虹曹学丽《蔬菜营养分析》化学工业出版社
6.《蔬菜的营养与药用价值》
7.植物组织中可溶性糖的测定 https://www.doczj.com/doc/a914754069.html,