一、单项选择题：（40×1=40，每题1分，共40分）
1、蛋白质在哪一波长下有最大光吸收？
A．250nm B.60nm C.270nm D.280nm E.290nm
2、从分枝杆菌中分离的DNA 样品内含有15.1%的腺嘌呤，那么G+C的百分含量是多少？（均按摩尔碱基计算）
A．70% B 69.8% C. 69.6% D.69.4 E. 69.2%
3、蛋白质的含氮量是：
A．15% B.16% C.17% D.18% E.19%
4、尿素合成的限速酶是：
A．精氨酸代琥珀酸合成酶
B．精氨酸代琥珀酸裂解酶
C．精氨酸酶
D．鸟氨酸氨基甲酰转移酶
E．氨基甲酰磷酸合成酶Ⅰ
5、下列哪一结构不是蛋白质的二级结构？
A．α-螺旋 B.β-折叠 C. β-转角 D.无规卷曲 E.右手双螺旋结构
6、下列对结合胆红素的说法哪一种是错误的？
A.主要是双葡萄糖醛酸胆红素
B.随正常人尿液排出
C. 水溶性大
D. 与重氮试剂作用直接反应阳性
E.别名为直接胆红素
7、协助脂酰基进入线粒体的物质是：
A. 生物碱
B.肉碱
C. 胆碱
D.乙醇胺
E.嘧啶碱
8、核小体的核心颗粒包括几个组蛋白分子?
A. 2
B. 4
C. 6
D.8
E.10
9、合成脱氧胸苷酸的直接前体是：
A. dCMP
B.dTTP
C.dUMP
D. dCDP
E.dGDP
10、参与羟化酶组成的细胞色素是:
A. Cyta
B.Cyt b
C. CytP450
D.Cyt c
E.Cytaa3
11、人体活动主要的直接供能物质是:
A. 葡萄糖
B. 脂肪酸
C. 磷酸肌酸
D. ATP
E.氨基酸
12、下列哪种氨基酸是人体营养必需氨基酸？
A.甘氨酸
B. 亮氨酸
C. 谷氨酸
D. 天冬氨酸
E.半光氨酸
13、嘌呤核苷酸合成与嘧啶核苷酸合成共同需要的物质是：
A. 甘氨酸
B. N10-CHO-FH4
C. PRPP
D. 天冬酰胺
E.N5-CH3-FH4
14、三羧酸循环是在细胞的哪一部位进行的？
A. 胞液
B. 线粒体
C. 微粒体
D. 细胞核
E.溶酶体
15、转氨酶的辅酶是：
A. FMN
B. NAD+
C. 磷酸吡哆醛
D. TPP
E.FA D
16、体内硫酸根主要由何种氨基酸代谢生成？
A. 酪氨酸
B. 天冬氨酸
C. 半胱氨酸
D. 赖氨酸
E.甘氨酸
17、使血糖降低的激素有（）
A. 糖皮质激素
B. 前列腺素
C. 胰岛素
D. 肾上腺素
E.甲状腺素
18、VLDL能转运：
A. 外源性TG
B. 脂肪酸
C. 内源性TG
D. 甘油
E.胆红素
19、下列关于2,3－二磷酸甘油酸（2,3－BPG）的叙述哪一项是错误的？
A. 是红细胞中含量较高的物质
B. 主要功能是调节血红蛋白的带O2功能
C. 主要是氧化供能
D. 是由1,3－二磷酸甘油酸转变来的
E. 使Hb氧解离曲线右移
20、指出下列哪个氨基酸是生酮氨基酸？
A.异亮氨酸
B. 缬氨酸
C. 亮氨酸
D. 苏氨酸
E.谷氨酸
21、已知乳酸循环（Cori循环）有利于乳酸再利用，节约能源，它是在哪两个组织间的循环反应
A.肌肉与肾脏
B.肌肉与肝脏
C.肌肉与心脏
D.肌肉与脑
E.肌肉与肺脏
22、已知肌糖原分解不能提供血糖，是因为肌肉缺乏：
A.糖原磷酸化酶
B.磷酸葡萄糖变位酶
C.脱支酶
D.葡萄糖-6-磷酸酶
E. UDPG焦磷酸化酶
23、下列关于蛋白质的叙述，哪一项不正确？
A．蛋白质的糖基化或磷酸化可影响蛋白质的构象
B．β-片层的形成需要二硫键
C．加入硫酸铵可使溶液中蛋白质沉淀
D．有些蛋白质可以两种不同的构象存在
E．有紫外吸收特性
24、与呼吸链递氢、递电子体无关的物质是：
A．FMN B. 铁硫蛋白 C. 泛醌 D.细胞色素aa3 E. Cyt P450 25、SH2结构域能结合：
A．P-Ser B. P-Thr C. P-Tyr D. Gα E. Gβγ
26、脂肪酸β-氧化中不生成下列哪一种化合物？
A. FADH2
B. H2O
C. 乙酰辅酶A
D. NADH+H+
E.脂酰CoA
27、下述哪种化合物是肝脏内由乙酰辅酶A生成乙酰乙酸的直接前体？（）
A. 乙酰乙酰辅酶A
B. β-羟丁酰辅酶A
C. β-羟丁酸
D. HMG辅酶A
E. 乙酰辅酶A
28、下列有关酮体的叙述哪一项是错的？
A. 酮体是脂肪酸正常代谢产物
B. 酮体是在肝中生成的
C. 乙酰辅酶A是生成酮体的原料，糖也能转变为乙酰辅酶A，故糖也是生酮物质
D. 酮体是在肝外组织被代谢的
E．糖尿病是脂肪动用过多，酮体产生多而发生酸中毒
29、下列哪种激素不属于脂解激素？
A. 胰高血糖素
B. 肾上腺素
C. 胰岛素
D. 促肾上腺皮质激素
E. ACTH
30、在直流电场中，卵清蛋白向哪个方向泳动？（卵清蛋白pI=4.6, 缓冲溶液pH为5.0）
A. 向阴极
B. 固定不动
C. 向阳极
D.既可向阴极又可向阳极
E. 移动中途可转向
31、与糖酵解无关的酶是：
A．己糖激酶 B. 6-磷酸果糖激酶 C. 丙酮酸激酶
D.三磷酸甘油醛脱氢酶
E. 丙酮酸羧化酶
32、某些代谢物脱氢经NADH氧化呼吸链生成的ATP数应是：
A .1个ATP B. 1.5个ATP C. 2个ATP D. 2.5个ATP E. 3个ATP
33、下列哪一种物质不能转变为糖：
A．乳酸 B.丙酮酸 C.氨基酸 D. 甘油 E. 脂肪酸
34、请指出下列哪种脂肪酸是必需脂肪酸？
A. 软脂酸
B.硬脂酸
C. 豆蔻酸
D. 亚麻酸
E.蜡酸
35、已知蛋白质、脂肪、糖是体内的供能物质，它们通常需要转化成下列哪一物质而进入TAC？
A．丙酰辅酶A B. 乙酰辅酶A C. 丁酰辅酶A D. 乙酰乙酰辅酶A E. 琥珀酰辅酶A
36 、CM残粒可与何受体结合，被肝组织摄取利用?
A．apo B受体 B. apo E受体 C. LDL受体 D. IDL受体 E .HDL受体
37、下列哪一物质不是胆固醇的转化产物？
A．胆汁酸 B. 雌激素 C. 醛固酮 D. 前列腺素 E. 维生素D3
38、合成脂肪酸和胆固醇的共同原料是：
A．丙酰辅酶A B.乙酰乙酰辅酶A C. 丁酰辅酶A
D. 乙酰辅酶A
E. 琥珀酰辅酶A
39、Gα的活性形式是什么?
A．Gα B. Gα-ATP C.Gβγ D. Gα-GDP E. Gα-GTP
40、具有防止动脉硬化功用的脂蛋白是：
A．CM B. LDL C. VLDL D. IDL E. HDL
1.D
2.B
3.B
4.A
5.E
6.B
7.B
8.B
9.C 10.C 11.D 12.B 13.C 14.B 15.C 16.C 17.C 18.C 19.C 20.C 21.B 22.D 23.B 24.E 25.C 26.B 27.D 28.C 29.C 30.C 31.E 32.C 33.E 34.D 35.B 36.B 37.D 38.D 39.E 40.E
二、多项选择题：（10×1=10，每题1分，共10分）
1、关于泛素标记的蛋白质降解过程，下列哪些说法是正确的?
A．需要泛素活化酶
B．需要ATP供能
C．需要泛素结合酶
D．需要泛素蛋白质连接酶
E．需要蛋白酶复合体
2、呼吸链复合体主要包括有：
A．复合体I B.复合体II C. 复合体III D.复合体IV. E.复合体V
3、apo CⅡ的功用是：
A．稳定脂蛋白结构
B．激活LCAT
C．激活LPL
D．识别脂蛋白受体
E．具有促进胆固醇脂进入HDL核心的作用
4、哪些不是肌肉细胞中能量贮存的主要形式是?
A．ATP B. ADP C. AMP D. 磷酸肌酸 E. 肌红蛋白
5、酪氨酸可转变为下列哪些物质?
A．多巴胺 B.肾上腺素 C.去甲肾上腺素 D.甲状腺素 E.黑色素
6、参与甘油三酯水解的酶有：
A. LPL
B. LCAT
C. 激素敏感TG脂肪酶
D. HMGCOA还原酶
E. HMGCOA合成酶.
7、生物氧化具有下述那些特点？
A．是在37℃恒温条件下进行的
B．不遵循氧化还原反应的一般规律
C．生物氧化时逐步释放能量，并有部分以化学能的形式储存备用
D．几乎全部反应都是酶促反应
E．2H和C直接与O2化合成H2O和CO2
8、乙酰CoA羧化酶受抑制时，下列哪些代谢途径不会受到直接影响？
A．胆固醇的合成 B.脂肪酸的合成 C.酮体的合成
D．脂肪酸的β-氧化 E.磷脂的合成
9、由丝氨酸可合成：
A．胆固醇 B. 酮体 C. 四氢叶酸 D. 乙醇胺 E.胆碱
10、体内的葡萄糖可以用于：
A．生成必需氨基酸 B. 生成脂肪 C.氧化供能
D．合成糖原 E. 生成非必需氨基酸
1.ABCDE
2.ABCD
3.AC
4.ABCE
5.ABCDE
6.AC
7.ACD
8.ACDE
9.DE 10.BCDE
三、填空题：（6×1=6，每题1分，共6分）
1、按结构分类，胆汁酸可分为( 游离胆汁酸和结合胆汁酸)两大类。
2、PIP2水解可生成两种第二信使，它们是（ ) 。
3、Ras蛋白类似于G蛋白中的( )。
4、丙酮酸+ATP+ ( )→草酰乙酸 +ADP+Pi
5、SH3结构域可识别( ) 。
6、线粒体外的NADH是通过( )将其所携带的氢转运至线粒体内，进入呼吸链被氧化成H2O,并生成1.5ATP。
四、名词解释：（10×2=20，每题2分，共20分）
1、受体
2、同工酶
3、模体
4、一碳单位
5、P/O比值
6、Tm
7、DNA的变性
8、胆色素
9、酶的化学修饰
10、生物转化
五、简答题：（4×4=16，每题4分，共16分）
1、能直接生成游离氨的氨基酸脱氨基方式有哪些？
2、简述脂肪酸合成的原料乙酰CoA从线粒体跨膜转运至胞液转运机制。
3、写出UMP转变为dTMP的反应过程。
4、试说明磺胺类药物抗菌机理
六、论述题:(1×8=8，每题8分，共8分)
试述丙氨酸的糖异生过程。
三、填空题：（6×1=6，每题1分，共6分）
1.
2. IP3和DAG（DG）
3. Gα亚基
4. CO2
5. 富含脯氨酸模体
6.α-磷酸甘油穿梭
四、名词解释：
1.是细胞膜上或细胞内能识别外源化学信号并与之结合的成分，（1分）其化学本质是蛋白质，个别是糖脂。（1分）
2.是指催化的相同化学反应，(1分)但酶蛋白的分子结构、理化性质乃至免疫学性质不同的一组酶。（1分）
4 是具有特殊功能的超二级结构，它是由二个或三个具有二级结构的肽段，在空间上相互接近，形成一个特殊的空间构象。（1分）一个模体总有其特征性的氨基酸序列，并发挥特殊功能。（1分）
4. 是指某些氨基酸在分解代谢过程中产生的含有一个碳原子的基团，（1分）包括-CH3、-CH2-、-CH=、-CHO、-CH=NH等。（1分）
5. 是指氧化氧化磷酸化过程中，每消耗1/2摩尔O2（1分）所生成ATP的摩尔数。（1分）
6. DNA变性是在一个相当窄的温度范围内完成的（1分），这个温度范围内，紫外光吸收值达到最大值的50%时的温度（1分）
7.在某些理化因素（1分）会导致DNA双链互补碱基对之间的氢键发生断裂，使双链DNA解离为单链的现象。（1分）
8.是体内铁卟啉化合物主要分解代谢的产物（1分），包括胆红素、胆绿素、胆素原、胆素。(1分)
9.酶蛋白肽链上的一些基团在酶的催化下可与某种化学基团发生可逆的共价结合（1分），从而改变酶的活性，这一过程称为酶的化学修饰。（1分）
10.体内外存在着非营养物质(1分），机体在排出这些非营养物之前，需要对它们进行代谢转变，使其水溶性提高，极性增强，易于通过胆汁或尿液排出体外，这一过程称为生物转化。（1分）
五、简答题：（每题4分，共16分）
1 .①L-谷氨酸氧化脱氨基作用（有L-谷氨酸脱氢酶催化）。（1分）
②联合脱氨基作用（包括转氨基偶联氧化脱氨基作用，转氨基偶联嘌呤核苷酸循环脱氨基）（2分）
③非氧化脱氨基作用（1分）
2 脂肪酸合成是在胞液中进行的，合成的原料乙酰CoA是在线粒体内生成，而乙酰CoA不能直接通过线粒体膜进入胞质，它可以通过柠檬酸-丙酮酸穿梭系统完成该过程。在线粒体中，乙酰CoA与草酰乙酸合成柠檬酸，柠檬酸透过线粒体膜进入胞质后被柠檬酸裂解酶作用又生成乙酰CoA和草酰乙酸，乙酰CoA参与脂肪酸合成。（2分）草酰乙酸可生成苹果酸，继而再生成丙酮酸，同时生成NADPH,后者为脂肪酸合成提供氢。丙酮酸再进入线粒体，形成柠檬酸-丙酮酸循环。（2分）
3
UMP----→UDP---→dUDP--→dUMP---------→dTMP
ATP 还原 -Pi N5,N10-CH2-FH4
（分）（1分）（1分）（1分）
4 细菌在合成二氢叶酸时，需要对氨基苯甲酸作为原料，由二氢叶酸合成酶催化合成二氢叶酸（进而合成四氢叶酸参与核酸的合成过程）。（2分）磺胺类药物与对氨基苯甲酸结构相似与对氨基苯甲酸竞争二氢叶酸合成酶，竞争抑制二氢叶酸的合成，从而抑制细菌生长繁殖。（2分）
五.论述题：(每题8分，共8分)
2丙氨酸---->2丙酮酸---->（进入线粒体）-----〉2草酰乙酸---→2苹果酸-→(出线粒体)（4分）---->2草酰乙酸--→2磷酸烯醇式丙酮酸--→--→2×3-磷酸甘油醛---→F-1,62P--→G6P--→葡萄糖(2分)
G1P
UDPG
↓
糖原（2分）
《生物化学》思考题 蛋白质 一、名词： 氨基酸及蛋白质等电点；蛋白质一级、二级、三级及四级结构；电泳；蛋白质分子病；别构效应；蛋白质变性作用；肽与肽键；N-端与-端；AA殘基； 二、简答题 1、中性、酸性及碱性氨基酸有哪些？ 答：20种氨基酸中的精氨酸、赖氨酸和组氨酸为3种碱性氨基酸；酸性氨基酸为天冬氨酸和谷氨酸2种；其他15种为中性氨基酸。 2、稳定蛋白质空间结构的作用力有哪些？ 答：氢键、盐键、疏水作用、范德华引力等是稳定空间结构的作用力；一级结构中的化学键有肽键和二硫键。 3、蛋白质在非等电点时不易形成凝集沉淀的的原理； 答：一是水化层，蛋白质表面带有亲水基团，形成水化层，使蛋白质颗粒相互隔开，不易碰撞成大颗粒；二是蛋白质在非等电时带有同种电荷，使蛋白质之间相互排斥，保持一定距离，不致相互凝集沉淀 4、指出下面pH条件下，各蛋白质在电场中向哪个方向移动，即正极，负极，还是保持原点？（1）胃蛋白酶（pI 1.0），在pH 5.0；（2）血清清蛋白（pI 4.9），在pH 6.0；（3）α-脂蛋白（pI 5.8），在pH 5.0和pH 9.0； 答：（1）胃蛋白酶pI 1.0＜环境pH 5.0，带负电荷，向正极移动； （2）血清清蛋白pI 4.9＜环境pH 6.0，带负电荷，向正极移动； （3）α-脂蛋白pI 5.8＞环境pH 5.0，带正电荷，向负极移动； α-脂蛋白pI 5.8＜环境pH 9.0，带负电荷，向正极移动。 三、何谓蛋白质的变性与沉淀？二者在本质上有何区别？ 答：蛋白质变性的概念：天然蛋白质受物理或化学因素的影响后，使其失去原有的生物活性，并伴随着物理化学性质的改变，这种作用称为蛋白质的变性。 变性的本质：分子中各种次级键断裂，使其空间构象从紧密有序的状态变成松散无序的状态，一级结构不破坏。 蛋白质变性后的表现：①?生物学活性消失；②?理化性质改变：溶解度下降，黏度增加，紫外吸收增加，侧链反应增强，对酶的作用敏感，易被水解。 蛋白质由于带有电荷和水膜，因此在水溶液中形成稳定的胶体。如果在蛋白质溶液中加入适当的试剂，破坏了蛋白质的水膜或中和了蛋白质的电荷，则蛋白质胶体溶液就不稳定而出现沉淀现象。沉淀机理：破坏蛋白质的水化膜，中和表面的净电荷。 蛋白质的沉淀可以分为两类： （1）可逆的沉淀：蛋白质的结构未发生显著的变化，除去引起沉淀的因素，蛋白质仍能溶于原来的溶剂中，并保持天然性质。如盐析或低温下的乙醇（或丙酮）短时间作用蛋白质。 （2）不可逆沉淀：蛋白质分子内部结构发生重大改变，蛋白质变性而沉淀，不再能溶于原溶剂。如加热引起蛋白质沉淀，与重金属或某些酸类的反应都属于此类。
《生物化学》题库 习题一参考答案 一、填空题 1蛋白质中的苯丙氨酸、酪氨酸和__色氨酸__3种氨基酸具有紫外吸收特性,因而使蛋白质在 280nm处有最大吸收值。 2蛋白质的二级结构最基本的有两种类型,它们是_α-螺旋结构__和___β-折叠结构__。前者的螺距为 0.54nm,每圈螺旋含_3.6__个氨基酸残基,每个氨基酸残基沿轴上升高度为__0.15nm____。天然 蛋白质中的该结构大都属于右手螺旋。 3氨基酸与茚三酮发生氧化脱羧脱氨反应生成__蓝紫色____色化合物,而脯氨酸与茚三酮反应 生成黄色化合物。 4当氨基酸溶液的pH=pI时,氨基酸以两性离子离子形式存在,当pH>pI时,氨基酸以负 离子形式存在。 5维持DNA双螺旋结构的因素有:碱基堆积力;氢键;离子键 6酶的活性中心包括结合部位和催化部位两个功能部位,其中前者直接与底物结合,决定酶的 专一性,后者是发生化学变化的部位,决定催化反应的性质。 72个H+或e经过细胞内的NADH和FADH2呼吸链时,各产生3个和2个ATP。 81分子葡萄糖转化为2分子乳酸净生成______2________分子ATP。 糖酵解过程中有3个不可逆的酶促反应,这些酶是己糖激酶;果糖磷酸激酶;丙酮酸激酶9。 10大肠杆菌RNA聚合酶全酶由σββα'2组成;核心酶的组成是'2ββα。参
与识别起始信号的是σ因子。 11按溶解性将维生素分为水溶性和脂溶性性维生素,其中前者主要包括V B1、V B2、V B6、 V B12、V C,后者主要包括V A、V D、V E、V K(每种类型至少写出三种维生素。) 12蛋白质的生物合成是以mRNA作为模板,tRNA作为运输氨基酸的工具,蛋白质合 成的场所是 核糖体。 13细胞内参与合成嘧啶碱基的氨基酸有:天冬氨酸和谷氨酰胺。 14、原核生物蛋白质合成的延伸阶段,氨基酸是以氨酰tRNA合成酶?GTP?EF-Tu三元复合体的形式进 位的。 15、脂肪酸的β-氧化包括氧化;水化;再氧化和硫解4步化学反应。 二、选择题 1、(E)反密码子GUA,所识别的密码子是: A.CAU B.UG C C.CGU D.UAC E.都不对 2、(C)下列哪一项不是蛋白质的性质之一? A.处于等电状态时溶解度最小 B.加入少量中性盐溶解度增加 C.变性蛋白质的溶解度增加 D.有紫外吸收特性 3.(B)竞争性抑制剂作用特点是:
生物化学实验思考题 Document number：BGCG-0857-BTDO-0089-2022
生物化学实验思考题 1.可用何种颜色反应鉴别酮糖的存在？ 间苯二酚反应，在酸的作用下，酮糖脱水生成羟甲基糠醛，后者再与间苯二酚作用生成红色物质。 2.α—萘酚的反应原理是什么？ 糖在浓的无机酸（硫酸、盐酸）作用下，脱水生成糠醛及其糠醛的衍生物，后者能与α—萘酚生成紫红色物质。 3.菲林试剂和本尼迪凯特氏法检验糖的原理是什么？ O沉淀。它们都是含有Cu2+的碱性溶液，能使还原糖氧化而本身还原成红色或者黄色的Cu 2 4.何谓纸层析法？ 用滤纸作为惰性支持物的的分层层析法。 5.何谓Rf值？影响Rf值的主要因素是什么？ 纸层析法形成的纸层析图谱上，原点到层析点中心的距离与原点到溶剂前沿的距离的比值；影响Rf值的因素有：物质的结构、性质、溶剂系统、层析滤纸的质量和层析温度等因素有关。 6.怎样制备扩展剂？ 扩展剂是4份水饱和的和1份醋酸的混合物。将20ml和5ml冰醋酸放入中，与15ml水混合，充分振荡，静置后分层，放出下层水层，漏斗中的则为扩展剂。 7.层析缸中的平衡剂的作用是什么？ 平衡剂起到使纸上吸附的溶剂达到饱和。使物质在展开剂和纸层析上吸附的溶剂中溶解度不同而进行分离。 8.通过蛋白质及氨基酸的呈色反应实验你掌握了几种鉴定蛋白质和氨基酸的方法？他们 的原理是什么？
四种：双缩脲反应；茚三酮反应；黄色反应；考马斯亮蓝反应。 （1）双缩脲在碱性环境中能与Cu2+ 生成紫红色化合物，蛋白质中有肽键，其结构与双缩脲相似，也能发生此反应。（2）除脯氨酸、羟脯氨酸和茚三酮反应产生黄色物质外，所有α—氨基酸及一切蛋白质都能和茚三酮反应产生蓝紫色物质。（3）含有苯环结构的氨基酸，如酪氨酸、和色氨酸，遇硝酸后，可被硝化成黄色物质，该化合物在碱性溶液中进一步形成橙色的硝醌酸钠。（4）考马斯亮蓝G250有红色和蓝色两种色调。在酸性溶液中，其以游离态存在呈现棕红色；当它与蛋白质通过疏水作用结合后变为蓝色。 9.什么是酶的最适温度及其应用的意义？ 酶活性最高时的温度称为酶的最适温度。可以利用这一原理指导工农业生产，提高生产效益。 10.什么是酶反应的最适PH?对酶的活性有什么影响？ 酶催化活性最高时反应体系的 pH 称为酶促反应的最适 PH。PH过高、过低都会使酶促反应的速率下降。 11.什么是酶的活化剂？ 指能够与分子上的一些结合，使酶活力提高的物质。 12.什么是酶的抑制剂？与变性剂有何区别？本实验结果如何证明酶的专一性？ 指与分子上的一些结合，使酶活力下降，甚至消失，但不使变性的物质。区别：酶的抑制剂不会使酶发生变性，而酶的变性剂会使酶的结构和性质发生改变。酶的专一性证明：实验结果表明通过在淀粉和蔗糖中分别加入有活性的淀粉酶和蔗糖酶后，两者均产生了还原性的糖，与本尼迪凯特试剂反应产生了砖红色沉淀，而其他的条件下均没有还原性糖的的产生，进而说明了酶的专一性。（答题时可以详尽的描述） 13.何谓碘值？有何意义？
第七章、代谢调控 1、什么是新陈代谢？ 新陈代谢简称代谢，是细胞中各种生物分子的合成、利用和降解反应的总和。一般来说，新陈代谢包括了所有产生和储藏能量的反应，以及所有利用这些能量合成低分子量化合物的反应。但不包括从小分子化合物合成蛋白质与核酸的过程。 生物新陈代谢过程可以分为合成代谢与分解代谢。 2、什么是代谢途径？代谢途径有哪些形式。 新陈代谢是逐步进行的，每种代谢都是由一连串反应组成的一个系列。这些一连串有序反应组成的系列就叫做代谢途径。在每一个代谢途径中，前一个反应的产物就是后一个反应的底物。所有这些反应的底物、中间产物和产物统称为代谢中间产物，简称代谢物。 代谢途径具有线形、环形和螺旋形等形式。有些代谢途径存在分支。 3、简述代谢途径的特点。 生物体内的新陈代谢在温和条件下进行：常温常压、有水的近中性环境。 由酶催化，酶的活性受到调控，精密的调控机制保证机体最经济地利用物质和能量。 代谢反应逐步进行，步骤繁多，彼此协调，有严格顺序性。 各代谢途径相互交接，形成物质与能量的网络化交流系统。 ATP是机体能量利用的共同形式，能量逐步释放或吸收。 4、列表说明真核细胞主要代谢途径与酶的区域分布。 代谢途径（酶或酶系）细胞内分布代谢途径（酶或酶系）细胞内分布 糖酵解胞液尿素合成胞液、线粒体 三羧酸循环线粒体蛋白质合成内质网、胞液 磷酸戊糖途径胞液DNA合成细胞核 糖异生胞液mRNA合成细胞核 糖原合成与分解胞液tRNA合成核质 脂肪酸β氧化线粒体rRNA合成核仁 脂肪酸合成胞液血红素合成胞液、线粒体 呼吸链线粒体胆红素合成微粒体、胞液 胆固醇合成内质网、胞液多种水解酶溶酶体 磷脂合成内质网 5、三个关键的中间代谢物是什么？ 在代谢过程中关键的代谢中间产物有三种：6-磷酸葡萄糖、丙酮酸、乙酰CoA。特别是乙酰CoA是各代谢之间的枢纽物质。通过三种中间产物使细胞中四类主要有机物质：糖、脂类、蛋白质和核酸之间实现相互转变。 6、细胞对代谢的调节途径有哪些？ 调节酶的活性。这种调节对现有的酶进行修饰，使酶的活性发生变化。这种调节一般在数秒或数分钟内即可完成，效果快速而短暂，因此是一种快速调节。 调节酶的数量。这是通过增加酶蛋白的合成或影响酶蛋白的讲解速度来调节，这种调节一般需要数小时才能完成，作用缓慢而持久，因此调节的速度比较慢。 调节底物的水平。这种调节主要是底物从细胞中的一个区域运送到另一个区域，一般是通过膜的选择性通透进行调节的。
一、选择题 1、蛋白质一级结构的主要化学键就是( E ) A、氢键 B、疏水键 C、盐键 D、二硫键 E、肽键 2、蛋白质变性后可出现下列哪种变化( D ) A、一级结构发生改变 B、构型发生改变 C、分子量变小 D、构象发生改变 E、溶解度变大 3、下列没有高能键的化合物就是( B ) A、磷酸肌酸 B、谷氨酰胺 C、ADP D、1,3一二磷酸甘油酸 E、磷酸烯醇式丙酮酸 4、嘌呤核苷酸从头合成中,首先合成的就是( A ) A、IMP B、AMP C、GMP D、XMP E、ATP 6、体内氨基酸脱氨基最主要的方式就是( B ) A、氧化脱氨基作用 B、联合脱氨基作用 C、转氨基作用 D、非氧化脱氨基作用 E、脱水脱氨基作用 7、关于三羧酸循环,下列的叙述哪条不正确( D ) A、产生NADH与FADH2 B、有GTP生成 C、氧化乙酰COA D、提供草酰乙酸净合成 E、在无氧条件下不能运转 8、胆固醇生物合成的限速酶就是( C ) A、HMG COA合成酶 B、HMG COA裂解酶 C、HMG COA还原酶 D、乙酰乙酰COA脱氢酶 E、硫激酶 9、下列何种酶就是酵解过程中的限速酶( D ) A、醛缩酶 B、烯醇化酶 C、乳酸脱氢酶 D、磷酸果糖激酶 E、3一磷酸甘油脱氢酶
10、DNA二级结构模型就是( B ) A、α一螺旋 B、走向相反的右手双螺旋 C、三股螺旋 D、走向相反的左手双螺旋 E、走向相同的右手双螺旋 11、下列维生素中参与转氨基作用的就是( D ) A、硫胺素 B、尼克酸 C、核黄素 D、磷酸吡哆醛 E、泛酸 12、人体嘌呤分解代谢的终产物就是( B ) A、尿素 B、尿酸 C、氨 D、β—丙氨酸 E、β—氨基异丁酸 13、蛋白质生物合成的起始信号就是( D ) A、UAG B、UAA C、UGA D、AUG E、AGU 14、非蛋白氮中含量最多的物质就是( D ) A、氨基酸 B、尿酸 C、肌酸 D、尿素 E、胆红素 15、脱氧核糖核苷酸生成的方式就是( B ) A、在一磷酸核苷水平上还原 B、在二磷酸核苷水平上还原 C、在三磷酸核苷水平上还原 D、在核苷水平上还原 16、妨碍胆道钙吸收的物质就是( E ) A、乳酸 B、氨基酸 C、抗坏血酸 D、柠檬酸 E、草酸盐 17、下列哪种途径在线粒体中进行( E ) A、糖的无氧酵介 B、糖元的分解 C、糖元的合成 D、糖的磷酸戊糖途径 E、三羧酸循环 18、关于DNA复制,下列哪项就是错误的( D ) A、真核细胞DNA有多个复制起始点 B、为半保留复制 C、亲代DNA双链都可作为模板 D、子代DNA的合成都就是连续进行的
第一章蛋白质结构与功能复习题 一、单选题 1. 维系蛋白质二级结构稳定的化学键是 A. 盐键 B. 二硫键 C. 肽键 D. 疏水键 E. 氢键 2．关于蛋白质二级结构错误的描述是 A. 蛋白质局部或某一段肽链有规则的重复构象 B. 二级结构仅指主链的空间构象 C. 多肽链主链构象由每个肽键的两个二面角所确定 D. 整条多肽链中全部氨基酸的位置 E. 无规卷曲也属二级结构范畴 3．蛋白质分子中的肽键 A. 是由一个氨基酸的α-氨基和另一个氨基酸的α-羧基形成的 B. 是由谷氨酸的γ-羧基与另一个α-氨基酸的氨基形成的 C. 是由赖氨酸的ε-氨基与另一分子α-氨基酸的羧基形成的 D. 氨基酸的各种氨基和各种羧基均可形成肽键 E. 以上都不是 4．以下有关肽键的叙述错误的是 A. 肽键属于一级结构 B. 肽键具有部分双键的性质
C. 肽键中C-N 键所连的四个原子处于同一平面 D. 肽键中C-N 键长度比C-Cα单键短 E. 肽键旋转而形成了β-折叠 5．蛋白质多肽链具有的方向性是 A. 从5′端到3′端 B. 从3′端到5′端 C. 从C 端到N端 D. 从N端到C 端 E. 以上都不是 6．蛋白质分子中的α-螺旋和β-片层都属于 A. 一级结构 2 B. 二级结构 C. 三级结构 D. 四级结构 E. 结构域 7．在各种蛋白质中含量相近的元素是 A. 碳 B. 氢 C. 氧 D. 氮 E. 硫 8．完整蛋白质分子必须具有
A. α-螺旋 B. β-片层 C. 辅基 D. 四级结构 E. 三级结构 9. 蛋白质吸收紫外光能力的大小，主要取决于 A. 含硫氨基酸的含量 B. 碱性氨基酸的含量 C. 酸性氨基酸的含量 D. 芳香族氨基酸的含量 E. 脂肪族氨基酸的含量 10. 蛋白质溶液的稳定因素是 A. 蛋白质溶液的粘度大 B. 蛋白质分子表面的疏水基团相互排斥 C. 蛋白质分子表面带有水化膜 D. 蛋白质分子中氨基酸的组成 E. 以上都不是 11. 维系蛋白质四级结构主要化学键是 A. 盐键 B. 二硫键 C. 疏水作用 D. 范德华力
\ 第一章 蛋白质化学思考题 1、组成蛋白质的AA 有哪些根据R 基的极性如何对其进行分类 根据R 基的极性分： 非极性R 基氨基酸共9种，均为中性AA ，疏水R 基AA 。包括甘氨酸、丙氨酸、 缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、脯氨酸、苯丙氨酸、色氨酸和甲硫氨酸（蛋氨酸）。 极性R 基氨基酸共11种，均为亲水R 基AA 。根据R 基在生理pH 下带电与否分： （1）不带电荷的极性R 基AA ：共有6种，均为中性AA 。 包括丝氨酸、苏氨酸、半胱氨酸、酪氨酸、天冬酰胺和谷氨酰胺。 ） （2）带负电荷的极性R 基AA ：共有2种，均为酸性AA 。 包括天冬氨酸和谷氨酸。 (3)带正电荷的极性R 基AA ：共有3种，均为碱性AA 。赖氨酸、精氨酸和组 氨酸。 2 、什么叫pI 有何生物学意义 pI ： 氨基酸 蛋白质中的常见氨基酸：蛋白质的基本组成单位。共20种。 蛋白中的稀有氨基酸：只在某些蛋白质中存在。 非蛋白质氨基酸：细胞、组织中有，蛋白质中无。 &
当氨基酸主要以两性离子形式存在时 ' （或所带的正负电荷数相等，净电荷等于0，在外电场作用下既不向正极移动，也不向负极移动） 所处溶液的pH值就称为该氨基酸的等电点。 当溶液中pH = pI时，AA净电荷为零； pH ＞ pI时，AA带负电； pH ＜ pI 时，AA带正电。 a、可据此利用电泳及离子交换层析法分离氨基酸和蛋白质。 b、等电点时AA的溶解度最小，易沉淀，可据此利用等电点沉淀法分离氨基酸和蛋白质。 . c、等电点时由于净电荷为零，AA在电场中不移动，可据此利用等电聚焦法分离氨基酸和蛋白质。 3 、什么叫Edman 反应有何生物学意义 Edman反应（氨基酸与异硫氰酸苯酯的反应） 氨基酸的α-NH2与异硫氰酸苯酯（PITC；苯异硫氰酸酯）间的反应。可用于鉴定多肽或蛋白质的N-端氨基酸。 意义：测N-端；测氨基酸序列；测肽链数目。 — 4 、什么叫肽肽单位肽平面二面角
生物化学试题库 蛋白质化学 一、填空题 1．构成蛋白质的氨基酸有 20 种，一般可根据氨基酸侧链（R）的 大小分为非极性侧链氨基酸和极性侧 链氨基酸两大类。其中前一类氨基酸侧链基团的共同特怔是具有 疏水性；而后一类氨基酸侧链（或基团）共有的特征是具有亲水 性。碱性氨基酸（pH6～7时荷正电）有两3种，它们分别是赖氨 基酸和精。组氨基酸；酸性氨基酸也有两种，分别是天冬 氨基酸和谷氨基酸。 2．紫外吸收法（280nm）定量测定蛋白质时其主要依据是因为大多数可溶性蛋 白质分子中含有苯丙氨基酸、酪氨基酸或 色氨基酸。 3．丝氨酸侧链特征基团是－OH ；半胱氨酸的侧链基团是－SH ；组氨酸的侧链基团是 。这三种氨基酸三字母代表符号分别是 4．氨基酸与水合印三酮反应的基团是氨基，除脯氨酸以外反应产物 的颜色是蓝紫色；因为脯氨酸是 —亚氨基酸，它与水合印三酮的反 应则显示黄色。 5．蛋白质结构中主键称为肽键，次级键有、 、
氢键疏水键、范德华力、二硫键；次级键中属于共价键的是二硫键键。 6．镰刀状贫血症是最早认识的一种分子病，患者的血红蛋白分子β亚基的第六位 谷氨酸被缬氨酸所替代，前一种氨基酸为极性侧链氨基酸，后者为非极性侧链氨基酸，这种微小的差异导致红血蛋白分子在氧分压较低时易于聚集，氧合能力下降，而易引起溶血性贫血。 7．Edman反应的主要试剂是异硫氰酸苯酯；在寡肽或多肽序列测定中，Edman反应的主要特点是从N-端依次对氨基酸进行分析鉴定。 8．蛋白质二级结构的基本类型有α-螺旋、、β-折叠β转角无规卷曲 和。其中维持前三种二级结构稳定键的次级键为氢 键。此外多肽链中决定这些结构的形成与存在的根本性因与氨基酸种类数目排列次序、、 有关。而当我肽链中出现脯氨酸残基的时候，多肽链的αa-螺旋往往会中断。 9．蛋白质水溶液是一种比较稳定的亲水胶体，其稳定性主要因素有两个，分别是分子表面有水化膜同性电荷斥力 和。
1 绪论 1．生物化学研究的对象和内容是什么？ 解答：生物化学主要研究: （1）生物机体的化学组成、生物分子的结构、性质及功能； （2）生物分子分解与合成及反应过程中的能量变化； （3）生物遗传信息的储存、传递和表达； （4）生物体新陈代谢的调节与控制。 2．你已经学过的课程中哪些内容与生物化学有关。 提示：生物化学是生命科学的基础学科，注意从不同的角度，去理解并运用生物化学的知识。 3．说明生物分子的元素组成和分子组成有哪些相似的规侓。 解答：生物大分子在元素组成上有相似的规侓性。碳、氢、氧、氮、磷、硫等6种是蛋白质、核酸、糖和脂的主要组成元素。碳原子具有特殊的成键性质，即碳原子最外层的4个电子可使碳与自身形成共价单键、共价双键和共价三键，碳还可与氮、氧和氢原子形成共价键。碳与被键合原子形成4个共价键的性质,使得碳骨架可形成线性、分支以及环状的多种多性的化合物。特殊的成键性质适应了生物大分子多样性的需要。氮、氧、硫、 磷元素构成了生物分子碳骨架上的氨基（—NH2）、羟基（—OH ）、羰基（C O ）、羧基（—COOH ）、巯基（—SH ）、磷酸基（—PO4 ）等功能基团。这些功能基团因氮、硫和磷有着可变的氧化数及氮和氧有着较强的电负性而与生命物质的许多关键作用密切相关。 生物大分子在结构上也有着共同的规律性。生物大分子均由相同类型的构件通过一定的共价键聚合成链状，其主链骨架呈现周期性重复。构成蛋白质的构件是20种基本氨基酸。氨基酸之间通过肽键相连。肽链具有方向性（N 端→C 端）,蛋白质主链骨架呈“肽单位”重复；核酸的构件是核苷酸,核苷酸通过3′, 5′-磷酸二酯键相连，核酸链也具有方向性(5′、→3′ ),核酸的主链骨架呈“磷酸-核糖（或脱氧核糖）”重复；构成脂质的构件是甘油、脂肪酸和胆碱，其非极性烃长链也是一种重复结构；构成多糖的构件是单糖，单糖间通过糖苷键相连，淀粉、纤维素、糖原的糖链骨架均呈葡萄糖基的重复。 2 蛋白质化学 1．用于测定蛋白质多肽链N 端、C 端的常用方法有哪些？基本原理是什么？ 解答：（1） N-末端测定法：常采用2,4―二硝基氟苯法、Edman 降解法、丹磺酰氯法。 ①2,4―二硝基氟苯(DNFB 或FDNB)法：多肽或蛋白质的游离末端氨基与2,4―二硝基氟苯（2,4―DNFB ）反应（Sanger 反应），生成DNP ―多肽或DNP ―蛋白质。由于DNFB 与氨基形成的键对酸水解远比肽键稳定，因此DNP ―多肽经酸水解后，只有N ―末端氨基酸为黄色DNP ―氨基酸衍生物，其余的都是游离氨基酸。 ② 丹磺酰氯(DNS)法：多肽或蛋白质的游离末端氨基与与丹磺酰氯（DNS ―Cl ）反应生成DNS ―多肽或DNS ―蛋白质。由于DNS 与氨基形成的键对酸水解远比肽键稳定，因此DNS ―多肽经酸水解后，只有N ―末端氨基酸为强烈的荧光物质DNS ―氨基酸，其余的都是游离氨基酸。 ③ 苯异硫氰酸脂（PITC 或Edman 降解）法：多肽或蛋白质的游离末端氨基与异硫氰酸苯酯（PITC ）反应（Edman 反应），生成苯氨基硫甲酰多肽或蛋白质。在酸性有机溶剂中加热时，N ―末端的PTC ―氨基酸发生环化，生成苯乙内酰硫脲的衍生物并从肽链上掉下来，除去N ―末端氨基酸后剩下的肽链仍然是完整的。 ④ 氨肽酶法：氨肽酶是一类肽链外切酶或叫外肽酶，能从多肽链的N 端逐个地向里切。根据不同的反应时间测出酶水解释放的氨基酸种类和数量，按反应时间和残基释放量作动力学曲线，就能知道该蛋白质的N 端残基序列。 （2）C ―末端测定法：常采用肼解法、还原法、羧肽酶法。 肼解法：蛋白质或多肽与无水肼加热发生肼解，反应中除C 端氨基酸以游离形式存 在外，其他氨基酸都转变为相应的氨基酸酰肼化物。
第一章蛋白质 选择题 1．某一溶液中蛋白质的百分含量为45％，此溶液的蛋白质氮的百分浓度为：E A．8.3% B．9.8% C．6.7% D．5.4% E．7.2％ 2．下列含有两个羧基的氨基酸是：D A．组氨酸B．赖氨酸C．甘氨酸D．天冬氨酸E．色氨酸 3．下列哪一种氨基酸是亚氨基酸：A A．脯氨酸B．焦谷氨酸C．亮氨酸D．丝氨酸E．酪氨酸 4．维持蛋白质一级结构的主要化学键是：C A．离子键B．疏水键C．肽键D．氢键E．二硫键 5．关于肽键特点的错误叙述是：E A．肽键中的C-N键较C-N单键短 B．肽键中的C-N键有部分双键性质 C．肽键的羰基氧和亚氨氢为反式构型 D．与C-N相连的六个原子处于同一平面上 E．肽键的旋转性，使蛋白质形成各种立体构象 6．关于蛋白质分子三级结构的描述，其中错误的是：B A．天然蛋白质分子均有这种结构 B．有三级结构的多肽链都具有生物学活性 C．三级结构的稳定性主要是次级键维系 D．亲水基团聚集在三级结构的表面 E．决定盘曲折叠的因素是氨基酸残基 7．具有四级结构的蛋白质特征是：E A．依赖肽键维系四级结构的稳定性 B．在三级结构的基础上，由二硫键将各多肽链进一步折叠、盘曲形成 C．每条多肽链都具有独立的生物学活性 D．分子中必定含有辅基 E．由两条或两条以上具有三级结构的多肽链组成 8．含有Ala，Asp，Lys，Cys的混合液，其pI依次分别为6.0，2.77，9.74，5.07，在pH9环境中电泳分离这四种氨基酸，自正极开始，电泳区带的顺序是：B A．Ala，Cys，Lys，Asp B．Asp，Cys，Ala，Lys C．Lys，Ala，Cys，Asp D．Cys，Lys，Ala，Asp E．Asp，Ala，Lys，Cys 9．变性蛋白质的主要特点是：D A．粘度下降 B．溶解度增加
第一章绪论 1、何为生化分离技术？其主要研究那些容？ 生化分离技术是指从动植物组织培养液和微生物发酵液中分离、纯化生物产品 的过程中所采用的方法和手段的总称。 2、生化分离的一般步骤包括哪些环节及技术？ 一般说来，生化分离过程主要包括4个方面：①原料液的预处理和固液分离， 常用加热、调PH、凝聚和絮凝等方法：②初步纯化（提取），常用沉淀、吸附、萃取、超滤等单元操作；③高度纯化（精制），常选用色谱分离技术；④成品加工，有浓缩、结晶和干燥等技术。 3、生化分离工程有那些特点，及其重要性？ 特点：1、目的产物在初始物料（发酵液）中的含量低；2、培养液是多组分的混合物，除少量产物外，还有大量的细胞及碎片、其他代物（几百上千种）、 培养基成分、无机盐等；3、生化产物的稳定性低，易变质、易失活、易变性， 对温度、pH值、重金属离子、有机溶剂、剪切力、表面力等非常敏感；4、对最终产品的质量要求高 重要性：生物技术产品一般存在于一个复杂的多相体系中。唯有经过分离和纯化等下游加工过程，才能制得符合使用要求的产品。因此产品的分离纯化是生物技术工业化的必需手段。在生物产品的开发研究中，分离过程的费用占全部研究费用的50 %以上；在产品的成本构成中，分离与纯化部分占总成本的40? 80 %;精细、药用产品的比例更高达70?90%。显然开发新的分离和纯化工艺是提高经济效益或减少投资的重要途径。 4、生物技术下游工程与上游工程之间是否有联系?
它们之间有联系。①生物工程作为一个整体，上游工程和下游工程要相互配合, 为了利于目的产物的分离与纯化，上游的工艺设计应尽量为下游的分离纯化创 造条件，例如，对于发酵工程产品，在加工过程中如果采用液体培养基，不用酵母膏、玉米浆等有色物质为原料，会使下游加工工程更方便、经济；②通常生物技术上游工程与下游工程相耦合。发酵-分离耦合过程的优点是可以解除终产物的反馈抑制效应，同时简化产物提取过程，缩短生产周期，收到一举数得的效果。 5、为何生物技术领域中往往出现“丰产不丰收”的现象？ 第二章预处理、过滤和细胞破碎 1、发酵液预处理的目的是什么？主要有那几种方法？ 目的：改变发酵液的物理性质，加快悬浮液中固形物沉降的速率；出去大部分可溶性杂质，并尽可能使产物转入便于以后处理的相中（多数是液相），以便于固液分离及后提取工序的顺利进行。 方法：①加热法。升高温度可有效降低液体粘度，从而提高过滤速率，常用于粘度随温度变化较大的流体。控制适当温度和受热时间，能使蛋白质凝聚形成较大颗粒，进一步改善发酵液的过滤特性。使用加热法时必须注意加热温度必须控制在不影响目的产物活性的围，对于发酵液，温度过高或时间过长可能造成细胞溶解，胞物质外溢，而增加发酵液的复杂性，影响其后的产物分离与纯化； ②调节悬浮液的pH值,pH直接影响发酵液中某些物质的电离度和电荷性质， 适当调节pH可以改善其过滤特性；③凝聚和絮凝；④使用惰性助滤剂。 2、何谓絮凝？何谓凝聚？何谓混凝？各自作用机理是什么？ 3、常用的凝聚剂有哪些？常用的絮凝剂有哪些? (1)凝聚作用：凝聚作用
生物化学（第三版）课后习题详细解答第三章氨基酸 提要α-氨基酸是蛋白质的构件分子，当用酸、碱或蛋白酶水解蛋白质时可获得它们。蛋白质中的氨基酸都是L型的。但碱水解得到的氨基酸是D型和L型的消旋混合物。 参与蛋白质组成的基本氨基酸只有20种。此外还有若干种氨基酸在某些蛋白质中存在，但它们都是在蛋白质生物合成后由相应是基本氨基酸（残基）经化学修饰而成。除参与蛋白质组成的氨基酸外，还有很多种其他氨基酸存在与各种组织和细胞中，有的是β-、γ-或δ-氨基酸，有些是D型氨基酸。 氨基酸是两性电解质。当pH接近1时，氨基酸的可解离基团全部质子化，当pH在13左右时，在这中间的某一pH（因不同氨基酸而异），氨基酸以等电的兼性离子（HNCHRCOO）+-则全部去质子化。 pH称为该氨基酸的等电点，用3状态存在。某一氨基酸处于净电荷为零的兼性离子状态时的介质 pI表示。 所有的α-氨基酸都能与茚三酮发生颜色反应。α-NH与2,4-二硝基氟苯（DNFB）作用产生相应 DNP-氨基酸（Sanger反应）；α-NH与苯乙硫氰酸酯（PITC）作用形成相应氨基酸的苯胺基2的 硫甲2酰衍生物（ Edman反应）。胱氨酸中的二硫键可用氧化剂（如过甲酸）或还原剂（如巯基乙醇）断裂。半胱氨酸的SH基在空气中氧化则成二硫键。这几个反应在氨基酸荷蛋白质化学中 占有重要地位。 除甘氨酸外α-氨基酸的α-碳是一个手性碳原子，因此α-氨基酸具有光学活性。比旋是α-氨基酸的物理常数之一，它是鉴别各种氨基酸的一种根据。 参与蛋白质组成的氨基酸中色氨酸、酪氨酸和苯丙氨酸在紫外区有光吸收，这是紫外吸收法定量蛋白质的依据。核磁共振（NMR）波谱技术在氨基酸和蛋白质的化学表征方面起重要作用。 氨基酸分析分离方法主要是基于氨基酸的酸碱性质和极性大小。常用方法有离子交换柱层析、高效液相层析（HPLC）等。 习题 1.写出下列氨基酸的单字母和三字母的缩写符号：精氨酸、天冬氨酸、谷氨酰氨、谷氨酸、苯丙氨酸、色氨酸和酪氨酸。[见表3-1] 表3-1 氨基酸的简写符号 三字单字母单字母三字母符母符名称名称符号符号号号L Leu Ala A (leucine) (alanine) 亮氨酸丙氨酸K Arg Lys R (lysine) 精氨酸(arginine) 赖氨酸M N Asn Met )(methionine) 蛋氨酸(asparagines) 甲硫氨酸(天冬酰氨F D Asp Phe (phenylalanine) 苯丙氨酸(aspartic acid) 天冬氨酸 B Asx Asp Asn或和/P C Pro Cys (praline) 脯氨酸半胱氨酸(cysteine) S Q Gln Ser (serine) 丝氨酸(glutamine) 谷氨酰氨T E Glu Thr (threonine) 谷氨酸(glutamic acid) 苏氨酸Z Gls Glu /和Gln或W G Gly Trp (tryptophan) (glycine)
核酸化学及研究方法 一、名词解释 1.正向遗传学：通过研究突变表型确定突变基因的经典遗传学方法。 2.核小体组蛋白修饰：组成核小体组蛋白，其多肽链的N末端游离于核小体之外，常被化学基团修饰，修饰类型包括：乙酰化、甲基化、磷酸化和泛素化，修饰之后会改变染色质的结构和活性。 3.位点特异性重组：位点特异性重组是遗传重组的一类。这类重组依赖于小范围同源序列的联会，重组只发生在同源短序列的范围之内，需要位点特异性的蛋白质分子参与催化。 4.转座机制：转座酶上两个不同亚基结合在转座子的特定序列上，两个亚基靠在一起形成有活性的二聚体，切下转座子，转座酶-转座子复合物结合到靶DNA上，通过转座酶的催化将转座子整合到新位点上。 5.基因敲除：利用DNA同源重组原理，用设计的外源同源DNA与受体细胞基因组中序列相同或相近的靶基因发生重组，从而将外源DNA整合到受体细胞的基因组中，产生精确的基因突变，完成基因敲除。 6.Sanger双脱氧终止法：核酸模板在核酸聚合酶、引物、四种单脱氧碱基存在的条件下复制或转录时，如果在四管反应系统中分别按比例引入四种双脱氧碱基，若双脱氧碱基掺入链端，该链便停止延长，若单脱氧碱基掺入链端，该链便可继续延伸。如此每管反应体系中便合成了以共同引物为5’端，以双脱氧碱基为3’端的一系列长度不等的核酸片段。反应终止后，分四个泳道进行电泳，以分离长短不一的核酸片段（长度相邻者仅差一个碱基），根据片段3’的双脱氧碱基，便可依次阅读合成片段的碱基排列顺序。 7.荧光实时PCR技术原理 探针法：TaqMan探针是一小段可以与靶DNA序列中间部位结合的单链DNA，它的5’和3’端分别带有一个荧光基团，这两个荧光基团由于距离过近，相互发生淬灭，不产生绿色荧光。PCR反应开始后，靶DNA变性，产生单链DNA，TaqMan探针结合到与之配对的靶DNA序列上，之后被Taq DNA聚合酶切除降解，从而解除荧光淬灭，荧光基团在激发光下发出荧光，最后可根据荧光强度计算靶DNA的数量。染料法：荧光染料（如SYBR GreenⅠ）能与双链DNA发生非序列特异性结合，并激发出绿色荧光。PCR反应开始后，随着DNA的不断延伸，结合到DNA上的荧光染料也相应增加，被激发产生的荧光也相应增加，可根据荧光强度计算初始模板的数量。 8.双分子荧光互补(BiFC)技术原理 将荧光蛋白在某些特定的位点切开，形成不发荧光的N片段和C片段。这2个片段在细胞内共表达或体外混合时，不能自发地组装成完整的荧光蛋白，不能产生荧光。但是，当这2个荧光蛋白的片段分别连接到一组有相互作用的目标蛋白上，在细胞内共表达或体外混合这两个目标蛋白时，由于目标蛋白质的相互作用，荧光蛋白的2个片段在空间上互相靠近互补，重新构建成完整的具有活性的荧光蛋白分子，并在该荧光蛋白的激发光激发下，发射荧光。 简言之，如果目标蛋白质之间有相互作用，则在激发光的激发下，产生该荧光蛋白的荧光。反之，若目标蛋白质之间没有相互作用，则不能被激发产生荧光。 二.问答题： 1.怎样将一个基因克隆到pET32a载体上；原核表达后，怎样纯化该蛋白？ 2.通过哪几种方法可以获得cDNA的全长？简述其原理。 （一）已知序列信息 1.同源序列法：根据基因家族各成员间保守氨基酸序列设计简并引物，利用简并引物进行RT-PCR扩增，得到该基因的部分cDNA序列，然后再利用RACE（cDNA末端快速扩增技术）获得cDNA全长。 2.功能克隆法：cDNA文库；基因组文库 （二）未知序列信息： 1.基于基因组DNA的克隆：是在鉴定已知基因的功能后，进而分离目标基因的一种方法。
1.糖的D-型和L-型是如何决定的？ 看单糖分子中离羰基最远的不对称碳原子的-ＯＨ的空间排布。若－ＯＨ在不对称碳原子右边，即为Ｄ－型。若－ＯＨ在不对称原子左边，即为Ｌ－型。 2.错误！未找到引用源。--型是怎样决定的，与D-及L-型的决定有和异同？ 凡糖分子的半缩醛羟基（即C-1上的-OH基在碳链同侧的称错误！未找到引用源。-型，在异侧的称错误！未找到引用源。-型。 都是以分子末端-错误！未找到引用源。OH基邻近不对称碳原子的-OH基的位置坐依据。 3.单糖为什么都有旋光性？新配置葡萄糖液的比旋光度最初随时间而改变，随后即不再改变而达一恒定比旋光度，为什么？ 一切单糖都含有不对称碳原子，所以都有旋光的能力。一个旋光体溶液放置后，其比旋光度改变的现象称变旋。变旋的原因是糖从一种结构变到另一种结构，即错误！未找到引用源。--型互变达到平衡时，比旋光度即不再改变。 4.单糖有哪些重要性质？ 记忆反应 醛基酮基氧化（还原性） 还原成醇 成脎 发酵 还原金属离子，糖本身被氧化成糖酸或其他产物 和苯肼作用成脎 通过烯醇化发酵产生乙醇 羟基成酯 成苷 脱水 氨基化 脱氧 与酸反应 半缩醛羟基的-H可被烷基或其他基团取代产生糖苷 C-2、C-３的－ＯＨ被－错误！未找到引用源。取代经 氧化酶作用产生脱氧糖。 5.什么叫脂和酯，生活中遇到的事物中有哪些与脂质有关？ 脂：是甘油与3分子脂酸结合所成的三酰甘油，称脂肪或真脂。 酯：是酸和醇起酯化反应失去水而形成的一类化合物。 生活中遇到的脂有虫蜡、蜂蜡、奶油。 6.检验油脂的质量通常要测他的典值、皂化值、和酸值，这是为什么？这三种油脂常数的大小说明什么问题？ 测典值可知油脂的不饱和程度，测皂化值可知油脂的相对分子质量，测酸值可知油脂中的游离脂肪酸的含量，这样有利于推测出油脂的化学组成，从而得出油脂的质量。 7．有什么办法可防止油脂的水解、氧化和酸败？在中性、常温下存放可防止水解，密封存放，避免与空气接触可防止氧化，将脂氧化可防止酸败。 8.支链淀粉与糖原的异同点？ 同：1.有D-葡萄糖，直链由错误！未找到引用源。-1,4-苷键连接形成；2.无还原性，有旋光性且均为右旋，不能与苯肼成脎；3.支链以错误！未找到引用源。-1,6-苷键连接； 4.为机体生物活动提供能量 异：1.支链淀粉不溶于水，分支较少较长，卷曲成螺旋，遇典变紫红色；2.糖原溶于水，分支较多较短，遇典呈红色。 9.直链淀粉与纤维素的异同点。 同：1.不含支链，有葡萄糖构成；2.有旋光性，无还原性，不能成脎，无变旋现象； 异：1.直链淀粉:错误！未找到引用源。-D 葡萄糖，错误！未找到引用源。-1,4糖苷键连接，空间构象，卷曲的螺旋状，略溶于水，与典呈蓝色。 纤维素，错误！未找到引用源。-D葡萄糖以1,4-错误！未找到引用源。苷键平行排
蛋白质 一、填空R （1）氨基酸的结构通式为H2N-C-COOH 。 （2）组成蛋白质分子的碱性氨基酸有赖氨酸、组氨酸、精氨酸，酸性氨基酸有天冬氨酸、谷氨酸。 （3）氨基酸的等电点pI是指氨基酸所带净电荷为零时溶液的pH值。 （4）蛋白质的常见结构有α-螺旋β-折叠β-转角和无规卷曲。 （5）SDS-PAGE纯化分离蛋白质是根据各种蛋白质分子量大小不同。 （6）氨基酸在等电点时主要以两性离子形式存在，在pH>pI时的溶液中，大部分以__阴_离子形式存在，在pH 一、名词解释 1、同聚多糖：由一种单糖组成的多糖，水解后生成同种单糖，如淀粉、纤维素等 2、氧化磷酸化；在真核细胞的线粒体或细菌中，物质在体内氧化时释放的能量供给ADP与无机磷合成ATP 的偶联反应。 3、多酶复合体: 几种功能不同的酶彼此嵌合在一起构成复合体，完成一系列酶促反应 4、限制性内切酶；一种在特殊核甘酸序列处水解双链DNA的内切酶。Ⅰ型限制性内切酶既能催化宿主DNA 的甲基化，又催化非甲基化的DNA的水解；而Ⅱ型限制性内切酶只催化非甲基化的DNA的水解 5、结构域：多肽链在二级结构或超二级结构的基础上形成三级结构的局部折叠区域，它是相对独立的紧密球形实体，称为结构域 6、脂肪酸ω-氧化：脂肪酸的ω-碳原子先被氧化成羧基，再进一步氧化成ω-羧基，形成α、ω-二羧脂肪酸，以后可以在两端进行α-氧化而分解。 7、戊糖磷酸途径：又称为磷酸已糖支路。是一个葡萄糖-6-磷酸经代谢产生NADPH和核糖-5-磷酸的途径。该途径包括氧化和非氧化两个阶段，在氧化阶段，葡萄糖-6-磷酸转化为核酮糖-5-磷酸和CO2，并生成两分子NADPH；在非氧化阶段，核酮糖-5-磷酸异构化生成核糖-5-磷酸或转化为酵解的两用人才个中间代谢物果糖-6-磷酸和甘油醛-3-磷酸。 ( 是指从6-磷酸葡萄糖开始,经过氧化脱羧、糖磷酸酯间的互变，最后形成6-磷酸果糖和3-磷酸甘油醛的过程) 8、竞争性抑制作用：通过增加底物浓度可以逆转的一种酶抑制类型。竞争性抑制剂通常与正常的底物或配体竞争同一个蛋白质的结合部位。这种抑制剂使Km增大而υmax不变。 9、肉毒碱穿梭作用：活化后的脂酰CoA是在线粒体外需要一个特殊的转运机制才能进入线粒体内膜。在膜内外都含有肉毒碱，脂酰CoA和肉毒碱结合，通过特殊通道进入膜内然后再与肉毒碱分离(脂酰CoA 通过形成脂酰肉毒碱从细胞质转运到线粒体的一个穿梭循环途径。) 10、呼吸链：又称电子传递链，是由一系列电子载体构成的，从NADH或FADH2向氧传递电子的系统 11 增色效应；当双螺旋DNA熔解（解链）时，260nm处紫外吸收增加的现象。 12、半不连续复制；半不连续复制是指DNA复制时，前导链上DNA的合成是连续的，后随链上是不连续的，故称为半不连续复制。 13、尿素循环: 是一个由4步酶促反应组成的，可以将来自氨和天冬氨酸的氮转化为尿素的循环。循环是发生在脊椎动物的肝脏中的一个代谢循环。 14、信号肽: 常指新合成多肽链中用于指导蛋白质夸膜转移（定位）的N-末端氨基酸序列（有时不一定在N端）。 15、核酶：具有催化功能的RNA分子,是生物催化剂。核酶又称核酸类酶、酶RNA、核酶类酶RNA。 16、半保留复制：DNA复制的一种方式。每条链都可用作合成互补链的模板，合成出两分子的双链DNA， 生物化学试题及答案（4） 第四章糖代谢 【测试题】 一、名词解释 1．糖酵解（glycolysis）11．糖原累积症 2．糖的有氧氧化12．糖酵解途径 3．磷酸戊糖途径13．血糖(blood sugar) 4．糖异生（glyconoegenesis)14．高血糖(hyperglycemin) 5．糖原的合成与分解15．低血糖(hypoglycemin) 6．三羧酸循环（krebs循环）16．肾糖阈 7．巴斯德效应(Pastuer效应) 17．糖尿病 8．丙酮酸羧化支路18．低血糖休克 9．乳酸循环（coris循环）19．活性葡萄糖 10．三碳途径20．底物循环 二、填空题 21．葡萄糖在体内主要分解代谢途径有、和。 22．糖酵解反应的进行亚细胞定位是在，最终产物为。 23．糖酵解途径中仅有的脱氢反应是在酶催化下完成的，受氢体是。两个 底物水平磷酸化反应分别由酶和酶催化。 24．肝糖原酵解的关键酶分别是、和丙酮酸激酶。 25．6—磷酸果糖激酶—1最强的变构激活剂是，是由6—磷酸果糖激酶—2催化生成，该酶是一双功能酶同时具有和两种活性。 26．1分子葡萄糖经糖酵解生成分子ATP，净生成分子A TP，其主要生理意义在于。 27．由于成熟红细胞没有，完全依赖供给能量。 28．丙酮酸脱氢酶复合体含有维生素、、、和。 29．三羧酸循环是由与缩合成柠檬酸开始，每循环一次有次脱氢、 - 次脱羧和次底物水平磷酸化，共生成分子A TP。 30．在三羧酸循环中催化氧化脱羧的酶分别是和。 31．糖有氧氧化反应的进行亚细胞定位是和。1分子葡萄糖氧化成CO2和H2O净生成或分子ATP。 32．6—磷酸果糖激酶—1有两个A TP结合位点，一是ATP作为底物结合，另一是与ATP亲和能力较低，需较高浓度A TP才能与之结合。 33．人体主要通过途径，为核酸的生物合成提供。 34．糖原合成与分解的关键酶分别是和。在糖原分解代谢时肝主要受的调控，而肌肉主要受的调控。 35．因肝脏含有酶，故能使糖原分解成葡萄糖，而肌肉中缺乏此酶，故肌糖原分解增强时，生成增多。 36．糖异生主要器官是，其次是。 37．糖异生的主要原料为、和。 38．糖异生过程中的关键酶分别是、、和。 39．调节血糖最主要的激素分别是和。 40．在饥饿状态下，维持血糖浓度恒定的主要代谢途径是。 三、选择题生化期末复习题及答案
生物化学试题及答案(4)
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