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基因工程原理笔记整理版

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一、分子遗传学的传承与发展

1、经典遗传学阶段

孟德尔最初提出了遗传因子的概念;摩尔根创立了遗传的染色体理论。

2、生化遗传学阶段(或微生物遗传学阶段)

3、分子遗传学阶段

1953年,Watson和Crick提出了DNA的双螺旋模型。

4、基因工程阶段

(1)、基因工程诞生的理论基础

①在40年代确定了遗传信息的携带者,即基因的分子载体是DNA而不是蛋白质,从

而明确了遗传的物质基础问题;

②在50年代揭示了DNA分子的双螺旋模型和半保留复制机理,解决了基因的自我复

制和传递的问题;

③在50年代末期和60年代,相继提出了“中心法则”和操纵子学说,并成功地破

译了遗传密码子,从而阐明了遗传信息的流向和表达问题。

(2)、基因工程诞生的技术基础

核酸内切限制酶、DNA连接酶、核酸杂交技术、琼脂糖凝胶电泳技术、克隆载体以及大肠杆菌转化体系的建立。(PCR技术不能作为基因工程诞生的技术基础,因为PCR 技术是在基因工程诞生后建立起来的。)

(3)基因工程的优点

①具有跨越天然物种屏障能力;

②能够使目的基因在大肠杆菌体内得到极大扩增,因此能对基因进行表达调控等基

因工程研究;

③确立了反向遗传学的研究途径。

5、基因组学阶段

基因组学包括:结构基因组学、功能基因组学(转录本组学、蛋白质组学、代谢组学)、基础基因组学、应用基因组学、比较基因组学

6、表观遗传学阶段

研究生命机体在发育与分化过程中,导致表型性状特征发生改变,但是相应核苷酸序列结构却没有发生改变的遗传学成为表观遗传学。

一、遗传信息的三个组成层次

1、有基因组DNA当中的蛋白质编码基因(<2%)构成的第一个层次;

2、仅仅包含非编码RNA(siRNA、miRNA),存在在广袤的RNA当中;

3、表观遗传信息包含在DNA周围与DNA相互作用的大分子—蛋白质。

二、基因的分子结构中的若干概念

1、5’侧翼序列:位于mRNA转录起点之前的序列为5’侧翼序列,也成为启动区。

在启动区有几个控制基因转录的信号:①决定mRNA转录起点的信号;②决定mRNA 转录起始的信号;③对环境刺激因素作出反应的信号;④对法语程序作出反应的信号;

⑤增强子

2、3’侧翼序列:指位于mRNA分子3’-末端的一段非转译的序列。

在3’侧翼序列区有3种信号:①控制转录终止信号;②控制mRNA末端加工信号;

③多数真核生物3’末端多聚腺苷酸化信号。

4、前导序列区:位于mRNA 5’端起始密码子之前的数百个核苷酸(不转译RNA区段),

也叫5’非转译区,简称5’-UTR。

前导序列区有两个重要的结构元件:①核糖体结合位点(RBS);②转录起始信号

5、同源性:由于进化上或个体发育上的共同来源而呈现的本质上的相似性,但其功能

不一定相同。

三、基因的组成部分

1、真核基因(过去常考):指真核细胞核基因组DNA的编码基因以及感染真核细胞的

DNA病毒或RNA病毒的编码基因。

2、原核基因(过去常考):原核生物染色体基因组以及真核生物的线粒体DNA和叶绿

体DNA的编码基因。

3、无论是真核生物的基因还是原核生物的基因,从大的方面讲都可以划分成如下四个

基本的组成部分:a. 编码区(coding region);b. 非编码区(noncoding region);

c. 启动区(promoter region);

d. 终止区(terminator)

4、原核基因的DNA序列结构包括如下三大组成部分:

a.启动子序列

5'-UTR

b.转录区序列 cDNA序列区-编码区

3'-UTR

c.终止子序列

大肠杆菌基因组结构的特点:①高效的遗传信息利用率(重叠基因的存在);②双链DNA的编码功能(大肠杆菌的基因组双链的部分区域都可编码);③具有多基因聚合形式的操纵子结构;④染色体基因组的拷贝数(当营养丰富时,大肠杆菌一个细胞中的染色体拷贝数达到3-4个;当营养贫瘠时,大肠杆菌细胞中染色体拷贝数平均1.1个。)

5、(1)真核基因组特点:

①被组蛋白包装成的结构;②基因组的多倍性;③具有大量的重复序列;④高比例

的非编码DNA序列;⑤庞大的基因数量。

(2)真核基因的特点:

①与原核基因不同,真核基因往往具有内含子(intron),它是包围在编码区之中的

非编码序列;

②真核基因是单顺反子,编码单基因产物,而原核基因则往往组成大的转录单位多

顺反子,即单一的mRNA分子可编码多种基因产物;

③成熟的真核mRNA分子的5'-端有一个帽的结构,3'-端有一段poly(A)尾巴。

(3)真核基因的结构(从三方面回答):

1)DNA水平:①启动子序列;②终止子序列;③转录序列区

2)pre-mRNA水平:①5'-UTR;②3'-UTR;③外显子;④内含子

3)成熟mRNA水平:①5'-UTR②3'-UTR③编码区④5'端帽的结构

⑤3'端poly(A)尾巴

四、基因图与基因作图

1、基因图:描述染色体上DNA大分子不同基因的排列顺序与间隔距离的一种线性图。

2、基因作图:按照遗传学或物理图的方法绘制基因图谱的过程。

3、基因图的类型:包括遗传图和物理图两种。

遗传图:根据遗传重组的实验结果绘制的表示同一条染色体DNA分子上不同基因的排列顺序及其相对距离的线性图,叫做遗传图。遗传图中基因间的距离,即图距单位,以厘摩(cM)表示。

物理图:以精确的物理长度为单位(通常是脱氧核糖核苷酸的数目)表示沿着染色体或DNA分子排列的两个位点之间实际距离和位置的特定图谱叫做物理图。一般说来物理图不涉及基因及性状特征。

六、基因分类

1.根据拷贝数多寡分类

*1.单拷贝基因——在单倍体或二倍体细胞的基因组中,编码多肽链的基因一般只有1~2个拷贝,叫单拷贝基因(Single-copy genes)。

*2.多拷贝基因——例如编码tRNA、rRNA以及组蛋白的基因,往往是多拷贝的,以保证有足够的基因产物满足细胞的生命需求,这样的基因叫多拷贝基因。

2.根据产物类型分类

(1)结构基因(Structural genes)

除了调节基因以外的编码任何RNA或蛋白质产物的基因,都叫做结构基因。(注意结构基因与看家基因在概念上的差别!)

(2)调节基因(Regulator genes)

从广义上讲任何一种能够调节或限制其它基因表达活性的基因,都叫做调节基因。但在一般情况下则是指其产物能够控制另外一个基因或若干基因表达效率的基因。

3.根据表达特性分类

(1)组成基因(Constitutive genes)

又叫做看家基因(Housekeeping gene),是一类理论上在所有细胞类型中都能进行表达、并为所有类型细胞生存提供必需的基本功能的基因。组成基因在中文中有时亦译为“组成型基因”,或“组成型表达基因”。

(2)诱导基因(Inducible genes)

诱导基因:因环境中某种特殊物质的存在而被诱导表达的基因,叫做“诱导型基因”,简称“诱导基因”。

因环境中某种物质的存在而使特定基因表达活性得以开启的过程,叫做诱

4.根据实验用途分类

(1)选择基因

选择基因(Selectable genes),又叫做选择标记基因(Selectable marker genes),是指可使被转化的细胞获得其亲本细胞所不具备的新的遗传特性,从而使

得人们能够使用特定的选择性培养基,将转化的新细胞从其亲本细胞群体中选择出

来的一类特殊的基因。

(2)标记基因

标记基因(Marker genes)在概念上与选择基因是有差别的,它是指其功能和染色体座位是已知的,并易于根据其编码产物或杂交实验测其存在的一类独特的基因,它可以作为绘制新基因座位的参照点。

(3)报告基因

报告基因特指其编码产物能被快速检测,常用来判断外源基因是否已经成功地导入寄主细胞、器官或组织的一类特殊的基因。

5.根据排列组合特点分类

(1)基因家族(gene family)(重中之重)

基因家族系指同一生物种中,从同一祖先基因经过复制,突变而来的一组具有相似结构、相似产物及相似功能的基因群体。

基因家族的判断标准:①多重性;②紧密连锁性;③核苷酸序列的同源性;

④相关的表型与功能。

(2)基因簇(Gene cluster)(重中之重)

基因簇系指原核生物基因组中,由不同基因组成的一个特殊的组合排列方式。

基因簇的判断标准:①同一基因簇的各个基因在遗传上往往是紧密连链的;②它们可以是属于同一操纵子的不同结构基因,也可以是属于不同操纵子的不同结构

基因;③它们可以来自同一基因家族的不同成员,也可以是来自不同基因家族的不

同成员。

(3)孤独基因(orphans)

系指与串联排列的基因簇成员相关,但位置是彼此分开的一类基因。孤独基因在功能上与串联基因是有差别的。

6.根据细胞类型分类

(1)原核基因

(2)真核基因

7.根据结构特点分类

(1)断裂基因(split gene)

编码序列不连续的间断基因,亦即是在其核苷酸序列中间插入了与氨基酸编码无关的DNA间隔区,使一个基因分隔成若干个不连续的区段。

(2)移动基因(movable gene)

又叫跳跃基因或转位因子,是指一种可以在染色体基因组上移动,甚至在不同染色体之间、噬菌体及质粒DNA之间跃迁的DNA短片段。

(3)假基因(pseudogene)

有人译伪基因。系指一类同野生型基因序列大部分同源,但由于突变而失去活性的畸变的核苷酸序列。

8.根据重复序列分类

(1)重叠基因(overlapping gene)

又叫嵌套基因(nested gene)。系指核苷酸编码序列彼此重叠的、编码不同蛋白质的两个或多个基因。

(2)重复基因(repeat gene)

在基因组上存在着多个或大量的序列重复的基因,如rRNA基因、tRNA基因等。

9.根据序列同源性分类

(1)同源基因:来自不同生物,但编码同样的蛋白质产物,具有共同进化祖先的基因称

为同源基因。

(2)共生同源基因

(3)直向同源基因

七、复制子:所谓复制子乃是含有一个复制起始位点的基因组中的DNA复制单位。

八、共线性:蛋白质多肽链分子中的氨基酸顺序,与其编码基因mRNA分子中的密码子顺序

之间存在的一致性关系,叫做共线性。

共线性包括四种情况:

①位于同一条染色体DNA上,不同基因的位置排列关系,这种情况叫做同线性。同线

性是共线性的一种。

②不同物种相关染色体DNA分子上,基因排列的顺序存在一致性。

③指DNA分子与其转录本RNA分子之间,其核苷酸碱基排列的顺序存在一致性。

④位于DNA或其RNA转录本上遗传密码子的排列顺序或转移的蛋白质中氨基酸的排列顺

序存在一致性。

九、基因工程中常用的酶:

核酸内切限制酶、DNA连接酶、DNA聚合酶、反转录酶、激酶、末端转移酶、核酸外切限制酶、λ核酸外切酶、碱性磷酸酶、S1核酸酶、Tag酶

十、切口与裂口

Nick(切口):指双链DNA分子中的单链断裂,即在相邻的两个核苷酸之间失去了一个磷酸二酯键。

Gap(裂口):即DNA裂口。指在双链DNA分子的某一条链上,失去一个或连续数个核苷酸时所出现的DNA单链断裂。

十一、同尾酶、同裂酶、异裂酶

同尾酶:一组来源不同、识别序列各异,但能够切割形成相同的黏性末端的核酸内切限制酶。

同裂酶:具有同样的识别位点,,产生同样的黏性末端,但是从不同的细菌中分离的,因而具有不同名称的一类核酸内切限制酶。

异裂酶:一组来源不同,但具有相同的识别序列和不同的切点的核酸内切限制酶。

十二、DNA连接酶

1、定义:利用ATP分子中的γ-磷酸基团为能量,通过催化两条并排DNA链的5'-磷酸基

团和3'-羟基之间,形成一个磷酸二酯键,而使两个DNA片段共价连接起来的

特异的核酸酶。

2、DNA连接酶进行连接的条件:

①DNA连接酶要求在一条DNA链的3'-末端具有一个游离的羟基(-OH)和另一条DNA

链的5'-末端具有一个磷酸基团(P),才能发挥其连接作用;

②由于在-OH和-P基团之间形成磷酸二酯键是一种需能的过程(反应),因此需要能

源分子的存在才能实现连接反应。

3、影响DNA连接酶连接效率的因素

①ATP浓度——建议分两次加入反应混合物

②连接酶浓度——连接平末端DNA片段,需1~2u

连接粘性末端DNA片段,需0.1u即可

③反应时间

④反应温度

⑤插入片段与载体分子间的摩尔比值

十三、基因克隆的质粒载体

1、质粒:独立于寄主染色体以外的自主复制的共价、闭合、环形的双链DNA分子

2、质粒克隆载体必须具备的条件

①具有复制区或复制因子(replicator)

②具有抗菌素抗性基因

③具有若干限制酶单一识别位点

④具有较小的分子量和较高的拷贝数

3、质粒的迁移作用:指由共存的接合型质粒引发的非接合型质粒的转移过程。

十四、质粒DNA的分离纯化

1、氯化铯---EtBr密度梯度离心

原理:实验表明,在细胞裂解及DNA分离的过程中,大分子量的细菌染色体DNA 容易发生断裂形成相应的线性片段,而质粒DNA则由于其分子量较小,结构紧密,因此仍能保持完整的状态。这种差别对质粒DNA的纯化是十分有用的。氯化铯---EtBr 密度梯度离心法就是根据这一差别建立的纯化质粒DNA的经典技术,当将含有EB的氯化铯溶液加到清亮的大肠杆菌裂解液中时,EB扁平分子便会通过在碱基对之间的嵌合作用而结合在DNA分子链上,并因此导致双螺旋结构发生解旋反应。线性的或开环的DNA分子,因其具有游离的末端而易于解旋,故可结合相当大量的EB分子。而象质粒这样的共价闭合环状的(cccDNA)DNA分子,由于没有游离的末端,只能发生有限的解旋反应,结果便限制了EB分子的结合数量,因此染色体DNA片段要比质粒cccDNA结合更多的EB分子。在DNA-EtBr复合物中,结合EB分子数量越多,其密度就越低。因此,在EB达到饱和浓度的条件下,质粒cccDNA就要比线性的染色体DNA片段具有更高的密度。通过氯化铯密度梯度离心之后,他们就会在不同的位置,从而达到纯化质粒DNA 的目的。

2、微量碱变性法

原理:这种方法是根据共价闭合环状质粒DNA与线性染色体DNA片段之间,在拓扑学上的差异发展而来的。实验观察发现,通过加热,尤其是在pH值介于12.0~12.5这个狭窄的范围内,线性DNA会被变性,而cccDNA则不会被变性。尽管在这样的条件下连接DNA 互补链之间的氢键会被断裂,但由于cccDNA的双螺旋主链骨架的彼此盘绕作用,互补的两条链仍然会紧密地结合在一起。与此相反,线性DNA的两条链则会完全分开。如果变性处理的质粒和染色体DNA混合物,通过致冷或恢复中型pH值便会迅速地复性。然而在这种复性过程中,这两种不同构型的DNA分子,其双链再结合的精确性则有本质上的差别。由于cccDNA 的两条互补链在形体上仍保持在一起,因此复性迅速而准确。但由随即断裂产生的线性的染色体DNA分子,彼此已经分离开来的互补链之间的复性作用就不会那么迅速而准确。他们聚集形成的网状结构,通过离心分离便会与变性的蛋白质与RNA一道沉淀下来。扔来滞留在上清液中的质粒cccDNA则可用酒精沉淀法收集。

十五、λ噬菌体载体

1、λ噬菌体的类型:主要有插入型载体和替换型载体

2、λZAP载体的结构:

①含有一个可以在体内发生内删除作用的pBluescript噬菌粒的DNA片段;

②在pBluescript的两侧是由两个单链DNA噬菌体f1的复制信号,即f1起始子和f1终止子包围着;

③在pBluescriptDNA序列的内部,有一段其两端分别带有T3及T7噬菌体启动子的多克隆位点区。

十六、M13克隆体系

1、顺反子内互补作用:又称基因内互补。指编码同样的多肽链序列但又各具有一个突变

的两个基因,联合产生出一种有功能活性的蛋白质多台的生化过程。

2、β-半乳糖苷酶显色反应原理:M13克隆体系,包括M13噬菌体本身和寄主菌株两个组

成部分。但无论是M13载体,还是大肠杆菌寄主菌株,单独都不能产生有功能活性的β-半乳糖苷酶。只有将两者结合在一起时,才能形成有功能的β-半乳糖苷酶,而且这种酶(四聚体时有活性)可以将X-gal(无色的)切割显蓝色。

lac缺失突变lacZ(△M15),由于缺失了lacZ基因中的编码β-半乳糖苷酶N-端部分的编码序列,因此只能合成出缺失了11-41位氨基酸的缺陷性的β-半乳糖苷酶,即M15多肽,这中多肽失去了四聚化作用的能力,故不具有酶的活性。而M13载体所携带的HindⅡ片段能够补偿lacZ基因的M15突变,使之恢复其形成四聚体的能力,从而重新获得β-半乳糖苷酶的功能。,并将其底物X-gal切割显蓝色。

3、α-互补作用:只有当β-半乳糖苷酶以四聚体形式存在时,才具有切割X-gal的生化功

能。lac缺失突变lacZ(△M15),由于缺失了lacZ基因中的编码β-半乳糖苷酶N-端部分的编码序列,因此只能合成出缺失了11-41位氨基酸的缺陷性的β-半乳糖苷酶,即M15多肽,这中多肽失去了四聚化作用的能力,故不具有酶的活性。β-半乳糖苷酶的溴化氢片段(也叫α-片段),具有该酶的2-92位氨基酸。体外实验表明,该片段能够互补M15多肽的功能,使之恢复形成四聚体的能力,从而重新获得β-半乳糖苷酶的功能。人们称这种M15多肽与α-片段之间的互补作用成为α-互补作用。

十七、噬菌粒载体

1、噬菌粒的组成:(1)质粒部分:①ColE1复制起点;②抗菌素抗性记号。

(2)噬菌体部分:①噬菌体DNA复制起点与终点;②噬菌体形态发

生有关的序列。

2、噬菌粒载体的优点:

①克隆在phagemid上的外源DNA可以像质粒一样按常规方法增殖,形成双链DNA,

既稳定又高产,具有常规质粒特性;

②复制方式可以被改变,从而产生单链DNA;

③不必进行亚克隆即可进行测序;

④可产生大片段外源单链DNA。

十八、噬菌体表面展示载体

1、构建原理:单链丝状噬菌体(如M13、fd及f1等)的基因Ⅷ编码的主要外壳蛋白质

cpVⅢ,其C端与DNA结合,而其N端则游离于噬菌体颗粒之外,基因Ⅲ

编码的次要外壳蛋白质cpⅢ,其C端固定在外壳上,N端暴露在病毒颗

粒的表面上。当外源基因插入到噬菌体基因组的基因Ⅷ或基因Ⅲ的编码

序列中时,在两者读码结构保持一致的情况下,外源蛋白质或多肽,便

会以融合蛋白质的形式表达,融合在外壳蛋白N端的外源多肽(或蛋白质)

便被展示在噬菌体颗粒的表面上。

2、噬菌体展示载体的定义:根据噬菌体展示原理,在丝状噬菌体的基础上建立

起来的一类具有特殊用途的、可在其表面表达克隆的外源基因的编码蛋白质的噬

菌体在叫做噬菌体展示载体。

十九、目的基因的分离

1、基因分离的主要方法:①应用DNA探针分离;②应用差别杂交或扣除杂交分离;

③应用PCR技术分离;④应用mRNA差别显示技术分离;⑤应用表达图谱分离;

⑥应用DNA插入突变法分离;⑦应用酵母双杂交系统分离;⑧应用定位克隆或图

为克隆技术分离;⑨应用DNA芯片技术分离。

2、基因的差异表达:在生物个体发育的不同阶段,或是在不同的组织或细胞中发生

的不同基因按时间、空间进行有序表达的方式,叫做基因的差异表达。

3、酵母双杂交系统(用来分离能与已知的靶蛋白相互作用的另一种蛋白质的编码基

因)

(1)原理:许多真核生物的转录激活因子都是由两个结构上可以分开的、功能

上相互独立的结构域组成的。如酿酒酵母的半乳糖苷酶基因的转录因子GAL4,在

N端1-147位氨基酸区段有一个DNA结合域(简称DNA-BD),在C端768-881位

氨基酸区段有一个转录激活域(简称AD)。 DNA-BD能够识别位于GAL4效应基因

上游的一个特定区段,即上游激活序列(UAS),并与之结合。而AD则是通过与

转录机中的其他成分之间的结合作用,以启动UAS下游的基因进行转录。这两个

结构域都是激活基因转录的必要条件,而且在正常的情况下他们都是同一种蛋白

质的组成部分。但是如果应用DNA重组技术把他们从形体上彼此分开,并放置在

同一寄主细胞中表达。那么由此产生的GAL4 DNA-BD和AD多肽,彼此之间就不

会直接地发生相互作用,故不能激活其相关的效应基因进行转录。因此,可应用

DNA重组技术将来自同一个转录因子的、或是两种不同转录因子的、分开的两种

结构域,在体内重新组装成具有功能的转录因子,从而激活UAS下游启动子调节

的报告基因的表达。

(2)构建两种E.coli—Yeast穿梭质粒

穿梭质粒(过去常考):是一类人工构建的具有两种不同复制起点和选择记号、

因而可在两种不同寄主细胞中进行复制和存留的质粒载体。这种质粒可以携带

外源DNA在原核细胞和真核细胞中往返穿梭。

1)第一种质粒载体pGBT9,这种质粒又叫做DNA-BD质粒载体(具Trp基因) 2)第二种质粒载体pGAD424,又叫AD质粒载体,它具有亮氨酸基因(leu),是用来构建cDNA表达文库的专用载体。

(3)共转化:从E.coli细胞中分别提取杂种质粒Ⅰ和杂种质粒Ⅱ,并共转化酵母菌株SFY526,涂布在缺少Trp和 leu的培养基上培养,以便筛选那些表达相

互作用的杂种蛋白质的菌落。若使用的报告基因为lacZ,便可通过显色反应

筛选出阳性克隆子(蓝色的为阳性克隆)。

4、DNA标签法:是根据DNA的插入作用发展出来的一种分离基因的方法。

当一段特定的DNA插入到基因组中目的基因的内部、或其邻近位点时,便会诱发该基因发生突变,并最终导致表型变化,形成突变体(突变植株);若用此已知的DNA插入序列作为探针则可从突变体植株的基因组文库中筛选到突变的基因;再利用此突变基因作为探针,就可从野生型的基因组DNA文库中克隆出野生型的目的基因。

二十、基因的表达与调控

2、原核基因表达的调控方式

①操纵子调节方式(只在原核生物中存在);②调节子的调节方式;③适

应性效应的调节方式;④正调控与负调控;⑤预程序化环路与快速开

关调节。

3、转录与复制的比较(重中之重)

①对引物的需求不一样(复制需要提供引物,而转录不需要);

②对底物的要求不一样(复制中为T,而转录中为U);

③与模板结合状况有区别(转录过程中产生的mRNA与模板很快分离);

④精确度不同;

⑤涉及的范围不一样(DNA复制:整个基因组,而且双链都可复制;RNA转录:

一条链的某几个基因)。

4、RNA编辑

(1)RNA编辑:在某些基因转录过程中,会有许多尿嘧啶核苷酸加入到前体mRNA核苷酸中,或者从前体mRNA中删除掉,以及甚至核苷酸碱基的取代,从而导致前体mRNA与转录模板不一致,称这种情况为RNA编辑。

(2)RNA编辑的主要类型:

①U的插入和删除引起的编辑;

②单核苷酸的引入引起的编辑;

③G、A的引入引起的编辑。

(3)RNA编辑的生物学意义

①移码突变的校正:RNA编辑可以校正移码突变,为生命有机体应对不利

条件提供一种相当有用的调控方法;

②遗传信息的扩充:由于mRNA编辑具有删掉起始密码子或在5’上游加上

起始密码子,3’端去掉终止密码子的作用,使遗传信息量增大,是生

命有机体控制转译的有效方式。

5、反馈抑制作用

(1)概念:系指生物合成途径中的一种终产物,当其浓度超过细胞的需要量时,就会反过来与该途径的第一种酶分子发生结合作用,从而导致

该酶活性被抑制的生化过程。

(2)反馈抑制的主要类型:简单反馈抑制、顺式反馈抑制、酶多重性反馈抑制、协同反馈抑制、累积性反馈抑制

二十一、克隆的真核基因在大肠杆菌中的表达

1、大肠杆菌表达载体的优越性:

①有关遗传的生物学背景知识了解清楚,特别是基因表达调控的知识了解较全

面;

②科学工作者已发展了完善的、安全的大肠杆菌寄主菌株;

③有了大肠杆菌的转基因表达调控的基础工作;

④大肠杆菌很容易进行工业化的批量生产。

2、存在的问题:

①真核基因比大肠杆菌基因结构复杂;

②真核基因与原核基因的转录信号不同;

③真核与原核的mRNA在结构上有差别;

④真核基因转译的蛋白质需经过加工修饰,而原核基因不需要;

⑤真核基因表达的蛋白质在大肠杆菌细胞中容易被细胞中的酶降解。

3、表达载体应该具备的条件:

①编码序列必须是连续的;

②真核基因必须处于诱导型的原核启动子的控制之下;

③为了避免原核细胞中的酶降解真核基因,可以构建融合基因。

4、表达载体的基本组成成分:①原核启动子,最好是诱导型的;②标记基因;③

复制起点区序列;④多克隆位点

5、外源蛋白质在大肠杆菌中的表达部位(过去常考)

①在细胞质中表达;②在周质中表达;③在胞外表达。

6、融合基因:指通过自发突变事件形成的、或是应用DNA体外重组技术构建的一

类具有来自两个或两个以上不同基因的核苷酸序列的新型基因。

7、融合蛋白质:由克隆在一起的两个或数个不同基因的编码序列组成的融合基因,

所转译产生的单一的多肽序列。

8、配偶体:指融合蛋白质中与目标蛋白质连接的别种蛋白质组分。

9、配体:在生化上指同蛋白质分子结合的分子或离子。

在层析技术中指能够与蛋白质特异性非共价结合的物质。

生物化学笔记(整理版)1

《生物化学》绪论 生物化学可以认为是生命的化学,是研究微生物、植物、动物及人体等的化学组成和生命过程中的化学变化的一门科学。 生命是发展的,生命起源,生物进化,人类起源等,说明生命是在发展,因而人类对生命化学的认识也在发展之中。 20世纪中叶直到80年代,生物化学领域中主要的事件: (一)生物化学研究方法的改进 a. 分配色谱法的创立——快捷、经济的分析技术由Martin.Synge创立。 b. Tisellius用电泳方法分离血清中化学构造相似的蛋白质成分。吸附层析法分离蛋白质及其他物质。 c. Svedberg第一台超离心机,测定了高度复杂的蛋白质。 d. 荧光分析法,同位素示踪,电子显微镜的应用,生物化学的分离、纯化、鉴定的方法向微量、快速、精确、简便、自动化的方向发展。 (二)物理学家、化学家、遗传学家参加到生命化学领域中来 1. Kendrew——物理学家,测定了肌红蛋白的结构。 2. Perutz——对血红蛋白结构进行了X-射线衍射分析。 3. Pauling——化学家,氢键在蛋白质结构中以及大分子间相互作用的重要性,认为某些protein具有类似的螺旋结构,镰刀形红细胞贫血症。 (1.2.3.都是诺贝尔获奖者) 4.Sanger―― 生物化学家 1955年确定了牛胰岛素的结构,获1958年Nobel prize化学奖。1980年设计出一种测定DNA内核苷酸排列顺序的方法,获1980年诺贝尔化学奖。 5.Berg―― 研究DNA重组技术,育成含有哺乳动物激素基因的菌株。 6.Mc clintock―― 遗传学家发现可移动的遗传成分,获1958年诺贝尔生理奖。 7.Krebs―― 生物化学家 1937年发现三羧酸循环,对细胞代谢及分生物的研究作出重要贡献,获1953年诺贝尔生理学或医学奖。 8.Lipmann―― 发现了辅酶A。 9. Ochoa——发现了细菌内的多核苷酸磷酸化酶 10.Korberg——生物化学家,发现DNA分子在细菌内及试管内的复制方式。(9.10.获1959年的诺贝尔生理医学奖) 11.Avery―― 加拿大细菌学家与美国生物学家Macleod,Carty1944年美国纽约洛克菲勒研究所著名实验。肺炎球菌会产生荚膜,其成分为多糖,若将具荚膜的肺炎球菌(光滑型)制成无细胞的物质,与活的无荚膜的肺炎球菌(粗糙型)细胞混合 ->粗糙型细胞也具有与之混合的光滑型的荚膜->表明,引起这种遗传的物质是DNA 1 / 29

中学综合素质考试知识点梳理

综合素质 第一章职业理念 第一节教育观 1、教育观是人们对教育所持有的看法。核心是“教育为了什么”,即教育目的。 ①以提高国民素质教育为根本宗旨 ②面向全体学生的教育 2、素质教育观的内涵③促进学生全面发展的教育 (创新教育是素质④促进学生个性发展的教育 教育的核心)⑤以培养学生的创新精神和实践能力为重点的教育 外延:连贯的、全方位的、全过程的、终身的教育活动 3、实施素质教育的途径 ①国家政策保障 ②推进新课程改革 ③学校管理、课外教育活动、班主任工作(重要途径) 4、新课改带来的教学转变 ①教学从“以教育者为中心”转向“以学习者为中心” ②教学从“教会学生知识”转向“教会学生学习” ③教学从“重结论轻过程”转向“重结论的同时更重过程” ④教学从“关注学科”转向“关注人” 5、实施素质教育的方法 ①发挥教师的作用 ②调动学生学习的主动性和积极性 ③积极开展实践活动 6、素质教育与应试教育的区别 ①全面素质与片面素质的区别(德育为先,五育并举) ②价值取向的区别(培养符合社会进步所需要的人才) ③教育方针的区别(实施了党的教育方针) 应试教育素质教育 教育对象主要面向少数学生,忽视大多数学生面向所有学生 教育目的偏重知识传授,忽视德育、体育、美 育、心理教育和生产劳动教育 德育、体育、美育、心理教育和生产劳 动教育全面进行 能力培养只重视技能训练,忽视能力培养重视各种能力的培养 教学方法以死记硬背和机械重复训练为主,使 学生课业负担过重 启发式、探究式教学,使学生生动、活 泼、主动地学习,减轻学生课业负担 学生评价筛选性评价,以考试成绩作为评价学 生的主要标准甚至唯一标准 发展性评价,评价方式多元,评价主体 多元 教学内容教学内容较难,过于偏重学科体系, 忽视综合性及应用性内容,存在着脱 离学生生活实际,忽视实践等问题 降低教学内容的深度和难度,弱化学科 体系,重视综合,教学内容结合学生经 验、联系实际 教学着眼点局限于学校注重发展性,终身教育,终身学习 7、素质教育的实施障碍 ①对素质教育的误解 ②沉重的课业负担

系统集成项目管理练习题答案

?226. 在进行项目的管理中, 命令、发布指示或行动被称为: A.权力 B.合法的权力 C.领导 D.影响 ?227. 组建的项目团队通常表现出下列哪一项特性? A.职权明确的渠道 B.角色冲突争斗 C.信任 D.认识了解团队 ?228. 职能组织的主要的一个缺点是: A.对于项目员工, 没有事业生涯连续性和缺乏机会 B.没有单个人直接地对整个项目负责 C.没有建立好沟通渠道 D.预算和成本控制的困难 ?229. 经理有项目团队所需要的信息,但是隐瞒住该信息。这是一种: A.正面对抗 B.信息过滤 C.影响区域 D.基本沟通力 ?230. 为了使项目经理完全而且有效地回应项目干系者的个人担忧或委屈,可能有必要 A.要求对问题的书面描述,并且经过项目办公室来递交 B.安排与项目利害相关方的经理进行讨论 C.与项目利害相关者建立更清楚的沟通联系 D.让项目业主作为一个仲裁人 ?231.在项目管理领域内, 许多员工不愿意接受晋升, 因为他们担心他们将会失去满足其需要的源动力。 A.自尊 B.归属 C.自我实现 D.安全 ?232. 在组织图中的虚点线意味着: A.关系的存在与否取决于组织的性质 B.当图表被完成时, 关系还没有被完全地定义 C.非正式的权限与责任的关系 D.独特的而且清楚地定义的关系

?233. 作为一个项目经理,基于你在主题领域上的专长, 你能够说服项目团队来遵照一定的行为方式。团队服从你是因为你的 A.职位权 B.领导力 C.影响力 D.专家权力 ?234. 职权结构包括纯粹的职能型(传统的管理)和双重职权型(矩阵式), 即项目经理和职能经理两者都具有权威的管理方式。矩阵式管理本身也呈现出不同的程度范围变化, 从弱矩阵式, 平衡式到强矩阵式。在项目管理中,弱矩阵式与强矩阵式之间的主要差别是: A.公司的文化 B.项目经理对于所安排的职能资源的相对影响程度 C.项目规模对于公司的重要性 D.信息流?235. 在线性责任图(LRC)中, 不会考虑下列哪一类信息? A.谁负责项目的一般的和操作性的管理 B.在每个活动上必须并且能咨询谁 C.专门化的责任被安排分配在哪里 D.每个活动要什么时候完成?236. 项目经理在创建高效项目团队时,经常会碰到障碍。由于项目角色和责任的安排,为了避免矛盾冲突,项目经理应该: A.设计一个项目团队责任分配矩阵 B.职能小组之间避免分享详细工作情况 C.严密监控团队活动 D.亲自指导团队的工作活动 ?237. 当一个项目需要公司内外的很多组织机构的参与时,担 列哪一个是最需要项目经理承的角色: A.教练 B. 风险经理 C. 整合者 D. 指导者 ?238.项目经理不仅要激励项目团队成员去实现项目目标,还要帮助团队成员完全理解: A.不同的经理可能发出矛盾冲突的指示 B.他们未来的提升只依赖于项目的成功 C.技术知识对项目成功是必不可少的 D.要进行新项目对团队成员不容易 ?239. 在项目执行期间,项目经理和项目团队会出现绩效偏差,必须采取纠正行动。这些纠正行动可能对其他项目经理有所帮助,应该分享并记录归档,借助于: A.变更控制委员会 B. 指导委员会 C. 定量风险分析 D. 经验教训学习过程 ?240. 在下列哪一组织结构类型中, 项目经理职位被认为是全职工作? A.职能组织 B.弱矩阵式组织 C.项目化组织 D。紧急事务式组织

教育学笔记整理版

教育学笔记 教育与教育学 教育的发展 一、教育的概念 教育一词最早出现在《孟子·尽心上》 广义的教育包括家庭教育、学校教育、社会教育。 狭义的教育指学校教育 二、教育的构成要素 教育者:教师是学校教育的主体,在教育过程中发挥主导作用。 受教育者:学生是教育实践活动的对象及学习的主体。 教育影响:教育影响是教育内容、教育方法和教育手段极其联系的总和。 在这三个基本要素中,受教育者和教育内容之间的矛盾是教育中的基本的决定性的矛盾。 三、教育的属性 本质属性:教育是一种有目的的培养人的社会活动。 社会属性:永恒性、历史性、相对独立性、继承性、阶级性。 四、教育功能的分类及教育的个体功能

教育起源的相关学说:

综观古代学校教育,其共同特征是: 1.教育与生产劳动想脱离; 2.教育具有阶级性和等级性 3.教育内容偏重于人文知识,教学方法倾向于自学、对辩和死记硬背。 接下来我们用两张思维导图来记忆近代社会的教育和现代社会的教育: 通过之前的笔记,我们了解了教育发展的历史形态,那世界教育改革的趋势又是什么呢?我们接着往下看:

教育学的研究对象及其发展状况。 首先我们来思考一下,教育的研究对象是什么呢? 那么我们先要了解一下教育学的定义: 教育学是研究教育现象和教育问题,揭示教育规律的一门社会科学。 什么是教育现象呢? 教育现象是教育活动的外在的、表面的特征,包括教育社会现象和教育认识现象。 什么是教育规律呢? 教育规律是教育内部诸因素之间、教育与外部诸因素之间内在、本质、必然的联系。 其次我们来思考一下,教育学的研究任务是什么呢? 教育学的研究任务是阐明教育的基础知识和基本理论,揭示教育教学的基本规律,给教育理论和实践工作者以理论和方法的指导,全面提高教育教学质量,为培养合格的人才服务。这句话比较长,也比较拗口,聪明的你记住了吗? 接下来我们再来看一下教育学和几个概念的联系和区别: 教育学不等于教育方针政策,但二者之间是有联系的,教育方针政策的制定要考虑教育学所阐述的教育科学理论,教育学也要围绕教育方针政策提出的问题、课题,开展科学的研讨和探讨,提供可供参考的意见。 教育学源于教育实践经验,又高于教育实践经验。教育实践经验是学习、研究、发展教育学的基础之一。 教育学是庞大教育科学体系中的基础学科。 教育学的价值与意义: 1.有助于树立正确的教育思想,提高贯彻社会主义教育方针、政策的自觉性。 2.有利于巩固热爱教育事业的专业思想,全面提高教师的素质。 3.有助于认识和掌握教育规律,提高从事教育工作的水平和能力。 4.有助于推动教育改革和教育科学研究。

2021年小学教师资格证考试《综合素质》知识点口诀记忆汇总

2021年小学教师资格证考试《综合素质》知 识点口诀记忆汇总 2021年小学教师资格证考试《综合素质》知识点口诀记忆汇总一、教育观 (一)素质教育观 (1)素质教育以提高国民素质为根本宗旨 (2)素质教育是面向全体学生的教育 (3)素质教育是促进学生全面发展的教育 (4)素质教育是促进学生个性发展的教育(5)素质教育是以培养学生的创新精神和实践能力为重点的教育口诀:“提素”“个性”“创”“两全” (二)我国教育目的的基本精神 (1) 要培养的人是社会主义事业的建设者和接班人;(2)要求学生在德智体美劳等方面全面发展; (3)适应时代要求,强调学生个性的发展。口诀:全面建设个性接班人 (二)新课改的教学观口诀:四个转向 (1)教学从“教育者为中心”转向“学习者为中心” (2)教学从“教会学生知识”转向“教会学生学习” (3)教学从“重结论轻过程”转向“重结论的同时更重过程” (4)教学从“关注学科”转向“关注人” 二、学生观口诀:二独一发 (1)学生是发展的人 (2)学生是独特的人 (3)学生是具有独立意义的人三、教师观 (一)教师角色的转变口诀:“促进”“研究“开”“社区”或四者一社区 (1)从教师与学生的关系看,新课程要求教师应该是学生学习和发展的促进者 (2)从教学与课程的关系看,新课程要求教师应该是课程的建设者和

开发者 (3)从教学与研究的关系看,新课程要求教师应该是教育教学的研究者 (4)从学校与社区的关系看,新课程要求教师应该是社区型的开放教师新课改教师角色的转变(即教师职业的责任) a教师是学生学习的促进者 b教师应该是教育教学的研究者c教师是课程的开发者和研究者 d教师应是社区型的开放教师 e 教师应该是终身学习的践行者五者一社区记忆技巧:学生不仅要在课上接受教育,还要去社区终身学。教师职业的价值对教师个人:可以满足教师作为个体自我生存和发展的需要对他人:对国家,社会,集体和人类都有着巨大的贡献,为社会和进步提供精神财富,培养全面发展的接班人和建设者 (或者①教师是文化传递者②教师是文明促进者③教师是智慧开启者④教师是道德塑造者) (二)教师行为转变口诀:你我他它 (1)在对待师生关系上,新课程强调尊重与赞赏 (2)在对待教学上,新课程强调帮助、引导 (3)在对待自我上,新课程强调反思 (4)在对待与其他教育者的关系上,新课程强调合作四、教师职业道德 口诀:“三爱”“两人”“一终身” (1)爱国守法——基本要求(教师要以身作则,知法懂法守法用法,用法律来规范自己的行为,从而为学生做出示范和榜样。

会计基础重点笔记

会计基础重点笔记

会计基础重点笔记第一章 1、概述: 是什么一种经济管理活动 ⑴定义:做什么核算和监督(基本职能) 怎么做以货币为主要计量单位(工具) ⑵特征: 1)以货为主要计量单位 2)会计信息有专门方法 会计分析方法(财务管理) a、分类:会计检查方法(审计) 会计核算方法 b、会计核算方法的内容 设置账户 复式记账 填制和审核会计凭证 7成本计算 登记账薄 财产清查 编制会计报表 核算 c、基本职能 监督

3)核算:确认、记量、记录、报告 以货币为主要计量单位 a、特点核算发生事中、事后 核算具有连续性、系统性、完整性 4)会计的本质:一种经济管理活动 2、会计对象(资金运动) a、定义:核算和监督的内容 b、工业企业会计对象 银行存款 资金的调整与退出 库存现金机器设备库存现金 工业企业:供产销 商品流通业:供销 二、会计要素:对会计对象的具体化 6大要素:资产、负债、所有者权益、收入、费用、利润 1、资产: 由过去的交易或事项形成的 a、定义由企业拥有和控制的 预期能给企业带来经济利益的资源 流动资产(库存现金、银行存款、应收账款) b、按资金运动分: 非流动资产(固定资产、无形资产)形态基本保持不变的(注:商誉不是无形资产) 2、负债:

由过去交易或事项形成的 a、定义 预期会导致经济利益流出企业的现实义务. a、分类 流动负债(如:短期借款,1年以内) 按流动性分 非流动负债(如:长期借款 1年以上) 3、所有者权益 a、定义:资产扣出负债后由所有者享有的剩余权益 b、会计恒等式:资产=负债+所有者权益 c、内容:实收资本、资本公积、盈余公积、未分配利润(盈余公积、未分配利润又称留存收益)备注:资产=负债+所有者权益是编制资产负债表的理论依据. 反映企业在某特定日期或某一时间点财务状况的报表 4、收入 在日常生活中发生的 a、定义会导致所有者权益增加的 与所有都投入资本无关的经济利益的总流入 a、范围:销售商品、提供劳务、让度资产的使用权 主营业务收入 b、分类 其他业务收入 备注:为客户或第三方代收的款项不作为收入处理. 5、费用

科技哲学班田培沛2013111398《简明中国科学技术史》读书笔记

《简明中国科学技术史话》读书笔记 作者: 科学技术哲学专业27班田培沛 2013111398 当前我国要实现四个现代化,科学技术的发展是关键。科学技术的发展,有一定的历史继承性。中国科学技术为什么古代先进而近代落后,一定有社会历史的原因。研究和了解中国科学技术发展的历史,探讨它的发展规律,将可以起到鉴古论今的作用。本书的主编是陈美东,本书向读者揭示中国科学技术发展的历史进程,不仅叙述中国古代科学技术的成就,也探索近代中国科学技术落后的原因。中国科学技术史,是整个人类文化史的一部分。在它发展的过程中,不断吸取了世界各民族、地区和国家的许多成果,同时也把自己的许多成果传到国外,贡献给全人类。关于中外科技交流,《简明中国科学技术史话》也给予了一定的注意。在这本书的最后,对中国科学技术史上若干规律性问题的加以探讨。这些意见虽然还只是初步的,不成熟或者不完备,甚至有错误,但是可以引起读者去进一步研究,也有助于读者从中国科学技术发展的历史经验中获得有益的借鉴和启示。 新石器时代文化大约在距今一万多年前,晚期智人在长期劳动实践中,智力进一步发展,劳动经验和技能,制作劳动工具的技术,都有显著的提高,这就发展成为现代人。这时候,人类的历史进入了一个新的阶段——新石器时代。新石器时代在技术上有许多新的突破,出现了形制准确合用和有锋利刃口的磨制石器,开始烧制陶器,产生了原始的畜牧业和种植业,并且利用野生葛、麻等纤维编织成织物,还建筑了住房。到现在为止,我国已经发现距今4000年-7000年前

的新石器时代文化遗址大约六七千处。由于我国土地辽阔,地形复杂,各地区气候差异也比较大,在古代交通不便的情况下,各地区造成一定的隔阂、闭塞状态。我们的先民长期在不同的自然环境里生活和进行生产活动,生产工具,生产技术、住房、生活用品等各方面都形成了各自不同的地区特点。考古学家习惯上用某种特定文化遗存最初发现的地名给这种文化命名。我国新石器时代文化著名的有河姆渡文化、大地湾文化、仰韶文化、红山文化、良渚文化、屈家岭文化、大汶口文化、龙山文化、马家窑文化、齐家文化等。原始公社制逐渐走向崩溃,原始社会时期,我们的先民在跟自然界作斗争的时候,是结成群体进行的。四五十万年前的“北京人”,由于工具落后,生产技术水平十分低下,组织能力也很薄弱,只能几十人结成一伙,靠采集和渔猎维持生活。因为生活极端艰苦,大多数人都早年天亡。有人曾经就所发掘到的22个“北京人”化石材料进行鉴定,在14岁以下死亡的就有15人之多,占68.2%。 奴隶社会早在国家形成前,黄帝、尧、舜、禹等就先后活动于黄河流域。启于公元前21世纪建立了我国第一个奴隶制国家夏,经商、西周、春秋四个阶段,我国的奴隶制度经历了1600年的独立的延续、发展期,这是别的文明古国所根本无法比拟的。随着我国奴隶制在公元前476年的结束,我国的历史也就于公元前475年进入了封建社会,这比西欧于476年才开始向封建社会过渡早了一千年。我国于公元前221年就建立了统一的、多民族的集权制国家———秦;而西欧的英法则在1453年英法百年战争结束后才开始走上集权的民族君主国的

系统集成知识点归纳总结

系统集成知识点归纳总结 软件工程:需求分析、设计、编码和测试 软件需求的分析方法(功能需求,非功能需求,设计约束) 1)结构化分析(Structured Analysis):是面向数据流的分析方法,(分层的)数据流图,数据字典,描述加工逻辑的结构化语言判定表判 定树是SA的工具 数据流图描述了对数据的处理流程,用来建立系统的逻辑模型 数据字典在需求分析阶段建立,通常作为数据流图的补充说明 数据字典最重要的作用是作为分析阶段的工具。在结构化分析,数据字典的作用是给数据流图上每个成分加以定义和说明 E-R 通常在需求分析后建立的实体关系模型,可用于描述数据流图数据存储及其之间的关系 需求分析阶段会用到层次方图,用例图,IPO图,不会用到N-S图IPO图:模块的输入输出,处理内容,模块的内部书库和调用关系N-S盒图,程序流程图,PAD图用于表示软件模块的执行过程,而E-R 图不适用 软件需求说明书是需求分析阶段最后的成果之一,包含数据描述功能描述,性能描述,不包含系统结构描述 SRS(Software Requirements Specification), 软件需求说明书 的编制是为了使用户和软件开发者双方对该软件的初始规定有一个共

同的理解,使之成为整个开发工作的基础。包含硬件、功能、性能、输 入输出、接口需求、警示信息、保密安全、数据与数据库、文档和法 规的要求 一个软件系统的生命周期包含可行性分析和项目开发计划,需求分析,设计(概要设计和详细设计),编码,测试维护 程序流程设计在详细设计和实现阶段,软件的总体结构设计在概要设计,并在概要设计说明说进行说明 详细设计:程序流程设计,代码设计,数据库设计,人机界面设计 软件设计包软件的结构设计,数据设计,接口设计和过程设计 结构设计:定义软件系统各主要部件之间的关系 软件测试的对象包括源程序,目标程序,数据及相关文档 软件的完全测试是不可能的原因:输入输出量太大,输出结果太多以及路径组合太多,测试依据没有同统一的标准 软件测试可以分为单元测试,集成测试,(确认测试),系统测试,验收测试 白盒测试:根据程序内部结构进测试,对程序的所有逻辑分之进行测试,逻辑覆盖属于典型的白盒测试,,在进行动态测试时,需要测试软件内部的结构和处理过程,不需要测试产品功能;在进行静态测试时有静态结构分析法,静态质量度量法,代码检查法

生物化学重点笔记(整理版)

教学目标: 1.掌握蛋白质的概念、重要性和分子组成。 2.掌握α-氨基酸的结构通式和20种氨基酸的名称、符号、结构、分类;掌握氨基酸的重要性质;熟悉肽和活性肽的概念。 3.掌握蛋白质的一、二、三、四级结构的特点及其重要化学键。 4.了解蛋白质结构与功能间的关系。 5.熟悉蛋白质的重要性质和分类 导入:100年前,恩格斯指出“蛋白体是生命的存在形式”;今天人们如何认识蛋白质的概念和重要性? 1839年荷兰化学家马尔德(G.J.Mulder)研究了乳和蛋中的清蛋白,并按瑞典化学家Berzelius的提议把提取的物质命名为蛋白质(Protein,源自希腊语,意指“第一重要的”)。德国化学家费希尔(E.Fischer)研究了蛋白质的组成和结构,在1907年奠立蛋白质化学。英国的鲍林(L.Pauling)在1951年推引出蛋白质的螺旋;桑格(F.Sanger)在1953年测出胰岛素的一级结构。佩鲁茨(M.F.Perutz)和肯德鲁(J.C.kendrew) 在1960年测定血红蛋白和肌红蛋白的晶体结构。1965年,我国生化学者首先合成了具有生物活性的蛋白质——胰岛素(insulin)。 蛋白质是由L-α-氨基酸通过肽键缩合而成的,具有较稳定的构象和一定生物功能的生物大分子(biomacromolecule)。蛋白质是生命活动所依赖的物质基础,是生物体中含量最丰富的大分子。 单细胞的大肠杆菌含有3000多种蛋白质,而人体有10万种以上结构和功能各异的蛋白质,人体干重的45%是蛋白质。生命是物质运动的高级形式,是通过蛋白质的多种功能来实现的。新陈代谢的所有的化学反应几乎都是在酶的催化下进行的,已发现的酶绝大多数是蛋白质。生命活动所需要的许多小分子物质和离子,它们的运输由蛋白质来完成。生物的运动、生物体的防御体系离不开蛋白质。蛋白质在遗传信息的控制、细胞膜的通透性,以及高等动物的记忆、识别机构等方面都起着重要的作用。随着蛋白质工程和蛋白质组学的兴起和发展,人们对蛋白质的结构与功能的认识越来越深刻。 第一节蛋白质的分子组成 一、蛋白质的元素组成 经元素分析,主要有C(50%~55%)、H(6%~7%)、O(19%~24%)、N(13%~19%)、S(0%~4%)。有些蛋白质还含微量的P、Fe、Cu、Zn、Mn、Co、Mo、I等。 各种蛋白质的含氮量很接近,平均为16%。因此,可以用定氮法来推算样品中蛋白质的大致含量。 每克样品含氮克数×6.25×100=100g样品中蛋白质含量(g%) 二、蛋白质的基本组成单位——氨基酸 蛋白质在酸、碱或蛋白酶的作用下,最终水解为游离氨基酸(amino acid),即蛋白质组成单体或构件分子。存在于自然界中的氨基酸有300余种,但合成蛋白质的氨基酸仅20种(称编码氨基酸),最先发现的是天门冬氨酸(1806年),最后鉴定的是苏氨酸(1938年)。 (一)氨基酸的结构通式 组成蛋白质的20种氨基酸有共同的结构特点: 1.氨基连接在α- C上,属于α-氨基酸(脯氨酸为α-亚氨基酸)。 2.R是側链,除甘氨酸外都含手性C,有D-型和L-型两种立体异构体。天然蛋白质中的氨基酸都是L-型。 注意:构型是指分子中各原子的特定空间排布,其变化要求共价键的断裂和重新形成。旋光性是异构体的光学活性,是使偏振光平面向左或向右旋转的性质,(-)表示左旋,(+)表示右旋。构型与旋光性没有直接对应关系。 (二)氨基酸的分类 1.按R基的化学结构分为脂肪族、芳香族、杂环、杂环亚氨基酸四类。 2.按R基的极性和在中性溶液的解离状态分为非极性氨基酸、极性不带电荷、极性带负电荷或带正电荷的四类。 带有非极性R(烃基、甲硫基、吲哚环等,共9种):甘(Gly)、丙(Ala)、缬(Val)、亮(Leu)、异亮(Ile)、苯丙(Phe)、甲硫(Met)、脯(Pro)、色(Trp) 带有不可解离的极性R(羟基、巯基、酰胺基等,共6种):丝(Ser)、苏(Thr)、天胺(Asn)、谷胺(Gln)、酪(Tyr)、半(Cys)带有可解离的极性R基(共5种):天(Asp)、谷(Glu)、赖(Lys)、精(Arg)、组(His),前两个为酸性氨基酸,后三个是碱性氨基酸。 蛋白质分子中的胱氨酸是两个半胱氨酸脱氢后以二硫键结合而成,胶原蛋白中的羟脯氨酸、羟赖氨酸,凝血酶原中的羧基谷氨酸是蛋白质加工修饰而成。 (三)氨基酸的重要理化性质 1.一般物理性质 α-氨基酸为无色晶体,熔点一般在200 oC以上。各种氨基酸在水中的溶解度差别很大(酪氨酸不溶于水)。一般溶解于稀酸或稀碱,

基础会计学必背知识点

《会计基础》复习资料 一、学习目的 切勿依靠押题!从业考试秉求全面考核的原则,考点覆盖全面,另外这是一门新的语言,需 要通篇理解,融会贯通,否则会支离破碎,反倒不易通过。 二、重点提示全书 一级重点章节: 第三章会计等式与复式记账; 第四章会计凭证; 第五章会计账簿; 第十章主要经济业务事项账务处理。 第一章总论第 一节会计概述 考点一会计的概念1.会计是以货币为主要计量单位,运用一系列专门方法,核算和监督一个单位经济活动 的一种经济管理工作。2.会计核算方法:设置账户、复式记账、填制和审核凭证、登记会计账簿、成本计算、 财产清查和编制会计报表。 考点二会计的职能1.基本职能:会计核算(首要职能) 和会计监督。 2.会计核算 1)定义:四环节:确认;计量;记录;报告;记账、 算账、报账; 2)特点:货币量度为主;完整性、连续性和系统性 3.会计监督 1)定义:依据:真实、合法性和合理性、效益性 分为:事前、事中和事后监督; 2)特点:价值指标;全过程监督 考点三会计对象1.会计的对象是特定主体的能以货币表现的经济活动。以货币表现的经济活动,又称为 价值运动或资金运动。2.过程:资金投入、资金运用和资 金退出 (1)资金的投入:所有者投入的资金和债权人投入的资金两部分。 (2)资金的循环和周转分为供应、生产、销售三个阶段。 (3)资金的退出包括偿还各项债务、上交各项税费(如所得税)、向所有者分配利润等。提取盈余公积不是资金退出企业。

考点四会计核算的具体内容1.款项和有价证券的收付 (区分款项和有价证券) 款项是作为支付手段的货币资金;有价证券是指表示一定财产拥有权或支配权的证券2.财物的收发、增减和使用 3.债权、债务的发生和结算(区分应收账款、预收账款、应付账款和预付账款各属于债权还 是债务) 4.资本的增减 5.收入、支出、费用、成本的计算(区分理解收入、支出、费用、成本的概念) 6.财务成果的计算和处理财务成果的计算和处理一般包括利润的计算、所得税的计算、利润 分配或亏损弥补等。 第二节会计基本假设 基本假设:会计主体、持续经营、会计分期和货币计量 考点一会计主体1.会计主体是会计确认、计量和报告 的空间范围。 2.凡是法人单位必为会计主体,但会计主体不一定是法律主体。 考点二持续经营 1、持续经营是假定企业将按目前状 态持续经营下去; 2、对固定资产的历史成本计价,分期计提折旧费用是持续经营的体现; 考点三会计分期1、会计分期,是指将企业持续经营的生产经营活动划分为一个个持续的、 长短相同的 期间;(会计分期的前提是持续经营、时间范围)2、具体内 容: 1)会计期间:年度、中期(半年度、季度和月度)。 2)由于会计分期,才产生了当期与其他期间的差别,从而形成了权责发生制和收付实 现制不同的记账基础,进而出现了应收、应付、预提、待摊等会计处理。 3)会计年度自公历每年的1月1日起至12月31日止。 考点三货币计量会计核算以人民币为记账本位币。业务收支以人民币以外的货币为主的单位,可以选定 其中一种货币作为记账本位币,但是编报的财务会计报告应当折算为人民币。 第三节会计基础 考点一会计基础的种类1.类型:权责发生制、收付实现 制 (1)企业:权责发生制 (2)行政单位会计:收付实现制 (3)事业单位会计:除经营业务采用权责发生制外,其他业务也采用收付实现制2.权责发生制:凡是当期已经实现的收入、已经发生和应当负担的费用,不论款项是否

同济大学中建史笔记整理

建筑理论与历史笔记整理 讲课:常青 ps黑字为上课内容,黑粗体是老师在黑板上写的标题,蓝字是我的一点补充说明,红字是我后来能够想起的期末考试选择填空部分。另附缪朴的《中国传统建筑的十三个特征》和有一堂课上拍的部分幻灯照片以及最后一堂课的复习笔记(基本上是以前课堂上讲过的,我懒的再输入一边了)和一次讲座笔记。照片拍的不是很清楚,笔记有点散,老师讲的很快,听不懂的就照着说的记了,错误的地方还请见谅。希望笔记对你有所帮助,祝你成功! 课程大纲 (按照我的理解认为重点的,理出的一条线,供你参考) ◆建筑史观(第一讲、第二讲):这门课的意义 ◆建筑意匠(第三讲~第六讲): 从中国传统木构建筑延续性的基本特征追究成因(地理、文化) ◆建筑演变(第七讲~第十一讲) 演变的现象(第七讲):延续中的变异 演变的成因(第八讲~第十一讲): 丝绸之路:魏晋南北朝(第八讲、第九讲) 西风东渐:中国近代建筑(第十讲、第十一讲) ◆建筑保护(第十二讲) ps 常青推荐的书目:《华夏意匠》,《后现代建筑语言》,《大乘的建筑观》李祖元汉宝德,《园冶注释》,《西方的没落》,《斗拱的起源》斯宾格勒,《清式营造则例》,《浮生六记》,《中国传统建筑的十三个特征》缪朴(《建筑师》36,40),<> 其中缪朴的《中国传统建筑的十三个特征》在上课过程中要求我们都读过 <>为研究生教材,常青老师特别推荐 考试: 期中论文《中国传统木构建筑的特征》 期末考试选择填空:上课笔记中内容 作图题:(意象作图)1.《中国传统木构建筑特征》 2.《21世纪外滩印象》 作文题:《从国家大剧院看保罗?;;安德鲁的建筑历史观》 ps.常青认为这门课的评分应当是论文的形式而非考试,考试是学校安排,迫不得以的。我觉得很对,因为写论文能逼着我们去查很多资料,看许多别人的观点,就算不感兴趣,打着抄一篇论文主意的学生也会去读那么几篇文章的。这远比考试死背笔记来的收获大。所以我也在次提一提,供你参考。 第一讲:概说 ●历史观,历史意识: 1.涉及过去和现在,深入骨髓的理解即往和历史的关系 一切历史都是当代史——[意]柯罗奇 2.《建筑理论的历史》维特鲁维 3.《建筑学的理论与历史》 特点:⑴记事本末,事件体(类似于《资治通鉴》对事件的分析)对建筑实践的分析, 有的放矢,“分析问题,专题性”

系统集成项目管理工程师教材笔记精华归纳整理

教材结构 第一章信息化基础知识 1、信息化基础知识 2、电子政务 3、企业信息化 4、商业智能 第二章信息系统服务管理 1、信息系统服务管理体系 2、信息系统集成资质管理 3、信息系统工程监理 4、ITIL与IT服务管理、信息系统审计 第三章信息系统集成专业技术知识 1、信息系统集成简述 2、信息系统建设 3、软件工程 4、面向对象系统分析与设计 5、软件架构 6、典型应用集成技术 7、计算机网络知识 第四章项目管理一般知识 1、什么是项目 2、项目的组织方式 3、项目生命周期 4、典型的信息系统项目的生命周期模型 5、单个项目的管理过程 6、项目管理高级话题 第五章立项管理 1、立项管理内容 2、建设方的立项管理 3、承建方的立项管理 4、签订合同

第六章项目整体管理 1、项目整体管理的主要活动和流程 2、项目启动 3、编制项目范围说明书(初步) 4、制定项目管理计划 5、指导和管理项目执行 6、监督和控制项目 7、整体变更控制 8、项目收尾 第七章项目范围管理 1、产品范围与项目范围 2、编制范围管理计划 3、范围定义 4、创建工作分解结构 5、范围确认 6、范围控制 第八章项目进度管理 1、项目进度管理概述 2、活动定义 3、活动排序 4、活动资源估算 5、活动历时估算 6、制定进度计划 7、项目进度控制 第九章项目成本管理 1、项目成本管理概述 2、制定项目成本管理计划 3、项目成本估算 4、项目成本预算 5、项目成本控制 第十章项目质量管理 1、质量管理基础 2、制定项目质量计划 3、项目质量保证 4、项目质量控制

1、项目人力资源管理的定义及有关概念 2、项目人力资源计划编制 3、项目团队组织建设 4、项目团队管理 第十二章项目沟通管理 1、项目沟通管理的基本概念 2、沟通管理计划编制 3、信息分发 4、沟通管理对组织过程资产的邮箱 5、绩效报告 6、项目干系人管理 第十三章项目合同管理 1、项目合同 2、项目合同的分类 3、项目合同签订 4、项目合同管理 5、项目合同索赔处理 第十四章项目采购管理 1、采购管理的相关概念和主要过程 2、编制采购计划 3、编制询价计划 4、询价 5、招标 6、合同及合同收尾 第十五章信息(文档)和配置管理 1、信息系统项目相关信息(文档)及其管理 2、配置管理 第十六章变更管理 1、项目变更的基本概念 2、变更管理的基本原则 3、变更管理组织机构与工作程序 4、项目变更管理的工作内容

认知笔记整理版

认知笔记整理版 第一章绪论 两个重要的问题:心理过程是如何发生的?我们如何知道心理过程是如何发生的? 认知:研究心理过程mental processes 如何产生的,sensory input is transformed转化、reduced 集中认知资源于一定的刺激上以待进行精细加工、elaborated精细加工、stored存储、recovered 复述and used使用。[即:编码操作(转换、缩减、添加)&记忆和应用操作(储存、提取、运用)] 认知心理学研究的领域:知觉、注意、记忆、一般知识组织、表象、语言、问题解决、推理Eg: 语言产生(心理过程,依赖于认知系统,非常快):思维表达——概念形成——选择词汇——语法概念、线性顺序(细分的心理结构) 心理表征:加工时,要转化成心理符号; 【发展简史】 (1879年以前,心理学时而敲敲哲学的大门,时而敲敲生理学的大门) 1879年冯特科学心理学实验室;(内省是指被训练过的观察者仔细地、小心地注意他们自己的感觉,精确地辨别这些感觉,并尽可能客观地报告这些感觉。) 19世纪艾宾浩斯研究记忆(学习无意义音节,测量重学时节省的时间); 19世纪威廉詹姆斯注重生活中的心理学; 20世纪华生行为主义;(行为主义是一种仅仅依靠客观的、可观察的反应的途径,它强调行为的环境决定性,而不是心理过程。) 20世纪格式塔心理学顿悟对问题解决的影响;(人有一种将他们所看到的东西组织起来的倾向,“整体大于部分之和”。顿悟——问题的各个部分最初看起来彼此无关。然而,随着突然的“顿悟一闪”,各个部分就会配合在一起产生解决办法。) 1956年9月11日认知心理学的生日; 当代认知心理学的出现: 对行为主义的观点越来越不满——皮亚杰发展心理学(儿童如何发展); 信息加工途径*(心理过程可以解释为,系统从刺激到反应的一系列序列的阶段中,所完成的信息加工。内部表征:信息→转化为有意义的符号→脑); 信息加工模型与神经科学模型。 生态学效度(Ecological Validity):实验室研究所获得的结果也应该能够适用于现实世界中自然发生的行为。(认知心理学遭到的批评:生态学效度低;) 认知科学cognitive science:试图回答有关心mind的问题,它考察知识的性质、组成、发展和运用;包括心理学、哲学、语言学、人类学、人工智能和神经科学,甚至是社会学和经济学——跨学科性。 认知神经科学cognitive neuroscience:认知活动的神经机制,着重考察大脑的结构和功能是如何解释认知过程的;神经水平和认知概念水平之间架起解释的桥梁(心理学与神经科学的

会计基础必背知识点整理教学内容

会计基础必背知识点 整理

第一章总论 1、会计是以货币为主要计量单位,反映和监督一个单位经济活动的一种经济管理工作。 2、会计按报告对象不同,分为财(国家)务会计(侧重于外部、过去信息)与管理会计(侧重于内部、未来信息) 3、会计的基本职能包括核算(基础)和监督(质保),会计还有预测经济前景、参于经济决策、评价经营业绩的职能。 4、会计的对象是价值运动或资金运动(投入—运用—退出) (空间范围,法人可以作为会计主体,但会计主体不一定是法人)、5、会计核算的基本前提是会计主体 持续经营(核算基础)、会计分期、货币计量(必要手段) 6、会计要素是对会计对象的具体化、基本分类,分为资产、负债、所有者权益、收入、费用、利润六大会计要素。 7、会计等式是设置账户、进行复式记账和编制会计报表的理论依据。资产=权益(金额不变:资产一增一减、权益一增一减益同减)资产=负债所有者权益(第一等式也是基本等式,静态要素,反映财务状况,编制资产负债表依据)收入-费用=利润(第二等式,动态要素,反映经营成果,编制利润债表(损益表)依据)取得收入表现为资产增加或负债减少发生费用表现为资产减少或负债增加。 第二章会计核算内容与要求

1、款项和有价证券是流动性最强的资产。款项主要包括现金、银行存款、银行汇票存款、银行本票存款、信用卡存款、信用证保证金存款、备用金等;有价证券是指国库券、股票、企业债券等。 2、收入是指日常活动中所形成的经济利益的总流入。支出是指企业所实际发生的各项开支和损失,费用是指日常活动所发生的经济利益的总流出。成本是指企业为生产产品、提供劳务而发生的各种耗费,是按一定的产品或劳务对象所归集的费用,是对象化了的费用。收入、支出、费用、成本是判断经营成果及盈亏状况的主要依据。 3、财务成果的计算和处理一般包括:利润的计算、所得税的计算和交纳、利润分配或亏损弥补 4、会计记录的文字应当使用中文。在民族自治地区,会计记录可以同时使用当地通用的一种民族文字。在中华人民共和国境内的外商投资企业、外国企业和其他外国组织的会计记录,可以同时使用一种外国文字。 第三章会计科目与账户 1、会计科目是对会计要素的具体内容进行分类 2、会计科目的设置原则是合法性、相关性、实用性。 3、账户根据会计科目设置的,具有一定格式和结构,用于记录经济业务的。 4、会计科目(账户)按反映业务详细程度分为总账和明细账。按会计要素不同可分为资产、负债、所有者权益、成本、损益。 5、账户的四个金额要素及关系:期末余额=期初余额本期增加发生额-本期减少发生额。

科学史读书笔记

《科学史》读书笔记 在科学史上,每一时代的科学家之间,或因为志同道合,或因为学术论争,而通过种种渠道互相交往。 西方医学和中国医学不同,特别是在外科方面。西方较早拜托了亚里士多德的水、火、土、气等,从自然哲学中分化出来,并以严格的解剖学为基础。中医虽然早在战国时期就笼统的提出了人体的血液循环,但是没有摆脱自然哲学思想的舒服,缺乏解剖学和生理学的严格论证,虽有许多秘方真传,但多属经验性的。 近代自然科学的革命 哥白尼的日心说 尼古拉.哥白尼N. Copernicus, 1473-1543,出生在波兰的一个商人家庭。学习过医学、数学、法律,天文学、希腊语言和哲学。在意大利还接受了人文主义思想的影响,特别是意大利人文主义的领导人、天文学家诺瓦拉的思想对他的影响最大。 经过30多年的努力,他写成了一部六卷本的不朽著作《天体运行论》。成书后,由于社会原因无法刊行,一直到哥白尼70岁时,才得以出版。但此时的哥白尼已重病在身,一直到去世也没能再读一遍。 哥白尼的《天体运行论》中的日心说,完全否定了《圣经》上肯定的托勒密的地心说,即否定了把地球置于宇宙中心的宗教教义,建立了科学的宇宙观。从此,自然科学就从神学中解放了出来。《圣经》的一贯正确和绝对真理的画皮被撕碎了,人们的精神枷锁也随之被打碎了。 哥白尼的日心说威胁着宗教神学的存在,所以《天体运行论》长期被列为禁书,不许流传。传播和支持这一学说的布鲁诺被罗马教廷处死,这足以说明宗教对日心说的恐惧。 《天体运行论》是科学向神学写的一篇挑战书,其中包括的科学内容和深远意义,远远超出了天文学的范围。这部著作可以说是近代科学真正开始的标志。 哥白尼是天文学史上第一个自觉不自觉地运用“简单性原则”的人,他以圆形轨道为基础的数学计算,比托勒密体系简答得多,所以易于被人理解。早在意大利求学时,哥白尼就接受了他老师的观点:托勒密的地心说体系太复杂,根本不符合数学上的“和谐原理”。尽管它被写进了《圣经》,并统治了人们思想1000多年,但其中一大套本轮、均轮的计算,仍然是繁杂而不协调的。

基础乐理笔记完整版

基础乐理笔记集团标准化办公室:[VV986T-J682P28-JP266L8-68PNN]

基础乐理 课堂笔记整理 为什么要学习基础乐理基础乐理都包括哪些内容基础乐理是一门音乐公共基础课,是音乐理论科目中第一门系统讲授音乐理论基础知识的课程;作为一门音乐公共基础课,与其他音乐课程的关系,都是极为密切的。 林伟雄整理 2010/7/28

第一章音及音名 一、音是怎么样产生的 二、音的性质 三、乐音与噪音 四、乐音体系 五、音名 六、音组 七、自然半音、全音、变化半音、全音、 一、音是怎么样产生的 音是由于物体的振动而产生的,物体振动产生声波。声波在空气中传播,作用于听觉器 官,使听到了声音。 人耳能听到的声音,大致在每秒钟振动11HZ——20000HZ之间。 二、音的性质 音的性质有四种:音高、音值、音量和音色。 音高是由发音体在每秒的振动次数来决定的,振动次数多,音则高;振动次数少,音则 低。 音值是由发音体振动时延续时间的长短所快定,延续时长、音则长;反之,音则短。 音量是由发体振动时振幅的大小来快定的,振幅大音则强,反之音则弱。 音色是由收发音体振动时泛音的多少及发音体的性质,形状等多种因素所决定。 音的四种性质,在音乐表现中的作用,各不相同。 三、乐音与噪音 振动规则的,听起来音高十分明显的,叫做“乐音”;振动不规则的,听起来音高不明显的,叫做“噪音”。 在音乐中使用的音,主要是乐音,但噪音也不是不可缺少的。 四、乐音体系 音乐中所使用的基本乐音的总和,叫做“乐音体系”。 乐音体系的各音,叫做“音级”。 将乐音体系的音,按照一定音高关系和次序,由低到高,或由高到低,依次排列起来,叫做“音列”。 在音乐体系中,音高关系的最小计算单位,叫做“半音”。两个半音相加,叫做“全 音”。在键盘上,相邻两键(包括黑键)构成半音,隔开一个琴键的,构成全音。 五、音名 乐音体系中的名音级,都有各自的名称,这就是“音名”。有C、D、E、F、G、A、B、表示。 Do、re、mi、fa、sol、la、si,多用于歌唱,故叫做“唱名”。 以七个字母命名的音级,叫做“基本音级”。 将基本音级加以高或降低而得来的,叫做“变化音级”。 六、音组 为了区分音名相同而音不同的各音,于是便产生了音的他组,这就是“音组”。 最中间的“小字一组”,表示为c1、d1、e1、f1、g1、a1、b1向右低次为“小字二组”至“小字五组”,标记为小写字母右上角加数字“1”、“2”……“5”。小字五组只有一个音“c5”。

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