临床检验基础
Clinical Laboratory Base
课程编号：J6500M003
课程类别：专业课程
实验课性质：非独立设课
适用专业：医学检验
实验学时：48学时实验学分：1.0学分
先修课程：临床检验基础
实验指导书：吴晓蔓主编的《临床检验基础实验指导》，由人民卫生出版社于2007年出版。
开课实验室名称及地点：临床医学实验中心，实验教学楼6号楼。
一、实验教学目的和基本要求
临床检验基础是临床检验医学的专业课之一，它是通过实验的各种方法包括感官检查，理学检查，化学检查，显微镜检查以及自动化仪器检查等手段，对病人的血液，体液，分泌物和排泄物等标本进行检验、分析以获取病原，病理变化及脏器功能状态等资料的学科。因此，临床检验基础的实验课在临床检验基础的教学中显得非常重要，其目的主要在于通过实验进一步巩固学生的理论知识，提高学生临床检验基础的基本操作技术，培养学生对临床检验的严肃态度和实事求是的工作作风。实验教学的基本要求是让学生掌握实验的目的，原理，了解实验的器材，标本采集，操作过程及注意事项，除必要的示教外大多实验要求学生在规定的时间内完成，并写出符合要求的实验报告。
二、实验课程内容和学时分配（见附表）
实验课程内容和学时分配
实验项目序号实验项目
名称
实验内容
学
时
分
配
实
验
属
性
实
验
类
型
每
组
人
数
实验
要求
每组主要消耗材料
名称、数量、消耗额
实验一血液标本
的采集和
血涂片的
制备
1、血液的采集
2．血液涂片的制备
3
专
业
类
验
证
性
2 必做玻片、瑞氏染色液
实验二血液的一
般检验
1．器材、试剂的准备。
2．RBC、WBC、WBC
3 专
业
验
证
2 必做
血小板稀释液
牛鲍氏计数板
分类、PLT计数实验室操
作。
3．RBC、WBC、WBC
分类PLT、计数结果换
算。
类性
实验三血栓与止
血的一般
检验
l．器材、试剂的准备
2．PT试管法实验操作
3、APTT测定试管法的实
验操作
4、报告方式
3
专
业
类
验
证
性
2 选做PT、APTT试剂盒
实验四尿液生成
和标本的
采集及处
理
l．器材、试剂的准备
2、防腐处理
3
专
业
类
验
证
性
2 选做防腐试剂、尿杯
实验五尿液理学
检查和化
学检查
1．器材、试剂的准备。
2．尿液外观、酸碱度、
比密、尿渗量测定的实验
过程。
3．尿液理化检查的报告
方式。
3
专
业
类
综
合
性
2 选做
酸度计、比密计及渗
透压计
实验六尿沉渣检
查1．器材、试剂的准备。
2．尿沉渣非染色法、染
色法检查的实验过程。
3．尿沉渣检查的报告方
式。
3
专
业
类
验
证
性
2 必做玻片、生理盐水
实验七尿液分析
仪及其临
床应用
1．器材、试剂的准备。
2．尿液干化学分析仪测
定的实验过程和注意事
项。
3．测定结果的分析与判
断。
3
专
业
类
综
合
性
2 必做
尿液干化学分析仪配
套尿试剂条
实验八脑脊液检
验
1．器材、试剂的准备。
2．脑脊液理学检查和用
显微镜进行细胞计数和
分类检查的实验过程。
3．脑脊液检查的报告方
式。
3
专
业
类
验
证
性
2 必做试管、玻片
实验九浆膜腔积
液检验
及病理分
析
1．器材、试剂的准备。
2．浆膜腔积液的理学检
查和显微镜检查的实验
过程。
3．浆膜腔积液蛋白定性 3
专
业
类
综
合
性
2 必做试管、玻片、量筒
试验(李凡他试验)的实验操作。
4．浆膜腔积液检查的报告形式。
实验十粪便检验1．器材、试剂的准备。
2．粪便理学检查和显微
镜检查的实验过程。
3．粪便隐血试验(邻一联
甲苯胺法)的方法及评
价、单克隆抗体金标法的
测定方法。
3
专
业
类
验
证
性
2 必做
试管、玻片、邻一联
甲苯胺、单克隆抗体
金标试条
实验十一生殖系统
分泌物检
验
1．器材、试剂的准备。
2．阴道分泌物检查理学
检查和显微镜检查的实
验方法。
3．精子形态检查
4、前列腺液检查中理学
检查和显微镜检查的实
验方法
3
专
业
类
验
证
性
2 必做试管、玻片
实验十二脱落细胞
检验基本
知识、检
验技术及
临床应用
1．阴道脱落细胞检查
2．浆膜腔积液脱落细胞
检查
3、病理细胞与正常细胞
显微镜检查
3
专
业
类
综
合
性
2 选做试管、玻片
实验十三各系统脱
落细胞检
查细针吸
取细胞学
检查
1．阴道脱落细胞检查
2．浆膜腔积液脱落细胞
检查
3．理学检查和显微镜检
查的实验方法
3
专
业
类
验
证
性
2 选做试管、玻片
实验十四血型与输
血检验
1．器材、试剂的准备。
2．试管法．ABO血型的
鉴定(正定型)。
3．试管法．ABO血型的
鉴定(反定型法)。
3
专
业
类
验
证
性
2 必做
试管、玻片、抗A、B
血清
实验十五尿蛋白定
性检查1．器材、试剂的准备。
2．磺基水杨酸法测定尿
蛋白的实验过程和加热
乙酸法测定尿蛋白的过
程。3．干扰因素的控制
与分析。
3
专
业
类
综
合
性
2 必做
试管、磺基水杨酸、
冰醋酸、尿干化学试
剂条
实验十六标本存放
时间对血
细胞分析
1．实验设计。
2．对RBC检验的影响。
3．对WBC检验的影响。3
专
业
类
设
计
性
2 选做
血细胞分析仪配套试
剂、瑞氏染色液等
结果的影
4．对血小板检验的影响
响
三、考试方法及成绩评定方法：
1、考试方法：
（1）实验带教老师对实验报告进行评分；
（2）操作技能考试；
2、成绩评定方法：
（1）实验操作技能占70%；
（2）平时表现占10%；
（3）实验报告占20%；
四、适用专业及年级：适用于医学检验专业
五、主要仪器设备：牛鲍氏计数板、显微镜、血细胞分析仪、血凝仪、酸度计、721分光光度计、尿干化学分析仪、比密计、量筒。
六、说明：本大纲是在上版大纲的基础上根椐2008培养方案修改。
制定人：万腊根审核人：王小中
临床检验基础（Clinical Laboratory Base）
课程编码：J6500M003实验指导书：《临床检验基础实验指导》
面向专业：医学检验
综合性实验项目名称血细胞分析仪间的比对
【实验目的】掌握血细胞分析仪间的方法对比试验的程序、结果判断。
【实验原理】
根据NCCLS《EP9—A文件》的要求对一组病人样品用新的检测系统与参考检测系统（原有的检测系统或公认的参考检测系统），同时进行分析测定，再用各种统计学方法或要求，计算出新的检测系统的系统误差。
【实验器材】
血细胞分析仪（两台以上）及配套试剂，新鲜EDTA抗凝血标本8×5份
【操作步骤】
每天应测定8份标本，每份标本都用两个检测系统进行双份测定，至少连续测定5d，共40份标本，测定时先对样本排序，按顺序1至8测定第一次，再按8至1测定第二次，再按下表收集各检测项目（WBC、RBC、HGB、PLT、HcT）试验数据。
表：方法学比较试验数据记录表
标本号
新的检测系统参考检测系统
Yi-Xi Yi1 Yi2 Yi Yi1-Yi2 Xi1 Xi2 Xi Xi1-Xi2
1
2
3
4
5
:
:
:
37
38
39
40
平均值DY DX E
表中：Yi1=
Yi2=
Yi= Yi1－Yi2=
Xi1=
Xi2=
Xi= Xi1－Xi2=
Yi－Xi=
DY=
DX=
E= 新的检测系统第i个标本第1批次测定结果
新的检测系统第i个标本第2批次测定结果
新的检测系统第i个标本平均值
新的检测系统第i个标本第1批次测定结果减第二批次测定结果参考检测系统第i个标本第1批次测定结果
参考检测系统第i个标本第2批次测定结果
参考检测系统第i个标本的平均值
参考检测系统第i个标本第1批次测定结果减第2批次测定结果两个检测系统第i个标本两次测定均值的差值
为新的检测系统成对结果差值的均值
为参考检测系统成对结果差值的均值
两个检测系统计算出的差值均值的均值（DY+DX/2）
3、离群点的判断
（1）一般的判断方法：以参考检测系统所得结果为横坐标，新的检测系统所得结果为纵坐标，将两个检测系统测定结果及时绘于座标纸上，及时检查结果，各点的连结应该是一条直线，如出现明显的离群点，即出现明显的系统误差应查找原因，重新检测数据。
（2）NCCLS《EP9-A文件》的判断标准：若两个检测系统存在差值，则有Yi1—Yi2，Xi1—Xi2或Yi—Xi超出限值：4XDY、4XDX或4XE时则视为离群点，在全部40个数据中可排除一个离群点，若离群点多于一个，则应增加8个实验数据。
4、相关回归分析
（1）计算回归方程和相关系数，将两个检测系统所得到的数据用数学方法求出一直线回归方程Y=bX+a 和计算出相关系数r 。
X 为参考检测系统的检测结果 Y 为新的检测系统的检测结果 a 为回归线的截距，代表恒定系统误差 b 为回归系数，代表比例系数误差
r 为两个检测系统的相关程度，可用于检验X 取值范围是否适当，一般要求r 大于或等于0.975（或r 2大于或等于0.95），则认为X 范围是合适的，若r 小于0.975，应再多做实验，扩大数据范围。
（2）计算系统误差和随机误差
当r≥0.975时可利用回归方程计算出新的检测系统的系统误差和随机误差。 在检测系统对比试验中，经数理统计得出的直线回归方程为：Y=bX+a ，理想的斜率b=1，截距a=0，这时Y=X ，两个检测系统的检测结果完全吻合，回归线为通过原点的直线。如a≠0，b≠1时，表示新的检测系统相对于参考检测系统存在系统误差，通过回归方程可以计算任意一点（或任意浓度）的系统误差，但临床上在医学决定水平处的浓度（Xc ）系统误差最有意义，因此对应于Xc 的系统误差计算：
Yc=bXc+a
SE=Yc －Xc=（b －1）Xc+a
若SE ＜Ea 则该新的检测系统在评价的某个范围内（Xc 范围内）可以用于临床实验室。
通过回归方程求了Y 值与新的检测系统在实际测定值Y 间有一定的差异，但可以用回归线的标准差，表示实测值Y 在回归线周围的分布情况称为回归线标准误，以S Y/X 表示，它可以定量表示组成回归线各点的离散程度即随机误差。
()2
2
--=
∑n Y Y S X
Y
)
RE=S Y/X
表：美国CLIA，88能力验证计划的血细胞分析项目的允许总误差检验项目可接受范围
RBC HCT HGB WBC PLT T±6% T±6% T±7% T±15% T±25%
【临床意义】
1.临床实验室引用一个新的检测系统对病人标本检测前必须对其正确度
进行评价，确定其系统误差在允许误差范围之内，才能应用于临床。
2.同一实验室有两台以上检测相同项目的仪器，在应用于临床前必须做比
对试验以确保不同仪器间的相同项目的结果具有一致性。
【注意事项】
1.样品中分析物的浓度应包括在常规工作中可能遇到的整个分析范围（一定
要有包括医学决定水平浓度的样品）。
2.浓度值超出参考范围的样品最好要超过总样本的一半。
综合性实验项目名称尿蛋白定性检验
实验项目学时：3学时实验要求：■必修□选修一、实验目的及要求：
掌握尿蛋白定性检验的各种方法及各种检验方法的特性
二、实验基本原理：
1、磺基水杨酸法：生物碱试剂磺基水杨酸在酸性条件下与蛋白质氨基酸阳离子结合，形成不溶性肉眼可见的蛋白盐沉淀。
2、加热醋酸法：蛋白质加热后变性，加稀醋酸后使尿液PH值达到蛋白质的等电点，使得变性凝固的蛋白质形成肉眼可见的白色沉淀。
3、PH指标剂蛋白误差法：尿干化学试剂模块中主要含有酸碱指示剂溴酚蓝、缓冲剂，在PH3.2时带负电荷，可与尿中白蛋白结合生成复合物，导致溴酚蓝进一步电离产生更多的H+，当超过一定缓冲范围时，指示剂发生颜色改变，变色程度与蛋白质含量相关。
三、主要仪器设备及实验耗材：
1、尿干化学分析仪；
2、试管
3、吸管
4、酒精灯
5、试剂：尿干化学试条、冰醋酸、磺基水杨酸。
四、实验内容或步骤：
1、标本：准备4个尿液标本，1号标本不含尿蛋白；2号尿标本含微量尿蛋白（0.05～0.1g/L）；3号尿标本蛋白含量高（＞1g/L）；4号尿标本仅含球蛋白。
2、按照《临床检验基础实验指导》分别用三种方法对4个尿标本进行检验，结检验的结果进行记录
3、对三种方法对上述四种标本进行检验的结果进行比较分析，得出各实验方法的分析灵敏度和特异性
五、思考题
1、不同的实验方法测定的结果有什么不同？
2、通过对不同的实验方法结果进行分析，各实验方法的分析灵敏度和特异性？
六、主要参考书
1、《临床检验基础实验指导》，吴晓蔓主编，人民卫生出版社于2007年出版。
2、《临床检验基础》，熊立凡主编，人民卫生出版社于2007年出版。
设计性实验项目名称标本存放时间对血细胞分析结果的影响实验项目学时：3学时实验要求：□必修■选修一、实验目的及要求：
了解全血标本存放时间对血细胞分析仪测定红细胞、白细胞和血小板各参数测定结果的影响探讨
二、主要仪器设备
1、血细胞分析仪；
2、显微镜；
3、牛鲍氏计数板；
4、玻片、试管、吸管等。
5、试剂：血细胞分析仪配套试剂、瑞氏染液等。
见表
《临床检验基础》修订论证意见表
专家姓名桂炳东、万腊根、王伶
郑晓丰、李俊明、谭立明
论证
时间
2009年5月12日
论证意见：
临床检验基础是临床检验医学的专业课之一，其实验课在临床检验基础的教学中显得非常重要，其目的主要在于通过实验进一步巩固学生的理论知识，提高学生临床检验基础的基本操作技术，培养学生对临床检验的严肃态度和实事求是的工作作风。实验教学的基本要求是让学生掌握实验的目的，原理，了解实验的器材，标本采集，操作过程及注意事项，除必要的示教外大多实验要求学生在规定的时间内完成，并写出符合要求的实验报告。
经专家组讨论，一致认为本大纲的修订是按照《临床检验基础》教学计划为依据，从医学检验人才的培养目标出发，体现创新教育观念、改革精神和素质教育的思想，吸收本学科专业的新知识、新内容和课程体系改革研究成果，注重本课程内容的有机衔接及教学方法与手段的改革。最大限度的利用现有的实验设备条件，通过对实验课程内容的调整与整合，开发新的实验内容，设置综合性、设计性实验，使有综合性、设计性实验的课程数达到培养学生的要求，实验内容更新率达到30%以上。按照本大纲的要求可在教学中贯彻循序渐进和理论联系实际的原则，选择有代表性的教学内容，以实验操作和示教讨论为主，还包括一些综合性、设计实验等，有利于加深学生的感性认识，使学生掌握临床检验基础的基本操作技术，培养学生对临床检验的严肃态度和实事求是的工作作风。
同意实施。
组长签名：
年月日
学院审核意见：
公章：
年月日
第一章血液一般检验的基本技术 ㈠单项选择题(A型题) 1. 成人静脉采血时，通常采血的部位是(A1型题)"实践技能" A 手背静脉 B 肘部静脉 C 颈外静脉 D 内踝静脉 E 股静脉 [本题答案] 2. 静脉采血时，错误的操作是(A1型题)“实践技能" A 从内向外消毒穿刺部位皮肤 B 进针时使针头斜面和针筒刻度向上 C 见回血后松开压脉带 D 未拔针头而直接将血液打入容器 E 如需抗凝应轻轻混匀 [本题答案] 4. EDTA盐抗凝剂不宜用于(A1型题)“实践技能" A 红细胞计数 B 白细胞计数 C 血小板计数 D 白细胞分类计数 E 凝血象检查和血小板功能试验 [本题答案] 6. 枸橼酸钠的抗凝原理是(A1型题)"基础知识" A 阻止凝血酶的形成 B 阻止血小板聚集 C 除去球蛋白 D 与血液中的钙离子形成螯合物 E 除去纤维蛋白原 [本题答案] 7. 关于抗凝剂，错误的叙述是(A1型题)"专业知识" A EDTA-Na2溶解度大于EDTA-K2 B EDTA盐与血浆中钙离子生成螯合物 C 肝素作为抗凝血酶Ⅲ的辅因子而抗凝 D 枸橼酸钠可用于红细胞沉降率测定 E 枸橼酸钠可用于输血保养液 [本题答案] 8. 对草酸盐抗凝剂，错误的叙述是(A1型题)"基础知识"
A 草酸铵可使血细胞膨胀 B 双草酸盐可用于血细胞比容测定 C 对Ⅴ因子保护差 D 过去用于凝血象的检查 E 可干扰血浆中钾，钠和氯的测定 [本题答案] 9. ICSH建议，血细胞计数时首选抗凝剂是(A1型题)"基础知识" A EDTA-K2 B EDTA C EDTA-Na2 D 肝素 E 枸橼酸钠 [本题答案] 11. 肝素抗凝主要是加强哪种抗凝血酶的作用(A1型题)"基础知识" A 抗凝血酶Ⅰ B 抗凝血酶Ⅱ C 抗凝血酶Ⅲ D 抗凝血酶Ⅳ E 抗凝血酶Ⅴ [本题答案] 13. 关于双草酸盐抗凝剂，错误的说法是(A1型题)"专业知识" A 草酸钾可使红细胞缩小 B 草酸铵可使红细胞胀大 C 不可用于血细胞比容测定 D 过去用于凝血象的测定 E 目前应用较少 [本题答案] 14. 凝血象检查时，抗凝剂最好用(A1型题)"专业知识" A EDTA-K2 B 38g/dl枸橼酸钠 C 109mmol/L枸橼酸钠 D 肝素 E 草酸钠 [本题答案] 16. 关于细胞成分的特性，正确的说法是(A1型题)"基础知识" A 嗜酸性颗粒为酸性物质
高职临床检验基础实验教学技能达标与评价 高等职业教育的培养面向目标是专业的岗位实践人员，当下我国大部分的医学类高职院校都是在中专卫校基础上升级而来的，其授课不管是教授方式还是当中蕴含的内容，都是中专的延续和升级。在教学理念上还未能与高职教育有良好的适应，高职临床检验课程开设的目的是为了培养学生的临床检验技术，教学的重点集中在临床检验的基本操作技能的传递上。 标签：高职教育；临床检验；教学技能 1.技能目标达标的方法 （1）技能达标目标展示。开展实验教学之前，教师需要先将实验教学内容的技能达标目标告知学生，让学生能够明白每一项实验教学的内容其需要达到的实际教学目标以及应该达到的技能操作目标。 （2）技能达标教学方式。在实验教学的过程中，教学步骤按照教师示范、学生模仿、组合练习以及熟练掌握四个阶段执行，让学生逐层逐级的掌握到相应的技能操作目标。例如，在白细胞计数的实验教学过程中，实验动作开始之前进行技能目标的初步展示，首先，教师对皮肤进行消毒，采集毛细血管血液、使用微量吸管、完成计数池充液等动作；其次，学生在教师的指导作用下开展、模仿每一个实验环节；最后，再把每个单一的练习环节组合练习而实现白细胞计数实验教学目标完成的作用。在开展下一项实验教学的过程中，例如，嗜酸性粒细胞计数，学生在完成了毛细血管采血、使用微量吸管与细胞计数等方面的操作动作后，就可以较为熟练地掌握此项技能的操作。 （3）技能的补充练习。在技能目标评价过程中不达标的学生，后期都需要开展技能的补充练习，以实现技能培训达标的目的。技能的补充练习包括的内容：帮助学生找寻问题出现的原因、开放实验室帮助学生开展实验技能练习、完成规定的实验操作内容、获取技能目标实现的必要建设条件；之后安排学生下临床实习、开展实习管理，通过考试和实践考核的方式实现课程的基本培养目标。 2.提升高职临床检验基础实验教学技能有效性的策略 （1）实验模块教学。完成一个单元的各个子实验操作后，可以依照实验教学的内容整体性的区分成血液学的一般检验、血栓止血检验动作、血型和输血检验等多个学习板块，在每一项学习板块中开展集中性的实验动作，对一种技术进行反复的训练以达到掌握一种操作技能的目的。 （2）有机组合实验。一项完成的临床检验，其中所包含的实验环节有实验前的准备、开展实验、等待实验结果、观察实验记录以及实验器具清洗，等等。如在开展血沉实验的时候，可以同步开展血涂片制作，以实现强化学生血涂片操作技能的目的，实验动作结束后让学生能够依照临床检验的基础实验规范开展实
血液标本 全血：用于细胞计数、分类、形态观察; 血浆：全血去除血细胞，用于血栓止血检测; 血清：全血自然凝固后析出的液体，用于生物化学、免疫学检测等。 血液标本采集方法： 一、毛细血管采血法：用于微量检测 部位：耳垂或手指末梢，主要是中指或无名指尖内侧，半岁以下拇指或足部，特殊人员视情况而定 所用器材：采血针、吸管， 简要步骤：1、准备材料；2、选择采血部位；3、按摩皮肤；4、消毒皮肤；5、针刺皮肤；6、拭去第一滴血；7、吸血；8、止血；9、稀释血液。 二、静脉采血法：用于血沉、免疫、生化等检测项目 部位：主要是肘静脉。还可以在：手背部手腕部等部位采血，幼儿可采用颈外静脉采血。采血器材：一次性注射器，检验用真空定量采血装置。 简要步骤：1、准备试管；2、标记试管；3、消毒双手；4、选择静脉；5、检查注射器；6、扎压脉带；7、选择进针部位；8、消毒皮肤；9、穿刺皮肤；10、抽血；11、止血；12、放血 【质量控制】 标本采集时应规范操作，以减少误差；毛细血管采血时应避开伤损部位，避免挤压皮肤，血液应自然流出；静脉采血时压脉带压迫时间不宜太长；动脉采血后应立即与空气隔绝，阻止血气交换；容器要洁净干燥，避免强力振荡引起溶血；血液标本采集后应立即送检；抗凝的标本其比例要准确，必要时需修正；尽量避免输液时采血，因可干扰测试结果 抗凝: 用物理或化学方法除去或抑制血液中的某些凝血因子的活性，以阻止血液凝固，称为抗凝。 一、草酸盐， 抗凝原理：与血液中钙离子形成沉淀； 使用方法：草酸钠0.1mol/L和血液1:9。 优点：溶解性好，价廉。 缺点：①对凝血因子保护功能差，影响凝血因子；②形成草酸钙沉淀物，影响自动凝血仪器的使用。 使用范围：逐步被淘汰。 二、柠檬酸钠（枸橼酸钠）， 抗凝原理：与钙离子生成可溶性的鳌合物。 使用方法：配成109mmol/L的浓度和血液1:9（用于凝血试验）；106mmol/L的浓度和血液1:4（用于血沉）。 优点：对凝血因子有很好的保护作用。 缺点：血液中溶解度低，抗凝作用较弱。 使用范围：止血学检验、血沉、输血保养液（毒性小）。 三、乙二胺四乙酸（EDTA）盐， 抗凝原理：与钙离子生成可溶性的鳌合物。 使用方法：15g/L EDTA和血液1:10。
长沙医学院医学检验专业四年制本科 培养方案 一、培养目标 培养具有良好的职业道德，较坚实的基础医学、临床医学知识与能力，具备医学检验、临床诊断等方面基础理论和技能，具备一定的创新意识、实践能力和终生学习能力，能够在各级医院、血站及预防等部门从事医学检验工作的应用型检验技师以及医学类实验室工作的医学专门人才。 二、培养要求 本专业学生通过基础医学、临床医学、医学检验方面的基本理论知识的学习，接受医学检验操作技能系统专业训练，具有医学检验、实验室质量控制和医院感染监控的基本能力。 （一）思想道德与职业素质目标 1?遵纪守法，树立科学的世界观、人生观、价值观和社会主义荣辱观，热爱祖国， 拥护中国共产党的领导，拥护社会主义制度，德、智、体、美全面发展，热爱本职工作，具有良好的职业道德，愿为我国现代化建设和医学检验事业而献身。 2?珍视生命，诚信关爱，搞好健康教育，健康宣传，具有人道主义精神；将预防疾病、驱除病痛作为自己的终身责任；将维护民众的健康利益作为自己的职业责任。 3?树立终身学习观念，追求卓越，具有在医学某一学科领域内进一步深造的基础。 4?在职业活动中重视医疗的伦理问题，尊重患者的隐私和人格。 5 ?坚持真理，具有实事求是的科学态度。 6.尊重同事和其他卫生保健专业人员，有集体主义精神和团队合作开展卫生服务工作的观念。 7?树立依法行医的法律观念，学会用法律保护病人和自身的权益。 8 ?具有创新意识、主动获取各专业信息能力、适应能力及分析批判的精神。 （二）专业知识要求 1?掌握基础医学和临床医学的基本理论知识。 2?掌握临床生物化学检验、临床免疫学检验、临床微生物学检验、临床血液学检验、分子诊断学、实验室质量管理、医院感染监控等专业的基本理论。 3.熟悉国家卫生工作及临床实验室质量管理的有关方针、政策和法规。 4.了解医学检验前沿学科的理论和技术的发展动态。 （三）专业技能要求 1 ?掌握临床生物化学检验、临床免疫学检验、临床微生物学检验、临床血液学检验、分子诊断
济宁医学院成人高等教育期末考试《临床检验基础技 术》复习题 一、单选题（共220题，50分） 1、粪便常见的虫卵，但除外 A、蛔虫卵 B、钩虫卵 C、绦虫卵 D、血吸虫卵 E、鞭虫卵 正确答案： C 2、用单克隆抗体胶体金试验检测尿hCG，其结果判断中正确的是 A、试带上质控线和检测线均不显紫红色为阳性 B、试带上质控线为紫红色，检测线为紫红色为阳性 C、试带上仅检测线为紫红色为阴性 D、试带上质控线和检测线均为紫红色为阴性 E、试带上仅质控线为紫红色为阳性 正确答案： B 3、粪便检查，不正确的是 A、 OBT化学3d前应素食 B、虫卵应连续3d送检 C、滋养体冬天应保温送检 D、马桶内的粪便不影响检查 E、涂片的生理盐水防止长霉菌 正确答案： D 4、被ICSH推荐为Hb测定参考方法的是 A、 AHD575测定法 B、沙利氏法 C、 SLS法 D、 HiCN法 E、 HiN3法 正确答案： D 5、凝血象检查时，抗凝剂最好用 A、 EDTA-K2 B、 38g/dl枸橼酸钠 C、 109mmol/L枸橼酸钠 D、肝素 E、草酸钠 正确答案： C 6、一次性粪便标本容器及玻片处理，正确的是 A、一次性标本容器焚烧处理 B、集中处理 C、回收加工循环利用
D、消毒30min烘干使用 E、玻片等容器等毁灭弃置 正确答案： A 7、用于尿蛋白成分保存的防腐剂是 A、甲苯 B、甲醛 C、麝香草酚 D、浓盐酸 E、稀盐酸 正确答案： A 8、脑脊液中IgA增高主要见于 A、病毒性脑炎 B、化脓性脑膜炎 C、脑肿瘤 D、多发性硬化症 E、蛛网膜下腔出血 正确答案： B 9、正常成年人脑脊液的分布，正确的是 A、全部存在于脑室 B、全部存在于蛛网膜下腔 C、 3/4存在于蛛网膜下腔，1/4存在于脑室 D、 1/4存在于蛛网膜下腔，3/4存在于脑室 E、 1/2存在于蛛网膜下腔，1/2存在于脑室正确答案： C 10、对草酸盐抗凝剂，错误的叙述是 A、草酸铵可使血细胞膨胀 B、双草酸盐可用于血细胞比容测定 C、对Ⅴ因子保护差 D、过去用于凝血象的检查 E、可干扰血浆中钾，钠和氯的测定 正确答案： D 11、肾单位不包括 A、肾小球 B、肾小囊 C、肾小管 D、集合管 E、髓袢 正确答案： D 12、引起生理性多尿的是 A、癔症 B、甲亢 C、糖尿病 D、慢性肾盂肾炎 E、失钾性肾病
教材：人民卫生出版社《临床检验基础（第5版）》 血液部分 红细胞计数（RBC）：测定单位体积血液中红细胞的数量。 【计数方法】显微镜计数法： 用等渗稀释液将血液稀释一定倍数（一般200倍）后，滴入血细胞计数盘，然后于显微镜下，计数一定范围内的红细胞数，经过换算即可求得每升血液中的红细胞数。 计算：红细胞数/L=5个中方格内红细胞×5 ×10 ×200 ×10^6/L
【参考值】 成年男性：（4. 0~5. 5）×10^12/L，成年女性：（3. 5~5. 0）×10^12/L；新生儿：（6. 0~7. 0）×10^12/L 低于3.5×10^12/L可诊断为贫血，低于1.5×10^12/L应考虑输血。 【临床意义】 1、病理性增多 相对性增多：血浆水分丢失，有形成分相对增加，绝对值没有发生变化 绝对性增多：继发性（心、肺疾病、异常血红蛋白病、某些肿瘤等）；原发性（真性红细胞增多症） 2、病理性减少 骨髓造血功能低下（再障）；造血原料缺乏（缺铁贫、巨幼贫）；红细胞破坏增加（溶贫）；红细胞丢失过多 红细胞比积（HCT/PCV）：指红细胞在全血中所占体积百分比。 【参考值】（温氏法） ①成年：男性0．40～0. 50，女性0．37～0. 48；②新生儿0.47~0.67；③儿童：0.33~0.42。【临床意义】 增高：1. 血液浓缩；2. 红细胞增多症；3. 新生儿。降低：1. 贫血；2. 其他原因的稀血症 应用：1. 疗效观察；2. 计算红细胞指数 血红蛋白(Hb)：是在人体有核红细胞及网织红细胞内合成的一种含色素辅基的结合蛋白质，是红细胞内的运输蛋白。 【检测原理】 血液在血红蛋白转化液中溶血后，除SHb外各种血红蛋白均可被高铁氰化钾氧化成高铁血红蛋白（Hi），Hi与氰化钾的氰根（CN-）生成稳定的棕红色氰化高铁血红蛋白（HiCN），HiCN在540nm有吸收峰。在特定的实验条件下，可测得吸光度并计算Hb（G/L）。但在实际工作中，一般实验室的分光光度计达不到WHO规定的标准条件，所以利用Hb参考液制备标准曲线，换算出Hb（G/L）。 【参考值】 成年男性：120-160 g/L，成年女性：110-150 g/L；新生儿：170-200 g/L
尿液部分 尿液的采集 指导病人后让其自行留取,取清洁中段尿,适用于尿常规检查、细菌检查与细胞学检查。 要求病人清洗手及外生殖器,一般留取中段尿到适当的未受污染的容器中。女性要防止阴道分泌物污染,婴幼儿要避免粪便污染。 晨尿:指清晨起床后、未进早餐与做运动之前第一次排出的尿液。 第二次晨尿:指采集晨尿后2~4小时内的尿液。(要求从前一天晚上到采集此次尿液标本时,只饮水200ml) 随机尿:指患者无需任何准备、不受时间限制、随时排出的尿液标本。 餐后尿:指午餐后2~4小时内的尿液。 3小时尿:上午6时~9时的尿液称为3小时尿。 12小时尿:从晚上8时开始到次日早晨8时终止的12小时内的全部尿液。 24小时尿:采集的当天,患者排空膀胱并弃去尿液,从此时开始计时并采集尿液,将24小时内的尿液全部采集于容器中;结束采集的次日(24小时后),患者排空膀胱,且将尿液采集于同一容器内。如此采集的尿液称为~。 【小知识点】 尿液检查一般应在收到标本后迅速进行。一般2h内送检,30min内完成检测。 如不能及时送检或分析,必须采取保存措施。常用的方法有冷藏法与化学防腐法。 尿量:指24小时内排出体外的尿液总量。 【参考区间】 成人1~2L/24h,即1ml/(h*kg);儿童按体重计算尿量,大约为成年人的3~4倍。 【相关内容】 一、多尿(polyuria):就是指成人24小时的尿量超过2、5L,儿童24小时尿量超过3L。 在正常情况下多尿常见于饮水过多、精神紧张等。此外,静脉输液过多或应用某些药物(如咖啡因、利尿剂等)也可以导致多尿。 病理性多尿常因肾小管重吸收功能与浓缩功能减退所致,可见于以下几种情况: 糖尿病:因尿中葡萄糖含量增高所致,属于溶质性利尿。 肾脏疾病:多种肾脏疾病,因肾小管破坏致使尿浓缩功能减退,均可导致多尿,其特点为夜尿增多。 内分泌疾病:如尿崩症,该病就是由于下丘脑-垂体受损,抗利尿激素分泌减少或缺乏,或由于
一、选择题（选择一个最佳答案，共20题，每题1分，共 20 分）： 1、成人毛细血管采血常用部位是（ D ） A. 手背 B. 肘部 C. 足跟 D. 手指 E. 耳垂 2、哪一凝血因子不是内源性凝血途径中的凝血因子 ( E ） A .Factor XI B. Factor VIII C. Factor XII D. Factor IX E. Factor VII 3．凝血试验，首选的抗凝剂是:（ E ） A、肝素 B、EDTA-K2 C、EDTA-Na2 D、草酸盐 E、枸橼酸钠 4、瑞氏染色法的染色作用：（ C ） A.物理吸附 B.化学亲合 C.物理吸附和化学亲合 D.化学结合 E.物理性结合 5. 下列何种物质被公认为是最强有力的促红细胞缗钱状聚集的物质：（ B ） A、白蛋白 B、纤维蛋白原 C、γ球蛋白 D、β球蛋白 E、胆固醇 6.门诊患者做尿常规分析，常采用下列哪种尿标本（ B ） A晨尿 B随机尿 C清洁尿 D 3h尿 E 24h尿 7. 患传染性单核细胞增多症时，血涂片可发现较多的细胞是：（ D ） A.大单核细胞 B.中性粒细胞中毒变性 C.幼稚单核细胞 D.异型淋巴细胞 E.幼稚粒细胞 8. 血红蛋白的组成是由（ A ） A.球蛋白和亚铁血红素 B.铁原子和原卟啉 C.血红素和铁原子 D.α2β肽链 E.血红素和白蛋白 9.下列哪种尿标本经加热后浑浊可消失（ C ） A 脓尿 B菌尿 C 结晶尿 D脂肪尿 E乳糜尿 10．白陶土可激活的凝血因子是：（ D ） A、I B、Ⅱ C、Ⅹ D、Ⅻ E、Ⅲ 11．临床判断消化道出血完全停止的最可靠实验指标结果是（ C ） A粪镜检无红细胞B无柏油样黑便C粪隐血试验阴性D粪胆素试验阴性E粪胆原试验阴性 12．通过粪便检查可确定疾病（ C ） A消化道恶性肿瘤 B消化道溃疡 C肠道寄生虫 D肝脏疾病 E消化不良 13．正常精液液化时间不超过（ E ） A 5min B 10min C 20min D 25min E 30min 14．正常前列腺液镜检时可见大量（ B ） A草酸钙结晶 B卵磷脂小体 C上皮细胞 D中性粒细胞 E 夏科-莱登
Hi ，Hi 与氰离子反应生成棕红色HiCN ，在540nm 处有最大吸收峰，且其吸光度与溶液浓度成正比而检出Hb 浓度。 / 注意：分光光度计必须符合WHO 标准，否则：1HiCN 参考液制作标准曲线或者计算K 值 2带标准直接计算 测定Hb 的方法学评价 1. HiCN 法：ICSH 和WHO 推荐参考方法 操作简便，结果稳定可靠，可测多种Hb （SHb 除外），可直接定值 /缺点：剧毒，不能测SHb ，对HbCO 转化慢，脂血、高球蛋白、高白蛋白、血小板增多可导致Hb 假性增高 2.SDS 法：临床首选/优点：试剂无毒,缺点：ε未定，需依赖HiCN 法间接得出结果， SDS 会破坏WBC ，不能用于WBC 计数 RBC 、Hb 测定的临床意义 1.RBC 、Hb 降低（低于参考值下限指示贫血） 1)生理性减少（生理性贫血）1、6个月-2岁婴幼儿（造血原料不足）2、妊娠中、晚期（血液稀释）3、老年人（造血功能减退） 2）病理性减少：RBC 生成少、破坏多、丢失多 2．RBC 、Hb 升高1）生理性增多：新生儿、高原生活、剧烈运动（缺氧）；成年男性比女性高（雄性激素水平较高） 2）病理性增多 1、相对性增多：血液浓缩：如剧烈呕吐、严重腹泻、 大面积烧伤患者2、绝对性增多：慢性心肺疾病、真红，RBC 可达（7-10）×1012 /L 贫血病因分类：1、骨髓造血功能低下：如再障、白血病、恶性肿瘤骨髓转移等 2、造血原料缺乏：如缺铁性贫血、巨幼贫 3、红细胞破坏增加：各种溶血性贫血 4、红细胞丢失过多：急、慢性失血 Hct 的方法及意义方法主要为离心法：温氏法和微量法 / 意义：略高：1血液浓缩：如大量出汗、呕吐、腹泻、大面积烧伤；2红细胞增多症：如真红，有时可高达80%3新生儿, 降低：各种贫血，但减少程度不一定与RBC 一致. 可用作真红、输血及输液疗效观察指标。 用作计算MCV 和MCHC 血液流变学指标之一，增加表明血↑；缺铁贫和巨幼贫正常或轻度↑2）减少：骨髓造血功能低下：绝对值<15×109 /L ：再障 2、作为贫血治疗的疗效观察指标 1）缺铁贫和巨幼贫治疗后，先Ret ↑，后RBC 和Hb 逐渐↑ 2）溶血和失血性贫血治疗后：Ret 逐渐降低，已得到控制；持续高值，未控制或加重。 3、网织红细胞成熟指数（RMI ）骨髓造血的早期标志 4、未成熟网织红细胞比值（IRF ） 5、RPI ESR 影响因素+意义 1）血浆因素 增快：纤维蛋白原、球蛋白、胆固醇、甘油三酯 减慢：清蛋白、糖蛋白及卵磷脂 2）红细胞因素 红细胞的数量和形态 3）其他因素 血沉管的位置，温度 / 临床意义：1、生理性血沉增快:老年人,妇女月经期,妊娠三个月以上血沉逐渐增快可达30mm/h 2、病理性血沉增快1）各种炎症：急性细菌性炎症、风湿热、结核活动期2）组织损伤及坏死：心肌梗死增快，心绞痛正常（鉴别）3）良、恶性肿瘤的鉴别：恶性肿瘤多增快，良性肿瘤多正常4）高球蛋白血症：SLE 、多发性骨髓瘤、巨球蛋白血症等5）贫血：越重越快6）高胆固醇血症：动脉粥硬化、糖尿病等 3、减慢：真性红细胞增多、脱水、DIC WBC ：中性粒数量变化：多数情况一致，也可以不一致 1）中性粒生理性增多1、年龄2、日间变化：下午较高3、剧烈运动、激动、严寒、暴热等4、妊娠、分娩 2）中性粒病理性增多 1、急性感染：化脓性球菌最常见 2、严重的组织损伤及大量血细胞破坏；严重的烧伤、大手术后、心肌梗死、急性溶血 3、急性大出血：内脏破裂、宫外孕破裂4、急性中毒：化学药物、代谢性中度 5、恶性肿瘤 6、白血病 3）中性粒减少 1、某些感染：伤寒、副伤寒、流感 2、某些血液病：再障 3、慢性理化损伤：X 射线、氯霉素 4、自身免疫性疾病：SLE 5、脾功能亢进 淋巴细胞的临床意义1）淋巴细胞增多 1、绝对增多：某些病毒或细菌所致的传染病；某些传染病恢复期；肾移植排异反应前期；急淋、慢淋；某些慢性感染 2、相对增多：再障、粒缺2）淋巴细胞减少 ：放射线、肾上腺皮质激素；N ↑可导致L ↓（相对） 单核临床意义 增多： 1、某些感染：亚急性感染性心内膜炎、急性感染的恢复期、肺结核 2、某些血液病：单核细胞性白血病、恶性组织细胞病、淋巴瘤及MDS 嗜酸粒 1、增多 超敏反应；寄生虫病；某些皮肤病；血液病：如慢粒 2、减少 伤寒、副伤寒、大手术后；长期使用肾上腺皮质激素 嗜碱粒 增多：慢粒、嗜碱性粒细胞性白血病 嗜酸性粒细胞直接计数原理+意义：采用嗜酸性粒细胞稀释液讲血液稀释一定倍数，红细胞和大部分其他白细胞被破坏，E 着色，充池计数经换算得每升血液中E 数 / 意义 1、生理变化 1）劳动、寒冷、饥饿、神经刺激，E ↓（肾上腺皮质激素组织骨髓释放E ，并促使血中E 向组织浸润） 2）日间变化：白天较低，夜间较高；上午波动较大，下午比较恒定。 2、嗜酸性粒细胞增多 1）过敏性疾患：支气管哮喘、血管神经性水肿、食物过敏 2）寄生虫：钩虫、蛔虫等 3）某些传染病：猩红热4）慢粒白血病5）某些恶性肿瘤：淋巴系统恶性疾病（如霍奇金）、肺癌 3、嗜酸性粒细胞减少 伤寒、副伤寒、大手术后严重组织损伤以及应用肾上腺皮质激素或促肾上腺皮质激素后。 4 、嗜酸性粒细胞计数的其他应用1）观察急性传染病的预后：2）观察手术和烧伤病人的预后3）测定肾上腺皮质功能 白细胞分类原理 三分类：电阻抗法,五分类：多项技术联合检测 1电阻抗法：溶血处理后白细胞体积，区别小细胞群（L ），中间细胞群（M 、E 、B ）和大细胞群（N ） 2光散射与细胞化学计数联合白细胞分类计数过氧化物酶染色：活性E 、N 、M 依次降低，L 、B 无活性 3容量、电导、光散射（VCS ）白细胞分类法,电阻抗法测量体积V ,高频电磁针测量细胞内部结构电导C ,光散射S 区别细胞颗粒的结构和颗粒的质量 4阻抗与射频技术联合白细胞分类法DC 通过四个不同的检测系统:嗜酸粒检测系统；嗜碱粒检测系统；淋巴、单核、粒细胞检测系统；幼稚细胞检测系统 5多角度偏振光散射白细胞分类技术 0°前角光散射测细胞大小 10°狭角光散射测细胞结构 90°垂直光散射测细胞的内部颗粒和细胞成分 90°消偏振光散射将E 从其他白细胞中分离出来 血细胞分析仪的检测参数及意义(1)RDW 红细胞体积分布宽度：参考<14.9% / 1、用于贫血的形态学分类（RDW/MCV ） 2、诊断缺铁贫。95%以上缺铁贫RDW 异常。小细胞低色素贫血、RDW 正常则缺铁贫可能不大。 3、缺铁贫与轻型地贫的鉴别。前者RDW 增高，后者正常。 (2)MPV 平均血小板体积：参考 7.6-13.2fl / 结合PLT 的变化，MPV 越大，新生血小板越多1、增大：血小板破坏增多，骨髓纤维化、血栓性疾病、脾切除、慢粒等 2、减少：骨髓造血功能损伤致血小板减少 常用筛选实验 BT 、PLT 、APTT 、PT 、D-D 临床应用 BT ：延长：血管壁异常；血小板异常；血管性血友病等 ,缩短：心梗、脑血管病变及DIC 等 PLT ： 生理变化：早晨较低，午后较高；剧烈运动后较高；月经、妊娠有改变；静脉血比毛细血管血高。 / 病 理变化：1）血小板减少（PLT<100×109 /L ）血小板生成障碍：再障、放射性损伤、急性白血病,血小板破坏或消 耗增多：ITP 、DIC , 血小板分布异常：脾肿大、血液被稀释 2）血小板增多（PLT>400×109 /L ） 原发性增多：慢粒、真红 反应性增多：急性化脓性感染、急性大出血等 APTT ： 1推荐应用的内凝筛选实验 2延长 1）Ⅷ、Ⅸ和Ⅺ减低，能检出Ⅷ：C 小于25%的轻型血友病 2）Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ、Ⅹ严重缺乏，如肝病，维生素K 缺乏 3）抗凝物质：口服抗凝剂、血循环中存在病理性抗凝物质等 4）纤溶活性增强 3缩短 1）高凝状态，如DIC 的高凝期2）血栓性疾病，如心、脑血管病变，深静脉血栓等 4检测肝素治疗的首选指标 PT 1延长1）先天性凝血因子Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ缺乏2）获得性凝血因子缺乏，如严重肝病、维生素K 缺乏、纤溶亢进、DIC 晚期3）血中抗凝物质增加，口服抗凝剂、肝素等 2缩短: DIC 早起，心梗、脑血栓行测好难过,3INR 是用于监测口服抗凝药的首选指标 D-D 增高：继发性纤溶（鉴别原发）。血栓性疾病、肿瘤,溶栓治疗的监测：D-D 显著升高 尿液检验目的？1.泌尿系统疾病诊断及疗效判断 2.其他系统疾病的诊断及鉴别诊断 3.安全用药监测 4.重金属中毒检查（职业病防护） 5.健康体检 尿液标本采集有哪些种类、方法和临床应用？ １.晨尿 : ①首次晨尿:肾脏浓缩功能评价,有形成分、化学成份(HCG). ②二次晨尿:细菌培养、有形成分计数. ２.随机尿 适于门诊、急诊。 ３.计时尿 ①3h 尿: 6-9am. 尿有形成分排泄率;②餐后2h 尿 ：病理性尿胆原、糖尿、蛋白尿等③12h 尿：晚上8点-次晨8点, :Addis 计数、蛋白排泄率等。 ④24h 尿：大容器(＞4L),防腐,收集完全,测尿总量,混匀,适量送检(50ml)；尿中化学成分、T.B 排出量,电解质等。 4.特殊尿标本①尿三杯试验②无菌尿液：细菌培养、药敏等。 尿液标本采集质量保证 1.尿液采集标准操作规程（SOP ） 2.检验项目选择与申请 3.患者准备:告知、控制 4.标本采集：器材、运送 5.人员职责 尿液标本保存有哪些方法 1.低温冷藏:2℃～8 ℃，6h 内，有形成分保存。 2.冰冻 －20℃～－70℃，离心，除去有形成分，冰冻上清液(化学成分)。 3.化学防腐 ①甲醛:有形成分形态固定。 ②甲苯 尿化学成分定性或定量。 ③麝香草酚:有形成分镜检、尿浓缩T.B 、化学成分。 ④浓盐酸 化学成分定量。 ⑤其他：冰乙酸:戊二醛:碳酸钠 尿液理学检查有项目及临床意义①尿量：1.少尿：<400ml/24h 或<17ml/h ，无尿: <100ml/24h 。肾前性少尿：休克、心衰、脱水。肾性少尿：急性肾炎、肾衰。肾后性少尿：尿路梗阻 2.多尿>2.5L/24h 肾性多尿：慢性肾炎、慢性肾衰早期等。内分泌性多尿：尿崩症、甲亢。代谢性多尿: 糖尿病 ②尿色及透明度: 1.血尿:泌尿生殖系统疾病：炎症、结石等/全身性疾病：血友病等/邻近器官疾病/药物不良反应。 2.血红蛋白尿:血管内溶血，如蚕豆病、输血反应等 3.肌红蛋白尿:肌肉组织广泛损伤、变性，如急性心梗等。 4.胆红素尿:见于阻塞性黄疸、肝细胞性黄疸。 5.乳糜尿:寄生虫（丝虫）或非寄生虫（结核、肿瘤、创伤、手术等）。 6.脓尿/菌尿:泌尿生殖系统感染。 7.结晶尿:正常尿、结石、痛风、药物等 ③尿比密 方法+评价：1.比重计法：需校正;操作繁、标本量大、影响（温度,蛋白,葡萄糖等）2.折射仪法：标准 3试带法: 简便，但干扰多，测定范围窄，精密 度差，过筛试验 临床意义：1. SG ↓：低比密尿SG ＜1.015见于尿崩症、慢性肾炎等。/ 比密低而固定：SG 固定于1.010±0.003, 呈等渗尿，表示肾实质严重损害。 2. SG ↑ 见于： 急性肾小球肾炎.糖尿病.肾前性少尿疾病如高热、脱 水等 2.鉴别肾前性或肾性少尿:肾前性少尿：Uosm ＞450mOsm/kg. H2O,肾性少尿：Uosm ＜350m 3.利用渗透清除率计算自由水清除率 尿蛋白定性试验+原理+评价+注意事项 ①试带法:（筛查。） ②加热醋酸法：加热加酸→蛋白沉淀 / 准确,A 、 G 均敏感；灵敏度较低, 操作较繁。 ③磺基水杨酸法(SSA):蛋白质NH 4+ ＋磺酸根－→蛋白盐沉淀 / 简便，灵敏度高，多种蛋白均反应；推荐确诊实验。 尿蛋白定量试验+评价 ①磺基水杨酸-硫酸钠比浊法：线性范围窄,影响多，欠准确。 ②双缩脲比色法：对A/G 均敏感；灵敏度较低，操作繁。 ③丽春红S 染料结合法：灵敏度很高，对A/G 均敏感，线性范围宽，干扰少；但操作繁。 ④其他：免疫法、尿蛋白电泳 / 灵敏、特异，前景好。 蛋白尿临床意义１.肾小球性蛋白尿：原发性肾小球损害性疾病、肾病综合征和某些继发性肾小球损害性疾病如糖尿病等。分为：选择性蛋白尿，非选择性蛋白尿 2.肾小管性蛋白尿 ：肾盂肾炎、间质性肾炎,中毒 3.混合性蛋白尿 . 4.溢出性蛋白尿：本周氏蛋白尿，血红蛋白尿、肌红蛋白尿。5.组织性蛋白尿：肾小管炎症、中毒等 6.假性(或偶然性)蛋白尿：膀胱炎、尿道炎等或阴道分泌物混入。 7. 生理性蛋白尿:功能性蛋白尿，体位性蛋白尿 （各种特点见名解） 尿糖定性试验 ①班氏糖定性（Benedict test ）:利用葡萄糖还原性将硫酸铜还原; / 简便，灵敏,特异性差，有假+（VitC 等）。 ②试带法 ③薄层层析法 尿糖定量试验 ①葡萄糖氧化酶(GOD)法:同血糖测定, 先以班氏法定性,再稀释至3g/L 以下。/ 灵敏、特异，抗VitC 等干扰；用于治疗监测及用药调整。 ②薄层层析法 临床意义 ①血糖增高性糖尿：摄入性,应激性(颅脑外伤、急性心梗),代谢性:糖尿病,内分泌性(血糖↑— 胰高糖素、甲状腺激素、生长激素、（去甲）肾上腺素、糖皮质激素,血糖↓— 胰岛素) ②血糖正常性糖尿：肾性糖尿,肾糖阈降低。 ③其它: 乳糖尿等。 尿胆红素检查方法：①重氮法:强酸介质中,Bil 与重氮盐偶联反应,产生红色偶氮化合物.(试带法)。/ 灵敏度较低，简便、快速，多假+/-，筛检。 ②氧化法:1.Harrison 法: 以钡盐吸附胆红素并浓缩，酸性三氯化铁氧化胆红素为胆绿素呈现绿色；/ 灵敏、准确，为确证试验；但操作较繁，假+(水杨酸等)。 2.Smith 碘环法:碘氧化胆红素呈绿色环。简单,灵敏度低。 尿胆原检查 ①改良Ehrlich 法:②试带法 尿酮体检测方法：①亚硝基铁氢化钠法:乙酰乙酸、 丙酮与亚硝基铁氢化钠反 ,灵敏度和特异性不同；试带法:筛检法,敏感、方便、快速；②Gerhardt 法 临床意义 ①糖尿病酮症酸中毒(Diabetic ketoacidosis)：早期β-羟丁酸为主，缓解后乙酰乙酸↑。 ②非糖尿病酮症：剧烈运动、禁食、发热、严重呕吐腹泻等。 直接涂片法 优点：简便，不影响有形成分形态 / 缺点：易漏诊 / 应用：血尿、脓尿者 离心涂片法 优点：敏感,阳性率高 / 缺点：操作不易规范，报告不统一，离心可破坏形态，使形态区分困难或漏检。 / 应用：有形成分较少的标本，多用于试带法后确诊。 尿有形成分包括哪些内容? 细胞（红，白），管型，结晶，其他成分。 管型形成条件：①白蛋白或T-H 蛋白→基质，首要条件 ②浓缩和酸化沉淀→蛋白质 ③可供交替使用的肾单位→足够的时间形成 ④尿流缓慢，有局部性尿液淤积 化学法检测尿隐血原理？Hb 亚铁血红素→催化过氧化氢作为电子受体使色原氧化呈色。 尿试带法测定各项目的原理如何? 1.蛋白质PRO ：指示剂蛋白误差法（溴酚蓝）, 2.葡萄糖GLU ：葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法(GOD-POD)法 3.亚硝酸盐NIT ：亚硝酸盐还原法 4.尿比密SG ：多聚电解质离子解离法。 5.酸碱度pH ：酸碱指示剂法 6.酮体KET ：亚硝基铁氰化钠法 7.胆红素BIL ：重氮反应原理 8.尿胆原URO ：醛化反应或偶氮法。 9.红细胞/血红蛋白/隐血(ERY/Hb/OB)：血红蛋白类过氧化物酶法。 10.白细胞LEU ：白细胞酯酶法 11.维生素CVitC ：还原法 尿液干化学分析质量控制㈠分析前质量保证 1.试带: 批号、避光、干燥 2.标本: 接受时间（2h 内检测）3.容器: 塑料、标记 4.饮食、用药 ㈡分析中质量保证 1.严格按规定要求操作 2.用质控人工尿液进行室内质控 3.质量控制标准 ㈢分析后质量保证 1.判断影响因素 2.检验报告的审核,签发①正确分析干化学与镜检结果相关性，②确证实验或参考方法 脑脊液检查适应性禁忌症 适应症:有脑膜刺激征(颈强直、布氏征、克氏征),疑有脑出血,原因不明的剧烈头疼，昏迷、抽搐或瘫痪 / 禁忌症：颅内压明显↑病情危重,局部皮肤感染 潘氏实验原理+评价+蛋白质增加意义CSF 中球蛋白与苯酚相结合形成不溶性蛋白质沉淀。/ 评价：优点：操作简便，快速，所需标本少，灵敏度高。缺点：假阳性率偏高。/ 蛋白质增加的意义：1.中枢神经 系统感染：病脑+ 结脑++ 化脑+++ 2.蛛 网膜下隙或脑室陈旧性出血 3.脑肿瘤 4.脑神经根病变 5.椎管内梗阻 脑脊液显微镜检查意义 1.中枢神经系统WBC+++（分叶为主） 2.脑寄生虫病：嗜酸性粒细胞增高 3.蛛网膜下隙或脑室出血：RBC 升高。 一、对涂片的满意程度：满意、不满意； 二、细胞学诊断：1.未见癌细胞和癌前病变细胞；2.病原体 3.反应性细胞改变①炎症有关②萎缩（有或无炎症）③宫内节育器④与放疗有关； 4.上皮细胞异常：鳞状上皮细胞异常（不典型鳞状上皮细胞、鳞状上皮内病变、鳞状细胞癌）腺上皮异（不典型腺体细胞性质未定、非典型颈管腺细胞倾向瘤变、颈管原位腺癌和腺癌） 测定临床意义1.早期妊娠的诊断 2.协助 3.流产诊断及保胎监护 4.绒 5.肿瘤 特异性阴道炎：清洁度异常，同时 / 非特异性 1.线索细胞 2.PH 大 4.5 3.胺试验阳性（加10%KOH ，因产氨而释放出鱼腥味臭味 4.阴道分泌物呈稀薄，乳白色奶油状。（线索细胞加 任意两项便可诊断） -- 精索静脉曲张：无力型精子症 3.死精子＞50%—死精子症 精子计数意义（1）少精子症，精子计数＜20×109/L ① 睾丸病变精索静脉曲张、睾丸炎、睾丸肿瘤。 ②输精管疾病输精管精道阻塞、输精管精道先天性缺如和免疫性不育。 ③其它逆行射精、有害金属或放射性损害、环境因素，老年人，药物（长期用棉酚）。 （2）无精子症：严重的睾丸 和输精管疾病。 精子尾部低渗肿胀试验HOS 概念及意义 精子在低渗溶液中，由于渗透压的变化，水分子通过精子膜进入精子以达到渗透压平衡，使精子体积增大而出现尾部不同程度的肿胀现象，相差显微镜或普通高倍镜观察，计数200个精子中出现各种肿胀精子数，计算平均百分比。 / 意义：体外精子膜功能及完整性的评估指标，预测精子潜在的受精能力，不育症的精子尾部肿胀率明显降低，活的不动精子提示精子鞭毛结构异常，因此也可用HOS 测定精子存活率 核异质（dyskaryosis ）：即上皮细胞的核异常，主要表现为核增大、形态异常、染色质增多、分布不均、核膜增厚、核染色较深，但胞质尚正常。根据不典型增生程度分为轻、中、重度不典型增生。 轻度核异质：不典型细胞占上皮细胞层下1/3，细胞边缘清楚，核轻度增大，有轻度至中度畸形，染色质轻度增多，染色稍加深，核胞质比多在正常范围内 中度核异质：不典型细胞占上皮细胞层下1/3 ～2/3，细胞边缘较清楚，核明显增大，畸形明显，染色质浓密不均，深染，核与胞质比轻度增大。 重度核异质：不典型细胞超过上皮细胞层2/3，细胞边界不清，极性紊乱，核明显增大，比正常大1～2倍，畸形更明显，染色质增多、核与胞质比增大。不典型增生几乎达到或超过全层，可诊断原位癌。 背景成分：指涂片中非上皮细胞成分。意义：①红细胞：与取材有关；②中性粒细胞：可大量出现，常呈裸核，组织炎症③淋巴细胞：慢性炎症时较多见④浆细胞：慢性炎症⑥细菌团、真菌团、植物细胞、棉花纤维、粘液和染料沉渣等 复鳞上皮细胞变化规律 1) 胞体：由小到大 2)胞核：由大到小至消失 3）核染色：质由细致、疏松、均匀到粗糙、紧密、固缩；4）胞质量：少到多，核胞质比大到小；5）胞质染色：暗红到浅红。 恶性肿瘤细胞主要形态特征 核的改变：1.核增大1～4倍（核染色质增生↑） 2.核畸形 3.核深染 DNA ↑，腺癌深染不及鳞癌 4.核膜增厚（染色质呈粗颗粒状，分布不均常堆积于核膜下）5.核胞质比增大 6.核仁增大、数目增多，形态异常（分化程度越低，核仁异常越明显）7.核分裂增多（有丝分裂细胞↑）8.裸核 ( 癌细胞增生过快，营养供给不足，细胞退化.腺癌和未分化癌多见) / 细胞质的改变： 高、低分化鳞癌主要特征 高分化鳞癌：以表层细胞为主 细胞多形性，体积大，胞浆丰富，常染深红色，核大、畸形、深染、常分散存。 / 低分化鳞癌：中层或底层细胞为主。不规则形或圆形，散在分布或成团。 高低分化腺癌主要特征 高分化腺癌：胞体较大，可单个脱落也可成排成团脱落，胞质丰富，含有空泡，有时大空泡将核挤于一侧，形成印戒样癌细胞为特征性细胞。特征性细胞有：①纤维形癌细胞②蝌蚪形癌细胞③癌珠。 / 低分化腺癌：胞体较小，多成团互相重叠，极性紊乱，易融合成团呈花边样或桑椹样。 小细胞未分化癌主要特征：癌细胞小，比淋巴细胞略大 异性明显，三角形燕麦形核胞浆少，往往是裸核 核畸形显著，染色呈墨水滴状 成片镶嵌状 脱落细胞 图片制作固定方法 染色方法 1.带湿固定：涂片尚未干燥固定，适用较粘稠的标本（痰液、宫颈刮片及食管刷片等） 2.干燥固定：自然干燥后，固定。适用较稀薄的标本（尿液、浆膜腔积液等）一般15～30min 。含粘液较多标本适当延长。 染色方法： H-E 染色：优点：染色效果好。操作简易，试剂易配染色透明度好，细胞质呈淡玫瑰红色，细胞核显紫蓝色，红细胞呈朱红色。缺点：不能用于观察阴道涂片对雌激素水平测定 / 巴氏染色优点：色彩多样且鲜艳。染色效果好，能观察女性雌激素水平；缺点：染色程序较复杂 / 瑞－吉氏染色 适用于血片、淋巴穿刺液和胸腹水涂片 脱落细胞报告方式:三级分类法：Ⅰ级阴性正常细胞或炎症变性细胞 Ⅱ级可疑发现核异质细胞 Ⅲ级阳性 / 四级分类法：Ⅰ级阴性 Ⅱ级少量轻度核异质细胞，多由炎症变性所致。Ⅲ级可疑。有重度核异质细胞，符合癌细胞标准。但由于数量过少，或形态不典型，不能排除癌前病变的可能。Ⅳ级阳性。涂片中可见典型的癌细胞。 / 直接法：①未找到癌细胞②标本质量差③找到不典型细胞④找到可疑癌细胞⑥找到癌细
1.血常规CBC:全血细胞计数 2.血量:动物循环系统内所含血液的总量 3.红细胞计数RBC:即测定单位体积外周血液中红细胞的数量 4.血红蛋白:红细胞的主要成分,由珠蛋白与亚铁血红素组成 5.白细胞计数WBC:指测定单位体积外周血(循环池)中各种白细胞的总数 6.白细胞分类计数DC:根据外周血中各种白细胞的特征识别五种白细胞,测定其相对比值(百分率)以及观察其病理变化的一种检验方法 7..血小板计数:即测定单位体积外周血液中血小板的数量,是出血与血栓形成实验室检查中最常用的实验之一 8.抗凝:用化学或物理的方法,抑制或除掉血液中某些凝血因子以阻止血液凝固的方法 9.抗凝剂:采用物理化学方法,除去抑制凝血因子的活性,以阻止血液凝固的物质 10.毒性指数:计算含有毒性颗粒的细胞数与所计数的中性粒细胞的比例 11.中毒颗粒:中性粒细胞中比正常中性颗粒大,大小不等,分布不均匀,染色较深,呈黑色或紫黑色.有时颗粒很粗大,与嗜碱性粒细胞易混淆,有时又小而稀少, 散杂在正常中性颗粒中. 12.亚铁血红素:血红蛋白色素部分,由铁原子及原卟啉区组成 13.核象:粒细胞的分叶状况,反应粒细胞的成熟程度. 14.核左移:外周血中性杆状核粒细胞增多并出现晚幼粒、中幼粒甚至早幼粒细胞 细胞时称为核左移。 15.核右移:外周血中性粒细胞五叶核以上者超过3％称为核右移.此时常伴有白 细胞总数减少 16.网织红细胞Ret:是介于晚幼红细胞和成熟红细胞之间尚未完全成熟的红细 胞 17.瑞氏染液:是由酸性染料伊红和碱性染料美蓝组成的复合染料,溶于甲醇后解 离为带正电的美蓝和带负电的伊红离子 18.异型淋巴细胞:在某些病毒性感染或过敏原刺激下使淋巴细胞增生,并出现一 定的形态变化称为异型淋巴细胞 19.退行性变白细胞:白细胞出现胞体肿大、结构模糊、边缘不清、核固缩、肿胀 或溶解等变化 20.血细胞比容HCT.PCV:一定体积中的全血中的红细胞所占容积的相对比例 21.平均红细胞体积MCV:指红细胞群体中各个细胞体积的平均值,fl 22.平均红细胞血红蛋白含量MCH:指红细胞群体中各个红细胞血红蛋白含量的 平均值,pg 23.平均红细胞血红蛋白浓度MCHC:指平均每升红细胞所含血红蛋白的浓度,g/L 24.出血时间（BT）:在特定条件下,皮肤小血管被刺破后,血液自然流出到自然停 止的时间 25.点彩红细胞:红细胞中残存的嗜碱性物质,是RNA变性沉淀的结果 26.嗜碱性点彩红细胞:是不完全成熟的红细胞,胞质内残存的核酸变性,聚集成 为颗粒,经碱性染料染色后,细胞内可见深染的颗粒 27.嗜酸性粒细胞:起源于骨髓多能造血干细胞的髓系干细胞分化的嗜酸性粒细 胞祖细胞。嗜酸性粒细胞集落形成因子主要由受抗原刺激的淋巴细胞产生, 因此,嗜酸性粒细胞与免疫系统关系密切. 28.酸性染料:为阴离子染料,主要有伊红Y和伊红B,能释放质子,与细胞的碱性
第一章血液标本采集和血涂片检查 一、选择题 （一）、A1型题（标准型） 1.静脉采血法的采血部位首选： A. 肘部静脉 B. 手背静脉 C. 内踝静脉 D. 股静脉 E. 颈静脉 2.WHO推荐成人皮肤采血部位为： A. 无名指指端内侧 B. 中指和无名指指端内侧 C. 中指指端内侧 D. 耳垂 E. 大拇趾 3.血细胞分析中最常用的染色法为： A. 吉姆萨染色 B. 瑞氏染色 C. HE染色 D. 罗氏染色 E. PAS染色 （二）、A1型题（否定型） 3. 下列那一种抗凝剂不能与血液中的钙离子结合： A. EDTA-K2 B. 草酸钠 C. 草酸铵 D. 肝素 E. 枸橼酸钠
四、论述题 1. 试述瑞氏染色法的原理及PH值对其的影响 参考答案 一、选择题（一）、A1型题（标准型） （二）、A1型题 四、论述题 1. ①瑞氏染色法的原理：瑞氏染料是 由酸性染料伊红和碱性染料美兰组成的复合染料。瑞氏染料溶于甲醇后，解离为带正电的美兰和带负电的伊红。由于各种细胞成分化学性质不同，对各种染料的亲和力不同，因此染色后呈现不同的色彩。如血红蛋白和嗜酸颗粒为碱性可与酸性染料伊红结合染成红色。细胞核蛋白和淋巴细胞胞浆为酸性，与碱性染料美兰或天青结合染成紫蓝色或蓝色。中性颗粒呈等电状态，与伊红和美兰均可结合染成紫红色。此染色过程既有物理的吸附作用，又有化学的亲和作用。 ②PH值的影响：细胞各种成分均为蛋白质组成，由于蛋白质系两性电解质，所带电荷随溶液PH值而定。在偏酸性环境中正电荷增多，易与伊红结合，染色偏红。在偏碱性环境中负电荷增多，易与美兰或天青结合，染色偏蓝。
第二章血液一般检验 一、选择题 （一）、A1型题（标准型） 3. 以N表示五个中方格内红细胞总数，则红细胞显微镜计数法的计算式应为： A. N×5×10×104×200 B. N×5×10×105×200 C. N×25/5×10×106×200 D. N×5/25×10×106×200 E. N×25×10×106×200 5. 血红蛋白测定的参考方法： A. 沙利法 B. 氰化高铁血红蛋白法 C. 叠氮高铁血红蛋白法 D. 十二烷基硫酸钠血红蛋白测定法 E. 碱羟血红蛋白测定法 6. 国内推荐哪种方法作为血红蛋白测定的次选方法： A. 沙利法 B. 血气分析法 C. 叠氮高铁血红蛋白法 D. 十二烷基硫酸钠血红蛋白测定法 E. 碱羟血红蛋白测定法 7. 血红蛋白测定法中基本淘汰的是： A. 沙利法 B. 血气分析法 C. 叠氮高铁血红蛋白法 D. 十二烷基硫酸钠血红蛋白测定法 E. 碱羟血红蛋白测定法 8. HiCN法测定血红蛋白所用波长：