基于NIOS平台的嵌入式之--安装uclinux
安装有很多方式,我使用:Windows版的Quartus II和SOPC Builder产生.sof和.ptf文件，并在VMWare上安裝Linux进行μClinux的交叉编译.做之前确认虚拟机硬盘大小8G.
具体步骤:
一安装交叉编译环境Nios II gcc cross compiler
一、下载nios2gcc.tar.bz2或Altera原厂的nios2gcc-20080203.tar.bz2至/usr/local/src
二、将nios2gcc.tar.bz2解压缩到/opt/nios2
[root@localhost src]# tar -jxvf nios2gcc.tar.bz2 -C /
三、设定cross compiler路径
[root@localhost src]# vi ~/.bash_profile
修改bash_profile的內容如下所示，加上/opt/nios2/bin路径
# .bash_profile
# Get the aliases and functions
if [ -f ~/.bashrc ]; then
. ~/.bashrc
fi
# User specific environment and startup programs
PATH=$PATH:$HOME/bin:/opt/nios2/bin
export PA TH
unset USERNAME
四
重新执行bash_profile script，让所设定的路径马上生效，因而不必再重新登出登入
[root@localhost src]# source ~/.bash_profile
五
测试Nios II gcc cross compiler是否安装成功
[root@localhost src]# nios2-linux-uclibc-gcc -v
若出现以下结果，表示Nios II gcc cross compiler已经设定成功
Reading specs from /opt/nios2/lib/gcc/nios2-linux-uclibc/3.4.6/specs
Configured with: /root/buildroot/toolchain_build_nios2/gcc-3.4.6/configure --prefix=/opt/nios2 --build=i386-pc-linux-gnu --host=i386-pc-linux-gnu --target=nios2-linux-uclibc --enable-languages=c --enable-shared --disable-__cxa_atexit --enable-target-optspace --with-gnu-ld --disable-nls --enable-threads --disable-multilib --enable-cxx-flags=-static
Thread model: posix
gcc version 3.4.6
二编译uCLinux内核
一
下载μClinux到/usr/local/src，uClinux-dist-20070130.tar.gz
二
将uClinux-dist-20070130.tar.gz解压
[root@localhost src]# tar -zxvf uClinux-dist-20070130.tar.gz
uClinux-dist-20070130.tar.gz解压后很大，如果解压出错，可能是虚拟机空间不够大.
三
下载补丁,μClinux kernel patch for Nios II：uClinux-dist-20070130-nios2-02.7z到/usr/local/src/uClinux-dist
四
安裝补丁μClinux kernel patch for Nios II
[root@localhost src]# cd uClinux-dist
[root@localhost uClinux-dist]# gunzip -c uClinux-dist-20070130-nios2-02.diff.gz | patch -p0
若出现一下结果，表示补丁成功
patching file vendors/Altera/nios2nommu/config.arch
patching file vendors/Altera/nios2nommu/config.linux-2.6.x
patching file lib/libpng/Makefile
patching file linux-2.6.x/include/asm-nios2nommu/ide.h
patching file linux-2.6.x/include/linux/elf-em.h
patching file linux-2.6.x/usr/Makefile
patching file linux-2.6.x/arch/nios2nommu/kernel/vmlinux.lds.S
patching file linux-2.6.x/arch/nios2nommu/drivers/Kconfig
patching file linux-2.6.x/arch/nios2nommu/drivers/altcf.c
patching file linux-2.6.x/arch/nios2nommu/drivers/pci/Kconfig
patching file linux-2.6.x/arch/nios2nommu/drivers/pci/pci-auto.c
patching file linux-2.6.x/arch/nios2nommu/drivers/pci/pci.c
patching file linux-2.6.x/arch/nios2nommu/drivers/pci/Makefile
patching file linux-2.6.x/arch/nios2nommu/drivers/spi.c
patching file linux-2.6.x/arch/nios2nommu/drivers/Makefile
patching file linux-2.6.x/drivers/mtd/maps/altera.c
patching file linux-2.6.x/drivers/mtd/maps/Kconfig
patching file linux-2.6.x/drivers/net/Kconfig
patching file linux-2.6.x/drivers/net/Makefile
patching file linux-2.6.x/drivers/net/dm9ks.c
patching file linux-2.6.x/drivers/net/open_eth.c
patching file linux-2.6.x/drivers/net/dm9000.c
patching file linux-2.6.x/drivers/net/Space.c
patching file linux-2.6.x/drivers/net/smc91x.c
patching file linux-2.6.x/drivers/net/smc911x.c
patching file linux-2.6.x/drivers/net/mtip1000.c
patching file linux-2.6.x/drivers/usb/Kconfig
patching file linux-2.6.x/drivers/usb/host/Kconfig
patching file linux-2.6.x/drivers/usb/host/isp1362-hcd.c
patching file linux-2.6.x/drivers/usb/host/Makefile
patching file linux-2.6.x/drivers/usb/host/isp1362.h
patching file linux-2.6.x/drivers/usb/Makefile
patching file linux-2.6.x/drivers/ide/ide.c
patching file user/microwin/src/fonts/X6x13.c
patching file user/microwin/src/demos/nxroach/Makefile
patching file user/microwin/src/demos/nanox/nxterm.c
patching file user/microwin/src/demos/nanox/nterm.c
patching file user/microwin/src/demos/nxkbd/keynum.c
patching file user/microwin/src/demos/nxkbd/keyctrl.c
patching file user/microwin/src/demos/nxkbd/keyshft.c
patching file user/microwin/src/Makefile.rules
patching file user/microwin/src/drivers/kbd_ttyscan.c
patching file user/microwin/src/drivers/scr_fb.c
patching file user/microwin/src/drivers/mou_ser.c
patching file user/ftpd/ftpcmd.c
patching file user/ftpd/Makefile
五
建立配置文件
[root@localhost uClinux-dist]# make xconfig
出现图形界面,Vendor/Product Selection选择Altera
初次编译libc version一定选择none,系统类型要选Default all setting
存档退出
六
将SOPC Builder配置文件system_0.ptf复制到/usr/local/src
七
根据ptf文件配置
[root@localhost uClinux-dist]# make vendor_hwselect SYSPTF=/usr/local/src/system_0.ptf 出现选择，按照需要进行选择。
我是:1 (CPU_0)，1 (cfi_flash_0)，2 (sdram)。
八
建立romfs文件夹，错误可忽略。
[root@localhost uClinux-dist]# make romfs
九
开始编译μClinux核心
[root@localhost uClinux-dist]# make
生成image文件
[root@localhost uClinux-dist]# make linux image
在/usr/local/src/uClinux-dist/linux-2.6.x/arch/nios2nommu/boot/下找到zImage
进行硬件和uCLinux的烧写
一
将zImage文件和DE2_NIOS2.sof复制到Windows的D:\altera\70\nios2eds\examples\下二
打开Nios II Command Shell
开始-> 程序-> Altera -> Nios II EDS 9.0 -> Nios II 9.0 Command Shell
三
将sof文件烧入到开发板
[SOPC Builder]$ nios2-configure-sof DE2_NIOS.sof
将zImage下载到SDRAM
[SOPC Builder]$ nios2-download -g zImage 四
启动μClinux
[SOPC Builder]$ nios2-terminal
如果看到下面表示安装成功
内政办发…2010?8号 内蒙古自治区人民政府办公厅转发 自治区国土资源厅等部门关于进一步推进 矿产资源开发整合工作实施意见的通知 各盟行政公署、市人民政府，自治区各有关委、办、厅、局，各有关企业、事业单位： 经自治区人民政府同意，现将自治区国土资源厅等部门制定的《关于进一步推进矿产资源开发整合工作的实施意见》转发给你们，请结合实际，认真贯彻落实。 二○一○年一月十四日
关于进一步推进矿产资源开发 整合工作的实施意见 国土资源厅发展改革委经委财政厅监察厅公安厅环境保护厅商务厅水利厅林业厅安全监管局煤矿监察局工商局煤炭工业局广电局 内蒙古电力(集团)有限责任公司 (二○一○年一月） 《国务院关于全面整顿和规范矿产资源开发秩序的通知》(国发…2005?28号)和《国务院办公厅转发国土资源部等部门对矿产资源开发进行整合意见的通知》(国办发…2006?108号)下发以来，我区高度重视，认真贯彻落实，制定下发了全区整顿和规范矿产资源开发秩序实施意见、煤炭和非煤矿产资源整合实施方案，成立了自治区、盟市及旗县(市、区)三级整合工作机构，加强宣传，精心组织，狠抓落实，深入督查，资源整合工作取得显著成效。全区确定实施资源整合的230处煤矿区全部完成整合工作，关闭了地方煤矿852处，淘汰落后生产能力4216 35万吨。通过资源整合和技术改造，全区矿井生产能力由整合前的平均不足9万吨/年，提高到70万吨/年，资源回采
率提高了20%以上。稀土、钨矿通过整合实现了有序开发，5个重点矿区资源整合工作全面完成。全区共确定非煤资源整合区320个，已完成了294个，其中重点整合区基本完成了整合工作。全区矿山安全生产和环境保护工作得到了明显改善，各类违法、违规案件得到了及时查处和有效遏制。但由于矿产资源开发整合是一项复杂的系统工程，涉及多方面利益关系的调整，政策性强，工作难度大，目前各地区整合工作进展还不平衡，一些地区还存在违法违规、矿山布局不合理以及环境和安全等问题，矿产资源开发监督管理的长效机制体制还有待于进一步完善。 为进一步推进我区矿产资源开发整合工作，促进矿业经济可持续发展，根据国土资源部等12部门《关于进一步推进矿产资源开发整合工作的通知》(国土资发…2009?141号)精神，现提出如下意见。 一、目标任务 在全面完成自治区矿产资源整体方案已确定的资源整合各项目标任务的基础上，继续加大矿产资源整合和专项整治工作力度，强化整合政策和措施，进一步调整优化矿产开发结构，推动产业升级，促进矿产资源高效开发利用，着力构建矿产资源勘查开发监督管理的长效机制。 (一)矿产资源勘查开发布局进一步优化。要依托基础地质和矿产勘查成果，科学编制矿产资源规划、地质勘查专项规划、矿区总体规划、矿业权设置方案和矿业权年度投放计划，实施矿业权投放计划管理。出让矿业权必须符合矿区总体规划、矿业权设置方案和矿业权年
Western实验步骤 1. 电泳(Electrophoresis) （1）SDS-PAGE凝胶配制 SDS-PAGE凝胶进行配制，配方试剂去离子水，Arc-HCL(29:1)，10%APS，SDS,TEMED。 一般按分子大小配胶，现实验分离胶配12%-15%的胶，浓缩胶10%的胶。 配胶步骤： 1.清洗玻璃板，装好（注意不要漏即玻璃板要对齐）。 2.按比例配分离胶（8ml-10ml） 3.加水压胶，待分离胶凝固后（可见有分离胶与水有分隔线，一般凝固时间30分钟-1小时左右），吸走上层水面 4.按比例配浓缩胶（3ml-4ml），加入分离胶上层，插入梳子，（注意别有气泡），待凝。（如果今日不上样可以放入4°C冰箱） 注意：玻璃板要洗得干净；玻璃板要装好，不要漏；制胶过程中，一定要充分混匀，而且避免有气泡；（2）样品处理 1.准备无菌EP管，向EP管内加入样品蛋白质体积的1/4体积的SDS缓冲液（5X的SDS-PAGE蛋白上样缓冲液，现样品加 3.5ul），之后加入相应蛋白样品（要制冰，蛋白质样品要放置在冰上），充分吹打混匀 2.100℃水浴加热5分钟，以充分变性蛋白。 3.12000r离心5分钟。 （3）上样与电泳 1.将玻璃板装入电泳槽中，加电泳缓冲液至泳槽的的2/3左右 2.蛋白质样品冷却到室温后，直接上样到SDS-PAGE胶加样孔内即可，样品两边加蛋白质Maker(6ul)（注意上样蛋白质顺序，一定不要弄错）。 3.通常把电压设置在100V，然后设定定时时间为100分钟（一般为90-120分钟）。设置定时可以避免经常发生的电泳过头。 通常电泳时溴酚蓝到达胶的底端处附近即可停止电泳，或者可以根据预染蛋白质分子量标准的电泳情况，预计目的蛋白已经被适当分离后即可停止电泳。（为了避免电泳过头，最好是在电泳设定时间的提前30分钟观察电泳） 注意：上样时尽量避免样本被上漏出孔外；注意电泳时间的把握；最重要的是一定要记录上样顺序，必要时记录在本子上。 3.转膜(Transfer) 1.物品准备，甲醇，转膜缓冲液，滤纸，转膜槽，玻璃皿3个，制冰。 2.取下胶板，用专门的板将玻璃板分离（务必不要将胶弄破，动作轻些，从下面和上面分离玻璃板），切适合大小的胶（不要切掉MAKER）。 3.用专门的板将胶转入事先放有转膜缓冲液的皿中，记录胶的顺序，剪与胶同等大小的滤纸和转膜纸PVDF膜，PVDF膜要放入甲醇中浸15秒（一般1-2分钟），胶要切角做标记（不要切到maker）,一般一个切三个角，一个切一个角，记录顺序 4.铺膜，PVDF膜铺在胶上，在PVDF膜上铺三层滤纸，然后胶的对侧面铺三层滤纸即可（滤纸要大于等PVDF膜，PVDF膜要大于等胶），赶尽气饱。 5.再将铺好的膜胶滤纸，转入转膜夹中，有PVDF膜这面放在正极侧（即无色透明夹这面），再将夹子放入转膜槽里（电极不要放错，蛋白质带负电的）
资源整合能力的形成与提高 所谓资源整合，就是将一些看起来彼此不相关的事物加以组合，创造出一种新生事物，使各种资源自身的价值得到增值的过程。从现代领导科学的研究来看，资源整合能力的高与低，往往是衡量一位领导者领导水平高低的一个非常重要的标志。善于整合资源的领导者，就像故事中的这位商人一样，本身并不拥有太多资源，但却具有独到的眼光，能够看出这些资源背后潜藏的价值，能够从这种价值增值中获取自己的收益。 新创企业资源整合能力的内涵 能力学派认为在组织内部整合各种资源最终形成公司的能力体系，通过组织间的学习完善组织的能力就是另一种重要的价值活动。能力构建与学习所创造的租金收入具有熊彼特租（Schumpeterian rents）的性质。基于能力观的学者往往注重企业动态能力在企业内部过程可能发挥的有效作用，但忽视了这些能力赖以存在的基础以及必须怎样与市场环境匹配才能真正发挥它们的有效作用。 Penrose（1959）、Wernerfelt（1984）认为，竞争优势要求不仅要充分利用现有的资源和能力，而且要开发新的资源和能力。以Barney（1991）为代表的传统资源学派，不对资源和能力加以特别的区分，有研究者都把企业的能力看作是一种特殊的企业资源。然而，直到 20 世纪 90 年代中后期，才有学者开始关注企业如何开始发展企业的特定能力和更新能力，资源选择机制在资源获取之前对企业绩效产生作用，而能力构建机制则在资源的具体配置上发挥作用（Makadok，2001）。 Terence（1992）指出，在如今的经济环境中，企业的竞争优势不仅来源于独特的资源，而且也来源于配置这些资源的方式。动态能力的产生不仅需要企业本身已经拥有一个较强的资源和能力的基础，而且还要求企业能够有效地配置现有资源，并能够不断地创造新的资源和新的知识。 Mahoney 和 Pandean（1992）认为，把潜在资源转为活动和行为就是企业能力的表现。由此来看，能力具有以下特性：（1）是企业获取、发展并使用其资源
Western-Blot 操作流程 （一）组织中总蛋白的提取 用干净的剪刀剪取绿豆大小的组织块于1.5ml的EP管中，加入200uLRIPA裂解液(含PMSF，比例为97：1：1：1)，用杵子研磨3-4min, 段事先在酒精里浸泡至少30min，用之前用滤纸吸干酒精，） 20-30s,每隔5min 后在 4℃下12000rpm 离心 5min，取上清分装于 1.5mlEP管中并置于-80℃冰箱保存。 （二）BCA法蛋白含量的测定 (1) 从-20℃取出 1mg/ml BSA，室温融化后，备用。 (3)以上步骤完成后，在所有加样的孔里各加上200uLBCA蛋白浓度测定试剂（按试剂A：试剂B=50：1的比例配置），然后置于37℃水浴锅30min后取出。 (4)酶标仪测定OD值。 (5)EXCEL表格制作标准曲线，按照标准曲线计算各样本的蛋白浓度。 （三）稀释蛋白及蛋白变性 如果计算出的样本的蛋白浓度偏高，需要用RIPA裂解液将蛋白稀释（一般将蛋白浓度稀释至5-10ug/uL）;稀释完后取10-30uL的样本蛋白置于新的1.5mLEP管中，加入新EP管中总体积1/4体积的上样缓冲液，置于99-100℃的干式恒温器中加热5-10min,使蛋白变性。（注意：将EP管的盖子盖紧，插入加热器的大圆孔中）煮过的蛋白置于-20℃冰箱保存。 （四）制作SDS电泳胶 ⑴清洗玻璃板，双蒸水冲洗晾干后，根据厂家说明安装玻璃板。 ⑵配置10%的分离胶 配方：H2O2 4.0ml 30%丙烯酰胺液 3.3ml 1.5mol/l Tris （ PH8.8） 2.5ml 10%SDS 100ul 10%过硫酸胺 100ul TEMED 4ul ⑶分离胶溶液中加入 TEMED 以及 10%过硫酸胺后需立即混匀（防止未灌胶就发生凝固），将混合液立即加入玻璃板内，距梳子下缘约 lcm 处即可，蒸馏水封顶，待凝胶完全聚合（约30min）后，倒去双蒸水。 ⑷制备5%的浓缩胶 配方；H2O2 3.4ml 30%丙烯酰胺液 0.83ml 1.5mol/l Tris （ PH6.8） 0.63ml 10%SDS 50ul
财务软件安装操作步骤说明 一．安装财务Oracle软件 1.将本机jdk文件夹复制到对方D盘根目录下； 2.将本机的hosts文件复制到对方etc文件下，路径如图：； 3.将对方机器中jdk文件夹中bin子文件夹中的“Oracle财务.Imk（快捷方式）”复制到 对方桌面上，如图所示：； 4.双击该快捷方式（跳出的页面选择Accept），如果跳出Oracle登陆界面即可。 如图所示： 二．安装财务凭证软件（先安装财务凭证软件，再安装ERP）
1.在对方机器的运行中输入\\196.6.9.44；在如图所示的路径中找到“ORAINST.EXE”文 件； 2.开始安装：运行 ⑴语言：（选择）简体中文； ⑵目标路径改为“C：”下（注意：与后面ERP所装的ORAINST文件夹不能安装在一个盘内）； ⑶到这步 选择5个安装项（如图所示）： 选择安装； ⑷一直ok到结束； ⑸到这步
点“退出”即可； 3.将本机App_mate文件夹复制到对方D盘根目录下； 4.将本机中文件复制到对方admin文件下， 路径如图：； 5.将本机“（快捷方式）”复制至对方桌面； 6.关闭多余文件夹； 7.打开登录界面即可； 8.若对方要求配置打印机，先选择合适的打印机型号，在打印机设置中选择打印机服务器 属性，创建新格式（注意：设置——宽度大小不变、高度大小减半） 注意：若安装失败，卸载时需到注册表中进行删除，再把主机中原有文件夹删除即可。三．安装BO 1. 在对方机器的运行中输入\\196.6.9.44；在如图所示的路径中找到“sno.txt”文件，并打开；
2. 同时，在如图所示的路径中找到“”文件； 3.开始安装：运行 ⑴Begin→Next→输入序列号： →Next→Next ⑵到这步 选择“Custom Setup”项 ⑶到这步 选择4个安装项（如图所示）：（先全不选，在进行勾选） 选择安装；“BusinessObjects”、“Designer”、 “Document Agent”、在Data Access中选择 “Oracle”（共4项） ⑷在弹出的文件夹中找到“Business objects” 快捷方式至对方桌面； ⑸关闭多余文件夹； 4.将本机bo_rep文件夹复制到对方D盘根目 录下； 5.双击“Business objects（快捷方式）”
Western bolt 一、实验目的 通过实验了解western blot技术的原理和操作。 二、实验原理 SDS-PAGE是最常用的定性分析蛋白质的电泳方式,特别是用于蛋白质纯度检测和测定蛋白质分子量。 PAGE能有效的分离蛋白质,主要依据其分子量和电荷的差异,而SDS-PAGE的分离原理则仅根据蛋白质的分子量的差异。 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳，是在聚丙烯酰胺凝胶系统中引进SDS（十二烷基硫酸钠），SDS会与变性的多肽，并使蛋白带负电荷，由于多肽结合SDS的量几乎总是与多肽的分子量成正比而与其序列无关，因此SDS多肽复合物在丙稀酰胺凝胶电泳中的迁移率只与多肽的大小有关，在达到饱和的状态下，每克多肽可与1.4g去污剂结合。当分子量在15KD到200KD之间时，蛋白质的迁移率和分子量的对数呈线性关系，符合下式：logMW=K-bX，式中：MW为分子量，X为迁移率，k、b均为常数，若将已知分子量的标准蛋白质的迁移率对分子量对数作图，可获得一条标准曲线，未知蛋白质在相同条件下进行电泳，根据它的电泳迁移率即可在标准曲线上求得分子量。 硝酸纤维素膜(nitrocellulose filter membrane，简称NC膜)，在胶体金试纸中用做C/T线的承载体，同时也是免疫反应的发生处。NC膜是生物学试验中最重要的耗材之一。 第一抗体就是能和特异性抗原特异性结合的蛋白。第二抗体是能和抗体结合，即抗体的抗体，其主要作用是检测抗体的存在，放大一抗的信号。 化学发光HRP底物（辣根过氧化物酶底物，也常被称为ECL试剂）是目前Western blot检测中最为灵敏的试剂。显影液的A液主要成分为鲁米诺（Luminol）及发光增强剂，B液主要成分为过氧化物溶液。二抗上含有HRP（辣根过氧化物酶），可以催化A液和B液反应发光。 三、实验器材 1.电泳槽，胶板架子 2.转膜仪 3.NC膜 4.电泳电源 5.滤纸 6.摇床 7.X射线摄影暗匣 8.X射线胶片 9.塑料薄膜 四、实验试剂 1.runningbuffer 5xrunningbuffer(1L) Tris 15.1g
w e s t e r n-b l o t-全过程-详细步骤
一：提蛋白： 1.PBS洗2遍，加RIPA 80-100ul（含10xcooktail）。 2.在冰上刮到离心管中，在冰上裂解20-30min。 3.4度离心，13000rpm、10-15min（准备新的离心管、配BCA 200ul/每孔(A:B=50：1)、96孔板加 PBS(2个对照组20ul，实验组18ul)）。 4.取上清转移到新离心管中，记住转移的体积。 5.96孔板中每孔加2ul蛋白液。 6.每孔加200ulA/B混合液。 7.37度半小时。 8.测浓度以及标化用一起在libo文件夹找模板，最后得到每组需要加的RIPA以及loding buffer，还 有标化后的浓度。562波长0.046斜率（实验组值-对照组值）/斜率=浓度浓度最好在4-8ug/ul最好，跑胶时就可以只加10ul蛋白液（蛋白含量40-80ug） 9.加好对应的RIPA以及loding buffer后，煮蛋白5-15min，-20度保存。 二：跑胶 1. 1.0玻板，洗干净 2.配制10%或者12%分离胶一块胶需要5ml 3.灌分离胶，在分离胶上层灌无水乙醇 4.配制5%浓缩胶 2块胶需要4ml 5.待分离胶干后，灌浓缩胶，插梳子 6.待胶干后，将胶及玻板一起放入电泳槽，拔梳子，倒入1*running buffer（上腔灌满，下腔过电线 丝） 7.预电泳，100v，10-15min 8.加样（蛋白样品及marker）10ul，marker 5ul 9.60v 10-20min，之后100-110v 三：转膜
1.配transfer buffer ，用10*transfer buffer 稀释10倍，并加20%甲醇 2.transfer buffer浸泡海绵、滤纸 3.pvdf膜，甲醇泡1分钟，清水洗2次，泡在transfer buffer里20min 4.胶取出，在transfer buffer里泡10min 5.黑胶白膜（一层海绵，2层滤纸） 6.转膜100v，1—1.5h（黑对黑，冰板，在冰里跑） 四：封闭、一抗、二抗 1．5%脱脂奶粉（pbst溶）1h 37度 2.一抗4度12h 3.pbst洗膜，3次，每次10min 4.二抗（1:5000）1h 37度 5. pbst洗膜，3次，每次10min 6.显影剂A和B各300ul PBST：1000ml’PBS+1mltween 5%脱脂奶粉：100mlPBST+5g脱脂奶粉 10*running buffer：tris 30.3g 甘氨酸 144.1g sds 10g 加水至1000ml 10*transfer buffer：tris 30.3g 甘氨酸 144.1g 加水至1000ml 1* transfer buffer：100ml10*transfer buffer 200ml甲醇加水至1000ml
资源整合流程 标准作业指导书 1目的资源整合就是要优化资源配置，要获得整体的最优。对不同来源、不同层次、不同结构、不同内容的资源进行识别与选择、汲取与配置、激活和有机融合，使其具有较强的柔性、条理性、系统性和价值性，并创造出新的资源的一个复杂的动态过程。进而增强企业竞争优势提供建设性建议。 2范围整合人力资源、客户资源、营销资源。 3职责根据企业产业定位、市场定位、产品定位对资源进行识别与选择、涉取与配置、激活与融合行成实际核心资源体系，（评估、审核、签定协议）并加以运用而产生绩效。 4 作业要求 4.1 流程图
4.2 识别与选择 4.2.1资源识别 a）人力资源：涵盖健康讲师、中医主治师、西医主治医师、营养师； b）客户资源：涵盖团体客户资源与个人客户资源，团体客户包含绿城房产集团、绿城控股集团内所有分子公司以及以公司形式产生合作、服务的团体；个人客户资源包含所有以个人形式产生合作及服务的单位； c）营销资源：是指在市场营销中形成的为组织或个人占有的核心技术、经验积累、产品及个人声誉、客户关系、市场网络等资源；涵盖健康行业诊疗技术、健康类产品、医疗机构、健康管理机构。 4.2.2 资源选择 a）人力资源 a1）健康讲师须持有讲师职业资格证以上资质； b1）中医主治师须省级名中医以上资质，从事相关行业20年以上； c1）西医主治医师须副主任医师以上资质，从事相关行业10年以上； d1）营养师为公共营养师，需持有国家三级营养师以上资质，从事相关行业5年以上 b）客户资源 用一个组织机构把他们组织起来，如会员制、顾客俱乐部、顾客联盟等组织，使客户集群，企业集群的客户资源可以更好地增加其市场竞争优势 c）营销资源 c1）健康检测技术：国内领先健康检测技术，须有相应资质认证； c2）健康类产品：保健品须有蓝帽子； c3）医疗机构：医院须国家三级甲等医院与国内国际先进医学中心； c4）健康管理机构：需卫生行政管理部门注册的合法医疗机构许可；“人员资质”是体检医生、护士的职业许可；“设备资质”是体检设备的医疗器械批准证书、良好的维护保养和应用状态。 4.2.3资源选定 资源选定须经过公司评估、评审、专业机构认证和签定协议后方经行涉取。 4.3 涉取与配置 4.3.1 资源涉取 资源涉取包括三个方式：资源购买、资源联盟、资源并购。 a）资源购买：通过市场购入所需的资源，需要注意的是，诸如知识尤其是隐性知识等新资源很难通过购买可以获取并能为企业所用的，这些资源可能是附着在非知识资源(如引进的设备等物质资源)之上。 b）资源联盟是指通过联合其他组织，对一些难以或无法通过自己进行开发的资源实行共同开发；这种方式不仅可涉取显性知识资源，还可涉取隐性资源，不过
1、组织蛋白的提取 取上述用于Mn含量测定中另外4只大鼠剩余的纹状体组织置于2ml EP管中，用干净的剪刀将组织块尽量剪碎，加400μl单去污剂裂解液（含PMSF）于超声器中进行裂解，然后置于冰上。几分钟后再超声数秒再置于冰上，要重复几次使组织尽量碾碎。裂解30min后，即可用移液器将裂解液移至1.5ml离心管中，然后在4℃下12000rpm离心5min，去上清分装于新的离心管中并置于-20℃保存。 2、蛋白含量的测定 （1）制作标准曲线 从-20℃取出1mg/ml BSA，室温融化后，备用。取96孔板，按下表加入各种试剂。混匀后，室温放置2min。在酶标仪上比色分析，测量OD值。 表2，标准曲线的制备 0μg 2.5μg 5.0μg10.0μg20.0μg40.0μg 1mg/mlBSA - 2.5μl 5.0μl10.0μl20.0μl40.0μl 0.15mol/L NaCl 100μl97.5μl95.0μl90.0μl80.0μl60.0μl G250考马斯亮蓝溶液1ml 1ml 1ml 1ml 1ml 1ml （2）检测样品蛋白含量 ①取96孔板，实验用各孔加入4℃存储的考马斯亮蓝溶液1ml。室温放置30min，后即可用于测蛋白。 ②其中一孔加0.15molNaCl溶液100μl做空白对照，其余个孔加95μl 0.15molNaCl溶液和5μl 0.15molNaCl待测蛋白样品，混匀后静置2min，在酶标仪上比色分析，在595nm处测量OD值。 ③绘制标准曲线，测得的结果是5μl样品含的蛋白量。 3、SDS-PAGE电泳 （1）干净玻璃板对齐后放入夹中卡紧。然后垂直置于架上准备灌胶。 （2）制备分离胶并灌胶：配置8ml 10%分离胶，3.2ml ddH2O，2.0ml 1.5mol/L Tris·HCl分离胶缓冲液（pH8.8），2.72ml 30%丙烯酰胺溶液，80μl 10%SDS，80μl 10%APS（过硫酸铵），16μl TEMED。
资源整合及利用 从去年至当下，公司的各方面资源已经积累了很多，另公司以外的人士大部分感到不可思议乃至在态度上及其关注。但在公司实际操作项目运作的中基层人员来说，大部分时候却感到力不从心，有种力量使不出来的感觉。当然，有这种感觉一定是哪里存在问题所致，不然怎么会有这样的感受呢？公司当下处在及其艰难的时候，当初选择加入公司的时候就已经想好会与公司共同努力承担成功与失败，所以一直在用心的关注公司内外的各种大小变化。从公司扎扎实实的运营业务发展到边干业务边搞文化建设，现在有很重视内部约束和文化革命到无业务可落地，我的心里很难过。我觉得我该给您汇报一下我的想法了。 实实在在的干事业，对外虚实结合造势创业我都特别支持您的做法，但是无论如何在事业的发展中要有自己的特色，特色的产品、服务和功能。咱们公司是很有资源优势的，也很有市场优势，团队人员层次也都不低，都拿的出手。现在就是在对目标市场的专业研究和成本核算方面做得还不足。当然，就这问题足以另公司发展缓慢迷失发展方向。最近，我从专业的招商引资书籍中和与地方城市实际搞招商引资的负责人口中及国家各级政府对招商引资和县域经济发展工作政策中理解到，我们网站和报纸实际上不应该是代替政府搞招商引资工作而是要帮助政府招商引资团队更加专业的去工作来促进经济发展。那一定要做到专业的咨询培训、专业的融资顾问、专业的项目规划、专业的会议会展配合和快捷准确的国家政策资讯。以上五部分就像一个手掌，撰起来就是一个拳头，单独拿出哪个手指都具有特色。网站前台是门面，网站后台是实力，网站形成会员产品后服务就是五大部分形成的一个拳头，或者单独的一项服务。网站后台还要继续打造强势的背景，另人更加向往。而产品及服务一定要成套系打组合拳，以下我简单
学习开发套件V3.0中嵌入Uclinux的步骤和方法 在学习开发套件V3.0中嵌入Uclinux的步骤和方法，硬件系统为EP1C6,2Mflash,8Msdram. 开发环境：SOPC学习开发套件V3.0，型号EP1C6。QII5.1+SP2,NiosII IDE5.1+SP1。 一 .安装nios2linux开发包nios2linux-1.4 二 .建立硬件系统 1． QII中建一工程linux_nios，并添加NIOSII CPU，QII工程和平常的建立并没有什么区别，只要得加上flash和sdram，因为这里只是对linux的简单调试，所以SOPC中只添加LED和UART等几个简单外设。如下图： 注意为防止不必要的麻烦，这里尽量使用默认名字。 如果想用USB连接电脑，在QII中把串口连接到USB线的IO管脚上即可。 我们的工程中是两个口都接了，使用串口或者USB口都行。 三．建立软件环境 打开NIOSII IDE 3.1 建立linux内核 file-> new-> project 后如下图：
注意：在安装Microtronix_uclinux_nios2开发包后在IDE中分增加出如上图的Microtronix NiosII选项如果没有可以按下面方法解决： 1)、打开cmd，在 开始->运行 那里输入cmd 2)、cd到你的NiosII的工作目录下面，我的NiosII安装在D盘，如下： 3)、在这里输入命令nios2-ide.exe –clean，进入NiosII IDE的clean模式，选择workspace：
这是在New->Other那里你就可以看到那个linux的目录项了。关了IDE窗口和cmd窗口，这样就可以正常看到Microtronix_linux了。 3.2 输入内核名字 按next: finish完成 四. 构建内核： 4.1 右键内核名，在弹出菜单中选择Configure Kernel如下：
Westen blot 一、配胶 （一）安装胶架 （二）配胶 1、分离胶：10%（10ML） O 4 ml DdH 2 30%Acr 3.3ml Tris-Hcl(8.8) 2.5ml 10%SDS 0.1ml 10%过硫酸铵AP 0.1ml TEMED O.OO4ML 2、积层胶: 4ml O 2.7 ml DdH 2 30%Acr 0.67ml Tris-Hcl(6.8) 0.5ml 10%SDS 0.04ml 10%过硫酸铵AP 0.04ml TEMED O.OO4ML 注意事项：1、TEMED催化AP产生自由基，加速Acr凝胶聚合，一般于4度存放。 不宜多加，否则胶易变硬脆裂。 2、TEMED易燃、腐蚀性、神经毒性，要注意防护。易挥发，使用后立 即盖紧瓶盖，佩戴PE手套。 3、每加完一样晃匀，TEMED最后加。 （三）灌胶 1、分离胶1ml枪吹打均匀，避免气泡，尽快灌入固定好的玻璃板中。 O，压平分离胶界面。待胶凝后可见分割折线。 2、分离胶上灌满ddH 2 O，分隔线先清楚后不清楚，待胶凝后又可见。 可用乙醇代替ddH 2 O，用滤纸吸干。 3、分离胶凝后，倒去顶部ddH 2 4、积层胶1ml枪吹打均匀，灌入玻璃板中至顶部。 5、插入梳子，注意梳子底部应无气泡。略倾斜插入梳子可避免出现气泡 6、20-30分钟后胶凝。 二、电泳 （一）准备 1、装上电泳装置，倒入1*电泳液。先倒内槽（新）没过短玻璃板，如内槽不漏液再加外槽，没过钢丝电极即可，内外槽不能相通。 2、拔出梳子（用力均匀缓慢拔出），用10vl枪点样。 （二）上样和电泳 1、10vl枪点样。（1.0胶最大上样量30vl，0.75胶最大上样量25vl） 2、样尽量点在中间孔位，空孔位用残样或5*buffer填补，避免边缘效应，使电流在胶板中均匀分布。
资源对大多数人来说是短缺的，98%的资源靠整合。只有把有限的资源整合到一块，就会有意想不到的效果。 一个位智者把一个穷孩子，世界首富的女儿，世界银行副行长的职位，首富的存款整合在一起，产生了多赢的良好效果。他是如何做的呢？首先他了解各自的需求： 1、一个穷孩子长的很帅，也很聪明，很追求上进，到了谈婚论嫁的年龄，却因为家庭贫穷找不到合适的对象。 2、世界首富的女儿长的很美，从小娇生惯养，非常任性，找了很多富家子弟，都因为种种原因，没有走进婚姻殿堂，首富为此伤透脑筋。 3、世界银行的行长，想让世界上的富人把钱存到银行中去，绞尽脑汁效果不明显。 其次他对症下药： 1、智者找到穷孩子说：“你想进城吗？想找媳妇吗？想成为世界银行的副行长吗？”。穷孩子连考虑也没有考虑就回答，“想！非常想！”。“那好！你必须提高自己的修养，学习贵族的礼仪，学习金融知识。一年后，这些东西学好了，你就会进城、找到漂亮的媳妇，当世界银行的副行长”。“谢谢您的指点，我一定按照您的要求拼命做好您说的一切！”。穷孩子感恩戴德，一步一鞠躬的离开了，开始按智者的目标奋斗。 2、智者又找到了世界首富，说：“你女儿想找一个有修养、有知识、长的帅，任世界银行副行长的年轻小伙子做终身伴侣吗？”。“当然想！”首富说：“这种好事哪里有啊？请您老兄多帮忙！”。智者说：“别着急，
你耐心等，一年后我一定给你找到如意的女婿！”。智者在首富的连连致谢中离开了。 3、智者又找到了世界银行的行长，说：“您想让世界首富的存款都存到你们银行吗？”行长说：“做梦都想啊，我们做了很多工作，首富的钱也没有存过来。怎么才能做到让首富的存款全部存到世界银行来呢？”。智者说：“有个小伙子，学识渊博，业务能力很强，是世界首富女婿的首选人物，他很有办法能让首富的存款放到世界银行来。如果一年内，能聘他当世界银行的副行长，那么存款的问题就解决了！”。行长爽快的答应了。 再次他巧妙地穿针引线： 一年的时间很快就要过去了，在智者的指点下，小伙子学有所成，仪表堂堂，风度翩翩。智者领着小伙子先找到世界银行行长，行长面试了小伙子后，立即下文聘他为世界银行的副行长，让他专门做首富的工作，把首富的全部存款转到世界银行来。小伙子由此成为最年轻的世界银行副行长，成为真正的年轻贵族。 智者领着刚担任世界银行副行长的小伙子，来到首富家。首富和他的女儿非常满意，面对这个前途无量，风流倜傥的年轻人，对智者千恩万谢。首富对智者说：“您费了这么大劲，给我找到了这么好的女婿，我如何感谢您呢？”！智者说：“不用，你如果要感谢的话，那就支持你的女婿吧，把钱存到他所在的世界银行，让他更有机会大展宏图！”。首富说：“没有问题，马上就能办理！”。
UC/OＳ和uＣｌｉnux的比较 出处:单片机商城发布日期:2０05-9－1011:1４：28 浏览次数：356 UC／ＯＳ和uClｉｎux的比较 摘要:嵌入式操作系统是嵌入式系统应用的核心软件。本文通过对两种典型的开源嵌入式操作系统的对比，分析和总结嵌入式操作系统应用中的若干问题，归纳嵌入式操作系统的选型依据。 关键词：嵌入式系统操作系统uC／OS uＣｌiｎux 引言 随着现代计算机技术的飞速发展和互联网技术的广泛应用，从PＣ时代过渡到了以个人数字助理、手持个人电脑和信息家电为代表的3C(计算机、通信、消费电子)一体的后PC时代。后PC时代里，嵌入式系统扮演了越来越重要的角色，被广泛应用于信息电器、移动设备、网络设备和工控仿真等领域。嵌入式系统是以嵌入式计算机为核心，面向用户、面向产品、面向应用，软硬件可裁减的，适用于对功能、可靠性、体积、成本、功耗等综合性能有严格要求的计算机系统。随着嵌入式系统的广泛应用，传统的前/后台程序开发机制已经不能满足日益复杂和荷记得的实现要求，因而现场常常采用嵌入式产时操作系统PROS（Reａl TｉmｅＯperatｉｏn Syｓｔｅm）开发实时多任务系统。嵌入式实时操作系统一般可以提供多任务的任务调度、时间管理、任务间通信和同步以及内存管理ＭMＵ（Ｍｅｍory MａnagｅｒＵnｉt)等重要服务,使得嵌入式应用程序易于设计和扩展。采用RＴＯS
可以使嵌入式产品更可靠、开发周期更短。在嵌入式应用中使用RTOＳ已经成为当前嵌入式应用的一个热点。 完成简单功能的嵌入式系统一般不需要操作系统。如，以前许多MＣS51系列单片机组成的小系统就只是利用软件实现简单的控制环路;但是随着所谓后ＰＣ时代的来临,嵌入式系统设计日趋复杂,嵌入式操作系统就必不可少了。 嵌入式RTOＳ在系统实时高效性、硬件的相关依赖性、软件固化以及应用的专业性等方面具有较为突出的优势。一般而言,嵌入式操作系统不同于一般意义的计算机操作系统,它有占用空间小、执行效率高、方便进行个性化定制和软件要求固化存储等特点。 从20世纪80年代起,国际上就有一些ＩT组织、公司，开始进行商用嵌入式操作系统和专用操作系统的研发。这其中涌现了一些著名的嵌入式操作系统，如Micrｏsofｔ公司的WinCＥ和WinｄRivｅr Sｙstem公司的ＶxWo ｒｋｓ就分别是非实时和实时嵌入式操作系统的代表。但是商用产品的造价都十分昂贵，用于一般用途会提高产品成本从而失去竞争力。 UC/OS和uCｌiｎｕx操作系统是用两种性能优良、源码公开且被广泛应用的免费嵌入式操作系统，可以作为研究实时操作系统和非实时操作系统的典范。本文通过uＣ/OS和uClinux的对比,分析和总结嵌入式操作系统应用中的若干重要问题，归纳嵌入式系统开发中操作系统的选型依据。 1两种开源嵌入式操作系统介绍 uC/OS和uＣｌiｎｕx操作系统,是当前得到广泛应用的两种免费且公开源
Western Blot实验技术一、制胶 SDS-PAGE分离胶配方表 1、检查制胶器是否漏水，吸干玻璃中水分
2、配置分离胶，加入玻璃板中（注意：不能有气泡和杂物），距离玻璃上口1.5mL停止加胶。 3、再加ddH2O或异丁醇水封除去气泡，凝胶后倒掉水，吸干水到浓缩胶插梳。 二、上样 1、先在内槽加满电泳液才可以拔梳子。 2、拔梳子时垂直向上拔出，不可左右摇晃梳子。 3、拔完梳子后观察梳子孔，是否有缺口和歪，用针头拨正。 4、上样时从左到右依次上样。 5、若上样组不多时，左右第一孔不加样。 6、要预留Marker的上样孔。 三、电泳 四、转膜
PVDF膜即聚偏二氟乙烯膜（polyvinylidene fluoride）是蛋白质印迹法中常用的一种固相支持物。PVDF膜是疏水性的，膜孔径有大有小，随着膜孔径的不断减小，膜对低分子量的蛋白结合就越牢固。 （转膜缓冲液：需4度预冷，现配现用，不能放太久。） 1、转印滤纸：全胶长8.5cm，宽5.5cm，需剪裁成7层滤纸，压平后约3mm。需在转膜缓冲液中平衡浸泡备用。 2、海绵垫：在转膜液中平衡浸泡备用。 3、PVDF膜：剪裁8.5cm*5.5cm ，需在甲醇中浸润2min（活化膜上正电基团），然后在转膜缓冲液中平衡浸泡备用。 4、凝胶：凝胶也需要在预冷的转膜转膜缓冲液中平衡浸泡3－5分钟。否则在转膜过程中会出现皱缩，导致出现转移的条带变形。 三明治夹心法：负极（黑）-海绵垫-滤纸-胶-PVDF膜-滤纸-海绵垫-正极（白） 转膜时间：通电恒流，60V，一个槽100mA左右，1h
（注意：在操作过程中用玻棒赶走气泡。 装置转膜仪时注意黑对黑（负对负），白对红（正对正）。 装置运行时需冰浴。） 五、封闭 在进行抗体杂交之前，需要先对转印膜进行封闭，以防止抗体对非转印蛋白区域的非特异性吸附。 封闭一般采用异源性蛋白质或去污剂，本实验室常用的有5%BSA，10%脱脂奶等，至于选择哪一类封闭液，首先应考虑与检测目的相适应（做l酪氨酸磷酸化时不推荐non-fat milk 封闭）。 1、将脱脂奶粉封闭液（1xTBST:脱脂奶粉=20mL：2g一块膜用量。牛血清蛋白、5%BSA 效果更好）倒好。 2、将PVDF膜取出放入封闭液中，盖子改好。 3、封膜一般常温1-2小时即可，也可4℃封闭过夜。 六、一抗 抗体反应主要采用间接法: 即先加入未标记特异性一抗与膜上抗原结合后，再加入标记的二抗进行杂交检测，标记二
AN3012 Application note Getting started with uClinux? for STM32F10x high-density devices Introduction uClinux, pronounced “you-see-Linux”, literally means “microcontroller (μC) Linux?”. uClinux is a Linux kernel fork for microcontrollers (MCUs, embedded systems). It does not have a memory management unit (MMU). Originally derived from version 2.0 (1996) of the Linux kernel, it now has ports based on Linux 2.6. Since version 2.6, the major parts of uC linux have been integrated with the mainline kernel for a number of processor architectures. The project continues to develop patches and supporting tools to use Linux on microcontrollers. uClinux supports many architectures, and this new version supports the STM3210E-EVAL evaluation board. The purpose of this application note is to explain you how to: 1.Install the uClinux operating system, the toolchain, and configure the kernel for the STM3210E-EVAL board 2. Build a uClinux image and download it to the STM3210E-EVAL board 3. Add applications to the kernel September 2009Doc ID 16051 Rev 11/36 https://www.doczj.com/doc/957633394.html,
Western-Blot 操作流程及注意事项 Western操作步骤 （一）蛋白样品制备 （1）单层贴壁细胞总蛋白的提取： 1. 倒掉培养液，并将瓶倒扣在吸水纸上使吸水纸吸干培养液（或将瓶直立放置一会儿使残余培养液流到瓶底然后再用移液器将其吸走）。 2. 每瓶细胞加3ml 4℃预冷的PBS（0.01M pH7.2~7.3）。平放轻轻摇动1min 洗涤细胞，然后弃去洗液。重复以上操作两次，共洗细胞三次以洗去培养液。将PBS 弃净后把培养瓶置于冰上。 3. 按1ml 裂解液加10 μl PMSF（100mM），摇匀置于冰上。（PMSF要摇匀至无结晶时才可与裂解液混合） 4. 每瓶细胞加400 μl含PMSF的裂解液，冰上裂解30min，为使细胞充分裂解培养瓶要经常来回摇动。 5. 裂解完后，用干净的刮棒将细胞刮于培养瓶的一侧（动作要快），然后用枪将细胞碎片和裂解液移至1.5ml 离心管中。（整个操作尽量在冰上进行） 6. 于4℃下12000rpm 离心5min。（提前开离心机预冷） 7. 将离心后的上清分装转移倒0.5min 的离心管中放于-20℃保存。 （个人感觉上述方法可操作性有待加强，细胞中蛋白本来就很少，一瓶50ml的细胞有时按照实验要求只能加100~200μl 的裂解液，按照上述操作，直接用200μl 裂解液进行裂解，根本就不够瓶壁上沾的。本人是先用预冷的PBS（一般数毫升）加入后，用细胞刮刮下细胞，转移至试管中，如果数瓶细胞是收集同一蛋白的，可以放在同一试管，离心后再将蛋白转移到EP管中，这样可操作性就比较强） （2）组织中总蛋白的提取： 1. 将少量组织块置于1~2ml 匀浆器中球状部位，用干净的剪刀将组织块尽量剪碎。 2. 加400 μl 单去污剂裂解液裂（含PMSF）于匀浆器中进行匀浆。然后置于冰上。 3. 几分钟后再碾一会儿再置于冰上，要重复碾几次使组织尽量碾碎。 4. 裂解30 min 后，即可用移液器将裂解液移至1.5ml 离心管中，然后在4℃下12000rpm 离心5min，取上清分装于0.5ml 离心管中并置于-20℃保存。 （3）加药物处理的贴壁细胞总蛋白的提取： 由于受药物的影响，一些细胞脱落下来，所以除按（一）操作外还应收集培养液中的细胞。以下是培养液中细胞总蛋白的提取： 1. 将培养液倒至15ml 离心管中，于2500rpm 离心5min。 2. 弃上清，加入4ml PBS并用枪轻吹打洗涤，然后2500rpm离心5min。弃上清后PBS 重复洗涤一次。 3. 用枪吸干上清后，加100 μl 裂解液（含PMSF）冰上裂解30min，裂解过程中要经常弹一弹以使细胞充分裂解。 4. 将裂解液与培养瓶中裂解液混在一起4℃、12000rpm 离心5min，取上清分装于0.5ml 离心管中并置于-20℃保存。 （二）蛋白含量的测定 （1）制作标准曲线 1. 从-20℃取出1mg/ml BSA，室温融化后，备用。 2. 取18 个1.5ml 离心管，3 个一组，分别标记为0μg，2.5μg，5.0μg ，10.0μg ，20.0μg ，40.0μg。
5个简单步骤，轻松整合微信群主资源 如何搭建你自己的社群联盟，轻松撬动类似地面实体店老板的群主大咖，让他们帮你 合作引流？ 如何凭空搭建平台，巧妙对接需求，集聚潜在客户？ 对于微信群这个资源来说，借力打力，整合才是永恒的主题。 之前说了，你的潜在客户都在人家的鱼塘里面，特别是在流量大咖群主们的鱼塘里， 这样的鱼塘，首推微信群！ 那如何实战上述平台思路，整合资源，收编那些社群大咖们？ 如何让群主大咖愿意与你开展合作呢？ 你不必拥有更多资源，只要你懂得【高维打低维】的道理，只需要站到行业的更高端，用【高维资源】诱惑，整合集中那些【拥有低维资源】的人就是了！ 下面给你分享简单步骤： 第一步，找寻比较靠谱的大咖群主！ 实战测试，就是要聚焦找寻那些【有个人品牌，有客户资源的大咖群主】，不要太大 的咖，其实小咖也可以的！看你的沟通能力！ 大咖到哪里去找？ 非常简单，最精准的大咖人群，就是直接上【搜狗微信】， https://www.doczj.com/doc/957633394.html,，找公众号文章作者，或是上简书、知乎，今日头条等自媒体平台，找那些一直在坚持写作的微信公众号主等自媒体达人。
为什么要上【搜狗微信】，而不是QQ群，或是微博，或是其它平台？ 因为实战测试发现：微信公众号一般每天只能发布一篇文章，受文章频率限制，上面 的作者文章，还有微信群质量，严重高于其它渠道，至少是在质量概率上大大超过QQ 群，或是其它流量渠道的质量！ 比如QQ群，就太多垃圾群了，你要找到超级精准的QQ群，是要有特别技巧的，哈哈！ 好了，你特别注意找寻搜狗微信渠道那些坚持原创，还比较靠谱的作者！ 如何确定他是原创者？怎么确定他比较靠谱？ 其实你看多了，就能发现了！网络江湖很小的，多看文章就是了！ 如何才能顺利添加这样的大咖群主？ 他们的私人微信号，一般在公众号文章或是自媒体文章上的，你去直接添加，带着崇 敬的心情，备注说“我是你的文章粉丝，咨询请教问题”，他们一般会通过你的！ 添加话术很多的，你自己要多测试！也欢迎与我们交流，分享更有效的添加话术！ 特别说明下：信任为王！信任嫁接！群主大咖的【信任转介绍】，对你今后的产品轻 松快速变现，非常重要！ 这个也是为什么你要找那些有个人品牌，有专家权威的大咖群主进行合作的主要原因！ 第二步，接近大咖群主，奠定合作基础！ 哈哈，考验你的“情商”的时候到了！ 这一步很多人都搞不定！担心吃闭门羹！ 其实，大道至简，你懂得卖家内参的换算思维就简单了！ 前面说了，方法就是两条：要么买单，要么资源换资源！实在不行，就直接卧底！ 我一般会直接购买大咖群主的【收费群】，成为群主大咖的客户，进群互动，贡献价值，搞定信任！ 主动付费，是链接高人的最直接方式，真诚尊重，是接近大咖的信任门票。 所以，懂得换算思维，找寻收费群，搞定收费群主，就是这个超级联盟批发式引流盈 利的核心秘笈！