第一章安装指南
1.打开计算机。
2.指到“ANASTAR”图标并双击。
3.输入“用户名”和“口令”,然后击“OK(确定)”键。
将出现下面的主菜单:
图1-1
系统配置:
用鼠标单击屏中的“配置”,弹出下面的系统配置选框:
图1-2
㈠仪器配置
单击“仪器”按键,弹出用于工作站系统配置窗口:
图1-3
仪器名称:输入正在使用的仪器的名称,如HPLC、GC等。
板#:计算机可以同时插入多个工作站界面卡,输入该仪器使用的界面卡号。(第一块板输入1,第二块板输入2,依此类推)
检测器数:输入所配置仪器将用到的检测器数。依据所购工作站的通道数设定。单通道工作站设定为“1”,双通道工作站设定为“2”。
控制:诸多仪器本身可以由工作站控制,如该仪器无附加控制系统,此处设定为“None”。
I/O线号:在分析过程中,仪器和计算机可交换一些信息。例如,当计算机准备开始接收数据时,它将给仪器一个READY信号;在仪器开始发送数据之前,发送一个TRIGGER信号;如果数据传送被不正确的操作所中断,仪器将发送STOP信号。定义这些信号线的接线号。
例如,TRIGGER信号线可以从仪器上的启动I/O接口连接于A/D工作站界面板的2号线上,在系统配置屏幕上的触发信号线号(输入)区中键入2。
注意:不能将同一个I/O线号用于一个以上的信号线或仪器,如:就绪信号线(输出)、触发信号线(输入)和停止信号线(输入)。
该仪器所用的I/O线:对任何给定的仪器可以用另外的I/O线传送其它指令或启动其它外部事件。在相应的块中击一下以标明该仪器所要采用的线号。在某个块中有一个“×”表示这个仪器将用那条线。
注意:不要选择同一条线用于一个以上的仪器。
选好后按“OK”回到系统配置窗口。
㈡检测器配置:
单击“检测器”按键,进入“检测器配置”窗口。
检测器通道:每台仪器的每个检测器与工作站界面之间均有其自身的通道,以进行数据传送与通讯。输入该检测器的通道号。
注意:在操作前将正确的通道号指定给每个检测器。
名称:输入检测器名称。
通道号#:输入通道号(单通道只能输入1)。
Y轴标:Y轴标可是电压(Volts)或是吸光度(Abs.)。
图1-4
其它项可参考屏幕上的默认值输入,完成后按“继续”钮进入“界面配置”窗口。
㈢界面卡配置:
图1-5
按“采集”按钮,进入下面的屏幕:
图1-6
板号#:计算机内可同时插入多个界面卡,输入每个界面卡的号。
基地址:输入界面卡所处的地址。(根据硬件接口卡上的地址说明输入),出厂时设为
300。
中断级:出厂定为IRQ10。
基频:内置值为10Hz,这个频率将给予最佳的信噪比,依据其使用地之电网频率,可以设
定为电网频率的整数分之一倍。(此基频已决定了系统采样的最高频率)
通道范围:设定每个通道之数值范围,一般为0~1V。
完成后按“OK”键,再按界面配置屏中的“退出”键。在“系统配置”窗口按“OK”键进入到主屏幕中。
㈣预检检测器信号
用预检功能可做快速信号预检。进入预检:
1.单击主屏幕中的仪器图标。
图1-7
2.击一下Preview图标,这样,将看到从仪器中输出的实时检测结果。如果进
一个简单的样品(如溶剂),将看到一个洗出峰,并指向正方向。
3.操作完毕,敲终止命令图标。在预检中,没有数据储存于盘中。
一旦确保检测信号连接妥当了,接下来按后面章节所讲的方法将远程启动装置(触发器)
和外部装置连接到终端盘上。
㈤触发器
1. 连接(远程启动)触发信号线
如果要仪器由外部触发启动数据采集,则必须连接一个触发信号线。触发信号线连接到指定的接线端子上。
注意:为了让触发和就绪的中继操作方便,必须在系统配置屏幕上给定触发和/或就绪的连接通道。在主菜单上选择配置进入该屏幕,如果要连接一个就绪信号中继,以使系统在没有准备好接收数据时闭锁进样器,可以定义界面上的某一输出端子为就绪信号中继端。
第二章指南
指南
这个指南是为了逐步撑握ANASTAR工作站的使用而设计的。您将看到如何开启ANASTAR工作站、建立一个简单的方法、选择最佳积分条件、设立并运行一个单点校正标样、然后运行一个未知样品并得到一个简单的报告,还会看到如何新建一个多运行测定的程序并建立一个定制报告。该指南按操作顺序设计。
为了更具体地了解这个指南所讲述的每一步,请参考技术参考章。
第一步-启动
在指南中假设已将Microsoft WindowsTM和ANASTAR工作站装好,并已完成ANASTAR系统配置。如果还没有配置好系统,请看ANASTAR安装指南中的说明。
㈠启动ANASTAR软件:
1.打开计算机。
2.指到“ANASTAR”图标并双击。
3.输入“用户名”和“口令”,然后击“OK(确定)”键。
㈡操作基础:
在主屏幕中单击仪器图标,进入“采集”屏幕;单击“Data”图标,打开数据文件,选中*.dat文件后,该谱图将显示在窗口中。如果该数据文件有多个通道,则每个数据将显示在它们自己的窗口中。用鼠标可放大谱图。还可以进行有关时间和吸收值的测量。
1. 放大色谱图:
放大或移动一个色谱图,只需在所要的区域外画一个框,按住鼠标左边的按钮把框拉到所要的画面外。然后放开按钮,谱图即自动放大至全屏幕。
可以继续将画面放大10次。在谱图上双击可将其还原到前次放大的大小。要直接转到整个谱图,可选择“选项”下面的“完全缩放”,或按住Shift键并在谱图上双击鼠标左手钮。
2. 进行相对测量
每当将鼠标移入色谱图窗口,它就会被锁在测量光标上。将鼠标左移或右移时,谱图相应的时间和吸收值将显示在窗口的上端。
要进行相对测量(如测量两峰之间的时间),可将鼠标移到所要的位置并按鼠标右边的按钮,这样使该点的时间和吸收值显示降到零位。当移动鼠标时,将显示相对于所击右侧鼠标按钮处的相对时间和吸收值。再击一下鼠标右侧按钮回到实际的时间和吸收值显示。
注意:该指南假设所使用的是图标。可以通过击图标来快速选取最常用命令。(下面展示了一个图标的例子)如果在屏幕上看不到图标,就从“选项”菜单中选“图标”将其打开。
图标条中的所有图标在菜单条或下拉式菜单中都可找到。在后面的章节中,每当讲一个图标的选择,后面都紧接着在括号中给出菜单条和下拉式菜单的选择。例如,图标“setup”后面跟着(方法/采集设置),表明该图标还可以通过击“方法”后击“采集设置”来执行。
第二步-在方法中设定测定参数
在测定所用仪器的图标上击一下。例如,
采集1
屏幕上将出现所选择仪器的仪器窗口,如下所示:
此时工作站将自动打开最后一次所使用的方法、批处理程序和数据文件。当第一次打开系统时,所列出的是缺省文件。它们是:TUTOR.MET(方法文件),DEMO.SEQ(批处理文件),和TUTOR.DAT(数据文件)。
在测定第一个样品之前,必须给数据系统设定一些有关如何采集数据的基本参数。
㈠采集设置:
必须为获得第一个标准样品设置必要的方法参数。
1.在仪器窗口的图标上,击setup钮(方法/采集设置)可看到设置采集参数的对话
框。采集参数包括运行时间和采样频率。
2.根据下面给的指南,为测定标样做适当的选择。确信选择时,就选OK(确
定)。可以选择取消随时退出采集设置对话框,但选择取消时所输入的值将不予保存。
通道:击活测定将用的检测器通道,检查每一个通道确保它们在分析时是打开的,必须为每一个打开的通道设定采集参数。
采样频率:选择采集数据点的频率。检测器输出的信号均为连续的模拟信号,而计算机则只能接收数字信号,因而需要一个至少能在最窄峰上收集15-20个数据点的采样频率。如果不能确定峰有多窄,则在预先运行时选缺省值。
击下箭头得到系统配置内可选用的的频率表。当击一个所需的采样频率时,对话框下一行的信息将显示选定的频率能够满足正确积分的最窄峰宽(底部)。多通道的采样频率必须互成整数倍。
注意:所选择的采样频率必须能收集足够的数据点来确定一个峰。一般来说,每个完整的峰最少需要15-20个点。尽量选一个能得到完整色谱图所需要的最小采样频率,因为采样频率越高所获得的数据文件越大,因而浪费更多的硬盘资源。
运行时间:输入样品达到完全分离所需的运行时间,到达该时间后系统将自动停止采集数据。如果不能确定运行将需要的时间,可设一个较长的时间,因为可以随时在全部出峰完毕后手动停止。然而,在确定正确的运行时间后一定要调整方法。
采集延时:在初运行时将采集延时设到0。采集延时是指启动运行(触发)和开始采样时之间的时间。
通道状态:保证所用的通道处于打开状态。如果通道是关着的,该通道将收集不到数据。如果不用某通道,请将它设在关闭状态。
触发:在与所设定的触发数据采集系统相匹配的图标上击一下,此处选择“手动”。
无:击启动后立即开始取样。
批测定时,各运行之间不中断。
手动:击启动后,系统检查界面卡,然后处于等待状态。操作
者必须按Enter开始运行。
批测定时各运行之间中断,并等待用户按Enter后再继续。
短路、断路:击启动后,系统检查界面卡,并处于等待
状态,等待触发器的“短路”或“断路”信号。
第三步-进标样
现在已经有一个方法准备用于标准样品的测定,进一个标样并开始首次运行。这里所进的样品应是标准样品,因为将用所得到的数据文件优化积分处理方法,并设定校正方法。
启动单运行:
数据采集既可从计算机键盘启动,也可从仪器上采用触发装置启动。
我们推荐使用仪器的触发装置来启动数据采集,因为这样会保证进样和开始数据采集之间的时间间距的重复性。有关连接触发信号的细节,请看安装指南。
1.开始运行,击Run Single图标。
将出现下面的对话框:
2.在标有“数据文件名”的块中键入LEARN.DAT。这是色谱图在硬盘上保存的文
件名。如果方法一栏是空着的请不要输入方法名。系统将用当前方法进行数据采集。
3.让其它参数保持缺省值,击一下“启动”。
此时窗口下面的状态条上会闪现“Waiting for Trigger...”信息。这条信息一直存在直到
接收到了由仪器的信号系统触发的信号或由键盘输入的“ENTER”。
4.进样同时击一下“ENTER”,此时屏幕即出现谱图。
指南的下一步:
◆用所得到的谱图优化积分参数
◆设立一个单点校正,用所得到的谱图编辑峰组份表及浓度
◆用所得到的色谱图校正方法
第四步-优化积分参数
现在我们已测定了标准样品,准备采用所得到的色谱图调整峰检测和积分参数。
注意:所有的方法参数可在仪器窗口中设定。这样可以不用退出仪器使用状态方便地进行方法优化。如果希望在数据采集的同时进行方法优化,可使用主菜单中的“重处理”程序。
㈠用图表方式设定积分参数
基于这一点,需要对照刚刚在屏幕上所得到的色谱图,数据已存盘。现在可以用这个已存的谱图用图表的形式设定积分参数。
击分析图标则可用当前方法参数对谱图进行予积分。
基线反映出用方法中所存在的缺省参数对色谱图进行予积分的情况。用“图形参数设置”对特定的谱图进行积分优化。
注意:如果分析谱图后不显示基线,击“选项/基线”即可显示基线。
谱图积分有两个必要的参数:峰宽和阈值。具体如何使用这些值,见本手册的技术指南。
用所显示的色谱图以图表的形式设定这些值:
选择方法后选择图形参数设置,下拉式菜单将显示能以图表形式设定的所有事件。
设定峰宽值:
1.在下拉式菜单中击峰宽(width),提示“选择峰起点”,此处请以所需的
最窄峰为准。
2.在峰的起点击一下,提示“选择峰的终点”。
3.在峰的终点击一下。
系统根据所选择的峰,计算近似峰宽值,并显示如下的对话框:。
击OK(确定),则将数值输入积分事件表中。
设定阈值:
1.在下拉式菜单中击一下“阈值(threshold)”。
2.提示“选择基线段的起点”。选一段没有出峰的谱图(即谱图的基线段),并
用鼠标在这段基线的起点击一下。提示“选择基线的终点”。
3.将鼠标移到基线段的终点,再击一下鼠标。
4.根据所选的色谱图计算阈值,并显示一个与峰宽项相似的对话块。击OK
(确定)则将数值输入到方法的积分事件表中。
有关设定积分参数的详细情况,见本手册的技术指南中的积分部分。
㈡谱图再积分:
现在已改变了积分参数,需要对谱图再积分以观察积分参数的改变对谱图的影响。
击分析图标,系统将用新的积分参数对谱图进行再积分,并显示出新的基线,如果已正确地设定了峰宽和阈值,基线应呈现正常状态。
谱图上的某一部分可能需要特定的参数(如谷到谷或弦切)对积分进行全优化。该选项的工作细节在本手册的技术指南中给出。
到这一步为止,百分面积法操作即已完成,打印报告即可观察百分面积法结果。
其后为内标/外标法操作指南。
第五步-校正设置
校正设置由两部分组成:峰组份表设定和标定基础设定。
㈠建立组份表
在标准混合样中建立一个谱峰目录的最简单的方法是用一个储存的标准数据文件以图表的形式进行。系统将自动输入保留时间。用户所要做的是填入峰的名称、各点的浓度和标明参照峰及内标峰。
1.标准文件显示在色谱图窗口时,击方法后再击图形参数设置。
2.在下拉式菜单中选确认峰。
3.将鼠标在所需峰的第一个峰起始前击一下。
4.然后将鼠标在所需峰的最后一个峰结束后击一下。
注意:为了以图表的形式建立峰组份表,必须预先对谱图进行积分,如果还没有对谱图进行积分,击一下“分析”图标。
5.出现一个对话框提示设定峰确认窗口(以RT%)和峰结果单位。输入峰确认窗口值
(或保持缺省),并输入标准混合物的浓度单位(例如,mg/ml)。
系统将显示所选定范围有峰的组份目录,连同每个峰的保留时间。弹出页的每一行都代表所给定的谱峰的校正信息,包括峰序号、峰名称、峰编号、保留时间、峰确认窗口(根据对话框中给定的百分数)、内标峰号、参照峰号、浓度点(到16)和浓度单位。
6.键入每个组份的名字来定义峰。如果要从表中删除一个峰,击该峰的峰序号,
然后选编辑/删除,或击一下“Delete”键。
注意:实际谱峰表中的列要多于窗口所显示的列。需要翻看显示中未出现的列时,击弹出页下面的滚动条或箭头,即可以左右翻看,或用表右边的滚动条或箭头上下翻看。
7.对于每个峰,在标为Ref ID#的列中输入参照峰的号。
8.如果所使用的是内标法,在ISTD ID#列中输入用于每个组份峰的内标峰号,也
可以不输入。
9.在标有“Level 1”的列中输入标准混合物中每个组份的浓度。
10.当输入完组份的名称和Level 1的浓度时,双击峰组份表窗口的左上角退出峰组
份表。
㈡校正设定:
制定校正方法的最后一步是完成校正设置的信息。
1.击方法。
2.击校正设置。
将显示下面的对话框,可以设定校正信息。
3.因为这是单点校正,应确保校正曲线拟合设为点到点。
4.将其它参数保持缺省值。有关该对话框中的其它参数的细节,参考本手册
的技术指南的校正一章。做完后,击OK(确定)。
指南的下一步:
◆运行校正标样
◆画结果校正曲线
测定一个未知样品
观察报告
第六步-单点校正
现在已完成方法校正设置部分,准备进行校正。在这个例子中将重新运行校正标样。可以用校正图标以所存的标准数据文件进行校正。
1.击运行校正图标。(控制/启动校正运行)
系统将提示校正运行所需参数的信息,
2.给运行键入样品名,可以是数字和/或字母。例如,CALIB 1。
3.键入LEARN.MET作为方法名,或击登录钮并从所显示的有效方法目录中选择所
需方法。将样品量、内标量和倍数因子设为方法所设定的值。
4.在数据文件名中键入LEARN.DAT作为用于保存数据的文件名,并为校正点数输
入1或相应的数。
5.于“校准开始前清除所有响应因子”处击一下,以击活该项选择。
6.准备好进标准样时击启动(Start)。系统将在标准样品运行完毕后自动修改方
法,计算每个组份的响应因子,将面积值(和峰高)输入到校正方法文件中。
第七步-显示校正曲线
校正方法后,可以得到每个组份的校正曲线。
1.击方法。
2.击显示校正曲线。
将会出现下面的屏幕,并在“组份库”框中列有方法中所有的组份以备查询。
3.要看到任何一种组份的校正曲线,只须击一下“组份库”框中的该组份名。因
为方法目前被校正为单点校正,只能在校正曲线上看到一个点。关于观看校正曲线的细节,见本手册的技术指南的观察谱峰校正一节。
第八步-保存方法
这里描述怎样将编辑好的方法存到硬盘上。
1.击文件。
2.击保存方法。
3.在对话框中键入名字LEARN.MET。
可以为方法选任何名字,及任何扩展名。然而,系统一般用扩展名MET查找方法。如果不另行定义的话,系统将把方法存到软件安装时所建立的路径中。
第九步-测定一个未知样品
现在准备测定一个“未知”样品并做一份报告,其结果是根据刚才所进行的校正得到的。
1.击Run Single图标(控制/启动单运行)。
将出现一个对话框提示运行所用的数据采集和处理的信息。
2.键入一个运行所用的样品名。例如,UNKNOWN1。
3.在标有“数据文件名”的地方键入SAMPLE.DAT。这是未知样品的数据文件
名。
4.键入所需采用的方法名LEARN.MET。如果将方法名一项空着,系统将自动以当
前方法采集和处理数据。样品量请输入实际样品量;内标量如采用内标法则输入“1”或实际值,如采用外标法,则此处为“0”;倍率处请输入样品相对于标样的稀释倍数。
5.当准备好进样时,击启动。如果选择了手动触发项,则在击“启动(Start)”
或“ENTER”后才开始采样。
第十步- 观察报告
可以在屏幕上观察报告或在数据处理或方法改进的过程中将它们打印出来。
注意:在这个指导过程中,为了避免每次进行谱图分析时都打印报告,分析色谱图后的打印报告选项是关闭的。要在数据采集后自动打印报告,分析项下的打印报告选项必须打开。
在所显示的框中,击“分析”后击“分析选项”打开这一选项,选“打印”项,当选择这项时,每积分均自动打印报告。
㈠在屏幕上观察报告
可以在屏幕上观察报告而不必将它输送到打印机上。这是评价方法改变对结果影响的最佳途径。
1.击报告钮。将出现一个下拉式菜单和所要观察的报告类型的目录,目录中包
括:百分面积法报告、归一法报告、内标法报告、外标法报告及用户定义报告。
2.击面积%,屏幕上的另一个窗口将出现一份当前色谱图的百分面积报告:
3.查阅完报告后,双击报告窗口左上角的按钮,即可退出报告查阅窗口。
注意:报告将包括根据上一次色谱分析时的有效积分参数所得的结果。如果您已更改了您的方法积分时间项,您必须在观察报告之前分析色谱图。
㈡打印报告
在再处理或采集中可同时打印一份报告。
1.击打印钮。
2.将出现一个报告类型的目录。在想要的报告上击一下来选择要打印的报告(或选
择方法目录)。
3.击面积%,一份百分面积报告将传送到系统默认的打印机上。
第十一步-建立一份定制报告
系统提供一系列固定报告格式,包括面积%、内标、外标、规一化和一种用户自定义格式的报告。
可以按原样使用这些报告,也可以建立自己完整的定制报告格式。
一份定制报告可以有多个部分,叫做“页”,每一页可以包括一个标题和落款、最多4个色谱图、4个结果表(“报告”)和4个方法节。
注意:当打印时,报告的每一“页”或“节”实际上可能多于一张纸。所打印出的页数将由色谱图的大小和数量以及报告中的结果表的大小决定。
现在要建立一份带有一个标题、一个谱图、和一个结果表的定制报告了。
击方法后击定制报告。将出现一个定制报告窗口,包括一个代表当前报告页的白色长方形,具有标题、色谱图和报告部分,和一个带有“1”的黑方块,代表该报告所定义的当前页。还显示一组“工具”便于向报告中添加条目。缺省报告包括一个标题、一个色谱图、和一个组份报告。(注意:如果所用的是TUTOR.MET说明文件,所显示的定制报告将是TUTOR.MET方法文件中的报告格式。)
㈠清除当前页
要从当前页面上移去定制报告条目,选编辑后选删除页。在确认提示中选确定。这样就将当前报告中所存在的条目清除掉了,此时就可以建立自己的报告格式。
㈡新建一个标题
一个报告的标题主要包括一个题目和一些关于报告中所包含数据的详细说明。例如,文件名和方法名。
1.要给报告加一个标题,在工具中的标题图标上按住鼠标按钮,将标题图标拉到
页面上然后放开鼠标。一个标题框将出现在页面上。需要将条目居中时,击编
辑后击居中。
2.在标题框内双击,将出现一个对话框,键入将显示在报告顶部的信息(例如,一
个题目),并为该信息选择如字体、字型号等附加内容(加注字体)。并设定边距,选定标题中所要包含的条目内容。
3.在文件名、方法名和采样日期和时间的框中击一下鼠标,使它们旁边的方框中
画上“×”。这样就使文件名、方法名、采样日期和时间打印在标题中,同时选定这些内容所采用的字体、字型号等。
4.击“OK”。
㈢安放色谱图
报告的每一部分(页)最多可有四个谱图。例如,报告可以包括多检测器运行中每个通道得出的色谱图,或者不同放大倍数的谱图以观全貌及部分细节。
1.击工具中的Chrom图标,并将其拉到报告中。放开鼠标将该条目放到页面上。用
编辑/居中命令将谱图居中。要放大谱图框,在框上击一下,然后拉谱图框直到达到所要的大小。
2.设定谱图显示格式:在谱图块中双击。将出现一个对话框,选择要显示的检测
器通道,设定边距、时间和信号范围。还可以选择画基线,并以各种方式给谱图作注释。