收稿日期:2001-09-24
基金项目:国家863ΠCIMS 资助项目(8632511296082002)
文章编号:100622343(2002)0420028203
解决多目标Flow 2shop 问题的生物免疫调度算法
杨建国,丁慧敏,李蓓智
(东华大学 机械工程学院,上海 200051)
摘 要:生产调度是车间自动化的关键问题之一,生产调度的优劣对制造系统的运行影响极大。通常的确定
性优化方法往往不适合生产调度这类NP 完全问题的求解。文章基于生命科学中的免疫概念与理论,构造了基于生物免疫机理的生产调度模型,并研制了用于求解目标Flow shop 问题的智能调度系统,克服了当前遗传算法用于求解此类问题时,易于出现早熟、搜索效率低及不能很好保持个体多样性等不足,大大改进了搜索效率,对复杂的多约束、大规模及多目标生产调度问题,算法效果显著,并且可以轻松地获得满足要求的多个优化解。文章讨论了模型的建立、算法的实现和应用实例,测试情况表明,以上模型与算法在生产调度实际中将具有广阔的应用前景。
关键词:生产调度;NP 优化问题;免疫算法中图分类号:TP278 文献标识码:A 生产调度问题一直是FMS 等复杂的大系统有效运作的重要问题之一。通常,作业调度问题包含多个目标以及实现这些目标的多种方法及资源,目标、方法及资源的组合使问题的状态空间呈指数形式增长。以人工神经网络(ANN )、模糊逻辑(FL )、遗传算法(G A )为代表的新一代人工智能技术的飞速发展为解决复杂调度问题提供了新的技术与途径,特别是最近发展起来的基于自然免疫机理的生物免疫算法,有着不同于其它算法的优良特性,其优良的抗体促进与抑制功能、很高的搜索效率与全局、局部收敛性,成为解决生产调度问题最有力的工具之一。
免疫系统是抵抗细菌、病毒和其它致病因子入侵的基本防御系统,它通过一套复杂的机制来重组基因,以产生抗体对付入侵的抗原,达到消灭抗原的目的。为了有效地提供防御功能,免疫系统必须进行模式识别,把自身的分子和细胞与抗原区分开来。除了具有识别能力之外,免疫系统与其它低级生物防御系统的区别在于它能够学习,并且有记忆能力。也就是说,免疫算法具有免疫记忆、抗体的自我识别与免疫的多样性等特点。与基于遗传的生物进化系统相比,免疫系统的特点是
[1,2]
:
(1)免疫系统通过进化地处理具有不同特征的抗原来
产生抗体,其抗体的多样性遗传机理,使其具有很好的优化搜索能力;
(2)免疫系统通过对抗体的相互抑制与促进反应,自我
调节必要的抗体生成,有效地解决了迭代搜索的局部收敛问题;
(3)免疫系统具有可寻址的自组织记忆功能,并且能动
态维护,具有能忘却很少使用信息的进化学习能力,能够很快适应外界环境的改变(不同优化计算问题);
(4)免疫系统的耐受诱导与维持机理,允许抗原被相同
抗体识别,因而具有强大的抗噪声能力;
(5)免疫系统通过其组织细胞与分子分散到生物体内
的各个部分,构成了一个天然的没有中央处理器的分布式处理系统,可以用来解决大型和复杂的优化计算问题。
免疫系统的以上特点为高效率地解决工程优化问题奠定了基础。本文将利用人工免疫机理的构建Flow 2shop 问题的调度算法,并通过研制的智能调度系统,测试和验证免疫算法用于解决NP 完全问题的效果。
1 生产调度问题
生产调度是指在多约束以及多个冲突性目标里正确确定工件的加工顺序与资源分配。在流水线作业调度(flow 2
shop )问题是,有m 台不同的机器与n 个不同的作业等待调
度。每个零件在系统中依次访问m 台机器后退出系统,即
n 个作业必须按相同序列通过m 台机器。
生产调度问题中常见的优化目标包括:工件加工通过时间最短、零件交货延误时间最短、零件平均等待时间最短、关键设备利用率最大等。
不同类型的调度问题可以用四个参数简明地表示,即
n Πm ΠOrg ΠObj ,其中,n 为工件数,m 为机器数,Org 表示生
产组织形式,Obj 表示目标函数。
2 免疫调度算法
免疫算法采用了体细胞理论(S omatic Theory )和网络假设(Network Hypothesis )[3,4],其主要工作流程包括了8个步骤。
2.1 抗原识别
免疫系统识别抗原的侵入,抗原对应于优化问题中输入数据。在生产调度问题中,目标函数是免疫算法的抗原。
2.2 初始抗体产生
随机产生N 个抗体,作为初始抗体群,N 表示抗体群大小。
第18卷第4期2002年8月机械设计与研究
Machine Design and Research Vol.18No.4Aug.,2002
2.3 抗体的激增
抗体群按一定的交叉概率与变异概率进行交叉和变异,产生W个新抗体。增加新抗体后的抗体群称为激增抗体群,其中具有N+W个抗体。
2.4 亲和力计算
(1)抗体ν与抗原的亲和力axν(ν=1,2,…,N+W)表示抗原与抗体的结合程度。
αxν=1
1+optν
(1) 如果生产调度问题的目标函数obj为求最小值,则optν=obj,如果为求最大值,则optν=1/objν。
解决多目标Flowshop调度问题时,通常有两种处理方法:
①对子目标函数加权求和。设目标函数makespan(零件加工通过时间)、delay(关键零件交货延误时间)、waittime (工件平均等待时间)与availability(关键机床利用率)的权重
分别为W
m
,W d,W w,W a,则:
optν=objν=makespan3W m+delay3
W d+waittime3W w+1/availability3W a(2) 在实际应用中,权重比例将直接影响优化效果。
②按既定的目标项目及其主次关系,寻求和确定近优解。
(2)抗体ν与ω之间的亲和力ayνω(ν,ω=1,2,…,N+ W)表示抗体之间的相似性,可以利用信息熵的理论进行计算。在由n个基因组成的N+W个抗体中(如图1所示),处于位置x处的基因信息熵为:
H x(N+W)=6N+W i=1-p i(x)log p i(x)(3
)
▲图1 基因的信息熵
式(3)中p
i
(x)为等位基因ki出现在位置x处的概率。
定义平均信息熵为:
H(N+W)=1
n6
n
x=1
H x(N+W)(4)
抗体ν与ω之间的亲和力为:
ayν,ω=
1
1+H(2)
(5)
2.5 抗体的抑制
(1)根据axν排除激增抗体群中axν小于一定阈值T 的抗体,其中T为上一代抗体群中的抗体与抗原之间的最小亲和力,即:
T=min{axν}(ν=1,2,…,N)(6) (2)根据抗体的浓度Cν先排除[Step5]1)中所得激增抗体群中的具有最高浓度的抗体,然后再计算所得激增抗体群中剩余抗体的浓度,依次排除浓度最高的抗体,直到激增抗体群中剩余N个抗体为止,此时产生的抗体群称为新一代抗体群。式(7)给出了抗体浓度Cν的计算公式。
Cν=
6νη?max ayνωΦayνωΦmax ay vω
抗体总数
(7)其中:max ayνω为抗体ν与其余抗体的最大亲和力,通常,η取值为0.8～1。
2.6 演变记忆细胞
从抑制抗体群中选取N
c
个优秀抗体存入记忆细胞。
2.7 终止条件判定
以最大迭代次数I作为问题求解的终止条件。如果迭代次数小于I,则转2.3节,否则,结束优化过程。
2.8 选出优化解
从最终的记忆细胞中挑选出与抗原亲和力最高的抗体作为最优解,记忆细胞中的其它抗体枳可作为近优解提供参数。
3 工程应用
3.1 调度问题的描述
选择调度问题的参数为nΠmΠFΠ{makespan,delay,wait2 time,availability},这是一个Flow2ship调度问题,制造系统由m台加工设备构成,编号为M1,M2,…,M m,零件组中有n
个零件,编号为J
1
,J2,…,J n。每个零件进入系统后,依次访问设备M1,M2,…,M m后退出系统。目标函数为:工件加工通过时间makespan最短;零件交货延迟时间delay最短;零件平均等待时间waittime最短;关键设备利用率avail2 ability最大。
调度系统的输入参数分为两个方面。①基本参数,如目标函数、设备数、零件数以及每个工件在每台设备上的加工时间以及每个工件从投料到出产的最长允许时间D,系统将形成负荷矩阵,表1给出了5个工件9台设备的负荷矩阵[5]。②设置参数,如最大迭代次数、抗体群中抗体个数、交叉概率、变异概率、记忆细胞数。
3.2 系统运行
系统按照免疫算法的工作流程运行,当迭代代数超过设定值后,算法终止。系统将给出进化后的记忆细胞内容,即基于主目标函数推荐相应的优秀抗体及其相关的目标函数值,以提供用户在综合考虑次要目标函数时选择比较理想的解。以表1负荷矩阵为例,令系统主目标函数为makespan,其它算法参数见表2,综合考虑表2推荐的记忆细胞内容及其相关目标函数,选择调度方案{4,1,3,2,5}为最终调度结果,该方案的甘特图及目标函数值如图2所示。
表1 5×9的负荷矩阵
J1J2J3J4J5 M134********
M22480524037
M32320902560
M43831131165
M56410236653
M63669736170
M73530342614
M86866574818
M99055357548
D600 1000 530 1000 1000
92
第4期 杨建国等:解决多目标Flow2shop问题的生物免疫调度算法
▲图2 最优调度结果的甘特图及其相关目标函数值4 免疫算法参数对优化效果的影响
在每一次求解问题的过程中,系统自动记录每迭代一次
种群中最优抗体的目标函数值,根据这些记录值自动绘制进
化曲线(目标函数与迭代次数关系曲线)。系统可以比较不
同算法参数对计算过程的影响。
4.1 种群数的影响
由表3给出的计算结果可以看出,随着种群数的增大,
算法收敛速度变慢,但种群的增大将有利于算法收敛到更优
的解。这是因为,种群个体数目的增加,种群激增与抑制将
增加,使算法收敛变慢。然而,随着种群个体增多,算法搜索
空间就变大,因而,算法收敛到全部最优解的可能性增大。
表2 记忆细胞群及其相关目标值
调度问题设备数=9工件数=5负荷矩阵表1种群数10
算法参数最大迭代数
100
交叉率0.85变异率0.04记忆细胞数6
调度方案Makespan
(h)
Delay
(h)
Availability
(%)
Waittime
(hΠday)
4,1,3,2,5636586.32 1.37
1,3,4,2,5649-7384.59 1.36
3,4,1,5,2698-10849.71 1.71
4,1,3,5,2727539.89 1.40
5,4,1,2,375123160.99 2.23
1,2,5,3,475314571.58 1.59
表3 种群大小对优化效果的影响
种群数最优目标值迭代代数
864927
1063647
1563659
3063688
4.2 交叉率和变异率的影响
通常,交叉率和变异率越大,算法收敛速度越快。根据生物进化理论,交叉在进化过程中占主导地位,变异为从属地位,表4给出了不同交叉率的种群迭代计算结果。
5 结 论
(1)基于免疫算法构造的生产调度模型,可以有效地解决任意规模的Flow-shop调度问题;
(2)增加种群大小和迭代次数,将有利于
获得最优解;
(3)提高交叉率和变异率,可以提高系统
的求解效率。
进一步的研究将在深入了解生物免疫机制的基础上,研究Job2shop问题的描述、编码
及其系统模型,使智能调度方法真正用于解决
工程实际问题。
表4 交叉率对优化效果的影响
交叉率最优目标值迭代代数
0.5063687
0.6563668
0.8563647
参考文献:
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1997.
作者简介:杨建国(1951-),男,东华大学机械工程学院教授、博士生导师,研究方向:智能设计、现代集成制造系统、基于InternetΠIntranet智能制造、生物制造系统。
机械设计与研究
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03机械设计与研究 第18卷
Abstract:The paper introduces a less2difference tooth grad2 uating device of new type:the planet transmission mechanism with the sleeves.The paper analyses its composition,working principle and transmission type.It also introduces the key to the technique and transmission performance.At list,it gives an ex2 ample for application.
K ey w ords:planet gear with the sleeves;gear transmission of one2difference tooth
The B alance op Shaking Force in Planar Close Chain Five2b ar Mechanism
MA cheng2Wen,Z ou Hai2jun Fang Xin2guo(School of Mechani2 cal Emgineering,shanghai Jiao Tong U2niversity,shanghai 200030,China)P22
Abstract:This paper present a theory of balance Shaking force in five bar mechanism.Through the study of the equation, we can get a conclusion,by add counterweight,we can complete balance the Shaking force in the mechanism.Simulation is G iven with the comuter.We also give answer to another type five bar mechanism.
K ey w ord:planar five bar Mechanism shaking force;bal2 ance;counterweight
The Determination Method of Optim al Plan and R epairing Magnitude of Cycloid Pingear Planetary R educer G ear Shape R epairing
YU Y ing1,YU Bo2
(1.Institute of Mechanical Engineering,Jiamusi University,Jia2 musi154007,China;2.Department of Engineering,Jiamusi Broadcasting Television University,Jiamusi154007,China)P24 Abstract:This paper presents a optimal gear repairing plan of positive equidistance plus negative move distance plus rotate angle which can obtain minimum original gap by means of anal2 ysis and comparing to original gap of cycloid pin gear planetary reducer,and gives computation method reasonable chosen to de2 termine its gear mend magnitudes.
K ey w ords:cycloid pin gear planetary reducer;original gap; gear shape repairing;top gap
Evolutionary Programming and It’s Application in Curve F air2 ness
L IU G e,L I Bai2lin
(School of Mechanical Engineering,S outhwest Jiaotong Univer2 sity,Chengdu610031,China)P26
Abstract:Curve fairness is an important problem in CADΠCAM.In this paper,Evolutionary Programming was used to deal with the curve fairness.A new method is presented to smooth directly initial data.An example is given to show that the method is the simple,convergent and effective.
K ey w ords:curve fairness;evolutionary programming;opti2 mization An Immune Scheduling Algorithm for Solving Multi2objective Flow2shop Problem
Y AN G Jian2guo,DIN G Hui2min,L I Bei2zhi
(College of Mechanic Engineering,DongHua University,Shang2 hai200051,China)P28
Abstract:Production scheduling is one of the most impor2 tant problems to be considered in the effective performance au2 tomation manufacturing system.It is the kind of NP2hard prob2 lem that the common used determinate methods are not suitable to solve.This paper proposed a powerful intelligent scheduling method based on the physiology immune mechanism.It can pre2 vent premature convergence and promotes population diversity, and can accelerate the convergence speed.It is efficient to solve the multi2constraint large scale problem and can obtain many optimal solutions in flow2ship scheduling.
K ey w ords:scheduling problem;NP2hard;immune algo2 rithm
Three2dimensional Model and Planar Projection Founded in AutoCAD
L IU shu2chum,SHEN TU Liu2fang
(Department of Mechanical Huaihai instute of technology,Lian Yun G ang222005,China)P31
Abstract:This paper reviews the effect of three2dimension2 al model and planar projection and how to build three2dimen2 sional model from the planar and form the planar projecton quickly from its model by means of AutoCADR14on window Screen,which pioduces quick proper engineerng2project and pla2 nar drafting.
K ey w ords:AutoCAD;planarprojection;three2dimensional model;
R esearch on Common Data C enter for I ndustrial E nterprise Alliance
G AO Hai2an1,CHEN Yun2
(1.Shanghai Information Institute of Science&Technology of Machine&Electric,Shanghai20002,China;2.CINS Research Center of Shanghai University,Shanghai200072,China)P33
Abstract:The establishment of Industrial Enterprise Alli2 ance plays important role in enterprise information.In the pa2 per,the requirements of the industrial Enterprise Alliance are analyzed.The architecture of Common Data Center is present2 ed.As an application of industrial Enterprise Alliance,Common Data Center for machine tool is developed.Therefore,its advan2 tage of the development of industrial information.
K ey w ords:industry;enterprise alliance;common data cen2 ter
R eliability Design Computing for the Multi2failure Mode R e2 lated Shafts
YU Tian2xiang,ZHAN G Xuan2sheng,ZHAN G Zu2ming
免疫组化技术全程原理 一、概念和常用方法介绍 1、定义 用标记的特异性抗体对组织切片或细胞标本中某些化学成分的分布和含量进行组织和细胞原位定性、定位或定量研究，这种技术称为免疫组织化学（immunohistochemistry）技术或免疫细胞化学（immunocytochemistry）技术。 2、原理 根据抗原抗体反应和化学显色原理，组织切片或细胞标本中的抗原先和一抗结合，再利用一抗与标记生物素、荧光素等的二抗进行反应，前者再用标记辣根过氧化物酶（HRP）或碱性磷酸酶（AKP）等的抗生物素（如链霉亲和素等）结合，最后通过呈色反应或荧光来显示细胞或组织中化学成分，在光学显微镜或荧光显微镜下可清晰看见细胞内发生的抗原抗体反应产物，从而能够在细胞爬片或组织切片上原位确定某些化学成分的分布和含量。 3、分类 1）按标记物质的种类，如荧光染料、放射性同位素、酶（主要有辣根过氧化物酶和碱性磷酸酶）、铁蛋白、胶体金等，可分为免疫荧光法、放射免疫法、免疫酶标法和免疫金银法等。 2）按染色步骤可分为直接法（又称一步法）和间接法（二步、三步或多步法）。与直接法相比，间接法的灵敏度提高了许多。 3）按结合方式可分为抗原-抗体结合，如过氧化物酶-抗过氧化物酶（PAP）法；亲和连接，如卵白素-生物素-过氧化物酶复合物（ABC）法、链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结（SP）法等，其中SP法是比较常用的方法；聚合物链接，如即用型二步法，此方法尤其适合于内源性生物素含量高的组织抗原检测。 4、目前几种常用免疫组化方法简单介绍 1）免疫荧光方法 是最早建立的免疫组织化学技术。它利用抗原抗体特异性结合的原理，先将已知抗体标上荧光素，以此作为探针检查细胞或组织内的相应抗原，在荧光显微镜下观察。当抗原抗体复合物中的荧光素受激发光的照射后即会发出一定波长的荧光，从而可确定组织中某种抗原的定位，进而还可进行定量分析。由于免疫荧光技术特异性强、灵敏度高、快速简便，所以在临床病理诊断、检验中应用较广。 2）免疫酶标方法
United States/Canada 800.662.2566Asia Paci?c +1.650.919.7300Europe +33.(0)1.3904.6880Japan +81.(0)77.543.6116Clontech Laboratories, Inc.A T akara Bio Company U s e r M a n u a l Antibodies Protocol Guide PT3407-1 (PR99224) Published 14 September 1999
Antibodies Protocol Guide Table of Contents I. Introduction 3 II. Materials Required 3 III. Western Blotting 4 A. Preparation of Cell Lysate and Electrophoresis 4 B. Western Blotting 5 IV. Immunoprecipitation 6 A. Preparation of Cell Lysate 6 B. Immunoprecipitation 7 V. Immunofluorescence and immunocytochemistry 8 A. Sample Preparation 8 B. Immunofluorescence 9 C. Immunocytochemistry 9 VI. ELISA 11 VII. References 12 Notice to Purchaser Clontech products are to be used for research purposes only. They may not be used for any other purpose, including, but not limited to, use in drugs, in vitro diagnostic purposes, therapeutics, or in humans. Clontech products may not be transferred to third parties, resold, modified for resale, or used to manufacture commercial products or to provide a service to third parties without written ap-proval of Clontech Laboratories, Inc. Clontech, the Clontech logo and all other trademarks are the property of Clontech Laboratories, Inc. Clontech is a Takara Bio Company. ?2006
良好的免疫组化染色切片是正确判断染色结果的基础和前提。由于免疫组化染色过程中存在很多步骤或环节，每一个步骤或环节都可能影响到染色的最终结果，因此，要做好一张高质量的免疫组化切片并不是一件非常容易的事。需要病理技术员和病理医生密切配合、相互协调、共同努力才能保证做出合格的免疫组化切片。虽然免疫组化染色可以存在各种各样的问题，但从染色的结果看，一般可分为两类：无色片（即无阳性信号）和“杂音”染色片（有阳性信号）。 一、无色片 染色结束后，切片中见不到任何阳性信号。这是常规工作中比较常见的现象，出现这种现象，有两种可能：1、真阴性结果：整个染色过程没有出现问题，组织或细胞确实不表达与抗体相关的抗原。2、假阴性结果：即此阴性结果不是真实的反映。假阴性结果又可分为两种情况：（1）、切片中根本就不包含所预期检查的组织或细胞。出现这种情况，要麽是病理医生选择错了切片或抗体选错了，要麽是技术员选错了蜡块。获得正确的切片进行染色是获得正确结果的前提。由此表明：制作出合格的免疫组化切片不仅仅是技术员的事，病理医生也起着不可缺少的作用。（2）、染色过程中的某一或某些环节出了问题。比如，组织未进行抗原修复，有的组织必须经过抗原修复才能检测抗原表达；或选用了只能用于冰冻组织而不能用于石蜡包埋组织的抗体；或一抗失效，虽然抗体失效在理论上是一个逐渐的过程，但偶尔也遇到突然失效的情况，抗体长期不用和/或已超过有效期是主要的原因。也可见于染色过程中漏掉了某一环节，如忘记加二抗或三抗，或用了两次二抗而缺少了三抗，或配制DAB时少了过氧化氢。为了避免这种简单的错误，有一种简单的方法：在三抗孵育结束时，将切片上的三抗甩在一张白纸上，在将配制好的DAB滴一滴在白纸的三抗上，观察是否出现棕色。如果出现了，证明三抗和DAB的配制过程没有错误。如果这种DAB再滴到切片上没有出现任何阳性信号，问题一定是出在三抗以前。如果纸上不出现棕色反应，问题肯定在三抗DAB或DAB的配制过程。这种简单方法能迅速的帮助我们查找出现问题可能的原因。 解决阴性染色的问题非常简单，就是设立“阳性对照”。如果阳性对照有了表达，说明染色的全过程和所有试剂都没有问题。如果此时测试片仍为阴性，便是真实的阴性，说明组织或细胞没有相应的抗原表达。反之，如果阳性对照没有着色，表明染色过程中某个或某些步骤出了问题或试剂出了问题。应一一寻找原因。阳性对照包括两种，一种称为“自身对照”或“内部对照”，这是指在测试的切片中本身就存在已知的抗原，如正常淋巴结中存在T和B细胞抗原，CD20或CD3都应该有表达。自身对照是一种比较理想的对照，对照和测试组织或细胞都在同一张切片中，都处于相同的试验条件下，结果更可靠也更具有可比性。在选择自身对照片时最好选择既有病变组织同时又有正常组织的部分，这样有利于对比。另一种称为“外部对照”，有时在测试的切片中不存在已知的抗原，如在胃的标本中怀疑是恶性黑色素瘤，需要用HMB45或Mart-1来检测，在正常的胃组织中本身不存在相关的抗原，如果病变出现阳性反应结果，尚能提示是恶黑，但是如果出现阴性结果，就无法确定是本身组织中不含黑色素瘤抗原，还是技术问题。因此，应另外设立一个已知的阳性对照。这种在测试组织之外的阳性对照称为“外部对照”。在实际工作中需要设立外部对照的情况很多，如果每一种抗体都要选不同的阳性对照，工作量会很大。为了解决这个问题，目前国内外有单位将多种不同组织集成在一起，制成多组织切片、“腊肠”“春卷”切片、组织芯片等，其连续切片储备待用，需要时取出一张便可作为阳性对照。另外，比较简单的方法，是采用阑尾作为阳性对照，因为与人体其它组织器官比较阑尾包含的组织种类较多，如有上皮、淋巴组织、平滑肌、间质、神经、血管、间皮等。一张阑尾切片可以检测大多数常用的抗体。 设立阳性对照是病理医生的任务或责任，而不是技术员的责任。病理医生观察了HE切片，了解切片中是否有自身对照，如果没有，就应告诉技术员采用阳性对照。因此，病理医生在免疫组化中的作用是不可忽视的。 抗体未覆盖上测试组织：当多块散开的小组织染色时，可能漏掉某块组织染色。 二、“杂音”染色片 免疫组化除正常的真实的阳性信号外常常会遇到不正常的背景着色，这些非正常的着色称为“杂音”染色。“杂音”染色种类繁多，产生的原因也多种多样，为了便于说明，笔者将其归纳为下面几种 1、全片着色
关于2013年公司实施《目标管理》的指导意见（节选） 三、目标管理体系 “目标管理”的实质就是“设定目标、实施计划、评估成果”的全过程；“设定目标”（包含 制定措施和计划）是目标管理的起点；“实施计划”（包含上级的监督和协调）是目标管理的过程；“评估成果”（及时绩效考核和奖惩）是目标管理的终点。即目标管理体系包含三个方面（也是三个阶段）的内容：目标管理、过程管理和结果管理，三者相辅相成，互相联系，形成目标管理体系。为此，实行目标管理必须从“目标管理——制定目标、措施和计划；过程管理——实施计划、监 督和协调；结果管理——绩效考核、及时奖惩”等三个方面谋划。 第一、目标管理——明确关键目标和制定合理计划 目标是企业或部门年度/季度/月度所期望的经营管理的成果。目标管理能不能产生理想的效果，首先取决于目标的设定，科学合理的目标是目标管理的前提和基础，是企业或部门工作的奋斗方向， 也是对全体员工进行各个阶段考核的主要内容。 （一）目标设定内容： 1、关键业绩目标：包括企业（部门）的经营目标、财务目标或部门或员工主要业务工作的目标。 2、关键管理目标：包括企业（部门）为实现业绩目标而在组织领导、文化建设（制度）、人力资 源发展等管理工作方面需要达成的目标。 3、编制要求 1）明确性：必须是公司/部门/岗位关键工作的目标；目标简明扼要，不要抽象的、概括性的描述 2）可衡量性：即目标指标要量化，必须有一组明确的数据，作为衡量是否达成目标的依据（可以从数量、质量、成本、时间、上级或客户的满意程度五个方面量化）；杜绝使用形容词或描述性的语言。 3）可实现性：目标标准不要过高或过低，必须是跳起来“摘桃”的目标 4）相关联性：目标内容的设定要与公司的生产经营方向、重点工作以及主要职责相关联 5）时限性：即制定的目标要有时间要求，必须有起点、终点或时间段 6）可评价性：在制定目标时应考虑到评价目标实现情况好坏的标准，不能模糊，便于后期绩效。（二）编制计划的要求 1、编制工作计划必须有“四大要素” 1）工作内容：做什么？--------工作目标、任务。计划应规定出在一定时间内所完成的工作目标、
细胞免疫组化染色步骤 1．细胞爬片，取出后，PBS洗三遍，每次3分钟。4℃冷丙酮固定10分钟，（或用4%多聚甲醛固定30分钟），干燥30分钟。 2. 用PBS洗三次，每次5分钟，加3%过氧化氢30μl，室温孵育10分钟，（以消除内源性过氧化物酶的活性）蒸馏水冲洗，PBS洗三次，每次5分钟。 3．加1%的Triton X-100 30μl，室温孵育10分钟，增加细胞膜的通透性。蒸馏水冲洗，PBS洗三次，每次5分钟。 4．滴加正常山羊血清30μl，封闭非特异性结合位点，以消除非特异性染色，室温孵育30分钟，倾去勿洗。 5．滴加适当稀释度的一抗，空白对照组以PBS代替一抗，4℃湿盒孵育过夜。PBS洗三次，每次5分钟。 6．滴加生物素标记的二抗工作液30μl，室温孵育30分钟。PBS洗三次，每次5分钟。 7．滴加辣根酶标记链酶卵白素30μl，室温孵育30分钟。PBS洗三次，每次5分钟。 8．滴加DAB显色剂30μl，显微镜下观察显色，自来水冲洗。 9. 将处理好的玻片细胞核衬染：浸入苏木精染液染色2min，自来水洗，迅速过盐酸酒精溶液，自来水洗，过氨水溶液，自来水洗。 10.梯度酒精脱水，过70%酒精1次，95%酒精2次，无水乙醇3次，每次1min 11.二甲苯透明，过二甲苯溶液3次，每次１min。 12.中性树胶封片将有细胞的一面向下，用中性树脂封片。 稀盐酸酒精溶液：用75%酒精配制1%盐酸。 淡氨水溶液：在400ml自来水中滴2滴浓氨水(使细胞核蓝化) 另外：需1%TritonX-100增加细胞膜通透性。苏木素复染时间和盐酸酒精脱色时间需自己摸索，我是染5-6秒脱色1-2秒。盐酸酒精还可用70%乙醇配制1%盐酸。我没用淡氨水溶液。若为悬浮细胞则需涂片，20μl即可。
免疫共沉淀实验原理及方法 免疫共沉淀（CoIP）概述及原理 免疫共沉淀（Co-Immunoprecipitation，CoIP）是研究蛋白-蛋白间相互作用的经典方法，属于免疫沉淀技术的一类，常被用于鉴定特定蛋白复合物的中未知蛋白组分。免疫共沉淀的设计理念是，假设一种已知蛋白是某个大的蛋白复合物的组成成员，那么利用这种蛋白的特异性抗体，就可能将整个蛋白复合物从溶液中“拉”下来（常说的“pull-down”），进而可以用于鉴定这个蛋白复合物中的其他未知成员。免疫共沉淀的特点可以概括为两点，第一是天然状态，第二是蛋白复合物。 免疫共沉淀的优势： 与其他研究蛋白质相互作用技术（如GST-Pull down、酵母双杂交等）相比，免疫共沉淀鉴定的相互作用蛋白是在细胞内与目的蛋白发生的天然结合，避免了人为的影响，因此符合体内实际情况，得到的蛋白可信度更高。 免疫共沉淀的局限性和注意事项： 1. 免疫共沉淀是建立在蛋白复合物成员间彼此紧密结合的基础上，意味着松散结合的蛋白组分很可能检测不到； 2. 由于蛋白质形成复合物以后，某些表位就会被掩盖，因此可能导致使用某一种pull-down抗体，无论怎么增加抗体浓度，也极少能将不到一半的目标蛋白复合物沉淀出来，如有必要最好使用多种不同抗体分别进行CoIP；
3. 由于检测的是天然状态，因此在不同的时间和不同的处理下，CoIP拉下来的蛋白复合物都可能是不同的，当然随着实验次数的增加，得到的蛋白复合物成员也会越来越庞大； 4. 如果使用Western Blot的方法检测的蛋白复合物中的目标蛋白，则需要在试验前进行预测，具有一定的冒险性；当然如果将蛋白复合物直接进行质谱分析就不存在上述问题，但需要得到较高纯度和浓度的蛋白复合物样品也非易事，并且成本较高； 5. CoIP鉴定得到的蛋白间相互作用可能是直接作用也可能是间接作用，进一步区分还需要进行GST-Pull down等实验检测； 6. 为了保证CoIP实验的可靠性和严谨性，需要使用复合物的不同成员分别独立进行CoIP实验，并且结果应该能够彼此验证，因为原则上使用复合物的任一成员进行CoIP都会得到其他所有成员[1] 免疫共沉淀的一般操作流程（中英文对照）：
第一章华为的工作目标管理法 无论做什么事情，首先要明确的就是做事的目标。目标是引导行动的关键，也是证明行动所具备的价值的前提，所以目标管理成了企业与个人管理的重要组成部分。华为公司非常重视目标管理，并且制定了符合SMAR标准的目标管理标准。SMAR标准是指Specific （要具体）、Measurable （可度量）、Actionable （可实现）、Realistic （结果导向）、Time-based （时间限定），这个标准强调了进行目标管理的基本态度，也为员工执行工作提供了一些基本思路。 1. 永远不能“先干起来再说” 以远大的目标规划产品的战略发展。一一任正非 华为在培训员工时，让每一个员工在工作开始前必须弄清楚五个要点：做什么、如何做、做多少、在哪儿做、为什么做。 “先瞄准目标，再开枪。”一一任正非 对于企业或者管理者来说，重要的是进行目标管理，要让每一个员工都建立起目标，而对于员工自己来说，更要懂得建立工作目标，明确自己的工作方向和工作内容，然后按照目标一步步去行动。目标的导向性会约束员工的行为，会激发员工的工作动力，从而引导员工自发地将工作做好。 2. 写下最初的梦想 为什么不去想一想当初为什么要进华为，为什么要在这里工作？一一任正非对于企业和员工来说，应该成为始终坚持目标的狮子，而不是越跑越乱的羚羊，想要做好自己的工作，就一定要做好目标的全程掌控。首先，要明确自己想要什么；其次，要写下自己的目标，然后时刻提醒自己按照这个目标去做。提升自己的专注度和控制能力，始终保持对目标的渴望。 3. 跳起来摘果子，而不是摘星星 三代人以内不要说进世界五百强。一一任正非 “做那些你所能做的，做那些你有机会做到的事。”一一成功学大师拿破仑 华为的员工在制定目标之前，总是会先进行调查，同时做好可行性研究，了解目标工作的难度，了解目标是否能够完成。 任正非说任何目标都必须是可执行的，任何缺乏执行性或者无法达到的目标，都
免疫组化常用方法介绍及个人经验总结 1 、定义 用标记的特异性抗体对组织切片或细胞标本中某些化学成分的分布和含量进行组织和细胞原位定性、定位或定量研究，这种技术称为免疫组织化学（immunohistochemistry）技术或免疫细胞化学（immunocytochemistry）技术。 2 、原理 根据抗原抗体反应和化学显色原理，组织切片或细胞标本中的抗原先和一抗结合，再利用一抗与标记生物素、荧光素等的二抗进行反应，前者再用标记辣根过氧化物酶（HRP）或碱性磷酸酶（AKP）等的抗生物素（如链霉亲和素等）结合，最后通过呈色反应或荧光来显示细胞或组织中化学成分，在光学显微镜或荧光显微镜下可清晰看见细胞内发生的抗原抗体反应产物，从而能够在细胞爬片或组织切片上原位确定某些化学成分的分布和含量。 3 、分类 1）按标记物质的种类，如荧光染料、放射性同位素、酶（主要有辣根过氧化物酶和碱性磷酸酶）、铁蛋白、胶体金等，可分为免疫荧光法、放射免疫法、免疫酶标法和免疫金银法等。2）按染色步骤可分为直接法（又称一步法）和间接法（二步、三步或多步法）。与直接法相比，间接法的灵敏度提高了许多。 3）按结合方式可分为抗原-抗体结合，如过氧化物酶-抗过氧化物酶（PAP）法；亲和连接，如卵白素-生物素-过氧化物酶复合物（ABC）法、链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结（SP）法等，其中SP 法是比较常用的方法；聚合物链接，如即用型二步法，此方法尤其适合于内源性生物素含量高的组织抗原检测。 4 、目前几种常用免疫组化方法简单介绍 1）免疫荧光方法 是最早建立的免疫组织化学技术。它利用抗原抗体特异性结合的原理，先将已知抗体标上荧光素，以此作为探针检查细胞或组织内的相应抗原，在荧光显微镜下观察。当抗原抗体复合物中的荧光素受激发光的照射后即会发出一定波长的荧光，从而可确定组织中某种抗原的定位，进而还可进行定量分析。由于免疫荧光技术特异性强、灵敏度高、快速简便，所以在临床病理诊断、检验中应用较广。 2）免疫酶标方法 免疫酶标方法是继免疫荧光后，于60 年代发展起来的技术。基本原理是先以酶标记的抗体与组织或细胞作用，然后加入酶的底物，生成有色的不溶性产物或具有一定电子密度的颗粒，通过光镜或电镜，对细胞表面和细胞内的各种抗原成分进行定位研究。免疫酶标技术是目前最常用的技术。 本方法与免疫荧光技术相比的主要优点是：定位准确，对比度好，染色标本可长期保存，适合于光、电镜研究等。 免疫酶标方法的发展非常迅速，已经衍生出了多种标记方法，且随着方法的不断改进和创新，其特异性和灵敏度都在不断提高，使用也越来越方便。目前在病理诊断中广为使用的有ABC 法、SP 三步法、即用型二步法检测系统等。
动物病理组织免疫组化制片操作规程 1、取材选材部位以病灶与正常组织交界处的组织标本为好，取材要完整，要尽可能注意到整个器官的结构特点。大小一般是1cm×1 cm×0.5 cm为宜。 在夹取组织时不要用力压、挤、揉等以免损坏组织。 2、固定以10%中性福尔马林固定液（固定液的量应为组织块的10-20倍）固定时间24-36小时。组织长时间固定，固定液中的福尔马林含有的杂质会产生一种酸，影响核的染色，整个组织显得非常陈旧。 3、全自动脱水机：包括脱水、透明、浸蜡等步骤 3.1、脱水组织经固定后，内含大量水分，须除尽水分才利于透明、浸蜡。常用酒精为脱水剂，逐级提高酒精浓度，以防组织过度收缩、变脆或脱水不完全而影响制片效果。脱水一般在室温下进行，由60%酒精、70%酒精、80%酒精、90%酒精、95%酒精、100%酒精I、100%酒精II组成。组织块在酒精中时间不宜过长，否则组织块容易变硬。 如切片后的蜡块中央呈灰白粗糙而不透亮，放置一段时间后蜡块中央出现一陷窝，此即表明组织脱水不够彻底，组织面暴露后水分蒸发，蜡块中央收缩形成陷窝，严重时难以切出完整切片。注意定时更换新的脱水剂，一般在使用到1500个脱水盒(含组织块)后即可考虑更换脱水液。 3.2、透明在室温下，组织块采用二甲苯或TO透明剂中进行透明。一般透明剂分为I、II两个试剂缸。组织在二甲苯或TO透明剂中贮留时间必须严格掌握，时间稍长，则组织脆硬易碎；时间过短，石蜡不易渗透进去，使浸蜡不完全。3.3、浸蜡恒温杯内温度应调至58-60℃为宜，使石蜡熔化完全。石蜡分为I、II两个缸。尽量控制组织块在石蜡中的浸泡时间，时间过长组织易碎；时间过短，石蜡未渗透进去，组织不能切片。
浅析多目标优化问题 【摘要】本文介绍了多目标优化问题的问题定义。通过对多目标优化算法、评估方法和测试用例的研究，分析了多目标优化问题所面临的挑战和困难。 【关键词】多目标优化问题；多目标优化算法；评估方法；测试用例 多目标优化问题MOPs （Multiobjective Optimization Problems）是工程实践和科学研究中的主要问题形式之一，广泛存在于优化控制、机械设计、数据挖掘、移动网络规划和逻辑电路设计等问题中。MOPs有多个目标，且各目标相互冲突。对于MOPs，通常存在一个折衷的解集（即Pareto最优解集），解集中的各个解在多目标之间进行权衡。获取具有良好收敛性及分布性的解集是求解MOPs的关键。 1 问题定义 最小化MOPs的一般描述如下： 2 多目标优化算法 目前，大量算法用于求解MOPs。通常，可以将求解MOPs的算法分为两类。 第一类算法，将MOPs转化为单目标优化问题。算法为每个目标设置权值，通过加权的方式将多目标转化为单目标。经过改变权值大小，多次求解MOPs 可以得到多个最优解，构成非支配解集[1]。 第二类算法，直接求解MOPs。这类算法主要依靠进化算法。进化算法这种面向种群的全局搜索法，对于直接得到非支配解集是非常有效的。基于进化算法的多目标优化算法被称为多目标进化算法。根据其特性，多目标进化算法可以划分为两代[2]。 （1）第一代算法：以适应度共享机制为分布性策略，并利用Pareto支配关系设计适应度函数。代表算法如下。VEGA将种群划分为若干子种群，每个子种群相对于一个目标进行优化，最终将子种群合并。MOGA根据解的支配关系，为每个解分配等级，算法按照等级为解设置适应度函数。NSGA采用非支配排序的思想为每个解分配虚拟适应度值，在进化过程中，算法根据虚拟适应度值采用比例选择法选择下一代。NPGA根据支配关系采用锦标赛选择法，当解的支配关系相同时，算法使用小生境技术选择最优的解进入下一代。 （2）第二代算法：以精英解保留机制为特征，并提出了多种较好的分布性策略。代表算法如下。NSGA-II降低了非支配排序的复杂度，并提出了基于拥挤距离的分布性策略。SPEA2提出了新的适应度分配策略和基于环境选择的分布性策略。PESA-II根据网络超格选择个体并使用了基于拥挤系数的分布性策略。
免疫沉淀与免疫共沉淀原理及方法 一、基本概念 免疫沉淀（immunoprecipitation）是利用抗体可与抗原特异性结合的特性，将抗原（常为靶蛋白）从混合体系沉淀下来，初步分离靶蛋白的一种方法。 免疫共沉淀（coimmunoprecipitation）是一种在体外探测两个蛋白分子间是否存在特异性相互作用的一种方法。其原理是如果两个蛋白在体外体系能够发生特异性相互作用的话，那么当用一种蛋白的抗体进行免疫沉淀时，另一个蛋白也会被同时沉淀下来。与酵母双杂交技术不同，免疫共沉淀技术所利用的是抗原和抗体间的免疫反应，是一种基于体外非细胞的环境中研究蛋白质与蛋白质的相互作用的方法。 不难看出，免疫共沉淀与免疫沉淀技术所使用的原理与方法大致相似，所不同的是，在免疫共沉淀中，对靶蛋白的结合与沉淀由另一个与之发生相互作用的蛋白替代。在免疫共沉淀或免疫沉淀的基础上，通过进一步与其它技术的结合，如聚丙烯酰胺凝胶电泳，还可进一步对靶蛋白的的分子量等特性进行鉴定。 二、抗体的选择 （一）多克隆抗体 多克隆抗体因其制备相对简单，可与靶蛋白分子的多个位点结合，所形成的抗原抗体复合物较稳定因而应用的最为广泛。但多克隆抗体的缺点在于非特异性结合较多，常会导致反映本底（是否是背景）升高和一定的假阳性结果。 （二）单克隆抗体 与多克隆抗体相比，单克隆抗体往往只结合一种抗原表位，具有单一结合特异性，所以发生非特异结合的机会少，可被用于确定靶蛋白上某一部位的特殊结构，甚至可被用于区分相同靶蛋白的不同形式如构象变化和修饰。但反过来，单克隆抗体仅与单一表位结合的特性也会引起具有同一表位的不同靶蛋白间的交叉反应。 三、免疫沉淀方法 免疫沉淀的靶蛋白一般来自细胞裂解液，可以是被同位素标记的也可以是未被标记的。若为前者，免
免疫组织化学的概念： 免疫组化是利用抗原与抗体特异性结合的原理，通过化学反应使标记抗体的显色剂(荧光素、酶、金属离子、同位素) 显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质)，对其进行定位、定性及定量的研究，称为免疫组织化学。 免疫组化实验中常用的抗体为单克隆抗体和多克隆抗体。 免疫组化实验所用的组织和细胞标本有哪些？ 实验所用主要为组织标本和细胞标本两大类，前者包括石蜡切片（病理大片和组织芯片）和冰冻切片，后者包括组织印片、细胞爬片和细胞涂片。 其中石蜡切片是制作组织标本最常用、最基本的方法，对于组织形态保存好，且能作连续切片，有利于各种染色对照观察；还能长期存档，供回顾性研究；石蜡切片制作过程对组织内抗原暴露有一定的影响，但可进行抗原修复，是免疫组化中首选的组织标本制作方法。 石蜡切片为什么要做抗原修复？有哪些方法？ 石蜡切片标本均用甲醛固定，使得细胞内抗原形成醛键、羧甲键而被封闭了部分抗原决定簇，同时蛋白之间发生交联而使抗原决定簇隐蔽。所以要求在进行IHC染色时，需要先进行抗原修复或暴露，即将固定时分子之间所形成的交联破坏，而恢复抗原的原有空间形态。 常用的抗原修复方法有微波修复法，高压加热法，酶消化法，水煮加热法等，常用的修复液是pH6.0的0.01 mol/L的柠檬酸盐缓冲液。 免疫组化常用的染色方法有哪些？ 根据标记物的不同分为免疫荧光法，免疫酶标法，亲和组织化学法，后者是以一种物质对某种组织成分具有高度亲合力为基础的检测方法。这种方法敏感性更高，有利于微量抗原(抗体)在细胞或亚细胞水平的定位，其中生物素——抗生物素染色法最常用。 抗体的保存： 抗体储存容器应由不吸附蛋白质的材料制成，常用的有聚丙烯，聚碳酸酯和硼硅酸玻璃。如储存的抗体中蛋白浓度很低（10-100mg/L），就应另加隔离蛋白以减少容器对抗体蛋白的吸附，隔离蛋白常用0.1%-1.0%的牛血清白蛋白。绝大多数已稀释的抗体应存在4℃-8℃条件下，以免冻融对抗体蛋白产生有害效应。抗体原液和已分离的免疫球蛋白组分应保存于-20℃条件下，并避免反复冻融。冷冻的抗体溶液应置于室温中缓慢地解冻，应绝对避免用高温快速解冻。被细菌污染的抗体常会出现假阳性结果，应将污染的抗体溶液及其他试剂弃之。为防止细菌污染，可于抗体溶液中加入0.01%叠氮钠。抗体经真空冷冻干燥后置-20℃以下可保存3-5年。保存稀释后的单抗应加入0.1%叠氮钠浓度。大多数稀释抗体可进行冷冻保存，少数抗体可能会丢失抗原活性。大多数单抗，只要蛋白浓度适当，可在4℃下保存数月。 多聚赖氨酸溶液（Poly-L-Lysine Solution） Cat.No.: SGP8920 Size: 10ml Conc.: 0.1% w/v, in water Storage: 18-26℃ Thimerosal, 0.01%, added as preservative 多聚赖氨酸溶液是广泛应用的组织切片与玻片黏合剂，该多聚阳离子分子与组织切片上的阴离子相互作用会产生较强的黏合力。 适用组织学，免疫组织化学，冰冻切片，细胞涂片，原位杂交等使用的玻片的防脱片处理，以防实验操作过程中组织掉片。也可用于细胞培养，增加细胞贴壁能力。 [使用说明] 免疫学 操作步骤（可直接在玻片上涂布） 1．灭菌的ddH2O 1:10稀释该多聚赖氨酸溶液。
免疫组化操作方法、原理、步骤以及常见问题处理大总结 1、方法操作不难，最大的难处是出现异常结果时如何解决？这就需要掌握免疫组化实验原理，每一步知道为什么这样做，这样你才敢大胆地改革先前的不对的方法步骤。如抗体孵育条件主要是抗体浓度、温度、时间，这三者一般是相互成反比的（相对），其中浓度是最重要的先决条件，温度决定反应的速度、时间决定反应的量。就拿温度来说，可以有4度、室温、37度，我推荐4度最佳，反应最温和，背景较浅；而37度反应速度较快，时间较短；室温我不太提倡，除非你每次都把环境温度控制在一定的范围，否则，尽量选择前两者。 2、免疫组化最大的优势是定位和定性。相比于其他蛋白检测方法，免疫组化具有定性灵敏度高、定位较直接准确，是定位检测分析首选方法。尤其对于有些因子的转位研究十分有用。 3、免疫组化结果定量分析的前提是高质量的染色切片。免疫组化结果也能定量分析，但必须是背景染色浅而特异性染色较深的情况下，分析最为准确，这种原则可能也是我们日常审稿时判定研究结果的必备条件。 4、免疫组化实验一定要设置阳性对照和阴性对照。阳性对照一般是用肯定表达这种抗原的切片来做；阴性对照一般是用PBS或非一抗替代一抗来进行反应，其余步骤均一致。前者是排除方法和实验系统有无问题；后者是排除有无一抗外的非特异性染色。 5、免疫组化的应用广泛，是当前实验研究的最重要方法之一。如今发SCI论文时，明显感觉仅靠量化的数据来发文章很难，加一些形态学数据或图片，老外十分欢迎，可能是怕你学术造假吧。当然也不能做假阳性或假阴性结果。 6、免疫组化技术掌握与否的鉴定标准是同一切片或不同切片中不同抗原均从摸索浓度或条件而做出优良的染色切片。我在平时带教中就发现许多研究生把我已经摸索很成熟的反应条件、浓度、方法步骤，重复运用于同一性质的切片和同一种抗体，做出来后就觉得自己已经掌握了免疫组化方法，更换一种抗体后，居然连二抗的种属来源都拿错了。失败往往促进你去思考试验原理和过程，成功有时也加快你自傲。 7、实验方法需要动手+动脑。如今我还不敢说我在免疫组化什么都知道。我只所以今天敢在这里说这说那，这是因为我经过了反复的动手+动脑，把理论原理运用于实践，在把实践中发现的问题带到理论知识中去解决，最终把理论与实践融会贯通。 一、概念和常用方法介绍 1、定义用标记的特异性抗体对组织切片或细胞标本中某些化学成分的分布和含量进行组织和细胞原位定性、定位或定量研究，这种技术称为免疫组织化学（immunohistochemistry）技术或免疫细胞化学（immunocytochemistry）技术。 2、原理根据抗原抗体反应和化学显色原理，组织切片或细胞标本中的抗原先和一抗结合，再利用一抗与标记生物素、荧光素等的二抗进行反应，前者再用标记辣根过氧化物酶（HRP）或碱性磷酸酶（AKP）等的抗生物素（如链霉亲和素等）结合，最后通过呈色反应或荧光来显示细胞或组织中化学成分，在光学显微镜或荧光显微镜下可清晰看见细胞内发生的抗原抗体反应产物，从而能够在细胞爬片或组织切片上原位确定某些化学成分的分布和含量。 3、分类 1）按标记物质的种类，如荧光染料、放射性同位素、酶（主要有辣根过氧化物酶和碱性磷酸酶）、铁蛋白、胶体金等，可分为免疫荧光法、放射免疫法、免疫酶标法和免疫金银法等。2）按染色步骤可分为直接法（又称一步法）和间接法（二步、三步或多步法）。与直接法相比，间接法的灵敏度提高了许多。3）按结合方式可分为抗原-抗体结合，如过氧化物酶-抗过氧化物酶（PAP）法；亲和连接，如卵白素-生物素-过氧化物酶复合物（ABC）法、链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结（SP）法等，其中SP法是比较
目标管理法 1、目标管理的由来 目标管理(Management by objectives缩写为MBO)是20世纪50年代中期出现于美国，以泰罗的科学管理和行为科学理论(特别是其中的参与管理)为基础形成的一套管理制度。凭借这种制度，可以使组织的成员亲自参加工作目标的制定，实现“自我控制”，并努力完成工作目标。而对于员工的工作成果，由于有明确的目标作为考核标准，从而使对员工的评价和奖励做到更客观、更合理，因而可以大大激发员工为完成组织目标而努力。由于这种管理制度在美国应用得非常广泛，而且特别适用于对主管人员的管理，所以被称为“管理中的管理”。 要想准确地指明究竟谁是目标管理的创始人并不容易，但公认为彼得·F·德鲁克对目标管理的发展和使之成为一个体系作出了重大贡献。 1954年，德鲁克在《管理的实践》一书中，首先提出了“目标管理和自我控制”的主张。之后，他又在此基础上发展了这一主张，他认为，企业的目的和任务，必须化为目标，企业的各级主管必须通过这些目标对下级进行领导，以此来达到企业的总目标。如果一个范围没有特定的目标，则这个范围必定被忽视，如果没有方向一致的分目标来指导各级主管人员的工作，则企业规模越大，人员越多时，发生冲突和浪费的可能性就越大。德鲁克的主张在企业界和管理学界产生了极大的影响，对形成和推广目标管理起了巨大的推动作用。 2、目标管理的概念与特点 目标管理的概念可以从以下几方面的特点来理解： (1)目标管理是参与管理的一种形式。目标的实现者同时也是目标的制定者，即由上级与下级在一起共同确定目标。首先确定出总目标，然后对总目标进行分解，逐级展开，通过上下协商，制定出企业各部门、各车间直至每个员工的目标；用总目标指导分目标，用分目标保证总目标，形成一个“目标—手段”链。 (2)强调“自我控制”。大力倡导目标管理的德鲁克认为，员工是愿意负责的，是愿意在工作中发挥自己的聪明才智和创造性的；如果我们控制的对象是一个社会组织中的“人”，则我们应“控制”的必须是行为的动机，而不应当是行为本身，也就是说必须以对动机的控制达到对行为的控制。目标管理的主旨在于，用“自我控制的管理”代替“压制性的管理”，它使管理人员能够控制他们自己的成绩。这种自我控制可以成为更强烈的动力，推动他们尽自己最大的力量把工作做好，而不仅仅是“过得去”就行了。 (3)促使下放权力。集权和分权的矛盾是组织的基本矛盾之一，唯恐失去控
一、泌尿与男性生殖系统肿瘤 前列腺癌：CK、P63、34E12、PSA、P504S（9AMAC）、AR 前列腺增生／腺瘤：CK、P63、34BE12、P504S 肾癌：CK、EMA、Inhibin、Melan－A、CK7、Vimentin、PAX2、CD10 肾母细胞瘤：WT－1、CK、P53、Ki－67 膀胱尿路上皮癌：CK7、CK20、P53、Ki－67、P63 精原细胞瘤：CK、PLAP、CD117、LCA、OCT3／4 二、淋巴造血系统肿瘤 胸腺肿瘤：CK、CD3、CD5、CD20、TdT、EBV＊ 霍奇金淋巴瘤：CD30、CD15、ALK－1、EMA、CD3、CD20、EBV＊、PAX －5 非霍奇金淋巴瘤：CD3、CD20、CD45RO、CD79α、TdT、CD43 间变大细胞淋巴瘤：CD30、CD15、ALK－1、EMA、CD3、CD20、EBV＊ 弥漫性大B细胞淋巴瘤：CD3、CD20、CD45RO、CD79α、CD43、CD30、Ki－67 小B细胞淋巴瘤：CD3、CD5、CD10、CD20、CD23、CD79α、CyclinD1、TdT T细胞淋巴瘤：CD3、CD20、CD43、CD45RO、CD79α、TdT、TiA－1、Perforin 套细胞淋巴瘤：CD3、CD5、CD20、CD79α、CyclinD1、TdT、Bcl－2、Ki－67 T／NK细胞淋巴瘤：CD3、CD20、CD45RO、CD79α、CD56、TiA－1、Perforin、粒酶B 淋巴上皮病变／癌：CK、EMA、S－100、Ki－67、P53、EBV＊、P63、CD30、CD20
免疫共沉淀实验原理及方法 免疫共沉淀(CoＩP）概述及原理 免疫共沉淀（Co－Immunopreｃipitａtｉoｎ，CoＩP)就是研究蛋白-蛋白间相互作用得经典方法，属于免疫沉淀技术得一类，常被用于鉴定特定蛋白复合物得中未知蛋白组分。免疫共沉淀得设计理念就是,假设一种已知蛋白就是某个大得蛋白复合物得组成成员,那么利用这种蛋白得特异性抗体，就可能将整个蛋白复合物从溶液中“拉”下来（常说得“puｌl-down”），进而可以用于鉴定这个蛋白复合物中得其她未知成员.免疫共沉淀得特点可以概括为两点，第一就是天然状态，第二就是蛋白复合物。 免疫共沉淀得优势: 与其她研究蛋白质相互作用技术（如ＧST-Puｌl doｗn、酵母双杂交等)相比，免疫共沉淀鉴定得相互作用蛋白就是在细胞内与目得蛋白发生得天然结合，避免了人为得影响,因此符合体内实际情况，得到得蛋白可信度更高。 免疫共沉淀得局限性与注意事项： 1、免疫共沉淀就是建立在蛋白复合物成员间彼此紧密结合得基础上,意味着松散结合得蛋白组分很可能检测不到； 2、由于蛋白质形成复合物以后，某些表位就会被掩盖，因此可能导致使用某一种ｐull-ｄown抗体，无论怎么增加抗体浓度，也极少能将不到一半得目标蛋白复合物沉淀出来,如有必要最好使用多种不同抗体分别进行CoIP; ３、由于检测得就是天然状态,因此在不同得时间与不同得处理下，ＣoＩP拉下来得蛋白复合物都可能就是不同得,当然随着实验次数得增加,得到得蛋白复合物成员也会越来越庞大; 4、如果使用Wｅstｅrn Bｌｏｔ得方法检测得蛋白复合物中得目标蛋白,则需要在试验前进行预测,具有一定得冒险性；当然如果将蛋白复合物直接进行质谱分析就不存在上述问题,但需要得到较高纯度与浓度得蛋白复合物样品也非易事，并且成本较高；
1. 企业实施目标管理的本质是：√ A考察员工的能力 B赢得利润 C用目标引导人的行为 D约束管理者的行为 正确答案： C 2. 关于目标管理体系建设的思路，下列表述错误的是：√ A目标管理是员工自控的前提 B目标由工作来确定 C组织目标和个人目标相互影响 D企业使命必须转化为目标 正确答案： B 3. 借助经验确定部门目标的步骤不包括：√ A定义服务对象 B定义部门责任 C定义优先考虑的问题 D定义完成工作的标准和时限 正确答案： A 4. 确定员工管理目标的最好方法是：√ A分解确定法 B运作流程法 C工作产出法 D经验确定法 正确答案： C
5. 工作产出法设定目标的优点不包括：√ A增加员工的客户意识 B扩大服务范围 C使个人和组织的贡献清晰化 D避免工作疏漏 正确答案： B 6. 制定《工作指导书》的步骤不包括：√ A列出所有服务对象名称 B将服务对象进行排序 C列出工作内容 D制定工作方法 正确答案： D 7. 影响战略目标实现的因素不包括：√ A企业文化的影响力 B企业自身的经济实力 C员工的技能水平 D企业的研发能力 正确答案： A 8. 绩效管理的核心环节是：√ A绩效评价 B绩效反馈 C绩效计划 D绩效监控 正确答案： D
9. 有效的绩效评价需要满足的条件不包括：√ A提供绩效改进的建设性反馈 B满足领导的意愿 C修改原有的绩效计划，并确定新计划 D为薪酬、晋升提供支持 正确答案： B 10. 分解绩效目标不需考虑的要求是：√ A质量要求 B数量要求 C个人的要求 D领导的要求 正确答案： C 判断题 11. 质量目标在分解过程中不允许设置差错率。此种说法：√ 正确 错误 正确答案：错误 12. 员工对总目标的贡献大小，是衡量其是否称职的标准之一。此种说法：√ 正确 错误 正确答案：正确 13. 使用工作产出法确定目标时，不需要将服务对象进行排序。此种说法：× 正确 错误 正确答案：错误
免疫组化常见问题与回答集锦 一、石蜡切片和冰冻切片的比较？ 1.要求做冰冻切片的不一定能做石蜡切片，这是我向一老师请教得出的结论。因为作石蜡切片时要高温烤片，可能会破坏组织的抗原性，如果组织的抗原性较稳定，则可作石蜡切片；但是要求做石蜡切片的，可作冰冻切片。 2.冰冻切片的优点是能够较好的保存组织的抗原免疫活性，做免疫组化时不需抗原修复这一步。缺点是细胞内易形成冰晶而破坏细胞结构，可能会使抗原弥散；切片厚度较石蜡的厚，做的片子没石蜡的漂亮。当你买一抗时，目录上都写着做什么样的切片，如果它写着只能做冰冻，就不能做石蜡，如写着两者都可，那就都能做。 3.石蜡切片的优点是可以保持组织细胞的形态结构，且容易存放在室温，而冰冻切片比较麻烦，一定要存在 -80oC 的低温冰箱中，尤其是用来做原位杂交的切片，为了防止 RNA 降解，保存一贯很重要。由于石蜡切片可以切到 4 μm 左右，所以原位杂交探针容易渗透到组织中去，容易成功，而且得到的颜色/形态都较冰冻切片好。 二、一抗的选择要点和技巧是什么？ 1.单克隆和多克隆抗体的选择。由一种克隆产生的特异性抗体叫做单克隆抗体。单克隆抗体能目标明确地与单一的特异抗原决定簇结合，就像导弹精确地命中目标一样。另一方面，即使是同一个抗原决定簇，在机体内也可以由好几种克隆来产生抗体，形成好几种单克隆抗体混杂物，称为多克隆抗体。在抗原抗体反应中，一般单克隆抗体特异性强，但亲和力相对小，检测抗原灵敏度相对就低；而多克隆抗体特异性稍弱，但抗体的亲和力强，灵敏度高，但易出现非特异性染色（可以通过封闭等避免）。 2.应用范围的选择。有的一抗只能用于 WB ( Western blotting）或免疫组化、免疫荧光、免疫沉淀等；甚至表明石蜡切片或冰冻切片。 3.种属反应性的选择。这一点很重要，表明这种抗体可能存在种属差异，且这种抗体适合检测哪种种属动物体内的抗原。 4.种属来源，一般兔来源的多是多克隆；而小鼠来源的多是单克隆，但也有另外。根据此来源来选择相应的二抗。 5.生产厂家的选择。如 santa Cruz 公司抗体一般 1 ml，价格 2100 元左右； 而 chemicon 公司一抗一般 100 μl，价格 2800 元左右。这两个厂家的同一种抗体，它的实际效价稳定是不同的，我一般用后者抗体做免疫组化效果较好，而前者做 WB 效果还可以。