本科生毕业论文（设计）
题目: 甜柿三萜类物质的分离条件的优化研究作者姓名:
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指导教师:
生命科学学院
二零一六年五月
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毕业论文作者（签名）：
年月日
目录
摘要 (1)
Abstrac. (2)
1 前言 (2)
1.1 罗田甜柿简介 (3)
1.1.1 柿子的研究进展 (3)
1.2 三萜类化合物介绍 (3)
1.2.1 三萜类化合物的结构特点 (4)
1.2.2 三萜类化合物的生物合成 (4)
1.2.3 三萜类化合物提取方法 (4)
1.2.4 三萜类化合物的定量分析方法 (5)
1.2.5 三萜类化合物的生物活性 (6)
1.3 本课题研究的主要内容 (7)
2 材料与方法 (7)
2.1 实验材料 (7)
2.2 主要仪器与设备 (7)
2.3 材料的预处理 (8)
2.4 提取条件的研究 (8)
2.4.1 确定提取的溶剂种类的方法 (8)
2.4.2 确定提取时乙醇的浓度的方法 (8)
2.4.3 确定提取时间的方法 (8)
2.4.4确定提取温度的方法 (8)
2.4.5 确定料液比的方法 (8)
2.4.6 确定最佳提取次数的方法 (8)
2.5 香草醛-冰乙酸、高氯酸显色法测定提取液中总三萜的含量 (8)
3 结果与分析 (9)
3.1 提取溶剂种类的确定 (9)
3.2 提取溶剂浓度的确定 (9)
3.3 提取时间的确定 (10)
3.4 提取温度的确定 (10)
3.5 提取料液比的确定 (11)
3.6 提取次数的确定 (12)
4 结论 (12)
参考文献 (14)
致谢 (15)
甜柿三萜类物质的分离条件的优化研究摘要：为确定罗田甜柿果肉中三萜类物质提取最佳工艺条件，将湖北省罗田三里畈镇的罗田甜柿作为实验材料，在单因素试验基础上，以三萜类物质的提取率为指标, 利用正交实验技术从不同的溶剂、不同浓度的乙醇、不同提取时间、不同的温度、不同的料液比、不同的提取次数等方面来确定提取罗田甜柿成熟果实中的总三萜的最佳条件。结果表明，罗田甜柿果肉三萜类物质的最佳提取条件：乙醇体积分数70％、液料比l：11、提取时间3h、提取温度85℃、提取两次。此条件下，罗田甜柿果肉中三萜类物质得率达51.13mg/100g FW。
关键词：甜柿；三萜类物质；回流提取
Optimization of Persimmon triterpenoids isolated
conditions
Abstract: To Determinate the triperpenes content and the optimal extraction condition of Luotiantianshi persimmon variety, the fruit of Sweet Persimmon produced in luotian county Hubei province were used as the raw material. The triperpenes were extracted under different solvents, different concentrations of ethanol, different extraction time, different temperature, different material to solvent ratio,and different extraction times. The optimal triperpenes extraction condition was established. When the material was extracted with ethanol at 85℃ for 3h and at the ratio of liquid to material(V/W)1:11 for 2 times，the extraction capacity of triperpenes was 51.13mg/100gFW determined with the colorimetry of vanillic aldehyde-acetic acid-perchloric acid.
Keywords:persimmon; triterpenoids; reflux extraction;
1 前言
1.1 罗田甜柿简介
罗田素有“甜柿之乡”的美称，罗田境内现有百年以上的甜柿树5000多株，其中錾字石、唐家山的甜柿久有盛名，和日本古老的甜柿“禅寺丸”比较而言，还早180余年。
罗田甜柿主要指的是中国湖北省大别山区罗田县产的甜柿，是中国地理标志产品，也是世界唯一自然脱涩的甜柿品种，生食口感极好。罗田甜柿是一种水溶性膳食纤维的天然绿色水果，果实橙黄色，果面富有光泽，清香诱人，营养极其丰富。
1.1.1 柿子的研究进展
根据中国林科院最新的测定的数据，每100g甜柿鲜果肉的蛋白质含量为0.57-0.67g、可溶性糖为11.68g、含有脂肪0.28-0.30g，并且富含β-胡萝卜素、尼克酸、铁、锌、硒等多种微量元素和维生素B1、B2、E、C[1-3]。陈湘宁等采用单因素和响应面试验研究超声波提取柿子多糖的优化提取条件，确定了最佳提取工艺条件为液料比18.04mL/g，提取时间32.12民，超声功率405.30W，提取温度40℃[4]。杨依姗等采用以硫酸为香草醛法优化柿子单宁的提取条件，确定了最佳提取工艺为1.0mL 提取液，2.5mL 1%香草醛的甲醇溶液以及2.5mL 5mol/L H2SO4甲醇溶液混匀后于30℃水浴保温20分钟[5]。李西柳等通过正交实验对柿叶渣中多酚的提取工艺进行优化，确定了最佳优化条件为料液比为20:1(mL/g),提取温度90℃，乙醇浓度40%，提取时间4h[6]。王恒超等采用微波辅助法提取柿子黄酮，确定了最佳优化条件为乙醇浓度70%，微波功率600W,提取时间150s,料液比1:30[7]。顾海峰等探讨了柿子果肉中总酚和缩合单宁的优化提取工艺, 采用Folin- Denis法和改良的香草醛- 盐酸法分别进行总酚和缩合单宁含量的测定。通过正交实验确立了含1%盐酸的无水甲醇是最佳提取溶剂,提取最佳条件为提取时间40min、提取温度90℃、料液比1∶12、提取3次[8-9]。但是，目前对于罗田甜柿的三萜类物质的分离条件的优化研究几乎处于空白阶段。
1.2 三萜类化合物介绍
三萜类化合物广泛存在于自然界。有的以游离形式存在，游离的三萜几乎不溶或难溶于水，可溶于常见有机溶剂。有的则与糖结合成苷的形式存在，多数可溶于水，水溶液振摇后产生似肥皂水溶液样泡沫，故被称为三萜皂苷(tfiterpenoid saponins)。
三萜类化合物在菌类、蕨类、单子叶植物、双子叶植物、动物以及海洋生物中均广泛分布，具有抗菌消炎、抑制肿瘤细胞生长、免疫调节等多种生理活性。
1.2.1 三萜类化合物的结构特点
萜类化合物是由异戊二烯单位头尾相连生成的天然产物。大多是由30个碳原子组成的萜类化合物，根据异戊二烯定则，多数三萜是由6个异戊二烯(30个碳)缩合而成的。
1.2.2 三萜类化合物的生物合成
研究表明萜类的生物合成途径有两条，在萜类化合物生物合成的两条途径中，最后都是由5个碳原子的焦磷酸异戊烯酯和其双键异构体焦磷酸二甲基烯丙缩合而成各种萜类的前体。这两条途径分别是甲戊二羟酸途径和脱氧木糖磷酸酯途。MV A 途径位于细胞质和内质网中，而DXP途径则位于质体。IPP是“活化”的异戊二烯单元，是所有萜类生物合成的中心前体。萜类生物合成的IPP既可来源于MV A途径，也可来源于DXP途径，或者同时来源于两条途径。
1.2.3 三萜类化合物提取方法
三萜类化合物一般采用有机溶剂在常温或低温下提取。提取物的进一步分离大多采用硅胶、氧化铝、葡萄糖凝胶进行柱层析或采用制备型HPLC进行分离纯化。目前应用于三萜类化合物的提取方法主要有如下几类。
（1）溶剂提取法
溶剂提取法是根据原料中各种成分在溶剂中的溶解性质，选用对目标成分溶解能力大，对不需要溶出成分溶解能力小的溶剂，将目标成分提取出来的方法。当溶剂加到原料中时，溶剂由于扩散、渗透作用逐渐通过细胞壁透入细胞内，溶解可溶性物质，从而造成细胞内外的浓度差，于是细胞内溶质不断向外扩散，直至细胞内外浓度达到动态平衡[10]。目前常用乙醇或甲醇溶液作为溶剂，对原料进行室温浸提、煎煮或加热回流提取，从而获得总三萜提取物。
（2）超声提取法
超声波是频率在20 KHz--50 MHz的声波，为一种高频率的机械波。弹性介质的存在是超声波传播的必要条件。超声波可使细胞因溶剂中瞬间产生的空化气泡的崩溃而破裂，溶剂渗透到细胞内部，使细胞中的溶质溶于溶剂中。同时，超声波产生的振动作用加强了胞内物质的释放、扩散和溶解。超声波提取三萜类化合物具有提取率高，时间短等优点。
（3）微波辅助提取法
微波提取是微波射线透过对微波吸收率较低的溶剂和细胞壁到达细胞内部，由于细胞液吸收微波能，细胞内部温度突然升高，压力增大。当压力超过细胞壁的承受能力时，细胞壁破裂，物质释放[11]。微波辅助提取作为一种新型提取技术已经广泛用于天然产物中黄酮、皂甙、多糖、三萜等有效成分的提取。但是微波提取法处理量小，限制了其规模化应用。
（4）超临界流体萃取法
超临界流体萃取(Supercritical fluid extraction，SFE)技术是20世纪60年代兴起的一种新型分离技术。与传统的提取方法相比，超临界流体萃取法的优点在于可在近常温条件下提取分离不同极性、不同沸点的化合物，几乎保留产品中全部有效成分，无有机溶剂残留[12-14]。因此，其产品纯度高，收率高，操作简单和节省能源。该技术在近几年发展较快，对萜类物质的提取应用日渐增多，比如马礼金等曾用超临界流体对红芝及其孢子中的三萜类化合物进行提取。但是超临界提取所需设备价格昂贵，成本较高。
1.2.4 三萜类化合物的定量分析方法
对三萜类化合物的定量分析方法有多种，包括重量法、比色法、色谱法等。由于三萜类化合物的数量众多，结构多样，因此在相关产品质量控制、菌种选育、发酵过程中往往需要测定总三萜的含量。目前常用于总三萜含量测定的是重量法和比色法。
（1）重量法
重量法测定总三萜的原理是根据三萜类化合物的极性，采用水和氯仿(或乙酸乙酯、正丁醇)对三萜提取物进行分配萃取，将有机相分离后进行浓缩，得到干物质并称重，即为粗三萜。该方法较为简便，使用较为广泛。但是该法所得总三萜的纯度不高。
（2）比色法
三萜类化合物通常具有双键、共轭双键结构，因此具有紫外吸收。有学者根据三萜类化合物在245 nm的紫外吸收来测定总三萜酸的含量。除了紫外比色法，也有学者采用硫酸乙醇显色反应测定总三萜的含量。紫外比色法和硫酸乙醇显色法都存在样品中干扰物质影响大的缺点。另据报道三萜类物质在加热条件下可与香草醛和高氯酸发生显色反应，该方法具有灵敏度高、准确度好，重现性佳的优点。
（3）薄层色谱(TLC)技术
薄层色谱(TLC)技术属于吸附色谱，是近年来发展的一种微量、快速和简单的色谱法，兼备了柱色谱和纸色谱的优点，已被成功用于三萜类化合物的定量分析。但是TLC对于三萜的测定仍然存在缺陷，如不适合分析总三萜含量、分析准确性差，一般只能做半定量或限度实验。
（4）高效液相色谱(HPLC)技术
高效液相色谱(HPLC)技术具有高效、高分辨率、高灵敏度等特点，常被用于三萜类化合物的定性定量分析。但是三萜类化合物有数百种，HPLC法一般是以极少数几种三萜为标准品，相应地测定原料或产品中某几种三萜的含量，而对于测定总三萜含量仍然存在困难。
（5）气相色谱技术
气相色谱(GC)技术已被用于测定三萜类化合物，具有灵敏度高、准确度高、重现性好等优点。但是三萜类化合物大多挥发性较差，因此采用GC法进行定量分析时往往需要将三萜进行衍生化后才能测定，因而一定程度上限制了其应用。常用的衍生化试剂有双(三甲硅烷)三氟乙酰胺(BSTFA)等。
1.2.5 三萜类化合物的生物活性
（1）三萜类物质的抗癌抗肿瘤作用
三萜类化合物是一类具有广泛抗肿瘤等生物活性的化合物，在自然界中分布广泛。其中，具有显著抗肿瘤活性的主要包括四环三萜和五环三萜，其作用机制主要通过诱导肿瘤细胞凋亡和抑制肿瘤细胞增殖抑制肿瘤新生血管生成和在线粒体以及基因水平发挥抗肿瘤活性[15-20]。许多具有抗肿瘤活性的三萜类化合物直接作用于肿瘤细胞，通过诱导肿瘤细胞凋亡和抑制肿瘤细胞增殖而发挥抗肿瘤活性。并且，血管生成异常是实体肿瘤发展的重要步骤。因此，抗血管生成是控制肿瘤生长的重要手段，20(R)--Rg3通过干扰血管生成的多个环节抑制血管生成而具有抗肿瘤活性。（2）三萜类物质的免疫调节作用
三萜类物质具有增强机体免疫的功能，通过吞噬细胞、T淋巴细胞、B淋巴细胞以及细胞因子等进行免疫调节作用[20-23]。三萜类物质的消炎镇痛作用炎症是具有血管系统的活体组织对损伤因子所发生的防御性反应。近年来，国内外的许多研究表明许多三萜类物质具有消炎、镇痛作用。
（3）三萜类物质的抗氧化作用
从生物物理学上讲，人衰老特别是皮肤呈现出衰老是由于组成皮肤的细胞内部被氧化而引起的。这主要是由于人体中存在一种叫自由基的物质，如超氧阴离子自由基、羟自由基和过氧化氢等。大量实验表明三萜类物质具有清除自由基的能力[23-25]。三萜类物质是一类重要的天然抗氧化活性物质，具有较高的研究和应用价值。
（4）三萜类物质的抗病毒抑菌作用
植物中广泛存在具有抗病毒、抑菌活性的物质，为人类抵御疾病提供了大量的资源。三萜类物质抗病毒抑菌作用已经得到医药界的肯定，并且，许多三萜类物质已经广泛地应用到临床上[26]。从楝科植物中分离得到的三萜类物质——达玛脂酸，在体外试验中表现出强力的抗病毒活性，能够抑制HIV-1 的传染。羊毛甾-8- 烯型三萜也表现出抑菌和抗病毒作用。
1.3 本课题研究的主要内容
罗田甜柿为大别山地区著名的地标性产品，已受到学术界和消费市场的广泛关注，但是目前其他各国以及我国大陆地区对罗田甜柿的研究很少，因此限制了罗田甜柿的开发利用。大量研究研究表明，多糖和三萜类化合物为甜柿的主要活性成分之一。其中，罗田甜柿三萜具有抗氧化、调节免疫、抑制血管新生、抗肿瘤、抗炎症、降血压等生物活性。因此本论文的主要研究内容为：罗田甜柿果肉三萜类化合物的提取工艺优化。
2 材料与方法
2.1 实验材料与药品
实验材料：于罗田县三里畈镇摘取的己成熟的新鲜罗田甜柿果实。
实验药品：药品：乙醇、甲醇、正乙烷、乙醚、熊果酸、氯仿、香草醛、冰乙酸、高氯酸（所用试剂均为分析纯，购于上海国药集团）；
2.2 主要仪器与设备
电子天平（赛多利斯科学仪器（北京）有限公司）、电阻炉（上海一恒科学仪器有限公司）、DSY-1501戴生高速万能粉碎机（永康市九顺莹商贸有限公司）、722S 可见分光光度计（上海菁华科技仪器有限公司）、SHZ-D(3)循环水式多用真空泵、RE-5220旋转蒸发器（上海亚荣生化仪器厂）、GZX-9240MBE电热恒温鼓风干燥箱（上海博迅实业有限公司）、电子恒温水浴锅（深圳国华仪器厂）、HH-6数显恒温
水浴锅(常州国华电器有限公司)；
2.3 材料的预处理
将采摘的果实带回实验室后，去除果蒂后洗净，自然晾干后切成块状并去掉种子，称重后，于烘箱中在80℃下烘干至恒重，计算干物质百分含量。粉碎后用于三萜类物质的提取。
2.4 提取条件的研究
2.4.1 确定提取的溶剂种类的方法
为了确定提取的溶剂种类，准确称取4份甜柿粉碎物各10.00g，分别加入11倍体积的70%正乙烷、70%乙醚、70%乙醇、70%甲醇，在85℃下水浴回流提取3 h，重复提取两次。
2.4.2 确定提取时乙醇的浓度的方法
为了确定提取时乙醇的浓度，准确称取5份甜柿粉碎物各10.00g，分别加入11倍体积的60%的乙醇、70%乙醇、80%乙醇、90%乙醇、100%乙醇，在85℃下水浴回流提取3 h，提取两次。
2.4.3 确定提取时间的方法
为了确定提取时间，准确称取5份甜柿粉碎物各10.00g，加入11倍体积的70%乙醇，分别在85℃水浴回流提取2h、 3 h、4h、5h、6h，提取两次。
2.4.4确定提取温度的方法
为了确定提取温度，准确称取4份甜柿粉碎物各10.00g，加入11倍量的70%乙醇，分别在65℃、75℃、85℃、95℃水浴回流提取3h，提取两次。
2.4.5 确定料液比的方法
为了确定料液比，准确称取5份甜柿粉碎物各10.00g，分别加入9倍体积、11倍体积、13倍体积、15倍体积、17倍体积的70%乙醇，置于85℃下水浴回流提取3h，提取两次。
2.4.6 确定最佳提取次数的方法
为了确定最佳提取次数，准确称取5份甜柿粉碎物，每份10.00g，加入11倍体积的70%乙醇，置于85℃水浴下回流提取3h，分别提取1次，2次，3次，4次，5次，6次。
2.5 香草醛-冰乙酸、高氯酸显色法测定提取液中总三萜的含量
所有提取液分别过滤后经旋转蒸发减压浓缩，浓缩液定容后，以熊果酸为标准品，采用香草醛-冰乙酸、高氯酸显色法[34]，在560nm波长下测定吸光值，测三次，确定三萜类物质的含量。
3 结果与分析
3.1 提取溶剂种类的确定
溶剂种类为70%正乙烷、70%乙醚、70%乙醇、70%甲醇的总三萜提取量分别为：13.25 mg/100gFW（鲜果）、30.43 mg/100gFW、45.36 mg/100gFW、43.13 mg/100gFW。由图1可知，甲醇、乙醇等极性较强的溶剂的提取效果明显优于极性弱的溶剂乙醚或正己烷。因此以70%乙醇的提取效果最优。
3.2 提取溶剂浓度的确定
不同溶剂总三萜提取量结果见图2。乙醇浓度为60%、70%、80%、90%、100%的总三萜类化合物提取量为38.96mg/100gFW、50.09mg/100gFW、45.36mg/100gFW、42.73mg/100gFW、19.87mg/100gFW。由图可知乙醇溶度从60%升至70%的过程中，三萜类化合物的含量是随着提取液的溶度升高而升高；随后继续升高乙醇浓度至80%、90%/、100%，三萜类物质的提取量随之下降。其中70%乙醇所提取的三萜类物质含量最高。
3.3 提取时间的确定
不同提取时间条件下总三萜提取量结果见图3。回流提取时间为2h、3h、4h、5h。所提取的三萜类物质的含量分别为41.32mg/100gFW、49.76 mg/100gFW、49.97 mg/100gFW、50.13 mg/100gFW；由图3可知，在提取时间为2h时，总三萜提取的量最低，为41.32mg/100gFW，随着浸提时间的增长，总三萜的提取量有所提升，但是升高的幅度十分的小，并不明显。当回流提取的时间延长为6h时，三萜类物质的提取量为49.36 mg/100g FW，相较于之前有所下降，所以提取时间并不是越长越好。因此出于时间和效益的综合考虑，提取时间为3h较为合适。
3.4 提取温度的确定
不同温度条件下总三萜提取量的结果见图4。由图4可知，提取温度为65℃、75℃、85℃、95℃三萜类物质的提取量分别为：20.21mg/100gFW、37.12 mg/100gFW、50.03mg/100gFW。随着温度从65℃依次升高至85℃而增加，当温度再升高到95℃时，其提取量随之下降到48.87mg/100gFW。因此，提取罗田甜柿中三萜类物质的最适温度为85℃。
3.5 提取料液比的确定
图5是不同料液比的提取结果。由图5可知，在料液比较低的情况下，罗田甜柿中三萜类物质的提取量也较低，为18.13mg/100mFW。而当料液比上升至1：11时，罗田甜柿中三萜类物质的提取量升高到49.97 mg/100mlFW；但是当料液比依次升高为1:13、1:15、1:17时，三萜类物质的提取量明显下降。由此，可以得出罗田甜柿提取效果最佳的料液比为1:11。
n
3.6 提取次数的确定
图6为不同提取次数时的提取结果。提取一次到提取五次所提取的总三萜类化合物浓度从分别为：26.53mg/100gFW 、51.13mg/100gFW 、31.79mg/100gFW 、35.95 mg/100gFW 、33.18 mg/100gFW 。由图6可知，当提取次数为1次的时候，罗田甜柿果实总三萜的提取量最低为26.53mg/100gFW ，提取次数为两次时，其三萜类化合物的提取量达到最大为51.13mg/100gFW ；且随着提取次数的再次增加，三萜类物质的提取量随之的减少。因此可知罗田甜柿果实的最佳提取次数为两次。
图6 提取次数对总三萜提取的影响Fig.6 The effect of extraction time on the extraction of triperpenes 0
1020304050601
2345
提取次数 extraction time 总三萜浓度
t r i p e r p e n e s c o n c e n t r a t i o n (m g /100g F W )
4 结论
在所选择的几种提取溶剂中，以乙醇的提取效果最好，其次是甲醇，乙醚提取效果不佳，最差的是正乙烷。分析原因可能是回流提取溶剂的极性大小有关。根据相似相溶原理，极性越接近三萜类物质极性的提取效果越好。
当乙醇浓度超过70％时，由于一些醇溶性物质的溶出增加，因而对总三萜的提取量造成影响。所以，乙醇浓度70％时为提取效果最佳。
在提取时间方面，从逻辑上来看，提取时间越长，提取量越高，效率越高。但是提取的时间太长，有的三萜类物质会因此而降解，从而影响总三萜的提取量。出于效率和效益的综合考虑，在提取罗田甜柿果实中三萜类化合物时，最佳的时间是3h 。
随着水浴温度的升高，分子的热运动加快，罗田甜柿果实中三萜类物质的提取量随之增加，而温度达到85℃时提取量最大，随着温度的继续升高，提取率将逐渐
提取次数
总三萜浓度（
mg/100g FM)
图6 提取次数对总三萜的影响
Fig.6 The effect of extraction time on the extraction of triperpenes
降低。这是由于三萜类化合物是活性物质，温度过高易破坏其结构或影响其活性。
料液比达到一定比例时，原料中的三萜类物质己经基本萃取完全，故而再继续增加溶剂的量，不仅会造成单位提取液中三萜类物质浓度的降低，浪费溶剂和能源，而且也给后续的浓缩工作带来困难。
提取次数少，不能够将原料中的三萜类化合物提取完全，所以随着提取次数的增加，三萜类化合物的的提取率逐渐增加，但是，当提取次数过多时，将增加浓缩工序的难度，也会浪费试剂。因此在提取罗田甜柿果实中三萜类物质时，提取次数为2次，提取效果较好。
综上，甜柿三萜类化合物的最佳提取条件为：以70%乙醇为溶剂，提取时间3h，温度为85℃，料液比l：11，提取两次。
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致谢
光阴如流水般匆匆，一转眼四年的大学学习就落下了帷幕。回首过去四年的学习经历，不禁感慨自己收获颇多，受益很大。完成这篇毕业论文花了不少的时间和精力，虽然很辛苦，但却也十分享受这个过程。通过上网，去图书馆查找等方式收集了大量的资料，加上多次不断地修改完善，让我学到了很多平时我不会接触到的知识，使我开阔了视野，丰富了知识体系；更让我理解到其实这个过程并不仅是完成论文，而且让我领悟到做好一件事所需要的认真、严谨的态度。
能够顺利完成这篇论文首先我要特别感谢我的指导老师。作为一名指导老师，他绝对称得上负责、严谨。在论文写作过程中，他对我进行了无私的指导和帮助，事无巨细，大到文章结构的修改和内容的完善，小到错别字和错误标点的更正，他都详细的批注在我的论文稿上，不厌其烦地帮助我进行论文的修改和改进。这一切无不让我感受到他负责任的工作态度和严谨的治学精神。其次还要感谢我的父母，我所有的一切都可以在你们这里得到理解与支持，谅解和分担。
当然也要感谢一起学习的同学们，你们鼓励的眼神和话语总是让我充满力量，在相互扶持和鼓励下我们携手渡过了一个又一个的难关，最终坚持到了最后。最后还要感谢教过我课程的所有的老师们，你们孜孜不倦地传授我新的知识，使我终身受用。
谢谢所有关心支持我的人！
杨树纯化木质素分离及其表征的研究 前言 21世纪世界各国面临着资源消耗过度、环境污染加剧的困境，积极寻找可再生能源、采用绿色化学土艺、减少环境污染是人类社会能够持续发展的唯一出路。国际能源局（IEA）声明，到2050年生物燃料有望提供世界总运输燃料需求量的27%，可达7.5亿吨石油当量。 杨树是一种全球大面积栽培的木本作物，具有适应性广、年生长期长和生产速度快等特点，是木质纤维素的重要研究代表，杨木的资源化利用具有着重要的意义。通过对木质纤维素原料进行预处理、酶解可以得到葡萄糖，进而发酵制取纤维乙醇。目前，纤维乙醇的制取土艺是可行的，然而土艺成本和产品经济性确是制约发展的重要因素。预处理过程中，有效地将木质素分离纯化并加以利用，能够提升纤维乙醇的整体经济性。木质素是单体繁多、结构复杂的一类三维立体高聚物，由苯丙烷结构单体通过醚键和碳碳键联结而成的无定形高聚物，侧链上存有各种官能团，半纤维素和木质素间的化学键联结形成的网络结构使其难以分离提取。 本研究通过磷酸丙酮法、碱法蒸煮法和有机溶剂法对杨树进行预处理，将分离纯化的木质素[[7]作为研究对象，并与国标法所提取木质素进行对比。通过红外吸收光谱和核磁共振进行表征，从木质素产率和改性程度的角度入手，寻求
能够实现生物质资源全组分利用的最为适合的预处理方法，提升纤维乙醇的产品经济性。 1实验部分 1.1试剂和仪器 杨树枝取自北京吕平，杨树末是经过去皮、烘干、截块、粉碎、筛分J步处理而得，过0.84mm筛孔，在索氏抽提器中苯醇抽提4h，空气中自然放置备用。所用化学试剂均为分析纯，所用水为去离子水。 红外光谱测定在Nicolet6700型FT}R（美国热电公司）上进行，由于所制得木质素是有机粉状物，需采用含有1%I}B:压片法进行预处理。液体‘HNMR在400MHz的400NMR型谱仪（瑞士Bruke:公司）上进行，准备25mg样品溶解在1.0mL 氖代二甲亚矾DMSOI6中，在25℃条件下测定HNMR，每个样品扫描16次70。脉冲角，脉冲宽度10.i,m，延迟时一间15s。 1.2磷酸丙酮预处理 杨树末和磷酸（质量分数85%）首先在水浴恒温振荡器中预浸，比较反应温度、固液比和反应时-间对木质素产率的影响规律。随后加入预冷的丙酮并充分萃取5min， 10000r/min高速冷冻离心实现固液分离，萃取漓心过程需重复3次。离心所得残留固体经过水洗，称重、酶解、发酵制取纤维乙醇；通过旋转蒸发仪对萃取液中的丙酮进行减压蒸馏回收，剩余酸液中加水并自然沉降1h，通过0.45,m混合
三萜类化合物 多数三萜类(triterpenes)化合物是一类基本母核由30个碳原子组成的萜类化合物，其结构根据异戊二烯定则可视为六个异戊二烯单位聚合而成，也是一类重要的中药化学成分。 三萜皂苷的苷元又称皂苷元(sapogenins)，常见的皂苷元为四环三萜和五环三萜类化合物。 组成三萜皂苷的糖常见的有D-葡萄糖、D-半乳糖、D-木糖、L-阿拉伯糖、L-鼠李糖、D-葡萄糖醛酸和D-半乳糖醛酸，这些糖多以低聚糖的形式与苷元成苷，且多数为吡喃型糖苷，但也有呋喃型糖苷。 三萜皂苷多为醇苷，但也有酯苷，后者又称酯皂苷（ester saponins），有的皂苷分子中既有醇苷键，又有酯苷键。另外根据皂苷分子中糖链的多少，可分为单糖链皂苷（monodesmosidic saponins）、双糖链皂苷（bisdesmosidic saponins）、叁糖链皂苷（tridesmosidic saponins），有的糖链甚至以环状结构存在。当原生苷由于水解或酶解，部分糖被降解时，所生成的苷叫次皂苷或原皂苷元（prosapogenins）。 生理活性：三萜类化合物具有广泛的生理活性。通过对三萜类化合物的生物活性及毒性研究结果显示，其具有溶血、抗癌、抗炎、抗菌、抗病毒、降低胆固醇、杀软体动物、抗生育等活性。如乌苏酸为夏枯草等植物的抗癌活性成分，雪胆甲素是山苦瓜的抗癌活性成分。 据三萜类化合物在植物体(生物体)内的存在形式、结构和性质，可分为三萜皂苷及其苷元和其他三萜类(包括树脂、苦味素、三萜生物碱及三萜醇等)两大类。但一般则根据三萜类化合物碳环的有无和多少进行分类。目前已发现的三萜类化合物，多数为四环三萜和五环三萜，少数为链状、单环、双环和三环三萜。近几十年来还发现了许多由于氧化、环裂解、甲基转位、重排及降解等而产生的结构复杂的高度氧化的新骨架类型的三萜类化合物。
立法权 美国国会拥有惟一的立法权力。在不授权原则下，国会不会在其他机关委派任何立法代表。根据此原则，美国最高法院在1998年的克林顿诉纽约市案（Clinton v. City of New York）里指出美国国会不应授予总统“择项否决权”（line-item veto），因为这授权使得总统可以在签署法案前对法案逐项否决，违返宪法的精神。 其中一个早期的不授权原则的确切限制的案例是1825年之“韦曼诉苏哈德案”（Wayman v. Southard）。在这案件里美国国会授予了法院制定司法程序的权力；这引起了很大争论，美国国会这做法被认为违宪。当时美国最高法院院长约翰·马歇尔（John Marshall）承认程序规则的设定为立法职能，其分辨了重要主题与其他细节。哈伦写道：“一个广义的规定应由国会制定，而国会应予受这些规定影响的官员权力来填满这些细节。” 哈伦的言论与其后法院的决定使得美国国会在授予权力时更具弹性。在1935年，国家复兴署设立的案件“谢克特生蓄公司诉联邦案” （A.L.A. Schechter Poultry Corp. v. United States）里，美国国会无法授予总统制定“公平竞争法”的权力。法院认为美国国会的授权范围太过广泛，故宣告该法违宪，并认为美国国会必须设定部份标准来统制政府官员，而法院的职能则只是为“公正与理性”、“公众利益”与“公众方便”。 [编辑] 行政权 美国总统拥有行政决策权，其主要职责为“监督法律之忠实执行”。根据这些字眼，宪法并没有要求总统本人去执行法律；而是要求总统的下属官僚完成这些职责。宪法授予总统监督法律之忠实执行的权力，使得其可以中止某位行政官员的任命。美国国会本身并不会中止这样的任命或阻止总统施行这权力。然而，总统的权力并不会延伸至非行政机关。而此等事务则由战争索偿委员会、州际
三萜类化合物药理作用研究进展 【摘要】三萜类化合物是自然界中一类重要的化合物，具有广泛的生理活性，本文对其近十几年来的药理研究做了简单的综述。就溶血、抗癌、解热、抗炎、镇痛、抗菌抗病毒等方面做了综述。 【关键词】三萜化合物；药理研究；进展 三萜类化合物在自然界种类繁多，分布广泛，资源丰富，多以游离状态或成苷或成酯的形式存在于中草药中，几乎都不溶或难溶于水。上世纪90年代以来特别是进入21世纪之后，三帖类化合物生物活性的多样性和重要性备受人们的重视，成为中药化学研究的一个热点领域。多年来，关于三帖类化合物的结构和活性研究积累了丰富的经验，现对该类化合物自1994年以来的活性研究情况进行综述，为该类化合物做进一步研究、开发和利用提供参考。 三萜类化合物具有广泛的生理活性。通过对三帖类化合物的生物活性及毒性研究，结果显示其具有溶血、抗癌、抗炎、抗菌、抗病毒、降低胆固醇、杀软体动物等活性。 1溶血作用 研究证明，甘草中的三萜可使输血用的血制品中的病毒失活，甘草次酸可100％地抑制疱疹性口腔炎病毒。傅乃武等人对甘草中三萜类化合物的抗氧化作用进行研究，得出其对抗H2O2的溶血作用明显，而对超氧阴离子自由基（O2-）和HPD光溶血无明显对抗作用[1]。 2抗肿瘤作用 Toth等从赤芝菌丝体中提取了6个具细胞毒活性的三萜类化合物，能明显抑制小鼠肝肉瘤(HTC)细胞的增殖（Toth et al.,1983）。李薇[2]研究表明0.80 g/kg 和1.20 g/kg的白桦三萜类物质（TBP）对小鼠黑色素瘤B16、肉瘤S180、Lewis 肺癌和艾氏腹水癌等瘤株的抑瘤率均达30%以上。有研究[2]表明三萜类物质体内抗肿瘤机制之一是增强机体的非特异性免疫功能。 3抗炎、解热、镇痛作用 Rajic A[3]等从菊花中分离得到27种具有抗炎作用的三萜类化合物。体外实验表明对丝氨酸蛋白酶胰蛋白酶或糜蛋白酶均具有潜在抑制作用，作者认为三萜类化合物C－3羟基脂肪酸化是抑制蛋白酶的必需基团。实验及临床提示雷公藤三帖化合物对免疫效应期有直接作用，可降低毛细血管通透性、抑制炎症浸润渗出、抑制或对抗各类炎症介质以及有抗凝抗血栓等减少组织损伤作用。五色梅根三萜类物质对醋酸致痛具有明显的镇痛作用，对二甲苯所致炎性水肿也有显著的抑制作用[4]。
更多图片(8张) 土地承包经营权就是公民集体对集体所有或国家所有由全民所有制或集体所有制单位使用的国有土地的承包经营权。该项权利的权利主体为公民或集体；权利客体为集体所有土地或国家所有由全民所有制单位或集体所有制单位使用的国有土地；权利内容由合同约定。现在，承包经营权流转的农民家庭越来越多，土地承包权主体同经营权主体发生分离，这是我国农业生产关系变化的新趋势。这个变化，对完善农村基本经营制度提出了新的要求，要不断探索农村土地集体所有制的有效实现形式，落实集体所有权、稳定农户承包权、放活土地经营权，加快构建以农户家庭经营为基础、合作与联合为纽带、社会化服务为支撑的立体式复合型现代农业经营体系。 [专家解读] 省委农村工作部副部长、新闻发言人钟正洪介绍，深化农村土地制度改革，是十八届三中全会有关精神的具体化，旨在赋予农民更多财产权利。 其中最大的亮点，就是承包地所有权、承包权、经营权“三权分离”。农村改革前，农村集体土地是所有权和经营权合一，土地集体所有、集体统一经营。搞家庭联产承包制，把土地所有权和承包经营权分开，所有权归集体，承包经营权归农户，这是我国农村改革的重大创新。现在，顺应农民保留土地承包权、流转土地经营权的意愿，把农民土地承包经营权分为承包权和经营权，形成所有权、承包权、经营权三权并行分置的新型农地制度，这是我国农村改革的又一次重大创新。这将有利于更好坚持集体土地的所有权，更好保障农户对土地的承包权，更好用活土地经营权，促进农业现代化与新型工业化、新型城镇化、信息化协调发展。 钟正洪透露，深化农村土地制度改革，有四个方面的基本要求。 第一，坚持农村土地农民集体所有。这是坚持农村基本经营制度的“魂”。农村基本经营制度是农村土地集体所有制的实现形式，农村土地集体所有权是土地承包经营权的基础和本位。 第二，坚持家庭承包经营基础性地位。农民家庭是集体土地承包经营的法定主体，农村集体土地应该由作为集体经济组织成员的农民家庭承包，其他任何主体都不能取代农民家庭的土地承包地位。农民家庭承包的土地，可以由农民家庭经营，也可以通过流转经营权，由其他经营主体经营。 第三，坚持稳定土地承包关系。深化农村土地制度改革，并不是所谓“土改”，更不是对农村土地承包关系推倒重来，而是确保现有农村土地承包关系稳定并保持长久不变，这是维护农民土地承包经营权的关键。今年，我省将全面开展农村土地承包经营权确权登记试点，并在3个县实行整县推进。办点示范，稳步推进，这是稳定土地承包关系的重要举措。 第四，坚持维护发展农民利益。这是深化农村土地制度改革的出发点和落脚点。通过改革，促进城乡土地等要素资源的平等互换，强化农民对土地承包经营权的物权保护，完善土地承包经营权权能，依法保障农民对承包地占有、使用、收益、流转及承包经营权抵押、担保权能，增加农民财产性收入，让农民共享改革成果。 （原标题：承包地所有权、承包权、经营权“三权分离”）
什么是三权分立 三权分立的核心: 立法权、行政权和司法权相互独立、互相制衡 立法权--国会 司法权-最高法院 行政权-总统 什么是“三权分立制”？ （1）国家的立法权、行政权和司法权分别由议会、政府和法院独立行使，同时又相互制约，保持权力平衡，按照这种权力分立和权力制衡的原则来组织国家机关，行使国家权力的制度，被称为“三权分立制”。三权分立的核心内容是权力分立、制约和平衡。 （2）三权分立是美国联邦政府组建和运动的基本原则。①“分权”：美国的中央政府机构由彼此平等而又独立的立法、行政和司法三个机关组成。立法权属于国会，行政权属于总统，司法权属于联邦各级法院。国会负责立法，总统负责实施法律，法院负责审查法律。 ②“制衡”：立法权属于国会，又受到总统和法院的制约；行政权属于总统，又受到国会和法院的制约；司法权属于法院，又受到国会和总统的制约。通过相互制约，保持权力平衡。 正确看待“三权分立制”？ （1）三权分立原则是资产阶级针对封建专制主义提出来的，按照这个原则组织国家机构，对于反对封建专制独裁，调节资产阶级内部各集团的利益，维护资本主义民主制度具有积极作用。 （2）三权分立也具有明显的阶级局限性和消极作用，表现在： ①所谓分权与制衡，事实上成为协调资产阶级内部权力分配的一种机制。 ②实行三权分立、权力制衡的一个必然结果，是三大权力机关之间互相扯皮，导致效率低下。③三权分立的原则难以在政治实践中真正贯彻。 （3）三权分立制，本质上是一种资产阶级民主制度，它有效地维护资产阶级的统治。但是，广大劳动人民不可能在这种制度下享有真正的民主。 什么是“两院制” 西方的两院制源于英国的上院和下院，而英国的上院和下院制度的形成，则是政治实践的产物，是历史发展的结果。两院制的优点是两院分别议事，讨论议案，分别通过，使得法律案或者其他重大议题能够慎重，其缺点是分别通过才能作为议会的正式法律，这样两院之间容易互相扯皮。特别是在西方实行的两党制或者多党制下，各政党均具有自己的利益，两院制实际上成为政党之间利益较量的机制，容易为政党利益所利用。
第八章三萜类化合物 三萜皂苷结构中多具有羧基，所以又常被称为（）皂苷。 不符合齐墩果烷结构特点的是 A. 属于三萜 B. C23、C24连接在C4位上 C. C29、C30连接在C20上 D. A、B、C、D、E环都是六元环 E. C29、C30分别连接在C19、C20上 E 皂苷多具有下列哪些性质 A. 吸湿性 B. 发泡性 C. 无明显熔点 D. 溶血性 E. 味苦而辛辣及刺激性 ABCDE 不符合皂苷通性的是 A. 大多为白色结晶 B. 味苦而辛辣 C. 对粘膜有刺激性 D. 振摇后能产生泡沫 E. 大多数有溶血作用 A 下列成分的水溶液振摇后能产生大量持久性泡沫，并不因加热而消失的是 A. 蛋白质 B. 黄酮苷 C. 蒽醌苷 D. 皂苷 E. 生物碱 D 某中药水提液，在试管中强烈振摇后，产生大量持久性泡沫，则该提取液中可能含有：A.皂苷 B.蛋白质 C.单宁 D.多糖 A 皂苷在哪些溶剂中溶解度较大
A. 热水 B. 含水稀醇 C. 热乙醇 D. 乙醚 E. 苯 ABC 可以用于皂苷元显色反应的试剂是 A. 醋酐-浓硫酸 B. 冰醋酸-乙酰氯 C. 苦味酸钠 D. 三氯醋酸 E. 五氯化锑 ABDE Liebermann-Burchard反应所使用的试剂是 A. 氯仿-浓硫酸 B. 冰醋酸-乙酰氯 C. 五氯化锑 D. 三氯醋酸 E. 醋酐-浓硫酸 E 有关皂苷的氯仿-浓硫酸反应叙述正确的是 A. 应加热至80℃，数分钟后出现正确现象 B. 氯仿层呈红色或篮色，硫酸层呈绿色荧光 C. 振摇后,界面出现紫色环 D. 氯仿层呈绿色荧光，硫酸层呈红色或篮色 E. 此反应可用于纸色谱显色 D 某天然化合药物的乙醇提取物以水溶解后，用正丁醇萃取，正丁醇萃取液经处理得一固体成分，该成分能产生泡沫反应，并有溶血作用，此成分对呈阴性反应。 A Liebermann反应 B Salkowiski反应 C Baljet反应 D Molish反应 C 鉴别三萜皂苷和甾体皂苷的方法有 A. 三氯醋酸反应 B. SbCl5反应 C. 发泡试验 D. 与胆甾醇反应 E. Liebermann-Burchard反应 ACE
本文由dylan_may贡献 pdf文档可能在WAP端浏览体验不佳。建议您优先选择TXT，或下载源文件到本机查看。 第 41 卷 3 期第 2007 年 6 月 河南农业大学学报 Journal of Henan A gricultural U niversity Vol 41 No. 3 . Jun. 2007 文章编号 : 1000 - 2340 ( 2007 ) 03 - 0356 - 07 木质素的测定方法研究进展 苏同福 ,高玉珍 ,刘 ,周 ,宫长荣霞斌 1 1 1 2 1 ( 1. 河南农业大学 ,河南郑州 450002; 2. 黄河中心医院药剂科 ,河南 郑州 450003 ) 摘要 : 对木质素的制备、总量的测定及其结构和分子量的测定等进行了综述 , 并分析了这些测定方法存在的问题 ,指出了将太赫兹技术应 用于木质素测定的前景 . 关键词 : 木质素 ; 降解 ; 太赫兹中图分类号 : Q 539; O 636. 2 文献标识码 : A Rev iew of D eterm ina tion of L ign in SU Tong2fu , GAO Yu 2zhen , L I Xia , ZHOU B in , GONG Chang2rong U ( 1. Henan Agricultural University, Zhengzhou 450002, China; 1 1 1 2 1 2. Pharmacy of yellow R iver Central Hosp ital, Zhengzhou 450003, China ) Abstract: Testing methods for total lignin, p reparation of lignin, structures and molecular weight, are introduced in this article. Problem s existing in these testing methods are analysed and the p rospects of the terahertz technology app lication to lignin analysis are pointed out . Key words: lignin; decompose; terahertz 木质素 ,又称为木素 , 广泛地存在于木材与禾本植物体内 , 通常认为是植物体在次生代谢合成的 ,在植物体内具有机械支持、防止生物降解、输送水分等功能 . 木质素的化学组成是苯丙烷类物质 (包括对羟基苯丙烷、—邻甲氧基苯丙烷以及 4 —羟基—3, 5 —二甲氧
三权分立的应用 1 三权分立简介 摘要：在数据库的应用系统中，有时需要将数据访问的权限控制到行级，通过应用系统实现的方法也有很多，但如何保障高安全性、提高大数据量的查询效率问题一直是人们讨论的话题。达梦数据库(简称DM)三权分立安全管理机制提供了很好的解决方案。利用DM的强制访问控制，可以使数据的访问粒度达到行级，具有控制灵活，高安全性、即使数据量较大时查询效率高等特点。本文从一个实际应用为例，介绍DM三权分立的应用，为应用系统提供一套解决方案以做参考。 1 三权分立简介 DM三权分立安全管理机制旨在构建高安全性数据库，以三权分立安全管理机制为基础的DM安全版数据库的安全级别已达到B1级。 DM在安全管理方面采用了三权分立的安全管理体制，即把系统管理员分为数据库管理员DBA，数据库安全管理员SSO，数据库审计员AUDITOR三类： （1）数据库管理员（DBA） 系统预设了数据库管理员账号SYSDBA，每个数据库至少需要一个数据库管理员来管理，他负责安装和升级达梦数据库管理系统、配置达梦数据库参数、创建数据库对象、自主访问权限的分配、数据导入导出以及数据库的备份和恢复。 （2）数据库审计员（AUDITOR） 系统预设了数据库审计员账号SYSAUDITOR，负责配置数据库的审计设置，定义新的数据库审计员，查看数据库的审计记录。 （3）数据库安全员（SSO） 系统预设了数据库安全员账号SYSSSO，负责对系统进行强制访问控制，定义新的数据库安全员，设置系统的策略及标记。 把数据库的普通用户、审计用户与标记用户的权限及相关处理完全分开，包括系统预设系统登录、用户、系统角色、用户角色及权限分配和控制。它们三者之间互相联系、互相制约，共同完成数据库的管理工作。 1.1 策略及标记的概念 系统可定义多个策略（policy），每个策略互相独立。一个策略包括一组预定义的标记组件，包括等级分类和非等级类别。 一个策略可以应用在多个用户或表上，在单个用户或表上也可以应用多个策略。标记用于标识数据库中主体及客体的敏感度（sensitivity）。一个标记由多个组件组成，其组件包括等级分类（level）和非等级类别(category)。每个标记必须包含一个等级分类组件，非等级类别组件则是可选的。 (1)等级分类（level）： 它是一线性有序的名称序列，用L=(l1，l2，…，lp)表示。其中li(1≤i≤p)表示第i个名称，任意两个名称li、lj之间，若i≤j，则li≤lj，于是有l1≤l2≤…≤lp，其中l1，l2，…，lp称为等级分类（以下简称等级）。 在DM中，一个策略最大可定义9999个等级。用户在定义策略中的等级时，需要为其指定编号，其编号在1－9999之间（编号小的意味着级别较低）。 (2)非等级类别 设集合C = {c1，c2，…，cm}中每一元素都是一名称，c1，c2，…，cm间彼此独立，无序，则集合C及其任意子集称为非等级类别集合，其中c1，c2，…，cm称为非等级类别（以下简称为范围）。 在DM5中，最大可定义10000个范围，范围不需要用户设置编号，且没有级别高低之分。 1.2 DM的强制访问控制 DM5为每个表都提供了自主访问控制（DAC，Discretionary Access Control)，除此之外，其还利用标记提供了强制访问控制（MAC，Mandatory Access Control）。当在一个表上应用了基于标记的一个安
1.三权分立制度的利 首先，三权分立制度是一个在当时社会条件下比较民主的制度，它内部分设三个权力部门，可以彼此相互监督，从而有效防止权力部门滥用职权。其次，它是出于反对专制、争取民主的革命条件下的时代产物，因此，是资产阶级反对封建斗争的结果，是用来维护资产阶级统治的民主制度。再次，实行三权分立制度，是为了调节资产阶级内部的矛盾，为协调集团利益寻找的更为有效的“平衡器”。 三权分立制度是适应资产阶级反对封建君主的个人集权制的斗争需要而产的，是特定历史条件下的产物，也是资产阶级革命取得胜利的标志。资产阶级国家最初实行三权分立的目的在于否定封建贵族阶级对国家权力的独揽和垄断，实现资产阶级与封建贵族阶级对国家权力的分享，而不是那种所谓的“遇到个明君就天下太平遇到个昏君就翻天倒地”的专制统治形式，这是很大的历史进步。它的初衷和目的是好的即要通过“分权”“衡”，实现以权力制约权力，实现议会对政府的监督。可以说，资产阶级三权分立度，是为了适应资产阶级发展需要而建立的一种民主形式。 2.三权分立制度的弊 首先，三权分立制度存在着内部互相扯皮，议而不决，行政效率低下的弊端。其次，也存在着议行分离、议行互悖、政令不一的弊端。其实质，仿佛变成了资产阶级内部不同私有集团间的权力分工。这一点已为恩格斯所指出：“这种分权只不过是为了简化和监督国家机构而实行的日常事务上的分工罢了。 三权分立制度从表面上看，是统治者与被统治者之间的分权制衡，但实际上却是统治阶级内部的权力再分配，人民只是陪衬而已。只能说三权分立的精神只适用于资产阶级政权形式的需要，但并不具有普遍意义。 在资本主义自由竞争阶段，立法权、行政权、司法权之间一般具有一定的“分权”关系，三权各自独立执行、地位平等。资本主义发展到国家垄断阶段后，资产阶级需要更多地用强有力的行政权来实现其利益，由此导致西方国家普遍出现“强政府、弱议会”的权力格局，三权间曾有过的各自独立执行、地位平等的权力格局被打破，行政权逐渐凌驾于立法权和司法权之上，行政权控制和参与立法权和司法权的行使。 首先，行政权凌驾于立法权之上，行政权控制和参与立法权的行使。西方国家政府控制和参与立法权的行使主要表现为：一是由政府高官直接兼任议会重要职务。二是议会被迫实行“委托立法”制度。 其次，行政权凌驾于司法权之上，行政权控制和参与司法权的行使。按照“三权分立”的“分权”原则，为保证司法权独立，政府不能插手法官人选选择，政府官员也不能兼任法官和检察官。然而当代美国的现实却并非如此。 三权分立模式是根植于西方特定的历史文化和环境条件的产物, 在西方资本主义的发展过程中曾产生过重要的作用，由于“三权分立”模式对中国现实国情的不适应性, 决定了中国决不能走“三权分立”道路的必然性。 三权分立对中国现实国情的不适应主要表现在如下方面: 第一, 三权分立, 不利于中国社会的稳定 三权分立在西方运作的基础之一, 是两党制或多党制的政党政治, 即不同派别的政党通过竞选分别掌握不同的权力和部门, 形成权力的分立和制约。但这种政党格局对中国社会的稳定将构成严峻的挑战。
酶解木质素的分离与结构研究 刘晓玲1,程贤甦﹡1,2 （1．福州大学材料科学与工程学院，福建福州，350002； 2．闽江学院化学与化学工程系，福建福州，350011） 酶解木质素是从微生物酶解玉米杆制备能源酒精的残渣中提取得到的木质素[1]。酶解玉米杆制备能源酒精既节省粮食又能充分利用资源，因此受到国内外学者的关注，南京林业大学余世袁教授培育优良菌种发酵玉米秸秆制备能源酒精，项目中试工艺过程取得了成功，但由于没有对残渣进行综合利用，成本过高而无法工业化生产。 本文采用两种不同的分离、提取方法，从酶解玉米秸杆制备酒精的残渣中提取酶解木质素，并结合多种分析手段，研究其结构特征，为酶解木质素的制备及应用奠定基础。 称取研磨至100目的酶解玉米秸杆残渣，和溶剂在0.1-1.0MPa 压力条件下，加热至70-95℃,维持50-180分钟,过滤。根据不同的溶剂种类，采用不同的后续处理方法。氢氧化钠氨水等碱性萃取液，用稀盐酸中和，再加入3-6倍体积的水，酶解木质素以沉淀析出，离心分离，冷冻干燥则得到酶解木质素；有机溶剂萃取液采用减压蒸去有机溶剂得到酶解木质素。将所得到的粗木质素溶于二氧六环，并用乙醚使之沉淀提纯[2]。 应用FT-IR 、UV 、GPC 和13C-NMR 研究了不同分离方法的酶解木质素的结构，结果表明，酶解木质素的分子量小于磨木木质素[3]，与木质素磺酸盐相比较，酶解木质素在结构上较好地保留了各种活性基团，酶解木质素的红外图谱中还多了1700cm -1和1328cm -1峰，说明酶解木质素中存在非共轭羰基。紫外图谱在210nm ，280nm 和310nm 附近有吸收峰出现，证明其具有木质素的基本结构，且不饱和性较大。由13C-NMR 图谱解析可知，所提取酶解木质素为GSH 型木质素，主要以β-O-4，β-5，β-1的结构存在[4]。以氢氧化钠作为萃取剂获得的酶解木质素提取率比较高。 Tab.1 Molecular weight distribution of EH lignin from different solvents 酶解木质素 溶剂 Mn M P Mw Mz Poly Dispersity SL 氢氧化钠 939 1047 1124 1338 1.20 BL 1，4-丁二醇 1167 1284 1544 1995 1.32 40003500300025002000 1500100050020 40 60 80100BL SL %T r a n s m i t t a n c e Wavenumber(cm -1) 200250300350400450500SL BL A b s o r p t i o n c o e f f i c i e n t Wavelength(nm) Fig1 FT-IR spectra of EH lignin from Fig2 UV spectra of EH lignin from different solvents different solvents
不同品种灵芝中三萜类化合物的比较研究 邢增涛1 郁琼花2 张劲松1 潘迎捷1 (1 上海市农科院食用菌研究所,上海201106; 2 通标标准技术服务有限公司,上海200233) 摘要 本研究利用HPLC对同一灵芝菌种不同生长阶段及不同品种灵芝子实体中三萜类化合物的含量和图谱进行了分析。结果表明在液体发酵7天左右的灵芝菌丝体中灵芝三萜类化合物的含量极低,而不同生长阶段的灵芝子实体中的三萜类化合物的变化较小,孢子粉中三萜类化合物的含量较子实体中低。不同品种的灵芝子实体中三萜类化合物的种类和含量存在差异,黑芝中几乎不含三萜类化合物。 关键词 灵芝 HP LC 三萜类化合物 菌丝体 子实体 灵芝三萜类化合物是灵芝中的主要活性物质之一,也是现代灵芝化学和灵芝药理研究的重点。目前,国内外的研究者已经从灵芝中分离纯化出100多个三萜类化合物。另外,在真菌和高等植物的许多次生代谢产物中,三萜类化合物、黄酮类化合物及多酚类化合物等均被用作形态上比较接近的真菌或高等植物鉴别和分类的特征性化合物。国外学者对灵芝做过类似的研究。本文利用HPLC对同一菌种发酵菌丝体、不同生长阶段的灵芝子实体、孢子粉,以及在我国商业化栽培的几种灵芝子实体中的三萜类化合物的种类和含量进行分析。为更合理地开发利用灵芝子实体和发酵菌丝体,以及分类和鉴定等提供科学的依据。 1 材料、仪器与试剂 灵芝发酵菌丝体、芝蕾期子实体、成熟期子实体、老化期子实体、孢子粉,菌种均为Ganoder ma lucidum0819,由上海农科院食用菌研究所药用真菌研究室选育。不同品种的灵芝子实体由上海市农科院食用菌研究所育种室王南博士提供。 HPLC:Waters2690;检测器,Waters2487;色谱柱,Nova-Pak-C18,3 9mm 150mm(Waters)。 95%乙醇(分析纯),甲醇(光谱纯),冰醋酸(分析纯),乙腈(光谱纯),实验用水为重蒸馏水。 2 方法 2 1 供试样品的处理 分别准确称取经粉碎的灵芝样品各1克,加入适量95%的乙醇,超声提取1h,过滤,收集滤液。重复提取3次。合并滤液,于40 左右,减压除去乙醇。用适量甲醇将样品溶出,定容至25ml,供测定。 2 2 HPLC分析条件 流动相:乙腈-2%乙酸(1 4)为A液;乙腈-2%乙酸(1 2)为B液。色谱柱的处理:预先用100%的A洗脱液冲洗色谱柱,设定检测温度为37 ,流速为0 5ml/min。梯度洗脱程序:0 5min,100%A;5 10m in,80%A;10 20min,70%A;20 30min,5%A;30 40min,40%A; 40 50min,20%A;50 100min100%B 1 。进样量为20 l。 3 结果 结果见图1,其中1为液体发酵7天的灵芝菌丝体,2为芝蕾期子实体、3为成熟期子实体、4为老化期子实体、5为孢子粉。图2为不同品种灵芝在同一培养基进行培养,并同一时期采收的老化期子实体中三萜类化合物的H PLC图谱,其中A为松杉灵芝、B为紫芝、C为灵芝0770、D为南韩灵芝、E为日本灵芝、F为灵芝0819、G为黑芝、H为江西黑芝。 4 讨论 从图1中可以看出,液体发酵7天左右的灵芝菌丝体中三萜类化合物的含量和种类几乎无法辨认。据Sheau-Farn Yeh 2 、Rongsuey Chyr 3 等人的研究报道, 液体发酵灵芝时三萜类化合物的含量至 图1 不同生长阶段灵芝产品中三萜 类化合物的HP LC图谱 575 中药材第27卷第8期2004年8月
三权分立制度(分立,制度) 第一篇：美国三权分立制度的特点美国三权分立制度的特点 三权分立的思想最初是由洛克、孟德斯鸠等人提出的，尤其是孟德斯鸠系统地对其内容进行了阐述。他的三权分立思想中既强调权力的分工，又强调权力的制衡，这对美国三权分立的确立产生了深远影响。美国的三权分立制度是独立战争后，为适应资本主义发展的需求，在1787年美国宪法中所确立的政权组织形式。其主要内涵是指把国家权力分为立法权、行政权与司法权，分别由国会、总统与法院行使，三权彼此独立，但又互相制约、保持均衡的一项政治制度，所以美国的三权分立制度是三权既分工又互相牵制的综合体。美国200多年的历史也已经证明：三权分立制度对于维护美国社会稳定，促进社会发展功不可没。美国的三权分立制度有以下几方面的特点： 1、美国三权分立制度从权力的来源上保障各自的独立性，使三种权力保持平行，是一种严格的三权分立模式。 三大部门权力来源不同，相互平行。根据这个原则所设计的体制，国会参议院议员由各州选民选举（最初是由各州议会选举产生，1913年第十七条修正案生效后改为现制），众议员由各选区选民选举产生；总统由选民选出的选举人组成的选举团选出；联邦各级法院的法官由总统经参议院同意后任命，但一旦被任命，如无失职行为就终身任职。因此，三个机关的地位是平行的，其中没有一个是最高权力机关。2、三权分立体制下的立法权、行政权与司法权在动态的运作过程中
维持彼此之间的制衡关系。 三权的分立与制衡不是简单的权力分配，也不是简单的权力制约，而是在动态的权力运作过程中体现各自的价值，展现各自的权威，实现相互的协作。这也是三权分立的资产阶级政治制度与封建君主专制制度的重要区别。君主专制的集权统治下，国家权力是僵化的，没有真正意义上的权力分工，君主是绝对权威。而在美国制宪者的设定下，国家权力的任何一方均不拥有绝对权。宪法根据各自特点赋予每种权力以威力的同时，又为每种权力戴上了“紧箍咒”。美国国会是立法机关，有权制定法律，但法律若想生效的话，必须经过总统的批准。当总统不认可国会通过的议案时，他就可以行使否决权。而参议院和众议院又可以分别以2/3多数推翻总统的否决。最高法院可以对国会及总统行为进行违宪性审查，使二者的活动纳入宪法设定的轨道。同样，国会和总统也有制约最高法院的上方宝剑：最高法院的大法官由总统提名和任命，由参议院批准。国会拥有对联邦法院法官的弹劾权。简而言之，只有在权力行使的过程中，三权分立的价值才得以充分体现。这就是美国三权分立制度设立的精妙之处。 3、三权分立制度所设定的权力界限存在含混不清、相互交叉之处，为权力在现实中的倾轧埋下伏笔。 一方面，这是美国三权分立制度的制衡思想的体现。三权的制衡是通过模糊权力的界限、重叠权力的行使领域而实现的。比如缔约权、人事任命权，均需在国会与总统的共同行使下才能够实现，成为双方长期争夺的目标。另外一方面，这种局面的出现应该说是和宪法规定不
1 三萜类化合物的提取分离 1.1 传统的三萜类成分提取分离方法 一般根据其溶解性采用不同的有机溶剂进行提取分离，如：将药材用乙醇浸提3次，提取液浓缩得到的浸膏溶于适量水中，然后用氯仿萃取3次，合并氯仿层，减压浓缩到原体积的1/3，用饱和NaHCO3溶液碱化，取氯仿层部分浓缩，得到棕色浸膏将所得浸膏用硅胶柱层析分离等。该方法需要消耗大量的有机溶剂易造成医药污染，且提取的选择不高，使制得药物剂型单一，多为汤剂或者丸、散等剂型，服用量大且携带不便，不利于中药的现代化。 1.2 超临界流体萃取法(SFE) 由于SFE在萃取过程中几乎不用有机溶剂，萃取物中无有机溶剂残留，对环境无污染，且提取效率高，节约能耗等特点，在中药化学成分的萃取分离领域得到了蓬勃发展。崔星明等［3］采用SFE得到的芦笋提取物，用甲醇溶解，采用液相色谱-质谱联用仪检测得到了56个组分。发现有保留时间和熊果酸基本一致的峰，其质谱分子离子峰和特征碎片峰都与熊果酸的一致。雒廷亮等［4］采用SFE对山茱萸中熊果酸提取方法的研究，结果表明，在熊果酸提取率基本相同的前提下，SFE不仅可以实现清洁生产，而且易于实现工业化。 1.3 半仿生提取 该法模拟口服给药，为经消化道给药的中药制剂设计了一种新的提取工艺，即将药材先用一定pH值的酸水提取，继以一定pH 值的碱水提取，提取液分别滤过、浓缩、制成制剂，据报道此种方法经济实用，可保证疗效［5］。龚慕辛等［6］通过比较水、不同浓度的乙醇、半仿生法及碱水提取对齐墩果酸提出量的影响，结果显示，半仿生提取齐墩果酸，提出量远高于一般水提。以pH=12的碱液提取女贞子可以使齐墩果酸提出量大于75%乙醇的提出量，并且齐墩果酸不是以游离的形式存在，吸收利用率将提高，提取成本也大大降低。 1.4 超声循环技术 黄书铭等［7］研究灵芝三萜类化合物的提取工艺时，在常规提取方法的基础上，增加超声循环的处理步骤，通过实验对比，超声循环提取所需各种溶剂用量减少，提取时间缩短，目的产物提取率提高了40%。 1.5 化学衍生法 化学衍生法chemical derivatizationmethod是色谱分析中用未处理样品的一种方法。衍生化的目的是使那些本不能直接进样分析的物质经过衍生化反应后转变为可以很方便地进行色谱分析的物质。仲兆金等［8］用重氮烷和卤代烃的化学衍生法使结构相近、难以分离的三萜酸酯化，不改变三萜骨架结构，利用其酯化物容易分离的特点，分离后再部分水解，分得茯苓三萜，确定其结构。 2 中药三萜类化合物的测定 中药总三萜类成分的的测定一般采用分光光度法。该方法结果稳定、重现性好准确度高，可作为中药质量评估的一种检测手段。如茯苓中总三萜类成分的含量测定［9］,灵芝样品中三萜类化合物的含量测定［10］,马桑叶中总三萜酸的含量测定［11］等。 3 中药三萜类单体成分的分析测定 目前用于中药三萜类单体成分的分析测定方法有光谱学、生物学及色谱学方法等，尤以色谱法应用最广泛。色谱法包括薄层色谱法、气相色谱法、高效液相法，以及它们与质谱联用技术等。其中薄层色谱法经济、简单、分离能力强，相当一部分三萜类化合物可以通过这种方法进行定量，但其重现性、选择性较差，直到高效薄层色谱法的出现才得以改善［12］。气相色谱法在三萜类化合物的分析中占有一定比例［13 14］。由于该方法要求化合物具有一定的挥发性，许多挥发性较弱的三萜类化合物需要进行衍生化处理，因而在一定程度上限制了方法的应用。目前，高效液相色谱法(HPLC)是三萜类化合物分析的最常见方法。另外，
三权分立简单理解集团标准化办公室：[VV986T-J682P28-JP266L8-68PNN]
三权分立功能： 1.存在两种权限模式：普通模式、三权模式 普通模式：默认只有超级管理员账号（admin/ngfw2012） 三权模式：默认有系统管理员（admin/ngfw2012）、审计管理员（auditadmin/ngfw2012）、策略管理员（securityadmin/ngfw2012）三个账号 2.普通模式 超级管理员具有所有权限 超级管理员可以创建管理员、审计员、策略员三种角色 分配权限： 超级管理员可以给管理员分配所有权限；-----普通模式下管理员权限不受限 超级管理员可以给审计员分配的权限如下：系统监控、应用分析、权限配置、权限模式（1.不显示保存、生效、配置向导的权限；2.不能进入系统升级页面；---普通模式下审计员权限受限 超级管理员可以给策略员分配的权限如下：系统监控、应用分析、数据中心（除配置日志、系统日志）、策略配置、网络配置、用户管理、系统管理（基本配置、权限配置、告警配置、网页命令行、证书管理）---普通模式下策略员权限受限 3.三权模式： 系统管理员权限：具有系统监控、网络配置、系统管理权限--也就是说从普通模式下切换到三权模式下，admin账号不再是超级管理员，变为系统管理员 审计管理员权限：具有系统监控、应用分析、权限配置、权限模式（1.不显示保存、生效、配置向导的权限；2.不能进入系统升级页面；） 策略管理员权限：具有系统监控、应用分析、数据中心（除配置日志、系统日志）、策略配置、网络配置、用户管理、系统管理（基本配置、权限配置、告警配置、网页命令行、证书管理） 创建子管理员： 系统管理员只能创建管理员角色，可分配的权限：系统监控、网络配置、系统管理权限---但不包括创建子级管理员权限、不包括切换权限模式的权限 审计管理员只能创建审计员角色，可分配的权限：系统监控、应用分析、权限配置、权限模式（1.不显示保存、生效、配置向导的权限；2.不能进入系统升级页面）---但不包括创建子级管理员权限、不包括审核权限模式切换的权限 策略管理员只能创建策略员角色，可分配的权限：具有系统监控、应用分析、数据中心（除配置日志、系统日志）、策略配置、网络配置、用户管理、系统管理（基本配置、权限配置、告警配置、网页命令行、证书管理---但不包括创建子级管理员权限 4.普通模式切换到三权模式：超级管理员直接切换，不需要审核，直接切换完成 5.三权模式切换到普通模式：系统管理员切换权限模式（只有该账号拥有切换权限模式的权利），审计管理员审核通过/拒绝（只有该账号拥有审核切换权限模式的权利） 6.切换模式在系统管理-高级配置中进行，不具备切换权限或审核权限的账号此部分功能按钮不可用 7.三权模式受限的体现 先谈一下保密局测试安全产品的需求：要求配置系统的日志，不能让配置的账号看到，只能让审计员看到 当前实现：超级管理员具有所有权限，肯定不符合上面的需求； 三权模式下，只有审计管理员（或审计员）可以看到配置日志和系统日志（上文标绿的字体）-- 此为权限受限 三权模式下，系统管理员切换权限模式需要审计管理员审核
酶解木质素的分离提取方法 CN 100487126 C 摘要 本发明公开了两种酶解木质素的分离提取方法。利用微生物酶解玉米秸秆中的糖分制备能源酒精是克服石油短缺所造成的能源危机的有效途径之一。本发明分别采用有机溶剂萃取和无机化学品处理的方法从微生物酶解玉米秸秆的残渣中分离提取获得酶解木质素。在制备能源酒精的微生物发酵和从残渣分离的过程中酶解木质素都处在相对温和的状态下，因此酶解木质素较好地保留了木质素的活性基团，适于制备木质素的改性产品，有良好的经济价值。从微生物酶解玉米秸秆的残渣中分离提取酶解木质素可以解决微生物酶解玉米秸秆制备能源酒精工艺的亏损问题，将有利于推广这种绿色环保的新工艺，有利于可持续发展。 权利要求(5) 1、一种酶解木质素的无机分离提取方法，其特征在于：将酶解玉米秸杆的残渣与无机碱性溶液混合，经过加热、加压，使酶解玉米秸杆的残渣中的木质素与无机碱性溶液充分反应溶解，通过过滤将含有酶解木质素的溶液与其他不溶的组分分离，酶解木质素溶液经过酸液中和后，加水使酶解木质素以沉淀析出，再经过离心分离、水洗、干燥得到酶解木质素。 2、根据权利要求1所述的酶解木质素的无机分离提取方法，其特征在于-加热的温度为 30-10(TC、加压的压力为0〈压力《l.簡Pa、并经过0.5-6.0小时。 3、根据权利要求2所述的酶解木质素的无机分离提取方法，其特征在于：其原料组成及重量份数比为：酶解玉米秸杆的残渣100份浓度为1一35%的无机碱性溶液200-1000份。 4、根据权利要求1或2所述的酶解木质素的无机分离提取方法，其特征在于：所述的无机碱性溶液为氢氧化钠溶液、氢氧化钾溶液、氢氧化钙溶液、氨水中的一种或一种以上。 5、根据权利要求1所述的酶解木质素的无机分离提取方法，其特征在于：所述的酸液为弱酸。说明 酶解木质素的分离提取方法 技术领域： 本发明涉及从微生物酶解玉米秸杆的残渣中分离提取酶解木质素的工艺和配方。背景技术： 地球上的石油资源日益枯竭，替代能源的开发迫在眉睫。能源酒精是目前各国都在开发的一种汽油的替代产品，釆用淀粉转化法制备能源酒精，每生产1吨酒精需要3. 3-3. 5吨淀粉。从成本核算来看，这种方法制备酒精是亏本的。玉米是一种主要粮食作物，世界各国玉米的种植面积颇为广阔，每年都会产生6-7亿吨玉米秸秆。我国每年有2-3亿吨玉米秸秆，除了少部分用作词料或制备沼气外，大部分被焚烧为草木灰，既浪费资源又污染环境。玉米秸秆含有大量的多糖组分，为了节约粮食并降低能源酒精的制造成本，国内外学者正在探索利用微生物、酶催化等生物技术让玉米秸秆中的多糖转化成能源酒精。美国能源部和瑞典政府都投入巨资支持开发这一重要资源，国际上瑞典、美国的生物技术公司在微生物培养、糖化酒精的菌种筛选方面做了大量工作，设计了一套试验生产工艺，但是他们对微生物酶解玉米秸杆制备能源酒精的残渣没有进一步开发，仅把残渣作为燃料烧掉，因此经济效益不高，无法推广应用。国内南京林业大学余世袁教授也进行了成功的试验，利用微生物酶解玉米秸杆制备能源酒精，用6.5吨玉米秸杆可以得到1吨能源酒精和1吨残渣，同样因为没有综合利用残渣中的木质素，该项目的