编 号 GY-TY-23-2013 代 替 规范等级 二级 重庆长安汽车股份有限公司内部技术规范 汽车零部件油漆涂层技术规范 Painting of auto parts technique criterion 2013-08-01制定 2013-09-25发布重庆长安汽车股份有限公司发布
前言 本规范是根据有关国家标准、行业标准及长安汽车的实际情况制定的。为保证汽车零部件油漆涂层质量，明确了涂层的质量要求、工艺管控要求和质量验收要求。 本规范由汽车工程研究总院法规标准所管理。 本规范由工艺技术部发动机总铸工艺设计所负责起草。 本规范主要起草人：黄平、张营营、杨鸿昌。 编制：黄平、张营营、杨鸿昌 校核：程巾 审定：彭宝斌 批准：张劲松 本规范的版本记录和版本号变动与修订记录 规范编号 制定/修订者 制定/修订日期批准 日期
汽车零部件油漆涂层技术规范 1范围 本规范规定了汽车零部件油漆涂层的质量要求、工艺管控要求和质量验收要求。 本规范适用于长安汽车零部件的油漆涂层。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件，凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 1730 漆膜硬度测定法 摆杆阻尼试验 GB/T 1731 漆膜柔韧性测定法 GB/T 1732 漆膜耐冲击测定法 GB/T 1734 漆膜耐汽油性测定法 GB/T 1735 色漆和清漆 耐热性的测定 GB/T 1740 漆膜耐湿热测定法 GB/T 1764 漆膜厚度测定法 GB/T 1766 色漆和清漆 涂层老化的评级方法 GB/T 1865 色漆和清漆 人工气候老化和人工辐射暴露（滤过的氙弧辐射） GB/T 5209 色漆和清漆 耐水性的测定 浸水法 GB 6514 涂装作业安全规程 涂漆工艺安全及其通风净化 GB/T 6739 涂膜硬度铅笔测定法 GB/T 9274 色漆和清漆 耐液体介质的测定 GB/T 9286 色漆和清漆 漆膜的划格试验 HG/T 3343 漆膜耐油性测定法 HJ／T 293 清洁生产标准 汽车制造业（涂装） QC/T 484 汽车油漆涂层 SY-HB-14 长安汽车禁限用物质的限值及测量方法（中国） SY-HB-15 长安汽车禁限用物质的限值及测量方法（欧盟）
模块五蛋白质双向电泳 1. 实验目的 掌握双向电泳能根据等电点和分子量分离蛋白质的原理，第一向等电聚焦电泳（IEF）和第二向聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）操作步骤，掌握凝胶染色方法，掌握凝胶分析软件的使用，了解对分离出的特异蛋白质的进一步分析方法，了解利用电泳技术分析生物大分子的方法。 2. 实验原理 从广义上讲，双向电泳是将样品电泳后为了不同的目的在垂直方向再进行一次电泳的方法。目前蛋白质双向电泳常用的组合第一向为等电聚焦（载体两性电解质pH梯度或固相pH梯度），根据蛋白质等电点进行分离，第二向为SDS－PAGE，根据相对分子质量分离蛋白质。这样经过两次分离后，在凝胶上显示出的蛋白点可以获得蛋白质等电点和相对分子质量信息。双向电泳技术作为分离蛋白质的经典方法，目前得到了相当广泛的应用。在植物研究中，成功建立了拟南芥、水稻、玉米等植物种类的双向电泳图谱数据库，对推动植物蛋白质组研究起到重要作用。 第一向等电聚焦：等电聚焦（isoelectrofocusing，IEF）是在凝胶柱中加入一种称为两性电解质载体（ampholyte）的物质，从而使凝胶柱在电场中形成稳定、连续和线性pH梯度。以电泳观点看，蛋白质最主要的特点是它的带电行为，它们在不同的pH值环境中带不同数量的正电荷或负电荷，只有在某一pH时，蛋白质的净电荷为零，此pH即为该蛋白质的等电点（isoeletric point，PI）。在电场中，蛋白质分子在大于其等电点的pH环境中以阴离子形式向正极移动，在小于其等电点的pH 环境中以阳离子形式向负极移动。如果在pH梯度 环境中将含有各种不同等电点的蛋白质混合样品进行电泳，不管混合蛋白质分子的原始分布如何，都将按照它们各自的等电点大小在pH梯度某一位置进行聚集，聚焦部位的蛋白质质点的净电荷为零，测定聚焦部位的pH即可知道该蛋白质的等电点。 第二向SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳：SDS是一种阴离子表面活性剂，当向蛋白质溶液中加入足够量的SDS时，形成了蛋白质－SDS复合物，这使得蛋白质从电荷和构象上都发生了改变。SDS使蛋白质分子的二硫键还原，使各种蛋白质－SDS复合物都带上相同密度的负电荷，而且它的量大大超过了蛋白质分子原的电荷量，因而掩盖了不同种蛋白质间原有的天然的电荷差别。在构象上，蛋白质－SDS复合物形成近似“雪茄烟”形的长椭圆棒，这样的蛋白质－SDS复合物，在凝胶中的迁移就不再受蛋白质原来的电荷和形状的影响，而仅取决于相对分子质量的大小，从而使我们通过SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS - PAGE）来测定蛋白质的相对分子质量。 单体丙烯酰胺和交联剂N，N－甲叉双丙烯酰胺，在催化剂存在的条件下，通过自由基引发的聚合交联形成聚丙烯酰胺凝胶，这提供了蛋白质泳动的三维空间凝胶网络。在SDS - PAGE电泳时相对分子质量小的蛋白质迁移速度快，相对分子质量大的蛋白质迁移速度慢，这样样品中的蛋白质可以分开形成蛋白质条带。 3. 实验设备 垂直电泳仪，水平电泳仪，低温循环水浴，脱色摇床，扫描仪，ImageMaster 2D platinum version 5.0软件。电泳仪及其配套制胶设备、脱色摇床。
双向电泳技术在生物医学中的应用现状和应用前景 1 双向电泳技术 1.1双向电泳技术概述 双向电泳（two-dimensional gel electrophoresis, 2-DE）是蛋白分离的黄金标准，由此可以分析生物样品的显著差别，产生的结果用于诊断疾病、发现新的药物靶标和分析潜在的环境和药物的毒性。双向电泳分离技术利用复杂蛋白混合物中单个组分的电泳迁移，第一向通过电荷的不同分离，另一向通过质量的不同分离。双向电泳协同质谱技术是正在出现的蛋白组学领域的中心技术。 双向电泳是一种分析从细胞、组织或其他生物样本中提取的蛋白质混合物的有力手段，是目前唯一能将数千种蛋白质同时分离与展示的分离技术，其高分辨率、高重复性和兼具微量制备的性能是其他分离方法所无与伦比的。双向电泳技术、计算机图像分析与大规模数据处理技术以及质谱技术被称为蛋白质组研究的三大基本支撑技术。可见双向电泳在蛋白质组学研究中的重要性。就像Fey和Larsen在他们的综述中提到：“尽管人们都想有新技术取代它，可是如果希望对细胞活动有全面的认识，其他技术无法在分辨率和灵敏度上与双向电泳相媲美”。 1.2 双向电泳技术的原理 双向电泳技术是蛋白质组学研究的核心技术之一。它利用了各种蛋白质等电点和分子量的不同来分离复杂蛋白质组分，具有较高的分辨率和灵敏度，目前已成为复杂蛋白质组分检测和分析的最好的生化技术。IPG - DALT系统双向电泳技术原理简明：首先利用等电聚焦( isoelectric focusing ,IEF) 将蛋白质沿pH 梯度分离至各自等电点(isoelectric point ,pI)，通过电荷分离蛋白质；然后沿垂直的方向以十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳( sodium dodecyl sulphate polyacryla -mide gel electrophoresis ,SDS-PAGE)，通过分子量分离蛋白质。所得蛋白双维排列图中每个点代表样本中一个或数个蛋白质，而蛋白质的等电点、分子量和在样本中的含量也可显现出来。蛋白双向电泳的分辨率和灵敏度很高，一般可分离
电泳的基本原理 电泳是指带电颗粒在电场的作用下发生迁移的过程。许多重要的生物分子，如氨基酸、多肽、蛋白质、核苷酸、核酸等都具有可电离基团，它们在某个特定的pH值下可以带正电或负电，在电场的作用下，这些带电分子会向着与其所带电荷极性相反的电极方向移动。电泳技术就是利用在电场的作用下，由于待分离样品中各种分子带电性质以及分子本身大小、形状等性质的差异，使带电分子产生不同的迁移速度，从而对样品进行分离、鉴定或提纯的技术。 电泳过程必须在一种支持介质中进行。Tiselius等在1937年进行的自由界面电泳没有固定支持介质，所以扩散和对流都比较强，影响分离效果。于是出现了固定支持介质的电泳，样品在固定的介质中进行电泳过程，减少了扩散和对流等干扰作用。最初的支持介质是滤纸和醋酸纤维素膜，目前这些介质在实验室已经应用得较少。在很长一段时间里，小分子物质如氨基酸、多肽、糖等通常用滤纸或纤维素、硅胶薄层平板为介质的电泳进行分离、分析，但目前则一般使用更灵敏的技术如HPLC等来进行分析。这些介质适合于分离小分子物质，操作简单、方便。但对于复杂的生物大分子则分离效果较差。凝胶作为支持介质的引入大大促进了电泳技术的发展，使电泳技术成为分析蛋白质、核酸等生物大分子的重要手段之一。最初使用的凝胶是淀粉凝胶，但目前使用得最多的是琼脂糖凝胶和聚丙烯酰胺凝胶。蛋白质电泳主要使用聚丙烯酰胺凝胶。 电泳装置主要包括两个部分：电源和电泳槽。电源提供直流电，在电泳槽中产生电场，驱动带电分子的迁移。电泳槽可以分为水平式和垂直式两类。垂直板式电泳是较为常见的一种，常用于聚丙烯酰胺凝胶电泳中蛋白质的分离。电泳槽中间是夹在一起的两块玻璃板，玻璃板两边由塑料条隔开，在玻璃平板中间
合同编号：****2016( )号 *******摩托车有限公司 *********** MOTORCYCLE CO.,LTD 技 术 服 务 协 议
协议编号： 技术、服务协议书 协议签订地点： 需方： (以下简称甲方) 供方：（以下简称乙方）甲、乙双方经协商就HL1201双组分阴极电泳漆产品的供货及技术服务要求，达成以下协议： 第一条总则 供方为需方提供的电泳涂料为供方目前稳定生产的HL1201双组份阴极电泳漆涂料，且能满足需方提出的质量技术要求。 1、电泳漆应稳定性好，耐腐蚀性能好，槽液易管理； 2、此涂料为双组份阴极电泳涂料，可以直接添加。档槽液参数偏高正常范围时，可以通过少量添加剂或添加涂料调整至正常； 3、在设备正常使用及运行情况下，此涂料应能满足极膜、超滤器、过滤器的正常使用周期。 4、供方提供不间断优良的现场技术服务，使电泳涂装顺利进行。 5、涂膜质量应达到双方达成协议的技术要求。 6、每年不定期的委托第三方检验两次。 7、电泳漆不含：铅汞镍硒铬等重金属符合环保指标。 第二条责任及条件 一、甲方责任 1、甲方对生产使用过程中的设备完好负责，并且在设备故障、损坏、不满足要求或使用寿命已到的情况下，应及时进行修复或更换。
2、甲方应具备常规的实验场地、检测仪器及化验人员。 3、甲方应对乙方服务代表的建议和分析数据予以高度重视，并积极调整、改善。 二、乙方责任 1、乙方具备完善的质量保证体系，从原材料到半成品、在制品、成品等都有严格的检验制度、检验设施，具备一定的生产、检验/仓储条件。 2、乙方保证向甲方提供的产品符合技术指标所规定的标准，供货时应标明产品名称、型号、净量、生产批号和生产日期，并随货提供产品出厂检测报告单。 3、乙方须提供“阴极电泳漆施工工艺及槽液管理规范”，供甲方执行。 4、乙方必须在投槽前、中，对需方现有前处理设备。工艺设计认同。 5、投槽后，一个月内达到所提供样板同等的质量和外观。并在以后的使用过程中达到最佳的、稳定的涂装质量。 6、在涂装过程中，档出现涂装异常时，一旦分析判定为乙方责任（原漆质量问题、技术指导、服务等）乙方承担全部责任，造成的所有经济损失由乙方承担，并负责在最短的时间内改善状况。 第三条质量、技术服务要求 1、供方提供的电泳涂料应能使用膜厚调整的需要；外表面≥16um 2、供方须每月对需方槽液进行抽样检测，对极液中的细菌、霉菌等含量根据生产情况进行检测，对检测的槽液或极夜供方应向需方提交实验报告及解决方法。 3、供方电泳漆在投入大槽后，在工艺、设备、槽液参数均达到要求的前提下，需方产品经过电泳漆、烘干后，应保证做到：①产品烘后，外露面上不得出现有流挂现象，②车厢所有缝隙不得出现不上漆的现象。③外露面上不得出现水迹。④整个车厢电泳烘干后应保持漆膜均匀、光滑，不得有色差。⑤确保电泳漆与需方
电泳技术要求 本公司电泳产品需外协，没有特殊说明按以下要求执行，如有不同要求另行在技术协议中指明。 一、要求 1、颜色：黑色 2、厚度：20±5um 3、耐盐雾：400小时 4、附着力：ISO 2409-2007 中0-2级 5、电泳部位：WILO产品，轴承孔不泳；其他客户全部泳。 6、外观：颜色均匀一致,无针孔、缩孔、漆流。 7、环保要求：提供ROHS认证 二、验收标准 1、盐雾试验：执行国家标准GB1771-2007 2、附着力：按ISO 2409-2007标准 3、厚度：执行ISO 2808-2007标准。 编制：审核：
静电粉末喷涂技术要求 本公司喷粉产品需外协，没有特殊说明按以下要求执行，如有不同要求另行在技术协议中指明。 一、要求 1、颜色：根据客户图纸、样品、色板要求。 2、厚度：80-100um 3、附着力：ISO 2409-2007 中3级 4、喷涂部位：根据客户要求 6、外观：颜色均匀一致,无针孔、缩孔。 二、验收标准 1、颜色：样品或色板。 2、附着力：按ISO 2409-2007标准 3、厚度：执行ISO 2808-2007标准。 编制：审核：
电镀锌技术要求 本公司产品电镀锌需外协，没有特殊说明按以下要求执行，如有不同要求另行在技术协议中指明。 一、要求 1、颜色：根据客户图纸要求 2、外观：不应存在明显可见的缺陷，如麻点、起泡、起留、剥落、未镀覆部位。 3、厚度：一般8-10um,户外件18-22um 4、镀层耐腐蚀性检验：96H 5、喷涂部位：根据客户要求 二、验收标准 1、镀锌膜分级：GB/T9800-1988 2、上述“一”中各项的检测按GB/T9799-1997标准 3、镀层耐腐蚀性检验：执行GB/T 10125-1997标准。 编制：审核： 铸铁件时效处理技术要求 一、时效处理
目录 一、公司简介 二、电泳原理 三、规范工艺流程 四、产品简介 五、全系列丙烯酸聚氨酯电著产品简介 六、全系列产品规格 七、全系列涂膜性能 八、补给剂资料 九、管理对策 十、问题点与对策 十一、各型号产品说明书
二、电泳涂装原理： 阴极电泳涂料是一种具有半水溶型和悬体系特征的多组份体系，在电场作用下，已中和的阳离子树脂携带的涂料粒子在阴极进行电沉积，其过程包括电泳、电解、电沉积、电渗四种现象。 1、电泳：悬浮在极性液体中的带电粒子由于电场影响而发生泳动的现象。阳离子型树脂粒子向作为阴极的工件移动。 2、电解：液体中的氢离子和氢氧根离子在直流电源的作用下，生成氢气和氧气，阴极界面PH值升高。 3、电沉积：阳离子涂料粒子在吸引它的电极（阴极）上被还原为中性不溶脂，析出粘附，形成不溶解的涂膜。 过程如下： H 2 O≒H++OH- 阳极：2H++2OH—- 2e→H 2O+1/2O 2 ↑+2H+ 阴极：2OH-+2H++2e→H 2 ↑+2OH- R 1 R 1 ∣∣ ~NH++OH-→~N↓+H 2 O ∣∣ R 2 R 2 4、电渗：在外电场力作用下，涂膜内部所含的水份从涂膜中渗析出来移向槽液，进行内聚部分脱水。电渗使亲水涂膜变为憎水涂膜，脱水使涂膜致密化。 由于上述四个过程是连续进行的，获得的涂膜在烘干之前含水量在10%以下，可以直接进行水洗、烘干，最后形成连续均一的品质优良的涂膜。
三、规范工艺流程： 1.环氧体系电泳流程： 高温脱脂（加超声波）→常温脱脂→水洗三次→酸洗除锈→水洗三次→流动水洗→表调→磷化→水洗三次→流动水洗→纯水洗两次→电泳涂装→回收水洗三次→纯水浸洗两次→纯水喷淋→脱水剂洗/吹洗→烘干固化→成品包装 2.透明有色体系电泳流程： 电镀工件（抛光工件）→化学除油（加超声波）→水洗两次→电解除油→水洗三次（溢流水洗）→中和（弱酸洗）→水洗三次（溢流水洗）→纯水洗两次→电泳涂装（透明及各色）→回收纯水洗两次→纯水洗三次（溢流）→脱水剂洗→滴水（吹净水珠）→烘烤→成品包装
车架电泳线线技术要求
车架以及底盘小件以及薄板件电泳线技术要求 甲方(需方)： 乙方(供方): 乙方向甲方提供车架、底盘小件以及薄板件电泳线设备 1 台(台套)，由乙方进行设备的设计、制造、安装、调试，验收合格后一次性交付甲方使用。为确保项目质量，需满足如下要求： 一、技术要求 1、项目总体要求 1.1涂装工件名称：车架以及底盘小件以及薄板件； 1.2零件最大组挂尺寸：长12米*宽1.1米*高1.6米， 1.3最大重量：1500KG 1.4动力来源：电、压缩空气、天然气； 1.3生产纲领： 车架产量50000台/年，底盘小件和薄板件25000挂/年； 1.4工作制度： 工作制度：每年300天，每天工作20个小时，三班制； 生产节拍：4.8分钟/件 1.5工艺过程： 工艺温度：预脱脂、脱脂温度不低于45℃；磷化温度为35～45℃；电泳温度为28～32℃； 电泳烘干工件表面温度为180℃以上，其余工序常温。 工序工序内容时间(min) 温度（℃）处理方式 1 上件常温自动输送过来 2 预脱脂 1 不低于45 浸渍 3 脱脂 3 不低于45 浸渍 4 水洗 1 常温浸渍+出槽喷淋 5 水洗 1 常温浸渍+出槽喷淋 6 表调 1 常温浸渍 7 磷化 3 35～45 浸渍 8 水洗 1 常温浸渍+出槽喷淋
除渣泵。 7）槽底与两侧壁板连接处采用圆弧结构，与底、侧板焊接的焊缝不在折角处，不采用槽底板与侧壁板直角对接焊。 8）槽体板与骨架按规范采用断续焊，槽体板与板之间采用连接密封焊，要求各焊缝尽量设置在骨架上，槽体要求耐压、不渗不漏。 9）预脱脂、脱脂、纯水洗等循环管路需加袋式过滤器。 10）预脱脂、脱脂过滤器中需加有高磁磁棒。磁棒可以手工清洁。 4.1.5 搅拌系统 1）要求槽底无死角，各处均能喷到。 2）每只浸槽喷射管数按保证车架表面处理质量的原则下选定。 4.1.6 喷淋系统 1）脱脂采用浸的方式，去除白车架内外表面上的污油和铁屑 2）磷化后水洗系统去除磷化后的车架内外表面上磷化渣。 3)磷化二次水洗后，有节拍自动控制喷纯水系统，清洗磷化后车架表面上磷化液的残留物。 4）前处理设备喷射系统各种功能要求的管路直径、阀门规格尺寸均以确保满足各种功能实现所需要的流量、压力而选定。 5）所有喷淋喷嘴采用不锈钢，可单独调节喷淋方向、调节后可固定的喷嘴。其中顶部喷淋支管做有连接在槽侧的辅助支架，支架确保喷淋支管的支承强度。 6）喷淋管和喷嘴冲洗净白车架和底盘小件表面的铁屑和大部分的污油。 4.1.7 密封室 密封室骨架要先用螺栓连接并调整好后，再进行整体焊接。安装焊接质量要符合相关行业标准。密封室不锈钢壁板制作时要贴保护膜，安装要按图纸要求和施工规范，注意外观质量，不得有明显划碰伤。密封室采用加胶玻璃。 4.1.8 除油装置： 1）要求能去除预脱脂、脱脂槽液中和浮在液面上的污油。 2)要求将槽内的含污油溶液加热到 80～90℃， 3）槽加热采用自动控制阀组和旁通，设有压力表和温度表，对槽液温度能实现自动控制。 4）预脱脂、脱脂槽液除油共用一套除油系统，各槽液中的污油进行处理，处理后的清液回流至原液提取槽内。 5）所有管路为可拆装式法兰连接，垫片采用聚四氟乙烯垫片，连接处密封良好，不渗不漏。 4.1.9 除铁屑装置
电泳技术标准 Company number：【0089WT-8898YT-W8CCB-BUUT-202108】
电泳技术说明 环氧电泳漆电泳规范 1.定义: 这种电泳方法是用一种黑色、阳离子水溶性的环氧树脂漆, 沉积覆着在被阴极 化的零件表面, 从而起到涂层的作用. 然后，这个漆层被置于165℃—190℃范围之下，在零件表面发生聚合反应而呈网状结构. 2.技术特征: 2.1处理过程零件电透的过程如下: ●脱脂. ●酸洗 ●磷化 ●表面电泳涂装 (环氧漆) ●通过165℃—190℃温度聚合反应(隧道)炉持续时间20分钟 2.2阳离子底漆 型号: 例如:阳离子电泳底漆2K BT SP 颜色: 黑色 RAL9005 3.技术要求: 3.1抗侵蚀要求---盐雾试验 根据ISO9227 的标准,在96个小时暴露于盐雾之后,在被测试零件表面不应该看到任何红锈痕迹或水泡，以下部位除外： 螺纹部位 零件的尖角部位
附着力---要求 根据NFT30 038 或NFEN ISO 2409标准， (在依据ISO9227 标准进行盐喷雾实验 96 个小时之后), 用间隔1mm的梳状物在零件表面划出方格，用3M 250 的胶带 粘贴后撕下，我们认为合格的等级是 0级和1级。 3.2厚度 厚度要符合以上所述3. 1和条的要求，这以厚度值应该在 10--20微米之间(最多不超过25微米) 在螺纹部位的电泳厚度要求使用螺纹规控制，并考虑到最大允许螺纹厚度。. 螺纹端检验规范 --- 循环泵泵壳 非内密封管螺纹 NFE 03005 标准 1.泵壳加工件螺纹检规 2 螺纹规的尺寸(螺纹面上的d2 尺寸)
双向电泳 一、材料 样品：人神经母细胞瘤细胞SK-N-SH 二、试剂 SDS-PAGE所需试剂 1、30％Acry-Bis (w/v) 29.2％Acry29.2g 0.8％Bis0.8g 加水至100ml溶解，棕色试剂瓶4℃贮存，PH<7，数月后重配 2、10％的SDS贮液(w/v) RT保存，因SDS在4℃会析出 3、Tris-HCl buffer ①1.5M的PH8.8的Tris-HCl buffer——分离胶buffer 100ml含Tris18.171g，加DDW至80ml，用浓HCl调PH8.8，再定容至100ml，4℃保存 ②1.0M的PH6.8的Tris buffer——浓缩胶buffer： 50ml 含Tris6.057g，加DDW至40ml，用浓HCl调PH6.8，再定容至50ml，4℃保存 4、TEMED 以游离碱形式发挥作用，催化AP形成自由基，故PH较低时，聚合反应受抑制，易吸湿，被氧化，从无色变为黄色，故因密闭4℃保存 5、10％AP 1g的AP溶于10ml水中，4℃保存，隔周新鲜配置 6、PH8.3 电泳缓冲液1L，RT保存 终浓度 Tris碱3g 250mM Gly（25.05）14.4g 250mM SDS 1g 0.1% (192mM) 加水至1L，可不调PH 7、甘油液4℃31ml 丙三醇 5.5ml DDW 25.5ml
8、考马斯亮蓝染液CBB （RT，50%甲醇+冰醋酸+R250） 总体积100ml 终浓度 甲醇Methanal 45ml 45% 水45ml 冰醋酸10ml 10% R250 0.25g 0.1% 改进：（0.12% G250, 10% (NH4)2SO4, 10% H3PO4, 20% 甲醇） 100ml H2O+100ml H3PO4（先混匀，产热的）+100g粉末状(NH4)2SO4（边搅拌边加）先溶解，然后加入1.2g G250再溶解（不能真正溶解），定容至800ml，边搅拌边加200ml甲醇，终体积1000ml（可至少保存半年）。 9、脱色液 7.5ml的冰醋酸 5ml的甲醇 加水至100ml 或者用含有少量NaCl的清水进行脱色 IEF 试剂 10、一向裂解液Lysis buffer ，-80℃贮存 总体积MW 10ml 终浓度 urea 60.06 4.2042g 7M 硫脲(thiourea) 76.12 1.5224g 2M CHAPS 614.89 0.4g 4% DTT 154.25 0.108 70mM Amphylyte PH3~9.5 200μl Tris-base 121.14 0.048456g 40mM 临用前加EGTA (100mM) 400μl 4mM PMSF(100mM) 200μl 2mM 11、一向管胶覆盖液Overlay buffer ，-80℃贮存 Lysis buffer 稀释一倍即可 12、上下槽电泳液（现配） 上槽阴极液（20mM的NaOH）：10ml 1M的贮液加水至500ml 下槽阳极液（10mM的H3PO4）：5ml 1M的贮液加水至500ml 注：若分离碱性蛋白，上下槽电极液互换 13、平衡缓冲液：一向管胶之后的balance buffer 2% SDS 10%甘油 5%β-巯基乙醇/DTT 62.5mM的Tris-HCl (PH6.8) 微量溴酚蓝
车架以及底盘小件以及薄板件电泳线技术要求 甲方(需方)： 乙方(供方): 乙方向甲方提供车架、底盘小件以及薄板件电泳线设备 1 台(台套)，由乙方进行设备的设计、制造、安装、调试，验收合格后一次性交付甲方使用。为确保项目质量，需满足如下要求： 一、技术要求 1、项目总体要求 1.1涂装工件名称：车架以及底盘小件以及薄板件； 1.2零件最大组挂尺寸：长12米*宽1.1米*高1.6米， 1.3最大重量：1500KG 1.4动力来源：电、压缩空气、天然气； 1.3生产纲领： 车架产量50000台/年，底盘小件和薄板件25000挂/年； 1.4工作制度： 工作制度：每年300天，每天工作20个小时，三班制； 生产节拍：4.8分钟/件 1.5工艺过程： 工艺温度：预脱脂、脱脂温度不低于45℃；磷化温度为35～45℃；电泳温度为28～32℃； 电泳烘干工件表面温度为180℃以上，其余工序常温。
（以上处理方式厂家可按照投标方的最优方案来制定）（每个工位有几个工作点根据工艺平面图确定） 1.6输送方式： 空中输送部分单独招标、地面输送包含在电泳线内 1.7作业点：每个工位有几个工作点根据工艺平面图确定 1.8厂房参数：210×18，厂房高度： 13米 1.9能源: 动力电： 380 Ｖ三相 50HZ 照明电： 220 Ｖ单相 50HZ 自来水：2～3 Kg/cm2（以实际情况为准） 压缩空气：5～6 Kg/cm2（以实际情况为准） 加热源：天然气 1.10有在著名工程机械单位或者汽车行业设计和建设大型阴极电泳涂装线的工程案例，且所承制的单个涂装线项目规模不小于1000万（出具合同证明）； 2、项目内容 2.1项目工作流程 1）工件在上件点上件； 2）工件经前处理、电泳； 3）电泳后转挂至地面链，进入电泳烘房进行烘烤、强冷； 2.2分项工程
一、200#溶剂 1. 标准号：沪Q/HG13-537-83（86） 2. 技术标准： 二. 石油甲苯 1. 标准号：GB3406-90 2. 技术标准： 三. 石油混合二甲苯 1. 标准号：GB3407-90 2. 技术标准：
四. 1000#溶剂 1. 标准号：AKZO/T03-R014-92 2. 技术标准： 检验方法： 馏程：按GB255-77（88） 芳烃含量：色谱法 闪点：GB261-71 4. 用途：醇酸漆、氨基漆。
五. 烧火油 1. 标准号：AKZO/T03-R008-92 2. 技术标准： 馏程：按GB255-77（88） 闪点：按GB261-77 六. 芳烃DH 100#（国产） 1. 标准号：AKZO/T03-R001-97 2. 技术标准： 馏程：按GB255-77（88） 4. 用途：氨基漆。 七. 芳烃100#（进口） 1. 标准号：AKZO/T03-R004-97 2. 技术标准：
馏程：按GB255-77（88）执行。 芳烃含量：按ASTM875执行。 4. 主要用途：氨基漆。 八. 芳烃DH150# 1. 标准号：AKZO/T03-R002-97 2. 技术标准： 馏程范围：按GB255-77（88）执行。 4. 主要用途：氨基漆。 九. 501稀释剂 1. 标准号：AKZO/T03-R003-96
2. 技术标准: 3. 环氧值：参照92年4月版《涂料工业用原料技术标准手册》中E型环氧树脂（E-20）中的环氧值测定。 4. 用途：环氧漆。 十. 异丙醇 1. 标准号：GB7814-87 2. 技术标准： 十一. 松节油 1. 标准号：LY205-74 2. 技术标准：
双向凝胶电泳技术原理与应用 Principle and application of two-dimensional gel electrophoresis 姓名：XX 班级：检验本科1113班 学号：XXX 【摘要】人类基因组计划与美国塞莱拉遗传信息公司于2001年在美国《科学》杂志和英国《自然》杂志联合宣布，他们绘制出了准确、清晰、完整的人类基因组图谱，至此，人类基因组计划已基本完成，随着后基因组时代的到来，蛋白质组学得到了空前的发展，蛋白质组研究旨在揭示基因表达的真正执行生命活动的全部蛋白质的表达规律和生物功能。包括蛋白质组、蛋白质组学、功能蛋白质组学和结构基因组学等新的概念的提出，蛋白质组学已成为当今生物领域中极其活跃的学科。其中双向电泳（two-dimensional electrophoresis，2.DE）是蛋白质组研究的三大关键核心技术之一 【abstract】Human gene group plans and United States sailaila genetic information company Yu 2001 in United States Science under magazine and United Kingdom natural under magazine joint announced, they draws out has accurate, and clear, and complete of human gene Group map, at this point, human gene group plans has basic completed, as Hou gene group era of comes, protein group learn get has unprecedented of development, protein group research aimed at reveals gene express of real implementation life activities of all protein of express law and biological function. Includes proteome, proteomics, structural proteomics and functional genomics of new concepts, such as proposed, proteomics has become extremely active in the field of biological sciences. Two-dimensional gel electrophoresis (two-dimensional electrophoresis,2.DE) is one of the three key core technologies of proteome research
电泳漆的标准、成分与技术 电泳漆，作为一类新型的低污染、省能源、省资源、起作保护和防腐蚀性的涂料，具有众多优势。下面天津弘创润天为大家细说电泳漆标准、电泳漆的成分以及电泳漆技术。 电泳漆标准 1、漆膜颜色及外观符合色标标准 2、柔韧性mm1 3、附着力（划圈法），级≤２ 4、冲击强度，公斤，厘米50 5、漆膜厚度，μM≥2 6、漆膜光度，度55-7 7、耐盐水性（25℃=1℃，3%氯化钠溶液中24H）肉眼 观察无变化 电泳漆的成分 电泳漆，也叫电泳涂料，现在还有很多人沿用“电泳漆” 的称呼，而不用“电泳涂料”。随着常规喷涂的缺陷不断浮现，电泳开始变得越来越普及.电泳漆也开始不断更新换代，从阳极电泳漆到阴极电泳漆，从单组分电泳漆到双组分电泳漆，电泳漆的发展也促进了电泳涂装的发展，使更加多的产品不再使用喷涂技术而是使用电泳。 电泳涂料由水溶性树脂，颜料，填料，助剂，溶剂还有中和剂组成。
电泳漆技术 电泳漆技术主要有以下原理： 1电泳是涂装金属工件最有效的方法之一。电泳涂装是将具有导电性的被涂物浸在装满水稀释的浓度比较低的民泳涂料槽中作为阳极（或阴极），在槽中另设置与其对应的阴极（或阳极），在两极间接通直流电一段时间后，在被涂物表面沉积出均匀细密、不被水溶解涂膜的一种特殊的涂装方法。 2电泳涂装过程中伴随着四种化学物理变化，即电解、电泳、电沉积、电渗。 （1）电泳：在电场作用下，带电荷的胶体粒子会向相反电荷电极泳动，这一现象称为电泳。 （2）电解：任何一种导电液体在通电时产生分解的现象称电解。例如，在具有导电性介质的水溶液中，在通直流电的条件下，在阳极表面产生氧气并发生金属溶解，在阴极表面还原氢气并析出金属这一现象称作电解。 （3）电沉积：在电泳涂装时，带电荷的粒子（树脂和颜填、料）在电场作用下到达相反电荷的电极，被H（阳极电泳）OH（阴极电泳）所中和，变成不溶于水的涂膜，这层漆膜很稳定，而且致密均一。这一过程称为电沉积。 （4）电渗：是电泳的逆过程。如果电沉积出的颗粒附着在某一位置，它们不在随电场的作用而发生移动，分散介质在不致密的松散颗粒中作与其移动方向相反的移动。这个电
1. 适用范围：本标准适用于钣金车身表面电泳涂层材料的检测。 2. 检验项目和技术指标见表一、表二。 表一：电泳漆膜性能指标 序号 检验项目 单位 指标 执行标准 1 外观 A 板 级 8-10 QB8021 C 板 8-10 QB8021 L 板 7-10 QB8021 H 板 7-10 QB8021 2 膜厚 μm 20-30 GB/T1764 3 硬度 ≥ 2H GB/T6739 4 杯突 ≥ 6 GB/T9753 5 附着力 级 0-1 GB/T1720 6 柔韧性 mm 1 GB/T1731 7 冲击 cm 50 GB/T1732 8 光泽 （60°） 50-80 GB/T9754 9 耐水性 （40℃）h ≥ 500 GB/T5209 10 耐盐雾 h ≥ 1000 ASTMB117 11 干燥时间 （工件温度） 175℃ min 25 GB/T1728 12 泳透力 cm ≥ 80% 福特盒法 文件名称 电泳漆技术质量要求 文件编号 JB-2011-001 发布部门 工艺技术部 编制 审核 批准 实施日期 修订状态 A1 共2页
表二：电泳漆原漆技术指标 序号 检验项目 单位 指标 执行标准 乳液 色浆 1 外观 乳白色液体 灰色粘稠液体， 无结块 目测 2 不挥发物 （120±2）℃/1h % 36±2 57±2 GB/T6751 3 细度 μm ≤ 10 15 GB/T6753.1 4 PH 值 6.3-6.9 酸度计 5 电导率 Μm/Cm 2000-2800 HC/T3336 6 MEQ 酸 mm01/100g 30-36 0.1mol/1NaOH 滴定 7 MEQ 碱 mm01/100g 55-65 0.1mol/1H 2SO 4滴定 8 粘度（20℃） mP a 2S ≤ 100 GB/T2794 9 密度（20℃） g/ml 1.05-1.07 GB/T6750 10 溶剂含量 (EB)% 0.5-1.5 气相色谱法
双向电泳的应用及研究进展 摘要:双向电泳是蛋白质组学研究中最常用的技术,具有简便、快速、高分辨率和重复性等优点。本文重点介绍了双向电泳的基本原理及其应用。同时对当前双向电泳技术面临的挑战和发展前景进行了讨论。 关键词: 双向电泳，应用，前景 1.1双向电泳技术概述 双向电泳（two-dimensional gel electrophoresis, 2-DE）是蛋白分离的黄金标准，由此可以分析生物样品的显著差别， 产生的结果用于诊断疾病、发现新的药物靶标和分析潜在的环境和药物的毒性。双向电泳分离技术利用复杂蛋白混合物中单个组分的电泳迁移，第一向通过电荷的不同分离，另一向通过质量的不同分离。双向电泳协同质谱技术是正在出现的蛋白组学领域的中心技术。双向电泳是一种分析从细胞、组织或其他生物样本中提取的蛋白质混合物的有力手段，是目前唯一能将数千种蛋白质同时分离与展示的分离技术，其高分辨率、高重复性和兼具微量制备的性能是其他分离方法所无与伦比的。双向电泳技术、计算机图像分析与大规模数据处理技术以及质谱技术被称为蛋白质组研究的三大基本支撑技术。可见双向电泳在蛋白质组学研究中的重要性。就像Fey和Larsen在他们的综述中提到：“尽管人们都想有新技术取代它，可是如果希望对细胞活动有全面的认识，其他技术无法在分辨率和灵敏度上与双向电泳相媲美”。 1.2双向电泳基本原理 1975年,意大利生化学家O’Farrell发明了双向电泳技术[1],双向电泳是指利用蛋白质的带电性和分子量大小的差异,通过两次凝胶电泳达到分离蛋白质群的技术。双向电泳技术依据两个不同的物理化学原理分离蛋白质。第一向电泳依据蛋白质的等电点不同,通过等电聚焦将带不同净电荷的蛋白质进行分离。在此基础上进行第二向的SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳,它依据蛋白质分子量的不同将之分离。双向电泳所得结果的斑点序列都对应着样品中的单一蛋白。因此，上千种蛋白质均能被分离开来，并且各种蛋白质的等电点，分子量和含量的信息都能得到。 2双向电泳的应用 双向电泳的分辨率较高，自第一次应用该技术以来，其分辨率已从15 个蛋白质点发展到10 000多个蛋白质点。一般的双向电泳也能分辨 1 000～3000 个蛋白质点。因此，近年来，双向电泳被广泛应用于农业、医学等研究领域。 2.1 在动物科学中的应用 在动物科学研究方面，双向电泳被广泛应用于小鼠血清蛋白、卵巢蛋白、兔晶状体蛋白质、昆虫离体细胞膜蛋白、户尘螨蛋白、家蚕雌性附腺及其Ng突变体蛋白质、大腹园蛛毒素蛋白质、家蚕蛋白质、牛精液蛋白、猪巨噬细胞蛋白等方面的研究。如钟小兰等[2]利用双向电泳技术分析肝郁症模型大鼠血清蛋白质组的差异表达。王治东等[3]采用蛋白质组学的双向电泳和蛋白质氨基酸序列分析技术研究了8Gy γ射线照射后24 h 小鼠血清蛋白质的变化。马翔等[4]通过双向电泳和质谱技术分析性成熟小鼠卵巢蛋白质组，并对其中的一种蛋白质进行免疫组化研究。刘奕志等[5]通过双向电泳和质谱鉴定有效分离和分析兔晶状体蛋白质组的特性，为白内障的防治带来新的前景。柳亦松等[6]以大腹园蛛粗毒为材料利用双向电泳技术获得蛋白质组双向电泳图谱，检测到500 个左右的蛋白质点，并对其中部分蛋白质点进行了质谱分析。靳远祥等[7]采用双向凝胶电泳和计算机辅助分析方法，分别对家蚕（Bombyx mori）限性黄茧品种雌蚕（黄茧）和雄蚕（白茧）的中部丝腺组织细胞蛋白质进行分离和比较分析。 2.2 在植物中的应用 在植物科学研究方面，双向电泳被广泛应用于水稻蛋白质、小麦蛋白质、茶树蛋白质、杉树蛋白质等方面的研究。如易克等[8]利用双向电泳技术对水稻种子胚乳蛋白进行了分析，获得了较好的电泳图谱，为探讨水稻灌浆期间与籽粒充实相关蛋白表达的变化，建立了一套适于水稻种子胚乳蛋白双向电泳分析技术。Picard 等利用双向电泳分析了亲缘关系较近的硬粒小麦不同株系的遗传多样性。林金科等[9]利用双向电泳技术分析了茶树蛋白质组，探索出一种可获得重复性好，清晰度高的蛋白质双向电泳图谱技术，并发现
电泳技术利用混合物中各组分所带电荷性质、电荷数量以及分子量的不同，在同电场作用下，根据各组分移动距离的不同，来分离鉴定各组分。电泳技术作为一种先进的检测手段，广泛应用于蛋白质、多肽、氨基酸、核苷酸、无机离子等的分离和鉴定，甚至病毒与细胞的研究。随着许多自动化电泳仪器设备的问世和普及，电泳技术在生物医学方面有着许多应用，显示出强大的生命力。 电泳介质的ph、缓冲液的离子强度、电场强度和电渗作用是影响电泳的主要因素。区带电泳可根据支持物的物理性状、支持物的装置形式和ph的连续性等来分类。其中常见的有聚丙烯酰胺凝胶电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳、琼脂糖电泳、等电聚焦电泳和双向电泳等。下面将简要地介绍几种电泳技术在生物医学中的应用。 聚丙烯酰胺凝胶电泳是一种常用的DNA检测方法，是聚合酶链式反应、单链构象多态分析中不可缺少的技术，广泛应用于生物医学中分子水平的诊断。其对小于500碱基的DNA片段分辨率很高，且可容纳相对大量的DNA。聚丙烯酰胺凝胶电泳基本上是一种分析工具，但有时也可用于纯化蛋白质。变性的蛋白质可以经过回收、洗脱、浓缩和除盐来纯化，这样制备的蛋白质样品可以用于蛋白质的结构分析或抗体的制备，是进行生物化学研究的基础。 琼脂糖电泳因为操作简单，耗时短而被广泛应用新鲜血液经琼脂糖电泳、染色后可得患者的血清蛋白质电泳图谱，这是了解患者血清蛋白质全貌的有效方法，可以用为初筛试验。在肾小球疾病中，尿蛋白电泳测定是反映疾病性质的重要窗口，是区别选择性尿和非选择性尿的重要标准之一。十二烷基硫酸钠-琼脂糖电泳测尿蛋白组分操作方法简便，高效。 等电聚焦电泳利用蛋白质具有两性解离及等电点的特征，用具有ph梯度的支持介质来分离的蛋白质。它的主要特点是：灵敏度及分辨率高，重复性好，电泳区带相当狭窄，特别适用于大批量纯度检测和真实性鉴定以及遗传多样性等群体生物学领域的研究。目前等电聚焦电泳主要用于两性电解质样品的分析、分离和制备，在同工酶的鉴定及蛋白质的微量分析上应用尤为广泛。随着生命科学的发展，特别是人类基因组计划全面完成之后所谓“后基因组”时代的来临，对复杂生命体的准确表征和分析就显得日益紧迫，等电聚焦电泳技术得到越来越多的使用。例如，利用等电聚焦电泳技术可以区分人血清蛋白、测出异常免疫球蛋白、进行基因分型，还可以在双相电泳中，将IEFE作为第一相。 双向电泳技术是八十年代发展起来的一种有效的二维分离技术。基于不同蛋白质等电点和分子量不同的特性，第一向通过电荷的不同分离，另一向通过电荷的不同分离，来建立混合物各组分的双向电泳图谱。由此可以分析生物样品的显著差别，产生的结果用于诊断疾病、发现新的药物靶标和分析潜在的药物和环境的毒性。在功能基因组时代，双向电泳技术主要用于寻找不同组织或细胞中差异表达的蛋白质，寻找疾病相关的标记分子，以进行疾病相关蛋白或基因的研究。目前许多研究者利用双向电泳对人体的各种器官、组织、细胞进行了研究，为疾病的判断、诊治及了解发病机制提供了新的手段。 例如，在肿瘤的研究中，寻找与肿瘤发生、发展和抗药性有关的蛋白，为寻找肿瘤的特异标志物、揭示肿瘤的发病机制以及开发新的肿瘤治疗方式和治疗药物提供理论依据。肿瘤发生的早期常常无任何症状，而只有在转移时才容易被发现，这往往延误了治疗的最佳时期，因此找到肿瘤的标志物进行及时的诊断和治疗显得尤为重要。Wadsworth J T等筛选了99例头颈部鳞状细胞癌患者和102例正常对照的血清蛋白质的表达情况，发现了几种蛋白在患者与