香菇多糖产业化项目可行性研究报告（此文档为word格式,下载后您可任意修改编辑！）
第一章总论
1.1 概述
1.1.1 项目名称及单位负责人
项目名称：香菇多糖产业化项目
主办单位：某某制药(集团)有限公司
法人代表：冯某某
1.1.2 编制依据
（1）某某制药(集团)有限公司提供的香菇（菌）多糖生产技术及有关参数。
（2）项目建设单位提供的有关项目的水文、地质、气象、图纸及工艺等有关设计基础数据。
（3）《药品生产质量管理规范（2010年修订）》关于香菇（菌）多糖及国家有关安全、卫生、劳动保护和环境规范等规定。
（4）国家药监局关于《香菇菌多糖GMP认证检查标准》。
（5）某某制药(集团)有限公司委托某某省医药有限公司编制多项生物技术集成实施香菇（菌）多糖产业化项目可行性研究报告的委托书。
1.1.3 项目编制原则
（1）本着规范、先进、适用、经济的原则，尽量采用国内先进技术和设备。
（2）可研报告从客观实际出发，在充分调查研究市场的基础上，
对产品的市场需求，工艺技术方案，厂区布局、技术经济及投资估算等方面作了同客观评价。
（3）按照GMP规范香菇菌多糖升级要求及GMP认证标准进行工程建设，并符合国家食品药品监督管理局颁布的GMP认证规范的要求和规定的标准。
（4）本着三同时为原则，在设计生产及辅助设施的同时，按照国家有关标准考虑环境保护和职业安全卫生设施。
（5）编制可研报告遵循国家防火、安全、卫生、劳动保护、环保等有关规定和规范。
1.2项目单位基本概况
某某制药（集团）有限公司成立于2003年9月26日，公司类型为有限责任公司，占地面积406亩,属国家综合性大型二类制药企业。企业注册资本金人民币20097万元，现有员工1800名，其中中专以上人数1580人，管理人员420人，工程技术人员和各类专业技术人员合计896人。目前企业拥有282个国药准字文号，经营范围包括片剂、硬胶囊剂、香菇菌多糖、软膏剂、滴眼剂、颗粒剂、口服剂、原料药、药用辅料的生产销售，药用中间体及下脚料加工销售等。
医药制造业是高科技、高回报的产业，一直是发达国家竞争的焦点。随着经济全球化的到来，国际市场竞争日趋激烈，也为我国医药工业发展带来了机遇，在这种大背景下，国内医药企业要生存要发展，必须适应这种新的客观条件，跟得上这种外界大环境的变化规模与变化速度。某某制药（集团）有限公司成立以来，以人为本，以先进的文化理念打造企业优势竞争力，通过数年来的建设和完善，已形成良好的发展机制：2004年11月，企业通过国家“GMP”认证, 2006年12
月，被评为省级“高新技术企业”；2007年8月公司被省政府认定为农业产业化省级重点龙头企业，2009年11月被农发行某某省分行评定为AA级信用等级企业, 被某某省银行业协会评为“某某省银行业信用优良客户”，被某某省工商行政管理局、某某省合同管理协会评为“守合同重信用企业”；各类药品经国家、省、市药检部门市场抽检连年100%合格，其中产品已获国家银质奖2个，部优产品3个，省优产品8个；原料药强力霉素获欧洲“COS”认证，目前庆大霉素原料药正在申报美国的“FDA”认证。
经过多年的发展，积累并完善了一整套有关研发、生产、销售的经验，先后承担国家级高技术产业化示范、某某省双百及工业结构调整等产业升级项目，形成了强大的品牌影响力和研发能力，形成了“多品种、大产能、全终端”的独特优势。2009年，某某制药（集团）有限公司在全国制药企业中化学类制药排名16位，综合类制药排名24位。2009年年由于国家实施基本医疗保险目录制度，至2010年该企业已入选国家基本医疗保险目录175个，其中甲类122个、乙类53个，占基本药物目录307个品种的55%以上；其中甘草片、香菇菌多糖等皆为某某省独家品种。根据《医药卫生体制改革近期重点实施方案（2009-2011年）》（国发〔2009〕12号）的规定：三年内，城镇职工医保、城镇居民医保和新农合将覆盖城乡全体居民，参保率均提高到90%以上。而只有进入基本药物目录的药品，才能享有国家制定的这项制度，所以医药生产企业进入国家基本药物目录的药品越多，企业的生产经营越能产生重大变革，产量、产值、销售才能更快实现持续不断和稳健的增长。
生产经营过程中，企业还根据国内外医药市场的发展趋势，确定了以科技进步和技术创新为主题，以产品结构调整为主线，开发高科
技、高附加值产品的战略思想，强力推进技术改造，实现了品牌扩张和企业再造。如合理分布着抗生素、合成、制剂等车间，自身拥有2万KVA的变电站、1600立方米/min空气压缩装置、56T能力的蒸汽锅炉及16眼40T至60T自提深水井。同时公司投入资金对生产车间及生产线进行技术改造，购进了国内一流的大型设备，并聘请郑州大学、某某工业大学、某某大学医学院等高校知名专家、教授作为兼职研究人员，重点发展组合化学技术、现代生物技术，开展多课题研究。目前，企业已有多个全国独家或知名产品：如复方甘草片是国家指定的某某省唯一生产商，强力霉素原料药出口欧美、东南亚等国家和地区。
某某制药（集团）有限公司通过对企业整体改造，企业从原料供应、产品生产、成品库存、到销售网络，呈现出了健康、稳健的发展势头，已经形成一个巨大的产业链。加之经多年市场检验和市场推广，以及大批产品名录入选国家医保目录。预计市场规模每年将以25%-30%的速度递增。由此，某某制药(集团)有限公司架构战略管理平台，企业管理实现了从科学走向科学加艺术的管理，促使企业迅速提升为一个集约型、现代化的企业集团。
1.3 项目单位财务状况
该公司财务管理规范，会计岗位设置、人员配备合理，制定了一套完善的财务制度，资金收支按规定流程办理，逐级审批，资金筹措年初制定计划并严格执行，产品销售基本上实现款现货，各种往来账项定期核对，应收账款及时回收，几年来财务没有呆、坏账现象，资金管理得到不断加强
公司基本户开设在农发行某某市分行营业部，2009年5月信用等级被中国农业发展银行某某省分行评定为AA。
2008年，实现销售收入60322.09万元，实现利润8805.85万元，税金3237.92万元，资产总额102314.20万元，其中固定资产19012.62万元，负债总额43263.95万元,资产负债率42.29%；
2009年，实现销售收入68954.82万元，实现利润10089.78万元，税金2677.39万元，资产总额108153.05万元，其中固定资产19199.37万元，负债总额40461.96万元,资产负债率37.41%。
2010年，实现销售收入84805.9万元，实现利润7110.6万元，税金2732.1万元，资产总额217881.8万元，其中固定资产26518.5万元，负债总额58788.7万元,资产负债率26.98%。
1.4 本项目课题负责人基本情况
李某某：男，1962年生，某某省某某市人。生物制药教授，硕士生导师，某某省学术技术带头人。中国生物化学与分子生物学学会会员，中国微生物学会会员，某某省微生物学会理事，某某省政府采购招投标专家。《中国生物工程杂志》、《食品科学》、《Biotechnology Progress》等刊物审稿专家。1987年毕业于某某师范大学生物系，同年考入中科院病毒所攻读硕士，于90年7月毕业并获硕士学位。毕业后即到某某理工学院工作，曾任某某理工学院生化系生化及微生物教研室主任、某某理工学院实验中心副主任、生化实验中心主任，某某理工学院生化系教授，某某绿环生化技术研究中心副主任。现任某某某某制药集团有限公司技术总工，某某工业大学教授。从事科研教育教学工作十几年来，除圆满完成各项教学任务外，在教学改革、教材建设、实验室建
设、提高教育教学质量方面做出了突出成绩；在科学研究与开发等方面也取得了突出成果，先后主讲过《微生物学》、《生物制药工艺学》、《抗生素生产工艺学》、《生物制药技术》、《药物毒理学》、《药剂学》、《工业发酵分析》、《发酵生物技术英语》、《Microbiology》和《环境工程概论》等10余门课程。以第一/二发明人完成6项已获得2项国家发明专利，其中与本项目直接相关专利4项。主持完成与本申请项目相关技术成果4项：完成的省部级成果“香菇(菌)多糖提取纯化新技术”（2000年9月通过某某省科技厅主持的成果鉴定）2001年9月获某某市优秀科技成果一等奖，2002年6月在由某某省政府等单位主办的2002中国·郑州先进实用技术交易会上获金奖。完成的“莲花菌多糖分离纯化新技术”也于2007年5月通过某某省科技厅和教育厅主持的成果鉴定。“液态法黄酒生产新工艺”98年7月通过某某省科委鉴定并获某某市科技进步二等奖。“稳定性二氧化氯溶液生产新方法与新工艺”2007年通过某某省科技厅鉴定。以第一/二作者撰写的直接相关研究或技术论文“香菇(菌)多糖分离最隹工艺及最隹原料研究(已被CA收录)”、“香菇(菌)多糖分离纯化技术研究”、“几种测定香菇(菌)多糖中蛋白质含量方法的比较研究”、“香菇(菌)多糖的提取及纯化技术初探”、“A Novel Approach to Deproteinization in Isolation and Purification of Lentinan”、“A Novel Approach to Degrading Plant Cellulose*----Continual Adding of Materials and Cycling Utilization of Acids and Cellulase (CACU)”、“莲花菌菌株Sd
的液态发酵特性研究”等10余篇分别发表在《中草药》、《Transactions of the Chinese Society of Agricultural Engineering》(国家一级) (已被EI收录)、《食品科学》(国家一级)、《中国生物防治》(国家一级)、《中国蔬菜》、《中国食用菌》、《中国酿造》、《生物技术》等国家一级及国内核心刊物上。其中，有2篇于2003年7月获得某某省自然科学优秀学术论文2等奖。主编、副主编出版与该项目直接相关的论著3部：（1）《微生物工程概论》，2000年9月由中国兵器工业出版社出版，主编。（2）《中药与肿瘤免疫研究》，96年8月由中国医药科技出版社出版，副主编。（3）《微生物学》，2001年3月由吉林人民出版社出版，副主编。在发酵工程、生物制药、酿造酒、食品添加剂等领域均取得突出成果。曾于96年4月获某某理工学院吴天喜奖教金一等奖；97年4月获中入奎奖教金一等奖；98年10月和2000年11月获某某市科技进步一等奖。2001年9月获某某市政府优秀学术成果一等奖。2002年9月获某某市优秀教师。2004年7月荣获2004全球华人生物科学家大会奖。2004年9月荣获某某省学术技术带头人。
第二章项目的基本情况
2.1 项目建设背景
随着我国建设环境友好型社会，大力发展循环经济的需要，加快资源节约型、环境友好型、可持续发展及节能减排等高技术开发成为产业发展的重点。采用生物技术创新引领现代生物产业的快速发展，生物制造、生物医药、生物能源、生物环保等一批新兴产业正在快速形成。面对日益严重的“白色污染”、石油资源的短缺和人类生活水平的提高，亟需开发绿色安全、环境友好、资源综合利用、高附加值的新型微生物发酵产品新技术新工艺，加快微生物制造产业发展，推动传统发酵产业化升级，提高微生物制造产品的国际竞争力。
香菇(菌)多糖是从食用真菌香菇或菌丝发酵液中提取出来的一种能治疗癌症，抗恶性肿瘤，抗病毒，抗感染，提高人体免疫力等具有多种生理药理功能的生物活性物质。香菇多糖是当今世界上公认疗效最为显著的抗癌新药之一，因其独特的疗效，倍受WHO和许多国家，特别是欧美发达国家的医疗权威机构所推崇和青睐。
香菇多糖及其系列产品----香菇多糖下脚料的研发具有非常广阔的前景。如前所述，由于香菇多糖广泛的药理作用，使它在医疗上的应用范围会越来越大，不仅可用于多种癌症的预防与治
疗，而且还有可能用于肝炎、青光眼、肥胖症等疾病的预防与治疗。香菇多糖下脚料----香菇蛋白粉是一种用途相当广泛的食品添加剂，它的研发应用将会为改变我国乃至国外（特别是发展中国家，其饮食中普遍缺乏蛋白质，钙，硒等营养素）人们的饮食结构起到促进作用，将会带动一系列新型或功能食品的开发生产。
通过本项目的建设，全面增强企业的自主创新能力，促进产业技术进步和升级，提高原料转化率和资源综合利用率，提高产品市场核心竞争力和企业经济效益，将起到重要的示范带动作用。
公司原香菇菌多糖生产车间虽然几经升级改造（包括GMP认证的改造），但是随着医药生产形势快速发展，国家对香菇菌多糖的生产要求越来越高，特别是今年一月新发布的药品生产质量管理规范（2010 年修订），该车间的厂房、设备、空气净化系统等已不能完全满足药品生产质量管理规范（2010 年修订）对香菇菌多糖的要求。因此，该公司对香菇菌多糖车间进行GMP质量升级和产业化技术改造已势在必行。
2.2项目建设内容
2.2.1 项目的产能规模
总体建设目标：建立1个符合国家GMP要求的规模化产业化示范生产基地。年产120吨香菇多糖（纯度≥25%）（以1700元/kg 计）或年产香菇(菌)多糖2,040,000mg（纯度≥85%）；以100元/mg 计，年产值达20400万元。
2.2 .2建设的主要内容
项目新增建筑面积3000m2，主要建设生产车间，配套建设、公用和环保设施等。项目建设期二年，采取公开招标的组织方式。项目达产后，形成年产120吨香菇（菌）多糖的生产规模。
本项目的主要建设内容有2项：香菇(菌)多糖液态发酵产业化平台的创建和示范；多级溶媒循环动态热回流法创建香菇(菌)多糖提取浓缩产业化平台和示范应用。
2.3项目技术工艺
2.3.1成果来源及知识产权情况
香菇(菌)多糖液态发酵工艺技术由某某制药（集团）有限公司自主研发成功，率先在我国实现了小规模产业化开发生产。采用中试规模连续开发生产香菇多糖片达五年之久，生产的香菇菌多糖原料药被某某省科技厅评为高新技术产品。内含多糖制备、除杂蛋白及脱色等多项专利技术（1. 一种多糖类药物复合脱色剂及其脱色方法，申请号：200818.8（已授权）；2.一种检测真菌多糖的方法，申请号：2008139.2（于近期授权）；3. 一种制备真菌多糖的方法，申请号：2008540.5（于近期授权）；4.一种多糖类药物除杂蛋白剂及其除杂方法，申请号：20081041.X（已授权））的香菇(菌)多糖高效制备新工艺和香菇蛋白粉及香菇保
健酒生产技术来自某某工业大学，该项目是一个典型的产学研紧密结合的成果。
2.3.2已完成的研究开发工作及中试情况和鉴定年限
目前中试生产规模可以达到月处理香菇（菌）5吨/月, 年处理香菇（菌）50吨,年产香菇多糖粗品2500kg, 香菇多糖精品100000mg。某某制药（集团）有限公司已采用中试规模连续开发生产香菇多糖片达五年之久，生产的香菇菌多糖原料药被某某省科技厅评为高新技术产品。项目产品已经取得国家新药证书和注册批件，具备产业化条件。
完成相关技术成果4项。已申报并被国家知识产权局受理核心技术发明专利4项。已在国家核心刊物上公开发表直接相关研究或技术论文10余篇。所以，具有良好的产业化开发生产基础。
2.3.3技术或工艺特点以及与现有技术和工艺比较所具有的优势
实践证明，该项目采用的新工艺技术具有以下特点：①改进了传统的单一产品的生产方法，综合性强，副产物利用率高，生产效率高；②采用的多糖制备、除杂蛋白及脱色等多项专利技术，使生产工艺路线缩短1/3；③产品提取率由过去每吨香菇提香菇多糖1.75克提高到2克以上，提高12-25%；④产品单一组分纯度由
85.5％提高到98.1－100％。⑤成本下降25%-30%。⑥经济效益较高，开发出的副产品香菇酒和香菇蛋白粉，能使经济效益提高10-30％。
该项目的创新性除了拥有的4项相关技术成果和4项核心技术发明专利外还表现在：
1）集香菇多糖的液态发酵技术、子实体和菌丝体的提取分离纯化技术于一体构成一种新的香菇（菌）多糖生产工艺，能成功地实现子实体和菌丝体香菇多糖的产业化生产。
2）能实现香菇（菌）多糖及其系列产品的综合化、零排放化的产业化生产。
2.3.4 该重大关键技术的突破对行业技术进步的重要意义和作用
本项目采用自主研发的香菇（菌）多糖的液态发酵和提取分离纯化新工艺，不仅能成功的实现子实体香菇多糖的产业化生产，亦可圆满实现香菇（菌）多糖的液态发酵法生产。该新工艺是集香菇多糖的液态发酵技术、子实体和菌丝体的提取分离纯化技术于一体，集多糖的高效制备、杂蛋白的去除、多糖的脱色和分析检测4项专利技术于一身，以实现香菇（菌）多糖及其系列产品的产业化。
其中自主研发的杂蛋白的去除和多糖的脱色2项国家发明专
利技术的成功应用，再把自主研发的另外2项专利技术——多级溶媒循环动态热回流提取浓缩技术和单相色谱-MALS技术集成起来，不仅能使香菇多糖生产水平上一个新台阶，它将对凡需用到这些专利技术进行相关产品开发生产的整个制药行业的技术升级起到巨大的推动作用。
该项目不仅属于生物技术药物的新产品产业化升级项目，它还直接涉及到食品精深加工业、保健品和新型饮料产业，另外，它也与农业产业结构调整、拉长农业产业链条密不可分。它还将有助于相关的化工原料、化学试剂、制药装备等产业的快速发展。同时也能够在一定程度上推动包装、运输等行业的发展。特别是在目前全球金融、经济危机的情况下，对于扩大内需，帮助部分中小型企业脱离困境，推动生物医药以及相关产业的发展将会起到积极的作用.
2.4总投资及资金来源
2.4.1 投资估算
（1）、本项目固定资产投资为8800万元，其中设备费6000万元，占68 %；安装工程费1350万元，占15%；建筑工程费660 万元，占 8%；其它费用790万元，占9%。
（2）、本项目另需铺底流动资金 1800万元
（3）、本项目总投资10600万元
2.4.2资金来源及筹措
资金筹措方案为：银行贷款4800万元，单位自筹5800万元。贷款偿还期为5年。
表2-1 投资总估算表
表2-2 香菇菌多糖车间综合估算表
2.4.3采用定额、价格及指标
（1）《某某省建筑工程概算定额》
（2）《某某省建筑工程建设其它费用定额及说明》（暂行规定）
（3）《化工设计概算指标》
（4）《中国制药机械新产品大全》（5）化工工艺设计手册
（6）产品样本及厂方报价
（7）省内同类厂家的建设资料2.4.4 主要设备及选型
2.5建设条件落实情况
2.5.1 动力供应
（1）水：本项目日用新水量600MG。循环水由玻璃钢冷却塔冷却，采用敞开式循环冷却水系统供给。根据某某制药（集团）有限公司提供的水文资料及条件，该项目生产和生活用水由公司自备井供给，水质符合生活饮用水标准，水压可保证在0.2-0.3MPa，可满足本项目用水需要。
（2）电：本项目全年用电量 112万度，用电设备总装机容量为1400kW。该厂变电站可满足该项目用电要求。
（3）蒸汽：该项目最大时用汽量12吨，日用汽量167吨，蒸汽来自厂内原有锅炉房，并能满足本项目要求。
（4）冷冻
冷冻：根据生产需要，本项目车间生产和空调所需的冷冻量为1600KW，有车间冷冻站供给。
2.5.2地理位置及水文地质状况
某某市地处豫东平原，黄河以南，距某某省省会郑州70km，东临商丘，南与许昌接壤。陇海铁路和连（云港）—霍（尔果斯）高速公路横穿该市，交通十分便利。
该市属于黄河冲积平原下游，地形西北高、东南低，平均坡降为1/5000，平均地面高度为海拔72 m，地面大部分为砂性土，地势平坦，环境宜人，工程地质属黄土状，轻亚粘土，地下水深1.6m。
地震裂度为六级，抗震按六级设防。
2.5.3气象条件
该区属温带大陆性季风气候，四季分明，气温降雨随季节变化显著，夏秋炎热多雨，冬春干冷多风，其气象条件为：
（1）气温
年平均气温14.0℃
极端最高气温42.9℃
极端最低气温-16.0℃
冬季采暖天数99天。
（2）空气湿度
历年平均相对湿度59%
（3）降雨量
平均年总降水量634.2mm
日最大降雨量176.5mm
（4）降雪量
香菇多糖提取工艺的研究进展 香菇多糖提取工艺的研究进展 香菇Lentinusedodes 为担子菌纲伞形科真菌，是世界上第二大食用菌。香菇多糖是香菇中最重要的一种生物活性物质，具有抑制肿瘤、调节免疫、抗病毒和抗氧化等多方面的药理活性，且毒副作用小。香菇多糖的提取常用水提醇沉法、酸碱提取法，但存在提取工艺复杂、溶剂使用量大、时间长等缺点，而且容易造成多糖降解，生物活性降低。本文主要对近年来香菇多糖提取工艺优化研究方面的进展进行阐述。 1.超声波提取 超声波提取法是利用超声波特殊的物理性质，加速介质质点运动、空化作用、振动匀化等以增大物质分子运动频率和速度，增加溶剂穿透力，从而使药效物质加速融人溶剂提高有效成分的得率。 王恒等用超声波辅助法从香菇中提取香菇多糖，通过实验优化确定出香菇多糖最佳提取工艺为超声功率200W ，料液比 35：1，超声时间40min ，香菇多糖提取率为6.72 ％。王俊颖等采用超声法浸提香菇多糖通过正交试验设计确定的最佳工艺为料水比1 : 25，超声温度60° C超声时间30min , 超声功率300W ，多糖得率为8.72 ％。李宏睿等采用正交试验设计，对香菇多糖的提取条件进行优化，并与单纯的热水浸提进行比较。结果表明，在料水比 l：25 ，超声时间35min ，超声功率105W ，热水浸提温度 90 ％，浸提时间20min 的条件下，提取效果最好，多糖提取率为13.75 ％，比单纯热水浸提法提高6.22％。 2.微波提取 微波辅助提取技术主要是通过调节微波加热的参数，有效地加热物料中的目标成分，对目标成分进行选择性提取。刘小丽等研究微波辅助法提取香菇多糖采用单因素试验对固液比、微波辐射功率、辐射时
国内食用菌公司集锦 国内食用菌公司集锦 1、川乐公司?四川省红岩镇梨花村?现已发展成为成都最大的 食用菌批发市场——百家批发市场的重要供应基地?每天平均出菇量 达到1.5吨。 2、星河生物?广东省、深圳、河南?主营业务为鲜品食用菌的 研发、生产和销售?主要产品包括金针菇、真姬菇和白玉菇等鲜品食用菌。经中国食用菌协会统计?截至2009年12月31日?公司日产 鲜品食用菌36吨?生产规模在全国食用菌工厂化生产企业中高居榜首。2009年2月?公司被中国食用菌协会评为“全国食用菌行业十 大龙头企业”。 3、湖南省安仁县坪上食用菌开发有限公司创建于2002年4月? 现有资产5268万元?注册资金500万元?是集食用菌科研、开发、 加工、生产销售为一体的湖南省农业产业龙头企业、131工程?公司承担的安仁县食用菌专业技术及服务体系建设列为国家星火计划项目。公司采取“公司+基地+农户”为基本特征的农业产业生产经营方 式?生产的“天扶”牌食用菌系列产品有姬菇、秀针菇、香菇、雪菇、 小平菇、鸡腿菇等?主要销往广州、深圳、武昌、长沙、杭州、上海、香港等大中城市和地区?产销率100%?产品供不应求。2009年2月被评为全国食用菌行业“十大”龙头企业?同时评为“AA”信用企业。2010 年被中国食用菌协会、中国烹饪协会、世界蘑菇学会、国际烹 饪联合会评为第六届中国国际食用菌烹饪大赛指定产品单位?这次被授予“全国食用菌行业优秀龙头企业”称号。 4、浙江省景宁县大自然食品、中信实业、博士园科技3家食用 菌龙头企业?景宁县是食用菌生产大县?全县有从事食用菌行业的企业38家?景宁绿色市场食用菌产品年交易量1万多吨?产值达6亿 多元。景宁县食用菌企业发展潜力巨大?有较好的经济基础?有多项政策措施的优惠?有大多数勤劳好学的从业人员?食用菌产业化、企业化应该说大有可为。但目前食用菌企业的发展处于起步阶段?企业人才只有消费没有培养?只有流失没有进入?人才资源溃乏已成为制约食用菌企业快速发展的重要因素。食用菌企业让员工参加知识更新培训班?对于促进食用菌企业技术骨干的技术知识更新?让技术骨干了解食用菌技术与市场发展趋势?拓展企业生产经营思路?进一步提升食用菌企业的生产管理技术水平?促进规模化生产经营主体的健康发展具有极其重要的意义。 5、天津华大绿色食品有限公司创立于2000年?是天津市重点龙 头企业?是天津市目前规模最大的食用菌种植、生产及加工基地。专门生产、加工、销售各种无公害食用菌、山野菜的一所企业?也是优质农产品精深加工出口创汇的外向型企业?产品远销加拿大、韩国、日本等。 公司注册资金1000万元人民币?目前总资产6500万元人民币?2006年销售收入1400万?创造利税69万?位于中国天津滨海新区
食品研究与开发 ２００７．Ｖｏｌ．２８．ＮＯ．０５ 作者简介：林楠（１９８１－），女（汉），在读硕士研究生，主要从事功能性食品的研究与开发。 ＊通讯作者：钟耀广，教授，主要从事功能性食品及食品安全方面的研究。 香菇（Ｌｅｎｔｉｎｕｌａｅｄｏｄｅｓ）是全球第二大人工种植最为普遍的食用菌［１］，由于香菇多糖具有抗肿瘤、抗病毒、提高免疫和刺激干扰素形成等功能，已成为当前研究的热点。香菇多糖作为一种辅助药物，其毒副作用小，疗效高，具有重要的研究和开发价值。本文试图对香菇多糖的提取、分离方法及其结构、生物活性等方面的研究进展进行概括和综述，为其进一步开发利用提供参考。 １香菇多糖的制备 １．１香菇的预处理 一般用于多糖提取的香菇子实体通常是干品，将 无霉变和虫蛀的优质香菇子实体置于６０℃左右的条件下干燥，以利于粉碎［２］，粉碎后过２０～８０目筛。由于香菇的脂肪含量约为干重的２％～４％［３］，因此一般不考虑脂肪对香菇提取的影响，但也有研究采用石油醚、乙醇等除去原料中的脂肪成分［４￣５］。 １．２香菇多糖的提取 多糖的提取可以采用热水、稀酸、稀碱作为浸提剂。在提取过程中，不仅要考虑到粗多糖的得率，还要保证不破坏多糖的结构。由于酸对多糖的糖苷键有破坏作用，故一般采用热水和稀碱作为浸提剂。热水浸提的温度一般为９０℃～１００℃，浸提时间１ｈ～３ｈ，浸提次数为２次～３次，合并浸提液，离心，收集上清液，减压浓缩到适当体积，加入一定量的乙醇静置过夜，离心，收集沉淀物，干燥得粗多糖。碱浸提通常采用ＮａＯＨ作为浸提液，浓度为０．１ｍｏｌ／Ｌ～１ｍｏｌ／Ｌ。 为了提高香菇多糖的提取率，减少能源消耗，缩短提取时间，研究者们尝试了一些其它的提取方法。张海容等［６］以香菇多糖为研究对象，对微波法及热水浸提法进行了比较，发现微波法的提取率高于传统热水法，且提取时间可以缩短１００倍。念保义等［７］利用超声波辅助热水法从香菇中浸提香菇多糖，不仅可以缩短提取时间，减小料液比，而且提高了提取率，降低了生产成本。董彩霞［８］利用纤维素酶作用于香菇细胞的细胞壁，使之破裂，多糖易从细胞内释放出来，以提高多糖的提取 率。也有研究先采用中性蛋白酶处理香菇粗粉，蛋白酶将与多糖结合的蛋白质酶解，使多糖释放出来，此法与传统工艺相比，提取率提高了４０％以上，多糖中杂蛋白 林楠１，钟耀广２，３，＊，王淑琴３，刘长江３ （１． 大连轻工业学院生物与食品工程学院，辽宁大连１１６０３４；２．上海水产大学食品学院，上海２０００９０；３．沈阳农业大学食品学院，辽宁沈阳１１０１６１） 香菇多糖的研究进展 摘 要：香菇多糖是真菌多糖中的一类，是目前最有开发前途的功能食品和药品资源之一。综述了香菇多糖的提取、 分离纯化、结构分析、生物活性等方面的研究概况。关键词：香菇多糖；提取；分离纯化；结构；活性 ＲＥＶＩＥＷＯＮＡＤＶＡＮＣＥＭＥＮＴＯＦＰＯＬＹＳＡＣＣＨＡＲＩＤＥＦＲＯＭＬＥＮＴＩＮＵＬＡＥＤＯＤＥＳ ＬＩＮＮａｎ１，ＺＨＯＮＧＹａｏ－ｇｕａｎｇ２，３，＊，ＷＡＮＧＳｈｕ－ｑｉｎ３，ＬＩＵＣｈａｎｇ－ｊｉａｎｇ３ （１．Ｃｏｌ ｌｅｇｅｏｆＢｉｏｌｏｇｙａｎｄＦｏｏｄＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，ＤａｌｉａｎＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＬｉｇｈｔＩｎｄｕｓｔｒｙ，Ｄａｌｉａｎ１１６０３４，Ｌｉａｏｎｉｎｇ，Ｃｈｉｎａ；２．ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＦｏｏｄＳｃｉｅｎｃｅａｎｄＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，ＳｈａｎｇｈａｉＦｉｓｈｅｒｉｅｓＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｓｈａｎｇｈａｉ２０００９０，Ｃｈｉｎａ；３．ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＦｏｏｄＳｃｉｅｎｃｅ，ＳｈｅｎｙａｎｇＡｇｒｉｃｕｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｓｈｅｎｙａｎｇ１１０１６１，Ｌｉａｏｎｉｎｇ，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｈｅｐｏｌ ｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｆｒｏｍＬｅｎｔｉｎｕｌａｅｄｏｄｅｓｉｓｏｎｅｏｆｆｕｎｇｕｓｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ．Ｉｔｉｓｒｅｇａｒｄｅｄａｓｏｎｅｏｆｔｈｅｍｏｓｔｐｒｏｍｉｓｉｎｇｒｅｓｏｕｒｃｅｓｏｆｆｕｎｃｔｉｏｎａｌｆｏｏｄａｎｄｄｒｕｇｓ．Ｉｎｔｈｉｓｐａｐｅｒ，ｉｔｉｓｒｅｖｉｅｗｅｄｔｈａｔｔｈｅｓｔｕｄｉｅｓｏｎｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ，ｉｓｏｌａｔｉｏｎａｎｄｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ，ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌａｎａｌｙｓｉｓ，ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌａｃｔｉｖｉｔｙｏｆｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｆｒｏｍＬｅｎｔｉｎｕｌａｅｄｏｄｅｓ．Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：Ｌｅｎｔｉｎｕｌａｅｄｏｄｅｓｐｏｌ ｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ；ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ；ｉｓｏｌａｔｉｏｎａｎｄｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ；ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ；ａｃｔｉｖｉｔｙ综述 １７４
绿色食品农药使用准则 1、范围。本标准规定了绿色食品生产和仓储中有害生物防治原则、农药选用、农药使用规范和绿色 食品农药残留要求。 2、规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件 凡是不注日期的引用文件,其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 ,仅注日期的版本适用于本文件。 GB 2763 GB/T 8321食品安全国家标准 （所有部分） 食品中农药最大残留限量 农药合理使用准则 GB 12475农药贮运、销售和使用的防毒规程 NY/T 391绿色食品产地环境质量 NY/T 1667（所有部分）农药登记管理术语 3、术语和定义 NY/T 1667 界定的及下列术语和定义适用于本文件。 3.1 AA 级绿色食品。产地环境质量符合NY/T 391 的要求 , 遵照绿色食品生产标准生产，生产过程中 遵循自然规律和生态学原理，协调种植业和养殖业的平衡，不使用化学合成的肥料、农药、兽药、渔药、 添加剂等物质，产品质量符合绿色食品产品标准，经专门机构许可使用绿色食品标志的产品。 3.2 A 级绿色食品。产地环境质量符合NY/T 391的要求,遵照绿色食品生产标准生产，生产过程中遵 循自然规律和生态学原理，协调种植业和养殖业的平衡，限量使用限定的化学合成生产资料，产品质 量符合绿色食品产品标准，经专门机构许可使用绿色食品标志的产品。 4、有害生物防治原则 绿色食品生产中有害生物的防治应遵循以下原则： ——以保持和优化农业生态系统为基础：建立有利于各类天敌繁衍和不利于病虫草害孳生的环境条 件，提高生物多样性，维持农业生态系统的平衡； ——优先采用农业措施：如抗病虫品种、种子种苗检疫、培育壮苗、加强栽培管理、中耕除草、耕 翻晒垡、清洁田园、轮作倒茬、间作套种等； ——尽量利用物理和生物措施：如用灯光、色彩诱杀害虫，机械捕捉害虫，释放害虫天敌，机械或 人工除草等； ——必要时合理使用低风险农药：如没有足够有效的农业、物理和生物措施，在确保人员、产品和 环境安全的前提下按照第 5、 6 章的规定，配合使用低风险的农药。 5、农药选用 5.1 所选用的农药应符合相关的法律法规，并获得国家农药登记许可。 5.2 应选择对主要防治对象有效的低风险农药品种，提倡兼治和不同作用机理农药交替使用。 5.3 农药剂型宜选用悬浮剂、微囊悬浮剂、水剂、水乳剂、微乳剂、颗粒剂、水分散粒剂和可溶性 粒剂等环境友好型剂型。 5.4AA级绿色食品生产应按照附录 A 第 A.1章的规定选用农药及其他植物保护产品。 5.5A 级绿色食品生产应按照附录有害生物防治需要时，还可适量使用第A 的规定，优先从表 A.2 章所列的农药。 A.1中选用农药。在表 A.1所列农药不能满足 6、农药使用规范 6.1 应在主要防治对象的防治适期，根据有害生物的发生特点和农药特性，选择适当的施药方式， 但不宜采用喷粉等风险较大的施药方式。 6.2 应按照农药产品标签或GB/T 8321 和 GB 12475 的规定使用农药，控制施药剂量（或浓度）、施
注射用香菇多糖类药物的研究 摘要：当今社会，治疗恶性肿瘤的辅助治疗类的药物不计其数，而天地欣（注射用香菇多糖）作为新型生物反应调节剂，因其是国内唯一可供静脉注射，并且各种各期肿瘤患者都可以使用（即适用性广），疗效显著，未发生任何明显毒副反应[1]等优点，成为肿瘤患者的优先选择。本文将从香菇多糖的药理，药效，工艺合成及优化等方面，对香菇多糖类药品进行研究，并且对其市场前景和发展方向做出了相应的预测和建议。 关键词：香菇多糖药理药效提取优化市场发展 Abstract:Nowadays, Lentimanfor Injection is becoming more and more popular with its adventages.It Is the only medicine which can be used for intravenous injection and patients with various stages of tumor can be used . Because of this, it has become the preferred choice of tumor patients. This paper will let you know more about the Lentinan. key words:LNT Pharmacy theory Extraction Optimization 1.简单介绍 天地欣是由南京绿叶思科公司生产的一种生物反应调节剂，其主要成分是从香菇的子实体中分离出来的一种葡聚糖 ,又称香菇糖、能难治、瘤能停、LC2 33。香菇糖是上世纪 60年代首先由日本学者千原吴郎从香菇子实体中经热水提取,分离纯化的一种具有抗肿瘤活性的葡聚糖 , 70年代应用于临床[2]。香菇多糖具有抗病毒、抗肿瘤、调节免疫和刺激干扰素形成等药理学活性的特点，经全国近五百家大、中型医院九年临床应用，疗效显著，未发生任何明显毒副反应，因此被广泛使用。 2.香菇多糖的药理及药效。 香菇(Lentinusedodes)属担子菌纲侧耳科(Pleurotaeeae)真菌,是世界著名食用兼药用菌之一。它含有多种有效的药用成分,尤其是含有抗病毒、抗肿瘤、调节免疫功能的香菇多糖(Lentinan简称LNT)而引起人们广泛的重视。香菇多糖是从香菇的子实体中分离得到的具β -1,6支链和β-1,3支链的β-1,3葡聚糖,相对分子质量在40～80万之间。LNT是一种良好的免疫增强剂,在中国已被广泛应用于治疗多种肿瘤。其结构式为： 大量临床前体内外实验证明,香菇多糖无直接细胞毒作用, 其主要作用是调节宿主免疫机制,激活各种免疫细胞成熟，分化和增殖，使免疫状态由低下恢复到接近于正常能力，使肿瘤细胞受抑制,进而发挥其抗肿瘤活性[4]。但在体内可通过刺激与分化机制激活巨噬细胞、T细胞和NK细胞的诱导和增强作用[3]，提高淋巴细胞转化率，促进抗体形成，从而提高免疫机制[5],与抗癌药物协同增强抗癌效果,产生抗癌作用。 具体细化，香菇多糖的机理从机制的本体来讲，分间接抑制和间接免疫调节两大药效。 2.1直接抑制 香菇多糖能够改变肿瘤细胞膜的某些成分,从而改变细胞膜的生化特性,影响细胞的新
正式名：香菇多糖汉语拼音：Xianggu 标准号：WS-291（X-256）-97 拉丁文或英文：Lentinan 主要活性成分：香菇[Lentinus edodes（Berk）sing]子实体提取、精制的多糖。按干燥品计算，含香菇多糖应不得少于%。 性状：类白色或浅黄色粉末；无味，有引湿性。在水、甲醇、乙醇或丙酮中几乎不溶；在L氢氧化钠中溶解。 比旋度取本品，置五氧化二磷干燥器中，减压干燥至恒重，精密称取适量，加L氢氧化钠溶液溶解并定量稀释制成每1ml中含10mg的溶液，依法测定（中国药典），范围在+2～+15之间。 鉴别：（1）取含量测定项下的溶液2ml，加蒽酮溶液（取蒽酮35mg置100ml量瓶中加硫酸溶解，并用硫酸稀释至刻度，即得，临用配制）5ml，振摇混匀，置水浴中加热，应显蓝绿色。 （2）取本品约10mg，滴加水少许研磨，再加水制成每1ml中含的溶液，置匀浆器中制成匀浆液，取10ml，加高碘酸钠溶液[取高碘酸钠（NaIO4）4.28g，加L硫酸溶液。溶解并稀释至1000ml]1ml，摇匀，立即取反应液4ml，以水为空白对照，照分光光度法（中国药典1995年版二部附录ⅣA），在295nm的波长处测定吸收度（A1），剩余的反应液置避光容器中。于3O℃连续搅拌6小时后，取出，测定吸收度（A2）。两次吸收度之差（A1-A2）应为～。 （3）红外光吸收图谱应与对照品的图谱一致，在89Ocm-1上附近有弱吸收峰。 检查：酸碱度取本品，加水制成%的匀浆液，依法测定（中国药典1995年版二部附录Ⅵ H），pH值应为～。 特性粘数取本品，置五氧化二磷干燥器中，减压干燥至恒重，精密称取适量，加L 氢氧化钠溶液数滴，使充分溶胀，研磨均匀，在25～30℃放置6～8小时，使完全溶解，制成每1ml中含的溶液，摇匀，依法测定（中国药典1995年版二部附录ⅥG第三法），特
微生物专题报告——食用菌多糖功能的研究概况 141201019 微生物学魏华 食用菌作为天然食药资源，营养丰富，含蛋白质、必需氨基酸、多糖、维生素等多种成分。食用菌多糖虽然含量比例仅占0.48-0.87%，却具特异的生物学功能活性。如具有抗肿瘤活性；可显著提高巨噬细胞吞噬量，刺激抗体产生，增强人体免疫功能；可降血糖、降血脂；可显著增加脑和肝脏组织中的过氧化物歧化酶SOD酶活力，抗氧化、抗衰老；保肝、抗辐射等等。 1971 年，Maeda 等从香菇中分离出一种具有抗肿瘤活性的多糖，这个研究发现影响重大，使更多的科学家开始研究真菌中的活性多糖[14]。截至目前，国内外已从食用菌中筛选出200 种有生物活性的多糖。同时，对于多糖的研究不仅只是研究其的生物学活性，更多的是利用生物学手段研究多糖分子的化学结构及结构与功能之间的关系[13]。国内对多糖的研究起步较晚，但在研究糖类的作用机理时，紧密与中医药的理论相结合，进展甚快。70 年代以来，我国在云芝、银耳、灵芝、黑木耳、裂褶菌、冬虫夏草、猴头菌和竹荪等中分离得到具有显著生理活性的、单一成分的多糖物质。目前，我国对药用多糖的研究仍多偏重于提取、分离、纯化、和研究药理活性等方面。虽然已有用于治疗癌症的商业化产品，但积累的临床资料仍很缺乏，大部分多糖产品尚处于实验阶段或仅用于保健品，还需重视新兴的糖生物学及工程学，提高研究水平。 1.食用菌多糖的种类 近年来研究报道的真菌多糖，主要有四类，葡聚糖、甘露聚糖、杂多糖、糖蛋白。 1.1葡聚糖 葡聚糖（Glucan），尤其是β(1-3)连接的葡聚糖具有多种活性[15-20]。如从金顶侧耳（Pleurotus citrinopileatus）子实体中分离的多糖，分子量为1.89×104，可能的结构是主链为β(1-3)连接的葡聚糖，支链为β(1-6)连接的葡萄糖[21]。从黑石耳（Dermatocarpon miniatum）子实体中分离的具有抗氧化功能的多糖，主要结构为α(1-4)(1-6)连接的葡聚糖，分子量为1.80×106[22]。从栓菌（Trametes suareclens）中分离的多糖分子量5.0×10 4，主链为β(1-3)-D-Glucan，支链为β(1—6)连接的葡萄糖。从斜顶菌（Clitopilus caepitosus)）多糖分子量1.32×106，主链为β(1-3)连接的葡聚糖，支链有较多的β(1-6)连接的葡聚糖链和较少的β(1-4)连接的葡聚糖链，分别连在主链的O-6 位和O-4 位。 1.2甘露聚糖
超声波法提取香菇多糖 研究背景： 香菇多糖的性质：香菇多糖以β~1，3葡聚糖为主，含有少量的木糖和甘露糖，具有抗病毒、抗肿瘤、调节免疫功能和刺激干扰素形成等功能 用途：抗肿瘤药。为化、放疗辅助药。主要用于胃癌、肺癌、乳腺癌。 生产技术状况：因为香菇多糖的用途广泛，提取比较方便，越来越多的人投身于这方面的研究，是的提取技术方面的大幅度提升。状况良好。 操作过程： 方案设计：香菇多糖的提取 香菇预先烘干→称取干香菇15克→粉碎→圆底烧瓶→200ml热水70℃→超声波发生器（水预热在60℃左右）→提取45min（中间停顿2次，每次5min）→过滤→滤渣→等滤液体积热水70℃→提取30min（中间超声波停2次，每次5min）→过滤→合并滤液→抽滤→滤液→量体积标识贮藏备用 香菇多糖的测定：1.首先去掉香菇多糖溶液中的的蛋白质：采用氯化钙法：将溶液PH 调节至8---9，加热到85℃，加入氯化钙使浓度达5% (w/v)，搅拌，冷却至室温，过滤，得脱蛋白多糖液。 2.制作标准曲线：准确吸取1mg/ ml 葡萄糖标准溶液1.0 、2.0 、 3.0 、 4.0 、 5.0ml 置于50ml 容量瓶定容，准确吸取该系列溶液各2ml ，然后加入6%苯酚1.0ml 及浓硫酸5.0ml,摇匀冷却，室温放置20分钟以后于490nm测光密度，以2.0ml水按同样显色操作为空白，横坐标为多糖微克数，纵坐标为光密度值，得标准曲线。 3. 样品的测定：取去完蛋白的样液2ml，然后加入6%苯酚1.0ml及浓硫酸5.0ml,摇匀冷却，室温放置20分钟以后于490nm测光密度。将吸光度控制在0.2-0.8 人员分工：我们分成两组来完成实验，因为有两组待测夜要进行测定。然后标准溶液是由第一大组完成。由于操作比较简单，我们就一起完成。1人对溶液进行去蛋白，2人制作待测液，1人对待测液进行测定，并记录数据。 实验现象：配置待测液时，加入浓硫酸后溶液变成橙黄色。从而可来额定吸光度。（附照片）总结分析
临床合理用药规范 （版本号：HLYY00） 为进一步加强合理用药管理，建立统一、规范的药物临床使用管理机制，推进临床合理用药，保障医疗质量和医疗安全，制定本细则。 一、抗生素使用原则 1. 诊断为细菌性感染者，方有指征应用抗菌药物：根据患者的症状、体征及血、尿常规等实验室检查结果，初步诊断为细菌性感染者以及经病原检查确诊为细菌性感染者方有指征应用抗菌药物；由真菌、结核分枝杆菌、非结核分枝杆菌、支原体、衣原体、螺旋体、立克次体及部分原虫等病原微生物所致的感染亦有指征应用抗菌药物。缺乏细菌及上述病原微生物感染的证据，诊断不能成立者，以及病毒性感染者，均无指征应用抗菌药物。凡怀疑细菌感染者，必须采集标本作细菌培养且应力争在使用抗菌药物前采集标本作细菌培养 2. 联合使用抗菌药物指征：病因未明的严重感染；单一药物不能控制的严重感染 (败血症、细菌性心内膜炎、化脓性脑膜炎)；多种细菌引起的混合感染 (需氧菌+厌氧菌，G+球菌+G-杆菌)；二重感染 (细菌+真菌)；需长期用药且细菌易产生耐药的感染 (结核病)；以两联为宜，且相互间具协同或相加作用。未经全院讨论，一律不允许使用三联抗菌药物。 3. I类手术围手术期抗菌药物预防应用：对具有预防使用抗菌药物指征的常见手术，要参照《常见手术预防用抗菌药物表》（见附件1）选择抗菌药物。以下手术原则上不允许预防使用抗菌药物：甲
状腺、乳腺、腹股沟疝、关节镜检查、颈动脉内膜剥脱、颅骨肿物切除、白内障手术、冠脉造影等血管介入诊断手术。I类手术预防使用抗菌药物给药方法及时间：在术前～2小时内给药，如果手术时间超过3小时，或失血量大(>1500 ml)，可手术中给予第2剂。总的预防用药时间不超过24小时，个别情况可延长至48小时。 4. 一般感染患者用药72小时，重症感染48小时后，根据临床反应或临床微生物检查结果，决定是否更换所用抗菌药物。感染患者待症状、体征及实验室检查明显好转或恢复正常后可再继续用药3天。 5. 氟喹诺酮类药物的经验性治疗可用于肠道感染、社区获得性呼吸道感染和社区获得性泌尿系统感染。其他感染性疾病治疗要参照致病菌药敏试验结果选用该类药物。 6. 抗生素品种见“常州市中医医院抗菌药物临床应用分级管理目录（2015版）”。 7．常见手术预防用抗菌药物见附件1。 二、神经（含脑细胞、脊髓）营养药、脑细胞保护药、改善颅内血管循环药物（静脉用或肌注用）使用原则 第一诊断为脑血管病或脑神经病变的患者同时使用不超过两种。第一诊断为其他疾病但伴随有脑血管病或神经病变的患者，脊髓及周围神经损伤患者不得同时使用两种或两种以上，必要时结合口服西药、中药汤剂进行调整。超出以上范围使用的需要有临床诊治指南Ⅰ级推荐或循证医学A级证据支持，否则视为不合理用药。
粗多糖含量测定方法学研究资料 一、仪器与试药 (1) 二、方法的研究 (2) 1.检测波长的测定 (2) 2.样品及对照制备方法 (2) 三、方法学验证 (3) 1.线性 (3) 2.精密度实验 (4) 3.稳定性实验 (4) 4.重复性试验 (5) 5.中间精密度实验 (5) 6.准确度试验 (6)
芪参颗粒粗多糖含量测定方法起草说明 标志性成分粗多糖含量测定的方法来源于《保健食品功效成分检测方法》白鸿主编（中国中医药出版社)的第二法，该方法的原理是：多糖经乙醇沉淀分离后，去除其他可溶性糖及杂质的干扰，糖与硫酸在沸水浴中加热脱水生成羟甲基呋喃甲醛（羟甲基呋喃糠醛），再与蒽酮缩合成蓝绿色化合物，其显色强度与溶液中糖的浓度成正比，在625nm波长下比色测定。 主要研究资料如下： 一、仪器与试药 1、仪器 (1) 离心机（湘南湘仪实验室仪器开发有限公司，型号TD25-WS）； (2) 离心管：50ml； (3) 水浴锅（上海精宏实验设备有限公司，型号 DK-S26）； (4) 旋涡混合器（DioCote，SA8）； (5) SHIMADZU UV-1800 紫外可见光分光光度计； (6) JB760-68 石英比色皿（宜兴市伟鑫仪器有限公司）； (7) TU-1901 双光束紫外可见光分光光度计（北京普析通用仪器有限责任公司）； 2、试药 (1) 葡萄糖：广州化学试剂厂，分析纯，批号为-1； (2) 无水乙醇：西陇化学股份有限公司，分析纯，批号为160802 1； (3) 蒽酮：国药集团化学试剂有限公司，分析纯，批号为； (4) 硫酸：广州化学试剂厂，分析纯，批号为-1； (5) 葡萄糖标准液：标准称取干燥恒重的分析纯级葡萄糖，加水溶解，并定容至50ml，此溶液1ml含10mg葡萄糖，用前稀释100倍为使用液（ml）。 (6) %蒽酮硫酸溶液（W/V）：准确称取蒽酮置于烧杯中，缓缓加入100ml 80%硫酸溶解，溶解后呈黄色透明溶液。现用现配。 3、试样
第25卷第5期浙江林业科技Vol. 25 No.5 2 0 0 5年9月JOUR. OF ZHEJIANG FOR. SCI. & TECH. Sep., 2 0 0 5 文章编号：1001-3776（2005）05-0049-05 食用菌多糖研究进展 王丽霞1, 2，杜德清2 （1. 中南林学院，湖南长沙 410004；2.丽水职业技术学院，浙江丽水 323000） 摘要：对食用菌多糖的提取、分离纯化、定性定量分析、活性研究和临床应用等研究进展进行了综述，指出了目前存在的不同食用菌多糖较难鉴别、真菌多糖提取纯化工艺需进一步加强、食用菌多糖结构和功能之间的关系问题，提出真菌多糖的提取工艺和构效关系是今后研究的主要方向。 关键词：食用菌；多糖；免疫调节；生理活性；提取纯化技术 中图分类号：S646 文献标识码：A 食用真菌是人类实践活动中最早认识和利用的一类微生物，具有种类繁多、世代短、生物量大、易培养、分布广和营养成分丰富等特点，国内外学者对其营养成分进行了广泛的研究[1]，近年来人们越来越认识到食用真菌中独特的多糖功能成分。据杨革报道[2]，真菌的多糖含量在0.48% ~ 0.87%。食用菌多糖是一种很好的免疫调节增强剂，可从根本上提高人体免疫功能，起到扶正固本、强身保健的作用。20世纪80年代以来，这方面的研究利用进展更为迅速，且正朝抗癌、增寿、强力、益智、美容以及提高免疫力和防止衰老等方向深化。现代医学研究发现，食用菌中能显著增强癌症患者抵抗力的生理活性物质即为食用菌多糖[3]。食用菌多糖的生理功能、化学结构以及构效关系正成为多糖研究的前沿阵地，取得了很大进展，而多糖分离、纯化和结构测定的方法也在不断发展和完善[4]。为此笔者对食用菌多糖的研究现状进行了综述，为食用菌多糖的进一步开发利用提供参考。 1 食用菌多糖提取工艺研究进展 不同食用真菌多糖的鉴别较为困难，这是因为即使同一属真菌中的不同种真菌所产多糖也不一致（包括多糖种类、多糖结构、分子量大小等）。目前也没有一份较为可靠的不同真菌多糖的图谱（例如能表明结构差别的红外图谱等）。从纯种发酵液（即只用一种已知真菌菌种发酵所得液体）或从已知真菌子实体中提取的多糖可以进行结构和定性、定量分析[5]。 食用菌菌丝多糖分胞外多糖和胞内多糖。对于提取深层发酵液中的食用菌多糖，常规提取一般是首先将菌丝从发酵液中分离出来，打浆处理，然后用热水提取法或其他方法从菌丝中提取胞内多糖，从滤液中提取胞外多糖，一般是把滤液先过滤，再浓缩，最后用有机溶剂沉淀而得到。从多糖水溶液中提取多糖，首先可用透析或超滤等方法去掉小分子物质（单糖、寡糖、氨基酸、短肽、无机盐等），然后设法去掉水分（各种合适的干燥方法、超滤以及有机溶剂沉淀法等）[6]。 根据多糖类物质易溶于热水而不溶于高浓度酒精的原理，食用菌多糖的提取通常采用水煮醇沉（热水提取及酒精沉淀法）的常规方法。其提取工艺流程如图1。 食用菌多糖除常规的水提法外还有一些其它提取方式。据王竟等人报道[7]，担子菌的发酵产物中一些具有生理活性的聚合物（主要为多糖类），其分子量一般在1 000 d以上，对于这些发酵多聚物的提取他们采用了超
香菇香菇多糖发酵生产分离提取生理活性 摘要:香菇是一种营养丰富的食、药用真菌香菇多糖因其具有如降血脂、抗血栓、抗血 小板聚集及抗肿瘤等生理活性而受到广泛的关注本论文通过香菇深层发酵来生产具有 生物活性的多糖为目的，研究了香菇多糖的发酵生产、提取、分离纯化及结构的初步分 析研究了营养性因子对香菇深层发酵的影响，结果表明葡萄糖、玉米粉、豆饼粉有利于 香菇菌体生长和胞外多糖的形成进一步的正交优化实验，确定了香菇深层发酵培养基为 葡萄糖20gL，豆饼粉60目20gL，KH2PO42gL，无机盐MgSO4·7H2O0.5gL优化发 酵工艺条件为初始pH5.5自然、接种量10％、种龄6d，温度28℃、250mL摇瓶装液 量80mL的条件下，香菇深层发酵结果最佳，在此基础上进行摇瓶发酵曲线测定，确定 了香菇适宜发酵周期为144h，胞外粗多糖含量最高可达542mg100mL，菌体生物量达 8.41mg100mL香菇发酵液胞外多糖最佳提取工艺为75％VV的乙醇浓度沉淀，温度为4℃，溶液pH值7.0时胞外粗多糖得率为670mg100mL发酵清液香菇发酵液胞内多糖 最佳提取工艺为组织捣碎法破壁处理、提取温度90℃、料水比14、提取时间4h、提 取次数2次，胞内多糖的最高产率为14.73mg50g湿菌丝体香菇胞外粗多糖经活性炭 脱色，酶法和三氯乙酸正丁醇法脱蛋白，经DEAE-纤维素柱进行组别分离和 Superdex200进行分级分离，经透析脱盐冷冻干燥得到香菇多糖纯品含量最多的胞外 多糖级分LEN1经红外光谱照射，证明其有多糖的特征吸收峰，是α-型吡喃环多糖经 紫外光谱扫描证明其不含蛋白质经HPLC测定，其分子量为6.5×105，是处于这一分 子量范围的单一成分，把提取出的香菇多糖应用于果蔬复合饮料中，无沉淀产生，证明 香菇多糖可用于饮料生产 标题:香菇香菇多糖发酵生产分离提取生理活性 专业:食品科学 学位:硕士 单位:山东轻工业学院@ 关键词:香菇香菇多糖发酵生产分离提取生理活性 论文时间:2007 分类:TS201.5 S646.12 导师:王成忠 语种:中文文摘 香菇多糖提取的原理是什么？ 多糖溶于热水,不溶于60%以上乙醇,也不溶于氯仿正丁醇.所以用热水提取,乙醇沉淀除去部分醇溶性杂质;因为热水也可以将蛋白类物质提取出来,所以用氯仿正丁醇萃取除去提取液中的蛋白. 香菇子实体粉碎,低温烘干,准确称量,乙醚回流脱脂,乙醚提取物回收处理,香菇子实体粉末加入20倍量水,温度50 ℃,反应时间为80 min提取香菇多糖粗品,活性炭脱色[ 5 ],离心除去沉淀,上清液中加入95%乙醇,使乙醇终体积分数为75% ,离心取沉淀即得香菇多糖粗品。 香菇多糖粗品水溶解后过DEAE2 52层析柱(cm × 60 cm,柱高52 cm) ,DEAE2 52层析柱先用pH518的磷酸盐缓冲液平衡,样品溶于此缓冲液后上柱。
香菇中糖类物质离与测定
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香菇中糖类物质的分离与测定 摘要：本实验采用热水浸提和乙醇醇沉的方法提取香菇多糖（Lentinan，LNT），利用正交法得出最佳提取粗多糖的方案，得到的粗多糖回收率为14.05﹪，再对得到的粗多糖进行定性、定量分析。用苯酚—硫酸法测定已提取出的粗多糖中单寡糖与多糖的含量为35.9%；经过薄层层析和纸层析法分析单糖的组成，其中组成多糖的单糖多属于葡萄糖和阿拉伯糖；用 Sepharsose CL—6B柱层析法测定多糖的相对分子量约为5597.58道尔顿。气象色谱分析单糖含的结果是香菇多糖中的单糖种类有半乳糖、葡萄糖、阿拉伯糖、岩藻糖等，其中含量较多的半乳糖和葡萄糖。 关键字：香菇多糖回收率含量组成相对分子量 Separation and Determination of carbohydrates in Lentinus edodes Abstract：This experiment extracts of lentinan (Lentinan LNT) by using hot water extraction and ethanol alcohol precipitation method. The orthogonal method to get the optimum extraction of polysaccharides is the best program, resulting polysaccharides recovery of 14.05%, and then to get crude polysaccharide qualitative and quantitative analysis. By using Phenol-sulfuric acid method, extracted polysaccharides single oligosaccharides and polysaccharides content was 35.9%; TLC and paper chromatography analysis monosaccharide composition, the monosaccharide composes mostly of glucose and arabinose; Relative molecular weight of polysaccharide determined by Sepharsose CL-6B column chromatography is about 5597.58 daltons. The results of gas chromatographic analysis of a monosaccharide is galactose, glucose, arabinose, fucose, sugar, and other types of monosaccharides in the lentinan. galactose and glucose are much more among them. Key words： Lentinan; Recoveries; Content; Composition; Relative molecular weight 0 引言： 糖类化合物是中药的重要成分，随着现代生物化学与分子生物学的不断发展与进步，人们对糖的了解越来越多。而糖生物学研究对揭示生命本质，实现中药现代化，深入开发中药资源有着重要的意义。但是,目前多糖的研究主要以陆生植物为主, 有些源于名贵中药,这不
香菇多糖的结构分析和构效关系研究进展 Review of lentinan on the structure analysis and structure-activity relationship 安啸陆珏婕杜琪珍 AN Xiao LU Jue-Jie DU Qi-Zhen （浙江工商大学食品与生物工程研究所,浙江杭州310035）（Institute of Food and Biological Engineering，Zhejiang Gongshang University,Hangzhou,Zhejiang,310035,China） 摘要：香菇多糖作为一种抗癌的生物活性物质，近年来日益受到人们的重视。本文系统地介绍了香菇多糖的化学结构及空间构象的分析方法，综述了香菇多糖的构效关系，以期为香菇多糖的进一步研究开发提供参考。 关键词：香菇多糖；结构分析；构效关系 Abstract:Lentinan was worldwidely recognized as a biological active substance possessing anti-tumor activity.The methods of structure analysis and structure-activity relationship of Lentinan were reviewed in the present paper which may provide the readers the knowledge for further study of Lentinan. Keywords:Lentinan；Structure analysis；Structure-activity relationship 香菇（Lentius edodes）为担子菌纲伞形科真菌，是世界上第二大食用菌[1]。香菇多糖是香菇中最重要的一种生物活性物质，作为一种免疫促进剂，在20世纪60年代已引起人们的广泛兴趣。现代研究表明：香菇多糖具有抗病毒、抗肿瘤、调节免疫力、降血糖、抗氧化等功能[2，3]。与传统中草药相比，香菇多糖通过增强机体免疫力间接杀死肿瘤细胞，因而毒副作用极小[4，5]。在临床上香菇多糖主要用于抑制和防止胃癌、鼻咽癌、直肠癌、乳腺癌和慢性粒细胞病的术后微转移[6～9]。多糖生物活性的发挥与其结构有关,化学基团的引入也常常会增强多糖的活性或使多糖产生新的活性,因而对多糖结构进行适当修饰是多糖领域研究的重点之一[10，11]。有关香菇多糖的研究，特别是结构方面的研究已引起了国内外学者的高度关注，并有望成为多糖领域的研究热点。现将香菇多糖结构分析和构效
香菇( lentinus edodes) 又称香蕈、冬菇，世界菇类中产量排名第二，在我国的菌类历史中香菇占据很高地位。蘑菇富含肉质，美味香醇，是食用兼药用菌之一，香菇自古以来就被认为是一种可以让人延年益寿的珍品，其具有益气不饥，化痰理气之功效。经现代医学研究人员证明，香菇具有很强的药理活性和营养价值［1］。近年来随着现代分子生物学迅猛发展，人们逐渐关注到多糖的生物活性功能，如多糖与体内免疫调节密切相关、抗肿瘤功效、抑制病毒细菌的能力、延缓衰老的作用。香菇多糖( lentinan，LNT) 是从真菌香菇中纯化提取出的β－1，3 －葡聚糖，是一种宿主免疫促进剂，其具有抗病毒、调节免疫、抗肿瘤以及刺激干扰素形成等多项功能［2］。对真菌多糖的研究可追溯到20 世纪50 年代，1969 年日本学者Chihara 等在香菇中首次发现并成功提取出香菇多糖，后续大量学者对香菇多糖逐步深入的研究，证明其作为一种良好的免疫促进剂，可在体内发挥重要的生物活性作用［3］，自此之后人们对于香菇多糖药理和临床方面的实验研究逐渐增多，目前已经开发出多种以香菇多糖为主的药物［4］。本研究笔者将整理近年来关于香菇多糖生物活性及应用的研究文献，从香菇多糖的免疫调节、抗肿瘤、抗感染、抗抑郁、抗疲劳、抗氧化和抗衰老、肝损伤的保护等作用对其研究进展进行概括和综述，为今后的研发和应用提供参考。1 香菇多糖对免疫调节功能的影响香菇多糖的免疫调节能力已被学术界多方面证实，香菇多糖对T 细胞可以起到调节作用，并且可以刺激T 细胞激活，使其增殖分化，导致一系列免疫反应应答作用［5］，香菇多糖的免疫调节作用不是直接攻击病原菌，而是通过刺激相关免疫细胞的成熟、分化和增殖，从而达到改善宿主机体平衡，进而改善宿主细胞对淋巴因子、激素等生理活性因子刺激的反应［6］。李浩烜［7］建立了免疫低下小鼠迟发型超敏反应( DTH) 模型，给予小鼠香菇多糖刺激进行实验。研究表明，香菇多糖组中颈部淋巴结( CLN) 和派氏结( PPs) 中的T 细胞比例和活化的T 细胞均比模型组有提高，血清中的IFN－γ 含量比模型组有所上升，发现香菇多糖主要通过影响IFN－γ 的释放来对T 细胞进行调控，从而影响体液免疫，进而对整个免疫系统进行调节。虽然香菇多糖主要以宿主介导T 细胞的细胞免疫发挥免疫调节作用，但在一些动物实验中发现香菇多糖也有促进 B 淋巴细胞合成IgG、IgM 的功能，并且可以提高免疫力低下组IgA、C3 的水平［8］。刘蓉蓉［9］选用健康的罗曼蛋公鸡为临床动物试验对象进行实验，研究发现香菇多糖在高、中、低剂量组均能显著的提高血清抗体效价、显著刺激免疫细胞增殖且对免疫器官起到促进发育的作用，提示香菇多糖有较好的增强免疫作用。香菇多糖还可以使自然杀伤细胞( NK) 激活，使其发挥作用，从而调节体内免疫系统，但香菇多糖只能在体内激活NK 细胞，在体外香菇多糖对NK 细胞没有激活作用。颜爱等［10］研究表明，香菇多糖和黄芪多糖均可以恢复被抑制小鼠NK 细胞活性( P＜0．05) ，且香菇多糖与黄芪多糖相比较，香菇多糖对小鼠自然杀伤细胞的恢复能力要更好，差异具有统计学意义( P＜0．01) 。2 香菇多糖对抗肿瘤作用的影响香菇多糖通过对体内免疫系统调节具有抗肿瘤作用，其抗肿瘤机制是由刺激的T 细胞和其他免疫细胞介导，这些细胞会引起一系列的细胞反应，例如介导细胞因子和一氧化氮的表达，还可以通过结合其他具有强抗肿瘤活性的缀合物分子如蛋白质和多肽，使香菇多糖表现出抗肿瘤功能［11］。1957 年Byerrum 等［12］首次报道蘑菇多糖具有抗肿瘤特性。近年来，国内不乏大量研究报道香菇多糖抗肿瘤的特性，唐洁等［13］利用联合治疗方案治疗了60 例中晚期胃肠道肿瘤患者，结果发现香菇多糖联合化疗治疗能显著改善患者的免疫功能和临床疗效，也有改善生活质量并减轻不良反应的效果。高琰妍［14］将130 例肺癌患者分为两组进行香菇多糖联合化疗治疗实验，结果表明联合治疗后的患者T 细胞亚群和NK 细胞的活性明显高于对照组。另有研究表明，香菇多糖可通过诱导肿瘤细胞凋亡、抑制肿瘤细胞的生殖从而达到抗肿瘤目的［15］。南君等［16］选取了100 例原发性肝癌患者为实验对象，实验结果发现配合香菇多糖观察组肝功能受损程度比对照组小，提示香菇多糖有保护肝脏的作用，且观