猪干扰素基因在腺病毒的表达及应用 崔尚金 （中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病 研究室, 黑龙江哈尔滨 150001） 多年来，疫苗免疫接种一直是一种预防大范围传染病爆发的最为有效的措施之一。目前被广泛用来进行免疫控制传染病以及自身免疫病和癌症等疾病的治疗。免疫接种的优点是促使先天性免疫细胞产生免疫记忆细胞，从而使机体针对特定的病原体产生持久的免疫保护。疫苗接种不仅可以通过注射灭活苗或弱毒苗实现，还可以通过注射亚单位疫苗(如纯化的类毒素)实现，也可以由其它方式将抗原呈递给免疫系统。 尽管疫苗接种非常成功，但免疫失败也时常出现（例如猪瘟疫苗），而且屡见不鲜，具体原因尚未明确。有些疫苗能够提供短期保护，不能使机体产生免疫记忆；有些疫苗能够使机体产生免疫记忆，但却不能使机体针对抗原产生有效的免疫保护。强烈的免疫反应并不不一定保证形成保护性免疫。例如，呼吸道的感染可以导致保护性免疫失效，而且现在形成了很多综合症，如猪圆环病毒、猪呼吸与繁殖综合症病毒等都是以综合征来危害动物机体。从疫苗开发的角度来看，在没有保护性免疫的干扰下，产生稳固的免疫应答的感染是一个非常有前景的研究领域。在免疫学领域，一些新的、功能强大的研究工具已经开始广泛使用，这主要归功于在宿主与病原体相互作用方面得到了新的见解，并进一步理解了以细胞和分子为基础的保护性免疫。保护性免疫应答不仅仅是抗原特异性的结果，更是体内环境各种因素、各种因子相互作用、相互影响的综合结果。因此，疫苗开发的重点应当从目前只考虑抗原特异性向抗原特异性和体内环境综合考虑转变，这必定是今后发展的新方向，也是目前大家对自然免疫、天然免疫研究非常火热的最重要的原因之一。新知识和新技术的获得必将使研究人员按照新的方式改造疫苗和体内环境综合考虑来对抗传染病，从而研制更为有效、更容易形成具有选择性保护和持久性的免疫记忆的新的免疫疫苗及相关产品。其中，干扰素作为研究的非常彻底的一种细胞因子，起到了很好的疗效，本文主要介绍猪I型干扰素。 1957 年 Isaac 和 Lindenman 进行鸡胚细胞流感病毒感染试验中首次发现一类能干扰和抑制病毒复制的可溶性细胞分泌物，故取名为干扰素（ interferon Wheelock 与 Green 分别于 1965 年和 1969 年相继发现免疫活性细胞经丝裂原或抗原刺激后，发生一类对酸敏感的干扰素，称为免疫干扰素。目前依据干扰素对酸的敏感性通常分为 I 型干扰素（酸敏感型）和 II 型干扰素（耐酸型）两类。几乎所有脊椎动物均可产生这两类干扰素，根据发生干扰素细胞种类不同，I 型干扰素至今已发现 INF- α、β、ω、κ、τ、δ等 6 种类型，而 II 型干扰素迄今为止仅发现 INF- γ一种（ Domeika, 2003 由于干扰素具广谱、高效抗病毒功能，及其对免疫系统起关键调节作用，因此成为当今免疫学、遗传学和分子生物学研究最为活跃的领域之一。 1、细胞因子及干扰素概念 细胞因子是由机体各种细胞合成分泌的具有多种生理活性和参与病理反应的小分子可溶性蛋白质。
干扰素抗病毒研究进展 摘要: 干扰素（IFN）是一种广谱感病毒剂，并不直接杀伤或抑制病毒，而主要是通过细胞表面受体作用使细胞产生抗病毒蛋白，从而抑制乙肝病毒的复制；同时还可增强自然杀伤细胞（NK细胞）、巨噬细胞和T淋巴细胞的活力，从而起到免疫调节作用，并增强抗病毒能力干扰素是一组具有多种功能的活性蛋白质（主要是糖蛋白），是一种由单核细胞和淋巴细胞产生的细胞因子。它们在同种细胞上具有广谱的抗病毒、影响细胞生长，以及分化、调节免疫功能等多种生物活性 IFN具有毒副作用小，高剂量仅有一般生物制剂的常见反应，抗原性弱，可反复应用等优点。随着IFN基因工程产品在临床上的推广应用，将大大提高病毒性疾病的治疗效果，具有广阔的应用。 关键词：干扰素；抗病毒活性；抗肿瘤免疫;生物学特性； 1 干扰素的分类和生物学活性 IFN蛋白家族基于它们的基因序列、染色体定位和受体特异性[2]分为3型，即Ⅰ型、Ⅱ型和Ⅲ型干扰素，Ⅰ型包括IFN-α、β、ω、ε、κ [3]、δ、τ、δ[4]等，但IFN-δ、τ、δ只在猪、牛、反刍动物和鼠体内检测到，在哺乳动物中IFN-α/β是多基因家族，IFN-α包括25个以上的亚型[5]。Ⅱ型干扰素由单基因家族IFN-γ构成，又称为免疫干扰素。Ⅲ型干扰素是一种新发现的细胞因子，与Ⅰ型干扰素关系密切，称为IFN-λ[6-7]，研究认为Ⅲ型干扰素有特殊的生理学功能[8]。干扰素本身并非直接抗病毒物质，其抗病毒作用体现在多方面。IFN对于病毒复制的任何阶段都具有靶向作用，包括穿入、转录、RNA稳定性、翻译起始、成熟、装配和释放过程。 2 干扰素的研究意义
近年来，国际反病毒和抗癌研究领域，在自然免疫调节和抗病毒物质，作为一种天然抗病毒蛋白质干扰素人类开发更多的关注。干扰素将成为一个21世纪的反病毒，防癌，其中最广泛使用的药物之一。α-干扰素治疗慢性乙型肝炎是目前抗病毒药物的第一选择是，对肝炎的药物治疗总有效率约为20％-30％。慢性肝炎的药物干扰素代表发展方向。它是唯一的C型肝炎病毒的药物有效的治疗，它是最广泛的肿瘤细胞因子的临床治疗。病毒性皮肤病，慢性宫颈炎，呼吸道病毒感染和妇科疾病，丘疹皮疹，造血系统恶性肿瘤，淋巴瘤，其主要标志。β-干扰素治疗多发性硬化症复发静脉使用。主要γ-干扰素治疗类风湿关节炎。γ-干扰素的免疫功能比α，β-干扰素强1000倍，不仅能增强机体免疫功能，自身免疫性疾病，还可以调整过渡到接近正常水平的免疫力。干扰素还用于生殖器衣原体感染，膀胱癌，生殖器疣，皮肤疾病，血液病，艾滋病相关综合征的治疗。世界上许多国家已批准生产和使用基因重组干扰素制剂为许多疾病的治疗。治疗后的临床应用表明，通常不严重的副作用，干扰素治疗，临床适应症正在不断发展扩大了干扰素的新用途 3.干扰素的生物学特性 研究表明，IFN生物学活性的发挥有赖于诱导的多种效应蛋白质的合成，其并不直接作为反应作用因子对其效应分子的基因组进行调控，而是通过受体介导的信号转导系统引发一系列特定的生化反应，最终达到效应分子表达的目的，而且IFN具有很强的活性，其活性呈多样性。 3.1抗病毒作用 IFN 、IFN—B、IFN 均有抗病毒作用一。动物试验证明，抗病毒活性远较I型低，和IFN—p能相互加强抗病毒作用。干扰素抗病毒具有广谱性，但它对细胞抗病毒作用是间接的，而且是非特异性的。当干扰素与细胞表面的干扰素受体 结合后，可诱导细胞内产生有酶活性的抗病毒蛋白(AndviralProtein，AVP)。已知的AVP至少有三种：蛋白激酶，磷酸二脂酶和2～5腺酸合成酶，前两种能破坏
世界卫生日男科活动 世界卫生日与男科有什么关系？他们举办了什么样的活动？下面是我整理的关于世界卫生日男科活动，希望大家喜欢，谢谢。 世界卫生日男科活动内容： [20xx年4月7日，由吉首市健康教育所开展的第62个世界卫生日"抵御耐药性：今天不采取行动，明天就无药可用"为主题的宣传活动，吉首曙光男科医院与州各大医院医护人员纷纷走向街头，向全州人民宣传不要乱服用含抗生素的药物。 早上10点，活动现场吸引了很多市民驻足观看，医护人员正在耐心的为市民讲解使用抗生素药品的弊端。 吉首曙光男科医院专家们耐心地为市民讲解使用抗生素药品的危害，还为前来咨询的市民免费测量血压，提供现场健康咨询，并派发健康宣传册，推广全新的高科技绿色诊疗新理念，以唤起社会对绿色诊疗的广泛关注。 吉首曙光男科医院负责人表示，目前，社会上胡乱使用抗生素药品的现场很严重，这应该要引起我们的足够重视。吉首曙光男科医院一直致力于社会公益事业，为建设和谐吉首、为湘西地区健康文明建设添砖加瓦，作为湘西首家专业男科医院，吉首曙光男科医院率先倡导绿色诊疗新理念，开创了湘西州泌尿科的新格局。医院不断提高专业技术水平，引进了国际前沿的诊疗技
术和尖端的医疗设备，拥有：HA智源肽前列腺治疗系统、ZRL-II-A 前列腺腔道介入系统、SWED性功能康复治疗仪、SW阴茎多普勒检测系统、多普勒彩色超声检测系统、HW温控内场治疗系统、ZD螺旋磁疗系统、NK半导体治疗仪、前列腺场效消融治疗系统、电磁式体外碎石系统等，在治疗前列腺疾病、性功能障碍(ED)、生殖感染、生殖整形、泌尿结石、男性不育等多个领域均走在了湘西的前列，力争与国际接轨，开创国内专科医院绿色诊疗新格局。 世界卫生日意义 呼吁各国高度关注新型和传统疾病以及大规模突发性公 共卫生危机给人类带来的灾难，增加卫生事业投资，确保子孙后代能够生活在安全、发展、繁荣的社会中，为人类构建安全的未来。 确定世界卫生日的宗旨是希望引起世界各国对卫生问题 的重视，并动员世界各国人民普遍关心和改善当前的卫生状况，提高人类健康水平。世界卫生日期间，包括中国在内的世界卫生组织各会员国都举行庆祝活动，推广和普及有关健康知识，提高人民健康水平。 世界卫生日来历 1946年7月22日，联合国经社理事会在纽约举行了一次国际卫生大会，60多个国家的代表共同签署了《世界卫生组织宪章》，《世界卫生组织宪章》于1948年4月7日生效。为纪念
胸腺肽是动物胸腺产生的一种蛋白质和多肽激素，在我国临床应用已有20多年的历史，但由于各种制剂的生产工艺，标准不同，产品质量及临床疗效也有较大的差异。普通胸腺肽属于生化制品，是健康小牛或猪等动物的胸腺组织提取物。该药是一种生物反应调节因子，能促进淋巴细胞成熟，调节和增强人体免疫机制，在临床上具有抗衰老、抗病毒复制、抗肿瘤细胞分化的作用。胸腺肽的主要剂型有：冻干粉针剂、注射液、肠溶片、肠溶胶囊和胸腺肽氯化钠注射液5种，生产厂家已超过百余家，国家食品药品监督管理局（SFDA）已核准下发了389个注射剂生产批文，有8家企业生产口服制剂。但由于胸腺肽有效成分不明确、含量低、含致敏大分子蛋白，不符合WHO对免疫调节剂的五项标准（1、化学成分明确；2、易于降解；3、刺激适中；4、不致癌，致畸变；5、无累积毒性，无不良反应及后继作用），因而疗效低、安全性差，不良反应尤其是严重过敏反应频繁发生，由此引发了国家药品不良反应监测中心对该类药品进行通报。 在对胸腺素类药物的研制中，科学家通过化学合成的方法制造出了胸腺生成素Ⅱ(ThymopoietinⅡ)，并在此基础上进一步开发了胸腺五肽。1985年，胸腺五肽在意大利以商品名“Timunox”上市。胸腺五肽（TP-5）是胸腺生成素Ⅱ的有效成分，由精氨酸、赖氨酸、天门冬氨酸、缬氨酸、酪氨酸5种氨基酸组成，与胸腺肽有着相同的生理功能和药效，其特点是药物纯度高、含量稳定(为激活T-淋巴细胞的最佳剂量)、安全可靠，且不含有大分子蛋白质，其有效成分为动物胸腺提取物的84～102倍，TP-5具有使血液中超氧化物歧化酶(SOD)含量升高，超氧负离子自由基含量显著下降的功能。 胸腺五肽在中国的发展，经历了一个漫长的过程。1997年，我国第一个自主研发合成多肽类药物的双向免疫调节剂即胸腺五肽（商品名：和信），由海南中和药业股份有限公司研制成功率先在国内上市，一度曾经为2003年抗击SARS发挥过重大的作用。随后，四川源基制药、北京双鹭药业、丹东医创药业等企业的产品也获准生产。截至2006年6月，SFDA 已核准36家企业生产胸腺五肽原料药及其注射剂。在临床推广过程中，胸腺五肽由于纯度高、质量稳定、疗效确切、安全可靠而受到广大医患的欢迎，使用前无需皮试。 胸腺肽α1(Tα1)是胸腺肽中的高端产品，该药物是由胸腺素组分5(TF-5)中分离纯化分离出的一种小分子生物活性多肽，其含量约占TF-5的0.6%，具有较高的免疫增强活性，同时还具有刺激血管内皮细胞迁移、促进血管生成和伤口愈合等作用，已用于乙型肝炎、丙型肝炎、恶性肿瘤以及免疫缺陷疾病等的临床治疗和研究。 在上世纪末，意大利赛生公司的产品“日达仙”已进入我国市场，单独使用或与抗病毒药物和抗癌症药物联用具有较好疗效，而且在国外也已在30多个国家获得批准上市。2002年底，SFDA批准四川源基制药有限公司生产原料药、成都地奥九泓制药厂生产1.6mg冻干粉针剂。随后，海南双成药业、海南中和药业分别获得了SFDA颁发的原料药及注射剂生产批件。临床应用证明胸腺肽α1安全性好，几乎无不良反应，使用前无需皮试。 而普通胸腺肽制剂报道出现过敏性休克、皮疹、发热、寒战、畏寒，胸闷、心悸、呼吸困难、头痛、紫绀等多项不良反应，使用前需做皮内敏感试验，在皮试阴性时，仍需加强临床用药监护。故胸腺五肽、胸腺肽α1与一般的胸腺肽注射剂有着本质上的区别。
说明书 XXXXXXXX 装置 技术领域 本发明是一种涉及 XX 配件XX 技术的设备，特别是一种 XXXXXXXX 机械装置。可用 于运输汽车、大小客车、船舶等 XX 中各种规格型号圆形 XXXX 的清洁维护XX 。 背景技术 对于使用XX 各种型号的圆筒形 纸制品，目前在对 气源的各种XX ，为了能够延长 XX 使用寿命，减少不必要磨损，采用了 XXXX 作为各种不同型号 XX 的重要部件，由于XX 的XXXX 大部分是 XXXX 进行清洁维护XX 时，存在的不足有： 1、 现有XXXXXXXXXXXXXX 车间，往往采用人工 XX 的方法对 XXXX 进行XX ，XX 操作工往往利用一根充气皮管上的带有压缩 XX 的XX 对准圆筒形XXXX 表面冲击来清除 表面附着的灰 尘，不仅污染环境，严重影响工人身体的呼吸道健康，且充气皮管 XX 的XX 压力不易掌控，当超过纸质 XXXX 所能承受的XX 压力（注：XX 纸质XXXX 所能承受的 高压XX 冲击范围是?），经常对XXXX 造成损坏，不得不进行频繁更换，从而造成巨大浪 费，以城市XXXX 为例，XXXX 所属XX 众多，每天早晚不停营运， 致使XXXX 次数密集， 由于XXXX 是XX 的重要部件，每套价格近300元人民币，价格较贵，再以XX 市XXXXXX 为例，因以现有 XX 技术对损坏的XXXX 进行更换一项，每年就需要花费人民币 115万元 以上，无疑极大增加了 XXXX 的营运成本。 2、 在以现有人工方法技术对 XX 进行XXXX 过程中，当纸质 XX 有微小破损时，不易 被发现，在重新使用时，因其过滤灰尘能力大幅下降，这样细小灰尘就能够穿过 XX 进入 XX 的气缸，造成XX 的早期磨损，缩短 3、 另，使用现有人工方法的充气皮管 XX ，造成操作麻烦，费时费工，至少须 XX 的寿命。 XX 冲击吹气还难以多方位、均匀吹气，容易损伤 2个以上XX 工协同操作才能保证 XXXX 质量。 XXXXXXXX 设备可供使用。 综上，在现有的XX 设备中，还没有合适的专用 发明内容 本发明的首要目的是提供一种操控简单、 又XX 收集方便和环保卫生的 XXXXXXXX 本发明的其次目的是还能方便调节内外 否有存在破损的问题，以保证使用质量。 本发明的目的 是以如下技 术方案实现的：本发明是一种用于 XXXXXXXX 机械装置，包括机架、 外壳、电控制面板，其特征还包括： a —密闭结构的XX 室，在XX 室中设有能支撑并驱动待 XXXX 筒（匀速）旋转的横 向并排安装的双滚筒（双辊筒）机构和能对 XXXX 筒进行内外喷气 XX 的横向安装的XX 导杆机构，其中所述的XX 导杆机构是由上下排列的外 XX 导杆（负责对XX 筒外表面进行 喷气XX ）和内XX 导杆（负责对 XX 筒内部表面进行喷气 XX ）所组成，所述内、外 导杆皆具有一空心杆壳体、一位于空心杆壳体内部的丝杆螺母和固定在螺母上的 XX , 个丝杆头端皆设有一可调速电机，内、外 XX 能在可调速电机及丝杆螺母的带动下在待 的XXXX 筒内外作匀速直线往还移动（运动） ，以便将压缩气体均匀地作用在 XXXX 内外表面，达到XX 的目的； b 、一设于机架底部的密封式 XX 收集器装置，该XX 收集器是由真空泵和位于真空泵 下方的（内置有水和粗孔海绵）的 XX 收集室组成（用于集中留置 XX ）,其中真空泵的进 能多方位均匀吹气、不损伤 机械装置。 XXXX 气压和准确快速检测经 XXXX 、省工省力, XX 处理后XX 是 XXXX 及XX 的 XX 在每 XX 筒的
重组猪α-干扰素的纯化及生化性质鉴定 邵 菁 1,2 ,于瑞嵩 2,3 ,董世娟 2,3 ,朱于敏 2,3 ,沈世缘 2,3 ,曹祥荣1,李 震 2,3 (1.南京师范大学生命科学学院,江苏南京210046)(2.上海市农业科学院畜牧兽医研究所,上海201106)(3.上海市农业遗传育种重点实验室,上海201106) [摘要] 对巴斯德毕赤酵母高效分泌表达的猪α2干扰素(Po I F N 2α)纯化工艺和纯化后重组蛋白的部分生化特性进行了研究,结果表明:猪α2干扰素(Po I F N 2α)发酵液经离心、透析、过滤处理之后,依次利用亲和层析和离子交换层析使目的蛋白得到了纯化.经N 端氨基酸测序,W estern 2bl ot,对酸、热、巯基乙醇的稳定性和糖基化程度等检测后发现,所表达的猪α2干扰素N 端氨基酸序列(前5个)正确,对酸和热基本稳定,二硫键对目的蛋白的活性至关重要,没有发现目的蛋白的糖基化. [关键词] 重组猪α2干扰素(Po I F N 2 α),亲和层析,离子交换层析,糖基化,生化性质[中图分类号]S852.4 [文献标识码]A [文章编号]100124616(2008)022******* Pur i f i ca ti on of Recom b i n an t Porc i n e 2 αI n terferon and the Iden ti f i ca ti on of its B i ochem i ca l Character isti cs Shao J ing 1,2 ,Yu Ruis ong 2,3 ,Dong Shijuan 2,3 ,Zhu Yum in 2,3 ,Shen Shiyuan 2,3 , Cao Xiangr ong 1 ,L i Zhen 2,3 (1.School of L ife Science,Nanjing Nor mal University,Nanjing 210046,China ) (2.Ani m al Husbandry and Veterinary Research I nstitute,Shanghai Acade my of Agricultural Sciences,Shanghai 201106,China ) (3.ShanghaiMunici pal Key Laborat ory of Agri 2Genetics and B reeding,Shanghai 201106,China ) Abstract:I n this study,we devel oped the technique f or purifying recombinant porcine 2 αinterfer on (Po I F N 2α)that was efficiently exp ressed by Pichia Past oris and studied the bi oche m ical characteristics of Po I F N 2α.Recombinant porcine I F N 2 αwas purified t o homogeneity by affinity chr omat ography and i on 2exchange chr omat ography stepwisely after centrifu 2gati on 、dialysis and filtrati on .The results of its bi oche m ical characteristics showed that the first five a m ino acids of N -ter m inal of the purified p r otein was correct .The p r otein was heat and acid 2stable and the dithi olate 2bond was crucial t o the p r otein activity .No glycosylati on were f ound on the target p r otein . Key words:recombinant porcine α2interfer on (Po I F N 2 α),affinity chr omat ography,i on 2exchange chr omat ography,glyco 2sylati on,bi oche m ical characteristics 收稿日期:2007207202. 基金项目:上海市农业科学院青年科技发展基金(农青年科技2005-02)资助项目.通讯联系人:李 震,研究员,研究方向:动物生物技术,E 2mail:zhenli@https://www.doczj.com/doc/7813650077.html, 干扰素(I nterfer on,I F N )是一类重要的细胞因子,具有种属特异性,在同种细胞上具有广谱的抗病毒、抗细胞增殖、免疫调节等多种生物活性.根据干扰素的来源和性质可分为Ⅰ型干扰素和Ⅱ型干扰素[1,2] . 猪干扰素(Po I F N )也可分为I 型和Ⅱ型,I 型包括α、β、ω和τ4种,Ⅱ型仅有γ1种.I 型猪干扰素基因无 内含子,基因组中一般含有多个I 型猪干扰素基因[3] .猪I F N 2α(Po I F N 2α)基因家族分为二类同源的、但明 显不同的基因类型:Po I F N 2 α1和Po I F N 2α2.目前,Po I F N 2α1基因已经在真核和原核细胞中得到表达,但相关的分离纯化报道很少.通过研究表明,Po I F N 2 α可被用作动物疫苗的免疫增强剂和猪病毒病的治疗剂 [4,5] ,因此,在获得较高水平表达产物的基础上,探索重组Po I F N 2 α的分离纯化工艺,具有重要的理论意— 79—第31卷第2期2008年6月 南京师大学报(自然科学版) JOURNAL OF NANJ I N G NOR MAL UN I V ERSI TY (Natural Science Editi on ) Vol .31No .2Jun,2008
前列腺场效消融仪 操作说明 目录 1.00 原理简介 P.2 7 .00 注意事项 P.8 2.00 安装 7.10正确选择和放置管状电极 P.8 2.10治疗仪的组成 P.2 7.20板状电极必须贴好 P.8 2.20 电源线的连接 P.3 7.30先做模拟再做临床 P.8 2.30 治疗电极和S1的连接 P.4 7.40及时使用启/停按钮开关 P.9 2.40模拟器的连接及模拟试验 P.4 7.50不升温问题 P.9 3.00 启停操作 P.4 7.60关于疗效问题 P9 3.10操作开关和按钮说明 P.4 8.00 附录 P.10 3.20关机步骤 P.4 4.00 参数设定和运行 P.5 4.10 对话框与功能键 P.5 4.11曲线图示 P.5 4.12电子功能键 P.6 4.20 运行和温度、时间的显示 P.6 4.21 治疗启动和运行 P.7 4.22 温度显示和倒计时 P.7 4.23 治疗温度和治疗结束 P.7 5 .00 病历管理 P.7 6 .00电极 P.8 6.10 管状电极的检查 P.8 6.20 板状电极的用法 P.8
1.00原理简介： 腔内场效应治疗原理 利用高能聚焦电流场产生的强大电场能，驱使组织细胞内带电粒子产生运动。这一过程包括： ?热效应：高能聚焦电流场使体内发热，发热程度因电流密度而异。温度对有些细菌和 生物体能起到杀灭和抑制作用，以治疗前列腺炎及其他炎症。电脑控制升温，直达病灶深处。 ?排毒效应：有些病人在治疗中见有脓状物随尿液排出体外。 ?生物学效应：高能聚焦电流场可以诱导机体内的某些理化过程及生理效应，促进与恢 复病变细胞、组织的正常生理功能及细胞活力的提高，并利于药物的吸收，以达到治疗目的。治疗后，可使前列腺炎治疗更迅速，特别针对久治不愈的顽固性前列腺炎效果明显，一般说来治疗后性功能都有不同程度的提高。建议此治疗均在低温档（42?C--47?C）进行。 2.00安装 2.10治疗仪为整机一体化结构，主要有： （I）场效源系统： S1、电极 （II）计算机系统：PC机、键盘、显示器和鼠标 （III）专用电源系统： S2 具体组成请参照以下图片1：
18卷3期2002年5月 生 物 工 程 学 报 Chinese Journal o f Biotechnology V ol.18 N o.3 May 2002 收稿日期:2001212217,修回日期:2002202228。 基金项目:上海市农科院重点学科青年科技骨干培养基金。 3通讯作者。 T el :86221262200389;Fax :86221262207858;E 2mail :zhenli60@https://www.doczj.com/doc/7813650077.html, 重组猪α干扰素基因定点突变及在大肠杆菌中的表达 陈 涛1 于瑞嵩 2,3 刘惠莉 2,3 李 震 2,33 曹祥荣 1 1(南京师范大学生命科学学院,南京 210097) 2(上海市农业科学院畜牧兽医研究所,上海 201106)3 (上海市农业遗传育种重点实验室,上海 201106) 摘 要 用巨引物PCR 法介导的定点突变把猪α干扰素(P oIFN 2α)第86位Cys (TG C )突变为T yr (T AC ),同时将其成熟蛋白N 端第一个密码子TG T 同义突变大肠杆菌偏爱的密码子TG C ,构建了大肠杆菌融合基因表达载体pGEX 2 IFN ,表达产物占菌体总蛋白的20%。将以包涵体形式表达的目的蛋白经变、复性处理,并以FP LC 进一步纯化,得 到了具有较高生物活性的产物(5200I U Πmg )。 关键词 猪α干扰素,巨引物PCR ,定点突变,包涵体 中图分类号 Q78 文献标识码 A 文章编号100023061(2002)0320339204 干扰素是动物中目前所知出现最早、作用最快的第一抵御病毒体系。人和鼠的干扰素已得到深入研究,但对于猪的干扰素研究相对较少。我国是养猪大国,而猪的病毒性疾病种类多、危害大,发展具 广谱抗病毒效应的猪干扰素无疑有重要意义。 猪α型干扰素(P oIFN 2α)基因无内含子,蛋白糖基化修饰也不重要 [1] ,因而方便利用原核表达载体 表达。我们在研究中克隆到编码猪α型干扰素成熟肽部分的基因片段[2] 并在大肠杆菌中进行了表达,发现其活性较低,估计其编码肽段的第86位Cys 可能影响了干扰素的抗病毒活性[3] 。本实验参照 P oIFN 2α1序列[1] 将此位点突变为T yr ,然后用大肠杆菌融合表达系统表达出G ST 2IFN 融合蛋白,目的产物纯化后具有较高的抗病毒活性。 1 材料与方法 111 材料 菌种和质粒:受体菌E .coli DH5α、E .coli BL21为本室保藏菌种;p GEX 24T 23载体购自Pharmacia 公司;pUCm 2IFN 质粒为本室构建、保存。 工具酶和试剂:P fu DNA 聚合酶购自上海生工生物工程公司,限制酶、T 4DNA 连接酶、S1核酸酶 购自T aK aRa 公司,HuIFN 2 α标准品购自卫生部上海生物制品研究所,Sephecyic 200购自Phamacia 公司,其它试剂均为国产分析纯。 人羊膜上皮细胞(WISH )及水疱性口炎病毒(VS V )购自卫生部上海生物制品研究所。112 方法 11211 定点突变:采用巨引物PCR 法[4] 。根据所得 P oIFN 2 α序列[2]设计3条引物:P1:5′G AT CCTG C G ACCTG CCT C A 3′;P2:5′G CTG AT CC AG T CC AG TG T AG AAC3′;P3:5′C AG AATT CAG AATGGG CTTG 3′。 其中P1处于IFN 基因的5′端,斜体C 为引入 的突变碱基,并在前面加了G AT CC (下划线部分),以便与经Bam HI 酶切后用S1核酸酶削平的载体进行平端连接构成新的Bam HI 酶切位点。P2处于IFN 基因内部,斜体T 为引入的突变碱基。P3处于IFN 基因的3′末端,下划线部分为引入的Eco RI 酶切位点(引物示意参见图1) 。 图1 引物示意图 Fig.1 P osition of primers The asterisk (3)indicates the sites to be mutated
一、什么是干扰素 1、是通过基因工程技术生产的高科技、绿色抗病毒生物兽药。 2、是一类蛋白多肽，具有多功能的细胞因子、具有广泛的抗病毒、抗肿瘤和免疫调 节作用的可溶性糖蛋白。 3、能诱导动物细胞产生多种广谱抗病毒蛋白。 4、抑制病毒增殖，增强机体免疫应答。 5、在动物抵抗病毒感染过程中起着重要作用。 6、是目前所知发挥作用最快的病毒防御体系，几分钟内使机体处于病毒状态。 7、使机体在1－3周时间内对病毒的重复感染有抵抗作用。 二、干扰素的分类 根据产生干扰素细胞种类不同分为︱型和‖型 ︱型干扰素包括α、β 、δ、τ、ω 等亚型，最具有典型代表的是a亚型，具有强烈的抗病毒功能，因此又称抗病毒干扰素（IFN-α） ‖型干扰素目前只发现y亚型，具有强烈的免疫调节功能，因此又称免疫干扰素（IFN-y） ︱型和‖型均具有抗病毒、调节免疫、抗肿瘤的作用 区别：抗病毒方面IFN－a﹥IFN－y 免疫调节方面IFN－y﹥IFN－a 三、干扰素的药理 GTPase 阻断病毒穿入 2?，5?-Aase 阻断病毒脱壳 抗病毒蛋白表达———Pkas ——细胞呈现抗病毒状态——阻断病毒复制 2?-PDEas 阻断病毒合成 活化NK细胞 MO吞噬功能亢进 激活免疫细胞——加强KT细胞功能——杀伤病毒感染细胞 ADCC活性增强 四、干扰素作用 1、抗病毒、抗肿瘤作用 干扰素进入机体后产生多种广谱抗病毒蛋白分解病毒RNA阻断病毒蛋白合成导致tRNA与氨基酸不能结合消除病毒感染。 2、免疫调理、免疫增强作用：激活T淋巴细胞，活化巨噬细胞，吸引淋巴细胞向 炎性组织移动。 五、吉莱德系列干扰素具有的显著特点和优势： 1、高浓缩型 ①每毫升的活性单位高达100多万，无须加量使用。
注射用胸腺肽说明书 通用名：注射用胸腺肽 曾用名：注射用胸腺素、注射用胸腺因子 商品名： 英文名：Thymopetidum for Injection 汉语拼音：Zhusheyong Xiongxiantai 本品主要成份及其化学名称为： 结构式： 分子式： 分子量： 【性状】 本品为类白色或微黄色冻干品。 【药理作用】 药效学：本品为免疫调节药。具有调节和增强人体细胞免疫功能的作用，能促使T-淋巴细胞成熟。 【药代动力学】 【适应症】 用于治疗各种原发性或继发性T细胞缺陷病，某些自身免疫性疾病，各种细胞免疫功能低下的疾病及肿瘤的辅助治疗.包括:1.各型重症肝炎、慢性活动性肝炎、慢性迁延性肝炎及肝硬化等；2.带状疱疹、生殖器疱疹、尖锐湿疣等；3.支气管炎、支气管哮喘、肺结核预防上呼吸道感染等；4.各种恶性肿瘤前期及化疗，放疗合用并用；5.红斑狼疮、风湿性及类风湿性疾病、强直性脊柱炎、格林巴利综合症等；6.再生障碍性贫血、白血病、血小板减少症等；7.病毒性角膜炎、病毒性结膜炎、过敏性鼻炎等；8.老年性早衰、妇女更年期综合症等；9.多发性疖肿及面部皮肤痤疮等，银屑病、扁平苔藓、鳞状细胞癌及上皮角化症等；10.儿童先天性免疫缺陷症等。 【用法与用量】 皮下或肌肉注射：1次10-20mg，一日1次或遵医嘱。静脉滴注：一次20-80mg，溶于500ml0.9%氯化钠注射液或5%葡萄糖注射液，一日1次或遵医嘱。
【禁忌】 阳性反应者忌用。 【注意事项】 1.对于过敏体质者，注射前或治疗终止后再用药时需做皮内敏感试验（配成25μg/ml的溶液，皮内注射0.1ml），阳性反应者禁用。 2.如出现混浊或絮状沉淀物等异常变化，禁忌使用。 【孕妇及哺乳期妇女用药】 慎用。 【儿童用药】 【老年患者用药】 【药物相互作用】 尚不明确。 【药物过量】 【规格】 5mg、10mg 【贮藏】 密闭，在凉暗处保存。 【包装】 5mg×5支；10mg×5支。西林瓶包装。 【有效期】 1.5年 简介 注射用胸腺肽采用健康新生小牛胸腺组织提取，含有生物活性的小分子多肽（分子量小于8000道尔顿），经冻干制成的一种生物制剂，该制剂具有促进淋巴细胞成熟，调节和增强人体免疫功
说明书摘要 本发明公开了一种XXXl （简要说明本发明解决什么技术问题，采用了什么主要的技术特征【一般直接复制权利要求1加以修改即行】，获得的有益效果） 注意：字数不超过300字。
摘要附图 指定一副最能从整体上反映本发明的图（假如有附图的话）
权利要求书 1、一种（主题名称），其特征在于：（其特征是：）。 （独立权利要求：前序部分+特征部分，前序部分=本发明主题名称+与现有（或接近）技术共有的必要技术特征【必要：是指缺少了就不能够解决技术问题】，特征部分=区别于现有现有技术的必要特征） 2、根据权利要求1所述的（主题名称），其特征在于：。 （从属权利要求：引用部分+特征部分，对引用的权利要求作进一步要求）
说明书 名称（与专利申请书的名称一致） 技术领域 本发明涉及XXX技术领域，特别是涉及一种收卷机转盘。（涉及的技术主题，便于专利局分类） 背景技术 （写明现有技术中得不足，或缺点，抑或是本发明所要解决的技术问题） 发明内容 为了克服上述现有技术的不足，本发明提供了一种（主题名称）。（说明要解决的技术问题） 本发明所采用的技术方案是：（解决上述现有技术的不足所采用的技术方案） 与现有技术相比，本发明的有益效果是（本发明的有益效果，就是说相对现有的技术，本发明的进步在哪里） 附图说明（有附图需要说明，没附图，这部分不需加入）图1为； 图2为。 具体实施方式 下面结合附图对本发明进一步说明。（采用最优例子来说明本发
明，说明本发明怎么去解决技术问题的。） （其实整个说明书结构就是：为什么（技术问题）+是什么（技术方案）+怎么做（具体实施））
猪β-干扰素的研究进展 徐蕙,刘德辉,郭霄峰 (华南农业大学兽医学院,广州 510642) 摘要:干扰素是由干扰素诱生剂诱导生物细胞所产生的一类高活性多功能的糖蛋白,干扰素自被发现以来,由于其广谱抗病毒、抗肿瘤活性及其强大的免疫调节作用而受到研究者们的重视。在其基因结构、作用机理及体外重组表达等方面都取得了巨大突破。作者综述了猪β-干扰素的基本特性、作用机理及其临床应用。 关键词:猪β-干扰素;基本特征;作用机理 中图分类号:S852.4 文献标识码:A 文章编号:1671-7236(2009)12-0120-03 干扰素(IFN )是一种广谱抗病毒糖蛋白,是1957年由英国病毒生物学家A lick Isaacs 和瑞士研究人员Jean Lindenmann 在利用鸡胚绒毛尿囊膜研 究流感干扰现象时发现的,并将其命名为干扰素。干扰素的分子质量一般在20～100ku ,不能透过普通透析膜,但可通过滤菌器,比病毒颗粒小,沉淀病毒的离心力不能沉降干扰素。干扰素的天冬氨酸、谷氨酸和亮氨酸含量较高,不含核酸,所以不被DNA 酶或RNA 酶破坏,但易被胰蛋白酶、乙醚、氯仿、酮基等破坏,-20℃条件下可长期保存。I 型干扰素具有耐酸性,在pH 2时稳定。Ⅱ型干扰素不耐酸,也不耐热,即在pH 2时不稳定,在56℃条件下30min 会被破坏。干扰素具有广谱性,可抗多种病毒和微生物。 1 IFN -β的类别与组织细胞来源 由于研究角度的不同,干扰素的分类方法有也不同。根据干扰素蛋白质的氨基酸结构与免疫原性的不同,可将干扰素划分为IFN -α、IFN -β、IFN -γ。其中又根据其对酸的不同敏感性,分为Ⅰ型干扰素和Ⅱ型干扰素。Ⅰ型干扰素对酸的耐受性较大,分别有IFN -α、IFN -β、IFN -ω、IFN -δ、IFN -κ、IFN -τ6种类型(银晓等,2008),Ⅱ型干扰素对酸敏感,迄今为止只有IFN -γ一个成员。近年来Ko tenko 等(2003)将Sheppard 鉴定的干扰素新家族命名为IFN -λs (IFN -λ1、IFN -λ2和IFN -λ3)。人类基因组组织(human genome org anizatio n ,H UGO )暂时将它们命名为IL -29、I L -28A 和IL -28B 。IFN -λs 与Ⅰ 收稿日期:2009-05-05 作者简介:徐蕙(1983-),女,广东人,硕士,研究方向:预防兽医 微生物。 通信作者:郭霄峰,男,博导。E -mail :xfgu o @scau .edu .cn 型IFN 有着几乎相同的功能,是否具有独特功能,正在进一步的研究之中(李珊等,2005)。正常的细 胞不产生干扰素,只有合成干扰素的潜力(高建忠等,2004),当细胞受到病毒感染或是诱生剂作用时产生。IFN -β主要由纤维母细胞受诱生剂作用而产生,IFN -α来源于白细胞,而IFN -γ来源于淋巴细胞。2 IFN -β的结构IFN -β因种属不同氨基酸序列也不同。猪与人、牛、马的IFN -β氨基酸同源性分别为65.1%、65.1%和66.1%(曾芸等,2007)。而同一种属的不同品种中,氨基酸序列略有不同,但都在98.5%以上。Antho ny (2002)对干扰素基因研究,得出IFN -α和IFN -β基因位于人9号染色体和小鼠的4号染色体,并连锁在一起。IFN -α和IFN -β氨基酸的同源性为26%～30%(武迎红等,2007)。2.1 猪IFN -β的结构 猪IFN -β基因含有一个561bp 的ORF ,编码186个氨基酸,分子质量约为22ku 。ORF 前21个氨基酸为信号肽,成熟蛋白为分泌型蛋白,有3个潜在的N 端糖基化位点Asn 94、Asn 101、Asn 173,氨基酸序列分别为Asn Asp Se r 、Asn G lu Th r 及A sn A sp Ser ,受体为Asn 上的N 原子。曾芸等(2007)对广西巴马猪的IFN -β进行蛋白质结构预测,得出在成熟的IFN -β蛋白中含有5个α-螺旋结构,分别位于第23-43,72-92,101-128,139-157和160-183位氨基酸残基。第27-177位氨基酸残基区域为IFN -β蛋白与其在细胞表面的Ⅰ型干扰素共有受体的结合区域。M ark 等(1984)报道可用任何氨基酸替代第17位的Cy s ,从而获得一系列IFN -β的同系物。替换第17位的Cys 可采用核苷酸点突变技术,将第17位的Cy s 变成中性氨基酸,如丝氨酸或酪氨酸。第17位的Cy s 对保持IFN -β的空间结构无明显的作用,该Cy s 被Ser 替 · 120·疾病防治中国畜牧兽医 2009年第36卷第12期
近年来，随着病原菌新毒株、变异株的不断出现，我国动物疾病的防制面临严峻的挑战，目前的预防和治疗措施已经不能经济而有效地控制疫病的发展，尤其是病毒性疾病的危害日益严重，因此迫切需要一种有效的防治措施。 自１９５７年Ｉｓａａｃｓ和Ｌｉｎｄｅｎｍａｎｎ发现干扰素以来，干扰素已经显示出了极强的抗病毒、抗肿瘤以及免疫调节活性和应用前景。因而，干扰素的研究越来越受到人们的广泛关注。目前动物干扰素主要停留在基础研究和临床试验阶段，且大多数集中于猪、鸡、鱼等少数动物，但近年来也取得了不小的进步，目前已有商品化的猪、犬、鸡等重组干扰素产品面市。本文就近年来国内动物干扰素的研究进展综述如下。 一、概况 干扰素 ＩＦＮ 是一类具有广泛生物学活性的蛋白质，具有调节机体免疫功能、抗病毒、抗肿瘤等多种作用，是机体防御系统的重要组成部分。ＩＦＮ的抗病毒活性是通过宿主细胞而间接完成的，并具有严格的种属特异性及选择性。根据其来源和结构，ＩＦＮ可分为α、β、γ三种类型，近年来，还发现了ω、τ等类型的干扰素。ＩＦＮ—α主要由单核细胞产生；ＩＦＮ—β主要由纤维母细胞产生，血管内皮细胞也可产生；ＩＦＮ—γ由抗原及ＰＨＡ等有丝分裂原刺激Ｔ细胞后产生，此外，ＮＫ细胞也可产生。ＩＦＮ—τ是反刍动物孕体附植时滋养层细胞分泌的特有的妊娠识别信号因子，在妊娠识别中发挥着重要的作用。 ＩＦＮ—α、ＩＦＮ—β尽管结构不同，但有许多相似之处，它们来自同一个祖先基因，结合相同的细胞表面受体，并发挥相似的生物学效应，因而将它们一起划归为Ⅰ型干扰素。其中ＩＦＮ—α是２０个结构相关的分子量约为１８ｋＤａ的多肽家族，每个由独立的基因编码；ＩＦＮ—β是个单基因产物，是分子量２０ｋＤａ的糖蛋白。ＩＦＮ—γ属Ⅱ型干扰素，由大约２１～２４ｋＤａ的亚基组成的以同源双体形式存在的糖蛋白。ＩＦＮ一γ对５６℃、ｐＨ２和０．１％ＳＤＳ敏感。 二、干扰素的生物学活性 干扰素在１９５７年被发现时，抗病毒活性被认为是其唯一特性，但随后研究发现干扰素除具有抗病毒增殖作用外，还有一系列其他生物学活性，如抗肿瘤、免疫调节作用等。大量研究表明，干扰素的生物学活性的发挥有赖于其诱导的多种效应蛋白质的合成。干扰素并不直接作为反式作用因子对其效应分子的基因组进行调控，而是通过受体介导的信号转导系统引发一系列特定的生化反应，最终达到效应分子的表达目的。此外，干扰素活性很高，并且其活性呈明显的多样性。现将其主要活性分述如下。 （一）Ⅰ型干扰素的主要生物学活性 抑制病毒复制，主要是通过诱导细胞合成多种酶 ２’—５’寡聚腺苷酸合成酶等 和旁分泌作用。 抑制细胞的增殖 如肿瘤细胞等）。 加强ＮＫ细胞杀伤病毒感染细胞的能力（ＮＫ细胞具有干扰素受体 。 改变ＭＨＣ分子的表达，增强ＭＨＣⅠ类分子的表达而抑制ＭＨＣⅡ类分子的表达。（二）Ⅱ型干扰素的主要生物学活性 ＩＦＮ—γ抗病毒活性较Ⅰ型低，但它的免疫调节和抗细胞增殖的作用较强，所以又称免疫干扰素，它是一种强的巨噬细胞、ＮＫ细胞、血管内皮细胞活化剂，能激活巨噬细胞并促进其活性；能直接作用于Ｔ和Ｂ淋巴细胞，促进分化；能增强ＭＨＣⅠ类分子和ＭＨＣⅡ类分子的表达。
胸腺肽注射液工艺规程 目录： 1、产品名称及剂型 2、产品概述 3、处方和依据 4、生产工艺流程图 5、制剂操作过程和工艺条件 6、质量监控 7、原辅料质量标准和检查方法及复检前最长储存期 8、半成品质量标准和检查方法 9、成品法定、内控质量标准和检查方法 10、包装材料和包装材料质量标准及内包材包装前的最长使用时间 11、工艺卫生要求 12、关键设备的准备工作 13、各设备标准操作程序 14、技术安全及劳动保护 15、劳动组织、岗位定员、工时定额、产品生产周期 16、原辅料消耗定额 17、包装材料消耗定额 18、物料平衡 19、综合利用和环境保护 20、附页 1、产品名称及剂型 1.1 产品名称：胸腺肽注射液 1.2 汉语拼音：Xiongxiantai Zhusheye 1.3 剂型：注射剂 1.4 批准文号：国药准字H20003471 2、产品概述 2.1 性状：本品为无色或微黄色澄明液体。 2.2PH 值：应为6.0 ?7.5. 2.3 作用与用途：免疫调节药。能使T- 淋巴细胞成熟，具有调节和增强人体细胞免疫功能的作用。用于儿童先天性免疫缺陷病、类风湿关节炎、顽固性口腔溃疡、红斑狼疮、病毒性肝炎、支气管哮喘以及预防上呼吸道感染等，亦可用于肿瘤性疾病的辅助治疗。 2.4用法用量：肌内，皮下注射，一次10?20mg 一日1次或遵医嘱。 静脉滴注，一次20?60mg溶于500ml0.9%氯化钠注射液或5%- 10%葡萄糖注射液，一日一次或遵医嘱。
2.5 规格：2ml:20mg 2.6贮藏：密闭，在凉暗处保存。 2.7有效期：1.5年 2.8注意：对于过敏体质者，注射前或治疗终止后再用药时，需做皮内敏感试验（配成每1ml 中含25^g勺溶液，皮内注射0.1ml ）,阳性反应者忌用。 3、处方和依据： 3.1工艺处方：本品为胸腺肽的灭菌水溶液，含多肽应为标示量的90.0%?125.0%。 3.2生产处方：取适量提取原液按含量计算加入适量注射用水，配制成每2ml含多肽为18m『 25mg= 3.3处方依据：国家药品监督管理局发国家药品标准WSXG-043-2000 4、生产工艺流程图： 胸腺肽原液注射用水 化验 曲颈瓶洗涤、干燥灭菌 化验