中科院研究生院硕士研究生入学考试
《生物化学与分子生物学》考试大纲
一、考试内容
1.蛋白质化学
考试内容
●蛋白质的化学组成，20种氨基酸的简写符号
●氨基酸的理化性质及化学反应
●蛋白质分子的结构（一级、二级、高级结构的概念及形式）
●蛋白质一级结构测定的一般步骤
●蛋白质的理化性质及分离纯化和纯度鉴定的方法
●蛋白质的变性作用
●蛋白质结构与功能的关系
考试要求
●了解氨基酸、肽的分类
●掌握氨基酸与蛋白质的物理性质和化学性质
●了解蛋白质一级结构的测定方法（目前关于蛋白质一级结构测定的新方法和新思路很多，而教科书和教学中
涉及的可能不够广泛，建议只让学生了解即可）
●理解氨基酸的通式与结构
●理解蛋白质二级和三级结构的类型及特点，四级结构的概念及亚基
●掌握肽键的特点
●掌握蛋白质的变性作用
●掌握蛋白质结构与功能的关系
2.核酸化学
考试内容
●核酸的基本化学组成及分类
●核苷酸的结构
●DNA和RNA一级结构的概念和二级结构要特点；DNA的三级结构
●RNA的分类及各类RNA的生物学功能
●核酸的主要理化特性
●核酸的研究方法
考试要求
●全面了解核酸的组成、结构、结构单位以及掌握核酸的性质
●全面了解核苷酸组成、结构、结构单位以及掌握核苷酸的性质
●掌握DNA的二级结构模型和核酸杂交技术
●了解microRNA的序列和结构特点（近年来针对非编码RNA的研究越来越深入，建议增加相关考核）
3. 糖类结构与功能
考试内容
●糖的主要分类及其各自的代表
●糖聚合物及其代表和它们的生物学功能
●糖链和糖蛋白的生物活性
考试要求
●掌握糖的概念及其分类
●掌握糖类的元素组成、化学本质及生物学功用
●理解旋光异构
●掌握单糖、二糖、寡糖和多糖的结构和性质
●掌握糖的鉴定原理
4. 脂质与生物膜
考试内容
●生物体内脂质的分类，其代表脂及各自特点
●甘油脂、磷脂以及脂肪酸特性。油脂和甘油磷脂的结构与性质
●生物膜的化学组成和结构，“流体镶嵌模型”的要点
考试要求
●了解脂质的类别、功能
●熟悉重要脂肪酸、重要磷脂的结构
●掌握甘油脂、磷脂的通式以及脂肪酸的特性
●掌握油脂和甘油磷脂的结构与性质
5. 酶学
考试内容
●酶的作用特点
●酶的作用机理
●影响酶促反应的因素（米氏方程的推导）
●酶的提纯与活力鉴定的基本方法
●熟悉酶的国际分类和命名
●了解抗体酶、核酶和固定化酶的基本概念和应用
考试要求
●了解酶的概念
●掌握酶活性调节的因素、酶的作用机制
●了解酶的分离提纯基本方法
●熟悉酶的国际分类（第一、二级分类）
●了解特殊酶，如溶菌酶、丝氨酸蛋白酶催化反应机制
●掌握酶活力概念、米氏方程以及酶活力的测定方法
●了解抗体酶、核酶的基本概念
●掌握固定化酶的方法和应用
6. 维生素和辅酶
考试内容
●维生素的分类及性质
●各种维生素的活性形式、生理功能
考试要求
●了解水溶性维生素的结构特点、生理功能和缺乏病
●了解脂溶性维生素的结构特点和功能
7. 激素
考试内容
●激素的分类
●激素的化学本质；激素的合成与分泌
●常见激素的结构和功能（甲状腺素、肾上腺素、胰岛素、胰高血糖素）
●激素作用机理
考试要求
●了解激素的类型、特点
●理解激素的化学本质和作用机制
●了解常见激素的结构和功能
●理解第二信使学说
8．新陈代谢和生物能学
考试内容
●新陈代谢的概念、类型及其特点
●ATP与高能磷酸化合物
●ATP的生物学功能
●电子传递过程与ATP的生成
呼吸链的组分、呼吸链中传递体的排列顺序
考试要求
理解新陈代谢的概念、类型及其特点
了解高能磷酸化合物的概念和种类
理解ATP的生物学功能
掌握呼吸链的组分、呼吸链中传递体的排列顺序
●掌握氧化磷酸化偶联机制
9. 糖的分解代谢和合成代谢
考试内容
●糖的代谢途径，包括物质代谢、能量代谢和有关的酶
●糖的无氧分解、有氧氧化的概念、部位和过程
●糖异生作用的概念、场所、原料及主要途径
●糖原合成作用的概念、反应步骤及限速酶
●糖酵解、丙酮酸的氧化脱羧和三羧酸循环的反应过程及催化反应的关键酶
●光合作用的概况
●光呼吸和C4途径
考试要求
●全面了解糖的各种代谢途径，包括物质代谢、能量代谢和酶的作用
●理解糖的无氧分解、有氧氧化的概念、部位和过程
●了解糖原合成作用的概念、反应步骤及限速酶
●掌握糖酵解、丙酮酸的氧化脱羧和三羧酸循环的途径及其限速酶调控位点
●掌握磷酸戊糖途径及其限速酶调控位点
●了解光合作用的总过程
●理解光反应过程和暗反应过程
●了解单糖、蔗糖和淀粉的形成过程
10. 脂类的代谢与合成
考试内容
●脂肪动员的概念、限速酶；甘油代谢
●脂肪酸的 -氧化过程及其能量的计算
●酮体的生成和利用
●胆固醇合成的部位、原料及胆固醇的转化及排泄
●血脂及血浆脂蛋白
考试要求
●全面了解甘油代谢：甘油的来源合去路，甘油的激活
●了解脂类的消化、吸收及血浆脂蛋白
●理解脂肪动员的概念、各级脂肪酶的作用、限速酶
●掌握脂肪酸β－氧化过程及能量生成的计算
●掌握脂肪的合成代谢
●理解脂肪酸的生物合成途径
●了解磷脂和胆固醇的代谢
11. 核酸的代谢
考试内容
●嘌呤、嘧啶核苷酸的分解代谢与合成代谢的途径
●外源核酸的消化和吸收
●碱基的分解
●核苷酸的生物合成
●常见辅酶核苷酸的结构和作用
考试要求
●了解外源核酸的消化和吸收
●理解碱基的分解代谢
●理解核苷酸的分解和合成途径
●掌握核苷酸的从头合成途径
●了解常见辅酶核苷酸的结构和作用
12. DNA，RNA和遗传密码
考试内容
●DNA复制的一般规律
●参与DNA复制的酶类与蛋白质因子的种类和作用（重点是原核生物的DNA聚合酶）
●DNA复制的基本过程
●真核生物与原核生物DNA复制的比较
●转录基本概念；参与转录的酶及有关因子
●原核生物的转录过程
●RNA转录后加工的意义
●mRNA、tRNA、rRNA和非编码RNA的后加工
●逆转录的过程
●逆转录病毒的生活周期和逆转录病毒载体的应用（利用逆转录病毒载体特性制作的载体在分子生物学实验中
的应用越来越广泛，无论是基因治疗还是iPS中都有它的身影，建议作为考试内容）
●RNA的复制：单链RNA病毒的RNA复制，双链RNA病毒的RNA复制
●RNA传递加工遗传信息
●染色体与DNA
染色体
染色体概述
真核细胞染色体的组成
原核生物基因组
●DNA的转座
转座子的分类和结构特征
转座作用的机制
转座作用的遗传学效应
真核生物中的转座子
转座子Tnl0的调控机制
考试要求
●理解DNA的复制和DNA损伤的修复基本过程
●掌握参与DNA复制的酶与蛋白质因子的性质和种类
●掌握DNA复制的特点
●掌握真核生物与原核生物DNA复制的异同点
●掌握DNA的损伤与修复的机理
●全面了解RNA转录与复制的机制
●掌握转录的一般规律
●掌握RNA聚合酶的作用机理
●理解原核生物的转录过程
●掌握启动子的作用机理
●了解真核生物的转录过程
●理解RNA转录后加工过程及其意义
●掌握逆转录的过程
●掌握逆转录病毒载体的应用
●理解RNA的复制
●掌握RNA传递加工遗传信息
13. 蛋白质的合成和转运
考试内容
●mRNA在蛋白质生物合成中的作用、原理和密码子的概念、特点
●tRNA、核糖体在蛋白质生物合成中的作用和原理
●参与蛋白质生物合成的主要分子的种类和功能
●蛋白质生物合成的过程
●翻译后的加工过程
●真核生物与原核生物蛋白质合成的区别
●蛋白质合成的抑制剂
考试要求
●全面了解蛋白质生物合成的分子基础
●掌握翻译的步骤
●掌握翻译后加工过程
●理解真核生物与原核生物蛋白质合成的区别
●理解蛋白质合成抑制因子的作用机理
14. 细胞代谢和基因表达调控
考试内容
●细胞代谢的调节网络
●酶活性的调节
●细胞信号传递系统
●原核生物和真核生物基因表达调控的区别
●真核生物基因转录前水平的调节
●真核生物基因转录活性的调节和转录因子的功能
●操纵子学说（原核生物基因转录起始的调节）
●翻译水平上的基因表达调控
●原核基因表达调控
原核基因调控总论
转录调节的类型
启动子与转录起始（要求熟练掌握，灵活运用）
RNA聚合酶与启动子的相互作用
环腺苷酸受体蛋白对转录的调控
乳糖操纵子
酶的诱导——lac体系受调控的证据
操纵子模型（要求熟练掌握，灵活运用）
lac操纵子DNA的调控区域
lac操纵子中的其他问题
色氨酸操纵子
trp操纵子的阻遏系统
弱化子与前导肽
trp操纵子弱化机制的实验依据
阻遏作用与弱化作用的协调
其他操纵子
半乳糖操纵子
阿拉伯糖操纵子
组氨酸操纵子
recA操纵子
多启动子调控的操纵子
入噬菌体基因表达调控
入噬菌体
入噬菌体基因组
溶原化循环和溶菌途径的建立
O区
入噬菌体的调控区及入阻遏物的发现
C I蛋白和Cro蛋白
转录后调控
稀有密码子对翻译的影响
重叠基因对翻译的影响
Poly(A)对翻译的影响
翻译的阻遏
RNA的高级结构对翻译的影响
RNA—RNA相互作用对翻译的影响
魔斑核苷酸水平对翻译的影响
考试要求
●理解代谢途径的交叉形成网络和代谢的基本要略
●理解酶促反应的前馈和反馈、酶活性的特异激活剂和抑制剂
●掌握细胞膜结构对代谢的调节和控制作用
●了解细胞信号传递和细胞增殖调节机理
●掌握操纵子学说的核心
●理解转录水平上的基因表达调控和翻译水平上的基因表达调控
15．基因工程和蛋白质工程
考试内容
●基因工程的简介
●DNA克隆的基本原理
●基因的分离、合成和测序
●克隆基因的表达
●基因来源、人类基因组计划及核酸顺序分析
●基因的功能研究（针对基因功能的相关研究技术如基因敲除和RNA干扰是近年来的研究热点，是基础研究与
技术结合的典范）
●RNA和DNA的测序方法及其过程
●蛋白质工程
考试要求
●掌握基因工程操作的一般步骤，
●掌握各种水平上的基因表达调控
●理解研究基因功能的一些方法和原理
●了解人类基因组计划及核酸顺序分析
●掌握RNA和DNA的测序方法及其过程
●了解蛋白质工程的进展
16. 真核生物基因调控原理
考试内容
●真核细胞的基因结构
基因家族(gene family)
真核基因的断裂结构
真核生物DNA水平的调控（要求熟练掌握，灵活运用）
●顺式作用元件与基因调控（要求熟练掌握，灵活运用）
Britten—Davidson模型
染色质结构对转录的影响
启动子及其对转录的影响
增强子及其对转录的影响
●反式作用因子对转录的调控（要求熟练掌握，灵活运用）
CAA T区结合蛋白CTF／NFl
TA TA和GC区结合蛋白
RNA聚合酶Ⅲ及其下游启动区结合蛋
其他转录因子及分子机制
转录因子介导的基因表达的级联调控（发育生物学的核心问题就是同样的基因组是如何实现时空特异表达的，转录因子在这其中起到了重要的作用，这是细胞信号转导和细胞分化的研究热点之一）
●激素及其影响
固醇类激素的作用机理
多肽激素的作用机理
激素的受体
●其他水平上的基因调控
RNA的加工成熟
翻译水平的调控
蛋白质的加工成熟
17.高等动物的基因表达
考试内容
●表观遗传学的概念和研究范畴
●基因表达与DNA甲基化（要求熟练掌握，灵活运用）
DNA的甲基化
DNA甲基化对基因转录的抑制机理
DNA甲基化与X染色体失活
DNA甲基化与转座及细胞癌变的关系
●基因表达与组蛋白修饰（组蛋白修饰的种类和对基因表达的影响）
●蛋白质磷酸化与信号传导（要求熟练掌握，灵活运用）
●免疫球蛋白的分子结构
●分子伴侣的功能
●原癌基因及其调控（掌握）
●癌基因和生长因子的关系
考试要求
●熟练掌握基因表达与DNA甲基化和组蛋白修饰
●熟练掌握蛋白质磷酸化与信号传导
●掌握原癌基因及其调控
18.病毒的分子生物学（一般了解）
考试内容
●人免疫缺损病毒——HIV
HIV病毒粒子的形态结构和传染
●乙型肝炎病毒——HBV
肝炎病毒的分类地位及病毒粒子结构
●SV40病毒
SV40基因的转录调控
考试要求
●掌握SV40基因的转录调控
19.植物基因工程（一般了解）
考试内容
●工程的基本原理（农杆菌Ti质粒法、直接转化法）
●植物抗逆和抗生物胁迫的分子生物学
基因工程产业化的现状与展望（一般了解）
考试内容
基因治疗
二、考试方法和考试时间
硕士研究生入学生物化学与分子生物学考试为笔试，考试时间为3小时。试卷务必书写清楚、符号和西文字母运用得当。不得在试题上答卷。
三、主要参考教材（参考书目）
《生物化学》（2002年第三版），上、下册王镜岩等编著，高等教育出版社
《基因VIII》（中文版），Benjamin Lewin，科学出版社（分子生物学主要参考教材建议以《基因VIII》为主）
编制单位：中国科学院研究生院
编制日期：2010年8月15日
生化及分子生物学复习资料（15天15题） 一、变性蛋白质的性质改变 ①结晶及生物活性丧失是蛋白质变性的主要特征。 ②硫水侧链基团外露。 ③理化性质改变，溶解度降低、沉淀，粘度增加，分子伸展。 ④生理化学性质改变。分子结构伸展松散，易被蛋白酶水解。 蛋白质一、二、三、四级结构；β-折叠、α-螺旋 二、B型双螺旋DNA的结构特点 1. 两条反向平行的多核苷酸链围绕一个“中心轴”形成右手双螺旋结构，螺旋表面有一条大沟和小沟； 2.磷酸和脱氧核糖在外侧，通过3’，5 ’－磷酸二酯键相连形成DNA的骨架，与中心轴平行。碱基位于内侧，与中心轴垂直； 3. 两条链间存在碱基互补：A与T或G与C配对形成氢键，称为碱基互补原则（A与T为两个氢键，G与C为三个氢键）； 4. 螺旋的稳定因素为碱基堆集力和氢键； 5. 螺旋的直径为2nm，螺距为，相邻碱基对的距离为，相邻两个核苷酸的夹角为36度。 DNA变性（复性）、增色（减色）效应 三、酶催化作用特点 一般特点(同普通的催化剂)：1、只催化热力学上允许的化学反应（G<0）；2、降低活化能，但不改变化学反应的平衡点；3、加快化学反应速度，但催化剂本身反应前后不发生改变。 特殊之处：1.催化具有高效性；2.高度的专一性(只能催化一种底物或一定结构的底物）； 3.易失活； 4.催化活性受到调节和控制； 5.催化活性与辅助因子有关 (全酶=酶蛋白＋辅助因子） 维生素；酶促反应速度；抑制剂；酶原 四、生物氧化的特点 1.反应条件温和。
2.生物氧化并非代谢物与氧直接结合，而是以脱氢为主的逐步反应。 3.生物氧化是逐步进行的，能量释放也是逐步的，一部分生成ATP。 4.终产物CO2为有机物氧化成有机酸进而脱羧生成。 呼吸链；氧化磷酸化；底物水平磷酸化；解偶联剂 五、磷酸戊糖途径的生理意义 1. 是体内生成NADPH的主要代谢途径 2. 该途径的中间产物为许多化合物的生物合成提供原料。 3. 与光合作用联系起来，实现某些单糖间的互变。 糖酵解；三羧酸循环；糖异生（掌握反应历程） 六、软脂酸β-氧化和从头合成的比较 β-氧化；α－氧化作用；ω－氧化作用 七、如何判断蛋白质的营养价值
中科院研究生院硕士研究生入学考试 《生物化学与分子生物学》考试大纲 一、考试内容 1.蛋白质化学 考试内容 ●蛋白质的化学组成，20种氨基酸的简写符号 ●氨基酸的理化性质及化学反应 ●蛋白质分子的结构（一级、二级、高级结构的概念及形式） ●蛋白质一级结构测定的一般步骤 ●蛋白质的理化性质及分离纯化和纯度鉴定的方法 ●蛋白质的变性作用 ●蛋白质结构与功能的关系 考试要求 ●了解氨基酸、肽的分类 ●掌握氨基酸与蛋白质的物理性质和化学性质 ●了解蛋白质一级结构的测定方法（目前关于蛋白质一级结构测定的新方法和新思路很多，而教科书和教学中 涉及的可能不够广泛，建议只让学生了解即可） ●理解氨基酸的通式与结构 ●理解蛋白质二级和三级结构的类型及特点，四级结构的概念及亚基 ●掌握肽键的特点 ●掌握蛋白质的变性作用 ●掌握蛋白质结构与功能的关系 2.核酸化学 考试内容 ●核酸的基本化学组成及分类 ●核苷酸的结构 ●DNA和RNA一级结构的概念和二级结构要特点；DNA的三级结构 ●RNA的分类及各类RNA的生物学功能 ●核酸的主要理化特性 ●核酸的研究方法 考试要求 ●全面了解核酸的组成、结构、结构单位以及掌握核酸的性质 ●全面了解核苷酸组成、结构、结构单位以及掌握核苷酸的性质 ●掌握DNA的二级结构模型和核酸杂交技术 ●了解microRNA的序列和结构特点（近年来针对非编码RNA的研究越来越深入，建议增加相关考核） 3. 糖类结构与功能 考试内容 ●糖的主要分类及其各自的代表 ●糖聚合物及其代表和它们的生物学功能 ●糖链和糖蛋白的生物活性 考试要求 ●掌握糖的概念及其分类 ●掌握糖类的元素组成、化学本质及生物学功用 ●理解旋光异构 ●掌握单糖、二糖、寡糖和多糖的结构和性质 ●掌握糖的鉴定原理 4. 脂质与生物膜 考试内容
实验一分子生物学仪器的使用及原理 一、实验目的 1.学习认识分子生物学实验室的仪器设备 2.了解分子生物学仪器设备使用的注意事项 二、主要仪器设备 1.普通离心机 2.无菌操作台 3.高速冷冻离心机 4.PCR仪 5.恒温振荡摇床 6.真空干燥箱 7.恒温水浴锅 8.紫外分光光度计 9.微波炉 10.微量移液器 11.Eppendorf管 12.高压灭菌锅 13.电泳仪 14.凝胶成像系统 15.紫外仪 三、实验报告要求 写出分子生物学主要仪器设备的使用注意事项
实验二：质粒（pEGFP-N1）的提取与酶切 一. 实验目的 1.了解碱裂解法提取质粒的基本原理和主要应用，掌握碱裂解法提取质粒的实验方法和各种试剂在提取过程中的作用。 二. 实验原理 碱裂解法是利用细菌染色体DNA与质粒DNA结构的大小差异来分离质粒DNA的。碱性（pH 12.0～12.5）条件可以破坏碱基配对，宿主和质粒DNA的碱基之间的氢键被破坏。当条件恢复正常时（加入酸性试剂中和），共价闭合环状的质粒DNA会迅速准确地恢复配对，重新形成完全天然的超螺旋分子；而较大的细菌染色体DNA分子则难以复性，会交联形成不溶于水的线团结构，缠绕附着在细胞壁碎片上，离心时易被沉淀下来，而质粒DNA则留在上清液中，用异丙醇沉淀、70 %乙醇洗涤即可获得质粒DNA。 三. 仪器设备 微量取液器（2 μL；20 μL；200 μL；1 000 μL），tip头，手掌型离心机，1.5 mL 离心管, 恒温水浴，制冰机，超净工作台，恒温培养箱。振荡器，离心机，金属浴，电泳仪，凝胶成像仪。 四．实验试剂 1.溶液Ⅰ：50 mmol/L葡萄糖；20 mmol/L Tris·HCl（pH = 8.0）；10 mmol/L EDTA（pH=8.0），高压蒸汽灭菌（121 ℃，0.105 Mpa）20 min。4 ℃贮存。 2.溶液Ⅱ（现用现配）：0.2 mol/L NaOH；1 g / L SDS。 3.溶液Ⅲ（pH 4.8）：每100 mL溶液中含5 mol/L乙酸钾60 mL；冰乙酸11.5 mL；H2O 28.5 mL。 4.RNase（10 mg / mL），LB液体培养基，氨苄青霉素，异丙醇，70 %（V / V）乙醇，无菌水。 五.实验步骤： 1.提取步骤： 1) 挑取LB固体培养基上生长的单菌落，接种于3-5mlLB（含氨苄）液体培养基中，37℃振荡培养12-14小时。 2) 取上述培养物移入1.5mlep管中，室温以8000r/min离心5分钟，弃上清，再加1.5ml上述培养养物于ep管中，室温以8000r/min再离心5分钟。 3) 弃上清液，将离心管倒置，使液体尽可能流尽。 4) 加溶液Ⅰ100μl，用力弹ep管，使菌体分散均匀；加溶液Ⅱ200μl，颠倒数次混匀（不要剧烈振荡），并将离心ep管放置于冰上5分钟，使细胞膜裂解（溶液Ⅱ为裂解液，故离心管中菌液逐渐变清）。 5) 加入150μl预冷的溶液Ⅲ，将管温和颠倒数次混匀，见白色絮状沉淀，可在冰上放置10分钟。（溶液Ⅲ为中和溶液，此时质粒DNA复性，染色体和蛋白质不可逆变性，形成不可溶复合物，同时K+使SDS-蛋白复合物沉淀。）然后，室温以12000r/min离心5分钟。 6) 抽取上清液于一新微量离心管（ep管）中，加无水乙醇900μl，冰浴20分钟，室温以13000r/min离心10分钟，放入净化工作台用风机吹干，加TE，定容至30μl，再加RNA酶5μl，37℃水浴30分钟。（-20℃保存备用） 酶切步骤： 1) 制胶：1%琼脂糖电泳：琼脂糖0.5克，TBE50毫升放电炉上使之融化，温度降到50摄氏度时加入EB冷凝后倒胶，30分钟后凝固，拔去梳子。
生物化学基本概念
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生物化学基本概念（２80) 一、绪论 １生物化学 2 分子生物学(狭义、广义) 3 结构生物学 4 基因组学 5蛋白质组学 6 糖生物学 7生物工程 8 基因工程 ９酶工程 10 蛋白质工程 11 细胞工程 １2 发酵工程 １3生化工程 １4 模式生物 二、核酸化学 1 核酸 2 拟核区 3质粒 4 沉降系数 5N-Ｃ糖苷键 ６第二信使 7 转化现象 8 类病毒 ９沅病毒（蛋白质侵染因子) 10 核酸的一级结构 11 DNA的一级结构 12 RＮA的一级结构 １3 寡核苷酸 １4 多核苷酸 １5 DNA的二级结构 1６ＤＮＡ的三级结构 17 正超螺旋
1８负超螺旋 19 RＮＡ的二级结构 2０RNＡ的三级结构 2１发夹结构 ２2 多顺反子 23 单顺反子 ２４减色效应 25 增色效应 2６核酸的变性 27 核酸的复性 28ＤNA的熔点（Tｍ、熔解温度) 29 退火 30 分子杂交 ３1 Soｕthｅrn 印迹法 32Ｎouthern 印迹法 三、蛋白质化学 1激素 2抗体 3 补体 4 干扰素 5 糖蛋白 ６蛋白质氨基酸 7非蛋白质氨基酸 8等电点（PＩ） 9肽 １０生物活性肽 11 双缩脲反应 1２构型 13 构象 1４蛋白质的一级结构 15蛋白质的二级结构 １6蛋白质的三级结构 17蛋白质的四级结构 18二面角
19β-折叠 ２0 β-转角 21 无规则卷曲 22超二级结构 ２3 结构域 24分子病 25 可变残基 26 不变残基 ２７电泳 ２8 透析 29 相对迁移率 3０盐析 31 盐溶 32 蛋白质的变性作用 33 变性蛋白 ３4 蛋白质的复性 35 简单蛋白 36 结合蛋白 3７糖蛋白 38脂蛋白 39色蛋白 ４0 核蛋白 41 磷蛋白 42 金属蛋白 4３可逆沉淀 44 不可逆沉淀 四、酶学 1 酶 2 单纯酶 3 结合酶 4 酶蛋白 5 辅因子 6全酶 7 辅酶
“生物化学与分子生物学” 题库 第二军医大学基础医学部 生物化学与分子生物学教研室编制 2004年7月
第一篇生物大分子的结构与功能 第一章蛋白质的结构与功能 一、单项选择题（A型题） 1.蛋白质的一级结构是指下面的哪一种情况？( ) A、氨基酸种类的数量 B、分子中的各种化学键 C、氨基酸残基的排列顺序 D、多肽链的形态和大小 E、氨基酸的连接方式 2.关于蛋白质分子三级结构的描述，其中错误的是:( ) A、天然蛋白质分子均有这种结构 B、具有三级结构的多肽链都有生物学活性 C、三级结构的稳定性主要是次级键维系 D、亲水基团多聚集在三级结构的表面 E、骨架链原子的空间排布 3、学习“蛋白质结构与功能”的理论后，我们认识到错误概念是（）。 A、蛋白质变性是肽键断裂所致 B、蛋白质的一级结构决定其空间结构 C、肽键的键长较单键短，但较双键长 D、四级结构蛋白质必定由二条或二条以上多肽链组成 E、蛋白质活性不仅取决于其一级结构，还依赖于高级结构的正确 4、通过“蛋白质、核酸的结构与功能”的学习，认为错误的概念是（）。 A、氢键是维系多肽链β-折叠的主要化学键 B、DNA分子的二级结构是双螺旋，维系其稳定的重要因素是碱基堆积力 C、蛋白质变性后可以恢复，但DNA变性后则不能恢复 D、谷氨酸、半胱氨酸和甘氨酸三者组成GSH E、蛋白质亚基具有三级结构，而tRNA三级结构呈倒L形 5、“蛋白质分子结构与功能”一章学习，告之我们以下概念不对的是（）。 A、氢键不仅是维系β-折叠的作用力，也是稳定β-转角结构的化学键 B、活性蛋白质均具有四级结构 C、α-螺旋的每一圈包含3.6个氨基酸残基 D、亚基独立存在时，不呈现生物学活性的 E、肽键是不可以自由旋转的 6、关于蛋白质分子中α-螺旋的下列描述，哪一项是错误的？（） A、蛋白质的一种二级结构 B、呈右手螺旋
大肠杆菌转录起始过程需要RNA 聚合酶全酶，其中__σ_____因子辨认起始点，而β 亚基和___β′____亚基组成了催化中心。转录的终止反映在____终止子___。 所有信号肽的位置都在新生肽的N 端。（）错 【解析】信号肽是指存在于蛋白多肽链上的在起始密码子之后能启动蛋白质运转的一段多肽序列，该序列常位于蛋白质的氨基末端，但也可以位于中部或其他地方。 遗传密码的特性和在基因传递中的意义，以及遗传密码是如何被破译的。 （1）遗传密码的特性及其在基因传递中的意义 ①遗传密码是三联子密码 1 个密码子由3 个连续的核苷酸组成，特异性地编码1 个氨基酸。 ②密码子的连续性 遗传密码以5′→3′方向、非重复、无标点的方式编码在核酸分子上。阅读mRNA 时以密码子为单位，连续阅读，密码间无间断也没有重叠，AUG 为甲硫氨酸兼起始密码子。UAA、UAG 和UGA 为终止密码子。因此要正确阅读密码，必须从起始密码子开始，按一定的读码框架连续读下去，直至遇到终止密码子为止。若插入或删除一个核苷酸，就会使以后的读码框发生错位，称为移码突变。 ③密码子的简并性 一种氨基酸有两种或两种以上的密码子，对应于同一氨基酸的密码子称为同义密码子。除甲硫氨酸（AUG）和色氨酸（UGG）只有一个密码子外，其他氨基酸都有一个以上的密码子。密码的简并性可以减少有害突变，在物种的稳定性上起一定作用，还可以保证翻译的速率。 ④密码子与反密码子的相互作用在密码子与反密码子的配对中，前两对碱基严格遵守碱基配对原则，但第三对碱基有一定的自由度，可以“摆动”，因而使某些tRNA 可以识别 1 个以上的密码子。tRNA 识别密码子的个数由反密码子的第一个碱基的性质决定。 a．反密码子第一位碱基为A 或C 时，只能识别1 种密码，分别为U、G； b．反密码子第一位碱基为G 或U 者可以识别2 种密码，分别为U 和C，A 和G； c．反密码子第一位碱基为I（黄嘌呤）时可识别3 种密码（U、C、A）。 如果有几个密码子同时编码一个氨基酸，凡是第一、二位碱基不同的密码子都对应于各自独立的tRNA。 ⑤密码的通用性与特殊性 a．通用性：所有生物几乎都使用同一套密码子。密码子的通用性说明生物有共同的起源，有助于生物的进化的研究。 b．特殊性：线粒体及少数生物基因组的密码子有变异，人线粒体中UGA 编码Trp，而不是终止密码子；AUA编码Met，而不是Ile；AGA 和AGC 是终止密码子，而不编码Arg。 ⑥密码的防错系统 密码的编排方式使得密码子中一个碱基被置换，其结果常常或是编码相同氨基酸或是以理化性质最接近的氨基酸取代。从而使基因突变造成的危害降至最低程度。即密码的编排具有防错功能，密码表是一个故障-安全系统，是在进化过程中获得的最佳选择 质粒的复制类型有两种：受到宿主细胞蛋白质合成的严格控制的称为_严紧型质粒_______，不受宿主细胞蛋白质合成的严格控制称为_松弛型质粒_______。 感受态细胞（competent cell） 感受态细胞是指受体细胞经过一些特殊方法（如CaCl2 等化学试剂）的处理后，细胞膜的通透性发生变化，成为能容许外源DNA 的载体分子通过的细胞。将构建好的载体转入感受态细胞进行表达，可以检验重组载体是否构建成功。感受态细胞作为重组载体的宿主可以进行后续实验，如蛋白质表达纯化等工作。 凝胶阻滞试验（electrophoretic mobility shift assay，EMSA） 凝胶阻滞试验是一种体外分析DNA 与蛋白质相互作用的技术，基本原理是蛋白质与DNA 结合后增加相对分子质量，没有结合蛋白的DNA 片段跑得快，结合蛋白的DNA 跑得慢。凝胶阻滞试验可以用于检测DNA结合蛋白、RNA 结合蛋白，并可通过加入特异性的抗体来检测特定的蛋白质。
一、生物化学、化学生物学、分子生物学，三者联系与区别 欧洲化学生物学的一个专门刊名为ChemBioChem刊物，这部刊物在我所阅读的文献中被反复提及，我查到该文献的两位主编分别是Jean-Marie Lehn教授和Alan R. Fersht教授，他们在诠释刊物的宗旨[1]时指出：ChemBioChem意指化学生物学和生物化学，其使命是涵盖从复杂的碳水化合物、多肽蛋白质到DNA/RNA，从组合化学、组合生物学到信号传导，从催化抗体到蛋白质折叠，从生物信息学和结构生物学到药物设计，这一范围宽广而欣欣向荣的学科领域。既然化学生物学涵盖面这么广泛，它到底和其它学科之间怎么区分呢？ 想到拿这个题目出来介绍是因为这是我在第一节课课堂讨论中的内容，我们小组所参考的文献主要是关于对化学生物学这门学科的认识，化学生物学的分析手段以及一些新的研究进展，比如药物开发和寻找药物靶点。当时课堂上对于题目中三者展开过热烈讨论，作为新兴学科的化学生物学，研究的是小分子作为工具解决生物学问题的学科，它如何从生物化学和分子生物学中分别出来，这也是我自己最开始产生过矛盾的问题，这里我结合所查阅的文献谈一下自己的理解。 1.1 生物化学(Biological Chemistry) 生物化学是研究生命物质的化学组成、结构、化学现象及生命过程中各种化学变化的生物学分支学科[1]。根据一些生物化学的书我归纳了一下，其研究的基本内容包括对生物体的化学组成的鉴定，对
新陈代谢与代谢调节控制，生物大分子的结构与功能测定，以及研究酶催化，生物膜和生物力学，激素与维生素，生命的起源与进化。 生物化学对其他各门生物学科的深刻影响首先反映在与其关系比较密切的细胞学、微生物学、遗传学、生理学等领域。通过对生物高分子结构与功能进行的深入研究，揭示了生物体物质代谢、能量转换、遗传信息传递、光合作用、神经传导、肌肉收缩、激素作用、免疫和细胞间通讯等许多奥秘，使人们对生命本质的认识跃进到一个崭新的阶段。(摘自https://www.doczj.com/doc/7013307027.html,/view/253496.htm) 1.2 化学生物学（Chemical Biology） 化学生物学是使用小分子作为工具解决生物学的问题或通过干扰/调节正常过程了解蛋白质的功能[1]。曾看到过一篇关于介绍化学生物学的奠基人Schreiber的文章，他曾经指出：“化学生物学是对分子生物学的有力补充，分子生物学采用定点突变的方法来改变生物分子如蛋白质和核酸的功能；而化学生物学是采用化学的手段，如运用小分子或人工设计合成的分子作为配体来直接改变生物分子的功能[2]。” 化学生物学是近年来出现的新兴研究领域，它融合了化学、生物学、物理学、信息科学等多个相关学科的理论、技术和研究方法，是一个有活力、有应用前景的新学科。它主要研究的内容包括[3]：1化学遗传学—采用小分子活性化合物作为探针,探索和调控细胞过程 (1)基因表达的小分子调控
机体是如何维持血糖平衡的（说明血糖的来源、去路及调节过程）？ 血液中的葡萄糖称为血糖，机体血糖平衡是糖、脂肪、氨基酸代谢协调的结果，也是肝、肌、脂肪组织等器官代谢协调的结果（由于血糖的来源与去路保持动态平衡，血糖是组织、中枢神经、脑能量来源的主要保证）。 A.血糖来源（3分） 糖类消化吸收：食物中的糖类经消化吸收入血，这是血糖最主要的来源；肝糖原分解：短期饥饿后，肝中储存的糖原分解成葡萄糖进入血液；糖异生作用：在较长时间饥饿后，氨基酸、甘油等非糖物质在肝内异生合成葡萄糖；其他单糖转化成葡萄糖。 B.血糖去路（4分） 氧化供能：葡萄糖在组织细胞中通过有氧氧化和无氧酵解产生ATP，为细胞供给能量，此为血糖的主要去路。合成糖原：进食后，肝和肌肉等组织将葡萄糖合成糖原以储存。转化成非糖物质：可转化为甘油、脂肪酸以合成脂肪；可转化为氨基酸、合成蛋白质。转变成其他糖或糖衍生物（戊糖磷酸途径），如核糖、脱氧核糖、氨基多糖等。血糖浓度高于肾阈时可随尿排出一部分。 C.血糖的调节（2分） 胰岛素是体内唯一降低血糖的激素，但胰岛素分泌受机体血糖的控制（机体血糖升高胰岛素分泌减少）。胰岛素分泌增加，糖原合酶活性提高、糖原磷酸化酶活性降低，糖原分解降低、糖原合成提高，血糖降低。否则相反（胰岛素分泌减少，糖原合酶活性降低、糖原磷酸化酶活性提高，糖原分解提高、糖原合成降低，血糖提高）。胰高血糖素、肾上腺素作用是升高机体血糖。胰高血糖素、肾上腺素分泌增加，糖原合酶活性降低、糖原磷酸化酶活性提高，糖原分解提高、糖原合成降低，血糖提高。否则相反。 老师，丙酮酸被还原为乳酸后，乳酸的去路是什么 这个问题很重要。 肌组织产生的乳酸的去向包括：大量乳酸透过肌细胞膜进入血液，在肝脏进行糖异生转变为葡萄糖。大量乳酸进入血液，在心肌中经LDH1催化生成丙酮酸氧化供能；部分乳酸在肌肉内脱氢生成丙酮酸而进入到有氧氧化供能。大量乳酸透过肌细胞膜进入血液，在肾脏异生为糖或经尿排出体外。 下面问题你能回答出来不 1说明脂肪氧化供能的过程 （1）脂肪动员：脂肪组织中的甘油三酯在HSL的作用下水解释放脂酸和甘油。 （2）脂酸氧化：经脂肪酸活化、脂酰CoA进入线粒体、β-氧化、乙酰CoA进入三羧酸循环彻底氧化成H2O 和CO2并释放能量。 （3）甘油氧化：经磷酸化、脱氢、异构转变成3-磷酸甘油醛，3-磷酸甘油醛循糖氧化分解途径彻底分解生成H2O 和CO2并释放能量。 1．丙氨酸异生形成葡萄糖的过程 答：（1）丙氨酸经GPT催化生成丙酮酸。（2）丙酮酸在线粒体内经丙酮酸羧化酶催化生成草酰乙酸，后者经苹果酸脱氢酶催化生成苹果酸出线粒体，在胞液中经苹果酸脱氢酶催化生成草酰乙酸，后者在磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶作用下生成磷酸烯醇式丙酮酸。（3）磷酸烯醇式丙酮酸循糖酵解途径至1，6-双磷酸果糖。1，6-双磷酸果糖经果糖双磷酸酶催化生成6-磷酸果糖，再异构成6-磷酸葡萄糖。6-磷酸葡萄糖在葡萄糖-6-磷酸酶作用下生成葡萄糖。
华中科技大学生物学硕士研究生入学考试《生化与分子生物学》 考试大纲 第一部分考试说明 一、考试性质 全国硕士研究生入学考试是为高等学校招收硕士研究生而设置的。其中，生物学（专业部分）由我校自行出题。它的评价标准是高等学校优秀本科毕业生能达到的及格或及格以上水平，以保证被录取者具有基本的生物学知识而有利于我校在录取时择优选拔。 二、评价目标 生物学（专业部分）考试在重点考查生物化学和分子生物学的基础知识、基本理论的基础上，注重考查理论联系实际的能力，说明、提出、分析和解决这些学科中出现的现象和问题。 ?正确地理解和掌握有关的基本概念、理论、假说、规律和论断 ?运用掌握的基础理论知识和原理，可以就某一问题设计出实验方案 ?准确、恰当地使用专业术语，文字通顺、层次清楚、有论有据、合乎逻辑地表述 三、考试形式和试卷结构 o答卷方式：闭卷，笔试，所列题目全部为必答题 o答题时间：180分钟 o题型比例：名词解释约15％；填空题约25％；简答和计算约30％；分析论述约30％ 第二部分考查要点 一、分子生物学 （一）DNA 1、DNA的结构 DNA的构成，DNA的一级结构、二级结构、高级结构 2、DNA的复制 DNA的半保留复制，复制起点、方向和速度，复制的几种主要方式 3、原核生物和真核生物DNA复制特点 原核生物DNA复制特点，真核生物DNA复制特点，DNA的复制调控 4、DNA的修复 四种修复方式
5、DNA的转座 转座子的分类和结构特征，转座机制，转座作用的遗传学效应，真核生物的转座子 （二）生物信息的传递（上）——从DNA到RNA 1、RNA的转录 转录的基本过程，转录机器的主要成分 2、启动子与转录起始 启动子的基本结构，启动子的识别，酶与启动子的结合，－10区和－35区的最佳间距，增强子及其功能，真核生物启动子对转录的影响 3、原核生物与真核生物mRNA的特征比较 原核生物mRNA的特征，真核生物mRNA的特征 4、终止和抗终止 不依赖于ρ因子的终止，依赖于ρ因子的终止，抗终止 5、内含子的剪接、编辑及化学修饰 RNA中的内含子，RNA的剪接，RNA的编辑和化学修饰 （三）生物信息的传递（下）——从DNA到蛋白质 1．遗传密码 三联子密码及其破译，遗传密码的性质 2．tRNA tRNA的结构、功能及种类，氨酰－tRNA合成酶 3．核糖体 核糖体的结构，rRNA，核糖体的功能 4．蛋白质合成的生物学机制 氨基酸的活化，肽链的起始、延伸和终止，蛋白质前体的加工，蛋白质合成抑制剂，RNA分子在生物进化中的地位 5．蛋白质运转机制 翻译－运转同步机制，翻译后的运转机制，核定位蛋白的运转机制，蛋白质的降解 （四）分子生物学研究法 1、重组DNA技术发展史上的重大事件 略 2、DNA操作技术 核酸的分离、提纯和定量测定的方法，核酸的凝胶电泳，分子杂交，细菌转化，核苷酸序列分析，基因扩增，DNA与蛋白质相互作用研究 2、基因克隆的主要载体系统 质粒DNA及其分离纯化，重要的大肠杆菌质粒载体，λ噬菌体载体，柯斯质粒载体，pBluescript噬菌体载体
2011中科院上海生命科学院生化与分子考研真题 一名词解释（4, X5） sanger双脱氧法，DNA切除修复，光合作用，酵母人工染色体抗体酶, 二选择（］'x20） 选择的范围：特别均匀，每章都有题，具体范围大约是：上册：7个，下册+分子：13 个 三判断（1‘ X30） 判断的范围：特别均匀，每章都有题，具体范围大约是：上册11个，下册+分子：19 选择题和判断题这里仅罗列下考核到的知识点，而且不区分选择和判断（缺部分题目）。1糖类异头物，问下列四种物质中哪两种是异头物 2糖原是直链还是支链 3蛋白质的三种水解方式 4核酸的最大吸收光谱是 5PH7.0时，多聚赖氨酸形成什么样的二级结构？ 6免疫球蛋白的结构 7核昔酸的水解产物 8DNA的组成单位是 9蛇毒磷酸二酯酶怎样水解DNA链？（上册P482） 10下列哪种物质不是辅酶? 11辅酶的功能不包括（）A转移基团B酶的专一性C传递电子D传递质子 12戊糖磷酸途径 13氧化磷酸化的部位 14蛋白质在消化道的消化部位 15泛素降解途径（以前考过大题） 16尿素循环（也考过） 17核昔酸的合成 18原核生物RNA聚合酶全酶亚基组成（考过） 19RNA内含子的切除 20哪种病毒没有逆转录过程？选项有HIV,乙肝病毒 21多肽链在核糖体合成过程中，tRNA在APE三个位点之间怎么移动的 22端粒酶的问题 23脂肪酸P -氧化的场所 24选择题：丙酮酸脱氢酶系的辅酶中不包括 25DNA的甲基化问题 26加poly （A）尾的酶 27密码子与反密码子配对的摆动假说 28组蛋白的修饰类型 四简答（5‘ X6） 1DNA分子克隆的概念和步骤 2表观遗传学研究内容，表观遗传学在肿瘤发生发展过程中的作用
生物化学与分子生物学知识总结 第一章蛋白质的结构与功能 1.组成蛋白质的元素主要有C、H、O、N和 S。 2.蛋白质元素组成的特点各种蛋白质的含氮量很接近，平均为16％。 100克样品中蛋白质的含量 (g %)= 每克样品含氮克数× 6.25×100 3.组成人体蛋白质的20种氨基酸均属于L- -氨基酸氨基酸 4.可根据侧链结构和理化性质进行分类 非极性脂肪族氨基酸极性中性氨基酸芳香族氨基酸酸性氨基酸碱性氨基酸 5.脯氨酸属于亚氨基酸 6.等电点(isoelectric point, pI) 在某一pH的溶液中，氨基酸解离成阳离子和阴离子的趋势及程度相等，成为兼性离子，呈电中性。此时溶液的pH值称为该氨基酸的等电点。 色氨酸、酪氨酸的最大吸收峰在 280 nm 附近。 氨基酸与茚三酮反应生成蓝紫色化合物 7.蛋白质的分子结构包括: 一级结构(primary structure) 二级结构(secondary structure) 三级结构(tertiary structure) 四级结构(quaternary structure) 1）一级结构定义:蛋白质的一级结构指在蛋白质分子从N-端至C-端的氨基酸排列顺序。主要的化学键:肽键，有些蛋白质还包括二硫键。 2）二级结构定义：蛋白质分子中某一段肽链的局部空间结构，即该段肽链主链骨架原子的相对空间位置，并不涉及
氨基酸残基侧链的构象主要的化学键：氢键 ?蛋白质二级结构 包括α-螺旋 (α -helix) β-折叠 (β-pleated sheet) β-转角 (β-turn) 无规卷曲 (random coil) 3）三级结构定义：整条肽链中全部氨基酸残基的相对空间位置。即肽链中所有原子在三维空间的排布位置。主要的化学键: 8. 模体(motif)是具有特殊功能的超二级结构，是由二个或 三个具有二级结构的肽段，在空间上相互接近，形成一个特殊的空间构象。 9.分子伴侣(chaperon)通过提供一个保护环境从而加速蛋白质折叠成天然构象或形成四级结构。 蛋白质分子中各亚基的空间排布及亚基接触部位的布局和相互作用，称为蛋白质的四级结构。 ?蛋白质胶体稳定的因素: 颗粒表面电荷、水化膜 10.蛋白质的变性： 在某些物理和化学因素作用下，其特定的空间构象被破坏，也即有序的空间结构变成无序的空间结构，从而导致其理化性质改变和生物活性的丧失。 变性的本质：破坏非共价键和二硫键，不改变蛋白质的一级结构。 ?造成变性的因素: 如加热、乙醇等有机溶剂、强酸、强碱、重金属离子及生物碱试剂等。 由于空间结构改变，分子内部疏水基团暴露，亲水基团被掩盖，故水溶性降低。由于变性蛋白质分子不对称性增加，故粘度增加。由于变性蛋白质肽键暴露，易被蛋白酶水解。
《生物化学》绪论 生物化学可以认为是生命的化学，是研究微生物、植物、动物及人体等的化学组成和生命过程中的化学变化的一门科学。 生命是发展的，生命起源，生物进化，人类起源等，说明生命是在发展，因而人类对生命化学的认识也在发展之中。 20世纪中叶直到80年代，生物化学领域中主要的事件： （一）生物化学研究方法的改进 a. 分配色谱法的创立——快捷、经济的分析技术由Martin.Synge创立。 b. Tisellius用电泳方法分离血清中化学构造相似的蛋白质成分。吸附层析法分离蛋白质及其他物质。 c. Svedberg第一台超离心机，测定了高度复杂的蛋白质。 d. 荧光分析法，同位素示踪，电子显微镜的应用，生物化学的分离、纯化、鉴定的方法向微量、快速、精确、简便、自动化的方向发展。 （二）物理学家、化学家、遗传学家参加到生命化学领域中来 1． Kendrew——物理学家，测定了肌红蛋白的结构。 2． Perutz——对血红蛋白结构进行了X-射线衍射分析。 3． Pauling——化学家，氢键在蛋白质结构中以及大分子间相互作用的重要性，认为某些protein具有类似的螺旋结构，镰刀形红细胞贫血症。 （1．2．3．都是诺贝尔获奖者） 4．Sanger―― 生物化学家 1955年确定了牛胰岛素的结构，获1958年Nobel prize化学奖。1980年设计出一种测定DNA内核苷酸排列顺序的方法，获1980年诺贝尔化学奖。 5．Berg―― 研究DNA重组技术，育成含有哺乳动物激素基因的菌株。 6．Mc clintock―― 遗传学家发现可移动的遗传成分，获1958年诺贝尔生理奖。 7．Krebs―― 生物化学家 1937年发现三羧酸循环，对细胞代谢及分生物的研究作出重要贡献，获1953年诺贝尔生理学或医学奖。 8．Lipmann―― 发现了辅酶A。 9． Ochoa——发现了细菌内的多核苷酸磷酸化酶 10．Korberg——生物化学家，发现DNA分子在细菌内及试管内的复制方式。（9．10．获1959年的诺贝尔生理医学奖） 11．Avery―― 加拿大细菌学家与美国生物学家Macleod,Carty1944年美国纽约洛克菲勒研究所著名实验。肺炎球菌会产生荚膜，其成分为多糖，若将具荚膜的肺炎球菌（光滑型）制成无细胞的物质，与活的无荚膜的肺炎球菌（粗糙型）细胞混合 －>粗糙型细胞也具有与之混合的光滑型的荚膜－>表明，引起这种遗传的物质是DNA 12．Wilkins―― 完成DNA的X-射线衍射研究，对Watson和Crick确定DNA分子的双螺旋结构是至关重要的。三人共获1962年诺贝尔生理医学奖。 13．Nirenberg―― 生物化学家在破译遗传密码方面作出重要贡献。
生物化学与分子生物学 生物化学与分子生物学既是生命科学的基础，又是生命科学的前沿。生物化学是研究生物体内化学分子与化学反应的基础生命科学，从分子水平探讨生命现象的本质。分子生物学研究核酸、蛋白质等生物大分子的结构、功能及基因结构、表达与调控的内容，其发展揭示了生命本质的高度有序性和一致性，是人类在认识论上的重大飞跃。近年来迅猛发展的生物化学与分子生物学学科促进了相关和交叉学科，尤其是医学的发展。因此该门课程是我们学习发展中必不可少的学科之一。故在学习之初就给予了高度重视。 最初学习了蛋白质的结构和功能、酶，以及核酸的结构和功能因高中内容有所涉及以及内容较少所以困难度不大。之后学习了糖代谢、脂质代谢、生物氧化、氨基酸代谢、核苷酸代谢、非营养物质代谢的内容，就对生物化学与分子生物学这门学科有了更多的了解以及认识。 其中我感触最深的就是糖的代谢，糖是人类食物的主要成分，约占食物总量的百分之五十以上。糖是机体的一种重要能量来源，人体所需能量的百分之五十至百分之七十来自于糖。其中葡萄糖占比很大。细胞内葡萄糖代谢主要包括糖的无氧氧化、糖的有氧氧化和磷酸戊糖途径，取决于不同类型细胞的代谢特点和供氧状况。 接下来我想着重谈论下我对糖的有氧氧化的理解及感想。由于在供氧充足的情况下机体绝大多数组织中的葡萄糖进行有氧氧化生成二氧化碳和水以及释放大量能量供机体利用。所以有氧氧化在糖代谢
中占有不可或缺的作用。第一阶段葡萄糖在胞液中进行糖酵产生丙酮酸；第二阶段丙酮酸进入线粒体氧化脱羧生成乙酰辅酶A；第三阶段在线粒体中乙酰辅酶A进入柠檬酸循环以及氧化磷酸化生成ATP。其中有很多内容都需要我们牢固掌握，例如每一步反应发生的部位、产生能量的多少、关键酶的名称以及它的激活剂和抑制剂、每一步反应的产物以及那些反应是底物水平磷酸化。糖酵解过程以及柠檬酸循环过程十分重要，需深刻理解记忆。在此我将氧化反应中的关键酶详细提及，关键酶是代谢途径中决定反应方向和反应速度的酶。它催化的反应速度最慢，所以又称限速酶。在糖酵解中关键酶有己糖激酶、磷酸果糖激酶-1和丙酮酸激酶；第二阶段关键酶有丙酮酸脱氢酶复合体；第三阶段柠檬酸循环中关键酶有柠檬酸合酶、异柠檬酸脱氢酶、α-酮戊二酸脱氢酶复合体。它们调节的反应均为不可逆反应，其活性决定代谢的总速度，它们的活性除受底物控制外还受多种代谢物或效应剂的调节。ATP/ADP（AMP）全程调节，该比值升高时，所有关键酶均被抑制，其中AMP影响大。 一分子葡萄糖有氧氧化可产生30或32分子ATP是无氧氧化的15或16倍，因此糖有氧氧化是糖分解生成ATP的主要方式。对机体的生长、发育和繁殖都有着重大意义。 学习生物化学与分子生物学对我们将来在临床学习以及工作中对疾病的发生和发展有了透彻的了解，对疾病的诊断和治疗提供了帮助。
生物化学与分子生物学名词解释
生化名解 1、肽单元（peptide unit）:参与肽键的6个原子Ca1、C、O、N、H、Ca2位于同一平面,Ca1和Ca2在平面上所处的位置为反式构型，此同一平面上的6个原子构成了肽单元，它是蛋白质分子构象的结构单元。Ca是两个肽平面的连接点，两个肽平面可经Ca的单键进行旋转，N—Ca、Ca—C是单键，可自由旋转。 2、结构域（domain）:分子量大的蛋白质三级结构常可分割成1个和数个球状或纤维状的区域，折叠得较为紧密，具有独立的生物学功能，大多数结构域含有序列上连续的100—200个氨基酸残基，若用限制性蛋白酶水解，含多个结构域的蛋白质常分成数个结构域，但各结构域的构象基本不变。 3、模体（motif)：在许多蛋白质分子中，二个或三个具有二级结构的肽段，在空间上相互接近，形成一个特殊的空间构象。一个模序总有其特征性的氨基酸序列，并发挥特殊功能，如锌指结构。 4、蛋白质变性(denaturation)：在某些物理和化学因素作用下，其特定的空间构象被破坏，也即有序的空间结构变成无序的空间结构，从而导致其理化性质的改变和生物活性的丧失。主要发生二硫键与非共价键的破坏，不涉及一级结构中氨基酸序列的改变，变性的蛋白质易沉淀，沉淀的蛋白质不一定变性。 5、蛋白质的等电点( isoelectric point, pI)：当蛋白质溶液处于某一pH时，
而改变酶的活性，此过程称为共价修饰。主要包括：磷酸化—去磷酸化；乙酰化—脱乙酰化；甲基化—去甲基化；腺苷化—脱腺苷化；—SH与—S—S—互变等；磷酸化与脱磷酸是最常见的方式。 10、酶原和酶原激活(zymogen and zymogen activation)：有些酶在细胞内合成或初分泌时只是酶的无活性前体，必须在一定的条件下水解开一个或几个特定的肽键，使构象发生改变，表现出酶的活性，此前体物质称为酶 原。由无活性的酶原向有活性酶转化的过程称为酶原激活。酶原的激活，实际是酶的活性中心形成或暴露的过程。 11、同工酶（isoenzyme isozyme）：催化同一化学反应而酶蛋白的分子结构，理化性质，以及免疫学性质都不同的一组酶。它们彼此在氨基酸序列，底物的亲和性等方面都存在着差异。由同一基因或不同基因编码，同工酶存在于同一种属或同一个体的不同组织或同一细胞的不同亚细胞结构中，它使不同的组织、器官和不同的亚细胞结构具有不同的代谢特征。 12、糖酵解(glycolysis)：在机体缺氧条件下，葡萄糖经一系列酶促反应生成丙酮酸进而还原生成乳酸的过程称为糖酵解（糖的无氧氧化）。糖酵解的反应部位在胞浆。主要包括由葡萄糖分解成丙酮酸的糖酵解途径和由丙酮酸转变成乳酸两个阶段，1分子葡萄糖经历4次底物水平磷酸化，净生成2分子ATP。关键酶主要有己糖激酶，6-磷酸果糖激酶-1和丙酮酸激酶。它的意义是机体在缺氧情况下获取能量的有效方式；某些细胞在氧供应正常情况下的重要供能途径。
2001中国科学院研究生院硕士研究生入学考试试题科目名称：生物化学与分子生物学 一.是非题(20题，每题1分，共20分) 1.所有a氨基酸中的a碳原子都是一个不对称的碳原子( ) 2.蛋白质的四级结构可以定义为一些特定的三级结构的肽链通过共价键形成的大分子体系的组合( ) 3.根据凝胶过滤层析的原理,分子量愈小的物质,因为愈容易通过,所以最先被洗脱出来( ) 4.两个或几个二级结构单元被连接多肽连接在一起,组成有特殊的几何排列的局部空间结构,这样的结构称为超二级结构,有称为模体(MOTIF)( ) 5.抑制剂不与底物竞争酶结合部位,则不会表现为竞争性抑制( ) 6.酶反应最适PH不仅取决于酶分子的解离情况,同时也取决于底物分子的解离情况( ) 7.寡聚酶一般是指由多个相同亚基组成的酶分子( ) 8.糖异生途径是由相同的一批酶催化的糖酵解途径的逆转( ) 9.线粒体内膜ADP-ATP载体蛋白在促进ADP由细胞质进入完整线粒体基质的同时ATP由完整线粒体基质进入细胞质的过程是需要能量的( ) 10.脂质体的直径可以小到150 ?( ) 11.质膜上糖蛋白的糖基都位于膜的外侧( ) 12.雄性激素在机体内可变为雌性激素( ) 13.CoA,NAD和FAD等辅酶中都含有腺苷酸部分( ) 14.黄嘌呤氧化酶的底物是黄嘌呤,也可以是次黄嘌呤( ) 15.RNA连接酶和DNA连接酶的催化连接反应都需要模板( )
16.DNA聚合酶和RNA聚合酶的催化反应都需要引物( ) 17.真核生物m RNA两端都含有3'-OH.( ) 18.在细菌中RNA聚合酶和核糖体蛋白质的合成由共同的调节系统( ) 19.所有氨酰-t RNA合成酶的作用都是把氨基酸连接在Trna末端核糖的3'-羟基上( ) 20.核小体中的核心组蛋白在细胞活动过程中都不会被化学修饰( ) 二.选择题(25题，每题1分，共25分) 1.绒毛膜促性激素是一种_____________ A.甾醇类激素 B. 脂肪酸衍生物激素 C. 含氮激素 2,溴化氰(CNBr)作用于____________ A.甲硫氨酰-X B. 精氨酰-X C. X-色氨酸 D. X-组氨酸 3.肌球蛋白分子具有下述哪一种酶的活力____________ A.ATP酶 B. 蛋白质激酶 C. 蛋白水解酶 4.神经生长因子(NGF)的活性分子由下列肽链组成________ A.αα B. ββ C. α2βγ2 5.胰岛素原是由一条"连接肽"通过碱性氨基酸残基连接其他二条链的C端和N端,这条"连接肽"称为_________ A.A链 B. B链 C. C肽 6.米氏方程双到数作图的总轴截距所对应的动力学常数为___________ A.Km B. Vmax C. Km/Vmax D. Vmax/Km 7.磷酸化酶激酶催化磷酸化酶的磷酸化,导致该酶__________________ A.由低活性形式变为高活性形式 B.由高活性形式变为低活性形式 C. 活性不受影响 8.底物引进一个基团以后,引起酶与底物结合能增加,此时酶催化反应速度增大,是由于______ A.结合能增大 B. 增加的结合能被用来降低反应活化能
第五章常用分子生物学技术的原理及其应用习题（引自网络精品课程） 一、选择题 （一）A型题 1 ．分子杂交实验不能用于 A ．单链DNA 与RNA 分子之间的杂交 B ．双链DNA 与RNA 分子之间的杂交 C ．单链RNA 分子之间的杂交 D ．单链DNA 分子之间的杂交 E ．抗原与抗体分子之间的杂交 2 ．关于探针叙述错误的是 A ．带有特殊标记 B ．具有特定序列 C ．必须是双链的核酸片段 D ．可以是基因组DNA 片段 E ．可以是抗体 3 ．下列哪种物质不能用作探针 A ．DNA 片段 B ．cDNA C ．蛋白质 D ．氨基酸 E ．RNA 片段 4 ．印迹技术可以分为 A ．DNA 印迹 B ．RNA 印迹 C ．蛋白质印迹 D ．斑点印迹 E ．以上都对 5 ．PCR 实验延伸温度一般是 A ．90 ℃ B ．72 ℃ C ．80 ℃ D ．95 ℃ E ．60 ℃ 6 ．Western blot 中的探针是 A ．RNA B ．单链DNA C ．cDNA D ．抗体 E ．双链DNA 7 ．Northern blotting 与Southern blotting 不同的是 A ．基本原理不同 B ．无需进行限制性内切酶消化 C ．探针必须是RNA D ．探针必须是DNA E ．靠毛细作用进行转移 8 ．可以不经电泳分离而直接点样在NC 膜上进行杂交分析的是 A ．斑点印迹 B ．原位杂交 C ．RNA 印迹 D ．DNA 芯片技术 E ．DNA 印迹 9 ．下列哪种物质在PCR 反应中不能作为模板 A ．RNA B ．单链DNA C ．cDNA D ．蛋白质 E ．双链DNA 10 ．RT-PCR 中不涉及的是 A ．探针 B ．cDNA C ．逆转录酶 D ．RNA E ．dNTP 11 ．关于PCR 的基本成分叙述错误的是 A ．特异性引物 B ．耐热性DNA 聚合酶 C ．dNTP D ．含有Zn 2+ 的缓冲液 E ．模板 12 ．DNA 链末端合成终止法不需要 A ．ddNTP B ．dNTP C ．引物标记 D ．DNA 聚合酶 E ．模板 13 ．cDNA 文库构建不需要 A ．提取mRNA B ．限制性内切酶裂解mRNA C ．逆转录合成cDNA D ．将cDNA 克隆入质粒或噬菌体 E ．重组载体转化宿主细胞 14 ．标签蛋白沉淀是 A ．研究蛋白质相互作用的技术 B ．基于亲和色谱原理 C ．常用标签是GST D ．也可以是6 组氨酸标签 E ．以上都对 15 ．研究蛋白质与DNA 在染色质环境下相互作用的技术是 A ．标签蛋白沉淀 B ．酵母双杂交 C ．凝胶迁移变动实验 D ．染色质免疫沉淀法 E ．噬菌体显示筛选系统 16 ．动物整体克隆技术又称为