微生物学复习资料
绪论
1、名词解释：微生物，微生物学，种，菌株、品系、克隆，菌落，菌苔。
微生物: 微生物是形体微小、单细胞或个体结构简单的多细胞、甚或无细胞结构，用肉眼看不见或看不清的低等生物的总称。
微生物学: 微生物学是一门在细胞、分子或群体水平上研究微生物的形态构造、生理代谢、遗传变异、生态分布和分类进化等生命活动基本规律，并将其应用于工业发酵、医药卫生、生物工程和环境保护等实践领域的科学，其根本任务是发掘、利用、改善和保护有益微生物，控制、消灭或改造有害微生物，为人类社会的进步服务。
种：种是最基本的分类单位,它是一大群表型特征高度相似，亲缘关系极其相近，与同属内其它种有着明显差异的菌株的总称。
菌株（品系）：表示任何由一个独立分离的单细胞繁殖而成的纯种群体极其一切后代；实际上是一个微生物达到遗传性纯的标志。
克隆：若菌落是由一个单细胞发展而来的，则它就是一个纯种细胞群或克隆。
菌落：在适宜的培养条件下，微生物在固体培养基表面（有时为内部）生长繁殖，形成以母细胞为中心的一堆肉眼可见的、有一定形态构造的子细胞集团，这就是菌落。
菌苔：如果将某一纯种的大量细胞密集地接种到固体培养基表面，结果长成的各“菌落”互相连成一片，这就是菌苔。
2、简述微生物学发展史上5个时期的特点和代表人物。
①史前期——朦胧阶段（约8000年前-1676）
特点：人们虽然没有看到微生物，但已经不自觉的利用有益微生物、防止有害微生物。
中国古代：
②初创期--形态学时期（1676-1861）
特点：这一时期微生物学的研究工作主要是对一些微生物进行形态描述。
代表人物——列文虎克：微生物学的先驱者
③奠基期--生理学时期（1861-1897）
特点：这一时期的主要工作是查找各种病原微生物，把微生物学的研究从形态描述推进到生理学研究的新水平，建立了系列微生物学的分支学科。
代表人物：巴斯德和科赫。
④发展期——生化水平研究阶段
特点：微生物学的研究进入分子水平，微生物学家的研究工作从上一时期的查找病原微生物转移到寻找各种有益微生物的代谢产物。
代表人物——E.Büchner生物化学奠基人
⑤成熟期——分子生物学水平研究阶段
特点：微生物学从一门应用学科发展为前沿基础学科，其研究工作进入分子水平，而微生物因其不同于高等动植物的生物学特性而成为分子生物学研究的主要对象。在应用研究方面，向着更自觉、更有效和可认为控制的方向发展，与遗传工程、细胞工程和酶工程紧密结合，成为新兴生物工程的主角。
代表人物——J.Watson和F.Crick：分子生物学奠基人
3、微生物共有哪五大共性？其中最基本的是哪一个？为什么？
五大共性：①体积小，面积大；②吸收多，转化快；③生长旺，繁殖快；④适应强，易变异；⑤分布广，种类多。
其中最基本的是体积小，面积大；原因：由于微生物是一个如此突出的小体积大面积系统，从而赋予它们具有不同于一切大生物的五大共性，因为一个小体积大面积系统，必然有一个
巨大的营养物质吸收面、代谢废物的排泄面和环境信息的交换面，并由此而产生其余4个共性。
4、微生物分类学有哪3项具体任务？试加以简述。
3项具体任务:分类、鉴定和命名
分类的任务是解决从个别到一般或从具体到抽象的问题，亦即通过收集大量描述有关个体的文献资料，经过科学的归纳和理性的思考，整理成一个科学的分类系统
鉴定的任务与分类恰恰相反，它是一个从一般到特殊或从抽象到具体的过程，亦即通过详细观察和描述一个未知纯种微生物的各种性状特征，然后查找现成的分类系统，以达到对其知类、辨名的目的。
命名的任务是为一个新发现的微生物确定一个新学名，亦即当你详细观察和描述某一具体菌种后，经过认真查找现有的权威性分类鉴定手册，发现这是一个以往从未记载过的新种，这时，就得按微生物的国际命名法规给予一个新学名。
5、种以上的分类单元分几级？
界,门,纲,目,科,属,种七级
6、何谓三域学说？
20世纪70年代末由美国伊利诺斯大学的C.R.Woese等人对大量微生物和其他生物进行16S 和18S rRNA的寡聚核苷酸测序，并比较其同源性水平后，提出了一个与以往各种界级分类不同的新系统，称为三域学说。三域指细菌域、古生菌域和真核生物域。
7、何谓（G+C）mol% 值？它在微生物分类鉴定中有何应用？
表示DNA分子中鸟嘌呤（G）和胞嘧啶（C）所占的摩尔百分比值。
应用: ①判别种与种之间亲缘关系相近程度；②是建立新分类单元时的重要指标。
第一章原核微生物的形态、构造和功能
1、名词解释：原核生物，细菌，缼壁细菌，原生质体，芽孢，伴孢晶体，放线菌.
原核生物：即广义的细菌，指一大类细胞核无核膜包裹，只存在称作核区的裸露DNA的原始单细胞生物，包括真细菌和古生菌两大类群。
细菌：是一类细胞细短、结构简单、胞壁坚韧、多以二分裂方式繁殖和水生性较强的原核生物。
缼壁细菌：指细胞壁缺乏或缺损的细菌。包括原生质体、球状体、L型细菌和支原体。原生质体：人工条件下用溶菌酶除去细胞壁或用青霉素抑制细胞壁合成后，所留下的仅由一层细胞膜包裹的圆球状细胞。一般由G+形成。
芽孢：某些细菌在生长发育后期，可在细胞内形成一个圆形或椭圆形的抗逆性休眠体，称为芽孢（又称内生孢子）。
伴孢晶体：少数芽孢杆菌在形成芽孢的同时，会在芽孢旁形成一颗菱形、方形或不规则形的碱溶性蛋白质晶体，称为伴孢晶体（即e内毒素）。
放线菌：是一类呈丝状生长、菌落呈放射状、以孢子繁殖的陆生性较强的革兰氏阳性菌。
2、细菌的基本有哪些？
细胞壁，细胞膜，间体，核区，核糖体，细胞质及其内含物
3、图示细菌细胞构造。见书11页
4、试比较G+和G-细菌细胞壁的异同。
成分革兰氏阳性细菌革兰氏阴性细菌
肽聚糖
磷壁酸
类脂质
蛋白质含量很高（30-95）
含量较高（<50）
一般无（<2）
0 含量很低（5~20）
含量较高（约20）
含量较高
5、简述革兰氏染色法的机制并说明此法的重要性。
革兰氏染色机制
结晶紫液初染和碘液媒染：在细菌的细胞膜内可形成不溶于水的结晶紫与碘的复合物。
乙醇脱色：G＋细胞壁较厚、肽聚糖网层次多和交联致密且不含类脂，把结晶紫与碘的复合物牢牢留在壁内，使其保持紫色；G-细胞壁薄、外膜层类脂含量高、肽聚糖层薄和文联度差，结晶紫与碘复合物的溶出，细胞退成无色。
复染: G-细菌呈现红色，而G+细菌则仍保留最初的紫色。
重要性: 革兰氏染色有着十分重要的理论与实践意义。通过这一染色，几乎可把所有的细菌分成革兰氏阳性菌与革兰氏阴性菌两个大类，因此它是分类鉴定菌种时的重要指标。又由于这两大类细菌在细胞结构、成分、形态、生理、生化、遗传、免疫、生态和药物敏感性等方面都呈现出明显的差异，因此任何细菌只要通过简单的革兰氏染色，就可提供不少其他重要的生物学特性方面的信息。
6、渗透调节皮层膨胀学说是如何解释芽孢的耐热机制的？
芽孢的耐热在于芽孢衣对多价阳离子和水分的渗透很差以及皮层的离子强度很高，这就使皮层产生了极高的渗透压去夺取芽孢核欣中的水分，其结果造成皮层的充分膨胀和核心的高度失水，正是这种失水的核心才赋予了芽孢极强的耐热性。
7、简述链霉菌形态构造特点。
1、基内菌丝：又称营养菌丝，是紧贴固体培养基表面并向培养基里面生长的菌丝。色浅、较细，其主要功能是吸收营养物和排泄代谢产物，一般没有隔膜。有的产生色素。
2、气生菌丝：营养菌丝发育到一定阶段，伸向空间形成气生菌丝，色较深、直径较粗，直形或弯曲状而分枝，有的产生色素。
第二章真核微生物的形态、构造和功能
1、名词解释：真核微生物，酵母菌，生活史，霉菌，无性孢子，有性孢子，子实体，
真核微生物：是指一大类有完整细胞核、结构精巧的染色体和多种细胞器的微生物。
酵母菌：非分类名词，一群能发酵糖类的单细胞微生物，属真菌类。
生活史：个体经一系列生长、发育阶段后而产生下一代个体的全部过程，就称为该生物的生活史或生命周期。
霉菌：（非分类名词）丝状真菌统称，通常指菌丝体发达而又不产生大型子实体的真菌。无性孢子：不经过两性细胞结合而直接由菌丝分化形成的繁殖性小体。
有性孢子：指经过两性细胞结合，经质配、核配、减数分裂形成的繁殖小体。
子实体：是由真菌的营养菌丝和生殖菌丝缠结而成的具有一定形状的产孢结构。
2、简述真菌的特点。
①不能进行光合作用；
②以产生大量孢子进行繁殖；
③一般具有发达的菌丝体；
④细胞壁多数含几丁质；
⑤营养方式为异养吸收型；
⑥陆生性较强。
3、简述酵母菌的特点。
（1）生活史中，个体主要以单细胞状态存在；
（2）多数营出芽繁殖，也有的裂殖；
（3）能发酵糖类产能；
（4）细胞壁常含甘露聚糖；
（5）喜在含糖量较高、酸度较大的水生环境中生长。
4、图示酵母菌细胞构造，并指出其细胞壁的结构特点。
细胞结构：见书48页
细胞壁的结构特点：
（1）化学组成：
三明治状的“酵母纤维素”：分三层，外层为甘露糖，内层为葡聚糖,其间夹有一层蛋白质分子。芽痕周围有少许几丁质。
（2）原生质体的制备：用蜗牛消化酶水解细胞壁。
（注：其结构特点可能不完善）
5、简述酵母菌的繁殖方式，图示酿酒酵母的生活史并说明各阶段的特点。
繁殖方式：⑴无性繁殖：①芽殖②裂殖③产生掷孢子等无性孢子
⑵有性繁殖——产生子囊及子囊孢子
生活史：见书51页
各阶段的特点：
子囊孢子发芽产生单倍体营养细胞
单倍体营养细胞出芽繁殖
异性营养细胞接合，质配核配，形成二倍体细胞
二倍体营养细胞不进行核分裂，出芽繁殖
二倍体细胞变成子囊，减数分裂，形成4子囊孢子
子囊破壁后释放出单倍体子囊孢子
6、霉菌的有性和无性孢子主要有哪些？
无性孢子有：厚垣孢子、节孢子、分生孢子、孢囊孢子、游动孢子、芽孢子、掷孢子。有性孢子有：卵孢子、接合孢子、子囊孢子、担孢子。
7、细菌、放线菌、酵母菌、霉菌四大类微生物的菌落有何不同？为什么？
菌落细菌酵母菌放线菌霉菌
含水形态很湿或较湿较湿干燥或较干燥干燥
外观形态小而突起或大而平坦大而突起小而紧密大而疏松或大而致密
菌落透明度透明或稍透明稍透明不透明不透明
菌落与培养基结合程度不结合不结合牢固结合较牢固结合
菌落颜色
多样单调，一般呈乳脂或矿烛色，少数红色或黑色
十分多样
十分多样
菌落正反面颜色的差别相同相同一般不同一般不同
菌落边缘一般看不到细胞可见球状，卵圆状或假丝状细胞有时可见细丝状细胞可见粗丝状细胞
气味一般有臭味多带酒香味带有泥腥味往往有霉味
原因：因为细菌、放线菌、酵母菌和霉菌的形态和生理类型不尽相同，所以在其菌落形态，构造等特征上也有各自的特点。
8、试比较细菌、放线菌、酵母菌和霉菌细胞壁成分的异同，并讨论它们原生质体制备方法。细胞壁成分的异同
细菌分为G+和G-，G+肽聚糖含量高，G-含量低；G+磷壁酸含量较高，而G-不含磷壁酸；G+类脂质一般无，而G-含量较高；G+不含蛋白质，G-含量较高。放线菌为G-，其细胞壁具有G-所具有的特点。酵母菌和霉菌为真菌，酵母菌的细胞壁外层为甘露聚糖，内层为葡聚糖；而霉菌的细胞壁成分为几丁质、蛋白质、葡聚糖。
原生质体制备方法：
G+菌原生质体获得：青霉素、溶菌酶
G-菌原生质体获得：EDTA鳌合剂处理，溶菌酶
放线菌原生质体获得：青霉素、溶菌酶
霉菌原生质体获得：纤维素酶
酵母菌原生质体获得：蜗牛消化酶
13、什么叫锁状联合？其生理意义如何？
锁状联合: 担子菌亚门中多数担子菌的双核菌丝，在进行细胞分裂时，于菌丝的分隔处形成的一个侧生的喙状结构称锁状联合。
生理意义：保证了双核菌丝在进行细胞分裂时，每节（每个细胞）都能含有两个异质（遗传型不同）的核，为进行有性生殖，通过核配形成担子打下基础。锁状联合是双核菌丝的鉴定标准，凡是产生锁状联合的菌丝均可断定为双核。锁状联合也是担子菌亚门的明显特征之一。
14、霉菌的营养菌丝和气生菌丝各有何特点？它们分别可分化出哪些特化结构？
1) 营养菌丝体：伸入培养基吸收营养；
2) 气生菌丝体：向空中生成，形成繁殖器官。
营养菌丝的特化结构：①假根②吸器③附着枝附着胞⑤菌核⑥菌索⑦匍匐菌丝⑧菌环和菌网
气生菌丝的特化结构：子实体
第三章病毒和亚病毒
1、名词解释：病毒，真病毒，亚病毒，噬菌斑，烈性噬菌体，温和噬菌体，溶原菌，溶原性。
病毒：是超显微的，无细胞结构，专性活细胞内寄生，在活细胞外具一般化学大分子特征，一旦进入宿主细胞又具有生命特征。
真病毒：至少含有核酸和蛋白质两种组分的病毒
亚病毒：凡在核酸和蛋白质两种成分中，只含其中之一的分子病原体称为亚病毒
噬菌斑：当一个噬菌体感染一个敏感细胞后，隔不久即释放出一群子代噬菌体，在固体培养基中，它们通过琼脂层的扩散又侵染周围的宿主细胞，并引起它们的裂解，如此经过多次重复，就出现了一个由无数噬菌体粒子构成的群体—噬菌斑，它是透亮不长菌的小圆斑，每一个噬菌斑是由一个噬菌体粒子形成的。
烈性噬菌体：凡在短时间内能连续完成吸附、侵入、增殖、成熟、裂解这五个阶段而实现其繁殖的噬菌体，称为烈性噬菌体。
温和性噬菌体：噬菌体侵染宿主后，并不增殖，裂解，而与宿主DNA结合，随宿主DNA 复制而复制，此时细胞中找不到形态上可见的噬菌体，这种噬菌体称为温和性噬菌体或溶源
噬菌体。
溶原菌：含有温和性噬菌体的细菌称为溶源性细菌。
溶源性——噬菌体附着或整合在宿主染色体上，一道复制。
2、病毒粒有哪几种对称体制？每种对称又有几类特殊外形？
①螺旋对称型—TMV 呈直杆状，中空
②二十面体对称—腺病毒外形呈典型的二十面体
③复合对称—T偶数噬菌体呈蝌蚪状
3、什么叫烈性噬菌体？简述其裂解性生活史。
烈性噬菌体：凡在短时间内能连续完成吸附、侵入、增殖、成熟、裂解这五个阶段而实现其繁殖的噬菌体，称为烈性噬菌体。
①吸附噬菌体尾丝散开，固着于特异性受点上。
②侵入尾鞘收缩，尾管推出并插入到细胞壁和膜中，头部的核酸注入到宿主细胞中，而蛋白质衣壳留在细胞壁外。
③增殖增殖过程包括核酸的复制和蛋白质的生物合成。注入细胞的核酸操纵宿主细胞代谢机构，以寄主个体及细胞降解物和培养基介质为原料，大量复制噬菌体核酸，并合成蛋白质外壳。
④成熟（装配）寄主细胞合成噬菌体壳体(T4噬菌体包括头部、尾部),并组装成完整的噬菌体粒子。
⑤裂解（释放）子代噬菌体成熟后，脂肪酶和溶菌酶促进宿主细胞裂解，从而释放出大量子代噬菌体。
4、什么是一步生长曲线？它可分几期？各期有何特点？
一步生长曲线：定量描述烈性噬菌体增殖规律的实验曲线称作一步生长曲线或一级生长曲线。
潜伏期从噬菌体吸附细菌细胞至细菌细胞释放出新的噬菌体的最短时间。又可分为隐晦期和胞内累积期。
裂解期从被感染的第一个细胞裂解至最后一个细胞裂解完毕所经历的时间。
平稳期指被感染的宿主已全部裂解，溶液中噬菌体数达到最高点后的时期。
裂解量每个被感染的细菌释放新的噬菌体的平均数
第四章微生物的营养和培养基
1、名词解释：自养微生物，异养微生物，营养，营养物，C/N，氨基酸自养型生物，氨基酸异养型生物，生长因子，大量元素，微量元素，培养基。
自养微生物：以二氧化碳作为主要或唯一的碳源，以无机氮化物作为氮源，通过细菌光合作用或化能合成作用获得的能量的微生物。
异养微生物：以有机物为碳源，光或有机物分解为能源的微生物。
营养：指生物体从外部环境摄取其生命活动所必须的能量和物质，以满足其生长和繁殖需要的一种生理功能。
营养物：能为机体生命活动提供结构物质、能量、代谢调节物质和良好的生理环境的物质称为营养物。
C/N比：所谓C/N是指在微生物培养基中所含的碳源中碳原子的摩尔数与氮源中氮原子的摩尔数之比。
氨基酸自养型生物：不需要氨基酸作为氮源的，它们能把非氨基酸类的简单氮源自行合成所需要的一切氨基酸。
氨基酸异养型生物：需要从外界吸收现成的氨基酸作氮源。
生长因子：一类对微生物正常代谢必不可少且又不能从简单的碳、氮源自行合成的所需极
微量的有机物。
大量元素：凡是生长所需浓度在10-3～10-4mol/L范围内的元素，可称为大量元素，包括P、S、K、Mg、Ca、Na和Fe等。
微量元素：凡是生长所需浓度在10-6～10-8mol/L范围内的元素，则称为微量元素，包括Cu、Zn、Mn、Mo、和Co等。
培养基：是一种人工配制的适合微生物生长繁殖或产生代谢产物用的混合养料，它具备微生物所需的六大营养元素，且其间比例合适。
2、指出四大类微生物的最适生长pH范围及常用的培养基名称。
细菌（PH 7．4—7．6）——牛肉膏蛋白胨培养基
真菌（自然PH）——马铃薯培养基
霉菌（PH 7．0—7．2）——察氏培养基
放线菌（PH 7．4—7．6）——高氏一号培养基。
3、指出微生物的六大营养要素。
（一）碳源（二）氮源（三）能源（四）生长因子（五）无机盐（六）水
4、试比较细胞膜运输营养物质的四种方式。
比较项目单纯扩散促进扩散主动运输基因移位
特异载体蛋白
运送速度
溶质运送方向
平衡时内外浓度
运送分子
能量消耗
运送前后溶质分子
载体饱和效应
与溶质类似物
运送抑制剂
运送对象举例
无
慢
由浓至稀
内外相等
无特异性
不需要
不变
无
无竞争性
无
H2O、CO2、O2
甘油、乙醇、少数氨基酸、盐类、代谢抑制剂有
快
由浓至稀
内外相等
特异性
不需要
不变
有
有竞争性
有
SO42+、PO43+、糖（真核生物）有
快
由稀至浓
内部浓度高得多
特异性
需要
不变
有
有竞争性
有
氨基酸、乳糖等糖类、Na+、Ca2+等无机离子无
快
由稀至浓
内部浓度高得多
特异性
需要
改变
有
有竞争性
有
葡萄糖、果糖、甘露糖、嘌呤、核苷、脂肪酸等
5、什么是鉴别性培养基？试以EMB培养基为例，分析其鉴别作用的原理。
鉴别性培养基：培养基中加入能于某一菌的无色代谢产物发生显色反应的指示剂，从而用肉眼就能使该菌菌落与外形相似的它种菌落相区分的培养基就称鉴别性培养基。
EMB作用原理
其中的伊红和美蓝两种苯胺染料可抑制革兰氏阳性细菌和一些难培养的革兰氏阴性细菌。在低酸度时，这两种染料结合形成沉淀，起着产酸指示剂的作用。因此试样中的多种肠道细菌会在EMB培养基上产生相互易区分的特征菌落，因而易于辨认。尤其是大肠杆菌，因其强烈分解乳搪而产生大量的混合酸，菌体带H+故可染上酸性染料伊红，又因伊红与美蓝结合，所以菌落染上深紫色，从菌落表面的反射光中还可看到绿色金属闪光：
6、什么是单功能营养物、双功能营养物、多功能营养物？
单功能营养物：一种营养物有一种营养要素功能，该营养物称为单功能营养物。
双功能营养物：一种营养物有两种营养要素功能，该营养物称为双功能营养物。
多功能营养物：一种营养物常有两种以上营养要素功能，该营养物称为多功能营养物。7、试述培养基的种类。
按对培养基成分的了解来分：
(1)天然培养基(2)组合培养基
按培养基外观的物理状态来分
(1)固体培养基(2)半固体培养基⑶液体培养基(4)脱水培养基
按培养基的功能来分
(1)种子培养基(2)发酵培养基(3)基础培养基(4)选择性培养基
第五章微生物的新陈代谢
1、名词解释：新陈代谢，生物氧化，呼吸，无氧呼吸，发酵，氧化磷酸化，光合磷酸化，底物水平磷酸化，Stickland反应。
新陈代谢：是指发生在活细胞中的各种分解代谢与合成代谢的总和。其中，分解代谢是指复杂的有机物分子通过分解代谢酶系的催化，产生简单分子、腺苷三磷酸(ATP)形式的能量或还原力(或称还原当量，以[H]表示)的作用；合成代谢则与分解代谢相反，是指在合成代谢酶系的催化下，由简单小分子、A TP形式的能量与[H]形式的还原力一起合成大分子的过程。
生物氧化：生物氧化是指发生在活细胞中的一系列产能性氧化反应的总称。
呼吸：呼吸是指底物按常规方式脱氢后，经完整的呼吸链递氢，最终由分子氧接受氢并产生水和释放能量(ATP)的生物氧化方式。呼吸必须在有氧条件下进行，因此又叫有氧呼吸。无氧呼吸：无氧呼吸又称厌氧呼吸，是一类呼吸链末端的氢受体为外源无机氧化物（少数为有机氧化物）的生物氧化。
发酵：无氧条件下，底物脱氢后产生的还原力不经呼吸链而直接传递给某一中间代谢物的低效产能反应。
氧化磷酸化：又称电子传递磷酸化，是指呼吸链的递氢（或电子）和受氢过程与磷酸化反应相偶联并产生A TP的作用。
光合磷酸化：由光照引起的电子传递与磷酸化作用相偶联而生成ATP的过程成为光合磷酸化。
底物水平磷酸化：是指在生物氧化过程中产生一些含有高能磷酸键的化合物，并且这些高能磷酸化合物的高能磷酸键键能可以直接偶联A TP合成。
Stickland反应:以一种氨基酸作氢供体和以另一种氨基酸作氢受体而实现生物氧化产能的独特发酵类型，称为stickland反应。stickland反应的产能效率很低，每分子氨基酸仅产1个ATP。
2、试述生物氧化的形式、过程、功能及类型。
形式：某物质与氧结合、脱氢或失去电子
过程:一般包括三个环节：
①底物脱氢（或脱电子）作用（该底物称作电子供体或供氢体）
②氢（或电子）的传递（需中间传递体，如NAD、FAD等）
③最后氢受体接受氢（或电子）（最终电子受体或最终氢受体）
功能：产能（A TP）、产还原力[H]和产小分子中间还原产物。
类型：呼吸、无氧呼吸、发酵
3、在化能异养微生物的生物氧化中，其基质脱氢和产能的途径主要有哪几条？试比较各途径的主要特点。
脱氢和产能的途径：EMP、HMP、ED、TCA
特点：EMP 当葡萄糖转化成1.6-二磷酸果糖后，在果糖二磷酸醛缩酶作用下，裂解为两个3Ｃ化合物，再由此转化为2分子丙酮酸。
HMP 当葡萄糖经一次磷酸化脱氢生成6-磷酸葡萄糖酸后，在6-磷酸葡萄糖酸脱酶作
用下，再次脱氢降解为1分子CO2和1分子磷酸戊糖。
ED 是少数EMP途径不完整的细菌所特有的利用葡萄糖的替代途径。一分子葡萄糖经ED途径可生成两个丙酮酸并净生成一个ATP、一个NADH+H+和一个NADPH+H+。
TCA (1)氧虽不直接参与其中反应，但必须在有氧条件下运转；
(2)丙酮酸在进入三羧酸循环之先要脱羧生成乙酰CoA，乙酰CoA和草酰乙酸缩合成柠檬酸再进入三羧酸循环。
(3)循环的结果是乙酰CoA被彻底氧化成CO2和H2O，每氧化1分子的乙酰CoA可产生12分子的ATP，草酰乙酸参与反应而本身并不消耗。
(4)产能效率极高；
(5)TCA位于一切分解代谢和合成代谢中的枢纽地位。
4、试述EMP途径在微生物生命活动中的重要性。
①供应ATP形式的能量和NADH2形式的还原力；②是连接其它几个重要代谢途径的桥梁，包括TCA、HMP和ED途径等；③为生物合成提供多种中间代谢物；④通过逆向反应可进行多糖合成。
5、试述HMP途径在微生物生命活动中的重要性。
①供应合成原料；②产还原力；③作为固定CO2的中介；④扩大碳源的利用范围；⑤连接EMP途径。
6、试述TCA循环在微生物产能和发酵生产中的重要性。
TCA位于一切分解代谢和合成代谢中的枢纽地位，产能效率极高，不仅可为微生物的生物合成提供各种碳架原料，而且还与人类的发酵生产紧密相关。
7、在微生物能量代谢中A TP的产生途径有哪几条？
EMP、HMP、ED、TCA、呼吸、无氧呼吸、发酵
8、试比较呼吸、无氧呼吸、发酵的异同点。
产能呼吸无氧呼吸发酵
环境条件有氧无氧无氧
终电子受体来源环境，外源性环境，外源性胞内、内源性性质分子氧化合物（通常为无机物）代谢中间物
能进行代谢产能方式的微生物专性好氧微生物、兼性好氧微生物、微嗜氧微生物专性厌氧微生物、兼性好氧微生物兼性好氧微生物、耐氧厌氧微生物、专性厌氧微生物
9、试比较同型和异型乳酸发酵。
10、细菌的酒精发酵途径如何？它与酵母菌的酒精发酵有何不同？细菌的酒精发酵有何优缺点？
酒精发酵途径ED, 酵母菌的酒精发酵EMP
优缺点:
a.优点：代谢速率高；产物转化率高；菌体生成少；代谢副产物少；发酵温度高；不必定期供氧；细菌为原核生物，易于用基因工程改造菌种；厌氧发酵，设备简单。
b.缺点：生长pH为5，较易染菌；细菌耐乙醇力较酵母菌为低（细菌7%乙醇，酵母菌耐8-10%乙醇）；底物范围窄（葡萄糖、果糖）。
11、青霉素为何只能抑制代谢旺盛的细菌？其制菌机制如何？
原因：青霉素抑制肽聚糖的合成过程，形成破裂的细胞壁，代谢旺盛的细菌才存在肽聚糖的合成，因此此时有青霉素作用时细胞易死亡。
作用机制：青霉素破坏肽聚糖合成过程中肽尾与肽桥间的转肽作用。
12、如何运用代谢调控理论使微生物合成比自身需求量更多的有用代谢产物？举例说明。
①应用营养缺陷型菌株解除正常的反馈调节
如赖氨酸发酵、肌苷酸的生产；
②应用抗反馈调节的突变株解除反馈调节
如黄色短杆菌的抗α—氨基—β—羟基戊酸菌株能累积苏氨酸；
③控制细胞膜的渗透性
如在谷氨酸发酵生产中只要把生物素浓度控制在亚适量的情况下，才能分泌出大量的谷氨酸，
第六章微生物的生长及其控制
1、名词解释：生长产量常数（Y），最适生长温度，巴氏消毒法，抗生素，抗代谢药物，选择毒力，生长限制因子，MIC。
生长产量常数（Y）：指菌体产量与限制性营养物消耗的比例关系。
最适生长温度：某菌分裂代时最短或生长速率最高时的培养温度。
巴氏消毒法：用较低的温度处理牛乳或其他液态食品，杀死其中可能存在的无芽孢病原菌而又不损害营养与风味的消毒方法。
抗生素：抗生素是生物在其生命活动中产生的一种次生代谢产物或其人工衍生物，能对他种生物的生命活动产生抑制作用或致死作用。
抗代谢药物：又称代谢拮抗物、代谢类似物，是指在结构上与生物体所必需的代谢物相似，可以与正常代谢途径中特定的酶发生竞争性反应，从而阻碍酶的功能、干扰代谢的正常进行的物质。
选择毒力：抗生素对人体及动、植物组织的毒力，一般远小于它对致病毒的毒力，这称为抗生素的选择毒力。
生长限制因子:凡是处于较低浓度范围内，可影响生长速率和菌体产量的营养物，就称生长限制因子。
MIC：最小抑菌浓度，表示某药物对某菌的最小抑菌浓度，常以μg/ml或μ/ml来表示。
2、什么是典型生长曲线？它可分几期？划分的依据是什么？各期特点如何？
典型生长曲线：将少量纯种单细胞微生物接种到恒容积的液体培养基中培养。在适宜条件下，其群体就会有规律地生长，定时取样测定细胞含量，以细胞数目的对数值作纵坐标，以培养时间作横坐标，就可以画出一条有规律的曲线，这就是微生物的典型生长曲线。
划分的依据：单细胞微生物。
(1)延滞期(停滞期、调整期) 特点：a.生长速率常数为零；b.细胞形态变大或增大；c.细胞内RNA尤其是rRNA含量增高，原生质呈嗜碱性。d.合成代谢活跃；e.对外界不良条件的反应敏感。
(2) 对数期特点：此时菌体细胞生长的速率常数R最大，分裂快，代时短，细胞进行平衡生长，菌体内酶系活跃，代谢旺盛，菌体数目以几何级数增加，群体的形态与生理特征最一致，抗不良环境的能力强。
⑶稳定期特点：a.生长速率常数为零；b.菌体产量达到最高；c.活菌数相对稳定；d.细胞开始贮存贮藏物；e.芽孢在这个时期形成；f.有些微生物在此时形成次生代谢产物。
⑷衰亡期特点：a.细胞形态多样；b.出现细胞自溶现象；c.有次生代谢产物的形成；d.芽孢在此时释放。
3、延滞期有何特点？如何缩短延滞期？
特点：a.生长速率常数为零；b.细胞形态变大或增大；c.细胞内RNA尤其是rRNA含量增高，原生质呈嗜碱性。d.合成代谢活跃；e.对外界不良条件的反应敏感。
消除：a. 以对数期的菌体作种子菌；b. 适当增大接种量：一般采用3%~8%的接种量，根据生产上的具体情况而定，最高不超过1/10。c. 培养基的成分：种子培养基尽量接近发酵培养基。
4、指数期有何特点？处于该期的微生物有何应用？
特点：此时菌体细胞生长的速率常数R最大，分裂快，代时短，细胞进行平衡生长，菌体内酶系活跃，代谢旺盛，菌体数目以几何级数增加，群体的形态与生理特征最一致，抗不良环境的能力强。
应用：指数期的微生物是研究生理、代谢等的良好材料；是增殖噬菌体的最适菌龄；是发酵生产中用做种子的最佳种龄，通过补加营养物质延长指数期。
5、稳定期为何会到来？有何特点？
形成原因:a.营养物尤其是生长限制因子的耗尽；b.营养物的比例失调；c.有害代谢产物的积累；d.物化条件的变化。
特点:a.生长速率常数为零；b.菌体产量达到最高；c.活菌数相对稳定；d.细胞开始贮存贮藏物；e.芽孢在这个时期形成；f.有些微生物在此时形成次生代谢产物。
6、什么叫连续培养？有何优点？为何连续时间是有限的？
连续培养：指微生物接种到培养基里以后的整个生长期间，微生物能持续地以比较恒定的生长速率常数进行生长，从而导致微生物的生长过程能“不断”地进行下去的一种培养方法。优点：高效、低耗、利于自控、产品质量稳定。
①菌种易于退化；②容易污染；③营养物的利用率低于分批培养。因此连续时间是有限的。
7、微生物培养过程中pH变化的规律如何？如何调整？
微生物的生命活动过程中会自动地改变外界环境的pH，其中发生pH改变有变酸和变碱两种过程，在一般微生物的培养中往往以变酸占优势，因此，随着培养时间延长，培养基的pH会逐渐下降。的变化还与培养基的组分尤其是碳氮比有很大关系，碳氮比高的培养基经培养后pH会明显下降；相反，碳氮比低的培养基经培养后，其pH常会明显上升。
措施：分为“治标”和“治本”两大类，前者指根据表面现象而进行直接、及时、快速但不持久的表面化调节，后者指根据内在机制而采用的间接、缓效但可发挥持久作用的调节。8、比较灭菌、消毒、防腐和化疗的异同，并举例。
比较项目灭菌消毒防腐化疗
处理因素
处理对象
微生物类型
对微生物作用
实例
强理、化因素
任何物体内外
一切微生物
彻底杀灭
加压蒸气灭菌，辐射灭菌，化学杀菌剂理、化因素
生物体表，酒、乳等
有关病原菌
杀死或抑制
70％酒精消毒，巴氏消毒法理、化因素
有机质物体内外
一切微生物
抑制或杀死
冷藏，干燥，糖渍，盐腌，缺氧，化学防腐剂化学治疗剂
宿主体内
有关病原菌
抑制或杀死
抗生素，磺胺药，生物药物素
9、试述微生物生长繁殖的测定方法。
一、测生长量（一）直接法1、测体积2、测干重（二）间接法1、比浊法2、生理指标法
二、计繁殖数1、直接计数法（全数）——血球计数板法2、间接计数法（活菌数）——稀释平板菌落计数法
10、试述高温灭菌的方法。
1、干热灭菌法（1）原理：干热可使破坏细胞膜破坏、蛋白质变性和原生质干燥，并可使各种细胞成分发生氧化变质。
（2）应用范围：1）烘箱内热空气灭菌法（150~170℃，1~2hr）：金属器械、洗净的玻璃器皿。2）火焰灼烧法：接种环、接种针等。
2、湿热灭菌：即以100℃以上的加压蒸气进行灭菌。
（1）相同温度及相同作用时间下，湿热灭菌法比干热灭菌法更有效：
湿热空气穿透力强，能破坏维持蛋白质空间结构和稳定性的氢键，能加速其变性。
（2）种类：
1)常压法a.巴氏消毒法：用较低的温度处理牛乳或其他液态食品，杀死其中可能存在的无芽孢病原菌而又不损害营养与风味的消毒方法。a)低温维持法(LTH)：要求62.8℃保持30min；
b)高温瞬时法(HTST)：要求71.7℃维持至少15s；
b.煮沸消毒法：a)适用范围：一般用于饮用水的消毒。b)条件：100℃下数分钟。
c.间隙灭菌法：又称丁达尔灭菌法或分段灭菌法。a) 适用范围：适用于不耐热培养基的灭菌。
b) 条件：80一100℃下蒸煮15—60分钟，三天。
2)加压法：a.常规加压法a) 适用范围：适合于一切微生物学实验室、医疗保健机构或发酵工厂中对培养基及多种器材、物料的灭菌。b) 条件：121℃(压力为lkg／cm2)，时间维持15—20分钟，也可采用在较低的温度(115℃，即0.7kg／cm2下维持35分钟的方法。
b.连续加压灭菌法：在发酵行业里也称“连消法”。a) 适用范围：在大规模的发酵工厂中作。培养基灭菌用。主要操作是将培养基在发酵罐外连续不断地进行加热、维持和冷却，然后才进入发酵罐。b) 条件：在135—140℃下处理5一l 5秒钟
11、请说明营养物质浓度变化对微生物生长速度和最终菌体产量的影响。
微生物生长所需要的营养物质，只有在浓度适当的条件下才能表现出良好的作用。浓度太低，不能满足微生物生长的需要；浓度太高反而会抑制微生物的生长，最终导致菌体产量。
12、试比较恒浊器和恒化器。
装置控制对象培养基培养基流速生长速率产物应用范围
恒浊器菌体密度
（内控制）无限制生长因子不恒定最高大量菌体及与菌体相平行的代谢产物生产为主
恒化器培养基流速
（外控制）有限制生长因子恒定低于最高不同生长速率的菌体实验室为主
13、按照微生物与氧气的关系可分为哪些类型？
根据氧与微生物生长的关系可将微生物分为好氧、微好氧、耐氧型、兼性厌氧和专性厌氧五种类型
14、为什么缺乏SOD的微生物只能进行专性厌氧生活？
好氧生物因有了SOD，故巨毒的O2-。就被歧化成毒性稍低的H2O2，在过氧化氢酶的作用下，H2O2又进一步变成无毒的H2O。厌氧菌因不能合成SOD，所以根本无法使O2-。歧化成H2O2，因此当有氧存在时，细胞内形成的O2-。就使自身受到毒害。
15、抗代谢药物的作用。
抗代谢药物的三种作用a.竞争酶的活性中心b.假冒正常代谢物c.代谢途径终产物结构类似物的反馈调节
16、什么是菌种衰退？菌种衰退的原因是什么？
菌种衰退:生产菌株生产性状的劣化或遗传研究菌株遗传标记的丢失称为菌种衰退。
原因: 1、自发突变2、通过诱变获得的高产菌株本身不纯3、培养、保藏条件
1、自发突变菌种退化的主要原因是有关基因的负突变。
2、通过诱变获得的高产菌株本身不纯高产突变只发生在一个核上，随着核的分离，原来未变异的低产性状逐渐恢复。单核微生物由于高产突变只发生在一条DNA链上，也往往发生分离回复的现象。
3、培养、保藏条件可以通过对自发突变率的影响来表现，也可在不改变基因现的情况下表。
17、什么是菌种复壮？
狭义的复壮:是在菌种已发生衰退的情况下，通过纯种分离和测定生产性能等方法，从衰退的群体中找出尚未衰退的个体，以达到恢复该菌原有性状的一种措施；
广义的复壮:指在菌种的生产性能尚未衰退前，有意识地进行纯种分离和生产性能的测定工作，以期菌种的生产性能逐步有所提高。
第八章微生物的生态
1、名词解释：水体自净作用，大肠菌群数，正常菌群，微生态制剂，无菌动物，悉生动物，根际微生物，附生微生物，互生，共生，寄生，拮抗，混菌培养，BOD5，COD，活性污泥。水体自净作用:指水体中存在的为量不多的有机或无机污染物通过物理性的扩散、稀释、沉降作用或化学性的氧化作用以及各种物学和生物化学作用而得到迁生移转化。
大肠菌群数:是一群好氧和兼性厌氧的，能在37℃24h内发酵乳糖产酸产气的革兰氏阴性无芽胞杆菌的总称。一般包括大肠埃希氏杆菌、产气杆菌、柠檬酸盐杆菌和副大肠杆菌等。正常菌群:
微生态制剂: 根据微生态学理论而制成的含有有益菌的活菌制剂，功能在于改善肠道菌群、治疗急、慢性肠炎以及其他保健功能。
无菌动物：凡在其体内外检查不到任何正常菌群的动物称为无菌动物。
悉生生物：人为地接种上某已知纯种微生物的无菌动物或无菌植物称为悉生生物。
根际微生物：生活在植物根际，借植物根系向周围分泌的各种外渗物为营养的微生物称为根际微生物，以无芽孢杆菌居多。
附生微生物：指生活在植物体表面，主要借其外渗物质或分泌物质为营养的微生物。主要是细菌及少数的酵母菌和霉菌，放线菌极少。
互生:指两种可以单独生活的生物，当其生活在一起时，通过各自的代谢活动而有利于对方或偏利于一方的生活方式。
共生:指两种生物共居在一起，相互分工协作、相依为命，甚至达到难分难解、合二为一的一种相互关系。
寄生:指一种小型生物生活在另一种较大型生物的体内或体表，从中摄取营养进行生长繁殖，并使后者蒙受损害甚至死亡的现象.
拮抗:指由某种生物所产生的某种代谢产物可抑制他种生物的生长发育甚至杀死它们的一种相互关系。
混菌培养: 又称混菌发酵或混合发酵指在发酵工业中采用两种或两种以上的具有互补性质的菌种进行混合培养
BOD5：即五日生化好氧量。指在20℃下，1L污水中所含的有机物，在进行微生物氧化时，五日内所消耗的分子氧的毫克数。
COD：即化学好氧量。指使用强氧化剂使1L污水中的有机物质迅速进行化学氧化时所消耗氧的毫克数。
活性污泥：由细菌、丝状菌、藻类和原生动物等微生物群体与污水中的悬浮有机物、胶状物和吸附物质在一起构成的凝胶团，在污水处理中具有很强的吸附、分解和利用有机物或毒物的能力。
拮抗:指由某种生物所产生的某种代谢产物可抑制他种生物的生长发育甚至杀死它们的一种相互关系。
2、检验饮用水的质量时，为什么要选用大肠菌群数作为主要指标？我国卫生部门对此有何规定？
1)由水传播的最重要的传染病是痢疾、霍乱和伤寒，它们都是肠道传染病。肠道病原菌都是通过粪便污染水源而传播的，因此防治饮用水传染病的关键是要严防水源被粪便污染。
2)水中存在病原菌可能性很小，直接检测困难，因此需要选择一种指示菌作为卫生指标；
ü生理习性与肠道病原菌类似，ü即在外界的生存时间基本一致；（代表性）
3)作为卫生指标的指示细菌必须符合：
ü在粪便中的数量比病原菌多，ü不ü会漏检；（灵敏性）
ü检验技术较简单;（操作方便）
4) 比较理想的指示菌是大肠杆菌；但大肠杆菌的检测容易受一些形态和理化特性相似的细菌的干扰；选择大肠菌群（coliform)作为指示菌。
我国卫生部门对饮用水的卫生标准为：每ml水细菌总数不超过100个，大肠菌群数每升水不超过3个。
3、试述微生物处理污水的原理。
在污水处理装置（人工生态系统）中，利用不同生理、生化功能微生物间的协同作用而进行的一种物质循环过程。
高BOD5的污水进入污水处理装置后，其中的自然微生物区系在好氧条件下，根据其中营养物质或有毒物质的情况，在客观上造成一个选择性的培养条件，随时间推移，发生微生物区系的群落演替，使水中有机物或毒物不断被降解、氧化、分解、转化或吸附沉降，进而达到净化的目的。
第九章传染与免疫
1、什么是抗原？它应该具备哪些条件？
抗原：抗原是一类能刺激人或动物产生抗体或致敏淋巴细胞，并能与这些产物在体内或体外发生特异性反应的物质。
条件：
异物性：指抗原的理化性质与其所刺激的机体的自身物质间的差异程度。
具有一定的化学组成与结构的大分子物质；
特异性—由抗原决定簇决定。
2、什么是抗体？
抗体：抗体是高等动物体在抗原物质的刺激下，由浆细胞所产生的一类能与相应抗原发生特异性结合的免疫球蛋白。
3、简述抗原抗体反应的一般规律。
①特异性②可逆性③定比性④阶段性⑤条件依赖性
4、简述抗原抗体间的主要反应。
凝集反应：颗粒性抗原与其相应的抗体在合适条件下反应，并出现凝集团的现象称为凝集反应。其中的抗原叫凝集原，抗体叫凝集素。
沉淀反应：可溶性抗原与其相应抗体在合适条件下反应并出现沉淀物的现象，称作沉淀反应。其中的抗原叫沉淀原，抗体叫沉淀素。
补体结合实验：
(4)交叉反应与凝集吸收反应：由于甲乙两菌存在共同抗原而引起的甲菌的抗原或（抗体）与乙菌的抗体或（抗原）发生较弱的免疫反应的现象，称为交叉反应。用不同细菌凝集吸收抗血清中共同抗体的方法叫凝集吸收反应。经过吸收后剩下的特异抗体叫单价特异抗血清。
5、什么是补体？
补体：补体是存在于正常人体或动物血清中的一组非特异性血清蛋白，主要是β球蛋白，是一类能被任何抗原与抗体的复合物所激活的原。
关于微生物的一些基本知识 1、微生物的分类 1.1 从微生物形态与结构 真核细胞型微生物细胞核的分化程度较高，有核膜、核仁和染色体；胞质内有完整的细胞器（如内质网、核糖体及线粒体等）。真菌属于此类型微生物。 原核细胞型微生物细胞核分化程度低，仅有原始核质，没有核膜与核仁；细胞器不很完善。这类微生物种类众多，有细菌、螺旋体、支原体、立克次体、衣原体和放线菌。 非细胞型微生物没有典型的细胞结构，亦无产生能量的酶系统，只能在活细胞内生长 繁殖。病毒属于此类型微生物。 1.2 从对氧的需求 好氧微生物：亦称需氧菌、需氧微生物。在有氧环境中生长繁殖，氧化有机物或无机 物的产能代谢过程，以分子氧为最终电子受体，进行有氧呼吸。 厌氧微生物：厌氧性细菌anaerobic bacteria 指在无氧条件下生活的细菌。为好氧性细菌的对应词。其中，在氧存在下不能生长的细菌，特称为专性厌氧菌，如梭菌、甲烷菌、 硫酸盐还原菌以及大部分光合细菌。 兼性厌氧细菌：无论有氧状态还是无氧状态都能生长发育的细菌。 1.3 微生物获得碳源与能量的方式 根据微生物对碳源和能源的需求不同，可将微生物分为下列四个营养类型： (1) 光能自养型微生物：以CO2作为惟一或主要碳源，以无机物（如硫化氢、硫代硫 酸钠等无机硫化物）作为供氢体，还原CO2合成细胞物质，并利用光能进行生长。它们都含有叶绿素等光合色素，因此能将光能转化为化学能。藻类、蓝细菌和某些光合细菌（红 硫细菌、绿硫细菌）都属于光能自养微生物。 (2)化能自养型微生物：以CO2或碳酸盐作为惟一或主要碳源，以氢气、硫化氢、二价铁离子或亚硝酸盐等有机物作为电子供体，还原CO2或碳酸盐合成细胞物质，并利用无机物氧化所产生的化学能作为能源。这类微生物包括氢细菌、硫细菌、铁细菌和硝化细菌等。 (3)光能异养型微生物：不能以CO2作为惟一或主要碳源，需要以有机物作为供氢体，具有光合色素，以光作为能源。在生长时，光能异养型微生物常需要外源的生长因子。红 螺菌属、红假单胞菌属和红螺微菌属的一些细菌就属于光能异养型微生物。 (4)化能异养型微生物：以有机化合物作为碳源，并利用有机物质氧化产生的化学能作 为能源，对于这类微生物而言，有机物既是碳源又是能源。 2、微生物的繁殖
微生物肥料研究发展、应用现状及开发对策 农业生产中化肥和农药的使用量逐年增加，引起土壤退化、生态环境恶化等问题，对农产品安全和农业可持续发展构成威胁和挑战。微生物肥料具有改良土质、增进土壤肥力、促进作物的营养吸收、增强作物抗病和抗逆能力等重要功能[1- 2]，其研究和开发面临很好的发展机遇。 一、微生物肥料的概念及研究进展 微生物肥料是一类含有活性微生物、具有肥料效应的特定制品。微生物肥料可分为2 类，一类通过其中所含微生物的生命活动来增加植物营养元素的供应量，改善植物营养状况，进而增加产量，如根瘤菌肥；另一类通过其中所含微生物的生命活动及其产生的次生代谢物质（如激素类等），提供植物营养元素的供应，促进植物对营养元素的吸收利用，抵抗某些病原微生物的致病作用，减轻病虫害的发生，如近年开发的植物促生根际细菌（Plant Growth- Promoting Rhizobacteria,PGPR）。 1887 年研究者发现豆科植物根瘤具有固氮功能并成功培养根瘤菌，此后，微生物肥料的研究与应用迅速增多。国外对微生物肥料的研究和应用历史较我国长，其主要的品种是各种根瘤菌肥。早在20 世纪20 年代在美国、澳大利亚等国就开始有根瘤菌接种剂（根瘤菌肥料）的研究和试用，一直到现在根瘤菌肥依然是最主要的品种。
我国微生物制剂的发展经历了根瘤菌剂、细菌肥料（菌肥）到微生物肥料的变迁，由豆科接种剂、菌种拌种发展为各种农作物的基肥，有的微生物由于能产生活性物质，有时也用作叶面喷施肥料。我国微生物肥料的研究应用是从豆科植物上应用根瘤菌接种剂开始的，起初只有大豆和花生根瘤菌剂；20 世纪50 年代，开始从原苏联引进自生固氮菌、磷细菌和硅酸盐细菌剂，称为细菌肥料；20 世纪60 年代推广使用放线菌制成的“5406”抗生菌肥料和固氮蓝绿藻肥；70～80 年代中期开始使用VA 菌根以改善植物磷素营养条件和提高水分利用率；80 年代中期至90 年代相继应用联合固氮菌和生物钾肥作为拌种剂；近几年来主要推广应用由固氮菌、磷细菌、钾细菌和有机肥复合制成的生物肥料，做基肥施用[3-5]。 目前，国内外出现了基因工程菌肥、作基肥和追肥用的有机无机复合菌肥、生物有机肥、非草炭载体高密度的菌粉型微生物接种剂肥料以及其他多种功能类型和名称的微生物肥料。 二、微生物肥料的种类及应用现状 微生物肥料的种类很多，如果按其制品中特定的微生物种类可分为细菌肥料（根瘤菌肥、固氮菌肥）、放线菌肥（如抗生菌类、5406）、真菌类肥料（如菌根真菌）等；按其作用机理可分为根瘤菌肥料、固氮菌肥料、解磷菌类肥料、解钾菌类肥料等；此外，还可以根据组成成分简单的划分为单纯微生物肥料和复合微生物肥料两大类型[3- 4]。研究较多的微生物肥料有以下几种。 2.1 根瘤菌和固氮菌类
病原微生物学知识点 重点整理
精品资料 病原生物与免疫学记忆知识点 1.免疫的现代概念。P4 答：生物在生存、发展过程中所形成的识别“自我”与“非己”，以及通过排斥“非己”而保护“自我”维护自身生理平衡与稳定的现象。 2.固有免疫与适应性免疫的特点。 答：（1）固有免疫：非特异性，可遗传性，效应恒定性。 （2）适应性免疫：特异性（针对性），习得性，效应递增性。 3.免疫系统的功能。P5 答：（1）积极意义：免疫防御，免疫自稳，免疫监视。 （2）消极意义：免疫损伤：超敏反应，自身免疫病。 4.人体中枢免疫器官的类型及作用。P6 答：（1）骨髓：①产生所有血细胞； ②淋巴细胞产生发育的器官：B细胞分化、发育的最主要场所； （2）胸腺：T细胞分化、发育、成熟的场所。 5.人体外周免疫器官的类型。P7 答：淋巴结，脾脏，黏膜相关淋巴组织。 6.抗原的定义及双重属性。P12 答：指能与T、B细胞受体结合，启动免疫应答，并能与相应的免疫应答产物产生特异性结合的物质。 双重属性：（1）免疫原性：指抗原能够刺激机体产生抗体或致敏淋巴细胞的能力。 （2）免疫反应性：指抗原与其所诱导的抗体或致敏淋巴细胞发生特异性结合的能力。7.半抗原的概念。P12 答：仅具有免疫反应性的物质。 8.表位的概念。P13 答：决定抗原特异性的结构基础或化学集团称为表位，又称抗原决定簇。 9.影响免疫原性的主要因素。P14 答：（1）抗原的结构与生物学特性：“异物”性，分子量，复杂性，易接近性，可提呈性。（2）免疫系统的识别能力。 （3）抗原与免疫系统的接触方式。 10.T细胞依赖性抗原和T细胞非依赖性抗原的概念。P15、16 答：（1）T细胞依赖性抗原：指需在APC及Th细胞参与下才能激活B细胞产生抗体的抗原。（2）T细胞非依赖性抗原：指刺激B细胞产生抗体时不需要Th细胞辅助的抗原。
微生物学实验复习 1、培养基的种类及用途: 2 3 ⑴目的要明确（根据微生物的种类、培养目的等），如培养基可由简单的无机物组成，生产用培养基内可加入化学成 分不明确的天然物质，而分类、鉴定用培养基内必须加入已知化学成分的物质。 （2）营养要协调：注意各种营养物质的浓度和比例。
(3)pH要适宜：各种微生物适宜生长的pH范围不同，如细菌、放线菌和真菌的最适pH分别 为：6.5?7.5、7.5?8.5 和 5.0?6.0。 4、灭菌与消毒： 5、细菌培养基的配制过程？ 答：配制培养液T调节PH T分装T包扎T灭菌T搁置斜面(搁置斜面的长度不超过试管总长的1/2) 【问题与探究】 (1)培养基灭菌后，为什么需要冷却到50 C左右时，才能用来搁置斜面或倒平板？你用什么办法来估计培养基的温度？ 【提示】琼脂的凝固点为40 C,温度太高易使培养皿破裂，低于40 C,培养基已凝固，倒不 出，所以培养基灭菌后，需冷却到50 C左右时才能用来倒平板，可以用手触摸盛有培养基的试管，感觉试管的温度下降到刚刚不烫手时就可以进行倒平板了。 (2)为什么需要使试管口通过火焰？ 【提示】通过灼烧灭菌，防止试管口的微生物污染培养基。 (3 )为了能彻底灭菌，在操作过程中应注意哪些事项？ 【提示】使用高压蒸汽灭菌锅时，加压之前一定要把原先的空气排尽，注意恒温灭菌，同时要注 意高压蒸汽灭菌锅的压力(100 kPa)、温度(121 °C )和灭菌时间(20 min)。
6、无菌操作和接种技术 (1) 接种 概念：在_无菌条件下将微生物接入培养基_的操作过程。 工具：玻璃刮铲、接种针和接种环。 方法：穿刺接种、斜面划线接种和平板划线接种、涂抹平板等。 (2 )无菌操作微生物接种技术的关键 ①培养微生物用的试管、培养皿和微生物培养基等，在接种之前都需要灭菌 ②通常接种操作要在一酒精灯火焰一的附近进行。 【想一想】在微生物的培养过程中为什么要进行无菌操作？ 提示：无菌操作的目的是防止受到空气中的杂菌污染。 7、微生物的分离 (1) 原理：根据微生物对「营养成分、氧气、pH等要求的不同，通过只提供目的微生物生长的必需条件，或加入某些抑制剂使非目的微生物不能生长，从而达到选择分离微生物的目的。 (2) 方法 ①据菌落形态特征初步分离 ②常用方法一一平板分离法 涂抹平板法 混合平板法 分类平板划线法 :是常用的平板分离法， 有扇形划线、连续划线、交叉 划线和方格划线等 目的：在培养基上得到目的微生物的单个菌落 【归纳】无菌技术的具体内容 (1) 对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行清洁和消毒。 (2) 将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌。 (3) 实验操作应在酒精灯火焰附近进行，以避免周围环境中微生物的污染。 ⑷实验操作时应避免已灭菌处理的材料用具与周围物品接触。 (5)在微生物的实验室培养中，无菌技术的核心是防止杂菌污染，保证培养物的纯度。 &平板分离法 ①原理：大多数细菌、许多真菌和单细胞藻类能在固体培养基上形成孤立的菌落。平板分离法能将单个微生物分离和固定在固体培养基表面或里面，每个孤立的活微生物体经过生长、繁殖均可形成便于移植的菌落。 ②常用培养基：最常用的分离、培养微生物的固体培养基是琼脂固体培养基。 ③方法：⑴涂抹平板法：分离材料进行10倍系列稀释，取一定稀释度样品倒入预先准备好的琼脂 平板，用无菌玻璃刮铲将样品涂布均匀，细菌菌落常仅在平板表面生长。 (2) 混合平板法：分离材料进行10倍系列稀释，取一定稀释度样品与溶 化的琼脂混合，将 与样品混合的琼脂倒入无菌平皿，细菌菌落出现在平板表面及内部。 ⑶平板划线法：有扇形划线、连续划线、方格划线等。 4?目的：通过采用各种平板分离法在培养基上得到目的微生物的单个菌落。
微生物肥料术语（NY/T 1113-2006） 1 范围 本标准规定了微生物肥料产品类型、菌种、培养基、灭菌、生产和质量检验等方面的主要术语。 本标准适用于微生物肥料生产、质检、应用、科研和教学等领域。 2 产品类型 2.1 微生物肥料microbial fertilizer; biofertilizer 含有特定微生物活体的制品，应用于农业生产，通过其中所含微生物的生命活动，增加植物养分的供应量或促进植物生长，提高产量，改善农产品品质及农业生态环境。 注：目前，微生物肥料包括微生物接种剂（2.2）、复合微生物肥料（2.3）和生物有机肥（2.4）。 2.2
微生物接种剂microbial inoculant [微生物]菌剂 一种或一种以上的目的微生物经工业化生产增殖后直接使用，或经浓缩（6.10）或经载体（6.9）吸附（6.11）而制成的活菌制品。 2.2.1 单一菌剂single species inoculant 由一种微生物菌种制成的微生物接种剂（2.2）。 2.2.2 复合菌剂multiple species inoculant 由两种或两种以上且互不拮抗的微生物菌种制成的微生物接种剂（2.2）。 2.2.3 细菌菌剂bacterial inoculant
以细菌为生产菌种制成的微生物接种剂（2.2）。 2.2.4 放线菌菌剂actinomycetic inoculant 以放线菌为生产菌种制成的微生物接种剂（2.2）。 2.2.5 真菌菌剂fungal inoculant 以真菌为生产菌种制成的微生物接种剂（2.2）。 2.2.6 固氮菌菌剂azotobacteria inoculant 以自生固氮菌和/或联合固氮菌为生产菌种制成的微生物接种剂（2.2）。 2.2.7
微生物的概念及其在生物分类中的地位 录入时间:2011-4-15 11:11:57 来源：中国食品商务网 1.1 微生物的概念 微生物（Microorganism, microbe）一词并非生物分类学上的专门名词，而是指大量的、极其多样的、不借助显微镜看不见的微小生物类群的总称。因此，微生物通常包括病毒、细菌、真菌、原生动物和某些藻类，它们的大小和特征见表1-1。 表1-1.微生物形态、大小和细胞类型 微生物大小近似值细胞特征 病毒0.01～0.25μm非细胞的 细菌0.1～10μm原核生物 真菌2μm～1m 真核生物 原生动物2～1000μm真核生物 藻类1μm～几米真核生物 但是有些例外。如许多真菌子实体、蘑菇等常肉眼可见；相同的，某些藻类能生长几米长。一般来说，微生物可以认为是相当简单的生物，大多数的细菌、原生动物、某些藻类和真菌是单细胞的微生物，即使为多细胞的微生物，也没有许多的细胞类型。病毒甚至没有细胞，只有蛋白质外壳包围着的遗传物质，且不能独立生活。 1.2 微生物在生物分类中的地位 在生物发展的历史上，曾把所有的生物分为动物界和植物界两大类。而
微生物，不仅形体微小、结构简单，而且它们中间有些类型像动物，有些类型像植物，还有些类型既有动物的某些特征，又具有植物的某些特征，因而归于动物或植物都不合适。于是，1866年海克尔（Haeckel）提出区别动物界与植物界的第三界——原生生物界。它包括藻类、原生动物、真菌和细菌。
随着科学的发展，新技术和研究方法的应用，尤其是电子显微镜和超显微结构研究技术的应用，发现了生物的细胞核有两种类型，一种是没有真正的核结构，称为原核，其细胞不具核膜，只有一团裸露的核物质；另一种是由核膜、核仁及染色体组成的真正的核结构称为真核。动物界、植物界及原生生物界中的大部分藻类、原生动物和真菌是真核生物，而细菌、蓝细菌则是原核生物。真核生物和原核生物不仅细胞核的结构不同，而且其性状也有差别，真核生物和原核生物性状的比较内容将在第二章详细介绍。 根据核结构的不同，1969年魏塔科（Whittaker）提出五界系统，即动物界、植物界、原生生物界、真菌界和原核生物界。五界系统的生物都有细胞结构。病毒作为一界被提出的较晚，主要原因是①病毒和类病毒是生物还是非生物，是原始类型还是次生类型是长期争论未决的问题；②病毒不是用双命法，分类不用阶元系统。但经过长期研究发现，病毒和细胞型生物是有共同特性：①遗传物质是DNA（部分病毒是RNA）；②使用共同的遗传密码。在此基础上，我国学者于1979年提出将无细胞结构病毒立为病毒界，从而建立了六界系统。 细胞型生物 动物界（Animalia） 植物界（Plantae）
微生物肥料生产新技术 Company Document number：WTUT-WT88Y-W8BBGB-BWYTT-19998
微生物肥料生产新技术 一、微生物肥料生产新工艺及流程 一般传统的微生物肥料生产工艺是：保藏菌种→斜面菌种培养活化→摇瓶扩大培养→发酵罐液体发酵→按一定的比例用草炭吸附后包装或按一定的比例稀释后直接包装。建立这样的生产企业需要建立大面积的无菌培养室、购置发酵罐、空压机、过滤器等设备，而且培养、发酵条件不易控制，菌种质量难以保证，投资大、成本高。 河北省生物工程技术公司针对众多微生物肥料生产企业中存在的上述难题，联合河北农业大学、河北大学、河北省科学院微生物研究所等单位微生物专家，经多年研究攻关、多次实验，开发出微生物肥料生产新工艺，成功解决了上述难题，非常适合中小微生物肥料生产企业采用，尤其是特别适合现有的复混肥料、有机肥料生产企业生产生物有机无机肥料、生物有机肥料，作为其产品功能更新、升级或提高应用效果而添加。 河北省生物工程技术公司微生物肥料新的生产工艺是：使用公司新开发出的高活性、高含量微生物菌粉按一定比例直接加入或包衣到有机肥或复混肥料中，即可生产出符合国家农业部登记标准要求的微生物菌剂、生物有机肥、复合微生物肥料、微生物冲施肥、拌冲剂等产品。 具体工艺流程为： （1）微生物菌剂工艺： 草炭或其他吸附剂 + 菌粉微生物固体菌剂或颗粒肥包装 （2）生物有机肥工艺： 有机肥粉状或颗粒 + 菌粉生物有机肥包装 （3）复合微生物肥料（生物复混肥）：
化肥（N、P、K）配料→混合→造粒→烘干冷却→筛分→ 包装 菌粉 （4）微生物冲施肥微生物拌种剂 和其他辅料配比制成微生物冲施肥及拌种挤 上述新工艺，实际上相当于将微生物肥料生产中投资大、工艺复杂、技术难度大、质量要求高、用量少的菌剂生产环节交给我们来完成，由我们统一规模化生产提供给每个企业。这样将使微生物肥料的生产变得简便、高效、低成本。就象手机市场研发出强大的手机芯片，从而使手机生产变得简化进而出现山寨手机一样，高活性的菌粉就是这种“芯片”，只需嫁接到你的产品中，即可生产出各种成分、含量的微生物肥料。所不同的是：高活性菌粉中的有效菌是国家已认可、明确用于农业生产的菌种，用于生产出来的各种微生物肥料均可获得农业部的微生物肥料登记证。 河北省生物工程技术公司提供的菌粉产品，采用现代化的生产设备，在工业化发酵生产生物肥料的基础上，将菌剂进一步浓缩低温脱水精制而成，实现了菌剂生产的规模化、现代化，保证了菌剂的质量，降低了成本。 二、高活性菌粉技术指标： 含（胶质芽孢杆菌）活性芽孢100亿/克个以上，有效期24个月 三、在微生物肥料生产中使用高活性菌粉的特点及优势 1、生产投资成本低
微生物学实验 实验一常用培养基的制备、灭菌与消毒 一、实验目的 了解培养基的配制原理；掌握配制培养基的一般方法和步骤；了解常见灭菌、清毒基本原理及方法；掌握干热天菌、高压蒸汽灭菌及过滤除菌的操作方法。 二、实验原理 培养基是人工按一定比例配制的供微生物生长繁殖和合成代谢产物所需要的营养物质的混合物。培养基的原材料可分为碳源、氮源、无机盐、生长因素和水。根据微生物的种类和实验目的不同，培养基也有不同的种类和配制方法。 牛肉膏蛋白胨培养基是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基，有时又称为普通培养基。由于这种培养基中含有一般细胞生长繁殖所需要的最基本的营养物质，所以可供微生物生长繁殖之用。 干热天菌、高压蒸汽灭菌方法主要是通过升温使蛋白质变性从而达到杀死微生物的效果。 三、试剂与器材 1.器材试管、三角瓶、烧杯、量筒、玻璃棒、培养基、分装器、天 平、牛角匙、高压蒸汽灭菌锅、pH度纸、棉花、牛皮纸、记号笔、麻绳、纱布、吸管、培养皿、电烘箱、注射器、微孔滤膜过滤器、镊子等。 2.试剂牛肉膏、蛋白胨、NaCl、琼脂 四、实验内容 1.称量→溶化→调pH→过滤→分装→加塞→包扎→灭菌→无菌检查 2.干热灭菌：装入待灭菌物品→升温→恒温→降温→开箱取物 3.高压蒸汽灭菌：加水→装物品→加盖→加热→排冷空气→加压→恒 压→降压回零→排汽→取物→无菌检查 4.过滤除菌：组装灭菌→连接→压滤→无菌检查→清洗灭菌 五、关键步骤及注意事项 1.要严格按配方配制。 2.调pH不要过头。
3.干热灭菌要注意物品不要堆放过紧，注意温度的时间控制，70oC 以下放物、取物。 4.高压灭菌要注意物品不要过多，加热后排除冷空气，到时降压回零 取物。 5.过滤除菌要注意各部件灭菌，压滤时，压力要适当，不可太猛太快， 滤膜要注意清洗保存。 六、思考题 1.培养基配好后，为什么必须立即灭菌?如何检查灭菌后的培养基是 无菌的? 2.在配制培养基的操作过程中应注意些什么问题?为什么? 3.培养微生物的培养基应具备哪些条件?为什么? 4.培养基的配制原则是什么? 实验二土壤中微生物分离纯化培养 一、实验目的 掌握倒平板的方法和几种常用的分离纯化微生物的基本操作技术；了解不同的微生物菌落在斜面上、半固体培养基和液体培养基中的生长特征；进一步熟练和掌握微生物无菌操作技术；掌握微生物培养方法。 二、实验原理 从混杂的微生物群体中获得只含有某一种或某一株微生物的过程称为微生物的分离与纯化。常用的分离、纯化方法：单细胞挑取法，稀释涂布平板法，稀释混合平板法，平板划线法稀释涂布平板法步骤：倒平板－制备土壤污水稀释液－涂布－培养－挑菌落；平板划线法步骤：倒平板－标记培养基名称－划线。 三、试剂与器材 1.器材盛9m1无菌水的试管、盛90m1无菌水并带有玻璃珠的三角 烧瓶、无菌玻璃涂棒、无菌吸管、接种环、酒精灯、无菌培养皿、显微镜、血细胞计数板等。 2.试剂牛肉膏蛋白胨培养基，高氏1号培养基，查氏培养基 四、实验内容
《微生物学》复习题 一、名词解释 1.微生物 一类个体微小，结构简单，必须借助显微镜才能看见，单细胞，简单多细胞，甚至无细胞结构的低等微生物通称 2.病原微生物 指可以侵入人体，引起感染甚至传染病的微生物，或称病原体。 3. 性菌毛 又称性毛，性丝，是一种长在细菌体表的纤细，中空，长直的蛋白质类附属物，比菌毛长，且每一个细胞仅一至少数几根。 4.菌落 是由单个细菌细胞或一堆同种细胞在适宜固体培养基表面或内部生长繁殖到一定程度，形成肉眼可见的子细胞群落。 5.质粒 凡游离于原核生物核基因组以外，具有独立复制能力的小型共价闭合环状的dDNA分子6、荚膜 某些细菌表面的特殊结构，是位于细胞壁表面的一层松散的粘液物质。 7.芽孢 某些细菌在其生长发育后期，一定条件下，在细胞内形成的一个圆形或椭圆形，厚壁，含水量极低，抗逆性极强的休眠构造。 8.菌毛 又称纤毛，伞毛，线毛或须毛，是一种长在细菌体表的纤细，中空，短直且数量较多的蛋白质类附属物。 9.细菌生长曲线 定量描述液体培养基中微生物群体生长规律的试验曲线。 10.酵母菌 一般泛指能发酵糖类的各种单细胞真菌的通俗名称。 11.病毒 是一类由核酸和蛋白质等少数几种成分组成的超显微“非单细胞生物”，其本质是一类含DNA或RNA的特殊遗传因子。 12、培养基 是指由人工配置的，含有六大营养要素，适合微生物生长繁殖或产生代谢产物用的混合营养料。
13. 消毒 采用较温和的理化因素，仅杀死物体表面或内部一部分对人体或动植物有害的病原菌，而对被消毒对象基本无害的措施。 14. 灭菌 采用强烈的理化因素使任何物体内外部的一切微生物永远丧失其生长繁殖能力的措施。 15. 无菌操作 用于防止微生物进入人体或其他无菌范围的操作技术。 16. 自发突变 是指物体在无人干预下自然发生的低频率突变。 17. 诱变 即诱发突变，是指通过人为的方法，利用物理，化学或生物因素显著提高基因自发突变频率的手段。 18.变异 指生物体在某种外因或内因的作用下引起的遗传物质结构或数量的改变，亦遗传型的改变。 19.营养缺陷型 指微生物等不能在无机盐类和碳源组成的基本培养基中增殖，必须补充一种或一种以上的营养物质才能生长。 20. 抗体 是高等动物体在抗原物质的刺激下，由浆细胞产生的一类能与相应抗原在体内发生特异结合的免疫球蛋白。 21. 传染 又称感染或侵染，指外源或内源性病原体在突破其宿主的三道防线（机械屏障，非特异性免疫和特异性免疫）后，在宿主的特定部位定居，生长，繁殖，产生特殊酶和毒素，进而引起一系列病理，生理性反应的过程。 22. 人畜共患病 即人和脊椎动物由同一种病原体引起的，在流行病学上密切相关的一类传染病。 23. 毒力 又称致病力，表示病原体致病能力的强弱。 24. 抗原 是一类能诱导机体发生免疫应答并能与相应抗体或T淋巴细胞受体发生特异性反应的大分子物质。 25.细胞因子 曾称淋巴因子，是一类存在于人和高等动物体中的，由白细胞和其他细胞合成的异源性
NY 227—94 微生物肥料标准 1 主题内容与适用范围 本标准规定了微生物肥料产品的分类、技术要求、试验方法、检验规则、包装、标志、运输与贮存。 本标准适用于有益微生物制成的，能改善作物营养条件(又有刺激作用)的活体微生物肥料制品。 2 引用标准 GB 8172 蛔虫卵测定方法 GB 4789 大肠菌值测定方法 GB 7468 总汞测定方法 GB 7471 总镉测定方法 GB 7466 总铬测定方法 GB 7485 总砷测定方法 GB 7470 总铅测定方法 3 产品分类 3.1 根瘤菌肥料：能在豆科植物上形成根瘤(或茎瘤)，同化空气中的氮气，供应豆科植物的氮素营养。用根瘤菌属(Rhizobium)或慢生根瘤菌属(Bradyrhizobium) 的菌株制造。 3.2 固氮菌肥料：在土壤和很多作物根际中同化空气中的氮气，供应作物氮素营养；又能分泌激素刺激作物生长。用下列菌种之一制造。 固氮菌属(Azotobacter) 氮单胞菌属(Azomonas) 固氮根瘤菌属(Azorhizobium) 根际联合固氮菌：固氮螺菌属(Azospirillum) 阴沟肠杆菌(Enterobacter cloacea)经鉴定为非致病菌 粪产碱菌(Alcaligenes faecalis)经鉴定为非致病菌 肺炎克氏杆菌(Klebsiella pneumoniae)经鉴定为非致病菌
其他经过鉴定的用于固氮菌肥料生产的菌种。 这些菌主要特征是在含一种有机碳源的无氮培养基中能固定分子态氮。 3.3 磷细菌肥料：能把土壤中难溶性磷，转化为作物可以利用的有效磷，改善作物磷素营养。用下列菌种之一制造。 分解有机磷化合物的细菌： 解磷巨大芽胞杆菌(Bacillus megatherium phosphaticum) 解磷珊瑚红赛氏杆菌(Serratia carollera phosphaticum) 节杆菌属中的一些种(Arthrobacter sp.) 转化无机磷化合物的细菌： 假单胞菌属中的一些种(Pseudomonas sp.) 其他经过鉴定的用于磷细菌肥料生产的菌种。 有机磷细菌在含磷矿粉或卵磷脂的合成培养基上有一定解磷作用，在麦麸发酵液中都含 刺激植物生长的生长素物质。 无机磷细菌具有溶解难溶性磷酸盐的作用。 3.4 硅酸盐细菌肥料：能对土壤中云母，长石等含钾的铝硅酸盐及磷灰石进行分解，释放出钾、磷与其他灰分元素，改善作物的营养条件。本品的生产菌种为胶质芽胞杆菌(Bacillus mucilginosus) 的菌株及其他经过鉴定的用于硅酸盐细菌肥料生产的菌种。 该菌在含钾长石粉的无氮培养基上有一定解钾作用，菌体内和发酵液中存在刺激植物生 长的生长素物质。 3.5 复合微生物肥料：含有上述(解磷、解钾、固氮微生物)或其他经过鉴定的两种以上互不 拮抗微生物，通过其生命活动，能增加作物营养供应量。 4 技术要求 4.1 成品技术指标1) 表1成品技术指标1) 剂型→ 项目液体固体颗粒
微生物基础知识考试试题 部门姓名得分 一、填空题（共30分，每空1分） 1.药品污染的主要途径、、、、。 2.引起药品腐败的微生物有、、、等。 3.常用的灭菌法有、、、 、。 4.细菌的形态有、、。 5.常用的消毒剂有、、、、等。 6.细菌生长最适宜的温度为；霉菌、酵母菌最适宜生长温度是℃；大肠杆菌最适宜生长温度为℃。 7.形体最微小，结构最简单的微生物是。 8.干热灭菌常用 2小时。 9.用乙醇进行消毒时，最佳浓度是。 10.细菌细胞由、、、核质组成。 二、判断（共20分，每题2分） 1.微生物数量多、分布广，但繁殖不快，适应性不强。（） 2.被微生物污染的药品可能会使其失去有效性。（） 3.无菌操作的目的是保证所生产药品不被环境中的微生物污染。（） 4.热致死点越高，说明微生物对温度的抗性越强。（） 5.食品中添加抑菌剂，可以杀灭含有的全部微生物。（） 6.病毒形体微小，必须用普通光学显微镜才能观察形态。（） 7.消毒剂品种应定期更换，防止产生耐药菌株。（）
8.高压蒸汽灭菌可以最为有效地除去物品内外的微生物. （） 9.霉菌不属于单细胞微生物。（） 三、名词解释（共30分，每题10分） 1.微生物： 3.消毒： 四、简答题（共20分） 1.微生物按结构划分的种类及微生物特点。（10分） 2.紫外线辐射和60Co灭菌的特点。（10分）
一、填空题（共30分，每空1分） 1.药品污染的主要途径空气、原辅料、水、设备与建筑、人员。 2.引起药品腐败的微生物有细菌、真菌、病毒、细菌内毒素及热原等。 3.常用的灭菌法有干热灭菌法、湿热灭菌法、气体灭菌法、滤过灭菌法、辐射灭菌法。 4.细菌的形态有球菌、杆菌、螺旋菌。 5.常用的消毒剂有乙醇、甲醛、苯扎溴铵、过氧乙酸、碘酒等。 6.细菌生长最适宜的温度为；霉菌、酵母菌最适宜生长温度是25～28℃； 大肠杆菌最适宜生长温度为36±1 ℃。 7.形体最微小，结构最简单的微生物是病毒。 8.干热灭菌常用160℃-170℃2小时。 9.用乙醇进行消毒时，最佳浓度是70%-75％。 10.细菌细胞由细胞壁、细胞膜、细胞质、核质组成。 二、判断（共20分，每题2分） 1.微生物数量多、分布广，但繁殖不快，适应性不强。（×） 2.被微生物污染的药品可能会使其失去有效性。（√） 3.无菌操作的目的是保证所生产药品不被环境中的微生物污染。（√） 4.热致死点越高，说明微生物对温度的抗性越强。（√） 5.食品中添加抑菌剂，可以杀灭含有的全部微生物。（×） 6.病毒形体微小，必须用普通光学显微镜才能观察形态。（×） 7.消毒剂品种应定期更换，防止产生耐药菌株。（√） 8.高压蒸汽灭菌可以最为有效地除去物品内外的微生物.（√） 9.霉菌不属于单细胞微生物。（√） 三、名词解释（共30分，每题10分） 1.微生物：一般地说是指一群形态上、结构上都很简单的生物体。它们是一群在光学显微镜或电子显微镜下放大几百倍，几千倍甚至几万倍才能看到的微小生物，因为人类肉眼无法觉察或辨清，故称之微生物。 2.灭菌：用物理方法或化学药品杀灭物体上所有的微生物，包括致病菌和非致病菌，繁殖体和芽孢。 3.消毒：消毒是指杀灭病原微生物的繁殖体，但杀不死芽孢等全部微生物。 四、简答题（共20分） 1.微生物按结构划分的种类及微生物特点。（10分） 微生物按种类划分： （1）非细胞型微生物：即生命现象不以细胞的形式表现。如病毒。 （2）原核细胞型微生物：虽有细胞结构，但仅有原始核。如细菌。 （3）真核细胞型微生物：有细胞结构，细胞核分化程度较高。如霉菌、酵母菌。 微生物特点： （1）体积小、面积大。（2）数量多、分布广。（3）新陈代谢旺盛、繁殖速度快。 （4）变异快、适应性强。（5）代谢强，转化快。 2.紫外线辐射和60Co灭菌的特点。 紫外线辐射穿透力很弱，不能穿透正常的包装物质，即使是一层纸、塑料薄膜等。主要用于空气灭菌、物体表面灭菌。 60Co灭菌穿透力强，可穿透数厘米厚的铅。辐射能量可直接作用于细胞蛋白质分子，伤害细胞导致死亡。 全等三角形提高练习
微生物肥料生物安全通用技术准则（NY 1109-2006） 1 范围 本标准规定了微生物肥料使用菌种安全性分级目录、不同菌种及产品选择毒理学试验的原则、程序、试验方法和结果评价方法。 本标准适用于中华人民共和国境内生产、销售的微生物肥料。 2 规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。 GB 15193.3-2003 急性毒性试验 GB/T 4789.28-2003 食品卫生微生物学检验染色法、培养基和试剂 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本标准。 3.1 半数致死量 median lethal dose,LD50 是经口给予受试物后，预期能够引起动物死亡率为50%的单一受试物剂量，该剂量为经过统计得出的估计值。其单位是每千克体重所摄入受试物质的毫克数、克数或毫升数，即mg/kg体重、g/kg体重或mL/kg体重。 4 选择毒理学试验的原则 4.1 生产用菌种
微生物肥料生产用菌种分为四级管理，其安全分级目录见附录A。未列入附录A中的菌种，除根瘤菌和乳杆菌(Lactobacillus）外，其余均需做毒理学试验。 4.1.1第一级（A.1）为免作毒理学试验的菌种。 4.1.2 第二级（A.2）为需做急性毒性试验的菌种。 4.1.3 第三级（A.3）为需做致病性试验的菌种。 4.1.4 第四级（A.4）为禁用菌种。 4.2 产品 4.2.1 除有机物料腐熟剂以外的固体微生物接种剂类产品均免做毒理学试验。 4.2.2 复合微生物肥料、生物有机肥和液体剂型微生物接种剂等需做急性毒性试验。 5 毒理学试验程序 5.1 菌种毒理学试验程序 5.1.1 应提供微生物肥料生产用菌种的鉴定资料，包括属及种的拉丁文学名和中文译名、形态、生理生化特性及鉴定依据、功能评价等资料。 5.1.2 根据产品所含菌种的鉴定资料，依据附录A之规定，确定菌种安全级别、是否做毒理学试验及毒理学检测项目。 5.1.3 对于需要做毒理学试验的菌种，生产者需提供试验用纯菌种斜面，经复核确认与该菌种鉴定资料相符且无杂菌污染后，进行毒理学试验。 5.2 产品毒理学程序 需对送检产品进行菌种和载体物料的真实性确认后，进行毒理学试验。 6 试验方法
微生物知识简介
现代环境生物技术原理与应用考题 一、请详细论述微生物的特点与污染控制工程的关系。 微生物主要有：病毒，原核微生物（以细菌为例），真核微生物（以酵母菌为例）等几种 病毒 形态---大多数小直径100nm左右，形态多样：砖状，子弹状，球状，蝌蚪状，杆状，卵圆状，丝状等。 结构：病毒中心是核酸(RNA)，外面包被着1层有规律地排列的蛋白亚单位，称为衣壳。构成衣壳的形态亚单位称为壳粒，由核酸和衣壳蛋白所构成的粒子称为核衣壳。核衣壳外面有一层由脂类货脂蛋白组成的包膜，包膜上还可有刺突。 特性： 1体积微小2非细胞结构3病毒的化学组成比较简单4严格活细胞内寄生 5以复制方式繁殖6特殊的抵抗力 病毒在污染控制方面的意义： 日常生活中，通过水传播的人类病毒超过100多种，检测水中纷繁的病毒极为困难。需要寻找一种指示微生物显得十分必要。噬菌体与肠道病毒的结构、组成、大小和复制方式等具有相似性，因此，噬菌体是较理想的水环境肠道病毒
指示生物，目前已经得到了广泛的应用如：大肠杆菌噬菌体（SC噬菌体）、F-RNA噬菌体、脆弱拟杆菌噬菌体等病毒均有十分良好的指示效果。 原核微生物 形态：以球状，杆状，螺旋状，丝状为主。 例如细菌个体形态有三类：球状，杆状，螺旋状 放线菌个体具有发育良好的分支状菌丝体,少数为杆状或原始丝状的简单形态。蓝细菌形态多样，一般有球状，杆状，单生或者形成团聚体。也有丝状和螺旋状的蓝细菌。 结构：1有核糖体和裸露的环状DNA 2有细胞质,细胞膜；没有真正细胞核,但有拟核； 3.有核糖体,没有其他被磨包围的细胞器：线粒体，溶酶体，内质网，过氧化氢酶等 4.大多数都有细胞壁4 特性：单细胞动物, 原核生物,最主要的特点是没有细胞核、染色体，即DNA外无蛋白质包裹。其次，原核生物体内无高级的细胞器（线粒体、叶绿体、高尔基体等），他只含有核糖体。另外，原核生物有细胞壁，但其成分和植物的不同，植物的是纤维素，原核生物是肽聚糖。原核生物外还有鞭毛等. 原核微生物在污染控制方面的意义: 细菌对污染物的净化处理
微生物肥与有机肥的区 别 标准化管理处编码[BBX968T-XBB8968-NNJ668-MM9N]
微生物肥与有机肥的区别 随着微生物肥料的兴起，不少农民难免会产生一种疑问，微生物肥料和有机肥到底有啥区别 首先咱们从微生物肥料与有机肥的定义上进行分析。元和绿宝 “微生物肥料”俗称菌肥，从字面上看，就是含有有益微生物群落的肥料，它属于一种活体肥料，主要是通过它含有的大量有益微生物的生命来实现菌肥的作用。元和农业“有机肥”也就是咱们俗称的农家肥，农家肥的主要来源是动植物，为作物提供包括多种、肽类以及包括氮、磷、钾在内的丰富的。增加土壤有机质，促进微生物繁殖。 从菌肥与有机肥的作用机理来看。菌肥实际上就是一群微生物群体，它可以给特定的作物提供对作物生长有益的微生物群，首先我们要明白微生物肥料并不是直接提供给作物营养的，菌肥是通过微生物的生命活动为作物增加养分促进生长。以多孢菌的解磷作用为例，多孢菌通过代谢活动产生有机酸(氨基酸、草酸、延胡索酸等)，这些酸一方面直接溶解土壤中难溶性磷酸盐，也能从难溶的无机磷灰石中释放出正磷酸盐。而有机肥是直接给作物提供营养元素的。有机肥在土壤中通过不断地矿化，可持续较长时间的为作物提供多种营养还有活性物质，尤其是有机物中丰富的碳源可以促进植物的生长。 最后咱们从他们的作用来看看菌肥和有机肥的不同之处。微生物肥料有四大主要作用，其中有①增加土壤肥力、②防治有害微生物、③促进植物增长、④提高作物品质。还是以多孢菌为例来讲这四个作用：1）多孢菌驶入土壤后，能够分解固化的无机盐分，使其成为植物可吸收利用的营养，这样就降低了盐分含量，缓解了土壤的盐渍化，消除了土壤板结，促进土壤团粒结构的形成，提高了土壤的保水保肥能力，并清洁了土壤，从而增加土壤的肥力；2）多孢菌生长过程中能代谢分泌细菌素（枯草菌素、多粘菌素、几丁质
微生物学实验复习题 一、选择题 1.革兰氏染色的关键操作步骤是： A. 结晶紫染色 B. 碘液固定 C. 酒精脱色 D. 复染 2.放线菌印片染色的关键操作是： A. 印片时不能移动 B. 染色 C. 染色后不能吸干 D. A和C 3.高氏培养基用来培养： A. 细菌 B. 真菌 C. 放线菌 4.肉汤培养基用来培养: A. 酵母菌 B. 霉菌 C. 细菌 5.无氮培养基用来培养: A. 自生固氮菌。 B. 硅酸盐细菌 C. 根瘤菌 D. A、B 均可培养 E. A、B、C 均可培养 6.在使用显微镜油镜时，为了提高分辨力，通常在镜头和盖玻片之间滴加: A. 二甲苯 B. 水 C. 香柏油 7.常用的消毒酒精浓度为: A. 75% B. 50% C. 90% 8.用甲醛进行空气熏蒸消毒的用量是: A. 20ml/M3 B. 6ml/M3 C. 1ml/M3 9.实验室培养基高压蒸汽灭菌的工艺条件是: A. 121℃/30min B. 115℃/30min C. 130℃/30min
10.巴氏消毒的工艺条件是: A. 62-63℃/30min B. 71-72℃/15min C. A.B. 均可 11.半固体培养基的主要用途是: A. 检查细菌的运动性 B. 检查细菌的好氧性 C. A.B. 两项 12.半固体培养基的琼脂加入量通常是: A. 1% B. 0.5% C. 0.1% 13.使用手提式灭菌锅灭菌的关键操作是: A. 排冷气彻底 B. 保温时间适当 C. 灭菌完后排气不能太快 D. A-C 14.目镜头上的“K”字母表示: A. 广视野目镜 B. 惠更斯目镜 C. 补偿目镜 15.目镜头上的“P”字母表示: A. 平场目镜 B. 广视野目镜 C. 平场补偿目镜 16.物镜头上的“PL”字母表示: A.正低相差物镜 B.正高相差物镜 C.负高相差物镜 17.物镜头上的“UVFL”字母表示。 A. 无荧光物镜 B. 照相物镜 C. 相差物镜 18.镜头上标有“TC”字母的镜头是: A. 相差调整望远镜 B. 摄影目镜 C. 相差目镜 19. “PA”表示: A. 马铃薯培养基 B. 高氏培养基 C. 肉汤培养基 20.无菌室空气灭菌常用方法是: A. 甲醛熏蒸 B. 紫外灯照射
微生物肥料生物安全通用技术准则NY-1109-2006
微生物肥料生物安全通用技术准则（NY 1109-2006） 1 范围 本标准规定了微生物肥料使用菌种安全性分级目录、不同菌种及产品选择毒理学试验的原则、程序、试验方法和结果评价方法。 本标准适用于中华人民共和国境内生产、销售的微生物肥料。 2 规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。 GB 15193.3-2003 急性毒性试验 GB/T 4789.28-2003 食品卫生微生物学检验染色法、培养基和试剂 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本标准。 3.1 半数致死量 median lethal dose,LD 50 是经口给予受试物后，预期能够引起动物死亡率为50%的单一受试物剂量，该剂量为经过统计得出的估计值。其单位是每千克体重所摄入受试物质的毫克数、克数或毫升数，即mg/kg体重、g/kg体重或mL/kg体重。
4选择毒理学试验的原则 4.1生产用菌种 微生物肥料生产用菌种分为四级管理，其安全分级目录见附录A。未列入附录A中的菌种，除根瘤菌和乳杆菌(Lactobacillus）外，其余均需做毒理学试验。 4.1.1第一级（A.1）为免作毒理学试验的菌种。 4.1.2 第二级（A.2）为需做急性毒性试验的菌种。 4.1.3 第三级（A.3）为需做致病性试验的菌种。 4.1.4 第四级（A.4）为禁用菌种。 4.2产品 4.2.1 除有机物料腐熟剂以外的固体微生物接种剂类产品均免做毒理学试验。 4.2.2 复合微生物肥料、生物有机肥和液体剂型微生物接种剂等需做急性毒性试验。 5 毒理学试验程序 5.1 菌种毒理学试验程序 5.1.1 应提供微生物肥料生产用菌种的鉴定资料，包括属及种的拉丁文学名和中文译名、形态、生理生化特性及鉴定依据、功能评价等资料。 5.1.2 根据产品所含菌种的鉴定资料，依据附录A之规定，确定菌种安全级别、是否做毒理学试验及毒理学检测项目。
微生物基础知识试题 部门：____________ 姓名：______________ 成绩：____________ 一、填空题（每空2分，共40分） 1、微生物的形体极度小，必须借助于_____________或______________放大数， 百倍、千倍至数万倍，常用______________、______________作为测量单位。 2、微生物分布广泛，存在于_________、_______、_________、______________ 、______________之表以及______________。 3、原核细胞生物由_____________构成，真核细胞生物多数由_____________组成。 4、利用某种微生物制成_____________或____________为人类预疾病。 5、活性粒子是夹带有大量_____________的粒子，非活性粒子是单纯的_____________粒 子。水是制药企业的____________或____________，由于水的污染，将直接导入污染源。 6、热力灭菌利用高温杀微生物可分为__________________、________________。 二、多项选择题（共15分） 1、来苏（甲酚皂）2%的水溶液用于（）消毒。 A．皮肤B、设备C、容器D、空气 2、常用的消毒剂75%的乙醇用于（）消毒。 A．皮肤工具B、设备C、容器D、空气 3、消毒剂用于表面活性剂0.1-0.2%的新洁尔灭液，用于（）消毒。 A．皮肤B、工具C、地漏D、容器 4、37-40%的甲醛液8-9ml/m3( )消毒。 A．皮肤B、工具C、地漏D、室内 5、常用的灭菌器主要有（） A．高压蒸汽灭菌器B、烘箱C、紫外线灯