山药多糖的提取及含量测定
摘要：山药又称薯蓣、土薯、山薯蓣、怀山药、淮山、白山药，是《中华本草》收载的草药，药用来源为薯蓣科植物山药干燥根茎。冬季茎叶枯萎后采挖，切去根头，洗净，除去外皮及须根，用硫黄熏后干燥，也有选择肥大顺直的干燥山药，置清水中，浸至无干心，闷透，用硫黄熏后，切齐两端，用木板搓成圆柱状，晒干，打光，称“光山药”。有滋养强壮，助消化，敛虚汗，止泻之功效，主治脾虚腹泻、肺虚咳嗽、糖尿病消渴、小便短频、遗精、妇女带下及消化不良的慢性肠炎。山药在食品业和加工业上大有发展前途。
关键词：山药提取含量测定
1 概述
山药的名称很多，例如淮山、淮山药、大薯、脚板苕、佛掌薯、扇子薯等，为一年生或多年生缠绕性藤本植物。山药为薯蓣科，是植物薯蓣的地下肉质块茎，既是一味重要中药，又是一种常见蔬菜。目前其营养价值和药用价值已逐步被人们重视和认可。山药始载于《神农本草经》，列为上品，谓其“味甘、温，补虚赢、除寒热邪气、补中益气力、长肌肉、久服耳目聪明。”不仅如此，历代古书对山药的平补作用均有记载。现代的研究表明，山药不仅具有多种营养成分，而且具有很高的药用价值，是卫生部公布的药食兼用植物之一。
1.1 结构
山药中具有较多的粘液质，粘液质是多糖与蛋白质的复合体经分析其内蛋白质占47.6%，多糖占52.4%不同山药中含量有所不同山药中多糖含量0.06%-1.09%分为酸性多糖和中性多糖，主要成分是甘露聚糖，半乳糖，木糖，葡萄糖和阿拉伯糖等。
1.2 山药多糖的药理作用
1.2.1 降血糖作用
山药是中医治疗消渴症的主要药物，山药多糖的降糖作用是近年来山药多糖研究的热点。山药提取物对禁食大鼠和兔有降血糖作用，能控制四氧嘧啶引起的高血糖。山药多糖可降低四氧嘧啶诱发的糖尿病大鼠血糖，大剂量山药多糖降糖更明显，降糖百分率随剂量增大而增加。山药多糖治疗糖尿病的具体机制目前还
不是很清楚，目前认为，山药多糖可以改善胰岛细胞功能，促进胰岛素的释放而使血糖降低，研究发现山药多糖可以使血清C肽水平增高，而C 肽是胰岛素原α链β链之间的连接肽，1分子胰岛素原裂解为1分子胰岛素及1 分子C肽，然后二者以等克分子分泌进入门静脉，由于C肽几乎不被肝脏摄取，C肽血液含量能准确反映胰岛功能水平高低，因此C肽值增高说明山药多糖可以增加胰岛素的分泌，改善受损的胰岛β细胞功能。
1.2.2 免疫调节作用
山药多糖既具有非特异性免疫功能，又具有提高特异性细胞免疫和体液免疫功能，因此对全面改善机体的免疫功能具有重要的意义。非特异性免疫是机体免疫系统的重要组成部分，单核巨噬细胞的吞噬能力是衡量机体非特异性免疫功能的标志之一。许多研究都表明，山药多糖对吞噬细胞的吞噬作用具有明显的促进作用。怀山药多糖可明显提高环磷酰胺所致免疫抑制小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬百分率和吞噬指数。低、中、高剂量（50、150、250 mg·kg-1·d-1）的山药多糖均可显著提高巨噬细胞的吞噬指数，高剂量组吞噬指数是对照组的3.9倍，表明山药多糖对巨噬细胞的吞噬功能具有极强的促进作用。山药多糖对小鼠非特异性免疫具有明显的促进作用。山药多糖还可以促进机体特异性免疫，山药多糖对细胞免疫和体液免疫均有明显促进作用，应用山药多糖可以极显著地提高T淋巴细胞的增殖能力。
1.2.3 抗氧化、抗衰老作用
研究发现山药多糖具有抗衰老作用，能显著降低促机体衰老酶的活性。目前，对自由基与衰老间的关系研究常以机体老化的代谢产物——血浆 LPO和组织脂褐素（LF）的含量为衰老的指标。代谢过程中所产生的自由基能作用于生物膜磷脂中的多不饱和脂肪酸，产生脂质过氧化物，如丙二醛（MDA），进而与磷脂酰乙醇胺和蛋白质交联成大分子复合物——脂褐素（老年色素），这是机体老化的一种标志，影响细胞代谢和功能形态改变，促进衰老和心脑血管硬化。山药多糖能降低小鼠LPO和脂褐质含量，这可能与清除体内自由基有关。
1.2.4 抗肿瘤作用
山药多糖具有刺激和调节人类免疫功能的作用，常作为增强免疫力的保健药品使用，山药多糖还能增强白细胞的吞噬作用。体外实验表明，山药多糖可作为抗癌的扶正药，这与它具有很强的免疫调节功能有关。低剂量山药多糖（50 mg/kg）对肺癌具有显著的抑制作用，而对黑色素瘤没有明显作用，而中剂量和
高剂量山药多糖对黑色素瘤和肺癌均有显著的抑制效果，且中等剂量最佳。在随后应用荷瘤小鼠对山药多糖抗肿瘤机制的研究中发现，山药多糖在体内能显著提高荷瘤小鼠的T淋巴细胞增殖能力和NK细胞活性，同时还能明显提高小鼠脾脏细胞产生IL-2的能力和腹腔巨噬细胞产生TNF-α的能力。而山药多糖在体外无抑瘤活性，只在体内具有强烈的抑瘤活性。
1.2.5 其他作用
山药多糖还具有抗突变作用，山药多糖对三种致突变物的致突变性均有显著抑制作用，而其抗突变作用的剂量-效应关系为对数曲线关系，即随着连续等量的递增每一平皿中受试物的剂量，所引起的抗突变作用逐渐增大。对其抗突变机制的研究表明，山药多糖的抗突变作用主要是通过抑制突变物对菌株的致突变作用而实现的，但也不排除去突变作用。山药作为传统补益中药，对机体具有广泛的作用，既是慢性病患者的食疗佳肴，也是老少皆宜的功能食品，其活性成分山药多糖是其发挥作用的主要成分。然而关于山药多糖的作用研究还需进一步深入，阐明其药理作用及机制，研究、探索中药的更大功用，让其更好地为人类健康造福。
2 提取方法
2.1 水提法
水提法是最简单,最常用的提取方法,但其特点是耗时长,提取效率不高.因水浸提受料液比,提取温度和提取时间的影响,研究者通过正交试验筛选出最佳的水提条件.如顾林等人在做山药多糖的分离纯化和组成研究就通过正交试验得出,山药多糖最佳水提条件为:料液比1:25,100摄氏度下下浸提2.5h。
2.2 超声提取法
超声提取法是利用超声波对细胞壁的破碎作用，促进胞内多糖的溶出,达到提高提取得率,缩短提取时间的目的。而影响超声波破壁的作用的因素主要有:超声功率,超声提取时间,料液温度,料液比等。李金忠等人网在单因素试验的基础上采用正交试验确定了超声提取山药多糖的最佳试验条件:超声功率1000W,超声提取时间50rain,提取温度100℃,料液比1:100.曾凡梅等人闻采用超声波协同纤维素酶破碎细胞壁提取山药多糖,通过正交试验确定的最佳提取工艺为:固液比1:15,酶量2%, pH值为4.72下,提取温度为5O,提取时间100min,功率为450W.
2.3 微波辅助提取
微波辅助提取法是近年来新兴的提取方法,具有绿色无害,提取率高,选择性高,省时有效低能耗等优点。许本波等人用微波辅助提取山药多糖,确立最佳提取条件为:微波功率464W,料液比1:20,浸提温度60℃,醇沉比4:1,山药多糖得率为10.52%。充分体现了微波提取法的优势。姬泓巍等人嗍对超声波和微波辅助提取山药多糖进行对比研究,发现微波提取山药多糖的得率高于超声波辅助提取。
3 山药多糖的纯化
3.1 化学试剂除杂
往往提取的山药粗多糖中还有许多杂质如蛋白质,脂类,色素等。常用的脱蛋白的方法有:Sevage法,氟氯乙烷法,氯乙酸法,酶法和等电点沉淀法。实验证明,Sevage法比较温和,而氯乙酸法反应剧烈。
3.2 色谱除杂
以往除去粗多糖杂质的方法常采用化学试剂的方法,在除去杂质的同时也会带走多糖.采用色谱层析的方法除杂能最大限度的减少多糖的损失,而且除杂效果远高于化学试剂法.已经有许多学者在纯化山药多糖时采用色谱技术,如顾林,王刚在山药多糖的纯化采用了DEAE柱层析和Sephadex法。
4 测定方法
4.1 紫外一可见分光光度法
紫外一可见分光光度法是目前测定多糖含量最常用的方法,常用的显色剂有苯酚,蒽酮一硫酸和3,5一二硝基水杨酸(DNS)。前两者主要利用多糖在强酸性条件下脱水生成糠醛或其衍生物,然后与酚类或者胺类反应缩合,生成有特定吸收波长的有色物质进行测定;DNS法则是利用了多糖的还原性。目前最常用的为苯酚硫酸法,曾儿梅采用此法测定山药中多糖的质量分数为24.8mg/g。
4.2 高效液相色谱法
日前,鲜有见运用高效液相色谱法测定山药多糖的报道，大部分报道都是以高效液相色谱来进行的实验。千刚在建立山药中多糖的含量测定时,选用
c58IOOA色谱柱(150mm×4.60mm),以乙腈一磷酸盐缓冲液(70:30)为流动相,以葡萄糖为对照品,在波长210nm下检测,结果在0.5～1.5g/L内呈良好线性关系(R=0.9996),测得山药中总多糖的质量分数为16.42%,RSD为0.09%,结果良好,方法快速,准确,重复性好。
5 结论
通过以上文献综述，不难发现：
山药多糖为近年来研究热点,由于其特殊的药理保健作用必将会引起更广泛的关注,确立一种既简单又合适的分离提纯和含量测定方法将显得很必要。
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真菌多糖的功能 在国际上，真菌多糖被称为称为“生物反应调节物”，简称“BRM”，按研究表明，药用菌的活性多糖成份β－D（1－73）葡萄糖对异源的、同源的甚至遗传性的肿瘤都有变化。此外，它还具有抗细菌、抗病毒和抗凝聚的作用，提高肝功能和解毒力，提高动物耐缺氧能力和氧的利用率，降低血液的粘稠度，增加心肌收缩力，改善心律，降血糖、镇静、镇痛、平喘、止咳、化痰的功效。 一、多糖对肿瘤的作用 1、多糖对肿瘤的治疗作用不是直接杀伤肿瘤细胞，而是通过增强患者的免疫防御系统，达到防癌抗癌的效果。实验证明，从香菇、黄芪、柏树菌中提出的多糖能增强 T 细胞的功能，使免疫功能低下的动物恢复正常，特别对具有杀伤肿瘤细胞功能的 T细胞 NK 细胞及LAK 细胞有激活作用。 2 、多糖又是免疫 B 细胞活化剂，像黄芪多糖、香菇多糖、柏树菌多糖、灵芝多糖等等能促进B细胞的增殖，使其产生大量免疫球蛋白抗体，从而增强抗病能力。 3 、巨噬细胞，特别是毒性巨噬细胞对肿瘤的细胞有很强杀伤力，它能合成和分泌肿瘤坏死因子（TNF），使肿瘤出血坏死。多糖类的物质是强大的 TNF 诱导剂，给动物注射多糖第 8 天，TNF 的产生达到高峰，从而发挥抗癌功效。 4 、干扰素（IFN）是机体内自己制造的抗病毒和抗癌物质。柏树菌多糖能够诱导机体产生干扰素。加进每毫升10－100微克浓度的柏树菌可使正常人产生α干扰素和γ干扰素的分别提高 8 倍和 4 倍。 5 、白细胞介素2（I L－2）为T细胞生长因子，由活化的 T 细胞所产生，即能维护免疫 T 细胞长期存活，又可诱导 T 杀伤细胞及 LAK 细胞的生长，因此成为治疗肿瘤和爱滋病等病毒的最新药物。多糖类药物可激活 T 细胞诱导内源性白介素2 产生，从而避免商品白介素2 的毒性与副反应。还能提高细胞对白介素2 的敏感性，使其能在较低剂量下产生最大治疗效果。 二、真菌多糖对糖尿病和哮喘的作用 研究发现真菌多糖治疗糖尿病是通过两方面发生作用的。二是改变血液循环，使机体胰脏血液循环加快，胰岛 B细胞得到了足够的氧，从而增加了胰岛素的分泌量。另一方面，提高肌肉细胞胰岛素靶细胞受体的功能，使得同样量的胰岛素能发挥更大的效果。有些老年糖尿病患者的内分泌功能检测时，胰岛素的量处于正常范围，其所以会产生糖尿病，主要是胰岛素靶细胞对胰岛素敏感性降低的原因。 哮喘患者气管肥大细胞的细胞透性较大，所以致喘物质组织胺容易从肥大细胞中释放出来。哮喘患者服用真菌多糖后，气管平滑肌肥大细胞、细胞膜的创作修复就会加快人。肥大细胞之组织胺释放受到了抵制，从而抑制了哮喘。真菌多糖的抗疲劳作用，现在知道，也是提高细胞生理功能，提高细胞乳酸脱酶的活性实现的。 三、真菌多糖抗病毒抗感染的作用 研究发现，是由于真菌多糖对细胞的作用。真菌多糖可以提高机体细胞的生理功能，修
题目石斛中多糖含量的测定 学生姓名高换楼学号1111034082所在学院化学与环境科学学院 专业班级化工1102班 指导教师季晓晖 完成地点陕西理工学院 2015 年 06 月 08 日
石斛中多糖含量的测定 高换楼 （陕西理工学院化学与环境科学学院化工专业1102班，陕西汉中723001） 季晓晖 [摘要] 石斛为我国常用贵重药材，有养阴清热、益胃生津的功效，石斛一直备受国内外研究者的重视。本文利用蒽酮-硫酸法对铁皮石斛多糖的含量进行了测定，并采用正交试验得到最佳实验方案，在石斛粉碎程度为粉末、液料比为50mL/g、提取2次，每次3小时的情况下多糖提取率最高。本文的实验结果为今后铁皮石斛多糖提取的质量评价及其进一步开发和利用提供参考依据。 [关键词] 石斛；多糖；蒽酮-硫酸法；抗氧化性；测定； Determination of Dendrobium polysaccharide content GAO Huanlou （Grade 02, Class 11, Major chemical engineering, School of chemical and environmental science Dept, Shaanxi University of Technology, Hanzhong 72300x, Shaanxi） Tutor: JI Xiaohui Abstract: Dendrobium is in common use in our country precious medicinal herbs, the effect of nourishing yin and clearing heat, nourishing stomach fluid, Dendrobium has attracted a lot of attention of researchers at home and abroad. The anthrone-sulfuric acid method of Dendrobium officinale polysaccharide content were measured, and using the orthogonal test and the optimum solution is obtained. In Dendrobium degree of comminution is in the form of powder, liquid to solid ratio for 50mL/1g, extraction 2 times, every time 3 hours of polysaccharides extraction rate was the highest. The experimental results for the quality evaluation of future Dendrobium officinale polysaccharide extraction and its further development and utilization to provide reference. Key words: Dendrobium; polysaccharide; anthrone-sulfuric acid method; antioxidation; determination;
粗多糖的测定方法(1) 1. 原理 分子量大于10，000道尔顿的多糖经80%乙醇沉淀后，加入碱性铜试剂，选择性地从其他高分子物质中沉淀出葡聚糖，沉淀部分与苯酚-H2SO4反应，生成有色物质，在485nm条件下，有色物质的吸光度值与葡聚糖浓度成正比。 2. 适用范围 参照AOAC方法。适用于检测含有分子量大于10，000道尔顿葡聚糖的样品。 3.仪器 （1）分光光度计 （2）离心机 （3）旋转混匀器 （4）恒温水浴锅 4.试剂 除特殊说明外，实验用水为蒸馏水，试剂为分析纯。 （1）80%乙醇：800ml无水乙醇加水200ml。 （2）2.5 mol/L NaOH溶液：100 g NaOH加蒸馏水稀释至1 L，加入固体无水硫酸钠至饱和。（3）铜贮存液：称取3.0 g CuSO4 ·5H2O，30.0 g柠檬酸钠加水溶解至1 L。溶液可贮存2周。 （4）铜应用溶液：取铜贮存液50 ml，加水50 ml混匀后加入无水硫酸钠12.5 g，临用新配。 （5）洗涤液：取水50 ml，加入10 ml铜应用溶液，10 ml 2.5 mol/L NaOH溶液，混匀。（6）1.8 mol/L H2SO4：取100ml浓硫酸用水稀释至1L。 （7）20 g/L苯酚溶液：称取2.0g苯酚，加水溶解并稀释至100ml，混匀备用。 （8）葡聚糖标准液：称取500mg葡聚糖（分子量500,000D）于称量皿中，105℃干燥4h 至恒重，置于装有干燥硅胶的干燥器中冷却。准确称取100mg干燥后的葡聚糖，用水定容至100ml，葡聚糖标准浓度为1.0 mg/ml。 （9）葡聚糖标准应用液：吸取葡聚糖标准液10ml，用水稀释10倍，葡聚糖终浓度为0.1mg/ml。 粗多糖的测定方法(2) 5. 操作方法 5.1 样品处理 （1）样品提取：称取样品1～5g，加水100ml，沸水浴加热2h，冷却至室温，定容至200ml （V1），混匀后过滤，弃初滤液，收集余下滤液。 （2）沉淀高分子物质：准确吸取上述滤液100ml （V2），置于烧杯中，加热浓缩至10ml，冷却后，加入无水乙醇40ml，将溶液转至离心管中以3000rpm离心5min，弃上清液，残渣用80%乙醇洗涤3次，残渣供沉淀葡聚糖之用。 （3）沉淀葡聚糖：上述残渣用水溶解，并定容至50ml （V3），混匀后过滤，弃初始滤液后，取滤液2.0ml （V4），加入2.5mol/L NaOH 2.0ml，Cu应用溶液2.0ml，沸水浴中煮沸2mim，冷却后以3000rpm离心5min，弃上清液，残渣用洗涤液洗涤3次，残渣供测定葡聚糖之用。 （4）测定葡聚糖：上述残渣用2.0mL 1.8mol/L H2SO4溶解，用水定容至100mL（V5）。准确吸取2.0ml（V6），置于25ml比色管中，加入1.0ml苯酚溶液，10ml浓硫酸，沸水浴煮沸2分钟，冷却比色。从标准曲线上查得相应含量，计算粗多糖含量。 5.2 标准曲线制备：
多糖含量的测定参照国标NY/1676-2008 一、实验原理 多糖在硫酸作用下，先水解成单糖，并迅速脱水生成糖醛衍生物，与苯酚反应生成橙黄色溶液，在490nm处有特征吸收，与标准曲线比较定量。 二、试剂 1、硫酸（H2SO4，国药集团），ρ=1.84g/mL； 2、无水乙醇（国药集团）； 3、苯酚（国药集团），重蒸馏； 4、80%乙醇溶液（国药集团）； 5、葡萄糖（国药集团），使用前于105℃恒温烘干至恒重； 6、80%苯酚溶液：称取80g苯酚于100mL烧杯中，加水溶解，定容至100ml后转至棕色瓶中，置4℃冰箱中避光贮存。 7、5%苯酚：吸取5mL，80%的苯酚溶液，溶于75mL水中，混匀，现配现用。 8、100mg/L标准葡萄糖溶液：称取0.1000g葡萄糖于100mL烧杯中，加水溶解，定容至1000mL，4℃冰箱中避光贮存。 三、仪器 双光束紫外可见分光光度计（TU-1901；北京普析通用仪器有限责任公司） 分析天平（0.0001g；奥豪斯） 超声提取器（KQ-500B;昆山市超声仪器有限公司） 高速离心机（常州中捷实验仪器制造有限公司） 四、操作步骤 1、样品的提取 称取样品0.1g于离心管中，加入20mL无水乙醇，充分混匀后超声提取30min，然后4000r/min离心10min，弃去上清液，不溶物用10mL乙醇溶液洗涤、离心。用水将上述不溶物转移至圆底烧瓶中，加入50mL水，沸水浴回流提取2h。冷却至室温，过滤，将上清液转移至100mL容量瓶中，残渣洗涤2-3次，洗涤液转移至容量瓶，加水定容。 2、标准曲线 分别吸取0、0.2mL、0.4 mL、0.6 mL、0.8 mL、1.0 mL标准液至试管中，蒸馏水补至1.0 mL。向试液中加入1.0 mL5%苯酚溶液，快速加入5 mL硫酸，静置10min。充分混匀后将试管放置于30℃水浴中反应20min,在490nm处测吸光度，以浓度为横坐标，吸光度未纵坐标，绘制标准曲线 3、测定 吸取1.00mL样品溶液于20mL具塞试管中，按照1、2操作，测定吸光度，同时做空白实验 五、计算公式 X（%）=m1*v1/(m2*v2)*0.9*10-4 m1标曲上查的样品测定液中含糖量，μg； v1样品定容体积，mL； v2比色测定所移取样品测定液体积，mL； m2样品质量，g； 0.9 葡萄糖换算成葡聚糖的校正系数
山药多糖的作用及其提取方法 李昂 .烟台大学生命科学学院，山东烟台264005 摘要：本文综述了山药多糖各种生物活性作用，并对近几年山药多糖的提取方法作了综述，指出了不同提取方法最佳提取工艺条件 关键词：山药多糖；作用；提取；最优条件 The Effect of Yam Polysaccharide and Method of its Extraction Li Ang （B iological Engineering，College of Life Science,Yantai University，Yantai 264005）Abstract: This paper was reviewed the biological activity of polysaccharides, and the extraction method in recent years, Chinese yam polysaccharide were summarized, pointed out the optimum extraction conditions of different extraction methods Key words: yam polysaccharide; function; extraction; optimal condition 前言 山药是薯蓣科多年生宿根植物山药(Dioscores opposite Thunb．)的块根，主产于河南、广东、广西等省，以河南焦作市(古怀庆府)所产最佳，又称“怀山药”。《本草纲目》记载其能“益肾气，健脾胃，止泻痢，化痰涎，润皮毛”。现代医学研究表明，山药具有增强免疫、抗氧化、抗衰老、抗肿瘤、降血糖等多种生物活性，其主要功效成分是山药多糖[1]。因此山药多糖成为近年来近年来的研究热点。山药多糖的组成和结构比较复杂，不同的研究者提取分离出了不同的山药多糖，其中有均多糖，有杂多糖，也有糖蛋白，相对分子质量从数干到数百万不等，其多糖含量和糖基组成也各不相同。陶乐平和吴东儒[2]从安徽产山药块茎中提取到一系列性质各异的多糖，认为热水提取物中的多糖主要由葡萄糖组成，而冷水提取物中的多糖则主要由甘露糖组成，并测定了其中一个组分的主要单糖为葡萄糖、甘露糖和半乳糖。 1 山药多糖的生物活性作用 1．1 体外抗氧化作用 刘安军, 舒媛等[3]测定了用Sevag法除去游离蛋白质的山药蛋白多糖的体外抗氧化作用，结果表明山药蛋白多糖对活性氧自由基具有良好的清除作用，可减少红细胞溶血和抑制小鼠肝匀浆脂质过氧化反应，说明山药蛋白多糖具有明显的体外抗氧化作用。尚晓娅等[4]研究表明，山药粗多糖和精制多糖均具有一定的还原能力，且粗多糖的还原力高于精制多糖。山药粗多糖和精制多糖具有较强的清除羟自由基的能力和较强的抑制小鼠肝匀浆自氧化MDA形成的作用，特别是精制多糖，其清除能力和抑制作用非常强，与Vc的水平差不多。 1．2 降血糖活性 胡国强等[5]，郜红利等[6]采用四氧嘧啶致糖尿病模型大鼠，以山药多糖连续灌胃给药，结果山药多糖对糖尿病大鼠的血糖有明显降低作用，可能与增加胰岛素分泌、改善受损的胰岛B 细胞功能有关。何云等[7]通过观察山药多糖对四氧嘧啶诱导的糖尿病大鼠胰岛素以及血小板
苯酚硫酸法测多糖含量 Company Document number：WUUT-WUUY-WBBGB-BWYTT-1982GT
一、硫酸苯酚法测多糖含量 1、试剂配制 1. 浓硫酸：分析纯，% 2. 5%苯酚：取苯酚5 g，置100 ml容量瓶中，加蒸馏水至刻度，摇匀后，置棕色试剂瓶中，冰箱中冷藏储存备用。 3. 标准葡聚糖（Dextran,Pharmacia）或分析纯葡萄糖。准确称取20m g经105℃干燥至恒重的葡萄糖标准品于500ml容量瓶中，蒸馏水溶解定容。 2、制作标准曲线 准确称取标准葡聚糖（或葡萄糖）10mg于250ml容量瓶中，加水至刻度，分别吸取、、、、、、及，各以蒸馏水补至，然后加入5%苯酚1ml及浓硫酸,摇匀冷却，室温放置20min以后于490nm测光密度，以水按同样显色操作为空白，横坐标为多糖微克数，纵坐标为光密度值，得标准曲线。 123456780 标准葡萄糖溶液 （mL） 蒸馏水（mL） 5%苯酚（mL） 浓硫酸（mL） 3 注意事项
（1）此法简单、快速、灵敏、重复性好，对每种糖仅制作一条标准曲线，颜色持久。 （2）制作标准线宜用相应的标准多糖，如用葡萄糖，应以校正系数校正μg数。（3）对杂多糖，分析结果可根据各单糖的组成比及主要组分单糖的标准曲线的校正系数加以校正计算 （4）测定时根据光密度值确定取样的量。光密度值最好在——之间。比如：小于之下可以考虑取样品时取2克，仍取样品液，如大于可以减半取的样品液测定。 （5）正常的反应溶液是深棕色。糖越多颜色越深。注意硫酸的纯度。空白的颜色很深，说明你的空白中的苯酚被氧化了深红是醌（苯酚氧化生成）的颜色颜色过深的话说明你的酚的难度过大，一般是5%但是没遇到你说的那么严重，不是深红色的做的好的时候颜色很浅，颜色深点也有肯能。 操作的时候有几条你需要注意的，这些对你的检测结果影响极大 1、苯酚需要重蒸，配制的苯酚溶液需要妥善保存。 2、样品检测的时候，向样品中加了苯酚溶液需要迅速摇匀，加入硫酸基本操作：硫酸沿壁加，最好能旋转比色管，让硫酸能均匀的沿壁流下。 3、加完硫酸需要立即摇匀，前提是塞子要配套，不怕烫热、冷水浴，要准确。
粗江蓠多糖的提取及光谱分析 作者：孟庆勇， 王亚飞， 揭新明， 东野广智， 张立坚， MENG Qing-yong， WANG Ya-fei，JIE Xin-ming， DONGYE Guang-zhi， ZHANG Li-jian 作者单位：广东医学院分析中心,广东,湛江,524023 刊名： 光谱学与光谱分析 英文刊名：SPECTROSCOPY AND SPECTRAL ANALYSIS 年，卷(期)：2006,26(10) 被引用次数：14次 参考文献(15条) 1.陈惠黎;李茂深;朱运松生物大分子的结构和功能 1999 2.陈洪亮;李伯涛;张家祥免疫活性多糖的免疫调节作用及机制研究进展[期刊论文]-中国药理学通报 2002(01) 3.Dias PF;Siqueira J M Jr;Vendruscolo L F查看详情 2005(04) 4.Damonte E B;Matulewicz M C;Cerezo A S查看详情 2004(18) 5.林位琅粗江蓠(Gracilaria gigas Harvey)浮筏式养殖技术初探[期刊论文]-现代渔业信息 2002(06) 6.刘慧燕;赵谋明江蓠低分子量多糖的提取以及抗氧化活性研究[期刊论文]-食品工业科技 2005(03) 7.张惟杰复合多糖生化研究技术 1987 8.李建武;余瑞元;袁明秀生物化学实验原理和方法 1994 9.陈军;姚成;欧阳平凯ICP-AES法测定猫爪草中常量及微量元素[期刊论文]-光谱学与光谱分析 2005(04) 10.李东霞;张双全;刘平SCAMP硫酸酯化多糖的制备及其光谱鉴定[期刊论文]-光谱学与光谱分析 2002(01) 11.Silva T M A;Alves L G de;Queiroz K C S查看详情 2005(04) 12.孟庆勇;刘志辉;徐美奕半叶马尾藻多糖的提取和分析[期刊论文]-光谱学与光谱分析 2004(12) 13.张塞金;李文权;邓勇智海洋微藻多糖的红外光谱分析初探[期刊论文]-厦门大学学报(自然科学版) 2005(z1) 14.刘清;杨克敌微量元素与健康 2003 15.贺锋嗄;哈森其木格芥菜多糖的研究[期刊论文]-光谱学与光谱分析 2006(02) 本文读者也读过(3条) 1.孟庆勇.刘志辉.徐美奕.东野广智半叶马尾藻多糖的提取和分析[期刊论文]-光谱学与光谱分析2004,24(12) 2.龚加顺.胡小静.彭春秀.周红杰.GONG Jia-shun.HU Xiao-jing.PENG Chun-xiu.ZHOU Hong-jie普洱茶及其原料多糖分子组成及光谱学特性研究[期刊论文]-光谱学与光谱分析2010,30(7) 3.贺锋嘎.哈森其木格.HE Feng-ga.Hasenqimeng芥菜多糖的研究[期刊论文]-光谱学与光谱分析2006,26(2) 引证文献(14条) 1.郝晓敏.谷长生.宋文东.林海生.颜健斌酸法江蓠菜岩藻多糖提取工艺及其性质研究[期刊论文]-安徽农业科学2007(30) 2.朱芳坤.范文秀.祝勇.李新峥南瓜多糖的性质及光谱分析[期刊论文]-光谱实验室 2009(3) 3.郝晓敏.林海生.许金涛.何辉.谷长生.宋文东超声酸提江蓠硫酸酯多糖工艺及其性质研究[期刊论文]-食品科技2008(6) 4.丁常泽.林世家黄花菜多糖的提取分离分析[期刊论文]-湖南人文科技学院学报 2009(2) 5.许海顺.蒋剑平.徐攀.熊耀康红参多糖抗氧化活性的研究[期刊论文]-浙江中医药大学学报 2011(6) 6.王颖莉.王秀文.曾冬明.刘亚明四君子汤(党参)多糖的微波法提取工艺及其光谱分析[期刊论文]-中国实验方剂
多糖含量的测定 1.原理 分子量大于10，000道尔顿的多糖经80%乙醇沉淀后，加入碱性铜试剂，选择性地从其他高分子物质中沉淀出葡聚糖，沉淀部分与苯酚-H2SO4反应，生成有色物质，在485nm条件下，有色物质的吸光度值与葡聚糖浓度成正比。 2.适用范围 参照AOAC方法。适用于检测含有分子量大于10，000道尔顿葡聚糖的样品。3.仪器 （1）分光光度计 （2）离心机 （3）旋转混匀器 （4）恒温水浴锅 4.试剂 除特殊说明外，实验用水为蒸馏水，试剂为分析纯。 （1）80%乙醇：800ml无水乙醇加水200ml。 （2）2.5mol/LNaOH溶液：100gNaOH加蒸馏水稀释至1L，加入固体无水硫酸钠至饱和。 （3）铜贮存液：称取3.0gCuSO4·5H 2 O，30.0g柠檬酸钠加水溶解至1 L。溶液可贮存2周。 （4）铜应用溶液：取铜贮存液50ml，加水50ml混匀后加入无水硫酸钠12.5 g，临用新配。 （5）洗涤液：取水50ml，加入10ml铜应用溶液，10ml2.5mol/LNaOH溶液，混匀。 （6）1.8mol/LH 2SO 4 ：取100ml浓硫酸用水稀释至1L。 （7）20g/L苯酚溶液：称取2.0g苯酚，加水溶解并稀释至100ml，混匀备用。（8）葡聚糖标准液：称取500mg葡聚糖（分子量500,000D）于称量皿中，105℃干燥4h至恒重，置于装有干燥硅胶的干燥器中冷却。准确称取100mg干燥后的葡聚糖，用水定容至100ml，葡聚糖标准浓度为1.0mg/ml。 （9）葡聚糖标准应用液：吸取葡聚糖标准液10ml，用水稀释10倍，葡聚糖终浓度为0.1mg/ml。 5.操作方法 5.1样品处理 （1）样品提取：称取样品1～5g，加水100ml，沸水浴加热2h，冷却至室温，定容至200ml（V1），混匀后过滤，弃初滤液，收集余下滤液。 （2）沉淀高分子物质：准确吸取上述滤液100ml（V2），置于烧杯中，加热浓缩至10ml，冷却后，加入无水乙醇40ml，将溶液转至离心管中以3000rpm离心5min，弃上清液，残渣用80%乙醇洗涤3次，残渣供沉淀葡聚糖之用。 （3）沉淀葡聚糖：上述残渣用水溶解，并定容至50ml（V3），混匀后过滤，弃初始滤液后，取滤液2.0ml （V4），加入2.5mol/LNaOH2.0ml，Cu应用溶液2.0ml，沸水浴中煮沸2mim，冷却后以3000rpm离心5min，弃上清液，残渣用洗涤液洗涤3次，残渣供测定葡聚糖之用。 （4）测定葡聚糖：上述残渣用2.0mL1.8mol/LH 2SO 4 溶解，用水定容至100mL（V5）。 准确吸取2.0ml（V6），置于25ml比色管中，加入1.0ml苯酚溶液，10ml浓硫酸，
粗多糖含量测定方法学研究资料 一、仪器与试药 (1) 二、方法的研究 (2) 1.检测波长的测定 (2) 2.样品及对照制备方法 (2) 三、方法学验证 (3) 1.线性 (3) 2.精密度实验 (4) 3.稳定性实验 (4) 4.重复性试验 (5) 5.中间精密度实验 (5) 6.准确度试验 (6)
芪参颗粒粗多糖含量测定方法起草说明 标志性成分粗多糖含量测定的方法来源于《保健食品功效成分检测方法》白鸿主编（中国中医药出版社)的第二法，该方法的原理是：多糖经乙醇沉淀分离后，去除其他可溶性糖及杂质的干扰，糖与硫酸在沸水浴中加热脱水生成羟甲基呋喃甲醛（羟甲基呋喃糠醛），再与蒽酮缩合成蓝绿色化合物，其显色强度与溶液中糖的浓度成正比，在625nm波长下比色测定。 主要研究资料如下： 一、仪器与试药 1、仪器 (1) 离心机（湘南湘仪实验室仪器开发有限公司，型号TD25-WS）； (2) 离心管：50ml； (3) 水浴锅（上海精宏实验设备有限公司，型号 DK-S26）； (4) 旋涡混合器（DioCote，SA8）； (5) SHIMADZU UV-1800 紫外可见光分光光度计； (6) JB760-68 石英比色皿（宜兴市伟鑫仪器有限公司）； (7) TU-1901 双光束紫外可见光分光光度计（北京普析通用仪器有限责任公司）； 2、试药 (1) 葡萄糖：广州化学试剂厂，分析纯，批号为-1； (2) 无水乙醇：西陇化学股份有限公司，分析纯，批号为160802 1； (3) 蒽酮：国药集团化学试剂有限公司，分析纯，批号为； (4) 硫酸：广州化学试剂厂，分析纯，批号为-1； (5) 葡萄糖标准液：标准称取干燥恒重的分析纯级葡萄糖，加水溶解，并定容至50ml，此溶液1ml含10mg葡萄糖，用前稀释100倍为使用液（ml）。 (6) %蒽酮硫酸溶液（W/V）：准确称取蒽酮置于烧杯中，缓缓加入100ml 80%硫酸溶解，溶解后呈黄色透明溶液。现用现配。 3、试样
1 目的 建立山药及其饮片的质量标准及检验标准操作程序，使山药的“采购、检验、验收、使用、保管”等工作有标准可依。 2 适用范围 适于山药及其饮片的采购、检验和复检。 3 责任人 山药质量标准及检验标准操作程序的编订、审批及使用人员。 4 物料信息 品名：山药 汉语拼音：Shanyao 拉丁名：DIOSCOREAE RHIZOMA 来源：本品为薯蓣科植物薯蓣Dioscorea opposita Thunb.的干燥根茎。冬季茎叶枯萎后采挖，切去根头，洗净，除去外皮及须根，干燥，或趁鲜切片，干燥； 也有选择肥大顺直的干燥山药，置清水中，浸至无心，闷透，切齐两端，用木板 搓成圆柱状，晒干，打光，习称“光山药”。 物料代码：见《物料代码表》 5 标准依据 《中国药典》2010年版第二增补本山药 6 山药质量标准 项目《中国药典》2010年版第二增补本公司内控质量标准 性状本品略呈圆柱形，弯曲而稍扁，长15～ 30㎝，直径1.5～6㎝。表面黄白色或 淡黄色，有纵沟、纵皱纹及须根痕， 偶有浅棕色外皮残留，体重，质坚实， 不易折断，断面白色，粉性。气微， 味淡、微酸，嚼之发黏。光山药呈圆 柱形，两端平齐，长9～18㎝，直径 1.5~3cm。表面光滑，白色或黄白色。 本品略呈圆柱形，弯曲而稍扁，长15～ 30㎝，直径1.5～6㎝。表面黄白色或 淡黄色，有纵沟、纵皱纹及须根痕， 偶有浅棕色外皮残留，体重，质坚实， 不易折断，断面白色，粉性。气微， 味淡、微酸，嚼之发黏。光山药呈圆 柱形，两端平齐，长9～18㎝，直径 1.5~3cm。表面光滑，白色或黄白色。 鉴别 应具规定的微鉴别特征应具规定的微鉴别特征 供试品色谱中，在与对照药材色谱相 应的位置上，显相同颜色的斑点。 供试品色谱中，在与对照药材色谱相 应的位置上，显相同颜色的斑点。 检查水 分 不得过16.0% 不得过16.0% 总 灰 分 不得过4.0% 不得过4.0% 浸出物不得少于7.0% 不得少于7.0%
真菌多糖的研究概况 郭凯，原雪 （中国药科大学生命科学与技术基地 ，江苏南京， 210038） E-mail：smallrians@https://www.doczj.com/doc/6614814135.html, 摘要：真菌多糖具有重要的药用价值，尤其是其免疫调节功能，在抗肿瘤、保肝、抗氧化等方面发挥重要的药理作用。本文对近年来真菌多糖免疫调节功能及药理作用的研究做一概述，为进一步研究和开发利用真菌多糖提供参考。 关键字：真菌多糖，免疫调节功能，药理作用 多糖（polysacharides，PS）是一种广泛存在于植物、动物和微生物组织中，具有多种生物活性的天然大分子化合物，是生命有机体的重要组成部分。真菌多糖是从真菌子实体、菌丝体、发酵液中分离出的，能够控制细胞分裂分化，调节细胞生长衰老的一类活性多糖[1]。与动、植物多糖不同的是真菌多糖分子单体之间，大多以β (1→3)与β(1→6)糖苷键结合，形成链状分子，具有螺旋状的立体构型[2]。 近年来对真菌多糖化学结构和生物活性的深入研究已经取得了丰硕的成果。实验证明真菌多糖具有很广泛的免疫调节作用，在抗肿瘤、抑制癌细胞、保肝、降血压、降血脂、抗血栓、抗辐射等方面起着重要的作用。目前已经广泛应用于临床。本文就近几年的研究成果做一总结。 1．免疫调节功能 目前普遍认为多糖的广泛免疫调节功能是其发挥药理作用的基础，研究已经深入到了分子和受体水平，发现多糖在机体免疫反应中的作用相当于抗原，可以激活多种免疫细胞，还能促进细胞因子生成，激活补体系统，促进抗体产生，对免疫系统发挥多方面的调节作用。 1.1巨噬细胞 巨噬细胞在机体的免疫系统中占有极其重要的地位，它担负着吞噬病原微生物，处理抗原并提呈给淋巴细胞，启动特异性免疫应答并参与免疫调节等作用，是多糖作用的最主要靶点。真菌多糖能明显提高巨噬细胞的吞噬能力。唐庆九[3]等实验表明灵芝多糖可刺激小鼠巨噬细胞分泌TNF-α和IL-1β，产生NO，并可增强巨噬细胞的吞噬能力。这可能是其增强机体免疫力的主要机制之一。马兴铭[4]等实验表明小鼠腹腔注射猪苓多糖、茯苓多糖、灵芝多糖100mg/kg，能显著提高正常小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬指数，加强小鼠腹腔巨噬细胞的非特异性吞噬能力。 1.2淋巴细胞 近年来大量临床医学试验表明，冬虫夏草能刺激和恢复T淋巴细胞和B淋巴细胞，增强淋巴细胞的转化作用[5]。用香菇多糖给小鼠皮下注射，可促进小鼠溶血空斑及外周血E-玫瑰环形成，增加体内淋巴细胞转换率，显著的增强对刀豆球蛋白（ConA）诱导的淋巴细胞增殖[6]。灵芝多糖具有促进同种异型抗原刺激的淋巴细胞转化作用，其作用机制是通过间接诱导 DNA多聚酶α的产生，促进免疫细胞中 DNA的合成，从而促进细胞的增殖，加速免疫应答的过程[7]。 1.3网状内皮系统 绝大多数的真菌多糖能刺激动物机体网状内皮系统（RES）的吞噬功能，使之释放一些细胞因子如肿瘤坏死因子（TNF）和白细胞介素（IL）来杀死肿瘤细胞，有效增强巨噬细胞
食用菌中粗多糖的测定苯酚硫酸法 作业指导书 本作业指导书主要依据NY/T 1676-2008 《食用菌中粗多糖含量的测定》标准而制定作业指导书。 1 范围 本标准规定了食用菌粗多糖的比色测定法。 本标准适用于各种干、鲜食用菌产品中粗多糖及食用菌制品中粗多糖含量的测定，不适用于添加淀粉、糊精组分的食用菌产品，以及食用菌液体发酵或固体发酵产品。 2 原理 多糖在硫酸作用下，先水解成单糖，并迅速脱水生成糖醛衍生物，与苯酚反应生成橙黄色溶液，在490nm处有特征吸收，与标准系列比较定量。 3 试剂和材料 除非另有说明，在分析中仅使用确认为分析纯的试剂和符合GB/T 6682的蒸馏水。 3.1 试剂 3.1.1 浓硫酸(H2SO4)。 3.1.2 无水乙醇(C2H6O)。 3.1.3 苯酚（C6H6O），重蒸馏。 3.1.4 80%乙醇。 3.1.5 葡萄糖（C6H12O6），使用前应于105℃恒温烘干至恒重。 3.1.6 80%苯酚溶液：称取80g苯酚（3.1.3）于100ml烧杯中，加水溶解，定容至100ml后转至棕色瓶中，至4℃冰箱中保存。 3.1.7 5%苯酚：吸取5ml苯酚溶液（3.1.6），溶于75ml水中，混匀，现配现用。 3.1.8 100mg/L标准葡萄糖溶液:称取0.1000g葡萄糖于100ml烧杯中，加水溶解，定容至1000ml，至4℃冰箱中保存。 4 仪器和设备 4.1 可见分光光度计 4.2 分析天平：感量0.001g。 4.3 超声提取器。 4.4 离心机 5 分析步骤 5.1 样品称取 称取样品0.5g，精确到0.001g，置于50ml具塞离心管中。 5.2 单糖去除 缓慢加入80%乙醇，同时用涡旋仪振摇，使混合均匀，置超声提取器中超声提取30min。4000r/min离心10min，弃去上清液，保留沉淀。 5.3 样品中有无淀粉、糊精 弃去上清液转移10ml至试管中，加入1滴碘溶液，振荡混合，观察是否有淀
真菌多糖的成分 随着社会的发展科技的进步健康的问题也越来越严重，因为我们的物质生活，得到了极大的改善，我们在享受着美味佳肴的同时伴随而来的是空气，水，环境，食物甚至于精神方面污染。各种文明病也在吞噬着我们健康。可是在治病寻方时，又局限于传统的治疗方法。西医治疗，针对性强，见效快采取的是抑制、控制、替代。治标不治本，病是越治越多，身体是越治越差。导致恶性循环。中医治疗辨证施治阴阳平衡，但见效慢。百度高温有量无质很难坚持。可以说这些文明病，诸如高血压，糖尿病，癌症。中风，偏瘫，抗生素对他们无效。营养保健品更是无济于事，所以人们急需找到一种比中医治本。比西医见效快。既安全又有保健作用，同时还能达到治疗的功效的产品。因此瀚齐生物有限公司就独家研发和生产出来。具有以上特性的食用菌系列产品。首先我们来介绍公司的产品的原料是食用菌和药用菌。是“冬虫夏草”、“灵芝”、“柏树菌”、“冠蝉”、“鸡腿蘑”、“安络小皮伞”、“香菇”、“银耳”、“猴头菇”等等上千种药、食两用菌。没有偏性，适宜各类体质的人长服久服，孕妇、婴儿、年迈的老人都可服用，无依赖，无毒副作用，安全有效，培元固本。说到食用菌很多朋友都听说过香菇有抗癌防癌的功效，香菇就属于食用菌，药用菌就是药用价值更高的一种菌。比如冬虫夏草，灵芝等，其实食用菌属于中药的范畴，中药分为三个等级，上品、中品、下品。先看下品：大家熟悉的：巴豆、砒霜、蜈蚣、蝎子、蛇都入下品药，因为它的毒性很强，不到万不得已不能随便用，因为有生命危险，他的特点是以毒攻毒，所以要慎服。 再来看中品，它是微毒的，我们常说“是药三分毒”，指的就是中药里的中品（西药叫副作用）。中品因具有“三分毒”因而也不宜久服，必须按疗程服用，然后停服，通过人体的代谢，把微毒代谢出去，再接着服用。因此中药的中品只能间服。 最后来看上品，上品是药食同源，无毒，如薏米、百合、大枣、生姜、杏仁对身体又无害，既能入药也可入食。常服久服能强身健体。延年益寿的称为上品，老
多糖的检测方法 粗多糖的苯酚-硫酸分光光度测定法 1.方法提要 多糖经乙醇沉淀分离后，去除其他可溶性糖及杂质的干扰，再与苯酚- 硫酸作用成橙红色化合物，其呈色强度与溶液中糖的浓度成正比，在485nm波长下比色定量。 2.仪器 （1）离心机：4000r/min。 （2）离心管：50ml或具塞15ml。 （3）分光光度计。 （4）水浴锅。 （5）旋涡混合器。 3.试剂 实验用水为双蒸水，所用试剂为分析纯级。 (1) 无水乙醇。 (2) 80%（v/v）乙醇溶液。 (3) 葡萄糖标准液：准确称取干燥恒重的分析纯葡萄糖0.5000g加水溶解，并定容至50ml，此溶液1ml含10mg葡萄糖，用前稀释100倍为使用液（0.1mg/ml）。 (4) 5%苯酚溶液（W/V）：称取精制苯酚5.0g，加水溶解并稀释至100ml，混匀。溶液置冰箱中可保存1个月。 (5) 浓硫酸（比重1.84）。 (6) 0.2mol/L磷酸盐缓冲液（pH6.5）：31.5ml（0.2mol/L）磷酸氢二钠与68.5ml（0.2mol/L）磷酸二氢钠混合。 4.测定步骤 （1）样品提取：称取混合均匀的固体样品1.0~2.0g，置于100ml容量瓶中，加水80ml 左右，于沸水浴中加热1小时（如保健食品添加的已是多糖提取物，则加热15min），冷却至室温后补加水至刻度（v1）,混匀后过滤，弃去初滤液，收集余下滤液供沉淀粗多糖。 (2)沉淀粗多糖：准确吸取上滤液（或液体样品）5.0ml（V2），置于50ml离心管中（或2.0ml于15ml具塞离心管中），加入无水乙醇20ml（或8ml），混匀，于4℃冰箱静置4小时以上，以4000r/min离心5min，弃去上清液，残渣用80%（V/V）乙醇溶液数毫升洗涤，离心后弃去上清液，反复操作3次。残渣用水溶解并定容至10~25ml（V3）（根据糖浓度而定）。 (3)标准曲线的绘制：准确吸取葡萄糖标准使用液0ml、0.10ml、0.20ml、0.40ml、0.60ml、0.80ml、1.00ml（相当于葡萄糖0mg、0.01mg、0.02mg、0.04mg、0.06mg、0.08mg、0.10mg）置于25ml比色管中，补加水至2.0ml，加入5%苯酚溶液1.0ml，在旋涡混合器上混匀，小心加入浓硫酸10ml，在旋涡混合器上小心混匀，置沸水浴中2min，冷却至室温，用分光光度计在485nm波长处以试剂空白为参比，1cm比色皿测定吸光度值。以葡萄糖质量为横坐标，吸光度值为纵坐标，绘制标准曲线。 (4)样品测定：准确吸取上液适量（V4）（含糖0.02~0.08mg）置于25ml比色管中，补加水至2.0ml，然后按（3）法测定吸光度值。从标准曲线上查出葡萄糖含量，计算样品中粗多糖含量。
蒽酮-硫酸比色法测定多糖含量 一. 实验原理 糖类在较高温度下可被浓硫酸作用而脱水生成糠醛或羟甲基糖醛后，与蒽酮(C14H10O)脱水缩合，形成糠醛的衍生物呈蓝绿色。该物质在620 nm处有最大吸收，在150 μg/mL范围内，其颜色的深浅与可溶性糖含量成正比。该法有很高的灵敏度，糖含量在30 μg左右就能进行测定。 二. 试剂器材 蒽酮试剂：精密称取0.1g蒽酮，加80%浓H2SO4100 mL使溶解，摇匀。当日配制使用； 葡萄糖标准液：将无水葡萄糖置于五氧化二磷干燥器中，12hr后精密称取100mg，用蒸馏水定容至100ml； 其他器材：分析天平、分光光度计、容量瓶(100ml、50ml、10ml)、烧杯、具塞试管、移液器、移液器吸头、涡旋振荡器和废液缸等。 三. 操作步骤 葡萄糖标准曲线的制作 取7支具塞试管，按下表数据精密配制一系列不同浓度的葡萄糖溶液，每个浓度做2-3个重复： 管号0 1 2 3 4 5 6 标准葡萄糖溶液/mL 0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 1.2 蒸馏水/mL 2.0 1.8 1.6 1.4 1.2 1.0 0.8 在每支试管中立即加入蒽酮试剂6mL，振荡混匀，各管加完后一起置于沸水浴中加热15min。取出，迅速浸于冰水浴中冷却15min。 在625nm波长下以第1管为空白，迅速测定其余各管吸光值。
以标准葡萄糖含量( g)为横坐标，以吸光值为纵坐标，绘制标准曲线。 样品的测定 将样品溶液糖浓度调整到测定范围，精确吸取2mL置于干燥洁净试管中，在每支试管中立即加入蒽酮试剂6mL，振荡混匀，各管加完后一起置于沸水浴中加热15min。取出，迅速浸于冰水浴中冷却15min，每个浓度做2-3个重复。 在625nm波长下迅速测定各管吸光值。根据葡萄糖含量的标准曲线，由样品溶液吸光值计算各样品溶液中糖的浓度，并计算其糖含量。 四. 注意事项 该法的特点是几乎可测定所有的碳水化合物，不但可测定戊糖与已糖，且可测所有寡糖类和多糖类，包括淀粉、纤维素等（因为反应液中的浓硫酸可把多糖水解成单糖而发生反应），所以用蒽酮法测出的碳水化合物含量，实际上是溶液中全部可溶性碳水化合物总量。 在没有必要细致划分各种碳水化合物的情况下，用蒽酮法可以一次测出总量，省去许多麻烦，因此，有特殊的应用价值，但在测定水溶性碳水化合物时，则应注意切勿将样品的未溶解残渣加入反应液中，否则会因为细胞壁中的纤维素、半纤维素等与蒽酮试剂发生反应而增加了测定误差。 不同的糖类与蒽酮试剂的显色深度不同，果糖显色最深，葡萄糖次之，半乳糖、甘露糖较浅，五碳糖显色更浅，故测定糖的混合物时，常因不同糖类的比例不同造成误差，但测定单一糖类时则可避免此种误差。
枸杞子中多糖含量的测定 柳婷，胡浩斌 (陇东学院化学化工学院，甘肃庆阳745000) 摘要：本文是用分光光度法测定枸杞子中的含糖量[1]。先用80%乙醇提取以除去单糖、低聚糖、生物碱等干扰成分，然后用蒸馏水提取其中所含的多糖类成分。多糖在硫酸作用下，水解成单糖，并迅速脱水生成糠醛衍生物，与苯酚缩合成有色化合物。用紫外分光光度法[2]测定其枸杞子多糖含量，本法简便，显色稳定，灵敏度高重现性好。 关键词:枸杞子；多糖；紫外分光光度计 Detection of Polysaccharide in Lycium barbarum Liu Ting, Hu Hao-Bin (College of Chemistry & Chemical Engineering, Longdong University, Qingyang 74500, China) Abstract:This paper is utilized spectrophotometry to detect Polysaccharide in Lycium barbarum..First,use 80% ethanol to remove simple sugars, oligosaccharides, alkaloids etc interference ingredients, and then extracted the ingredients. Of polysaccharose with distilled water. In Sulfuric acid condition, polysaccharide hydrolysis into monosaccharides, and rapidly dehydrated to furfural derivatives, then condense with phenol into colored compounds. Using spectrophotometry to detect polysaccharide in Lycium barbarum,the method is simple, color stability, high sensitivity and good reproducibility. Key words:Lycium barbarum; polysaccharose; spectrophotometry 枸杞子（Lycium barbarum是我国传统的中药材和重要经济作物，性状呈类纺锤形，略扁，长6～21 mm,直径3～10 mm。表面鲜红色或暗红色，顶端有小凸起状的花柱痕，基部有白色的果梗痕，果皮柔韧，皱缩，果肉肉质，柔润而有粘性，种子多数，类肾形，无臭，味甜，微酸，具有滋肾补肝、润肺明目等功能。 近年来，人们对枸杞子的药理作用进行了深人研究，发现枸杞子能增强机体免疫力[3]、抗肿瘤、抗辐射[4]、抗疲劳[5]、防衰老、增加造血功能等。临床医学研究还表明，枸杞子对糖尿病[6]、高血压[7]、视神经萎缩、肾炎、肝炎[8]等有显著疗效。对于枸杞子的上述功能的重要作用因子，一般认为与枸杞子中存在的枸杞多糖有关。因此，开始研究枸杞多糖，测定枸杞多糖的含量就显的非常重要。 鉴于枸杞多糖的分离纯化[9]困难,有关结构性质方面的研究报道甚少,枸杞多糖的生理活性,还必需从分离纯化、结构特征及药理作用3方面展开深入研究。这样,医学临床应用与保健型枸杞饮品[10]的开发才有坚实的理论基础。本试验主要完成枸杞多糖的分离与提纯，并对