攀枝花学院
Panzhihua University 教案
2011—2012学年度第一学期
课程名称微生物学实验
学时(学分)22（1.5）
适用班级2010级生物工程班授课教师曹慕岚
教师职务讲师
教学单位生物与化学工程学院
教务处制
实验教案编写说明
1、实验教案的编写要求参照《攀枝花学院教案编写规范》（攀院教[2007]04号）执行。
2、实验教案格式可按附后“实验教案”格式采用手写或打印。
3、实验教案的基本内容可包括：教学目的与要求、教学重点与难点、仪器设备及用具、教学过程(含①实验预习检查②实验原理及方法③仪器设备介绍④实验内容及注意事项⑤实验指导要点⑥检查实验结果)、实验预做记录(含①原始实验数据记录②数据处理及结果分析)、实验预习要求、实验报告要求、参考书目、后记等相关内容。
4、实验教案编写应在坚持教案编写基本要求的基础上，充分考虑教师自身条件和学科的差异，针对教师、学科、学生以及教学情景的不同，编写出形式多样，能体现教学风格、具有特色的教案，促进教案的创新。
5、教案编写水平的高低，很大程度上取决于教师钻研教材与实验方法，研究学生实际状况和设计教学方法的水平，取决于教师对本学科知识掌握的深度和广度以及教师教育思想的端正更新。因此，教师应努力提高自身素质，提高教师教案编写水平。
实验教案
实验教案
课题(项目)名称:酵母菌形态观察和大小测定计划学时: 4 实验类型: 1.演示性□ 2.验证性√ 3.综合性□ 4.设计性□ 5.其它□
授课日期: 2012 年 4 月 17 日第九周星期二第 5/6/7/8 节
实验三酵母菌形态观察和大小测定
一、目的和要求
1、观察酵母菌的形态及出芽生殖方式，学习区分酵母菌死活细胞的实验方法
2、掌握酵母菌的一般形态特征及其与细菌的区别
3、了解目镜测微尺和镜台测微尺的构造和使用原理，掌握微生物细胞大小的测定方法
二、基本原理
1、关于形态观察的原理
本实验是通过美蓝染液水浸片和水-碘液水浸片老观察酵母的形态。
用美蓝对酵母的活细胞进行染色时，由于细胞的新陈代谢作用，细胞内具有较强的还原能力，能使美蓝由蓝色的氧化型变为无色的还原型。因此，具有还原能力的酵母活细胞是无色的，而死细胞或代谢作用微弱的衰老细胞则是蓝色或淡蓝色。
2、关于细胞大小测定的原理
微生物细胞大小是微生物基本的形态特征，也是分类鉴定的依据之一。微生物大小测定，需在显微镜，借助特殊的测量工具——目镜测微尺和镜台测微尺。镜台测微尺是中央部分刻有精确等分线的载玻片，目镜测微尺是块可放入接目镜内心圆形小玻片，测量时，需将其放在接目镜中心的隔板上，用以测量经显微镜放大后的细胞物象。
球菌用直径来表示大小，杆菌则用宽和长的范围来表示。
目镜测微尺
三、实验器材
1、菌种
实验教案
在称取时动作要迅速。另外，称药品时严防药品混杂，一把牛角匙用于一种药品，或称取一种药品后，洗净、擦干，再称取另一药品，瓶盖也不要盖错。
2．溶化
在上述烧杯中可先加入少于所需要的水量，用玻棒搅匀，然后，在石棉网上加热使其溶解。待药品完全溶解后，补充水分到所需的总体积。如果配制固体培养基，将称好的琼脂放入已溶化的药品中，再加热溶化，在琼脂溶化的过程中，需不断搅拌，以防琼脂糊底使烧杯破裂。最后补足所失的水分。
3．调pH
在未调pH前，先用精密pH试纸测量培养基的原始pH值，如果pH偏酸，用滴管向培养基中逐滴加入1mol/L NaOH，边加边搅拌，并随时用pH试纸测其pH值，直至pH达7．6。反之，则用1mol/L HCl进行调节。注意pH值不要调过头，以避免回调，否则，将会影响培养基内各离子的浓度。
对于有些要求pH值较精确的微生物，其pH的调节可用酸度计进行
4．过滤
趁热用滤纸或多层纱布过滤，以利结果的观察。一般无特殊要求的情况下，这一步可以省去（本实验无需过滤）。
5．分装
按实验要求，可将配制的培养基分装入试管内或三角烧瓶内。
分装过程中注意不要使培养基沾在管口或瓶口上，以免沾污棉塞而引起污染。
(1)液体分装分装高度以试管高度的1/4左右为宜。
(2)固体分装分装试管，其装量不超过管高的1/5，灭菌后制成斜面。分装三角烧瓶的量以不超过三角烧瓶容积的一半为宜。
(3)半固体分装试管一般以试管高度的1/3为宜，灭菌后垂直待凝。
6．加塞
培养基分装完毕后，在试管口或三角烧瓶口上塞上棉塞，以阻止外界微生物进入培养基内而造成污染，并保证有良好的通气性能。
7．包扎
加塞后，将全部试管用麻绳捆扎好，再在棉塞外包一层牛皮纸，以防止灭菌时冷凝水润湿棉塞，其外再用一道麻绳扎好。用记号笔注明培养基名称、组别、日期。三角烧瓶加塞后，外包牛皮纸，用麻绳以活结形式扎好，使用时容易解开，同样用记号笔注明培养基名称、组别、日期。
8．灭菌
将上述培养基以1．05kg/cm2（15磅/英寸2），121．3℃，20分钟高压蒸汽灭菌。
9．搁置斜面