实验指导
目录
实验一分子生物学实验室常用仪器及使用方法
实验二质粒 DNA 的提取-碱裂解法
实验三琼脂糖凝胶电泳
实验四限制性内切核酸酶的酶切与鉴定
实验五大肠杆菌感受态细胞的制备及转化
实验六动物组织细胞基因组 DNA 提取
实验七 DNA 的定量
实验八 PCR 基因扩增
实验九琼脂糖凝胶电泳分离与纯化目的 DNA
实验十 DNA 重组
实验十一动物组织细胞总 RNA 的提取
实验一分子生物学实验室常用仪器及使用
事实证明, 在科学飞速发展的今天, 无论从事哪个领域的研究,要想突破,除了有
良好的理论基础外,更重要的是依赖于先进的技术和优良的仪器设备以及良好的研究环境。一个标准的分子生物学实验室除了具有一般生物学实验室的常规仪器设备外, 还具有一些特殊用途的仪器, 这些仪器一般较精密, 价格昂贵。下面介绍这些仪器的使用方法和注意事项。
一、冷冻离心机
低温分离技术是分子生物学研究中必不可少的手段。基因片段的分离、酶蛋白的沉淀和回收以及其它生物样品的分离制备实验中都离不开低温离心技术 , 因此低温冷冻离心机成为分子生物学研究中必备的重要仪器。在国内, 有多个厂家生产冷冻离心机, 本实验室的高速冷冻离心机为 GL-20G-Ⅱ型(上海安亭 ,落地式。配有角式转头:6×50ml 、 12×10ml 和 12×1.5ml 。极限转速 20000rpm 。
1. 安装与调试
离心机应放置在水平坚固的地面上,应至少距离 10cm 以上且具有良好的通风环境中,周围空气应呈中性,且无导电性灰尘、易燃气体和腐蚀性气体,环境温度应在
0~30℃之间,相对湿度小于 80%。试转前应先打开盖门,用手盘动转轴,轻巧灵活,无异常现象方可上所用的转头。转子准确到位后打开电源开关,然后用手按住门开关, 再按运转键,转动后立即停止,并观察转轴的转向,若逆时针旋转即为正确,机器可投入使用。
2. 操作程序
(1插上电源, 待机指示灯亮; 打开电源开关,调速与定时系统的数码管显示的闪烁数字为机器工作转速的出厂设定,温控系统的数码管显示此时离心腔的温度。
(2设定机器的工作参数,如工作温度,运转时间,工作转速等。
(3将预先平衡好的样品放置于转头样品架上,关闭机盖。
(4按控制面板的运转键,离心机开始运转。在预先设定的加速时间内,其运速升至预先设定的值。
(5 在预先设定的运转时间内(不包括减速时间 , 离心机开始减速,其转速在预先设定的减速时间内降至零。
(6按控制面板上的停止键,数码管显示 dedT ,数秒钟后即显示闪烁的转速值,这时机器已准备好下一次工作。
3. 注意事项
(1离心机应始终处于水平位置,外接电源系统的电压要匹配,并要求有良好的接地线,机器不使用,要拔掉电源插头。
(2开机前应检查转头安装是否牢固,机腔中有无异物掉入。
(3样品应预先平衡,使用离心筒离心时离心筒与样品应同时平衡。
(4挥发性或腐蚀性液体离心时,应使用带盖的离心管,并确保液体不外漏以免腐蚀机腔或造成事故。
(5除工作温度、运转速度和运转时间外,不要随意更改机器的工作参数,以免影响机器性能。转速设定不得超过最高转速,以确保机器安全运转。
(6使用中如出现 0.00或其它数字,机器不运转,应关机断电, 10秒钟后重新开机, 待所设转速显示后,再按运转键,机器将照常运转。
(7不得在机器运转过程中或转子未停稳的情况下打开盖门,以免发生事故。
(8每次操作完毕应做好使用情况记录,并定期对机器各项性能进行检修。二、电泳仪
电泳技术是分子生物学研究不可缺少的重要手段。电泳一般分为自由界面电泳和区带电泳大类,自由界面电泳不需支持物, 如等速电泳、密度梯度电泳及显微电泳等,这类电泳目前已很少使用。区带电泳需用各种类型的物质作为支持物, 常用的支持物有滤纸、醋酸纤维薄膜、非凝胶性支持物、凝胶性支持物及硅胶― G 薄层等, 分子生物学实验中最常用的是琼脂糖凝胶电泳。应用电泳法可以对不同物质进行定性或定量分析, 或将一定混合物进行组份分析或单个组份提取制备。下面以 DYY-12型电脑三恒多用电泳仪(北京六一仪器厂为例介绍其使用方法。
1. 使用方法
(1按电源开关,显示屏出现“欢迎使用 DYY-12型电脑三恒多用电泳仪…”等字样后, 同时系统初始化,蜂鸣 4声,设置常设置。屏幕转成参数设置状态,见图一:
U: 0V U =100V |Mode :STD
I: 0mA I =50mA |
P: 0W P =50W |
T: 00:00 T =01:00 |
其中 :左侧大写 U: I: P: T: 为电泳时实际值; 中间部分显示程序的常设值 (预置值。 Mode(模式 :STD(标准 ; TIME(定时 ; VH (伏时 ; STEP (分步
(2设置工作程序。用键盘输入新的工作程序。例如,要求工作电压 U =1000V ,电流
I 限制在 200mA 以内,功率 W 限制在 100W 以内,时间 T 为 3小时 20分,并且到时间自动关掉输出。则操作步骤如下:
①按“模式”键,将工作模式由标准(STD 转为定时(TIME
模式。每按一下模式键 , 其工作方式按下列顺序改变 :
STD?TIME?VH?STEP?STD。
②先设置电压 U ,按“选择”键,先将其反显,然后输入数字键即可设置该参数的数值。按数字 1000, 则电压即设置完成。
③设置电流 I ,按“选择”键,先使 I 反显,然后输入数字 200。
④设置功率 P ,按“选择”键,先使 P 反显,然后输入数字 100。
⑤设置时间 T ,按“选择”键,先使 T 反显,然后输入数字 320。如果输入错误,可以按“清除”键,再重新输入。
⑥确认各参数无误后,按“启动”键,启动电泳仪输出程序。在显示屏状态栏中显示 Start! 并蜂鸣 4声, 提醒操作者电泳仪将输出高电压, 注意安全。之后逐渐将输出电压加至设置值。同时在状态栏中显示“ Run ” ,并有两个不断闪烁的高压符号,表
示端口已有电压输出。在状态栏最下方,显示实际的工作时间(精确到秒。
⑦每次启动输出时,仪器自动将此时的设置数值存入“ MO ”号存储单元。以后
需要调用时可以按“读取”键,再按“ 0”键,按“确定”键,即可将上次设置的工作程序取出执行。
⑧电泳结束,仪器显示:“ END ” ,并连续蜂鸣提醒。此时按任一键可止鸣。 2. 注意事项
(1U、 I 、 P 三个参数的有效输入范围是:U :5~3000V ; I :4~400mA ; P :4~400W.
(2一般情况下,当 No Load !时,首先应关机检查电极导线与电泳槽之间是否有接触不良的地方,可以用万用表的欧姆档逐段测量。
(3如果输出端接多个电泳槽,则仪器显示的电流数值为各槽电流之和,此时应选择稳压输出,以减小各槽的相互影响。
(4注意保持仪器的清洁,不要遮挡仪器后方进风通道。严禁将电泳槽放在仪器
顶部,避免缓冲液洒进仪器内部。
(5本仪器输出电压较高,使用中应不避免接触输出回路及电泳槽内部,以免发生危险。
(6长期不用仪器,应放置在干燥通风的清洁环境中保存。
三、分析天平
分析天平是定量分析工作中不可缺少的重要仪器,充分了解仪器性能及熟练掌
握其使用方法,是获得可靠分析结果的保证。分析天平的种类很多,有普通分析天平、半自动 /全自动电光分析天平及电子分析天平等。目前实验室常规备用的是自
动化程度较高的电子分析天平。下面介绍电子分析天平 PL203/01型和 AL104/01型 (METTLER-TOLEDO的性能及使用方法。 PL203/01型精密电子天平:最大称量210g ;实际分度值 0.001g ; AL104/01型高分辨率电子分析天平:最大称量 110g ;实际分度值 0.0001g
1. 使用方法
(1检查并调整天平至水平位置。检查电源电压是否匹配(使用配置的稳压器 ,按天平仪器要求通电预热至所需时间 30min 。
(2打开天平开关“ on ” , 天平则自动进行灵敏度及零点调节。待显示屏上所有字段短时点亮,天平回零时,可进行正式称量。
(3称量时将洁净称量瓶或称量纸置于称盘上,关上侧门,天平将显示该重量,点击“ ?O/T?”键自动校对零,然后逐渐加入待称物质,直至所需重量为止。
(4称量结束应及时除去称量瓶(纸 ,关上侧门,切断电源,并做好使用情况登记。
2. 注意事项
(1天平应放置在牢固平稳水泥台或木台上,室内要求清洁、干燥,同时应避免光线直接照射到天平上。
(2称量时应从侧门取放物质,读数时应关闭箱门以免空气流动引起天平摆动。
(3挥发性、腐蚀性、强酸强碱类物质应盛于带盖称量瓶内称量,防止腐蚀天平。
(4电子分析天平若长时间不使用,则应定时通电预热, 每周一次,每次预热 2h ,以确保仪器始终处于良好使用状态。
四、分光光度计
不同物质对不同波长入射的吸收程度各不相同,从而形成各具特征的吸收光谱。根据这一原理, 应用比色法可以对某些有色物质进行定性或定量分析。但由于比色法仅限于可见光区, 而且精度低, 已远远不能满足高精度微量分析的要求。随着科学技术不断发展, 分析仪器也不断地更新换代, 人们引进了分光光度法的概念, 分光光度计随之应用。分光光度计由光源、单色器、吸收池、接受器、显示屏幕所组成,它不仅适应于可见光区,同时还扩展至紫外光区及红外光区。光密度(OD 是许多溶液中的溶质定量的指标之一,通过所产生的单色光
而测定某一溶液对该单色光的吸收值。分子生物学实验中常使用紫外分光光度计进行核酸溶液定量和纯度的初步判断。下面介绍紫外可见光分光光度计GeneQantTM Pro(Amersham 的使用方法。该仪器除了能检测核酸样品浓度外 , 还可进行蛋白质浓度以及细胞培养液浓度的测定,能检测低至几微升样品(70μl 和
5~7μl ,样品无需稀释,测量后还可全部回收。
使用方法
(1打开电源开关(ON ,等待数秒钟,显示屏上显示一系列数据,如本机型号、当前日期等,这些数据可以重新设置,当出现“ instrument Ready ”即可进入下一程序。
(2在仪器面板上有许多功能键,其中包括检测 base sep 、 Tm 、 DNA 、
RNA 、 oligo 、 Protein595assay 、 Protein280 meas、 cell culture等。例如,欲检测DNA , 按 DNA 键,即进入 DNA 检测程序。在显示屏上:
Pathlengh 10mm
Units μg/μl Use 320nm NO
Dilution Faotor 1
Insert reference,
以上为仪器预设置的参考数据,若按“ enter ”键,和“ select ”键可以将以上的参数进行重新设定。
(3取石英样品杯 70μl 或 5~7μl ,容量大小根据需要。先用吸管吸高纯水入样品杯中,然后放入仪器上的样品槽中,放入时注意样品杯的光学面朝前方。
(4按“ set ref ”键,进行空白测试。显示屏上出现一系列数据均“ 0.000”并提示插入样品“ Insert sample ” 。将样品杯取出,吸干水分,稍干燥后,同样吸入待测样品,放入样品槽中进行测定。
(5一个样品测定完毕,按“ stop ”键,返回“ Instrument Ready” 。
(6取出样品杯,吸出样品,然后用高纯水洗几次,自然晾干。由于样品杯十分昂贵,使用时要小心操作。不能用手指拿样品杯的光学面,用后要及时洗涤, 可用温水或稀盐酸, 乙醇以至铬酸洗液(浓酸中浸泡不要超过 15分钟 ,表面只能用柔软的绒布
或拭镜头纸擦净。
五、数字式酸度计
酸度计是实验室配置溶液必备的仪器。本实验室的酸度计为台式微电脑酸碱度计和温度计(Hanna , 测量 pH 范围为 0.00~14.00pH ;温度为 0.0~100.0℃ ;
1. 使用方法
(1将 pH 电极和温度探头与主机连接,主机与电源连接。
(2取出电极保护套, 如果有结晶盐出现,这是电极常见现象,浸入水后就会消
逝。如果薄膜玻璃或透析膜发干,可在 HI170300电极保存液中浸泡 1小时。
(3 pH 校准。将 pH 电极和温度探棒浸泡在所选的标准缓冲液内 4cm (建议用pH6.86、 7.01 , 缓冲液值可通过“ D ℃” 或“ ?℃” 键来调节。按“ CAL ” 键, 仪器将显示“ CAL ” 和“ BUF ” 符号及“ 7.01”数据。当读数不稳定时,屏幕会显示
“ NOTREADY ” ;当读数稳定时,屏幕会显示“ READY ”和“ CFM ” ,按“ CFM ”键确认校准值。确认第一校准点后 ,将 pH 电极与温度探棒浸泡在标准缓冲液内 4cm (建议用 pH4.01、 9.18、 10.01 ;再按“ CAL ”键,仪器将显示“ CAL ”和“ BUF ”符号及“ 4.01”数据。按“ CFM ”键确认校正值。
(4 pH 测量。校准完毕后,仪器自动进入 pH 测量状态,将电极与温度探棒浸泡在待测溶液约 4cm ,停几分钟让电极读数稳定。
2. 注意事项
(1由于 pH211酸度计内装有可充电电池,在刚购买或长时间放置后,再使用时,通电校正测量完毕后,可将电源继续还插入电源插座,只需关闭开关,这样可以保证电池充电, 是校正值得以储存,下次测量时无须校正即可进入精确测量。
(2不可用蒸馏水、去离子水和纯水浸泡电极。如果读数偏差太大(±1pH ,则是由于没有校正或电极变干。为避免电极受损,在关机前要将 pH 电极从溶液中拿出。当处于关机状态时,在电极浸入电极保存液前,电极要与机器分开。
(3 如仪器已测过几种不同的样品溶液,请用自来水清洗, 或在插入样品溶液前,用待测样品清洗电极。
(4温度会影响 pH 的读数,为测量准确的 pH 值, 温度要在适合的范围内进行自动温度补偿,用 HI7669/2W温度探棒浸入样品中, 紧靠电极并停几分钟 ,如果被测溶液的温度已知或测量是在相同温度下进行, 只需动手补偿, 那么此时温度探棒是不用连接, 屏幕上会显示温度读数伴有℃信号闪烁。温度可通过“ ?℃”或“ D ℃”来调节。
六、 PCR 仪
PCR 仪,也称 DNA 热循环仪、基因扩增仪,它是使一对寡核苷酸引物结合到正负 DNA 链上的靶序列两侧,从而酶促合成拷贝数为百万倍的靶序列 DNA 片段,它的每一循环包括在三种不同温度进行 DNA 变性、引物复性、 DNA 聚合酶催化的延伸反应的三个过程。
PCR 仪主要应用于基础研究和应用研究等许多领域,如基因分析、序列分析、进化分析、临床诊断、法医学等等。随着分子生物学的不断发展, PCR 扩增技术也得到普及推广应用,
因此了解 PCR 仪的性能,熟练掌握仪器的正确使用方法及使用过程中的注意事项,将是十分必要的。
现介绍 PCR 扩增仪(Tl Thermocycler的使用方法和注意事项。
1. 使用方法
(1接通电源开关,仪器进入准备状态;在显示屏上记录了当前仪器的温度和盖子(Lid 的温度。若仪器正在运行时, 须按“ B ” 键 (start/stop , 才能退出运行并返回准备状态。
(2编写程序段。在准备状态下按“ C ”键 (programs进入编程状态,选定一程序号,然后按“ enter ”键,进入下一程序;按“ A ” (list键后,选一文件号(empty program ;再按“ enter ”键,进入下一程序;按“ ABC ”键,进入下一程序,用上下左右键号选择一个字
母(A 、 B 、 C 、 D 、… ,然后按“ enter ”键,进入下一程序;按“ name ok”键,完成文件命名。
(3设定盖子的温度。“ lid temp :℃” ,盖子的温度一般比变性温度要高 10℃,例如变性温度是 95℃,那么盖子的温度就要设定为 105℃。待盖子预热后按“ enter ”键,进入下一程序。
(4设定变性温度、变性时间、延伸温度、延伸时间、退火温度、退火时间及
循环总数等参数。从第一步依次按“ enter ”键进入,用四个移位键移动设定位置。先设定温度,后设定时间,全部参数设置完后,按“ pgm ok”键,所设定的程序自动被保存。
(5运行程序。检查设定是否正确, 按“ start ”键,选择设定好的程序,开始运行。显示屏上可观察到系统运行的情况,按“ Stop ”可停止运行。
七、凝胶成像系统
本系统属全自动电脑控制影像分析系统,主要拍摄核酸的 agarose 电泳胶片,及
蛋白质的 acrylamide 电泳胶片。在与 markers 比较后,可精确计算样本的分子量,对
核酸电泳也可准确定量,是分子生物学及生化蛋白试验的重要检测工具。本系统包括暗箱, 紫外透射仪,摄像头,变焦镜,电脑以及专业凝胶图象采集及分析 . 软件(3.3版。该软件提供对电泳凝胶、斑点测量、 PCR 密度的定量分析等。此外,还提供图像采集、标注、打印、数据和图像发送到 Word 、 Excel 、图像处理等功能。
1. 使用方法
(1 打开电脑,启动凝胶分析软件,进入用户界面。
(2打开采集凝胶图像的暗箱装置电源开关,放入凝胶,打开紫外光源或白光光源, 将采集装置与电脑上采集卡相连,然后选择“文件”菜单中的“图像采集”或工具栏的“图像采集”按钮,出现图像窗口:“开始采集” 、“停止采集” 、“采集图像”等。如果图像不清晰,可以调节暗箱上的变焦镜,使之清晰。可直接将图像保存起来,也可通过“图像处理”
对图像进行旋转、裁剪、滤波、调节对比度……方面的处理。
(3对读入的电泳凝胶图像,可以启动电泳凝胶分析系统。在“功能选择”菜单中选择“电泳凝胶”或在工具栏上的“电泳凝胶”工具,将出现泳道分析工具栏,并在“图像显示”子窗口中出现一个红色的矩形框。还可进入“条带分析”系统,对条带进行编号,对二条以上的条带进行比较。
(4 采集图像结束后, 关闭暗箱电源开关, 从暗箱中取出凝胶, 并将玻璃板清洗干净, 晾干。
八、空气恒温摇床
摇床(振荡器为实验室的常规设备。 SHK-99-Ⅱ型台式空气恒温摇床,采用微电脑控制系统, 温度范围:室温+5℃~60℃,精度±0.5℃;时间范围:1分钟~99小时 59分钟;转速范围:60RPM ~250RPM 。
1. 使用方法
(1 LED 屏幕上各段数据:
RPM Temp Time
1 000 00.0 00:00
屏幕上“ 1”表示第一段,如果是第二段则为“ 2” , “ Temp ”表示温度, “ RPM ”表示每分钟转速, “ Time ”表示时间,不设定时可自动累计时间一直运行。“ Temp ” 、“ RPM ” 、“ Time ” 的值随时可以修改,随时按新值运行。
(2工作程序设置。按“ F1”键,进入设置状态。可在速度,温度,时间,运行等四部分之间切换。在每一部分按“ F2”键输入数据,输入完十位数据,再输入个位数据,按“ F2” 键,再按“ F2”键,到小数位,再按“ F2”键,又到十位,以此循环。
(3再按“ F1”键,转回运行状态,按“ Start ”键,电机开始运行,时间开始计时。
(4按“ End ”键,结束系统运行。
2. 注意事项
(1打开电源,系统开始自检,等待 LCD 屏幕出现“ WELCOME ”字样,系统自检完毕,可以进行第 2步参数设置。若屏幕出现:a. “ TEMP ERROR ” ,表示温度检测线路有错误; b. “ MOTOR ERROR” ,表示电机部分有错误。
(2运行过程可以打开箱盖,这样电机不运行,时间也停止,盖上盖接着运行。
(3工作完毕,关闭电源。关机后,要等一段时间再开机。
九、水的净化装置
分子生物学实验对水的纯度要求越来越高, 一般蒸馏水常常难以满足实验要求, 大多要求要进行第二次蒸馏(双蒸水 ,它可以去除水中的大部分有机杂质,但制作时间较长,而且无机杂质还是很多。许多实验还需要去离子水,这就需要阴阳离子交换树脂进行处理。目前, 分子生物学实验室都使用高质量的超纯水。如美国微孔滤膜
公司的 Milli-Q 超纯水制造系统所制造的超纯水适用于许多学科领域,如分子克隆、各种色谱分析、氨基酸分析、 DNA 测序、酶反应、组织和细胞培养等实验。下面介绍 RO-MB 壁挂式反渗透高纯水机性能及使用方法。 RO-MB 反渗透高纯水机(杭州永洁达产水量(25℃ 10L/H;产水水质:RO 纯水: <10μs/cm,高纯水:>15MΩ.cm ;可用自来水制成普通实验用水和高纯水,同时满足不同水质要求。在线电导率仪对产水水质连续检测,可保证产水质量。
1. 使用方法
(1准备:先检测与纯水机相连的原水管路、废水管路连接是否正常,打开原水阀门。供电电源是否正常,检查按钮是否在关闭状态(按钮弹出状态。将电源插头插入带有接地线的 220V 电源插座上。
(2开机:依次按下电源开关,泵开关,纯水机启动产水,同时废水排出,指示灯亮起,并处于自动运行状态。
(3取纯水:若打开 RO 纯水或高纯水出口阀门,则可获得相应水质的纯水。当高纯水出口阀门打开时, 检测仪表显示高纯水电导率或电阻值。为了获得高质量的高纯水, 可以先放掉一杯水后再取新鲜水。
(4关机:不用时可关闭个按钮停机,自来水进水阀门不必关闭,这时机子内部的进水电磁阀已自动切断水路。只要管路阀门不漏,也可使机子保持自动待机状态。
2. 注意事项
(1纯水机的正常使用环境温度为 15~35℃,产水量会随温度降低而下降,冬季保养温度不低于 5℃。
(2 预处理滤芯一般三至六个月更换一次,实际使用寿命与自来水水质、总过滤量等有关。
(3 混床滤芯产高纯水约 1~3吨, 约二至四个月更换一次, 实际使用寿命与自来水水质、水中含盐量、总用水量等有关。设备停运时间超过 2天。必须注意定期冲洗维护。夏季宜每天开机 30分钟冲洗一次,冬季每隔 2~3天开机冲洗一次。
(4使用过程若发现停机后泵仍频繁地每隔数分钟有规则地启动数秒钟又停机,此为管路漏水引起, 需及时打开机箱加以解决。若每隔半小时以上启动数秒钟又停机, 乃属正常现
象, 有利于冲洗和保护反渗透膜元件, 避免遭到微生物繁殖和减少污物沉积, 尤其高温季节。十、消毒设备
细菌和细胞培养以及核酸等有关实验所用的试剂、器皿及实验用具, 应严格灭菌, 有的实验还要求没有核酸酶的污染,故应将实验器械,试剂等进行高压消毒。对于经过导入 DNA 重组分子的菌株,操作后必须进行严格的高压消毒灭活处理。
大批实验物品、试剂、培养基等可以使用大型消毒器进行消毒。一些不能经受高压、高温消毒的试剂可用滤器滤膜除菌,器皿可用紫外线照射、 75%乙醇或0.1%的十二烷基硫酸钠 (SDS 浸泡消毒。所有的细胞培养、细菌培养的操作,都应在紫外线消毒后的超净工作台中进行。
下面介绍立式自动压力蒸汽灭菌器(LDZX-40BI 的使用方法。
1. 使用方法
(1开盖:转动手轮,使锅盖离开密封圈。
(2通电:连接自动进水装置。接通电源,将控制面板上电源开关按至 ON 处,若水位低(LOW 红灯亮,蒸发锅内属断水状态;缺水(LACK 黄灯亮,电源已正常输入。
(3加水:打开水源,水位达到低水位,控制面板上低水位红灯和缺水黄灯相继灭,加热(1-绿灯亮,继续加水至高水位(HIGH 绿灯亮,自动停止加水。
(4堆放物品:需包扎的灭菌物品,体积不超过 200mm ×100mm ×100mm 为宜,各包装之间留有间隙,堆放在金属框内,这样有利于蒸汽的穿透,提高灭菌效果。
(5密封高压锅:推横梁入立柱内,旋转手轮,使锅盖下压,充分压紧。
(6设定温度:通电后数显窗灯亮,上层为红色,显示温度,下层为绿色,设定温度和时间。先按控制面板上确认键,绿色数显闪烁,进入温度设定状态。按一次移位键所指相应位置闪烁,根据所需数据位置进行(单项循环移位。按△增加键或 ?? 减少键,进行所需温度设定。设定完毕,按二次确认键,进行温度确认。
(7设定时间:按一次确认键,将温度设定切换成时间设定;再按一次移位键,所指相应位置闪烁, 根据所需数据位置进行移位; 按增加键或减少键, 进行所需时间设定。设定完毕, 按二次确认键, 进行时间设定确认。时间采用倒计时, 当灭菌锅内温度达到设定温度, 定时器开始倒计时。
(8灭菌:在加热初,将下排汽阀打开至垂直位置;下排汽阀待蒸汽冒出时,压力表显示指示为 100℃时,将下排汽阀推向水平关闭位置;留有微量蒸汽逸出,以控制总汽流量的 15%为宜。使用最高灭菌温度为 124℃~126℃, 压力在 0.145Mpa
~0.165Mpa 范围内属于安全阀设定数,超出压力部分,安全阀将自动泄压,并开始计数灭菌所需时间。灭菌完成,
电控装置将自动关闭加热系统,伴有蜂鸣提醒;并将保温时间切换成 END 显示;此时,将控制面板上电源开关按至 OFF 处;关闭电源,停止加热待其冷却。
(9干燥:物品灭菌后需要迅速干燥,须打开放汽阀和下排汽阀,将灭菌器内的蒸汽迅速排出,使物品上残留水蒸汽快速挥发。
(10将盖开启,取出已灭菌物品。关闭水源,打开下排水阀,排尽灭菌室的水与水垢, 以备下次使用。
2. 注意事项
(1堆放灭菌物品时,严禁堵塞安全阀的出汽孔,必须留出空位保证其空气畅通,否则安全阀因出汽孔堵塞不能工作,造成事故。
(2灭菌液体时,应将液体灌装在硬制的耐热玻璃瓶中,以不超过 3/4体积为好,瓶口选用棉花纱塞, 切勿使用未打孔的橡胶或软木塞, 特别注意, 在灭菌液体结束时不准立即释放蒸汽,必须待压力表指针回零位方可排放余汽。
(3对不同类型,不同灭菌物要求的物品,切勿放在一起灭菌,以免顾此失彼,造成损失。
实验二质粒 DNA 的提取-碱裂解法
一、实验原理
细菌质粒是一类双链、闭环的 DNA ,大小范围从 1kb 至 200kb 以上不等。各种质粒都是存在于细胞质中、独立于细胞染色体之外的自主复制的遗传成份, 通常情况下可持续稳定地处于染色体外的游离状态, 但在一定条件下也会可逆地整合到寄主染色体上, 随着染色体的复制而复制,并通过细胞分裂传递到后代。
一般分离质粒 DNA 的方法都包括 3个步骤:①培养细菌,使质粒 DNA 大量扩增;②收集和裂解细菌;③分离和纯化质粒 DNA 。分离制备质粒 DNA 的方法很多,其中常用的方法有碱裂解法、煮沸法、 SDS 法、羟基磷灰石层析法等。在实际操作中可以根据宿主菌株类型、质粒分子大小、碱基组成和结构等特点以及质粒DNA 的用途进行选择。本实验介绍碱裂解法提取质粒 DNA 。
碱裂解法提取质粒 DNA 是根据共价闭合环状质粒 DNA 和线性染色体 DNA 在拓扑学上的差异来分离质粒 DNA 。在 pH 值介于 12.0-12.5这个狭窄的范围内,线性的 DNA 双螺旋结构解开而被变性,尽管在这样的条件下,共价闭环质粒 DNA 的氢键会被断裂,但两条互补链彼此相互盘绕, 仍会紧密地结合在一起。当加入 pH4.8乙酸钾高盐缓冲液恢复 pH 至中性时, 因为共价闭合环状的质粒 DNA 的两条互补链仍保持在一起,因此复性迅速而准确,而线性的染色体 DNA 的两条互补链彼此已完全分开,复性就不会那么迅速而准确,它们相互缠绕形成不溶性网状结构,而复性的质
粒 DNA 恢复原来构型,保持可溶性状态。通过离心,染色体 DNA 与不稳定的大分子 RNA ,蛋白质 -SDS 复合物等一起沉淀下来而被除去,最后用酚氯仿抽提纯化上清液中的质粒 DNA 。
二、仪器及试剂
1. 仪器及耗材:37℃恒温摇床、冷冻离心机、台式离心机、微量移液器、 50 ml 离心管、 1.5 ml离心管管、枪头、各种规格的量筒、接种环、试剂瓶、 100 l或者250 ml三角瓶、玻棒等。
2. 试剂及配制:
LB 培养液的配制:
酵母浸提物 5.0 g;
胰蛋白胨 10.0 g;
NaCl 10.0 g;
依次称量后加入 800 ml去离子水后搅拌至完全溶解,用 5 mol/L NaOH(约 0.2 ml 调节培养液的 pH 值至 7.0。再加去离子水将溶液定容至总体积为 1000 ml, 10磅高压灭菌 20 min, 冷却后 4℃保存。
溶液Ⅰ(GET 缓冲液 :25 mmol/LTris-HCl(pH8.0 , 10 mmol/L EDTA, 50 mmol/L 葡萄糖
配制:1000 ml
1 mol/L Tris-HCl(pH8.0 25 ml
0.5 mol/L EDTA(pH8.0 20 ml
20% Glucose(1.11mol/L 45 ml
dH2O
910ml
将以上溶液混合装瓶, 10磅高压灭菌 20 min,冷却后 4℃保存。
溶液 II (变性液 :200 mmol/L NaOH , 1% SDS
配制:500 ml
10% SDS 50 ml
2N NaOH 50 ml
取以上溶液,用灭菌去离子水定容至 500 ml ,充分混匀。室温保存,此溶液保存时间最好不超过一个月,最好现用现配。
注意:SDS 易产生气泡,不要剧烈搅拌。
溶液 III (醋酸钾液 :3 mol/L 醋酸钾(KAc 缓冲液, pH 5.6。 5 mol/L 冰醋酸
配制:500 ml
醋酸钾 147 g
冰醋酸 57.5 ml
加入 300 ml去离子水后搅拌溶解。待醋酸钾溶解后,再加去离子水将溶液定容至 500 ml。高温高压灭菌后, 4℃保存。
10×TE 缓冲液(pH 8.0 :100 mmol/L Tris-HCl, 10 mmol/L EDTA
配制:1000ml
1 mol/LTris-HCl 缓冲液 (pH 8.0 100ml
500 mmol/L EDTA (pH8.0 20 ml
加入约 800 ml的去离子水,均匀混合。溶液定容至 1 L。高温高压灭菌后, 4℃保存。
苯酚 /氯仿 /异戊醇 (25 : 24 : 1:将量取 25 ml Tris-HCl(pH8.0平衡苯酚,加入 24 ml 氯仿和 1 ml 异戊醇,充分混合后,移入棕色玻璃瓶中, 4℃保存。
其它试剂:TE (pH8.0 、异丙醇、氯仿 /异戊醇(24:1 、无水乙醇、 70%乙醇、氨卞青霉素贮存液(50 mg/ml
三、操作步骤
1. 菌体的培养和收获
(1将 5~10 ml 含有氨卞青霉素(AP 的 LB 培养基加入到容量为 100ml 的三角瓶中,然后接入一单菌落,并保持通气良好,于 37℃ 220 rpm 振摇过夜培养(约 16h 后可以再转接一次,于 37℃ 220 rpm振摇培养 3~4 h。
(2 吸取培养的菌液 1.5 ml, 转入 1.5 ml的离心管中, 用台式离心机以 12000 rpm 离心 3 min。弃上清,将离心管倒置,使液体尽可能流尽。
2. 质粒 DNA 提取(碱裂解法
(1加 100 ul 溶液Ⅰ重悬细菌沉淀,用枪吹打直至混和均匀。
(2 加 200 ul溶液Ⅱ, 盖紧管口, 轻缓上下颠倒离心管以混合内容物。室温静置5 min(溶液变透明,粘稠。
(3加 150 ul溶液Ⅲ,轻微振荡混和 10 sec,置冰上 10 min (溶液出现白色沉淀。
(4 12000 rpm离心 6 min,取上清液至另一离心管(弃沉淀。
(5加等量的酚 /氯仿 /异戊醇,旋涡混匀 1 min , 12000 r/min离心 6min ,取上清液至另一离心管。
(6加 1倍异丙醇,振荡混匀,静置 10 min, 12000 rpm离心 6 min。弃上清液,将离心管倒置于吸水纸,将附于管壁的残余液滴除净。
(7加 200 ul 70%乙醇洗涤沉淀物,台式离心机 12000 rpm离心 2 min,弃上清液,将沉淀在室温下晾干(或在 50℃-60℃的烘箱中也可。
(8沉淀加20μl TE, 反复吹打使质粒 DNA 充分溶解,-20℃保存。
四、常见问题及可能原因
1. 提取的质粒 DNA 不纯:变性不充分;关键步骤反应时间过短;离心时间或速度不够。
2. 提取的质粒 DNA 呈涂布状:操作过程中用力过猛,动作过大;操作系统内有污染。
3. 与染色体 DNA 分离不全:变性过程不完全;试剂配制有问题(成分,浓度或
pH 。
实验三琼脂糖凝胶电泳
一、实验原理
琼脂糖凝胶电泳是分离和纯化 DNA 片段的常用技术。把 DNA 样品加入到一块包含电解质的多孔支持介质(琼脂糖凝胶的样品孔中,并置于静电场上。由于DNA 分子的双螺旋骨架两侧带有含负电荷的磷酸根残基, 因此在电场中向正极移动。在一定的电场强度下, DNA 分子的迁移速度取决于分子筛效应。具有不同的相对分子质量的 DNA 片段泳动速度不一样, 因而可依据 DNA 分子的大小来使其分离。凝胶电泳不仅可分离不同分子质量的 DNA , 也可以分离相对分子质量相同,而构型不同的 DNA 分子。在电泳过程中可以通过示踪染料或相对分子质量标准参照
一、疾病预防控制中心实验室仪器设备清单 1 气相色谱仪：定性定量分析 2 阿贝折射仪：测透明半透明液体或固体的折射率和平均色散 3 氨气分析仪：测样品中氨的含量 4 测汞仪：测固、体液体样品中汞含量 5 电导率仪：测电解质溶液电导率值 6 二氧化硫测定仪：大气环镜中二氧化硫浓度的自动监测 7 二氧化碳测定仪：大气环镜中二氧化碳浓度的自动监测 8 离子交换纯水器：使用离子交换法制纯水 9 粉层采样器：该采样器适用于煤矿及其它粉层作业环镜中进行粉层采样 10 光电浊度仪：测量浊度 11 光照度计：测定光照强度 12 火焰光度计：监床化验用病理研究 13 激光粉层仪：检测粉层浓度 14 紫外可见分光光度计：测量物质对不同波长单色辐射的吸收程度、定量分析 15 紫外辐射照度计：紫外辐射照度测量 16 自动量程照度计：测定光照强度 17 自动旋光仪：测物质旋光度，分析物质的浓度、纯度、含糖量 18 酶标仪：定性定量 19 冷原子荧光测汞仪：专用测贡仪器，测痕量贡 20 离子计：测离子浓度 21 CO分析仪：测大气环镜中一氧化碳含量 22 双道原子荧光光度计：固、液体中汞、砷、硒、锑、锗、锡含量测定析 23 手持糖量计：测体的含糖量 24 生化分析仪：测定样品的浓度，酶反映速率和酶的活性等数十种生化参数 25 洗板机：与酶标仪配套使用 26 微量可调移液器：移微量液体 27 显微镜：观察微小物质 28 荧光分光光度计：分析和测试各类微生物，氨基酸、蛋白质、核酸及多种监床药物 29 医用净化工作台：提供无尘无菌高洁净工作环镜 30 便携式红外线人析器：测定公共场所中的CO2浓度 31 电子微风仪：适用于工厂企业通风空调，镜污染览测动压平衡自动跟踪等速烟尘采样器的采样 32 放射性污染计量仪：测试放射性污染是否超标 33 热敏电阻（测辐射热计）：用于辐射探测 34 紫外光功力计：测试检测紫外光功率 35 热球式电风速仪：测定室内外或模型的气流速度时，是一种测量低风速的基本仪器 36 红血蛋白仪：检测血红蛋白
实验室常用器材使用方法及注意事项
实验室常见仪器使用方法及注意事项 一、常见的仪器 （一）初中化学实验常见仪器 反应容器可直接受热的：试管、蒸发皿、燃烧匙、坩埚等能间接受热的：烧杯、烧瓶、锥形瓶（加热时，需加石棉网） 常存放药品的仪器：广口瓶（固体）、细口瓶（液体）、滴瓶 （少量液体）、集气瓶（气体） 用加热仪器：酒精灯 计量仪器：托盘天平（称固体质量）、量筒（量液体体积） 仪分离仪器：漏斗 取用仪器：药匙（粉末或小晶粒状）、镊子（块状或较大颗粒）、胶头滴管（少量液体） 器夹持仪器：试管夹、铁架台（带铁夹、铁圈）、坩埚钳其它仪器：长颈漏斗、石棉网、玻璃棒、试管刷、水槽 不能加热：量筒、集气瓶、漏斗、温度计、滴瓶、表面皿、广口瓶、细口瓶等 1、试管 （1）、用途： a、在常温或加热时，用作少量试剂的反应容器。 b、溶解少量固体。 c、收集少量气体的容器 d、用于装置成小型气体的发生
器。 （2）、注意事项： a、加热时外壁必须干燥，不能骤热骤冷，一般要先均匀受热，然后才能集中受热， 防止试管受热不均而破裂。 b、加热时，试管要先用铁夹夹持固定在铁架台上（短时间加热也可用试管夹夹持）。 试管夹应夹在的中上部（或铁夹应夹在离试管口的1/3处）。c、加热固体时，试管口要略向下倾斜，且未冷前试管不能直立，避免管口冷凝水倒流 使试管炸裂。 d、加热液体时，盛液量一般不超过试管容积的1/3（防止液体受热溢出），使试管与桌面 约成45°的角度（增大受热面积，防止暴沸），管口不能对着自己或别人（防止液体喷出伤人）。反应时试管内的液体不超过试管容积的1/2。 2、烧杯用途：①溶解固体物质、配制溶液，以及溶液的稀释、浓缩 ②也可用做较大量的物质间的反应 注意事项：受热时外壁要干燥，并放在石棉网上使其受热均匀（防止受热不均使烧杯炸裂）， 加液量一般不超过容积的1/3（防止加热沸腾使液体外溢）。
常用分析仪器知识 一、绪论 1.与我们制程产品相关，所使用的相对复杂一些的仪器包括以下： 1）原子吸收分光光度仪（AAS） 2）紫外-可见分光光度仪（UV-VIS） 3）循环伏安分析仪（CVS） 4）X射线能量色散光谱仪（EDX） 5）扫描电子显微镜（SEM） 6）X射线测厚仪（XRF测厚） 2.常用仪器综述 1）按仪器的通常分类，AAS、XRF测厚、EDX（其实也是属于XRF的一种）和UV都是属于光谱仪；CVS属于电化学仪器；SEM属于电镜仪器。 2）SEM通常可与XRF测厚和EDX联合使用，有些EDX机器也同时兼具XRF测厚功能，从相关常见的分析报告可同时看到样品的SEM图和分析 测量的结果图表。 3）AAS、UV、XRF测厚、EDX和CVS都是使用分析比较技术，要求进入仪器测试的标准样品和未知样品具有相似性和重现性，简而言之，样品测试 前需要作校正和样品处理。 二、AAS 1.AAS定量分析原理和仪器结构组成 1）分析原理：原子吸收的过程是当基态原子吸收某些特定波长的能量由基态到激发态。根据Lambert-Beer 定律，吸收值与浓度成正比关系，从标准溶 液作出校正曲线后，再读出未知溶液的浓度。原子吸收分光光度仪即是利 用原子化器将样品原子蒸气化后，吸收某一特定波长光，此光来自空心阴 极灯管，再经过光学系统分光经由单光器过滤仅有要测的波长光进入侦测 器。 2）仪器组成：A.放射光源(空心阴极管或EDL灯管)；B.样品导入装置-简易雾化器；C.火焰式原子化器；D.分光仪(Echell 分光系统)；E.侦测器(固态 半导体) 2.优缺点 1）优点：A.可做多种金属元素的定量分析（约70多个）.
实验指导 目录 实验一分子生物学实验室常用仪器及使用方法实验二质粒DNA的提取－碱裂解法 实验三琼脂糖凝胶电泳 实验四限制性内切核酸酶的酶切与鉴定 实验五大肠杆菌感受态细胞的制备及转化 实验六动物组织细胞基因组 DNA提取 实验七 DNA的定量 实验八 PCR基因扩增 实验九琼脂糖凝胶电泳分离与纯化目的DNA 实验十 DNA重组 实验十一动物组织细胞总RNA的提取 实验一分子生物学实验室常用仪器及使用
事实证明，在科学飞速发展的今天，无论从事哪个领域的研究，要想突破，除了有良好的理论基础外，更重要的是依赖于先进的技术和优良的仪器设备以及良好的研究环境。一个标准的分子生物学实验室除了具有一般生物学实验室的常规仪器设备外，还具有一些特殊用途的仪器，这些仪器一般较精密，价格昂贵。下面介绍这些仪器的使用方法和注意事项。 一、冷冻离心机 低温分离技术是分子生物学研究中必不可少的手段。基因片段的分离、酶蛋白的沉淀和回收以及其它生物样品的分离制备实验中都离不开低温离心技术，因此低温冷冻离心机成为分子生物学研究中必备的重要仪器。在国内，有多个厂家生产冷冻离心机，本实验室的高速冷冻离心机为GL-20G-Ⅱ型（上海安亭），落地式。配有角式转头：6×50ml、12×10ml和12×1.5ml。极限转速20000rpm。 1. 安装与调试 离心机应放置在水平坚固的地面上，应至少距离10cm以上且具有良好的通风环境中，周围空气应呈中性，且无导电性灰尘、易燃气体和腐蚀性气体，环境温度应在0～30℃之间，相对湿度小于80%。试转前应先打开盖门，用手盘动转轴，轻巧灵活，无异常现象方可上所用的转头。转子准确到位后打开电源开关，然后用手按住门开关，再按运转键，转动后立即停止，并观察转轴的转向，若逆时针旋转即为正确，机器可投入使用。 2. 操作程序 （1）插上电源，待机指示灯亮；打开电源开关，调速与定时系统的数码管显示的闪烁数字为机器工作转速的出厂设定，温控系统的数码管显示此时离心腔的温度。 （2）设定机器的工作参数，如工作温度，运转时间，工作转速等。 （3）将预先平衡好的样品放置于转头样品架上，关闭机盖。 （4）按控制面板的运转键，离心机开始运转。在预先设定的加速时间内，其运速升至预先设定的值。 （5）在预先设定的运转时间内（不包括减速时间），离心机开始减速，其转速在预先设定的减速时间内降至零。 （6）按控制面板上的停止键，数码管显示dedT，数秒钟后即显示闪烁的转速值，这时机器已准备好下一次工作。 3. 注意事项 （1）离心机应始终处于水平位置，外接电源系统的电压要匹配，并要求有良好的接地线，机器不使用，要拔掉电源插头。
超净工作台 标准： A.根据环境的洁净程度，可定期（一般2～3个月）将粗滤布拆下清洗予以更换； B.定期（一般为一周）对超净工作台环境进行灭菌，同时，经常用纱布沾上酒精或丙酮有机溶剂将紫外杀菌灯外表面揩擦干净，保持表面清洁，否则会影响杀菌效果； C.当加大风机电压不能使操作风速达到0.32m/s时，必须更换高效空气过滤器； D.更换高效空气过滤器时可打开顶盖，更换时应注意过滤器上的箭头标志，箭头指向即为层气流流向； E.更换高效空气过滤气后，应用尘埃粒子计数器检查四周边框密封是否良好，调节风机电压，使操作平均风速保持在0.32～0.48m/s范围内，再有用Y09-4型尘埃粒子计数器检查洁净度。操作规程： A.使用工作台时，应提前1小时开机，同时开启紫外灭菌灯，处理操作区内表面积累的微生物，三十分钟后关闭杀菌灯； B.新安装的或长期未使用的工作台，使用前必须对工作台和周围环境先用超净真空吸尘器或用不产生纤维的工具进行清洁工作台，再采用药物灭菌法和紫外线灭菌法进行灭菌处理； C.操作区内不允许存放不必要的物品，以保持操作区的洁净气流流型不受干扰； D.操作区内应尽量避免作明显扰乱气流流型的动作； E.操作区内的使用温度不得大于60℃。 冰箱 使用标准： A.在冰箱接入电源之前，请仔细核对冰箱的电压范围和电源电压是否相等； B.冰箱必须有干燥的接地，如果电气线路没有接地，那么必须请电工将冰箱单独接地； C.不可将汽油、酒精、胶粘剂等易燃、易爆品放入冰箱内，以免引起爆炸； D.冰箱不能在有可燃性气体的环境中使用，如发现可燃气体泄漏，千万不可拔去电源插头，关闭温控器或灯开关，否则会产生电火花，引起爆炸； E.切勿用水喷洒冰箱顶部，以免使电气零件受损，发生危险； F.清洁保养及搬动冰箱时必须切断电源，并小心操作，不让电气元件受损； G.冰箱应放置在平坦、坚实的地面上，如放置不平，可调节箱底平脚； H.冰箱应放置在通风干燥，远离热源的地方，并避免阳光直射； I.冰箱在一般使用时，会结霜，当结霜特别严重时，可关机或关掉电源进行人工化霜，必要时可打开柜门加速霜层融化； J.当冰箱搁置不用时或长时间使用箱内出现异味时，必须进行清理； K.不可用酸、化学稀释剂，汽油、苯之类物品清洗冰箱任何部件； L.箱内不要放熟的食品，热的仪器必须冷却至室温后，再放入箱内； 操作规程： A.首次通电或长时间不用重新通电时，由于箱内外温度接近，为迅速进入冷藏状态，可把温度调至最冷处，待冰箱连续运行2～3小时，箱温降低后，再将温度调至适当位置； B.在使用中，不要经常调动温度控制器； 电子天平 操作规程： A.将电子天平置于稳固、平整的台面上； B.插上电源，打开开关；
实验室常用仪器及其使用 1.能区分和识别常用的仪器，了解化学实验常用仪器的主要用途 2.掌握常见反应器、加热仪器、计量仪器、分离仪器、干燥仪器的使用方法 3.能懂得选择合适的实验仪器进行实验，会绘制简单的仪器装置图 4.知道质谱仪、核磁共振仪、红外光谱仪等现代仪器在测定物质结构中的作用。 知识点1 反应器的使用方法 6.集气瓶
知识点2 计量仪器的使用方法 2.量筒 3.容量瓶 4.托盘天平 知识点3 加热、蒸发、蒸馏、结晶的仪器2.表面皿、蒸发皿
知识点4过滤、分离、注入液体的仪器 干燥管 干燥器 铁架台、 铁夹 试管夹 坩埚钳 二、质谱仪、核磁共振仪、红外光谱仪等现代仪器在测定物质结构中的作用 1.质谱仪 用途 。 2．核磁共振仪 用途 。 3．红外光谱仪
【例1】下列实验中所选用的仪器合理的是（） A. 用200mL量筒量取5.2mL稀硫酸 B. 用250mL容量瓶配制250mL0.2mol/L的氢氧化钠溶液 C. 用托盘天平称量11.7克氯化钠晶体 D. 用碱式滴定管量取25.1mL溴水 解析：这是一道考查称量仪器使用的题目。选用量筒时应注意选合适规格，量取5.2mL 稀硫酸要用10mL量筒，所以A不正确；滴定管量取液体时应精确到0.01mL，所以D不正确。 托盘天平可称量精确到0.1克，一般配制多大体积的溶液就选用多大体积的容量瓶。 答案：BC 【变式】准确量取25.00 mL高锰酸钾溶液，可选用的仪器是（ C ） A . 50 mL量筒 B. 10 mL量筒 C. 50 mL酸式滴定管 D. 50mL碱式滴定管【例2】一支40mL碱式滴定管注入苛性钠溶液后，液面正好在10mL刻度处，则苛性钠溶液体积为（） A . 10mL B. 大于10mL C. 30 mL D. 大于30 mL 解析：滴定管的0刻度线在上方，40mL刻度线下至尖嘴处仍有溶液，所以大于30 mL 答案：D 【变式】下列量器和温度计的刻度表示正确的是（CD） A.量筒的刻度值是由下向上增大，“0”刻度在下 B.250毫升容量瓶上一般刻有30℃250毫升的标记 C.滴定管的刻度值由上而下增大，“0”刻度在上 D.温度计的刻度是由下而上增大，“0”在有刻度标记区域 【例3】现有下列仪器或用品：①铁架台（含铁圈，各种铁夹）；②锥形瓶；③酸式滴定管与碱式滴定管；④烧杯（若干）；⑤玻璃棒；⑥胶头滴管；⑦天平（含砝码）；⑧滤纸；⑨量筒；⑩过滤漏斗。 （1）过滤时，应选用的上述仪器是（填编号）。 （2）配制一定物质的量浓度的溶液时，还缺少的仪器是。 （3）在中和滴定使用滴定管前，首先应。 解析这类试题的解题方法是首先看题目选项的具体操作。联想该操作的仪器、方法、注意事项等，对比题目中所给的仪器进行组合，看仪器是否完全具备进行某一项实验，这样才能得出正确结论，有时试题是给出一些仪器来完成某些实验操作，而所给的仪器不全，其解题方法与之类似，即通过联想完成。 答案（1）过滤所用的仪器有：铁架台、烧杯、玻璃棒、滤纸、过滤漏斗。 （2）配制一定物质的量浓度的仪器有：天平（含砝码）、容量瓶、烧杯、玻璃棒、胶头滴管。 （3）检查活塞是否漏水，在确保不漏水后方可使用。
实验室仪器操作使用规程 文件编号：SH/ZJ-05/02-2011 版本：A/01 页数：21 生效日期：2011年9月1日 编写：日期： 审核：日期： 批准：日期： 分发号：受控印章： 质量总监： 01 质检部部长：02 分发日期： 第1节质检部仪器设备一览表
第2节仪器操作使用规程 1. 高速组织捣碎机（DS-1） 1、将刀对准机轴，按下联轴节弹性元件至尺槽，使其居于容器盖园孔，方可启动电机。
2、物料须缓缓倒入容器中，先开慢速（1 ) ，后开快速（2 ) ，但慢速只能作起步作用，不宜长用。 3、由于电动机高速运转，不能长时间使用，必须每使用三分钟，休息五分钟，方可继续使用。 2. 绞肉机（MM8） 一、注意事项 1、机器旋转过程中严禁用手伸入绞肉筒，以免发生伤手事故； 2、需绞的肉一定要去净皮、骨、筋，并把肉切成细条状，以免损坏机器； 3、空机启动，螺杆转向必须与箭头指示牌所指的方向一致，导正常运转后，才可把肉放进绞肉筒进行绞肉，否则容易造成肉卡住机件，使机不能启动和正常运转，严重时会挤破绞肉筒、出肉轮，甚至会烧坏电动机： 4、如发现电动机运转不正常，应立即切断电源，停机检查原因，看是否有皮、骨、筋卡住； 5、如果出现肉呈糊状，可能由以下原因造成： ①出肉轮太松造成，切肉入与出肉孔板接触不良，应重新调整； ②出肉孔板堵塞，要给予疏通； ③切肉刀太钝，应修磨或更换；
二、使用方法 使用时，绞肉部分各零件应清洗干净，步骤如下： 拧出出肉轮，按顺序取出出肉孔板、切肉刀、送肉螺杆，然后松开夹紧手柄，取出绞肉筒，清洗完后，再装回绞肉筒，板动夹紧手柄至夹紧位置，然后，依次装入送肉螺杆，切肉刀、出肉孔板，再旋上出肉轮，要注意出肉轮不要旋得太紧，只需旋至刚与出肉孔板接触即可，通电旋转，再将出肉轮的松紧调至适当位置，否则会影响机器的使用寿命及出肉质量。以上工作做完即可进行绞肉，开机后把预先去掉皮、骨、筋并切成长条状的肉投入绞肉筒，如果出肉太慢，可用塞肉棒（严禁直接用手）把绞肉筒的肉条适当往下推送，但也不能送得太急，以免超过电动机承载能力，损坏电动机。 使用完毕，应将绞肉部分各零件卸下清洗抹干，以备下次使用。 3. 电子计数天平（LT200OA） 一、构造 本仪器由称盘、外壳、电源、检定分度值等部件组成； 二、使用方法 1、预热：接通电，打开开关，天平显示从“F…… 2 ”到“F…… 9 ”后即显示“0.0”或“0”，然后预热30 分钟左右，方能使称量准确；
知识精要?化学实验常用仪器及其使用 中学化学实验常用的仪器有20多种，对这些仪器应该在反复使用和训练规范操作的基础上，努力做到“三会”，即：会识别仪器的名称和能恰当地选用仪器(仪器的种类和必要的规格)；会正确地使用仪器进行实验；会画常用仪器的剖面图。 按照中学化学实验常用仪器的用途，大致可分为计量仪器、分离物质仪器、可加热的仪器、加热仪器、存放物质的仪器和其它仪器六类。现对这些仪器的名称、规格、用途和操作要领分述如下。 1．计量仪器 (1)量筒 量筒用于量度一定体积的液体。量筒的容积常见的有10mL、 50mL、100mL等多种，其分度(最小刻度每格)依次为0.2mL、1mL、1mL。应该根据需要量取液体的体积大小，选用适当规格的量筒；量取液体时，以液面的弯月形最低点为准；量筒不能加热，不能作反应容器(量筒是有刻度的玻璃容器，温度的变化会使刻度不准确，且量筒受热可能引起炸裂，因此，量筒不能用做反应容器或用来稀释浓硫酸、溶解强碱，也不能量取过热的液体或用于加热等)。量取液体时，应先往量筒里注液体到接近刻度然后改用滴管，将液体逐滴加入，直到指定量。读数时量筒必须方平视线必须与量筒内液体凹液面最底处保持水平。俯视使读数偏高；仰视使读数偏低。如右图 (2)托盘天平
固体药品称量使用托盘天平，一般能精确到0.1克。 使用步骤注意事项：①先调整零点；②称量物和砝码的位置为“左物右码”；③称量物不能直接放在托盘上，干燥的药品放在洁净的纸上称量，易潮解的和有腐蚀性的药品放在小烧杯等玻璃器皿里称量；④砝码用镊子夹取（“先大后小”）⑤称量结束后，应使游码归零，砝码放回砝码盒。 2．分离物质的仪器 漏斗漏斗内放滤纸用于过滤，也可通过漏斗向小口容器中转移液体。漏斗不能直接加热；过滤时应固定在铁架台的铁环上或固定在漏斗架上。 3．可加热的仪器 1)．试管用来盛放少量药品，常温或加热情况下进行少量试剂反应的容器，可用于制取或收集少量气体。 使用注意事项：①可直接加热,用试管夹夹在距试管口1/3管长处。 ②加热后不能骤冷，防止炸裂。③加热时试管口不能对着任何人；给固体加热时，试管要横放，管口略向下倾斜。 ④加入试管内的液体，不加热时不超过试管容积的l/2，加热时不超过l/3。 2)．烧杯用作配置溶液和加大试剂的反应容器，在常温或加热时使用。使用注意事项：①烧杯外壁擦干后方可用于加热，加热时应放置在石棉网上，使受热均匀，盛放液体的容量通常不超过容积的1/3。 ②溶解物质搅拌时，玻璃棒不能触及杯壁或杯底。
实验一分子生物学实验室常用仪器设备简介 实验室主要仪器，设备的简介及使用方法 微量移液器 微量移液器是连续可调的、计量和转移液体的专用仪器，其装有直接读数容量计。 微量移液器有多种规格，在移液器量程范围内能连续调节读数。移液器常见的四种规格分别是： 0.5～10μl(读数窗显示0.5～10.0,每转1档为0.1μl); 10～100μl(读数窗显示10.0～100, 每转1档为1μl); 20～200μl(读数窗显示20～200, 每转1档1μl); 100～1000μl(读数窗显示100～1000, 每转1档为5μl). 量液的操作步骤： 1．将微量移液器装上吸头（不同规格的移液器用不同的吸头） 2．将微量移液器按钮轻轻压至第一停点； 3．垂直握持微量移液器，使吸嘴浸入液样面下几毫米，千万不要将吸嘴直接插到液体底部；4．缓慢、平稳地松开控制按钮，吸上样液。否则液体进入吸嘴太快，导致液体倒吸入移液器内部，或吸入体积减少； 5．等一秒钟后将吸嘴提离液面 6．平稳地把按钮压到第一停点，再把按钮压至第二停点以排出剩余液体； 7．提起微量移液器，然后按吸嘴弹射器除去吸嘴。 量液操作注意问题： 1．未装吸嘴的微量移液器绝对不可用来吸取任何液体。 2．一定要在允许量程范围内设定容量，千万不要将读数的调节超出其适用的刻度范围，否则会造成损坏。 3．不要横放带有残余液体吸嘴的移液器。 4．不要用大量程的移液器移取小体积样品。 5. 移液器使用完后，将刻度调到最大刻度，收藏。 低温台式高速离心机 离心机的分类 低速：每分钟几千转 高速：每分钟1 ~ 3万转 超速：每分钟3万转以上 离心机的功能：分离，纯化 低速：细胞等大分子 高速：DNA，蛋白等 超速: 病毒，蛋白等，根据用途又可分为分析超速离心机和制备超速离心机。 低温分离技术是分子生物学研究中必不可少的手段 基因片段的分离、酶蛋白的沉淀和回收以及其它生物样品的分离制备实验中都离不开低温离心技术 本实验室所用离心机为台式高速离心机（IBM），配有角式转头：24×1.5ml；极限转速20000rpm 台式高速离心机使用步骤 1、把离心机放置于平面桌或平面台上，目测使之平衡，用手轻摇一下离心机，检查离心机是否放置平衡。
实验室常用仪器使用方法及注意事项 一、常用的仪器 （一）初中化学实验常用仪器 反应容器可直接受热的：试管、蒸发皿、燃烧匙、坩埚等 能间接受热的：烧杯、烧瓶、锥形瓶（加热时，需加石棉网） 常存放药品的仪器：广口瓶（固体）、细口瓶（液体）、滴瓶（少量液体）、集气瓶（气体）用加热仪器：酒精灯 计量仪器：托盘天平（称固体质量）、量筒（量液体体积） 仪分离仪器：漏斗 取用仪器：药匙（粉末或小晶粒状）、镊子（块状或较大颗粒）、胶头滴管（少量液体）器夹持仪器：试管夹、铁架台（带铁夹、铁圈）、坩埚钳 其他仪器：长颈漏斗、石棉网、玻璃棒、试管刷、水槽 不能加热：量筒、集气瓶、漏斗、温度计、滴瓶、表面皿、广口瓶、细口瓶等 1、试管 （1）、用途： a 、在常温或加热时，用作少量试剂的反应容器。 b 、溶解少量固体。 c、收集少量气体的容器 d、用于装置成小型气体的发生器。 （2）、注意事项： a、加热时外壁必须干燥，不能骤热骤冷，一般要先均匀受热，然后才能集中受热， 防止试管受热不均而破裂。 b、加热时，试管要先用铁夹夹持固定在铁架台上（短时间加热也可用试管夹夹持）。 试管夹应夹在的中上部（或铁夹应夹在离试管口的1/3 处）。 c、加热固体时，试管口要略向下倾斜，且未冷前试管不能直立，避免管口冷凝水倒流 使试管炸裂。 d、加热液体时，盛液量一般不超过试管容积的1/3 （防止液体受热溢出），使试管与桌面 约成 45°的角度（增大受热面积，防止暴沸），管口不能对着自己或别人（防止液体喷出伤 人）。反应时试管内的液体不超过试管容积的1/2 。 2、烧杯用途：①溶解固体物质、配制溶液，以及溶液的稀释、浓缩
实验室常用仪器具体功能 1 显微镜 用于放大微小物体成为人的肉眼所能看到的仪器 2 电子称 电子称是用来对货物进行称重的自动化称重设备，通过传感器的力电转换，经称重仪表处理来完成对货物的计量，适用于各种散货的计量。 3 离心机 该机适用于生物，化学，遗传学，医药学，医院，实验室对学业，生物体，叶绿素，蛋白核酸等液体混合物的分离。 4 测厚仪 测厚仪用来测量不同单一材料或者覆盖层的厚度，分无损和有损两种，其中大部分是无损的。 5 切割机 电阻切割机用于切割电阻.电容.晶体管等,可连续工作.效率高.切口整齐平滑等特点.。 6 硬度计 硬度计是测量各种材料硬度的仪器，分为洛氏、维氏、布氏、邵氏、里氏、消氏等不同类别。 7 抛光机 在金相试样制备过程中，试样的抛光是一道主要工序，经过磨光的试样，在抛光机上抛光后，可获得光亮如镜的表面，它具有传动平稳、噪音小、操作、维修方便等优点。该机的抛光盘直径和传递功率均大于国内同类产品，能适合更多种材料的抛光要求。 8 电子天平 是实验室分析或质量控制所必须的仪器，具有称量大，精度高，在较差使用环境下亦可达到精密称量的要求。 9
测温仪 是温度计的一种，用红外线的原理来感应物体表面温度，操作比较方便，特别是高温物体的测量。应用广泛，如钢铸造、炉温、机器零件、玻璃及室温、体温等各种物体表面温度的测量。 10 干燥箱 干燥箱是一种常用的仪器设备,主要用来干燥样品,也可以提供实验所需的温度环境.干燥箱应用与化工,电子,铸造,汽车,食品,机械等各个行业.。 11 放大镜 是用来对细小物体的放大以观察、识别、鉴定等最普通而方便、有效的仪器，有台式、便携式、带光源、带刻度等多种选择，可以应用于各行各业。 12 分光光度计 常用分析仪器之一，常用于样品的定性与定量的分析，或透射、反射等光谱分析。广泛应用于医药，食品，石油，建材等各个领域。 13 电导率仪 电导率仪是适用于精密测量各种液体介质的仪器设备,主要用来精密测量液体介质的电导率值,当配以相应常数的电极可以精确测量高纯水电导率，广泛应用各领域的科研和生产. 粘度计一种用于测量液体的粘性阻力与液体的动力粘度 的仪器，广泛应用于油脂、油漆。 14 外径千分尺 广泛用于长度厚度的测量。外径千分尺现在分为数显和机械两大类，数显的精度一般都是0.001mm,机械的分为两种，有0.01mm也有0.001mm 15 内径千分尺 广泛应用于孔径直径，沟槽宽度的测量。其也分为两个大类：两点接杆式的内经千分尺，和三点式的三爪内径千分尺。两点式一般测量比较大的孔径，最长可以到6米。三爪主要测量小孔径，最小可以到达3.5mm的孔径。需要注意的是，三爪分为通孔和盲孔。 16 电流表 电流表是测定电流强弱和方向的电学仪器。分直流电流表和交流电流表。供实验室和工业现场测试用。
１、实验室常用仪器设备清单
2、选用及科研要求得仪器
3、其它重要补充 1酸度计:测HP 值 2电导率仪:测电解质溶液电导率值 3旋光仪(自视自动):测物质旋光度,分析物质得浓度、纯度、含糖量 4气相色谱仪:定性定量分析 5液相色谱仪:定性定量分析 6自动定位滴定仪:酸碱滴定、氧化还原滴定、沉淀滴定、络合滴定 7智能崩解仪:在设定温度(人体温度下)进行药片崩解实验 8药物溶出度仪:在设定温度(人体温度下)进行药片崩解实验 9脆碎度检查仪:在设定转速下进行药片脆碎度检验 10熔点仪：测量结晶性化学制品、药品与部分结晶聚合物熔点 11澄明度检测仪：观察溶液澄清程度,有否颗粒物 12紫外辐射照度计:紫外辐射照度测量 13紫外可见分光光度计:测量物质对不同波长单色辐射得吸收程度,定量分析14可见分光光度计:测量物质对不同波长单色辐射得吸收程度,定量分析 15微量进样器:液相、气相色谱分析中使用 16阿贝折射仪:测透明半透明液体或固体得折射率与平均色散 17原子吸收争光光度计：根据被测元素得基态原子对特征辐射得吸收程度进行定量分析 18荧光分光光度计：分析与测试与类微生物、氨基酸蛋白质、核酸及多种监床药物 19色差计:测量药品颜色
20红外分光光度计:定性定量分析 21手持糖量计：测定溶液中糖度、含糖量
22标准旋光管旋光仪: 测旋光度标准,检验旋光仪准确度 23超净水器:制超净水 24钠离子浓度计:测钠离子浓度 25尘埃粒子计数器:测定空气中得微粒 26永停滴定仪:根据电们变化指示滴定终点得滴定用仪器 27卡尔费休水份测定仪:测产品含水量 28薄层色谱仪:定性分析 29傅立液变换红外光谱仪:定性定量分析 30紫外强度计:测紫外线强度 31三用紫外线分析仪:药物生产与研究中,可用来检查荧光药品得质量 32生物显微镜:观察微小物质 33激光粒子数计:尘埃粒子计数 34多小长飞点扫描仪:凝胶电冰、薄层板等得精密定量 35风速仪:测风速 36数字式光度表：测量可见光辐照强度 37反渗透纯水机:超纯水系统得进水,也可作一般实验室用水 38环境参数测试仪:测试环镜参数 39医用净化工作台:提供无尘无菌高洁净工作环镜 40紫外线斑点检测仪:在药物生产研究中,可用来检查荧光药品质量 41浮游菌采样器:监控空气中细菌总数与检测空气中得与种细菌 42数字白度计:测试药品白度,以及荧光样品测量 43散射光浊渡仪：测量水质浊度 44实验淘(labtaobao、)-专业级科学仪器、分析仪器、实验室设备、检测及测试设备一站式选型与价格查询信息平台。
实验室常用仪器简介 点击次数：412 发布时间：2010-8-4 显微镜用于放大微小物体成为人的肉眼所能看到的仪器 电子称电子称是用来对货物进行称重的自动化称重设备，通过传感器的力电转换，经称重仪表处理来完成对货物的计量，适用于各种散货的计量。 电子秤电子秤是用来对货物进行称重的自动化称重设备，通过传感器的力电转换，经称重仪表处理来完成对货物的计量，适用于各种散货的计量。 离心机该机适用于生物，化学，遗传学，医药学，医院，实验室对学业，生物体，叶绿素，蛋白核酸等液体混合物的分离。 测厚仪测厚仪用来测量不同单一材料或者覆盖层的厚度，分无损和有损两种，其中大部分是无损的。 切割机电阻切割机用于切割电阻.电容.晶体管等,可连续工作.效率高.切口整齐平滑等特点. 硬度计硬度计是测量各种材料硬度的仪器，分为洛氏、维氏、布氏、邵氏、里氏、消氏等不同类别。 抛光机在金相试样制备过程中，试样的抛光是一道主要工序，经过磨光的试样，在抛光机上抛光后，可获得光亮如镜的表面，它具有传动平稳、噪音小、操作、维修方便等优点。该机的抛光盘直径和传递功率均大于国内同类产品，能适合更多种材料的抛光要求。 电子天平是实验室分析或质量控制所必须的仪器，具有称量大，精度高，在较差使用环境下亦可达到精密称量的要求。 测温仪是温度计的一种，用红外线的原理来感应物体表面温度，操作比较方便，特别是高温物体的测量。应用广泛，如钢铸造、炉温、机器零件、玻璃及室温、体温等各种物体表面温度的测量。 干燥箱干燥箱是一种常用的仪器设备,主要用来干燥样品,也可以提供实验所需的温度环境.干燥箱应用与化工,电子,铸造,汽车,食品,机械等各个行业. 放大镜是用来对细小物体的放大以观察、识别、鉴定等最普通而方便、有效的仪器，有台式、便携式、带光源、带刻度等多种选择，可以应用于各行各业。 分光光度计常用分析仪器之一，常用于样品的定性与定量的分析，或透射、反射等光谱分析。广泛应用于医药，食品，石油，建材等各个领域 电导率仪电导率仪是适用于精密测量各种液体介质的仪器设备,主要用来精密测量液体介质的电导率值,当配以相应常数的电极可以精确测量高纯水电导率，广泛应用各领域的科研和生产. 粘度计一种用于测量液体的粘性阻力与液体的动力粘度的仪器，广泛应用于油脂、油漆。 千分尺外径千分尺：广泛用于长度厚度的测量。外径千分尺现在分为数显和机械两大类，数显的精度一般都是0.001mm,机械的分为两种，有0.01mm也有0.001mm 内径千分尺广泛应用于孔径直径，沟槽宽度的测量。其也分为两个大类：两点接杆式的内经千分尺，和三点式的三爪内径千分尺。两点式一般测量比较大的孔径，最长可以到6米。三爪主要测量小孔径，最小可以到达3.5mm的孔径。需要注意的是，三爪分为通孔和盲孔。 电流表电流表是测定电流强弱和方向的电学仪器。分直流电流表和交流电流表。供实验室和工业现场测试用。 温湿度计用来测定环境的温度及湿度，以确定产品生产或仓储的环境条件。也应用于人们日常生活。应
实验室仪器使用规则及注意事项 1、滴定管 滴定管分为两种，碱式滴定管和酸式滴定管 酸式滴定管只能用来装酸性的有强氧化性的溶液， 酸式滴定管下面的玻璃旋塞是滴定开关。 碱式滴定管就只能装碱性溶液和强还原溶液，碱 式滴定管的下端有一段橡皮管，橡皮管的中间的 玻璃球是滴定开关。 滴定管使用方法： 1.验漏，洗净滴定管后滴定管装满水关紧旋钮直立， 检查是否漏水。 2.洗涤滴定管，再用滴定液对滴定管进行润洗，润 洗后装滴定液到零刻度以上。 3.检查滴定管内是否有气泡，有的话调节滴定开关放出。 4.读出初始滴定液的体积。 滴定操作： 调节滴定开关使滴定液滴入待测溶液中，初始滴定速度慢，中间快，最后缓慢滴入。达到滴定终点时立即关闭滴定开关，读出剩余的滴定液体积。 计算：根据滴定液体积初始的读数减去剩余的滴定液体积，就可以得出用去了多少滴定液了。 2、托盘天平 使用方法 使用前 1.要放置在水平的地方，游码要指向红色0刻度线。 2.调节平衡螺母(天平两端的螺母)调节零点直至指针对准中 央刻度线直至天平横梁水平位置平衡。(小口诀：放平移零调 平衡，螺母调平反指针/走高端。) 3.左托盘放称量物，右托盘放砝码。根据称量物的性状应放 在玻璃器皿或洁净的纸上，事先应在同一天平上称得玻璃器皿或纸片的质量，然后称量待称物质。 4.砝码不能用手拿要用镊子夹取.千万不能把砝码弄湿、弄脏（这样会让砝码生锈，砝码质量变大，测量结果不准确），游码也要用镊子拨动。 5.添加砝码从估计称量物的最大值加起，逐步减小。托盘天平只能称准到0.1克。加减砝码并移动标尺上的游码，直至指针再次对准中央刻度线。（小口诀：先估后测左物右码由大到小后移游码） 6.过冷过热的物体不可放在天平上称量。应先在干燥器内放置至室温后再称。 7.物体的质量=砝码的总质量+游码在标尺上所对的刻度值（M左=M右+M游） 8.取用砝码必须用镊子，取下的砝码应放在砝码盒中，称量完毕，应把游码移回零点。
循环水多用真空泵使用说明 1、 打开水箱盖注入清洁凉水，水面到达溢水孔高度时停止加水。 2、 将需抽真空设备的抽水管套紧密连接到抽气嘴上，打开电源开 关即可开始抽真空工作。 3、实验结束后关闭开关，切断电源。 注意事项: 1、 请勿将泵头离水长时间空转，以免磨损机械密封。 2、 循环水应保持干净，以防堵塞真空泵，长期工作需定期清洗水 箱。 旋转蒸发仪使用说明 1、按电机开关，绿灯亮，主机开始旋转。 2、按电热开关，水浴锅自动加热，恒温控制。不许无水干烧。 3、实验结束后关闭开关，切断电源。 注意事项 1、先注水后通电。水浴锅加热时，请勿用手触摸，以免烫伤。 2、玻璃器件有严重污垢时，可用稀盐酸清洗。 3、经常检查密封圈的磨损程度，及时更换磨损的密封圈，以确保仪 器的真空度。 快速低温冷却循环泵使用说明 1、插上电源后，打开电源开关。 2、参数设置：显示屏幕上排显示实际检测温度，中排显示所需设置 温度，下排显示所需保温时间。 3、设置进入键进入温度设置区，通过按加减按键和左移右移键来设 置所需温度值，设置完成后按“设置进入键”，进入保温时间设置 来设置，设置完成后按“设置进入键”退出。 4、按“启动/暂停”键2秒，进入正常运行，显示屏上：“泵运转”符号 出现。 5、制冷自动运行前，“制冷”符号会持续闪烁，在启动间隔时间运行 完成后，制冷控制继电器吸合“制冷”符号停止闪烁，制冷开始工
作。在温度降至用户设定值时，制冷控制继电器停止输出，显示 屏上制冷符号消失。 6、实验结束后关闭开关，切断电源。 注意事项： 1、使用前槽内加入纯净水，且不能低于工作台版30mm。 叶面积测量仪使用说明 最大测量参数： 扫描长度：2m 扫描宽度：213mm 叶片厚度：3mm 1、按住面贴“开关”键3秒，当听到滴声响时，仪器开机完成。 2、按“确认”键进入，按“↑”、“↓”选择，按“返回”退回上一级菜单。 3、进入“测量设置”后，点击确认进入“测量项目”进入，选择要测量 的因子，打“√”表示测量此项，打“X”表示不测量此项。按确认键 更改。 4、存储方式包括自动保存和手动保存。 5、数据查询：按“↑”、“↓”选择数据编号并查询。 6、数据导出：按确认键进行导出。 7、数据删除：按“↑”、“↓”选择是否删除。 8、将叶子的叶面与叶柄连接处放置于仪器扫描处，按住手柄上的红 色按钮直到声音响起同时显示屏提示正在测量时，握住叶柄往正 面匀速拉动即可测得准确值。测量完成后可在显示屏上查看本次 测量数据。 注意事项： 1、每次使用完成后请充电。以免影响下次使用及电池寿命。 2、测量时叶面向着测量光放置。 3、仪器不能测量偏白色或白色的叶子。 4、避免阳光直射下测量。
一、常见仪器的分类 一般根据仪器的主要用途的不同，可将常见化学实验仪器分为下列8类： （一）计量类 用于量度质量、体积、温度、密度等的仪器。这类仪器中多为玻璃量器。主要有滴定管、移液管、量筒、量杯等。 （二）反应类 用于发生化学反应的仪器，也包括一部分可加热的仪器。这类仪器中多为玻璃或瓷质烧器。主要有试管、烧瓶、蒸发皿、坩埚等。（三）容器类 用于盛装或贮存固体、液体、气体等各种化学试剂的试剂瓶等。（四）分离类 用于进行过滤、分液、萃取、蒸发、灼烧、结晶、分馏等分离提纯操作的仪器。主要有漏斗、分液漏斗、蒸发皿、烧瓶、冷凝器、坩埚、烧杯等。 （五）固体夹持类 用于固定、夹持各种仪器的用品或仪器。主要有铁夹、铁圈、铁架台、漏斗架等。 （六）加热类 用于加热的用品或仪器。主要有试管、烧杯、烧瓶、蒸发皿、坩埚等。 （七）配套类
用于组装、连接仪器时所用的玻璃管、玻璃阀、橡胶管、橡胶塞等用品或仪器。 （八）其它类 不便归属上述各类的其它仪器或用品。 二、中学化学常见仪器的名称和使用 （一）计量仪器 1．量杯 量杯属量出式（符号Ex）量器，它用于量度从量器中排出液体的体积。排出液体的体积为该液体在量器内时从刻度值读取的体积数。 量杯有2种型式。面对分度表时，量杯倾液嘴向右，便于左手操作，称为左执式量杯。倾液嘴向左，则称为右执式量杯。250 mL以内的量杯均为左执式，500 mL以上者，则属于右执式。 2．温度计 温度计是用于测量温度的仪器。其种类很多，有数码式温度计，热敏温度计痔。而实验室中常用为玻璃液体温度。 温度计可根据用途和测量精度分为标准温度计和实用温度计2类。标准温度汁的精度高，它主要用于校正其它温度计。实用温度计是指所供实际测温用的温度计，主要有实验用温度计、工业温度计、气象温度计、医用温度计等。中学常用棒式工业温度汁。其中酒精温度计的量程为100℃，水银温度计用200℃和360℃2种量程规格。 使用注意事项
ICP （inductively coupled plasma ）电感耦合等离子体光谱仪VARIAN 725-ES 工作原理：利用氩等离子体产生的高温使用试样完全分解形成激发态的原子和离子，由于激发态的原子和离子不稳定，外层电子会从激发态向低的能级跃迁，因此发射出特征的谱线。通过光栅等分光后，利用检测器检测特定波长的强度，光的强度与待测元素浓度成正比。 功能及特点：ICP主要用于无机元素的定性及定量分析，能检测70多种元素。具有： 检出限低，检出灵敏度高（检出限达ng/ml 量级）； 分析精密度高； 分析动态范围大（工作的直线范围可达4-5 个数量级）；基体效应小； 多元素同时分析，分析速度快；操作简单，使用安全等特点。 VARIAN725-ES是全谱直读型ICP,采用的检测器为二维CCD佥测。通过不同前处理方法，检测范围最大可以是百分之几十，最小能达到微克每千克（及ppb量级）。应用：ICP广泛应用于科研、地质、质量检验、环境保护、化工等各行各业。按照分析材料性质不同可分为： 金属材料（包括贵金属、稀有金属、稀土等）； 非金属材料（包括陶瓷、矿石、土壤等）； 半导体材料（包括多晶硅、砷化镓、碳化硅等）； 化工原料及化学试剂； 食品； 药品； 。）水、空气等（其他． AAS原子吸收光谱仪 工作原理：利用光源发出特征光谱辐射，经过原子化器室后，由分光系统得到单 色光经过光电倍增管后到达检测器，终端电脑从检测器得到信号，进一步转化为数据进行处理，因为原子化器没有进样时，光通过原子化器时没有被吸收，透光率为100%，而当原子化器进样时，光通过原子化器时有一部分被吸收，透光率减小。根据朗伯-比尔定律，吸光度与样品浓度成正比，因此参照标准，根据吸光度可得出样品的浓度。 功能及特点：AAS巳成为金属元素分析的最有力工具之一，而且在许多领域巳作为标准分析方法。 具有： 检出限低（检出限达ng/ml 量级）；准确度高，火焰原子吸收的相对误差<1%；选择性好，大多数情况下共存元素对被测元素不产生干扰；分析速度快，应用范围广。 应用：原子吸收光谱分析现巳广泛用于各个分析领域，主要有四个方面：理论研究；元素分析；有机物分析；金属化学形态分析。． CS 工作原理：被测样品在富氧条件下由高频炉高温加热燃烧使碳、硫氧化成CO2 和S02气体，该气体经处理后进入相应的吸收池，对相应的红外辐射进行吸收再由探测器转化成对应的信号。此信号由计算机采样，经线性校正后转换成与CO2 和S02浓度成正比的数值，然后把整个分析过程的取值累加，分析结束后，此累加值在计算机中除以重量值，再乘以校正系数、扣除空白，即可获得样品中碳、硫百分含量。
转载]知识精要?化学实验常用仪器及其使用3 知识精要·化学实验常用仪器及其使用 中学化学实验常用的仪器有20多种，对这些仪器应该在反复使用和训练规范操作的基础上，努力做到“三会”，即：会识别仪器的名称和能恰当地选用仪器(仪器的种类和必要的规格)；会正确地使用仪器进行实验；会画常用仪器的剖面图。 按照中学化学实验常用仪器的用途，大致可分为计量仪器、分离物质仪器、可加热的仪器、加热仪器、存放物质的仪器和其它仪器六类。现对这些仪器的名称、规格、用途和操作要领分述如下。 1．计量仪器 (1)量筒 量筒用于量度一定体积的液体。量筒的容积常见的有10mL、50mL、100mL等多种，其分度(最小刻度每格)依次为0.2mL、1mL、1mL。应该根据需要量取液体的体积大小，选用适当规格的量筒；量取液体时，以液面的弯月形最低点为准；量筒不能加热，不能作反应容器(量筒是有刻度的玻璃容器，温度的变化会使刻度不准确，且量筒受热可能引起炸裂，因此，量筒不能用做反应容器或用来稀释浓硫酸、溶解强碱，也不能量取过热的液体或用于加热等)。量取液体时，应先往量筒里注液体到接近刻度然后改用滴管，将液体逐滴加入，直到指定量。读数时量筒必须方平视线必须与量筒内液体凹液面最底处保持水平。俯视使读数偏高；仰视使读数偏低。如右图 (2)托盘天平 固体药品称量使用托盘天平，一般能精确到0.1克。 使用步骤注意事项：①先调整零点；②称量物和砝码的位置为“左物右码”；③称量物不能直接放在托盘上，干燥的药品放在洁净的纸上称量，易潮解的和有腐蚀性的药品放在小烧杯等玻璃器皿里称量；④砝码用镊子夹取（“先大后小”）⑤称量结束后，应使游码归零，砝码放回砝码盒。 2．分离物质的仪器 漏斗漏斗内放滤纸用于过滤，也可通过漏斗向小口容器中转移液体。漏斗不能直接加热；过滤时应固定在铁架台的铁环上或固定在漏斗架上。 3．可加热的仪器 1．试管用来盛放少量药品，常温或加热情况下进行少量试剂反应的容器，可用于制取或收集少量气体。 使用注意事项：①可直接加热,用试管夹夹在距试管口1/3管长处。②加热后不能骤冷，防止炸裂。③加热时试管口不能对着任何人；给固体加热时，试管要横放，管口略向下倾斜。 ④加入试管内的液体，不加热时不超过试管容积的l/2，加热时不超过l/3。 2．烧杯用作配置溶液和加大试剂的反应容器，在常温或加热时使用。 使用注意事项：①烧杯外壁擦干后方可用于加热，加热时应放置在石棉网上，使受热均匀，盛放液体的容量通常不超过容积的1/3。②溶解物质搅拌时，玻璃棒不能触及杯壁或杯底。 3．烧瓶用于试剂量较大而又有液体物质参加反应的容器,还可制作洗瓶。可分为圆底烧瓶、平底烧瓶和蒸馏烧瓶。它们都可用于装配气体发生装置。蒸馏烧瓶用于分离互溶的沸点不同的物质。 使用注意事项：①圆底烧瓶和蒸馏烧瓶可用于加热，加热时要垫石棉网，也可用于其它热浴（如水浴加热等）。②液体加入量不要超过烧瓶容积的1/2。③使用时(制气体或有机 合成等)，应固定在铁架上，烧瓶夹应垫石棉绳或套橡皮管。 4．蒸发皿用于蒸发液体或浓缩溶液。 使用注意事项：①可直接加热，但不能骤冷。②盛液量不应超过蒸发皿容积的2/3. ③