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Blue Native PAGE电泳

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高通量全自动毛细管电泳分析系统技术参数

高通量全自动毛细管电泳分析系统技术参数 1.主要用途: 1.1 用于高通量动植物基因组核酸扩增产物微卫星片段大小分析,即SSR分析。 1.2 用于农业育种反向遗传学辐射或化学诱变突变体筛查,即Tilling分析。 1.3 用于常规DNA/RNA或扩增产物片段大小定性定量分析。 1.4 用于二代测序(NGS)过程中基因组DNA及文库的质控(定性定量)。 1.5 RNA定性定量分析。 1.6 质粒DNA分析、CAPS/RAPD分析。 1.7 同时具备定性和定量的功能。 2. 工作条件 2.1 环境温度: 15到25°C 2.2电源:100-240 VAC, 50-60Hz 2.3湿度:小于80% 3.技术指标 3.1*自动进样系统标准要求:标准SBS格式96孔板装载样品,12个样品同时进样, 同时检测。 3.2进样系统配置要求:3 x 96样品进样托盘,可实现无人值守下288个样本连续进 样分析。 3.3*毛细管电泳分离技术,12通道毛细管长度55cm或者80cm。片段大小分辨率 2bp(小于300bp片段) 3.4全自动仪器,每次标本分析都更换新的分离胶。 3.5分析前全自动灌胶。 3.6全自动进样。 3.7全自动进Marker和Ladder。 3.8分析结束后全自动清洗毛细管。 3.9分析结束后全自动将毛细管置入毛细管保存液中。 3.10标准分析时间:15分钟内完成12个样本的分析检测(小于3kbp样本) 3.11*检出限:5 pg/μL,即2ul上述单组分标本稀释12倍后进样,可测出信噪比大 于10:1的信号。

3.12动态范围:从最小至最高优于3个数量级。 3.13样品要求:PCR产物、基因组DNA、RNA 等。样品无需纯化除盐等后处理,直接 进样分析。 3.14*可检测DNA范围:1~100000bp。最大可测到10万碱基对,可对gDNA基因组DNA 进行质控检测。 3.15*突变检测灵敏度:可检测1000bp大小的DNA片段中1个碱基突变的存在以及8 个混合样本中1个突变样本的存在。 3.16适用的试剂盒:基因组DNA,NGS,RNA及常规片段大小分离试剂盒。 3.17片段大小计算精度:优于5%, 3.18光源:长寿命LED光源(标准寿命超过10年)激发波长470nm。 3.19检测器:高灵敏度CCD检测器,检测样本的发射波长范围:500~600nm。 3.20具备电压进样和真空进样2种进样方式。 3.21可同时放入2种不同类型的分离胶,2种不同类型的应用可不需要人工干预连续 进行,如可连续进行DNA和RNA定性定量分析。 4.基本配置 4.1主机:1台 4.2计算机控制(电脑,内预安装软件):1台 4.3安装调试试剂盒1套 4.4备品备件及工具包 4.5毛细管组件 4.6使用手册 技术服务要求 1.设备安装调试: 在买方指定的地点完成安装调试,并配合买方进行测试验 收。 2.质保期为验收合格后保修12个月,终身维修,质保期外只收硬件成本费。 3.维修响应时间: 接到维修通知后,1个工作日内作出响应,3个工作日内到 场排除故障。 注:该设备办理免税,如不能办理免税,所有费用由中标公司承担。

高效毛细管电泳色谱仪的介绍

高效毛细管电泳色谱仪的介绍 高效毛细管电泳色谱仪(CE)是以毛细管为分离通道,以高压直流电场为驱动力,利用荷电粒子之间的淌度差异和分配系数差异进行分离。由于CE溶质区带的超小体积特性导致光程太短,圆柱形毛细管作为光学表面不够理想,对检测器灵敏度要求相当高。CE常用检测器有紫外检测器、激光诱导荧光检测器、质谱检测器和电化学检测器等。 一、紫外检测器: 紫外检测器是基于物质对紫外吸收进行检测,是成熟的检测器,在CE中应用广。 1、原理: 入射紫外光通过样品时,被吸收的多少符合朗伯-比耳定律。 检测点在毛细管的末端,检测点的毛细管的外涂层要烧掉。 2、检测方法: (1)固定波长: 光源为低紫外氘灯,用滤光片获得固定波长的光。 (2)可变波长: 光源为氘灯或钨灯,用单色器(棱镜或光栅)获得连续可调波长的光。 (3)快速扫描: 1)利用线性二极管阵列快速捕获紫外光。 2)利用硅光电倍增管作快速扫描。 3、特点: (1)通用性好,特别是对蛋白质的适用性很强。 (2)灵敏度不足。 4、提高灵敏度的方法: 由于CE检测池的光路长度为毛细管内径,一般不超过100μm,小内径的毛细管限制了紫外检测器的灵敏度,可采用以下几种方法来提高灵敏度。 (1)优化测定波长: 通过测定不同波长下的信噪比来选择测定波长,以提高灵敏度。

(2)减少检测噪音: 1)提高光源强度。 2)采用聚焦和狭缝等减少背景光的影响。 3)采用良好的信号放大系统。 (3)扩展吸光光路长度: 1)为了克服圆柱形毛细管表面引起的散射、失真等不利的光学特性和增加光路长度,可采用矩形、扁形、Z形和泡型等特殊毛细管。当然柱效会有所下降。 2)对于普通毛细管,可采用轴向照射和多次反射来增加光路长度。 ①轴向照射:将激光光束从毛细管末端沿管轴方向入射,在毛细管侧面进行检测。 ②多次反射:在毛细管壁镀上银,分别开入射窗和出射窗。当入射光以特定角度入射后,在毛细管内反射30~40次后从出射窗口射出。 二、激光诱导荧光检测器: 激光诱导荧光检测器采用激发光源使检测物质产生荧光进行检测。 检测下限为10ˉ12~10ˉ10mol/L。 三、质谱检测器: 在CE-MS联用中,毛细管区带电泳为常用。电子喷雾离子源可检测多种高质量的带电分子,从CE分离出来的分子经过接口后直接进入MS,是MS的离子源。 检测下限为10ˉ9~10ˉ7mol/L,通用性好,可获得溶质的结构信息,但接口复杂。 四、电化学检测器: 电化学检测器可避免光学类检测器遇到的光程太短的问题,是CE中灵敏的检测器之一。 1、电导检测器: 柱上电导检测是在毛细管壁上用激光钻两个孔,插上两根铂电极,再将孔封住进行检测。 检测下限为10ˉ7~10ˉ5mol/L,通用性好,但需专门装置和毛细管处理。 2、安培检测器: CE中微量样品可使库仑效率大大提高,可达40%以上,而在HPLC中很少超过10%。 检测下限为10ˉ9~10ˉ8mol/L,灵敏度高,选择性好,但仅适用于电活性物

全自动核酸蛋白分析系统

全自动核酸蛋白分析系统 技术参数 1.功能:采用毛细管电泳原理,可应用于DNA、RNA等核酸的电泳分析,能进行全自动的核酸片段大小测定,核酸质控,浓度测定,微卫星分析等;仪器具有蛋白电泳功能 2.光源:LED光源,高灵敏度的光电倍增管检测; 3.自动化程度:采用预装式卡夹,即插即用,无须人工制胶、灌胶、上样,整个过程全部由仪器自动来完成;每轮分析后,仪器自动清洗毛细管,无须人工清洗; ★4.上样形式:直接兼容常规0.2ml离心管、常规8联管、12联管、96孔微孔板等;可搭配专用微量管,样品管中溶液需求量最低1ul;无需手工加染料; ★5.可以一次性完成1-100个任意个数样品的检测分析不浪费试剂;可单次自动处理单个样本不造成任何试剂耗材的浪费; 6.电泳时间:分析时间:最快可达1-2分钟内完成一次电泳; 7.检测片段范围:15bp-40kb; 8.灵敏度:无需对样品进行纯化,可以直接对PCR产物原液进行检测。DNA样品的检测灵敏度可达2pg/ul; 9.样品上样量:小于0.1 ul; 10.卡夹:提供预制胶卡夹,适用于DNA高分辨率分析、DNA标准卡夹、DNA快速筛查分析、RNA质量控制分析等应用;同时具有可供选择的蛋白预制胶卡夹; ★11.分辨率:对<500bp的DNA片段,可达1-4bp分辨率,300bp以内片段可达2bp分辨率; 12.软件功能:软件可以自动输出电泳胶图、峰图、样品浓度、片段大小等一系列数据,并可以以报告形式完整打印输出;PDF、WORD、JPG都可以输出; 13.无污染:系统中仪器、耗材及检测过程均为全封闭式,避免了核酸染色剂等有害物质与操作人员的接触; ★14.可选择通卡夹配件,在仪器外部对卡夹进行通胶,可以对卡夹中毛细管中的胶进行更好的置换,对过期卡夹或者保存不当卡夹进行处理。 ★15.采用空气压缩机或其它给压装置,操作方便,小巧便于放置和移动,无需氮气钢瓶,无需后期灌气。 配置清单 1.主机一台 2.操作电脑一台 3.分析软件一套 4.壹个核酸检测预制胶卡夹 5.DNAAlignmentMarker 1支 6.DNASIZEMarker 1支 7.缓冲液试剂一套 1 / 1

市售几款基于毛细管电泳原理的核酸分析仪的比较

市售几款基于毛细管电泳原理的核酸分析仪的比较 1.毛细管电泳原理及发展史 毛细管电泳(capillary electrophoresis,CE),又叫高效毛细管电泳(HPCE)是利用带电性不同的粒子在电场中迁移,在泳动过程中物质的各组分被分离。被分离物质的迁移率取决于分子的结构、形状和电荷数量等因素,同时受溶液pH值、离子强度、粘度和两性电解质因素的影响。是近年来发展最快的分析方法之一。 1981年Jorgenson和Lukacs首先提出在75μm内径毛细管柱内用高电压进行分离,创立了现代毛细管电泳。1984年Terabe等建立了胶束毛细管电动力学色谱。1987年Hjerten建立了毛细管等电聚焦,Cohen和Karger提出了毛细管凝胶电泳。1988~1989年出现了第一批毛细管电泳商品仪器。从此,由于CE符合了以生物工程为代表的生命科学各领域中对多肽、蛋白质(包括酶,抗体)、核苷酸乃至脱氧核糖核酸(DNA)的分离分析要求,得到了迅速的发展。 2.传统电泳的不足及毛细管电泳的优点 经典电泳技术虽然对生物化学的发展起了重要的推动作用,但是传统的电泳存在诸多弊端如解析度不佳、灵敏度差、重現性差、、电泳中的有害物质核酸染料废弃物处理麻烦、定量困难、各式药品保存及品质管理复杂、多样仪器操作及管理:配胶/制胶/电泳/UV灯/照相/软件分析等、人工判读没有统一标准、后续资料处理复杂、资料保存困难,已经很难满足现代生命科学研究的要求。 随着科技的进步基于毛细管电泳技术新仪器设备也被广泛的研发出来,其克服了传统凝胶电泳实验的一些弊端,具有高通量、高分辨率、高灵敏度、全自动、标准化、无污染等优点,赋予了其强大的检测分析功能,帮助科研工作者提高效率,及研判实验的准确性。3. 几款核酸分析仪的比较 现在市面上比较流行的利用毛细管电泳技术对dsDNA、RNA进行分离的核酸分析仪有安捷伦公司的2100生物分析仪、凯杰公司的QIAxcel系统、伯乐公司的Experion系统还有来自祖国宝岛台湾光鼎公司的Qsep100系统。虽然他们都是基于毛细管电泳的原理设计

毛细管电泳仪

毛细管: 凡内径很细的管子叫“毛细管”。通常指的是内径等于或小于1毫米的细管,因管径有的细如毛发故称毛细管。目前应用在医学上,建筑材料上。 简介: 水银温度计、钢笔尖部的狭缝、毛巾和吸墨纸纤维间的缝隙、土壤结构中的细隙以及植物的根、茎、叶的脉络等,都可认为是毛细管。毛细管电色谱是发展起来的一种新型微分离分析技术,它整合了毛细管电泳与微径柱液相色谱的优点,通过在填充微细颗粒液相色谱填料的微径柱色谱柱两端施加直流高压电场,达到其对痕量复杂生物及化学体系样品优越的分离能力。 细管空调:毛细管网模拟叶脉和人体毛细血管机制,由外径为3.5-5.0mm(壁厚0.9mm左右)的毛细管和外径20mm(壁厚2mm 或2.3mm)的供回水主干管构成管网。保温层、散热层、和毛细管网结合使用,复合成毛细管网换热器,大大提高了毛细管网单一构造的散热能力合使用用途,保护了毛细管管壁不受损坏。毛细管网平面辐射空调系统一般采用小循环大系统方式,并采用专用溶液作介质,可以避免系统阻塞,方便控制。为达到更高舒适度要求并避免结露,房间还应该配套湿度控制和新风系统。毛细管网生产和应用技术此前一直由德国企业高度垄断,北京普来福环境技术有限公司已打破国外企业垄断,研发生产出国产的毛细管网换热器,申请了多项发明专利和实用新型专利,并且已经进入批量生产阶段。

电泳仪: 电泳仪是实现电泳分析的仪器。一般由电源、电泳槽、检测单元等组成。所谓电泳,是指带电粒子在电场中的运动,不同物质由于所带电荷及分子量的不同,因此在电场中运动速度不同,据此可以对不同物质进行定性或定量分析,或将一定混合物进行组分分析或单个组分提取制备。 毛细管电泳仪: 毛细管电泳仪以弹性石英毛细管为分离通道,以高压直流电场为驱动力,依据样品中各组分的淌度和分配行为的差异而实现各组分分离。 工作原理: 毛细管电泳柱中装载电解液运行时,由于管壁硅羟基的存在会产生电渗流,电渗流将推动整个毛细管柱内的溶液定向移动。与一般色谱技术的主要区别在于其分离原理不是基于组分在流动相和固定相中分配系数,而是在电场作用下离子迁移速度的不同。 适用领域: 1. 医学及临床检验 毛细管电泳在医学及临床检验中的应用包括患者的病理检测、疾病诊断、疾病机理分析及体内代谢物分析等。分析对象是体液或组织中的药物、疾病相关标志物和离子等。 2.药物及天然产物

毛细管电泳仪

毛细管电泳仪 毛细管电泳(capillary electrophoresis,CE)又称高效毛细管电泳(high performance capillary electrophoresis,HPCE),是一类以毛细管为分离通道、以高压直流电场为驱动力的新型液相分离技术。毛细管电泳实际上包含电泳、色谱及其交叉内容,它使分析化学得以从微升水平进入纳升水平,并使单细胞分析,乃至单分子分析成为可能。长期困扰我们的生物大分子如蛋白质的分离分析也因此有了新的转机。 目录·基础理论·分类·特点·仪器系统·影响分离因素·基础理论·分类·特点·仪器系统·影响分离因素·测定药物与蛋白结合常数·毛细管电泳-质谱联用·微全分析系统·应用· \ 1 双电层 双电层是指两相之间的分离表面由相对固定和游离的两部分离子组成的与表面异号的离子层,凡是浸没在液体中的界面都会产生双电层。在毛细管电泳中,无论是带电粒子的表面还是毛细管管壁的表面都有双电层。 2 Zeta 电势毛细管电泳书籍 电介质溶液中,任何带电粒子都可被看成是一个双电层系统的一部分,离子自身的电荷被异号的带电离子中和,这些异号离子中有一些被不可逆的吸附到离子上,而另一些则游离在附近,并扩散到电介质中进

行离子交换。“固定”离子有一个切平面,它和离得最近的离子之间的电势则被称之为离子的Zeta 电势。 石英材质的毛细管是毛细管电泳中最常使用的毛细管,管子内表面在pH>3 情况下带负电,当其与溶液接触时,会形成紧贴内表面的和游离的两部分离子。这两部分离子组成的与表面电荷异号的离子层,即为双电层,其中第一部分又称之为Stern 层。第二层为扩散层。扩散层中游离部分离子的电荷密度随着和表面距离的增大而急剧减小。在Stern 层和双电层的游离部分的起点的边界层之间的电势称之为管壁的Zeta 电势。典型值大体在0-100 mV 之间,Zeta 电势的值随距离增大按指数衰减,使其衰减一个指数单位所需的距离称之为双电层的厚度(δ)。熔硅表面的Zeta 电势与它表面上的电荷数及双电层厚度有关,而这些又受到离子的性质、缓冲溶液pH 值、缓冲溶液中阳离子和熔硅表面间的平衡等因素的影响。 3 淌度、绝对淌度和有效淌度 带电粒子在直流电场作用下于一定介质(溶剂)中所发生的定向运动称为电泳。单位电场下的电泳速度称为淌度。在无限稀释溶液中(稀溶液数据外推)测得的淌度称为绝对淌度。 电场中带电离子运动除了受到电场力的作用外,还会受到溶剂阻力的作用。一定时间后,两种力的作用就会达到平衡,此时离子作匀速运动,电泳进入稳态。实际溶液的活度不同,特别是酸碱度的不同,所以样品分子的离解度不同,电荷也将发生变化,这时的淌度可称为有效电泳淌度。一般来说,离子所带电荷越多、离解度越大、体

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