生物分离工程复习题
一、名词解释
1.凝聚：在电解质作用下，破坏细胞菌体和蛋白质等胶体粒子的分散状态，使胶体粒子聚集的过程。
2.分配系数：在一定温度、压力下，溶质分子分布在两个互不相溶的溶剂里，达到平衡后，它在两相的浓度为一
常数叫分配系数。
3.絮凝：指在某些高分子絮凝剂存在下，在悬浮粒子之间发生架桥作用而使胶粒形成粗大的絮凝团的过程
4.过滤：是在某一支撑物上放过滤介质，注入含固体颗粒的溶液，使液体通过，固体颗粒留下，是固液分离的常
用方法之一。
5.萃取过程：利用在两个互不相溶的液相中各种组分（包括目的产物）溶解度的不同，从而达到分离的目的
6.吸附：是利用吸附剂对液体或气体中某一组分具有选择性吸附的能力，使其富集在吸附剂表面的过程。
7.反渗析：当外加压力大于渗透压时，水将从溶液一侧向纯水一侧移动，此种渗透称之为反渗透。
8.离心沉降：利用悬浮液或乳浊液中密度不同的组分在离心力场中迅速沉降分层，实现固液分离
9.离心过滤：使悬浮液在离心力场作用下产生的离心力压力，作用在过滤介质上，使液体通过过滤介质成为滤液，
而固体颗粒被截留在过滤介质表面，从而实现固液分离，是离心与过滤单元操作的集成，分离效率更高
10.离子交换：利用离子交换树脂作为吸附剂，将溶液中的待分离组分，依据其电荷差异，依靠库仑力吸附在树脂
上，然后利用合适的洗脱剂将吸附质从树脂上洗脱下来，达到分离的目的。
11.固相析出技术：利用沉析剂（precipitator）使所需提取的生化物质或杂质在溶液中的溶解度降低而形成无定
形固体沉淀的过程。
12.助滤剂：助滤剂是一种具有特殊性能的细粉或纤维，它能使某些难以过滤的物料变得容易过滤
13.色谱技术：是一组相关分离方法的总称，色谱柱的一般结构含有固定相（多孔介质）和流动相，根据物质在两
相间的分配行为不同（由于亲和力差异），经过多次分配（吸附-解吸-吸附-解吸…），达到分离的目的。
14.有机溶剂沉淀：在含有溶质的水溶液中加入一定量亲水的有机溶剂，降低溶质的溶解度，使其沉淀析出。
15.等电点沉淀：调节体系pH值，使两性电解质的溶解度下降，析出的操作称为等电点沉淀。
16.膜分离：利用膜的选择性（孔径大小），以膜的两侧存在的能量差作为推动力，由于溶液中各组分透过膜的迁
移率不同而实现分离的一种技术。
17.化学渗透破壁法：某些化学试剂，如有机溶剂、变性剂、表面活性剂、抗生素、金属螯合剂等，可以改变细胞
壁或细胞膜的通透性，从而使胞内物质有选择地渗透出来。
18.超临界流体：超临界流体是状态超过气液共存时的最高压力和最高温度下物质特有的点——临界点后的流体。
19.反渗透：在只有溶剂能通过的渗透膜的两侧，形成大于渗透压的压力差，就可以使溶剂发生倒流，使溶液达到
浓缩的效果，这种操作成为反渗透。
20.树脂工作交换容量：单位质量干树脂或单位体积湿树脂所能吸附的一价离子的毫摩尔数称为树脂交换容量，在
充填柱上操作达到漏出点时，树脂所吸附的量称为树脂工作交换容量。
21.色谱阻滞因数：溶质在色谱柱（纸、板）中的移动速率与流动相移动速率之比称为阻滞因数，以Rf表示。
22.膜的浓差极化：是指但溶剂透过膜，而溶质留在膜上，因而使膜面浓度增大，并高于主体中浓度。
23.超滤：凡是能截留相对分子量在500以上的高分子膜分离过程称为超滤，它主要是用于从溶剂或小分子溶质中
将大分子筛分出来。
24.生物分离技术：是指从动植物与微生物的有机体或器官、生物工程产物（发酵液、培养液）及其生物化学产品
中提取、分离、纯化有用物质的技术过程。
25.物理萃取：即溶质根据相似相溶的原理在两相间达到分配平衡，萃取剂与溶质之间不发生化学反应。
26.化学萃取：则利用脂溶性萃取剂与溶质之间的化学反应生成脂溶性复合分子实现溶质向有机相的分配。
27.盐析：是利用不同物质在高浓度的盐溶液中溶解度的差异，向溶液中加入一定量的中性盐，使原溶解的物质沉
淀析出的分离技术。
28.有机聚合物沉析：利用生物分子与某些有机聚合物形成沉淀而析出的分离技术称为有机聚合物沉析。
29.离子交换平衡：当正反应、逆反应速率相等时，溶液中各种离子的浓度不再变化而达平衡状态，即称为离子交
换平衡。
30.功能基团：离子交换树脂中与载体以共价键联结的不能移动的活性基团，又称功能基团
31.平衡离子：离子交换树脂中与功能基团以离子键联结的可移动的平衡离子，亦称活性离子。
32.树脂的再生：就是让使用过的树脂重新获得使用性能的处理过程，树脂的再生反应是交换吸附的逆反应。
33.层析分离：是一种物理的分离方法，利用多组分混合物中各组分物理化学性质的差别，使各组分以不同的程度
分布在两个相中。
34.流动相：在层析过程中，推动固定相上待分离的物质朝着一个方向移动的液体、气体或租临界体等，都称为流
动相。
35.正相色谱：是指固定相的极性高于流动相的极性，因此，在这种层析过程中非极性分子或极性小的分子比极性
36.反相色谱：是指固定相的极性低于流动相的极性，在这种层析过程中，极性大的分子比极性小的分子移动的速
度快而先从柱中流出。
37.吸附层析：是以吸附剂为固定相，根据待分离物与吸附剂之间吸附力不同而达到分离目的的一种层析技术。
38.分配层析：是根据在一个有两相同时存在的溶剂系统中，不同物质的分配系数不同而达到分离目的的一种层析
技术。
39.凝胶过滤：层析是以具有网状结构的凝胶颗粒作为固定相，根据物质的分子大小进行分离的一种层析技术。
40.离子交换层析：是以离子交换剂为固定相，根据物质的带电性质不同而进行分离的一种层析技术。
41.高效液相色谱：是指选用颗粒极细的高效耐压新型固定相，借助高压泵来输送流动相，并配有实时在线检测器，
实现色谱分离过程全部自动化的液相色谱法。
42.亲和层析：是利用生物活性物质之间的专一亲和吸附作用而进行的层析方法。是近年来发展的纯化酶和其他高
分子的一种特殊的层析技术。
43.疏水层析：是利用表面偶联弱疏水性基团（疏水性配基）的疏水性吸附剂为固定相，根据蛋白质与疏水性吸附
剂之间的弱疏水性相互作用的差别进行分离纯化的层析技术。
44.介电常数：表示介质对带有相反电荷的微粒之间的静电引力与真空对比减弱的倍数。
45.过滤介质：是指能使固一液混合料液得以分离的某一介面，通常指滤布或膜过滤中所用的膜。
46.等电点：是两性物质在其质点的净电荷为零时介质的pH值,溶质净电荷为零，分子间排斥电位降低，吸引力增
大，能相互聚集起来，沉淀析出，此时溶质的溶解度最低。
47.有机酸沉析：含氮有机酸（如苦味酸和鞣酸等）能够与有机分子的碱性功能团形成复合物而沉淀析出。
48.选择变性沉析：是利用蛋白质、酶与核酸等生物大分子对某些物理或化学因素敏感性不同，而有选择地使之变
性沉析，以达到目的物与杂蛋白分离的技术，称为选择变性沉析。
二、选择
1．HPLC是哪种色谱的简称（ C ）。
A．离子交换色谱 B.气相色谱 C.高效液相色谱 D.凝胶色谱
2．针对配基的生物学特异性的蛋白质分离方法是（ C ）。
A.凝胶过滤
B.离子交换层析
C.亲和层析
D.纸层析
3．盐析法沉淀蛋白质的原理是（ B ）
A.降低蛋白质溶液的介电常数
B.中和电荷，破坏水膜
C.与蛋白质结合成不溶性蛋白
D.调节蛋白质溶液pH到等电点
4．从组织中提取酶时，最理想的结果是（ C ）
A.蛋白产量最高
B.酶活力单位数值很大
C.比活力最高
D.Km最小
5．适合于亲脂性物质的分离的吸附剂是（ B ）。
A．活性炭 B.氧化铝 C.硅胶 D.磷酸钙
6．下列哪项酶的特性对利用酶作为亲和层析固定相的分析工具是必需的？（ B ）
A.该酶的活力高
B..对底物有高度特异亲合性
C.酶能被抑制剂抑制
D.最适温度高
E.酶具有多个亚基
7．用于蛋白质分离过程中的脱盐和更换缓冲液的色谱是（ C ）
A．离子交换色谱 B.亲和色谱 C.凝胶过滤色谱 D.反相色谱
45．适合小量细胞破碎的方法是（ B ）
高压匀浆法 B.超声破碎法 C.高速珠磨法 D.高压挤压法
8．盐析法沉淀蛋白质的原理是（ B ）
A.降低蛋白质溶液的介电常数
B.中和电荷，破坏水膜
C.与蛋白质结合成不溶性蛋白
D.调节蛋白质溶液pH到等电点
9．蛋白质分子量的测定可采用（ C ）方法。
A．离子交换层析 B.亲和层析 C.凝胶层析 D.聚酰胺层析
10．基因工程药物分离纯化过程中，细胞收集常采用的方法（ C ）
A．盐析 B.超声波 C.膜过滤 D.层析
11．氨基酸的结晶纯化是根据氨基酸的（ A ）性质。
A.溶解度和等电点
B.分子量
C.酸碱性
D.生产方式
12．离子交换剂不适用于提取（ D ）物质。
A．抗生素 B.氨基酸 C.有机酸 D.蛋白质
13．人血清清蛋白的等电点为4.64，在PH为7的溶液中将血清蛋白质溶液通电，清蛋白质分子向（A）
A ：正极移动；B：负极移动；C：不移动；D：不确定。
14．蛋白质具有两性性质主要原因是（ B ）
A：蛋白质分子有一个羧基和一个氨基；B：蛋白质分子有多个羧基和氨基；C：蛋白质分子有苯环和羟基；D：以上都对
15．使蛋白质盐析可加入试剂（ D ）
A：氯化钠；B：硫酸；C：硝酸汞；D：硫酸铵
16．凝胶色谱分离的依据是（ B ）。
A、固定相对各物质的吸附力不同
B、各物质分子大小不同
C、各物质在流动相和固定相中的分配系数不同
D、各物质与专一分子的亲和力不同
17．非对称膜的支撑层（ C ）。
A、与分离层材料不同
B、影响膜的分离性能
C、只起支撑作用
D、与分离层孔径相同
18．下列哪一项是强酸性阳离子交换树脂的活性交换基团（ A ）
A 磺酸基团（-SO3 H）
B 羧基-COOH
C 酚羟基C6H5OH
D 氧乙酸基-OCH2COOH
19．依离子价或水化半径不同，离子交换树脂对不同离子亲和能力不同。树脂对下列离子亲和力排列顺序正确的有（ A ）。
A、Fe3+﹥Ca2+﹥Na+
B、Na+﹥Ca2+﹥Fe3+
C、Na+﹥Rb+﹥Cs+
D、Rb+﹥Cs+﹥Na+
20．乳化液膜的制备中强烈搅拌（ C ）。
A、是为了让浓缩分离充分
B、应用在被萃取相与W/O的混合中
C、使内相的尺寸变小
D、应用在膜相与萃取相的乳化中
21．结晶过程中，溶质过饱和度大小（ A ）。
A、不仅会影响晶核的形成速度，而且会影响晶体的长大速度
B、只会影响晶核的形成速度，但不会影响晶体的长大速度
C、不会影响晶核的形成速度，但会影响晶体的长大速度
D、不会影响晶核的形成速度，而且不会影响晶体的长大速度
22．如果要将复杂原料中分子量大于5000的物质与5000分子量以下的物质分开选用（ D ）。
A、Sephadex G-200
B、Sephadex G-150
C、Sephadex G-100
D、Sephadex G-50
23．在蛋白质初步提取的过程中，不能使用的方法（ C ）。
A、双水相萃取
B、超临界流体萃取
C、有机溶剂萃取
D、反胶团萃取
24．在液膜分离的操作过程中，（ B ）主要起到稳定液膜的作用。
A、载体
B、表面活性剂
C、增强剂
D、膜溶剂
25．离子交换法是应用离子交换剂作为吸附剂，通过（ A ）将溶液中带相反电荷的物质吸附在离子交换剂上。
A、静电作用
B、疏水作用
C、氢键作用
D、范德华力
26．真空转鼓过滤机工作一个循环经过（ A ）。
A、过滤区、缓冲区、再生区、卸渣区
B、缓冲区、过滤区、再生区、卸渣区
C、过滤区、缓冲区、卸渣区、再生区
D、过滤区、再生区、缓冲区、卸渣区
27．丝状（团状）真菌适合采用（ A ）破碎。
A、珠磨法
B、高压匀浆法
C、A与B联合
D、A与B均不行
28．用来提取产物的溶剂称（ C ）。
A、料液
B、萃取液
C、萃取剂
D、萃余液。
29．阴离子交换剂（ C ）。
A、可交换的为阴、阳离子
B、可交换的为蛋白质
C、可交换的为阴离子
D、可交换的为阳离子
30．分配层析中的载体（ C ）。
A、对分离有影响
B、是固定相
C、能吸附溶剂构成固定相
D、是流动相
31．凝胶色谱分离的依据是（ B ）。
A、固定相对各物质的吸附力不同
B、各物质分子大小不同
C、各物质在流动相和固定相中的分配系数不同
D、各物质与专一分子的亲和力不同
32．洗脱体积是（ C ）。
A、凝胶颗粒之间空隙的总体积
B、溶质进入凝胶内部的体积
C、与该溶质保留时间相对应的流动相体积
D、溶质从柱中流出时所用的流动相体积
33．工业上强酸型和强碱型离子交换树脂在使用时为了减少酸碱用量且避免设备腐蚀，一般先将其转变为（ B ）。
A、钠型和磺酸型
B、钠型和氯型
C、铵型和磺酸型
D、铵型和氯型
34．吸附色谱分离的依据是（ A ）。
A、固定相对各物质的吸附力不同
B、各物质分子大小不同
C、各物质在流动相和固定相的分配系数不同
D、各物质与专一分子的亲和力不同
35．依离子价或水化半径不同，离子交换树脂对不同离子亲和能力不同。树脂对下列离子亲和力排列顺序正确的有（ A ）。
A、Fe3+>Ca2+>Na+
B、Na+ >Ca2+> Fe3+
C、硫酸根>柠檬酸根>硝酸根
D、硝酸根>硫酸根>柠檬酸根
36．乳化液膜的制备中强烈搅拌（ B ）。
A、是为了让浓缩分离充分
B、应用在被萃取相与W/O的混合中
C、使内水相的尺寸变小
D、应用在膜相与反萃取相的乳化中
37．下面哪一种是根据酶分子专一性结合的纯化方法（ A ）。
A. 亲和层析
B. 凝胶层析
C. 离子交换层析
D. 盐析
38．纯化酶时，酶纯度的主要指标是：（ D ）
A .蛋白质浓度 B. 酶量 C .酶的总活力 D. 酶的比活力
39．盐析法纯化酶类是根据（ B ）进行纯化。
A.根据酶分子电荷性质的纯化方法
B.调节酶溶解度的方法
C.根据酶分子大小、形状不同的纯化方法
D.根据酶分子专一性结合的纯化方法
40．分子筛层析纯化酶是根据（ C ）进行纯化。
A.根据酶分子电荷性质的纯化方法
B.调节酶溶解度的方法
C.根据酶分子大小、形状不同的纯化方法
D.根据酶分子专一性结合的纯化方法
41．以下哪项不是在重力场中，颗粒在静止的流体中降落时受到的力（ B ）
A.重力
B. 压力
C.浮力
D. 阻力
42．以下哪项不是颗粒在离心力场中受到的力（ C ）
A.离心力
B. 向心力
C.重力
D. 阻力
43．颗粒与流体的密度差越小，颗粒的沉降速度（ A ）
A.越小
B.越大
C.不变
D.无法确定
44．工业上常用的过滤介质不包括（ D ）
A.织物介质
B.堆积介质
C.多孔固体介质
D.真空介质
45．下列物质属于絮凝剂的有（ A ）。
A、明矾
B、石灰
C、聚丙烯类
D、硫酸亚铁
46．关于用氢键形成来判断各类溶剂互溶规律，下列（ A ）项是正确的叙述。
A、氢键形成是能量释放的过程，若两种溶剂混合后形成的氢键增加或强度更大，则有利于互溶。
B、氢键形成是能量吸收的过程，若两种溶剂混合后形成的氢键增加或强度更大，则有利于互溶。
C、氢键形成是能量释放的过程，若两种溶剂混合后形成的氢键增加或强度更大，则不利于互溶。
D、氢键形成是能量吸收的过程，若两种溶剂混合后形成的氢键增加或强度更大，则不利于互溶。
47．关于精馏回流比控制，对于一定的分离任务，以下正确的两项是（ A ）
A、若回流比变大，则精馏能耗增大；
B、若回流比变大，则精馏能耗减小；
C、若回流比变大，则所需理论塔板数变大；
D、若回流比变小，则所需理论塔板数变小。
48．结晶过程中，溶质过饱和度大小（ A ）
A、不仅会影响晶核的形成速度，而且会影响晶体的长大速度
B、只会影响晶核的形成速度，但不会影响晶体的长大速度
C、不会影响晶核的形成速度，但会影响晶体的长大速度
D、不会影响晶核的形成速度，而且不会影响晶体的长大速度
49．下列哪项不是蛋白质的浓度测定的方法（ D ）。
A、凯氏定氮法 B.双缩脲法 C.福林-酚法 D.核磁共振
50．供生产生物药物的生物资源不包括（ D ）
A.动物 B植物 C.微生物 D.矿物质
51．发酵液的预处理方法不包括（ C ）
A. 加热 B絮凝 C.离心 D. 调pH
52．其他条件均相同时，优先选用那种固液分离手段（ B ）
A. 离心分离 B过滤 C. 沉降 D.超滤
53．那种细胞破碎方法适用工业生产（ A ）
A. 高压匀浆 B超声波破碎 C. 渗透压冲击法 D. 酶解法
54．高压匀浆法破碎细胞，不适用于（ D ）
A. 酵母菌 B大肠杆菌 C. 巨大芽孢杆菌 D.青霉
55．关于萃取下列说法正确的是（ C ）
A. 酸性物质在酸性条件下萃取 B碱性物质在碱性条件下萃取
C. 两性电解质在等电点时进行提取
D. 两性电解质偏离等电点时进行提取
56．液一液萃取时常发生乳化作用，如何避免（ D ）
A.剧烈搅拌 B低温 C.静止 D.加热
57．在葡聚糖与聚乙二醇形成的双水相体系中，目标蛋白质存在于（ A ）
A.上相 B下相 C.葡聚糖相 D.以上都有可能
58．当两种高聚物水溶液相互混合时，二者之间的相互作用不可能产生（D）
A. 互不相溶，形成两个水相 B两种高聚物都分配于一相，另一相几乎全部为溶剂水
C. 完全互溶，形成均相的高聚物水溶液
D.形成沉淀
59．超临界流体萃取中，如何降低溶质的溶解度达到分离的目的（ C ）
A.降温 B升高压力 C.升温 D.加入夹带剂
60．下列关于固相析出说法正确的是（ B ）
A.沉淀和晶体会同时生成 B析出速度慢产生的是结晶
C.和析出速度无关
D.析出速度慢产生的是沉淀
61．盐析操作中，硫酸铵在什么样的情况下不能使用（ B ）
A.酸性条件 B碱性条件 C.中性条件 D.和溶液酸碱度无关
62．有机溶剂沉淀法中可使用的有机溶剂为（ D ）
A.乙酸乙酯 B正丁醇 C.苯 D.丙酮
63．有机溶剂为什么能够沉淀蛋白质（ B ）
A.介电常数大 B介电常数小 C.中和电荷 D.与蛋白质相互反应
64．蛋白质溶液进行有机溶剂沉淀，蛋白质的浓度在（ A ）范围内适合。
A. 0.5％～2％ B1％～3％ C. 2％～4％ D. 3％～5％
65．若两性物质结合了较多阳离子，则等电点pH会（ A ）
A.升高 B降低 C.不变 D.以上均有可能
66．若两性物质结合了较多阴离子，则等电点pH会（ B ）
A.升高 B降低 C.不变 D.以上均有可能
67．生物活性物质与金属离子形成难溶性的复合物沉析，然后适用（ C ）去除金属离子。
A. SDS B CTAB C. EDTA D. CPC
68．那一种膜孔径最小（ C ）
A.微滤 B超滤 C.反渗透 D. 纳米过滤
69．超滤技术常被用作（ C ）
A. 小分子物质的脱盐和浓缩 B小分子物质的分级分离
C. 小分子物质的纯化
D.固液分离
70．微孔膜过滤不能用来（ D ）
A. 酶活力测定 B mRNA的测定及纯化 C. 蛋白质含量测定 D.分离离子与小分子
71．吸附剂和吸附质之间作用力是通过（ A ）产生的吸附称为物理吸附。
A. 范德华力 B库伦力 C.静电引力 D.相互结合
72．洗脱吸附剂上附着的溶质，洗脱液的极性强弱关系为（ A ）
A. 石油醚﹤环己烷﹤四氯化碳 B二氯甲烷﹤乙醚﹤四氯化碳
C.乙酸乙酯﹤丙酮﹤氯仿
D. 吡啶﹤甲醇﹤水
73．那一种活性碳的吸附容量最小（ B ）
A.粉末活性碳 B锦纶活性碳 C.颗粒活性碳
74．酚型离子交换树脂则应在（ B ）的溶液中才能进行反应
A. pH＞7 B pH＞9 C. pH﹤9 D. pH﹤7
75．羧酸型离子交换树脂必须在（ C ）的溶液中才有交换能力
A. pH＞5 B pH﹤7 C. pH＞7 D. pH﹤5
76．离子交换树脂适用（ B ）进行溶胀
A.水 B乙醇 C.氢氧化钠 D.盐酸
77．下列关于离子交换层析洗脱说法错误的是（ D ）
A. 对强酸性树脂一般选择氨水、甲醇及甲醇缓冲液等作洗脱剂
B弱酸性树脂用稀硫酸、盐酸等作洗脱剂
C. 强碱性树脂用盐酸-甲醇、醋酸等作洗脱剂
D. 若被交换的物质用酸、碱洗不下来，应使用更强的酸、碱
78．阳树脂在软化中易受Fe3+污染，可通过（ C ）清除铁化合物。
A.水 B乙醇 C. 加抑制剂的高浓度盐酸 D.高浓度盐溶液
79．下列关于正相色谱与反相色谱说法正确的是（ C ）
A. 正相色谱是指固定相的极性低于流动相的极性
B正相色谱层析过程中非极性分子或极性小的分子比极性大的分子移动的速度慢
C. 反相色谱是指固定相的极性低于流动相的极性
D. 反相色谱层析过程中，极性大的分子比极性小的分子移动的速度慢
80．一般来说，可使用正相色谱分离（ B ）
A. 酚 B带电离子 C. 醇 D. 有机酸
81．分子筛层析指的是（ C ）
A. 吸附层析 B分配层析 C. 凝胶过滤 D. 亲和层析
82．常用的紫外线波长有两种（ B ）
A. 256nm和365nm B254nm和365nm C. 254nm和367nm D. 256nm和367nm
83．以氧化铝和硅胶为介质进行层析，由于对极性稍大的成分其Rf（ B ）
A.大 B小 C.中等 D.不一定
84．对于吸附的强弱描述错误的是（ A ）
A. 吸附现象与两相界面张力的降低成反比
B某物质自溶液中被吸附程度与其在溶液中的溶解度成正比
C. 极性吸附剂容易吸附极性物质
D. 非极性吸附剂容易吸附非极性物质
85．进行梯度洗脱，若用50g吸附剂，一般每份洗脱液量常为（ C ）
A. 20rnL B100rnL C. 50rnL D. 90rnL
86．离子交换用的层析柱直径和柱长比一般为（ B ）之间
A. 1：10-1：20 B1：10-1：50 C. 1：10-1：30 D. 1：20-1：50
87．离子交换层析的上样时，上样量一般为柱床体积的（ C ）为宜。
A. 2％-5％ B1％-2％ C. 1％-5％ D. 3％-7％
88．通过改变pH值从而使与离子交换剂结合的各个组分被洗脱下来，可使用（ A ）
A. 阳离子交换剂一般是pH值从低到高洗脱 B阳离子交换剂一般是pH值从高到低洗脱 C. 阴离子交换剂一般是pH值从低到高 D. 以上都不对
89．那一种凝胶的孔径最小（ A ）
A. Sephadex G-25 B Sephadex G-50 C. Sephadex G-100 D. Sephadex G-200
90．那一种凝胶的吸水量最大（ D ）
A. Sephadex G-25 B Sephadex G-50 C. Sephadex G-100 D. Sephadex G-200
91．葡聚糖凝胶可使用那种溶剂溶胀（ C ）
A.甲醇 B乙醇 C.缓冲液 D.乙酸乙酯
92．疏水亲和吸附层析通常在（ D ）的条件下进行
A.酸性 B碱性 C.中 D. 高浓度盐溶液
93．当硅胶吸水量在（ B ）以上时，就失去其吸附作用
A. 13% B17% C. 10% D. 15%
94．气相色谱的载气不能用（ C ）
A. 氢气 B氦气 C.氧气 D. 氮气
95．关于电泳分离中迁移率描述正确的是（ A ）
A.带电分子所带净电荷成正比 B分子的大小成正比
C. 缓冲液的黏度成正比
D.以上都不对
96．在什么情况下得到粗大而有规则的晶体（ A ）
A. 晶体生长速度大大超过晶核生成速度 B晶体生长速度大大低于过晶核生成速度
C. 晶体生长速度等于晶核生成速度
D.以上都不对
97．恒速干燥阶段与降速干燥阶段，那一阶段先发生（ A ）
A. 恒速干燥阶段 B降速干燥阶段 C.同时发生 D.只有一种会发生
98．珠磨机破碎细胞，适用于（ D ）
A. 酵母菌 B大肠杆菌 C. 巨大芽孢杆菌 D.青霉
99．为加快过滤效果通常使用（ C ）
A.电解质 B高分子聚合物 C.惰性助滤剂 D.活性助滤剂
100．不能用于固液分离的手段为（ C ）
A.离心 B过滤 C.超滤 D.双水相萃取
101．最常用的干燥方法有（ D ）
A、常压干燥
B、减压干燥
C、喷雾干燥
D、以上都是
102．下列哪个不属于高度纯化：( B )
A. 层析
B. 吸附法
C. 亲和层析
D.凝胶层析
103．酶提取液中，除所需酶外，还含有大量的杂蛋白、多糖、脂类和核酸等，为了进一步纯化，可用( E )方法除去杂质。
A、调pH值和加热沉淀法
B、蛋白质表面变性法
C、降解或沉淀核酸法
D、利用结合底物保护法除去杂蛋白
E、以上都可以
104．物理萃取即溶质根据（ B ）的原理进行分离的
A.吸附
B.相似相溶 C分子筛 D 亲和
105．纳米过滤的滤膜孔径（ D ）
A 0.02～10μm
B 0.001～0.02μm
C <2nm
D < 1nm
106．适合小量细胞破碎的方法是（ B ）
A.高压匀浆法
B.超声破碎法
C.高速珠磨法
D.高压挤压法
107．人血清清蛋白的等电点为4.64，在PH为7的溶液中将血清蛋白质溶液通电，清蛋白质分子向（A）
A ：正极移动；B：负极移动；C：不移动；D：不确定。
108．单宁沉析法制备菠萝蛋白酶实验中，加入1%的单宁于鲜菠萝汁中产生沉淀，属于( D )沉析原理。
A盐析 B有机溶剂沉析 C等电点沉析 D有机酸沉析
109．关于疏水柱层析的操作错误( D )
A疏水层析柱装柱完毕后，通常要用含有高盐浓度的缓冲液进行平衡
B疏水层析是利用蛋白质与疏水性吸附剂之间的弱疏水性相互作用的差别进行分离纯化的层析技术
C洗脱后的层析柱再生处理，可用8mol/L尿素溶液或含8mol/L尿素的缓冲溶液洗涤，然后用平衡缓冲液平衡
D疏水柱层析分辨率很高、流速慢、加样量小
110．结晶法对溶剂选择的原则是（ C ）
A、对有效成分溶解度大，对杂质溶解度小
B、对有效成分溶解度小，对杂质溶解度大
C、对有效成分热时溶解度大冷时溶解度小，对杂质冷热都溶或都不溶
D、对有效成分冷热时都溶，对杂质则不溶
E、对杂质热时溶解度大，冷时溶解度小
111．适用于分离糖、苷等的SephadexG的分离原理是（ C ）
A、吸附
B、分配比
C、分子大小
D、离子交换
E、水溶性大小
112．关于分配柱层析的基本操作错误( D )。
A装柱分干法和湿法两种
B分配柱层析法使用两种溶剂，事先必须先使这两个相互相饱和
C用硅藻土为载体，需分批小量地倒入柱中，用一端是平盘的棒把硅藻压紧压平
113．在高效液相色谱中,下列哪种检测器不适合于在梯度洗脱时使用. （ D ）
A．紫外检测器 B．荧光检测器 C．蒸发光散射检测器 D．示差折光检测器
114．网格高聚物吸附剂吸附的弱酸性物质，一般用下列哪种溶液洗脱。（ D ）
A.水
B.高盐
C.低pH
D. 高pH
115．下列哪项不属于发酵液的预处理：（ D ）
A.加热
B.调pH
C.絮凝和凝聚
D.层析
116．下列哪个不属于初步纯化：( C )
A .沉淀法 B. 吸附法 C. 离子交换层析 D. 萃取法
117．颗粒与流体的密度差越小，颗粒的沉降速度（ A ）
A.越小
B.越大
C.不变
D.无法确定
118．盐析法沉淀蛋白质的原理是（ B ）
A.降低蛋白质溶液的介电常数
B.中和电荷，破坏水膜
C.与蛋白质结合成不溶性蛋白
D.调节蛋白质溶液pH到等电点
119．高效液相色谱仪的种类很多，但是无论何种高效液相色谱仪，基本上由（ D ）组成。
A 高压输液系统、进样系统、分离系统、过滤系统、记录系统或色谱工作站等五大部分
B进样系统、分离系统、检测系统、记录系统或色谱工作站四大部分
C高压输液系统、进样系统、分离系统、检测系统四大部分
D高压输液系统、进样系统、分离系统、检测系统、记录系统或色谱工作站等五大部分
120．影响电泳分离的主要因素（ B ）
A 光照
B 待分离生物大分子的性质
C 湿度
D 电泳时间
121．超滤膜通常不以其孔径大小作为指标，而以截留分子量作为指标。所谓“分子量截留值”是指阻留率达（ B ）的最小被截留物质的分子量。
A 80%以上
B 90%以上
C 70%以上
D 95%以上
122．在凝胶过滤（分离范围是5000~400000）中，下列哪种蛋白质最先被洗脱下来（ B ）
A．细胞色素C（13370）B．肌球蛋白（400000）C．过氧化氢酶（247500）
D．血清清蛋白（68500）E．肌红蛋白（16900）
123．“类似物容易吸附类似物”的原则,一般极性吸附剂适宜于从何种溶剂中吸附极性物质（ B ）
A．极性溶剂 B．非极性溶剂 C．水 D．溶剂
124．能够除去发酵液中钙、镁、铁离子的方法是（ C ）
A．过滤 B．萃取 C．离子交换 D．蒸馏
125．从四环素发酵液中去除铁离子,可用（ B ）
A．草酸酸化 B．加黄血盐 C．加硫酸锌 D．氨水碱化
126．当向蛋白质纯溶液中加入中性盐时，蛋白质溶解度（ C ）
A、增大
B、减小
C、先增大，后减小
D、先减小，后增大
127．关于大孔树脂洗脱条件的说法，错误的是：（ A ）
A、最常用的是以高级醇、酮或其水溶液解吸。
B、对弱酸性物质可用碱来解吸。
C、对弱碱性物质可用酸来解吸。
D、如吸附系在高浓度盐类溶液中进行时，则常常仅用水洗就能解吸下来。
128．为了进一步检查凝胶柱的质量，通常用一种大分子的有色物质溶液过柱，常见的检查物质为蓝色葡聚糖，下面不属于它的作用的是（C）
A、观察柱床有无沟流
B、观察色带是否平整
C、测量流速
D、测量层析柱的外水体积
129．亲和层析的洗脱过程中，在流动相中减去配基的洗脱方法称作（ D ）
A、阴性洗脱
B、剧烈洗脱
C、正洗脱
D、负洗脱
130．下列细胞破碎的方法中，哪个方法属于非机械破碎法( A )
A.化学法
B. 高压匀浆
C. 超声波破碎
D.高速珠磨
131．下列哪一项不是常用的滤布材料（ C ）
A. 法兰绒
B. 帆布
C. 滤纸
D.斜纹布
132．超滤膜截留的颗粒直径为( B )
A 0.02～10μm
B 0.001～0.02μm
C <2nm
D < 1nm
133．阴树脂易受有机物污染，污染后，可用（ B ）处理
A柠檬酸 B 10%NaCl+2%～5%NaOH混合溶液 C 氨基三乙酸 D EDTA
134．关于用氢键形成来判断各类溶剂互溶规律，下列（ A ）项是正确的叙述。
A、氢键形成是能量释放的过程，若溶剂混合后形成的氢键增加或强度更大，则有利于互溶。
B、氢键形成是能量吸收的过程，若溶剂混合后形成的氢键增加或强度更大，则有利于互溶。
C、氢键形成是能量释放的过程，若溶剂混合后形成的氢键增加或强度更大，则不利于互溶。
D、氢键形成是能量吸收的过程，若溶剂混合后形成的氢键增加或强度更大，则不利于互溶。
135．HPLC是哪种色谱的简称（ C ）。
A．离子交换色谱 B.气相色谱 C.高效液相色谱 D.凝胶色谱
136．洗脱体积是（ C ）。
A、凝胶颗粒之间空隙的总体积
B、溶质进入凝胶内部的体积
C、与该溶质保留时间相对应的流动相体积
D、溶质从柱中流出时所用的流动相体积
137．分子筛层析纯化酶是根据（ C ）进行纯化。
A.根据酶分子电荷性质的纯化方法
B.调节酶溶解度的方法
C.根据酶分子大小、形状不同的纯化方法
D.根据酶分子专一性结合的纯化方法
138．用于蛋白质分离过程中的脱盐和更换缓冲液的色谱是（ C ）
A．离子交换色谱 B．亲和色谱 C．凝胶过滤色谱 D．反相色谱
139．用活性炭色谱分离糖类化合物时，所选用的洗脱剂顺序为：（ D ）
A、先用乙醇洗脱，然后再用水洗脱
B、用甲醇、乙醇等有机溶剂洗脱
C、先用乙醇洗脱，再用其他有机溶剂洗脱
D、先用水洗脱，然后再用不同浓度乙醇洗脱
140．微滤膜所截留的颗粒直径为( A )
A 0.02～10μm
B 0.001～0.02μm
C <2nm
D < 1nm
141．下列哪一项不是阳离子交换树脂（ D ）
A 氢型
B 钠型
C 铵型
D 羟型
142．适合于亲脂性物质的分离的吸附剂是（ B ）。
A．活性炭 B.氧化铝 C.硅胶 D.磷酸钙
143．气相色谱柱主要有（ C ）。
A填充柱 B毛细管柱 C A或B D A或B及其他
144．关于分配柱层析的基本操作错误( D )。
A装柱分干法和湿法两种
B分配柱层析法使用两种溶剂，事先必须先使这两个相互相饱和
C用硅藻土为载体，需分批小量地倒入柱中，用一端是平盘的棒把硅藻压紧压平
D分配柱层析适用于分离极性比较小、在有机溶剂中溶解度大的成分，或极性很相似的成分。
145．按分离原理不同，电泳可分为（ A ）
A 区带电泳、自由界面电泳、等速电泳、等电聚焦电泳
B 纸电泳、醋酸纤维薄膜电泳、琼脂凝胶电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳
C 区带电泳、自由界面电泳、纸电泳、醋酸纤维薄膜电泳
D 等速电泳、等电聚焦电泳、琼脂凝胶电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳
146．在酸性条件下用下列哪种树脂吸附氨基酸有较大的交换容量（ C ）
A．羟型阴 B．氯型阴 C．氢型阳 D．钠型阳
147．超临界流体萃取法适用于提取（ B ）
A、极性大的成分
B、极性小的成分
C、离子型化合物
D、能气化的成分
E、亲水性成分
148．分离纯化早期，由于提取液中成分复杂，目的物浓度稀，因而易采用（ A ）
A、分离量大分辨率低的方法
B、分离量小分辨率低的方法
C、分离量小分辨率高的方法
D、各种方法都试验一下，根据试验结果确定
149．蛋白质类物质的分离纯化往往是多步骤的，其前期处理手段多采用下列哪类的方法。（ B ）
A．分辨率高 B.负载量大 C.操作简便 D.价廉
150．亲和层析的洗脱过程中，在流动相中减去配基的洗脱方法称作（ D ）
A. 阴性洗脱
B. 剧烈洗脱
C. 正洗脱
D. 负洗脱
151．将四环素粗品溶于pH2的水中，用氨水调pH4.5—4.6，28－30℃保温，即有四环素沉淀结晶析出。此沉淀方法称为（ B ）
A、有机溶剂结晶法
B、等电点法
C、透析结晶法
D、盐析结晶法
152．针对配基的生物学特异性的蛋白质分离方法是（ C ）。
A.凝胶过滤
B.离子交换层析
C.亲和层析
D.纸层析
153．下列哪项不是常用的树脂再生剂（ D ）
A 1％～10％HCl
B H2S04、
C NaCl、
D 蒸馏水
154．反渗透膜的孔径小于( C )
A 0.02～10μm
B 0.001～0.02μm
C <2nm
D < 1nm
155．亲和层析的洗脱过程中，在流动相中加入配基的洗脱方法称作（ C ）
A、阴性洗脱
B、剧烈洗脱
C、竞争洗脱
D、非竞争洗脱
156．凝胶层析中，有时溶质的Kd>1，其原因是（ B ）
A、凝胶排斥
B、凝胶吸附
C、柱床过长
D、流速过低
157．活性炭在下列哪种溶剂中吸附能力最强？（ A ）
A、水
B、甲醇
C、乙醇
D、三氯甲烷
158．将配基与可溶性的载体偶联后形成载体-配基复合物，该复合物可选择性地与蛋白质结合，在一定条件下沉淀出来，此方法称为（ A ）
A、亲和沉淀
B、聚合物沉淀
C、金属离子沉淀
D、盐析沉淀
159．在一定的pH和温度下改变离子强度（盐浓度）进行盐析，称作 ( A )
A、KS盐析法
B、β盐析法
C、重复盐析法
D、分部盐析法
160．在超滤过程中，主要的推动力是（ C ）
A、浓度差
B、电势差
C、压力
D、重力
161．下面关于亲和层析载体的说法错误的是（ B ）
A、载体必须能充分功能化。
B、载体必须有较好的理化稳定性和生物亲和性，尽量减少非专一性吸附。
C、载体必须具有高度的水不溶性和亲水性。
D、理想的亲和层析载体外观上应为大小均匀的刚性小球。
162．在选用凝胶层析柱时，为了提高分辨率，宜选用的层析柱是（ A ）
A、粗且长的
B、粗且短的
C、细且长的
D、细且短的
163．如果用大肠杆菌作为宿主细胞，蛋白表达部位为周质，下面哪种细胞破碎的方
法最佳？（ C ）
A.匀浆法
B.超声波法
C. 渗透压休克法
D. 冻融法
164．盐析法与有机溶剂沉淀法比较，其优点是（ B ）
A．分辨率高 B．变性作用小 C．杂质易除 D．沉淀易分离
165．在萃取液用量相同的条件下，下列哪种萃取方式的理论收率最高（ C ）
A.单级萃取
B.三级错流萃取
C.三级逆流萃取
D.二级逆流萃取
166．磺酸型阳离子交换树脂可用于分离（ E ）
A、强心苷
B、有机酸
C、醌类
D、苯丙素
E、生物碱
167．不能用于糖类提取后的分离纯化的方法是（ B ）
A、活性炭柱色谱法
B、酸碱溶剂法
C、凝胶色谱法
D、分级沉淀法
E、大孔树脂色谱法
168．用大孔树脂分离苷类常用的洗脱剂是（ B ）
A、水
B、含水醇
C、正丁醇
D、乙醚
E、氯仿
三、判断题
1.助滤剂是一种可压缩的多孔微粒。（×）
2.通过加入某些反应剂是发酵液进行预处理的方法之一。（√）
3.高级醇能被细胞壁中的类脂吸收，使胞壁膜溶胀，导致细胞破碎。（×）
4.极性溶剂与非极性溶剂互溶。（×）
5.溶剂萃取中的乳化现象一定存在。（×）
6.临界压力是液化气体所需的压力。（×）
7.进料的温度和pH会影响膜的寿命。（√）
8.液膜能把两个互溶但组成不同的溶液隔开。（√）
9.流动相为气体则称为气相色谱。（√）
10.用冷溶剂溶出固体材料中的物质的方法又称浸煮。（×）
11.用热溶剂溶出固体材料中的物质的方法又称浸渍。（×）
13.要增加目的物的溶解度，往往要在目的物等电点附近进行提取。（×）
14.应用有机溶剂提取生化成分时，一般在较高温度下进行。（×）
15.常压干燥浓缩的缺点是设备投资及操作维护费用高，生产能力不太大。（×）
16.生物物质中最常用的干燥方法是减压干燥。（√）
17.冷冻干燥适用于高度热敏的生物物质。（√）
18.溶剂的极性从小到大为丙醇＞乙醇＞水＞乙酸。（√）
19.蛋白质变性，一级、二级、三级结构都被破坏。（×）
20.蛋白质类的生物大分子在盐析过程中，最好在高温下进行，因为温度高会增加其溶解度。（×）
21.吸附剂氧化铝的活性与其含水量无关。（×）
22.酸性、中性、碱性氨基酸在强碱性阴离子交换树脂柱上的吸附顺序是碱性氨基酸＞中性氨基酸＞酸性氨基酸
（×）
23.离子交换剂是一种不溶于酸、碱及有机溶剂的固态学分子化合物。（√）
24.蛋白质变性后溶解度降低，主要是因为电荷被中和及水膜被去除所引起的。（×）
25.溶剂的极性从小到大为丙醇＞乙醇＞水＞乙酸。（√）
26.当某一蛋白质分子的酸性氨基酸残基数目等于其碱性氨基酸残基数目时，此蛋白质的等电点为7.0。（√）
27.采用氧化铝为吸附剂时，用洗脱剂应从高极性开始，逐渐减低，洗脱剂的极性。（×）
28.重蒸馏法常为制备无盐水的方法。（×）
29.板框压滤机可过滤所有菌体。（×）
30.高压匀浆法可破碎高度分枝的微生物。（×）
31.超声波破碎法的有效能量利用率极低，操作过程产生大量的热，因此操作需在冰水或有外部冷却的容器中进行。
（√）
32.冻结的作用是破坏细胞膜的疏水键结构，降低其亲水性和通透性。（×）
33.有机溶剂被细胞壁吸收后，会使细胞壁膨胀或溶解，导致破裂，把细胞内产物释放到水相中去。（√）
34.蛋白质为两性电解质，改变pH可改变其荷电性质，pH﹥pI蛋白质带正电。（×）
35.蛋白质为两性电解质，改变pH可改变其荷电性质，pH﹥pI蛋白质带负电。（√）
36.蛋白质为两性电解质，改变pH可改变其荷电性质，pH﹤pI蛋白质带负电。（×）
37.蛋白质为两性电解质，改变pH可改变其荷电性质，pH﹤pI蛋白质带正电。。（√）
38.离心是基于固体颗粒和周围液体密度存在差异而实现分离的。（√）
39.不同高分子化合物的溶液相互混合可形成两相或多相系统，如葡聚糖与聚乙二醇（PEG）按一定比例与水混合
后，溶液先呈浑浊状态，待静置平衡后，逐渐分成互不相溶的两相，上相富含PEG，下相富含葡聚糖。（√）40.不同高分子化合物的溶液相互混合可形成两相或多相系统，如葡聚糖与聚乙二醇（PEG）按一定比例与水混合
后，溶液先呈浑浊状态，待静置平衡后，逐渐分成互不相溶的两相，下相富含PEG，上相富含葡聚糖。（×）41.超临界流体温度不变条件下，溶解度随密度（或压力）的增加而增加，而在压力不变时，温度增加情况下，溶
解度有可能增加或下降。（√）
42.．盐析是利用不同物质在高浓度的盐溶液中溶解度的差异，向溶液中加入一定量的中性盐，使原溶解的物质沉
淀析出的分离技术。（√）
43.硫酸铵在碱性环境中可以应用。（×）
44.在低盐浓度时，盐离子能增加生物分子表面电荷，使生物分子水合作用增强，具有促进溶解的作用。（√）
45.向含有生化物质的水溶液中加入一定量亲水性的有机溶剂，能使生化物质沉淀析出。（√）
46.丙酮沉析作用小于乙醇。（×）
47.有机溶剂与水混合要在低温下进行。（√）
48.有机溶剂沉析分辨能力比盐析高。（√）
49.若两性物质结合了较多阳离子，则等电点pH降低。（×）
50.等电点沉淀在实际操作中应避免溶液pH上升至5以上。（√）
51.纳米过滤膜孔径最小。（×）
52.离子交换速率总是取决于内部扩散速率。（×）
53.酚型树脂则应在pH小于9的溶液中才能进行反应。（×）
54.伯胺基在pH<7的溶液中使用。（√）
55.在70～80℃时盐型树脂的分解反应达到初步脱盐而不用酸碱再生剂的这种树脂叫热再生树脂。（√）
56.对强酸性树脂一般选择氨水、甲醇及甲醇缓冲液等作洗脱剂。（√）
57.阴树脂易受有机物污染，可用有机溶剂浸泡或淋洗。（×）
58.如不慎树脂失水，应先用水浸泡。（×）
59.只有树脂对被交换离子比原结合在树脂上的离子具有更高的选择性时，静态离子交换操作才有可能获得较好的
60.层析分离是一种化学的分离方法。（×）
61.分离纯化极性大的分子（带电离子等）采用反相色谱（或正相柱），（×）
62.而分离纯化极性小的有机分子（有机酸、醇、酚等）多采用正相色谱（或反相柱）。（×）
63.吸附力较弱的组分，有较低的Rf值。（×）
64.离子交换剂可以分为3部分：高分子聚合物基质、电荷基团和被交换离子。（×）
65.任何情况都优先选择较小孔隙的交换剂。（×）
66.凝胶柱层析可进行生物大分子分子量的测定。（√）
67.在高浓度盐溶液中疏水性相互作用减小。（×）
68.色谱分离技术中固定相都是固体。（×）
69.色谱分离技术中被检测物质的峰越宽越好。（×）
70.制备型HPLC对仪器的要求不像分析型HPLC那样苛刻。（√）
71.在聚丙烯酰胺凝胶中加入阴离子去污剂十二烷基硫酸钠（SDS），影响凝胶的形成。（×）
72.等电聚焦电泳会形成的一个由阳极到阴极逐步递减的pH梯度。（×）
73.在恒速干燥阶段，过程速度由水分从物料内部移动到表面的速度即内扩散所控制。（×）
74.在降速干燥阶段，干燥速度由水的表面汽化速度即外扩散所控制法。（×）
75.渗透压冲击是各种细胞破碎法中最为温和的一种，适用于易于破碎的细胞，如动物细胞和革兰氏阳性菌。（×）
76.等密度梯度离心中，梯度液的密度要包含所有被分离物质的密度。（√）
77.可以用纸色谱的方法来选择、设计液-液萃取分离物质的最佳方案。（√）
78.Sephadex LH-20的分离原理主要是分子筛和正相分配色谱。（√）
79.酸性、中性、碱性氨基酸在强碱性阴离子交换树脂柱上的吸附顺序是碱性氨基酸＞中性氨基酸＞酸性氨基酸
（×）
80.等密度梯度离心适于分离大小相同密度不同的物质。（√）
81.当气体的温度超过其临界温度，压力超过临界压力之后，物质的聚集状态就介于气态和液态之间，成为超临界
流体。（√）
82.盐析反应完全需要一定时间，一般硫酸铵全部加完后，应放置30min以上才可进行固-液分离。（√）
83.层析点样时用一根毛细管，吸取样品溶液，在距薄层一端 1.5^-2cm的起始线上点样，样品点直径小于3mm。
（√）
84.疏水柱层析可直接分离盐析后或高盐洗脱下来的蛋白质、酶等生物大分子溶液（√）
85.某结晶物质经硅胶薄层色谱，用一种展开剂展开，显示单一斑点，所以该晶体为一单体。（×）
86.水提醇沉法时根据物质溶解度差别进行分离的方法。（√）
87.采用溶剂提取法提取中草药有效成分时，选择溶剂的原则是“相似相溶原则”。（√）
88.凝聚与絮凝作用的原理是相同的，只是沉淀的状态不同。（×）
89.冻结-融化法冻结的作用是破坏细胞膜的疏水键结构，增加其亲水性和通透性来破坏细胞的。（√）
90.发生乳化现象对萃取是有利的。（×）
91.丙酮，介电常数较低，沉析作用大于乙醇，所以在沉析时选用丙酮较好。（×）
92.由于pH值可能对蛋白的稳定性有较大的影响，故一般通常采用改变离子强度的梯度洗脱（√）
93.盐析作用也能减少有机溶剂在水中的溶解度，使提取液中的水分含量减少。可以促使生化物质转入有机相从而
提高萃取率。（√）
94.珠磨法中适当地增加研磨剂的装量可提高细胞破碎率。（×）
95.中性多糖类药物常用水作溶剂来提取，也可用水浸煮，也可以用冷水浸提。（∨）
96.凝胶层析会使得大分子物质后流出，小分子物质先流出。（×）
97.有机溶剂（如胍、乙醇、尿素和异丙醇等）可以削弱疏水分子间的相互作用。可以用于任何规模的细胞破碎。
（√）
98.液一液萃取时，常发生乳化作用，使有机溶济与水相分层困难。而且无法恢复。（×）
99.蛋白质变性后溶解度降低，主要是因为电荷被中和及水膜被去除所引起的。（×）
100.活性氧化铝可分三种类型：碱性氧化铝、中性和酸性氧化铝。（√）
101.细胞破碎技术是生物分离操作中必需的步骤。（×）
102.离心操作时，对称放置的离心管要达到体积相同才能进行离心操作。（×）
103.分配系数K与溶质的浓度和相体积比无关，它主要取决于相系统的性质、被萃取物质的表面性质和温度。（√）104.甲醇沉淀作用与乙醇相当，但对蛋白质的变性作用比乙醇、丙酮都小，所以应用广泛。（×）
105.氨基酸、蛋白质、多肽、酶、核酸等两性物质可用等电点沉析。（√）
106.同时含有酸、碱两种基团的树脂叫两性树脂（√）
107.氧化铝和硅胶都为亲水性吸附剂，由于对极性稍大的成分吸附力大，所以极性大的成分难以解吸附，Rf小，极
108.盐析一般可在室温下进行，当处理对温度敏感的蛋白质或酶时，盐析操作要在低温下（如0℃～4℃）进行。
（√）
109.蛋白质类的生物大分子在盐析过程中，最好在高温下进行，因为温度高会增加其溶解度。（×）
110.液膜能把两个互溶但组成不同的溶液隔开。（√）
111.沉淀法、吸附法、萃取法、超滤法都是进行初步纯化。（√）
112.渗透压冲击是各种细胞破碎法中最为温和的一种，适用于易于破碎的细胞，如动物细胞和革兰氏阴性菌。（√）113.同一化合物用不同溶剂重结晶，其结晶的熔点可能有差距。（√）
114.化学萃取即溶质根据相似相溶的原理在两相间达到分配平衡，萃取剂与溶质之间不发生化学反应。（×）115.若两性物质结合了较多阳离子（如Ca2+、Mg2+、Zn2+等），则等电点pH升高。（√）
116.采用凝胶过滤分离蛋白质主要取决于蛋白质分子的大小，先将蛋白质混合物上柱然后进行洗脱，小分子的蛋白质由于所受排阻力较小首先被洗脱出来。( × )
117.树脂使用后不可再回收。（×）
四、填空
1.发酵液常用的固液分离方法有（离心）和（过滤）等。
2.常用的蛋白质沉析方法有（等电点沉淀），（盐析）和（有机溶剂沉淀）。
3.阳离子交换树脂按照活性基团分类，可分为（强酸型），（弱酸型）和（中等强度）；其典型的活性基团分别有
（磺酸基团），（羧基），（磷酸基）。
4.蛋白质分离常用的色谱法有（凝胶色谱法），（多糖基离子交换色谱法），（高效液相色谱法）和（亲和色谱法）。
5.为使过滤进行的顺利通常要加入（惰性助滤剂）。
6.离子交换分离操作中，常用的洗脱方法有（pH梯度）和（离子强度（盐）梯度）。
7.阴离子交换树脂按照活性基团分类，可分为（强碱型），（弱碱型）和（中等强度）；其典型的活性基团分别有
（季氨基）、（伯、仲、叔氨）、（强弱基团都具备）。
8.离子交换树脂由（载体），（活性基团）和（可交换离子）组成。
9.常用的化学细胞破碎方法有（渗透冲击），（酶消化法），（增溶法），（脂溶法）和（碱处理法）。
10.DEAE Sepharose是（阴）离子交换树脂，其活性基团是（二乙基氨基乙基）。
11.影响离子交换选择性的因素有（离子化合价），（离子水化半径），（溶液浓度），（离子强度），（溶液的pH值），
（有机溶剂），（树脂物理结构）和（辅助力）。
12.CM Sepharose是（阳）离子交换树脂，其活性基团是（羧甲基）
13.工业离心设备从形式上可分为（管式），（套筒式），（碟片式），等型式。
14.膜分离过程中所使用的膜，依据其膜特性（孔径）不同可分为（微滤膜），（超滤膜），（纳滤膜）和（反渗
透膜）。
15.工业上常用的超滤装置有（板式），（管式），（螺旋卷式）和（中空纤维式）。
16.影响吸附的主要因素有（吸附剂的性质），（吸附质的性质），（温度），（溶液pH值），（盐浓度）和（吸附物
浓度和吸附剂用量）。
17.影响盐析的因素有（溶质种类），（溶质浓度），（pH值）和（温度）。
18.简单地说，离子交换过程实际上只有（外部扩散），（内部扩散）和（化学交换反应）三步；
19.反相高效液相色谱的固定相是（非极性）的，而流动相是（极性）的；常用的固定相有（C18）和（C8）；常用的
流动相有（甲醇）和（乙睛）。
20.超临界流体的特点是与气体有相似的（粘度（扩散系数）），与液体有相似的（密度）。
21.等电聚焦电泳法分离不同蛋白质的原理是依据其（等电点（pI））的不同；
22.根据分离机理的不同，色谱法可分为（吸附色谱），（离子交换色谱），（凝胶色谱），（分配色谱）和（亲和色谱）。
23.典型的工业过滤设备有（板框压滤机）和（真空转鼓过滤机）。
24.常用离心设备可分为（离心沉降）和（离心过滤）两大类；
25.根据物化理论，萃取达到平衡时，溶质在萃取相和萃余相中的（浓度的比值）一定；
26.根据吸附剂与吸附质之间存在的吸附力性质的不同，可将吸附分为（物理）、（化学）、（极性）和（交换）吸附；
27.离子交换操作一般分为（动态）和（静态）两种；
28.蛋白质等生物大分子，在溶液中呈稳定的分散状态，其原因是由于（分子表面电荷）和（水化层）；
29.盐析用盐的选择需考虑（盐析作用强）、（溶解度大）、（生物学惰性）和（来源丰富、经济）等几个方面的因素；
30.影响有机溶剂沉淀的因素有（温度）、（pH）、（样品浓度）、（中性盐浓度）和（金属离子）。
31.结晶包括三个过程（过饱和溶液的形成）、（晶核的形成）和（晶体的生长）。
32.过饱和溶液的形成方法有（饱和溶液冷却）、（部分溶剂蒸发）、（解析）和（化学反应结晶）。
33.物料中所含水分可分为（结合水）和（非结合水）三种；
34.根据干燥曲线，物料干燥可分为（恒速干燥阶段）和（降速干燥阶段）两个阶段；
36.大孔网状吸附剂有（非极性）、（中等极性）和（极性）三种主要类型；
37.影响离子交换速度的因素有（树脂粒度）、（交联度）、（溶液流速）、（温度）、（离子的大小）、（离子的化合价）
和（离子浓度）。
38.分配色谱的基本构成要素有（载体）、（固定相）和（流动相）。
39.分子筛色谱也称（凝胶色谱）的主要应用是（脱盐）和（分级分离）
40.根据膜结构的不同，常用的膜可分为（对称性膜）、（非对称膜）和（复合膜）三类；
41.固体可分为（结晶）和（无定型）两种状态；
42.结晶的前提是（过饱和溶液的形成）；结晶的推动力是（溶液的过饱和度）；
43.根据晶体生长扩散学说，晶体的生长包括（溶质借扩散作用从溶液中转移到晶体的表面）、（溶质长入晶面放出
结晶热）和（结晶热传递回到溶液中）三个过程；
44.影响晶体生长速度的主要因素有（杂质）、（搅拌）、（过饱和度）和（温度）。
五、简答与问答题
1、试述凝胶色谱的原理？
答：将混合原料加在柱上并用流动相洗脱，则无法进入孔隙内部的大分子直接被洗脱下来，小分子因为可以进入孔隙内部而受到很大的阻滞，最晚被洗脱下来，而中等大小的分子，虽然可以进入孔隙内部但并不深入，受到的阻滞作用不强，因而在两者之间被洗脱下来。
2、在色谱操作过程中为什么要进行平衡？
答：1、流速平衡：流速是柱层析操作当中的主要影响因素，流速的快慢直接影响着分离的效果，流速过快，混合物得不到完全的分离，流速过慢，整体分离的时间要延长，因此在分离前首先要确定留宿。
2、液体环境：为了保持被分离物质运动的均一性，以及好的吸附和解析效果，因此要保持孔隙内部和外部液体环境的一致，所以进行液体环境的平衡。
3、以羧酸吸附蛋白质为例，简要说明离子交换树脂的洗脱方法及其原理？
答：1、加碱：主要是调节蛋白质到达等电点，是蛋白质带电量减少，吸附力下降从而被洗脱下来。
2、加酸：主要是抑制羧酸的电离，使活性基团带电量下降，吸附力下降从而蛋白质被洗脱下来。
3、加盐：依照质量作用定律，把蛋白质洗脱下来。
3、在离子交换色谱操作中，怎样选择离子交换树脂？
答：1、对阴阳离子交换树脂的选择：正电荷选择阳离子交换树脂，负电荷选择阴离子交换树脂。
2、对离子交换树脂强弱的选择：较强的酸性或碱性，选择选用弱酸性或弱碱性树脂。
3、对离子交换树脂离子型的选择：根据分离的目的，弱酸或弱碱性树脂不使用H或OH型。
4、简述盐析的原理及产生的现象？
答：当中性盐加入蛋白质分散体系时可能出现以下两种情况：
（1）“盐溶”现象—低盐浓度下，蛋白质溶解度增大
（2）“盐析”现象—高盐浓度下，蛋白质溶解度随之下降，原因如下：
（a）无机离子与蛋白质表面电荷中和，形成离子对，部分中和了蛋白质的电性，使蛋白质分子之间的排斥力减弱，从而能够相互靠拢；
（b）中性盐的亲水性大，使蛋白质脱去水化膜，疏水区暴露，由于疏水区的相互作用导致沉淀；
5、简述吸附色谱分离技术的原理？
答: 利用溶质与吸附剂之间的分子吸附力(范德华力，包括色散力、诱导力、定向力以及氢键)的差异而实现分离6、在运用离子交换技术提取蛋白质时，为什么要使用多糖基离子交换剂？
答:因为离子交换树脂孔径小,大分子蛋白质难以进入。同时，树脂内部主要为疏水性，对亲水性的蛋白质会产生影响。而多糖基离子交换剂没有上述问题。
7、简述过饱和溶液形成的方法？
答：（1）热饱和溶液冷却（等溶剂结晶）
适用于溶解度随温度升高而增加的体系；同时，溶解度随温度变化的幅度要适中；
（2）部分溶剂蒸发法（等温结晶法）
适用于溶解度随温度降低变化不大的体系，或随温度升高溶解度降低的体系；
（3）真空蒸发冷却法
使溶剂在真空下迅速蒸发，并结合绝热冷却，是结合冷却和部分溶剂蒸发两种方法的一种结晶方法。
（4）化学反应结晶
加入反应剂产生新物质，当该新物质的溶解度超过饱和溶解度时，即有晶体析出；
8、怎样进行离子交换树脂的预处理及转型？
答：物理处理：水洗、过筛，去杂，以获得粒度均匀的树脂颗粒；
化学处理：转型（氢型或钠型）阳离子树脂酸—碱—酸阴离子树脂碱—酸—碱
9、何谓等电点沉析法？
答:蛋白质再等电点下的溶解度最低，根据这一性质，再溶液中加入一定比例的有机溶剂，破坏蛋白质表面的水化层和双电层，降低分子间斥力，加强了蛋白质分子间的疏水相互作用，使得蛋白质分子得以聚集成团沉淀下来。10、何谓超临界流体萃取，并简述其分离原理？
答：超临界流体萃取是利用超临界流体具有的类似气体的扩散系数，以及类似液体的密度（溶解能力强）的特点，利用超临界流体为萃取剂进行的萃取单元操作。其特点是安全、无毒、产品分离简单，但设备投资较大。
11、简述结晶过程中晶体形成的条件？
答：结晶过程包括过饱和溶液的形成、晶核的形成及晶体的生长三个过程，其中溶液达到过饱和状态是结晶的前提，过饱和度是结晶的推动力。
12、简述凝胶色谱的分离原理？
答：凝胶排阻色谱的分离介质（填料）具有均匀的网格结构，其分离原理是具有不同分子量的溶质分子，在流经柱床是，由于大分子难以进入凝胶内部，而从凝胶颗粒之间流出，保留时间短；而小分子溶质可以进入凝胶内部，由于凝胶多孔结构的阻滞作用，流经体积变大，保留时间延长。这样，分子量不同的溶质分子得以分离。
13、膜分离过程中，有那些原因会造成膜污染，如何处理？
答：（1）膜污染主要有两种情况：一是附着层被滤饼、有机物凝胶、无机物水垢胶体物质或微生物等吸附于表面；另一种是料液中溶质结晶或沉淀造成堵塞。（3分）
（2）膜污染是可以预防或减轻的，措施包括料液预处理、膜性质的改善、操作条件改变等方式。（2分）
（3）膜污染所引起的通量衰减往往是不可逆的，只能通过清洗的处理方式消除，包括物理方法冲洗和化学药品溶液清洗等。（2分）
14、超临界萃取的原理及SC-CO2萃取的优点？
答:原理：溶质在超临界流体中的溶解度，与其密度有关，密度越大，溶解度越大。在临界点附近，微小的压力增加或温度下降，则溶剂的密度大幅度增加，对溶质的溶解度将大幅度增加，有利于溶质的萃取。而在临界点附近，微小的压力下降或温度上升，则溶剂的密度大幅度减少，对溶质的溶解度将大幅减少，有利于溶质的分离和溶剂的回收。
优点：无毒无腐蚀性，不可燃烧，价格低廉，传质好萃取快，临界温度和临界压力较低适合于热敏生物制品，可获萃取物或萃余物
15、何谓免疫亲和层析，简述亲和免疫层析介质的制备过程?
答、免疫亲和层析是利用亲和技术和色谱分离集成产生的一种高效色谱分离技术，其分离原理是通过抗原-抗体之间特异性的相互作用，从而实现高效的分离。
层析介质的制备过程包括：抗体的制备、抗体提取、载体活化，手臂链的连接、抗体的连接等步骤。
16、何谓亲和吸附，有何特点？
答：亲和吸附是吸附单元操作的一种，它是利用亲和吸附剂与目标物之间的特殊的化学作用实现的高效分离手段。亲和吸附剂的组成包括：惰性载体、手臂链、特异性亲和配基。
亲和吸附的特点是高效、简便、适用范围广、分离速度快、条件温和，但载体制备难度大，通用性差，成本较高。
17、简述生物分离过程的特点?
答: 1、产品丰富：产品的多样性导致分离方法的多样性
2、绝大多数生物分离方法来源于化学分离
3、生物分离一般比化工分离难度大
（1）成分复杂（2）悬液中的目标产物浓度低（3）生物活性，条件相对温和（4）生物产品要求高质量（5）获得高纯度的干燥产品（6）卫生
18、试比较凝聚和絮凝两过程的异同？
答：凝聚和絮凝——在电介质作用下，破坏溶质胶体颗粒表面的双电层，破坏胶体系统的分散状态，使胶体粒子聚集的过程。
凝聚：简单电解质降低胶体间的排斥力。从而范德华引力起主导作用，聚合成较大的胶粒，粒子的密度越大，越易分离。
絮凝：指在某些高分子絮凝剂存在下，在悬浮粒子之间发生架桥作用而使胶粒形成粗大的絮凝团的过程
19、简述有机溶剂沉析的原理？
答：1、概念：在含有溶质的水溶液中加入一定量亲水的有机溶剂，降低溶质的溶解度，使其沉淀析出。
2、原理：
（1）降低了溶质的介电常数，使溶质之间的静电引力增加，从而出现聚集现象，导致沉淀。
（2）由于有机溶剂的水合作用，降低了自由水的浓度，降低了亲水溶质表面水化层的厚度，降低了亲水性，导致脱水凝聚。
20、膜分离技术的类型和定义？
答：膜分离过程的实质是物质透过或被截留于膜的过程，近似于筛分过程，依据滤膜孔径大小而达到物质分离的目的，故而可以按分离粒子大小进行分类：
（1）微滤：以多孔细小薄膜为过滤介质，压力为推动力，使不溶性物质得以分离的操作，孔径分布范围在0.025~14μm之间；
（2）超滤：分离介质同上，但孔径更小，为0.001~0.02 μm，分离推动力仍为压力差，适合于分离酶、蛋白质等生物大分子物质；
（3）反渗透：是一种以压力差为推动力，从溶液中分离出溶剂的膜分离操作，孔径范围在0.0001~0.001 μm之间；（由于分离的溶剂分子往往很小，不能忽略渗透压的作用，故而成为反渗透）；
（4）纳滤：以压力差为推动力，从溶液中分离300~1000小分子量的膜分离过程，孔径分布在平均2nm；
（5）电渗析：以电位差为推动力，利用离子交换膜的选择透过性，从溶液中脱除或富集电解质的膜分离操作；21、影响液-固分离的因素？
（一）微生物种类的影响
一般真菌的菌丝比较粗大，液一固分离容易，含真菌菌体及絮凝蛋白质的发酵液，可采用鼓式真空过滤或板框过滤。对于酵母菌体，离心分离的方法具有较好的效果。但是细菌或细胞碎片相当细小，液一固分离十分困难，用一般的离心分离或过滤方法效果很差，因此应先用预处理的各种手段来增大粒子，才能获得澄清的滤液。
（二）发酵液的黏度
液一固分离的速度通常与黏度成反比。影响发酵液黏度的因素很多：
（1）菌体种类和浓度不同，其黏度有很大差别。
（2）不同的培养基组分和用量也会影响黏度，如用黄豆饼粉、花生饼粉作氮源，用淀粉作碳源会使黏度增大。发酵液中未用完的培养基较多或发酵后期用油作消沫剂也会使过滤困难。
22、影响有机溶剂萃取分离的因素？
影响液一液萃取的因素主要有目的物在两相的分配比（分配系数K）和有机溶剂的用量等。分配系数K值增大，提取效率也增大，萃取就易于进行完全。当K值较小时，可以适当增加有机溶剂用量来提高萃取率，但有机溶剂用量增加会增加后处理的工作量，因此在实际工作中，常常采取分次加入溶剂，连续多次提取来提高萃取率。
23、盐析的原理及影响因素？
1、亲水性大于蛋白质破坏水化层
2、带电离子中和蛋白质表面电荷
影响因素：
（1）盐离子浓度（2）生物分子种类（3）生物分子浓度（4） pH值（五）温度
24、影响有机溶剂沉析的因素？
（1）温度（2）生物样品的浓度（3）pH（4）离子强度（5）金属离子
25、何时应用静态离子交换分离法？
一般只是在试探性实验、测定交换平衡常数、某些交换动力学的研究、交换分配系数的测定、络合物离解常数的测定、滴定曲线的研究、某些催化反应的试探性研究、除去盐溶液中过剩的酸和碱、吸附溶液中所含的高分子量物质等方面可能用到。此外还用于不适合用柱进行操作的离子交换分离，如溶液粘度太大、含有悬浮固体及在反应时放出气体会造成沟流或堵塞管柱；或者是含有碳酸盐、亚硫酸盐、硫化物的溶液与氢型阳离子柱交换时；以及某些交换速度较慢、交换要求在一步完成的等条件下，还是可以采用的。
26、简述交换容量及其影响因素？
交换容量是指离子交换剂能提供交换离子的量，它反映离子交换剂与溶液中离子进行交换的能力。通常所说的离子交换剂的交换容量是指离子交换剂所能提供交换离子的总量，又称为总交换容量，它只和离子交换剂本身的性质有关。
影响交换容量的因素很多，主要可以分为两个方面，一方面是离子交换剂颗粒大小、颗粒内孔隙大小以及所分离的样品组分的大小等影响。另一些影响因素如实验中的离子强度、pH值等主要影响样品中组分和离子交换剂的带电性质。
27、疏水柱层析分离原理？
亲水性蛋白质（酶）表面均含有一定量的疏水性基团。尽管在水溶液中蛋白质（酶）具有将疏水性基团折叠在分子内部而表面显露极性和荷电基团的趋势，但总会有一些疏水性基团或极性基团的疏水部位暴露在蛋白质（酶）表面。这部分疏水基团可与亲水性固定相表面偶联的短链烷基、苯基等弱疏水基会发生疏水性相互作用，被固定相（疏水性吸附剂）所吸附。
28、影响电泳分离的主要因素？
1、大分子的性质
2、电场强度
3、溶液的pH
4、溶液的离子强度
5、电渗
6、温度
7、支持物的影响
38. 提高晶体质量的方法有哪些？
29、生物分离的基本原理？
主要是依据离心力、分子大小（筛分）、浓度差、压力差、电荷效应、吸附作用、静电作用、亲和作用、疏水作用、溶解度、平衡分离等原理对原料或产物进行分离、纯化。不同的分离对象需要采用不同的分离方法才能有效地被分离。
30、试列举常见的吸附剂
（1）活性炭（2）白陶土（白土、陶土、高岭土）（3）磷酸钙凝胶（4）氢氧化铝凝胶
（5）氧化铝（6）硅胶（7）滑石粉（8）硅藻土（9）皂土（10）沸石（11）聚酰胺粉（12）大网格聚合物吸附剂31、吸附色谱分离化学成分的原理是什么？简述硅胶、氧化铝、聚酰胺、活性炭这四种吸附剂的主要用途和特点？
利用混合物中各成分在两相中吸附力的差异进行分离。硅胶可分离各类成分。氧化铝分离碱性或亲脂性成分。活性炭分离水溶性成分。聚酰胺是氢键吸附，适合分离黄酮成分。
32、树脂的再生（或称活化）？
所谓树脂的再生就是让使用过的树脂重新获得使用性能的处理过程，树脂的再生反应是交换吸附的逆反应。再生方法可根据污染情况和条件而定，一般阳树脂在软化中易受Fe3+污染，清除铁化合物的方法，通常是用加抑制剂的高浓度盐酸（10%～15%）浸泡树脂5～12h，甚至更长。也可用柠檬酸、氨基三乙酸、EDTA等络合物进行处理。阴树脂易受有机物污染，可用10%NaCl+2%～5%NaOH混合溶液浸泡或淋洗
33、液一液萃取时溶剂的选择要注意以下几点？
（1）选用的溶剂必须具有较高选择性，各种溶质在所选的溶剂中之分配系数差异愈大愈好。
（2）、选用的溶剂，在萃取后，溶质与溶剂要容易分离与回收。
（3）、两种溶剂的密度相差不大时，易形成乳化，不利于萃取液的分离，选用溶剂时应注意。
（4）、要选用无毒，不易燃烧的价廉易得的溶剂。
34、试述活性炭的吸附剂的吸附特点？
（1）在水溶液中吸附力最强，在有机溶剂中吸附力较弱。
（2）对极性基团（-COOH、-NH2、-OH等）多的化合物的吸附力大于极性基团少的化合物，。
（3）对芳香族化合物的吸附力大于脂肪族化合物。
（4）对分子量大的化合物的吸附力大于分子量小的化合物。
（5）发酵液的pH与活性炭的吸附效率有关，一般碱性物质在中性下吸附，酸性下解吸；酸性物质在中性下吸附，碱性解吸。
（6）活性炭吸附溶质的量在未达到平衡前一般随温度升高而增加；但在升高温度时应考虑到溶质对热的稳定性。
35、简述凝胶层析有哪些用途？
①作为分析工具；作为脱盐工具②生物大分子的浓缩
③除热原物质④生物大分子的分离纯化；分子量的测定
36、简述pH对发酵液过滤特性的影响，并举例说明。
答：（1） pH直接影响发酵液中某些物质的电离程度和电荷性质，因此适当调节pH值可以改善发酵液的过滤特性。（2）氨基酸和蛋白质在酸性条件下带正电，碱性条件下带负电，等电点时净电荷为零，两性物质在等电点下的溶解度最小，等电点沉淀法在生物工业分离中广泛使用。（3）如味精生产，利用等电点沉淀法提取谷氨酸，一般蛋白质也在酸性范围达到等电点；膜分离中可通过调整pH值改变易吸附分子的电荷性质，减少膜堵塞和膜污染；此外，细胞、细胞碎片及某些胶体物质等在特定pH下也可能趋于絮凝而成为较大颗粒，有利于过滤进行。
37、以胞内酶提取为例，简要说明双水相系统工业化萃取的主要流程及操作注意点。
答：（1）主要流程：使用PEG/盐系统提取胞内酶时，可先使细胞碎片分配到下相，使蛋白质分配在上相；分离后，上相中的蛋白质可以加入适当的盐，进行二次双水相萃取，目的是利用盐相（下相）去除核酸和多糖；上相中的蛋白质进行第三次萃取，通过pH调节，使上相含色素，蛋白质分配在盐相，以便通过超滤将其和主体PEG分离，主体PEG可循环使用。
（2）操作注意点：实验放大的主要依据是分配系数，遇到的主要问题是细胞碎片相的粘度问题、萃取平衡时间以及相分离问题。需要带低速搅拌和溢流装置的混合－沉降系统；上下相分离利用重力沉降能耗成本低，但高粘度体系要选用离心分离；改变条件再次萃取并结合超滤、透析等处理可实现多聚物的彻底分离。
38、孔膜过滤技术的应用？
微孔滤膜孔径在0.025 -14μm范围内操作压力在1---10磅／英寸2之间。
孔径为0.01-0.05μm的膜可以截留噬菌体、较大病毒或大的胶体颗粒，可用于病毒分离。
孔径为0.1μm的膜用于试剂的超净、分离沉淀和胶体悬液，也有作生物膜模拟之用。
孔径为0.2μm的膜用于高纯水的制备、制剂除菌、细菌计数、空气病毒定量测定等。
孔径为0.45μm的微孔滤膜用得最多，常用来进行水的超净化处理、汽油超净、电子工业超净、注射液的无菌检查、饮用水的细菌检查、放射免疫测定、光测介质溶液的净化以及锅炉水中Fe（OH）3的分析等。
山科大生物分离工程试题（ A ）卷 一、填充题（40分，每小题2分） 1. 生物产品的分离包括R ，I ，P 和P 。 2. 发酵液常用的固液分离方法有和等。 3. 离心设备从形式上可分为，，等型式。 4. 膜分离过程中所使用的膜，依据其膜特性（孔径）不同可分为，和； 5. 多糖基离子交换剂包括和两大类。 6. 工业上常用的超滤装置有，，和。 7. 影响吸附的主要因素有，，，，和。 8. 离子交换树脂由，和组成。 9. 电泳用凝胶制备时，过硫酸铵的作用是；甲叉双丙烯酰胺的作用 是；TEMED的作用是； 10 影响盐析的因素有，，和； 11.在结晶操作中，工业上常用的起晶方法有，和； 12.简单地说，离子交换过程实际上只有，和三个步骤； 13.在生物制品进行吸附或离子交换分离时，通常遵循Langmuir吸附方程，其形式为； 14. 反相高效液相色谱的固定相是的，而流动相是的；常用的固定相有和；常用的流 动相有和； 15.超临界流体的特点是与气体有相似的，与液体有相似的； 16.离子交换树脂的合成方法有和两大类； 17.常用的化学细胞破碎方法有，，，和； 18.等电聚焦电泳法分离不同蛋白质的原理是依据其的不同； 19.离子交换分离操作中，常用的洗脱方法有和； 20. 晶体质量主要指，和三个方面； 三.计算题（30分） 1、用醋酸戊酯从发酵液中萃取青霉素，已知发酵液中青霉素浓度为0.2Kg/m3，萃取平衡常数为K=40，处理能力为H=0.5m3/h，萃取溶剂流量为L=0.03m3/h，若要产品收率达96%，试计算理论上所需萃取级数？（10分） 2、应用离子交换树脂作为吸附剂分离抗菌素，饱和吸附量为0.06 Kg（抗菌素）/Kg（干树脂）；当抗菌素浓度为0.02Kg/m3时，吸附量为0.04Kg/Kg；假定此吸附属于Langmuir等温吸附，求料液含抗菌素0.2Kg/m3时的吸附量（10分） 3、一种耐盐细胞其能积累细胞内低分子量卤化物，适应高渗透压，能在含有0.32mol/LNaCl, 0.02mol/LMgCl2, 0.015mol/LCaCl2, 0.01mol/LFeCl3 的培养基这培养，当其从含盐量高的培养基中转移至清水中，在数分钟内能将胞内
PART B 生物分离工程实验 实验十二香菇多糖的分离提取 一、实验目的 让学生了解香菇多糖的理化性质及提取工艺流程，掌握真空浓缩技术。 二、实验原理 香菇是一种药食两用真菌，具有提高免疫力、抗癌、降糖等多种生理功能。水溶性多糖作为香菇主要活性成分之一，主要以β-1,3-葡聚糖的形式，分子量从几万到几十万不等。通过有机溶剂提取，真空浓缩技术进行分离提取。 三、实验材料与试剂 原料：干香菇500g 试剂：氯仿、正丁醇、医用纱布、浓硫酸、重蒸酚、工业酒精 四、实验仪器 组织捣碎机、水浴锅、旋转蒸发器、1cm比色皿、751分光光度计、电子天平、台式离心机、试管、量筒、烧杯、玻璃棒 五、提取工艺流程 1. 1kg干香菇切成小块，以1：10（重量比）加入水，用组织捣碎机进行均质； 2. 取200mL均质液放入1L烧杯中，再加入300mL蒸馏水，加热至沸后，温 火煮沸1小时，（注意：煮沸过程中用玻璃棒不断搅拌，以免烧杯底部发生糊结；并间歇加入少量水，使杯内液体体积保持在500mL左右； 3. 加热完毕后，将杯内液体用8层纱布过滤，除去残渣，上清液转入另一烧杯 中； 4. 将上清液倒入圆底烧瓶中，在旋转浓缩仪上进行浓缩，浓缩条件为-0.1MPa 、 60℃，浓缩液体积至100mL左右停止； 5. 将浓缩液在1×10000g离心10min，将上清液转入另一烧杯，除去残渣； 6. 上清液中加入等体积的氯仿正丁醇浓液（体积比为4：1），搅拌5min，静置 30分钟； 7. 将混合液体在1×5000g下离心20min,分离水相；
8. 在水相中加入终浓度为80%的酒精，搅拌均匀，静置20min，1×5000g下离 心10min； 9. 取出沉淀物，放入已称重的干燥表面皿中，在真空干燥箱中80℃下真空干燥； 10. 干燥后，称重，计算多糖的产率； 11. 准确称取干燥后多糖20mg于500ml容量瓶中，加水定容； 12. 取定容液2ml加入6%苯酚1ml，混匀，再加入浓硫酸5ml，混匀，放置20min 后，于490nm测吸光度； 13. 葡萄糖标准曲线的制定：准确称取葡萄糖20mg定容于500ml容量瓶中，分 别取0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.4、1.6及1.8ml，补水至2ml，依12步骤反应液，并分别测吸光度，根据葡萄糖浓度和吸光度绘制标准曲线； 14. 根据香菇多糖吸光度和葡萄糖标准曲线，计算多糖纯度。 六、思考题 1. 根据以上实验步骤，表达多糖产率及纯度的计算公式； 2. 利用所学生物化学知识，分析多糖沉淀原理。
试卷编号： 一、名词解释题（本大题共3小题，每小题3分，总计9分） 1.Bioseparation Engineering：回收生物产品分离过程原理与方法。 2.双水相萃取：某些亲水性高分子聚合物的水溶液超过一定浓度后可形成两相， 并且在两相中水分均占很大比例，即形成双水相系统(two aqueous phase system)。 利用亲水性高分子聚合物的水溶液可形成双水相的性质，Albertsson于50年代 后期开发了双水相萃取法(two aqueous phase extraction)，又称双水相分配法(two aqueous phase partitioning)。 3.电渗：在电场作用下，带电颗粒在溶液中的运动。 二、辨别正误题并改正，对的打√，错的打×（本大题共15小题，每小题2分，总计30分） 1.壳聚糖能应用于发酵液的澄清处理是由于架桥作用。错（不确定） 2.目前国内工业上发酵生产的发酵液是复杂的牛顿性流体,滤饼具有可压缩性。错 3.盐析仅与蛋白质溶液PH和温度有关，常用于蛋白质的纯化。错 4.超临界流体是一种介于气体和液体之间的流体，可用于热敏性生物物质的分离。 对 5.膜分离时，当截留率δ=1时,表示溶质能自由透过膜。错 6.生产味精时，过饱和度仅对晶体生长有贡献。对 7.阴离子纤维素类离子交换剂能用于酸性青霉素的提取。对 8.卡那霉素晶体的生产可以采用添加一定浓度的甲醇来沉淀浓缩液中的卡那霉 素。 9.凝胶电泳和凝胶过滤的机理是一样的。错 10.PEG-硫酸钠水溶液能用于淀粉酶的提取。对 11.乙醇能沉淀蛋白质是由于降低了水化程度和盐析效应的结果。对 12.冷冻干燥一般在-20℃—-30℃下进行，干燥过程中可以加入甘油、蔗糖等作为保 护剂。对 13.反相层析的固定相和流动相都含有高极性基团，可用来分离生物物质。错 14.大网格吸附剂由于在制备时加入致孔剂而具有大孔径、高交联度，高比表面积 的特点。错（不确定） 15.PEG沉淀蛋白质是基于体积不相容性。错 三、选择题（本大题共10小题，每小题2分，总计20分） 1.对于反胶束萃取蛋白质，下面说法正确的是：A A 在有机相中，蛋白质被萃取进表面活性剂形成的极性核里 B 加入助溶剂，可用阳离子表面活性剂CTAB萃取带正电荷的蛋白质 C 表面活性剂浓度越高越好 D 增大溶液离子强度，双电层变薄，可提高反胶束萃取蛋白质的能力 2.能进行海水脱盐的是：C A 超滤 B 微滤
测量学试题库 一、填空题 （一）测量学基础知识（1-120题） 1.地面点到假定水准面铅垂距离称为该点的相对高程。 2.通过平均海水面的水准面大地水准面。 3.测量工作的基本内容是高程测量、角度测量，距离测量 4.测量使用的平面直角坐标是以两条相互垂直线的交点标原点，南北方向的纵轴x轴，以东西方向的 纵轴为y轴。 5.地面点位若用地理坐标表示，应为经度、纬度和绝对高程。 6.地面两点间高程之差，称为该两点间的高差。 7.在测量中，将地表面当平面对待，指的是在100平方千米范围内时，距离测量数据不至于影响测量成 果的精度。 8.测量学的分类，大致可分为大地测量学，普通测量学，摄影测量学，工程测量 学。 9.地球是一个旋转的椭球体，如果把它看作圆球，其半径的概值为6371 km。 10.我国的珠穆朗玛峰顶的绝对高程为8848。13 m。 11.地面点的经度为该点的子午面与首子午面所夹的二面角。 12.地面点的纬度为该点的铅垂线与赤道平面所组成的角度。 13.测量工作的程序是从整体到局部、先控制后碎部。 14.测量学的任务是测绘和测设。 15.直线定向的标准方向有真子午线方向、磁子午线方向、坐标纵轴方向。 16.由真子午线方向方向顺时针转到测线的水平夹角为直线的坐标方位角。 17.距离丈量的相对误差的公式为。 18.坐标方位角的取值范围是O或360 。 19.确定直线方向的工作称为直线定向，用目估法或经纬仪法把许多点标定在某一已知直线上的工 作为直线定线。 20.距离丈量是用相对误差来衡量其精度的，该误差是用分子为的 形式来表示。
21.用平量法丈量距离的三个基本要求是、、。 22.直线的象限角是指直线与标准方向的北端或南端所夹的角，并要标注所在象限。 23.某点磁偏角为该点的方向与该点的方向的夹角。 24.某直线的方位角与该直线的反方位角相差。 25.地面点的标志，按保存时间长短可分为和。 26.丈量地面两点间的距离，指的是两点间的距离。 27.森林罗盘仪的主要组成部分为和。 28.某直线的方位角为123°20′，则它的正方位角为。 29.水准仪的检验和校正的项目有、、。 30.水准仪主要轴线之间应满足的几何关系为、、。 31.由于水准仪校正不完善而剩余的i角误差对一段水准路线高差值的影响是成正比的。 32.闭和水准路线高差闭和差的计算公式为。 33.水准仪的主要轴线有、、、。 34.水准测量中，转点的作用是，在同一转点上，既有，又有读数。 35.水准仪上圆水准器的作用是使仪器，管水准器的作用是使仪器。 36.通过水准管与内壁圆弧的为水准管轴。 37.转动物镜对光螺旋的目的是使影像。 38.一般工程水准测量高程差允许闭和差为或。 h为负值时，表示高，低。 39.一测站的高差ab 40.用高差法进行普通水准测量的计算校核的公式是。 41.微倾水准仪由、、三部分组成。 42.通过圆水准器内壁圆弧零点的称为圆水准器轴。 43.微倾水准仪精平操作是旋转__________使水准管的气泡居中,符合影像符合。 44.水准测量高差闭合的调整方法是将闭合差反其符号,按各测段的__________成比例分配或按_________成 比例分配。 45.用水准仪望远镜筒上的准星和照门照准水准尺后，在目镜中看到图像不清晰,应该_____________螺旋,若十 字丝不清晰,应旋转_________螺旋。 46.水准点的符号,采用英文字母_______表示。 47.水准测量的测站校核,一般用______法或______法。
生物分离工程实验 实验一茶多酚标准曲线的测定 仪器：紫外分光光度计，比色皿，天平，容量瓶，移液管，pH计、试管 药品：没食子酸丙酯或茶多酚，酒石酸钾钠，硫酸亚铁，磷酸氢二钠，磷酸二氢钾。 方法： A溶液配制 没食子酸丙酯标准溶液配制 准确称取25mg没食子酸丙酯，蒸馏水溶液，移入25mL容量瓶并稀释至刻度，摇匀，配制成1mg/mL的标准溶液 酒石酸亚铁溶液配制 准确称取0.1g硫酸亚铁，和0.5g酒石酸钾钠，混合，蒸馏水溶解后移入100mL容量瓶，稀释至刻度，摇匀。 pH7.5磷酸盐缓冲液配制 磷酸氢二钠：准确称取分析纯磷酸氢二钠2.969g，蒸馏水稀释溶解，移入250mL容量瓶，加水稀释至刻度，摇匀，为a液 磷酸二氢钾：准确称取分析纯磷酸二氢钾，、2.2695g，蒸馏水溶解，移入250mL容量瓶，定容，B。 取A液体85mL，B液体15mL混合均匀，即成。 B．标准曲线绘制 分别吸取0、0.25、0.50、0.75、1.0、1.25mL的没食子酸丙酯标准液于25mL容量瓶中，加入蒸馏水4mL，再加入酒石酸亚铁溶液5mL，用pH7.5的磷酸盐缓冲溶液稀释至刻度，摇匀，分光光度计在540nm处，1cm比色皿，分别测定吸光度。空白参比操作同上，不加没食子酸丙酯。以容量瓶中没食子酸丙酯的绝对含量mg为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线，做线性回归。 C 样品测定 取适量样品加入容量瓶，操作同上，没食子酸丙酯含量乘以换算系数1.5，求得茶多酚。
实验二超声法和回流法提取茶多酚的比较 实验仪器： 超声提取器、布氏漏斗、抽滤瓶、真空泵、烧瓶、量筒、分光光度计、比色皿、容量瓶等、实验试剂 茶叶、纯净水、茶多酚（没食子酸丙酯）、硫酸亚铁、酒石酸钾钠、磷酸氢二钠、磷酸二氢钾等 操作方法 1、材料准备 称取一定量的茶叶，研钵粉碎。备用 2、提取 A、超声提取法 称取5g粉碎后茶叶末，放入烧瓶（塑料袋密封），加入100mL水，于超声提取器，50℃提取20min，抽滤，定容至100mL，待测。 B、回流提取法 称取10g粉碎后茶叶末，放入圆底烧瓶，加入100mL水，80℃提取40min，分别在1、3、5、7、10、15、20、30、40min取3mL样品，小漏斗过滤后，待测。测得茶多酚含量（mg/mL）以茶多酚含量为纵坐标，时间为横坐标绘制曲线。 3. 含量测定 按照标准曲线的方法测定含量。 所需试剂及仪器 试剂： 没食子酸丙酯或者茶多酚，酒石酸钾钠，硫酸亚铁，磷酸氢二钠，磷酸二氢钾， 仪器： 紫外分光光度计，水浴锅，电子天平，pH计，超声提取器，量筒（100mL*1），容量瓶（25mL*8，100mL*4, 250mL*2），比色皿*5，移液管（1.0mL*2, 0.5mL*2, 2mL*2, 5mL*4） 三角瓶250mL*2，小漏斗*2，试管架
生物分离工程复习题 第一章绪论 简答题： 1、简述生物分离技术的基本涵义及内容。 答：基本涵义：生物分离技术是指从动植物与微生物的有机体或器官、生物工程产物（发酵液、培养液）及其生物化学产品中提取、分离、纯化有用物质的技术过程。 内容主要包括：离心分离、过滤分离、泡沫分离、萃取分离、沉淀（析）分离、膜分离、层析（色谱）分离、电泳分离技术以及产品的浓缩、结晶、干燥等技术。 2、物质分离的本质是有效识别混合物中不同溶质间物理、化学和生物学性质的差别，利用能够识别这些差别的分离介质和扩大这些差别的分离设备实现溶质间的分离或目标组分的纯化。请从物质的理化性质和生物学性质几个方面简述生物活性物质分离纯化的主要原理。 答：生物大分子分离纯化的主要原理是： 1）根据分子形状和大小不同进行分离，如差速离心与超离心、膜分离、凝胶过滤等； 2）根据分子电离性质（带电性）差异进行分离，如离子交换法、电泳法、等电聚焦法； 3）根据分子极性大小及溶解度不同进行分离，如溶剂提取法、逆流分配法、分配层析法、盐析法、等电点沉淀及有机溶剂分级沉淀等； 4）根据物质吸附性质的不同进行分离，如选择性吸附与吸附层析等； 5）根据配体特异性进行分离，如亲和层析法等。 填空题： 1.为了提高最终产品的回收率：一是提高每一级的回收率，二是减少操作 步骤。 2、评价一个分离过程效率的三个主要标准是：①浓缩程度②分离纯化程
度③回收率。 判断并改错： 原料目标产物的浓度越高，所需的能耗越高，回收成本越大。(×)改：原料目标产物的浓度越低。 选择题： 1. B 可以提高总回收率。 A.增加操作步骤 B.减少操作步骤 C.缩短操作时间 D.降低每一步的收率2．分离纯化早期，由于提取液中成分复杂，目的物浓度稀，因而易采用（ A ） A、分离量大分辨率低的方法 B、分离量小分辨率低的方法 C、分离量小分辨率高的方法 D、各种方法都试验一下，根据试验结果确定 第二章细胞分离与破碎 概念题： 过滤：是在某一支撑物上放多孔性过滤介质，注入含固体颗粒的溶液，使液体通过，固体颗粒被截留，是固液分离的常用方法之一。 离心过滤：使悬浮液在离心力作用下产生离心压力，使液体通过过滤介质成为滤液，而固体颗粒被截留在过滤介质表面，从而实现固液分离，是离心与过滤单元操作的集成，分离效率更高。 填空题： 1.在细胞分离中，细胞的密度ρ S 越大，细胞培养液的密度ρ L 越小，则细 胞沉降速率越大。 2.过滤中推动力要克服的阻力有介质阻力和滤饼阻力，其中滤饼占主导作 用。 3.重力沉降过程中，固体颗粒受到重力，浮力，摩擦阻力的作用，当 固体匀速下降时，三个力的关系重力=浮力+摩擦阻力。 4.区带离心包括差速区带离心和平衡区带离心。
第一章绪论 1.1试题 1.1.1名词解释题 (1)水准面(2)大地水准面 (3)参考椭球面 (4)绝对高程(5)相对高程 1.1.2填空题 (1)地形图测绘工作程序，首先应作___________________________，然后才做 _________________________，这样做的好处是________________________ ____________________________和_________________________。 (2)确定地面点的空间位置必须有三个参量：(a)____________，(b)____________ (c)_______________。 (3)小区域独立测区坐标系可用______________________________坐标系; 大区域测量坐标 系应采用_______________________坐标系。 (4)测量工作的组织原则是______________________，_____________________ 和 ____________________________。 (5)普通工程测绘工作中，大比例尺是指_______________________________，中比例尺是指 _______________________________________，小比例尺是指 _________________________________________。 (6)测量工作内容的三要素是指:____________测量，____________测量以及___________测 量。 (7)测量工作中使用的坐标系，其X、Y坐标轴位置与数学上正相反，其原因是 __________________________________________________________。 (8)测量的任务包括测绘与放样两方面，测绘是___________________________ _____________________________; 放放样是__________________________ _________________________。 (9)测量工作的基准面是_____________________、____________________和 ______________________；基准线是______________和______________线。 (10)假定的平面直角坐标系，纵坐标轴可以采用________________________， ______________________________或___________________________。 1.1.3是非判断题 (1)测量成果的处理，距离与角度以参考椭球面为基准面，高程以大地水准面为基准面。 ( ) (2)在10km为半径的圆范围内，平面图测量工作可以用水平面代替水准面。( ) (3)在小区域进行测量时，用水平面代替水准面对距离测量的影响较大，故应考虑。 ( ) (4)在小地区进行测量时，用水平面代替水准面对高程影响很小，可以忽略。( ) (5)地面上AB两点间绝对高程之差与相对高程之差是相同的。( ) (6)在测量工作中采用的独立平面直角坐标系，规定南北方向为X轴，东西方向为Y轴，象 限按反时针方向编号。( ) (7)高斯投影中，偏离中央子午线愈远变形愈大。( ) (8)六度带的中央子午线和边缘子午线均是三度带的中央子午线。( ) (9)地形图的比例尺精度愈低，表示地物、地貌愈简略。( ) 1.1.4单项选择题 (1)大地水准面可定义为 (a)处处与重力方向相垂直的曲面; (b)通过静止的平均海水面的曲面; (c)把水准面延伸包围整个地球的曲面; (d)地球大地的水准面。 (2)如果A、B两点的高差h AB为正，则说明 (a)A点比B点高; (b)B点比A点高;
生物分离工程复习题 一、名词解释 1.凝聚：在电解质作用下，破坏细胞菌体和蛋白质等胶体粒子的分散状态，使胶体粒子聚集的过程。 2.分配系数：在一定温度、压力下，溶质分子分布在两个互不相溶的溶剂里，达到平衡后，它在两相的浓度为一 常数叫分配系数。 3.絮凝：指在某些高分子絮凝剂存在下，在悬浮粒子之间发生架桥作用而使胶粒形成粗大的絮凝团的过程 4.过滤：是在某一支撑物上放过滤介质，注入含固体颗粒的溶液，使液体通过，固体颗粒留下，是固液分离的常 用方法之一。 5.萃取过程：利用在两个互不相溶的液相中各种组分（包括目的产物）溶解度的不同，从而达到分离的目的 6.吸附：是利用吸附剂对液体或气体中某一组分具有选择性吸附的能力，使其富集在吸附剂表面的过程。 7.反渗析：当外加压力大于渗透压时，水将从溶液一侧向纯水一侧移动，此种渗透称之为反渗透。 8.离心沉降：利用悬浮液或乳浊液中密度不同的组分在离心力场中迅速沉降分层，实现固液分离 9.离心过滤：使悬浮液在离心力场作用下产生的离心力压力，作用在过滤介质上，使液体通过过滤介质成为滤液， 而固体颗粒被截留在过滤介质表面，从而实现固液分离，是离心与过滤单元操作的集成，分离效率更高 10.离子交换：利用离子交换树脂作为吸附剂，将溶液中的待分离组分，依据其电荷差异，依靠库仑力吸附在树脂 上，然后利用合适的洗脱剂将吸附质从树脂上洗脱下来，达到分离的目的。 11.固相析出技术：利用沉析剂（precipitator）使所需提取的生化物质或杂质在溶液中的溶解度降低而形成无定 形固体沉淀的过程。 12.助滤剂：助滤剂是一种具有特殊性能的细粉或纤维，它能使某些难以过滤的物料变得容易过滤 13.色谱技术：是一组相关分离方法的总称，色谱柱的一般结构含有固定相（多孔介质）和流动相，根据物质在两 相间的分配行为不同（由于亲和力差异），经过多次分配（吸附-解吸-吸附-解吸…），达到分离的目的。 14.有机溶剂沉淀：在含有溶质的水溶液中加入一定量亲水的有机溶剂，降低溶质的溶解度，使其沉淀析出。 15.等电点沉淀：调节体系pH值，使两性电解质的溶解度下降，析出的操作称为等电点沉淀。 16.膜分离：利用膜的选择性（孔径大小），以膜的两侧存在的能量差作为推动力，由于溶液中各组分透过膜的迁 移率不同而实现分离的一种技术。 17.化学渗透破壁法：某些化学试剂，如有机溶剂、变性剂、表面活性剂、抗生素、金属螯合剂等，可以改变细胞 壁或细胞膜的通透性，从而使胞内物质有选择地渗透出来。 18.超临界流体：超临界流体是状态超过气液共存时的最高压力和最高温度下物质特有的点——临界点后的流体。 19.反渗透：在只有溶剂能通过的渗透膜的两侧，形成大于渗透压的压力差，就可以使溶剂发生倒流，使溶液达到 浓缩的效果，这种操作成为反渗透。 20.树脂工作交换容量：单位质量干树脂或单位体积湿树脂所能吸附的一价离子的毫摩尔数称为树脂交换容量，在 充填柱上操作达到漏出点时，树脂所吸附的量称为树脂工作交换容量。 21.色谱阻滞因数：溶质在色谱柱（纸、板）中的移动速率与流动相移动速率之比称为阻滞因数，以Rf表示。 22.膜的浓差极化：是指但溶剂透过膜，而溶质留在膜上，因而使膜面浓度增大，并高于主体中浓度。 23.超滤：凡是能截留相对分子量在500以上的高分子膜分离过程称为超滤，它主要是用于从溶剂或小分子溶质中 将大分子筛分出来。 24.生物分离技术：是指从动植物与微生物的有机体或器官、生物工程产物（发酵液、培养液）及其生物化学产品 中提取、分离、纯化有用物质的技术过程。 25.物理萃取：即溶质根据相似相溶的原理在两相间达到分配平衡，萃取剂与溶质之间不发生化学反应。 26.化学萃取：则利用脂溶性萃取剂与溶质之间的化学反应生成脂溶性复合分子实现溶质向有机相的分配。 27.盐析：是利用不同物质在高浓度的盐溶液中溶解度的差异，向溶液中加入一定量的中性盐，使原溶解的物质沉 淀析出的分离技术。 28.有机聚合物沉析：利用生物分子与某些有机聚合物形成沉淀而析出的分离技术称为有机聚合物沉析。 29.离子交换平衡：当正反应、逆反应速率相等时，溶液中各种离子的浓度不再变化而达平衡状态，即称为离子交 换平衡。 30.功能基团：离子交换树脂中与载体以共价键联结的不能移动的活性基团，又称功能基团 31.平衡离子：离子交换树脂中与功能基团以离子键联结的可移动的平衡离子，亦称活性离子。 32.树脂的再生：就是让使用过的树脂重新获得使用性能的处理过程，树脂的再生反应是交换吸附的逆反应。 33.层析分离：是一种物理的分离方法，利用多组分混合物中各组分物理化学性质的差别，使各组分以不同的程度 分布在两个相中。 34.流动相：在层析过程中，推动固定相上待分离的物质朝着一个方向移动的液体、气体或租临界体等，都称为流 动相。 35.正相色谱：是指固定相的极性高于流动相的极性，因此，在这种层析过程中非极性分子或极性小的分子比极性 大的分子移动的速度快，先从柱中流出来。
填空题 1. .根据吸附剂与吸附质之间存在的吸附力性质的不同，可将吸附分为物理吸附、化学吸附和交换吸附； 2. 比表面积和孔径是评价吸附剂性能的主要参数。 3. 层析操作必须具有固定相和流动相。 4. 溶质的分配系数大，则在固定相上存在的几率大，随流动相的移动速度 小。 5. 层析柱的理论板数越多，则溶质的分离度越大。 6. 两种溶质的分配系数相差越小，需要的越多的理论板数才能获得较大的 分离度。 7. 影响吸附的主要因素有吸附质的性质，温度，溶液pH值，盐的浓度和吸附物的浓度与吸附剂的用量； 8. 离子交换树脂由网络骨架（载体），联结骨架上的功能基团（活性基）和可交换离子组成。 9. 电泳用凝胶制备时，过硫酸铵的作用是引发剂（提供催化丙烯酰胺和双丙烯酰胺聚合所必需的自由基）；甲叉双丙烯酰胺的作用是交联剂（丙烯酰胺单体和交联剂甲叉双丙烯酰胺催化剂的作用下聚合而成的含酰胺基侧链的脂肪族长链）；TEMED的作用是增速剂（催化过硫酸胺形成自由基而加速丙烯酰胺和双丙烯酰胺的聚合）； 10. 影响盐析的因素有溶质种类，溶质浓度，pH 和温度； 11. 在结晶操作中，工业上常用的起晶方法有自然起晶法，刺激起晶法和晶种起晶法； 12. 简单地说离子交换过程实际上只有外部扩散、部扩散和化学交换反应三步；
13. 在生物制品进行吸附或离子交换分离时，通常遵循Langmuir 吸附方程，其形式为c K c q q 0+= 14. 反相高效液相色谱的固定相是 疏水性强 的，而流动相是 极性强 的； 15. 等电聚焦电泳法分离不同蛋白质的原理是依据其 等电点 的不同； 16. 离子交换分离操作中，常用的洗脱方法有 静态洗脱 和 动态洗脱 ； 17. 晶体质量主要指 晶体大小 ， 形状 和 纯度 三个方面； 18. 亲和吸附原理包括 配基固定化 ， 吸附样品 和 样品解析 三步； 19. 根据分离机理的不同，色谱法可分为 吸附、离交、亲和、凝胶过滤色谱 20. 蛋白质分离常用的色谱法有 免疫亲和色谱法， 疏水作用色谱法 ， 金属螯合色谱法 和 共价作用色谱法 ； 21. SDS-PAGE 电泳制胶时，加入十二烷基磺酸钠（SDS ）的目的是消除各种待分离蛋白的 分子形状 和 电荷 差异，而将 分子量 作为分离的依据；加入二硫叔糖醇的目的是 强还原剂，破坏半胱氨酸间的二硫键 ； 22. 影响亲和吸附的因素有 配基浓度 、 空间位阻 、 配基与载体的结合位点 、 微环境 和 载体孔径 ； 23. 阳离子交换树脂按照活性基团分类，可分为 强酸性阳离子交换树脂 、 弱酸性 和 中强酸性 ；其典型的活性基团分别有 3 、 COOH - 、2)(OH PO -； 24. 阴离子交换树脂按照活性基团分类，可分为强碱性、 弱碱性 和 中强碱 性 ；其典型的活性基团分别有-+OH CH RN 33)(、2NH -、兼有以上两种基团； 25. 影响离子交换选择性的因素有 离子水合半径 、 离子价 、 离子强度 、 溶液pH ，温度 、溶液浓度 、 搅拌速率 、和 交联度、膨胀度、颗粒大小 ；
工程测量学试题库（附答案） 1. ( D )处处与铅垂线垂直。 A.水平面 B.参考椭球面 C.铅垂面 D.大地水准面 2. 地球的长半径约为( A )千米。 A.6371 B.6400 C.6378 D.6356 3. 在测量直角坐标系中，纵轴为( C )。 A.x轴，向东为正 B.y轴，向东为正 C.x轴，向北为正 D.y轴，向北为正 4. 对高程测量，用水平面代替水准面的限度是( D )。 A. 在以10km为半径的范围内可以代替 B. 在以20km为半径的范围内可以代替 C. 不论多大距离都可代替 D. 不能代替 5. 在以( B )km为半径的范围内，可以用水平面代替水准面进行距离测量。 A.5 B.10 C.15 D.20 6. 在测量平面直角坐标系中,x轴表示什么方向？（C）。 A.东西 B.左右 C.南北 D.前后 7. 测定点的坐标的主要工作是( C )。 A．测量水平距离B．测量水平角 C．测量水平距离和水平角D．测量竖直角 8. 确定地面点的空间位置，就是确定该点的平面坐标和( A )。 A．高程B．方位角 C．已知坐标D．未知点坐标 9. 高斯投影属于( C )。 A．等面积投影B．等距离投影 C．等角投影D．等长度投影 10. 在测量直角坐标系中，横轴为( C )。 A. x轴，向东为正 B. x轴，向北为正 C. y轴，向东为正 D. y轴，向北为正 11. 在测量坐标系中，Y轴向（D）为正。 A、北 B、南 C、西 D、东 12. 假设的平均的静止海平面称为（D）。 A、基准面 B、水准面 C、水平面 D、大地水准面
13. ( B )的基准面是大地水准面。 A. 竖直角 B. 高程 C. 水平距离 D. 水平角 14. 建筑工程施工测量的基本工作是（B）。 A.测图 B.测设 C.用图 D.识图 15. 大地水准面处处与铅垂线（A）交。 A、正 B、平行 C、重合 D、斜 16. A、B两点，HA为115.032m，HB为114.729m，则hAB为（A）。 A、-0.303 B、0.303 C、29.761 D、-29.761 17. 建筑施工图中标注的某部位标高，一般都是指（B）。 A、绝对高程 B、相对高程 C、高差 18. 水在静止时的表面叫( B )。 A. 静水面 B. 水准面 C. 大地水准面 D. 水平面 19. ( B )的投影是大地水准面。 A. 竖直角 B. 高斯平面坐标 C. 水平距离 D. 水平角 20. 我国目前采用的高程基准是（D）。 A.高斯平面直角坐标 B.1980年国家大地坐标系 C.黄海高程系统 D.1985年国家高程基准 21. 地面上有一点A，任意取一个水准面，则点A到该水准面的铅垂距离为（D）。 A.绝对高程 B.海拔 C.高差 D.相对高程 22. 地面某点的经度为85°32′，该点应在三度带的第几带?( B ) 。 A．28 B．29 C．27 D．30 23. 在水准测量中，若后视点A读数小，前视点B读数大，则( D )。 A.A点比B点低 B.A、B可能同高 C.A、B的高程取决于仪器高度 D.A点比B点高 24. 水准测量中，设A为后视点，B为前视点，A尺读数为2.713m，B尺读数为1.401,已知A点高程为15.000m，则视线高程为( D )m。 A.13.688 B.16.312 C.16.401 D.17.713 25. 在水准测量中，若后视点A的读数大，前视点B的读数小，则有( A )。 A.A点比B点低 B.A点比B点高 C.A点与B点可能同高 D.A、B点的高低取决于仪器高度 26. 水准仪的分划值越大，说明( B )。 A. 圆弧半径大 B. 其灵敏度低 C. 气泡整平困难 D. 整平精度高 27. DS1水准仪的观测精度( A )DS3水准仪。
《生物分离工程》题库 一、填充题 1. 生物产品的分离包括R 不溶物的去除 ，I 产物分离 ，P 纯化 和P 精 制 ； 2. 发酵液常用的固液分离方法有 过滤 和 离心 等； 3. 离心设备从形式上可分为 管式 ， 套筒式 ， 碟片式 等型式； 4. 膜分离过程中所使用的膜，依据其膜特性（孔径）不同可分为 微滤膜 ， 超滤膜 ， 纳滤膜 和 反渗透膜 ； 5. 多糖基离子交换剂包括 离子交换纤维素 和 葡聚糖凝胶离子交换剂 两大类； 6. 工业上常用的超滤装置有 板式 ， 管式 ， 螺旋式和 中空纤维式 ； 7. 影响吸附的主要因素有 吸附质的性质 ， 温度 ， 溶液pH 值 ， 盐的浓度 和 吸附物的浓度与吸附剂的用量 ； 8. 离子交换树脂由 网络骨架 （载体） ， 联结骨架上的功能基团 （活性基） 和 可 交换离子 组成。 9. 电泳用凝胶制备时，过硫酸铵的作用是 引发剂（ 提供催化丙烯酰胺和双丙烯酰胺聚 合所必需的自由基） ； 甲叉双丙烯酰胺的作用是 交联剂（丙烯酰胺单体和交联剂甲叉双丙烯酰胺催化剂的作 用下聚合而成的含酰胺基侧链的脂肪族长链） ； TEMED 的作用是 增速剂 （催化过硫酸胺形成自由基而加速丙烯酰胺和双丙烯酰胺的 聚合 ）； 10 影响盐析的因素有 溶质种类 ， 溶质浓度 ， pH 和 温度 ； 11.在结晶操作中，工业上常用的起晶方法有 自然起晶法 ， 刺激起晶法 和 晶种起晶法 ； 12.简单地说离子交换过程实际上只有 外部扩散 、内部扩散 和化学交换反应 三步； 13.在生物制品进行吸附或离子交换分离时，通常遵循Langmuir 吸附方程，其形式为c K c q q 0+= 14.反相高效液相色谱的固定相是 疏水性强 的，而流动相是 极性强 的；常用的固定相有C 8 辛烷基 和 十八烷基C 18 ；常用的流动相有 乙腈 和 异丙醇 ； 15.超临界流体的特点是与气体有相似的 粘度和扩散系数 ，与液体有相似的 密度 ； 16.离子交换树脂的合成方法有 加聚法 和 逐步共聚法 两大类；
第一章 1．生物分离工程的一般过程P4 答：①发酵液的预处理主要采用凝聚和絮凝等技术来加速固相，液相分离，提高过滤速度。过滤、离心是其最基本的单元操作。 ②产物的提取采用沉淀、吸附、萃取、超滤等单元操作。 ③产物的精制常采用色谱分离技术，有层析、离子交换、亲和色谱、吸附色谱、电色谱。 ④成品的加工处理浓缩、结晶、干燥 第二章 一、概念： 1.发酵液的预处理：指采用凝聚和絮凝等技术来加速固相、液相分离，提高过滤速度。 2.凝集（凝聚）：指在投加的化学物质（如水解的凝聚剂，铝、铁的盐类或石灰等）作用下，发酵液中的 胶体脱稳并使粒子相互凝集成为1mm大小块状絮凝体的过程。 3.絮凝：指某些高分子絮凝剂能在悬浮粒子之间产生桥梁作用，使胶粒形成粗大絮凝团的过程。 4.离心分离：指在离心场的作用下，将悬浮液中的固相和液相加以分离的方法。主要用于颗粒较细的悬 浮液和乳浊液的分离。（分为差示离心、均匀介质离心、密度梯度离心、等密度梯度离心和平衡等密度离心。） 5.等电点沉淀法：利用蛋白质等两性化合物在等电点时溶解度最低，易产生沉淀的性质，用酸化剂或碱化 剂调节发酵液的pH，使其达到菌体蛋白的等电点而产生沉淀。 二、填空： 1、按过滤时料液流动方向的不同，分为常规过滤和错流过滤。 2、可溶性杂蛋白的去除法包括：等电点沉淀法、热处理法、化学变性沉淀法和吸附法 三、问答 1、发酵液的一般特征？ ①组成大部分为水； ②发酵产物的浓度较低； ③发酵液中的悬浮固形物主要是菌体和蛋白的胶状物； ④含有培养基中的残留成分，如无机盐类、非蛋白质大分子及其降解产物； ⑤含有其他少量代谢副产物；
⑥含有色素、毒性物质。热原质等有机杂质。 2、常用的絮凝剂有什么？ 无极絮凝剂：Al2(SO4)3·18H2O (明矾)、氯化钙、氯化镁碱式氯化铝、高分子无机聚合物等。 有机絮凝剂：壳多糖及其衍生物、明胶、丙烯酰胺类、聚苯乙烯类、聚丙烯酰类聚乙烯亚胺类。 3、影响絮凝效果的因素？ 答：①絮凝剂的种类； ②絮凝剂浓度； ③ pH; 最关键因素，影响絮凝剂活性基团的解离度。 ④搅拌转速和时间。 4、发酵液预处理的方法？ 答：①凝聚和絮凝方法 ②加热法 ③调节PH法 ④加水稀释法 ⑤加入助滤剂法 ⑥加吸附剂法或加盐法 ⑦高价态无机离子去除法 Ca2+——草酸、草酸钠→形成草酸钙沉淀 Mg2+——三聚磷酸钠(Na5P3P10)→形成三聚磷酸钠镁可溶性络合物 Fe3+——黄血盐(K4Fe(CN)6) →普鲁士蓝淀 ⑧可溶性杂蛋白的去除法 3、VB12发酵液絮凝预处理的研究 答：由正交试验确定影响絮凝的主要因素，结果表明，最佳絮凝条件：絮凝剂为聚合氯化铝、加入体积分数7%，pH6、搅拌速度14r/min、搅拌时间45s。通过加压过滤实验，得到絮凝后
选择题库及参考答案 第1章 绪论 1-1、我国使用高程系的标准名称是(BD 。 A.1956黄海高程系 B.1956年黄海高程系 C.1985年国家高程基准 D.1985国家高程基准 1-2、我国使用平面坐标系的标准名称是(AC 。 A.1954北京坐标系 B. 1954年北京坐标系 C.1980西安坐标系 D. 1980年西安坐标系 1-2、在高斯平面直角坐标系中，纵轴为( C )。 A.x 轴，向东为正 B.y 轴，向东为正 C.x 轴，向北为正 D.y 轴，向北为正 1-3、A 点的高斯坐标为=A x 112240m ，=A y 19343800m ，则A 点所在6°带的带号及中央子午线的经度分别为( D ) A 11带，66 B 11带，63 C 19带，117 D 19带，111 1-4、在( D )为半径的圆面积之内进行平面坐标测量时，可以用过测区中心点的切平面代替大地水准面，而不必考虑地球曲率对距离的投影。 A 100km B 50km C 25km D 10km 1-5、对高程测量，用水平面代替水准面的限度是( D )。 A 在以10km 为半径的范围内可以代替 B 在以20km 为半径的范围内可以代替 C 不论多大距离都可代替 D 不能代替 1-6、高斯平面直角坐标系中直线的坐标方位角是按以下哪种方式量取的？( C ) A 纵坐标北端起逆时针 B 横坐标东端起逆时针 C 纵坐标北端起顺时针 D 横坐标东端起顺时针 1-7、地理坐标分为( A )。 A 天文坐标和大地坐标 B 天文坐标和参考坐标 C 参考坐标和大地坐标 D 三维坐标和二维坐标 1-8、地面某点的经度为东经85°32′，该点应在三度带的第几带?( B ) A 28 B 29 C 27 D 30 1-9、高斯投影属于( C )。 A 等面积投影 B 等距离投影 C 等角投影 D 等长度投影 1-10、测量使用的高斯平面直角坐标系与数学使用的笛卡尔坐标系的区别是( B )。 A x 与y 轴互换，第一象限相同，象限逆时针编号 B x 与y 轴互换，第一象限相同，象限顺时针编号 C x 与y 轴不变，第一象限相同，象限顺时针编号 D x 与y 轴互换，第一象限不同，象限顺时针编号 第2章 水准测量 2-1、水准仪的( B )应平行于仪器竖轴。 A 视准轴 B 圆水准器轴 C 十字丝横丝 D 管水准器轴 2-2、水准器的分划值越大，说明( B )。 A 内圆弧的半径大 B 其灵敏度低 C 气泡整平困难 D 整平精度高 2-3、在普通水准测量中，应在水准尺上读取( D )位数。 A 5 B 3 C 2 D 4 2-4、水准测量中，设后尺A 的读数a=2.713m ，前尺B 的读数为b=1.401m ，已知A 点高程为15.000m ，则视线高程为( B )m 。 A.13.688 B.16.312 C.16.401 D.17.713 2-5、在水准测量中，若后视点A 的读数大，前视点B 的读数小，则有( A )。 A.A 点比B 点低 B.A 点比B 点高 C.A 点与B 点可能同高 D.A 、B 点的高低取决于仪器高度 2-6、自动安平水准仪，( D )。 A.既没有圆水准器也没有管水准器 B.没有圆水准器 C. 既有圆水准器也有管水准器 D.没有管水准器
第一章复习题 1.生物分离工程在生物技术中的地位？ 2.生物分离工程的特点是什么？ 3.生物分离工程可分为几大部分，分别包括哪些单元操作？ 4.在设计下游分离过程前，必须考虑哪些问题方能确保我们所设计的工艺过程最为经济、可靠？ 5.生物分离效率有哪些评价指标？ 第二章复习题 1．简述细胞破碎的意义 2．细胞破碎方法的大致分类 3．化学渗透法和机械破碎法相比有哪些优缺点？ 第三章复习题 1．常用的蛋白质沉淀方法有哪些？ 2．影响盐析的主要因素有哪些？ 3．何谓中性盐的饱和度？ 4．盐析操作中，中性盐的用量（40% 硫酸铵饱和度）如何计算？5．简述盐析的原理。6．简述有机溶剂沉析的原理。 7．简述等电点沉析的原理。 第四章复习题 1．膜分离技术的概念 2．膜的概念 3．根据膜孔径大小，膜分离技术的分类 4．基本的膜材料有哪些？ 5．常用的膜组件有哪些？ 6．何谓反渗透？实现反渗透分离的条件是什么？其特点有哪些？ 7．强制膜分离的概念？ 8．电渗析的工作原理？ 9．膜污染的主要原因是什么？常用的清洗剂有哪些？如何选择？ 10．膜分离在生物产物的回收和纯化方面的应用有哪些方面？ 第五章复习题 1.什么是萃取过程？ 2.液－液萃取从机理上分析可分为哪两类？ 3.常见物理萃取体系由那些构成要素？ 4.何谓萃取的分配系数？其影响因素有哪些？ 5.何谓超临界流体萃取？其特点有哪些？有哪几种方法？ 6.何谓双水相萃取?常见的双水相构成体系有哪些？ 7.反胶团的构成以及反胶团萃取的基本原理 第六章复习题 1.影响吸附的主要因素？ 2.亲和吸附的原理和特点是什么？ 3.常用的离子交换树脂类型有哪些？ 4.影响离子交换速度的因素有哪些？ 5.用于蛋白质提取分离的离子交换剂有哪些哪些特殊要求，主要有哪几类？ 第七章复习题
填空题 1. 为了提高最终产品的回收率一是（提高每步分离效率），二是（减少分离步骤）。 2. 评价一个分离过程效率的三个主要标准是：（浓缩率），（分离系数）和（产品回收程度） 3?生物产品的分离过程包括发酵液的预处理和（液固分离），（产品的提取），（产品的精制） 和（产品的加工处理）。 4?生化反应所起的作用是产生目的产物，指标是（产率）和（转化率），而生物分离解决的 是如何从反应液中获取这些物质，涉及的是（收率）和（纯度）。 5?生物分离的主要任务：从发酵液和细胞培养液中以（最高的效率），（理想的纯度）和（最小的能耗）把目的产物分离出来。 6?生物分离过程的特点包括：（生物分离过程的体系特殊），（生物分离过程的工艺流程特殊），（生物分离过程的成本特殊）。 7. 物质分离的本质是识别混合物中不同溶质间（物理），（化学）和（生物）性质的差别利用 能识别这些差别的（分离介质）和扩大这些差别的（分离设备） 8. 性质不同的溶质在分离操作中具有不同的（传质速率）和或（平衡状态） 9. 平衡分离是根据溶质在两相间（分配平衡）的差异实现分离；溶质达到分配。平衡为扩散 传质过程，推动力仅取决于系统的（热力学性质）。 10. 差速分离是利用外力驱动溶质迁移产生的（速度差）进行分离的方法。 1. 在细胞分离中，细胞的密度越（大），细胞培养液的密度越（小），则细胞沉降 2. 区带离心包括（差速）区带离心和（等密度）区带离心。
3. 为使过滤进行的顺利通常要加入（惰性助滤剂）。 4. 发酵液常用的固液分离方法有（离心）和（过滤）等。 5?常用离心设备可分为（离心沉降）和（离心过滤）两大类； 6?常用的工业絮凝剂有（无机絮凝剂）和（有机絮凝剂）两大类。 7. 工业生产中常用的助滤剂有（硅藻土）和（珍珠岩粉）。 8. 重力沉降过程中，固体颗粒受到（重力），（浮力），（摩擦阻力）的作用， 固体匀速下降时，三个力的关系（重力=浮力+摩擦阻力）。 9. 发酵液预处理的方法包括：（凝集），（絮凝），（加热法）；（调节pH法），（加水稀释法），加入（助滤剂）和（吸附剂）。 10. 发酵液中胶粒保持稳定的原因：（双电层）和（蛋白质周围水化层）结构。 11. 发酵液预处理过程中的相对纯化主要包括去除（高价态无机离子），（可溶性杂蛋白质），（色素）和（多糖类物质）。 12. 发酵液中杂蛋白的去除方法主要有（等电点沉淀法），（热处理法）和（化学变性沉淀法）。 13. 差速区带离心用于分离（大小）不同的颗粒，与颗粒（密度）无关。等密度区带离心包 括（预形成梯度密度离心）和（自形成梯度密度离心）两种方式。离心达到平衡后，样品颗粒的区带形状和平衡位置（不再发生变化）。 1?单从细胞直径的角度，细胞（直径越小），所需的压力或剪切力越大，细胞越 2. 常用的化学细胞破碎方法有（.酸碱法），（盐法），（表面活性剂处理），（有机溶剂法）和（螯合剂）。 3. 包涵体的溶解需要打断蛋白质分子和分子间的（共价键），（离子键），疏水作用及静电 作用等，使多肽链伸展。因此，包涵体的溶解需要强的变性剂，如（8mol/L尿素）和（6mol/L 盐