收稿日期：２０１０－０７－
０８ 基金项目：
国家支撑计划项目（２００６ＢＡＤ６Ａ０７）；农业行业专项基金资助项目（２０１００３０６０）；国家生猪现代产业体系建设专项基金资助项目（ｎｙｃｙ
ｔｘ－００９） 作者简介：刘 捷（１９８４－）
，男，硕士研究生。＊通讯作者
猪圆环病毒２型、猪巨细胞病毒和ＴＴＶ－
２混合感染的流行病学调查刘 捷，陆 琪，王先炜，李玉峰，王晓晔，姜 平＊ （南京农业大学兽医学院农业部动物疫病诊断与免疫重
点开放实验室，江苏南京２１００９５
）摘要：本研究根据猪圆环病毒２型（ＰＣＶ２）ＯＲＦ２、猪巨细胞病毒（ＰＣＭＶ）ｇＢ基因和ＴＴＶ２非编码区序列合成引物，利用ＰＣＲ方法对２００９年来自江苏、浙江、上海、广东和广西等５个省市７６个患病猪群的仔猪病料进行了病原学检测。结果显示，ＰＣＶ２阳性率６４．５％（４９／７６），ＴＴＶ２阳性率４７．４％（３６／７６），ＰＣＭＶ阳性率６９．７％（４９／７６）。在ＰＣＶ２的阳性病料中，与ＰＣＭＶ和／或ＴＴＶ２混合感染占９３．９％（４６／４９），ＰＣＭＶ单独感染阳性率１８．４％（１４／７６），表明该地区ＰＣＶ２感染率明显提高，混合感染种类复杂，从而为有效预防和控制这些疾病提供了理论依据。关键词：猪圆环病毒２型；猪巨细胞病毒；Ｔｏｒｑ
ｕｅ Ｔｅｎｏ病毒；流行病学中图分类号：Ｓ８５２．６５ 文献标志码：Ａ 文章编号：１００５－４５４５（２０１１）０８－１０９５－
０４Ｅｐｉｄｅｍｉｏｌｏｇｉｃａｌ ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎ ｏｆ ｐｏｒｃｉｎｅ ｃｉｒｃｏｖｉｒｕｓ ｔｙｐｅ ２，ｐ
ｏｒｃｉｎｅ ｃｙｔｏｍｅｇａｌｏｖｉｒｕｓａｎｄ Ｔｏｒｑ
ｕｅ Ｔｅｎｏ ｖｉｒｕｓ ２ｉｎｆｅｃｔｉｏｎＬＩＵ Ｊｉｅ，ＬＵ Ｑｉａｎ，ＷＡＮＧ Ｘｉａｎ－ｗｅｉ，ＬＩ Ｙｕ－ｆｅｎｇ，ＷＡＮＧ Ｘｉａｏ－ｙｅ，ＪＩＡＮＧ Ｐｉｎｇ＊
（Ｋｅｙ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｏｆ Ａｎ－ｉｍａｌ Ｄｉｓｅａｓｅｓ Ｄｉａｇｉｎｏｓｔｉｃ ａｎｄ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ Ｍｏｄｉｃｉｎｅ，Ｎａｎｊｉａｎｇ ＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｍｉｎｉｓｔｒｙ
ｏｆ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ，Ｎａｎｊｉｎｇ２１００９５，Ｃｈｉｎａ）Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ａｃｃｏｒｄｉｎｇ ｔｏ ｔｈｅ ｐｕｂｌｉｓｈｅｄ ＯＲＦ２ｓｅｑｕｅｎｃｅ ｏｆ ｐｏｒｃｉｎｅ ｃｉｒｃｏｖｉｒｕｓ ｔｙｐｅ ２（ＰＣＶ２），ｇｌｙｃｏｐｒｏｔｅｉｎ Ｂ ｇｅｎｅ ｏｆ ｐｏｒ－ｃｉｎｅ ｃｙｔｏｍｅｇａｌｏｖｉｒｕｓ（ＰＣＭＶ）ａｎｄ ｎｏｎｃｏｄｉｎｇ ｒｅｇｉｏｎ ｓｅｑｕｅｎｃｅ ｏｆ Ｔｏｒｑｕｅ Ｔｅｎｏ ｖｉｒｕｓ ２（ＴＴＶ２），ｔｈｅ ｐｒｉｍｅｒｓ ｗｅｒｅ ｄｅ－ｓｉｇｎｅｄ ｔｏ ｄｅｖｅｌｏｐ ＰＣＲ ａｓｓａｙｓ．Ａｎｄ ｔｈｏｓｅ ｖｉｒｕｓｅｓ ｗｅｒｅ ｅｘａｍｉｎｅｄ ｉｎ ｔｈｅ ｄｉｓｅａｓｅｄ ｐｉｇｓ ｆｒｏｍ ７６ｐｉｇ ｈｅｒｄｓ ｏｆ Ｊｉａｎｇｓｕ，Ｚｈｅｊｉａｎｇ，Ｓｈａｎｇｈａｉ，Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ ａｎｄ Ｇｕａｎｇｘｉ ｐｒｏｖｉｎｃｅｓ ｉｎ ２００９．Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｒａｔｅ ｏｆ ＰＣＶ２，ＰＣＭＶ ａｎｄ ＴＴＶ２ｏｆ ｔｈｅｓｅ ７６ｓａｍｐｌｅｓ ｗｅｒｅ ６４．５％（４９／７６），６９．７％（４９／７６）ａｎｄ ４７．４％（３６／７６），ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ａ－ｍｏｎｇ ｔｈｅ ４９ＰＣＶ２ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｓａｍｐｌｅｓ，ｔｈｅ ｒａｔｅ ｏｆ ｃｏ－ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ，ＰＣＶ２＋ＰＣＭＶ，ＰＣＶ２＋ＴＴＶ２ａｎｄ ＰＣＶ２＋ＰＣＭＶ＋ＴＴＶ２，ｗａｓ ９３．９％（４６／４９）．Ｔｈｅ ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｒａｔｅ ｏｆ ｓｉｎｇｌｅ ＰＣＭＶ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ ｗａｓ １８．４％（１４／７６）．Ｉｔ ｉｎｄｉｃａｔｅｄ ｔｈａｔ ＰＣＶ２ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ ｗａｓ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｉｎｃｒｅａｓｅｄ ｉｎ ｔｈｅｓｅ ｒｅｇｉｏｎｓ ａｎｄ ｔｈｅ ｃｏ－ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ ｏｆ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｖｉｒｕｓｅｓ ｗａｓ ｃｏｍｐｌｉｃａｔｅｄ．Ｉｔ ｐｒｏ－ｖｉｄｅｄ ａ ｔｈｅｏｒｅｔｉｃａｌ ｂａｓｉｓ ｆｏｒ ｅｆｆｅｃｔｉｖｅｌｙ ｃｏｎｔｒｏｌｌｉｎｇ
ｔｈｅｓｅ ｄｉｓｅａｓｅｓ．Ｋｅｙ
ｗｏｒｄｓ：ｐｏｒｃｉｎｅ ｃｉｒｃｏｖｉｒｕｓ ｔｙｐｅ ２；ｐｏｒｃｉｎｅ ｃｙｔｏｍｅｇａｌｏｖｉｒｕｓ；Ｔｏｒｑｕｅ Ｔｅｎｏ ｖｉｒｕｓ；ｅｐｉｄｅｍｉｏｌｏｇｙ＊Ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇ
ａｕｔｈｏｒ 猪圆环病毒２型（Ｐｏｒｃｉｎｅ ｃｉｒｃｏｖｉｒｕｓ ｔｙｐ
ｅ ２，ＰＣＶ２）是圆环病毒科，圆环病毒属成员。病毒粒子无囊膜，核酸为单链、负股环状ＤＮＡ，大小约１．７６ｋｂ，包括６个开放阅读框。最早研究表明ＰＣＶ２是断奶仔猪多系统衰竭综合征（ＰＭＷＳ）的重要病
原［１］
，近来研究证实ＰＣＶ２与猪呼吸道病综合征（ＰＲＤＣ）［２］、猪增生性和坏死性肺炎（ＰＮＰ）
［３］
及猪皮炎肾病综合征（ＰＤＮＳ）
［４］
等也有密切关系。其中以ＰＭＷＳ的影响最为严重，给各国养猪业带来巨大的经济损失，国内养猪业也未能幸免。
Ｔｏｒｑ
ｕｅ Ｔｅｎｏ ｖｉｒｕｓ（ＴＴＶ）是１９９７年由日本学者Ｎｉｓｈｉｚａｗａ等［５］
从１例输血后非甲－庚型肝炎病人血清中分离到的新型肝炎病毒。ＴＴＶ是一种无囊膜的单股负链环状ＤＮＡ病毒，
目前该病毒被归为圆环病毒科，指环病毒属［
６］
。在猪体内检测到的ＴＴＶ被分为２种基因型，即ＴＴＶ１和ＴＴＶ２［７］
，
但迄今与猪任何已知疾病无明显关联。然而，在发生了断奶仔猪多系统衰竭综合征（ＰＭＷＳ）
的猪群中，ＴＴＶ２的感染更加普遍［８］
。
猪巨细胞病毒（Ｐｏｒｃｉｎｅ ｃｙｔｏｍｅｇ
ａｌｏｖｉｒｕｓ，ＰＣ－ＭＶ）
属β疱疹病毒亚科，是继伪狂犬病病毒之后发５
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现的第２个猪疱疹病毒。ＰＣＭＶ主要是一种“机会性感染”的病毒，多呈隐性感染，潜伏感染状态的猪在长途运输、寒冷、分娩等应激因素作用下，病毒可被激活并重新排毒，引起疾病［９］，但我国尚未见报道。ＰＣＶ２、ＰＣＭＶ和ＴＴＶ２都是ＤＮＡ病毒，在猪群中的分布都较为广泛，其中ＰＣＶ２影响较大，已经为大家所注意。但ＰＣＭＶ和ＴＴＶ２致病作用尚不十分清楚，我国对其也很少研究。本研究利用ＰＣＲ方法，对我国部分地区发病猪群仔猪病料进行这３种病原的检测，为有效预防和控制这些疾病提供理论依据。
１ 材料与方法
１．１ 主要试剂 ＤＮＡｚｏｌ Ｒｅａｇｅｎｔ，购自ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ公司；ＨＳＴＭ ＴａｑＭｉｘ Ｋｉｔ，购自东盛生物科技有限公司；ＤＮＡ Ｍａｒｋｅｒ ＤＬ２０００，１ｋｂ ＤＮＡ Ｌａｄｄｅｒ购自ＴａＫａＲａ公司。
１．２ 病料样品 ２００９年以来，上海、浙江、江苏、广东和广西５省市７６个规模猪场患病仔猪病料样品，每个猪群病料样品为淋巴结、肺脏和脾脏组织等量混合而成。
１．３ 组织病料ＤＮＡ的提取 用ＤＮＡｚｏｌ试剂提取ＤＮＡ。取５０ｍｇ剪碎的组织于２ｍＬ离心管中，加１ｍＬ ＤＮＡｚｏｌ，使用电动匀浆器处理５～１０次，室温放置５～１０ｍｉｎ。４℃，１０ ０００ｒ／ｍｉｎ离心１０ｍｉｎ，将得到的上清转移到新离心管。加入０．５ｍＬ １００％乙醇，颠倒离心管５～８次，混匀样品至出现ＤＮＡ沉淀，室温放置１～３ｍｉｎ，自然沉淀后尽可能吸弃上清。用０．８ｍＬ ７５％乙醇漂洗ＤＮＡ２次，漂洗时，将ＤＮＡ悬浮在乙醇中，颠倒离心管３～６次，然后静置０．５～１ｍｉｎ使ＤＮＡ沉降到管底，尽可能吸弃上清。吸去残余的乙醇，晾干１５ｓ后立刻用８ｍｍｏｌ／Ｌ ＮａＯＨ溶解ＤＮＡ。－２０℃保存待用。１．４ ＰＣＲ检测ＰＣＶ２ 根据文献［１０］方法。合成１对ＰＣＶ２引物，片段跨幅为整个ＯＲＦ２，长７５１ｂｐ。引物序列如下：上游引物：５′－ＴＴＣＧＧＴＡＣＣＡＧＣ－ＴＡＴＧＡＣＧＴＡＴＣＣＡＡＧ－３′；下游引物：５′－ＧＣ－ＣＡＡＧＣＴＴＴＣＡＣＴＴＣＧＴＡＡＴＧＧＴＴＴＴ－３′。引物由ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ公司合成。ＰＣＲ扩增反应总体积为２５μＬ，上下游引物各１μＬ，２×ＰＣＲ Ｒｅａｃｔｉｏｎ Ｍｉｘ１２．５μＬ，Ｔａｑ ＤＮＡ聚合酶（２．５Ｕ／μＬ）０．３μＬ，ＤＮＡ模板３μＬ，补水至２５μＬ。反应参数为：９４℃预变性３ｍｉｎ；９４℃４５ｓ，５８℃４５ｓ，７２℃４５ｓ，共３４个循环；最后７２℃延伸１０ｍｉｎ。取５μＬ ＰＣＲ产物于１％琼脂糖凝胶电泳分析。１．５ ＰＣＲ检测ＴＴＶ２ 根据文献［１１］方法。合成１对ＴＴＶ２引物，扩增非编码区的一段序列，长２５２ｂｐ。引物序列如下：上游引物：５′－ＴＣＡＴＧＡ－ＣＡＧＧＧＴＴＣＡＣＣＧＧＡ－３′；下游引物：５′－ＣＧＴＣＴ－ＧＣＧＣＡＣＴＴＡＣＴＴＡＴＡＴＡＣＴＣＴＡ－３′。引物由ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ公司合成。ＰＣＲ反应总体积为２５μＬ，上下游引物各１μＬ，２×ＰＣＲ Ｒｅａｃｔｉｏｎ Ｍｉｘ １２．５μＬ，Ｔａｑ ＤＮＡ聚合酶（２．５Ｕ／μＬ）０．３μＬ，ＤＮＡ模板３μＬ，补水至２５μＬ。反应参数为：９４℃预变性５ｍｉｎ；９４℃１５ｓ，５４℃２０ｓ，７２℃３０ｓ，共５０个循环；最后７２℃延伸５ｍｉｎ。取５μＬ ＰＣＲ产物于１％琼脂糖凝胶电泳分析。
１．６ ＰＣＲ检测ＰＣＭＶ 根据文献［１２］方法。合成１对ＰＣＭＶ引物，片段针对ｇＢ基因中的一段序列，长４１３ｂｐ。引物序列如下：上游引物：５′－ＣＣＣＴ－ＧＡＴＣＴＴＡＡＡＴＧＡＣＧＡＧＧＡＣＧＴＧＡＣ－３′；下游引物：５′－ＡＣＣＧＴＣＴＧＡＧＡＧＡＧＡＣＴＧＡＡＣＴＴＣＴＣＴＧＡＣＡＣ－３′。ＰＣＲ反应总体积为２５μＬ，上下游引物各１μＬ，２×ＰＣＲ Ｒｅａｃｔｉｏｎ Ｍｉｘ １２．５μＬ，ＴａｑＤＮＡ聚合酶（２．５Ｕ／μＬ）０．３μＬ，ＤＮＡ模板３μＬ，补水至２５μＬ。ＰＣＲ反应参数为：９４℃预变性５ｍｉｎ；９４℃４５ｓ，６０℃４５ｓ，７２℃６０ｓ，共３２个循环；最后７２℃延伸５ｍｉｎ。取５μＬ ＰＣＲ产物于１％琼脂糖凝胶电泳分析。
２ 结果
２．１ 临床症状与病理变化 所有猪场均存在不同程度的临床发病情况，主要表现为：４０～１００日龄仔猪体温４０．０～４１．０℃，生长缓慢，瘦弱，被毛粗乱，皮肤发白，呼吸困难，发病率２０％～５０％，死亡率达５％～３５％。病理变化主要有：淋巴结水肿、不同程度的出血；肾脏肿大、有灰白色斑，部分肾脏有出血点血；脾脏不同程度的肿大、边缘有坏死灶，质地变脆；部分病例可见肝脏表面有出血点或灰白点，少部分回肠或结肠黏膜有出血；部分肺脏淤血呈殷红色，肺间质不同程度的增宽，有的有实变、肺脏浆膜与胸膜发生粘连、胸膜腔内含有浆液性积液等。
２．２ ＰＣＶ２检测结果 通过ＰＣＲ反应，对从来自上海、浙江、江苏、广东和广西５省市７６个规模猪场患病仔猪病料进行检测，结果有４９份可以扩增出预期的目的基因条带，且与阳性对照所扩增出的片段完全符合（图１），表明所检测的病料中ＰＣＶ２阳性率为６４．５％（表１），其中，上海阳性率最高，其次为浙江省。
２．３ ＰＣＭＶ检测结果 通过ＰＣＲ反应，对这７６份病仔猪淋巴结病料进行检测，结果有５３份可以扩增
６
９
０
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出预期的目的基因条带，且与阳性对照所扩增出的片段完全符合（图１），表明所检测的病料中ＰＣＭＶ阳性率为６９．７％（
表１），其中，上海、浙江、江苏阳性率均在６６％以上。２．４ ＴＴＶ２检测结果 结果见图１和表１，７６份病料中有３６份可以扩增出预期的目的基因条带，且与阳性对照所扩增出的片段完全符合，阳性率为４７．４％，其中，上海和浙江阳性率均在５０％以上
。
图１ 部分临床组织样品ＰＣＲ检测结果 Ｍ．ＤＮＡ Ｍａｒｋｅｒ
ＤＬ２０００；１～
１０．病料样品号；１１．阳性对照；１２．阴性对照表１ ＰＣＶ２与ＰＣＭＶ和ＴＴＶ２感染ＰＣＲ检测结果
地区病料数病料阳性率
ＰＣＶ２
ＰＣＭＶ
ＴＴＶ２
上海
１２ １１（９１．７％）８（６６．７％）６（５０．０％）江苏２５ １３（５２．０％）１７（６８．０％）９（３６．０％）浙江３０ １９（６３．３％）２０（６６．７％）１６（５３．３％）广东３ １（３３．３％）３（１００％）０广西６ ５（８３．３％）５（８３．３％）５（８３．３％）总计
７６
４９（６４．５％）
５３（６９．７％）
３６（４７．４％）
２．５ 混合感染统计结果 结果见表２。ＰＣＶ２、ＰＣ－
ＭＶ、ＴＴＶ２单独感染的阳性率分别为５．３％、１８．４％、３．９％。ＰＣＶ２与ＰＣＭＶ或ＴＴＶ２混合感
染率占ＰＣＶ２感染的９３．９％（４６／４９），其中，ＰＣＶ２与ＰＣＭＶ混合感染占２８．６％（１４／４９），ＰＣＶ２与ＴＴＶ２混合感染占２０．４％（１０／４９），ＰＣＶ２、ＰＣＭＶ与ＴＴＶ２三者混合感染占４４．９％（２２／４９）。此外，ＰＣＭＶ与ＴＴＶ２混合感染率为２．６％（２／７６）
，而３种病原均为阴性的病料占９．２％（７／７６）。统计结果显示，江苏省ＰＣＶ２与ＰＣＭＶ混合感染率最高，上海市ＰＣＶ２与ＴＴＶ２混合感染率最高，广西省ＰＣ－
ＭＶ与ＴＴＶ２混合感染率最高，
浙江省３种病原混合感染率最高。
表２ ＰＣＶ２、ＰＣＭＶ和ＴＴＶ２感染统计结果
地区病料数病料阳性率
单一感染
ＰＣＶ２ＰＣＭＶ ＴＴＶ２两重感染
ＰＣＶ２＋ＰＣＭＶ
ＰＣＶ２＋ＴＴＶ２ＰＣＭＶ＋ＴＴＶ２三重感染
ＰＣＶ２＋ＰＣＭＶ＋ＴＴＶ２均未感染上海
１２ １（８．３％）０ ０ ４（３３．３％）２（１６．７％）０
４（３３．３％）１（８．３％）江苏２５ １（４．０％）５（２０．０％）１（４．０％）５（２０．０％）３（１２．０％）１（４．０％）５（２０．０％）４（１６．０％）浙江３０ ２（６．７％）７（２３．３％）２（６．７％）３（１０．０％）４（１３．３％）０
１０（３３．３％）２（６．７％）广东３ ０ ２（６６．７％）０
１（３３．３％）００００广西６ ０ ０ ０
１（１６．７％）１（１６．７％）１（１６．７％）３（５０．０％）０总计
７６
４（５．３％）１４（１８．４％）３（３．９％）１４（１８．４％）１０（１３．２％）２（２．６％）２２（２８．９％）７（９．２％）
３ 讨论
ＰＭＷＳ、ＰＲＤＣ、ＰＮＰ和ＰＤＮＳ等疾病已经在
世界主要养猪国家发现。ＰＣＶ２是这些疾病的重要病原，但并不是唯一的病原。ＰＣＶ２主要侵害免疫系统，导致感染猪免疫抑制，降低机体对其他病原体的抵抗力和疫苗的反应性，容易导致其他病毒和细
菌的继发感染［
１３］
，使其死亡率明显升高，给养猪业造成巨大的经济损失。本研究对２００９年以来从来自上海、浙江、江苏、广东和广西５省市１８个猪场７６份病料样品进行ＰＣＶ２检测，
结果阳性率为６４．５％，其中，与ＰＣＭＶ和ＴＴＶ２混合感染占９３．９％（４６／４９），表明该地区ＰＣＶ２感染率明显提
高，混合感染种类复杂。
猪ＴＴＶ的两种基因型已经在猪血清、血浆、精液、粪便、鼻腔和直肠棉拭中被检测到，ＴＴＶ在猪群
中广泛传播，粪－口途径被认为是病毒传播的主要途径。ＴＴＶ感染呈全球性分布，在人群以及猪等动物中感染比例较高。虽然至今尚未有报道ＴＴＶ感
染在猪群中会引起何种明显疾病，Ｋｅｋａｒａｉｎｅｎ等［８
］
采用ＰＣＲ方法，对西班牙感染ＰＭＷＳ的猪群和未感染ＰＭＷＳ的猪群血样进行了ＴＴＶ检测，
结果ＰＭＷＳ感染猪群的ＴＴＶ阳性率为９７％，而未感染猪为７８％，其中ＴＴＶ２阳性率差异悬殊，
分别为９７％和７２％，而ＴＴＶ１阳性率无显著差异。我国王礞礞等报道，ＰＭＷＳ猪群中存在ＴＴＶ，９４份样品为ＰＣＶ２和ＴＴＶ１混合感染，占样品总数的３６．４％，
１９３份样品为ＰＣＶ２和ＴＴＶ２混合感染，占７４．８％；
另外还有一些样品为三重感染，占３４．５％［１
４］
。本研究结果表明，该地区ＰＣＭＶ阳性率达６９．７％，其中，ＴＴＶ２与ＰＣＶ２混合感染占ＰＣＶ２感染数的
７３．５％（３６／４９）。ＴＴＶ在ＰＭＷＳ的作用有待于进
７
９０１ 中国兽医学报 ２０１１年８月 第３１卷 第８期 Ｃｈｉｎ Ｊ Ｖｅｔ Ｓｃｉ Ａｕｇ．２０１１ Ｖｏｌ．３１ Ｎｏ．８
一步研究。
猪巨细胞病毒病，又称猪包涵体鼻炎，是由ＰＣ－ＭＶ引起的仔猪的一种常见传染病，在易感猪群可引起母猪胚胎和仔猪死亡，表现发育不良、鼻炎和肺炎等临床症状［１５－１７］，欧洲很多国家都发现有本病。ＰＣＭＶ分布相当广泛，多数猪群该病毒。如德国用ＰＣＲ方法，调查猪的流行率要高于５０％；在英国进行的血清学检查的结果表明：９０％以上的猪群曾受到过感染，通过ＥＬＩＳＡ或ＩＦＡ检测，发现９８％以上的猪血清呈阳性；北美和澳大利亚也有报道，其中美国发病率甚高，猪群的抗体保有率为９０％［１８］。本研究结果表明，该地区ＰＣＭＶ阳性率达６９．７％，其中，ＰＣＭＶ与ＰＣＶ２和ＴＴＶ２混合感染占７６．３％（４５／５９），单独感染的占２３．７％（１４／５９），说明我国规模猪场也普遍存在该病毒，其致病性有待进一步研究。
近年来，猪群发病多为多种病原的混合感染，临床症状和剖检病理变化表现类型较多，认为可能是多种病原相互影响，相互协作引起疾病发生。本试验发现华东地区发病仔猪群中ＰＣＶ２、ＰＣＭＶ、ＴＴＶ２ ３种病原有较高的感染率，对于这３种病原在疾病发生中的相互协同作用究竟如何，尚需进一步研究。此外，为了进一步明确其在我国猪群中混合感染情况，尚需要进一步扩大取样的时间和空间。
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ＰＲＲＳＶ）ａｎｄ ｐｏｒｃｉｎｅ ｃｉｒｃｏｖｉｒｕｓ ｔｙｐｅ ２（ＰＣＶ２）［Ｃ］∥
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１ 中国兽医学报 ２０１１年８月 第３１卷 第８期 Ｃｈｉｎ Ｊ Ｖｅｔ Ｓｃｉ Ａｕｇ．２０１１ Ｖｏｌ．３１ Ｎｏ．８
猪圆环病毒的七大主要症状 我们相信科学指导生产，我们相信数据客观真实，我们相信改变才能突破提高。 圆环病毒的代表性疾病有猪断奶后多系统衰竭综合症、母猪繁殖障碍、断奶猪和育肥猪呼吸道疾病、猪皮炎肾病综合症、猪腹泻综合征以及仔猪的中枢系统疾病。 由于圆环病毒能破坏猪体的免疫系统，造成免疫抑制，引起继发性免疫缺陷，因而本病常与蓝耳病、细小病毒、伪狂犬、及猪副嗜血杆菌、气喘病、胸膜肺炎、巴氏杆菌和链球菌等混合感染或继发。 猪圆环病毒病是以免疫抑制为主要特征的一类病毒性传染病，临床表现较为复杂。圆环病毒对免疫器官有严重的侵害性，可导致机体免疫系统免疫的高度抑制。通俗的讲，圆环病毒可以是疫苗免疫失效，机体免疫力减弱或消失。圆环病毒的代表性疾病有猪断奶后多系统衰竭综合症、母猪繁殖障碍、断奶猪和育肥猪呼吸道疾病、猪皮炎肾病综合症、猪腹泻综合征以及仔猪的中枢系统疾病。 一、PIDS（猪免疫缺陷综合症） 1：猪机体抵抗力降低，更易继发感染其他病原，这也是圆环病毒与猪的许多疾病混合感染有关的原因。 2：对减弱疫苗或低致病性微生物可以引起发病。 3：疫苗接种不产生免疫应答。 4：重复发病对治疗无应答性。 二、PMWS（猪多系统衰竭综合症） 最常见的是猪只渐进性消瘦或生长迟缓，这也是诊断PMWS所必需的临床依据，其他症状有厌食、精神沉郁、行动迟缓、皮肤苍白、被毛蓬乱、呼吸困难、咳嗽为特征。较少发现的症状为腹泻和中枢神经系统紊乱。发病率一般很低而病死率都很高。 四季均可发生，主要危害断奶后2～3周的仔猪（40～70日龄）。实行早期隔离断奶的猪场，仔猪也有该病的发生，病毒可随粪便和鼻腔分泌物排出体外，经消化道传播或者可能经胎盘垂直传染仔猪，发病率和死亡率不定；呈地方性流行时，发病率和死亡率均较低，但急性爆发时，发病率可达50%，病死率高达20%～30%。如果该病与猪细小病毒或猪繁殖与呼吸综合征病毒、链球菌、多杀性巴氏杆菌和副猪嗜血杆菌等混合感染时，仔猪的死亡率会更高。 三、PRDC（猪呼吸道疾病综合症）
猪圆环病毒的研究进展 引自--华中农业大学黄青伟 一、PCV 的发现 猪圆环病毒(porclne Circovirus) 于1974 年在PK 一15 细胞中发现，当时认为是一种细胞污染物，后证实为一种新的病毒。该病毒是一种环状、无囊膜、单链DNA 病毒；在ICTV 第6 次病毒分类报告中，将猪的圆环病毒(PCV) 、鸡贫血病毒(cA V) 、鹦鹉喙羽病毒(PBFDA V)3 个病毒归类于网环病毒科，圆环病毒属成员。 病毒的理化特性 PCV 粒子为20 面体对称结构，其直径人小为17nm ，CsCL 浮密度l 37g ／era3 。无囊膜，含有单股负链环状DNA 。基因组长 1 ．7kb ，分子量5 8 × 102 。PCV 不具凝血活性，可抵抗PH3 ．0 的环境，经氯仿作用不失活，该病毒只在猪源和VERO 细胞培养物中才能完全复制，并且依赖细胞周期s 期表达的细胞蛋白。可在PK —15 细胞上增殖但不引起明显的细胞病变。Tischer 等发现，用a 一氨基葡萄糖处理细胞培养物后可促进病毒的复制。PCV 有两种基因型：PCV 一 1 和PCV 一 2 。前者基因组为1759bp ，后者基因组为1768bp 。PCV 一1 有7 个0RF ，编码大于5KD 的蛋白质。其巾ORFl 编码的蛋质与植物矮小病毒(plant nanovirus) 和喙羽病毒(heak and featherdisease ViruS)ORFL 码的蛋白质有较高的同源性。PCV 一2 有11 个ORF 预计分别编码36 — 2KD 的蛋白，但目前只有 6 个得到证实。PCV 一1 和PCV 一2_ 干相，ORFI 核苷酸和编码的蛋白质的同源性分别为83 ％、86 ％．而ORF2 分别为67 ％、65 ％。二者的主要结构蛋白均由ORF2 编码。 从发病猪的淋巴组织发现了PCV 病毒颗粒，说明发生了病毒传染。用PCR 方法从发病猪淋巴组织中和人工感染仔猪的鼻腔分泌物和粪便中检测到了PCV 和DNA 。 二、流行病学 PCV 的来源现在还不清楚，但它广泛存在于猪源肾细胞中已经得到证实。免疫荧光和免疫酶组化法也证明，PCV 抗原广泛存在于不同代次的PK — 15 、猪源原代、继代细胞以及1 ～19 日龄的猪体内。Gills 等(1988) 还证实，美国菌种收藏中心PK 一15 细胞亚系CCL 一33 ，存在PCV 抗原。 Tischer(1986) 证实，在德国柏林和德国北部两个地区的屠宰场，发现有77 ％～95 ％的猪存在PCV 抗体。另外，还发现柏林地区野猪也存在PCV 抗体。Edwards 等(1994) 证实，他们收集的血清样品86 ％(75 ／87) 存在PCV 抗体，Hines 等(1995) 证实，在美围佐治亚州的11 个猪群、北卡罗来纳州的 1 个猪群、衣阿华州均存在PCV 抗体，抗体阳性率为53 ％(208 ／399) 。此外，加拿大、澳大利亚、新西兰等国家也有猪群中存在PCV 抗体的报道。但以上报道均未发现感染猪有临床症状，因此可以断言PCV 一 1 的流行是世界性的。 随着PCV 一 2 概念的提出，目前在德国、法国、新西兰、美国、加拿大、爱尔兰、印度、日本、中国台湾等国家和地区已有从PMWS 猪中检测到PCV 一 2 的报道。我国郎洪武等通过ELISA 方法在可疑猪群中也大量的检测到了PCV 一 2 抗体。这些资料说明PCV － 2 也已在世界范围内流行。Allen 指出PCV 一 1 可能在猪的育肥期间发生感染，北爱尔兰的一项纵向研究指出仔猪在出生8 ～9 周龄后，血液中PCV — l 盼母源抗体消失，但在13 ～15 周龄时PCV 一1 的抗体又出现。这说明PCV 一1 感染主要发生在第11 ～13 周龄期间，而这恰好是仔猪从保育舍向育肥舍转移的时期。
猪圆环病毒的八大危害 技术专题"猪圆环病毒病的八大危害 作者：华传仙江西派德农实业有限公司 2003年,第四届国际新出现与再出现猪病大会在意大利罗马举行,此届猪病大会的主题是猪繁殖与呼吸障碍综合征(PRRS)、仔猪断奶多系统衰竭综合征(PMWS)和猪流感(SIV)，表明猪圆环病毒病已成为世界猪病热点。南京农业大学吴增坚教授等(2006)对2004年6～12月间华东地区送检的猪呼吸道疾病综合征的病料进行PCR基因测序，病毒病检出率由高到低排列为：蓝耳病病毒：82%（68/83）；圆环病毒：80%（52/65）；猪瘟病毒：76%（19/25）；细小病毒：42%（15/36）；伪狂犬病病毒：33%（4/12）。 猪圆环病毒(PCV)在1982年被发现,当时被认为是PK-15细胞系的一种污染物。血清学调查证实德国(1982)、加拿大(1989)、新西兰(1991)、英国(1994)、美国(1995)都有本病毒存在,它广泛分布于世界各地。本病自1996年首次报道后，近10年中几乎遍及所有养猪比较发达的国家，许多规模化猪场均受到重创，致使不少染病猪场保育猪死、淘率高达20％，少数猪甚至高达50％左右。现有的研究基本上都证明，圆环病毒Ⅱ在蓝耳病病毒或者某些免疫增强剂等因素的共同作用下，加深了对淋巴系统的侵害，造成淋巴细胞缺少和淋巴肉芽肿的特殊病变，继而造成机体的免疫抑制，引发多种相关疾病。 一、与蓝耳病并发是造成保育猪和生长前期育肥猪（6～13周龄）死亡的主要原因
Harms等（2001）采用剖腹取胎，不吃初乳人工饲喂至3周的猪做实验：19头单接种圆环病毒，表现为发热、嗜睡、轻度呼吸加快，4头黄疸，14头渗出性皮炎。因黄疸死亡2头，渗出性皮炎死亡1头，出血性胃溃疡死亡3头，接种后28天死亡率26%，呈典型的断奶后多系统衰竭综合征眼观与组织学病变。 17头联合接种蓝耳病病毒和圆环病毒，表现为发热、昏睡，由呼吸加快发展为呼吸困难，偶见黄疸，接种后10天，死亡率91%，接种后20天全部死亡，表现为严重间质性肺炎和坏死性肝炎（Vet Pathol 38:528-539）。 以上实验表明，单一圆环病毒感染可引起消瘦、黄疸为主的断奶后多系统衰竭综合征，而蓝耳病病毒与圆环病毒同时感染引起以呼吸困难为特征，致死率可达100%。 二、造成断奶仔猪多系统衰竭综合症(PMWS) 本病的主要临床症状为体温升高，进行性消瘦，体重减轻，被毛粗乱、毛竖起，皮肤苍白或黄疸（20%比例），继而呼吸加快，腹式呼吸或张口呼吸，腹部起伏明显，腹股沟淋巴结明显肿大，最后死亡。无继发感染病例不咳嗽，不腹泻。 剖检可见腹股沟淋巴结、肠系膜淋巴结肿大，切面苍白不出血，肺部病变以间质增宽、水肿和肺浆膜面斑点状出血为特征。 三、参与呼吸道疾病综合征（PRDC） 圆环病毒病在多数情况下，被视为断奶仔猪多系统衰竭综合征的孪生病，其发病原因，系由猪群在蓝耳病或蓝耳病和猪圆环病毒Ⅱ型
由于受到圆环病毒和蓝耳病毒的侵袭，猪只的抵抗力下降，猪越来越难养，猪病也越来越难治。所以做好圆环病毒的防控是猪场的重要工作。 一、病原：对猪有危害的是圆环病毒2型(pcv-2)，该病毒对外界的抵抗力非常强。母猪是主要的传染源，公猪的精液常常带毒，可通过胎盘垂直传播。感染的猪只免疫抑制，抵抗力下降。而且往往与蓝耳病毒混合感染，使猪只的免疫力下一步下降，继发感染其它疾病如副猪嗜血杆菌，链球菌，附红细胞体等，更可怕的是由于免疫抑制剂，猪瘟抗体水平下降不能保护，猪场感染猪瘟等疾病而无法治愈，使猪场遭受很多的损失。临床上常见的与圆环病毒有关的疾病有：断奶后多系统衰竭综合征;猪皮炎和肾病综合征;猪呼吸道疾病综合征;母猪繁殖障碍综合征;消化道疾病综合征;初生仔猪先天性震颤。 二、流行特点： 1、断奶后多系统衰竭综合征在我国猪场广泛存在，主要发生在哺乳期和保育期的仔猪，一般于断奶后2-3天开始发病，急性发病猪群中，病死率超过20%。严重的高达60%以上。将成为在今后很长一段时间内困扰我国养猪业的主要问题之一。 2、猪皮炎和肾病综合征主要发生于保育后期和生长育肥，呈散发，死亡率很低。
三、临床症状： 1、多系统衰竭综合征;猪只进行性消瘦，生长迟缓，呼吸困难、喘气、腹式呼吸，淋巴结明显的肿，腹泻，皮肤苍白、贫血部分猪有黄疸症状。 2、猪皮炎和肾病综合征：猪皮肤上形成圆形或形状不规则、呈红色到紫色的病变，病变中央呈黑色，病变常融合成大的斑块。 四：剖检病变：肾脏灰白色、水肿，脾脏轻度肿胀或萎缩，肝脏肿大、可出现中等程度的黄疸，回肠和结肠段肠壁变薄，肺脏肿胀，质度坚硬或似橡皮，其上散在有大小不等的紫褐色实变区，全身淋巴结，特别是颌下、腹股沟、纵隔、肺门和肠系膜淋巴结显著肿大，切面为灰黄色，有的可见出血。 特别注意：该病通常与副猪嗜血杆菌一起感染，临床解剖中常见有胸膜炎、胸壁粘连、纤维素渗出肺脏出血(点、斑、成片)、脓肿，心包炎、心包液增多，腹膜炎、腹腔纤维素渗出，关节炎。 五;防控办法： 1、疫苗;没有高效的疫苗能控制猪圆环病毒疾病的发生。很多猪场反映猪圆环病毒疫苗免疫后断奶猪的整齐度提高了，似乎对断奶后多系统衰竭综合征有一定的预防作用，但对皮炎肾病综合征没有什么效果。
猪圆环病毒病症状有哪些 猪圆环病毒病主要侵害5-16周龄的仔猪，引起仔猪渐进性消瘦、呼吸急促或困难、腹泻、贫血、皮肤苍白和全身淋巴结肿大，导致断奶后与生长期的猪生长迟缓及高死淘率，给世界养猪业造成了巨大的经济损失。下面我们了解一下猪圆环病毒病症状有哪些。 猪圆环病毒病的临床症状 (l)断奶后仔猪的系统衰竭综合征(pmws)：6-16周断奶仔猪表现为发育不良消瘦、皮肤苍白、肌肉衰弱无力、呼吸系统多发性炎症、呼吸困难、腹泻、贫血、黄疸、体表淋巴结肿大，皮肤出现蓝色的皮下出血点，特别是最后一对乳头呈淡蓝色。有些猪出现神经症状，如角弓反张、四肢划动，最后因衰竭死亡。 (2)猪皮炎与肾病综合征(pdns)：主要表现体温微高至正常，主要从后肢和臀部开始出现中央为黑紫色，边缘呈紫红色圆形或不规则形，隆起于皮肤表面，呈斑块状黑色痂皮，并逐步向前躯蔓延，如无继发感染，一般死亡率在15%以下。 (3)仔猪先天震颤症(ct)：主要表现出生仔猪全身骨骼肌肉痉挛性收缩，头部、肋部四肢震颤，站立不稳，行走困难、吮吸不住乳头，因仔猪吃奶不足表现昏睡、低血糖症，最后衰竭而死。要与缺硒、猪伪狂犬病，单纯的由于母猪无乳综合征引起的初生仔猪低血糖症，以及猪瘟感染相区别。 猪圆环病毒的剖检
(1)pmws：猪尸体消瘦，有不同程度贫血和黄疸，全身淋巴结肿大4-5倍，切面呈苍白色，可见间质性肺炎、肺门淋巴出血肿大、支气管黏脓性炎症引起的肺部表面散在隆起的胶状硬块。腹股沟淋巴结、肠系膜淋巴结及支气管淋巴结显著肿大、质硬，切面结构致密、灰白色或见出血。 (2)pdns:除确皮肤表现外，双侧肾肿大到原来3-4倍，颜色苍白，表面有出血点，切面多汁并伴有灰白色坏死灶。脾肿大、肝脏呈橘黄色外观，心脏肥大。肺脏呈弥漫性或局灶性间质性肺炎病变，病变部变硬，呈灰红色或灰白色。 (3)繁殖障碍：检验可见死胎和木乃伊胎、新生仔猪胸腹腔积水，心脏扩大成苍白色。肾脏肿大，色变淡，表面或切面皮质部有大小不等的灰白色斑点（白斑肾）。 猪圆环病毒的实验室诊断 (1)本病确诊须进行病毒的分离，证明病原的存在，也可以用血清学方法诊断。 (2)实验室诊断通常取发病猪肺、脾、淋巴结和肾等病理组织样品，制成组织悬液接种于pk-15细胞，分离纯化病毒。采用间接免疫荧光试验、电镜技术、胶体金免疫层析法和酶联免疫吸附试验(elisa)作为辅助诊断手段。 (3)常用的病原学诊断程序。采集剖检所见典型的病料，可直接采用pcr方法或原位杂交技术(ish)进行快速诊断。免疫荧光和原位杂交将被用来确定组织或器官中的病毒或核酸。采集剖检所见典型的病料，
猪圆环病毒2型疫苗最新研究进展 猪圆环病毒病是公认的免疫抑制病之一，造成猪场损失惨重，疫苗免疫成了救命的稻草。从2011年猪圆环疫苗上市至今，已有17家圆环产品先后上市，目前，出现严重供大于求的现象，同时，养殖场也面临着幸福的烦恼，大量产品的上市，产品价格可能下降，但是，面对玲琅满目的产品，如何选择疫苗成了养殖场一个重要的课题，针对这些烦恼，本文希望能够为养殖场选择疫苗带来帮助，避免走弯路，为养殖场服务。 1.PCV-2国内外最新流行动态 由PCV-2引发的疾病已成全球流行之势，在加拿大首次报道该病原引起PMWS后[1]，学者通过调查本国包括SPF猪、部分散养猪以及育肥猪发现，猪群中PCV-2血清中抗体普遍存在，但目前该病在加拿大仍然只是散发。在英国和北爱尔兰，猪群血清中PCV-2抗体阳性率分别为86％和92％。美国、法国、丹麦、意大利、西班牙、荷兰、新西兰、日本、韩国、墨西哥等国家也相继报道猪群中存在PMWS。在我国猪群中PCV-2感染情况也不容乐观。2000年郎洪武等[2]在北京、河北、山东、天津、江西、吉林、河南等7省(市)的22个猪群采集了559份血清，用ELISA 方法检测PCV-2抗体，其阳性率高达5l％，表明我国猪群中存在PCV-2的感染。王忠田等[3]用PCR方法对我国北京、山东、河北、深圳、山西、天津、广东等省(市)的12个规模化猪场发病猪群进行猪圆环病毒2型感染的流行病学调查，结果表明猪圆环病毒2型感染情况在我国猪群中相当严重。李超等[4]在2010年对安徽省PCV-2流行病学调查，结果表明安徽省14个市(县)的PCV-2抗体阳性率平均为74.36％，表明安徽省猪群中普遍存在着PCV-2的感染。从上述报道表明PCV-2在我国猪群中广泛存在。根据流行病学调查显示，虽然猪群中PCV-2抗体阳性率较高，但很大比例的抗体阳性猪群并不表现出临床症状。PCV-2与其他多种病原混合感染较为严重，调查发现沙门氏菌、大肠杆菌等细菌性病原与PCV-2混合感染率达到了20％[5]。陕西省PCV-2与PRV混合感染率是21.7％[6]。2005年陈义祥等对广西地区197份组织病料检测发现，PCV-2与PRRSV、CSFV、SIV、PRV混合感染占总病料数量的57.73％。2003年王文军等[7]对黑龙江地区PCV-2阳性猪群的病料调查发现，蓝耳病和猪瘟的阳性率也较高。 哈尔滨兽医研究所刘长明[8]在2007年采用免疫过氧化物酶单层细胞染色试验（IPMA）对来自与黑龙江、吉林、河北、上海、内蒙古、云南、江西等地的健康猪群480份血清和发病猪群424份血清，抗体阳性率分别为79.2%和91.7%，表明PCV-2在猪群中感染率非常高。 山东农科院畜牧兽医研究所吴家强博士检测结果也证实PCV-2防控比较糟糕，PCV-2，2010年检出率为34.66%（124/357），2011年检出率为25.59%(174/588)；2012年检出率为 21.38%(147/683)，圆环病毒病依然严重，但有下降趋势，这个和使用圆环疫苗免疫有关系。 2.PCV-2病毒特点
仅供科研使用，不得用于临床检验。 猪圆环病毒Ⅱ型抗体(PCV2-Ab)定性检测试剂盒（ELISA）说明 书 【产品名称】 通用名称：猪圆环病毒Ⅱ型抗体(PCV2-Ab)定性检测试剂盒（ELISA） 英文名称：Test Kit for Antibodies to Porcine Circovirus 2 ELISA KIT 【包装规格】 96人份/盒 【预期用途】 仅供科研使用，猪圆环病毒病是由猪圆环病毒Ⅱ型（Porcine Circovirus 2，PCV2）引起的猪的一种多系统功能障碍性疾病，其临床表现多种多样，主要为断奶仔猪多系统衰竭综合症、猪皮炎与肾病综合征、母猪繁殖障碍等。 本试剂用于检测猪血清中猪圆环病毒Ⅱ型抗体，可用于猪圆环病毒Ⅱ型疫苗免疫效果评价。 【检验原理】 本试剂盒系由预包被猪圆环病毒Ⅱ型重组cap蛋白的酶标板、酶标记物及其他配套试剂组成，应用酶联免疫法（ELISA）原理检测猪血清、血浆样本中猪圆环病毒Ⅱ型抗体。实验时在酶标板中加入对照血清和待检样本，经温育后若样品中含有猪圆环病毒Ⅱ型抗体，则将与酶标板上抗原结合，经洗涤除去未结合的其他成分后；再加入酶标记物，与酶标板上抗原抗体复合物发生特异性结合；再经洗涤除去未结合的酶标记物，在孔中加TMB底物液，与酶反应形成蓝色产物，显色深浅与样品中的特异性抗体含量成正相关；加入终止液终止反应后，产物变为黄色；用酶标仪在450nm波长测定各反应孔中的吸光值，即可知样品是否含有猪圆环病毒Ⅱ型抗体。
【主要组成成分】 主要成分 需要但未提供的材料及耗材 1、酶标仪 2、精密移液器及一次性吸头 3、蒸馏水 4、洗瓶或者自动洗板机 5、37℃水浴锅或恒温箱 6、500ml量筒 7、无粉一次性乳胶手套 【储存条件及有效期】 1、2-8℃保存，切勿冷冻，有效期6个月。 2、开封使用后，包被微孔板放入带有干燥剂的自封袋中，密闭自封袋，并将全部试剂放回2-8℃冰箱。 3、开封后，按照建议的条件保存，校准品、包被微孔板和HRP标记抗体，有效期为14天，
洛阳普莱柯生物工程股份有限公司 中国首创猪圆环病毒2型灭活疫苗——圆健TM及特性 【技术创新】 ?中国首创（2005年初开始研制，2007年12月独家获农业部批准进入临床试验，2009年7月率先通过农业部新兽药注册初审，2010年7月获农业部复审，2010年8月获农业部新兽药证书，2010年9月12产品在国内首家正式上市）?中国独家采用美国SBC公司技术专利克隆细胞PKK细胞生产（使得病毒原液效价比使用PK-15细胞生产的要高10倍，目前国内产品几乎多数均采用PK-15细胞） ?中国独家全套引进美国SBC公司细胞悬浮培养生产线生产（该条生产线耗资138，000，000元人民币，生产的病毒原液效价比转瓶生产高100~140倍，目前国内除了一家生产五号病疫苗的企业拥有该生产线外，同类产品几乎均为转瓶生产工艺） ?流行毒株PCV2b——PCV-2-SH株专利毒株 ?疫苗佐剂为独家采用进口法国Seppic公司的Montanide ISA206(W /O/W)双相油乳剂（同类产品为普通国产矿物油佐剂或者水质佐剂） ?产品按欧III版GMP标准生产（国内同类产品生产企业中唯一的中外合作企业，外国专家担任生产技术总监——荷兰乌特列支国立大学博士舒海索Hessel原诺华公司生产CEO全程把控产品品质） 【抗原含量】 ?圆环病毒疫苗农业部国家标准为高于:106.0TCID50/ml ?圆健T M抗原含量为：107.0TCID50/m l（圆健TM配苗前病毒原液抗原高于107.0TCID50/ml，而其它同类产品均采用PK-15细胞和普通的转瓶工艺生产的病毒原液抗原一般在104.0TCID50/ml~105.0TCID50/ml之间） 【使用对象及方法】 ?仔猪：对于母抗不高、感染压力大的猪场推荐10—21天仔猪可以首免1ml/头,再于首免14-21天后加强1ml/头。也可以按说明书“仔猪14～21日龄：2ml/头” ?与喘气苗、蓝耳苗之间无明显相互免疫干扰作用。 ?母猪：2ml/头.次；圆环病毒污染严重猪场所有母猪：一年2—3次一刀切免疫，或者产前15—45天跟胎免疫。或普免和跟胎免疫结合。 ?使用方法：推荐时间：夏季早上接种，秋冬春下午接种。用前回温到25-30摄氏度左右，颈部肌肉注射。 ?保存方法：2—8℃。 ?免疫保护期：6个月（3个月）。
猪圆环病毒病概述：本病由猪圆环病毒(PCV)引起。病原-----PCV 1、分类：1995年列为圆环病毒科（Circoviridae)。在本科里还有其他的病毒，如鸡传染性贫血病毒（CA V）、鹦鹉喙羽病病毒（BFDV）。PCV、BFDV列为圆环病毒属，CA V列为环形病毒属。 2.核酸类型：DNA。其单链环状DNA染色质有1759个碱基组成。且已克隆测定了序列。有11个开放阅读框架，编码11种蛋白质。引起PMWS的PCV和引起PK-15污染的PCV，同属于圆环病毒属，且高度的同源，但抗原性及DNA序列方面有一定的差异。为了区别，日前将PCV－PK15称为PCV-1，而将PMWS称为PCV-2。3、形态大小：为无囊膜二十面体，大小约4～26.5nm。4、PCV可在猪源细胞上复制，但CPE不明显。5、存在：淋巴结，骨髓，血液。流行病学1、PCV易引起猪发病，一般不与CA V 和BFDV发生交叉感染，但用ELISA证实人血清有30%、小鼠血清12%~69%、牛血清35%抗体阳性。2、血清学调查表明：猪的阳性为20%~80%，且分布极其广，几乎世界各处都有。3、6~8周龄的猪多发，在PRRS阳性猪群中更易继发本病。4、发病率高，病死率有高有低，但即使不死，亦诱发其它疾病的发生。症状①仔猪断奶后多系统衰弱综合症；②猪皮炎肾病综合症；③相关性繁殖障碍综合症；④相关性肺炎； ⑤相关性肠炎；⑥相关性神经系统病。体重减轻，渐进性消瘦，虚弱。呼吸困难，过速，偶有咳嗽。皮肤苍白，结膜黄染。下痢、腹泻。中枢神经紊乱。病变：全身淋巴结肿大，尤以腹股沟淋巴结为最，肿大达3~4倍，切面充血、出血。肺弥漫性病变，比重增加，坚实成橡皮样，表面呈花斑状。肝花斑状，萎缩。脾肿大，切面呈肉状。肾被膜有白色病灶，肿大。回肠有花斑状。诊断：一、临诊腹股沟淋巴结肿大，脾、肾肿大，肝萎缩，渐进性消瘦，有诊断价值。二、实验1、原代肾细胞或PK-15可用作培养PCV-2，但在细胞培养物上还不能判是否有病毒存在。需要特异抗体用免疫荧光或直接免疫过氧化物酶染色确认。2、用PCR扩增病毒。3、待检材料做组织切片，观察有否包涵体。4、ELISA测定抗体。防治1、预防：圆环病毒-繁殖障碍与呼吸综合症二联苗。首免：10-15日龄。二免：30-35日龄。2、发病后的处理：1）在饲料中添加呋喃妥咽或病毒灵或病毒唑，多维。2）注射圆环·蓝毒康或圆环抗毒杀。3）注射猪用干扰素
猪圆环病毒病 1.猪圆环病毒病是以免疫抑制为主要特征的一类病毒性传染病,临床表现较为复杂.圆环病毒对免疫器官有严重的侵害性,可导致机体免疫系 统免疫的高度抑制.通俗的讲,圆环病毒可以是疫苗免疫失效,机体免疫力减弱或消失. 圆环病毒的代表性疾病有猪断奶后多系统衰竭综合症\母猪繁殖障碍\ 断奶猪和育肥猪呼吸道疾病\猪皮炎肾病综合症以及仔猪的先天性振颤.迄今为止,圆环病毒2型所引起的疾病日益引起了人们的关注. 猪断奶后多系统衰竭综合症主要发生在断奶后2~3周内的仔猪,一般是断奶后2~3天和一周发病较多,发病率为20%~60%,病死率为5%~35%.猪皮炎肾病综合症通常发生于12~14周龄的猪,发病率为12%~20%,病死率5%~35%.仔猪先天性振颤多见于出生后一周以内的小猪.由于圆环病毒 能破坏猪体的免疫系统,造成免疫抑制,引起继发性免疫缺陷,因而本病常与蓝耳病\细小病毒\伪狂犬\及猪副嗜血杆菌\气喘病\胸膜肺炎\巴 氏杆菌和链球菌等混合感染或继发. 2.临床症状: (1)仔猪断奶后多系统衰竭综合症:临床表现在多个系统的衰竭为特征.精神不振,食欲不佳,毛长较瘦,眼毛也很长,毛乱,生长发育不良,进行 性消瘦;贫血,皮肤苍白,肌肉衰弱无力,还有的表现咳嗽,喷嚏,呼吸困难.腹股沟淋巴结,下颌淋巴节,肿大到正常的2~5倍,有细菌混合感染时,淋巴结可见化脓症状,部分病例可见皮肤黏膜黄染,下痢及嗜睡.肺部有不同程度的病变.
(2)皮炎肾病综合症:临床表现为皮肤发生圆形或不规则型的隆起,呈现红色或紫色,中央为黑色的病灶.病灶常融合为带状或条状.病灶通常在后躯后肢和腹部最早发现.剖检所见:肾肿大苍白常被小出血点覆盖. (3)仔猪先天性振颤.发病仔猪站立时振颤,由轻变重,睡觉或卧下时减轻,受外界刺激时可加重或引发振颤.严重影响吃奶,以致死亡. 3.防治措施: (1)严格执行全进全出制度,良好环境卫生,良好通风,降低氨气及有害气体浓度,饲养密度适当,减少应激. (2)定期消毒,可用过氧乙酸及火碱消毒. (3)预防可给母猪阿莫西林150克,80%泰妙菌素125克,70%黄芪200克混合拌料.断奶猪每吨料加80%泰妙菌素50 克阿莫西林150克,黄芪200克,强力霉素50克. (4)对于以发病的猪只,可用兽医免疫处方5毫升兑头孢噻呋粉针或者用血清圆蓝联抗配合速可必宁进行治疗,临床治疗中以取得显著疗效.对于大群拌以70%黄芪和高浓度阿莫西林300克每吨可有效的控制继发感染,使本病得到有效治疗.
猪圆环病毒感染的症状及防治 猪圆环病毒感染是由猪圆环病毒引起的猪的一种新的传染病。本猪病可导致猪群产生严重的免疫抑制，从而容易导致继发或并发其他传染病。_ 目前，本病已遍及世界各养猪国家和地区。我国于2001年**发现。目前该病在我国猪群中已广泛流行，给养猪业造成了巨大损失。猪圆环病毒病已成为严重危害世界养猪业的一种新的传染病。 只是猪圆环病毒（PVC）的主要宿主。猪对PVC有较强的易感性，各种年龄的猪均可感染，但仔猪感染后发病严重。胚胎期或生后早期感染的猪，往往在断奶后才可以发病，一般集中在5—18周龄，尤其在6—12周龄**为多见。怀孕母猪感染PVC后，可经胎盘垂直传染给仔猪，并导致繁殖障碍。感染猪可自鼻液、粪便等废物中排除病毒，经消化道、呼吸道引起感染。 血清学调查发现，国外猪群PVC阳性率达20%—80%，国内的阳性率也达52.8%—100%。 自PVC发现以来，PVC-1和PVC-2已经被证实为世界性流行和存在的病毒。其中，PVC-2病毒在我国猪群中的感染已经相当严重。 病毒是致病的必要因素，但不是充分条件，必须在其他因素的共同参与下才能导致明显的和严重的临诊病症，这些因素除了一些常见的、重要的病原体外，还包括饲养管理不善、通风不良、温度不适、免疫接种应激、不同来源和日龄的猪混养等。本病的发病率和死亡率变化很大，
依据猪群健康状况、饲养管理水平、环境条件及病毒类型等而定，一般在10%—20%，个别发病、死亡率可达40%。 猪病症状： 猪圆环病毒感染后潜伏期均较长，即使胚胎期或出生后早期感染，也多在断奶以后才陆续出现症状。PVC-2感染可以引起以下多种病症： 1、猪断奶后多系统衰竭综合症2 l 通常发生于断奶仔猪，1997年**报道，随后美洲、欧洲和亚洲各国相继报道了该病。现已证实PVC-2是猪断奶后多系统衰竭综合症的重要病原，繁殖与呼吸综合症病毒、细小病毒、伪狂犬病病毒等病原混合感染和免疫刺激可以加重该病的危害程度。 患猪表现为精神欠佳、食欲不振、体温略偏高、肌肉衰弱无力、下痢、呼吸困难、眼睑水肿、黄疸、贫血、消瘦、生长发育不良，与同龄猪体重相差甚大，皮肤湿疹，全身性的淋巴结病变，尤其以腹股沟、肠系膜、支气管以及纵膈淋巴结肿胀明显，发病率为5%—30%，死亡率为5%—40%不等，康复猪成为僵猪。 2、皮炎和肾病综合症; 通常发生于8—18周龄的猪。在1993年**报道于英国，随后在美国、欧洲和南非、亚洲均有报道。发病率为0.15%—2%，有的时候可高达7%。以会阴部和四肢皮肤出现红紫色隆起的不规则斑块为主要症状。患猪表现为皮下水肿，食欲丧失，有时体温上升。通常在3d内死亡，有时可以维持2—3周。 3、增生性坏死性间质性肺炎.
龙源期刊网 https://www.doczj.com/doc/602192740.html, 猪圆环病毒的临床表现及防治措施 作者：刘红亮 来源：《乡村科技》2017年第30期 [摘要] 猪圆环病毒是一种具有较大危害的传染性疾病，患猪多出现腹泻、体质下降、贫 血等不同临床表现，无疑会影响猪群正常发育，严重的会导致猪群死亡，影响养猪业经济效益。基于此，本文对猪圆环病毒临床表现进行分析，并提出相应的防治措施，为养猪人员提供参考。 [关键词] 猪圆环病毒；临床表现；防治措施 [中图分类号] S858.28 [文献标识码] B [文章编号] 1674-7909（2017）30-73-2 1974年，德国科学家发现猪圆环病毒，但没有对其给予高度重视，导致养猪业出现巨大 的经济损失。我国于2001年发现此病毒，由于还没有成功研制出猪圆环病毒疫苗，因而防治效果不理想。但是，可以结合临床表现提出相应的防治策略，降低发病率。 1 猪圆环病毒的临床表现 1.1 多系统衰竭综合征 一般该临床表现多出现在哺乳中后期，病猪多表现被毛粗乱、精神不振、食欲差、呼吸困难、食欲差以及不同程度的咳嗽、喘气、皮肤苍白等现象；部分病猪耳朵出现蓝色，腹部下乳头皮肤为蓝紫色，个别病猪出现顽固性腹泻。经剖检发现，患猪耳朵和腹部等区域皮肤有大量蓝色出血点，肾脏有白斑，肺肿大肉变，肠系膜淋巴结明显肿大；个别病猪的结肠外浆膜层有明显的淋巴滤泡增生，情况较为严重的患猪可出现局灶性坏死现象[1]。 1.2 肾病综合征 肾病综合症集中发生于生长育肥猪和保育猪，病猪多出现减食、轻度发热现象，尤其是在皮肤上出现不规则或圆形红色痘点，10～20 d后这些小痘点会逐渐脱皮或变成黑色，发病率较低。经剖检可知，患猪肺部有不同程度肉样变，肾脏也有白色坏死斑[2]。 1.3 呼吸道综合征 呼吸道综合征多出现在生长猪和保育猪，春夏秋冬四季均会发生。患猪主要出现出体温偏高、食欲不振、咳嗽、喘气和流鼻水，情况严重的会出现张口呼吸，有较高病死率。如果遇到气候转变或喂食霉变饲料，则会加重病情[3]。经剖检可知，患猪肺肿大，甚至出现胸腔积液 和肺粘连等病变。
猪圆环病毒病临床症状 近几年本病在世界许多国家包括我国广泛流行，给养猪业造成重大损失。受到各国的普遍关注。本病以皮肤苍白、腹泻、呼吸困难、渐进性消瘦为特征。经过几年对本病的诊断，笔者积累了一些临床症状的观察和剖检变化的经验，报告如下： 临床症状：圆环病毒侵害猪体后，根据猪的大小可分为四种类型： 1.传染性先天性振颤（CT）：母猪怀孕期间无任何异常表现，仔猪出生或几小时后出现震颤，共济失调，吮乳时，口频频点击乳头附近，但需一定时间才能吸住乳头，有的仔猪由于口部颤抖厉害，根本就吸不住乳头，一部分仔猪因此饿死或被母猪压死。此时需要人工辅助哺乳。同一窝仔猪中有个别发病的，也有全部发病的，但轻重程度各有差异，同一窝仔猪中如有个别发病的仔猪，其康复时间快，颤抖也较轻。大部分或全部发病仔猪，颤抖较重，恢复相对较慢。卧下或睡眠时颤抖较轻或停止，观察颤抖停止的仔猪与正常猪基本一样。耐过的仔猪，大部分满月后可自行康复，康复仔猪无后遗症。极个别猪颤抖延续到成年。 2.断奶仔猪多系统衰竭综合征（PMWS）：常见于断奶后至16周龄的仔猪，可见断奶前膘肥体壮的仔猪，断奶后逐渐消瘦，断奶前后形成强大反差。（养殖户常说的：别说长了，还缩小哪），皮肤苍白，个别猪黄疸，毛长，毛稠、毛乱无光泽。可见猪年龄不大，但是都带老相。呼吸加快、咳嗽。行走无力，精神沉郁。个别严重病例耳水肿增厚，其上布满红紫斑和紫色的疙瘩，眼周围充血、瘀血红肿。部分病猪腹泻黑色粪便。提起两后肢摆动，感觉绵软、衰竭、挣扎无力。使猪仰卧可见腹股沟淋巴结明显肿大，阉割后的仔猪提起后肢或仰卧时，凸起的一对腹股沟淋巴结，很多人认为是仔猪的两个睾丸。腹泻，尿黄或排尿到最后时，可见灰白色絮状物。 3.皮炎肾衰综合症（PDNS）：本病是架子猪易得一种以皮肤炎症、肾小球肾炎和间质性肾炎为特征的疾病。皮肤初期潮红，中后期皮肤苍白，表面有圆形或不规则形凸起的疙瘩，疙瘩先后呈红色、紫红色或顶部黑色结痂。有的猪几乎一夜之间遍及全身，有的猪周身皮肤紫红色或灰紫色。但猪并未表现强烈的痒感。本病的紫疙瘩是布满整个皮肤，基本没有毛稀处多，密处少之分。病愈的猪疙瘩消失后，留下明显的痕迹。有的猪可见眼睑稍肿，眼睫毛上附着较硬的污垢，但并未见眼角有大量脓性分泌物。急性病例可见体温升高、厌食、腿软等症状。 4.繁殖障碍型：哺乳母猪在仔猪断奶后，母猪长时间不发情或虽然发情，却屡配不孕；怀孕母猪体温正常或稍高，皮肤暗红粗糙，阴门上可见黄豆大小的紫泡，流产、早产，产出木乃伊胎或弱仔。 剖检变化：传染性先天性振颤（CT）：剖检病死仔猪，各器官无肉眼可见的变化。病理组织学可见脊髓髓磷脂沉着迟缓。断奶仔猪多系统衰竭综合征（PMWS）：肌肉色淡，萎缩，肺肿胀呈间质肺炎，质硬肺泡出血，心叶、尖叶萎缩；脾肿大肉变。淋巴结的变化较复杂，一般呈灰白色肿大，切面外翻，也有呈深浅不一的暗红色，但是，都有一个较显著的特点，肿大4-5倍。 皮炎肾衰综合症（PDNS）： 整个脾肿大、梗死、质地坚硬，用针从脾的中间穿过提起，可见脾两头稍下垂似扁担状。肾苍白水肿，体积和重量均超过正常猪的4倍，切面肾盂和肾髓质弥散性出血。肾包膜有紫红色淤血斑点。肾上腺切面可见坏死灶。肺肉变，下缘有大的淤血斑，表面有点状出血。大肠有几个较深的溃疡灶，肌肉色淡。淋巴结灰白色肿大。 繁殖障碍型：流产、早产和产出的木乃伊胎或弱仔，暂时还没有能明显区别与其它繁殖障碍性疾病的肉眼可见的病变。综合防治：用抗生素治疗猪圆环病毒病无太大的效果，仅能减少继发性的细菌感染。子猪断奶后3～4周是预防猪圆环病毒病的关键时期。因此，最有效的方法和措施是尽可能减少对断奶子猪的刺激。避免过早断奶和断奶后更换饲料，断奶后要继续饲喂断奶前的饲料至少10天；在断奶子猪饲料中按每吨饲料中添加1.2公斤利高霉素，15％金霉素2.5公斤或强力霉素150克，阿莫西林150克，连续饲喂15天；避免断奶后并窝并群；避免在断奶前、后1周内多次注射疫苗；降低饲养密度，为子猪提供舒适的环境。 子猪用药：哺乳子猪在3、7、21日龄注射三针得米先，断奶前1周至断奶后半个月，在每吨饲料中添加1.5公斤利高霉素或强力霉素150克，断奶前后各饲喂1周或断奶后半个月。 母猪用药：在母猪产前1周和产后1周，按每吨饲料中添加1.2公斤利高霉素，2.5公斤15％金霉素，150克阿莫西林进行饲喂。 做好猪瘟、蓝耳病、猪细小病毒、伪狂和喘气病等疫苗的免疫接种工作。
猪圆环病毒病原检测方法及应用 动医112班 动物科学学院动物医学专业 2012年7月11日 摘要：猪圆环病毒(PCV)是近年受到广泛关注的危害世界养猪业的重要病源之一。PCV具有PCV-1和PCV-2两种基因型。猪圆环病毒（PCV）感染引起的猪圆环病毒病，是以免疫抑制为特征的类病毒性传染病，临床表现主要是由PCV-2引起的仔猪断奶后多系统衰竭综合征。特别是猪圆环病毒2型感染引起的不同生长阶段猪的免疫系统损伤，造成猪机体高度易感，使养猪业蒙受巨大的损失。因此对猪圆环病毒感染的检测技术方法至关重要，且意义重大。文章对就近几年国内外对猪圆环病毒检测技术，包括病毒的分离、电镜观察、聚合酶链式反应（PCR）间接免疫荧光试验、免疫组织化学技术检测、原位核酸杂交试验等进行综述。特别是对猪圆环病毒2型检测技术及应用做了介绍。 关键词：猪圆环病毒；检测方法；应用。 猪圆环病毒（PCV）为圆环病毒科圆环病毒属，是迄今发现的最小的动物DNA 病毒。该病毒基因组为单股环状DNA，无囊膜，粒子呈20面体对称，直径17～20nm。根据PCV的抗原性、核苷酸序列及致病性将PCV分成PCV-1和PCV-2两种基因型。猪圆环病毒是近年来备受人们关注的一种在世界各地广泛存在的慢性疾病，是一系列疾病的总称。自1974年Tischer I等［1］首次发现猪圆环病毒（Porcine circovirus,PCV）以来，随着研究的深入，发现PCV-1对猪无致病性，但是PCV1能产生血清抗体，猪群中普遍存在PCV-1，广泛存在于猪源细胞及正常猪体内各组织中。PCV-2对猪有致病性，与传染性先天性震颤（CT）、断奶仔猪多系统衰竭综合征（PMWS）、皮炎肾衰竭综合征（PDNS）、猪呼吸道疾病综合征（PRDC）及妊娠母猪繁殖障碍相关，其可在猪源细胞培养物中繁殖，不产生细胞病变,易被忽视，因此猪源细胞疫苗或诊断抗体造成潜在的危害。PCV-2导致的断奶仔猪多系统衰竭综合征（PMWS）造成了很大的经济损失。同时，PCV-2感染一般伴随着猪繁殖与呼吸综合征（PRRS）感染，造成对猪的免疫系统的损伤，引起免疫抑制，降低猪的抵抗力，造成其他病原（细菌、病毒、真菌和寄生虫）的续发和并发感染，提高病猪的死亡率造成更大的经济损失。由于猪群中普遍存在着PCV 抗体，单一的抗体阳性不能确诊为阳性，确诊必须依靠实验室方法检测出PCV-2抗原或核酸。由于病毒复制困难，所以检测和防控研究非常困难。为此，各国兽医工作者进行了大量的研究，建立了多种高度特异性的病毒学、免疫学和分子生物学诊断方法。文章对目前国内外PCV的检测方法及应用进行综述。 1病毒的分离鉴定技术 猪圆环病毒的分离培养多数是从病猪中采取肺、肝、脾、淋巴结和扁桃体等组织,制成组织匀浆,用氯仿处理除去有囊膜的病毒,接种PK-15细胞,利用氨基葡萄糖短时间处理感染细胞,以促进病毒的增殖。对于PCV-2的分离方法具体是将病死猪组织（淋巴结、肝脏、肺脏、肾脏或脾脏）研磨粉碎，然后与PBS按1:5混合，反复冻融3次，离心，去上层清液，用氯仿抽提，除去有囊膜的病毒
猪圆环病毒即PCV1和PCV2。PCV1为非致病性的病毒。PCV2为致病性的病毒。PCV2是断奶仔猪多系统衰竭综合征、皮炎与肾病综合征(PNDS)的主要病原。 2016年美国发现一种新型猪圆环病毒，命名为猪圆环病毒3型（PVC3）。对猪致病性及在猪圆环病毒相关疾病中作用以及现有商品化PCV2疫苗对其免疫效力等有待进一步研究。 为已知的最小的动物病毒之一，PCV对外界理化因子的抵抗力相当强。 在淋巴细胞内繁殖，严重侵害猪的免疫系统:病毒与巨噬细胞、单核细胞、组织细胞和胸腺巨噬细胞相伴随，导致患猪体况下降，形成免疫抑制。 推荐；治疗时每吨饲料中添加猪益肽2kg，连用5-7天，病发症状基本消失。 预防时每吨饲料中添加猪益肽1kg，连用3-5天，也可长期添加。让猪自身免疫力和抗病 能力提高5倍-10倍， 特点：从高免猪血清抗体中分离，冻干，包被得到的特异性血清冻干粉，其具有抗细菌，抗病毒和抗外毒素等多种活性，并具有调理，凝集和沉淀病原体，以及中和病毒的作用.能有解机体发热、炎症和疼痛。该药作用迅速，30分钟内可减轻疼痛 传播途径：水平传播、垂直传播。猪在不同猪群间的移动是该病毒的主要传播途径，也可通过被污染的衣服和设备进行传播。 PCV2抵抗力强，在PH3的酸性环境及72℃的高温环境中也能存活一段时间，氯仿作用不失活，无血凝活性。烧碱、甲醛等消毒剂敏感。 PCV感染可引起猪的免疫抑制，从而使机体更易感染其他病原，这也是圆环病毒与猪的许多疾病混合感染有关的原因。最常见的混合感染有圆环、蓝耳、副猪、链球菌，圆环、蓝耳、喘气病，圆环、蓝耳、喘气、传胸、伪狂犬。其病猪的病死率高的可达25%~40%。