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基因工程试题

基因工程试题
基因工程试题

武汉大学生命科学学院

2006-2007学年度第二学期期末考试

<<基因工程>>A试卷

姓名学号专业得分

答案请写在答题纸上,写在试卷上无效.

1.比较在大肠杆菌、植物和动物个体中表达真核生物基因时的优缺

点。(16分)

2.谈谈核酸杂交的基本原理,并举例说明Southern blot在基因工

程中的应用。(12分)

3.什么叫基因文库?既然基因文库是没有“目录的图书馆”,那为什

么要构建基因文库?(10分)

4.DNA测序中双脱氧酶法的原理(8分)

5. 已知一个克隆在质粒载体上的500bpDNA 外源片段,请设计并用

3种标记方法方案来对这个外源片段进行标记。(18分)

6.试述PCR技术的基本原理,如果想通过PCR技术从一个生物基因

组中扩增一个约500bp的基因片段,再和载体连接克隆,然后转入大肠杆菌中,请描述其克隆过程(包括检测)。(18分)

7.叙述植物基因枪和农杆菌介导的转化DNA方法的原理,并比较两

者的优缺点?(18分)

老师给的重点:

1.用DNA制备探针标记

2.PCR相关问题

3.转基因动物的安全性

4.重组DNA与空载体自连

5.噬菌体/农杆菌为基础的载体与质粒相关特点

6.E.coli中高效表达外源真核基因的原理

7.植物转基因方法(农杆菌、基因枪...)

8.动物转基因技术

9.Southern blot原理以及在基因工程中的应用

10.PCR克隆in E.coli (PCR从基因组中扩增DNA片段+t载体转入大肠杆菌筛选双抗性蓝白斑菌落)

11.比较以大肠杆菌、植物、动物作为外源真核基因表达系统的优缺点

12. 用大肠杆菌作为受体细胞表达目的基因的原因

1.用DNA制备探针标记。

a.切口平移法:控制DNaseI的浓度,就可以在双链DNA分子的一条链的有限位置上打

开切口,形成3-OH末端(这条链即成为引物)。DNA聚合酶I把一个带有标记物的dNTP就加在这引物的3-OH末端,而它的5-3的核酸外切酶活性将切除5-单核苷酸,同时依次添加新的核苷酸到3一侧,其结果使切口沿着DNA平移,这就叫切口平移(Nick translation)

b.随机引物标记。能与任何DNA配对互补的一小段DNA序列叫随机引物。DNA聚合酶

klenow大片段能在随机引物的引导下以带有标记物的dNTP为原料合成新的与模板DNA互补的探针。

c.PCR法:标记物的dNTP ,dNTP. 引物(插入片段两端的序列)等扩增合成新的带有标

记物的DNA。

d.末端标记法。用磷酸酶去除DNA末端磷酸,再用磷酸激酶将32P加入DNA末端标记

DNA。

2.PCR相关问题。

出现非特异性扩增带

PCR扩增后出现的条带与预计的大小不一致,或大或小,或者同时出现特异性扩增带与非特异性扩增带。非特异性条带的出现,其原因:一是引物与靶序列不完全互补、或引物聚合形成二聚体。二是Mg2+离子浓度过高、退火温度过低,及PCR循环次数过多有关。其次是酶的质和量,往往一些来源的酶易出现非特异条带而另一来源的酶则不出现,酶量过多有时也会出现非特异性扩增。其对策有:必要时重新设计引物。减低酶量或调换另一来源的酶。降低引物量,适当增加模板量,减少循环次数。适当提高退火温度或采用二温度点法(93℃变性,65℃左右退火与延伸)。Mg2+浓度为1.5~2.0mmol/L为宜。Mg2+浓度过高,反应特异性降低,出现非特异扩增,浓度过低会降低Taq DNA聚合酶的活性,使反应产物减少。

3.转基因动物的安全性。

1.从基因工程的技术程序看,转基因动物性食品的食用安全性是可以保证的。首先,转基因技术是把需要转移的目的基因注射到细胞核中,使之与细胞核DNA融合,而这个过程需要很严格的试验条件,这也正是转基因成功率较低的原因之一。人们所吃的食物除了基因表达出来的蛋白,还包含基因的载体DNA本身,这些物质进入人体消化道之后被分解,即使没有完全分解,基因要进入人体细胞的细胞核并完成与DNA的融合而产生变异,也不会比实验室条件下容易。其次,转入动物体内的基因都是天然存在的,人们平时的食

物中就含有这些基因,用转基因技术只是把这种基因转入其他的动物体内进行生产后再食用,因此,从理论上讲,转基因动物食品是安全的。但转基因动物性食品对人体健康也可能存在潜在的影响,如上述讲到的过敏原的问题,目的基因产物如果是潜在的过敏原,那么该转基因食品就有可能引起人体的过敏。

2;②转基因动物中的新基因给食物链其他环节造成了无意的不良后果;③。强化转基因动物的生存竞争性对自然界生物多样性的影响

4.重组DNA和空载自连

5.噬菌体农杆菌为基础的载体与质粒相关的特点

6.涉及三个方面:1强化蛋白质的生物合成(重组质粒的拷贝数,转录水平和翻译速率);a,启动子。高水平表达的最佳启动子必须具备的条件:(1)它必须是一种强启动子,能够使克隆基因的蛋白质产物的表达量占细胞总蛋白的10%-30%;(2)这种启动子应该是诱导型的,能通过简单的方式使用廉价的诱导物而得以诱导。B。使用有效的终止子。C。SD序列。D。选用偏爱密码子。E。增加质粒的拷贝数。

2抑制蛋白质产物降解;以包涵体、分泌蛋白、或融合蛋白形式表达。

3恢复维持蛋白质特异性空间结构。

7.植物转基因的方法

1.DNA直接转移法

A.化学刺激法

B. 电击法

C.显微注射法

D.脂质体介导法

E.基因枪法。

F.微激光束法

2.载体介导法。

农杆菌介导法

8.动物转基因技术。

1.显微注射法。在显微操作仪下用极细的微吸管将在体外构建的外源目的基因注射到处于原核时期的受精卵的原核中,外源基因在受精卵繁殖过程中通过DNA的复制而整合到动物基因组中,再通过胚胎移植技术将整合有外源基因的受精卵移植到受体的子宫内继续发育,进而得到转基因动物

2.逆转录病毒法。逆转录病毒法是将外源目的基因和逆转录病毒载体重组,再使之包装成为高滴度病毒颗粒,人为感染着床前或着床后的胚胎,也可直接将胚胎与能释放逆转录病毒的单层培养细胞共孵育以达到感染的目的。携带外源基因的反转录病毒DNA依靠逆转录病毒的整合酶及其末端特异性核苷酸序列可以整合到宿主染色体上,经过杂交筛选即可获得含有目的基因的动物。

3.胚胎干细胞法。将外源目的基因转移到ES细胞中,外源基因整合到ES细胞的基因组中,把ES细胞移入胚泡期的胚胎,再把这样的胚胎移植到假孕的代孕子宫内发育,产生出嵌合体动物,进一步获得生殖系携带外源基因的纯合转基因动物(嵌合体动物之间杂交,筛选出纯合转基因后代)。

4.精子载体法。它是直接用精子作为外源DNA的载体,精子直接与外源DNA混合培养时,外源DNA可直接进入精子头部,通过受精将外源基因引入动物细胞中。

5.经膜处理的携外源DNA精子的卵母细胞微注射

6.体细胞核移植法。将外源目的基因导入能传代培养的动物体细胞(包括动物成体体细胞、胎体成纤维细胞等),以这些动物体细胞为核供体,通过显微操作或电融合使核供体与相应的核受体(去核的原核胚或成熟的卵母细胞)不经过有性繁殖过程,在体外直接进行重组融合,对重组的胚进行胚胎移植,进而得到带有外源基因的转基因动物。

9.Southernblot 原理及在基因工程中的应用

待分析的基因组DNA或其它DNA首先用一种或几种限制性核酸内切酶消化,消化后的DNA片段通过琼脂糖凝胶电泳按照分子量的大小进行分离,凝胶经碱变性处理,将DNA 分子变性成单链,经毛细管作用或物理方法将凝胶中的单链DNA分子从胶上转移到固相支持物上(一般使用的是尼龙膜和纤维素膜)。然后用标记的DNA或RNA探针对附着于膜上的DNA进行杂交来检测这些被转移的DNA片段,与探针有同源性的DNA片段在膜上的位置可以通过特定的检测方法如放射自显影或显色而显示。

遗传病诊断,DNA图谱分析,检测样品中的DNA及其含量,PCR产物分析等

检测重组子。从基因文库中筛选目的基因。Southern杂交可以确定外源基因在植物中的组织结构、外源DNA整和的位置及拷贝数、转基因植株F1世代外源基因的稳定性。

10.

11.比较一大肠杆菌。植物,动物作为外缘真核基因表达系统的优缺点。

大肠杆菌:优点结构简单,生理生化和遗传背景知识,尤其是其基因表达调控机制有了清楚的了解;(2)易于大规模培养,成本低廉;(3)经过了遗传改造,已发展为一种安全的基因工程实验系统,拥有各种不同的菌株和载体系列缺点:(1)真核基因具有内含

子,所以只能用其cDNA;(2)许多真核生物基因仅在大肠杆菌中合成无特异性空间结构的多肽链;(3)许多真核基因的蛋白质产物,都要经受翻译后的加工修饰,而大肠杆菌缺乏蛋白质加工系统;(4)大肠杆菌内源性蛋白酶易降解外来的真核生物基因所表达的蛋白质分子;(5)大肠杆菌细胞膜间隙中含有大量的内毒素,痕量的内毒素即可导致人体热原反应。

植物:优点1)可对表达产物进行转译后加工,保持了产物的天然特性。2)转基因植物中的外源基因可通过植物杂交的方法进行基因重组而达到在植物体内积累多基因的目的。3)植物表达系统的产物可以直接储存在植物种子和果实中,无需冷连系统设备进行储藏运输,故易于长距离运输和普及推广。不仅降低了成本且方便。4)疫苗抗原基因转入可食用的植物后,可供人直接服用或饲喂动物,不需要分离提纯。这样可节约许多仪器设备,降低生产成本,使用方便。5)粘膜免疫是病毒性腹泻的免疫保护机制,但在启动粘膜免疫方面尚属难题。转基因植物细胞是可以启动粘膜免疫的有效途径。

缺点:1)生产周期长。2)

动物:优点:表达产物能充分修饰且具有稳定的生物活性,产品成本低,并可进行大规模的生产;产品质量高,可诱导分泌,易提纯,不污染环境。

缺点:1)转基因动物成功率低2)外源基因在动物基因组中的随机整合,可能会引起宿主细胞基因的插入突变、缺失突变及宿主基因的扩增重排和移位,也可能激活正常状态下处于关闭状态的基因,从而导致动物表型的改变甚至造成动物不育或死亡。3)外源基因表达水平不高4)安全性问题

12.用大肠杆菌作为受体细胞表达目的基因的原因。

1.结构简单,生理生物背景和遗传背景清楚。尤其是对其基因表达的调控机制有清楚的了解。2。易于大规模培养,成本低廉。3。经过遗传改造,已经发展成为一种安全的实验系统。拥有不同的菌株及载体系列。

基因工程考试试题.doc

基因工程 一名词解释 DNA,1、限制与修饰系统:限制酶的生物学功能一般被认为是用来保护宿主细胞不受外源DNA的感染,可讲解外 来 从而阻止其复制和整合到细胞中。一般来说,与限制酶相伴而生的修饰酶是甲基转移酶,或者说是甲基化酶,能保护 自身的 DNA不被讲解。限制酶和甲基转移酶组成限制与修饰系统。 2、各种限制与修饰系统的比较 Ⅱ型Ⅰ型Ⅲ型 识别位点4~6bp,大多为回文序列二分非对称5~7bp 非对称 切割位点在识别位点中或靠近识别位点无特异性,至少在识别位点外100bp 识别位点下游 24~26bp 简答 1. 何谓 Star activity?简述Star activity的影响因素及克服方法? 答:在极端非标准条件下,限制酶能切割与识别序列相似的序列,这个改变的特征称为星星活性。 pH 引起星星活性的的因素:①高甘油浓度(>5%);②酶过量( >100U/μl );③低离子强度( <25mmol/L);④高(> ;⑤有机溶剂如DMSO (二甲基亚砜)、乙醇、乙二醇、二甲基乙酰胺、二甲基甲酰胺等;⑥用其它二价阳离子 星星活性的抑制措施:①减少酶的用量,避免过量酶切,减少甘油浓度;②保证反应体系中无有机溶剂或乙醇;③提高离子强度到100 ~ 150mM(在不抑制酶活性的前提下);④降低反应pH至;⑤使用Mg2+作为二价阳离子。 2. 试回答影响限制性内切核酸酶切割效率的因素?(影响酶活性的因素?) 答:外因:反应条件、底物纯度(是否有杂质、是否有盐离子和苯酚的污染)、何时加酶、操作是否恰当,反应体系的选择、反应时间的长短 内因:星星活性、底物甲基化、底物的构象 3、 DNA末端长度对酶切割的影响 答:限制酶切割 DNA 时,对识别序列两端的非识别序列有长度要求,也就是说在识别序列两端必须要有一定数量的 核苷酸,否则限制酶将难以发挥切割活性。在设计PCR引物时,如果要在末端引入一个酶切位点,为保证能够顺利切 割扩增的 PCR产物,应在设计的引物末端加上能够满足要求的碱基数目。一般需加 3 ~4 个碱基对。 4、何为载体?一个理想的载体应具备那些特点? 答:将外源 DNA 或目的基因携带入宿主细胞的工具称为载体。载体应具备:①在宿主细胞内必须能够自主复制(具 备复制原点);②必须具备合适的酶切位点,供外源DNA 片段插入,同时不影响其复制;③有一定的选择标记,用于 筛选;④其它:有一定的拷贝数,便于制备。 5 抗性基因( Resistant gene)是目前使用的最广泛的选择标记,常用的抗生素抗性有哪几种?并举两例说明其原理? 答:氨苄青霉素抗性基因( ampr)、四环素抗性基因(tetr )、氯霉素抗性基因( Cmr)、卡那霉素和新霉素抗性基因( kanr , neor )以及琥珀突变抑制基因supF 。 ⑴青霉素抑制细胞壁肽聚糖的合成,与有关的酶结合,抑制转肽反应并抑制其活性。氨苄青霉素抗性Ampr 编码一个酶,可分泌进入细胞的周质区,并催化β - 内酰胺环水解,从而解除氨苄青霉素的毒性。 ⑵四环素与核糖体 30S 亚基的一种蛋白质结合,从而抑制核糖体的转位。 Tetr 编码一个由 399 个氨基酸组成的膜 结合蛋白,可阻止四环素进入细胞。 6. 何为α - 互补?如何利用α - 互补来筛选插入了外源DNA 的重组质粒? 答:α - 互补指 lacZ 基因上缺失近操纵基因区段的突变体与带有完整的近操纵基因区段的β - 半乳糖苷酶阴性的突变体之间实现互补。α - 互补是基于在两个不同的缺陷β-半乳糖苷酶之间可实现功能互补而建立的。实现α- 互补主要有两部分组成:LacZ △ M15 ,放在 F 质粒或染色体上,随宿主传代;LacZ' ,放在载体上,作为筛选标记,当在 LacZ' 中插入一个片断后,将不可避免地导致产生无α- 互补能力的β-半乳糖苷酶片断。在诱导物IPTG 和底物 X-gal (同时可作为生色剂)的作用下,含重组质粒的菌落不能产生有活性的β-半乳糖苷酶,不能分解 X-gal ,呈现白色,而含非重组质粒的菌落则呈现兰色。以此达到筛选的目的。 7、试简述λ噬菌体的裂解生长状态Lytic growth 和溶原状态 Lysogenic state 两种循环的分化及其调节过程? 答:裂解生长状态是λ噬菌体在宿主中大量复制并组装成子代λ噬菌体颗粒,导致宿主细胞裂 解。溶原状态为λ噬菌体基因组 DNA 通过位点专一性重组整合到宿主染色体DNA 中随宿主的繁殖传到子代细胞。调节过程:由感染复数

基因工程习题及答案

第二章习题 一、单选题 1.在基因操作中所用的限制性核酸内切酶是指( B ) A.I类限制酶 B. II类限制酶 C. III类限制酶 D.核酸内切酶 E. RNAase 2.下列关于同裂酶的叙述错误的是( B ) A. 是从不同菌种分离到的不同的酶,也称异源同工酶。 B. 它们的识别序列完全相同。 C. 它们的切割方式可以相同,也可以不同。 D. 有些同裂酶识别的完整序列不完全一样,但切割位点间的序列一样。 E. 两种同裂酶的切割产物连接后,可能会丢失这两个同裂酶的识别位点。 3. 多数限制酶消化DNA的最佳温度是( A ) A. 37℃ B.30℃ C.25℃ D.16℃ E.33℃ 4. 下列关于限制酶的叙述错误的是( B ) A. I类限制酶反应需要 Mg2+、ATP和S-腺苷蛋氨酸。 B. II类限制酶反应需要Mg2+、ATP。 C. III类限制酶反应需要Mg2+、ATP,S-腺苷蛋氨酸能促进反应,但不是绝对需要。 D. I、III类限制酶对DNA有切割和甲基化活性,II类限制酶对DNA只有切割活性而无甲基化活性。 E. II类限制酶要求严格的识别序列和切割点,具有高度精确性。 5. 如果一个限制酶识别长度为6bp ,则其在DNA上识别6bp的切割概率为( D ) A. 1/44 B. 1/66 C. 1/64 D.1/46 E. 1/106 6. 多数II类限制酶反应最适PH是 ( C ) A. PH:2-4 B. PH:4-6 C. PH:6-8 D. PH:8-10 E. PH:4-10 7. 下列关于限制酶反应的说法错误的是 ( D ) A. 限制酶识别序列内或其邻近的胞嘧啶、腺嘌呤或尿嘧啶被甲基化后,可能会阻碍限制酶的酶解活性。 B. 许多限制酶对线性DNA和超螺旋DNA底物的切割活性是有明显差异的。 C. 有些限制酶对同一DNA底物上不同酶切位点的切割速率会有差异。 D. 限制酶反应缓冲系统一般不用磷酸缓冲液,是由于磷酸根会抑制限制酶反应。 E. BSA对许多限制酶的切割活性都有促进作用,所以酶切反应中常加入一定量的BSA。 8. II类限制酶反应中必须的阳离子是( C )

基因工程选择题试题库,很全

2. 第一个作为重组DNA载体的质粒是() (a) pBR322 (b)ColEI (c)pSCI01 (d)pUCI8 3. 关于宿主控制的限制修饰现象的本质,下列描述中只有()不太恰当 (a) 由作用于同一DNA序列的两种酶构成 (b) 这一系统中的核酸酶都是U类限制性内切核酸酶 (c) 这一系统中的修饰酶主要是通过甲基化作用对DNA进行修饰 (d) 不同的宿主系统具有不同的限制-修饰系统 4. H型限制性内切核酸酶:() (a) 有内切核酸酶和甲基化酶活性且经常识别回文序列 (b) 仅有内切核酸酶活性,甲基化酶活性由另外一种酶提供 (c) 限制性识别非甲基化的核苷酸序列(d)有外切核酸酶和甲基化酶活性(e) 仅有外切核酸酶活性,甲基化酶活性由另外一种酶提供 5?下面有关限制酶的叙述哪些是正确的?() (a) 限制酶是外切酶而不是内切酶 (b) 限制酶在特异序列(识别位点)对DNA进行切割 (c) 同一种限制酶切割DNA时留下的末端序列总是相同的 (d) 一些限制酶在识别位点内稍有不同的点切割双链DNA,产生黏末端 (e) 一些限制酶在识别位点内相同的位臵切割双链DNA,产生平末端

6 .第一个被分离的U类酶是:() (a) EcoK (b)Hind 川(c)Hind U(d)EcoB 7?在下列进行DNA部分酶切的条件中,控制那一项最好?() (a) 反应时间(b)酶量(c)反应体积(d)酶反应的温度 8. 在下列试剂中,那一种可以螯合Ca2+离子?() (a) EDTA (b)柠檬酸钠(c)SDS (d)EGTA 9. 在下列工具酶中,那一种可以被EGTA抑制活性?() (a) S1单链核酸酶(b)末端转移酶(c)碱性磷酸酶(d)Bal 31核酸酶 10 .限制性内切核酸酶可以特异性地识别:() (a)双链DNA的特定碱基对(b)双链DNA的特定碱基序列 (c)特定的三联密码(d)以上都正确 11.下列关于限制性内切核酸酶的表示方法中,正确一项的是()。 (a) Sau3A I (b)E . coRI (c)hind III (d)Sau 3A1 12 .限制性内切核酸酶的星号活性是指:() (a)在非常规条件下,识别和切割序列发生变化的活性。(b)活性大大提高 (c)切割速度大大加快(d)识别序列与原来的完全不同 13 .下面哪一种不是产生星号活性的主要原因?() (a)甘油含量过高(b)反应体系中含有有机溶剂 (c)含有非Mg2+的二价阳离子(d)酶切反应时酶浓度过低 14. 关于宿主控制的限制修饰现象的本质,下列描述中只有()不太恰当

基因工程测试题

基因工程测试题 一、选择题: 1.人的糖蛋白必须经内质网和高尔基体进一步加工合成。通过转基因技术可以使人的糖蛋白基因得以表达的受体细胞是( ) A.大肠杆菌 B.酵母菌 C.肺炎双球菌 D.乳酸菌 2.下列有关基因工程的叙述,正确的是( ) A.DNA连接酶将碱基对之间的氢键连接起来 B.目的基因导入受体细胞后,受体细胞即发生基因突变 C.限制性核酸内切酶识别序列越短,则该序列在DNA中出现的几率就越大 D.常用的载体有大肠杆菌、噬菌体和动植物病毒等 3.我国科学家运用基因工程技术,将苏云金芽孢杆菌的抗虫基因导入棉花细胞并成功表达,培育出了抗虫棉。下列叙述不正确的是( ) A.抗虫基因的提取和运输需要专用的工具酶和载体 B.重组DNA分子中替换一个碱基对,不一定导致毒蛋白的毒性丧失 C.抗虫棉的抗虫基因可通过花粉传递到近缘作物,从而造成基因污染 D.转基因抗虫棉是否具有抗虫特性是通过检测棉花对抗生素抗性来确定的 4.如图是获得抗虫棉的技术流程示意图。卡那霉素抗性基因(kan r)常作为标记基因,只有含卡那霉素抗性基因的细胞才能在卡那霉素培养

基上生长。下列叙述正确的是( ) A.构建重组质粒过程中需要限制性核酸内切酶和DNA连接酶 B.愈伤组织的分化产生了不同基因型的植株 C.卡那霉素抗性基因(kan r)中有该过程所利用的限制性核酸内切酶 的识别位点 D.抗虫棉有性生殖后代能保持抗虫性状的稳定遗传 5.上海医学研究所成功培育出第一头携带人白蛋白基因的转基因牛。他们还研究出一种可大大提高基因表达水平的新方法,使转基因动物乳汁中的药物蛋白含量提高30多倍,以下与此有关的叙述中正确的是( ) A.“转基因动物”是指体细胞中出现了新基因的动物 B.“提高基因表达水平”是指设法使牛的乳腺细胞中含有更多的人白蛋白基因 C.只有从转基因牛乳汁中才能获取人白蛋白,是因为人白蛋白基因只在牛乳腺细胞中含有 D.转基因牛的肌肉细胞中也有人白蛋白基因,但不发生转录、翻译,不能合成人白蛋白 6.下列关于蛋白质工程和基因工程的比较,不合理的是( )

【精品】2021年高中高三生物二轮复习专题练习含答案解析4:基因工程

2021年高三生物二轮复习专题练习4含答案解 析:基因工程 一、选择题 1.下列关于基因工程应用的叙述,正确的是( ) A.基因治疗就是把缺陷基因诱变成正常基因 B.基因诊断的基本原理是DNA分子杂交 C.一种基因探针能检测水体中的各种病毒 D.利用基因工程生产乙肝疫苗时,目的基因存在于人体B淋巴细胞的DNA中 2.1970年,特明和巴尔德摩证实了RNA病毒能依赖RNA 合成DNA的过程,并发现了催化此过程的酶。下面为形成cDNA 的过程和PCR扩增过程示意图。请根据图解分析,下列说法不.正确的是( ) A.催化①过程的酶是逆转录酶 B.从图示可以看出要将碱基对之间的氢键断开可以用核酸酶H和高温处理 C.从图中信息分析可知,②⑤过程为DNA复制,催化⑤过程的酶能耐高温 D.如果RNA单链中有碱基100个,其中A占25%,U占15%,则通过该过程合成的一个双链DNA片段中有胞嘧啶30

个 3.在用基因工程技术构建抗除草剂的转基因烟草过程中,下列操作错误的是( ) A.用限制性核酸内切酶切割烟草花叶病毒的核酸 B.用DNA连接酶连接经切割的抗除草剂基因和载体 C.将重组DNA分子导入烟草原生质体 D.用含除草剂的培养基筛选转基因烟草细胞 4.如图是将人的生长激素基因导入细菌B细胞内制造“工程菌”的示意图。已知细菌B细胞内不含质粒A,也不含质粒A上的基因。判断下列说法正确的是( ) A.将重组质粒导入细菌B常用的方法是显微注射法 B.将完成导入过程后的细菌涂布在含有氨苄青霉素的培养基上,能生长的只是导入了重组质粒的细菌 C.将完成导入过程后的细菌涂布在含有四环素的培养基上,能生长的就是导入了质粒A的细菌 D.目的基因成功表达的标志是受体细胞能在含有氨苄青霉素的培养基上生长 5.在基因工程操作中限制性核酸内切酶是不可缺少的工具酶。下列有关限制性核酸内切酶的叙述错误的是( )

基因工程测试题经典

xxxXXXXX 学校XXXX 年学年度第二学期第二次月考 XXX 年级xx 班级 姓名:_______________班级:_______________考号:_______________ 一、选择题 (每空? 分,共? 分) 1、下列有关基因工程和蛋白质工程的叙述,正确的是 A .蛋白质工程的流程和天然蛋白质合成的过程是相同的 B .基因工程合成的是天然存在的蛋白质,蛋白质工程合成的可以不是天然存在的蛋白质 C .基因工程是分子水平操作,蛋白质工程是细胞水平(或性状水平)操作 D .基因工程完全不同于蛋白质工程 2、PCR 是一种体外迅速扩增DNA 片段的技术,下列有关PCR 过程的叙述,不正确的是 A .变性过程中破坏的是DNA 分子内碱基对之间的氢键 B .复性过程中引物与DNA 模板链的结合是依靠碱基互补配对原则完成 C .延伸过程中需要DNA 聚合酶、ATP 、四种核糖核苷酸 D .PCR 与细胞内 DNA 复制相比所需要酶的最适温度较高 3、35.采用基因工程技术将人凝血因子基因导入山羊受精卵,培育出了转基因羊。但是人凝血因子只存在于该转基因羊的乳汁中。下列有关叙述,正确的是( ) A .人体细胞中凝血因子基因的碱基对数目,小于凝血因子氨基酸数目的3倍 B .可用显微注射技术将含有人凝血因子基因的重组DNA 分子导入羊的受精卵 C .在该转基因羊中,人凝血因子基因只存在于乳腺细胞,而不存在于其他体细胞中 D .人凝血因子基因开始转录后,DNA 连接酶以DNA 分子的一条链为模板合成mRNA

4、ch1L基因是蓝细菌拟核DNA上控制叶绿素合成的基因.为研究该基因对叶绿素合成的控制,需要构建该种生物缺失ch1L基因的变异株细胞.技术路线如图所示,对此描述错误的是() 5、下图表示基因工程中目的基因的获取示意图,不正确的是: A、同种生物的基因组文库大于cDNA文库 B、③表示PCR技术,用来扩增目的基因 C、从基因文库中要得到所需目的基因,可根据目的基因的有关信息来获取 D、只要基因的核苷酸序列已知,就只能通过人工合成的方法获取 6、图1表示含有目的基因D的DNA片段长度(bp即碱基对)和部分碱基序 列,图2表示一种质粒的结构和部分碱基序列。现有MspⅠ、BamHⅠ、MboⅠ、SmaⅠ4种限制性核酸内切酶,它们识别的碱基序列和酶切位点分别为:C↓CGG、G↓GATCC、↓GATC、CCC↓GGG。下列分析中正确的是:

基因工程练习题(附答案)

基因工程练习题 1、在基因工程中使用的限制性核酸内切酶,其作用是( ) A、将目的基因从染色体上切割出来 B、识别并切割特定的DNA核苷酸序列 C、将目的基因与运载体结合 D、将目的基因导入受体细胞 2、基因工程中常用细菌等原核生物作受体细胞的原因不包括( ) A、繁殖速度快 B、遗传物质相对较少 C、多为单细胞,操作简便 D、DNA为单链,变异少 3、基因工程是DNA分子水平的操作,下列有关基因工程的叙述中,错误的是( ) A、限制酶只用于切割获取目的基因 B、载体与目的基因可以用同一种限制酶处理 C、基因工程所用的工具酶是限制酶,DNA连接酶 D、带有目的基因的载体是否进入受体细胞需检测 4、运用现代生物技术,将苏云金芽孢杆菌的抗虫基因整合到棉花细胞中,为检测实验是否成功,最方便的方法是检测棉花植株是否有( ) A、抗虫基因 B、抗虫基因产物 C、新的细胞核 D、相应性状 5、转基因动物转基因时的受体细胞是( ) A、受精卵 B、精细胞 C、卵细胞 D、体细胞 6、基因工程中常见的载体是( ) A、质体 B、染色体 C、质粒 D、线粒体 7、水母发光蛋白由236个氨基酸构成,其中Asp、Gly、Ser构成发光环,现已将这种蛋白质的基因作为生物转基因的标记,在转基因技术中,这种蛋白质的作用是( ) A、促使目的基因导入宿主细胞中B、促使目的基因在宿主细胞中复制 C、使目的基因容易被检测出来 D、使目的基因容易成功表达 8、运用现代生物技术的育种方法,将抗菜青虫的Bt基因转移到优质油菜中,培育出转基因抗虫的油菜品种,这一品种在生长过程中能产生特异的杀虫蛋白质,对菜青虫有显著抗性,能大大减轻菜青虫对油菜的危害,提高油菜产量,减少农药使用,据以上信息,下列叙述正确的是( ) A、Bt基因的化学成分是蛋白质 B、Bt基因中有菜青虫的遗传物质 C、转基因抗虫油菜能产生杀虫蛋白是由于具有Bt基因 D、转基因抗虫油菜产生的杀虫蛋白是无机物 9、人的糖蛋白必须经内质网和高尔基体进一步加工合成,通过转基因技术,可以使人的糖蛋白基因得以表达的受体细胞是( ) A、大肠杆菌 B、酵母菌 C、T 噬菌体 D、质粒DNA 4 10、不属于质粒被选为基因运载体的理由是() A.能复制 B.有多个限制酶切点C.具有标记基因D.它是环状DNA

基因工程和细胞工程测试题(附答案,可用于考试)

5 高二生物《基因工程和细胞工程》测试题姓名班级 (时间:90分钟分数:100分) 一.选择题(本大题包括25题,每题2分,共50分。每题只有一个选项符合题意。) 1.以下说法正确的是() A.所有的限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列 B.质粒是基因工程中惟一的运载体 C.运载体必须具备的条件之一是:具有多个限制酶切点,以便与外源基因连接D.质粒是广泛存在于细菌细胞中的一种颗粒状细胞器 2.植物体细胞杂交与动物细胞工程中所用技术与原理不.相符的是() A.纤维素酶、果胶酶处理和胰蛋白酶处理——酶的专一性 B.植物组织培养和动物细胞培养——细胞的全能性 C.植物体细胞杂交和动物细胞融合——生物膜的流动性 D.紫草细胞培养和杂交瘤细胞的培养——细胞分裂 3.有关基因工程的叙述正确的是() A.限制性内切酶只在获得目的基因时才用 B.重组质粒的形成在细胞内完成 C.质粒都可作运载体 D.蛋白质的结构可为合成目的基因提供资料 4.能克服远缘杂交障碍培育农作物新品种的技术是() A.基因工程 B.组织培养 C.诱变育种 D.杂交育种 5.下列关于动物细胞培养的叙述,正确的是( ) A.培养人的效应T细胞能产生单克隆抗体 B.培养人的B细胞能够无限地增殖 C.人的成熟红细胞经过培养能形成细胞株 D.用胰蛋白酶处理肝组织可获得单个肝细胞 6.PCR技术扩增DNA,需要的条件是( ) ①目的基因②引物③四种脱氧核苷酸 ④DNA聚合酶等⑤mRNA⑥核糖体 A、①②③④ B、②③④⑤ C、①③④⑤ D、①②③⑥ 7.以下对DNA的描述,错误的是() A.人的正常T淋巴细胞中含有人体全部遗传信息 B.同种生物个体间DNA完全相同 C.DNA的基本功能是遗传信息的复制与表达 D.一个DNA分子可以控制多个性状 8. 蛋白质工程中直接需要进行操作的对象是() A.氨基酸结构 B.蛋白质空间结构 C.肽链结构 D.基因结构 9.细胞工程的发展所依赖的理论基础是() A.DNA双螺旋结构模型的建立 B.遗传密码的确立及其通用性的发现 C.生物体细胞全能性的证明 D.遗传信息传递的“中心法则”的发现 10.下列不是基因工程中的目的基因的检测手段的是:() A.分子杂交技术 B.抗原—抗体杂交 C.抗虫或抗病的接种 D.基因枪法 11.在以下4种细胞工程技术中,培育出的新个体中,体内遗传物质均来自一个亲本的是() A.植物组织培养 B. 单克隆抗体 C. 植物体细胞杂交 D.细胞核移植 12.动物细胞融合与植物细胞融合相比特有的是() A.基本原理相同 B.诱导融合的方法类 C.原生质体融合 D.可用灭活的病毒作诱导剂 13.下列哪一项属于克隆() A.将鸡的某个DNA片段整合到小鼠的DNA分子中 B.将抗药菌的某基因引入草履虫的细胞内 C.将鼠骨髓细胞与经过免疫的脾细胞融合成杂交瘤细胞

基因工程试题及答案

基因工程试题及答案 【篇一:基因工程题库以及答案】 因工程是_________年代发展起来的遗传学的一个分支学科。 2.基因工程的两个基本特点是: (1)____________, (2)___________。 3.基因克隆中三个基本要点是:___________;_________和 __________。 4.通过比较用不同组合的限制性内切核酸酶处理某一特定基因区域所得到的不同大小的片段,可以构建显示该区域各限制性内切核酸酶切点相互位置的___________。 5.限制性内切核酸酶是按属名和种名相结合的原则命名的,第一个大写字母取自_______,第二、三两个字母取自_________,第四个字母则用___________表示。 6.部分酶切可采取的措施有:(1)____________(2)___________ (3)___________等。 7.第一个分离的限制性内切核酸酶是___________;而第一个用于构建重组体的限制性内切核酸酶是_____________。 8.限制性内切核酸酶bsuri和haeⅢ的来源不同,但识别的序列都是_________,它们属于_____________。 9.dna聚合酶i的klenow大片段是用_____________切割dna聚合酶i得到的分子量为76kda的大片段,具有两种酶活性: (1)____________; (2)________________的活性。 10.为了防止dna的自身环化,可用_____________去双链 dna__________________。 11.egta是____________离子螯合剂。 12.测序酶是修饰了的t7 dna聚合酶,它只有_____________酶的活性,而没有_______酶的活性。 13.切口移位(nick translation)法标记dna的基本原理在于利用 _________的_______和______的作用。 14.欲将某一具有突出单链末端的双链dna分子转变成平末端的双链形式,通常可采用_________或_______________。 15.反转录酶除了催化dna的合成外,还具有____________的作用,可以将dna- rna杂种双链中的___________水解掉。

基因工程实验考试试题(答案)

1.简述本学期从基因组DNA提取到重组质粒鉴定的实验流程? 答:①基因组DNA的提取;②PCR扩增目的基因;③凝胶电泳分离纯化PCR扩增的DNA片段以及DNA的体外连接;④重组质粒的转化及转化子的筛选;⑤重组质粒的抽提;⑥重组质粒的酶切鉴定。 2.如何正确使用微量移液器? 答:①选取合适量程的移液器;②根据取液量设定量程;③安装(吸液)枪头;④按至第一档,将枪头垂直伸入液面下适当位置吸液;⑤按至第二档将液体打入容器;⑥弃掉枪头;⑦将量程调至最大,放回原处。 3.在琼脂糖凝胶电泳点样时,DNA通常和什么试剂混匀,其主要成分和作用是什么? 答:loading Buffer。主要成分为溴酚蓝,二甲苯青和甘油。 溴酚蓝和二甲苯青起指示作用;甘油加大样品密度,从而沉降于点样孔中,以免浮出。 4.简述制作1%的琼脂糖凝胶电泳的操作步骤。 答:①取0.5g琼脂糖置于锥形瓶,量取50ml 1×TBE溶液于瓶中,微波炉加热至琼脂糖溶解;②将移胶板放入胶室中,选取合适梳子垂直安插在移胶板上方,待琼脂降温至55℃下后,缓慢导入该胶室里;③量取合适量1×TBE溶液导入洗净的电泳槽,并正确插好电泳线; ④等凝胶凝固后,将梳子垂直拔出;⑤点样;⑥轻放移胶板至电泳槽的合适位置;⑦打开电泳仪的开关,调好参数,开始电泳;⑧一定时间后,停止电泳,取出凝胶板,然后经BE染色放入成像系统显色、观察。 5.琼脂糖凝胶电泳中DNA分子迁移率受哪些因素的影响?(实验书P75) 答:①样品DNA的大小和构象;②琼脂糖浓度;③电泳电场;④温度;⑤缓冲液;⑥嵌入染料的存在与否; 6.在使用苯酚进行DNA抽提时应注意什么?(实验书P31) 答:注意不要吸取中间的变性蛋白质层。 7.在基因组DNA提取过程中常用酚、氯仿、异戊醇试剂,它们各有什么作用? 答:酚——是蛋白质变性,抑制DNA酶的降解作用;氯仿——除去脂类,同时加速有机相与水相的分层;异戊醇——降低表面张力,从而减少气泡的产生。 8.提取DNA实验中,通常可选用哪些试剂沉淀DNA? 答:冷的无水乙醇、冷的异丙醇、终浓度为0.1~0.25mol/L 的NaCl 9.简述在DNA提取实验中个试剂的作用(SDS,EDTA,酚/氯仿/异戊醇、无水乙醇,70%乙醇)。 答:SDS——破坏细胞膜,解聚核蛋白;EDTA——整合金属离子,抑制DNase活性;酚/氯仿/异戊醇——见第7题;无水乙醇——沉淀DNA;70%乙醇——洗涤DNA沉淀。 10.简述PCR扩增技术的原理及各种试剂的作用(Mg2+,dNTP,引物,DNA,缓冲液,Taq DNA聚合酶)。 答:(1)利用半保留复制的原理,以待扩增的DNA为模板,通过一系列酶在体外引物介导下,

2015-2017基因工程高考题附答案

选修3——基因工程高考题 1.(2017?新课标Ⅰ卷.38)(15分) 真核生物基因中通常有内含子,而原核生物基因中没有,原核生物没有真核生物所具有的切除内含子对应的RNA序列的机制。已知在人体中基因A(有内含子)可以表达出某种特定蛋白(简称蛋白A)。回答下列问题: (1)某同学从人的基因组文库中获得了基因A,以大肠杆菌作为受体细胞却未得到蛋白A,其原因是_____________________________________________。 (2)若用家蚕作为表达基因A的受体,在噬菌体和昆虫病毒两种载体中,不选用______________作为载体,其原因是_______________________________________________________________。(3)若要高效地获得蛋白A,可选用大肠杆菌作为受体。因为与家蚕相比,大肠杆菌具有_____________________________________________________(答出两点即可)等优点。 (4)若要检测基因A是否翻译出蛋白A,可用的检测物质是___________________(填“蛋白A 的基因”或“蛋白A的抗体”)。 (5)艾弗里等人的肺炎双球菌转化实验为证明DNA是遗传物质做出了重要贡献,也可以说是基因工程的先导,如果说他们的工作为基因工程理论的建立提供了启示,那么,这一启示是_______________________________________________________________________________。2.(2017?新课标Ⅱ卷.38)(15分) 几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分,几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内,可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题: (1)在进行基因工程操作时,若要从植物体中提取几丁质酶的mRNA,常选用嫩叶而不选用老叶作为实验材料,原因是________________________________。提取RNA时,提取液中需添加RNA酶抑制剂,其目的是______________________________________。 (2)以mRNA为材料可以获得cDNA,其原理是________________________________。 (3)若要使目的基因在受体细胞中表达,需要通过质粒载体而不能直接将目的基因导入受体细胞,原因是________________________________________________________(答出两点即可)。(4)当几丁质酶基因和质粒载体连接时,DNA连接酶催化形成的化学键是__________________________。 (5)若获得的转基因植株(几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中)抗真菌病的能力没有提高,根据中心法则分析,其可能的原因是____________________________________________。 3.(2017?新课标Ⅲ卷.38)(15分)编码蛋白甲的DNA序列(序列甲)由A、B、C、D、E五个片段组成,编码蛋白乙和丙的序列由序列甲的部分片段组成,如图1所示。 回答下列问题: (1)现要通过基因工程的方法获得蛋白乙,若在启动子的下游直接接上编码蛋白乙的DNA序列(TTCGCTTCT……CAGGAAGGA),则所构建的表达载体转入宿主细胞后不能翻译出蛋白乙,原因是_____________________________________________________________。(2)某同学在用PCR技术获取DNA片段B或D的过程中,在PCR反应体系中加入了DNA聚合酶、引物等,还加入了序列甲作为________________,加入了________________作为合成DNA的原料。 (3)现通过基因工程方法获得了甲、乙、丙三种蛋白,要鉴定这三种蛋白是否具有刺激T淋巴细胞增殖的作用,某同学做了如下实验:将一定量的含T淋巴细胞的培养液平均分成四组,其中三组分别加入等量的蛋白甲、乙、丙,另一组作为对照,培养并定期检测T淋巴细胞浓度,结果如图2。 ①由图2 可知,当细胞浓度达到a时,添加蛋白乙的培养液中T淋巴细胞浓度不再增加,此时若要使T淋巴细胞继续增殖,可采用的方法是________________________。细胞培养过程中,培养箱中通常要维持一定的CO2浓度,CO2的作用是________________________。 ②仅根据图、图2可知,上述甲、乙、丙三种蛋白中,若缺少______________(填“A”“B”“C”“D”或“E”)片段所编码的肽段,则会降低其刺激T淋巴细胞增殖的效果。 4.(2017·天津理综卷9)(20分)玉米自交系(遗传稳定的育种材料)B具有高产、抗病等优良性质,但难以直接培育成转基因植株,为使其获得抗除草剂性状,需依次进行步骤I、II试验。 Ⅰ.获得抗除草剂转基因玉米自交系A,技术路线如下图。 (1)为防止酶切产物自身环化,构建表达载体需用2种限制酶,选择的原则是______(单选)。 ①Ti质粒内,每种限制酶只有一个切割位点 ②G基因编码蛋白质的序列中,每种限制酶只有一个切割位点

基因工程作业题及答案

第二章 1. 名词解释:核酸内切酶、核酸内切限制酶、同裂酶、同尾酶、核酸外切酶、末端脱氧核苷酸转移酶 答: 核酸内切酶:是一类从多核苷酸链的内部催化磷酸二酯键断裂的酶。 核酸内切限制酶:是一类能够识别双链DNA分子中的某种特定核苷酸序列(4—8bp),并由此处切割DNA双链的核酸内切酶。 同裂酶:识别位点的序列相同的限制性内切酶。 同尾酶:识别的序列不同,但能切出相同的粘性末端。 核酸外切酶:是一类从多核苷酸链的一头开始催化降解核苷酸的酶。 末端脱氧核苷酸转移酶:可以不需要模板,在单链DNA或突出的双链DNA 3’-OH端随机 添加dNTPs的酶 2. 限制性内切核酸酶的命名原则是什么? 答:限制性内切核酸酶按属名和种名相结合的原则命名的,即:属名+种名+株名+序号; 首字母:取属名的第一个字母,且斜体大写; 第二字母:取种名的第一个字母,斜体小写; 第三字母:(1)取种名的第二个字母,斜体小写; (2)若种名有词头,且已命名过限制酶,则取词头后的第一字母代替。 第四字母:若有株名,株名则作为第四字母,是否大小写,根据原来的情况而定,但用正体。 顺序号:若在同一菌株中分离了几种限制酶,则按先后顺序冠以I、Ⅱ、Ⅲ、…等,用正体。 3.部分酶切可采取的措施有哪些? 答:1)缩短保温时间 2)降低反应温度 3)减少酶的用量 4. 在序列5'-CGAACATATGGAGT-3'中含有一个6bp 的Ⅱ类限制性内切核酸酶的识别序列,该位点的序列可能是什么? 答:回文序列是:5'-CATA TG-3, 5.什么是限制性内切核酸酶的星号活性? 受哪些因素影响? 答:Ⅱ类限制酶虽然识别和切割的序列都具有特异性,但是这种特异性受特定条件的限制,即在一定环境条件下表现出来的特异性。条件的改变,限制酶的特异性就会松 动,识别的序列和切割都有一些改变,改变后的活性通常称第二活性,而将这种因 条件的改变会出现第二活性的酶的右上角加一个星号表示,因此第二活性又称为星 活性。 概括起来,诱发星活性的因素有如下几种:(1)高甘油含量(>5%, v/v);(2)限制性 内切核酸酶用量过高(>100U/ugDNA);(3)低离子强度(<25 mmol/L);(4)高pH(8.0 以上);(5)含有有机溶剂,如DMSO,乙醇等;(6)有非Mg2+的二价阳离子存在(如 Mn2+,Cu2+,C02+,Zn2+等)。 第三章 1.如何将野生型的λ噬菌体改造成为一个理想的载体? 答:①删除λ噬菌体的非必需区,留出插入空间;并在余下的非必须区内制造限制酶切点 ②引进某些突变表型,作为选择标记 ③突变某些基因,使它成为安全载体 ④删除λDNA必须区段上常用的限制酶切点

高中生物高考题分类题基因工程(可编辑修改word版)

知识点一基因工程的概念 基因工程是指按照人们的愿望,进行严格的设计,并通过体外DNA 重组和转基因等技术,赋予生物以新的遗传特性,从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。由于基因工程是在DNA 分子水平上进行设计和施工的,因此又叫做DNA 重组技术。 注意:对本概念应从以下几个方面理解: 知识点二基因工程的基本工具 1.限制性核酸内切酶——“分子手术刀” (1)限制性内切酶的来源:主要是从原核生物中分离纯化来的。 (2)限制性内切酶的作用:能够识别双链DNA 分子的某种特定的核苷酸序列,并能将每一条链上特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键切开。 (3)限制性内切酶的切割方式及结果:①在中心轴线两侧将DNA 切开,切口是黏性末端。 ②沿着中心轴线切开DNA,切口是平末端。 2.DNA 连接酶——“分子缝合针” (1)来源:大肠杆菌、T4噬菌体 (2)DNA 连接酶的种类:E.coliDNA 连接酶和T4DNA 连接酶。 (3)作用及作用部位:E.coliDNA 连接酶作用于黏性末端被切开的磷酸二酯键,T4DNA 连接酶作用于黏性末端和平末端被切开的磷酸二酯键。 注意:比较有关的DNA 酶 (1)DNA 水解酶:能够将DNA 水解成四种脱氧核苷酸,彻底水解成磷酸、脱氧核糖和含氮碱基 (2)DNA 解旋酶:能够将DNA 或DNA 的某一段解成两条长链,作用的部位是碱基和碱基之间的氢键。注意:使DNA 解成两条长链的方法除用解旋酶以外,在适当的高温(如94℃)、重金属盐的作用下,也可使DNA 解旋。(3)DNA 聚合酶:能将单个的核苷酸通过磷酸二酯键连接成DNA 长链。 (4)DNA 连接酶:是通过磷酸二酯键连接双链DNA 的缺口。注意比较DNA 聚合酶和DNA 连接酶的异同点。 3.基因进入受体细胞的载体——“分子运输车”

基因工程试题及答案全集

作业一: 一、名词解释: 1、基因:是遗传的物质基础,是DNA(脱氧核糖核酸)分子上具有遗传信息的特定核苷酸序列的总称,是具有遗传效应的DNA分子片段。 2、基因组该指单倍体细胞中包括编码序列和非编码序列在内的全部DNA分子 3、操纵子:原核生物的几个功能相关的结构基因往往排列在一起,转录生成一个mRNA,然后分别翻译成几种不同的蛋白质。这些蛋白可能是催化某一代谢过程的酶,或共同完成某种功能。这些结构基因与其上游的启动子,操纵基因共同构成转录单位,称操纵子。 4、启动子:是RNA聚合酶结合位点周围的一组转录控制组件,包括至少一个转录起始点。在真核基因中增强子和启动子常交错覆盖或连续。有时,将结构密切联系而无法区分的启动子、增强子样结构统称启动子。 5、增强子:是一种能够提高转录效率的顺式调控元件,最早是在SV40病毒中发现的长约200bp 的一段DNA,可使旁侧的基因转录提高100倍,其后在多种真核生物,甚至在原核生物中都发现了增强子。增强子通常占100~200bp长度,也和启动子一样由若干组件构成,基本核心组件常为8~12bp,可以单拷贝或多拷贝串连形式存在。 6、基因表达:是指细胞在生命过程中,把储存在DNA顺序中遗传信息经过转录和翻译,转变成具有生物活性的蛋白质分子。 二、简答题 1、说明限制性内切核酸酶的命名原则要点。 答:限制性内切核酸酶采用三字母的命名原则,即属名+种名+株名的各一个首字母,再加上序号. 基本原则: 3-4个字母组成,方式是:属名+种名+株名+序号; 首字母: 取属名的第一个字母,且斜体大写;第二字母: 取种名的第一个字母,斜体小写;第三字母: (1)取种名的第二个字母,斜体小写;(2)若种名有词头,且已命名过限制酶,则取词头后的第一字母代替.第四字母: 若有株名,株名则作为第四字母,是否大小写,根据原来的情况而定,但用正体. 顺序号: 若在同一菌株中分离了几种限制酶,则按先后顺序冠以I,Ⅱ,Ⅲ,…等,用正体. 2、什么是限制性内切核酸酶的星号活性受哪些因素影向 答:Ⅱ类限制酶虽然识别和切割的序列都具有特异性,但是这种特异性受特定条件的限制,即在一定环境条件下表现出来的特异性。条件的改变,限制酶的特异性就会松动,识别的序列和切割都有一些改变,改变后的活性通常称第二活性,而将这种因条件的改变会出现第二活性的酶的右上角加一个星号表示,因此第二活性又称为星号活性。 概括起来,诱发星活性的因素有如下几种: (1)高甘油含量(>5%, v/v); (2)限制性内切核酸酶用量过高(>100U/ugDNA); ;L)/mmol(<25 低离子强度(3). (4)高pH以上);(5)含有有机溶剂,如DMSO,乙醇等; (6)有非Mg2+的二价阳离子存在(如Mn2+,Cu2+,C02+,Zn2+等)。 3、影响DNA连接酶催化连接反应的因素有哪些 答:(1)DNA的纯度(2)DNA甲基化的程度(3)酶切消化反应的温度(4)DNA的分子结构(5)核酸内切限制酶的缓冲液 4、什么是Klenow酶有哪些活性在基因工程中有什么作用 答:Klenow酶是1974年Klenow用枯草杆菌蛋白酶水解DNA聚合酶I,得到两个片段,其中大片段的分子量为75kDa,它具有5'-3'聚合酶和3'-5'外切核酸酶的活性,小片段具有5'-3'外切核酸酶活性。由于大片段失去了DNA聚合酶I中会降解5'引物的5'-3'外切核酸酶的活性,所以在

基因工程试题与答案

基因工程试题与答案 1 、转基因动物的安全性问题 正面观点: (1)转基因工程是不可阻挡的. 基因工程将影响当代重大的环境问题:人口过剩/污染/ 生物多样性急剧减退等等. 保护土壤/ 水/ 能源成为发展可持续农业的目标。 (2)转基因食品的功效: 改良植物的食用品质;增加果蔬贮藏、保鲜性能;生产特殊食品——食品疫苗。 (3)迄今为止并没有发现转基因食品危害人体健康和环境的确切证据。如果转基因生物技术得不到社会支持,这一研究将被扼杀。 反面观点: 转基因的潜在危害:转基因动植物安全性评价主要集中在环境安全性,食品安全性以及对人动物健康的影响三方面。 环境安全性分析包括: (1)生存竞争性:转基因植物在生存竞争方面具有的优势可能导致生物多样性的减少,影响了生物多样性; (2)生殖隔离距离: 基因不可控制的水平转移的可能性;与近缘野生种的可交配性:外源基因是否会漂流扩散至亲缘野生种中,从而破坏自然生态平衡; (3)对非靶生物的影响:转基因植物花粉通过风,雨,鸟,昆虫,真菌,细菌以至 个生物链传播使外源基因逃逸,从而造成基因污染

(4)病毒发生异缘重组或异缘包装的可能性:自然界中存在着植物病毒之间的异缘重 组。 (5)对农业和生态环境的影响,生态平衡. 如产生超级杂草的可能性;种植抗虫转基 因作物后可能使害虫产生免疫并遗传、从而产生更加难以消灭的“超级害虫”; 食品安全性: (1)转基因毒性. 如英国发现转基因马铃薯会减弱老鼠免疫系统功能,美国发现转基因 玉米会危害蝴蝶幼虫及其相关生态环境; (2)人的毒理反应或过敏反应. 大肠杆菌细胞膜间隙中含有大量的内毒素,痕量的内 毒素即可导致人体热原反应。 (3)实质等同性的原则,即某一种生物技术产品或其成分能够与市场上现有的对应产 品进行比较。如果一种转基因产品能够与现存的一种产品进行比较,并且发现具有实质同等性,便能用现产品安全性同种方法对待它。转基因植物所引入的蛋白对人体可能是异性蛋白质,在部分人中可能发生食物过敏,特别是幼儿和某些过敏体质的人。 对人动物健康的影响:转入传统食品或作物中的基因可能来自各种物种,有些是人们不 能或者极少食用的,是否会对人体造成危害;转基因植物食品中的新基因会不会传递给人畜的肠道微生物,插入表达,然后危害健康。 动物:1. 外源基因在动物基因组中的随机整合,可能会引起宿主细胞基因的插入突变、 缺失突变及宿主基因的扩增重排和移位,也可能激活正常状态下处于关闭状态的基因,从而导致动物表型的改变甚至造成动物不育或死亡; 2. 插入的外源基因是否会影响宿主动物自身的基因表达及表达水平; 3. 转基因动物是否可能会把外源基因传递给生活在其周围的其它种群及环境,造成基因 污染; 4. 在病毒等致病基因的转基因研究中,不可避免地会产生一些有害的转基因动物,是否 可能因为使用转基因动物制品而将一些动物性疾病传递给人类。 5. 未知的. 总的来说:就目前而言,还没有发现转基因食品对人类有害,但同时也缺乏证据证明它的无

华中农业大学生物化学本科试题库 第18章 基因工程基础

第18章基因工程基础单元自测题 (一) 名词解释 1.遗传工程 2.生物技术 3.基因工程 4.细胞工程 5.蛋白质工程 6.分子克隆 7.载体 8.转化 和转染9.基因文库10. cDNA文库 (二) 填空 1.自然界的常见基因转移方式有、、、。 2.不同DNA分子间发生的共价连接称为,有、两种方式。 3.基因工程的载体必须具备的条件有、、。 4.基因工程常用的载体DNA分子有、、和。 5.一个完整的DNA克隆过程应包括、、、、 。 6.目的基因获取的途径或来源有、、、。 7.基因工程过程中重组体直接筛选法的方式有、、。 8.基因克隆真核生物表达体系常见的有、、表达体系。 9.根据重组体DNA的性质不同,将重组体DNA导入受体细胞的方式有、、等。10.如果M13的外源基因被插入到lac Z基因内,则在含有X-gal的培养基上生长时会出现色菌落,如果在lac Z 基因内无外源基因插入,在同样的条件下呈现色菌落。 11.当细胞与细胞或细菌通过菌毛相互接触时,就可以从一个细胞(细菌)转移到另一细胞(细菌),这种类型的DNA 转移称为作用。 12.重组DNA技术中常用的工具酶有、、、。 (三) 选择题 1.下列那种方式保证了免疫球蛋白的多样性? A. 转化 B. 转染 C. 转位 D. 转导 2.微切割技术使目的基因可来源于下列那种物质? A. 真核细胞染色体DNA B. 人工合成DNA C. cDNA D. G-文库 3.重组DNA技术中常用的工具酶下列那项不是: A. 限制性核酸内切酶 B. DNA连接酶 C. DNA聚合酶I D. RNA聚合酶 4.DNA致癌病毒感染宿主细胞后,使之发生癌变是因为发生了: A. 转化 B. 转导 C. 接合 D. 转座 5.关于基因工程的叙述,下列哪项是错误的? A. 基因工程也称基因克隆 B . 只有质粒DNA可作为载体 C . 重组体DNA转化或转染宿主细胞 D. 需获得目的基因 6.有关质粒的叙述,下列哪项是错误的? A. pB R322含有β-半乳糖苷酶的α片段基因 B. 质粒较易转化 C. 质粒的遗传表型可作为转化子的筛选依据 D. pB R322的分子中仅有一个 E.co R I 内切酶位点 7.下列哪项不是重组DNA的连接方式? A. 粘性末端与粘性末端的连接 B .平端与平端的连接 C . 粘性末端与平端的连接 D . 人工接头连接 8.有关噬菌体的叙述哪项不符合? A. 感染大肠杆菌时仅把D NA注入大肠杆菌内 B. 只有裂解一种生活方式 C . 溶源和裂解两种生活方式可以相互转变 D. 噬菌体是由外壳蛋白和D NA组装而成 9.D NA克隆不包括下列哪项步骤? A. 选择一个适合的载体 B . 重组体用融合法导入细胞 C . 用连接酶连接载体 D NA和目的D NA,形成重组体 D . 用载体的相应抗生素抗性筛选含重组体的细菌 10.下列哪项不能作为表达载体导人真核细胞的方法? A. 磷酸钙转染 B . 电穿孔 C . 脂质体转染 D . 氯化钙转染 11. 下列哪项不能作为基因工程重组体的筛选方法? A. PC R技术 B. 宿主菌的营养缺陷标志补救

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