乙醇对家兔离体小肠平滑肌活动的影响
班级：法医0901 实验室301 组员：古忱苏秦韦甜许灵邵梦远陈惟【实验目的】
本实验以家兔离体小肠为标本,观察不同浓度乙醇对离体小肠平滑肌活动的影响,进一步了解乙醇与人体健康的关系。
【实验原理】
乙醇可抑制心肌自律性和降低心肌收缩力。消化道是乙醇进入体内最先受刺激的部位,乙醇进入胃内可造成胃粘膜损伤,但乙醇对小肠活动有何影响,目前还不十分清楚。有研究报道,乙醇对心肌细胞钠离子跨膜内流有一定抑制用,对心肌细胞内贮存的钙离子释放有显著抑制作用。因认为乙醇对心肌细胞收缩的抑制作用可能是通过改变肌水平或肌浆对钙离子的转运而实现的,但不影响细胞外跨膜内流。乙醇对小肠平滑肌的抑制作用可能与乙醇抑制钠离子、钙离子转运有关。
本实验采用常规离体灌注，小肠平滑肌标本活动的实验方法,记录用药前后肠段平滑肌自发收缩性活动变化。用不同浓度乙醇对小肠平滑肌自发收缩活动进行作用,然后用其变化值与用药前比较。
【实验对象】
家兔，体重2-2.5kg，雌雄兼用
【实验药品和器材】
台氏液，MebLab生物信号采集处理系统;CW-3型平滑肌槽恒温仪,;无水乙醇(20℃时密度为0 789ｇ/ｍ1，用于配制不同浓度的乙醇);张力换能器，铁支架，双凹夹，温度计，烧杯。
【实验方法与步骤】
1．在实验前禁食24ｈ,自由饮水,实验前1ｈ喂食。将家兔处死后，立即放入兔台上迅速沿腹正中线切开腹部,找出胃幽门与十二指肠交界处,以此处为起点,取十二指肠近端20ｃｍ肠管。先将该肠管相连的肠系膜分离,再将拟取的肠管两端剪断,将游离的肠管取出体外,臵于盛有保持37℃的台氏液的烧怀中,用注射器抽取温台氏液洗净肠内容物。当肠管活动明显时,将其剪成2cm左右的肠段作为实验标本。
2．结扎,并将一端固定于通气管钩上,臵于盛有30ml 台氏液的浴管中;另一端经细线连于张力换能器上,然后通过升降换能器的高度,以牵张结线,使标本垂直悬挂于恒温的台氏液的浴管中。给予2ｇ负荷平衡组织30min,将充满空气的气囊经一胶管与通气管相接,通入浴管的台氏液中,持续缓慢放气,其速度以持续单个气泡出现而不冲动小肠为宜。小肠平滑肌活动变化值的测量采用计算机生物信号采集处理系统。
3. 向标本中滴入不同浓度乙醇(1.25% 2.5% 5% 9.0% 10%)，并记录其收缩曲线
【实验项目】
1.记录小肠平滑肌自动节律性收缩曲线：记录离体小肠在37℃台氏液中
的收缩曲线，注意观察收缩的幅度和节律。收缩曲线基线高低表示小肠
平滑肌紧张性的高低，收缩曲线高度表示小肠平滑肌的收缩活动的强
弱。
2.不同浓度乙醇的作用：在药管中加入1.25%的乙醇溶液100mml，观察
收缩活动的改变，待作用明显后，先打开药管的出口放弃含药的台氏液，
在打开二通开关使预液管预温的台氏液通向药管液，重复2-3次，待
小肠恢复后，再注入同样体积的2.5%的乙醇溶液，照上述方法依次做
完浓度为5%和9.0% ，10%的溶液。
【注意事项】
待标本出现规律的自发节律性收缩并稳定20min后开始记录。先记录一段肠管在台氏液恒温37℃时的收缩曲线,观察肠管的收缩幅度、收缩频率,并从收缩曲线的基线改变,观察小肠平滑肌张力变化,以收缩基线上升。表示张力增强,收缩基线下降表示肌张力减弱。每次实验项目完成后,用37℃温热台氏液反复冲洗肠管,每次5min,共3次,然后观察肠管活动恢复情况。
【实验结果预测】
预测1：在钙离子流向肌浆而引起收缩过程中，膜电位逐渐升高，当膜电位达到一定值，钙离子通道开始关闭，也就是说钙离子通道是一种电压门控通道，而乙醇可以和关闭的钙离子通道可逆性结合，从而维持后者的关闭状态。因此：
1. 收缩曲线的基线上升且几乎一致（这时的膜电位就是上述的V）
2. 乙醇浓度的升高被乙醇维持的关闭着的钙离子通道增多，波形越来越缓直至变成一直线。
3. 由于是可逆性结合故而经台氏液洗涤后仍能恢复。
预测2：乙醇可能影响钙泵的功能，因为舒张过程是由肌浆的钙离子下降引起，而钙离子的下降主要为钙泵的功劳。乙醇和钙泵可逆性结合来抑制钙泵的作用，从而使曲线停止于收缩状态
【实验意义】
含酒精的饮料对小肠有较大的影响，它能使小肠活动停止于收缩状态从而
对机体造成伤害，所以我们在日常生活中应该少喝含酒精的饮料。
【实验结果记录及分析表】
作用机制可能是：乙醇为小分子脂溶性物质，其适宜的脂水分配系数使其能够透过细胞膜而进入细胞内影响膜蛋白和膜脂导致膜结构紊乱，乙醇的急性效应是降低胞浆Ca2+浓度，膜转运蛋白功能紊乱，细胞外Ca2+进入细胞内，细胞内Ca2+浓度升高，造成钙超载。
当各种原因引起胞浆内Ca2+浓度异常增加时，将刺激线粒体钙泵向线粒体内摄钙，使胞浆内Ca2+向线粒体内转移。线粒体摄入过多的钙，除增加ATP消
耗外，Ca2+还与线粒体内含磷酸根的化合物结合，形成不溶性磷酸钙，干扰线粒体氧化磷酸化，使ATP生成减少；另外，线粒体内Ca2+浓度的逐步增加，使其跨膜电位逐渐减小，产生ATP的功能逐渐丧失，从而干扰心脑细胞的能量代谢。线粒体内的Ca2+浓度升高最终使线粒体的渗透转运孔道呈高通透性持久开放状态。PTP是一种位于线粒体内外膜结合处，受Ca2+、线粒体膜电位、pH等调控的蛋白性孔道。PTP的高通透性持久开放，则引起线粒体内膜通透性急剧增加，使得一些在正常情况下不能通过内膜的物质(分子量>1500D)可以自由透过内膜，从而继发线粒体膜除极、氧自由基(ROS)过量生成、基质渗透性肿胀及凋亡效应蛋白释放等一系列细胞学效应，致使线粒体肿胀破坏，膜电位完全、永久消失，对线粒体结构和功能造成不可逆性损伤。自由基性质活泼，有极强的氧化能力，通过氧化反应来攻击细胞膜、线粒体体膜，与膜中不饱和脂肪酸反应，造成脂质过氧化，脂质过氧化产物又可以分解为更多的自由基，引起自由基连锁反应。自由基可与各种细胞成分反应，造成细胞结构损伤和功能代谢障碍：（1）膜脂质过氧化增强：通过破坏细胞膜的正常结构，间接抑制膜蛋白功能，促进自由基及其他生物活性物质生成；破坏线粒体膜的正常结构，减少ATP生成；（2）蛋白质功能抑制：氧化某些氨基酸残基或酶的巯基，使胞浆及膜蛋白和某些酶交联，直接损伤其功能；（3）破坏核酸及染色体：自由基可使碱基羟化或DNA断裂，从而引起染色体畸变或细胞死亡
台州学院 医学院实验报告 班级：学号：姓名： 实验课程：机能学实验 实验项目：消化道平滑肌的生理特性和药物的影响实验分室： 实验日期 2015年 6 月 3 日
一、实验目的 1、学习离体肠段平滑肌的实验方法。 2、了解肠段平滑肌的生理特性。 3、观察某些药物对离体平滑肌的作用 二、实验原理 哺乳动物消化管平滑肌与肌肉组织共有的特性，如兴奋性、传导性和收缩性等。但消化管平滑肌又有其特点，即兴奋性较低，收缩缓慢，富有伸展性，具有紧张性、自动节律性，对化学、温度和机械牵张刺激较敏感等。这些特性可维持消化管内一定压力，保持胃肠等一定的形态和位置，适合于消化管内容物的理化变化，在体内受中枢神经系统和体液因素的调节。将离体组织器官置于摸拟体内环境的溶液中，可在一定时间内保持其功能。本实验以台式液作灌流液，在体外观察及记录哺乳动物离体肠段的一般生理特性。 三、实验仪器与材料 兔、恒温平滑肌槽、支架、烧杯、20ml注射器、张力传感器、生物机能实验系统、温度计、台式液、肾上腺素（1：10000）、乙酰胆碱（1：10000）、阿托品针剂（1支）。 四、实验内容、方法与步骤 1、安装麦氏浴槽恒温平滑肌浴槽可用来记录消化道平滑肌的收缩活动，分为外槽和内槽，内槽用来浸浴实验标本，外槽内有恒温自来水流动以加热内槽中的台氏液，使其温度保持在37℃左右。小肠标本一端固定在内槽底部的铁钩上，另一端连至肌肉张力换能器的悬臂上。换能器与生物信号采集处理系统通道相连并输入计算机。内槽中的台氏液以刚能淹没肠管为宜。内槽底部还有通空气和排液的共同开口，通过此开口可排液和供给标本所需氧气。 2、制备离体兔肠段 取禁食24h的健康家兔，一手提后肢使头部自然下垂，另一手用木槌猛击兔后头延髓部，致其昏迷后立即剖开腹腔，找到胃幽门与十二指肠交界处。在十二指肠起始端扎一线，取出十二指肠、空肠、放入冷台式液内。先用20ml注射器冲洗内容物，冲洗干净后剪成若干约1.5cm长的小肠段（每一实验小组一段）在其两端结扎，一端做一短线环固定在通气的浴皿内，另一端扎线与张力传感器相连，此线不宜过长且必须竖直。将肠段完全浸浴在调好温度的平滑肌槽中。
. 实验目的一 、学习离体小肠平滑肌灌流的实验方法；1 、证明小肠平滑肌具有自动节律性和紧张性活动，观察若干刺激对离体小肠运动的影响。2 实验原理二 动物的胃肠道由平滑肌组成，胃肠道平滑肌除具有肌肉的共性，如兴奋性、传导性和收可以形成多种形式的运主要表现为紧张性和自动节律性收缩，缩性之外，尚有自己的特性，小肠还有分节运动及摆动。胃还有明显的容受性舒张，主要有紧张性收缩，蠕动。此外，动，、温度以及气体供应等pH如果将动物的小肠平滑肌离体，放置在各种化学成分、渗透压、并可以观察可保持离体小肠段长时间地存活下来，因子十分接近机体的内环境的溶液中时，温度刺激、化学刺激十分到小肠平滑肌的自动节律性、紧张收缩性、伸展性和对机械牵拉、将小肠的一端通常用台式液做灌流液，敏感，而对电刺激和切割刺激不敏感等一系列特性。固定，另一端连张力换能器，即可通过一定的记录装置记录下小肠肌的收缩曲线。使用仪器、材料三 仪器：细线，注射器，恒温平滑肌槽，计算机生物信号采集处理系统，张力换能器，万1、能支架，螺旋夹，双凹夹，温度计，橡胶管，制氧机等。溶液，溶液，1mol/LHCl：10000乙酰胆碱，1êCl1:50002、材料：台氏液，肾上腺素，12 1mol/LNaOH溶液，阿托品等。. 实验步骤四37摄氏度。、开启恒温平滑肌槽电源，使其恒温工作点定在1 2-3cm长的十二指肠，用台氏液漂洗，置于低温台氏液中备用。、猝死兔子，剪取2连接各种仪器，将小肠的两端分别与标本固定钩和张力换能器连接，让制氧机正常为台3、氏液供氧，进入计算机生物信号采集处理系统。摄氏度台氏液中的肠段节律性收缩曲线，待中央标本槽内的台氏液37、先后观察、记录4待台氏液中恢复供氧，停氧1min ,记录肠段节律性收缩曲线，温度稳定在37摄氏度后，℃37记录肠段节律性收缩曲线。再灌流分别换成22℃，45℃的台氏液，的小肠稳定后，溶溶液，1êCl溶液，台氏液待肠段活动恢复后，依次滴加1mol/LNaOH1mol/LHCl2乙酰胆碱，阿托品观察肠段收缩曲线的改变。每次实验：100005000肾上腺素，1：液1 次。37在观察到明显变化后，都应用预先准备好的℃台氏液冲洗3实验结果及分析五 ）缺氧对离体小肠活动的影响（1收缩张力最小值为/min,17次从图一可以看出，正常情况下，离体家兔肠段收缩频率为对浴槽内的离体小肠停氧的瞬间可以看到基线明显上移接着又下降回35g。26.8g，最大值为34.6g，最大值为。收缩张力最小值为原来状态，其节律为16次/min, 23.7g 张力：g 图一缺氧对离体小肠活动的影响（12.5s/Div）s 单位：1 / 5 . 分析：在缺氧情况下，家兔离体肠段收缩频率和强度都略有下降，但在缺氧瞬间上移的基线是小肠对生理需要的适应，故收缩有所加强但时间很短。从实验得到的数据可以说明，氧气也是影响小肠活动的因素，缺氧时对小肠收缩活动有抑制作用。）低温对离体小肠活动的影响（2最大张力次/min，小肠收缩张力最小为16g,离体小肠在适宜的温度下，其节律为17℃的台氏液后，
传出神经系统药物对家兔离体肠管平滑肌的影响 实验目的 1、掌握离体平滑肌的实验方法。 2、观察传出神经系统药物对离体家兔小肠平滑肌的作用 教学时数2学时 实验原理 一、离体实验 1、所用组织：心脏、膀胱、子宫、气管、肺、肠等均可用于离体实验 2、特点：实验条件易于控制、操作简便、结果准确、节省时间，可进行大量 药物的筛选。 3、要求：离体实验需在一定生理环境下进行，模拟体内环境。 （1）温度：38±0.5℃ （2）通氧气：1－2气泡/s （3）营养液：含有一定离子和葡萄糖的溶液，不同的组织所选用的营养液不同。 二、离体肠管实验 1、肠管的选择：根据实验目的的不同进行选择 （1）小肠：十二指肠、空肠、回肠 （2）自律性：频率较慢，起博点位于十二指肠，自律性自上而下渐弱。 （3）空肠多做定性实验，回肠多做定量实验 2、肠内受体及作用原理 （1）受体：家兔小肠平滑肌上存在α、β、M受体。 （2）作用：α、β受体兴奋可使小肠平滑肌抑制而舒张；M受体兴奋可使小肠平滑肌兴奋而收缩。 （3）药品对受体的作用：
1、氯化乙酰胆碱（Ach）：M受体激动剂，乙酰胆碱可兴奋M受体，使小肠收缩幅度 增加，蠕动加强。 2、阿托品(Atro)：M受体阻断药，为竞争性拮抗剂，单独用药对肠管无作用，可阻断 M受体，对抗乙酰胆碱的M样作用，使肠管收缩幅度降低。 3、肾上腺素(Ad)：α、β受体激动剂，可激活α、β受体（主要是β2受体），α、β 受体激动可产生与M受体激动相反的效应，表现为肠管舒张，小肠蠕动减弱。 4、氯化钙（Bacl2）：①Ba2+进入细胞与钙调蛋白结合，使平滑肌收缩，②Ba2+可使细 胞膜发生去极化。所以加入Bacl2肠管会发生强直性收缩，Bacl2并非作用于受体，所以阿托品不能对抗这一作用。 实验材料 1．动物：家兔 2．药品①5X10-4氯化乙酰胆碱 ②0.5％硫酸阿托品 ③0.1%盐酸肾上腺素 ④20％BaCL2 3、器材：RM6240多媒体化生物信号记录分析系统、PC80586计算机、张 力传感器、保温式麦氏浴槽、超级恒温水浴、“L”型通气钩、高位吊瓶、量 筒、烧杯、培养器、氧气瓶、外科剪刀、眼科剪刀、眼科镊子、缝衣针、棉线、注射器、台式营养器。 实验方法 一、首先调试RM6240系统，使进入肌张力测定状态． 1．在主菜单中用鼠标选择<实验>中的<消化>，选择系统显示<平滑肌生理特性>。 2．在界面右侧控制参数区选择<张力>,〈选择3g〉,扫描速度1.0s/div,确定信号输入，选择〈通道2〉，在工具菜单选择快速归零（空载时钩上无任何东西）。 3．在主菜单中选择〈示波〉，进入示波状态。
一实验目的 1学习离体小肠平滑肌灌流的实验方法； 2、证明小肠平滑肌具有自动节律性和紧张性活动，观察若干刺激对离体小肠运动的影响。二实验原理 动物的胃肠道由平滑肌组成，胃肠道平滑肌除具有肌肉的共性，如兴奋性、传导性和收缩性之外，尚有自己的特性，主要表现为紧张性和自动节律性收缩，可以形成多种形式的运 动，主要有紧张性收缩，蠕动。此外，胃还有明显的容受性舒张，小肠还有分节运动及摆动。 如果将动物的小肠平滑肌离体，放置在各种化学成分、渗透压、pH、温度以及气体供应等 因子十分接近机体的内环境的溶液中时，可保持离体小肠段长时间地存活下来，并可以观察 到小肠平滑肌的自动节律性、紧张收缩性、伸展性和对机械牵拉、温度刺激、化学刺激十分 敏感，而对电刺激和切割刺激不敏感等一系列特性。通常用台式液做灌流液，将小肠的一端 固定，另一端连张力换能器，即可通过一定的记录装置记录下小肠肌的收缩曲线。 三使用仪器、材料 1 仪器：细线，注射器，恒温平滑肌槽，计算机生物信号采集处理系统，张力换能器，万 能支架，螺旋夹，双凹夹，温度计，橡胶管，制氧机等。 2、材料：台氏液，1:5000肾上腺素，1 : 10000乙酰胆碱，1%CaCl2溶液，1mol/LHCI溶液，1mol/LNaOH 溶液，阿托品等。 四.实验步骤 1、开启恒温平滑肌槽电源，使其恒温工作点定在37摄氏度。 2、猝死兔子，剪取2-3cm长的十二指肠，用台氏液漂洗，置于低温台氏液中备用。 3、连接各种仪器，将小肠的两端分别与标本固定钩和张力换能器连接，让制氧机正常为台 氏液供氧，进入计算机生物信号采集处理系统。 4、先后观察、记录37摄氏度台氏液中的肠段节律性收缩曲线，待中央标本槽内的台氏液 温度稳定在37摄氏度后，停氧1min，记录肠段节律性收缩曲线，恢复供氧，待台氏液中 的小肠稳定后，分别换成22 C, 45 C的台氏液，记录肠段节律性收缩曲线。再灌流37 C 台氏液待肠段活动恢复后，依次滴加1moI/LNaOH溶液，1moI/LHCI溶液，1%CaCI2溶液1: 5000肾上腺素，1: 10000乙酰胆碱，阿托品观察肠段收缩曲线的改变。每次实验在观察到明显变化后，都应用预先准备好的37 C台氏液冲洗3次。 五实验结果及分析 (1)缺氧对离体小肠活动的影响 从图一可以看出，正常情况下，离体家兔肠段收缩频率为17次/min,收缩张力最小值为 26.8g,最大值为35g。对浴槽内的离体小肠停氧的瞬间可以看到基线明显上移接着又下降回原来状态，其节律为16次/min,收缩张力最小值为23.7g，最大值为34.6g。 张力：g ■0 图一缺氧对离体小肠活动的影响(12.5s/Div) 单位：s
离体小肠平滑肌的生理特性及药物作用的观察 实验目的：学习一种离体组织器官实验方法；观察离子成分，酸碱度，温度，乙酰胆碱，肾上腺素等药物对离体家兔小肠 平滑肌的作用；分析平滑肌活动的某些生理特性及理化 环境改变对它的影响。 实验原理：消化道平滑肌具有自动节律性，较大的伸展性，对化学物质，温度及牵张刺激较为敏感等生理特性。将离体的 组织，器官置于模拟的内环境中，可在一定时间内保持 其功能，从而为我们检测它们的生理学和药理学特性提 供了便利的条件。功能和维持的时间长短与模拟内环境 的精确性和稳定性有关。 实验动物：家兔，体重2.0~~2.5kg，雌雄不拘。 实验器材：台氏液，0.01%肾上腺素溶液，0.01%乙酰胆碱溶液，0.01%阿托品溶液，1mol/L盐酸溶液，1mol/L氢氧化钠溶液。 恒温平滑肌槽，小烧杯，丝线，温度计，张力换能器，污 物杯，双凹夹。 实验步骤：1..处死动物 2.制备肠段标本 注意事项：1.肠管勿牵拉过紧或过松，且连线必须垂直，且不得与浴槽的管壁，通气塑料管接触，以免摩擦。 2.浴槽中液体的量以高过肠段为准，并保持液面高度一 致。
3.药物应滴在肠管附近，药物要事先预热至38度。各药 用量系参考剂量，若效果不明显，可以增补加药，但不 可一次过多，以免引起不可逆反应。 4.每次加药出现反应后，必须立即更换浴槽内的台氏液 至少三次，待肠管恢复稳定活动后，再观察下一项目。 实验结果：1. 正常情况下，离体小肠平滑肌在台氏液中可以自由缓 慢收缩，但其节律性不规则。在浴槽中加入乙酰胆碱 后可见离体肠管活动增强，描计曲线出现收缩频率变 快，幅度增加。出现上述现象是因为消化道平滑肌 产生动作电位的离子基础与钙离子的内流有关，乙 酰胆碱可与肌膜上的M受体结合，使得两类通道开 放：一类为电位敏感性钙离子专用通道，另一类为 特异性受体活化钙离子专用通道。前一类对Ach敏 感，小剂量Ach即引起开放；后一类对Ach相对不 敏感，只有大剂量才会引起开放。这两类通道开放 都使得肌浆中钙离子增高，进而激活肌纤蛋白—肌 凝蛋白—ATP系统，使平滑肌收缩，肌张力增加。 当加入抗胆碱药阿托品后，现象消失。
离体小肠平滑肌的生理特性及药物作用观察实 验报告精编 Document number：WTT-LKK-GBB-08921-EIGG-22986
离体小肠平滑肌的生理特性及药物作用观察 一、实验目的: ①进一步熟悉BL-410/420多媒体生物信号记录分析系统； ②学习离体肠肌的实验装置和使用方 法； ③观察并记录传出神经系统药物以及酸 碱对离体小肠平滑肌收缩的影响 二、实验对象：家兔离体小肠肠管。 三、实验原理：消化道平滑肌具有自动节律性运动的特性，其产生机理源于其肌肉细胞本身的自发缓慢放电并受中枢神经系统及体液因素的调节，所以可以取离体的小肠肠管并放置于人工创造的正常生理环境下，利用BL- 410/420多媒体生物信号记录分析系统和换能器系统分别研究传出神经系统药物以及酸碱对小肠平滑肌收缩的影响。 四、实验记录与分析 ㈠
图（一） 图（一)表示小肠由38度台氏液到室温下其平滑肌收缩曲 线变化情况 从图（一)可以看出小肠所处温度降到室温时明显减弱，因为平滑肌收缩需要酶催化，而温度在一定范围内下降时钠钾泵及离子通道的酶的催化活性也会降低，这就可以影响钠钾钙等离子的转运，继而影响去极化和复极化的速度，进而动作电位的产生速率和幅度就会下降，所以平滑肌的收缩程度会减弱。 ㈡
图（二） 图（二）表示在38度台氏液加入肾上腺素后小肠平滑肌收 缩曲线的变化情况 由图（二）可知加入肾上腺素后小肠平滑肌收缩明显减弱，这是因为肾上腺素与小肠平滑肌肌膜上的β肾上腺素能受体结合，可导致使膜超极化，从而使膜去极化达到阈电位的幅度增加，所以其动作电位的产生频率下降，所以小肠平滑肌的收缩幅度减弱。 ㈢
小肠平滑肌的生理特性和药物的影响 姓名：学号：班级： 一、实验目的 1.学习离体肠平滑肌器官灌流的实验方法。 2.观察豚鼠离体小肠平滑肌的一般生理特性。 3.观察药物对豚鼠离体小肠平滑肌生理特性的影响。 二、实验材料 1.实验动物：豚鼠 2.器材：小肠平滑肌恒温水浴装置，球胆（气泵或氧气筒），张力换能器，烧杯，温度 计，注射器，注射针头，棉线，手术剪，培养皿，滴管。 3.药品：台式液，10-5mol/L乙酰胆碱，10-4mol/L苯海拉明，10-5mol/L磷酸组胺，10-3mol/L 硫酸阿托品，1%BaCl2溶液。 三、实验方法和步骤 1.豚鼠离体肠平滑肌的制备 以手倒提豚鼠，用木槌猛击其头后部令其急死，立即剖开腹腔，轻轻剪取回肠，迅速 置于冷台式液中，除去肠系膜，并将肠管剪成数段，用台式液将肠内容物冲洗干净， 然后剪成小段备用。注意操作应轻柔。 2.实验装置的准备 此装置由恒温、供气、供液和排液以及记录部分组成。浴槽内水温由恒温装置控制在 37±0.5℃。浴管与浴槽相连，以使浴管内营养液保持同样的恒温。气源（充气气囊或 气泵等）与浴管相连，气流量以1～2个小气泡为宜。浴管下端与排液管相连，其上 端管口处可随时充入新的恒温营养液。 3.标本连接及记录 轻取一段标本，一端用线系在装置的小钩上，对角线方向将另一端用与张力换能器相 连的小钩钩住，慢慢放入浴管中并调节其紧张度至适宜，此时标本通过张力换能器与 计算机相连。标本连接好后向浴管内充入37±0.5℃营养液，适应10~15min后，描记 一段离体回肠平滑肌正常收缩曲线。 4.如果环境适宜，标本存活，适应10～15min后，描记一段正常曲线，然后按如下步 骤给药。
一实验目的 1、学习离体小肠平滑肌灌流的实验方法； 2、证明小肠平滑肌具有自动节律性和紧张性活动，观察若干刺激对离体小肠运动的影响。 二实验原理 动物的胃肠道由平滑肌组成，胃肠道平滑肌除具有肌肉的共性，如兴奋性、传导性和收缩性之外，尚有自己的特性，主要表现为紧张性和自动节律性收缩，可以形成多种形式的运动，主要有紧张性收缩，蠕动。此外，胃还有明显的容受性舒张，小肠还有分节运动及摆动。如果将动物的小肠平滑肌离体，放置在各种化学成分、渗透压、pH、温度以及气体供应等因子十分接近机体的内环境的溶液中时，可保持离体小肠段长时间地存活下来，并可以观察到小肠平滑肌的自动节律性、紧张收缩性、伸展性和对机械牵拉、温度刺激、化学刺激十分敏感，而对电刺激和切割刺激不敏感等一系列特性。通常用台式液做灌流液，将小肠的一端固定，另一端连张力换能器，即可通过一定的记录装置记录下小肠肌的收缩曲线。 三使用仪器、材料 1、仪器：细线，注射器，恒温平滑肌槽，计算机生物信号采集处理系统，张力换能器，万 能支架，螺旋夹，双凹夹，温度计，橡胶管，制氧机等。 2、材料：台氏液，1:5000肾上腺素，1：10000乙酰胆碱，1%CaCl2溶液，1mol/LHCl溶液， 1mol/LNaOH溶液，阿托品等。 四. 实验步骤 1、开启恒温平滑肌槽电源，使其恒温工作点定在37摄氏度。 2、猝死兔子，剪取2-3cm长的十二指肠，用台氏液漂洗，置于低温台氏液中备用。 3、连接各种仪器，将小肠的两端分别与标本固定钩和张力换能器连接，让制氧机正常为台 氏液供氧，进入计算机生物信号采集处理系统。 4、先后观察、记录37摄氏度台氏液中的肠段节律性收缩曲线，待中央标本槽内的台氏液 温度稳定在37摄氏度后，停氧1min ,记录肠段节律性收缩曲线，恢复供氧，待台氏液中的小肠稳定后，分别换成22℃，45℃的台氏液，记录肠段节律性收缩曲线。再灌流37℃台氏液待肠段活动恢复后，依次滴加1mol/LNaOH溶液，1mol/LHCl溶液，1%CaCl2溶液1：5000肾上腺素，1：10000乙酰胆碱，阿托品观察肠段收缩曲线的改变。每次实验在观察到明显变化后，都应用预先准备好的37℃台氏液冲洗3次。 五实验结果及分析 （1）缺氧对离体小肠活动的影响 从图一可以看出，正常情况下，离体家兔肠段收缩频率为17次/min,收缩张力最小值为26.8g，最大值为35g。对浴槽内的离体小肠停氧的瞬间可以看到基线明显上移接着又下降回原来状态，其节律为16次/min, 收缩张力最小值为23.7g，最大值为34.6g。 张力：g
实验十二消化实验 家兔离体小肠平滑肌生理特性 [目的要求] 1、学习离体肠段平滑肌的实验方法。 ２、了解肠段平滑肌的生理特性。 [基本原理] 哺乳动物消化管平滑肌与肌肉组织共有的特性,如兴奋性、传导性与收缩性等。但消化管平滑肌又有其特点,即兴奋性较低,收缩缓慢,富有伸展性,具有紧张性、自动节律性,对化学、温度与机械牵张刺激较敏感等。这些特性可维持消化管内一定压力,保持胃肠等一定的形态与位置,适合于消化管内容物的理化变化,在体内受中枢神经系统与体液因素的调节。将离体组织器官置于摸拟体内环境的溶液中,可在一定时间内保持其功能。本实验以台式液作灌流液,在体外观察及记录哺乳动物离体肠段的一般生理特性。 ［动物与器材] 兔、恒温平滑肌槽、支架、烧杯、20ｍｌ注射器、张力传感器、生物机能实验系统、温度计、台式液、肾上腺素(1:1000０)、乙酰胆碱(1:10０00)、阿托品针剂(1支)。 [方法与步骤] １、装好实验装置,平滑肌槽恒温调至3７℃。 ２、制备离体兔肠段 用木槌猛击兔后头延髓部,致其昏迷后立即剖开腹腔,找到胃幽门与十二指肠交界处。在十二指肠起始端扎一线,取出十二指肠、空肠、放入冷台式液内。先用20ml注射器冲洗内容物,冲洗干净后剪成若干约1、5cm长的小肠段(每一实验小组一段)在其两端结扎,一端做一短线环固定在通气的浴皿内,另一端扎线与张力传感器相连。将肠段完全浸浴在调好温度的平滑肌槽中,并调整好台式液充气量(小气泡接连不断)。 3、开启生物机能实验系统,接通与张力传感器相连的通道。固定管并调节扎线与张力传感器,使肠段运动自如又能牵动传感器(注意:扎线不可贴壁或过紧过
机能学实验报告 实验一、小肠平滑肌生理特性的观察与分析 一、实验目的—— 1.观察温度、乙酰胆碱、肾上腺素等药物对离体家兔小肠平滑肌的作用； 2.观察消化道平滑肌的一般生理特性及分析理化环境改变对其舒缩活动的影响。 二、实验原理 消化道平滑肌和骨骼肌、心肌一样，也具有兴奋性、传导性和收缩性，有些也具有自律性。相比之下消化道平滑肌的兴奋性低，收缩慢，伸展性大，具有紧张性收缩，对化学物质、温度变化
及牵张刺激较敏感等特性。小肠离体后，置于适宜的溶液中，观察其收缩活动及环境变化的影响，观察分析上述生理特性。 三、实验材料--- 1、实验动物：家兔 2、器械、药品：电热恒温水浴锅、浴槽、张力换能器（量程为25g以下）、BL-410生物记录系统、L型通气管、道氏袋、注射器、培养皿、温度计、烧杯、螺丝夹、三维调节器、台氏液、0.01%去甲肾上腺素、0.01%乙酰胆碱、1mol/L NaOH溶液、lmol/L HCl 溶液、2%CaCI2溶液。 四、实验方法和步骤 1、标本制备流程： ①击昏家兔： 用木槌猛击兔头枕部，使其昏迷。 ②剖开腹腔快速取出肠管： 立即剖开腹腔，找出胃幽门与十二指肠交界处，快速取长20~30cm的肠管，先将与该肠管相连的肠系膜沿肠缘剪去，置于供氧台氏液中轻轻漂洗，把肠内容物基本洗净。 ③制作离体肠标本： 将肠管分成数段，每段长2-3cm，两端各系一条
线，保存于供氧的38C左右的台氏液中 2、仪器安装与调试实验安装（如图）： 恒温水浴锅控制加热，恒温工作点定在38C。 将充满氧气的道氏袋与通气钩相连接，将肠段一端系在通气管钩上，另一端与张力换能器相连。控制通气量，使氧气从通气管前端呈单个而不是成串逸出。 仪器调试：BL-410系统的使用，选择“实验项目”中的“消化实验”选中“消化道平滑肌生理特性”。相关参数设置的参考值：时间常数t -DC 高频滤波 F —30Hz,显速—4.00s/div，增益—100g。用鼠标左键单击工具条上的“开始” 按钮，调节参数至波形幅度、密度适当，待收缩曲线稳定后，单击记录按钮。 观察项目现象及解释 1.待标本稳定后，记录小肠平滑肌收缩的对照曲线。 2?乙酰胆碱的作用用滴管吸入0.01%乙酰胆碱向灌流浴槽内滴1~2滴。观察到明显效应后，立即从排水管放出浴槽内含乙酰胆碱的台氏液，加入新鲜温台氏液，由此反复3次，以洗涤或稀释残留的乙酰胆碱，使之达到无效浓度，待小肠运动恢复后进行
实验十三离体小肠平滑肌的生理特性 一、实验目的 1、学习离体肠段平滑肌的实验方法。 2、观察消化道平滑肌的一般生理特性及某些因素对它的影响。 3、加深对消化道平滑肌生理特性的理解。 二、实验原理 消化管、血管、子宫、输尿管、输卵管以及输精管等均由平滑肌组成。哺乳动物消化管平滑肌与骨骼肌、心肌一样，具有肌组织共有的特性，如兴奋性、传导性和收缩性等。但消化道平滑肌又有其特点，即兴奋性较低，收缩缓慢，富有伸展性，具有紧张性、自动节律性，对化学、温度和机械牵张刺激较敏感等。这些特点对维持消化管内一定压力、保持胃肠等一定的形态和位置，适合于消化管内容物的理化变化具有生理意义。这些特点在整体内受中枢神经系统和体液因素的调节。 家兔小肠平滑肌上存在α、β、M受体。其作用是：α、β受体兴奋可使小肠平滑肌抑制而舒张；M受体兴奋可使小肠平滑肌兴奋而收缩。 下面是各类药品对小肠受体的分别作用： 1、乙酰胆碱（Ach）：M受体激活剂，乙酰胆碱可兴奋M受体，使小肠收 缩幅度增加，蠕动加强。 2、阿托品(Atro)：M受体阻断药，为竞争性拮抗剂，单独用药对肠管无 作用，可阻断M受体，对抗乙酰胆碱的M样作用，使肠管收缩幅度降 低。 3、肾上腺素(Ad)：α、β受体激活剂，可激活α、β受体（主要是β 2受体），α、β受体激动可产生与M受体激动相反的效应，表现为肠 管舒张，小肠蠕动减弱。 4、氯化钡（Bacl 2 ）：Ba2+ 进入细胞与钙调蛋白结合，使平滑肌收缩。Ba2+ 可使细胞膜发生去极化。所以加入Bacl 2肠管会发生强直性收缩，Bacl 2 并非作用于受体，所以阿托品不能对抗这一作用。
5、盐酸（HCl）：加酸可使Ca2+ 内流减少，肌浆网Ca2+ 释放减少，从而 Ca2+ 与肌钙蛋白结合减少，因此平滑肌收缩频率和幅度都降低。 6、氢氧化钠（NaOH）：加碱后[H+]降低，Ca2+ 内流增加，肌浆网Ca2+ 释放 增多，从而Ca2+ 与肌钙蛋白结合增多，因此平滑肌收缩频率和幅度都 升高。 7、磷酸组织胺：作用于静息电位较高、兴奋性也较高的Ah型神经，使其 兴奋性进一步增强，冲动发生频率增加，破坏了神经丛原有的冲动发 放频率，使得小肠平滑肌痉挛，持续收缩而不舒张。 三、动物与器材 实验动物：家兔 1只。 实验器材：恒温水浴槽、滴管、小烧杯、培养皿、张力换能器、桥式放大、细线。 实验试剂：台式液、1／10 000肾上腺素、1／100000乙酰胆碱、0.01％磷酸组胺、1mol/L的NaOH溶液、1mol/L的HCl溶液、0.5mg/ml 硫酸阿托品、1％氯化钡溶液。 四、方法与步骤 1、恒温浴档的准备：使用平滑肌槽恒温仪，浴槽用电热棒及恒温仪控制加热， 恒温工作点定在38C左右。实验前将台氏液加入4支小试管，放入浴槽水域中。开电源开关，使其加热，同时指示灯亮(若恒温控制失灵时，需用温度计随时探测浴槽中的温度)。 2、通入氧气：连接氧气管，经橡皮管送入装有台氏液的培养皿中，调整气体量 至3-5个泡/s。调整Powerlab，准备张力换能器，使其固定于营养管正上方。 3、制备标本：用木检猛击免头忱部，使其昏迷，立即剖开腹腔，找出胃幽门与 十二指肠交界处。由此取长20一30cm的肠管。先将与该肠管相连的肠系膜沿肠缘剪去，再将此肠管两端分别用线结扎，干结扎两端内侧剪断．取出肠段，置于古氏液中轻轻漂洗，当肠内容基本洗净后，将肠管分成数段．每段长2—3cm、两端各系一条线，保存于供氧的35℃左右的台氏液中。 4、标本安装：将小肠段一端固定于营养管钩子上，一端连于张力换能器，放入 营养管中，使肠段完全浸于台氏液中，且保证其不贴壁，液未碰到其他阻碍，
实验五离体小肠平滑肌的生理特性及药物作用的观察 【实验目的】 学习一种离体组织器官实验方法;观察离子成分、酸碱度、温度、乙酰胆碱、去甲肾上腺素对离体家兔小肠平滑肌的作用；分析平滑肌活动的某些生理特性及理化环境改变对它的影响。 【实验原理】 消化道平滑肌具有自动节律性、较大的伸展性，对化学物质、温度及牵张刺激较为敏感等生理特性。 【实验材料】 实验动物：家兔，2.0-2.5kg 实验药品：台式液、0.01%去甲肾上腺素溶液、0.01%乙酰胆碱溶液、0.01%阿托品溶液、1.0%氯化钙溶液、1mol/l盐酸溶液、1mol/l氢氧化钠溶液。 实验器材：恒温平滑肌槽、小烧杯、污物杯、张力换能器、双凹夹、温度计、BL-420生物信号系统、丝线等。 【实验步骤】 1.恒温浴槽的准备工作； 2.标本制备； 3.仪器连接与设置； 4.启动计算机，打开BL-420生物信号系统，调节参数，开始记录。 观察项目 1.自动节律性收缩，描记一段离体小肠平滑肌的收缩曲线，观察其节律性 收缩及张力水平。 2.观察胆碱能受体激动剂对肠断收缩的影响及阻断剂的作用。 （1）乙酰胆碱的作用：向浴槽标本管中加入0.01%的乙酰胆碱溶液1~2滴，观察肠管张力和收缩有何变化。作用产生后，洗涤三次，进 行下一项实验。 （2）阿托品的作用：向浴槽标本管中加入0.01%的阿托品溶液2~3滴， 两分钟后，再加入0.01%的乙酰胆碱溶液1~2滴，观察肠管张力和收缩 有何变化。与（1）比较结果后，洗涤三次，待其活动稳定后，进行下一
项实验。 3.观察肾上腺素能受体激动剂对肠断收缩的影响及阻断剂的作用。 去甲肾上腺素的作用：向浴槽标本管中加入0.01%的去甲肾上腺素2~3 滴，观察肠管张力和收缩有何变化。然后洗涤三次，待其活动稳定后， 进行下一项实验。 4．观察钙离子对肠断收缩的影响 向浴槽标本管中加入1%的氯化钙溶液2~3滴，观察肠管平滑肌的反应。然后洗涤三次，待其活动稳定后，进行下一项实验。 5．观察酸碱度对肠断收缩的影响 向浴槽标本管中加入1mol/l的盐酸溶液1~2滴，观察平滑肌的反应，待作用出现明显后，在此基础上，加入1mol/l的NaOH溶液1~2滴，观察平滑肌的反应。 【实验结果】 1.乙酰胆碱对肠断收缩的影响：小肠平滑肌收缩活动加强。 2.阿托品和乙酰胆碱对肠断收缩的影响：小肠平滑肌收缩活动不受影响。
离体小肠平滑肌的生理特性及药物作用观察实验报告离体小肠平滑肌的生理特性及药物作用观察 一、实验目的：①进一步熟悉ＢL-４１0/４20多媒体生物信号记录分析系统； ②学习离体肠肌的实验装置和使 用方法； ③观察并记录传出神经系统药物 以及酸碱对离体小肠平滑肌收缩的影响 二、实验对象:家兔离体小肠肠管。 三、实验原理：消化道平滑肌具有自动节律性运动的特性,其产生机理源于其肌肉细胞本身的自发缓慢放电并受中枢神经系统及体液因素的调节，所以可以取离体的小肠肠管并放置于人工创造的正常生理环境下，利用BL-4１0／4２０多媒体生物信号记录分析系统和换能器系统分别研究传出神经系统药物以及酸碱对小肠平滑肌收缩的影响。. 四、. 五、实验记录与分析 ㈠
图（一） 图（一)表示小肠由38度台氏液到室温下其平滑肌收 缩曲线变化情况 从图（一）可以看出小肠所处温度降到室温时明显减弱,因为平滑肌收缩需要酶催化,而温度在一定范围内下降时钠钾泵及离子通道的酶的催化活性也会降低,这就可以影响钠钾钙等离子的转运,继而影响去极化和复极化的速度，进而动作电位的产生速率和幅度就会下降，所以平滑肌的收缩程度会减弱。. . ㈡
图（二) 图（二）表示在38度台氏液加入肾上腺素后小肠平滑 肌收缩曲线的变化情况 由图（二）可知加入肾上腺素后小肠平滑肌收缩明显减弱,这是因为肾上腺素与小肠平滑肌肌膜上的β肾上腺素能受体结合,可导致使膜超极化，从而使膜去极化达到阈电位的幅度增加,所以其动作电位的产生频率下降，所以小肠平滑肌的收缩幅度减弱。. . ㈢
图(三) 图（三）表示在正常38度台氏液里滴加乙酰胆碱的小 肠平滑肌收缩曲线变化情况 由图(三）可知在正常38度台氏液里滴加乙酰胆碱后小肠平滑肌收缩明显增强，这是应为乙酰胆碱与小肠平滑肌肌膜上的Ｍ受体结合后，可以在膜去极化未达到一定的电位时提前激活更多的慢钙通道,使大量的钙离子内流，进而使动作电位产生的频率增加,所以小肠的平滑肌收缩增强.. . ㈣
离体小肠平滑肌的生理特性 一、实验结果 1.37℃时小肠平滑肌的正常收缩曲线： 2.停止供氧1min： 恢复供氧： : 3.加BaCl 2 : 4.加CaCl 2 5.加Adr:
6.加Ach ： 7.加阿托品、Ach(仪器故障，取自其他组) 二、分析与讨论 哺乳动物小肠平滑肌具有其特点，即兴奋性较低，收缩缓慢，富有伸展性，具有紧张性、自动节律性，对化学、温度和机械牵张刺激较敏感等。将离体小肠置于模拟内环境（如本实验使用的台氏液）中，可在一定时间内保持其功能可，以此来研究肠段的一般生理特性。 1.37℃正常情况下 可以观察到离体小肠段在台式液中缓慢地节律性收缩。 分析：肌肉本身具有一种自发的节律性去极化波，它受神经、体液调节。 2.缺氧 由图可知，停止供氧后，小肠的收缩减弱，直至恢复供氧，小肠的收缩恢复正常。 分析：停止供氧，肠肌细胞新陈代谢减弱，ATP 产量下降，能量缺乏，收缩减弱。 3.加BaCl 2 由图可知，加入BaCl 2后，小肠的收缩加强。 分析：①Ba 2+刺激肠壁的化学感受器，通过壁内神经丛短途反射，使收缩加强。 ②Ba 2+进入细胞与钙调蛋白结合，使平滑肌收缩。③Ba 2+可使细胞膜发生去极化，直接兴奋肠肌。 4.加CaCl 2 由图可知，加入CaCl 2后，小肠的收缩先增强后减弱。 分析：平滑肌动作电位发生主要是由于Ca 2+内流。由于胞外Ca 2+浓度升高，胞内Ca 2+随之升高，激活平滑肌收缩系统，收缩增强。 5.加Adr 由图可知，加入Adr 后，小肠的收缩减弱。 分析：肠肌膜上存在α和β受体，Adr 作用于α受体，引起肠肌膜上K +外流增多，细胞膜发生超极化，膜去极化达到阈电位的电位幅度增加，所以其动作电位的产阿托品 Ach
机 能 实 验 学 实 验 报 告 课题名称：传出神经药物对离体肠肌的作用院（系）：韶关学院医学院 专业班级：2011级临床医学本科班 学生姓名：符宏展 学号：112 指导教师：梁俊辉 二○一三年六月五日
机能实验报告 实验目录： 1 实验目的 2 实验装置和器材 3 实验药物 4 实验动物 5 实验原理 6 实验方法 7 实验注意事项 8 实验结果 实验数据 实验记录波型及静态测量数据 9 实验结果讨论 10 实验结论 11 实验思考
实验报告 实验次序：九实验项目：传出神经药物对离体肠肌的作用班级：11临本姓名：符宏展学号：112 实验类型（打√）：（基础□综合□设计□） 一、实验预习 实验预习报告内容原则上应包含实验目的、实验原理、实验主要仪器、试剂及实验步骤。 实验目的： 掌握：1.消化道平滑肌的一般生理特性及某些因素对它的影响。 2.哺乳动物离体器官灌流法。 实验装置和器材：RM6240生物信号采集与处理系统、离体器官恒温灌流仪、氧气瓶、张力换能器、烧杯、滴管等。 实验药物：蒂罗德溶液、0.01%肾上腺素、0.01% 乙酰胆碱、0.01%阿托品、0.1%普萘洛尔、0.1%酚妥拉明等。 实验动物：家兔 实验原理： 哺乳动物消化道平滑肌具有收缩性、缓慢而不规则的自动节律性、伸展性和对化学、温度及机械牵张刺激较为敏感等生理特性。 消化道平滑肌常保持微弱的持续收缩状态，即有一定的紧张性。本实验应用不同的化学刺激、神经递质和药品作用于离体平滑肌，以了解其一般生理特性及药物的影响。 家兔小肠平滑肌上存在α、β、Ｍ受体。α、β受体兴奋可使小肠平滑肌抑制而舒张；Ｍ受体兴奋可使小肠平滑肌兴奋而收缩。观察乙酰胆碱、阿托品、肾上腺素等传出神经系统药物对离体家兔小肠平滑肌的作用并掌握离体平滑肌的实验方法。 实验方法： 1.仪器的准备：恒温浴槽的水箱加入适当的水,设置温度为38℃； 2.动物手术：制备离体肠肌标本； 3.安装实验装置：肠段置于恒温灌流仪的内槽,下端系在钩上,上端与张力换能器相连。氧气袋开口的针头插入标本槽下端的橡皮管内,人工加压控制出气量,使气泡呈单个逸出； 4.观察项目： ⑴观察正常小肠平滑肌运动的节律、波形和幅度； ⑵给予0.01%乙酰胆碱2滴，观察收缩曲线的变化； ⑶给予0.01%阿托品2～4滴，观察收缩曲线的变化。1~2min后再加入乙酰胆碱2滴于浴槽内，观察收缩曲线的变化； ⑷给予0.01%肾上腺素2滴，观察收缩曲线的变化； ⑸给予0.1%普萘洛尔2滴，观察收缩曲线的变化。2min后加入0.01%肾上腺素2滴，观察收缩曲线的变化；1min后加入0.1%普萘洛尔2滴，观察收缩曲线的变化； ⑹给予0.1%酚妥拉明2滴，观察收缩曲线的变化。2min后加入0.01%肾上腺素2滴，观察收缩曲线的变化；1min后加入0.1%酚妥拉明2滴，观察收缩曲线的变化；
人体机能学实验报告 离体小肠平滑肌肌的生理特性 实验结果：实验讨论： 1、我们可以看到小肠从17℃转移到38℃的台氏液中，小肠平滑肌的收缩幅度、 基线上移和频率增加，产生上述的主要原因是：小肠肠管的台氏液温度以38℃~40℃为宜，低于或高于这个温度，都会影响结果。由于小肠管平滑肌对温度改变极为敏感，当温度降到30℃以下时，故代谢水平的降低，兴奋性减弱，可出现收缩曲线基线下移，频率变慢，收缩幅度变小。 2、在浴槽中加入乙酰胆碱后，可见离体肠管活动增强，幅度增加。出现上述现 象的机理，目前认为乙酰胆碱可与肌膜上的M受体 结合，使得两类通道开放：一类为电位敏感性Ca2+ 专用通道，另一类为特异性受体活化Ca2+ 专用通道。前一类通道对Ach敏感，小剂量Ach即引起开放；后一类通道对Ach 相对不敏感，只有大剂量Ach才会引起开放。这两类通道开放都使得肌浆中Ca2+增高，进而激活肌纤蛋白—肌凝蛋白—ATP系统，使平滑肌收缩，肌张力增加。 3、在浴槽标本管中加入阿品托溶液，2分钟后再加入乙酰胆碱（Ach ），发现 小肠管张力和收缩力没有明显 的变化，原因是阿托品是乙酰 胆碱阻断剂，使乙酰胆碱的作用消失。故加入乙酰胆碱后没有作用。所以两者都加入观察到曲线无明显变化。
4、在浴槽中加入肾上腺素后，可见离体肠管活动减弱，描记曲线出现收缩频率 变慢，幅度减小以及基线下移。出现上述现象的机理， 目前认为与肠肌细胞膜上存在α和β两中受体，α受 体又分为α抑制型受体和α兴奋型受体有关。肾上腺 素作用于α抑制型受体，引起肠肌膜上一种特异性受体活化，使K+外流增多，细胞膜发生超极化，肠肌兴奋性降低，肌张力下降。同时，肾上腺素还作用于β受体，①它的激活引起肠肌细胞膜中的cAMP 合成增多，cAMP激活肠肌膜及肌浆网上Ca2+泵活动，使肌浆中Ca2+浓度降低，亦使肌张力降低；②β 受体激活后还促使K+及Ca2+外流增加，加速膜的超极化，促进了肠肌肌张力的减低。 5、在浴槽中加入盐酸溶液后，离体肠管活动减弱，描记曲线出现收缩幅度降低， 频率变慢。出现这一现象，目前认为其原 因在于：①细胞外H+升高时，Ca2+通道 的活性受到抑制，使得Ca2+内流减少。 ② H+升高能干扰肌肉的代谢和肌丝滑行 的生化过程：H+能与Ca2+竞争钙调蛋白的结合位点而使肌球蛋白ATP酶活性降低（近期有理论认为是直接抑制作用而非竞争作用）；使肌原纤维对Ca2+的敏感性和Ca2+从肌质网的释放量减少。在加盐酸使平滑肌收缩减弱的基础上，再加NaOH于浴槽中，则肠管活动出现相反的情况，即肠管活动增强。原因在于NaOH可以中和H+，改变了细胞外液的PH值，PH过高、过低，收缩幅度及张力都会降低，故小肠平滑肌的收缩又恢复正常。由于此次试验加入的量过多，出现收缩的下降，和恢复收缩的不明显。
离体小肠平滑肌的生理特性及药物作用观察 一、实验目的: ①进一步熟悉BL-410/420多媒体生物信号记录分析系统； ②学习离体肠肌的实验装置和使用方法； ③观察并记录传出神经系统药物以及酸碱对离体小肠平滑肌收缩的影 响 二、实验对象：家兔离体小肠肠管。 三、实验原理：消化道平滑肌具有自动节律性运动的特性，其产生机理源于其肌肉细胞本身的自发缓慢放电并受中枢神经系统及体液因素的调节，所以可以取离体的小肠肠管并放置于人工创造的正常生理环境下，利用BL-410/420多媒体生物信号记录分析系统和换能器系统分别研究传出神经系统药物以及酸碱对小肠平滑肌收缩的影响。 四、实验记录与分析 ㈠ 图（一） 图（一)表示小肠由38度台氏液到室温下其平滑肌收缩曲线变化情况从图（一)可以看出小肠所处温度降到室温时明显减弱，因为平滑肌收缩需要酶催化，而温度在一定范围内下降时钠钾泵及离子通道的酶的催化活性也会降低，这就可以影响钠钾钙等离子的转运，继而影响去极化和复极化的速度，进而动作电位的产生速率和幅度就会下降，所以平滑肌的收缩程度会减弱。 ㈡
图（二） 图（二）表示在38度台氏液加入肾上腺素后小肠平滑肌收缩曲线的变化情况 由图（二）可知加入肾上腺素后小肠平滑肌收缩明显减弱，这是因为肾上腺素与小肠平滑肌肌膜上的β肾上腺素能受体结合，可导致使膜超极化，从而使膜去极化达到阈电位的幅度增加，所以其动作电位的产生频率下降，所以小肠平滑肌的收缩幅度减弱。 ㈢
图（三） 图（三)表示在正常38度台氏液里滴加乙酰胆碱的小肠平滑肌收缩曲线变化情况 由图（三）可知在正常38度台氏液里滴加乙酰胆碱后小肠平滑肌收缩明显增强，这是应为乙酰胆碱与小肠平滑肌肌膜上的M受体结合后，可以在膜去极化未达到一定的电位时提前激活更多的慢钙通道，使大量的钙离子内流，进而使动作电位产生的频率增加，所以小肠的平滑肌收缩增强。 ㈣
医学院实验报告 班级: 学号: 姓名: 实验课程:机能学实验 实验项目:消化道平滑肌的生理特性与药物的影响 实验分室: 实验日期 2015年 6 月 3 日 1、学习离体肠段平滑肌的实验方法。 2、了解肠段平滑肌的生理特性。 3、观察某些药物对离体平滑肌的作用 二、实验原理 哺乳动物消化管平滑肌与肌肉组织共有的特性,如兴奋性、传导性与收缩性等。但消化管平滑肌又有其特点,即兴奋性较低,收缩缓慢,富有伸展性,具有紧张性、自动节律性,对化学、温度与机械牵张刺激较敏感等。这些特性可维持消化管内一定压力,保持胃肠等一定的形态与位置,适合于消化管内容物的理化变化,在体内受中枢神经系统与体液因素的调节。将离体组织器官置于摸拟体内环境的溶液中,可在一定时间内保持其功能。本实验以台式液作灌流液,在体外观察及记录哺乳动物离体肠段的一般生理特性。 三、实验仪器与材料 兔、恒温平滑肌槽、支架、烧杯、20ml注射器、张力传感器、生物机能实验系统、温度计、台式液、肾上腺素(1:10000)、乙酰胆碱(1:10000)、阿托品针剂(1支)。 四、实验内容、方法与步骤 1、安装麦氏浴槽恒温平滑肌浴槽可用来记录消化道平滑肌的收缩活动,分为外槽与内槽,内槽用来浸浴实验标本,外槽内有恒温自来水流动以加热内槽中的台氏液,使其温度保持在37℃左右。小肠标本一端固定在 内槽底部的铁钩上,另一端连至肌肉张力换能器的悬臂上。换能器与生物信号采集处理系统通道相连并输入计
算机。内槽中的台氏液以刚能淹没肠管为宜。内槽底部还有通空气与排液的共同开口,通过此开口可排液与供给标本所需氧气。 2、制备离体兔肠段 取禁食24h的健康家兔,一手提后肢使头部自然下垂,另一手用木槌猛击兔后头延髓部,致其昏迷后立即剖开腹腔,找到胃幽门与十二指肠交界处。在十二指肠起始端扎一线,取出十二指肠、空肠、放入冷台式液内。先用20ml注射器冲洗内容物,冲洗干净后剪成若干约1、5cm长的小肠段(每一实验小组一段)在其两端结扎,一端做一短线环固定在通气的浴皿内,另一端扎线与张力传感器相连,此线不宜过长且必须竖直。将肠段完全浸浴在调好温度的平滑肌槽中。 3、开启生物机能实验系统,接通与张力传感器相连的通道。固定管并调节扎线与张力传感器,使肠段运动自如又能牵动传感器(注意:扎线不可贴壁或过紧过松)。调节增益与扫描速度,使肠段的运动曲线清晰地显示在显示器上并记录肠段活动曲线。 4、实验观察 (1)记录肠段正常运动曲线,观察基线水平、收缩幅度、节律及波形特点。用新鲜37℃台式液冲洗,待恢复正常(注意作好标记,下同)。 (2)加肾上腺素在内槽台氏液中加入1～2滴肾上腺素(1:10000),观察并记录曲线变化。曲线变化后立即更换新的38℃的台氏液。 (3)加乙酰胆碱在内槽台氏液中加入1～2滴乙酰胆碱(1:10000),观察并记录曲线变化。依上法冲洗。 (4)在内槽台氏液中加入2～4滴阿托品(1:10000),2min后再加1～2滴乙酰胆碱(1:10000),记录并观察曲线变化,与项目(3)进行比较。依上法冲洗。 (5)环境pH的影响加入HCL3~4滴,观察平滑肌收缩活动的改变。在其基础上再滴3~4滴NaOH观察肠平滑肌的反应。标记,冲洗。 (6)温度的影响将内槽换成25℃台式液,同时关闭恒温加热装置,使内槽台氏液温度逐渐降至25℃,并记录曲线变化,同时观察肠段紧张度变化。 五、实验数据处理