动物细胞工程
一、单选题：
1．下列关于动物细胞培养的叙述，正确的是
A．培养中的人效应T细胞能产生单克隆抗体
B．培养中的人B细胞能够无限地增殖
C．人的成熟红细胞经过培养能形成细胞株
D．用胰蛋白酶处理肝组织可获得单个肝细胞
2．单克隆抗体技术在疾病诊断和治疗以及生命科学研究中具有广泛的应用。下列关于单克隆抗体的叙述，错误
．．的是
A．特异性强、灵敏度高
B．与抗癌药物结合可制成“生物导弹”
C．体外培养B淋巴细胞可大量分泌单克隆抗体
D．由效应B细胞与骨髓瘤细胞融合而成的杂交瘤细胞分泌
3．关于单克隆抗体，下列叙述不．正确的是
A．可以制成诊断盒．用于疾病的珍断
B．可以与药物结合，用于病变细胞的定向治疗
C．可以利用基因工程技术生产
D．可以在生物体内生产，不能体外生产
4．下列关于细胞工程的叙述中，错误
．．的是
A．植物细胞融合必须先制备原生质体B．试管婴儿技术包括人工受精和胚胎移植两方面
C．经细胞核移植培育出新个体只具有一个亲本的遗传性状D．用于培养的植物器官或属于外植体
5．用动物细胞工程技术获取单克隆抗体，下列实验步骤中错误
．．的是
A．将抗原注入小鼠体内，获得能产生抗体的B淋巴细胞
B．用纤维素酶处理B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞
C．用聚乙二醇（PEG）作诱导剂，促使能产生抗体的B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合D．筛选杂交瘤细胞，并从中选出能产生所需抗体的细胞群，培养后提取单克隆抗体6．人类寄希望于利用干细胞（人体中具有分裂、分化能力的细胞）的分离和体外培养，在体外培育出组织器官，并最终通过组织或器官移植实现对临床疾病的治疗。能否用肌细胞代替干细胞
A．不能，因为肌细胞与干细胞所含有的遗传物质不同
B．不能，因为肌细胞是高度分化的细胞，没有分裂能力
C．能，因为肌细胞虽然是分化的细胞，但在一定条件下也可脱分化，实现细胞全能性D．能，因为肌细胞与干细胞具有完全相同的遗传物质
7．下列属于组织培养但不是克隆的是（）A．将花粉离体培养成单倍体植株B．芽发育成枝条
C．根尖分生区发育成成熟区D．上皮细胞无性繁殖产生的细胞群
8．动物细胞培养液和植物组织培养液的共有成分是（）A．葡萄糖B．蔗糖C．动物血清D．维生素
9．动物细胞培养的细胞来自于（）A．任何个体的细胞B．只能取自动物胚胎细胞
C．只能取自幼龄动物的组织细胞D．胚胎或幼龄动物的器官和组织细胞
10．动物细胞工程常用的技术手段中，最基础的是（）
A.动物细胞培养B．动物细胞融合C．单克隆杭体D．胚胎、核移植
11.“生物导弹”是指（）
A.单克隆抗体
B.杂交瘤细胞
C.产生特定抗体的B淋巴细胞
D.在单抗上连接抗癌药物
12．.如用动物的细胞进行克隆实验应该选择的细胞核不能是（）
A、乳腺细胞的
B、卵细胞的
C、胃腺细胞的
D、囊胚时期的胚胎细胞的
13．单克隆抗体制备过程中使用的骨髓瘤细胞是一种缺陷型细胞，在含有次黄嘌呤、氨基喋呤和胸腺嘧啶的培养基（HAT）中无法生长；而小鼠脾细胞是正常细胞，在HAT培养基上可正常存活。用聚乙二醇诱导细胞融合后，经过数代培养，最终可在HA T培养基上存活并能产生单克隆抗体的细胞是（）
A．骨髓瘤细胞之间形成的融合细胞B．脾细胞之间形成的融合细胞
C．骨髓瘤细胞与脾细胞之间形成的融合细胞D．脾细胞
14．研究单克隆抗体治疗癌症的思路是（）
A．利用单克隆抗体特异性地对抗癌细胞
B．以单克隆抗体作抗癌药物杀死癌细胞
C．抗癌物质在克隆细胞中大量合成
D．单克隆抗体携带抗癌药物特异性地与癌细胞结合
15．用于动物细胞培养的组织和细胞大都取自胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织，其主要原因是这样的组织细胞（）
A.容易产生各种变异B．具有更强的全能性
C.取材十分方便D．分裂增殖的能力强
16．动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中，正确的是（）
①诱导融合的方法完全相同②所用的技术手段不相同③所采用的原理完全相同④都能形成杂种细胞
A.①②
B.①③
C.②④
D.③④
17．有关动物细胞培养的叙述中正确的是
A．动物细胞培养前要用胰蛋白酶使细胞分散
B．动物细胞培养的目的是获得大量的细胞分泌蛋白
C．细胞遗传物质的改变发生于原代培养过程中
D．培养至50代后能继续传代的传代细胞叫细胞株
二.多选题
18．关于制备单克隆抗体的叙述不正确的是
A．单克隆抗体产自淋巴细胞
B．单克隆抗体的制备要经过细胞融合
C．单克隆抗体的获得不需要使细胞癌变
D．必须同时在体内和体外培养挑选出所需抗体的细胞群
19．对细胞全能性的表述不正确的有
A．没有离体植物细胞也能表现出全能性
B．动物细胞融合标志着动物细胞全能性的实现
C．单克隆抗体的制备原理依据是细胞的全能性
D．花粉可培育成单倍体，是细胞全能性的体现
20．将小鼠骨髓瘤细胞与一种B淋巴细胞融合，可使融合的细胞经培养产生单克隆抗体，其依据是
A．B淋巴细胞只有与骨髓瘤细胞融合后才能产生抗体
B．B淋巴细胞可以产生抗体，但不能无限增殖
C．骨髓瘤细胞可以产生抗体，但不能无限增殖
D．骨髓瘤细胞可以无限增殖，但不能产生抗体
21．动物细胞体外培养时，通常要在培养基中补充一定浓
度的某些物质。如图是血清对正常细胞和癌细胞培养影响
的实验结果。从该图提供的信息可以获得的正确结论有 :
A．正常细胞与癌细胞的增殖速率相同
B.有无血清对正常细胞培养的影响不同
C．培养基中补充血清有助于正常细胞的培养
D.培养基中是否补充血清对癌细胞的培养影响不大
三、非选题：
22、下图为细胞融合的简略过程（只考虑两个细胞的融合），请据图回
答：
I．若A、B是基因型分别为rrHH、RRhh两个烟草品种细胞的花粉，且这两对基因位于非同源染色体上，由于一对隐性纯合基因(rr或hh) 的作用，在光照强度大于800勒克斯时，都不能生长。
（1）实验开始时必须用除去不利于原生质体融合的物质。
（2）实验中除获得杂种细胞外，还有基因型为的融合细胞。
（3）设计一方法（不考虑机械方法），从培养液中分离出杂种细胞，方法：
（4）将杂种细胞培养成杂种植株依据的理论基础是。
II．若该过程是制备治疗“SARS”病毒的单克隆抗体，A为人B淋巴细胞（染色体组成为2A＋XX=46），B为鼠骨髓瘤细胞（染色体组成为2A＋XX=40）
（5）用单克隆抗体制成“生物导弹”主要利用了抗体的特性。
（6）A细胞来自于，杂种细胞C共有个染色体组。
（7）杂交瘤细胞在体外培养时与植物组织培养的主要区别是培养基要用培养基。（物理状态），培养基中除了添加必要的营养物质为还需加入。
23、肺癌在全国的发病率居肿瘤之首，小细胞肺癌是恶性程度最高的一种，上海肺癌研究所细胞与分子免疫研究室在国内率先研制出一种名叫“2F7”的靶向生物导弹。这种生物导弹是一种专门对小细胞肺癌产生特定靶向性的特异性单克隆抗体。注入静脉后，会“直扑”小细胞肺癌病灶，使其携带的肿瘤化疗药物能“集中火力”抑制、杀灭肿瘤细胞。这预示着化疗药物有望弥补“良莠不分”、损害全身免疫力的缺陷。
（1）制备单克隆抗体的原理是。
（2）制备单克隆抗体用到的动物细胞工程技术手段有。
（3）单克隆抗体是由细胞产生的。
（4）静脉注入而不是口服单克隆抗体的原因是。
（5）单克隆抗体与肿瘤细胞结合并发挥作用的过程属于免疫的阶段。
24．为某同学根据右图杂交瘤技术的方法，设计的生产破伤风杆菌抗体的实验方案，据图回答：
1）该方案能达到预期效果吗？_________原因是
______________________________。
（2）图中②为_________过程，常用
____________________________作为诱导剂，该细胞继承了_________________，因此不仅能分泌
_________，还有_________________本领。
（3）破伤风杆菌的抗体最终可以从_________和
_________中提取。
（4）该方案的目的是_________________。
25、右图是制备分泌抗X抗体的过程，根据图解回答问题：
（1）给小鼠注射抗原的目的是__________________。
（2）在单克隆抗体制备过程中之所以
选用B淋巴细胞和骨髓瘤细胞，是因
为它们融合后的杂交瘤细胞具有
_________________________的特性。
（3）由图中可看出，单克隆抗体制备
过程运用了____ __和__________的
动物细胞工程技术手段，前者常用的
诱导剂与植物原生质体融合不同的是
可用________________。
（4）动物细胞培养液的配方通常含有
葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素等，
与植物细胞培养基有所不同的是，还
含有_________________。
（5）在动物细胞融合过程中，需要将
所选取的组织细胞离散开，以利于细
胞融合，可用________________处理
离体组织细胞使之分散开。
（6）图中有两次筛选过程，其中步骤
④的目的是筛选出___________ _____，步骤⑤⑥的目的是筛选出________ _______。
（7）请根据以下信息，设计一方法（不考虑机械方法），从培养液中筛选出杂交瘤细胞。已知细胞合成DNA有D和S两条途径，其中D途径能被氨基嘌呤阻断。人淋巴细胞中有这两种DNA的合成途径，但一般不分裂增殖。鼠骨髓瘤细胞中尽管没有S途径，但能不断分裂增殖，将这两种细胞在试管中混合，加聚乙二醇促融，获得杂种细胞。
方法：____________ ______________。原理：______________ ________
26、(1)在动物细胞培养过程中，当贴壁细胞分裂长年到细胞表面时，细胞会停止分裂增增殖，这种现象称为细胞的。此时，瓶壁上形成的细胞层数是。要使贴壁细胞从瓶壁上分离下来，需要用酶处理，可用的酶是。
(2)随首细胞传代次数的增多，绝大部分细胞分裂停止，进面出现的现象；但极少数细胞可以连续增殖，其中有些细胞会因遗传物质发生改变面变成细胞，该种细胞的黏着性，细胞膜表面蛋白质（糖蛋白）的量。
(3)现用某种大分子染料，对细胞进行染色时，观察到死细胞被污色，而活细胞不染色，原因是。
(4) 检查某种毒物是否能改变细胞染一的数目，最好选用细胞分裂到期的细胞用显微镜进行观察。
(5)在细胞培养过程中，通常在条件下保存细胞。因为在这种条件下，细胞中的活性降低，细胞的速率降低。
(6)给患者移植经细胞培养形成的皮肤组织后，发生了排斥现象，这是因为机体把移植的皮肤组织当作进行攻击。
27、现有甲、乙两种可能有一定毒性的化学物质，实验室研究人员欲通过动物细胞培养的方法来鉴定它们是否有毒性并比较二者毒性的强弱。请你以一个研究人员的身份参与此项研究，完成下列有关问题。
Ⅰ．实验原理：
根据这种变异细胞占全部培养细胞的百分数(以下称Q值)，可判断该化学物质的毒性。
Ⅱ．材料用具：活的小白鼠胚胎、胰蛋白酶液、动物细胞培养液、动物细胞固定液、适宜浓度的龙胆紫溶液、适宜浓度的化学物质甲溶液、适宜浓度的化学物质乙溶液、蒸馏水、滴管、培养皿、剪刀、锥形瓶、恒温箱、载玻片、盖玻片、显微镜、小白鼠正常有丝分裂各时期的高倍显微照片。
Ⅲ．实验步骤：
(1)制备细胞悬浮液。
把活的小白鼠胚胎放在培养皿中剪碎，转入锥形瓶中，加入胰蛋白酶液处理，使胚胎组织离散成单个细胞，再加入动物细胞培养液，制成细胞悬浮液。
(2)进行细胞培养。
①取A、B、C 3个洁净的培养瓶，；
②A、B两个培养瓶中分别加入等量的甲、乙溶液。C瓶中加入等量的蒸馏水，摇匀；
③
(3)制作临时装片。
①当细胞增殖到大约8代左右时，同时从恒温箱中取出3个培养瓶，用胰蛋白酶液处理，加入动物细胞固定液，迅速杀死细胞并固定细胞分裂相；
②静置一段时间后，分别从各培养瓶底部吸取适量的细胞悬浮液，滴在与培养瓶有相同编号的载玻片的中央，，3min~5min后，盖上盖玻片。（4）镜检和统计
把临时装片放在显微镜下，先用低倍镜后用高倍镜，寻找处于期的细胞，并与进行对比，统计并计算该期变异的细胞占该期细胞总数的百分数(Q值)。
Ⅵ.结果分析与结论：
（1）经研究人员实验得知，A、B、C三个培养瓶的Q值依次为：QA=1.3%，QB=12.5%，QC=0.1%，由此可知该实验的结论是。
（2）在实验中，C培养瓶起作用，C瓶的Q值说明
。
28、自然界中有一种含有叶绿体的原生动物—眼虫，这说明植物的细胞器同样可以在某些动物细胞中存活。某同学提出问题“动物细胞与植物细胞之间可以实现杂交吗？”他尝试设计出下列具体的实验方案。结合实验方案回答：
实验原理：根据眼虫的特点，动物细胞和植物细胞之间在理论上是可以实现杂交的。实验步骤如下：（1）①中选的植物材料细胞中，必须有的细胞器是。
（2）③过程所用的酶是和
（3）④过程除了用电激之外，还可以用、等做诱导因素。
（4）⑤过程动物细胞体外培养需要满足的条件是、、、。
（5）在整个实验过程中，要强调所用的器械的灭菌和实验人员的无菌操作，原因是
。
（6）在⑤⑥过程中，通常要添加血清，原因是。
（7）如果让动植物杂交种批量培养生产，可以用技术。
（8）动植物杂交种细胞是否有细胞壁？。理由是。
答案
1D 2C 3D 4C 5B 6B 7A 8D 9D 10A 11D 12B 13C 14D 15D 16C 17A 18ACD 19ABC 20BD 21BCD
22（1）纤维素酶(或果胶酶)（2）rrHH、RRhh（3）置大于800勒克斯光照下培养，收集分化的细胞团（4）细胞的全能性 II （5）抗体与抗原结合，发挥特异性免疫效应（6）非典患者2；（7）液体动物血清
23（1）每种效应B细胞只能产生一种特异性抗体瘤细胞能无限增殖
（2）动物细胞融合、动物细胞培养（3）杂交瘤
（4）抗体是蛋白质，若口服则被消化，使抗体失去其功能（5）体液效应
24（1）不能因为没有将抗原注入小鼠体内，无法获得产生此种抗体的效应B细胞（2）细胞融合灭活的病毒（或聚乙二醇）双亲细胞的遗传物质特异性抗体在体外培养条件下大量繁殖（3）培养液小鼠腹水（4）制备单克隆抗体
25(1)获得能产生相应抗体的B淋巴细胞(2)既能无限增殖，又能产生特定抗体(3)动物细胞融合动物细胞培养灭活病毒 (4)动物血清(5)胰蛋白酶 (6)杂交瘤细胞能产生特定抗体的杂交瘤细胞(7)方法：培养液中加入氨基嘌呤，收集增殖的细胞原理：加入氨基嘌呤后，使D合成途径阻断，仅有D合成途径的骨髓瘤细胞及其彼此融合的细胞就不能增殖，但
人淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合后的杂种细胞可以利用淋巴细胞中的S途径合成DNA而增殖
26（1）相互接触接触抑制单层（或一层）胰蛋白酶（2）衰老甚至死亡不死性降低减少（3）由于活细胞的膜具有选择透过性，大分子染料不能进入活细胞内，故活细胞不能着色（或由于死细胞的膜丧失了选择透过性，大分子染料能够进入死细胞内而着色）（4）中（5）冷冻（或超低温、液氮）酶新陈代谢
（6）抗原
27 I．有毒物质会使动物细胞发生染色体变异Ⅲ．(2)①分别放人等量的细胞悬浮液
③把3个培养瓶放在37℃(或适宜温度)的恒温箱中培养 (3)②加1～2滴龙胆紫溶液染色
(4)有丝分裂中小白鼠正常细胞有丝分裂中期高倍显微照片Ⅳ．(1)甲、乙两种化学物质均有毒性．且乙的毒性比甲的毒性大 (2)对照动物细胞在正常培养状态下染色体变异频率非常低
28⑴叶绿体⑵纤维素酶和果胶酶⑶病毒聚乙二醇（振荡、离心、生物、化学因素等）⑷无菌、无毒的环境营养温度和pH 气体环境⑸组织培养中用到的培养基含有丰富的营养成分，有利于培养物的生长，然而各种杂菌同样也可以在上面迅速生长，所以组织培养过程中污染现象经常发生。培养基一旦被污染，迅速生长的各种杂菌不但会和培养物争夺营养，而且这些杂菌生长的过程中会生成大量对培养物有害的物质，导致培养物迅速死亡（2分）⑹由于人们对细胞所需的营养物质还没有完全搞清楚，通常加入血清、血浆等一些天然成分⑺动物细胞培养⑻无因为胚胎在母体子宫中完成胚胎发育
专题2细胞工程 一、选择题 1.运用下列各种细胞工程技术培育生物新品种,操作过程中能形成愈伤组织的是( )。 ①植物组织培养②植物体细胞杂交③动物细胞培养 ④转基因植物的培育 A.①②③ B.①②④ C.①③④ D.①②③④ 2.生物技术的发展速度很快,已灭绝生物的“复生”将不再是神话。如果世界上最后一只野驴刚死亡,以下较易成功“复生”野驴的方法是( )。 A.将野驴的体细胞取出,利用组织培养技术,经脱分化、再分化,培育成新个体 B.将野驴的体细胞两两融合,再经组织培养培育成新个体 C.取出野驴的体细胞核移植到母家驴的去核卵细胞中,经孕育培育成新个体 D.将野驴的基因导入家驴的受精卵中,培育成新个体 3.下列关于细胞工程的叙述,错误的是( )。 A.电刺激可诱导植物原生质体融合或动物细胞融合 B.去除植物细胞的细胞壁和将动物组织分散成单个细胞均需酶处理 C.小鼠骨髓瘤细胞和经抗原免疫小鼠的B淋巴细胞融合可制备单克隆抗体 D.某种植物甲、乙两品种的体细胞杂种与甲、乙两品种杂交后代的染色体数目相同 4.用高度分化的植物细胞、组织和器官进行组织培养可以形成愈伤组织,下列叙述错误的是( )。 A.该愈伤组织是细胞经过脱分化和分裂形成的 B.该愈伤组织的细胞没有全能性 C.该愈伤组织是由排列疏松的薄壁细胞组成的 D.该愈伤组织可以形成具有生根发芽能力的胚状结构 5.名为“我的皮肤”的生物活性绷带自从在英国诞生后,给皮肤烧伤病人带来了福音。该活性绷带的原理是先采集一些细胞样本,再让其在特殊的膜片上增殖。5~7天后,将膜片敷在患者的伤口上,膜片会将细胞逐渐“释放”到伤口,并促进新生皮肤层生长,达到加速伤口愈合的目的。下列有关叙述中,不正确的是( )。 A.“我的皮肤”的获得技术属于动物细胞工程 B.人的皮肤烧伤后会因人体第二道防线的破坏而导致免疫力下降 C.种植在膜片上的细胞样本最好选自患者本人 D.膜片能否把细胞顺利“释放”到伤口,加速患者自身皮肤愈合与细胞膜上的糖蛋白有关 6.既可用于DNA重组技术又可用于细胞融合技术的是( )。 A.病毒 B.纤维素酶 C.聚乙二醇 D.质粒 7.培育农作物新品种的过程中,常利用植物组织培养技术。下列叙述正确的是( )。 A.培育转基因的外植体得到的新个体属于基因突变个体 B.在植物组织培养过程中用理化因素诱导可获得大量有益突变体 C.单倍体育种中经减数分裂和组织培养两个过程能获得纯合二倍体 D.植物组织培养技术的理论基础是细胞的全能性 8.下列与细胞工程技术相关的表述中,不正确的是( )。 A.植物体细胞杂交技术可以克服常规的远缘杂交不亲和障碍 B.动物细胞培养与植物组织培养所用的培养基成分基本相同 C.动物细胞融合与植物原生质体融合的基本原理相同 D.植物组织培养技术的理论基础是细胞的全能性 9.经植物组织培养技术培养出来的植物一般很少有植物病毒危害,其原因在于( )。 A.在组织培养过程中经过了脱分化和再分化,进行的是快速分裂和分化
第I卷（选择题） 1．下列关于现代生物技术的叙述中不正确的是（） A.植物细胞去除细胞壁获得的原生质体仍然具有全能性 B.动物细胞培养过程中需用胰蛋白酶处理获取单个细胞 C.需使用特定的选择培养基筛选杂交瘤细胞 D.DNA连接酶将DNA分子碱基对之间的氢键连接起来 2．将特定药物与单克隆抗体相结合制成的“生物导弹”，能够用于杀死人类的某些癌细胞，其过程如下图所示。下列相关叙述不正确的是（） A.①过程的原理和植物原生质体融合的原理基本相同 B.经①形成的杂交瘤细胞能无限增殖并产生单一抗体 C.②过程需要筛选并克隆单个杂交瘤细胞 D.抗体的靶向作用使③过程具有高度特异性 3．图示利用奶牛乳汁生产血清白蛋白的过程，分析错误 ．．的是 A．①经胰蛋白酶处理可得到③ B．图中涉及基因工程、细胞核移植等技术 C．常用PCR技术扩增② D．把⑤送入⑥的最佳时期是囊胚和原肠胚 4．下表为动、植物细胞工程的有关内容比较，你认为错误的有 A．0处 B．1处 C．2处 D．3处 5．对细胞全能性的表述正确的有 A．没有离体植物细胞也能表现出全能性 B．动物细胞融合标志着动物细胞全能性的实现 C．单克隆抗体的制备原理依据是细胞的全能性
D．花粉可培育成单倍体，是细胞全能性的体现 6．关于现代生物技术应用的叙述，错误的是 A.蛋白质工程可合成自然界中不存在的蛋白质 B.体细胞杂交技术可用于克隆动物和制备单克隆抗体 C.植物组织培养技术可用于植物茎尖脱毒 D.动物细胞培养技术可用于转基因动物的培育 7．下列与动物细胞培养有关的表述中，不正确的是( )。 A．培养液通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清 B．原代培养的细胞一般传至10代左右便会出现生长停止 C．动物细胞培养一般能够传到40～50代，但其遗传物质发生了改变 D．动物细胞培养可用于检测有毒物质和获得大量自身的健康细胞 8．下列有关体细胞核移植技术的说法不正确的是 A．体细胞核移植技术应用的成功率非常高 B．克隆技术的各个环节有待于进一步改进 C．大多数克隆动物还存在一些遗传和生理缺陷类的健康问题 D．克隆动物食品的安全性问题仍然存有争议 9．用于动物细胞培养的组织和细胞大都取自胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织，其主要原因是这样的组织或细胞 A．容易产生各种变异 B．具有更高的全能性 C．取材十分方便 D．分裂增殖的能力强 10．某研究小组为测定药物对体外培养细胞的毒性，准备对某种动物的肝细胞进行动物细胞培养。下列有关说法正确的是 A．在利用肝组织块制备肝细胞悬液时，可用胃蛋白酶处理 B．细胞培养应在CO2培养箱中进行，CO2的作用是刺激细胞的呼吸 C．取单个肝细胞进行培养，获得细胞群的方法不属于克隆培养法 D．肝细胞在原代培养过程中，会出现停止增殖的现象 11．关于动物细胞融合的相关说法，不正确的是 A．动物细胞融合也称细胞杂交，是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程B．融合后形成的具有原来两个或多个动物细胞遗传信息的单核细胞，称为杂交细胞C．通过动物细胞融合技术获得了能产生单克隆抗体的生物新品种 D．细胞融合技术突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能 第II卷（非选择题） 12．（11分）红细胞生成素(EPO)是人体内促进红细胞生成的一种糖蛋白，可用于治疗肾衰性贫血等疾病。目前临床使用的是重组人红细胞生成素(rhEPO)，其简易生产流程如图所示。 请回答问题： (1)图中①所指的物质是________，②所指的物质是________。 (2)基因表达载体导入中国仓鼠卵巢细胞系(CHO)最常采用的方法是____________，它的启动子是__________的识别和结合部位。 (3)CHO是仓鼠的卵巢细胞经过细胞培养过程中的___________________培养获得的无限
植物细胞工程测试题 一、单选题： 1．植物组织培养是指（） A．离体的植物器官或细胞培育成愈伤组织B．愈伤组织培育成植株 C．离体的植物器官、组织或细胞培养成完整植物体D．愈伤组织形成高度液泡化组织2．植物体细胞杂交的结果是（） A.产生杂种植株B．产生杂种细胞C．原生质体融合D．形成愈伤组织 3．如图是“白菜一甘蓝”杂种植株的培育过程。下列说法正确的是（） A．图示“白菜—甘蓝”植株不能结子 B．愈伤组织有叶绿体，代谢类型是自养需氧型 C．上述过程中包含着有丝分裂、减数分裂和细胞分化等过程 D．“白菜—甘蓝”杂种植株具有的性状是细胞全能性表达的结果 4．不能人工诱导原生质体融合的方法是（） A.振动 B.电刺激 C.PEG试剂D．重压 5．植物细胞表现出全能性的必要条件是（） A.给予适宜的营养和外界条件 B.脱离母体后给予适宜营养和外界条件 C.导入其他植物细胞的基因 D.将成熟筛管细胞核移植到去核的卵细胞内 6．植物组织培养过程中的脱分化是指（） A.植物体的分生组织通过细胞分裂产生新细胞 B．未成熟的种子经过处理培育出幼苗的过程 C．植物的器官、组织或细胞，通过离体培养产生愈伤组织的过程 D.取植物的枝芽培育成一株新植物的过程 7.下列植物细胞全能性最高的是（） A.形成层细胞 B.韧皮部细胞 C.木质部细胞 D.叶肉细胞 8．植物组织培养过程的顺序是（） ①离体的植物器官、组织或细胞②根、芽③愈伤组织 ④脱分化⑤再分化⑥植物体 A．①④③⑤②⑥B．①④③②⑤⑥C．①⑤④③②⑥D．⑥①④③⑤②
9．下列有关细胞工程的叙述不正确的是（） A. 在细胞整体水平上定向改变遗传物质B．在细胞器水平上定向改变遗传物质 C．在细胞器水平上定向改变细胞核的遗传物质 D．在细胞整体水平上获得细胞产品 10．对人工种子正确的解释是（） A．通过科学手段人工合成的种子B．利用植物组织培养技术获得的种子 C．种皮能自我生成的种子D．人工种子发芽率低 11．有关全能性的叙述，不正确的是( ) A．受精卵在自然条件下能使后代细胞形成完整个体，因此全能性最高 B．生物体内细胞由于分化，全能性不能表达 C．卵细胞与受精卵一样，细胞未分化，全能性很高 D．植物细胞离体培养在一定条件下能表现出全能性 12．马铃薯利用它的块茎进行无性繁殖，种植的世代多了以后往往会感染病毒而减产，为此农户都希望得到无病毒的幼苗进行种植。获得无病毒幼苗的最佳办法是（） A．选择优良品种进行杂交B．进行远缘植物体细胞杂交 C．利有芽尖进行组织培养D．人工诱导基因突变 13．用植物组织培养技术，可以培养或生产出（） A．食品添加剂B．无病毒植物 C.人工种子D．前三项都是 14．科学工作者把胡萝卜的韧皮部细胞分离出来，将单个细胞放入培养基中培养，获得了许多完整的植株，这些植株的特点是（） A．彼此性状相似B．变异频率较高C．单倍体D．都是纯合子 15．植物的微型繁殖技术是指（） A．植物体细胞杂交技术B．嫁接C．营养繁殖D．植物组织培养 16．胚状体是在植物组织培养的哪一阶段上获得的（） A．愈伤组织B．再分化C．形成完整植株D．取离体组织 17．运用植物组织培养技术，可以培育或生产出（） A．细胞产物——生物碱B．无病毒植物C．人工种子D．以上都是 18．植物的微型繁殖的优点是（） A．取材少B．培养周期短C．繁殖率高D．以上都是 19．（08江苏高考）下列关于植物组织培养的叙述中，错误的是（） A．培养基中添加蔗糖的目的是提供营养和调节渗透压 B．培养基中的生长素和细胞分裂素影响愈伤组织的生长和分化 C．离体器官或组织的细胞都必须通过脱分化才能形成愈伤组织 D．同一株绿色开花植物不同部位的细胞经培养获得的愈伤组织基因相同 20.（08天津）为获得纯合高蔓抗病番茄植株，采用了下图所示的方法，图中两对相对性状独立遗传。
高中生物《细胞工程》练习题 题号一二三四总分 得分 一、单选题（本大题共19小题，共19.0分） 1.下列关于植物组织培养的叙述中，错误的是（） A. 为了提供营养和调节渗透压，培养基中应添加蔗糖 B. 培养基中的生长素和细胞分裂素会影响愈伤组织的生长和分化 C. 器官、组织的细胞在离体的情况下通过再分化形成愈伤组织 D. 同一株绿色开花植物不同部位的细胞经培养获得的植株的基因型可能不同 2.如图表示四倍体兰花叶片植物组织培养的过程，下列相关叙述正确的是（） A. 此兰花的花药离体培养所得植株为二倍体 B. ①阶段体现了细胞的全能性，②阶段需要细胞分裂素 C. ①阶段有细胞增殖，但无细胞分化 D. ②过程为脱分化，③过程为再分化 3.利用植物体细胞杂交技术将白菜和甘蓝(均为二倍体)培育成“白菜—甘蓝”杂种植株(如下图所 示)。下列说法正确的是（） A. 图示“白菜—甘蓝”植株不能结子 B. 植物体细胞杂交技术的目的是获得杂种细胞 C. 上述过程中包含着有丝分裂、细胞分化和减数分裂等过程 D. “白菜—甘蓝”杂种植株所具有的性状是基因选择性表达的结果 4.某植物的基因型为AaBB,通过下列技术可以分别将其转变为以下基因型的植物:①AABB ②aB ③AaBBC ④AAaaBBBB。则以下排列正确的是( )
A. 诱变育种、转基因技术、花药离体培养、细胞融合 B. 杂交育种、单倍体育种、基因拼接技术、多倍体育种 C. 花药离体培养、诱变育种、多倍体育种、转基国技术 D. 单倍体育种、花药离体培养、基因工程育种、多倍体育种 5.下面为利用玉米(2N=20)的幼苗芽尖细胞(基因型BbTt)进行实验的流程示意图。下列有关分析不 正确的是( ) A. 基因重组发生在图中②过程，过程③中能够在显微镜下看到染色单体的时期是前期和中期 B. 秋水仙素用于培育多倍体的原理是其能够抑制纺锤体的形成，着丝点不能分裂 C. 植株a为二倍体，植株c属于单倍体，其发育起点为配子 D. 利用幼苗2进行育种的最大优点是明显缩短育种年限，植株b纯合的概率为100% 6.植物体细胞杂交与动物细胞工程中所用技术与原理不相符的是（） A. 纤维素酶、果胶酶处理和胰蛋白酶处理——酶的专一性 B. 植物组织培养和动物细胞培养——细胞的全能性 C. 植物体细胞杂交和动物细胞融合——生物膜的流动性 D. 紫草细胞培养和杂交瘤细胞的培养——细胞分裂 7.下列关于植物组织培养和动物克隆的说法不正确的是（） A. 植物组织培养获得的试管苗，可能为杂合子，也可能为纯合子；可能为单倍体，也可能为二 倍体 B. 同一株绿色开花植物不同部位的细胞经组织培养获得的愈伤组织基因型一定相同 C. 动物克隆的技术基础是动物细胞培养 D. 为了防止细胞培养过程中细菌的污染，可向培养液中加入适量的抗生素 8.芦笋是雌雄异株植物，雄株性染色体为XY，雌株为XX；其幼茎可食用，雄株产量高。以下为 两种培育雄株的技术路线。有关叙述正确的是（）
植物细胞工程练习 学校:___________姓名：___________班级：___________座号：___________ 一、非选择题 1．草莓是人们经常食用的一种水果，有较高的营养价值。草莓是无性繁殖的作物，长期种植会使病毒积累在体内，产量降低，品质下降。下图是利用植物组织培养技术培育草莓脱毒苗的过程，请据图回答： （1）外植体能够形成幼苗所依据的原理是____________。培育脱毒苗时，一般选取_________作为外植体，其依据是__________________。 （2）①是脱分化过程，细胞脱分化是指已经分化的细胞，经过诱导后，失去其__________而转变为未分化细胞的过程。②是_______________过程。 （3）研究表明，多倍体草莓产量高于二倍体，利用组织培养技术获得多倍体草莓的方法有两种:一是使用__________〔药剂）处理草莓的愈伤组织，再经培养获得多倍体植株；二是利用_________(药剂)诱导草莓体细胞融合形成杂种细胞后，再经组织培养获得多倍体植株，这种育种技术被称为___________技术。 2．选取A、B植株的细胞进行如下图操作，请回答问题: (1)实现图中的①过程最常用的方法是________。 (2)②过程的发生，必须进行____________,其方法有____________法和____________法。 (3) 若细胞A内含a个染色体，细胞B内含b个染色体，则“杂种细胞”内含________个染色体；若A、B植株采用常规杂交育种方法成功的话，得到的后代含_____个染色体，必须用______________来处理幼苗，才能得到可育的杂种植株，其中含有_____个染色体。这两种方法相比，体细胞杂交方法的优点是：__________________________________。 (4)如果原生质体A为小鼠的浆细胞，原生质体B为小鼠的骨髓瘤细胞，诱导二者融合时，独特的方法是用_______处理。 3．细胞工程是一门新兴的生物工程技术。在动、植物的育种；药物提取；药物生产等领域的应用十分广泛。利用所学知识回答以下关于细胞工程的相关问题。 （1）釆用植物细胞工程育种的方法如下：
第二章 1、目前，常用的植物细胞培养基种类有哪些？各有什么特点？ 1）MS培养基特点是无机盐和离子浓度较高，是较稳定的平衡溶液。 2）B5培养基其主要特点是含有较低的铵，这是因为铵对不少培养物的生长有抑制作用。3）White培养基其特点是无机盐数量较低，适于生根培养 4）N6培养基其特点是成分较简单，KNO3和（NH4）2SO4含量高。 5）KM8P培养基其特点是有机成分较复杂，它包括了所有的单糖和维生素，广泛用于原生质融合培养。 2、简要说明MS培养基的基本组成。 1）大量元素母液配制 MS培养基的大量元素主要包括硝酸铵（NH4NO3）、硝酸钾(KNO3)、磷酸二氢钾（KH2PO4）、硫酸镁（MgSO4?7H2O）和氯化钾（CaCl2,CaCl2?2H2O）五种化合物。 2）微量元素母液配制 MS培养基的微量元素由7种化合物（除Fe外）组成MnSO4?4H2O、ZnSO4?7H2O、H3BO3、KI、NaMoO4?2H2O、CuSO4?5H2O、CoCl2?6H2O。 3）铁盐母液配制 MS培养基中的铁盐是硫酸亚铁（FeSO4?4H2O）和乙二胺四乙酸二钠（Na2?EDTA）的螯合物，必须单独配成母液。 4）有机母液的配制 MS培养基的有机成分有甘氨酸、肌醇、烟酸、烟酸硫胺素和盐酸吡哆素。 5）激素母液配制 MS培养基中的激素有生长素类、细胞分裂素 3、配制培养基时，为什么要先配制母液？如何配制母液？ 1）配制母液不但可以保证各物质成分的准确性及配制时的快速移取，而且还便于低温保藏。2）基本培养基中的大量元素、微量元素、维生素等一般都分别配制成母液。 4、常用的灭菌方法有哪些，各有哪些优缺点？ 1）湿热灭菌（高压蒸汽灭菌）优点：高温高压蒸汽对生物材料有良好的穿透力，能造成蛋白质变性凝固而使微生物死亡，是一种最有效的灭菌方法。缺点：如果是对培养基或液体溶液灭菌，灭菌时间与需要灭菌的培养基或液体溶液的体积密切相关，时间不足达不到灭菌效果，时间过长培养基内的化学物质遭到破坏，影响培养基成分。 2）过滤除菌优点： 3）干热灭菌缺点：干热灭菌存在能源消耗大、浪费时间、安全性差问题 4）紫外线灭菌缺点：由于紫外线穿透物质的能力很弱，所以只适于空气中和物体表面的灭菌，而且要求距照射物质以不超过1.2m为宜。 5）熏蒸消毒优点：方法简便，只需要把消毒的空间关闭紧密即可。
细胞工程练习题 一．选择题 1. 在离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织的过程中，下列哪一项条件 是不需要的 A．消毒灭菌B．适宜的温度C．充足的光照D．适宜的养料和激素 2. (08江苏生物)下列关于植物组织培养的叙述中，错误 ．．的是 A．培养基中添加蔗糖的目的是提供营养和调节渗透压 B．培养基中的生长素和细胞分裂素影响愈伤组织的生长和分化 C．离体器官或组织的细胞都必须通过脱分化才能形成愈伤组织 D．同一株绿色开花植物不同部位的细胞经培养获得的愈伤组织基因相同3．下列选项中能正确说明生物工程技术的是（） A．植物组织培养是指离体的植物器官或细胞进行脱分化形成新个体 B．动物克隆的技术的基础是动物的细胞培养 C．人工诱变、细胞工程、基因工程等都能对微生物进行定向改造 D．动物细胞融合技术目前的用途是培养具有双亲优良性状的经济动物 4．下图是“白菜 —甘蓝”杂种植 株的培育过程。 下列说法正确的 是 A．所得到的“白菜—甘蓝”植株不能结籽 B．愈伤组织是已高度分化的细胞 C．上述过程中包含着有丝分裂、细胞分化和减数分裂等过程 D．诱导原生质体融合时可用聚乙二醇 5．下面是将四倍体兰花的叶片通过植物组织培养形成植株的示意图，相关叙述中正确的是 A．②阶段会发生减数分裂过程B．①阶段需生长素而③阶段需细胞分裂素C．此过程体现植物细胞具有全能性D．此兰花的花药离体培养所得植株为二倍体6．右图为将胡萝卜的离体组织在一定条 件下培育形成试管苗的过程示意图。 有关叙述正确的是 A. 利用此过程获得的试管苗可能为杂合子 B．①②过程中都会发生细胞的增殖和分化 C. 多倍体植株的培育需经过如图所示过程 D．此过程依据的生物学原理是细胞膜具有流动性 7. 各项培育植物新品种的过程中，不经过愈伤组织阶段的是 A．通过植物体细胞杂交培育白菜——甘蓝杂种植株 B．通过多倍体育种培育无子西瓜 C．通过单倍体育种培育优质小麦 D．通过基因工程培育转基因抗虫水稻 8. （09浙江卷）用动、植物成体的体细胞进行离体培养，下列叙述正确的是 A．都需用CO2培养箱B．都须用液体培养基 C．都要在无菌条件下进行D．都可体现细胞的全能性D．植物体细胞杂交过程中，需用不同浓度的细胞分裂素和生长素培养杂种体细胞 9. 动物细胞培养必需条件的是 A.无菌、无毒的环境 B.适宜的温度和pH C.O2等气体环境 D.适宜的光照条件 10. 物的肝肿瘤细胞进行细胞培养。下列说法错误的是 A．在利用肝组织块制备细胞悬液时，可用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理 B．细胞培养应在含5％CO2的恒温培养箱中进行，CO2的作用是刺激细胞呼吸 C．为了防止细胞培养过程中细菌的污染，可向培养液中加入适量的抗生素D．在合成培养基中，通常需加入血清、血浆等天然成分 11. (08上海生物)制备单克隆抗体所采用的细胞工程技术包括 ①细胞培养②细胞融合③胚胎移植④细胞核移植 A．①②B．①③C．②③D．③④12. 能有效打破物种界限，定向改造生物的遗传性状，培育新的优良品种的生物技术是A.基因工程技术B．诱变育种技术C．杂交育种技术D．组织培养技术13. 某小鼠生活过程中被多种病原体感染过，科学家却能够以该小鼠为实验材料， 通过细胞工程技术获得抗某种病原体的高纯度单克隆抗体，这是因为 A．小鼠体内只有一种抗体B．小鼠体内只有一种B淋巴细胞 C．B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合后只产生一种杂交瘤细胞 D．可以通过克隆培养法和抗体检测筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞14. (08理综Ⅰ)下列关于细胞工程的叙述，错误 ．．的是 A．电刺激可诱导植物原生质体融合或动物细胞融合 B．去除植物细胞的细胞壁和将动物组织分散成单个细胞均需酶处理 ③ ② ① 四倍体兰花叶片愈伤组织胚状体植株
，能够用 于杀死人类的某些 第I 卷（选择题） 1 .下列关于现代生物技术的叙述中不正确的是（ A. 植物细胞去除细胞壁获得的原生质体仍然具有全能性 B. 动物细胞培养过程中需用胰蛋白酶处理获取单个细胞 C. 需使用特定的选择培养基筛选杂交瘤细胞 D. DNA 连接酶将DNA 分子碱基对之间的氢键连接起来 2 .将特定药物与单克隆抗体相结合制成的“生物导弹” 胞，其 过程如下图所示。下列相关叙述不正确的是（ A. ①过程的原理和植物原生质体融合的原理基本相同 B. 经①形成的杂交瘤细胞能无限增殖并产生单一抗体 C. ②过程需要筛选并克隆单个杂交瘤细胞 D. 抗体的靶向作用使③过程具有高度特异性 3 .图示利用奶牛乳汁生产血清白蛋白的过程，分析错误 的是 A. ①经胰蛋白酶处理可得到③ B. 图中涉及基因工程、细胞核移植等技术 C. 常用PCR 技术扩增② D. 把⑤送入⑥的最佳时期是囊胚和原肠胚 4 .下表为动、植物细胞工程的有关内容比较，你认为错误 的有 植物细胞工程 动物细胞工程 持殊处理 酶解法去除细胞壁 胰蛋白酶处理配制细胞悬液 融合方法 物理方法，化学方法 物理方法，化学方法，生物方法 典型应用 人工种子，种间杂种植物 单克隆抗体的制备 培养液的区别 麦芽糖是离体组织赖以生长的成分 动物血清不可缺少 A. 0处 B . 1处 C . 2处 5.对细胞全能性的表述正确的有 A. 没有离体植物细胞也能表现出全能性 B. 动物细胞融合标志着动物细胞全能性的实现 C. 单克隆抗体的制备原理依据是细胞的全能性 D. 花粉可培育成单倍体，是细胞全能性的体现 脾细胞- 话髓痼细胞- 4 ■杂左痢 细胞 抗瘵药物 |结律 _ ；辺.单克隆一生物③十 抗体 导弹「 癌细胞 ① Q) III
细胞工程复习题 一、名词解释（每小题3分，共21分）1．酶工程： 2．继代培养 3．人工种子： 4．单倍体培养： 5．微细胞： 6．胚胎工程： 7．克隆： 8．蛋白质工程： 9．外植体： 10．动物细胞与组织培养： 11．组织工程： 12．雌核发育： 13．胚胎融合： 14．转基因动物： 15．生物化学工程： 16．愈伤组织： 17．看护培养： 18．细胞固定化： 19．染色体工程 20．细胞重组： 21．基因工程技术： 二、简答题 1．细胞工程的重要应用体现在哪些方面
2．何为植物细胞两相培养技术建立植物细胞的两相培养系统必须满足的条件是什么 3．动物细胞体外培养有哪些特点 4．动物器官培养技术中，传统的器官培养方法主要有哪些 5．什么是细胞核移植技术以鱼类细胞核移植为例，其技术要点有哪些方面6．植物组织培养与植物细胞培养有什么区别 7．何为细胞悬浮培养怎样做到悬浮培养细胞的同步化 8．动物细胞生物反应器培养生产的生物制品主要有哪些种类 9．什么是试管动物试管动物技术主要包括哪几个主要技术环节 10．何为体细胞克隆技术多莉羊是怎样培育出的 11．芦荟组织培养快速繁殖中，通过哪些途径可以得到完整的植株 12．人工种子利用有何优势 13．用于动物细胞与组织培养的生物反应器应具备哪些基本要求
14．何为胚胎移植主要包括哪些关键技术 15．转基因动物技术的应用主要体现在哪几个方面 三、论述题 1．请阐述单克隆抗体的制备过程 2．植物组织培养技术主要包括哪些环节各环节的主要工作内容有哪些 3．请阐述原生质的分离，纯化和活力鉴定的技术过程 四、计算题 μ和ppm浓度各是什么1．有一培养基的IAA浓度是1.5/ mg L，问其/ mol L （分子量） 2．培养基的配方是 2.0/0.5/ +++水解酪蛋白 MS BA mg L NAA mg L 500mg/L+3%蔗糖+%琼脂粉。MS母液的浓度分别是：大量元素10倍，微量元素100倍，铁盐100倍，有机物100倍；BA母液浓度ml，NAA母液浓度ml。要配制800ml 该培养基，需要吸取各种母液各多少ml分别称取蔗糖、琼脂粉各多少克 3．要配制1mol/L的 NaOH100ml, 要称取98%的固体NaOH多少克要配制1mol/L的HCl1000 ml,要量取浓HCl多少ml（NaOH分子量40，HCl分子量，浓HCl含量38%，比重） 五、填空题 1．生物工程操作的对象是什么这是与化学工程等其他工程类学科最明显的不同
鸡西市第四中学2012—2013年度下学期初一生物导学案 第二单元第一章第二节植物细胞 编制人：姜秀英复核人：张宏使用日期：2012. 10 编号：07【授课模式】目标导航双主高效 【学习目标】通过自主学习能够认识并说出动物细胞的基本结构；通过合作探究能够说明动物细胞与植物细胞基本结构的异同点；会制作人口腔上皮细胞临时装片，使用显微镜观察。认同细胞学说是19世纪自然科学三大发现之一。【重点难点】制作人的口腔上皮细胞临时装片，并使用显微镜观察；动物细胞的基本结构。 【学习方法】自主学习合作交流展示提升 【学习导航】自主学习前，首先熟悉教材46本节课所要学习的知识要点；详读教材，了解掌握制作并观察植物细胞临时装片的方法步骤，能熟练规范操作使用显微镜。 【自主学习】： ㈠制作口腔上皮细胞临时装片。 1.阅读教材了解口腔上皮细胞的制作过程和步骤。 2.讨论: ①制作人的口腔上皮细胞临时装片时，为什么要用生理盐水，用清水行吗？为什么要漱口？ ②为什么要用稀碘液对人的口腔上皮细胞进行染色？ ③人的口腔上皮细胞的基本结构是怎样的？绘图加以说明。 3.请你归纳制作人的口腔上皮细胞临时装片的“动作”步骤：（每一步骤用一个字概括） 、、、、、、。 ㈡模拟制作动物细胞模型，思考讨论下列问题： ①塑料袋相当于______;果脯相当于______;琼脂相当于______. ②细胞的结构是立体的还是平面的？ ③总结动物细胞的基本结构。 ㈢说出动物细胞与植物细胞基本结构的异同点；
【当堂检测】： 1．下列哪一项不是动、植物细胞共有的结构（） A、细胞膜和细胞质； B、细胞核和细胞膜； C、液泡和细胞壁； D、细胞质和细胞核。 2．制作口腔上皮细胞临时装片的正确顺序是（） ①滴一滴生理盐水；②染色；③盖盖玻片； ④用两开水漱口；⑤取口腔上皮细胞并涂抹。 A.①②③④⑤ B.⑤④③②① C.①④⑤③② D.④⑤①③② 3.制作人的口腔上皮细胞装片时，常用的染色剂是（） A、浓的碘液； B、红墨水； C、龙胆紫； D、稀碘液。 4.为了使临时装片内不产生气泡或少产生气泡，盖盖玻片时应（） A、把盖玻片平放在载玻片上； B、事先多滴几滴清水； C、让盖玻片的一边先接触载玻片上的水滴，重重的压平； D、让盖玻片的一边先接触载玻片上的水滴，轻轻放下。 5.制作口腔上皮细胞临时装片时，先在载玻片上加一滴0.9%的生理盐水，其原因是（） 6.动物细胞不具有，植物细胞具有的结构（） A、细胞壁、细胞膜、液泡 B、细胞壁、细胞膜、细胞核 C、细胞壁、线粒体、液泡 D、细胞壁、叶绿体、液泡 7. 制作口腔上皮细胞临时装片时，漱口的液体、载玻片上滴加的液体、染色用的液体分别是（） A、自来水、生理盐水、碘液 B、生理盐水、自来水、碘液 C、凉开水、生理盐水、碘液 D、碘液、生理盐水、凉开水 8.如图是某同学“用显微镜观察人口腔上皮细胞装片”时看到的图像，若使图像中人口腔上皮细胞移至视野中央，应将玻片标本（） A、向上移动 B、向下移动 C、向左移动 D、向右移动 【课后反思】
动物细胞工程试题 1用动、植物成体的体细胞进行离体培养，下列叙述正确的是（C）A都须用液体培养基 B都需用培养箱 C都要在无菌条件下进行 D都可体现细胞的全能性 解析：动物细胞离体培养主要是获得细胞的代谢产物，植物体细胞离体培养体现的是全能性。植物体细胞是固体培养基。动物体细胞培养需要二氧化碳培养箱。 动物细胞培养： 1、动物细胞的培养：动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和繁殖。 2、动物细胞培养液的成分：葡萄糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等。 3、动物细胞培养液的特点：液体培养基含动物血清。 4、动物细胞培养需要满足以下条件 (1)充足的营养供给——微量元素、无机盐、糖类、氨基酸、促生长因子、血清等。 (2)适宜的温度：36.5℃±0.5℃；适宜的pH：7.2～7.4。 (3)无菌、无毒的环境：培养液应进行无菌处理。通常还要在培养液中添加一定量的抗生素，以防培养过程中的污染。此外，应定期更换培养液，防止代谢产物积累对细胞自身造成危害。 (4)气体环境：95%空气+5%CO2。O2是细胞代谢所必需的，CO2的主要作用是维持培养液的pH。 5、动物细胞培养的过程： 取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织）→剪碎→用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理
分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养瓶中进行原代培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养。 2下列关于细胞工程的叙述，错误的是（D） A. 电刺激可诱导植物原生质体融合或动物细胞融合 B. 去除植物细胞的细胞壁和将动物组织分散成单个细胞均需酶处理 C. 小鼠骨髓瘤细胞和经抗原免疫小鼠的B淋巴细胞融合可制备单克隆抗体 D. 某种植物甲乙两品种的体细胞杂交与甲乙两品种杂交后代的染色体数目相同 解析：A正确诱导原生质体融合的方法有物理法（离心振动电刺激）化学法（聚乙二醇PEG）生物方法（灭活的病毒）. B正确去除植物细胞壁需要纤维素酶和果胶酶，将动物组织分散成单个细胞需要胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理一段时间。C正确小鼠骨髓瘤细胞和经抗原免疫小鼠的B淋巴细胞融合既可以无限增殖，又可产生特异性抗体。D错误，假设甲植物体细胞是2N,乙植物体细胞是2M，甲乙体细胞杂交染色体数目为2N+2M；而甲乙品种杂交染色体数目是N+M。 3制备单克隆抗体所采用的细胞工程技术包括（A） ①细胞培养②细胞融合③胚胎移植④细胞核移植 A．①②B．①③C．②③D．③④ 解析：单克隆抗体的制备过程是人工诱导经过免疫的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，再经筛选获得能产生特定抗体的杂交瘤细胞，经过培养获得的杂交瘤细胞获得单克隆抗体。 4利用细胞工程方法，以SARS病毒核衣壳蛋白为抗原制备出单克隆抗体。下列相关叙述正确的是（D） A. 用纯化的核衣蛋白反复注射到小鼠体内，产生的血清抗体为单克隆抗体 B. 体外培养单个浆细胞可以获得大量针对SARS病毒的单克隆抗体
细胞工程练习题 1．在下列过程中，需要采用植物组织培养技术的是() ①利用秋水仙素处理萌发的种子或幼苗，获得多倍体植株②利用花药离体培养得到的单倍体植株③利用基因工程培养抗棉铃虫的植株④利用细胞工程培养“番茄—马铃薯”杂种植株⑤无子西瓜的大量繁殖A．①②③B．③④⑤ C．①②④⑤D．②③④⑤ 答案D 解析利用秋水仙素处理萌发的种子或幼苗，获得多倍体植株，不需要采用植物组织培养技术，①错误；利用花药离体培养得到的单倍体植株，需要采用植物组织培养技术，②正确；利用基因工程培养抗棉铃虫的植株，需要采用植物组织培养技术，③正确；利用细胞工程培养“番茄—马铃薯”杂种植株，需要采用植物组织培养技术，④正确；无子西瓜的大量繁殖，需要采用植物组织培养技术，⑤正确。所以②③④⑤正确。2．科学家培育克隆羊时，使用了三种细胞核的供体细胞，分别将这些细胞核移入去核卵细胞的细胞质中，形成重组细胞，发育成重组胚胎，这些重组胚胎的发育情况如下。 细胞核的供体细胞类型妊娠数/受体母羊数 乳腺上皮细胞1/13 胚胎成纤维细胞4/10 早期胚胎细胞14/27 据此分析不正确的是() A．早期胚胎细胞作为细胞核的供体细胞妊娠成功率最高 B．克隆羊的遗传信息与细胞核的供体细胞完全相同 C．体细胞核移植难度高于胚胎细胞核移植 D．重组细胞发育与去核卵母细胞的细胞质有关 答案B 解析分析表格数据可知，早期胚胎细胞作为细胞核的供体细胞妊娠成功率最高，A正确；克隆羊的培育用到了核移植、胚胎移植技术，克隆羊的细胞核遗传信息来自细胞核的供体，细胞质的遗传信息来自卵细胞，B错误；对比表格中的数据可知：体细胞核移植难度高于胚胎细胞核移植，C正确；核移植中做受体细胞的都是去核卵母细胞，可见重组细胞发育与去核卵细胞的细胞质有关，D正确。
2018年高考生物专题练习 基因工程与细胞工程 1．(2017东北三省三校一联,38)马铃薯是重要的经济作物,人类在(马铃薯的)基因育种方面取得丰硕成果。（1）马铃薯是双子叶植物,常用__________法将目的基因导入马铃薯体细胞中。构建好的基因表达载体包括目的基因、__________、__________、__________、复制原点五部分。 （2）马铃薯得病会导致产量下降。基因工程中常用的抗病基因为__________(写一种即可)。 （3）科学家还培育出抗除草剂的转基因马铃薯,主要从两个方面进行设计： ①修饰除草剂作用的靶蛋白,使其对除草剂__________,或使靶蛋白过量表达,植物吸收除草剂后仍能正常代谢。 ②引入酶或酶系统,在除草剂发生作用前__________。 （4）将目的基因导入受体细胞后,还需对转基因植物进行__________。 2．(2017湖北武汉一模,38)基因敲除是应用DNA重组原理发展起来的一门新兴技术。“基因敲除细胞”的构建过程如下： 第一步,从小鼠囊胚中分离出胚胎干细胞(ES),在培养基中扩增。这些细胞中需要改造的基因称为“靶基因”;第二步,构建基因表达载体。取与靶基因序列同源的目的基因(同源臂),在同源臂上接入neo R(新霉素抵抗基因)等。由于同源臂与靶基因的DNA正好配对,所以能像“准星”一样,将表达载体准确地带到靶基因的位置; 第三步,将表达载体导入胚胎干细胞,并与其内靶基因同源重组,完成胚胎干细胞的基因改造; 第四步,基因改造后的胚胎干细胞增殖、筛选。基本原理如图所示。 请根据上述资料,回答下列问题。 （1）实施基因工程的核心步骤是__________,基因表达载体中的__________是位于基因首端的有特殊结构的DNA片段;在构建的过程中所需要的工具酶是__________。 （2）如果要获得一只含目的基因的小鼠,则选择的受体细胞通常是__________,原因是__________。 （3）上述资料中neo R基因的作用最可能是__________。为了鉴定目的基因是否成功表达,有时进行抗原—抗体杂交,目的蛋白相当于__________。 （4）该项技术具有广阔的应用前景,请试举一例：__________。 3．(2017河北衡水中学一模,38)科学家从某细菌中提取抗盐基因,转入烟草并培育成转基因抗盐烟草。下图是转基因抗盐烟草的培育过程,含目的基因的DNA和质粒上的箭头表示相关限制酶的酶切位点。请分析回答下列问题。
动物细胞工程复习题 绪论 1、动物细胞工程技术应用的两面性。 2、动物细胞工程包含哪些主要研究内容？ 实验室设置及无菌操作技术 1、你认为动物细胞培养无菌操作的要点有哪些？ 2、动物细胞培养液的主要成分有哪些？ 3、常用的培养动物细胞的培养基的种类？目前实验室中中常用的培养基是什么？ 4、什么是天然培养基、合成培养基和无血清培养基？ 5、目前常用的合成培养基有哪些？有哪些优点？ 6、什么是无血清培养基?无血清培养基成分有哪些？无血清培养在实验研究中有什么特殊意义？ 7、BSS有哪些功能？常用的BSS有哪些？ 动物细胞组织培养 名词解释： 原代培养
传代培养 接触抑制 密度抑制 细胞克隆 细胞系 细胞株 动物细胞固定化培养 微载体培养技术 大孔载体培养技术 有限细胞系和无限细胞系 问答题： 1、体外培养细胞有哪些类型及各自特点？ 2、细胞系的生长过程包括哪些主要阶段？每一生长阶段各有什么特征？ 3、每代细胞的生长曲线包括哪几个主要时期？各期细胞有什么特点？ 4、动物细胞原代培养的方法？举例说明培养的基本过程。 5、贴壁细胞传代时采用何种方法，其技术关键是什么？ 6、为保证好的冻存复苏效果，需要考虑那些问题？ 7、怎样对培养的细胞进行常规观察和生物学特性鉴定？
8、培养细胞污染的途径？防止污染的措施？ 9、动物细胞培养的方基本法有哪些？ 10、动物细胞的大规模培养的方法有哪些？ 11、微载体及多孔载体培养的原理及优点分别是什么。 12、什么流加式操作？有什么特点？ 动物细胞融合 1 名词解释： 单克隆抗体 饲养细胞 细胞克隆化培养 淋巴细胞杂交瘤 2、动物细胞融合的方法有哪些？简述动物细胞融合过程。 3. 试述杂交瘤技术生产单克隆抗体的原理与主要技术过程 4、杂交瘤细胞克隆化培养的目的是什么？常用的杂交瘤细胞克隆方法有那些？ 5、杂交瘤细胞筛选的方法及原理？ 6、动物细胞融合应用？ 动物干细胞技术 1．按照细胞发育潜能将干细胞可分为几类？根据细胞来源可分为几类？
第39讲细胞工程练习题（一） 下图是制备抗埃博拉病毒VP40蛋白的单克隆抗体的过程，请回答： (1)过程①中选用EcoRI和XhoI两种限制酶切割的优点是________，此外还要用到_______酶。 (2)过程②中首先需要用__________处理大肠杆菌，使其处于感受态，VP40基因进入大肠杆菌后维持稳定并表达的过程称为__________。 (3)与植物原生质体融合相比，过程④特有的方法是用_________处理。通常在选择培养基中需加入抗生素，目的是__________。选择培养基上存活的杂交瘤细胞产生的抗体__________(是、不是)单克隆抗体。 (4)图示过程应用的生物技术有 _____(至少答出三种)。 2、玉米是一种主要的农作物，为了提高玉米的产量，科学家做了大量的研究工作．如 图是关于玉米培养的过程，请据图回答： （1）取玉米幼苗的茎尖进行如图A→C 培育，发育成植株D，该过程所用技术叫______，依据的理论基础是______；培育无毒苗常取茎尖进行培养，原因是______．（2）取D的花药培养成幼苗F称为______，若玉米种子基因型为AaBbcc（自由组合），则F的类型有______种，需经______处理后才能发育成可育植株G． （3）从生殖方式上分析，A→D属于______生殖；从细胞分裂方式上分析，E→F过程中进行了______分裂． （4）B→C过程中，若愈伤组织在培养基中未形成根，先分化出了芽，其原因可能是__________________________________． （5）若想通过上述过程培育出一种新的玉米品种，可以采用______育种方式；若想培育出一种能抗虫的玉米新品种，可以采用______育种． 第39讲细胞工程练习题（二） 1、甲、乙是染色体数目相同的两种二倍体药用植物，甲含有效成分A，乙含有效成分B。
《细胞工程》复习题 一、选择题： 1．在动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中，正确的是（Ｂ）A．结果是相同的 B．杂种细胞的形成过程基本相同 C．操作过程中酶的作用相同 D．诱导融合的手段相同 2. 单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和B淋巴细胞 诱导融合后，要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞，在 这种培养基上不能存活增殖的细胞是（ C ） ①淋巴细胞 ②小鼠骨髓瘤细胞 ③B淋巴细胞自身融合细胞 ④小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞 ⑤杂交瘤细胞 A．②④ B．①③⑤ C．①②③④ D．②③ 3．动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中，正确的有（ D ）
A．诱导融合的方法完全相同B．所用的技术手段完全相同 C．所采用的原理完全相同D．都能形成杂种细胞 4.单克隆抗体是指（ C ） A．单个骨髓瘤细胞增殖产生的抗体 B．单个B淋巴细胞增殖产生的抗体 C．单个杂交瘤细胞增殖产生的抗体 D．单个抗体通过克隆化，产生大量抗体 5.将小鼠骨髓瘤细胞与一种B淋巴细胞融合，可使融合的细胞经培养产生单克隆抗体，其依据是（多选） （AC ） A．B淋巴细胞可以产生抗体，但不能无限增殖 B．B淋巴细胞只有与骨髓瘤细胞融合后才能产生抗体 C．骨髓瘤细胞可以无限增殖，但不能产生抗体 D．骨髓瘤细胞可以产生抗体，但不能无限增殖 6.要想获得大量的单克隆抗体就必须用单个的B淋巴细胞进行无性繁殖，形成细胞群。其原因是（ D ） A．在体外培养条件下B淋巴细胞可以无限增殖 B．在动物体内B淋巴细胞可产生多达百万种以上的抗体 C．每一个B淋巴细胞都参与特异性免疫反应
. D．每一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体 7.关于单克隆抗体，下列叙述不正确的是（D ） A、可以制成诊断盒．用于疾病的珍断 B、可以与药物结合，用于病变细胞的定向治疗 C、可以利用基因工程技术生产 D、可以在生物体内生产，不能体外生产 8. 以下不属于生长素的是(D) A IAA B NAA C 2,4- D D 6-BA 9.植物细胞有而动物细胞没有的结构是(D) A细胞质 B线粒体 C内质网 D叶绿体 10.拥有接触抑制的是(B) A原核细胞 B动物细胞 C植物细胞 D真核细胞 11.产生自胸腺的淋巴细胞是(A) A T淋巴细胞 B B淋巴细胞 C C淋 巴细胞 D G淋巴细胞