实验室生物安全等级应用之生物安全柜 “ 生物安全柜可分为一级、二级和三级三大类以满足不同的生物研究和防疫要求。 一级生物安全柜可保护工作人员和环境而不保护样品。气流原理和实验室通风橱一样，不同之处在于排气口安装有HEPA过滤器。所有类型的生物安全柜都在排气和进气口使用HEPA过滤器。一级生物安全柜本身无风机，依赖外接通风管中的风机带动气流，由于不能对试验品或产品提供保护，目前已较少使用。 二级生物安全柜是目前应用最为广泛的柜型。与Ⅰ级生物安全柜一样，Ⅱ级生物安全柜也有气流流入前窗开口，被称作“进气流”，用来防止在微生物操作时可能生成的气溶胶从前窗逃逸。与Ⅰ级生物安全柜不同的是，未经过滤的进气流会在到达工作区域前被进风格栅俘获，因此试验品不会受到外界空气的污染。Ⅱ级生物安全柜的一个独特之处在于经过HEPA过滤器过滤的垂直层流气流从安全柜顶部吹下，被称作“下沉气流”。下沉气流不断吹过安全柜工作区域，以保护柜中的试验品不被外界尘埃或细菌污染。 按照NSF49的中的规定，二级生物安全柜依照入口气流风速、排气方式和循环方式可分为4个级别：A1型，A2型(原B3型),B1型和B2型。所有的二级生物安全柜都可提供工作人员、环境和产品的保护。 A1型安全柜前窗气流速度最小量或测量平均值应至少为0.38m/s。70%气体通过HEPA 过滤器再循环至工作区，30%的气体通过排气口过滤排除。A2型安全柜前窗气流速度最小量或测量平均值应至少为0.5m/s。70%气体通过HEPA过滤器再循环至工作区，30%的气体通过排气口过滤排除。A2型安全柜的负压环绕污染区域的设计，阻止了柜内物质的泄漏。 二级B型生物安全柜均为连接排气系统的安全柜。连接安全柜排气导管的风机连接紧急供应电源，目的在断电下仍可保持安全柜负压，以免危险气体泄漏如实验室。其前窗气流速
生物安全柜介绍 1. 概述 生物安全柜是生物实验室的一级隔离屏障设备。所谓生物安全柜，实质就是一种负压过滤排风柜（见有关标准：YY0569、JG170、ANSI/NSF49、EN12469对生物安全柜作出的定义），其本身可分为部分隔离和完全隔离。 生物危害的隔离措施通常由一次隔离和二次隔离措施实现。采用生物安全柜的目的是为了把生物实验室污染区域及污染风险降到最低，以实现一次隔离目的。为防止生物危害从实验室漏到外部环境，把实验室和外界隔断，即为二次隔离，二次隔离的目的是防止实验室外的人被生物感染。 由于生物危险的事例几乎都发生在实验室内，一次隔离措施越严格、充分，则可降低实验室污染的风险，从源头上抑制生物危害的发生。 由于目前生物实验室以及医院临床医学检验和研究应用最广的是Ⅱ级生物安全柜，本文将着重对Ⅱ级生物安全柜进行阐述。 2. 依据 GB 19489—2007《实验室生物安全通用要求》； 《实验室生物安全手册》（WHO）； ISO 15190—2003《医学实验室—安全要求》； YY0569-2005 生物安全柜； JG170-2005 生物安全柜； JGxxx-xxxx 洁净工作台（报批稿）。 3. 生物安全柜的特殊防护设计 3.1 生物安全柜的级别类型和适用范围 生物安全柜分成Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ共三个等级，其中：Ⅱ级生物安全柜又细分为A1、 A2、B1、B2四个类型，A1、A2、B1分别为循环气流结构，B2为气流100%直接排放结构。实验领域对于A1类生物安全柜应用极少，其流入气流流速相对较低，对人员防护隔离能力相对较低，不能满足生物危害的高风险场合应用。通常，A1类生物安全柜仅用于医学教学或对已知的低风险病原体操作。B1类生物安全柜的排风气流流量是系统总风量的70%，尚有30%循环气流，这样的特性 决定了它仍然不能用于化学毒性场合。常用的是Ⅱ级生物安全柜中的A2、B2类 生物安全柜。 生物安全柜应用气流围场、空气负压、物理过滤、风险预警及联锁控制等综合隔离技术，实现生物危害防护，实现保护人员或保护人员、保护实验对象、保护环境目的。 Ⅰ级生物安全柜●Ⅰ级生物安全柜从前部操作口吸入空气，经排风口高效空气 过滤器滤除病原体颗粒后排出空气。它依赖吸入空气实现生物隔离，其应用目的是保护人员免遭病原体感染。
生物安全柜的操作规范 生物安全柜作为致病菌接种必备设备，在微生物检测中有着很重要的作用，为规范生物安全柜的操作。 本文从人员、使用环境、设备操作流程及注意事项等几个方面进行阐述，使微生物检测人员能够正确使用生物安全柜。 01 首先微生物检测人员需进行生物安全柜的使用培训才能进行操作，未经授权人员不能使用。 02 其次使用环境条件建议安置在10,000洁净度以上环境安置，环境在温度0～40℃、相对湿度不超过90％、无腐蚀性气体和通风良好的室内，远离高速尘源和震源。 安全柜附近不得有超过安全柜正面吸入风速（>0.5m/s）的气流。禁止在有人员频繁进出的场所、门和通道口处及空调送风口附近安装使用安全柜，以免空气干扰操作口及排气口气流。在安全柜周围应留有保养检修空间（至少应在两侧留出25cm，背面留出30cm）。
03 然后是仪器原理及操作流程：生物安全柜工作原理是空气由前窗操作口进入负压风道与柜体内空气充分混合后，由风机送入静压箱，经高效过滤器过滤后以垂直层流的状态进入操作区，操作区左右及后部墙体均为负压风道，使工作区与外部环境形成气幕及箱体双层隔离。 同时工作区被负压包围，保证样品不发生泄漏，操作区的气流由于风机的作用，通过负压风道与前窗操作口进入的空气混合后。 其中部分混合气体（约70%）由风机送入静压箱循环使用，其余混合气体（约30%）经排风高效过滤器过滤后排出柜体。 操作流程： 生物安全柜玻璃门为手动操作，正常工作时玻璃门的开启高度200mm，如果超出表示高度时，声光报警系统启动，提醒用户玻璃门超高。注：当玻璃门开启时，紫外灯无法开启。
生物安全柜电源为220V、50Hz，柜体后部方有接地标志，必须做到可靠接地后方可使用。 接通电源后，通电进入待命状态。 （1）按下[紫外灯控制键]，开启紫外灯消毒30分钟后将紫外灯关闭。（注：此时玻璃门应是关闭状态） （2）打开玻璃门到标识处。 （3）按下[风机启动键]，开启风机约30分钟左右，使操作区达到规定的洁净度。
、病原生物材料在均浆或搅拌后，容器应在以下哪个场所进行开启：B A:实验台上 B:生物安全柜内 C:无菌室内 D:超净工作台 2、接收感染性物质标本应由几人进行：B A:1 B:2 C:3 D:4 3、以下哪项不是实验室生物安全防护的目的：D A:保护实验者不受实验对象侵染 B:确保实验室其他工作人员不受实验对象侵染 C:确保周围环境不受其污染 D:保证得到理想的实验结果 4、进行微生物的危险度评估的最主要考虑因素是：B A:实验室的性质或职能 B:微生物危险度等级 C:病原体的操作步骤和方法 D:病原体的地方流行性 5、放射实验操作前应该？D A:进行辐射安全培训，获得放射工作人员培训合格证 B:放射性工作开展前进行健康体检 C:做好同位素领用登记 D:以上均正确 6、正常屏障系统动物实验室内的气压，相对室外是什么压力：A A:正压 B:负压
C:等压 D:随意 7、生物安全柜操作时废物袋以及盛放废弃吸管的容器放置要求不正确的是：B A:废物袋以及盛放废弃吸管的容器等必须放在安全柜内而不应放在安全柜之外 B:因其体积大的放在生物安全柜一侧就可以 C:污染的吸管、容器等应先在放于安全柜中装有消毒液的容器中消毒1 h以上，放可处理D:消毒液后的废弃物方可转入医疗废弃物专用垃圾袋中进行高压灭菌等处理 8、放射实验操作中应该？D A:放射性同位素操作过程中佩戴个人剂量计 B:使用正确的防护措施 C:含有同位素的容器及时标签 D:以上均正确 9、金属钠着火可采用的灭火方式有A A:干砂 B:水 C:湿抹布 D:泡沫灭火器 10、不属于常用辐射量的是：D A:当量剂量 B:吸收剂量 C:有效剂量 D:放射性活度 11、常规微生物操作规程中的安全操作要点，以下哪一项是错误的：C A:禁止非工作人员进入实验室 B:禁止在工作区饮食、吸烟、处理隐形眼镜、化妆及储存食物 C:所有培养物、废弃物在运出实验室之前不必进行灭菌 D:移液器吸取液体，禁止口吸 12、放射性衰变的规律是：B
目的：建立生物安全柜的的使用、清洁与维护保养标准操作规程。 范围：适用于微生物实验室的HBC-1300IIA 生物安全柜。 2 职责：审核本规程是质监部QC主任的责任,批准本规程是质量受权人的责任,执行本规程是质监部QC的责任。 1、名称：生物安全柜 2、型号: HBC-1300IIA2 3、依据：该设备的使用说明书 4 、安装及使用前准备 4.1安装 4.1.1生物安全柜安放位置在设计未指明时应避开人流频繁处和房间出入口，并应避免室内空气流动对操作口气流屏障造成干扰。
4.1.2如果实验室有窗子，应始终保持关闭。 4.1.3生物安全柜周围应留出30cm 的空间，以便清除脏物。如果空间限制，至少应在两边留出8cm，背面留出3.8cm空间。应在安全柜的电源处留出足够的空间，以便于在不移动安全柜的情况下，可进行维修。 4.1.4生物安全柜的背面、侧面离墙面的距离应保持在8～30cm之间。对于地面和底边紧贴地面的安全柜，所有的沿地边缘应加以密封。 4.1使用环境： 安全柜应放置不低于D级以下的洁净室（区） （1）工作电压：AC220 V（+10%，-15%） （2）输出负载：MAX AC250V/2A （3）工作温度：0℃～50℃ （4）工作湿度：40～90%（40 ℃不凝露） （5）存放温度：-10℃～+55℃ （6）大气压力：86～106Kpa 4.2使用前准备 4.2.1操作前应打开紫外灯，照射30min，后将本次操作所需的全部物品移入安全柜，避免双臂频繁穿过气幕破坏气流；并且在移入前用75%酒精擦拭物品表面消毒，以去除污染。 4.2.2工作人员应在外衣外面穿上带扣的实验工作服，戴乳胶手套保护双手。手套应套在实验服衣袖外而不是扎在里面，穿紧口的袖子也可以保护操作者的手腕。 4.2.3在实验操作时，不可完全打开玻璃视窗，应保证操作人员的脸部在工作窗口之
在实验室中使用苏净安泰生物安全柜操作说明： 1. 位置空气通过前面开口进入生物安全柜的速度大约为0.45m/s。这样速度的定向气流是极易受到干扰的，包括人员走近生物安全柜所形成的气流，打开窗户，送风系统调整以及开关门等都可能造成影响。 因此，最为理想的是，生物安全柜应位于人员活动，物品流动以及可能会扰乱气流的地方。在安全柜的后方以及每一个侧面要尽可能留有30cm的空间，以利用对安全柜的维护。在安全柜的上面应留有30-35cm的空间，以便准确测量空气通过排风过滤器的速度，并便于排风过滤器的更换。 2. 操作人员生物安全柜如果使用不当，其防护作用就可能大大地受到影响。操作人员在移动双臂进出安全柜时，需要小心维持前面开口处气流的完整性，双臂应该垂直地缓慢进出前面的开口。 手和双臂伸入到生物安全柜中等待大约一分钟，以便安全柜调整完毕并且让里面的空气"扫过"手和双臂的表面以后，才可以开始对物品进行处理。要在开始实验之前将所有必须的物品置于安全柜内，以尽可能减少双臂进出前面开口的次数。 3.物品放置二级生物安全柜前面的进气格栅不能被纸，仪器设备或其他物品阻挡。放入安全柜内的物品应采用70%酒精来消除表面污染。可以在消毒剂浸湿的毛巾上进行实验，以吸收可能溅出的液滴。 所有物品应尽可能地放在工作台后部靠近工作台边缘的位置，并使其在操作中不会阻挡候补格栅。可产生气溶胶的设备（例如混匀器，离心机等）应靠近安全柜的后部放置。像有生物危害性的废弃物袋，盛放废弃吸管的盘子以及吸滤瓶等体积较大的物品，应该放在安全柜内的某一侧。在工作台面上的实验操作应该按照从清洁区到污染区的方向进行。 耐高压灭菌的生物危害性废弃物袋以及吸管盛放盘不应放在安全柜的外面，否则在使用这些物品时双臂就必须频繁进出安全柜，这样会干扰安全柜空气屏障的完整性，从而影响对人员和物品的防护。 4.操作和维护大多数生物安全柜的设计允许全天24小时工作。研究人员还发现，连续工作有助于控制实验室中灰尘和颗粒的水平。向房间中排风或通过套管接口与专门的排风管相连接的一级A1和A2型生物安全柜，在不使用时是可以关闭的。其他如二级B1和二级B2型生物安全柜，是通过硬管安装的，就必须始终保持空气流动以维持房间空气的平衡。 在开始工作以前以及完成工作以后，应至少让安全柜工作5分钟来完成"净化"的过程，应即应留在将污染的空气派出安全柜的时间。 生物安全柜的所有维修工作应该由有资质的专业人员来进行。在生物安全柜操作中出现的任何故障都应该报告，并应在再次使用之前进行维修。 5.紫外灯生物安全柜中不需要紫外灯。如果使用紫外灯的话，应该每周进行清洁，以除去可能影响其杀菌效果的灰尘和污垢。在安全柜重新认证时，要检查紫外线的强度，以确保有适当的光发射量。房间中有人时一定要关闭紫外灯，以保护眼睛和皮肤，避免因不慎暴露而造成伤害。 6.明火在生物安全柜内所形成的几乎没有微生物的环境中，应避免使用明火。使用明火会对气流产生影响，并且在处理挥发性物品和易燃物品时，也易造成危险。在对接种环进行灭菌时，可以使用微型燃烧器或电炉，而不应使用明火。 7. 溢出实验室中要张贴如何处理溢出物的实验室操作规则，每一位使用实验室的成员都要阅读并理解这些规程。一旦在生物安全柜中发生由生物学危害的物品溢出时，应在安全柜出于工作状态下立即进行清理。要使用有效的消毒剂，并在处理过程中尽可能减少气溶胶的生成。所有接触溢出物品的材料都要进行消毒/或高压灭菌。 8. 认证在安装是一季每隔一定时间以后，应由有资质的专业人员按照生产商的说明对
生物安全柜的使用及注意事项 1.要根据国家标准和有关的规定，向所有可能使用生物安全柜的用户解释安全柜的使用及限制条件。应发给工作人员书面规定或安全手册或操作手册。特别是必须明确告诉工作人员，在出现溅洒、破碎、方法不当的情况下，安全柜无法保护操作人员。 2.安全柜只有在工作正常时才能使用。 3.安全柜前脸的玻璃观察窗不得在安全柜处使用状态时打开。 4.柜内放置的仪器和材料必须保持在最低数量。静压箱后部的空气循环不得受阻。将材料放入安全柜的工作区之前，应对其表面进行去污处理。 5.柜内不得使用本生灯(一种煤气灯)，因其产生的热会干扰气流并可能损坏过滤器。可以使用微型电焚烧炉，但使用一次性灭菌环则更好。 6.柜内所有的工作要在工作面的中部或后部进行，并能从观察面板中看到。 7.操作手后方的活动要达到最少。 8.操作手不应将手臂来回伸进出柜子，以免干扰气流。 9.前送风格栅不得被便签、滴管、或其他材料堵住，否则会干扰气流从而可能使材料受到污染，使人员处在暴露状态。 10.应在每次工作完成后及一天结束时，使用合适的消毒剂清洁安全柜的表面。 11.柜子的风扇在工作开始前和工作完成后要再各运行5分钟。 生物安全柜安放位置 从生物安全柜前脸的开口流入柜内的气流速度约为0.45米/秒。以这一风速，柜内单向流的一致性易受干扰，很容易被安全柜附近人员的走动、开窗、送风配风器、门的开关所干扰。按理想的布置，应放在远离活动及可能有干扰气流的地方。应尽量在安全柜的后侧及两侧留下30厘米的空间，便于维护作业。柜子上方则留下30~35厘米的高度，以便对排风过滤器的风速进行精确测量，并为排风过滤器的更换留下足够空间。 生物安全柜的清洁与消毒 生物安全柜内的所有物品，包括设备，都应在工作完成之后进行表面去污处理并从柜内取出，因为残留的培养介质可能会提供微生物的生长条件。安全柜的内表面应在每次使用前与使用后进行去污处理。要用消毒剂擦拭工作台表面及内壁面，使用的消毒剂应能杀死柜内可能存在的所有微生物。一天工作结束时，应进行最后表面去污处理，即对工作台、各个侧面、背面及玻璃的里面进行全面擦拭。可以使用漂白粉液或70%酒精，这种对目标生物有效的消毒剂。如使用漂白粉液这种有腐蚀性的消毒剂，则要用灭菌水进行二次擦拭。建议工作柜在清洁、消毒时处在工作状态。如果其未处在工作状态，则应运行5分钟，以便在安全柜关闭前将其中的气体清除掉。 生物安全柜的去污处理 对1级和2级生物安全柜的去污，是将适量的低聚甲醛（使柜内空气中的低聚甲醛的最终浓度为80%）置于电热盘或煎锅上（从柜外控制）。另将一个放有比低聚甲醛多10%的碳酸氢的电热盘或煎锅也放在柜内（在柜外控制）。这第二个容器上应带盖，这个盖子可以从远处取下来（例如系在一根线上，线可以从柜外拉动）。这样可以使提前中和的低聚甲醛达到最小。如果相对温度低于70%，有热水的开口容器。如果没有前隔板，则要用生型塑料挡板，将其用胶带粘在前脸，确保不会有气体漏入房间。当盘内的低聚甲醛已全部挥发或开关已打开1小时后，将开关关闭。将安全柜放置一整晚不得触动。然后将第二个盘子的盖移开并打开其开关，碳酸氢氨开始挥发。这时，关闭盘子的开关，让安全柜开始工作，使碳酸氢氨气循环1小时。然后可以取下前隔板（或塑料挡板），安全柜即可使用。
1. 目的: 规范生物安全柜的操作与维护保养工作，确保设备的正常运作，以保障操作人员的安全。 2. 范围: 无菌实验室阳性间菌检员使用的BHC-1300A2生物安全柜。 3．职责：菌检员负责设备的正常操作与维护保养，由质量部经理复核相关文件记录。 4. 内容 4.1 安全柜应放置于十万级以下的初级净化间。操作前应打开紫外灯，照射30min，后将本次操作所需的全部物品移入安全柜，避免双臂频繁穿过气幕破坏气流；并且在移入前用75%酒精擦拭物品表面消毒，以去除污染。 4.2 打开风机10min，待柜内空气净化并气流稳定后再进行实验操作。将双臂缓缓伸入安全柜内，至少静止2min，使柜内气流稳定后再进行操作。 4.3 生物安全柜内不放与本次实验无关的物品。物品应尽量靠后放置，不得挡住气道口，以免干扰气流正常流动。 4.4 操作时应避免交叉污染。为防止可能溅出的液滴，应准备好75%的酒精棉球或用消毒剂浸泡的小块纱布，避免用物品覆盖住安全柜的格栅。 4.5 在实验操作时，不可完全打开玻璃视窗，应保证操作人员的脸部在工作窗口之上。在柜内操作时动作应轻柔、舒缓，防止影响柜内气流。 4.6 安全柜应定期进行检测与保养，以保证其正常工作。工作中一旦发现安全柜工作异常，应立即停止工作，采取相应处理措施，并通知质量部经理。 4.7 检验完成后，关闭玻璃视窗，保持风机继续运转10min，同时打开紫外灯，照射30min。 4.8 安全柜应定期进行清洁消毒，可用75%酒精或0.2%新洁尔灭溶液擦拭工作台面及柜体外表面；每次检验工作完成后应全面消毒。 4.9 柜内使用的物品应在消毒缸消毒后再取出，以防止将标准菌株残留带出而污染环境，造成生物危害。 4.10 使用方法： 4.10.1 安全柜采用LED液晶面板控制，控制面板包括的功能键有：电源开关键、杀菌灯键、风挡键（快速、慢速、无风）、照明键。 4.10.2 插上220V交流电源后，按下控制面板上的所示电源开关开启即可使用；需要灭菌时，按灭菌灯键；风挡键有三级（快速、慢速、无风）循环，默认为无风，按一次为慢速，再按为快速，第三次则回到无风，如此循环；平时操作照明，只需按照明键即可。 5.设备的维护保养 5.1 每次检验操作后用75%的酒精（其他杀菌剂视用户使用的材料而定）彻底对安全柜内部工作区域表面、侧壁、后壁、窗户进行表面净化。切勿使用含有氯的杀菌剂，因为它可能对安全柜的不锈钢结构造成损坏。同时对紫外灯和电源输出口表面进行清洁。当清洁安全柜内部区域时，操作人员除了手放以外，身体的其他任何部位不能进入安全柜。 5.2 长时间未实验时也得每两周进行清洁维护，按5.1进行，定期清洁不锈钢表面会使之保持表面的光滑美观。 5.3 每月用湿布对安全柜外部表面进行擦拭，尤其是安全柜的前面和上部，把堆积的灰尘打扫干净。并检查所有的维护配件的合理使用情况。 5.4 根据实际情况，每个季度或者半年检查安全柜的任何物理异常或故障，如有异常及时报修；将初效过滤器拆下清洗，防止积尘将导致进风量不足，而降低洁净效果。 5.5 每年请具备资格的认证技术人员对安全柜进行性能认证，依据紫外灯使用寿命效果，进行紫外灯的更换；当正常调节或清洗初效空气过滤器后，仍达不到理想的截面风速时，则应调节风机的工作电压（旋动旋钮），从而达到理想的均匀风速（将调节风速旋钮从左向右，从低速向高速缓慢调节，新工作台不应调至最高风速）。 5.6 在使用十八个月后当风机工作电压调整至最高点时，仍不能达到理想风速时，则说明高效空气过滤器积尘过多（滤料上滤孔已基本被堵，要及时更新），一般高效空气过滤器的使用期限为十八个月；更换高效空气过滤器时，应注意型号规格尺寸（原生产厂家配置），按箭头风向装置，并注意过滤器的周边密封，绝对无渗漏现象发生。
JYK-SAF·09 实验室生物安全柜操作程序 1、目的：确保的生物安全柜能正确、正常的使用，确保使用生物安全柜的工作 人员的健康及相应的样本及试剂不受污染。 2、范围：细菌室及值班工作人员 3、职责： 3．1细菌室工作人员：应指导教育科室人员正确使用及维护生物安全柜 3．2操作人员：应对所使用的生物安全柜的正确使用及维护进行有效监督。 4、定义：无 5、流程图：无 6、流程说明： 6．1生物安全柜的位置应当远离人员、物品流动以及可能会扰乱气流的地方。6．2 在生物安全柜的后面以及每一个侧面都应该留有30cm的空间以便于对生物安全柜的维护。 6．3 生物安全柜上面应该留有30~35cm的空间以便于准确测量空气通过排风过滤器的速度，并便于排风过滤器的更换。 6．4 工作人员在将手臂移动进出生物安全柜时，必须注意维持前面开口处的气流的完整性，手臂的移动应当尽可能慢，且和前面的开口垂直。 6．5 对生物安全柜里的物质进行操作必须在将手放进去1分钟后进行，这样可调整安全柜内通过手臂表面的空气。在开始操作前，要将所有必需的物品置于安全柜内，以尽量减少手臂进出前面开口的次数。 6．6 II级生物安全柜前面的进气格栅不能被纸、器具和其他物品阻挡。 6．7 放入安全柜内的物品必须经过70%的酒精清除表面的污染。 6．8可以在采用浸满消毒剂的毛巾上进行实验，以吸收可能溅出的液滴。6．9 所有物品应当尽可能放在安全柜工作台后部靠近工作台的后缘的位置，并使其在操作中不会阻挡后部格栅。 6．10 易产生气溶胶的设备（如混匀器、离心机）应当放在安全柜的后部。体积较大的物品如生物危害性的废物袋，盛废弃移液管的盘子及负压吸引器，应当放在安全柜内的某一侧。在工作台面的实验操作应按照从清洁区到污染区域的方向
微生物检验实验室生物安全柜标准操作规程 1.目的 规范生物安全柜操作规程，确保生物安全柜正常使用、 洁净、无污染。 2.授权操作人经培训并通过考核的微生物检验实 验室工作人员。 3.原理 高效粒子过滤器（HEPA）可有效过滤并滞留99.99%的≥0.3um的颗粒。 层流气体沿着一个方向以一固定的速度流动为层流。 安全柜内由上向下的层流，能捕捉安全柜工作区域内产生的 全部浮尘，并将它们引导到HEPA过滤器。 定向气流从安全柜前面的栅格定向引入安全柜的气 流，对生物安全柜的性能也起着关键的作用。空气导流板可 阻止安全柜内的浮尘从工作区域跑到外部环境中去。 4.适用范围 可能产生气溶胶标本的处理；所有需要基因扩增的标 本。 5.操作程序 5.1将安全柜门抬起至正常工作位置，注意不得高于安全柜左边的警戒线（SASFLEVEL）. 5.2打开安全柜电源开关及内置风机，仪器报警自检，
约需3秒。 5.3检查、记录压力指示读数。 5.4无任何阻碍状态下，让安全柜至少工作15分钟。 5.5在正式操作前将实验用品放入安全柜，不得过载， 不得挡住前后风口。 5.6安全柜内所有的实验材料须离玻璃门至少4cm。 5.7放入实验材料后，让安全柜开启2～3分钟后再开 始工作。 5.8操作期间，避免工作时人员进出室内或在操作者背 后走动，以减少气流干扰。 5.9操作过程中，如有物质溢出或液体溅出，应对所有被污染的物体消毒，并用75%酒精消毒安全柜内表面。 5.10工作结束后，须让安全柜在无任何阻碍状态下继 续至少工作5分钟，以清除工作区域内浮尘污染。 5.11关闭生物安全柜玻璃门，打开紫外线灯消毒≥30 分钟。 5.12消毒结束后，把System按钮置于“OFF”档，关 闭紫外灯。 6、维护保养 6.1每日维护使用前观察并记录生物安全柜内的压力 表，压力表正常工作范围为0.7～1.3英尺水柱，如≥ 1.3英尺水柱，参见“9.1压力异常”。工作结束后，用75%酒精消
生物安全柜的操作流程 1.设备的操作界面： 在安全柜的操作屏上设有液晶显示窗口和五个触控式按键，能够动态显示设备运行状态以及各类故障信息。重复按动各键可相应完成“启动/停止风机；打开/关闭荧光灯；打开/关闭紫外灯；接通/切断插座电源；暂时消去报警声”的操作。 2. 操作流程： 由于生物安全柜是一种为了操作人员及其周围环境的安全,把在处理病原体时发生的污染气溶胶隔离在操作区域内的防御装置。因此,作业人员必须严格按照指定的操作流程,进行正确的操作,才能发挥其有效的隔离与防御作用。 ●作业前准备 打开安全柜的总电源开关，必须先将玻璃移门完全关闭后，再按“杀菌” 键开启紫外灯，实施紫外线杀菌操作。 请注意：此时作业人员必须远离设备，以免紫外线对人身造成伤害。 为了保护作业者，安全柜具有“杀菌操作的联锁与定时”功能。控制系统在杀菌操作连续运行三十分钟后，自动关闭紫外灯，并显示提示信息。在杀菌过程中，一旦打开移门或开启荧光灯，系统就会自动关闭紫外灯。 杀菌操作结束后，打开移门至200mm安全高度，按“送风机”键启动送风机运行,为了实现工作区域的自净，请保持设备在此状态运行十分钟后再开始正式作业。 ●正式作业 按“照明”键开启荧光灯,将移门保持在200mm安全高度,开始正式作业。 安全柜出厂检测时,已将工作区风速调节在额定范围，启动风机后,自动进入标准的额定状态运行，作业者不必进行风速调节。 在安全柜工作腔内部设有两个备用插座，供实验辅助设备使用。并具有独立的过流过载保护线路，不影响安全柜的正常运行。
请注意：1.作业时请不要将移门开启超过安全线高度，否则,将有气流不能平衡的危险,可能会引起不洁气熔胶外漏,而危害作业者的健康。 2.务必在“切断备用插座电源”的状态下，将辅助设备的电源插头插 入“备用插座”，再按“插座”键接通备用插座电源；使用结束时, 必须再次按“插座”键，切断插座电源。 3. 所用辅助设备的功耗不允许超过插座的最大负荷（见插座上标识）。 4. 吸入风口处禁止放置碎物或者细小物件，以免吸入风道至风机里。 结束作业 作业结束时,请保持风机运行十分钟后再关闭。按住“送风机”键持续3秒钟以上，可关闭风机。 请注意:操作结束时，务必先关闭送风机，等待风机停止运转后，再切断安全柜的电源。以免造成器件损坏。
静脉用药调配室生物安全柜的标准操作规程生物安全柜属于垂直层流台，通过层流台顶部的高效过滤器，可以过滤99.99%的0.3μm以上的微粒，使操作台空间形成局部100级的洁净环境，并且通过工作台面四周的散流孔回风形成相对负压，因此，不应当有任何物体阻挡散流孔，包括手臂等。 一、清洁与消毒： （一）每天在操作开始前，应当使用75%的乙醇擦拭工作区域的顶部、两侧及台面，顺序应当从上到下，从里向外； （二）在调配过程中，每完成一份成品输液调配后，应当清理操作台上废弃物，并用清水擦拭，必要时再用75%的乙醇消毒台面； （三）每天操作结束后，应当彻底清场，先用清水清洁，再用75%乙醇擦拭消毒； （四）每天操作结束后应当打开回风槽道外盖，先用蒸馏水清洁回风槽道，再用75%乙醇擦拭消毒。 二、生物安全柜的操作与注意事项： （一）有1至2位调配人员提前半小时先启动生物柜循环风机和紫外线灯，关闭前窗至安全线处，30分钟后关闭紫外线灯，然后用75%乙醇擦拭生物安全柜顶部、两侧及台面，顺序为从上到下、从里到外进行消毒，然后打开照明灯后方可进行调配； （二）紫外线灯启动期间，不得进行调配，工作人员应当离开操作间； （三）紫外线灯应当定期检测，如达不到灭菌效果时，应当及时更换灯管； （四）所有静脉用药调配必须在离工作台外沿20厘米，内沿8～10厘米，并离台面至少10厘米区域内进行； （五）调配时前窗不可高过安全警戒线，否则，操作区域内不能保证负压，可能会造成药物气雾外散，对工作人员造成伤害或污染洁净间； （六）生物安全柜的回风道应当定期用蒸馏水擦拭清洁后，再用75％乙醇消毒； （七）生物安全柜每月应当做一次沉降菌监测，方法：将培养皿打开，放置在操作台上半小时，封盖后进行细菌培养，菌落计数； （八）生物安全柜应当根据自动监测指示，及时更换过滤器的活性炭。 三、每年应当对生物安全柜进行各项参数的检测，以保证生物安全柜运行质量，并保存检测报告。
The prerequisite for vigorously developing our productivity is that we must be responsible for the safety of our company and our own lives. （安全管理） 单位：___________________ 姓名：___________________ 日期：___________________ 生物安全柜使用的操作规程 (2021新版)
生物安全柜使用的操作规程(2021新版)导语：建立和健全我们的现代企业制度，是指引我们生产劳动的方向。而大力发展我们生产力的前提，是我们必须对我们企业和我们自己的生命安全负责。可用于实体印刷或电子存档（使用前请详细阅读条款）。 1．每次使用前应检查生物安全柜的正常指标，包括风速、气流量和负压在正常范围。若出现异常应停止使用，进行检修工作。 2．在使用中不能打开玻璃观察窗。 3．生物安全柜内应尽量少放器材或样品，不能影响后部压力排风系统的气流循环。 4．生物安全柜内不能使用酒精灯，允许使用微型电加热器，最好使用一次性无菌接种环。 5．所有工作必须在工作台面的中后部进行，并能够通过玻璃观察挡板看到。操作者不要频繁移动手臂及挥动手臂以免破坏定向气流。 6．尽量减少操作者身后的人员走动以及快速开关房间的门，以防止对生物安全柜的气流造成影响。 7．操作时废物袋以及盛放废弃吸管的容器等必须放在安全柜内而不应放在安全柜之外。污染的吸管、容器等应先在放于安全柜内的装有消毒液的容器中消毒1h以上，方可转入医疗废物专用垃圾袋中进行
生物安全柜的使用制度 1、在做保养前，应先切断电源。 2、由于对操作时间的统计直接影响对维护需要的判断，因此在使用此柜时应备有 操作时间的详细记录以备参考和查询。 3、表面的清洁： 非工作区的不锈钢：用浸泡在浓缩肥皂液中的柔软毛巾清洁表面，然后用浸泡在干净的热水或温水中的另一块棉布或毛巾擦净工作区的不锈钢：使用医用 酒精擦净。禁止使用强氧化性的试剂或溶液。 外部涂层：任一种非研磨的家庭用清洁剂，使用柔软的棉布或毛巾擦净。 4、在使用过程中每日清洁： 1）消毒和清洗操作区 2）对控制面板进行消毒 3）用柔软的清洁剂或玻璃专用清洁剂清洗箱体外表面和玻璃 4）对设备的各种功能进行检查 5) 将本次工作记录在案 5、每月清洗： 1）用清洗剂将所有外表面的尘埃消除， 2)对设备的工作台面 内壁表面、观察窗内面应以75﹪酒精擦拭。 3）将本次清洗记录在案 6 每年维护： 1）检查前玻璃门驱动装置的松紧度 2）检查紫外线灯管和荧光灯管 3）每年申请厂家对安全柜的整体性能检测 4）将本次维护记录在案。
生物安全柜使用操作步骤 ●准备工作： 1、物品准备： ⑴操作人员防护用品：无粉乳胶手套及聚氯乙烯手套各1副，一次性防渗透防 护衣1件，一次性口罩、帽子（有条件者备N95口罩）、防护镜等； ⑵治疗盘：常规消毒用物1套，无菌纱布、棉球； ⑶一次性注射器、一次性防渗透防护垫、防渗透专用污物袋； ⑷根据医嘱备化疗药物、输液袋等。 2、人员准备：洗手，佩戴一次性口罩、帽子、更鞋，换工作服，外套一次性防 渗透防护衣；配药时带双层手套，即：聚氯乙烯手套外戴1副无粉乳胶手套。 ●操作流程： 1、配药前洗手，穿防渗透护服，佩戴口罩，帽子，带聚氯乙烯手套，其外套一 副乳胶手套。 2、配药前启动紫外线灯进行生物安全柜内操作空气消毒30分钟，并在操作前用 75%究竟擦拭柜内面及台面，保持洁净的备药环境，柜内操作台面铺一次性防渗防护垫，减少药液污染。 3、取合适的注射器及注射针并检查 4、再次查对医嘱及治疗卡 5、割据安剖前应轻弹其颈部，使附着的药粉降至瓶底，打开安剖时应垫一纱 布，以防划破手套。瓶装药物稀释及抽取药液时，应插入双针头以排除瓶内压力,防止针栓脱出造成污染。并且要求在抽取药液后, 瓶内进行排气和排液后再拔针, 不可使药液排于空气中。加药时将化疗药加入瓶装液体后应抽尽瓶内空气, 避免瓶内压力过大导致更换液体时药液外溢。 6、抽取药液时可选用一次性注射器，并注意抽取药液以不超过注射器容量的3 /4为宜。抽取药液后放以垫有聚乙烯薄膜的无菌盘内备用，每次用后按污物处理。 7、再次查对 8、完成配置后，保持安全柜运行5--10分钟，使飞散的气溶胶完全附着到过滤 器上，关闭。再用75%酒精擦拭操作台面。 9、整理用物，操作中使用的注射器、输液器、输液袋、敷料及放置化疗药物的 安瓿等物品应放在专用的塑料袋内集中封闭处理, 以免药液蒸发污染室内空气。 10、操作完毕，脱去手套及防护用具，流动水洗手。
生物安全柜标准（SFDA 版）微生物安全柜性能要求 Performance criteria for microbiological safety cabinets 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发布目次目次II 前言IV 1 范围 1 2 规范性引用文件1 3 术语和定义1 4 分级 2 4.1 Ⅰ级微生物安全柜2 4.2 Ⅱ级微生物安全柜2 4.3 Ⅲ级微生物安全柜3 5 基本要求4 5.1 外观要求 4 5.2 基本功能要求4 5.3 尺寸偏差 4 5.4 材料要求 4 5.5 结构要求 5 6 性能要求7 6.1 柜体防泄漏7 6.2 HEPA 过滤器防泄漏7 6.3 噪声7 6.4 光强度7 6.5 振动7 6.6 人员、产品与交叉污染防护7 6.7 下降气流流速8 6.8 流入气流流速8 6.9 气流模式8 6.10 集液槽泄漏8 6.11 稳定性8 6.12 温升9 6.13 压差9 6.14 电气设备9 7 性能试验方法9 7.1 箱体防泄漏9 7.2 HEPA 过滤器泄漏9 7.3 噪声9 7.4 光强度9 7.5 振动9 7.6 人员、产品与交叉污染保护的微生物试验9 7.7 下降气流流速10
7.8 流入气流流速10 7.9 气流模式10 7.10 排溢槽泄漏10 7.11 稳定性10 7.12 温升10 7.13 压差10 8 检验规则10 8.1 出厂检验10 8.2 型式检验10 8.3 安装检验11 8.3 常规维护检验11 9 标志11 9.1 产品标志（铭牌）11 9.2 包装标志12 10 包装、运输、储存12 10.1 包装12 10.2 随机文件与附件13 10.3 运输13 10.4 储存13 附录 A （规范性附录）性能测试14 附录 B （资料性附录）枯草芽孢杆菌悬浮液的制备33 参考文献35 前言 本标准参照EN12469:2000《生物技术微生物安全柜性能要求》和NSF/ANSI49-2002 《Class Ⅱ（层流）生物安全研究柜》制定。 本标准的附录 A 为规范性附录，附录 B 为资料性附录。本标准由国家食品药品监督管理局提出。 本标准由全国医用临床检验实验室和体外诊断系统标准化技术委员会归口。本标准起草单位：北京市医疗器械检验所、广州新仪仪器有限公司、上海瑞仰净化装备有限公司、力新仪器（上海）有限公司、上海复星医学科技发展有限公司、新加坡ESCO 公司。本标准主要起草人： 微生物安全柜性能要求 Performance criteria for microbiological safety cabinets 1 范围本标准适用于微生物安全柜,并规定符合本标准的安全柜可以通过测试。本标准包括对微生物安全柜设计、结构和性能的基本要求、试验方法、检验规则和产品的标志、包装、运输。这种安全柜应有对人员、产品和环境的保护、安全运转、耐久性和结构稳定性、洁净能力、噪音水平的限制、照明、振动、电动机/鼓风机性能的基本要求。 2 规范性引用文件 下列标准中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后 所有的修改单（不包括堪误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准目 的达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新
生物安全柜实验室 1、BSL-4实验室为独立的建筑物或建筑物内有明确界线的独立区。设施内的房间作如下安排，至少通过两道门后，才进入有三级生物安全柜的房间(生物安全柜室)。供进出生物安全柜室用的外内更衣间通过淋浴室隔开。不能通过更衣间进入生物安全柜室的材料、用品、设备，可通过设有双门高压锅、浸泡缸、烟熏消毒舱、或通气间的遏制屏障处(用于消毒)进入。 2、实验开始前，每天检查所有的控制参数(如，气流方向)和生命支持系统，保证实验室按照其运转参数运转。 3、生物安全柜室和内更衣间的墙面、地面、天花板建成密封的内壳,以便于烟熏、防止动物和昆虫进出。地板整体密封、覆盖。内壳的内表面耐液体和化学试剂，便于该区域清洁和消毒。有关结构和表面的所有裂缝均密封。进入生物安全柜室和内更衣间的门框尽量小、能密封，便于消毒。生物安全柜室地板上的任何排水管直接通入废液消毒系统中。下水道开口和其他管道含有HEPA过滤器，防止动物。 4、实验台表面一体或密封，防水、耐热、耐有机溶剂、耐酸碱和用于工作台面及设施消毒的其他化学物质。 5、实验室的操作台开口结构简单，能承受预期的重量并符合使用要求。实验台、安全柜以及设备之间的空间应便于打扫、消毒。实验室使用的椅子及其它器具，应覆盖易于消毒的非织物。 6、有免接触式或全自动操作的洗手池，洗手池应安装在生物安全柜室和外内更衣间的门附近。 7、若有中央真空系统，生物安全柜室外的区域不需要抽真空。在线的HEPA 过滤器应安装在离使用点和供应阀尽可能近的地方。过滤器的安装要便于就地消毒和更换。生物安全柜室的其他液体和气体供应系统，应有防回流装置保护。 8、若有喷水池，应设在实验室外的走道里，自动或脚动操作。喷水池的供水系统和实验室区域的供水系统分开，设防回流保护器。 9、进入实验室的门可自动关闭，并且可锁。 10、任何窗户不会打破，并密封。 11、对于传递出三级生物安全柜和生物安全柜室的需要消毒的物料，备有双
核酸实验室生物安全柜选哪种型号合适？ 一般选用二级生物安全柜即可，A1\A2\B1\B2生物安全柜SICOLAB均有提供。 生物安全柜是设计用以保护操作者本人、实验室环境以及实验材料，避免在操作原始培养物、菌毒株以及诊断标本等具有传染性的实验材料时接触可能产生的传染性气溶胶和溅出物。它是当今微生物学、生物医学、基因重组、动物实验和生物制品等实验室必备设备，特别是那些对操作者需要采取保护措施的场合，如医疗卫生、制药、科研等进行细菌培养时提供无菌无尘工作环境。 一、生物安全柜类型 根据生物安全防护水平的差异，生物安全柜可分为 I 级、II 级和 III 级 3 种类型。 （1）I 级生物安全柜可保护工作人员和环境而不保护样品。排气口安装有高效粒子过滤器（HEPA），将外排气流过滤，防止微生物气溶胶扩散造成污染。生物安全柜本身无风机，依赖外接通风管中的风机带动气流，由于不能保护柜内产品，目前已较少使用。 （2）II 级生物安全柜是目前应用最为广泛的柜型。与 I级生物安全柜不同的是，未经过滤的进气流会在到达工作区域前被进风格栅俘获，试验品不会受到外界空气的污染。II 级生物安全柜经过 HEPA 过滤的垂直层流气流从安全柜顶部吹下，下沉气流不断吹过安全柜工作区域，以保护柜中的试验品不被外界尘埃或细菌污染。 （3）III 级生物安全柜是为生物安全防护等级为 4 级实验室而设计的，柜体完全气密，工作人员通过连接在柜体的手套进行操作，试验品通过双门的传递箱进出安全柜以确保不受污染，适用于高风险的生物试验，如进行 SARS、埃博拉病毒相关实验等。生物安全柜核心的要点是：①高效过滤膜；②安全柜的柜体结构和气密性；③生物安全柜的防泄露测试；④优化的气流流速和优良的风机；⑤必不可少的报警功能。 二、适用范围 （1）生物安全一级（BSL-1）适用于非常熟悉的病源。该病源不会经常引发健康成人疾病，对实验人员和环境潜在危险小，一般不要求也不使用生物安全柜。 （2）生物安全二级（BSL-2）适合于对人和环境有中度潜在危险的病源，可选用 I、II 级生物安全柜。 （3）生物安全三级（BSL-3）适用于临床、诊断、教学、研究或者生产设施，在该级别中开展有关内源性和外源性病原的工作。最好选用 II 级或 II 级以上生物安全柜，实验室
生物安全柜等级的划分 生物安全柜是为操作原代培养物、菌毒株以及诊断性标本等具有感染性的实验材料时，用来保护操作者本人、实验室环境以及实验材料，使其避免暴露于上述操作过程中可能产生的感染性气溶胶和溅出物而设计的。 根据生物安全防护水平的差异，生物安全柜可分为一级、二级和三级三种类型。 一级生物安全柜可保护工作人员和环境而不保护样品。其气流原理和实验室通风橱基本相同，不同之处在于排气口安装有HEPA 过滤器，将外排气流过滤进而防止微生物气溶胶扩散造成污染。一级生物安全柜本身无风机，依赖外接通风管中的风机带动气流，由于不能保护柜内产品，目前已较少使用。 二级生物安全柜是目前应用最为广泛的柜型。按照《中华人民共和国医药行业标生物安全柜准YY0569-2005生物安全柜》中的规定，二级生物安全柜依照入口气流风速、排气方式和循环方式可分为4 个级别：A1 型，A2 型，B1 型和B2 型。所有的二级生物安全柜都可提供工作人员、环境和产品的保护。 A1 型安全柜前窗气流速度最小量或测量平均值应至少为0.38m/s。70%气体通过HEPA 过滤器再循环至工作区，30%的气体通过排气口过滤排出。 A2 型安全柜前窗气流速度最小量或测量平均值应至少为0.5m/s。70%气体通过HEPA 过滤器再循环至工作区，30%的气体通过排气口过滤排出。 二级B型生物安全柜均为连接排气系统的安全柜。连接安全柜排气导管的风机连接紧急供应电源，目的在断电下仍可保持安全柜负压，以免危险气体泄漏。其前窗气流速度最小量或测量平均值应至少为0.5m/s(100fpm)。 B1 型70%气体通过排气口HEPA 过滤器排除，30%的气体通过供气口HEPA 过滤器再循环至工作区。 B2 型为100%全排型安全柜，无内部循环气流，可同时提供生物性和化学性的安全控制，可以操作挥发性化学品和挥发性核放射物作为添加剂的微生物实验。 三级生物安全柜是为生物安全防护等级为4级实验室而设计的，柜体完全气密，工作人员通过连接在柜体的手套进行操作，俗称手套箱(Golve box)，试验品通过双门的传递箱