姓名：胡明明
学号：2013102040076
病毒性肝炎及丙型肝炎病毒
病毒性肝炎
在我国，病毒性肝炎的发病数据已位于传染病的第一位，如得不到及时治疗，将发展为肝硬化以及肝癌，每年用于治疗和护理病毒性肝炎患者的费用高达3600亿人民币。病毒性肝炎对人民的健康造成了巨大危害，相应的研究工作和防疫工作显得非常重要。
病毒性肝炎是由病毒感染引起的主要以肝脏炎症为表征的一类传染疾病。其主要传播途径通过肠道或体液、血液传播。病毒性肝炎主要由5类同源性不大的肝炎病毒引起：甲型肝炎病毒（Hepatitis A Virus，HA V）、乙型肝炎病毒（Hepatitis B Virus，HBV）、丙型肝炎病毒（Hepatitis C Virus，HCV）、丁型肝炎病毒（Hepatitis D Virus，HDV）、戊型肝炎病毒（Hepatitis E Virus，HEV）。其中又以HA V，HBV，HCV最为常见。HA V与HEV感染引起急性肝炎，HBV、HCV、HDV感染造成慢性感染并最终导致肝硬化和肝癌。除了以上5类肝炎病毒之外，诸如单纯疱疹病毒、巨细胞病毒、EB病毒、黄热病毒等病毒也能引发病毒性肝炎。
一病毒性肝炎的历史回顾
最早记录通过体液传播的肝炎病例可以追溯至1885年，一位名叫Lurman 的德国人报道在不莱梅的一间1，289人的船厂中，由于针头和注射器消毒不正确的原因，15%的工人在接种天花病毒疫苗以后2-4个月纷纷出现黄疸症状，随后爆发了肝炎疫情(Mocarski and Courcelle 2001)。正式对病毒性肝炎的研究开始于第二次世界大战期间。其被分为感染性肝炎（infectious hepatitis)和血清同源性肝炎（homologous serum hepatitis）(Major, Mihalik et al. 1999)。后来，随着引起这两种肝炎的病毒被分别命名为HA V和HBV，甲型肝炎（Hepatitis A，HA）和
乙型肝炎（Hepatitis B，HB）替了原有的名称。在精确的检测肝炎病毒种类的方法出现之前，病毒性肝炎病人的诊断都是通过临床和传染病学的特征来进行。1965年，HBV表面抗原（HBsAg）被发现(Blumberg, Alter et al. 1965)，并在1968年发现其与HBV的联系(Reed, Xu et al. 1997; Osella, Massa et al. 1998)。至此，人类对病毒性肝炎有了清晰的认识。1971年，建立了以放射性免疫共沉淀的方法检测HBsAg，这种方法的准确性得到了广泛的承认(Lander, Alter et al. 1971)。很快，人们又发明了HBsAg和HBV核心抗原（HBcAg）的放射免疫检测方法。通过这三种方法，感染HBV的病人都能准确的被诊断出。然而，人们发现肝脏移植并发行肝炎的病人并不被HBV感染，唯一的另一种已知病源体是HA V，而HA V的病理特征又与此不符。于是人们认为存在着至少一种其他的致肝炎的病原体。1978年，由美国国立卫生院（NIH）开展的一项工作中，被调查的30名病人中，仅2名诊断结果为HA V患者，12名为HBV患者，其他16名病人被称为非A非B型肝炎（NANBH）患者(Nelson, Marousis et al. 1997)。在此基础上，NANBH的观念得到了广泛地认可，对这种未知的病原体的工作开始展开。
在接下来的15年中，许许多多研究小组都声称发现了这种新的病毒，或者与其相关的病毒抗原或抗体。但事实证明没有一个报道是完全正确的。尽管如此，还是能通过这些报道窥见一些这种全新病毒的一些病毒学和流行病学的特性。第一，它除了感染人类之外还能感染黑猩猩(Alter, Purcell et al. 1978; Hollinger, Gitnick et al. 1978)。第二，通过它通常是通过血液传播可以预见出这种新病毒能引起慢性的感染。这样的慢性感染能导致慢性的肝脏疾病、肝硬化(Alter, Holland et al. 1975)。第三，这种病毒在脂类溶剂中没有活性，暗示这种病毒表面有包膜结构(Feinstone, Mihalik et al. 1983)。第四，它能穿过50纳米的滤器，说明它的颗粒直径在50纳米以下(He, Alling et al. 1987)。由此，一种细小，有包膜结构的新病毒的画面出现在人们面前。
随着上世纪80年代分子生物学技术的飞速发展，使得确定这种病毒的具体信息变得可能。在慢性感染的黑猩猩身上提取得到的血浆具有高滴度的病毒(Bradley and Maynard 1986)。来自Chiron公司的Houghton研究小组利用这种血浆构建了一个λ噬菌体表达文库(Choo, Kuo et al. 1989)，在此基础上筛选与NANBH病人血清中相关的蛋白。他们得到了一个编号为”5-1-1”的克隆能表达
与NANBH特异相关的抗原。5-1-1克隆的最初来源是一条约10，000个核苷酸的单链RNA分子，这个RNA分子具有一个连续的长开放阅读框。这种NANBH 病毒也随后被命名为HCV(Kuo, Choo et al. 1989)。
丙型肝炎病毒
一、丙型肝炎病毒的结构和流行病学
丙型肝炎病毒（Hepatitis C Virus, HCV）由于其基因组和多聚蛋白的特性与黄热病毒类似(Choo, Richman et al. 1991)，因而在病毒学分类上被归为黄病毒科（Flaviviridae）中的肝炎病毒属。早期被认为是导致非A非B型病毒性肝炎（NANBH）的致病因子，于1978年首次被发现，1989年通过基因测序技术首次获得其全基因组序列。单个HCV病毒颗粒直径在45-50纳米(He, Alling et al. 1987)，最内层基因组为一条约9，500核苷酸的正意单链RNA，包裹着基因组的是由病毒核心蛋白形成的衣壳，再往外是来源自宿主的包膜结构，在这层包膜结构上插入了病毒编码的糖蛋白(Choo, Richman et al. 1991)。HCV 基因组由5’末端和3’末端非翻译区域（Untranslated Region, UTR）和一个编码约由3，000个氨基酸的多聚蛋白的开放阅读框（ORF）组成(Choukhi, Ung et al. 1998)。这个多聚蛋白在翻译的过程中和翻译后通过宿主细胞的和病毒自身的蛋白酶切割加工成特异的病毒基因产物（图1）。结构蛋白：Core，E1，E2；非结构蛋白：p7，NS2，NS3，NS4A，NS4B，NS5A，NS5B。不同的HCV毒株在基因组上表现出非常大的变异性，然而这种高变异性并非存在于HCV基因组的每个片段。相对保守的区段比如core、E1、NS5被人们研究得比较深入，并以此将HCV分为6中基因型（1-6）和50余种亚型（1a、1b、1c等）(Bukh, Miller et al. 1995)。在欧美和中国主要是第1型为主、第2型以日本、中国居多、第3型在泰国、新加坡、与印度部分地区较常见、在埃及、中东与非洲中部主要是第4型，而第5型与第6型则是南非与东南亚较常见。HCV只感染人类和类人猿,据2001年的一项统计，全球已有约1.7亿人感染HCV。HCV传播途径为体液传播（parenteral transmission），而最主要传播途径是受污染的血液。吸毒者和注射类人群（如共用针头）通常是感染HCV的高危险群，大约70%的感染者都有注射毒品的习惯。使用不干净的器械纹身和穿孔也是危险因素。随着血液筛检的进步，发展中国家
现在因输血后感染HCV的风险已经大大下降。除了血液传染之外，HCV也会通过性行为与垂直传染（通过母亲传染给未出生的婴儿）来传播，在HCV感染者精液与阴道分泌物中可以发现HCV病毒颗粒的存在，目前也有一些报告已经显示性行为是可以传播HCV的。不过，经由性行为感染HCV的机率是很低的。另外HCV垂直传染的机会也很低，大约占0%到12%左右。至今为止仍有高达40%感染者是由于不明原因而感染，所以还有未知的传染途径存在。目前（2004年），针对HCV的治疗方法是持续24至48周对病人注射PEG 干扰素和口服抗病毒药物利巴韦林（Ribavirin）。根据病人携带病毒亚型的不同，治愈率在50%至80%之间。但是干扰素疗法有许多副作用，尤其是对病人的心理有不良影响，病人可能产生暴躁、忧郁和恐惧等心理。影响治愈率的因素除病毒亚型外还有病人的年龄、性别、体重、病毒载量、患病时间和已经对肝脏产生的破坏程度。
图1：HCV多聚蛋白在共翻译和翻译后的过程中加工形成的结构蛋白和非结构蛋白
二、HCV的分子和病毒学特性
（一）5’-UTR
HCV完整的5’-UTR由341个核苷酸组成(Han, Shyamala et al. 1991)，其组成多个环状的二级结构(Honda, Beard et al. 1999)。5‘-UTR是HCV基因组中最为保守的结构之一·(Bukh, Purcell et al. 1992)，虽然基于PCR的基因分型方法发现不同基因型的HCV，其5’-UTR存在着核苷酸的多态性(Stuyver, Wyseur et al. 1996)，但其整个二级结构仍然趋于保守。几个不同研究组分别证实，HCV5‘-UTR中存在着一个内部核糖体进入位点（Internal Ribosome Entry Site，IRES），这个结构能指导HCV基因组在人体内起始不需要帽子结构的翻译(Fukushi, Katayama et al. 1994; Rostoker, Pawlotsky et al. 1996; Wentworth, Sette et al. 1996)。随后，研究者发现IRES与HCV基因组翻译起始密码子AUG下游12-30个核苷酸能发生RNA-RNA相互作用，这种相互作用对于IRES行使功能是必要的(Honda, Brown et al. 1996; Honda, Beard et al. 1999)。不同基因型的HCV，其5’-UTR IRES指导翻译起始的效率也不尽相同，这是由于其核苷酸的多态性影响了RNA-RNA和RNA-蛋白质相互作用的效果(Collier, Tang et al. 1998; Honda, Rijnbrand et al. 1999)。5’-UTR能与宿主细胞内一些蛋白如多聚嘌呤结合蛋白（Polypyrimidine tract-binding protein，PTBP）和翻译起始因子eIF3相互作用，对于行使其翻译起始功能有着重要作用(Ali and Siddiqui 1995; Buratti, Tisminetzky et al. 1998)。然而，HCV感染后病毒的翻译起始的精确机制仍还需要进一步的研究来阐明。
（二）3’-UTR
编码约3,000个氨基酸的ORF的终止密码子之后便是HCV的3’-UTR。3’-UTR由一个约30个碱基的可变区和98个碱基的保守区组成(Kolykhalov, Feinstone et al. 1996; Taylor, Shi et al. 1999)。通过计算机的结构预测，其能形成稳定的柄环状二级结构(Blight and Rice 1997; Ito and Lai 1997)。3’-UTR 中位于3’末端的98个保守核苷酸能与宿主细胞内PTBP蛋白发生特异的相互作用(Ito and Lai 1997)，暗示着其在病毒的复制及翻译过程中起着调控作用(Ito and Lai 1999)。利用缺失性感染克隆在黑猩猩上的实验表明，3’-UTR 的98个保守核苷酸对于病毒的感染能力有着重要的作用，然而其5’端30
个可变碱基则显得不重要(Kolykhalov, Mihalik et al. 2000)。
（三）核心蛋白Core
HCV多聚蛋白的N端头191个氨基酸被认为是其核心蛋白core。Core 蛋白分子量在21-23 kDa，形成覆盖在HCV基因组外的核衣壳(Hijikata, Kato et al. 1991)。整个Core蛋白的编码区域都属于高度保守区段，其分子量的可变性通过SDS-PAGE分析得知是其C末端的缩短产物(Hijikata, Kato et al. 1991; Scheuer, Ashrafzadeh et al. 1992)。Core蛋白的基本功能特性被认为是其N端具有核定为信号和DNA结合基序(Chang, Yen et al. 1994)。然而没有一项临床数据表明感染HCV的肝细胞核内检测出core蛋白(Barba, Harper et al. 1997)。体外实验表明，core蛋白能与宿主蛋白或其他病毒相互作用，具有多种功能(Reed, Grakoui et al. 1995)，如反式激活和抑制作用(Mendenhall, Seeff et al. 1991)。在HCV的致病过程中扮演着重要角色。
（四）包膜蛋白E1、E2
HCV多聚蛋白编码的糖蛋白E1（gp31）和E2（gp70）是HCV病毒颗粒的包膜蛋白。E1、E2在加工过程中通过N端的信号肽定位到内质网中，并分别具有5和11个糖基化的修饰位点(Grakoui, Wychowski et al. 1993; Dubuisson, Hsu et al. 1994)。HCV多聚蛋白在加工过程中会产生两种E2前体：E2-NS2和E2-p7(Grakoui, Wychowski et al. 1993; Dubuisson, Hsu et al. 1994)。E2-p7在加工过程中不能被切割，导致E2会形成E2和E2-p7两种形式(Lin, Thomson et al. 1995)。E2-p7和p7的功能至今仍未有明确的解释。
蛋白动力学的实验证明E1、E2通过缓慢的相互作用形成稳定的复合物。这种正确折叠形成的非共价结合的异源二聚体依赖其N-糖基化(Dubuisson, Hsu et al. 1994; Deleersnyder, Pillez et al. 1997)。E1-E2的相互作用使其一直滞留在内质网中形成膜融合结构而不转运到细胞表面，然而缺失了E2 C末端疏水结构域，会导致E1-E2形成分泌蛋白(Mita, Hayashi et al. 1994)。
与Core和E1的高度保守不同的是，E2蛋白具有高度可变的特性。E2 N端的1-27（多聚蛋白384-410）的氨基酸高度可变，这一区域被称作HVR1(Wong, Dudley et al. 1998)。任何一株分离得到的HCV，其HVR1都不同，并且不同基因型和亚型的毒株，其HVR1也没有任何规律可循
(Neumann, Lam et al. 1998)。根据E2 HVR1的这一特性，研究者在HCV侵染性全长克隆J6-JFH-1（JC-1）中将3×Flag标签替代原有的HVR1序列，能纯化得到表达Flag标签的HCV病毒颗粒(Takahashi, Akazawa et al. 2010)。（五）NS2
NS2的加工过程中，其N端由宿主细胞的信号肽负责切割，C端由HCV 自身编码的蛋白酶NS2/3负责切割。NS2/3蛋白酶负责切割HCV多聚蛋白NS2和NS3，这一过程需要锌离子(Hijikata, Mizushima et al. 1993)。NS2的切割不需要下游NS3丝氨酸蛋白酶的参与，实验证明NS3丝氨酸蛋白酶失活之后，NS2的加工不受到任何影响(Grakoui, McCourt et al. 1993)。而位于NS2区段的952位组氨酸和993位半胱氨酸具有锌离子的结合能力，进而对NS2/3的切割加工是必需的(Hijikata, Mizushima et al. 1993)。NS2本身是一个疏水的跨膜蛋白，其C端位于内质网腔，N端则暴露于细胞质中。近年来，研究者发现NS2能与结构蛋白E1-E2和非结构蛋白NS3-NS4A相互作用，在病毒颗粒的装配和加工中起着重要作用(Ma, Anantpadma et al. 2011; Popescu, Callens et al. 2011)。
（六）NS3
NS3主要具有N端丝氨酸蛋白酶和C端RNA解旋酶两大结构域。NS3的丝氨酸蛋白酶活性对HCV是必需的。整个黄病毒科病毒都具有NS3这一带丝氨酸蛋白酶的非结构蛋白，并且其对病毒的生长是不可或缺的(Chambers, Weir et al. 1990)。NS3蛋白酶负责切割加工3/4A，4A/4B，4B/5A，5A/5B(Bartenschlager, Ahlborn-Laake et al. 1993; Grakoui, McCourt et al. 1993; Hijikata, Mizushima et al. 1993; Honda, Brown et al. 1996)。对不同基因型HCV的NS3分析得出，多聚蛋白1083位组氨酸，1107位天冬氨酸，1165位丝氨（对应NS3为第57位组氨酸，81位天冬氨酸，139位丝氨酸）是高度保守的，并且这3个氨基酸对于NS3蛋白酶的催化活性是必须的，替换这3者中的任何一个都将使得NS3蛋白酶失活(Bartenschlager, Ahlborn-Laake et al. 1993)。
随着对NS3蛋白研究的深入，研究者发现能被NS3切割的氨基酸序列总是存在着一定的规律的氨基酸排列，这种有规律的排列在不同基因型的
HCV中趋于保守。这暗示着NS3的切割具有一定的特异性。研究指出，切割位点上游第6位（p6）往往是天冬氨酸（D）或者谷氨酸（E），上游第1位（p1）一般是半胱氨酸（C）或苏氨酸（T），下游第1位（p1’）一般是丝氨酸（S）或者丙氨酸（A），并且将p6位的D替换成甘氨酸（G）、苯丙氨酸（F）、天冬酰胺（N）对其切割识别的特异性影响不大(Komoda, Hijikata et al. 1994)。
NS3的蛋白酶活性还需要一个辅助因子NS4A。NS4A能与NS3N端前22个氨基酸相互作用形成稳定的复合物(Bartenschlager, Lohmann et al. 1995)。NS3/4A复合物的形成对于3/4A、4B/5A的切割加工是必须的，并且也能增强4A/4B、5A/5B的切割效率(Failla, Tomei et al. 1995; Lin, Wu et al. 1997)。
（七）NS4
HCV NS4区段编码两个蛋白NS4A和NS4B。NS4A由54个氨基酸组成，N端是疏水性结构，C端是亲水性结构(Failla, Tomei et al. 1994)。NS4A 能增强NS3丝氨酸蛋白酶的顺式和反式切割活性(Bartenschlager, Ahlborn-Laake et al. 1994; Lin, Thomson et al. 1995)。NS4A N端21-34位氨基酸组成的疏水区域被认为是增强NS3活性所必需的(Failla, Tomei et al. 1995)。NS4A与NS3形成NS3/4A蛋白酶对于HCV多聚蛋白的加工并不是必须的，但是NS3/4A整合形成一个更加稳定的复合物(Kim, Morgenstern et al. 1996)，并且NS3/4A复合物构象上的变化能保证NS3丝氨酸蛋白酶的活性稳定，还能指导NS3/4A定位于内质网更好的进行HCV多聚蛋白的加工和HCV的复制(Failla, Tomei et al. 1995; Kim, Morgenstern et al. 1996)。
NS4B是一个27kDa的疏水性蛋白质。多年以来NS4B被认为是没有功能或者功能未知的一个蛋白。近年来，关于NS4B功能的研究逐渐增多。NS4B能调节NS5B的聚合酶活性(Piccininni, Varaklioti et al. 2002)，影响宿主的细胞信号传导，损坏内质网的正常功能，调节病毒和宿主细胞RNA的翻译。NS4B最近被发现能负责形成一种新型的细胞内膜状结构——膜状网络（Membranous Web），这种膜状网络能给病毒的复制提供一个平台(Egger, Wolk et al. 2002)。
（八）NS5
HCV NS5区段能加工产生两个非结构蛋白NS5A和NS5B。NS5A是一个多功能的调节细胞信号转导和病毒复制的蛋白。其内部有多个磷酸化位点，能被宿主细胞的激酶磷酸化并与细胞膜相互作用。体外实验的研究表明，NS5A 有两种磷酸化的形式—— 56kDa（p56）的基本磷酸化形态和58kDa（p58）的超磷酸化形态(Kaneko, Tanji et al. 1994; Tanji, Kaneko et al. 1995)。并且p58是在p56的基础上磷酸化而来，对于HCV多聚蛋白的加工是必需的(Neddermann, Clementi et al. 1999)。NS5A的磷酸化位点多为丝氨酸。值得关注的是，其他黄病毒科病毒，比如黄热病毒的NS5A蛋白在体外和体内实验中也发现有磷酸化的现象。这种整个科属的病毒在这一功能上的保守性体现出NS5A磷酸化对于病毒生活周期的重要性(Reed, Gorbalenya et al. 1998)。
NS5B是HCV多聚蛋白C末端的最后一个蛋白。其具有以RNA为模板的RNA聚合酶（RNA-dependent RNA polymerase，RdRp）活性。体外实验证明其具有RNA结合能力(Cheng, Chang et al. 1999)，并且通过昆虫细胞和大肠杆菌体外表达系统也证实重组NS5B具有RdRp活性(Baumert, Ito et al. 1998; Ferrari, Wright-Minogue et al. 1999)。
三、HCV的生活周期
HCV专一性的感染人类和类人猿的肝脏细胞。HCV的生活周期（图2）大致可以分为六个阶段。第一阶段，通过HCV颗粒表面的低密度脂蛋白（Low Density Lipoprotein，LDL）与肝细胞表面的LDL受体（LDLr）相结合，HCV包膜糖蛋白E1、E2随即与细胞表面的多聚葡萄糖胺结合(Andre, Komurian-Pradel et al. 2002)。在此起始基础之上，清扫受体B-1（Scavenger Receptor B-1，SRB-1）、CD81、细胞间紧密连接蛋白Claudin-1（CLDN-1）和Occludin（OCLN）协同将HCV病毒颗粒通过网格蛋白依赖方式固定在细胞表面(Dubuisson, Helle et al. 2008)。固定之后，病毒包膜与细胞膜的融合并进入细胞内部。这一过程需要胞内体的低pH值环境使得HCV包膜糖蛋白E1、E2发生重排，包膜与细胞膜融合，病毒进入细胞内部。第二阶段，HCV RNA释放至细胞质中以后，便开始依赖5’-UTR中IRES进行翻译
(Moradpour, Penin et al. 2007)。RNA翻译在粗面内质网上进行，翻译成一个约3，000氨基酸的多聚蛋白，然后通过细胞和病毒编码的蛋白酶加工成10种病毒蛋白产物。第三阶段，所有加工成熟的HCV蛋白产物都将直接或间接地定位于内质网来源的膜结构上，在这里他们能发挥各自的功能
图2：HCV的生活周期。引自：(Bartenschlager, Cosset et al. 2010) (Rehermann 2009)。第四阶段，通过NS4B和NS5A的结合，HCV蛋白和内质网膜复合物形成一个个膜状网络（Membranous Web）,这种膜状网络的聚集使得HCV的复制以每一个复制小泡（Replication Vesicle，RV）为场所进行。
第五阶段，HCV RNA在NS5B RdRp指导下在内质网中进行半保留复制。正意链基因组RNA首先复制形成一个负意链的复制形态（Replication Form，RF），然后以RF为复制中间体（Replication Intermediate，RI）复制出更多的HCV 基因组RNA。新合成的HCV RNA 将用于翻译、复制和病毒颗粒的装配。第六阶段，core蛋白聚集在细胞内脂滴（Lipid Droplet，LD）表面，基因组RNA在复制酶的牵引下靠近core蛋白，并触发病毒核衣壳的形成(Miyanari, Atsuzawa et al. 2007)。成熟的核衣壳通过与LDL合成相连接的方式进入内质网腔，随后转运分泌出细胞进入血液循环或者感染临近的肝细胞(Huang, Sun et al. 2007)。这一过程
需要LDL的合成和相关的酶类例如ApoE。
四、HCV感染的致病特征
（一）急性丙型肝炎
感染HCV之后6到12周，少部份人会产生急性丙型肝炎，其中25%的人会出现一些轻微、不明显的症状，包括郁闷、食欲不振、恶心等。有时还会出现比较独特的症状，例如黄疸、脂肪痢，以及血清中丙氨酸转氨酶（Alanine transaminase，ALT）指数的升高。剩下75%的人，基本上都没有任何症状的出现，另外感染HCV可能会产生急性爆发性性肝炎，但发病机率非常低。
（二）慢性丙型肝炎
大多数感染HCV的人通常会转变成慢性肝炎。除非到了末期，慢性丙型肝炎通常是没有任何症状的，ALT的指数也通常是正常或只有轻微的升高，不过大多数的人肝脏组织已经有异常病变。25%的人在感染HCV后20年中病情逐渐恶化，导致肝纤维化（hepatic fibrosis）和肝硬化（hepatic cirrhosis），因HCV 感染导致肝硬化的病人病情通常最终会发展成为肝细胞癌（hepatocellular carcinoma）。
（三）肝外病变
感染HCV之后，除了影响肝脏之外，还会引起许多组织和器官病变。最常见的病变是混合性冷凝球蛋白血症（essential mixed cryoglobulinemia），它会同时出现紫斑症、虚弱、关节疼痛这三种典型症状。其他常出现的病变还有非何杰金氏淋巴瘤（Non-Hodgkin's B-cell lymphoma）及膜性增生性肾丝球肾炎（membranoproliferative glomerulonephritis）。出现在皮肤上的病变是迟发性皮肤紫质症（porphyria cutaneatarda），其典型的皮肤症状为皮肤易脆，而且在日光曝晒部位，如脸、四肢、手背易有水泡、红斑产生。
寨卡病毒实验室检测技术 方案 The latest revision on November 22, 2020
附件1 寨卡病毒实验室检测技术方案 寨卡病毒(ZikaVirus)属黄病毒科（Flaviviridae）黄病毒属（Flavivirus），呈球形，直径约为40-70nm，有包膜。基因组为单股正链RNA，长度约为10.8Kb，可分为亚洲型和非洲型两个基因型。 寨卡病毒病的检测方法包括病毒核酸检测、IgM抗体检测、中和抗体检测和病毒分离等。寨卡病毒与黄病毒属其他病毒具有较强的血清学交叉反应，目前主要采用病毒核酸检测。 一、检测对象 （一）疑似和临床诊断病例。 （二）伊蚊成蚊和幼虫。 二、样本采集、保存和运输 （一）病例标本采集。 对怀疑感染寨卡病毒的患者，推荐采集血清标本开展检测。 用无菌真空干燥管，采集患者非抗凝血5mL，及时分离血清，分装2管，保存于带螺旋盖、内有垫圈的冻存管内，标记清楚后低温保存，其中1管用于现场实验室检测，1管用于上级疾病预防控制机构复核。 对病例应尽可能采集双份血液标本，两份标本之间相隔14天为宜，住院病例可于入院当天和出院前1天各采集一份。 （二）蚊媒标本采集。 疫点内采集的伊蚊成蚊及幼虫，分类鉴定后，填写媒介标本采集信息表，按照采集地点分装，每管10-20只。
（三）标本保存、运送。 如标本能够在24小时内开展实验室检测，应将标本置于2-8℃保存；如能在7天内开展检测，应将样本置于-20℃保存；如需保存7天以上，应将样本置于-70℃以下。 标本运送时采用低温冷藏运输，避免冻融，样本运输应遵守国家关于三类病原体的相关生物安全规定。 三、检测方法 寨卡病毒病的检测方法包括病毒核酸检测、IgM抗体检测、中和抗体检测和病毒分离等。寨卡病毒与黄病毒属其他病毒具有较强的血清学交叉反应，目前主要采用病毒核酸检测。 开展蚊媒寨卡病毒检测时，对捕获的伊蚊成蚊或幼虫进行病毒核酸检测。 开展寨卡病毒实验室检测时，应同时考虑登革病毒和基孔肯雅病毒感染可能。登革病毒和基孔肯雅病毒实验室检测应按照相应的技术指南开展。 （一）临床标本检测。 1．病原学检测 病原学检测主要适用于急性期血液标本，一般认为发病7天内检测阳性率高。 （1）核酸检测：采用荧光定量RT-PCR方法，是目前早期诊断寨卡病毒病的主要检测手段。 （2）病毒分离：将标本接种于蚊源细胞（C6/36）或哺乳动物细胞（BHK21、Vero）进行分离培养，出现病变以后，用检测核酸的方法鉴定病毒。也可使用乳鼠脑内接种进行病毒分离。 2．血清学检测
化学实验室基本操作中的注意事项 中学化学实验基本操作中的高考考点较多，为便于系统复习和认真掌握化学实验操作，现总结八点注意事项，以期对同学们有所帮助。 一、注意事“先后”顺序 1．组装仪器顺序：先零后整，由低到高，由左到右，先里后外，拆装置与之顺序相反。 2．加热器试管时，先均匀加热，后局部加热。 3．制取气体时，先检查装置的气密性，后装入药品。 4．使用容量瓶、分液漏斗、滴定管前先检查是否漏水，后洗涤干净。 5．用排液法收集气体时，先移导管后撤酒精灯。 6．用石蕊试纸、淀粉碘化钾试纸、醋酸铅试纸气体性质时，要先用蒸馏水将试纸润湿。再将试纸靠近气体检验。而用pH试纸时，要先用玻璃棒蘸取待测液少许滴到放在表面皿中央的干燥pH试纸上，再与标准比色卡比较。 7．中和滴定实验时，用蒸馏水洗净的滴定管、移液管要先用待盛液洗涤2~3次后，再盛装试液。注入滴定管中的液体液面开始在“零”刻度或“零”刻度以下。 8．点燃可燃性气体时，应先验纯后点燃。净化气体时，应先净化后干燥。
9．焰色反应试验中，每做一次，铂丝都应当先蘸取浓盐酸放在火焰上灼烧至无色后再做下一次。 10．配制一定物质的量溶液时，溶解或稀释后溶液应冷却再移入容量瓶。 11．气体在热固体表面时，应先将气体干燥后反应。 12．硫酸沾到皮肤上，先迅速用干布擦去，再用水冲洗，千万不得先用水冲洗；碱液沾到皮肤上，立即用较多水冲洗，再涂上硼酸溶液。 二、注意“数据”归类 1．托盘天平的准确度为0.1g；在测定晶体中结晶水含量时，为保证加热过程中使结晶水全部失去，实验中需加热、称量、再加热、再称量，直到最后两次称量不超过0.1g。 2．滴定管的准确度为0.01mL。 3．酒精灯内酒精的量不能少于容积的1/3，也不能多于2/3。4．试管在加热时，所盛液体不能超过试管容积的1/3；且要与桌面成45°角。用试管夹夹试管时应夹在离管口1/3处。 5．烧杯、烧瓶加热时，盛液体量均在容积的1/3~2/3处，蒸发皿加热液体时，盛液体量不宜超过容积的2/3。 6．液体取用时，若没有说明用量，一般取1~2mL。 7．配制一定的物质的量浓度溶液时，烧杯、玻璃棒要洗2~3次，用烧杯往容量瓶中加蒸馏水时，一般加到距离刻度线和1~2mL处，再用胶头滴管定容。
附件1 人类辅助生殖技术规范 人类辅助生殖技术(Assisted Reproductive Technology，ART)包括体外受精—胚胎移植(In Vitro Fertilization and Embryo Transfer，IVF—ET)及其衍生技术和人工授精(Artificial Insemination，AI)两大类。从事人类辅助生殖技术的各类医疗机构和计划生育服务机构(以下简称机构) 一、体外受精— 体外受精—胚胎移植及其衍生技术目前主要包括体外受精—胚胎移植、配子或合子输卵管内移植、卵胞浆内单精子显微注射、胚胎冻融、植入前胚胎遗传学 (一) 1. (1)必须是持有《医疗机构执业许可证》的综合性医院、专科医院或持有《计划生育技术服务机构执业许可证》的省级以上(含省级)的计划生育技术服务机 (2)中国人民解放军医疗机构开展体外受精—胚胎移植及其衍生技术，根据两个《办法》规定，由所在的省、自治区、直辖市卫生行政部门或总后卫生部科 (3)中外合资、合作医疗机构必须同时持有卫生部批准证书和原外经贸部(现商务部) (4)机构必须设有妇产科和男科临床并具有妇产科住院开腹手术的技术和条 (5)生殖医学机构由生殖医学临床(以下称临床)和体外受精实验室(以下称实验室) (6) (7) (8)机构如同时设置人类精子库，不能设在同一科室，必须与生殖医学机构
(9)凡计划拟开展人类辅助生殖技术的机构必须由所在省、区、市卫生行政部门根据区域规划、医疗需求予以初审，并上报卫生部批准筹建。筹建完成后由 (10)实施体外受精— 2. 机构设总负责人、临床负责人和实验室负责人，临床负责人与实验室负责人 生殖医学机构的在编专职技术人员不得少于12人，其中临床医师不得少于6人(包括男科执业医师1人)，实验室专业技术人员不得少于3人，护理人员不得少于3 外籍、中国台湾地区、香港和澳门特别行政区技术人员来内地从事人类辅助 (1) ①专职临床医师必须是具备医学学士学位并已获得中级以上技术职称或具 ②临床负责人须由从事生殖专业具有高级技术职称的妇产科执业医师担任； 掌握女性生殖内分泌学临床专业知识，特别是促排卵药物的使用和月经周期的激 掌握妇科超声技术，并具备卵泡超声监测及Ｂ超介导下阴道穿刺取卵的技术能力，具备开腹手 ④机构中应配备专职男科临床医师，掌握男性生殖医学基础理论和临床专业 (2) ①胚胎培养实验室技术人员必须具备医学或生物学专业学士以上学位或大 ②实验室负责人须由医学或生物学专业高级技术职称人员担任，具备细胞生物学、胚胎学、遗传学等相关学科的理论及细胞培养技能，掌握人类辅助生殖技
实验室检测基础知识试题（含答案） 1.光学金相试样制备要经过的步骤是：( )、镶嵌、( )、( )、( )。 取样磨光抛光显示 2.金相试样的取样必须具备( )性和( )性。 代表有针对 3.通常作为金相组织腐蚀剂的化学药品不外乎有四类,它们是( )和 ( )、( )、( )、( )。 各种有机酸无机酸各种碱各种盐类溶剂 4.金属中常见的晶格有三种类型,它们是( )、( )和( )。 体心立方晶格面心立方晶格密排立方晶格 5.铁素体的金相特征为( )的( )晶粒。 明亮多边形 6.奥氏体的金相特征为( )晶粒,晶界较铁素体( ),晶粒内常出现 ( )。 多边形平直孪晶 7.金属是具有金属光泽、( )和有良好( )、( )的物质。 可锻性导电性导热性 8.金属和合金的( )是不同的,这主要( )它们各自的结构和( )。性能取决于组织 9.金属在外力作用下,都会发生一定的变形,一般有两种形式,即( )变形和( )变形。 弹性塑性 10.热应力是金属在( )时( )所引起的应力。 加热内外温差 11.金属结晶主要受三个因素的影响：金属的( )；( )；金属结晶时的状态。 化学成份冷却速度 12.金属能够结晶,与液态金属的( )有密切的关系。 结构特点 13.纯金属是由( )元素组成的。 单一金属 14.合金则由( )或两种以上的金属、或金属与( )组成的具有金属特性的物质。 两种非金属 15.金属的原子在空间总是严格按照一定的( )而( )地排列。 规则周期 16.金属晶体是由原子通过( )结合而成的。 金属键 17.一般的合金钢在退火、正火状态下,具有( )+( )组织。 铁素体珠光体
实验室技术总结 是最新的《实验室技术总结》，觉得应该跟大家分享，希望大家能有所收获。 篇一：实验室技术负责人工作总结 实验室技术负责人工作总结 随着国家认证实验室评审的日益临近，我们的实验室管理、设备、技术能力、质量意识不断提高。本质量检测中心质量体系运行已有一年多时间，为了验证我们的检测活动及结果是否符合体系的要求，同时保证本中心的质量方针、目标、质量体系的适用性、有效性，并得到持续改进，现将工作情况汇报如下。 一一.组织贯彻执行国家有关检测、检验的法令、法规、技术标准和规范。 通过上跟踪查询，购买最新版本的相关标准等渠道，不断更新中心现有的标准资料，并通过外来文件确认表及文件定期审查表和文件清单的形式不断更新。随着我们质量检测中心的核心标准之一GB/T颁布实施，不仅我们的人员需要进一步培训，我们的体系同时做出了重大的修订，对于文件定期审查表、外来文件确认表的升级，对于新版标准中提出的新的要求进行重新学习、评估质量检测中心在新版标准下的检测能力，重新进行了抗拉强度和脱碳试验两个检测方法的确认，对本质量检测中心经过严格能力评估以后，认为符合新版国家标准的检测要求。同时又进行了合同的评审等等，使得我们质量检测中心能够迅速适应新版标准，使用新版标
准进行检测工作。结果证实我中心采用的标准是持续和有效的。 二、作业指导书的组织制定和批准 今年上半年本质量检测中心购入了一台新型金属分析光电直读光谱仪，以替换先前使用的直读光谱仪，由光谱操作员和本人编制批准了新型金属分析光电直读光谱仪的操作规程。由于GB/T的颁布范文TOP1O0使得本质量检测中心的抗拉强度和脱碳试验这两个检测项目发生了部分变更，又重新对这两个试验项目的检测细则进行了审核，并修改了局部内容。 三、仪器配置工作 所有检测仪器均已由第三方计量机构进行检定和校准，并按规定程序完成金相显微镜、影像投影仪、数显卡尺、数显高度尺、数显千分尺、直读光谱仪等设备的期间核查，确保设备在有效期内能正常使用。所有的检测室均配备空调系统和温湿度计，每天填写温湿度值。经检查表明符合《设施环境条件控制程序》的要求，资源配制方面比较合理，完全符合本检测中心检测方面的要求。鉴于本质量检测中心的300KN万能试验机年代较为久远，虽然运行正常，但有故障隐患，为了保证检测工作不受检测设备可能的故障影响，今年又添置了一台新的300KN微机控制电液伺服万能试验机。而为了完善钢结构连接副的检测工作，又配置了一台10000NM 的高强度螺栓轴力扭矩检测仪。 四、检测人员的培训情况 今年我们又进行了ISO17025体系标准及管理文件再次培训，
转载]知识精要?化学实验常用仪器及其使用3 知识精要·化学实验常用仪器及其使用 中学化学实验常用的仪器有20多种，对这些仪器应该在反复使用和训练规范操作的基础上，努力做到“三会”，即：会识别仪器的名称和能恰当地选用仪器(仪器的种类和必要的规格)；会正确地使用仪器进行实验；会画常用仪器的剖面图。 按照中学化学实验常用仪器的用途，大致可分为计量仪器、分离物质仪器、可加热的仪器、加热仪器、存放物质的仪器和其它仪器六类。现对这些仪器的名称、规格、用途和操作要领分述如下。 1．计量仪器 (1)量筒 量筒用于量度一定体积的液体。量筒的容积常见的有10mL、50mL、100mL等多种，其分度(最小刻度每格)依次为0.2mL、1mL、1mL。应该根据需要量取液体的体积大小，选用适当规格的量筒；量取液体时，以液面的弯月形最低点为准；量筒不能加热，不能作反应容器(量筒是有刻度的玻璃容器，温度的变化会使刻度不准确，且量筒受热可能引起炸裂，因此，量筒不能用做反应容器或用来稀释浓硫酸、溶解强碱，也不能量取过热的液体或用于加热等)。量取液体时，应先往量筒里注液体到接近刻度然后改用滴管，将液体逐滴加入，直到指定量。读数时量筒必须方平视线必须与量筒内液体凹液面最底处保持水平。俯视使读数偏高；仰视使读数偏低。如右图 (2)托盘天平 固体药品称量使用托盘天平，一般能精确到0.1克。 使用步骤注意事项：①先调整零点；②称量物和砝码的位置为“左物右码”；③称量物不能直接放在托盘上，干燥的药品放在洁净的纸上称量，易潮解的和有腐蚀性的药品放在小烧杯等玻璃器皿里称量；④砝码 用镊子夹取（“先大后小”）⑤称量结束后，应使游码归零，砝码放回砝码盒。 2．分离物质的仪器 漏斗漏斗内放滤纸用于过滤，也可通过漏斗向小口容器中转移液体。漏斗不能直接加热；过滤时应 固定在铁架台的铁环上或固定在漏斗架上。 3．可加热的仪器 1．试管用来盛放少量药品，常温或加热情况下进行少量试剂反应的容器，可用于制取或收集少 量气体。 使用注意事项：①可直接加热,用试管夹夹在距试管口1/3管长处。②加热后不能骤冷，防止炸裂。③加热时试管口不能对着任何人；给固体加热时，试管要横放，管口略向下倾斜。 ④加入试管内的液体，不加热时不超过试管容积的l/2，加热时不超过l/3。 2．烧杯用作配置溶液和加大试剂的反应容器，在常温或加热时使用。 使用注意事项：①烧杯外壁擦干后方可用于加热，加热时应放置在石棉网上，使受热均匀，盛放液体的容量通常不超过容积的1/3。②溶解物质搅拌时，玻璃棒不能触及杯壁或杯底。 3．烧瓶用于试剂量较大而又有液体物质参加反应的容器,还可制作洗瓶。可分为圆底烧瓶、平底烧瓶和蒸馏烧瓶。它们都可用于装配气体发生装置。蒸馏烧瓶用于分离互溶的沸点不同的物质。 使用注意事项：①圆底烧瓶和蒸馏烧瓶可用于加热，加热时要垫石棉网，也可用于其它热浴（如水浴加热等）。②液体加入量不要超过烧瓶容积的1/2。③使用时(制气体或有机 合成等)，应固定在铁架上，烧瓶夹应垫石棉绳或套橡皮管。 4．蒸发皿用于蒸发液体或浓缩溶液。 使用注意事项：①可直接加热，但不能骤冷。②盛液量不应超过蒸发皿容积的2/3. ③
检测能力分析一览表 第 1 页共17页 序号被检产品 名称 软件检测能力分析硬件检测能力分析 备注标准/规范 代号 检测项数培训情况仪器检定操作 1 水泥GB175-2007 GB/T3183-2003 GB/T13693-2005 GB/T2015-2005 GB/T17671-1999 GB/T1346-2011 GB/T2419-2005 GB/T1345-2005 JTGE30-2005 GB/T12573-2008 安定性 凝结时间 细度 标准稠度用水量 抗折强度 抗压强度 流动度 对规范已进行了相关培训， 从理论到实际进行讲解 已检定 技术负责 人已作相 应培训，满 足操作要 求。
检测能力分析一览表 第 2 页共17 页 序号被检产品 名称 软件检测能力分析硬件检测能力分析 备注标准/规范 代号 检测项数培训情况仪器检定操作 2 金属材料及焊接力学 性能GB1499.1-2008 GB1499.2-2007 GB13788-2008 JG190-2006 GB/T5223-2002 GB/T5223.3-2005 GB/T701-2008 GB/T 228.1-2010 GB/T232-2010 GB/T238-2013 JGJ/T27-2001 JGJ107-2010 JGJ18-2012 屈服强度 抗拉强度 断后伸长率 最大力总伸长率 弯曲性能 反复弯曲次数 重量偏差 屈强比 屈标比 焊接性能 对规范已进行了相关培训， 从理论到实际进行讲解 已检定 技术负责 人已作相 应培训，满 足操作要 求。
检测能力分析一览表 第3页共17 页 序号被检产品 名称 软件检测能力分析硬件检测能力分析 备注标准/规范 代号 检测项数培训情况仪器检定操作 3 砌体材料NY/T671-2003 GB5101-2003 GB13544-2011 GB8239-1997 GB28635-2012 GB11968-2006 JC/T862-2008 GB/T4111-2013 GB13545-2014 抗折强度 抗压强度 吸水率 含水率 几何外观尺寸 对规范已进行了相关培训， 从理论到实际进行讲解 已检定 技术负责 人已作相 应培训，满 足操作要 求。
中学化学实验基本操作中的高考考点较多,为便于系统复习和认真掌握化学实 验操作,现总结八点注意事项,以期对同学们有所帮助。 一、注意事 " 先后 " 顺序 1.组装仪器顺序:先零后整,由低到高,由左到右,先里后外,拆装置与之顺序相 反。 2.加热器试管时,先均匀加热,后局部加热。 3.制取气体时,先检查装置的气密性,后装入药品。 4.使用容量瓶、分液漏斗、滴定管前先检查是否漏水,后洗涤干净。 5.用排液法收集气体时,先移导管后撤酒精灯。 6.用石蕊试纸、淀粉碘化钾试纸、醋酸铅试纸气体性质时,要先用蒸馏水将试纸润湿。再将试纸靠近气体检验。而用 pH 试纸时,要先用玻璃棒蘸取待测液少许滴 到放在表面皿中央的干燥 pH 试纸上,再与标准比色卡比较。 7.中和滴定实验时,用蒸馏水洗净的滴定管、移液管要先用待盛液洗涤 2~3次后, 再盛装试液。注入滴定管中的液体液面开始在 " 零 " 刻度或 " 零 " 刻度以下。 8.点燃可燃性气体时,应先验纯后点燃。净化气体时,应先净化后干燥。 9.焰色反应试验中,每做一次,铂丝都应当先蘸取浓盐酸放在火焰上灼烧至无色 后再做下一次。 10.配制一定物质的量溶液时,溶解或稀释后溶液应冷却再移入容量瓶。 11.气体在热固体表面时,应先将气体干燥后反应。 12.硫酸沾到皮肤上,先迅速用干布擦去,再用水冲洗,千万不得先用水冲洗;碱液 沾到皮肤上,立即用较多水冲洗,再涂上硼酸溶液。
二、注意 " 数据 " 归类 1.托盘天平的准确度为 0.1g ;在测定晶体中结晶水含量时,为保证加热过程中使结晶水全部失去,实验中需加热、称量、再加热、再称量,直到最后两次称量不超过0.1g 。 2.滴定管的准确度为 0.01mL 。 3.酒精灯内酒精的量不能少于容积的 1/3,也不能多于 2/3。 4.试管在加热时,所盛液体不能超过试管容积的 1/3;且要与桌面成 45°角。用试管 夹夹试管时应夹在离管口 1/3处。 5.烧杯、烧瓶加热时,盛液体量均在容积的 1/3~2/3处,蒸发皿加热液体时,盛液体量不宜超过容积的 2/3。 6.液体取用时,若没有说明用量,一般取 1~2mL。 7.配制一定的物质的量浓度溶液时,烧杯、玻璃棒要洗 2~3次,用烧杯往容量瓶中加蒸馏水时,一般加到距离刻度线和 1~2mL处,再用胶头滴管定容。 8.酸碱指示剂的用量一般在 2~3滴。 9.用 pH 试纸测出溶液的 pH ,不能含有小数;任何水溶液, H+或 OH-的浓度均不能为 "0" ,而是大于 "0" 。 10.滴定管的 "0" 刻度在滴定管的上部(但不是最上端,在量取液体体积时,液面不一定要在 "0" 刻度,得要要 "0" 刻度以下;滴定管读数时装液或放液后,需观察 1~2分钟才能观察液面高度。 11.量杯、量筒、容量瓶没有 "0" 刻度;温度计 "0" 刻度在温度计的中下部。
测试技术实验室建设方案 电气信息工程系 2006年4月6日 测试技术实验室建设方案 一、必要性 为了适应电气信息工程学院学科专业建设和发展的需要，贯彻我院的教育宗旨—注重学生的专业综合素质及动手能力的培养，根据对我院的现有实验条件的分析和学科专业建设的需要，我们认为应在现有实验设备基础上新建测试技术实验室，组建一个既能面向学生实验，又能有助于教师进行科研的具有先进水平的测试技术实验室。 由于微电子技术、计算机技术、软件技术、网络技术的高速发展，以及它们在各种测量技术与仪器仪表上的应用，使新的测试理论、测试方法、测试领域以及仪器结构不断涌现并发展成熟，在许多方面已经突破了传统测试技术的概念。基于虚拟仪器的现代测试技术逐步形成了一种发展趋势。虚拟仪器是一种功能意义上的仪器，它是由计算机技术、测量技术和微电子技术不断取得突破而孕育出来的一项新兴技术。虚拟仪器通常是指以计算机为核心的，由强大的测试应用软件支持的，具有虚拟仪器面板，足够的仪器硬件及通信功能的信息处理系统。例如，计算机加上A/D转换器及其他少量辅助电路，编制各种软件就可实现数据采集、波形显示、电压测量、时间测量、频率测量及频谱分析等各种功能，取代传统的示波器、电压表、频率计、频谱分析仪等仪器，配上相应的传感器，就可实现对非电量的测量。可见，虚拟仪器可借助通用数据采集装置，通过编制不同的软件测试方案，可构造任意功能的仪器，即定义仪器的功能。与传统的仪器相比较，虚拟仪器具有模块化及开放性和互换性的特点和资源复用性，同时可方便、经济地组建或重构自动测试系统。因此，与传统的仪器相比，虚拟仪器具有4大优势：性能高、扩展性强、开发时间少，以及出色的集成功能。 将虚拟仪器引入测试系统，就可以建立便于更新、机动灵活、资源共享、功能强大、成本低廉、自主版权的测试系统。这种测试系统能够按工程测试的要求，自由增减系统模块，通过重新配置系统资源，充分运用已有的标准化系统资源，以透明的方式提高工程测试技术综合应用的效率。 现代测试技术知识是测控技术与仪器、电子信息工程、机电一体化等专业的学生所必须
l．能加热的仪器 （l）试管用来盛放少量药品、常温或加热情况下进行少量试剂反应的容器，可用于制取或收集少量气体。 使用注意事项：①可直接加热，用试管夹夹在距试管口1/3处。②放在试管内的液体，不加热时不超过试管容积的l/2，加热时不超过l/3。③加热后不能骤冷，防止炸裂。④加热时试管口不应对着任何人；给固体加热时，试管要横放，管口略向下倾斜。 （2）烧杯用作配制溶液和较大量试剂的反应容器，在常温或加热时使用。 使用注意事项：①加热时应放置在石棉网上，使受热均匀。 ②溶解物质用玻璃棒搅拌时，不能触及杯壁或杯底。 （3）烧瓶用于试剂量较大而又有液体物质参加反应的容器，可分为圆底烧瓶、平底烧瓶和蒸馏烧瓶。它们都可用于装配气体发生装置。蒸馏烧瓶用于蒸馏以分离互溶的沸点不同的物质。 使用注意事项：①圆底烧瓶和蒸馏烧瓶可用于加热，加热时要垫石棉网，也可用于其他热浴（如水浴加热等）。②液体加入量不要超过烧瓶容积的1/2。 （4）蒸发皿用于蒸发液体或浓缩溶液。 使用注意事项：①可直接加热，但不能骤冷。②盛液量不应超过蒸发皿容积的2/3。③取、放蒸发皿应使用坩埚钳。 （5）坩埚主要用于固体物质的高温灼烧。 使用注意事项：①把坩埚放在三脚架上的泥三角上直接加热。②取、放坩埚时应用坩埚钳。（6）酒精灯化学实验时常用的加热热源。 使用注意事项：①酒精灯的灯芯要平整。②添加酒精时，不超过酒精灯容积的2/3；酒精不少于l/4。③绝对禁止向燃着的酒精灯里添加酒精，以免失火。④绝对禁止用酒精灯引燃另一只酒精灯。⑤用完酒精灯，必须用灯帽盖灭，不可用嘴去吹。⑥不要碰倒酒精灯，万一洒出的酒精在桌上燃烧起来，应立即用湿布扑盖。 2．分离物质的仪器 （1）漏斗分普通漏斗、长颈漏斗、分液漏斗。普通漏斗用于过滤或向小口容器转移液体。长颈漏斗用于气体发生装置中注入液体。分液漏斗用于分离密度不同且互不相溶的不同液体，也可用于向反应器中随时加液。也用于萃取分离。 （2）洗气瓶中学一般用广口瓶、锥形瓶或大试管装配。洗气瓶内盛放的液体，用以洗涤气体，除去其中的水分或其他气体杂质。使用时要注意气体的流向，一般为“长进短出”。（3）干燥管干燥管内盛放的固体，用以洗涤气体，除去其中的水分或其他气体杂质，也可以使用U型管。 3．计量仪器 （l）托盘天平用于精密度要求不高的称量，能称准到0.1g。所附砝码是天平上称量时衡定物质质量的标准。 使用注意事项：①称量前天平要放平稳，游码放在刻度尺的零处，调节天平左、右的平衡螺母，使天平平衡。②称量时把称量物放在左盘，砝码放在右盘。砝码要用镊子夹取，先加质量大的砝码，再加质量小的砝码。③称量干燥的固体药品应放在在纸上称量。
实验室资质认定内审员培训习题 三、分析题（每题6分，共18分） 请说明是否符合《评审准则》的要求？简单描述不符合事实，不符合《评审准则》的哪一条款及内容？ 1、评审组在现场参观实验室时发现其中一间办公室装修很好。室主任讲，那是从事室内空气质量检测的工作室，我们从事房间装饰装修、室内空气污染治理，直到空气质量检测的一条龙服务，为业主创造方便条件。 2、评审员在检查实验室的用户申诉和投诉记录时发现有一条意见“实验室的技术负责人经常不在家，检测报告中的问题总是得不到及时解决。”技术负责人如是说：“这是没法解决的问题，因为我确实需要经常出差。” 3、在某实验室计量认证现场评审召开座谈会时，评审组长询问某检测室年轻的检测员是否了解实验室管理体系建立的依据是什么？你们的质量方针和质量目标是什么？回答：“不太清楚，那是领导的事，跟我们关系不大，我的工作就是做好检测工作，把结果报出去。” 4、评审组在现场样品检测考核时，见实验室人员正在查阅专业方法标准合订本，实验室主任讲，合订本便宜，用起来方便，方法标准不保密，不受控，我们只盖实验室公章放心使用，评审员翻了几本，果然干干净净，但发现有已被代替的标准。 5、评审员发现某实验室的人事部仪器设备均选择当地法定计量技术机构进行溯源，当询问一台大型专业检测仪器当地法定计量技术机构是否有能力检测时，该机构的管理人员解释说：“是否有能力检测我们不清楚，但我们选择的是法定计量检定机构，所以它们出具的证书和报告肯定符合要求。” 6、评审员在某实验室评审时，询问有关实验室合同评审的情况，该机构的管理人员解释说：“我们实验室制定了相关合同评审的程序文件，但实验室没与客户签过检测合同，所以也没有进行过合同评审。” 7、评审员在某实验室评审时，询问有关实验室申诉和投诉处理和主动征求客户意见的情况，该机构的管理人员解释说“我们实验室制定了申诉和投诉处理的程序文件，并且向客户发函主动征求客户意见，客户反馈意见不多，而且反馈的意见不尽合理，也以也没有进行处理。”
实验室在辅助生殖医学中的作用 辅助生殖医学领域是一相对较新的医学专业，1959年诞生了第1例“试管动物”（兔子）。随后实验迅速由动物进展至人类。体外受精（In vitro fertilization，IVF）是第一个发展起来的辅助生殖技术。1978年7月28日英国首例体外受精诞生了路易斯布朗（Louise Brown）。1981年美国首次应用IVF。此后IVF方法学作了改良和优化。美国已有超过114,000婴儿是采用IVF 技术出生的。 按照美国疾病控制和预防中心（CDC）的规定，辅助生殖技术（assisted reproductive technologies, ART）包括运用卵子和精子的所有生育力治疗方法。一般说来，ART方法包括： 通过外科手术取出卵母细胞 在实验室内卵母细胞与精子结合受精 胚胎移植至妇女子宫或捐赠给其他妇女 受精可采用实验室体外受精或妇女子宫内受精。 不育症的诊断 不育症简单定义为双方有正常的性生活并且不采取避孕措施、但一年后不能怀孕或出现死胎。美 国不育症患者约有6百余万——占生育年龄的10%。不育与女性、男性或双方均有关，亦有原因 不明者。 实验室检查对诊断男性和女性不育症起着关键作用。男性检查包括精液分析、抗精子抗体测定、 血激素水平测定。精液分析可区分精子数量、形态或精子活动力的异常。抗精子抗体可测定精子 的自身免疫，有报道称不育症男性中有10%会出现抗精子抗体，而有生育力的男性出现的比例<1%。采用卵母细胞单精子微注射技术（ICSI）、即将精子直接注入卵母细胞浆内可达到成功受精。激 素分析包括睾酮、泌乳素（PRL）、黄体生成素（LH）和促卵泡激素（FSH）。这些激素之间的相 互关系对正常精子的产生是重要的。一种或多种激素异常有助于判定出现问题的部位（睾丸、垂 体或下丘脑）。 女性的评估范围更广，包括排卵监测、子宫和输卵管的X射线照相术、腹腔镜检查直接观察生殖 器官和子宫内膜活检。初步实验室分析包括检测促甲状腺激素（TSH）、游离甲状腺（FT4）以确 定甲状腺功能，检测FSH、LH、PRL以评价下丘脑和垂体功能，检测硫酸脱氢表雄酮（DHEA—S） 和睾酮（总睾酮和游离或生物活性睾酮）以排除高雄性激素血症。另外还可在月经周期的特殊时 间进行激素分析，如在周期第3天测FSH和雌二醇（E2）以评估卵巢的储备。检测LH和PRL用有以评估卵泡期，在黄体中期测孕酮来评估排卵功能。
口腔专业建设方案 为加强我校专业建设，改善办学条件，强化教学管理，全面提高教学质量，根据教育部颁发的《普通高等学校高职高专教育专业设置管理原则意见》（教高[2004]4号）、《关于全面提高高等职业教育教 学质量的若干意见》（教高[2006]16号）等文件精神，特制定本方案。 一、专业现状 口腔医学技术专业，从开设至今已经为社会培养了多批优秀人才，多分布在全国各地义齿制作中心或口腔门诊从事义齿制作及口腔疾 病治疗工作。现在校生297名，专任教师24名，行业兼职教师1名，实验管理人员1名，实训室4个（口腔技工实验室、口腔临床实验室、口腔烤瓷实验室、口腔铸造抛光实验室）基本可满足本专业人才培养的需求。 二、专业建设总体目标 进一步加强师资队伍建设，引进专任教师，选聘兼职教师，增强师资力量，加强教师的业务学习，形成一支业务精湛、师德高尚、结构合理、教改意识和质量意识强、教学能力和科研能力突出、实践技能水平高的双师素质教师和双师结构教学团队，为教育教学及专业建设搭建平台。进一步完善校实训基地建设，为学生提供较好的教学条件。以市场需求为导向优化人才培养方案，以就业为目标优化课程体系，改革教学容和方法，提升教学水平，提高教学质量，培养更多的符合社会需求的高素质技能型人才。 三、专业建设的具体容 （一）专业教学团队建设
要解决的问题：专任教师严重不足，改变本专业长期依靠外聘教师的不合理的教师结构。 具体措施：1.引进专业教师，最好是口腔修复工艺专业毕业生或口腔修复学硕士研究生。继续加强教师的业务实践，每年寒暑假派出教师到企业去挂职顶岗。2.加强企业合作，选聘企业的一线专业技术人才、能工巧匠担任兼职教师，参与教学工作（尤其是实践教学），使兼职教师承担专业课时比例逐年增加；培养选拔和引进（聘用）技术服务能力强、行业企业影响力较大的专业带头人，逐步建成与企业联系紧密、规模稳定、人员流动、水平较高的专兼结合双师结构教学团队。（二）实验实训基地建设 要解决的问题：实训室按需所建而非按工作流程所建，缺少职业氛围，有实用性但缺乏仿真性。 具体措施：建立仿真性或生产性校实训基地。1. 进一步规实训室管理制度；开放实训室，给学生提供发挥创造力的条件和场所，提高学生综合素质，培养适应社会需求的高素质技能型人才。2.对现有口腔实训室进行扩建，按照义齿制作流程设计规划实训基地，将职业文化融入到实训基地建设中，使实训基地具有职业性、仿真性。3.校外实习基地建设：继续扩大与企业的合作，把学生的认识与社会实践相结合，把学生知识运用与管理改革相结合，使学生真正贴近现实接触实际，在服务社会的实践中锻炼综合能力。 （三）人才培养方案及课程体系改革 要解决的问题：要根据新形势下市场对人才的需求为依据，修改人才
人类辅助生殖技术规范 https://www.doczj.com/doc/559689486.html,/ivfbutton/first.php 人类辅助生殖技术（Assisted Reproductive Technology, ART）包括: 人工授精（ArtificialInsemination,AI）和体外受精-胚胎移植(In V itro Fertilization and Embryo Transfer,IVF-ET)及其衍生技术两大类。从事人类辅助生殖技术的医疗机构（以下简称医疗机构）须遵守本规范。 一、人工授精技术规范 人工授精根据精子来源分为丈夫精液人工授精（Artificial Insemination by Husband Semen, AIH）和供精人工授精（Artificial Insemination by Donor Semen, AID）。根据授精部位分为阴道内人工授精（Intravaginal Insemination, IVI）、宫颈内人工授精（Intracervical Insemination, ICI）、宫腔内人工授精（Intrauterine Insemination, IUI）和输卵管内人工授精（Intratubal Insemination, ITI）等。 （一）基本要求 1、机构设置条件 （1）必须是具有执业许可证的综合性医院或专科医院； （2）实施供精人工授精必须获得卫生部的批准证书，实施丈夫精液人工授精必须获得省、自治区、直辖市卫生行政部门的批准证书； （3）实施供精人工授精，必须同获得《人类精子库批准证书》的人类精子库签有供精协议； （4）具备法律或主管机关要求的其他条件。 2、人员要求 （1）最少具有从事生殖医学专业的医师2名，实验室工作人员2名，护士1名，且均具备良好的职业道德。 （2）从业医师须具备执业医师资格，具有临床妇产科和生殖内分泌理论及实践经验，具备妇科超声经验。负责人须具备副高及其以上医学专业技术职称。实验室工作人员具有精液分析和精子处理能力。护士具备执业护士资格。 3、场所要求 场所包含候诊室、诊室和检查室、B超室、人工授精实验室、授精室和其他辅助区域。总面积不得少于100 M2 ，其中人工授精实验室和授精室的专用面积各不少于20 M2 。另外，医疗机构须具备妇科内分泌测定、影像学检查、遗传学检查等相关检查条件。 4、设备条件 （1）妇检床2张以上； （2）B超仪1台（配置阴道探头）； （3）生物显微镜1台； （4）小型离心机1台； （5）百级超净工作台； （6）二氧化碳恒温箱； （7）液氮罐2－3个； （8）冰箱。 以上设备要求运行良好，专业检验合格。 （二）管理 1、实施授精前，不育夫妇必须签定《知情同意书》。 2、供精人工授精只能从持有批准证书的精子库获得精源。 3、医疗机构必须实时做好医疗记录、随访，供精人工授精的对象应向精子库反馈妊娠及子代情况。记录应永久保存。
附件2 狂犬病实验室检测技术指南 1、实验室条件及生物安全操作要求 （1）从事狂犬病临床和实验室的工作人员需要暴露前免疫，所有意外暴露于狂犬病毒时必需立即报告本部门负责人。 （2）操作所有潜在狂犬病感染的材料均应在P2或P3（实验室固定毒在P2，病人或动物分离的街毒在P3）生物安全实验室内进行。 （3）当实验室对接收到的动物标本进行操作时，必须在P3以上条件的专业实验室中进行。没有安全实验室（P3级）的单位，严禁从事病毒分离工作。 （4）实验前要穿戴好防护服装、眼镜、手套，作好技术上的准备。 （5）由于空气传播狂犬病毒已经得到证实，因此高速混悬或离心操作应在密闭状态下进行。 （6）实验后要作好善后消毒处理,狂犬病毒对脂溶剂（肥皂水、醚、氯仿、丙酮），45～70%乙醇，碘制剂和四铵化合物敏感，操作完毕对操作台、实验材料等 要用相应的消毒剂或高压蒸汽进行消毒处理。 2、实验室检测网络组成及职责 （1）中国疾病预防控制中心牵头，全国各省级疾病预防控制中心及所辖区域内的各级疾病预防控制中心组成实验室检测网络。 （2）中国疾病预防控制中心职责 A.诊断试剂的研制、标准化，并推荐质量稳定可靠的诊断试剂； B.负责毒株的鉴定和病毒变异性调查； C.对各级实验室检测人员进行技术培训。 D.协助省级疾病预防控制中心完成标本的实验室检测。 （3）省级疾病预防控制中心职责 A.收集、保存辖区内各监测点的各种待检测标本。 B.辖区内各种标本的实验室检测。 C.对本省监测点标本采集和运送给与技术指导和协助。 （4）县级监测点疾病预防控制中心职责 采集病例标本，运送病例标本至省级疾病预防控制中心。 3、实验室检测方法
教学实验室管理规章制度 一、总则 1.口腔医学实验教学示范中心的教学实验室在分管院长的领导下，由教学办公室负责管理。各实验室设管理员1人。教学实验室管理员必须具有副高及以上技术职称，管理员负责仪器、设备的保管与使用，以及实验资料的管理。 2.教学实验室系统图(附图) 口腔医学实验教学示范中心教学实验室 口腔仿真实验室口腔理工实验室口腔基础实验室 二、教学实验室设备管理制度 1.本管理制度适用于各实验室管理的一切仪器、设备及大型工具。 2.各教学实验室的仪器、设备向全院师生开放。 3.教学实验室所有仪器、设备的说明书、定货合同等一切资料，均由实验室管理员统一登记、编号、建卡片归档保管。设备卡片由院设备员保管。 4.向总务处提出采购进口或国产仪器、设备，均由教学办负责人签字申请。 5.大型及精密仪器、设备由教学办负责人指定专人使用、管理及维护。非指定人员不得擅自动用。 6.仪器、设备维护的内容包括: (1)外观整洁，无非正常损伤。 (2)电源插头及开关触点良好。 (3)杜绝漏电、漏水等不安全隐患。 (4)按照仪器设备保养说明书的要求，进行常规保养维护工作。 7.新购仪器、设备到货后，由教学办负责人指定专人会同设备员、总务采
8.新型、贵重仪器购入后由教学办负责人委派专人详细阅读说明书，将外文说明书中的重要内容译为中文并写出基本操作规程，或必要时接受有关的培训后方可对仪器、设备实行操作。其他专业人员的操作应经上述专人指导掌握后方可进行 9.使用、操作贵重仪器、设备后，需认真填写使用记录，应写明设备启用时数及运行状况。 10.当仪器、设备出现无法排除的故障及发生损坏时，应立即向教学办负责人报告；造成严重损坏时，应填写书面报告。 11.仪器、设备故障的维修由管理员提出维修方式及程序的意见；维修后，操作员应及时填写书面维修记录。 12.各教学实验室的全部仪器、设备及其说明书等资料一律不予外借。 三、教学实验室仪器、设备的维修制度 1.所有仪器、设备应由使用人员保持外部清洁，进行定期维修、简易保养及维护。 2.仪器、设备发生故障时，应报教学办负责人，并会同有关部门及时修理。 3.非专业人员不得擅自动用贵重、大型仪器、设备。 4.贵重、大型仪器、设备应立操作规程卡片，应严格登记使用情况。 5.所有新仪器、新设备在使用前，应由专人认真阅读说明书，并在专业人员的指导下启用。 6.教学办负责人定期检查各种仪器、设备的使用和保养情况。 四、教学实验室日常管理 1.教学实验室必须保持清洁、整齐、安静，实验室内禁止吸烟。 2.禁止将与教学实验工作及试验设备无关的物品带入实验室。
目录 1. 实验室管理制度 (160) 2. 化验室管理制度 (162) 3. 计量管理制度 (166) 4. 资料室管理制度 (167) 5. 取样班管理制度 (169) 6. 堆浸工段管理制度 (171) 7. 实验室考核制度 (172) 8. 化验室考核制度 (173) 9. 计量班考核制度 (175) 10. 取样班考核制度 (176)
技术质量部组织机构图 图一技术质量部组织机构图
1. 实验室管理制度 1.1 实验室工作 1.1.1 试验室保持肃静，集中思想，认真操作，仔细观察现象，如实记录结果，积极思考问题。 1.1.2 试验时应保持试验室和桌面清洁整体。废纸，火柴梗和废液等应倒在废物缸内，严禁到入水槽内，以防水槽和下水道堵塞或腐蚀。 1.1.3 爱护公司财产，小心使用仪器和实验设备，注意节约水、点和煤气。 1.1.4 使用精密仪器时，必须严格按照操作规程进行操作，细心谨慎，如发现仪器有故障，应立即停止使用，及时报告并联系维修人员。 1.1.5 使用药品应注意以下几点： a. 药品应按规定量取用，应注意节约，尽量少用； b. 取用固体药品时，注意勿使其撒落在实验台上； c. 药品自瓶中取出后，不应倒回原瓶，以免带入杂质而引起瓶中药品变质； d. 试剂瓶用过后，应立即盖好塞子，并放回原处，以免和其他瓶上的塞子搞错，混入杂质； e. 各种试剂和药品，严禁拿到自己的实验桌上； f. 实验后要回收的药品，应倒入回收瓶中。 1.1.6 实验后，应将仪器洗刷干净，放回规定的位置，整理好桌面。 1.1.7 值日生打扫整个实验室，最后负责检查水龙头是否关好，拉开电闸，关好门窗后才能离开实验室。 1.2 实验室工作中的安全操作 1.2.1 一切有毒的或有恶臭的物质的实验，都应该在通风橱中进行； 1.2.2 一切易挥发的和易燃的物质实验，都应该在离火较远的地方进行，且应该尽可能的在通风橱中进行； 1.2.3 加热试管时，不要将试管口指向自己和他人，也不要俯视正在加热的液体，以免溅出的液体将人烫伤； 1.2.4 在闻瓶中气体时，鼻子不能直接对着瓶口或管口，而应用手把少量的气体轻轻扇向自己的鼻孔；
人类辅助生殖技术规范 人类辅助生殖技术（Assisted Reproductive Technology，ART）包括体外受精-胚胎移植(In Vitro Fertilization and Embryo Transfer，IVF-ET)及其衍生技术和人工授精（Artificial Insemination，AI）两大类。从事人类辅助生殖技术的各类医疗机构和计划生育服务机构(以下简称机构)须遵守本规范。 一、体外受精-胚胎移植及其衍生技术规范 体外受精-胚胎移植及其衍生技术目前主要包括体外受精-胚胎移植、配子或合子输卵管内移植、卵胞浆内单精子显微注射、胚胎冻融、植入前胚胎遗传学诊断等。 （一）基本要求。 1、机构设臵条件 （1）必须是持有《医疗机构执业许可证》的综合性医院、专科医院或持有《计划生育技术服务机构执业许可证》的省级以上（含省级）的计划生育技术服务机构； （2）中国人民解放军医疗机构开展体外受精-胚胎移植及其衍生技术，根据两个《办法》规定，由所在的省、自治区、直辖市卫生行政部门或总后卫生部科技部门组织专家论证、审核并报国家卫生部审批； （3）中外合资、合作医疗机构必须同时持有卫生部批准证书和原外经贸部（现商务部）颁发的《外商投资企业批准证书》； （4）机构必须设有妇产科和男科临床并具有妇产科住院开腹手术的技术和条件； （5）生殖医学机构由生殖医学临床（以下称临床）和体外受精实验室（以下称实验室）两部分组成； （6）机构必须具备选择性减胎技术； （7）机构必须具备胚胎冷冻、保存、复苏的技术和条件； （8）机构如同时设臵人类精子库，不能设在同一科室，必须与生殖医学机构分开管理； （9）凡计划拟开展人类辅助生殖技术的机构必须由所在省、区、市卫生行政部门根据区域规划、医疗需求予以初审，并上报卫生部批准筹建。筹建完成后由卫生部组织专家进行预准入评审，试运行一年后再行正式准入评审； （10）实施体外受精-胚胎移植及其衍生技术必须获得卫生部的批准证书。 2、在编人员要求 机构设总负责人、临床负责人和实验室负责人，临床负责人与实验室负责人不得由同一人担任。 生殖医学机构的在编专职技术人员不得少于12人，其中临床医师不得少于6人（包括男科执业医师1人），实验室专业技术人员不得少于3人，护理人员不得少于3人。上述人员须接受卫生部指定医疗机构进行生殖医学专业技术培训。 外籍、中国台湾地区、香港和澳门特别行政区技术人员来内地从事人类辅助生殖诊疗活动须按国家有关管理规定执行。 （1）临床医师 ①专职临床医师必须是具备医学学士学位并已获得中级以上技术职称或具备生殖医学硕士学位的妇产科或泌尿男科专业的执业医师； ②临床负责人须由从事生殖专业具有高级技术职称的妇产科执业医师担任； ③临床医师必须具备以下方面的知识和工作能力： 掌握女性生殖内分泌学临床专业知识，特别是促排卵药物的使用和月经周期的激素调控； 掌握妇科超声技术，并具备卵泡超声监测及Ｂ超介导下阴道穿刺取卵的技术能力，具备开腹手术的能力；具备处理人类辅助生殖技术各种并发症的能力； ④机构中应配备专职男科临床医师，掌握男性生殖医学基础理论和临床专业技术。 （2）实验室技术人员 ①胚胎培养实验室技术人员必须具备医学或生物学专业学士以上学位或大专毕业并具备中级技术职称；