微波法芹菜中芹菜素
的提取和芹菜中芹菜素的测定
摘要：建立一种测定芹菜中芹菜素含量的紫外可见分光光度法，对芹菜的新鲜叶片、新鲜茎中芹菜素含量进行测定。采用紫外可见分光光度直接测定法，检测波长为270nm，芹菜素在0.023~0.115 mg·mL-1范围内线性关系良好，精密度较高，稳定性较好。同时采用微波法对芹菜中芹菜素进行提取，实验结果表明：以体积分数为65%的乙醇浓度为提取剂，料液比（g/ml）为1:7.5的条件下第一次提取2min，第二次提取1min为最佳提取条件。紫外可见分光光度法简便，快速，可用于芹菜中芹菜素含量的测定；微波法提取时间短，提取率高，是强化固液提取过程颇具发展潜力的一项新型辅助提取技术。
关键词：芹菜；芹菜素；紫外可见分光光度法；测定；微波法：家用微波炉；提取条件
Microwave method in The celery, celery and The Extraction of Celery in The Determination of Celery Element
Hu Li Jiao Liu-Yun Zhang Juan Tao qiang
(Hengyang Normal College Life Science zhi dao lao shi:He Li-Fang) Abstract: Establishing a determination in the celery, content of celery ultraviolet spectrophotometry, the fresh leaf of celery, fresh meat content in the stem celery were determined. Utilizes uv-vis spectrophotometry method detected wavelength determined directly, for 270 nm, celery element in 0.023 ~ 0.115 mg ·mL-1 range, high precision and good inside sex, stability is good. And the method of microwave extraction in the celery, celery, the experimental results show that: to the volume fraction of 65% ethanol concentration for material liquid extraction agents, than (g/mL) for 1:7. 5 conditions the first 2 min, the second time extracting extraction for best extraction conditions 1 min. Ultraviolet spectrophotometry is simple, fast, and can be used in the celery celery element content is determined; Microwave extraction method of short time, high yield, is to strengthen the solid and liquid extraction process has the potential for the development of a new auxiliary extraction technology. Keywords: celery; Celery element; Ultraviolet spectrophotometry; Determination; Microwave
method: household microwave oven; Extraction conditions
1 前言部分
芹菜(Apium grauensL.Var.dulecdc.)为伞形科芹菜属草本植物，是我们日常生活中食用的一种蔬菜，具有“补血、祛风、健脾利湿”的作用，且能清理胃中湿浊。由于它具有一定的药用保健功能，有“药芹”之称。研究表明：芹菜中含多种化学成分，主要有芹菜素(Apigenin)、挥发油、有机酸、胡萝卜素(Carotence)、维生素C、糖类及多种黄酮类化合物。其中具有独特的药理效应和生物学功能成分的芹菜素属于一种黄酮类化合物，分子式为C15H18O15，化学结构为4’,5,7—三羟黄酮，其4’,5,7位置的3个羟基和C2 C3双键决定了其独特的药理学效应和生物学特性。近年来大量的实验表明芹菜素具有多种药理功效：镇静、安神、保护皮质神经元、预防动脉粥样硬化、雌激素作用、抑制肿瘤血管形成、侵袭和转移、降压、抗氧化、抗菌消炎和利尿的作用。在临床上主要用于治疗肿瘤、高血压、病毒性肝炎、改善中老年人的记忆力等。芹菜素还有影响中枢神经和保护心脏的作用，可用于治疗帕金森氏症，也可作为抗HIV抗病毒药物及MAP激酶的抑制剂。因此，测定芹菜中芹菜素的含量，对于相关产品的开发研究，具有十分重要的现实意义。
本文采取乙醇为提取溶剂，用微波法提取芹菜素，是目前比较新的方法。此法不仅以其操作简单、副产物少、产率高及产物易提纯等优点，而且浸出过程中材料细粉不凝聚、不糊化，克服了热水法易凝聚、糊化的不足。从乙醇浓度、提取时间，提取级数及料液比四个方面对芹菜素提取量的影响，确定芹菜中芹菜素提取的最佳条件。
2 实验部分
2.1 材料与仪器
2.1.1 原料
芹菜：购于衡阳市香江百货（岳屏店）
2.1.2 试剂
芹菜素标准品：深圳伽马公司提供，无水乙醇，蒸馏水
2.1.3 仪器
电子天平（FA2004N），紫外可见分光光度计（UV-2102 PCS型），家用微波炉，恒温水浴锅（HH-S，江苏国胜实验仪器厂），过滤装置，碾钵，烧杯，试管，玻璃棒，量筒，移液管。
2.2实验方法
2.2.1样品溶液的制备
样液A（新鲜叶片）：取芹菜叶片10g，用蒸馏水洗净，沥干10min，捣碎，加入80%乙醇100ml，在70℃下水浴1h，用微波炉微波扫描2min，用滤纸过滤，得滤液备用。
样液B（新鲜茎）：取芹菜茎10g，用蒸馏水洗净，沥干10min，捣碎，加入80%的乙醇100ml，在70℃下水浴1h，用微波炉微波扫描2min，用滤纸过滤，得滤液备用。
2.2.2最大吸收波长的选择
取样液A、B溶液各2ml，用30%的乙醇定容至10ml，在200~600nmUV中扫描，确定比色波长
2.2.3标准品溶液的制备
取5.75mg芹菜素标准品，用30%的乙醇定容至25ml，保存备用。
2.2.4 标准曲线的绘制
精确取标准品溶液0、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5ml，分别置于5ml的容量瓶中，用30%乙醇定容至5ml，以浓度为0的溶液作为空白，在270nm波长处比色测定。
2.2.5微波法提取条件的选择
2.2.5.1提取时间对芹菜素提取量的影响
称取5份10 g新鲜芹菜茎，用蒸馏水洗净后捣碎，分别加入50ml 80%的乙醇，恒温70度水浴加热1h，进行第一次微波提取，微波照射时间设为1min、2min、3min、4min、5 min。冷却后再进行第二次微波提取，微波照射时间设为1min.，将其过滤得样液，从5组样液中各取样1 ml，用30%的乙醇定容至5ml ，紫外分光度计270nm下，分别测得其吸光度。
2.2.5.2乙醇浓度对芹菜素提取量的影响
分别称取10 g新鲜芹菜茎8份，用蒸馏水洗净后捣碎，分别加入50ml 60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%、95%的乙醇，恒温70度.水浴加热1h，进行第一次微波提取，微波照射时间设为2min，再进行第二次微波提取，微波照射时间设为2min.将其过滤得样液，从8组样液中各取样1 ml，用30%的乙醇定容至5ml ，紫外分光度计270nm下，分别测得其吸光度。
2.2.5.3料液比对芹菜素提取量的影响
称取4份10 g新鲜芹菜茎，用蒸馏水洗净后捣碎，分别加入25ml、50ml、75ml、100ml 65%的乙醇，其料液比分别为1:2.5 , 1:5.0 , 1:7.5 , 1:10.0 。70度水浴加热1h，进行第一次微波提取，微波照射时间设为2min.，再进行第二次微波提取，微波照射时间设为1min. 将其过滤得样液，从4组样液中各取样1 ml，用30%的乙醇定容至5ml ，紫外分光度计270nm下，分别测得其吸光度。
2.2.5.4提取级数对芹菜素提取量的影响
称取4份10g新鲜芹菜茎捣碎，分别加入50ml 65%的乙醇，设为A、B、C、D组，70度水浴加热1h，分别进行第一次微波提取，微波照射时间设为2min。
B、C、D组进行第二次微波提取，微波照射时间设为1min、2min、1min。D组再进行第三次微波提取，微波照射时间为30s. 将其过滤得样液，从4组样液中取样各1 ml，用30%的乙醇定容至5ml ，紫外分光度计270nm下，分别测得其吸光度。
3 结果与分析
3.1 最大吸收波长的选择
扫描结果如图2所示：
新鲜叶片扫描新鲜茎扫描
图2 吸收波长的选择
从图2扫描结果可以发现，新鲜叶片中芹菜素在240nm，270nm，365nm 处都有吸收峰，且在240nm和270nm处有强吸收峰，而在365nm处有弱的吸收峰；新鲜茎中芹菜素在240nm，270nm，365nm处出现吸收峰，综合分析，在240nm 和270nm处均可作为检测波长的选择，但是在240nm处波长较短，故本实验选择270nm作为检测波长。
3.2标准曲线的绘制
标准曲线测定结果如表1所示。
表1 标准曲线制作数据
编号 1 2 3 4 5 6
0 0.023 0.046 0.069 0.092 0.115 芹菜素浓度
（mg·mL-1）
吸光度（OA）0 0.082 0.184 0.292 0.403 0.533 以标准品浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线如图3。
用最小二乘法计算直线回归方程的公式为：Y=a X+ b
解得：a=4.641 b=-0.0178
所以得回归方程为：Y=4.641x-0.0178，r2= 0.9953。然后，取样品液各1ml，用30%乙醇稀释至5ml，利用紫外可见分光光度计，依法测定其吸光度，利用回归方程计算出样品中所含的芹菜素的含量。
3.3微波法提取条件的选择
3.3.1微波扫描时间对芹菜素提取量的影响
用体积分数为80%的乙醇做溶剂，料液比（g/ml）为1:5.0及相同的微波扫描时间下。不同的提取量见图3，由图3可见，当提取时间为2min 时，芹菜素的提取量最大，低于2min ，提取不完全，高于2 min，部分芹菜素可能被破坏，而导致提取量下降，在微波辐射过程中，电磁波把能量直接传递到原料内部，使之瞬时加热，当提取时间过长时达到过高温度，使芹菜素活化成份降解或异构化，导致提取物有效成分含量降低，因此提取时间以2 min为宜。
图 3
3.3.2乙醇浓度对芹菜素提取量的影响
在微波扫描时间为2 min，料液比（g/ml）为1:5.0的条件下，采用不同浓度乙醇的提取结果见图4，由图4可见，随着乙醇浓度的增加，芹菜素的提取量增加，乙醇体积分数为65%时，提取量最大，然后随着乙醇浓度的再增加时，芹菜素的提取量减少到缓慢增加。所以选择乙醇体积分数为65%。
图 4
3.3.3料液比对芹菜素提取量的影响
不同料液比的提取结果见表2，由表2可见，芹菜素的提取量随着提取溶剂的增加而增加，在固定微波扫描时间和相同的乙醇浓度下，当提取溶剂体积大于料质量的7.5倍时，芹菜素的提取量基本保持不变，故选择料液比（g/ml）为1:7.5。
表2 料液比对芹菜素提取量的影响
料液比/（g/ml）1:2.5 1:5.0 1:7.5 1:10.0
芹菜中芹菜素31.38 42.72 60.84 68.64
的含量/（mg/g）
3.3.4提取级数对芹菜素提取量的影响
在固定的微波扫描时间和相同的乙醇浓度下，对同一料液比的样品进行不同的提取级数微波扫描，其结果见表3，由表3可见，进行一次提取的A组，得到的芹菜素最少；进行二次提取的B、C组，区别在第二次提取时微波扫描时间分别设为1min , 2min 得到的芹菜素量都有所增加，但是C组测得的芹菜素量偏少；进行三次提取的D组，前两次提取同A组，进行第三次提取微波扫描时间设为
30s,得到的芹菜素含量较B组稍多。可见在前二次提取的基础上，再增加提取次数，对芹菜的提取量增加不大，因此选择二次提取，但在进行第二次提取时时间设为1min。
表 3 提取级数对芹菜素提取量的影响
4 结论与讨论
（1）通过对新鲜叶片，新鲜茎的紫外可见扫描结果的对比分析，确定了紫外可见分光光度直接测定法用于测定芹菜中芹菜素含量的合适检测波长为270nm。
（2）关于芹菜中的叶绿素问题：用乙醇作为有机溶剂，不仅能够提取芹菜素，也能够提取叶绿素，叶绿素a，b对645nm和663nm波长的光有吸收高峰，且两吸收曲线相交于652nm处，测定芹菜素是在270nm处，因此叶绿素在270nm处对测定影响不大。
（3）微波法提取芹菜中芹菜素的最佳提取条件为：以体积分数为65%的乙醇浓度为提取剂，料液比（g/ml）为1:7.5的条件下第一次提取2min，第二次提取1min。
（4）在整个提取中，由于乙醇的挥发，造成溶剂体积减小，计算出的浓度即芹菜素的含量偏大，由于每组实验处于同一环境下，则并不影响最佳条件的确定。
（5）用微波法提取芹菜素，是目前比较新的方法。它的原理是微射线辐射于溶剂并透过细胞壁到达细胞内部，由于溶剂及细胞液吸收微波能，细胞内部温度升高，压力增大，当压力超过细胞壁的承受能力时，细胞壁破裂，位于细胞内部的有效成份从细胞中释放出来，传递转移到溶剂周围被溶剂溶解。此法提取时间短，提取率高，是强化固液提取过程颇具发展潜力的一项新型辅助提取技术。
（6）芹菜提取物具有良好的药用价值，对多个系统疾病具有良好的治疗作用，具有较好的开发前景。本实验采用紫外可见分光光度法在270nm波长下测定芹菜中芹菜素含量的结果的稳定性好，重现性好，以芹菜素标准品为标样的直接测
定法是一种操作简单，结果较为准确的测定法。为芹菜素在食品开发及医药应用上提供科学依据。
参考文献:
［1］文赤夫，董爱问，罗庆华，雷姝。紫花地丁中芹菜素提取和清除自由基活性研究。《现代食品科技》
［2］高金燕，曾小花等。从芹菜中提取黄酮类物质的初步研究，中国食品添加剂2004，3
［3］毕丽君，李慧等。水芹中黄酮类化合物最佳提取工艺的研究，食品科学1999,12
［4］张桂，畅天狮等芹菜中提取黄酮类物质的研究，食品科学，2002
［5］赵国华，陈宗道。类黄酮的生理作用【J】，食品与发酵工业，2001,27（3）［6］周崎主编，植物生理学实验指导【M】,北京：中国农业出版社，1995 ［7］Wang CN Chi CW Lin YL JOURNAL OF CHEMISTRY 2001(07)
［8］芹菜素的药理学研究进展；西安交通大学第二附属医院普外科
［9］胡敏, 张艳红, 胡艳银杏黄酮甙的水浸提方法研究[J]. 食品与发酵工业, 1998, 24(4):31-34.
［10］丁利君, 吴振辉, 蔡创海, 等. 菊花中黄酮类物质提取方法的研究[J]. 食品工业科技, 2002, 23(2):20-22.
［11］曹永刚. 芦丁提取工艺的研究[J]. 中国医药工业杂志, 1993, 24(2):51-53. ［12］许钢, 张虹, 胡剑. 竹叶黄酮的提取方法[J]. 分析化学, 2000, 28(7):857-859.
［13］闫蕊，尚庆坤，戴欣，微波法提取芦荟中黄酮类化合物；东北师范大学化学学院，吉林长春130024
［14］微波提取机理；天水华圆制药设备科技有限责任公司，甘肃天水741020 ［15］李嵘，金美芳，微波法提取银杏黄酮的新工艺；大连化学物理研究所［16］戴玉锦，卢明，冯玲，微波法从柚皮中提取黄酮类化合物的工艺研究；江苏苏州215009
丹参提取物 西安金绿生物工程技术有限公司 [产品名称-KinGreen]: 丹参提取物 [英文名称-KinGreen]: Salvia Miltrorrhiza Extract [拉丁名称-KinGreen]：Slauia miltiorrhiza Bunge [原料别名-KinGreen]：亦参、木羊乳（《吴普本草》），逐马（陶弘景），山参（《日华子本草》），紫丹参（《现代实用中药》），红根（《中国药植志》），紫党参（《南京民间药草》），山红萝卜（《浙江中药手册》），活血根、靠山红、红参（《江苏植药志》），烧酒壶根、野苏子根、山苏子根（《东北药植志》），大红袍（《河北药材》），蜜罐头、血参根、朵朵花根（《山东中药》），蜂糖罐（《陕西中药志》）。 [产品来源-KinGreen]: 丹参提取物来源为为唇形科植物丹参Salvia miltiorrhiza Bunge. 的干燥根及根茎。春、秋二季采挖，除去泥沙，干燥。 [原料形态-KinGreen]: 多年生草本，高30-100cm。全株密被淡黄色柔毛及腺毛。茎四棱形，具槽，上部分枝。叶对生，奇数羽状香叶；叶柄长1-7cm；小叶通常5，稀3或7片，顶端小叶最大，侧生小叶较小，小叶片卵圆形至宽宽卵圆形，长2-7cm，宽0.8-5cm，先端急尖或渐尖，基部斜圆形或宽
楔形，边具圆锯齿，两面密被白色柔毛。轮伞花序组成顶生或腑生的总状花序，每轮有花3-10朵，下部者疏离，上部者密集；苞片披针形，上面无毛，下面略被毛；花萼近钟状，紫色；花冠二唇形，蓝紫色，长2-2.7cm，上唇直立，呈镰刀状，先端微裂，下唇较上唇短，先端3裂，中央裂片较两侧裂片长且大；发育雄蕊2，着生于下唇的中部，伸出花冠外，退化雄蕊2，线形，着生于上唇喉部的两侧，花药退化成花瓣状；花盘前方稍膨大；子房上位，4深裂，花柱细长，柱头2裂，裂片不等。小坚果长圆形，熟时棕色或黑色，长约3.2cm，径1.5mm，包于宿萼中。花期5-9月，果期8-10月。 [原料分布-KinGreen]: 分布于辽宁、河北、山西、陕西、宁夏、甘肃、山东、江苏、安徽、浙江、福建、江西、河南、湖北、湖南、四川、贵州等地。 [ Product—Brand ]: 西安金绿-Xi’an KinGreen [化学成分-KinGreen]： [供应厂家-KinGreen]: 西安金绿生物工程技术有限公司[生产流程-KinGreen]: 选材，煎煮、渗漉、回流、蒸馏、沉淀、静置、过滤、浓缩、干燥等过程。 [药理作用-KinGreen]: 心血管系统的作用 ①强心加强心肌收缩力、改善心脏功能，不增加心肌耗氧量
丹参有效成分的分离与提取 （作者： _________ 单位：___________ 邮编：___________ ） 【关键词】丹参；隐丹参酮；丹参酮H A 丹参为唇形科多年生草本植物，丹参的干燥根及根茎，主产于四川、安徽、江苏及河南等省。春秋两季采挖，除去茎叶泥沙，须根晒干。其根茎短粗，顶端有残留茎基，根数条，长圆柱形，略弯曲，有的分枝并有须状细根，长10-20 cm，直径0.3-1 cm，表面棕红色或暗棕红色，粗糙，具纵皱纹，老根外皮疏松，多显紫棕色，常呈鳞片状脱质硬而脆，断面疏松，有裂隙或略平整而致密，皮部棕红色，本部灰黄色或紫色，导管束黄白色，呈放射状排列，气微，味微苦涩。丹参有效成分主要有脂溶性非醌色素类化合物，如丹参酮H A、丹参酮HB、隐丹参酮及其异构体。水溶性酚酸类成分如原儿茶醛、丹参素。其中，隐丹参酮是抗菌的有效成分。 1材料与方法
1.1材料与试剂丹参粉末，乙醇，苯，氧化铝，丙酮。 1.2实验方法取丹参粉末，用乙醇热煮，煮沸15-20 min，用苯洗脱过滤，洗脱液经氧铝（皿级）层析，再用苯洗脱，样品呈紫色样段，橙红色样段，暗红色样段，取橙红色样段经过苯洗脱，再用丙酮洗脱，呈板状结晶，为丹参酸甲脂，呈橙红色结晶，为隐丹参酮。将暗红色样段，氧化铝棒置容器中，经苯洗脱，再用丙酮洗脱，呈暗红色结晶，为丹参酮H A。隐丹参酮与丹参酮H A为脂溶性成分，样品的甲醇提取液，回收溶剂至干，残渣溶于氯仿期滤，滤液加水振摇静止，取氯仿层浓缩至干，加氯仿显色。原儿茶醛、丹参素为水溶性成分，用荧光法鉴别。取本品粉末，置白瓷板上，于紫外灯（365 mm）下检视，呈灰色荧光，即原儿茶醛。薄层色谱法：样品水提液，浓缩后，以80% 醇沉，用盐酸调值，pH 2，乙醚萃取，醚提取液挥去乙醚，用乙醇溶液，点于硅胶G （或H）—羧甲基纤维素钠薄层板上，先以苯一乙酸一乙甲酸（4 : 1）展开1 cm取出挥溶剂再以苯一乙酸乙酯一甲酸（80 : 50 8）展开，以三氯化铁一铁氰化钾（1 1）试剂显色。 1.2.1指纹图谱参照高效液相色谱法（《中国药典》2000版1部VID）测定。系统适用性试验十八烷基硅烷键合硅胶为固定相，流速0.5 mL/min，检测波长为281 nm，理论板数按原儿茶醛峰计算，应不低于5000，见表1、表2。表1二元梯度洗脱参数表2特征峰相对保留时间表3特征峰标准相对峰面积 1.2.2对照品溶液的制备取原儿茶醛对照品适量，精密称定，加甲醇制成相当于每2 mL含原儿茶醛0.01 mg的溶液，摇匀，即得。
丹参提取工艺研究 丹参由脂溶性成分和水溶性成分组成，其酯溶性成分丹参酮ⅡA是治疗心脑血管疾病的有效成分。本方案采用乙醇回流提取，通过正交实验（将丹参用不同提取时间、浓度乙醇溶液、不同溶媒量及提取次数各设置3个水平）选择最佳乙醇提取工艺条件，并以丹参酮ⅡA含量作为考察指标。通过实验最终得：以12倍量85%的乙醇回流提取3次，1.5 h/次，丹参酮ⅡA的提取率最高。 标签：丹参；丹参酮ⅡA；提取工艺；正交试验 1丹参提取方法 丹参提取方法有：①水煎煮法，②乙醇回流法，③乙醇回流-水煎煮提取法，④超临界提取法，⑤超声提取法。 2丹参研究的现实意义 近年来管疾病的治疗取得迅猛发展，溶栓药物和介入治疗等大大改善了冠心病患者的预后。随着人们生活水平提高，人们越来越关注自身的健康问题，天然药物及其保健品的需求也越来越大，为了更好地发挥丹参的药用价值，本文采用乙醇回流提取法，运用正交设计法，考察丹参醇提的影响因素，并以丹参酮ⅡA 作为参考指标，筛选最佳提取工艺条件。 2.1实验材料 2.1.1仪器，见表1。 2.1.2试剂及药材乙醇（95%）（分析纯，杭州长征化工厂）；甲醇（分析醇，杭州双林化工试剂厂）；甲醇（色谱纯）。丹参药材（20140108，亳州市安利达药业有限公司）。 2.2实验步骤 2.2.1正交试验的设计 2.2.1.1正交试验因素水平表根据影响乙醇回流提取的因素：以乙醇浓度、提取时间、溶媒量、提取次数为因素，每个因素拟定3个水平，因素水平表，见表2。 2.2.1.2 L934正交试验将丹参药材粉碎为粗粉，平行精密称取9份药材，每份10 g，按L934正交试验表安排实验，以丹参酮ⅡA的含量为指标。将丹参药材粗粉，置蒸馏烧瓶中，精密加入规定量乙醇，称重，加热回流，放冷，再称定重量，用乙醇补足减失重量，摇匀，合并提取液，滤过，续滤液，即得。
丹参药理作用研究进展 摘要：目的：探讨丹参的药理作用新用途，为临床应用提供依据。方法：查阅相关文献进行分析和归纳。结果：丹参的药理作用及其广泛，包括扩张血管，抗血栓，对心肌的保护，降血脂，防治动脉粥样硬化，改善外周循环，改善缺血在灌注损伤，保护肝，抗肿瘤，抗氧化，抗菌消炎等作用。结论：丹参的药理作用疗效确切，在临床上有广泛应用，值得更深入研究。 关键词：丹参；植物来源；化学成分；药理作用；研究进展 前言丹参为唇形科鼠尾属植物丹参（Salvia Miltiorrhiza Bunge）的干燥根及根茎[1]现代药理学研究证明，丹参的药理活性主要是对心脑血管系统的作用，如扩张血管加快血流、改善微循环、改变血液黏滞性、抗氧化、抗凝血、增加心肌供血等，主要用于治疗冠心病、高血脂症、脑血管病[12]。现就丹参的化学成分和药理作用及临床应用研究进展作一综述。 1化学成分 丹参的化学成分分为脂溶性和水溶性两部分，前者为丹参酮类，主要有丹参酮Ⅰ、丹参酮ⅡA、丹参酮ⅡB、丹参羟甲酯、隐丹参酮、羟基丹参酮、二氢丹参酮Ⅰ以及异丹参酮Ⅱ、异丹参酮、二氢异丹参酮Ⅰ；后者主要为酚酸类，包括丹参素、原儿茶醛、丹参酸甲、已、丙[1]。 2药理作用 2.1心血管系统作用 2.1.1扩张血管的作用陈士良等[2]自制微米缩窄器造成犬冠状动脉左前降支狭窄模型，结果提示，复方丹参注射液有直接扩张冠脉，改善缺血区血供的作用。 2.1.2抗血栓形成的作用白细胞与血栓形成的关系很早就引起极大关注。富血小板栓部位常有白细胞聚集，白细胞通过呼吸爆发产生大量氧自由基及过氧化氢等激活血小板。白细胞与血小板的黏附在炎症、血栓形成、组织损伤及性播散凝血中起重要作用。姜开余等[3]考察丹参素对血小板，白细胞和血管内皮细胞表达各种细胞黏附分子，包括
南阳医学高等专科学校2011届毕业生 毕业论文 题目丹参的有效成分提取分离方法研究进展 完成人刘奕心 班级 09升段中药班 学制二年制 专业中药学 指导教师吴杰 完成日期 2011年3月12号
丹参的有效成分提取分离方法研究进展 【摘要】本文综述了丹参有效成分的各种提取分离技术，其中包括超临界流体萃取技术、微波辅助萃取法、加压液体萃取法、高速逆流色谱法和真空液相层析法等，并分别对其优缺点进行分析，为丹参药理学活性物质基础的研究提供参考。 【关键词】丹参; 有效成分; 提取分离 丹参为唇形科植物丹参Salvia miltiorrhiza Bge.的干燥根及根茎，始载于《神农本草经》，被列为上品，历代本草均有收载。其味苦、性微寒，归心、肝二经。具祛瘀止痛、活血通经、清心除烦之功效，是一种临床应用广泛的中药。其现代药理作用主要包括舒张冠脉、增加冠脉血流量，具有明显的钙拮抗剂作用;提高心室的顺应性，改善心脏的舒张功能，对缺血心肌和再灌注心脏具有保护作用;抑制内源性胆固醇的合成;增加微循环流速和流量，消除局部静脉血液瘀滞，改善组织细胞缺血、缺氧所致的代谢障碍;具有抗体外血栓形成、抗血小板聚集、抗内外凝血系统功能、减少血小板、促进纤维蛋白原降解作用;具有很强的清除自由基和抗氧化作用等[1]。随着人类疾病谱的变化，丹参作为能够预防和治疗人类面临的几大危险疾病的植物药之一，它的应用将会更加广泛。 近年来，丹参的临床疗效备受关注，因此，丹参有效成分的提取分离成为一个研究热点。随着提取分离技术的发展，研究丹参有效成分的手段呈现出多样化，如超临界流体萃取技术(supercritical fluid extraction，SFE)、微波辅助萃取法(microwave-assisted extraction，MAE)、加压液体萃取法(pressurized liquid extraction，PLE)、高速逆流色谱法(high-speed counter-current chromatography，HSCCC)和真空液相层析法(vacuum liquid chromatography，VLC)等。通过查阅国内外相关文献，本文对丹参有效成分的提取分离方法进行综述。 1 丹参有效成分的演变 20世纪30～60年代，丹参有效成分的研究重点为脂溶性成分。1979年姚俊严等从丹参中分离出原儿茶醛，从而把研究重点转移到水溶性成分。20世纪80年代后期至90年代，人们在分离丹参水溶性酚酸成分时，发现丹参的主要活性成分为水溶性酚酸。 丹参的化学成分复杂，其中包括①二萜醌类，如丹参酮I，IIA，IIB、异丹参酮I，II、隐丹参酮、异隐丹参酮、二氢丹参酮I、二氢异丹参酮I等; ②酚酸类，如丹酚酸A—K、原儿茶醛、丹参素、熊果酸、异阿魏酸等; ③其它成分，如黄芩苷、β-谷甾醇、胡萝卜苷、氨基酸、无机元素等。丹参有效成分通常被归为两大类：脂溶性成分和水溶
丹参素：分子式及相对分子量：C9H10O5，198.17 丹参素 英文名称：Danshensu Salvianic acid A 来源 丹参素临床应用的研究进展（齐齐哈尔医学院学报2004年第25卷第2期）丹参为唇形科鼠尾草属植物(Salvia miltiorrhiza Bge)的干燥根部。丹参素(Salvianic acid A)是丹参水溶性部位分离到的有效成分之一，即D(+)β-(3，4-二羟基苯基)乳酸。 物理性质 白色长针状结晶, 熔点84～86℃，密度1.546。在乙醇中测不出旋光度，FeCl3反应呈黄绿色。【分了式】：C9H10O5 【分子量】：162.14 【理化性质】：白色长针状结晶, 熔点（m.p.）84℃～86℃。其钠盐为白色针状结晶, 熔点（m.p.）255℃～258℃°, [α]20.5D+35°(水), [α]27.5D+14.8°(1mol/L HCl)。本品为棕黄色或淡黄色粉末，有引湿性，在水中易溶。 成分分类 酚性芳香酸类化合物 【规格】>70%;>90%;>98%，薄层鉴别只有一个斑点，为单一成份。 生产工艺流程 丹参药材，粉碎，加12 倍量水,浸泡过夜，煎煮两次, 每次2h。合并提取液，浓缩至密度1.3，加70%乙醇沉淀, 回收乙醇。用乙醚萃取两次, 水层用饱和食盐水盐析, 过滤盐析物, 滤液放置得到的白色沉淀物在水中重结晶得丹参素，含量约为98%。 药理药效 （百度百科+丹参素临床应用的研究进展（齐齐哈尔医学院学报-2004年2期））1 . 对心肌的作用: 丹参素具有缩小心肌梗死范围和减轻病程的作用, 同时对心肌缺血ö再灌注损伤具有保护作用。张力等报道丹参素为超氧阴离子清除剂, 从而推测其可保护心肌线粒体免受氧自由基引发的脂质过氧化物的损伤。苏晓华等研究表明, 丹参素对大鼠心肌线粒体ADP/O , RCR 及细胞色素氧化酶具有保护作用, 提示丹参素为良好的?OH 清除剂, 并对大鼠心肌线粒体膜具有保护作用。丹参素对外源性O2有清除作用，减轻自由基对线粒体膜流动的影响，起到保护线粒体的功能。 2. 抑制血小板聚集及抗凝作用: 丹参素能明显抑制血小板的聚集, 并明显增加血小板膜的流动性, 提示其对冠心病有效。史举彤等报道, 丹参素可提高红细胞的负电荷, 使彼此不易聚集; 降低全血粘度, 抑制血小板聚集, 缴活纤溶酶系统; 增加红细胞膜的机械强度, 减少红细胞的破坏。大剂量丹参素可增加血管脆性, 这可能与丹参素具有抗血小板聚集和促进纤维降解功能有关。丹参素可提高机体的纤溶活性，改善血液流变性、提高红细胞的变形能力和调解血液的粘滞度，改善全身各脏器(尤其是药物首先到达的心脏、肝脏、肺脏和胰腺)的微循环障碍，有助于机体组织的康复和成人呼吸窘迫综合征等严重并发症的纠正。
丹参总有效成分的提取 丹参又名赤参，紫丹参，红根等。为双子叶植物唇形科Labiatae鼠尾草属植物丹参Salvia miltiorrhiza Bge.的干燥根及根茎。主产于安徽、河南、陕西等地。功效：活血调经，祛瘀止痛，凉血消痈，清心除烦，养血安神。 根主含二萜醌类色素, 丹参酮（tanshinone）Ⅰ, ⅡA, ⅡB, 隐丹参酮（cryptotanshinone）, 异丹参酮（isotanshinones）Ⅰ, Ⅱ, 异隐丹参酮（１socryptotanshinone）, 丹参新酮（miltirone）, 丹参酸甲酯（methyl tanshinonate）, 羟基丹参酮ⅡA（hydroxytanshinone）, 二氢丹参酮Ⅰ（dihydrotanshinone I）, 丹参新醌甲、乙、丙, 次甲丹参醌（methylenetanshinquinone）和鼠尾草酚（salviol）．另报道含铁锈醇（ferruginol）、Δl-丹参新酮（Δl-dehydromiltirone）、Δl-丹参酮ⅡA （Δl-dehydrotanshinone IIA）、丹参新醌丁（danshenxinkun D）和1, 2二氢丹参醌等．除二萜醌类化合物外, 尚含原儿茶醛（protocatechuic aldehyde）、β-谷甾醇和D（＋）β-（３, ４一二羟基苯基）乳酸（即丹参素, 丹参酸甲）, 以及缩羧酸化合物（salvianolic acids）A, E等。 取丹参除杂，以粉碎机粉碎过20目筛。将丹参药粉装入提取罐中，加入体积比为20:1的95%的乙醇，进行蒸煮2h浸出。将浸出液输入到减压浓缩罐中，回收乙醇后将水溶液浓缩到小体积，成为稠浸膏状。加入浸膏量2倍的2％氢氧化钠水溶液，边加边搅拌、放置、沉淀完全后过滤。沉淀用蒸馏水洗到中性。在60℃以下烘干，粉碎成细粉，过60目筛即得成品。
丹参有效成分的分离与提取 【关键词】丹参；隐丹参酮；丹参酮IIA 丹参为唇形科多年生草本植物，丹参的干燥根及根茎，主产于四川、安徽、江苏及河南等省。春秋两季采挖，除去茎叶泥沙，须根晒干。其根茎短粗，顶端有残留茎基，根数条，长圆柱形，略弯曲，有的分枝并有须状细根，长10- 20 cm,直径0.3-1 cm,表面棕红色或暗棕红色，粗糙，具纵皱纹，老根外皮疏松，多显紫棕色，常呈鱗片状脱质硬而脆，断面疏松，有裂隙或略平整而致密，皮部棕红色，本部灰黄色或紫色，导管束黄白色，呈放射状排列，气微，味微苦涩。丹参有效成分主要有脂溶性非醌色素类化合物，如丹参酮IIA、丹参酮IIB、隐丹参酮及其异构体。水溶性酚酸类成分如原儿茶醛、丹参素。其中，隐丹参酮是抗菌的有效成分。 1材料与方法 1.1材料与试剂丹参粉末，乙醇，苯，氧化铝，丙酮。 1.2实验方法取丹参粉末，用乙醇热煮，煮沸15-20 min,用苯洗脱过滤，洗脱液经氧铝(I I I级)层析，再用苯洗脱，样品呈紫色样段，橙红色样段，暗红色样段，取橙红色样段经过苯洗脱，再用丙酮洗脱，呈板状结晶，为丹参酸甲脂，呈橙红色结晶，为隐丹参酮。将暗红色样段，氧化铝棒置容器中，经苯洗脱，再用丙酮洗脱，呈暗红色结晶，为丹参酮IIA。隐丹参酮与丹参酮IIA 为脂溶性成分，样品的甲醇提取液，回收溶剂至干，残渣溶于氯仿期滤，滤液加水振摇静止，取氯仿层浓缩至干，加氯仿显色。原儿茶醛、丹参素为水溶性成分，用荧光法鉴别。取本品粉末，置白瓷板上，于紫外灯(365 ram)下检视，呈灰色荧光，即原儿茶醛。薄层色谱法:样品水提液，浓缩后，以80%醇沉，用盐酸调值，pH 2,乙醚萃取，醚提取液挥去乙醚，用乙醇溶液，点于硅胶G(或H) —羧甲基纤维素钠薄层板上，先以苯一乙酸一乙甲酸(4 ：4 ：1)展开1 cm取出挥溶剂再以苯一乙酸乙酯一甲酸(80 ：50 ：8)展开，以三氯化铁一铁氰化钾(1 ： 1)试剂显色。 0. 2. 1指纹图谱参照高效液相色谱法（《中国药典》2000版1部VID)测定。系统适用性试验十八烷基硅烷键合硅胶为固定相，流速0.5mL/min，检测波长为281 nm,理论板数按原儿茶醛峰计算，应不低于5000,见表1、表2。 表 1 二元梯度洗脱参数表2特征峰相对保留时间表3特征峰标准相对峰面积 1.2.2对照品溶液的制备取原儿茶醛对照品适量，精密称定，加甲醇制成相当于每2 mL含原儿茶醛0.01 mg的溶液，摇匀，即得。 1.2.3供试品溶液的制备取含量测定项下供试品溶液。 1.2.4测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液10 mL，注入液相
丹参提取物 【产品名称】丹参提取物 【英文名称】Salvia miltiorrhiza P.E. 【拉丁名称】Salvia miltiorrhiza Bunge 【别名】赤参、紫丹参、亦参、木羊乳、逐马、山参、红根、紫党参、血根参、山红萝卜、山苏子根等 【提取来源】唇形科植物丹参Salvia Miltiorrhizae的干燥根及根茎提取加工而成。 【化学成分】含丹参酮Ⅰ、ⅡA、ⅡB（tanshinoneⅠ、ⅡA、ⅡB）异丹参酮Ⅰ、ⅡA（isotanshinoneⅠ、ⅡA）、隐丹参酮（cryptotanshinone）、异隐丹参酮（isocryptotanshin-one）、甲基丹参酮（methyItanshinone）、羟基丹参酮等。 【产品规格】10:1 【检测方法】TLC 【颜色性状】棕黄色粉末 【产品目数】100%通过80目筛 【功能主治】祛瘀止痛，活血通经，清心除烦。用于月经不调、经闭痛经、症瘕积聚、胸腹刺痛、热痹疼痛、疮疡肿痛、肝脾肿大、心绞痛。 【药理作用】 1.对冠状动脉作用：治疗冠心病，能改善冠状动脉循环，抑制血栓疾病发生。丹参素具有显著扩张冠状动脉，增加冠脉血流量，
降低心肌耗氧量，减慢心率和增加心肌收缩力的作用。 2.对心肌修复作用：丹参素及丹参酮IIA均能显著延长小鼠耐缺氧时间，减轻缺氧引起的心肌损伤，同时，改善心肌收缩力，促进心肌再生。 3.对微循环作用：丹参舒心胶囊能扩张动物微动脉，使毛细管网开放数量增多，加快血液流速、流量，从而改善微循环障碍。 4.对血液流变性作用：丹参素及丹参酮IIA有抑制ADP诱导血小板凝集、抑制血小板TXA2的合成与释放缩血管物质及促进纤维蛋白降解作用。可降低冠心病、脑缺血中风及心肌梗塞病人的全血和血浆粘度，减少红细胞压积，通过抗凝降粘的作用使患者血液流变学指标恢复正常。 5.对血脂的作用：丹参素可抑制内源性胆固醇的合成，降低氧化低密度脂蛋白（LDL）的生成，降低中性脂肪，可用于高脂血症引起的动脉粥样硬化。 6.抗感染，用于化脓性和外科感染（急性扁桃体炎，外耳道炎、骨髓炎、手术感染等）。 7.用于治疗宫颈糜烂。 【包装方式】25公斤/纸板桶或铝箔袋 【存储条件】本品应密封遮光，贮存在干燥、阴凉、通风良好的地方；有效期为两年。
丹七片中丹参素的HPLC测定 （作者:___________单位: ___________邮编: ___________） 【摘要】目的用HPLC法测定丹七片中丹参素的含量。方法HPLC用外标一点法，Diamonsil ODS1 C18柱，甲醇- 水－冰乙酸（8：91：1）为流动相，流速为1.0ml/min，λ=281nm。结果丹参素在0.0747～0.224mg/ml范围内呈良好线性,回归方程为Y=7033980.19X-34659.73，r=0.9999，平均加样回收率99.4%，RSD 为1.5%（n=6）。结论方法简便，准确，专属性强，测定结果重复性好，为丹七片中丹参素的定量分析提供了科学有效的方法。【关键词】丹七片丹参素HPLC 【Abstract】Objective To establish the method for detemining the content of Danshensu in Danqi Pian by HPLC.Methods Using Diamonsil ODS1 C18 Column, Methyl alcohol- wate- Acetic acid glacial（8：91：1）as the mobile phase,detection wavelength as 281nm and flow rate was 1.0ml/min.Results The calibration curve was linear at a range
of 0.0747mg/ml ～0.224mg/ml for the Danshensu and linear equation was Y=7033980.19X-34659.73，r=0.9999. The average recovery was 99.4% and the related standard deviation（RSD）was 1.5%（n=6）.Conclusion This method was simple and accurate and proper,which can be provide for scientific quantitative analysis method of Danshensu in Danqi Pian and the reduplication of the result was good. 【Key words】Danqi Pian；Danshensu；HPLC 丹七片收载于部颁药品标准中药成方制剂第一册中，功能主治：活血化瘀。用于血瘀气滞，心胸痹痛，眩晕头痛，经期腹痛［1］。处方由丹参、三七组成，原标准中只有鉴别查项，没有含量控制项。为了更好地控制丹七片的质量，提高丹七片的质量标准，笔者对丹七片处方进行了分析，处方中主药丹参是用水提取的，参考《中国药典》2005年版一部复方丹参滴丸质量标准［2］，进行本品中丹参素含量测定，并进行了方法学研究，控制药品质量。采用高效液相色谱法测定丹参素含量，方法简便快速，稳定可靠，专属性强。 1 仪器与试药 1.1 仪器高效液相谱仪：SPD—10A 日本岛津；紫外分光仪：上海康化生化仪器制造厂；超声波清洗器：SK3200H 上海科导超声仪器有限公司。 1.2 试药丹参素钠对照品（批号110805-200508，供含量测定用）由中国生物制品检定所提供；丹七片（批号：20070401、
Hans Journal of Chemical Engineering and Technology 化学工程与技术, 2016, 6(6), 134-138 Published Online November 2016 in Hans. https://www.doczj.com/doc/4213523587.html,/journal/hjcet https://www.doczj.com/doc/4213523587.html,/10.12677/hjcet.2016.66018 文章引用: 宋乃建. 丹参多糖提取工艺研究[J]. 化学工程与技术, 2016, 6(6): 134-138. Extraction of Polysaccharide in Root of Salvia miltiorrhiza Naijian Song College of Chemistry and Environment, Weinan Normal University, Weinan Shaanxi Received: Oct. 19th , 2016; accepted: Nov. 6th , 2016; published: Nov. 9th , 2016 Copyright ? 2016 by author and Hans Publishers Inc. This work is licensed under the Creative Commons Attribution International License (CC BY). https://www.doczj.com/doc/4213523587.html,/licenses/by/4.0/ Abstract The polysaccharide in root of Salvia miltiorrhiza was extracted with water with the aid of micro-wave. Through single factor experiment and orthogonal experiment, the optimal process parame-ters were obtained: microwave time 120 s, ratio of liquid to material 25:1, microwave power 350 W, microwave temperature 80?C. Under the optimal conditions, the extraction rate was 84.556 mg/g. Keywords Salvia miltiorrhiza , Polysaccharide, Extraction 丹参多糖提取工艺研究 宋乃建 渭南师范学院化学与环境学院，陕西 渭南 收稿日期：2016年10月19日；录用日期：2016年11月6日；发布日期：2016年11月9日 摘 要 以丹参为原料，水为提取剂，采用微波辅助法提取丹参多糖。通过控制单因素作用时间、功率、温度、液料比，再结合正交实验对提取丹参多糖的工艺条件进行优选，从而得出采用微波辅助法提取丹参的最 Open Access
收稿日期:2006209211; 修订日期:2007201219 作者简介:刘敏彦(19752),女(汉族),河北石家庄人,现任河北以岭医药研究院有限公司工程师,学士学位,主要从事中药新药的研发工作. 丹参不同提取方法中水溶性成分含量的比较研究 刘敏彦1 ,赵韶华1 ,盖潇桦1 ,王玉峰2 ,李向军1 ,秦 拢 1 (1.河北以岭医药研究院有限公司,河北石家庄 050035; 2.石家庄以岭药业股份有限公司,河北石家庄 050035) 摘要:目的研究不同提取方法提取的丹参药材中水溶性成分的含量。方法采用高效液相色谱法比较了煎煮、超声、索氏提取3种不同提取方法中丹酚酸B 、丹参素、原儿茶醛的含量。结果超声提取丹酚酸B 含量最高,索氏提取丹参素、原 儿茶醛含量最高。结论测定丹酚酸B 的含量宜采用超声法提取,而测定丹参素、原儿茶醛的含量则宜采用索氏提取法。 关键词:丹参; 提取方法; 丹酚酸B; 丹参素; 原儿茶醛中图分类号:R284.2 文献标识码:A 文章编号:100820805(2007)0521186201 Study on D eterm i n a ti on of W a ter -Soluble Acti ve Pr i n c i ples of Sa lvia M iltio rrh iza by D i f 2feren t Extracti on M ethod L I U M in 2yan 1 ,Z HAO S hao 2hua 1 ,G A I X iao 2hua 1 ,WANG Y u 2feng 2 ,L I X iang 2jun 1 ,Q I N L ong 1 (1.Hebei Yiling A cade m y of M ed ical L i m ited Co m pany,Sh ijiazhuang,050035,China;2.Sh ijiazhuang Yiling Phar m aceu tical L i m ited Co m pany,Shijiazhuang,050035,China ) Abstract:O bjecti ve To study on the deter m inati on ofW ater 2Soluble active p rinci p les of Salvia m iltiorrhiza by different extrac 2 ti on method .M ethods Adop ting HP LC t o deter m ine the content of Salvianolic acid B,danshensu,p r ot ocatchuic aldehyde in jianzhu extracti on,ultras onic extracti on,suoshi extracti on .Results It was evident that the content of Salvianolic acid B was the highest in ultras onic extracti on and the content of danshensu and p r ot ocatchuic aldehyde were the highest in suoshi extracti on .Conclusi on U ltras onic extracti on is available t o deter m ine the content of Salvianolic acid B and suoshi extracti on is available t o deter m ine the content of danshensu and p r ot ocatchuic aldehyde . Key words:Salvia m iltiorrhiza B eg .; Extracti on method; Salvianolic acid B; Danshensu; Pr ot ocatchuic aldehyde 丹参为唇形科植物丹参Salvia m iltiorrhiza Bge .的干燥根及根茎。其水溶性部分在化学成分、药理作用方面已被广泛研究[1] 。水溶性部分主要为酚酸类成分,具有抗心绞痛、增加冠脉血流量和对抗ADP 所致血小板凝集作用。故对丹参的不同提取方法中各成分含量进行了研究。1 仪器和材料 高效液相色谱仪W aters 1515;丹酚酸B (批号1115622200302)、丹参素钠(批号0855*******)、原儿茶醛(批号0813-9201)购于中国药品生物制品检定所;丹参药材(购自安国),实验中所用甲醇、乙腈均为色谱纯,其它试剂均为分析纯。2 方法与结果2.1 丹参药材的提取方法2.1.1 超声提取精密称取丹参粉末(60目)0.2g 两份,分别加水40m l,一份在常温下超声提取20m in,另一份在冰水浴中超声提取20m in,提取液离心,过滤,续滤液作为超声法供试品溶液1,2。2.1.2 煎煮提取取丹参药材约20g 两份,加水煎煮。1号样品加10倍量水加热提取3次,2h /次;2号样品加10倍量水加热提取2次,2h /次。均定容至500m l 。作为煎煮法供试品溶液1,2。2.1.3 索氏提取法精密称取丹参粉末(60目)1g4份,分别置索氏提取器中,分别加水100m l,加热回流提取4,8,12,16h,各份样品均定容至100m l 。作为索提法供试品1,2,3,4。2.2 对照品溶液的制备精密称取原儿茶醛对照品5.02mg,加 甲醇定容至10m l,摇匀,精密量取1m l,加水定容至100m l,摇匀,浓度为50.2μg/m l 。精密称取丹酚酸B 对照品2.58mg,加 甲醇定容至50m l,摇匀,浓度为51.6 μg/m l 。精密称取丹参素钠对照品2.46mg,加甲醇定容至100m l,摇匀,相当于丹参素的浓度21.66μg/m l 。2.3 含量测定方法2.3.1 色谱条件用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;流动相:乙腈21%冰乙酸(21∶79);检测波长为280n m,流速1.0m l/m in 。2.3.2 测定法将各组供试品溶液,用0.45μm 的微孔滤膜过滤,分别精密吸取对照品溶液20μl,供试品溶液10～20μl,注入液相色谱仪,测定即得。2.4 含量测定结果见表1。 表1 不同提取方法中丹参各成分含量测定结果 mg ?g -1 序号丹酚酸B 丹参素原儿茶醛超声法1号57.0264无峰无峰超声法2号56.2743无峰 无峰 煎煮法1号27.0271 5.51730.3863煎煮法2号27.7876 4.10540.3042索提法1号29.4025 5.05450.7511索提法2号22.87648.6956 1.1070索提法3号11.850114.5389 2.2242索提法4号 9.0231 16.0518 2.2028 3 小结 由以上实验结果可知:以超声法提取的丹参中丹酚酸B 的含量最高,并且由超声所造成的水温变化对丹酚酸B 的含量影响不大,但无丹参素及原儿茶醛的色谱峰;采用索氏提取法随着 ? 6811?时珍国医国药2007年第18卷第5期L I SH I ZHEN MED I C I N E AND MATER I A MED I CA RESEARCH 2007VOL.18NO.5
中药丹参的临床研究进展 方 芳＊ 王平珍＊ 邱 芸＊ 关键词：丹参；临床研究；进展 中图分类号：Ｒ２８５．６ 文献标识码：Ｂ 文章编号：１００６－０９７９（２０１２）１９－００８１－０２ 丹参味苦，性微寒，归心、肝经，具有祛瘀止痛、活血通经、清心除烦之功效。有资料显示，近年来对丹参的药理作用研究较多并取得一定的成果，主要用于治疗月经不调、经闭痛经、胸腹刺痛、热闭疼痛、心烦不眠、骨折内伤等症［１］，主要体现在以下方面。 １ 对心血管的保护作用 陶军［２］等利用家兔心肌缺血－再灌注模型，观察了缺血－再灌注后心肌２，４－亚甲二氧苯丙胺（ＭＤＡ）生成、超氧化物歧化物（ＳＯＤ）活性、血清肌酸激酶（ＣＫ）活性变化及丹参酮Ⅱ－Ａ对上述指标的影响。结果表明，缺血－再灌注心肌ＭＤＡ含量显著升高，ＳＯＤ活性明显下降，同时血清ＣＫ活性显著升高，缺血和再灌注模型给予丹参酮Ⅱ－Ａ（５ｍｇ／ｋｇ）能显著降低心肌中ＭＤＡ的生成和减少心肌ＣＫ的释放。用化学发光法显示丹参酮Ⅱ－Ａ对超氧阴离子、羟基自由基和过氧化氢有消除作用。由此推测消除氧自由基是丹参酮Ⅱ－Ａ防治心肌再灌注损伤的机制之一。同时梁勇［３］等研究表明，丹参在治疗小狗的心肌梗塞的实验中，其疗效与潘生丁相同；该实验亦说明丹参能有效缩小心肌梗塞的面积和降低心肌耗氧量的药理作用。钱卫民［４］等研究表明，丹参素对心肌Ｌ型钙通道电流具有明显的阻断作用，具有类似异搏停样Ｌ型钙通道阻断剂的作用。高贤均［５］报道，在具有钙通道阻滞剂（ＣＣＢ）作用的６万种中草药中，丹参与川芎、赤芍、当归等所具有的ＣＣＢ作用相当，成为心脑血管疾病的主要药物。 ２ 具有改善外周循环的作用 现代医学研究表明，丹参有改善外周血液循环、提高在常压和低压下机体的耐缺氧能力，加快微循环的血液流通和增加毛细血管网等作用，并能抑制凝血、激活纤溶。范瑞强［６］研究表明，丹参是通过影响脯氨酸和赖氨酸羟化酶的活性来抑制人体皮肤成纤维细胞合成胶原的，但不影响ＤＮＡ及非胶原蛋白的合成，丹参对胶原的合成的抑制率与剂量呈正相关。张志伟［７］等通过应用ＳＰＥＣＴ测定大鼠残肝有效血流量变化实验，其结果表明肝部分切除后残肝有效血流量下降（Ｐ＜０．０１），缺血组残肝有效血流量明显低于对照组（Ｐ＜０．０１），术后第７天仍低于术前水平（Ｐ＜０．０５）；丹参组残肝有效血流量明显高于缺血组，术后第７天达正常水平，其机制可能为丹参有效成分抑制血小板聚集、激活纤维酶系统增加红细胞机械强度，降低血液粘稠度，扩张微血管，加快血流速度，增加血流量，从而改善微循环。 ３ 消炎抗菌作用 张金茹［８］体外抑菌实验表明，丹参煎剂（１∶１）对金黄葡萄球菌、大肠杆菌、变形杆菌、伤寒杆菌抑菌作用，总丹参酮、隐丹参酮、丹参酮Ⅱ、丹参酸甲脂对金黄色葡萄球菌抗菌效果最强，丹参水煎剂（１∶３）的总丹参酮对某些皮肤真菌均有不同程度的抑制作用。李仪奎［９］认为丹参抗菌成分主要在二帖醌这个成分，包括隐丹参酮、丹参酮Ⅱａ、Ⅱｂ等。其体外抑菌试验表明［１９］：丹参抗感染作用机理在于对金黄色葡萄球及其耐药菌株、人型结核杆菌Ｈ３７ＲＶ有抑制作用。杜友成［１０］等研究了丹参的抗内毒素作用，静脉注射大肠杆菌制成感染性休克犬模型，发现丹参注射液治疗组休克犬存活时间延长，存活率高，认为丹参具有抗犬感染性休克的作用，在临床上对感染性休克患者应用丹参，可望提高成活率。其抗感染性休克的作用机理在 ＊抚州市第二医院（江西抚州３４４０００） ２０１２年８月２４日收稿 进一步的研究中被证实为丹参注射液具有抗犬感染性休克内毒素的作用。 ４ 抗消化性溃疡作用 张向荣［１１］等研究表明，丹参抗消化性溃疡的有效成分为水溶性部分丹酚酸类，机制为改善黏膜上皮增生和黏液的分泌，抑制迷走神经兴奋而降低胃运动，减少黏膜皱褶形成而减轻胃黏膜的损伤等。王国中等研究表明丹参有抗溃疡的作用，对模型组动物采用丹参治疗，则ＰＧＩ２的代谢产物６－ｋｅｔｏ－ＰＧＦＩα含量显著高于对照组（Ｐ＜０．０１），表明丹参抗溃疡的作用是通过ＰＧＩ２实现的ＰＧＩ２由毛细血管内皮细胞产生，可使毛细血管扩张增加十二指肠黏膜的血流量，为十二指肠粘膜细胞提供丰富的氧、氨基酸、糖等营养物质，合成更多的黏液，从而增强了黏液屏障作用。推测丹参还具有增强十二指肠黏膜细胞更新的作用，从而提高了十二指肠黏膜的防御能力。丹参的抗溃疡机制主要是增强十二指肠黏膜屏障的防御能力。 ５ 抗血栓形成的作用 白细胞与血栓的形成的关系很早就引起极大的关注。姜开余［１２］等考察丹参素对血小板、白细胞和血管内皮细胞表达各种细胞黏附分子的影响，丹参素对细胞因子活化内皮细胞有抑制作用，从而有利于保护血管内皮，减少白细胞的黏附。这可能是其发挥抗血栓形成的作用机制之一。斐文芬［１３］等有研究丹参酮Ⅱ－Ａ除对效应器官直接作用外，尚可通过抑制交感神经节细胞，使交感神经的紧张性降低而使这些神经所支配的血管平滑肌松弛，血管扩张。 ６ 对神经细胞的保护作用 张文生［１４］等以培养神经细胞缺糖缺氧损伤为模型，模拟脑缺氧的状态，诱导培养的ＳＨＳ Ｙ５Ｙ细胞凋亡的发生。随着缺糖缺氧损伤时间的延长，细胞内钙离子明显升高，细胞凋亡的发生也越来越多，坏死细胞也增多；丹参素能显著改善缺糖缺氧损伤所致的线粒体氧化磷酸化功能障碍，调节细胞能量代谢的作用，使ＬＤＨ的释放也越来越多、细胞钙离子的浓度水平、细胞凋亡及坏死的百分率均明显降低，这种作用可能与其抑制神经细胞内钙超载有关。何丽娜［１５］等实验发现丹参酮能抑制氧自由基损伤过量，对ＮＯ－氧自由基损伤途径同样发挥抑制作用。丹参酮对Ｃａ２＋的作用，导致Ｃａ２＋大量释放所致细胞死亡也表现出保护作用，ＮＭＤＡ受体激活后可引起受体型钙通道开放，刺激Ｃａ２＋内流，引起钙超载。同时激活诱导型一氧化合成酶产生ＮＯ，进一步损伤细胞。丹参酮对此类损伤模型的保护作用提示其作用机制可能与直接影响ＮＭＤＡ受体依赖性的钙通道有关。王军［１６］等以为丹参酮Ⅱ－Ａ可明显减轻凝闭大鼠一侧大脑中造成局灶性脑缺血２４ｈ后脑组织充血、水肿和缺血坏死，推测其是通过促进机体对氧自由基代谢、降低自由基水平发挥作用。 ７ 抗肿瘤作用 方杰［１７］在细胞水平观察丹参和丹参素对乳腺癌ＭＣＦ细胞株的杀伤作用以及血清成分的影响，研究表明在丹参素的影响下，肿瘤细胞可能因缺乏胆固醇来源而生长受抑制。 总之，在新的世纪里，具有我国传统文化和独特优势的中医药，面临着前所未有的发展机遇与挑战。随着社会的进步，人类的疾病谱已发生变化，医疗模式已由单纯的疾病治疗转变为预防、保健、治疗与康复相结合的模式。人类呼唤“回归大自然”的呼声越来越高，传统医药倍受青睐，随着全球经济一体化的进程加快，祖国医学融入国际市场的广度和深度在不断开 １ ８ ２０１２年第１９期
丹参提取物 概述： 【学名】中文学名：丹参， 第二学名：S. miltiorrhiza， 别名：赤参、紫丹参、亦参、木羊乳、逐马、山参、红根、紫党参、血根参、山红萝卜、山苏子根等 【产地】生于向阳山坡草丛、沟边、路旁或林边等地。全国大部分地区都有分布。【植物来源】唇形科植物丹参Salvia Miltiorrhizae的干燥根及根茎提取加工而成。 【植物形态】多年生草本，高30-100cm.全株密被淡黄色柔毛及腺毛。茎四棱形，具槽，上部分枝。叶对生，奇数羽状香叶；叶柄长1-7cm；小叶通常5，稀3或7片，顶端小叶最大，侧生小叶较小，小叶片卵圆形至宽宽卵圆形，长2-7cm，宽0.8-5cm，先端急尖或渐尖，基部斜圆形或宽楔形，边具圆锯齿，两面密被白色柔毛。轮伞花序组成顶生或腑生的总状花序，每轮有花3-10朵，下部者疏离，上部者密集；苞片披针形，上面无毛，下面略被毛；花萼近钟状，紫色；花冠二唇形，蓝紫色，长2-2.7cm，上唇直立，呈镰刀状，先端微裂，下唇较上唇短，先端裂，中央裂片较两侧裂片长且大；发育雄蕊，着生于下唇的中部，伸出花冠外，退化雄蕊，线形，着生于上唇喉部的两侧，花药退化成花瓣状；花盘前方稍膨大；子房上位，深裂，花柱细长，柱头裂，裂片不等。小坚果长圆形，熟时棕色或黑色，长约3.2cm，径1.5mm，包于宿萼中。花期5-9月，果期8-10月。 【性状及颜色】：“零”添加浅黄色粉剂 【成分含量】：丹参酸含量≥5%，高于国家标准 【特性】：易溶于水，抗氧化性强
【功效】：清除人体内的氧自由基，抑制脂质过氧化反应，提高人体免疫机能， 活血化瘀，通经活络，改善人体心脑血管动脉粥样硬化、心脏缺血、血管内皮增厚等症状，抗肝脏纤维化、抗肿瘤、抗衰老。 【核心优势】：“零”添加纯植物提取，最大限度的保留植物中抗氧化性的成分。【应用行业】：药厂，保健品厂。 【储存方法】：避光，避湿，避高温。 【包装方式】：复合膜真空包装 丹参提取物应用说明：人体的健康状态会直接反应出氧自由基在血液中的浓度值，想要保持健康的体魄，远离各种疾病，就必须把氧自由基在血液的浓度值降到最低水平，丹酚酸有对氧自由基的清楚（吞噬）行为已被大量的研究结果所证明。丹酚酸可缓解由瞬间脑部缺血引起的行为学障碍，对由此造成的学习忆功能障碍有明显的改善作用，并可抵抗脑缺血引起的能力障碍及脑水肿 制法：