羊肚菌原种配方筛选试验方案 一、羊肚菌的生物学特性 1、生态环境 羊肚菌发生地生态环境复杂多样，而且不同种类也有生态上的变化，羊肚菌与植被类型也极为复杂。多生长于阔叶林地上及路旁，单生或群生。还有部分生长在杨树林、果园、草地、河滩、榆树林、槐树林及上述林边的路旁河边。 2、土壤 羊肚菌是一种土生菌，菌丝分布在土壤中。大多羊肚菌发生在腐殖土、黑（黄）色壤土、沙泥混合土中。 3、发生时间 羊肚菌主要发生在两个季节：春末夏初和夏末秋初，这两个时段的典型特征是前后存在温差的变化，或先低后高，或先高后低。 4、温度 研究认为羊肚菌属低温型真菌，菌丝在3-28℃均能生长，生长最适温度为18-22℃，孢子萌发最适宜温度15-20℃，子实体生长最适宜温度为15-18℃。昼夜温差大，能促进子实体的形成。 5、水分和湿度 羊肚菌生长基质的含水量与一般食用菌相似，最适含水量为60%-65%，在子囊果生长地土壤的含水量在20%-30%为宜，子囊果只有在空气相对湿度为75%-95%的条件下才能正常生长。 6、光照和空气 羊肚菌菌丝和菌核生长阶段不需要光照。光线过强会抑制菌丝生长，菌丝在暗处或微光条件下生长很快。光照对子囊果的形成有一定的促进作用，太强或过弱不利于子囊果的生长发育。羊肚菌也是好氧真菌，足够的氧气和良好的通风场所是保证羊肚菌正常发育下的必要条件，菌丝生长阶段对空气无明显的要求，子囊果生长发育则对空气有较强的要求，CO2浓度不得超过0.3%。 7、PH 研究认为，羊肚菌生长的最适PH在6.5-7.5之间，趋于中性。
二、供试菌株 选取3种羊肚菌菌种作为供试菌株 三、母种的制作 1、母种培养基的制作 配方：马铃薯综合培养基（1L） 马铃薯200g+葡萄糖20g+琼脂20g+磷酸二氢钾3g+硫酸镁1.5g Note：马铃薯需挖去芽眼、削皮、切块加水煮30min左右用四层纱布过滤取滤液，称取其他原料一同置于锅中加热煮沸定容至一定的体积，分装 到试管或锥形瓶中置于高压灭菌锅过灭菌1h左右，灭完菌后待高压 锅压力降至0，取出培养基摆斜面或分装到无菌的培养皿中冷却接种。 2、母种的接种及培养 在超菌工作台上按照要求进行接种，接种后置于20℃的培养箱中避光培养三天即可长满培养皿表面，4-6天就可长出菌核。 四、原种的制作 1、配方选择 配方1 棉籽壳75%、木屑8%、麦麸12%、石灰1%、腐殖土4% 配方2 木屑75%、麸皮20%、磷肥1%、石膏1%和腐殖土3% 配方3 麦粒60%、谷壳20%、石膏1%、腐殖土19% 配方4 麦粒75%、土壤23%、石灰1%、过磷酸钙1% 配方5 棉籽壳30%、腐殖土30%、木屑40%、磷酸二氢钾0.2% 配方6 全麦粒100% 2、培养基制备 将配方 1 至配方8的基料按比例称好，加入适量的水，使含水量达60% 左右；用手握时，指缝间有水溢出，但不滴下；然后装入25 mm×250 mm 的试管，使装入量及松紧度一致。每个处理装10 支试管，高温、高压灭菌，置于暗处冷却备用。 3、注意事项
白僵菌 产品简介 白僵菌是一种半知菌类的虫生真菌，具有营养器官--菌丝和 繁殖器官--分生孢子，菌丝有横隔有分枝。白僵菌的分布范 围很广，从海拔几米至2000多米的高山均发现过白僵菌的存 在，白僵菌可以侵入6个目15科200多种昆虫、螨类的 虫体内大量繁殖，同时不断产生白僵素（大环脂类毒素） 和草酸钙结晶，这些物质可引起昆虫中毒，使体液发现机 能发生变化，打乱新陈代谢以致死亡。 白僵菌分类： 常见白僵菌共有三种：球孢白僵菌、小球孢白僵菌、卵孢白僵菌。球孢、小球孢、卵孢三种白僵病菌，其不同发育阶段，虽具有共同的形态特征，但也存在一定的差异。其区别是：球孢和小球孢白僵菌，分生孢子虽都为球形或卵形（约各50%），均生于对称成直角的茸状产孢细胞顶端，分生孢子梗呈直角分支聚成集团。所不同的是前者孢子大，一般2.5—3.0微米，菌落呈平绒状，在明胶培养基本逐渐从白色变到乳白色，而在马铃薯琼脂培养培养的底部无色或淡黄色。后者孢子较小，一般为2-2.5微米，菌落白色至乳白色初为疏茸状或棉絮状，后期形成乳粉状的孢子层，不使马铃薯琼脂培养基斜面变色，但在清淅明交培养基上呈粉红色，颜色很不显著，而且10天后便消失。卵孢白僵菌不同于前两种的主要特征，是其分生孢子大多是亚园形或椭圆形，而且分生孢子开差较大，一般为2.0-6.0×1.5-4微米，生于产孢细胞顶端新延伸的“乙”形丝形器上，菌落表面高低不同，白色，初为茸毛状或棉絮状，后期形成粉状，在明胶培养基的底部呈深红色至桑色，某些菌丝命名马铃薯培养基呈不同程度浅紫色至红色。 目前在农业部登记的白僵菌有两种： 一、白僵菌(beauveria)名称又为虫生真菌球孢白僵菌。是生物源杀虫剂。原药外观为乳白色粉末，制剂外观为乳黄色粉状物。 二、球孢白僵菌(beauveria bassiana)为植物源杀虫剂。本产品主要通过触杀作用，可以穿透昆虫体壁，在昆虫体内增殖，进而致死目标害虫。外观为土灰色条状。 所谓白僵虫就是白僵菌的分生孢子落在昆虫体上，在高温条件下，即可发芽直接侵入昆
球孢白僵菌 球孢白僵菌（B. bassiana）在分类 上属于半知菌亚门 （Deuteromycotina），丝孢纲 （Hyphomycetes），丛梗孢目 （Moniliales），丛梗孢科 （Moniliaceae），白僵菌属（Beauveria）。球孢白僵菌（B. bassiana）是国内外广泛用于害虫生物防治的杀虫真菌之一，被认为是最具开发潜力的一种昆虫病原真菌。 【产品功效】球孢白僵菌,属于链孢霉科。可寄生于60多种昆虫体上 .国内外研究人员利用球孢白僵菌防治玉米螟（Lewis, et al., 1996）、松毛虫（Alves, et al., 2002）、小蔗螟（Alves, et al., 2002）、盲椿（Leland, et al., 2006）、谷象（Vassilakos, et al., 2006）、柑桔红蜘蛛（Shi et al., 2006）和蚜虫（Ye, et al., 2005）等农林害虫。特别是对玉米螟和松毛虫的生物防治，在国内已作为常规手段连年使用。由于球孢白僵菌能有效地控制虫口数量，同时不伤害其他天敌昆虫和有益生物，完全符合有害生物综合治理的宗旨，同时由于其容易大量生产，防治成本较有竞争力，因而其具有广泛的应用前景。 【活性成分】白僵菌为真菌类杀虫制剂。白僵菌分球孢白僵菌(B．bassiana)。白僵菌分生孢子在寄主表皮或气孔、消化道上，遇适宜条件开始萌发，出生芽管。同时产生脂肪酶、蛋白酶、几丁质酶溶解昆虫的表皮，由芽管入侵虫体，在虫体内生长繁殖，消耗寄主体内养分，形成大量菌丝和孢子，布满虫体全身。同时产生各种毒素，如白僵素(Beauvericin)，卵孢白僵菌素(Tenellin)和卵孢子素(Oosporein)等。白僵素为含N-甲基氨基酸的环状肘。【性状】白僵素为针状无色晶体，加醋酸铅于水溶液中可产生絮状白色沉淀，对茚三酮显正反应。