第六章：吸光光度法
一、思考题：
1、解释下列名词
a.光吸收曲线及标准曲线；
b.互补色光及单色光；
c.吸光度及透射比。
解：a. (1)光吸收曲线指的是测量某种物质对不同波长单色光的吸收程度时，以波长为横坐标，吸光度为纵坐标作图得到的一条吸收光谱曲线。(2)标准曲线指的是在选择的实验条件下分别测量一系列不同含量的标准溶液的吸光度时，以标准溶液中待测组分的含量为横坐标，吸光度为纵坐标作图得到的一条直线。
b.(1)互补色光指的是两种相对应颜色的光，将它们按一定比例混合，可得到白光。(2)单色光指的是具有同一波长的光。
c.(1)吸光度指的是溶液对光的吸收程度，与溶液浓度、液层厚度及入射光波长等因素有关。(2)透射比指的是透射光强度与入射光强度的比值。
2、符合朗伯-比尔定律的某一吸光物质溶液，其最大吸收波长和吸光度随吸光物
质浓度的增大其变化情况如何？
解：最大吸收波长不变，吸光度增大。
3、吸光物质的摩尔吸收系数与下列哪些因素有关？入射光波长，被测物质的浓
度，络合物的解离度，掩蔽剂。
解：入射光波长、络合物的解离度和掩蔽剂。
4、试说明吸光光度法中标准曲线不通过原点的原因。
解：可能是由于参比溶液选择不当，吸收池厚度不等，吸收池位置不妥，吸收池透光面不清洁等原因所引起的。
5、在吸光光度法中，影响显色反应的因素有哪些？
解：溶液酸度、显色剂的用量、显色反应时间、显色反应温度、溶剂和干扰物质。
6、酸度对显色反应的影响主要表现在哪些方面？
解：影响显色剂的平衡浓度和颜色；影响被测金属离子的存在状态；影响络合物的组成。
7、在吸光光度法中，选择入射光波长的原则是什么？
解：吸收最大，干扰最小。
8、分光光度计是由哪些部件组成的？各部件的作用如何？
解：主要部件：光源、单色器、比色皿、检测器和显示装置。光源可以发射连续光谱，是产生入射光的基础；单色器是将光源发出的连续光谱分解为单色光的装置，提供单色光作为入射光；比色皿是盛放试液的容器；检测器的作用是接受从比色皿发出的透射光并转换成电信号进行测量；显示装置的作用是把放大的信号以吸光度A或透射比T的方式显示或记录下来。
9、测量吸光度时，应如何选择参比溶液？
解：（1）当试液及显色剂均无色时，可用蒸馏水作参比溶液；（2）显色剂为无色，而被测试液中存在其他有色离子，可用不加显色剂的被测试液作参比溶液；（3）显色剂有颜色，可选择不加试样溶液的试剂空白作参比溶液；（4）显色剂和试剂均有颜色，可将一份试液加入适当掩蔽剂，将被测组分掩蔽起来，使之不再与显色剂作用，而显色剂及其他试剂均按试液测定方法加入，以此作为参比溶液，这样就可以消除显色剂和一些共存组分的干扰；（5）改变加入试剂的顺序，使被测组分不发生显色反应，可以此溶液作为参比溶液消除干扰。
10 、示差吸光光度法的原理是什么？为什么它能提高测定的准确度？
解：（1）设用作参比的标准溶液为c0，待测试液浓度为c x，且c x大于c0。
根据朗伯-比尔定律得到：A x=εc x b和A0=εc0b ,
两式相减，得到相对吸光度为：A相对=?A=A x-A0=εb(c x-c0)=εb?c=εbc相对
由上式可得所测得的吸光度差与这两种溶液的浓度差成正比。以空白溶液作为参比，作?A-?c标准曲线，根据测得的?A求出相应的?c值，从c x=c0+?c可求出待测试液的浓度。
（2）与一般吸光光度法相比，采用示差法测定时，读数将落在测量误差较小的区域，从而提高了测定的准确度。
二、习题：
1、计算并绘制吸光度和透射比的关系标尺。
T
A 1lg
=解：
2、根据A=-lgT=K’c ，设K’=2.5?104,今有五个标准溶液，浓度c 分别为4.0?10-6, 8.0?10-6, 1.2?10-5, 1.6?10-5, 2.0?10-5 mol ?L -1,绘制以c 为横坐标、T 为纵坐标的c-T 关系曲线图。这样的曲线图能否作定量分析标准曲线用，为什么？
解：吸光度与吸光物质的含量成正比，这是光度法进行定量的基础，标准曲线就是根据这一原理制作的。当K’=2.5?104时，虽然A ∝ c, 但是T-c 关系呈指数关系，不好用作定量分析标准曲线用。
3、某试液用2 cm 比色皿测量时，T=60%，若改用1cm 或3 cm 比色皿，T 及A 等于多少？
%
461010
33
.0333.02
3222.03%
771010
11.0111.02
1222.0122.0222.0%60lg lg %,
60,2333
.031
3133111
.021
21221113
2
===≈=?
=?=====≈=?
=?==≈=-=-=∴==----A A T b b A A cm b T b b A A cm b T A T cm b 时，当时，当解：
4、某钢样含镍约0.12%，用丁二酮肟光度法（ε=1.3?104 L ?mol -1?cm -1）进行测定。试样溶解后，转入100 mL 容量瓶中，显色，并加入水稀释至刻度。取部分试液于波长470nm 处用1cm 比色皿进行测量。如要求此时的测量误差最小，
应称取试样多少克？
g
W M V b
A
m A Ni
Ni
s 16.0%
12.0693
.58100.0)1
103.1434
.0()(
434.04
=????=
??=
∴=ε小，
时，测量的相对误差最
解：
5、浓度为25.5μg/50mL 的Cu 2+溶液，用双环己酮草酰二腙光度法进行测定，于波长600nm 处用2cm 比色皿进行测量，测得T=50.5%，求摩尔吸收系数ε，灵敏度指数S 。
2
3
2
3
4
1
1
44
6
10
4.31043.310
85.1546.63108.110
85.1050
.0546.6310
5.252%5.50lg lg -------??≈??=?=
=
???≈?=???
-=-=
cm
g cm g M
S cm
mol
L bc
T μμε
ε解：
6、用一般吸光光度法测量0.00100 mol ?L -1锌标准溶液和含锌试液，分别测得A=0.700和A=1.000，两种溶液的透射比相差多少？如用0.00100 mol ?L -1标准溶液作参比溶液，试液的吸光度是多少？与示差吸光光度法相比较，读数标尺放大了多少倍？
5
10
1010
10300
.0700.0000.1%
0.10%0.10%0.2010
10
10
1010
000
.1300.0000
.1700
.02
1
210
1====-=-=?=-=-=-=-=?==
---------Ax
Ar x
r s x A A A
t T T A A A T T T I I T 解：
7、标准溶液以示差吸光光度法测定高锰酸钾溶液的浓度，以含锰10.0mg ?mL -1
的标准溶液作参比溶液，其对水的透射比为T=20%,并以此调节透射比为100%，此时测得未知浓度高锰酸钾溶液得透射比为T x =40.0%，计算高锰酸钾的质量浓度。
1
7.150.10699
.0097.1097.1398.0699.0398.0%0.40lg lg 699.0%0.20lg lg -?=?=
?=
=+=+==-=-==-=-=mL
mg C A A C A A A T A T A s s
x s x x s 样样样解：
8、Ti 和V 与H 2O 2作用生成有色络合物，今以50mL 1.06?10-3 mol ?L -1的钛溶液发色后定容为100 mL ；25 mL 6.28?10-3 mol ?L -1的钒溶液发色后定容为100
mL 。另取20.0 mL 含Ti 和V 的未知混合液经以上相同方法发色。这三份溶液各用厚度为1 cm 的吸收池在415nm 及455nm 处测得吸光度值如下：求未Ti 0.435 0.246 V 0.251 0.377
1
3
3
1
3
41
3
1
4
455
455
4554154154151
134551
1
4455
1
134151
1
4
415
1
3
31
4
3
10
35.60
.200
.10010
27.11070.20.200.1001039.51027.11039.51.2402.464555.09.1598.820645.0,1.24010
57.11377.02.46410
30.51246.04559.15910
57.11251.08.82010
30.51435.041510
57.1100
2510
28.61030.5100501006.1----------------------------??=?
?=??=??=??=??=+=+=+=+=??=??=
=
??=??===??=??=
=
??=??===??=?
?=??=??=L
mol C L
mol C L
mol C L
mol C C C C C C C A C C A C C V Ti cm
mol
L bc
A cm mol L bc A nm cm
mol
L bc A cm mol L bc A nm L
mol C L
mol C v Ti v Ti v Ti v Ti v v Ti Ti v v Ti Ti v Ti v
Ti v
Ti v Ti ‘‘
则原溶液中解得
得
则据
和的浓度为和设未知液中
时，时，解：在标准溶液中，εεεεεελεελ
9、测定纯金属钴中微量锰时，在酸性溶液中用KIO 4将锰氧化为MnO 4-后进行光度测定。若用标准锰溶液配制标准系列，在绘制标准曲线及测定试样时，应
该用什么参比溶液？
解：因为Mn 2+是无色的，绘制标准曲线可以用蒸馏水作参比。测样品时，因为Co 2+呈浅红色，所以可以选用试样溶液作参比。 10、NO 2-在波长355nm 处ε355=23.3 L ?mol -1?cm -1，ε355/ε302=2.50；NO 3-在波长355nm 处的吸收可忽略，在波长302nm 处ε302=7.24 L ?mol -1?cm -1。今有一含NO 2-和NO 3-的试液，用1cm 吸收池测得A 302=1.010，A 355=0.730。计算试液中NO 2-和NO 3-的浓度。
1
1
3553553553023023021
1
355
302
0992.00313.00
13.23730.0124.7132.9010.132.950
.23.2350
.23
2
2
3
2
3
32
23322
2
2
----?=?=+??=??+??=??+??=??+??=?==
=
----
---
---
-
----L
mol C L
mol C C C C C b C b A C b C b A cm
mol
L NO NO NO NO NO NO NO
NO NO
NO NO NO NO NO
NO
解得
得
据公式解：
εεε
ε
εε
1
5
1
5
3
1
1
3
6.1321
10
54.7%0010.010001%
0010.010********.72105.2%0.42lg lg 105.2%0.422510%0010.011------?=????=
??=
??=???=-=-???=mol
g CV
M L L
mol C C bc
T cm mol L cm nm 水中，在解：尔质量。
。求此有色络合物的摩
。已知为比色皿测得透射比
处，用的水溶液在、某有色络合物的
εε
1
54
4
1
4
4
21
1
4
10
7.6)
101.1(1100.1434.0434.010
1.11100.1%0.8lg lg 100.1%0.8151212-----+
--??=-????=?=?=??=???=-=-???=L
mol C C C
b A A L
mol C C bc
T Pb
cm mol L cm nm 测得所以，
时，相对标准偏差最小因为解：小？
测量得相对标准偏差最使浓度
标准作参比溶液，才能
问需多大浓度得示差法测定上述溶液，。若改用
。已知比为以水作参比，测得透射比色皿，
处，用法测定其含铅试液，于、采用双硫腙吸光光度εεε
10
.52
27
.593.42
27.500.5760
.0311.0311.0070.0lg 93
.400.5051
.0700.0700.046.1lg
1]
[][lg
311.0,
700.000.5760
.0070
.0051.046.100.900.1100.900.1102.1610450450610132
1
2
1450610450
6101
3
=+=
+=
=+---==+---===+---===??=-
---
a a a
a a a In HIn a
pK pK pK
pK
pK pK pH HIn In pH A A A A pK pH A A pH A A pH cm pH L mol c nm nm In nm nm HIn 则则。时，理论变色点
当，
解：据。
点。求指示剂的理论变色，在相同条件下测得
调至，将其现有该指示剂的稀溶液：
比色皿测量吸光度如下的缓冲溶液中，用
和的溶液，分别在
该指示剂处稍有吸收。今配制处有最大吸收，在
）在吸收。其碱式（
处稍有
处有最大吸收，在
）在（、某酸碱指示剂得酸式
1
1
5
1
54
1
1
4
4382296671
:16671
105.70500.0105.71100.1750.0)100.1229750.0380110500.01:114-------?=-=-==?=??=
=
??=???==???==mol
g M
M
M
mol
g CV
m M
L
mol C C bc
A cm
mol L M
nm cm L g 苦味酸
苦味酸胺
有机胺
苦味酸胺
苦味酸
有机胺：苦味酸则解得解：。
，（已知
，求有机胺的摩尔质量处测得吸光度为
大的吸收波长的比色皿，在最溶液，以制成某加合物，溶于乙醇中现称取的苦味酸胺的加合物，
质量，常将其转变为、为测定有机胺的摩尔 εε
g
x x L
mol b
A
C A cm mol
L cm nm mL MnO
72.09
.54100.01097.1%15.010
97.11
102.2434.0434.0102.21525100,%15154
1
4
3
1
1
3
4
=???=???=??=
=∴=???=------解得则据
小，时，测量的相对误差最解：多少克？
差为最小，应称取试样
若希望仪器测量相对误
。
比色皿进行测定，
处用用吸光光度法于
容量瓶中定容，
于，溶解后锰全部转化为
、某钢样含锰约εε
2
.11lg 10
54.1)
10
21.121096.2)(10
21.110
48.1(10
21.110
21.110
48.1390
.0320.0][][])
[2])([(]
[]
][[][2:1lg 2:1,390.0320.0,10
96.2,10
48.11611
2
5
5
5
5
5
1
5
5
max
2max 22
2222
2max 1
5
1
5
2=?=??-??-??=
∴??=??=
?==
--=
=∴==????-------------+
稳稳稳稳又络合比为解：值为多少？，其络合比为，外推法得到
收度用等摩尔法测得最大吸
某显色剂的总浓度为
的总浓度为、已知K K L
mol C A A
ML A A C ML ML C ML C ML L M ML K K A A L mol L mol ZrO M M
L M
1
5
4
1
1
4
10
0.61
101.1434.008.0lg lg lg 434.0,
101.1,08.017----??=??--=
?--=
∴--=-=?=?∴=????==L
mol b
A
T C bC T bC bC C b A A cm
mol
L T εεεεεε参比参比参比小。
时，测量的相对误差最
解：度为多少？
差最小，参比溶液得浓
液，要使测量的相对误
若用示差法测定上述溶
已知白作参比测得
、某有色溶液以试剂空
10
25
24
2)
(1
5
3
11
22
1122111
4
10
06.3)10
75.1(]][[10
75.1996
.5110909.0909.000.2440
.0200.030440.00.10)(00.2200.054000.12500.1030184---
+
-----?=?==??=?=
?=?=
?====?CrO
Ba K L
mol C L
mg C A A C bC A bC A K C A mL VI L mg nm cm mL mL C BaCrO
BaCrO
sp sp 得解：据。
铬酸钡的溶度积时
。试计算同样发色后，测得标准液的铬已知。
波长下，测得吸光度为
比色皿于容，用以二苯胺基脲显色并定
中比色管中，在酸性介质
于，吸取上层清液
水浴中，让其充分平衡的恒温
与水在量得法测定铬酸钡时，加过、利用二苯胺基脲比色εε
%
7.2%10032
.0ln 32.001.0ln 32.010
10lg lg %75%251,10
0.401.0%25545100.119%
75lg 10
0.110
0.4lg 21
21
211
3
41
3
43
311
2
=?=
=
===∴=
=-=??±??????------T
T dT
E T C C T T T L mol KMnO nm L mol KMnO r T C C
又解：结果的相对误差。
测定
时的浓度为，数误差为计算当仪器透射比的读的入射光，
波长下的时，吸收了的浓度为、
20、图6-18为X 和Y 两种吸光物质的吸收曲线，今采用双波长吸光光度法对它们进行分别测定。试用作图法选择参比波长及测量波长，并说明其理由。 解：
（1） 测量X 时，Y 可视为干扰物质。则选择λ1作为测量波长，λ2作为参比
波长，因为λ1和λ2两处Y 的吸光度相等，可以用以消除Y 对X 的干扰。 （2） 测量Y 时，X 可视为干扰物质。则选择λ3作为测量波长，λ4作为参比
波长，因为λ3和λ4两处X的吸光度相等，可以用以消除X对Y的干扰。
第九章 吸光光度法 1.与化学分析法相比，吸光光度法的主要特点是什么？ 答：①灵敏度高 ②仪器设备简单，操作简便，快速 ③ 准确度较高 ④ 应用广泛 2.何谓复合光、单色光、可见光和互补色光？白光与复合光有何区别？ 答：⑴复合光指由不同单色光组成的光； 单色光指其处于某一波长的光； 可见光指人的眼睛所能感觉到的波长范围为400-750 nm 的电磁波； 将两种适当颜色的光按照一定的强度比例混合若可形成白光，它们称为互补色光； ⑵ 白光是是一种特殊的复合光，它是将各种不同颜色的光按一定的强度比例混合而成有复合光。 3.简述朗伯-比尔定律成立的前提条件及物理意义，写出其数学表达式。 答：确定前提为：①入射光为平行单色光且垂直照射；② 吸光物质为均匀非散射体系；③吸光质点之间无相互作用；④辐射与物质之间的作用仅限于光吸收过程，无荧光和光化学现象发生。 其物理意义如下：当一束单色光垂直通过某一均匀非散射的吸光物质时，其吸光度A 与吸光物质的浓度c 及吸收层厚度 b 成正比。 其数学表达式为： Kbc T I I A t ===1 lg lg 0 4.摩尔吸收系数κ在光度分析中有什么意义？如何求出κ值？κ值受什么因素的影响？ 答：⑴摩尔吸光系数κ在光度分析中的意义：当吸光物质的浓度为1mol/L 和吸收层厚度为 1cm 时，吸光物质对某波长光的吸光度。 (2)在吸光物质的浓度适宜低时，测其吸光度A ，然后根据bc A = κ计算而求得。 (3) κ值受入射光的波长，吸光物质的性质、溶剂、温度、溶液的组成、仪器灵敏度等因素的影响。 5.何谓吸光度和透射比，两者的关系如何？ 答：吸光度A 是指入射光强度I 0与透射光强度I t 的比值的对数值。 透射比T 是指透射光强度I t 与入射光强度I 0的比值。 两者的关系如下：T I I A t 1lg lg 0== 6.在光度法测定中引起偏离朗伯-比尔定律的主要因素有那些？如何消除这些因素的影响？ 答：⑴物理因素：①非单色光引起的偏离 ②非平行入射光引起的偏离 ③ 介质不均匀引起的偏离。 ⑵化学因素：①溶液浓度过高引起的偏离 ② 化学反应引起的偏离。 消除这些影响的方法：采用性能较好的单色器 采用平行光束进行入射，改造吸光物质使之为均匀非散射体系，在稀溶液进行，控制解离度不变，加入过量的显色剂并保持溶液中游离显色剂的浓度恒定。 7.分光光度计的主要部件有哪些？各部件的作用是什么？ 答：分光光度计的主要部件有：光源、单色器、吸收池、检测系统、信号显示系统。 光源能提供具有足够发射强度、稳定且波长连续变化的复合光。 单色器的作用是从光源发出的复合光中分出所需要的单色光。
吸光光度法课后练习题及参考答案 一、选择题 1．所谓可见光区，所指的波长范围是（B ） （A）200~400nm （B）400~750nm （C）750~1000nm （D）100~200nm 2.一束（B ）通过有色溶液时，溶液的吸光度与溶液浓度和液层厚度的乘积成正比。 （A）平行可见光（B）平行单色光（C）白光（D）紫外光 3．下列说法正确的是（A ） （A）朗伯-比尔定律，浓度c与吸光度A之间的关系是一条通过原点的直线（B）朗伯-比尔定律成立的条件是稀溶液，与是否单色光无关 （C）最大吸收波长λmax是指物质能对光产生吸收所对应的最大波长 @ （D）同一物质在不同波长处吸光系数不同，不同物质在同一波长处的吸光系数相同 4．符合比耳定律的有色溶液稀释时，其最大的吸收峰的波长位置（C ） （A）向长波方向移动（B）向短波方向移动 （C）不移动，但峰高降低（D）无任何变化 5．标准工作曲线不过原点的可能的原因是（D ） （A）显色反应得酸度控制不当（B）显色剂得浓度过高 （C）吸收波长选择不当（D）参比溶液选择不当 6．某物质摩尔吸光系数很大，则表明（A ） （A）该物质对某波长光的吸光能力很强 （B）该物质浓度很大 / （C）测定该物质的精密度很高 （D）测量该物质产生的吸光度很大 7．吸光性物质的摩尔吸光系数与下列(D )因素有关 （A）比色皿厚度（B）该物质浓度 （C）吸收池材料（D）入射光波长
8．已知KMnO4的相对分子质量为，κ545nm=×103，今在545nm处用浓度为% KMnO4溶液，比色皿测得透射比为（A ） （A）15% （B）83% （C）25% （D）53% 9．有AB两份不同浓度的有色溶液，A溶液用吸收池，B溶液用吸收池，在同一波长下测得的吸光度值相等，则它们的浓度关系为(D ) （A）A是B的1/3 （B）A等于B （C）B是A的3倍（D）B是A的1/3 : 10．某有色溶液，当用1cm吸收池时，其透射比为T，若改用2cm吸收池，则透射比应为（D ） （A）2T （B）2lgT （C）T1/2 （D）T2 11．用常规分光光度法测得标准溶液的透射率为20％，试液的透射率为10％，若以示差分光光度法测定试液，以标准溶液为参比，则试液的透过率为（C ）（A）20% （B）40% （C）50% （D）80% 12．用分光光度计测量有色化合物，浓度相对标准偏差最小时的吸光度为（D ）（A）（B）（C）（D） 13．在分光光度测定中，如试样溶液有色，显色剂本身无色，溶液中除被测离子外，其它共存离子与显色剂不生色，此时应选（B ）为参比。 （A）溶剂空白（B）试液空白（C）试剂空白（D）褪色参比 14．用邻菲罗啉法测定锅炉水中的铁，pH需控制在4~6之间，通常选择（D ）缓冲溶液较合适。 （A）邻苯二甲酸氢钾（B）NH3—NH4Cl （C）NaHCO3—Na2CO3（D）HAc—Na Ac — 15．下述操作中正确的是（C ） （A）比色皿外壁有水珠（B）手捏比色皿的磨光面 （C）手捏比色皿的毛面（D）用报纸去擦比色皿外壁的水 二、填空题 1．在可见光区，物质的颜色是由（透射光的波长）决定的。已知姿色和绿色是一对互补色光，则KMNO4溶液吸收的是（绿）色光。
第十章 吸光光度法 1.与化学分析法相比，吸光光度法的主要特点是什么？ 答：①灵敏度高 ②仪器设备简单,操作简便,快速. ③ 准确度较高 ④ 应用广泛 。 2.何谓复合光、单色光、可见光和互补色光？白光与复合光有何区别？ 答：⑴复合光指由不同单色光组成的光; 单色光指其处于某一波长的光; 可见光指人的眼睛所能感觉到的波长范围为400-750 nm 的电磁波; 将两种适当颜色的光按照一定的强度比例混合就可形成复合光,它们称为互补色光; ⑵ 白光是是一种特殊的复合光，它是将将各种小组长的光按一定的强度比例混合而成。 3.简述朗伯-比尔定律成立的前提条件及物理意义，写出其数学表达式。 答：确定前提为：①入射光为平行单色光且垂直照射;② 吸光物质为均匀非散射体系;③吸光质点之间无相互作用;④辐射与物质之间的作用仅限于光吸收过程,无荧光和化学现象发生。 其物理意义如下：当一束单色光垂直通过某一均匀非散射的吸光物质时,其吸光度A 与物质的浓度c 及吸收层厚度 b 成正比。 其数学表达式为： Kbc T I I A t ===1lg lg 0 4.摩尔吸收系数κ在光度分析中有什么意义？如何求出κ值？κ值受什么因素的影响？ 答：⑴摩尔吸光系数κ在光度分析中的意义：当吸光物质的浓度为1mol/L 和吸收层厚度为 1cm 时，吸光物质对某波长光的吸光度。 (2)在适宜的低浓度时，测其吸光度A ，然后根据bc A =κ计算而求得。 (3) κ值受入射光的波长，吸光物质的性质、溶剂、温度、溶液的组成、仪器灵敏度等因素的影响。 5.何谓吸光度和透射比，两者的关系如何？ 答：吸光度A 是指入射光强度与透射光强度的比值的对数值。 透射比T 是指透射光强度I t 与入射光强度I 0的比值。 两者的关系如下：T I I A t 1lg lg 0== 6.在光度法测定中引起偏离朗伯-比尔定律的主要因素有那些？如何消除这些因素的影响？ 答：⑴物理因素：①非单色光引起的偏离 ②非平行入射光引起的偏离 ③ 介质不均匀引起的偏离。 ⑵化学因素：①溶液浓度过高引起的偏离 ② 化学反应引起的偏离。 消除这些影响的方法：采用性能较好的单色器 采用平行光束进行入射，吸光物质为均匀非散射体系，溶液较稀，控制解离度不变，加入过量的显色剂并保持溶液中游离显色剂的浓度恒定。 7.分光光度计的主要部件有哪些？各部件的作用是什么？ 答：分光光度计的主要部件有：光源、单色器、吸收池、检测系统、信号显示系统。 光源能提供具有足够发射强度、稳定且波长连续变化的复合光。 单色器的作用是从光源发出的复合光中分出所需要的单色光。 吸收池是用于盛装参比溶液、试样溶液的器皿。
紫外-可见分光光度法 一、单项选择题 1．可见光的波长范围是 A、760~1000nm B、400~760nm C、200~400nm D、小于400nm E、大于760nm 2．下列关于光波的叙述，正确的是 A、只具有波动性 B、只具有粒子性 C、具有波粒二象性 D、其能量大小于波长成正比 E、传播速度与介质无关 3．两种是互补色关系的单色光，按一定的强度比例混合可成为 A、白光 B、红色光 C、黄色光 D、蓝色光 E、紫色光 4．测定Fe3+含量时，加入KSCN显色剂，生成的配合物是红色的，则此配合物吸收了白光中的 A、红光 B、绿光 C、紫光 D、蓝光 E、青光 5．紫外-可见分光光度计的波长范围是 A、200~1000nm B、400~760nm C、1000nm 以上 D、200~760nm E、200nm以下 6．紫外-可见分光光度法测定的灵敏度高，准确度好，一般其相对误差在 A、不超过±％ B、1%~5% C、5%~20%
D 、5%~10% E 、%~1% 7．在分光光度分析中，透过光强度（I t ）与入射光强度（I 0）之比，即I t / I 0称 为 A 、吸光度 B 、透光率 C 、吸光系数 D 、光密度 E 、 消光度 8．当入射光的强度（I 0）一定时，溶液吸收光的强度（I a ）越小，则溶液透过光的 强度（I t ） A 、越大 B 、越小 C 、保持不变 D 、等于0 E 、以 上都不正确 9．朗伯-比尔定律，即光的吸收定律，表述了光的吸光度与 A 、溶液浓度的关系 B 、溶液液层厚度的关系 C 、波长的关系 D 、溶液的浓度与液层厚度的关系 E 、溶液温度的关系 10．符合光的吸收定律的物质，与吸光系数无关的因素是 A 、入射光的波长 B 、吸光物质的性质 C 、溶 液的温度 D 、溶剂的性质 E 、在稀溶液条件下，溶液的浓度 11．在吸收光谱曲线上，如果其他条件都不变，只改变溶液的浓度，则最大吸收波长的位置和峰的 高度将 A 、峰位向长波方向移动，逢高增加 B 、峰位向短波方向移 动，峰高增加
第七章分光光度法 分光光度法是基于物质对光的选择性吸收而建立起来的分析方法。（在选定波长下，被测定溶液对光的吸收程度与溶液中吸光组分的浓度有简单的定量关系）。根据被利用的光波长范围可分为可见、紫外、红外光谱法。利用可见光进行分光光度分析时，通常将被测定组分通过化学反应转变成有色化合物，然后进行吸光度的测量。因此分光光度法在一定意义上使用着比色法，吸光光度法等名词，本章重点讨论可见分光光度法。 一、分光光度法 （一）光的基本性质 光是电磁波。其波长范围很广，如果以波长或频率为序排列可得到如下电磁波谱图。 光谱名称波长范围跃迁类型分析方法 X—射线远紫外光近紫外光可见光近紫外光中红外光远红外光微波 无线电波0.1—10nm 10—200nm 200—400nm 400—760nm 0.76—2.5μm 2.5—5.0μm 500—1000μm 0.1—100cm 1—1000m K.L层电子 中层电子 价电子 分子振动 分子振动和低位 转动 分子振动 X—射线光谱法 真空紫外光度法 紫外可见光度法 比色可见光度法 近红外光谱法 中红外光谱法 远红外光谱法 微波光谱法 核磁共振光谱法 光有微粒二象性，波动性是指光按波的形式传播。如光的折射、衍射、偏振和干涉等，光的波长λ，频率γ与速度c的关系为： λγ = c 式中λ以cm表示，γ以Hz表示，c为光速2.7979×1010cm/s（真空中） 光同时又具有粒子性，如电效应就明显地表现其粒子性。 光是由“光微粒子”（光量子或光子）组成的，光量子的能量可表示为 γh E=h为普朗克常数6.6262×10-34J.S 可见上式把光的波粒两相性用h统一起来了。 结论：不同波长（或频率）的光，其能量不同，短波的能量大，长波的能量小。（二）物质对光的吸收 吸收光谱有原子吸收光谱和分子吸收光谱。 原子吸收光谱是由原子外层电子选择性地吸收某些波长的电磁波而引起的。原子吸收分光光度法就是根据原子的这种性质所引起来的。分子吸收光谱比较复杂。这是由分子结构的复杂性引起的，在同一电子能级中有几个振动能级，而在同一振动能级中又有几个转动能级，电子能级之间的能量差一般为1~20电子伏特。因此，电子能级跃迁而产生的吸收光谱，位于紫外-可见光部分。这种又价电子跃迁而产生的分光光谱称为电子光谱。 在电子能级变化时，不可避免地也伴随着分子振动和转动能级的变化，因此，分子的电子光谱通常比原子的线状光谱复杂的多，呈带状光谱。如果用近红外线
第十章吸光光度法 9.1 0.088 mg Fe3+．用硫氰酸盐显色后，在容量瓶中用水稀释到50 mL，用1 cm 比色皿，在波长480 nm处测得A＝0.740。求吸收系数α及κ。 9.2 用双硫腙光度法测定Pb2+，Pb2+的浓度为0.08mg/50mL，用2cm比色皿在520nm下测得T＝53%，求κ。 9.3 用磺基水杨酸法测定微量铁。标准溶液是由0.2160gNH4Fe(SO4)2·12H2O溶于水中稀释至500mL配制成的。根据下列数据，绘制标准曲线。 标准铁溶液的体积V /mL 0.0 2.0 4.0 6.0 8.0 10.0 吸光度0.0 0.165 0.320 0.480 0.630 0.790 某试液5.00 mL，稀释至250 mL。取此稀释液2.00 mL，与绘制标准曲线相同条件下显色和测定吸光度。测得A＝0.500。求试液铁含量(单位：mg/mL)。铁铵矾的相对分子质量为482.178。
9.4 取钢试样1.0 g，溶解于酸中，将其中锰氧化成高锰酸盐，准确配制成250mL，测得其吸光度为1.00×10–3 mol·L－1 KMnO4溶液的吸光度的1.5倍。计算钢中锰的百分含量。
9.5 用普通光度法测定铜。在相同条件下测得1.00×10-2 mol·L-1标准铜溶液和含铜试液的吸光度分别为0.699和1.00。如光度计透光度读数的相对误差为0.5％，测试液浓度测定的相对误差为多少？如采用示差法测定，用铜标准液为参比，测试液的吸光度为多少？浓度测定的相对误差为多少？两种测定方法中标准溶液与试液的透光度各差多少？示差法使读书标尺放大了多少倍？
第七章吸光光度法 一、选择题 1．所谓可见光区，所指的波长范围是（B ） （A）200~400nm （B）400~750nm （C）750~1000nm （D）100~200nm 2.一束（ B ）通过有色溶液时，溶液的吸光度与溶液浓度和液层厚度的乘积成正比。（A）平行可见光（B）平行单色光（C）白光（D）紫外光 3．下列说法正确的是（ A ） （A）朗伯-比尔定律，浓度c与吸光度A之间的关系是一条通过原点的直线 （B）朗伯-比尔定律成立的条件是稀溶液，与是否单色光无关 （C）最大吸收波长λmax是指物质能对光产生吸收所对应的最大波长 （D）同一物质在不同波长处吸光系数不同，不同物质在同一波长处的吸光系数相同4．符合比耳定律的有色溶液稀释时，其最大的吸收峰的波长位置（C ） （A）向长波方向移动（B）向短波方向移动 （C）不移动，但峰高降低（D）无任何变化 5．标准工作曲线不过原点的可能的原因是（ D ） （A）显色反应得酸度控制不当（B）显色剂得浓度过高 （C）吸收波长选择不当（D）参比溶液选择不当 6．某物质摩尔吸光系数很大，则表明（ A ） （A）该物质对某波长光的吸光能力很强 （B）该物质浓度很大 （C）测定该物质的精密度很高 （D）测量该物质产生的吸光度很大
7．吸光性物质的摩尔吸光系数与下列( D )因素有关 （A）比色皿厚度（B）该物质浓度 （C）吸收池材料（D）入射光波长 8．已知KMnO4的相对分子质量为158.04，κ545nm=2.2×103，今在545nm处用浓度为0.0020%KMnO4溶液，3.00cm比色皿测得透射比为（ A ） （A）15% （B）83% （C）25% （D）53% 9．有AB两份不同浓度的有色溶液，A溶液用1.0cm吸收池，B溶液用3.0cm吸收池，在同一波长下测得的吸光度值相等，则它们的浓度关系为( D ) （A）A是B的1/3 （B）A等于B （C）B是A的3倍（D）B是A的1/3 10．某有色溶液，当用1cm吸收池时，其透射比为T，若改用2cm吸收池，则透射比应为（ D ） （A）2T （B）2lgT （C）T 1/2 （D）T2 11．用常规分光光度法测得标准溶液的透射率为20％，试液的透射率为10％，若以示差分光光度法测定试液，以标准溶液为参比，则试液的透过率为（ C ） （A）20% （B）40% （C）50% （D）80% 12．用分光光度计测量有色化合物，浓度相对标准偏差最小时的吸光度为（ D ） （A）0.368 （B）0.334 （C）0.443 （D）0.434 13．在分光光度测定中，如试样溶液有色，显色剂本身无色，溶液中除被测离子外，其它共存离子与显色剂不生色，此时应选（B ）为参比。 （A）溶剂空白（B）试液空白（C）试剂空白（D）褪色参比 14．用邻菲罗啉法测定锅炉水中的铁，pH需控制在4~6之间，通常选择（ D ）缓冲溶液较合适。 （A）邻苯二甲酸氢钾（B）NH3—NH4Cl （C）NaHCO3—Na2CO3 （D）HAc—NaAc 15．下述操作中正确的是（ C ）
紫外-可见分光光度法单元测验题参考答案 一、填空题（共20分，1分/空） 1、朗伯定律是说明在一定条件下，光的吸收与光径长度成正比；比尔定律是说明在一定条件下，光的吸收与溶液浓度成正比，二者合为一体称为朗伯-比尔定律，其数学表达式为A=Kbc。 2、摩尔吸光系数的单位是L·mol-1·cm-1，它表示物质的浓度为1mol·L-1，液层厚度为1cm时，在一定波长下溶液的吸光度，常用符号ε表示。 3、分子的运动包括三种，它们是电子运动、分子振动和分子转动。其中能量最大的是电子运动，能量最低的是分子转动。 4、多组分分光光度法可用解方程组的方法来求得各组分的含量，这是基于吸光度的加和性。 5、在紫外可见分光光度计中，在可见光区使用的光源是钨灯，用的棱镜和比色皿的材质可以是玻璃；而在紫外光区使用的光源是氢或氘灯，用的棱镜和比色皿的材质一定是石英。 6、影响有色配合物的摩尔吸收系数的因素是波长。 二、单选题(共20分，2分/题) 1、人眼能感觉到的光称为可见光，其波长范围是（A）。 ～780nm ～400nm ～1000nm ～1000nm 2、物质吸收光辐射后产生紫外-可见吸收光谱，这是由于（C）。 A.分子的振动 B.分子的转动 C.原子核外层电子的跃迁 D.分子的振动和转动 3、物质的颜色是由于选择吸收了白光中的某些波长的光所致。CuSO4溶液呈蓝色是由于它吸收了白光中的（C）。 A.蓝色光波 B.绿色光波 C.黄色光波 D.青色光波 4、符合吸收定律得溶液稀释时，其最大吸收峰波长位置（D）。 A.向长波移动 B.向短波移动
C.不移动 D.不移动，吸收峰值降低 5、当吸光度A=0时，τ为（C）。 % % D.∞ 6、高吸光度差示法和一般的分光光度法不同点在于参比溶液不同，前者的参比溶液为（D）。 A.溶剂 B.试剂空白 C.比被测试液浓度稍高的待测组分标准溶液 D.比被测试液浓度稍低的待测组分标准溶液 7、双波长分光光度计的输出信号是（B）。 A.试样在λ1吸收和参比在λ2吸收之差 B.试样在λ1和λ2吸收之差 C.试样在λ1和λ2吸收之和 D.试样在λ1吸收和参比在λ2吸收之和 8、在分光光度分析中，常出现工作曲线不过原点的情况，下列说法中不会引起这一现象的是（C）。 A.测量和参比溶液所用吸收池不对称 B.参比溶液选择不当 C.显色反应灵敏度太低 D.显色反应的检测下限太高 9、在符合朗伯-比尔定律的范围内，有色物的浓度、最大吸收波长、吸光度三者的关系是（B）。 A.增加，增加，增加 B.减小，不变，减小 C.减小，增加，增加 D.增加，不变，减小 10、双波长分光光度计与单波长分光光度计的主要区别在于（D）。 A.光源的种类 B.检测器的个数 C.吸收池的个数 D.使用的单色器的个数 三、简答题(共25分，5分/题) 1、紫外-可见分光光度法具有什么特点 答：①具有较高的灵明度，适用于微量组分的测定； ②分析速度快，操作简便； ③仪器设备不复杂，价格低廉； ④应用广泛，大部分无机离子和许多有机物质的微量成分都可以用这种方法测定。 2、分光光度计由哪几个主要部件组成各部件的作用是什么
第八章分光光度法 一、选择题 1.人眼感觉到的光称为可见光，其波长范围是。 a.200-400nm b.400-750nm c.10-200nm d.750-2500nm 2.物质的颜色是由于选择性地吸收了白光中的某些波长的光所致。KMnO4 显紫红色是由于它吸收白光中的。 a.紫红色光 b.绿色光 c.黄色光 d.蓝色光 3.吸收曲线是。 a.吸光物质浓度与吸光度之间的关系曲线； b.吸光物质浓度与透光度之间的关系曲线； c.入射光波长与吸光物质溶液厚度之间的关系曲线； d.入射光波长与吸光物质的吸光度之间的关系曲线。 4.符合光吸收定律的某有色溶液稀释时，其最大的吸收波长λmax的位置将。 a.向长波长方向移动 b.向短波长方向移动 c.不移动，但高峰值增大 d.不移动，但高峰值降低 5.吸光光度法中光吸收定律可表示为。 a.I=10abc b.A=1gT c.I=I0×10-εbc d.I0=I×10-εbc 6.下因素中，影响摩尔吸光系数（ε）大小的是。 a.有色配合物的浓度 b.入射光强度 c.比色皿厚度 d.入射光波长 7、有一浓度为C的溶液，吸收入射光的40%（即透光率为60%），在同样条件下，溶液浓度为0.5C的同一溶液的透光度为( ) A、30% B、20% C、77% D、36% 8．某试液用2cm 比色皿测量时，T=20%，若改用1cm比色皿测量，则A和T 分别为( ) A、0.35和40% B、0.22和36% C、0.35和45% D、0.35和100% 9.现有不同浓度的KMnO4溶液A、B，在同一波长下测定，若A用１cm比色皿，B用2cm比色皿，而测得的吸光度相同，则它们浓度关系为。 a.C A=C B b.C A=2C B c.C B=2C A d. 10.某试液用１cm 比色皿测量时，T=60%，若改用2cm比色皿测量，则A和T分别为。 a.0.44和36% b.0.22和36% c.0.44和30% d.0.44和120% 二、填空题 1、可见分光光度计的基本部件包括，，，，。 2、光度分析的定量分析方法主要有、、三类。 三、简答题 1．什么是Lambert-Beer定律？写出其数学表达式。 2．摩尔吸光系数（ε）的物理意义是什么？它和哪些因素有关？
第10章吸光光度法 基本内容 1概述 1.1吸光光度法的特点 吸光光度法是基于物质对光的选择性吸收而建立起来的分析方法,包括比色法,可见紫外吸光光度法和红外光谱法等。 1.1.1.光的基本性质：光是一种电磁波。具有同一波长的光称为单色光，由不同波长组成的光称为复合光。波长在200nm～400nm范围的光称为紫外光，人的眼睛能感到波长在400nm～750nm范围的光叫可见光。白光是由红、橙、黄、绿、青、蓝、紫等各种单色光按一定强度比例混合而成的。实验证明：将适当的两种单色光按一定强度比例混合，也可得到白光，这两种单色光互称为互补色光。 1.1. 2.物质对光的选择性吸收：溶液呈不同的颜色是由于溶液中的吸光质点选择性吸收了某种颜色的光所引起的。当白光通过某一均匀的溶液时，若该溶液对可见光波段的光都不吸收，则溶液无色透明；若溶液对不同波长的光全部吸收，则溶液呈黑色；若溶液对各种波长的光呈选择性吸收，则溶液呈现的是与吸收光成互补色光的颜色。如硫酸铜溶液呈蓝色是因为溶液吸收了白光中的黄色光，高锰酸钾溶液因吸收了白光中的绿光而呈紫色等。 1.1.3.光吸收曲线：任何一种溶液对不同波长的光的吸收程度不同，若将各种波长的单色光依次通过某一浓度的溶液，测量每一波长下溶液对光的吸收程度，以波长λ为横坐标，吸光度A为纵坐标绘画，所得曲线叫光吸收曲线。由光吸收曲线可知：溶液对各种波长的单色光的吸收程度是不同的，在某一波长处有一最大吸收，这一波长称为最λ表示；不同浓度的同一种物质的溶液，光吸收曲线的形状相似，最大吸收波长，用 max 大吸收波长不变，只是相应的吸光度大小不同。 1.2光吸收的基本定律 当一束平行的单色光通过含有吸光物质的溶液时，溶液的吸光度A与吸光物质的浓度c及液层厚度b成正比，即A=Kbc
第十二章分光光度分析法 （一）判断题 1. 可见光的波长范围在400-760nm之间。（） 2. 吸光度A与透光度T成反比。（） 3. 朗伯-比尔定律只适用于单色光。（） 4. 同一物质与不同显色剂反应，生成不同的有色化合物时具有相同的ε值。（） 5. 可见光源用钨丝白炽灯，紫外光源用氘灯。（） 6. 若显色剂用量多，则显色反应完成程度高，故显色剂用量越多越好。（） 7. 一般来说，加入有机溶剂，可以提高显色反应的灵敏度。（） 8. 浓度相对误差仅与仪器读数误差相关。（） 9. 浓度较高时测量相对误差大，浓度较低时，测量相对误差小。（） 10. 符合朗伯-比尔定律的某有色溶液稀释时，其最大吸收波长λmax向长波方向移动。（） 11. 有色溶液的吸光度随溶液浓度增大而增大，所以吸光度与浓度成正比。（） 12. 在光度分析中，溶液浓度越大，吸光度越大，测量结果越准确。（）（二）填空题 1. 朗伯-比尔定律数学表达式：A=kbc，式中A代表，b代表，c代表，k代表。当c的单位用mol·L-1表示时，k以符号表示，称为。 2. 下列物质水溶液选择吸收光的颜色为：CuSO4；K2Cr2O7； KMnO4。 3. 光度计的种类和型号繁多，但都主要由、、、、五大部件组成。 4. 分光光度计的表头上，均匀的标尺是，不均匀的标尺是。 5. 为了降低测量误差，吸光光度分析中比较适宜的吸光度范围是，吸光度为时，测量误差最小。 6. 在以参比溶液调节仪器的零点时，因无法调至透光度为100%，而只好调节至95%处，此处测得一有色溶液的透光度读数为35.2%，该有色溶液的真正透光度为。 7. 二苯硫腙的CCl4溶液吸收580 ~ 620nm范围内的光，它显色。 8. 测量某有色配合物在一定波长下用2cm比色皿测定时其T =0.60，若在相同条件下改用1.0cm比色皿测定，吸光度A为，用3.0cm比色皿测定，T为。 9. 苯酚在水溶液中摩尔吸光系数为6.17?103 L·cm—1·mol—1，若要求使用1.0cm比色皿，透光度在0.15 ~ 0.65之间，则苯酚的浓度应控制在。 10. 吸光光度分析的方法有、、等。 （三）选择题 1. 在吸光光度法中，透射光强度与入射光强度之比称为（） A．吸光度 B. 透光度 C. 消光度 D. 光密度 2. 有色溶液的摩尔吸光系数ε与下列哪种因素有关（） A．入射光波长 B.液层厚度 C.有色物质浓度 D.有色物质稳定性 3. 透光度与吸光度的关系是（） A. 1/T = A B. lg1/T = A C. lg T = A D. T = lg1/A 4. 若测得某溶液在λmax时A>0.8，可以采取下列哪些措施？（） A.增大光源亮度 B.改变入射光波长 C.稀释溶液 D.换用小的比色皿。 5. 邻菲罗林测Fe，合适的参比溶液（） A．样品空白 B.试剂空白 C.蒸馏水空白 6. 分光光度法测定钴盐中微量Mn，加入无色氧化剂将Mn2+氧化为MnO4-，测定中应选（）
第二章：紫外吸收光谱法 一、选择 1. 频率（MHz）为4.47×108的辐射，其波长数值为 （1）670.7nm （2）670.7μ（3）670.7cm （4）670.7m 2. 紫外-可见光谱的产生是由外层价电子能级跃迁所致，其 能级差的大小决定了 （1）吸收峰的强度（2）吸收峰的数目 （3）吸收峰的位置（4）吸收峰的形状 3. 紫外光谱是带状光谱的原因是由于 （1）紫外光能量大（2）波长短（3）电子能级差大 （4）电子能级跃迁的同时伴随有振动及转动能级跃迁的原因 4. 化合物中，下面哪一种跃迁所需的能量最高 （1）σ→σ*（2）π→π*（3）n→σ*（4）n→π* 5. π→π*跃迁的吸收峰在下列哪种溶剂中测量，其最大吸收 波长最大 （1）水（2）甲醇（3）乙醇（4）正己烷6. 下列化合物中，在近紫外区（200～400nm）无吸收的是 （1）（2）（3）（4） 7. 下列化合物，紫外吸收λmax值最大的是 （1）（2）（3）（4） 二、解答及解析题 1.吸收光谱是怎样产生的？吸收带波长与吸收强度主要由什
么因素决定？ 2.紫外吸收光谱有哪些基本特征？ 3.为什么紫外吸收光谱是带状光谱？ 4.紫外吸收光谱能提供哪些分子结构信息？紫外光谱在结构 分析中有什么用途又有何局限性？ 5.分子的价电子跃迁有哪些类型？哪几种类型的跃迁能在紫 外吸收光谱中反映出来? 6.影响紫外光谱吸收带的主要因素有哪些？ 7.有机化合物的紫外吸收带有几种类型？它们与分子结构有什 么关系？ 8.溶剂对紫外吸收光谱有什么影响？选择溶剂时应考虑哪些 因素？ 9.什么是发色基团？什么是助色基团？它们具有什么样结构 或特征？ 10.为什么助色基团取代基能使烯双键的n→π*跃迁波长红 移？而使羰基n→π*跃迁波长蓝移？ 11.为什么共轭双键分子中双键数目愈多其π→π*跃迁吸收带 波长愈长？请解释其因。 12.芳环化合物都有B吸收带，但当化合物处于气态或在极性溶剂、非极性溶剂 中时，B吸收带的形状有明显的差别，解释其原因。 13.pH对某些化合物的吸收带有一定的影响，例如苯胺在酸性介质中它的K吸收带和B吸收带发生蓝移，而苯酚在碱性介质中其K吸收带和B吸收带发生红移,为什么？羟酸在碱性介质中它的吸收带和形状会发生什么变化？ 14.某些有机化合物，如稠环化合物大多数都呈棕色或棕黄色，许多天然有机 化合物也具有颜色，为什么？
第八章吸光光度法 基于物质对光的选择性吸收而建立的分析方法称为吸光光度法。包括比色法、可见及紫外分光光度法等。本章主要讨论可见光区的吸光光度法。利用可见光进行吸光光度法分析时，通常将被测组分通过化学反应转变成有色化合物，然后进行吸光度的测量。例如：测量钢样中Mn的 含量，在酸性溶液中将Mn氧化为MnO 4-，然后进行吸光 度的测量。 与化学分析法比较它具有如下特点：
（一）灵敏度高 吸光光度法常用于测定试样中1－0.001%的微量组分。对固体试样一般可测至10-4 %。 （二）分析微量组分的准确度高 例如：含铁量为0.001%的试样，如果用滴定法测定，称量1g试样，仅含铁0.01mg，无法用滴定分析法测定。如果用显色剂1，10-邻二氮菲与亚铁离子生成橙红色的1，10-邻 二氮菲亚铁配合物，就可用吸光光度法来测定。 Fe2++ 3(1,10-phen) → [ Fe(1,10-phen)3] 2+（三）操作简便，测定快速 （四）应用广泛 几乎所有的无机离子和许多有机化合物都可直接或间接地用分光光度法测定。可用来研究化学反应的机理、溶液中配合物的组成、测定一些酸碱的离解常数等。
§8-1 吸光光度法基本原理 一、物质对光的选择吸收 当光束照射到物质上时，光与物质发生相互作用，产生了反射、散射、吸收或透射（p238, 图9-1）。若被照射的是 均匀的溶液，则光在溶液中的散射损失可以忽略。 当一束由红、橙、黄、绿、青、蓝、紫等各种颜色的光复合而成的白光通过某一有色溶液时，一些波长的光被溶液吸收，另一些波长的光则透过。当透射光波长在400-700nm 范围时，人眼可觉察到颜色的存在，这部分光被称为可见光。透射光和吸收光呈互补色，即物质呈现的颜色是与其吸收光呈互补色的透射光的颜色。 溶液由于吸收了580-600 nm的黄色光，呈例如：CuSO 4 现的是与黄色呈互补色的蓝色。不同波长的光具有不同的颜色，见P238，表9-1。
第十二章 吸光光度分析法 一、本章要点 1．掌握吸收曲线的绘制方法、吸收光谱、最大吸收波长的概念。 2. 掌握朗伯-比尔定律、吸光度、摩尔吸光系数、透光率的基本概念及相互之间的关系。 3.熟悉偏离朗伯-比尔定律的原因。 4. 掌握显色反应及其条件的选择、吸光光度分析方法及熟悉常用仪器的基本原理、主要部件 及具体操作。 二、示例解析 1. 已知含Cd 2+浓度为140μg ·L -1 的溶液，用双硫腙显色后，用厚度为2cm 的比色皿测得 A =0.22，计算此溶液的摩尔吸光系数。 解： 查表知Cd 的摩尔质量为112.41g ·mol —1 c (C d 2+)=140×10-6/112.41=1.25×10—6（mol ·L —1） 46108810 2512220?=??==ε-...bc A （L ·mol -1·cm —1） 需要指出的是，上例中的ε 值是把被测组分看成是完全转变成有色化合物的。但在实际测 定中，因有色物质组成不确定或有副反应存在，实际计算出的是表观摩尔吸光系数。 2. 已知吸光度A = 0.474，计算T 及T % 解： A = -lg T = 2 - lg T % lg T = -A = -0.474 ， T = 0.336； lg T % = 2-A = 2-0.474 =1.53， T % = 33.6 3. 准确移取含磷30μg 的标准溶液于25mL 容量瓶中，加入5%钼酸铵及其它相关试剂， 稀释至刻度。在690nm 处测定吸光度为0.410。称10.0g 含磷试样，在与标准溶液相同的条件 下测得吸光度为0.320。计算试样中磷的质量分数。 解： ω（P ）=100?m A V c A S X S X =3100.1025410.02530320.0????? =0.23 4. 某一分光光度计的透光率读数误差为0.005，当测量的百分透光率为9.5%时，测得的 浓度相对误差为多少？ 解：?T = 0.005，T = 0.095，代入式（8-6）： 095 .0lg 095.0005.0434.0??=?c c = -0.022 = -2.2% 5. 测定某样品中Fe 的含量，称样0.2g 测得T =1.0%，若仪器透光率读数误差为0.50% 试计算： ⑴ 测量结果的相对误差为多少？ ⑵ 欲使测得的A 值为0.434，以提高测量的准确度，则应减少称样量或稀释样品多少倍？ ⑶ 若不进行上面的操作，为提高测量准确度应选用几厘米的比色皿？ 解： ⑴ ?T =0.50%，T = 1.0%，代入（8-6）式 01 .0lg 01.0005.0434.0??=?C C = 0.1085 = 10.85% ⑵ 原试液T =1.0%，A = 2.00，要使A = 0.434，降低相对误差，则需稀释样品。因为 减少称样量会增大称量误差。所以稀释倍数=C 原/C =2.00/0.434 =4.6，即稀释4.6倍。 ⑶若不稀释样品，为了提高准确度，则要降低吸光度，因为C 较大，所以应选择厚度小 的比色皿，即选用0.5cm 比色皿。 6. 如何选择适宜的参比溶液？
吸光光度法课后练习题及参考答案一、选择题 1所谓可见光区，所指的波长范围是(B ) (A)200~400nm (B) 400~750nm (C) 750T000nm (D) 100~200nm 2.—束(B )通过有色溶液时，溶液的吸光度与溶液浓度和液层厚度的乘积成正比。 (A)平行可见光 (B)平行单色光 (C)白光(D)紫外光 3.下列说法正确的是(A ) (A)朗伯-比尔定律，浓度c与吸光度A之间的关系是一条通过原点的直线 (B)朗伯-比尔定律成立的条件是稀溶液，与是否单色光无关 (C)最大吸收波长入max是指物质能对光产生吸收所对应的最大波长 (D)同一物质在不同波长处吸光系数不同，不同物质在同一波长处的吸光系数相同 4.符合比耳定律的有色溶液稀释时，其最大的吸收峰的波长位置( C) (A)向长波方向移动(B)向短波方向移动 (C)不移动，但峰高降低(D)无任何变化 5.标准工作曲线不过原点的可能的原因是(D ) (A)显色反应得酸度控制不当(B)显色剂得浓度过高 (C)吸收波长选择不当(D)参比溶液选择不当 6.某物质摩尔吸光系数很大，则表明(A ) (A)该物质对某波长光的吸光能力很强 (B)该物质浓度很大 (C)测定该物质的精密度很高 (D)测量该物质产生的吸光度很大 7.吸光性物质的摩尔吸光系数与下列(D )因素有关 (A)比色皿厚度 (B)该物质浓度 (C)吸收池材料 (D)入射光波长 8.已知KMnO 4的相对分子质量为158.04,运45nm=2.2X 103,今在545nm处用
吸光光度法课后练习题及参考答案浓度为0.0020%KMnO4溶液，3.00cm比色皿测得透射比为(A ) (A) 15% (B) 83% (C) 25% (D) 53%
第六章吸光光度法习题 一、填空题 1、已知某有色络合物在一定波长下用2cm吸收池测定时其透光度T=0.60。若在相同条件下改用1cm吸收池测定，吸光度A为，用3cm吸收池测量，T为。 2、测量某有色络合物的透光度时，若吸收池厚度不变，当有色络合物浓度为c时的透光度为T，当其浓度为 时的透光度为。 3、苯酚在水溶液中摩尔吸收系数ε为 ，若要求使用1cm吸收池时的透光度为0.15~0.65之间，则苯酚的浓度应控制在。 4、某有色络合物浓度为 ，以1cm吸收池在最大吸收波长下的吸光度为0.280，在此波长下该有色物的摩尔吸收系数为。 6、已知KMnO4的摩尔质量为158 ，其水溶液的 。求此波长下质量分数为0.0020%的KMnO4溶液在3.0cm吸收池的透光度 为。 7、用普通分光广度法测得标液c1的透射率为20％，试液透射率为12％。若以示差法测定，以标液c1作参比，则试液透射率为。 二、选择题
1、在符合朗伯－比尔定律的范围内，有色物的浓度、最大吸收波长、吸光度三者的关系是（） A、增加，增加，增加； B、减小、不变、减小； C、减小，增加，增加； D、增加，不变，减小。 2、测定纯金属钴中锰时，在酸性溶液中以KIO4氧化Mn2+成 以分光光度法测定。若测定试样中锰时，其参比溶液为（） A、蒸馏水； B、含KIO4的试样溶 液； C、KIO4溶液； D、不含KIO4的试样溶液 3、在分光光度分析中，常出现工作曲线不过原点的情况。下列说法中不会引起这一现象的是（） A、测量和参比溶液所用吸收池不对称； B、参比溶液选择不当； C、显色反应的灵敏度太低； D、显色反应的检测下限太高。 4、光度分析中，在某浓度下以1.0cm吸收池测得透光度为T。若浓度增大1倍，透光度为（） A、 少； B、T/2； C、2T； D、 。
第八章分光光度法
第六章 吸光光度法 一、问答题 1. 摩尔吸收系数的物理意义是什么？其大小和哪些因素有关？在分析化学中κ有何意义？ 2. 朗伯－比尔定律的物理意义是什么？什么是透光度？什么是吸光度？二者之间的关系是什么？ 3. 为社么物质对光发生选择性吸收？ 4. 分光光度计有哪些主要部件？它们各起什么作用？ 5 当研究一种新的显色剂时，必须做哪些实验条件的研究？为什么？ 6 什么是吸收光谱曲线？什么是标准曲线？它们有何实际意义？利用标准曲线进行定量分析时可否使用透光度T 和浓度c 为坐标？ 7 测定金属钴中微量锰时在酸性液中用KIO 3将锰氧化为高锰酸根离子后进行吸光度的测定。若用高锰酸钾配制标准系列，在测定标准系列及试液的吸光度时应选什么作参比溶液？ 8 吸光度的测量条件如何选择？为什么？普通光度法与示差法有何异同？ 9 光度分析法误差的主要来源有哪些？如何减免这些误差？试根据误差分类分别加以讨论。 10 常见的电子跃迁有哪几种类型？ 11 在有机化合物的鉴定和结构判断上，紫外－可见吸收光谱提供信息具有什么特点？ 二、计算题 1．以邻二氮菲光度法测定Fe (Ⅱ)，称取试样0.500g ，经处理后，加入显色剂，最后定容 为50.0mL ，用1.0 cm 吸收池在510 nm 波长下测得吸光度A =0.430，计算试样中的w (Fe)(以百分数表示)；当溶液稀释一倍后透射比是多少？（ε510=1.1×104） 2．%0.61%10010=?=-A T 已知KMnO 4的ε545=2.2×103，计算此波长下浓度为0.002% （m/v ）KMnO 4溶液在3.0cm 吸收池中的透射比。若溶液稀释一倍后透射比是多少？ 3. 以丁二酮肟光度法测定镍，若络合物NiDx 2的浓度为1.7×10-5mol ·L -1，用2.0cm 吸收池 在470nm 波长下测得的透射比为30.0%。计算络合物在该波长的摩尔吸光系数。 4. 根据下列数据绘制磺基水杨酸光度法测定Fe （Ⅲ）的工作曲线。标准溶液是由0.432g 铁铵矾[NH 4Fe(SO 4)2·12H 2O]溶于水定容到500.0mL 配制成的。取下列不同量标准溶液于50.0mL 容量瓶中，加显色剂后定容，测量其吸光度。 V (Fe(Ⅲ))（mL ） 1.00 2.00 3.00 4.00 5.00 6.00 A 0.097 0.200 0.304 0.408 0.510 0.618 测定某试液含铁量时，吸取试液5.00mL ，稀释至250.0mL ，再取此稀释溶液2.00mL 置于50.0mL 容量瓶中，与上述工作曲线相同条件下显色后定容，测得的吸光度为0.450，计算试液中Fe(Ⅲ)含量（以g/L 表示）。 5. 以PAR 光度法测定Nb ，络合物最大吸收波长为550nm ，ε=3.6×104；以PAR 光度法测定 Pb ，络合物最大吸收波长为520nm ，ε=4.0×104。计算并比较两者的桑德尔灵敏度。 6. 有两份不同浓度的某一有色络合物溶液，当液层厚度均为 1.0cm 时，对某一波长的透
分光光度计复习题 一、判断题 1. 在一定的光强照射下，光电流与射入的光量近似成正比。( √) 2. 在分光光度计中，用光电管代替硒光电池可以提高测量的准确度。( ×) 3. 单光束紫外-可见分光光度计是根据物质的分子对紫外、可见区辐射(光)产生的吸收光谱和Lambert-Beer 定律测量物质的性质和含量的分析仪器。( √) 4. 单光束紫外-可见分光光度计的检定周期一般为半年。( ×) 5. 单光束紫外-可见分光光度计的仪器类别分为A类和B类。（×） 6. 检定紫外-可见分光光度计所使用的光谱中性滤光片的标称值为10%、20%、30%(或40%)。（√） 7. 仪器无需预热就能检定。（×） 8. 单光束紫外-可见分光光度计检定规程规定，仪器透射比重复性应不大于相应投射比准确度绝对值的2倍。（×） 9. 适用于可见光区的光源，常用的有钨灯和普通灯。( ×) 10．杂散光的存在，会使测量结果吸光度值增加，透射比值减小。( ×) 11. 分光光度计最重要的计量指标是波长的准确度和投射比正确度。（√） 12. 表征干涉滤光片特性的参数是峰值波长和半宽度。（√） 13. 检定可见分光光度计时，要求温度在10℃以上，相对湿度不大于80%。( ×) 14. 检定可见分光光度计时，电源电压：(220±22)V，频率：(50±1)Hz。( √) 15. 检定可见分光光度计时，可不进行外观检查。（×） 16. 可见分光光度计处于正常工作状态时，当波长置于580nm处时，在样品室内应能看到绿色光斑。（×） 17. 样品室应密封良好，无漏光现象。（√） 18. 吸收池的透光面是否光洁，有无划痕和斑点都不影响检定。（×） 19. 可见分光光度计检定规程主要是针对波长范围为360-800nm，或以次为主要谱区可见分光光度计的检定。( √) 20. 紫外分光光度计的光源常用碘钨灯。（×） 21. 原子吸收光谱中灯电流的选择原则是在保证放电稳定和有适当光强输出的情况下，尽是选用最低的工作电流( √) 22. 在原子吸收分光光度法中，对谱线复杂的元素常用较小的狭缝进行测定。( √) 23. 任何型号的分光光度计都由光源、单色器、吸收池和显示系统四个部分组成。（×） 24. 分光光度计使用的光电倍增管，负高压越高灵敏度就越高。（√） 25. 可见分光光度计检验波长准确度是采用苯蒸气的吸收光谱曲线检查。（×） 26. 朗伯一比尔定律只适用于单色光光。（√） 27. 在一定浓度范围内，有色溶液的浓度越大，对光的吸收也越大，但吸收峰波长仍不变。（√） 28. 分光光度计按它们的波长范围可分为4种。（×） 29. 可见光区光谱中性滤光片，透射比标称值为10%，20%，30%（或40%）。（√） 30. 单光束紫外-可见分光光度计检定规程适用于波长范围为190至850nm的仪器检定。（√） 31. 分光光度计的光源系统由光源和一系列平面镜组成。（×） 32. 公式A= t lg不是检定规程中描述的Lambert-Beer定律的数学表达式。（√） 33. 决定仪器分辨率大小最主要因素是线色散的大小。（√） 34. 吸收池的透明窗口需要垂直于入射光束，以便减少反射损失。（√） 35.