血栓与止血检测
在生理条件下，人体内的止血和凝血系统与抗凝血和纤维蛋白溶解（纤溶）系统，相互制约，但处于动态平衡状态，以维持血管内的血液不断循环流动，因此即使血管局部有轻微损伤，既不会出血不止，也不会因局部止血而发生广泛血栓或栓塞，在病理情况下无论哪一系统的作用发生异常，都可导致出血或血栓形成。
本章在复习止血和凝血机制的基础上，主要讲解血栓与止血常用的筛选试验。这些试验在临床上常用于出血性疾病或血栓性疾病的初步分类诊断、疗效观察和药物监护。
第一节止血与凝血机制
一、正常止血机制
机体的正常止血，主要依赖于完整的血管壁结构和功能，有效的积压小板质量和数量，正常的血浆凝血因子活性。其中，血小板和凝血因子的作用是主要的。
正常止血机制及血栓与止血常用筛选试验检测环节
二、正常凝血机制
血液凝固是指血液由流动状态变为凝胶状态，它是十分复杂的理化反应。肉眼可见的血块形成既是纤维蛋白形成的物理现象，也是一系列酶促生化反应的终点。整个过程涉及许多凝血因子。
（一）凝血因子
迄今为止，参与凝血的因子共有14个。其中用罗马数字编号的有12个（从Ⅰ－Ⅷ，其中Ⅵ并不存在）。习惯上，前4个凝血因子常分别称为纤维蛋白原（因子Ⅰ）．凝血酶（因子Ⅱ）．组织因子Ⅲ）和钙离子（因子Ⅳ）。
（二）凝血机制
在生理条件下，凝血因子一般处于无活性的状态；当这些凝血因子被激活后，就了生了至今仍公认为的“瀑布学说“的一系列酶促反应。
凝血过程通常分为：①内源性凝血途径；②外源性凝血途径；③共同凝血途径。所谓内源性或外源性凝血并非绝对独立的，而是互有联系，这就是进一步说明凝血机制的复杂性。
三、纤维蛋白溶解机制
在生理止血过程中，小血管内的血凝块常可成为血栓，填塞了这一段血管。出血停止、血管创伤愈合后，构成血栓的血纤维可逐渐溶解，先形成一些穿过血栓的通道，最后可以达到基本畅通。血纤维溶解的过程，称为纤维蛋白溶解（简称纤溶）。
纤维蛋白溶解（纤溶）系统包括四种成分，即纤维蛋白溶解酶原（plasminogen）（纤溶酶原，血浆素原）、纤维蛋白溶解酶（plasmin）（纤溶酶，血浆素）、纤溶原激活物与纤溶抑制物。纤溶的基本过程可分两个阶段，即纤溶酶原的激活与纤维蛋白（或纤维蛋白原）的降解。
第二节血栓与止血的常用筛选试验
血栓与止血常用筛选试验包括毛细血管脆性试验、出血时间测定、血小板计数、血块收缩试验、凝血时间测定、血浆凝血酶原时间测定和活化部分凝血活酶时间测定。这些试验中，前四项试验主要反映了血管壁和血小板在血栓与止血中的作用。其中，出血时间和血小板计数两项最常用。在反映凝血机制方面，除了血浆凝血酶原时间测定是本书中唯一代表外源凝血途径的试验外，其余三项均属检查内源性凝血的试验，以活部分凝血活酶时间测定最敏感。
一、毛细血管脆性试验
[原理]毛细血管壁的完整性有赖于毛细血管的结构、功能和血小板质和量的正常，也与某些体液因素有在。当这些因至少有缺陷时，毛细血管的完整性就受到破坏。毛细血管脆性试验或称束臂试验是在上臂给静脉及毛细血管理体制外加“标准压力”、增加血管负荷，观察前臂一定范围内此肤出血点当选量的方法。本试验主要反映毛细血管结构和功能，也与血小板质和量有关。
[方法学评价]本试验对检查毛细血管壁的缺陷比检查血小板的缺陷稍敏感。但总体而言，也仅是一个粗略的指标。许多有血管或血小板异常并有出血症状的病人，本试验可呈假阴性；而许多无症状的人可以呈阳性，主要应用于新生儿因为检查新生儿毛细管及血小板的功能无法使用与成人一样的方法。
[参考值]阳性：男性<5个出血点；女性<10个出血点。
[临床意义]
1．病理性CFT阳性见于：①毛细血管有缺陷的疾病：如遗传性出血性毛细血管扩张症，本试验较有价值，还有坏血病、过敏性紫癜、老年性紫癜等；②血小板有缺陷的疾病：原发性血小板减少性紫癜（ITP）、血小板无力症、血管性血友病（von willebrand disease,VWD）、血小板病；③其它：偶见于严重的凝血异常；毛细血管造成损伤的疾病，如败血症、尿毒症、肝脏疾病、慢性肝炎、血栓性血小板减少性紫癜。
2．少数正常人CFT可呈阳性，尤其是妇女。因此CFT临床价值不大。
二、出血时间测定
[原理]在一定条件下，人为刺破皮肤毛细血管后，从血液自然注出到自然停止所需的时间，称为出血蛙间测定（bleeding time,BT）。BT测定受血小板的数量和质量、毛细血管结构和功能以及血小板与毛细血管之间相互作用的影响，而受血液固因子含量及活性作用影响较小。
[方法学评价]
BT测定是筛选试验中唯一的体内的试验。传统方法有Duke法和IVY法，目前推荐使用标准化出血时间测定器法（template bleeding time,TBT）。
BT测定的影响因素有：皮肤切口深度、长度、位置、方向，毛细血管所受压力；皮肤温度等。其中，最重要的因素是切口的深度。对儿童、老年、有瘢痕形成史的患者，可用瘀点计替代TBT作出血时间测定。
Duke法是在耳垂采血，虽然操作简便，但整个操作难发标准化，且很不敏感，特别是对血管性血友病的检测；故已渐被淘汰。
IVY法采血部位在前臂掌侧。在上臂用压脉带施加固定压力，然后在前臂规定的范围内作切口。敏感性较好。但因切口深度、长度仍未能标准化，故重复性不如在其基础上改进后的TBT法。
TBT法是较理想的方法。TBT是在IVY出血时间测定方法上经改进后目前最有效的标准测定法，由于使用标准的测定器，因此能使此肤切口的长度和深度恒定，使试验重复性比传统方法明显提高，有利于检出血管壁及血小板质和量的缺陷。而且根据需要不同型号的测定器，可作为不同长度和深度的标准切口，适用于不同年龄的患者。测定器法对前臂的切口有两种：刀刃长轴与前臂垂直的为水平切口，与前臂平行的为垂直的切口；水平切口第三性高，为首先方法，但对4个月以下的婴儿宜作垂直切口，以免形成疤痕。
[参考值]TBT法（SimplateⅡ型）： 2.3～9.5min
IVY法:2～7min
Duke法：1～3min（不超过4min）
[临床意义]由于临床上由药物治疗引起的BT延长常见，故测定前应仔细询问病人用药情况，如是否服用阿司匹林、抗炎药、口服抗凝药及某些抗生素等。
1．BT延长
（1）血小板数量异常：①原发性血小板减少紫癜、血栓性血小板减少紫癜（可因药物、中毒、感染、免疫等原因引起）；②血小板增多症，如原发性血小板增多症。
（2）血小板功能缺陷：①先天性血小板病如血小板无力症；②获得性血小板病如药物引起的血小板病、骨髓增生异常综合症等。
（3）血管性血友病（VWD）。
（4）血管壁及结构异常（少见）遗传性出血性毛细血管扩张症等。
（5）偶见于严重的凝血因子缺乏：如凝血因子Ⅱ、Ⅴ、Ⅷ、Ⅸ或纤维蛋白缺乏；弥漫性血管内凝血（DIC）；也见于接受大量输血后患者。
2．BT缩短：主要见于某些严重的血栓前状态和血栓形成时。如妊娠高血压综合征、心肌梗死、脑血管病变、DIC高凝期等，均可因血管壁损害，血小板或背后血因子活性过度增强所致。
三、血小板计数
[原理]血小板计数（blood platelet count,BPC）的基本原理，同血液的白细胞或红细胞计数法。[方法学评价]血小板由于体积小，特别是容易发生粘附、聚集和变性破坏，故常难以准确计数。目前血小板计数方法主要有两大类：血细胞分析仪法和目视显微镜计数法。目视显微镜计数法有普通光学显微镜计数法（分为直接法和间接法，但后者已被淘汰）和相差显微镜法。
1．普通光镜直接计数法：因稀释液成分没，有多种计数方法。可分为两类：①破坏红细胞的溶血法；例如草酸铵稀释液法对红细胞破坏力强，血小板计数发生困难，也有用赤血盐血小板稀释者，此剂稳定，可在室温下长期保存而不变质，但如稀释20倍或40倍，则红细胞破坏不完全。②不不破坏红细胞方法：有复方碘稀释液法。因红细胞未破坏，可能掩盖血小板，且液易生长微生物而干扰计数，已被淘汰。
2．相差显微镜直接计数法：用草酸铵作稀释液，在明显的显微镜下进行计数，并可于照相后核对计数。此法准确性高，血小板易于识别。
3．血细胞分析仪法：此法由于重复性好，适于临床应用，目前血液细胞分析仪逐步普及，一般均发全血作为标本，比用富含血小板浆测定简便。但由于血细胞分析仪计数法不能完全将血小板与其它类似大小的物质（如红细胞或白细胞碎片、灰法等杂物）区别开来，因此计数结果有时仍需目视显微镜计数作校正，因而国内外仍将目视显微镜计数（特别是相差异显微镜计数法）作为参考方法。
在各种稀释液中，无论自动血细胞分析仪法或显微镜计数法，多以草酸铵溶血法作为参考（国内亦将此稀释液定为首先方法）。
[参考值]普通显微镜计数法：（100～300）×109/L
[临床意义]
1．生理性：正常人血小板计数一天内可有6-10%变化；表现为早晨较低，先后略高；春季较低，冬季略高；平原居民较低，高原较高；静脉血比毛细血管血高10%；月经前降你，月经后升高；妊娠中晚期升高，分娩后即降低；运动后升高，休息后恢复。
2．病理性
（1）在临床上，除创伤之外，血小板减少引起出血常见原因。血小板数大于100×109/L，无异常出血；当小于50×109/L时，可有出血症状。常见的疾病有：①血小板生成障碍，如急性白血病、再生障碍性贫血；②血小板破坏过多，如ITP、脾功能亢进，系统性红斑狼疮；③血小板消耗增多，如DIC、血栓性血小板减少紫癜。
（2）血小板增多（血小板数大于400×10/L）；①骨髓增生性疾病：慢性粒细胞白血病，真性红细胞增多症；②原发性血小板增多症；③急性大出血，急性溶库存，急性化脓性感染；④脾切手术后。四、凝血时间测定
[原理]新鲜血液离体后，因子被异物表面（玻璃）激活，启动了内源性凝血。由于血液中含有内源性凝血所需的全部凝血因子、血小板及钙离子，血液则发生凝固。血液凝固所需时间即为凝血时间（clotting rime,CT）。
[方法学评价]凝血时间测定，根据标本来源有：
毛细血管采血法：可用玻片法或毛细血管法测定。由于采血过程易混入较多组织液因而即使有内源性凝血因子缺乏，也仍发生外源性凝血，使本该异常的结果变为正常。本法极不敏感，仅能检测出Ⅷ：C水平<2%的血友病患者，漏检率达95%故属于淘汰的方法。
静脉采血法：由于血液中较少的混入组织液，因此对内源凝血因子缺乏的第三性比毛细血管采血法要高。目前有3种检测法：
（1）普通试管法（Lee-White法）：仅能Ⅷ：C水平<2%的患者，本法不敏感目前也趋于淘汰。（2）硅管法（SCT）：本法与普通试管法的测定方法基本相同，唯一的区别是采用涂有硅油的试管。由于硅管内壁不易使内壁凝血因子接触活化，故凝血时间比普通试管法长，也较第三可检出因子Ⅷ：C水平<45%患者。
（3）活化凝血时间（activated clotting rime,ACT）法：本法是在待检全血中加入白陶土部分凝血活酶悬液，先充分激活接触活化系统的凝血因子Ⅶ、Ⅺ等，并为凝血反应提供丰富的催化表面，从而
提高了试验的第三性，是内源性系统第三的筛选试验之一，能检出Ⅷ：C水平<45%亚临床血友病。ACT 法也是监护体外循环肝素用量的较好的指标之一。
以上测定凝血时间的各种方法，在检测内源性凝血因子缺乏方面，无论敏感性或准确性均不如活化部分凝血活酶时间测定（APPT）。
[参考值]普通试管法：5～10min
硅管法：15～32min
活化凝血时间法：1.1～2.1min
[临床意义]
1．CT延长①较显著的因子Ⅷ、Ⅸ减少的血友病甲、乙凝血因子缺乏症；②血管性血友病；③严重的因子Ⅴ、Ⅹ、纤维蛋白抗凝剂、应用肝素以及低纤维蛋白原血症；④继发性或原发性纤溶活力增强；
⑤循环血液中的抗涨物，如抗因子Ⅷ抗体因子搞体、SLE等。
2．CT缩短①血栓前状态：DIC高凝期等；②血栓性疾病如心肌梗死，不稳定心绞痛、脑血管病变、溏尿病行之有效管病变、肺梗死、深静脉血栓形成、妊高征、肾病综合征及高血溏、高血脂等。
五、血浆凝血酶原时间测定
[原理]在抗凝血浆中，加入足够量的组织凝血活酶（组织因子，TF）和适量的钙离子，即可满足外源凝血的全部条件。从加入钙离子到血浆凝固所需在的时间即称为血浆凝血酶原时间。PT的长短反映了血浆中凝血酶原、纤维蛋白原和因子Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ的水平。
[方法学评价]一步法凝血酶原时间测定：由Quick在1935年创建。该法是在抗凝血浆中直接加入试剂一次完成测定，因此称一步法。当时认为该试验只反映了凝血酶原的活性（因子未发现凝血因子Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ）。原使用草酸钠液作为抗凝剂，后来发现此液不利于凝血因子和保存，故已改用枸橼酸钠作抗凝剂。一步法PT常用静脉抗凝血普通试管法手工测定；也有用毛细血管微量抗血测定，虽采血量少，但操作较繁琐，故少用；也可用表面玻皿法测定，准确性较并管法高，而操作不如后者简便。近年来，多采用半自动或全自动血液凝固仪测定，也以出现纤维蛋白丝作为终点。
手工法虽重复性差、耗时，但仍有相当程度的准确性，故仍广泛应用，其中以手工倾斜试管法为参考方法。半自动仪法，提高了光天化日确度和速度，但存在标本交叉污染的缺点。全自动仪法克服了半自动仪法不足之处，使检测更加精确、快速、敏感与方便。
组织凝血活酶试剂质量是影响PT测定准确性最重要的因素之一。组织凝血活酶的不同来源，不同制备方法，使务实验室之间及每批试剂之间PT测定的结果差异大，可比性差，特别影响对口服抗凝血剂患者治疗效果的判断，因此早在1967年，WHO就将功赎罪67/40批号人脑凝血活酶标准品，作为以后制备不同来源的血活酶的参考物，并要求计算和提供每批组织凝血活酶的国际敏感指数。ISI表示标准
品组织凝血活酶与每批组织凝血活酶PT校正曲线的斜率，即在双对数的坐标纸上，纵坐标为用标准品测定的PT对数值，横坐标为用待校正的组织凝血活酶测定的相同标本PT的对数值。60/40的ISI为1.0。ISI值越低，表示试剂愈敏感。目前务国大体是用国示标准品标化自己制备的本国国家标准品。新的组织凝血活酶标准品来自兔或牛的制备。其它各种组织凝血活酶剂的ISI必须按照新的标准品ISI进行校正。其次，WHO等国际的要威机构还要求，PT正常对照值必需至少来自20名以上男女各半的混合血浆所测定得结果。并且还规定姨口服抗凝剂的患者必须使用国际PT结果报告形成，并用以为抗凝治疗监护的指标，INR=（病人凝血酶原时间/正常人平均凝血酶原进间）ISI。作PT测定时，首先应了解所用的组织凝积压活酶试剂的ISI，ISI值通常由产生试剂的厂商提供的，测定PT后，即可计算出INR。为使用方便，INR也可从制造商提供的图表中查提，最初规定INR必须使用手工法测得，在引入自动化凝血仪后，为了不影响INR的可靠性，制造商还应提供仪器相应的ISI值。使用ISI和INR可减少或去除各实验室PT测定的在技术和试剂上差异，使抗凝疗法监测过程中，各种PT结果有可比性。近年，国外用重组组织因子作为PT测定。γ-TF比其它动物性来源的涨血活酶对凝血因子Ⅱ、Ⅶ、Ⅹ敏感性高，但目前未被推广使用。
一步法PT结果报告方法：一般情况下，可同时报告被检标本PT和正常对照PT以及PT比率。凝血酶原比率=被检血浆PT时间/正常血浆PT时间。过去曾用凝血酶原活动度报告，现已少用；当PT用于监测口服抗凝剂时，则必须同时报告INR值。
二步法凝原时间测定：首先由Warner等创建，后由Ware\Seegers等改良，此法第一步生成凝血酶，第二步是测定生成的凝血酶，从而间接测得凝血酶原时间。二步法虽然双较合理，但操作繁琐，未被广泛应用。
[参考值]一步法凝血酶原时间：11～13s
凝血酶原比值：0.82～1.15
[临床意义]
1．PT延长：PT超过正常对照3秒以上或凝血酶原比值超过正常范围即为延长，主要见于：①先天性因子Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ减少及纤维蛋白原的缺乏（低或无纤维蛋白血症）；②获得性凝血因子缺乏，如DIC、原发性纤溶亢进症、肝病的阻塞性黄疸和维生素K缺乏、血循环中抗凝物质增多等。
2．PT缩短：①先天性因子Ⅴ增多；②DIC早期（高凝状态）；③口服避孕药、其它血栓前状态及血栓性疾病（凝血因子和血小板活性增高，血管损伤等无法为血栓形成的基础）。
3．口服抗凝药的监护临床上当NIR为2-4时为抗凝治疗的合适范围，当INR>4.5时，如纤维蛋白水平和血小板数仍正常，则提示抗凝过度，应三少或停止用药。INR>4.5时，同时伴有纤维蛋白原和血小板减低，则右能是DIC或肝病等所致也应减少或停止口服抗凝剂。
六、活化部分凝血活酶时间测定
[原理]在抗凝血浆中，加入足量的活化接触因子激活剂和部分凝血活酶（代替血小板的磷脂），再加入适量的钙离子即可满足内源抗凝血的全部条件。从加入钙离子到血浆凝固所需的时间即称为活化部分凝血活酶时间（activated partialthromboplastin time,APTT）。APTT的长短反映了血浆中内源凝血系统凝血因子共同途径中凝血酶原、纤维蛋白原和因子Ⅴ、Ⅹ的水平。本试验是目前最常用的敏感的检查内源凝血系统是否正常的筛选试验。
[方法学评价]APTT测因所用的激活剂不同以及部分凝血活酶来类推制备的不同，均影响测定的结果。因此本试验的准确性首先取决于部分凝血活酶试剂的质量，常用的激活剂的有白陶土，此时APTT又称为KPTT不觉可用硅藻土等。即使是同一种激活剂，其质量也可有很大不同。APTT最禄是用玻璃试管激活接触因子，后来又加同质理的激活剂，使激活作用更迅速更标准化，从而消除了接触激活的差异，部分涨血活酶主要来源于兔脑组织，不同制剂质量不同，一般选用对因子Ⅷ：C、Ⅸ、Ⅺ在血浆浓度为200～250U/L时敏感的试剂。APTT是一个较为敏感且简便的试验。可替代普通试管法凝血时间测定或血浆复钙时间测定。用自动血浆凝固仪测定APTT，虽可提高检测速度和结果精确性，但仪器本身也会产生一定误差，这一点也是不能忽视的。1995年国际血栓与止血委员会和国际血液学标准委员会已开始合作研究应用APTT监测肝素治疗时的标准化问题。
[参考值]33.68～40.32s
[临床意义]基本与凝血时间意义相同，但第三性高。目前所用的大多数APTT测定方法，凡当血浆凝血因子低于正常水平的15-30%即可异常。
1．APTT延长：APTT结果超过正常对照10s以上即为正常延长。APTT是内源凝血因子缺乏最可靠的筛选试验，主要用于发现轻型的血友病。虽可检出因子Ⅷ：C水平低于25%甲型血友病，但对于亚临床型血友病（因子Ⅷ大于25%）和血友病携带者第三性欠佳。结果延长也见于因子Ⅺ（血友病乙）、Ⅻ和Ⅶ缺乏症；血中抗凝血物如凝血因子抑制物或肝素水平增高时，当凝血酶原、纤维蛋白原及因子Ⅴ、Ⅹ缺乏时也可延长，但第三性略差；其它尚有肝病、DIC、大量输入库存血等。
2．APTT缩短：见于DIC，血栓前状态及血栓性疾病。
3．肝素治疗监护：APTT对血浆肝素的浓度很为第三故是目前广泛应用的实验室监护指标。此时要注意APTT测定结果必须与肝素治疗范围的血浆浓度呈线性关系，否则不宜使用。一般在肝素治疗期间，APTT维持在正常对照的1.5～3.0倍为宜。
第三节检测项目的选择和应用
一．一期止血缺陷的选择
1、筛选试验：血小板计数（PLT）、出血时间（BT）
2、诊断试验
二．二期止血缺陷的选择
1、筛选试验：APTT、PT
2、诊断试验
三、纤维蛋白溶解综合征
1、筛选试验：FDP、DD
2、诊断试验（DIC诊断标准）
第四篇血栓与止血及其检验 第一部分习题 一、名词解释 1．出血时间 2．血小板聚集试验 3．血小板生存时间（PST） 4．活化蛋白C抵抗 5．过敏性紫癜 6．原发性纤溶 二、简答题 1．简述血小板聚集试验的原理。 2．遗传性血小板功能缺陷有哪些疾病？ 3．何为血栓前状态？有何病理性变化？ 4．简述血小板相关免疫球蛋白检测的临床意义。 5．简述血小板膜糖蛋白测定的原理及临床意义。 三、论述题 1．何谓一期止血缺陷？常用的筛检试验有哪些？其筛检试验在临床应用时分哪几种情况？ 2．何谓二期止血缺陷？常用的筛检试验有哪些？其筛检试验在临床应用时分哪几种情况？ 3．试述血友病的实验诊断步骤。 4．试述肝病引发出血的主要原因。 5．何为特发性血小板减少性紫癜？临床如何分型？哪些指标对本病具有肯定性诊断价值？ 6．诊断DIC的筛选试验和确诊试验各有哪些？ 7．试述血友病A 的主要临床表现和诊断步骤。 四、病例分析题 患者，男性，12岁。2天前，剧烈运动后，右膝关节肿痛，行走困难入院。3年前患者双膝关节不明原因的红、肿伴疼痛，被认为是关节炎，治疗后痊愈。患者自幼常有鼻出血现象。检验Hb 120g/L；BPC200×109/L；CT: 15min（普通试管法，正常对照10min）；BT 3min（正常对照为4min）；PT:14s（正常对照为13s）；APTT: 62s（正常对照 35s）；TT 16s（正常对照为18s）。 1．根据以上资料，该患者初步诊断是什么？ 2．如需最终确诊，还需要哪些资料和实验室检查？
五、选择题 【A1型题】 1．出血时间测定一般不作为常规筛查试验，主要原因是 A．临床灵敏度偏低B．临床特异性不高 C．BT测定器太昂贵D．操作复杂，皮肤切口稍大 E．只能筛查血管性出血性疾病 2．出血时间缩短的疾病可见于 A．血管性血友病B．血小板减少症 C．血小板功能缺陷症D．DIC E．心肌梗死 3．血块收缩率正常的疾病是 A．特发性血小板减少性紫癜B．血小板无力症 C．低纤维蛋白原血症D．血友病 E．血小板贮存池病 4．血小板血栓阻塞时间测定主要用于 A．诊断血管性血友病B．筛查血小板无力症 C．筛查血小板贮存池病D．辅助诊断巨血小板综合征 E．筛查血管与血小板相关的疾病 5．不属于血管性血友病因子（vWF）功能检查的试验是 A．vWF 多聚体分析B．vWF 的FⅧ结合能力 C．vWF 的胶原结合能力D．血浆vWF 瑞斯托霉素辅因子 E．瑞斯托霉素诱导的血小板凝集 6．瑞斯托霉素诱导的血小板凝集和ADP诱导的血小板聚集所不同的是A．血小板不被激活B．vWF不参与 C．GPⅡb/Ⅲa起主要作用D．与GPⅠb/Ⅸ/Ⅴ复合物无关 E．与血浆纤维蛋白原浓度相关 7．适合于口服阿司匹林药效监测的血小板聚集诱导剂是 A．ADP B．胶原C．肾上腺素 D．花生四烯酸E．瑞斯托霉素 8．临床最常用的血小板聚集试验方法是 A．全血阻抗法B．光散射比浊法C．微量反应板法D．PRP透射比浊法E．自发性聚集试验测定 9．血小板α颗粒缺陷时，ADP诱导的血小板 A．聚集率增高B．聚集率正常C．仅有一相聚集峰D．聚集率轻度降低E．可见一相和二相聚集峰 10．下列参与血小板释放反应的诱导剂中，作用最强的是 A．ADP B．肾上腺素C．5—HT D．TXA2 E．凝血酶 11．下列除外哪种疾病外，一般毛细血管脆性试验阳性 A．过敏性紫癜B．血友病C．血小板减少性紫癜D．遗传性出血性毛细血管扩张症E．血小板无力症12．下列除外哪种疾病外，出血时间可延长 A．血小板减少性紫癜B．血小板无力症 C．遗传性出血性毛细血管扩张症D．血友病 E．血管性血友病 13．出血时间测定器法的参考值 A．2.5~9.5分钟B．1~6分钟C．1~3分钟 D．大于20秒E．20~40秒 14．血浆FDP的参考范围是 A．＜1.5mg/L B．＜2.5mg/L C．＜5.0mg/L D．＜10mg/L E．＜20mg/L 15．阿司匹林耐量试验的含义是 A．服用阿司匹林后测定其BT B．服用阿司匹林2、4小时后测定BT C．测定服药前后2、4小时的BT D．测定服药前2、4小时的BT E．测定服药前后3、6小时的BT 16．MPV是指 A．平均血小板体积B．平均血小析数C．血小板体积
[模拟] 出血、血栓与止血检测(一) A1型题每一道考试题下面有A、B、C、D、E五个备选答案。请从中选择一个最佳答案。 第1题： 血小板在动脉粥样硬化发生中的作用 A.增加内皮细胞内的脂质 B.损伤内皮细胞 C.诱发胶原增生 D.在受损血管局部形成血小板血栓 E.活化凝血因子 参考答案：B 答案解析： 第2题： 内源性凝血第一阶段的辅因子是 A.FⅢ B.FV C.PK D.FⅧ E.FⅫ 参考答案：D 答案解析： 第3题： 不含有丝氨酸活性中心的是 A.Ⅷa B.凝血酶 C.Ⅸa D.Ⅺa E.Ⅻa 参考答案：A 答案解析： 第4题： 血小板黏附功能异常增加见于
A.储存池病 B.口服避孕药 C.巨大血小板综合征 D.服用解热镇痛药 E.血小板无力症 参考答案：B 答案解析： 第5题： 关于因子Ⅻ，正确的叙述是 A.在体内的作用可有可无 B.更重要的生理功能在于激活纤溶系统 C.内源性凝血必需的因子 D.可激活mdYVK E.可激活因子Ⅺ 参考答案：B 答案解析： 第6题： APTT用于血友病的筛查，其敏感性为 A.可筛查出亚临床型血友病 B.不能用于筛查血友病 C.可筛查出重型血友病 D.可筛查出血友病携带者 E.可筛查出轻型血友病 参考答案：E 答案解析： 第7题： 一患者多次发生鼻出血，PT、APTT、血小板计数都正常，应继续检查 A.凝血时间 B.血小板功能 C.出血时间 D.束臂试验 E.Vwf 参考答案：B 答案解析：
第8题： 血栓前状态的筛查指标，除外 A.APTT、PT缩短 B.血小板计数升高 C.纤维蛋白原含量增加 D.GMPl40过度表达 E.D-二聚体阳性 参考答案：E 答案解析： 第9题： 抗血友病蛋白指的是 A.FⅦ B.FⅨ C.FⅧ D.FⅪ E.FV 参考答案：C 答案解析： 第10题： 心肌梗死溶栓治疗有效的监测指标除外 A.9T在正常的1.5～2.5倍 B.纤维蛋白原1.2～1.5g/L C.FDP在300～400mg/L D.血小板计数(100-～300)×109/L E.D-二聚体阳性 参考答案：D 答案解析： 第11题： ATⅢ不能抑制的是 A.Ⅻa B.凝血酶 C.Ⅷa D.Ⅺa
血栓与止血检验的基础理论 一血栓与止血基础理论 出血 血栓 止血 ?血管壁的止血作用 ?血小板的止血作用 ?血液凝固 一血管壁的止血作用 血管按管径分： 大血管：管径＞100μm ，在血栓止血机制中作用不明显 小血管：管径＜50μm，参与止血作用的主要血管，分小动脉、小静脉、毛细血管，微循环血管。 血管壁的结构： 内膜层：主要由内皮细胞粘合质组成，含血管性血友病因子（vWF）,组织纤容酶原激活物（t-PA），纤维连接蛋白（Fn）,层素（Ln），纤容酶原激活物抑制剂（PAI-1）和血栓调节蛋白（TM）,内皮细胞表面有糖萼，是多种受体所在的部位。内皮细胞之间由粘合性物质连接，试内皮细胞信息传递和维持血管通透性的物质基础。 中膜层：由基底膜、微纤维、胶原、平滑肌和弹力纤维等构成。内皮细胞和中膜 ）合成酶和ADP酶。 层还含有组织因子（TF）、前列环素（PGI 2 外膜层：由结缔组织构成。 1 主要是内膜层的内皮细胞的止血作用 ?参与小血管的收缩 ?激活血小板 ?促进血液凝固作用 ?血液凝固的调节作用 2 内皮细胞的抗血栓形成作用 ?调节血管松弛和舒张作用 ?抑制血小板聚集的作用 ?血液凝固和调节作用 3 血管内皮的异质性 ?何谓异质性？ 不同组织中的血管内皮细胞存在着很多不同的特性，有的很活跃，有的很安静；有的呈扁平状，有的较肿胀；还有的具有高生物合成能力。 4 血管内皮的生长及调控 ?肝素结合生长因子（HBGF）：对内皮细胞有丝分裂原和趋化作用 ?血管内皮生长因子家族（VEGF）:与血管内皮生长因子细胞表面受体结合，可
应受体的内皮细胞生长的作用 ?成纤维细胞生长因子家族（FGF） 二血小板的止血作用 （1）血小板的结构： 正常血循环中，静止的血小板呈双凸碟形，平均直径2-4μm ，电子显微镜下血小板表面有一些小的凹陷，称开放管道系统（OCS）。 血小板表面最主要的结构就是细胞膜及其组成成分膜蛋白和膜脂质。 ①血小板表面结构： 膜蛋白：糖蛋白（GP）是主要的膜蛋白成分，含量最多：GPⅡb/Ⅲa复合物，与血小板的聚集功能有关，第二GPⅠb/ Ⅸ复合物，与血小板的黏附功能有关，再者GP Ⅰa/Ⅱa复合物，它是胶原的受体。 膜脂质：磷脂最多，占总脂 75%-80%，胆固醇：20%-25%，糖脂：2%-5%， 磷脂，磷脂主要由鞘磷脂（SPH）和甘油磷脂组成，后者包括磷脂酰胆碱（PC）、磷脂酰乙醇胺（PE）、磷脂酰丝氨酸（PS）、磷脂酰肌醇（PI）以及少量溶血卵磷脂等。各种磷脂在血小板两侧成不对称分布。在血小板未活化时，SPH、PC、和PE主要分布在质膜的外侧面，而PS主要分布在内侧面，血小板被激活时，PS 转向外侧面，可能成为血小板第三因子（PF3）。 ②血小板骨架系统和收缩蛋白 是指膜内侧面的微管、微丝和膜下细丝，也称作血小板溶胶—凝胶区。 ?微管：非膜性管道结构，呈环形排列于血小板四周。维持血小板的形状。 ?微丝：实心细丝状结构，主要含有肌动蛋白细丝和肌球蛋白粗丝，肌动蛋白和 肌球蛋白构成血小板的收缩蛋白参与血小板收缩活动、伪足形成和释放反应。 ?膜下细丝：结构与作用与微丝相似。 ③血小板细胞器和内容物 细胞器最主要的是一些颗粒成分： α-颗粒：是血小板中可分泌的蛋白质的主要贮存部位。其成分有： β血小板球蛋白（β-TG），是血小板特意的蛋白质，它可抑制血管内皮细胞产生,间接促进血小板聚集和血栓形成，当血小板被激活，β-TG从α-颗粒中释出，PGI 2, 使血浆中含量增高。 血小板第四因子（PF4 ）：是血小板又一特异的蛋白质，其作用是中和肝素的抗凝活性，促进血栓形成。 凝血酶敏感蛋白（TSP）：不是血小板特异，但是促血小板聚集。 纤维连接蛋白（Fn） 血小板源（衍生）生长因子（PDGF）：是一种碱性糖蛋白，来自巨核细胞，其作用是刺激DNA合成和细胞增殖，促进细胞生长；促进细胞内胆固醇酯化，增强细胞对低密度脂蛋白的反应性，最终可导致动脉粥样硬化板块的形成。 δ-颗粒（致密颗粒）：含ATP，较多的Ca2+,80%的ADP贮存在致密颗粒中。5-HT 储存于致密颗粒中，当血小板受到凝血酶刺激时，其释放到血浆，促血小板聚集和收缩。 γ-颗粒（溶酶体）数目较少，含有很多种酸性水解酶及组织蛋白酶，是血小板的消化结构. 其他：线粒体、糖原颗粒、过氧化物酶小体、内质网、小泡、高尔基膜囊 ④血小板特殊膜系统
第三章凝血和止血一般检验 (一)单项选择题(A型题) 1．血小板膜糖蛋白Ⅱb／Ⅲa复合物主要与血小板哪种功能有关（A） (中) A、聚集功能 B、分泌功能 C、释放功能 D、促凝功能 E、血块收缩功能 2．血小板膜糖蛋白Ib、主要与血小板哪种功能有关（C） (中) A、释放功能 B、分泌功能 C、粘附功能 D、促凝功能 E、血块收缩功能 3．血小板的功能不包括（B） (易) A、粘附功能 B、活化因子Ⅻ C、释放功能 D、聚集功能 E、血块收缩功能 4．参与纤维蛋白原变成交联纤维蛋白过程的凝血因子是（E） (中) A、因子Ⅷ B、因子X C、因子Ⅺ D、因子Ⅻ E、因子XⅢ 5．肝素的抗凝作用需依赖（A） (中) A、 ATⅢ B、肝素酶 C、活化蛋白C抑制物 D、α2-巨球蛋白 E、αl一抗胰蛋白酶 6．参与蛋白C激活的物质是（D） (中) A、纤溶酶 B、胰蛋白酶 C、糜蛋白酶 D、凝血酶 E、抗凝血酶
7．在止凝血功能降低、抗凝血功能增强的病理情况下，机体会出现（A） (中) A、低凝状态或出血倾向 B、血栓前状态 C、血栓状态 D、高凝状态 E、机体自动调节不表现病理状态 8．纤维蛋白(原)降解产物的主要生理功能是（C） (中) A、促进血液凝固 B、促进纤维蛋白溶解 C、抗凝作用及抑制血小板聚集作用 D、抑制纤维蛋白溶解 E、促进血液凝固和抑制纤维蛋白溶解 9．纤溶酶原激活物的作用是（E） (中) A、使纤维蛋白原变为纤维蛋白原降解产物 B、使纤维蛋白变为纤维蛋白降解产物 C、使纤维蛋白原变为纤维蛋白 D、抑制纤维蛋白单体变为纤维蛋白 E、使纤溶酶原变为纤溶酶 10．出血时间延长的原因主要是（E） (中) A、因子I减少 B、因子Ⅶ减少 C、因子Ⅷ减少 D、因子Ⅻ减少 E、血小板减少或功能异常 11．出血时间延长常见于（D） (中) A、血友病A、 B、血友病B、 C、 FⅪ缺乏症 D、原发性血小板减少性紫癜 E、过敏性紫癜 12．血小板减少是指血小板数量（E） (中) A、 <80*109／L B、 <100*109／L C、 <110*109／L D、 <120*109／L E、 <150*109／L 13．血块收缩不良主要见于（B） (易) A、巨大血小板综合征
血栓与止血检测 （一、二、三、四） 一、填空题 1、血管的止血作用有、、、。 2、引起血小板减少的原因有、、。 3、活化部分凝血活酶时间（APTT）延长见于、、、、 、。 二、判断题 1、内源性凝血途径首先被激活的凝血因子是凝血因子Ⅲ。（） 2、血管性血友病患者毛细血管抵抗力试验阳性。（） 3、纤维蛋白源时间增加时，凝血时间延长。（） 4、APTT是反映内源性凝血系统各凝血因子总的凝血状况的筛选试验。（） 5、严重的维生素K缺乏可使PT延长。（） 三、名词解释 1、PT 2、APTT 四、选择题 A型题 1、内源性凝血系统的始幼因子是：（） A、组织凝血活酶 B、Ca++ C、Ⅻ因子 D、ⅩⅢ因子 E、Ⅹ因子 2、外源性凝血系统和内源性凝血系统形成凝血活酶都需要什么凝血因子？（） A、因子Ⅶ B、因子Ⅷ C、因子Ⅹ D、因子Ⅺ E、因子Ⅻ 3、下列哪项不是毛细血管脆性试验阳性：（） A、血管壁结构异常 B、过敏性紫癜 C、单纯性紫癜 D、血友病 E、血管性血友病 4、血小板代数增多见于下列哪种疾病：（） A、ITP B、SLE C、AA D、TTP E、慢粒白血病慢性期 5、下列哪项血块收缩试验不减低：（） A、ITP B、ⅩШ因子缺乏症 C、血小板无力症 D、红细胞增多症 E、多发性骨髓瘤 B型题 A、出血时间测定 B、血管性血友病因子抗原测定 C、血小板无关免疫球蛋白测定 D、凝血时间测定 E、血浆纤维蛋白肽测定 6、了解内源性凝血系统（） 7、用于ITP的诊断（） 8、用于VWD的诊断（） 9、了解血小板的功能和数量（） C型题 A、血管性血友病 B、原发性血小板减少性紫癜 C、两者均有 D、两者均无 10、毛细血管脆性试验阳性（） 11、出血时间延长（） 12、血小板相关免疫球蛋白增高（） 13、凝血时间延长（） A、血友病甲 B、血管性血友病 C、两者均有 D、两者均无 14、APTT延长（） 15、PT延长（）