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中外医疗
ＣＨＩＮＡ ＦＯＲＥＩＧＮ ＭＥＤＩＣＡＬ ＴＲＥＡＴＭＥＮＴ 中外医疗
２０１０ ＮＯ．２０
ＣＨＩＮＡ ＦＯＲＥＩＧＮ ＭＥＤＩＣＡＬ ＴＲＥＡＴＭＥＮＴ
基 础 医 学
鼻咽癌起病隐匿、早期症状不典型,且易发生淋巴结转移,能否早期诊断是决定其预后的关键因素,目前有关其发生和转移的分子机制尚未完全阐明。MCM2在DNA 复制过程及细胞周期中起着重要作用。许多研究显示微染色体维持蛋白(minichromosome maintenance protein)表达阳性是细胞具有增殖能力的标志,细胞已退出增殖周期则不表达,意味着其已分化成熟或进入了G0期,这对肿瘤的早期诊断和预测提供了一个新的极好的标记物。我们采用免疫组织化学(S-P)法检测75例鼻咽部不同病变组织标本的MCM2蛋白表达情况,研究细胞增值与鼻咽癌发生、发展的关系,探讨其在鼻咽癌早期诊断中的价值。ｌ 资料与方法1.1 一般资料
选取我院病理科2002～2007年活检石蜡标本共75例。经病理证实为:鼻咽癌60例(均为鳞状细胞癌)、鼻咽正常黏膜15例。60例鼻咽癌标本均为未经放化疗的活检标本。男47例、女13例;年龄29～71岁,平均48.6岁。根据UICC1997年TNM 分型分期标准进行临床分期:Ⅰ期12例、Ⅱ期11例、Ⅲ期25例、Ⅳ期12例,伴有淋巴结转移48例、无淋巴结转移12例。1.2 试剂
浓缩型鼠抗人MCM2单克隆抗体购自美国SantaCruz 公司,工作浓度为1∶150;鼠免疫组化二步法试剂盒(K IT29801)、DAB 显色试剂盒均购自福州迈新公司。1.3 方法
石蜡块4μm 厚连续切片,按鼠免疫组化二步法试剂盒说明书进行免疫组化操作,抗原修复采用高压加热法,用已知鼻咽癌阳性切片作阳性对照,阴性对照采用PBS 液代替一抗,均做HE 染色对照。1.4 结果判定
MCM2阳性表达是指细胞核染成棕褐色或棕黄色。并计算MCM2标记指数:选5个背景最清晰、阳性细胞最密集区域(低倍镜下),计算每个区域100个细胞中阳性细胞数(高倍镜下),取5个区域阳性细胞数平均值为标记指数,进行评级,0～5％为阴性、6%～25％为I 级、26％～50％为Ⅱ级、51％～75％为Ⅲ级、75％～100％为Ⅳ级。1.5 统计分析
统计分析采用SPSS 11.0统计软件包作χ2检验,检验水准取α＝0.05。２ 结果
2.1 MCM2在不同鼻咽部组织中的表达特征
MCM2在正常鼻咽部黏膜中基本不表达,或仅在黏膜基底层有增殖能力的少数细胞中表达;在鼻咽癌中其表达分布多呈弥散
性分布,失去规律。MCM2蛋白在正常鼻咽部黏膜、鼻咽癌组织中的阳性率分别为13.3％(2/15例)、81.7％(49/60例),鼻咽癌中MCM2的表达明显高于正常鼻咽部组织(P <0.01)。2.2 MCM2表达与鼻咽癌主要临床病理参数间的关系
MCM2在高、中、低分化鼻咽癌的表达率分别为:58.3％、80.0％、95.7％,在Ⅰ～Ⅱ期和Ⅲ～Ⅳ期的表达率分别为:65.2％、91.9％,在有、无颈部淋巴结转移患者中的表达率分别为:85.4％、66.7％,其差异均有显著性(P <0.05)。３ 讨论
许多研究证实MCM2是真核细胞DNA 复制起始的许可因子,是启动DNA 复制的重要因子,DNA 复制完成即从染色体脱离,这对DNA 复制起始的调控十分重要,保证了染色体在每一个细胞周期只复制1次。而且只有在处于增殖活动周期的细胞中MCM 蛋白才表达,这提示其可作为肿瘤细胞的特殊标记物。我们应用MCM2单克隆抗体检测不同鼻咽部组织标本,统计分析显示,鼻咽癌中MCM2的表达明显高于正常鼻咽部组织(P <0.01),低分化的鼻咽癌其表达增强、增多,标记指数也高于高分化者,有显著性差异(P <0.05),这提示低分化的鼻咽癌中MCM2量较多,DNA 复制起点也多,细胞着色也就愈深,故细胞核中MCM2阳性表达强度可反映出细胞DNA 复制的活跃程度[1]。这符合肿瘤增殖与分化的一般规律。根据其标记指数及表达特点,能较好地区分不同分化程度的肿瘤组织和正常组织,表明MCM2可作为鼻咽癌可靠的肿瘤标记物,这对鼻咽癌的早期筛选有很大帮助。能更好指导临床上鼻咽癌的早期诊断、监测复发等。
同时,本结果还提示鼻咽癌各临床分期及有无淋巴结转移间MCM2表达强度亦有明显差异性(P <0.05),Ⅲ、Ⅳ期的鼻咽癌的标记指数明显高于Ⅰ、Ⅱ期,有淋巴结转移的标记指数也明显增高,可见MCM2与鼻咽癌病程密切相关。随肿瘤分化的降低与临床分期的进展,MCM2表达率升高且标记指数也逐步升高。这表明MCM2标记指数能较好地反映鼻咽癌的临床病理特征和细胞增殖分化水平,可作为判断鼻咽癌恶性程度的指标,并能使鼻咽癌组织学分期更客观。
综上所述,鼻咽癌的发病机制涉及MCM2的异常,其能较好地反映癌细胞的增殖规律,可鉴别非癌细胞和癌细胞,与鼻咽癌的发生及临床进展密切相关。参考文献
[1]
Maiorano D,Lutzmann M,Mechali M.MCM proteins and DNA replication.Current Opinion in Cell[J].Biology,2006,18(2):130～136.
【收稿日期】 ２０１０－０４－０１
MCM2蛋白在鼻咽癌中的表达及临床意义
蔡开贵 胡艳 汤素琴 黄玉梅 刘鹤梁 朱锦洲 江全胜（广州市花都区人民医院耳鼻咽喉科 广东广州 ５１０８００）
【摘要】目的 探讨微染色体维持蛋白2(MCM2)与人鼻咽癌发生和发展的关系。方法 应用免疫组织化学(S-P)法检测60例鼻咽癌、15例鼻咽正常黏膜标本中MCM2的表达水平。结果 人鼻咽癌组织中MCM2阳性率为81.67％,显著高于鼻咽正常黏膜组织13.33％(P <0.01)。结论 MCM2能很好的反映鼻咽癌细胞的增值状态,对判断人鼻咽癌的发生和发展及预后具有一定的临床意义。【关键词】鼻咽癌 微染色体维持蛋白2【中图分类号】R735.1【文献标识码】A 【文章编号】1674-0742(2010)07(b)-0045-01