泰国试管婴儿冷冻胚胎能保存多久？
泰国试管婴儿技术通过促排卵药物诱发女性多发排卵，取得较为理想数目的卵子，之后与精子配成受精卵，直至发育成胚胎。一般一次移植1-2枚胚胎，那剩余的胚胎即可冷冻起来以备不时之需。通俗来讲，胚胎可以在受精后的任何一个阶段用于冷冻。那么，泰国试管婴儿冷冻胚胎保存期间会不会弄混？冷冻胚胎能保存多少年呢？
试管婴儿冷冻胚胎过程安全吗？胚胎会不会弄混淆？
试管专家解释说，现在的技术完全可以保证胚胎在冷冻下不会受到损伤，即使解冻复苏后也不会影响胚胎的活性。冷冻时，通过医疗专用的防冻剂，细胞周围和内部就不会因水分的溢出而产生冰晶，细胞因此不会受到损伤，等到细胞内的水分完全被冷冻保护剂取代以后，把胚胎装入细小的麦管或小容器.然后在计算机的控制下，将其温度从室温逐渐降到零下35~40℃左右.然后将装有胚胎的麦管直接放到零下196℃的液氮罐中长期保存。
在液氮罐内，每个容器上都标明患者的姓名、胚胎的数量、发育阶段、冷冻的时间等。因此，患者之间的胚胎是不会混淆的，完全能可以打消不必要的担心。
冷冻胚胎能保存多少年呢？
理论上讲.由于胚胎在零下196℃的环境下，代谢完全停止，只要环境不发生改变，理论上来讲能够永久保存。但是胚胎冷冻技术发展至今二十余年，胚胎的存活状况，暂且无法得出结论。
据报道.在以色列，一名39岁的妇女移植了她冷冻保存12年的胚胎后，出生了正常的婴儿。这也是迄今报道的最长期保存的冷冻胚胎移植的试管婴儿出生的例子。也许有些胚胎已经冷冻保存了更长的时间，但却仍然没有被解冻移植，因此，它们的存活状况暂且无法得知。
试管婴儿全流程和注意事项（必读篇） 仔细阅读次篇文章，对成功会有很大帮助。以下内容由唯美加海外整理提供。 试管婴儿流程分为以下七个部分： 前期检查→制定方案→建档→进入周期→取卵→移植→验孕 前期检查： 女方在辅助生殖技术前所需的检查项目 支原体，衣原体，淋球菌、白带常规、宫颈刮片、子宫+双附件B超、尿常规、心电图ET 预试验，空腹抽血查传染病系列（乙肝、丙肝、梅毒、艾滋病）加血型，肝功肾功血糖血沉B超下通液或输卵管碘油造影、染色体、心电图，胸片、凝血功能 促黄体生成素(LH),促卵泡刺激素(FSH),泌乳素(PRL),睾酮(T),孕酮(P),雌二醇（E），抗子宫内膜，抗体抗精子抗，抗心磷脂抗体、抗卵巢抗体、解脲支原（UU）、沙眼衣原体（CT）、病毒四项（包括巨细胞病毒、风疹病毒、弓形体病毒、单纯疱疹病毒）、宫探 ①必须月经期检查的项目：做性激素六项检查,包括：促黄体生成素(LH),促卵泡刺激素(FSH),泌乳素(PR L),睾酮(T),孕酮(P),雌二醇（E） ②必须月经干净检查的项目：白带常规，支原体，衣原体，淋球菌，宫颈刮片， 子宫+双附件B超，尿常规。子宫输卵管造影在月经干净3-7天内进行③其他检查项目与月经周期无关 男方检查项目主要包括查精液和抽血两部分： ①抽血项目包括：HIV，RPR，HCV，乙肝两对半，肝肾功能，血型②精液检查：精液分析（常规和形态分析），支原体，衣原体； ③若男方精液有异常还需增加生殖器B超，内分泌检测（FSH,LH,PRL,T）④检查时间：精液分析需要禁欲3-5天，支原体和衣原体无此要求 一般两个人检查加起来费用在3000左右宫腔镜的费用在1500左右腹腔镜的费用在10000左右宫腹腔镜的费用在15000左右 月经来潮24小时内取子宫内膜（必要时）宫腔镜检查（必要时 染色体检查（必要时）：适用于原发性闭经、习惯性流产、严重男性少、弱、畸精症 无精症等患者 其他：IVF/ICSI还需增加尿常规，心电图，胸片 人工授精者(AIH和AID)必须查输卵管的通畅情况，常用的检查方法有子宫输卵管造影，宫腔镜下通液等(具体检查方法由医生根据病情决定). 。 注意：在国内做试管第一次检查记得带上三证：结婚证、计划生育证明（有效期是半年）、身份证。在泰国做试管的话需要提供护照。 制定方案： 所有检查做完后把报告给医生后，医生会当面建议初步制定方案了试管移植方案分： 1、长方案（又分为长效长方案和短效长方案） 长效长方案：排卵后黄体中期一般是月经第21天开始使用降调药物，打一针长效达菲林3.75mg/支， 一般是两个人分针打，月经第三天去医院抽血、B超，降调成功的话可以开始促排，促排期间会定时去医院B超监测卵泡的大小，等卵泡快成熟时就可以打夜针准备取卵了（适合卵功能好的女性）
试管想要一次成功，这几件事就千万别做！ 泰国试管婴儿技术帮助很多不孕不育的家庭实现了生儿育女的梦，因此也让更多同样有着不孕困扰的家庭受到鼓舞，寄希望于泰国试管婴儿技术。可是试管的成功也是一概率事件，影响试管成功的因素也是多方面的。例如说试管期间有些事情就不能做，做了可是会大大降低成功率的，到底是哪些事情呢？一起来看看吧！ 1、促排、取卵及移植后不宜同房 促排期间，可以说也是养“卵”蓄锐的一个阶段，这个阶段如果同房会影响激素的分泌，不建议在此阶段同房。尤其是到了促排后期，同房可能会导致提前排出卵子，从而影响之后获得成熟卵子的数量，导致促排失败。 取卵手术是一种有创手术，并且卵巢也会受到一定的刺激，如果在此期间同房，很容易造成感染。 胚胎移植后不宜同房，这是胚胎着床和发育的阶段，加上女方身体比较敏感和脆弱，同房很容易造成着床失败。并且在移植成功后，孕早期的三个月也是需要禁止同房的，头三个月是危险期，同房容易造成胎停和流产。 2、抽烟喝酒
香烟烟雾中包含超过4000种有毒化学物质。吸烟会延长自然受孕女性获得妊娠的时间、加速窦卵泡的损耗导致提前绝经。对于行IVF治疗的女性来说，吸烟可导致成熟卵泡数减少，受精率及着床率下降，增加自然流产率。 酒精同样可能会导致生育力下降，在一些临床对照研究中发现，接受IVF 治疗的男女任何一方饮酒都会影响妊娠结局，女方饮酒会降低获卵率、临床妊娠率和增加流产率，而男方饮酒将增加流产几率，降低活产率。 因此在整个试管过程中，男女任何一方都需要戒烟戒酒。 3、滥用药物 一些药物是孕妇慎用或者禁用的，可能会对胎儿产生不良影响甚至有致畸或者流产的危害，还有一些药物会影响男性精子质量，因此在试管过程中，不可擅自用药。如果身体出现不适，既不要忍着拖着不去就诊，也不要自己随便去买药对付对付。还是得去正规医院就诊，并且及时告知医生有备孕或者怀孕的情况。 4、熬夜 熬夜除了让人疲惫不堪，还会扰乱人正常的内分泌，影响激素水平。在试管婴儿助孕过程中，准妈妈保持良好的睡眠，规律作息是很有必要的。5、接触毒害物质
优佳国际总结了以下几点： 1、年龄 年龄是试管决定Iv治疗与否的重要因素，据国内外文献报道，35岁以上妇女生育能力呈直线下降趋势，年龄在35岁以下妊娠率可达50-55%, 35-39岁妊娠率可达35-40%, 40-45岁妊娠率约为10-20%，年龄大于45岁的患者，不仅妊娠率极低，且胚胎的染色体易发生异常，胎儿畸形率明显增高。IVF治疗中高龄人群流产率明显增加，早产、死胎的发生率也高于年轻孕妇。另外，随着年龄增大，卵巢储备下降，获卵数减少，也是影响决定IVF治疗妊娠的因素之一。 2、不孕因素 子宫畸形、严重的子宫内膜异位症、严重少弱畸精症、卵子异常者等，在IV治疗中的失败率较高。另外夫妇其中一方或双方染色体异常，他们在IVF治疗中的失败率和流产率都较染色体正常的夫妇明显增高。 3、子宫内环境 子宫内膜是胚胎着床的场所，子宫腺肌症、子宫内膜炎、子宫内膜息肉、宫腔粘连或其它影响子宫环境的病变都可能导致胚胎不能着床而影响IVF治疗的成功率。 4、输卵管积水 输卵管炎症造成伞端粘连，各种来源的液体积聚输卵管形成积水。积水内含有大量的炎症细胞和毒素可毒害和杀伤胚胎，积水进入宫腔内也可破坏子宫内膜坏境，并对胚胎有机械冲刷等作用，以上因素均可影响胚胎的种植。统计发现，输卵管积水未行输卵管手术者IV 治疗的妊娠率约为25%，而经输卵管手术者的IV治疗妊娠率可达50%，所以术前发现输卵管积水者建议手术处理后再行IVF治疗。 手术处理的方法有三种: 1)输卵管造口术:可暂时解除积水的影响，但术后积水复发率>50%; 2)输卵管切除术:可彻底解决输卵管积水，但术后可伤及卵巢周边血管，可能会影响卵巢功能; 3)输卵管峡部结扎术:可彻底避免积水流入宫腔，手术创伤小，不影响卵巢功能储备。 另外，输卵管积水最常见于排卵期，因此，对于有输卵管通而不畅或输卵管造口病史的患者，术前可能需要多次B超监测输卵管积水的存在。在促排卵过程中，由于卵泡发育，体内雌激素水平上升，输卵管粘膜分泌旺盛，输卵管积水量可能增加，严重影响胚胎的种植，建议冷冻全部胚胎并取消新鲜周期胚胎移植，行手术处理后再移植冷冻胚胎。 5、胚胎质量 胚胎质量是决定IVF治疗成功与否的重要因素。当精、卵结合障碍，发生不受精或受精后不分裂，则不能形成胚胎。按照胚胎的评级方法，1-2级属于优质胚胎，移植后的着床率及妊娠率均高于非优质胚胎。但目前胚胎评级还只是形态学上的判断，并不能准确预测其发育潜能。因此，移植非优质胚胎也有一定的成功率。 6、心理状态 患者的心理和精神状态是影响IVF治疗成败的一个重要因素。心理压力较重的妇女，内分泌会受到影响，血管长期处在收缩状态，影响子宫、卵巢局部的血流，且神经系统的紧张使神经介质释放出现异常，造成子宫、输卵管肌肉收缩紊，造成胚胎不能着床而导致治疗失败。所以解除心理压力，医患之间充分交流，夫妇互相体谅和鼓励是非常重要的。 7、卵巢储备功能 卵巢储备功能是影响IVF治疗成功率的重要因素。卵巢内小卵泡的数目和卵巢的体积是卵巢储备的评估指标。当女方年龄偏大或以往做过卵巢囊肿剥离手术、盆腔严重粘连或其
合同登记编号： 怀生健康泰国试管婴儿技术咨询合同 项目名称： 委托方： （甲方） 受托方： （乙方） 签订地点：省（市）市（县、区）签订日期：年月日 有效期限：年月日至年月日
填表说明 （提示：请认真阅读本说明，在合同签订时不必打印本说明） 一、“合同登记编号”由技术转移办公室填写。 二、技术咨询合同是指当事人一方为另一方就特定技术项目提供可行性论证、技术预测、专题技术调查、分析评价报告等所订立的合同。 三、咨询内容、要求和方法务必详实，突出技术性内容。 四、技术情报和资料的保密 包括当事人各方对核心技术（包括情报和资料）的保密内容、期限和泄漏技术秘密应承担的责任。 五、验收、评价方法，包括咨询工作成果验收标准与方法、验收时间和地点。 六、双方签字盖章后生效：主要是指合作双方均是中国境内的法人所签的技术合同；涉外技术合同尊重国际惯例，外方签字即可；国内自然人签订的技术合同，个人签字（盖章）也即生效。 七、其他 合同如果是通过中介机构介绍签订的，应将中介合同作为本合同的附件。如双方当事人约定定金、财产抵押及担保的，应将给付定金、财产抵押及担保手续的复印件作为本合同的附件。 八、委托代理人：签订技术合同的任何一方如只有委托代理人签字，则须出示法定代表人委托书。 九、本合同书中，凡是当事人约定无需填写的条款，在该条款填写的空白处划（/）表示。
依据《中华人民共和国合同法》的规定，合同双方就 项目的技术咨询，经协商一致，签订本合同。 一、技术咨询的内容、形式及要求 （一）技术咨询内容： （二）技术咨询形式： （三）技术咨询要求： 二、履行的期限、地点和方式 （一）履行期限、地点 本合同自年月日至年月日在 （地点）履行。 （二）履行方式（包括成果提交方式、时间、内容及数量） 三、甲方的协作事项 在合同生效后（时间）内，甲方应向乙方提供下列资料和
家畜胚胎超低温冷冻保存的研究进展 蔡元1、2，张凤鸣1、2，潘红梅1、2、，陈四清1、2 (1.重庆市畜牧科学院重庆荣昌402460 .2.重庆市养猪工程技术研究中心重庆荣昌402460) 摘要：本文对家畜胚胎冷冻保护液的成分、冷冻方法、胚胎解冻方法与冷冻保护剂的脱除及最新研究进展进行了综述。 关键词：家畜；胚胎；冷冻保存 Present Research Advance in Cryopreservation of Livestock Embryos Cai yuan1、2, Zhang fengming1 2 ,Pan hongmei1、2 ,Chengsiqing1 2 (1.Chongqing Institute of Animal Science ,Chongqing Rongchang 402460 2.Chongqing Swine engineering Research，Chongqing Rongchang 402460) Abstract： Advances on cryoprotextive solution, freezing way, thaw way and the elimination of cryoprotective solution and recent situation in livestock embryos were reviewed in this paper. Key words：Livestock；Embryo；Cryopreservation 家畜胚胎的超低温冷冻保存技术不仅为动物种质资源的保存和良种家畜的国际交流提供了简单有效的手段,而且还是胚胎移植、体外受精、转基因和克隆等胚胎生物技术不可分割的组成部分。自从1972年,英国学者Whittingham等人首次冷冻保存小鼠胚胎获得成功后[1]，到目前已经在20多种哺乳动物上获得成功，奶牛、黄牛、山羊、绵羊、马、兔和小鼠等的冷冻胚胎已得到较广泛的使用[2-3]，特别是牛和羊的胚胎冷冻保存研究进展很快，其冷冻胚胎已经走向商品化应用。目前人们对冷冻保存原理、冷冻保存的因素和冷冻方法进行了广泛的研究并取得了巨大进步。 1、抗冻保护剂和冷冻溶液 在哺乳动物的胚胎冷冻过程中，加入抗冻保护剂的目的是为了防止冰晶的形成。抗冻保护剂常可分为三类：(1)细胞内液抗冻保护剂。常用低分子量可渗性物质，例如甲醇、乙二醇(EG)、丙二醇(PG)、甘油(G)、二甲基亚砜(DMSO)等；(2)细胞外液抗冻保护剂。常用低分子量不可渗性物质，例如半乳糖(Galactose)、蔗糖(Sucrose)、海藻糖(Trchaose)、聚蔗糖(Ficoll)等。（3）大分子量不可渗性物质，例如聚乙烯吡咯烷酮(PVP)，聚乙烯醇(PVA)，羟乙基淀粉及其它一些聚合物。 在实际应用中，缓慢冷冻法经常只使用一种抗冻保护剂，如甘油或乙二醇等，而快速冷冻和玻璃化冷冻常应用多种抗冻保护剂，如甘油和丙二醇、甘油和乙二醇或者乙二醇和丙二醇，再加入葡萄糖、蔗糖或半乳糖。甘油可调节细胞脱水并保护蛋白结构，而糖类，例如海藻糖可以保持膜结构，甘油本身并不能保持细胞膜结构，而且在高浓度和高温下可以诱发膜融合，因此解冻后需尽快除去甘油。这些不同低温保护液的特性表明，他们是以不同方法来保持胚胎细胞免受冷冻损伤，有效的低温保护液应将各种低温保护剂
玻璃化冷冻法保存人类囊胚的临床应用 戴志俊季钢张芳芳张奕 （合肥市妇幼保健院，合肥230001，安徽） 摘要：目的：探讨玻璃化冷冻法保存人类囊胚的临床应用效果。方法：回顾性分析2011年1月～10月在我院生殖中心行玻璃化冷冻解冻囊胚患者共12个周期的结局。结果：玻璃化冷冻解冻共21枚胚胎，存活21枚（存活率100%），共解冻12个周期，均有胚胎移植，获得临床妊娠5例（妊娠率41.67%），着床率23.81%（5/21）。结论：玻璃化冷冻法是保存人类囊胚的一种有效方法。 关键词：囊胚，玻璃化，冷冻保存，人类 Clinical Application Of Vitrification For Human Blastocysts Dai Zhijun, Ji Gang , Zhang Fangfang , Zhang Yi （Hefei Maternity and Child Health Hospital,Hefei 230001,Anhui）Abstract:Objective: To examine the clinical value of vitrification for human blastocysts. Methods: Retrospective analysis of 12 patients who conduct embryos vitrification from Jua.2011 to Oct.2011. Results: All of the 21 blastocysts were thawed and survived , survival rate was 100%(21/21);5 cycles of 12 cycles got clinical pregnancy after transferred, clinical pregnancy rate were 41.67% ,implantion rate were 作者单位：合肥市妇幼保健院 安徽医科大学妇幼保健临床学院安徽230001
超过40岁试管婴儿助孕成功率多高？ 有研究显示，40岁以后的女性，每提早一年行试管婴儿治疗，其预期成功率显示出明显的提高。如果采用人工授精，成功率只有1%左右。因此，40岁以上不孕女性请尽快选择泰国试管婴儿助孕。 试管婴儿是迄今为止助孕技术中最为复杂的医疗手段，通过一系列的促排卵、取卵、胚胎培养与移植技术来完成。年龄是试管婴儿助孕结局的独立预测因子。虽然试管婴儿治疗成了高龄不孕女性的最佳选择，但超过40岁的女性卵子质量显著下降，年龄越大，卵巢储备越少，促排卵治疗获得的有效卵泡数就会越少。 尽管对高龄不孕女性的促排卵方案有了不断的改进，如采用微刺激促排卵或自然周期，辅助抗氧化剂和生长激素等，但优质卵子获取仍是高龄女性助孕的最主要的困难。年龄与卵子质量成反比已成为生殖医学界不可辩驳的事实。 高龄妇女卵子的线粒体数量和功能异常。线粒体为细胞内的能量来源，为卵子的成熟提供必须的能量。它的老化将导致卵子或胚胎的染色体非整倍体的增加，胚胎不能发育为胎儿。 有报道显示，年龄超过40岁时，有一半以上的胚胎因为染色体非整倍体而导致怀孕失败、流产或胎儿异常，并且随着年龄增加此比例将进一步上升。年龄一旦达到42岁，则行试管婴儿治疗周期中有可移植胚胎的周期则显著下降近一半，这意味着高龄妇女取卵
后，有超过一半的人没有可用的胚胎，或者即使获得了胚胎，也由于年龄的因素导致胚胎质量和子宫的容受性下降，妊娠机会极低。 此外，随着年龄增加，子宫内膜腺体上胶原含量增加，对性激素反应有不同程度下降，使蜕膜容积减少，子宫内膜容受性下降。这些对试管婴儿的助孕结局均产生负面影响。 有的女性还会不甘心，难道我只能做泰国试管婴儿了吗？这倒不一定，试管婴儿只是主动积极争取机会怀孕，如果这个年龄还一味地期待自然怀孕，就像守株待兔一样，万一等不到怀孕，卵巢储备已经衰竭，到时连做试管婴儿的机会都没有了。
胚胎冷冻保存技术 摘要; 胚胎冷冻保存技术可使胚胎移植不受时间地点的限制，从而达到提高胚胎移植效率的目的。研究和优化胚胎冷冻保存技术对胚胎工程的发展有重要的意义。 关键词：胚胎冷冻保存 为便于长途运输和随时供移植使用，将那些６～７日龄已有２０～３０个细胞的新鲜活胚胎（或分割后的半胚胎、１／４胎）在－１９６℃的超低温下冷冻贮存就是胚胎冷冻保存技术。这是在冷冻精子的技术基础上进一步发展起来的一项新技术。目前用冷冻胚胎移植的成功率约为鲜胚胎的７０％～８０％，胚胎冷冻保存技术可使胚胎移植不受时间地点的限制，从而达到提高胚胎移植效率的目的。 现有的胚胎冷冻保存方法有四种： 一、常规冷冻法 常规冷冻法：也叫慢速冷冻法、逐步降温法。将采集到的胚胎用培养液洗涤后置入有不同冷冻保护剂(甘油或二甲亚枫(DMSO)等)浓度的三种冷冻液中(冷冻液浓度由低到高，最终浓度1．4M)，每种冷冻液中平衡5分钟，然后将胚胎和冷冻液装入细管中封口、标记，放入冷冻仪中进行冷冻。冷冻速率先以1～3~C／分下降至-6～-7℃，在此温度诱发结晶，平衡10分钟，然后，以0．3℃／分的速率降温至-35～_38℃，之后投入液氮中保存。胚胎解冻后，需按胚胎进入冷冻液时的相反浓度，即从高到低浓度脱除冷冻保护剂，每步5分钟，最后置入含20％血清的PBS保护液中洗涤3次，彻底脱除冷冻保护剂。或者将解冻后的胚胎放入0．5M(或1．0M)的蔗糖溶液中平衡10分钟，再用上述PBS液洗涤3次。 二、一步冷冻法 一步冷冻法：也叫一步细管法。该方法是由慢速冷冻法改进而来，细管内的冷冻液和蔗糖液是分开的，因此，在细管内用蔗糖液可一步脱除甘油抗冻剂，从而利于在生产中推广应用。 三、程序冷冻法 程序冷冻法主要采用低浓度冻结保存剂梯度脱水,经程序冷冻仪缓慢降温。主要操作步骤包括:将细胞顺序放入一系列逐渐增加保存剂浓度的溶液中梯度脱水,置入程序冷冻仪快速降温至-6℃植冰(人工诱导冰晶形成),然后程序冷冻仪缓慢降温至-30℃~-80℃后液氮贮存。 程序冷冻法主要使用渗透较慢的低温保护剂，如乙二醇(EG)、丙二醇(PG)、甘油(G)、二甲基亚砜(DMSO)，使冷冻保护剂充分渗透人胚胎细胞内，平衡后，利用程序降温仪缓慢降温，最后投入液氮保存。程序冷冻法采用较低浓度的冷冻保护剂，对胚胎毒性损害小，解冻后存活率较高。但因其操作繁琐，降温速度慢，致使所需时间长，需要特殊的降温装置，在不具备实验条件的场所不能使用此法进行胚胎冷冻。目前国内外均较少使用。 通常在程序化慢冷的液体中，各含有一种细胞渗透性冷冻保护剂和一种非细胞渗透性保护剂，于室温下，在低浓度的冷冻保护剂溶液中预平衡，然后放置在终浓度的冷冻液中。在冷冻仪内于预设的程序下降温标本，经过冷冻保护剂的处理后，胞内渗透压增高，意味着细胞内液冰点下降。由于细胞自身的特性，
药品器材清单 PMSG 孕马血清促性腺激素 hCG 人绒毛膜促性腺激素 DPBS 杜氏磷酸缓冲液 M16 体外培养液 EG 乙二醇 蔗糖 塑料细管 1ml注射器 35mm培养皿若干 二氧化碳培养箱 小鼠胚胎的获取 控光（14h光照，10h黑暗）饲养1-2周后的4-6周龄小白雌鼠，腹腔注射10 IU/只PMSG，48h后腹腔注射10 IU/只hCG。注射hCG后（计时为0h）当晚与雄鼠（≥8周龄）合笼（雌：雄=2:1或1:1）。次日早晨检查阴道栓，见栓雌鼠于72-82h颈椎脱臼处死，采集桑椹胚。在DPBS中洗净后移入M16培养基，置于5 %CO2,95 %空气,相对湿度100 %的二氧化碳培养箱中待用。 小鼠胚胎的玻璃化冷冻 平衡液EG10，见附录溶液的配制。 玻璃化溶液EFS40 ，见附表2。或者EG40，亦见附录溶液的配制。 解冻稀释液用DPBS稀释而成的0. 5mol/L蔗糖溶液。 将室温调至25℃,经1～2小时将溶液及用具充分平衡后，用0. 25ml的塑料细管(Flance) 按顺序吸入解冻稀释液5cm———空气1㎝——1.5cm玻璃化溶液。 用吸管将胚胎移入平衡液平衡5分钟,而后导入细管内的玻璃化溶液中平衡30秒。这30秒接着吸入空气1cm——吸满解冻稀释液，封口后直接投入液氮中保存。 小鼠冷冻胚胎的解冻 将冻好保存于液氮中的细管,取出后直接投入25℃水中快速解冻。当解冻稀释液部分由乳白变为透明时取出,用吸水纸将细管水珠拭净,剪断细管两端的栓塞后,用含有解冻稀释液(0. 8ml)的注射器(带16号针头),将细管内容物冲洗于表面皿中，轻轻摇匀,置于实体显微镜下回收胚胎。回收的胚胎于解冻稀释液中平衡5分钟,以便脱出细胞内部乙二醇,再用PBS洗净后,移入M16溶液中于5 %CO2,95 %空气,相对湿度100 %的二氧化碳培养箱中培养。 小鼠胚胎的发育能力判定 体外培养回收的胚胎在M16中培养48小时以内恢复到囊胚或继续发育的胚胎视为有发育能力胚胎。 胚胎移植解冻后的胚胎,约经3小时培养,选择外形良好的胚胎移植于与结扎输精管的公鼠交配后即假妊娠第3天受体鼠的子宫中,一侧5～7枚,每只受体10～14枚胚胎为宜。妊娠19～22天观察产仔情况。
泰国试管婴儿OR中国试管婴儿，哪个更强 试管婴儿是现代社会的一种特殊的生殖技术，是把精子跟卵子取到体外进行结合，进行胚胎培养，养成健康的囊胚，最后移植到子宫内。这些囊胚也是在妈妈的子宫内长大，经过十月怀胎才来到这个世界上。 泰国的试管婴儿在近几年来风靡中国，许多国内的不孕不育家庭或者有特殊要求的夫妻都赴泰去做试管婴儿，那对中国人来说，泰国的试管婴儿是不是真的比中国的强呢？到底强在哪些方面呢？泰嘉运健康小编为你解答 1.成功率 国内比较有名气的医院的成功率是35% 泰国许多做试管婴儿医院的成功率是70%左右 2.技术 国内目前都只实施第一代、第二代试管婴儿技术，第三代较少。 泰国各大医院第一代、第二代、第三代都可以实施，第三代称为PDF技术，对移植前胚胎进行基因检测，诊断是否有异常，筛选出健康的胚胎移植。 3.选择性别 在国内，我国明令规定非医学需要或罕见遗传病，不可对试管婴儿进行性别筛选。 在泰国，选择性别是合法的。 4.证件 国内各大医院做试管都需要3症，即准生症、结婚症、夫妻双方身份证，缺一不可。 泰国医院只需要结婚证即可。 5.医院服务 国内的各大医院，排队取号难已经是众所周知的事情了，而且采取的是流水线的治疗方式，治疗过程要经过几个医生完成，无法做到完美衔接治疗方案。 泰国是采取预约制，医生是是一对一的治疗方式，从检查到取卵移植，都是由一个医生来完成，医生更了解患者的情况，也可以与医生完美的沟通。让过程变得更理想，结果更称心。 以上这几点，充分说明了中国与泰国试管之间的差别。最大的亮点在于：泰国第三代试管婴儿，可以筛选基因，选择性的植入胚胎，要男要女、要双胞胎、要龙凤胎，只要你所想，泰嘉运都可以如你所愿。
哺乳动物胚胎冷冻保存综述 09动物生物技术2班 200930380216 宋骥晨 摘要：哺乳动物胚胎冷冻保存效果受冷冻保护剂、冷冻方法、解冻方法等多种因素影响, 其中冷冻方法是一个关键性因素。目前胚胎冷冻方法主要有常规慢速冷冻法和玻璃化冷冻法两种。常规慢速冷冻法是指利用甘油、乙二醇等做冷冻保护剂通过缓慢降温的方式进行胚胎冷冻; 玻璃化冷冻法是指利用高浓度的冷冻保护剂通过快速降温的方式进行胚胎冷冻。与常规慢速冷冻法相比, 玻璃化冷冻法简化了操作过程, 大大缩短了操作时间, 不需昂贵的程序控制冷冻仪。 关键词：胚胎; 冷冻保存; 冷冻保护剂; 冷冻; 解冻 胚胎冷冻保存是采取特殊的保护措施和降温程序使胚胎在 -196℃温度下停止代谢活动, 而升温后又不失去代谢能力的一种长期保存技术, 是实现动物胚胎生产技术实用化和商业化的重要保证。1972年, whittingham等首先发明了慢速冷冻法, 成功地保存了小鼠胚胎, 并在解冻后移植产下了后代。这种方法经过30多年的发展, 冷冻效果已基本稳定, 迄今为止, 已有多种动物胚胎经常规冷冻、解冻后移植至受体得到后代。 1.胚胎冷冻保存原理 胚胎细胞是发育中的细胞, 细胞内水分含量达到80%以上, 如
果不经保护, 冷冻时细胞内部就会形成冰晶, 破坏蛋白质的结构使其发生不可逆的变化, 从而导致胚胎死亡。常规慢速冷冻法的原理是通过加入低浓度的防冻剂, 缓慢降温将胚胎内的水分在冻结前脱出, 阻止冷冻过程中形成有害冰晶而造成胚胎损伤。将胚胎放到含有渗透性防冻剂的溶液中,防冻剂使胚胎细胞内的水分能够在-10℃以上不冻结并且能替换出部分水分。随着降温的进行, 细胞外液开始形成冰晶, 细胞外液浓度变高, 由于渗透压的原理使细胞内的水分开始脱出。为了保证细胞外液冰晶形成的时间总是早于细胞内液, 大多数冷冻程序采用植冰的方式来诱发细胞外液冰晶的生长, 植冰通常在-5℃到- 7℃进行。缓慢降温使细胞内的水分有更多的时间在冻结前脱出。需要指出的是, 胚胎在冷冻过程中不可避免地要形成冰晶。关键是冰晶的大小和数量能否造成胚胎的损伤。玻璃化冷冻保存的原理是在足够低的温度下或采用高浓度的防冻剂使冷冻过程中形成玻璃样物质减少细胞内外冰晶的形成。总之, 无论采取何种冷冻方法, 胚胎冷冻保存的原理都是阻止冷冻、解冻过程中细胞内形成致死冰晶。 2.抗冻保护剂和冷冻保护液 在哺乳动物的胚胎冷冻过程中, 冰晶的形成对胚胎的损伤是致命的。-15℃~ -50℃是一个致死温度区, 在这个温度区细胞容易形成大的冰晶。加入抗冻保护剂能避免冰晶的形成。抗冻保护剂主要分为3类：（1）低分子质量可渗物质, 如甲醇、乙二醇、丙二醇、甘油等一些醇类; （2）低分子质量不可渗物质, 如葡萄
江苏省无锡市中级人民法院 民事判决书 （2014）锡民终字第01235号 上诉人（原审原告）沈新南。 上诉人（原审原告）邵玉妹。 两上诉人的共同委托代理人郭小兵，江苏瑞莱律师事务所律师。 两上诉人的共同委托代理人郭伟，江苏瑞莱律师事务所律师。 被上诉人（原审被告）刘金法。 被上诉人（原审被告）胡杏仙。 原审第三人南京鼓楼医院，住所地南京市鼓楼区中山路321号。 法定代表人韩光曙，该院院长。 委托代理人王玢，该院生殖中心医生。 委托代理人郑哲兰，江苏永衡昭辉律师事务所律师。 上诉人沈新南、邵玉妹因与被上诉人刘金法、胡杏仙，原审第三人南京鼓楼医院监管权和处置权纠纷一案，不服宜兴市人民法院（2013）宜民初字第2729号民事判决，向本院提起上诉。本院于2014年7月2日受理后，依法组成合议庭审理了本案，现已审理终结。 原审法院审理查明： 沈杰与刘曦于2010年10月13日登记结婚，于2012年4月6日取得生育证明。2012年8月，沈杰与刘曦因“原发性不孕症、外院反复促排卵及人工授精失败”，要求在南京市鼓楼医院（以下简称鼓楼医院）施行体外受精-胚胎移植助孕手术；鼓楼医院在治疗过程中，获卵15枚，受精13枚，分裂13枚；取卵后72小时为预防“卵巢过度刺激综合征”，鼓楼医院未对刘曦移植新鲜胚胎，而于当天冷冻4枚受精胚胎。治疗期间，刘曦曾于2012年3月5日与鼓楼医院签订《辅助生殖染色体诊断知情同意书》，刘曦在该同意书中明确对染色体检查及相关事项已经了解清楚，同意进行该检查；愿意承担因该检查可能带来的各种风险；所取样本如有剩余，同意由诊断中心按国家相关法律、法规的要求代为处理等。2012年9月3日，沈杰、刘曦与鼓楼医院签订《配子、胚胎去向知情同意书》，上载明两人在鼓楼医院生殖医学中心实施了试管手术，获卵15枚，移植0枚，冷冻4枚，继续观察6枚胚胎；对于剩余配子(卵子、精子)、胚胎，两人选择同意丢
泰国试管婴儿前提高卵子质量的6个小方法 对于育龄女性来说，高质量的卵子是孕育的前提。只有优质成熟的卵子和精子结合，才能孕育健康的宝宝。因此，女性在试管婴儿前首先要做的，就是提高卵子质量。那么优质的卵子是什么样的？该如何提高卵子质量呢？为大家总结了这六项。 1、运动不能少 身体素质一旦提高，免疫力随之上升，病魔再想攻击你，可能比登天还难，所以适当慢跑、游泳、骑单车......很重要。不管怎样，只要有个好身体，拥有好卵子迟早的事情。 2、心情要好 进一步乳腺增生退一步子宫肌瘤卵巢囊肿，长期心情不好容易导致内分泌紊乱，影响排卵。所以，备孕要适当排解压力。此外，压力太大不仅可能造成女性卵子质量不好，还可能会导致男性障碍，影响精子质量。 3、远离烟酒 要有当爸爸妈妈的觉悟，香烟的毒性会直接作用于卵子，过量的酒精也对卵子质量有不良影响。所以，备孕前就要把烟酒给戒掉！ 4、注意饮食 拥有好身体的前提是保持一个良好的饮食习惯，不少食物对卵子会造成伤害，尤其是生冷、辛辣类食物，还有香烟、酒精等等。要想在试管婴儿提高卵子质量，应该多吃些富含高蛋白的食物，黑豆、大豆、豆浆等豆制品值得多摄入。 5、保证休息 工作做不完，钱挣不完，卵子会凋亡。人类的正常休息时间是在8h，不是说你凌晨2点睡，早上10点起也符合这条规律，一旦熬夜，卵子的质量必定大打折扣，规律的作息才有助于卵巢保养。 6、多补铁 曾有研究指出，铁是影响卵子质量的重要元素，关系着卵子的营养吸收，而缺乏铁元素可能引起排卵障碍。尤其是经期，要注意补铁。 泰嘉运表示补铁不用搞那么复杂，没什么必要大量去补，就注意平时多吃菠菜等高铁食物就可以了。
浅谈泰国试管婴儿成功率 试管婴儿的成功率是做试管最关心的问题，也有人因为成功率不高而放弃不做，其它这种情况不是没有的，看每个人的身体不同，成功率也会不一样的，所以各位不要拿别人的成功率当做是自己的，这是一个很大的误区。 世界上试管婴儿成功率最高的两个国家：一个是泰国，一个是美国。很多中国人一直以为泰国是一个很落后的国家，其实不然，泰国的国民收入以及超过中国，而且泰国政府鼓励支持试管婴儿的科研，目前来说，泰国是世界上试管婴儿技术第二强的国家。泰国的试管婴儿的成功率也仅次于美国，而去泰国做试管婴儿的费用却远远低于美国。 恒嘉国际泰国试管专家表明。试管婴儿的成功率对不同的个体是不同的，一般情况下，身体越健康年龄月底的人群做试管婴儿的成功率越高，年龄越大身体健康比较差的这类人群做试管婴儿的成功率就越低。到泰国做试管婴儿，首先要经过各项专业的专项检查，而后由丰富经验的医生为您提供检查报告以及成功率预测，如果您想做试管婴儿，选择泰国是您明智的选择! 影响试管成功率原因有以下几点： 1、输卵管积水潴留液改变宫腔的内环境，机械的干扰胚胎与子宫内膜的接触。 2、输卵管积水常由感染引起，且多为上行感染，即往的感染可能会造成子宫内膜损害，留下永久性的对胚胎种植容受性的影响。 3、输卵管积水中所含的微生物、碎屑及毒性物质影响胚胎着床，降低胚胎种植率及妊娠率，增加流产率 4、输卵管积水患者种植窗期子宫内膜β一整合素水平下降，亦可影响子宫内膜容受性。 5、输卵管积水时组织所释放出来的细胞因子、前列腺素、白细胞趋化因子和其他炎性复合物作用与子宫内膜，影响胚胎着床。
6、另一方面B超监测下经阴道取卵过程中误穿输卵管积水，积水直接污染卵细胞，影响卵细胞受精及受精卵发育。 7、在试管婴儿治疗的超排卵中B超监测可发现少数输卵管积水呈进行性增大，会被误认为发育中卵泡，会引起用药误导，提早给予HCG，导致取卵时成熟卵细胞比率下降。 如何提高泰国试管婴儿成功率? 研究人员认为，黄体酮受体基因通常会产生两种稍微不同的蛋白质，而两者的平衡控制着许多其他基因的行为，变异基因会打破这种平衡，导致子宫内膜变化，并对胚胎植入和存活造成不利的影响。 为此，研究人员在动物研究中对与胚胎植入和发育成功有关的三种基因进行了研究，这些基因也对试管受精生育成功几率有影响。这三种基因都正常的妇女怀孕率达92%，而那些携带一个或更多变异基因的妇女怀孕率只有41%左右。 恒嘉国际泰国试管通过研究发现，试管受精成功不仅率与接受试管受精手术的妇女的年龄和其提供的卵子质量有关，基因因素也是相当重要的。
赴泰国做试管婴儿明白这几点提高成功率 目前做试管婴儿的人数每年都在上涨，试管婴儿技术每年也帮助成千上万的患者实现了生儿育女的梦想。做试管婴儿的患者最关心的就是成功率，都想要一次成功。这是最皆大欢喜的，然而试管婴儿成功率并非100%，是有一定的失败概率的。小编今天就来讲解怎么做才能提高试管婴儿成功率，在赴泰国做试管婴儿之前你需要明白这几点。 1、胚胎质量 胚胎的质量是由精子和卵子质量决定的，而其中卵子的质量尤其重要。卵子质量重要的决定因素是年龄，所以如果已经判断你们的情况需要做试管，就尽快开始；泰嘉运建议超过35岁的女性朋友们，一定不要拖；40岁以上的更是要只争朝夕。 2、良好习惯 时间是不能倒退的，但是我们通过保持一个好的生活习惯，坚持健康的饮食，尤其是多吃富含维生素C的蔬菜水果，比如说葡萄、草莓、蓝莓等等，再加上按照医生的医嘱，适当的服用辅酶Q10、深海鱼油、维生素E等等维生素类的药物就可以了，至于促排卵方案就留给医生去决定。 3、内膜厚度 一般来说女性是老卵巢不老子宫的，所以不用担心子宫会随着年龄的增长而衰老，但是内膜就像土壤一样是需要灌溉。同时它也是害怕损伤的，尤其是反复多次刮宫对内膜的损伤，非常严重需要避免，一旦损伤就需要到专门的医院去诊治。其他的有一些包括子宫内膜息肉、内膜的慢性炎症、子宫肌瘤、都有可能影响胚胎的种植，需要手术治疗或者消炎药治疗。 4、身体环境 影响胚胎成功种植的因素有很多，其中首当其冲的就是输卵管积水，这是一致公认的会大大降低试管成功率的因素，在胚胎移植前一定要处理。可靠的方式就是在腹腔镜下做结扎或者是切除输卵管。当然还有其它的一些因素，包括免疫性异常等，这个是需要医生根据病史来筛查判断，并且给予相应的治疗。 5、情绪管理 心情对于试管婴儿成功率的影响也是很大的，在做试管婴儿的过程中，可以单纯靠自己的力量提高成功率的，就是放松心情，配合医生积极的治疗，保持一个良好的心态，这样才会有好的结果。
泰国试管婴儿双胞胎成功率 从现实情况来看，自然孕育的双胞胎几率不是很大。一个家庭如果生育了一对双胞胎，想必心情是跟中奖一样的高兴。因为有很多人通过试管婴儿双双胞胎成功。因此，就有夫妻想通过试管婴儿生双胞胎、龙凤胎!那么试管婴儿是不是生双胞胎的好办法呢? 目前全球每年新生儿中，双胞胎及多胞胎的产出率在一些出生率高的国家已经达到了20%。据泰国试管婴儿专家介绍说，做试管婴儿生双胞胎的几率还是很大的，在正常情况下，多胎妊娠的几率大约是1%~2%。但是对于进行试管婴儿的女性，多胎妊娠的可能性会增加很多，包括双胞胎、三胞胎、四胞胎甚至更多胞胎，据我们初步统计，试管婴儿双胞胎及多胞胎可达20%~25%，对技术好的专家而言可以做到更高。 一般来说，受精卵在体外发育成胚胎后，为了保证成功率，医生会将两个胚胎移植入母体，这使得试管婴儿的双胞胎率明显高于自然妊娠，但多胎妊娠会给孕妇和胎儿都带来诸多风险，比如胎儿的流产率、早产率、死亡率都会上升，孕妇的孕期并发症也会增多。 依据国家规定，试管婴儿手术前必须对夫妇双方进行严格的评估，只有符合指证和伦理的多重条件才能进行。想借助试管婴儿怀双胎乃至多胎都是不可取的，也绝非想做就能做。 泰国因为政策和文化的关系，试管婴儿技术发展的非常不错，医疗设备相对其他国家比较先进。当地的法律允许试管婴儿选择性别，多胞胎的政策也相对宽容，可以进行染色体筛查，根据患者的身体情况植入一个男胚及一个女胚生龙凤胎，也可以生男双胞胎或女双胞胎! 泰国试管婴儿成功率高达65%。通过泰国高水平的试管技术，可以大大提高她怀双胎甚至是多胞胎的机会，但是有的生育年龄已经很大，身体状况及胚胎不是特别好的，就要根据她们的具体情况，选择移植的胚胎的数量，提高试管的成功率。
泰国试管婴儿之入境须知 飞机降落前，需要填入境卡，非泰国公民需要再填另一张。新版入境卡自2017年9月后由原先的两联三页减缩成一联两页，去掉繁琐的问答改为更为简洁的选择勾选方式来方便游客的填写。 1、入境卡第一页： ①姓氏（大写拼音，应和护照对照一致） ②名 ③性别（男/女） ④国籍（Chinese护照信息栏里有） ⑤护照号（护照首页右上角） ⑥出生日期：格式为日/月/年 ⑦入境航班号（入境泰国乘坐的航班号码） ⑧签证号码（提前办好的泰国旅游签上红色数字为签证号码，如落地签则不填写）
⑨职业 ⑩来自哪个国家（从哪个国家入境如实填写，如从中国入境则填写：CHINA）?来泰国的目的（一般填写旅游：TRAVEL） ?停留时间（从入境之日起至出境日期） ?居住城市（在国内的长期居住地） ?国家（CHINA） ?在泰国的地址（酒店地址或者朋友家地址都可以，保证真实有效） ?联系电话（泰国本地手机号或国内手机号+86） ?邮箱 ?签名（应和护照首页签名一致） 第二页： ①航班类型：包机/班机 ②第一次来泰国？：是/不是
③是否跟团?：是/不是 ④住宿类型：酒店/朋友家/青年旅舍/公寓/客栈/其他 ⑤来泰国的目的：一般填写第一栏打X 假期 ⑥年收入（根据汇率自行计算，选择请打X） 这就是一份完整的入境卡填写攻略，入境泰国的航班空乘人员通常会在飞机上分发入境卡，如丢失或者未领到去往海关处的路上也会有领取入境卡的地方。不要未填写就去排队，否则排队以后也会被海关拦下重新填写。 2、入境注意事项： 1、持泰国旅游签入境，提前办好通常会有59天有效期，填写入境卡后直接排队入关。 2、持空白护照准备落地签的游客请提前准备好酒店预订单，2寸照片，以及返程的航班订单（截图或打印好都可以），下飞机后有中文指示跟着落地签办理处排队，到时候直接出示给工作人员。 3、不管出境还是入境都要确定海关人员在你的护照上盖章，并看清楚时间。如果少了一个章就少了一次出入境记录，以后会有偷渡嫌疑会非常麻烦。
随着试管婴儿技术愈发的强大，去泰国试管婴儿也越来越受到国人的欢迎，不仅是泰国试管技术可以与美国媲美，更重要是续办证件简单，而且花费较少，因此能偏向国人的选择。那么究竟试管婴儿的一次成功率有多少呢？优佳国际为您一一讲解下，请您耐心看完。 据统计分析，近年来不孕不育症的患者人数不断上升。很多患者都把怀孕希望寄于试管婴儿。究竟，试管婴儿一次成功率有多大？ 其实，很多人都不到需要求助于试管婴儿技术的地步。很多现代人的不孕不育症都与个人生活习惯有关，比如吸烟、喝酒、熬夜、打电脑游戏等，通过改变生活习惯就能治愈。毕竟，做试管婴儿需要投入的时间、精力、财力等都不小，具体是不是该做，要根据医院实际体检情况而定。以某医院数字为例，问诊的不孕不育者中，最终做试管婴儿取卵手术的只有3100多人次，占比约2%。 而据某医院对进行试管婴儿手术的患者调查发现：有40%多的不孕不育是因女性引起的，有40%多的不孕不育是因男性引起的，两者比例大致相当，还有少部分的情况是由男女双方共同引起的。可见，生不出孩子，男性的问题引起的概率约占一半，而试管婴儿手术则多是由女性来承受。 适合于做手术的女性，从病症上来说包括：有严重输卵管疾病的，如患盆腔炎导致输卵管堵塞、积水;或输卵管结核而子宫内膜正常;或异位妊娠术后输卵管堵塞;或子宫内膜异位症及卵泡不破裂综合征等。 适合于做试管婴儿手术的男性，通常是有少精症、弱精症、畸精症等症状，这些症状往往很难改变。 试管婴儿技术又称“体外受精联合胚胎移植技术(IVF)”，即分别将女性体内的卵子与男性体内的精子取出后，置于试管内使其受精，再将胚胎前体“受精卵”移植回母体子宫内发育成胎儿并诞生婴儿。它是人类生殖技术上的一大创举。 试管婴儿的成功需要操作过程中每个环节都成功，才能让婴儿顺利降临。操作环节包括：从女性体内取卵子、从男性体内取精子、让卵子和精子在体外形成胚胎、把胚胎移植入女性体内、女性妊娠、女性产子，能否顺利产下婴儿取决于男女双方自身的条件，到胚胎移植后，就和自然受精的人生孩子的成功率差不多了。 在做试管婴儿手术前，需要通过催卵针让女性排出更多卵子，以便有更多的选择而提高试管婴儿的成功率。通常情况，经过催卵作用，从女性体内取出的卵子有约十颗，多的时候达二三十颗。这些卵子用来马上和精子结合形成胚胎，以达到冷冻存活的目的。
首例冷冻胚胎继承案民 事判决书 Revised as of 23 November 2020
我国首例冷冻胚胎继承案民事判决书江苏省无锡市中级人民法院民事判决书（2014）锡民终字第01235号上诉人（原审原告）沈新南。上诉人（原审原告）邵玉妹。两上诉人的共同委托代理人郭小兵，江苏瑞莱律师事务所律师。两上诉人的共同委托代理人郭伟，江苏瑞莱律师事务所律师。被上诉人（原审被告）刘金法。被上诉人（原审被告）胡杏仙。原审第三人南京鼓楼医院，住所地南京市鼓楼区中山路321号。法定代表人韩光曙，该院院长。委托代理人王玢，该院生殖中心医生。委托代理人郑哲兰，江苏永衡昭辉律师事务所律师。上诉人沈新南、邵玉妹因与被上诉人刘金法、胡杏仙，原审第三人南京鼓楼医院监管权和处置权纠纷一案，不服宜兴市人民法院（2013）宜民初字第2729号民事判决，向本院提起上诉。本院于2014年7月2日受理后，依法组成合议庭审理了本案，现已审理终结。原审法院审理查明：沈杰与刘曦于2010年10月13日登记结婚，于2012年4月6日取得生育证明。2012年8月，沈杰与刘曦因“原发性不孕症、外院反复促排卵及人工授精失败”，要求在南京市鼓楼医院（以下简称鼓楼医院）施行体外受精-胚胎移植助孕手术；鼓楼医院在治疗过程中，获卵15枚，受精13枚，分裂13枚；取卵后72小时为预防“卵巢过度刺激综合征”，鼓楼医院未对刘曦移植新鲜胚胎，而于当天冷冻4枚受精胚胎。治疗期间，刘曦曾于2012年3月5日与鼓楼医院签订《辅助生殖染色体诊断知情同意书》，刘曦在该同意书中明确对染色体检查及相关事项已经了解清楚，同意进行该检查；愿意承担因该检查可能带来的各种风险；所取样本如有剩余，同意由诊断中心按国家相关法律、法规的要求代为处理等。2012年9月3日，沈杰、刘曦与鼓楼医院签订《配子、胚胎去向知情同意书》，上载明两人在鼓楼医院生殖医学中心实施了试管手术，获卵15枚，移植0枚，冷冻4枚，继续观察6枚胚胎；对于剩余配子(卵子、精子)、胚胎，两人选择同意丢弃；对于继续观察的胚胎，如果发展成囊胚，两人选择同意囊胚冷冻。同日，沈杰、刘曦与鼓楼医院签订《胚胎和囊胚冷冻、解冻及移植知情同意书》，鼓楼医院在该同意书中明确，胚胎不能无限期保存，目前该中心冷冻保存期限为一年，首次费用为三个月，如需继续冷冻，需补交费用，逾期不予保存；如果超过保存期，沈杰、刘曦选择同意将胚胎丢弃。2013年3月20日23时20分许，沈杰驾驶苏B5U858车途中在道路左侧侧翻，撞到路边树木，造成刘曦当日死亡，沈杰于同年3月25日死亡的后果。现沈杰、刘