第二章
填空题
1.个群
2.纯
3.灭菌任何生物
4.稀释倒平板法涂布平板法平板划线法
5.分类鉴定
5.死亡污染变异
7，低〔高) 好(差)
8，放大反差分辨率
9. 1000--1500*10或15 90或100 香柏油lo.披长振幅
11.紫外线
12.光源真空荧光屏照片
13.球状杆状螺旋状
14.菌丝体营养菌丝气生菌丝繁殖菌丝
15.原生动物
选择题
1.1
2.2
3.1
4.4
5.2
6.2
7.3
8.4
9.3
10.4
是非题
1.-
2.-
3.+
4.-
5.-
6.+
7.-
8.+
9.+
10.-
11.+
2014年中国科学院大学851微生物学考研真题（完整回忆版） 一、名词解释（每小题4分，共40分） 1．鞭毛和菌毛 2．合成培养基和天然培养基 3．微生物生态系统 4．生命三域学说 5．生物修复 6．前体激活 7．无义突变 8．原生质体恢复 9．病毒的核衣壳和包膜 10．人工免疫和免疫调节剂 二、匹配题（每空1分，共20分。每个答案可以对应一个或多个问题）（一） 1、首先发现微生物的人a、Alexander Fleming 2、否定“自然发生说”的人b、Louis Pasteur 3、发现青霉素的人c、Robert Koch 4、用固体培养基培养的人d、Watson 5、提出双螺旋结构的人e、Antony van Leeuwenhoek （二）
1、蓝细菌 2、大肠杆菌b、化能异养 3、硝化细菌c、碳源 4、紫色非硫细菌d、光能自养 5、CO2e、光能异养 （三） 1．信号肽a．切除修复 2．包涵体b．核糖体和DNA结合位点 3．细菌转化c．与细胞膜进行结合 4．光复活d．外源基因的表达 5．SD序列e．蛋白和DNA的融合 （四） 1、NK细胞a、特异杀伤 2、噬中性粒细胞b、自然杀伤 3、巨噬细胞c、体液免疫 4、T细胞d、吞噬作用 5、B细胞 三、填空题（每空1分，共40分） 1．微生物按照（）染色法可以分为（）和（）两种。 2．真菌细胞壁的主要成分为（）。此外还有少量的（）和（）。 3．微生物命名法的主要根据是林奈的（）法，种名主要由（）和（）构成。 4．微生物的营养要素主要有（）、（）、（）、（）、（）和水这6种。 5．微生物间相互作用的方式有（）、（）、（）、（）、（）和竞争关系。
微生物习题集 第一章? 绪论 一、术语或名词??? 1．微生物(microorganism)? 因太小，一般用肉眼看不清楚的生物。这些微小生物包括：无细胞结构不能独立生活的病毒、亚病毒(类病 毒、拟病毒、朊病毒)；具原核细胞结构的真细菌、古生菌以及具真核细胞结构的真菌(酵母、霉菌、蕈菌等)、单细胞藻类、原生动物等。 但其中也有少数成员是肉眼可见的。 2．微生物学(microbiology)? 研究肉眼难以看清的称之为微生物的生命活动的科学，分离和培养这些微小生物需要特殊技术。 3．分子微生物学(molecularmicrobiology)? 在分子水平上研究微生物生命活动规律的科学。 4．细胞微生物学(cellularmicrobiology)? 重点研究微生物与寄主细胞相互关系的科学。 5．微生物基因组学(microbic genomics)? 研究微生物基因组的分子结构、信息含量及其编码的基因产物的科学。 6．自生说(spontaneousgeneration)? 一个古老的学说，认为一切生命有机体能够从无生命的物质自然发生的。 7．安东·列文虎克(AntonyvanLeeuwenhoek，1632—1723)? 荷兰商人，他是真正看见并描述微生物的第一人，他利用自制放大倍数为50～ 300倍的显微镜发现了微生物世界(当时被称之为微小动物)，首次揭示了一个崭新的生物世界——微生物界。 8．路易斯·巴斯德(LouisPasteur，1822—1895)? 法国人，原为化学家，后来转向微生物学研究领域，为微生物学的建立和发展做出了 卓越的贡献，成为微生物学的奠基人。主要贡献：用曲颈瓶实验彻底否定了“自生说”，从此建立了病原学说，推动了微生物学的发展； 研究了鸡霍乱，发现将病原菌减毒可诱发免疫性，以预防鸡霍乱病；其后他又研究了牛、羊炭疽病和狂犬病，并首次制成狂犬疫苗，证实 其免疫学说，为人类防病、治病做出了重大贡献；分离到了许多引起发酵的微生物，并证实酒精发酵是由酵母菌引起的，也发现乳酸发酵、 醋酸发酵和丁酸发酵都是不同细菌所引起的，为进一步研究微生物的生理生化和工业微生物学奠定了基础。 9．罗伯特．柯赫(Robert Koch，1843—1910)? 德国人，着名的细菌学家，曾经是一名医生，对病原细菌的研究做出了突出的贡献：A具 体证实了炭疽病菌是炭疽病的病原菌；B分离、培养了肺结核病的病原菌，这是当时死亡率极高的传染性疾病，因此柯赫获得了诺贝尔奖； C提出了证明某种微生物是否为某种疾病病原体的基本原则——柯赫氏定律。他也是微生物学的奠基人。 10．伍连德(1879—1960)? 我国广东香山人，着名公共卫生学家，我国海港检疫创始人。他用微生物学理论和技术对鼠疫和霍乱的病原进 行研究和防治，在中国最早建立起卫生防疫机构，培养了第一支预防鼠疫的专业队伍，在他的领导和组织下，有效地战胜了1910—1911 和1920—1921年间我国东北各地鼠疫的大流行，被国际上誉为着名的防疫专家，世界鼠疫会议1911年4月在我国沈阳举行时，他任大会 主席和中国首席代表。着有“论肺型鼠疫”、“鼠疫概论”和“中国医史”等。 11．汤飞凡(1879—1958)? 我国湖南醴陵人，着名的医学微生物学家，在医学细菌学、病毒学和免疫学等方面的某些领域做出·了显着的 贡献，特别是首次应用鸡胚卵黄囊接种法从病人的眼结膜刮屑物中分离、培养沙眼衣原体的成功，确证了沙眼衣原体的存在，为世界上首 创，成为医学微生物学方面的重大成果。 12．SARS? Severe Acute Respiratory Syndrome的简称，严重急性呼吸道综合征，即我国称为的非典型肺炎，也简称为非典。 二、习题 ? 填空题 1．微生物与人类关系的重要性，你怎么强调都不过分，微生物是一把十分锋利的双刃剑，它们在给人类带来??? 的同时也带 来?? ? 。 2．1347年的一场由?? ? 引起的瘟疫几乎摧毁了整个欧洲，有1／3的人(约2 500万人)死于这场灾难。 3．2003年SARS在我国一些地区迅速蔓延，正常的生活和工作节奏严重地被打乱，这是因为SARS有很强的传染性，它是由一种新型 的?? ? 所引起。 4．微生物包括：?? ? 细胞结构不能独立生活的病毒、亚病毒(类病毒、拟病毒、朊病毒)；具细胞结构的真细菌、古生菌；具?? ? 细胞结构的真菌(酵母、霉菌、蕈菌等)、单细胞藻类、原生动物等。 5．着名微生物学家Roger Stranier提出，确定微生物领域不应只是根据微生物的大小，而且也应该根据有别于动、植物的??? 。 6．重点研究微生物与寄主细胞相互关系的新型学科领域，称为?? ? 。 7．公元6世纪(北魏时期)，我国贾思勰的巨着“?? ? ”详细地记载了制曲、酿酒、制酱和酿醋等工艺。 8，19世纪中期，以法国的?? ? 和德国的??? 为代表的科学家，揭露了微生物是造成腐败发酵和人畜疾病的原因，并 建立了分离、培养、接种和灭菌等一系列独特的微生物技术，从而奠定了微生物学的基础，同时开辟了医学和工业微生物学等分支学科。??? 和?? ? 是微生物学的奠基人。 9．20世纪中后期，由于微生物学的?? ? 、?? ? 等技术的渗透和应用的拓宽及发展，动、植物细胞也可以像微生物一样在乎 板或三角瓶中分离、培养和在发酵罐中进行生产。 10．目前已经完成基因组测序的3大类微生物主要是?? 、? ?及?? ? 。而随着基因组作图测序方法的不断进步与完善， 基因组研究将成为一种常规的研究方法，为从本质上认识微生物自身以及利用和改造微生物将产生质的飞跃。 11．微生物从发现到现在的短短的300年间，特别是20世纪中期以后，已在人类的生活和生产实践中得到广泛的应用，并形成了继动、
中国科学院（中科院）考博历年试题汇总 中科院发育遗传所2002生物化学（博士） 注：请将试卷写在答题纸上；不用抄题，但要写请题号；草稿纸上答题无效。一、名次解释：（20分） 二、以动物细胞或植物细胞为例说明细胞中的膜结构及其功能。（12分） 三、在研究位置基因的功能时往往采用推定的该基因所编码的氨基酸序列与已知功能的蛋白质的氨基酸序列比较来推断，你认为这种比较应采用什么原则？为什么？（12分） 四、真核基因在原核细胞中表达的蛋白质常常失去生物活性，为什么？举例说明。（12分） 五、简述信号肽的结构特点、功能和从蛋白质产物中切除的机理。（12分） 六、分子筛、离子交换和亲和层析是三种分离、醇化蛋白质的方法，你如何根据所要分离、纯化的蛋白质的性质选择使用。（12分） 七、酶联免疫吸附实验（ELISA）的基本原理是什么？如何用此方法检测样品中的抗原和抗体？（12分） 八、某一个蛋白，SDS凝胶电泳表明其分子量位于16900于37100标准带之间，当用巯基乙醇和碘乙酸处理该蛋白后经SDS凝胶电泳分析仍得到一条带，但分子量接近标准带13370处，请推断此蛋白质的结构？为什么第二次用前要加碘乙酸？（8分） 中科院发育遗传所2000-2001生物化学（博士） 2000年博士研究生入学考试 生物化学试题 1．酶蛋白的构象决定了酶对底物的专一性，请描述并图示酶与底物相互关系的几种学说。（20分） 2．什么是DNA的半保留复制和半不连续复制？如何证明？真核细胞与原核细胞的DNA复制有何不同？（20分） 3．概述可作为纯化依据的蛋白质性质及据此发展的方法。（20分） 4．简述酵解和发酵两个过程并说明两者的异同。（15分） 5．吃多了高蛋白食物为什么需要多喝水？（10分） 6．在非极端环境的生物体中是否存在氰化物不敏感的呼吸作用？如果有，其可能的生物学意义是什么？（5分） 以下两题中任选一题（10分） 7．概述植物或微生物细胞感应（应答）环境刺激因子（如养分缺乏、热、冷、干旱、
主要内容大豆的结构与成分?传统豆制品的生产?豆乳制品?豆乳粉及豆浆晶的生产?大豆低聚糖的制取及应用?大豆中生物活性成分的提取及应用?大豆加工副产品的综合利用? 大豆的结构与成分第一节一、大豆子粒的形态结构及组成? 二、大豆的主要化学成分?碳水
化合物1.? 大豆中的可溶性碳水化合物?人 体内的的消化酶不能分解水苏糖、棉子糖，但它们是人体肠道内有益菌-双歧杆菌的增殖因子，对人体生理功能提高有很好的 作用。大豆中的不溶性碳水化合物?果胶质、纤维素纤维有延缓 食物消化吸收的功能，可以降低对糖、。保健功能中性脂肪和胆 固醇的吸收，对人体产生 2.蛋白质?分为清蛋白和球
蛋白，其中球蛋白占到90%左右，球蛋白中7S和11S 球蛋白之和占总蛋白含量的70%以上。3.脂肪?。18%大豆中脂肪含量约为 4.大豆中的酶及抗营养因子脂 肪氧化酶：对食品影响作用：一是改善面粉色泽，?强化面筋蛋白质的作用，二是产生不良风味。尿素酶：大豆中抗营养因子，含量较高，受热失去活?性；淀粉分解酶和蛋白分解酶：豆粕中；?；，活性丧失90%20min℃：胰蛋白酶抑制剂100处理?：受热失活。
细胞凝集素?． 5.大豆中的微量成分无机盐?十余种，通常是含有钙、磷、铁、钾等的无机盐类。维生素?水溶性维生素为主，脂溶性很少。皂苷?抗营又称皂甙或皂素，具有溶血性和毒性，通常视为，但研究表明其对人体并无生理上的障碍作用，养成分反而有抗炎症、抗溃疡和抗过敏的功效。． 6.大豆中的味成分（1）脂肪族羰基化合物（2）芳香族羰基化合物（3）挥发性脂肪酸（4）挥发性
胺（5）挥发性脂肪醇（6）酚酸7.有机酸、异黄酮异黄酮抗氧化。柠檬酸、醋酸、延胡索酸等。．三、大豆蛋白质的性质?溶解性1. 四、大豆蛋白质的变性?由于物理、化学条件的改变使大豆蛋白质分子的内部结构、物理性质、化学性质和功能性质随之改变的现象称为大豆蛋白质的变性。1.酸碱引起的大豆蛋白的变性处于极端的酸性和碱性条件下的蛋
中国科学院大学 2015年招收攻读硕士学位研究生入学统一考试试题 科目名称:838环境化学 智从教育独家编辑整理 考生须知: 1.本试卷满分为150分，全部考试时间总计180分钟。 2.所有答案必须写在答题纸上，写在试题纸上或草稿纸上一律无效。 3.可以使用无字典存储和编程功能的电子计算器。 一、名词解释（每题3分，共30分） 1.拮抗作用：指两种或两种以上的化学物质同时或数分钟内先后输入集体，其中一种化学物质可干扰另一种化学物质原有的生物学作用使其减弱，或两种化学物质相互干扰使混合物的生物学作用或毒性作用的强度，低于两种化学物质任何一种单独输入机体的强度。 2.生物放大：指同一食物链上的高营养级生物，通过吞食低营养级生物积蓄某种元素或难降解物质，使其在机体内的浓度随营养级数增大而提高的现象。 3.光化学第一定律：首先，光子的能量大于化学键能时，才能引起光解反应；其次，分子对某特定波长的光要有特征吸收光谱，才能产生光化学反应。 4.酚酞碱度：如果以酚酞为指示剂，用强酸滴定，当溶液由较高的pH值降到8.3时，此时表示OH-被中和，CO32-全部变成HCO3-，作为碳酸盐只中和了一半，得到的结果称为酚酞碱度。 5.矿化作用：：是在土壤微生物作用下，土壤中有机态化合物转化为无机态化合物过程的总称。 6.Fenton试剂：指在天然或人为添加的亚铁离子时，与过氧化氢发生作用，能够产生高反应活性的羟基自由基的试剂 7.表面活性剂：：分子中同时具有亲水性基团和疏水性基团的物质。 8.土壤盐基饱和度：在土壤交换性阳离子中盐基离子所占的百分数称为土壤盐基饱和度。 9.干沉降：指颗粒物在重力作用下沉降，或与其他物体碰撞后发生的沉降。 10.PM2.5：指空气动力学直径小于等于2.5μm的颗粒物。
2010年中科院微生物考博真题答案 1.通过核酸分析鉴定微生物的主要方法，试简述16S rRNA序列分析技术的原理、优点和 基本操作步骤 （1）G+C含量的测定 （2）核酸分子的杂交：DNA-DNA杂交；DNA-rRNA杂交；核酸探针 （3）16s rRNA的核苷酸序列分析 16S rRNA序列分析技术的原理：核糖体rRNA对所有生物的生存都是必不可少的。其中16 S rRNA在细菌及其他微生物的进化过程中高度保守，被称为细菌的“分子化石”。在16S rRNA 分子中含有高度保守的序列区域和高度变化的序列区域，因此很适于对进化距离不同的各种生物亲缘关系的比较研究。其具体方法如下：首先借鉴恒定区的序列设计引物，将16S rRNA 基因片段扩增出来，测序获得16S rRNA基因序列，再与生物信息数据库（如GenBank）中的16S rRNA基因序列进行比对和同源性分析比较，利用可变区序列的差异构建系统发育树，分析该微生物与其他微生物之间在分子进化过程中的系统发育关系（亲缘关系），从而达到对该微生物分类鉴定的目的。通常认为，16S rRNA基因序列同源性小于97 %，可以认为属于不同的种，同源性小于93~95 %，可以认为属于不同的属。 优点：（1）rRNA参与生物蛋白质的合成过程，其功能是任何生物都必不可少的，而且在生物进化的漫长过程中，其功能保持不变。 （2）16S rRNA既含有高度保守的序列区域，又有中度保守和高度变化的序列区域，它适用于进化距离不同的各类生物亲缘关系的研究。 （3）16S rRNA相对分子质量大小适中，便于序列分析。 （4）16S rRNA普遍存在于真核和原核生物中，可作为测量各类生物进化的工具。 基本操作步骤： （1）设计合成引物 （2）PCR扩增16S rRNA片段 （3）琼脂糖凝胶电泳检测PCR产物 （4）胶回收16S rRNA片段 （5）16S rRNA基因片段通过pMD18-T载体进行克隆 （6）16S rRNA基因序列测定 （7）序列分析和系统发育树的构建 2.微生物的营养要素有哪几类？各有何功能？按所需碳源和能源的性质来划分，微生物的 营养类型可以分为哪几类？各营养类型举一例说明。 微生物的营养要素：（1）碳源：碳源是在微生物生长过程中为微生物提供碳素来源的物质。碳源经过一系列化学变化后，成为微生物自身的细胞物质和代谢产物。同时，绝大多数碳源物质在细胞内生化反应过程中还能为机体提供维持生命活动的能量，碳源也是能源物质。氮源：氮源物质为微生物提供氮素来源，这类物质主要用来合成细胞中的含氮物质，一般情况下不作为能源，只有少数自养微生物可以利用铵盐硝酸盐等作为氮源与能源。氮是组成核酸和蛋白质的重要元素，氮对微生物的生长发育有着重要作用。 无机盐：无机盐是微生物生长必不可少的营养物质，其生理功能是作为酶活性中心的组成部分，维持生物大分子和细胞结构的稳定性，调节并维持细胞的渗透压平衡、控制细胞的氧化还原电位和作为某些微生物生长的能源物质等。 生长因子：微生物生长所必需且需求量很少，但微生物自身不能合成或合成量不足以满足机体生长需要的有机化合物。
微生物习题集 第一章绪论 一、术语或名词 1．微生物(microorganism) 因太小，一般用肉眼看不清楚的生物。这些微小生物包括：无细胞结构不能独立生活的病毒、亚病毒(类病毒、拟病毒、朊病毒)；具原核细胞结构的真细菌、古生菌以及具真核细胞结构的真菌(酵母、霉菌、蕈菌等)、单细胞藻类、原生动物等。但其中也有少数成员是肉眼可见的。 2．微生物学(microbiology) 研究肉眼难以看清的称之为微生物的生命活动的科学，分离和培养这些微小生物需要特殊技术。 3．分子微生物学(molecularmicrobiology) 在分子水平上研究微生物生命活动规律的科学。 4．细胞微生物学(cellularmicrobiology) 重点研究微生物与寄主细胞相互关系的科学。 5．微生物基因组学(microbic genomics) 研究微生物基因组的分子结构、信息含量及其编码的基因产物的科学。 6．自生说(spontaneousgeneration) 一个古老的学说，认为一切生命有机体能够从无生命的物质自然发生的。 7．安东·列文虎克(AntonyvanLeeuwenhoek，1632—1723) 荷兰商人，他是真正看见并描述微生物的第一人，他利用自制放大倍数为50～300倍的显微镜发现了微生物世界(当时被称之为微小动物)，首次揭示了一个崭新的生物世界——微生物界。 8．路易斯·巴斯德(LouisPasteur，1822—1895) 法国人，原为化学家，后来转向微生物学研究领域，为微生物学的建立和发展做出了卓越的贡献，成为微生物学的奠基人。主要贡献：用曲颈瓶实验彻底否定了“自生说”，从此建立了病原学说，推动了微生物学的发展；研究了鸡霍乱，发现将病原菌减毒可诱发免疫性，以预防鸡霍乱病；其后他又研究了牛、羊炭疽病和狂犬病，并首次制成狂犬疫苗，证实其免疫学说，为人类防病、治病做出了重大贡献；分离到了许多引起发酵的微生物，并证实酒精发酵是由酵母菌引起的，也发现乳酸发酵、醋酸发酵和丁酸发酵都是不同细菌所引起的，为进一步研究微生物的生理生化和工业微生物学奠定了基础。 9．罗伯特．柯赫(Robert Koch，1843—1910) 德国人，著名的细菌学家，曾经是一名医生，对病原细菌的研究做出了突出的贡献：A具体证实了炭疽病菌是炭疽病的病原菌；B分离、培养了肺结核病的病原菌，这是当时死亡率极高的传染性疾病，因此柯赫获得了诺贝尔奖；C提出了证明某种微生物是否为某种疾病病原体的基本原则——柯赫氏定律。他也是微生物学的奠基人。 10．伍连德(1879—1960) 我国广东香山人，著名公共卫生学家，我国海港检疫创始人。他用微生物学理论和技术对鼠疫和霍乱的病原进行研究和防治，在中国最早建立起卫生防疫机构，培养了第一支预防鼠疫的专业队伍，在他的领导和组织下，有效地战胜了1910—1911和1920—1921年间我国东北各地鼠疫的大流行，被国际上誉为著名的防疫专家，世界鼠疫会议1911年4月在我国沈阳举行时，他任大会主席和中国首席代表。著有“论肺型鼠疫”、“鼠疫概论”和“中国医史”等。 11．汤飞凡(1879—1958) 我国湖南醴陵人，著名的医学微生物学家，在医学细菌学、病毒学和免疫学等方面的某些领域做出·了显著的贡献，特别是首次应用鸡胚卵黄囊接种法从病人的眼结膜刮屑物中分离、培养沙眼衣原体的成功，确证了沙眼衣原体的存在，为世界上首创，成为医学微生物学方面的重大成果。 12．SARS Severe Acute Respiratory Syndrome的简称，严重急性呼吸道综合征，即我国称为的非典型肺炎，也简称为非典。 二、习题 填空题 1．微生物与人类关系的重要性，你怎么强调都不过分，微生物是一把十分锋利的双刃剑，它们在给人类带来的同时也带来。 2．1347年的一场由引起的瘟疫几乎摧毁了整个欧洲，有1／3的人(约2 500万人)死于这场灾难。 3．20XX年SARS在我国一些地区迅速蔓延，正常的生活和工作节奏严重地被打乱，这是因为SARS有很
2002微生物学 一问答题（每题20分，共完成5题，1，2，3题必答，4，5，6题中任选2题） 1 目前主要用什么分子作为进化指征，依据是什么，对生物分类学有什么影响？ 2 以噬菌体感染原核细胞为例，试述病毒与宿主的相互作用。 3 试述微生物在基因工程中的作用 4 何谓生物降解？何谓降解性质粒？如何确定降解基因是否在质粒上？ 5 以人类免疫缺陷病毒（HIV）感染为例，试述抗病毒药物的发展策略 6 何谓基因芯片？试述在微生物学研究中的应用 2003微生物学 一名词 1、Viroceptor 2、IRES 3、Endospore 4、Vransduction 5、Viroid 6、Fertility factor 7、Mycoplasma 8、Selective medium 9、V ource of nitrogen 10、IFN 二简答 1、简述微生物同化CO2的方式 2、为什么Ti质粒被广泛用于构件转基因植物 3、对数生长期中微生物生长的数学模型是什么？并示出所有参数的意义 4、何谓标记拯救？举例说明其在病毒学中的应用 5、何谓抗原？简述特征 三论述 1．述M cAb制备的原理和基本程序 2．述在微生物育种中，通过选育突变株获得高产、优质、低耗菌株的筛选策略 3．试设计一个试验，测定病毒的毒力 中国科学院微生物研究所2004年硕士研究生入学考试微生物学试题 一、名词解释（共40分） 1、质粒和类核体 2、朊病毒和噬菌体 3、内毒素和外毒素 4、互生作用和拮抗作用 5、古生菌和极端环境微生物 6、初级代谢和次级代谢 7、操纵子和基因组 8、芽孢和分生孢子 9、准性生殖和溶原转变 10、 O抗原和H抗原 二、是非题，请在（）中打“＋”表示是，或“－”表示非。（10分） 1、 SARS的病原体是噬菌体。（）
微生物学 本章节学习重点：掌握：微生物、病原微生物和医学微生物学概念、病原微生物的种类 微生物:是广泛存在于自然界中的一大群形体微小、结构简单、肉眼直接看不见，必须借助光学显微镜或电子显微镜放大数百倍、数千倍甚至数万倍才能观察到的微小生物的总称。 微生物的分类： 1）非细胞型微生物2）原核细胞型微生物3）真核细胞型微生物 本章节学习重点： 掌握或熟悉细菌的基本形态、基本结构及特殊结构的特征与功能； 熟悉细菌生长繁殖的条件及繁殖方式、人工培养方法以及与细菌鉴别和致病有关的代谢产物。 细菌的结构 1、基本结构：细胞壁、细胞膜、细胞浆及核质。 2、特殊结构：荚膜、鞭毛、菌毛和芽胞。 革兰氏阳性菌，革兰氏阴性菌细胞壁比较 细胞壁结构显著不同，导致G+菌与G-菌染色性、抗原性、致病性、对药物的敏感性等方面的很大差异细胞壁的功能:维持细菌的外形，对细菌起保护作用；参与细胞内外物质交换；具抗原性等。 细胞膜的功能: 细胞膜有选择性通透作用，与细胞壁共同完成菌体内外的物质交换。膜上有多种呼吸酶，参与细胞的呼吸过程。膜上有多种合成酶，参与生物合成过程。细菌细胞膜可以形成特有的结构。 荚膜的特点及功能： 定义:细胞壁外一层透明黏液状物质。 化学成分: 多数：多糖少数：多肽 观察：特殊染色法、墨汁负染法； 功能： （1）抗干燥作用：贮留水分 （2）形成生物膜：荚膜多糖可使细菌彼此之间粘连，也可粘附于组织细胞或物体表面形成生物膜 （3）抗吞噬作用：能保护细菌免受溶菌酶、补体、抗体、抗菌药物等有害物质的损伤，保护细菌抵抗宿主细胞的吞噬与消化作用，从而成为侵袭力的组成之一。 （4）荚膜抗原：分型依据。
微生物生态学 1、重要人物及贡献： A. 切尔.卡逊(Rachel Carson): 【寂静的春天】，在国外，有人认为“生态学时代”的出现开始于该书的出版。 B. 恩斯特·海克尔: 德国人，第一次提出生态学概念。 C. 列文虎克：改进了显微镜以及，首次观测到了微生物个体，建立了微生物学。 D. 路易·巴斯德(Louis Pasteur):否定自然发生说（自生说）及倡导疾病细菌学说（胚种学说）和发明预防接种方法而闻名，为第一个创造狂犬病和炭疽的疫苗的科学家，他和费迪南德·科恩以及罗伯特·科赫一起开创了细菌学，被认为是微生物学的奠基者之一。 E. 罗伯特·科赫Robert Koch：发现炭疽杆菌、结核杆菌和霍乱弧菌，提出“科赫原则”。 F. Robert Hungate：发明了厌氧培养基，并从牛胃中成功培养出厌氧微生物。 G. 马丁努斯·拜耶林克: 病毒学的开创者，发现了氮气转化为植物所能够吸收的铵离子的过程──固氮作用，认识到细菌能够以硫酸盐代替氧气作为最终电子受体。 H. 维诺格拉斯基（Sergei Winogradsky）：确定了它利用无机物H 2 S作为能源、以CO2作为碳源。他首次提出了自养生物的概念及其与自然循环的关系。成功分离出固氮菌。描述了微生物的H2、So 和Fe2+的氧化发展了富集培养技术。 I. Carl Woese：16S指出16S的特殊性，建立生命三域假说。 J. 佐贝尔（Zobell C E):明确海洋微生物这一特殊群体的普遍意义；基本确立海洋微生物的研究方法(Zobell 2216E）；认识并加深钻研海洋微生物与环境-生态因子的关系；开创和发展海洋微生物在物质转化、能量流动中的作用和地位的研究；关注海洋微生物的经济重要性。 2、未培养微生物:是指迄今所采用的微生物纯培养分离及培养方法还未获得纯培养的微生物。包括生理/生态功能未知，没有相应培养技术，可能代表一大类微生物。以及生理/生态功能已知，具有培养技术，但尚未获得培养，目前分离报道的多数菌种属于此类。 3、MPN:最大或然数（most probable number，MPN）计数又称稀释培养计数，适用于测定在一个混杂的微生物群落中虽不占优势，但却具有特殊生理功能的类群。其特点是利用待测微生物的特殊生理功能的选择性来摆脱其他微生物类群的干扰，并通过该生理功能的表现来判断该类群微生物的存在和丰度。 菌落原位杂交（colony in situ hybridization）：是将细菌菌落从一主平板转移到硝酸纤维素滤膜上，然后将滤膜上的菌落细胞裂解以释放出DNA，将DNA烘干固定于膜上与32P或荧光标记的探针杂交，通过放射自显影或激发荧光以检测菌落杂交信号、并与主平板上的菌落对位。 荧光原位杂交（Fluorescence in situ hybridization，FISH）：用已知的标记单链核酸为探针，按照碱基互补的原则，与待检材料中未知的单链核酸进行异性结合，形成可被检测的杂交双链核酸。 变性梯度凝胶电泳（DGGE）：使用一对特异性引物PCR扩增微生物自然群体的16S rRNA 基因，产生长度相同但序列有异的DNA片段的混合物，然后用DGGE分离产物混合物。DGGE 胶是在6％聚丙烯酰胺胶中添加线性梯度的变性剂，变性剂的浓度由上到下，从低到高成线性梯度。 Quantitative Competitive PCR，QC-PCR：指在PCR反应体系中加入一定已知量的竞争性模板作为内标，与未知浓度的目标模板一起进行PCR扩增。通过二者产物的比值反映初始目
中科院大学硕士研究生入学考试 《微生物学》考试大纲 一.考试科目基本要求及适用范围概述 本《微生物学》考试大纲适用于中国科学院大学微生物学及相关专业的硕士研究生入学考试。微生物学是现代生物学的重要分支学科，是许多学科专业的基础课程。本考试大纲的主要内容包括微生物学的基本概念和原理，包括微生物生物多样性和分类、微生物生理和代谢、微生物生态学、微生物遗传学、微生物免疫学及微生物生物技术等。要求考生对微生物学的基本概念、专业词语、技术原理有较深的了解；系统掌握微生物的系统分类、细胞结构与功能、生理代谢、遗传变异、生态学和免疫学的基本理论知识以及相关实验技术；并具有应用这些知识和技术分析和解决问题的能力。 二.考试形式 闭卷，笔试，考试时间180分钟，总分150分。 试卷结构（题型）包括：名词解释、匹配题、填空题、简答题、实验设计题，共五个部分。 三.考试内容 (一)微生物学基本概念和意义 1.微生物学定义 2.微生物的多样性和重要类群 3.微生物学的发展过程、重要事件和人物 4.微生物的重要作用 (二)原核生物 1.原核生物的定义、关键内涵及其与真核生物的本质差异 2.原核生物的细胞结构与功能 3.原核生物的分类与鉴定 4.原核生物的物种多样性:细菌(Bacteria)和古菌(Archaea) (三)真核微生物 1.真核生物的定义、关键内涵及其与原核生物的本质差异 2.真核微生物的细胞结构与功能 3.真菌的主要类群：酵母菌、霉菌、蕈菌 (四)病毒和亚病毒 1.病毒和亚病毒的特点和定义 2.病毒的分类和命名
3.病毒的宿主范围 4.病毒的培养和纯化 5.病毒的复制 6.类病毒、拟病毒和朊病毒 7.重要病毒生物学特性及研究方法 （五）微生物生理和代谢 1.微生物的营养和繁殖 2.微生物的生长特点及测定 3.有害微生物的控制 4.微生物的能量代谢 5.分解代谢和合成代谢 6.次生代谢 7.合成代谢途径举例 8.代谢调控与工业发酵 （六）微生物生态学 1.微生物生态学的概念 2.自然界中微生物分布及生境多样性 3.微生物与其他生物的关系 4.微生物与自然界物质循环 5.微生物在环境保护中的作用 6．分子微生物生态学的基本方法和原理 (七)微生物遗传、变异和育种 1.微生物遗传变异的物质基础 2.质粒及转座因子 3.微生物基因的表达及调控 4.微生物基因突变和诱变育种 5.基因重组和杂交育种 6.基因工程原理及技术 7.菌种的退化、复壮和保藏 8.微生物基因组结构特点及功能基因组（八）传染与免疫 1.传染的概念 2.非特异性免疫 3.特异性免疫 4.免疫学的实际意义 （九）实验设计 1.微生物的分离、鉴定 2.获得特定的微生物基因或代谢产物 3.利用所知功能的微生物解决某个实际问题
中国科学院大学 2017年招收博士学位研究生入学统一考试试题 科目名称：微生物学 考生须知： 1.本试卷满分为100分，全部考试时间总计180分钟。 2.所有答案必须写在答题纸上，写在试题纸上或草稿纸上一律无效。 _____________________________________________________________________ 一、名词解释（合计24分，每题2分） 1.DNA shuffling 2.准性生殖 3.转座因子 4.质粒 5.菌株 6.人体的正常微生物菌群 7.操纵子8.CRISPR-Cas系统 9.无氧呼吸10.次级代谢 11.消毒12.同工酶 二、简答题（合计24分，每题3分） 1.何为细菌的群体感应调节？简述其调节机制。 2.古生菌中有几种RNA聚合酶，古生菌的基本转录因子和启动子有何特征？ 3.何为分解代谢物阻遏调控，哪些类型的操纵子受cAMP-CAP的调控？ 4.原核生物的转座因子有哪些主要类型，它们的转座可引发哪些遗传学效应？ 5.常用的微生物菌种保藏方法有哪些？ 6.简述细菌双组份系统。 7.列举诱发基因突变的五种方式。 8.根据微生物和氧的关系，可将微生物分成哪几个类型？ 科目名称：微生物学第1页共2页
三、问答题（合计32分，每题4分） 1.磺胺类药物、青霉素、四环素的作用机制分别是什么？ 2.抗药性菌株有什么特点，如何避免抗药性的产生？ 3.简述微生物基因组测序的基本方法和意义。 4.什么是抗原，常见类型有哪些？ 5.列出细菌负转录调控的两种类型并举例说明。 6.分别解释微生物基因组（Genome），泛基因组（Pan-genome）与宏基因组（Meta-genome）的概念。 的固定途径。 7.简述两条CO 2 8.在微生物的培养过程中，如果要缩短其生长的延迟期，可以在菌种、培养基和其它方面采取哪些措施？ 四、综合题（合计20分，每题5分） 1.Griffith是如何发现转化现象的，他当时为何未能进一步揭示转化因子的实质？Avery等人是如何证实转化因子的实质是DNA的，他面对了哪些质疑，他是如何消除这些质疑的？ 2.你可能在博士课程学习与研究中感兴趣的研究方向是什么，阐述此研究方向在国内外的研究进展，并分享一下你对此的体会与设想。 3.请设计一套简单的CRISPR-Cas9系统用于实现大肠杆菌基因组单基因的单点突变。 4.阐述你对于合成生物学这门新兴学科的认识，它与系统生物学、生物技术之间有什么关系？ 科目名称：微生物学第2页共2页
微生物学考试复习重点 第一章绪论 1、微生物学的定义 微生物学一般定义为研究肉眼难以看清的称之为微生物的生命活动的科学。 2、微生物的种类 ①无细胞结构不能独立生活的病毒、亚病毒因子（卫星病毒、卫星RNA和朊病毒）； ②原核细胞结构的细菌、古生菌； ③真核细胞结构的真菌（酵母菌、霉菌、覃菌等）、单细胞藻类、原生动物等。 3、微生物生命现象的特性和共性 ①微生物具有其他生物不具备的生物学特性、代谢途径和功能； ②微生物具有其他生物共有的基本生物学特性； ③易操作性：微生物具有个体小、结构简单、生长周期短、易大量培养、易变异、重复性强等优势。 4、微生物的发现 荷兰商人安东?列文虎克利用自制的显微镜发现了微生物世界。 5、微生物学发展过程中的重大事件 ①1867：Lister创立了消毒外科； ②1890：Von Behring制备抗毒素治疗白喉和破伤风； ③1892：IV anowsky提供烟草花叶病是由病毒引起的证据； ④1928：Griffith发现细菌转化； ⑤1929：Fleming发现青霉素； ⑥1977：Woese提出古生菌是不同于细菌和真核生物的特殊类群； ⑦1995：第一个独立生活的细菌（流感嗜血杆菌）全基因组序列测定完成； ⑧1996：第一个独立生活的古生菌（詹氏甲烷球菌）基因组测序完成； ⑨1997：第一个真核生物（啤酒酵母）基因组测序完成。 6、微生物学发展的奠基者 ①巴斯德和科赫是微生物学发展的奠基者。 ②巴斯德的贡献 a彻底否定了“自生说”：巴斯德用著名的曲颈瓶实验彻底否定了“自生说”，并从此建立了病原学说，推动了微生物学的发展； b免疫学—预防接种：巴斯德研究了鸡霍乱，发现将病原菌减毒可诱发免疫性，以预防鸡霍乱病，他为人类防病、治病作出了重大贡献； c证明发酵是由微生物引起的 d其他贡献—巴斯德消毒法和家蚕软化病问题。 ③科赫的贡献 a证明炭疽杆菌是炭疽病的病原菌； b发现肺结核的病原菌； c提出了证明某种微生物是否为某种疾病病原体的基本原则——科赫原则； d用固体培养基分离纯化微生物的技术； e配制培养基。 ④科赫原则 a在每一相同的病例中都出现这种微生物； b要从寄主分离出这样的微生物并在培养基中培养出来； c用这种微生物的纯培养接种健康而敏感的寄主，同样的疾病会重复发生； d从实验发病的寄主中能再度分离培养出这种微生物。 第二章微生物的纯培养和显微技术 1、无菌技术的概念 在分离、转接及培养纯培养物时防止其被其他微生物所污染，其自身也不污染操作环境的技术被称为无菌技术。 2、最常用的灭菌方法 高压蒸汽灭菌 3、接种操作 ①接种环在火焰上灼烧灭菌； ②烧红的接种环在空气中冷却，同时打开装有培养物的试管； ③用接种环蘸取一环培养物转移到一装有无菌培养基的试管中，并将试管重新盖好；
中国科学院研究生院 2007年招收攻读硕士学位研究生入学统一考试试题 科目名称：生物化学与分子生物学 考生须知： 1．本试卷满分为150分，全部考试时间总计180分钟。 2．所有答案必须写在答题纸上，写在试题纸上或草稿纸上一律无效。 一、 名词解释(每题4分，共20分) 1.重组修复 2.转座子 3.C4途径 4.正前馈作用和正反馈作用 5.RNA剪接和可变剪接 二、 单项选择题(每题1分，共20分，请在答题纸上标清题号，并将答案 写在题号后) 1. 下列各项中，不属于细胞代谢的中间产物的是： A. 葡萄糖-6-磷酸 B. 丙酮酸 C. 胆固醇 D. 乙酰辅酶A 2.在真核生物细胞周期的四个时相中，用于准备DNA合成的是： A. M期 B. G1期 C. S期 D. G2期 科目名称：生物化学与分子生物学 第1页 共9页
3. 下列各项中，不属于真核生物基因表达转录前水平调节的过程是： A. RNA编辑 B. 染色质丢失 C. 染色体DNA的修饰和异染色质化 D. 基因重排 4. 下列各项中，尚未获得诺贝尔奖的是： A. DNA双螺旋模型 B. PCR仪的发明 C. RNA干扰技术 D. 抑癌基因的发现 5. 下列事件中，不属于表观遗传调控的是： A. DNA甲基化 B. 组蛋白乙酰化 C. mRNA 加尾 D. RNA干扰 6. 大肠杆菌中，参与转录终止调控的是： A. TATA box B. ρ因子 C. snoRNA D. RNaseP 7. 在正转录调控系统中，调节基因的产物被称为： A. 阻遏蛋白 B. 诱导因子 C. 激活蛋白 D. 增强子 科目名称：生物化学与分子生物学 第2页 共9页
微生物学研究生考试大纲 第一章绪论 1. 微生物与我们的生活（利弊） 2.微生物的发现与奠基人 荷兰列文虎克：用自制放大倍数约300倍显微镜观察到微生物的存在 巴斯德的工作 (1) 发现并证实发酵是由微生物引起的彻底否定了“自然发生”学说(3) 免疫学——预防接种(4) 其他贡献：巴斯德消毒法等 柯赫的工作 (1) 微生物学基本操作技术方面的贡献 a）细菌纯培养方法的建立b）配制培养基 c）流动蒸汽灭菌d）染色观察和显微摄影 （2）对病原细菌的研究作出了突出的贡献： a）具体证实了炭疽病菌是炭疽病的病原菌。b）发现了肺结核病的病原菌c）证明某种微生物是否为某种疾病病原体的基本原则——柯赫原则 1 在每一病例中都出现这种微生物； 2 要从寄主分离出这样的微生物并在培养基中培养出来； 3用这种微生物的纯培养接种健康而敏感的寄主，同样的疾病会重复发生； 4 从试验发病的寄主中能再度分离培养出这种微生物来。 微生物的定义：人肉眼难以看清的微小生物总称。微生物的类群及特点：个体小、结构简、胃口大、食谱广、繁殖快、易培养、数量大、分布广、种类多、级界宽、变异易、抗性强、休眠长、起源早、发现晚、。 微生物的发展历程和发展趋势 发展历程：8000年前早起应用阶段，微生物发现，微生物生理生化阶段（微生物奠基人），现代微生物学（多学科交叉，人类肠道微生物） 发展趋势：多学科交叉、微生物学促进生命科学的发展、我国微生物学的发展、21世纪微生物学的发展趋势：1）微生物基因组；2）环境微生物；3）微生物生命现象的共性与特性；4）多学科交叉；5）人体微生物；6）现代微生物产业。第二章微生物的纯培养和显微技术 一、无菌技术：微生物不被污染且不污染周围环境的技术 二、微生物纯菌种的分离方法： 固体培养基分离微生物纯菌种的技术：涂布平板，平板划线、倒平板和稀释摇管法，最常用且可靠 液体培养基获得纯菌种的方法：稀释不同培养器皿中，95%不长菌，但长出的被认为是纯菌种，不太可靠且很少用。 单细胞分离：在特定显微镜和工具下取得单个细胞，要求细胞个体较大且有特殊工具。 三、微生物保藏技术：不死亡、不污染、不退化 传代培养保藏、冷冻保藏、干燥保藏 四、显微镜和显微技术
第1章绪论 1.1复习笔记 一、微生物和你 微生物是一把十分锋利的双刃剑，它们在给人类带来巨大利益的同时也带来“残忍”的破坏。 1.有利方面 （1）微生物为人类提供很多有用产品，例如：啤酒、抗生素。 （2）微生物参与地球上的物质循环。 （3）微生物为以基因工程为代表的生物技术的发展起到了推动作用。 有害方面 微生物引起的瘟疫会给人类带来毁灭性的灾难。 二、微生物学 研究对象及分类地位 （1）定义 微生物学一般定义为研究肉眼难以看清的称之为微生物的生命活动的科学。 （2）微生物包括的种类 ① 无细胞结构不能独立生活的病毒、亚病毒因子（卫星病毒、卫星RNA和朊病毒）； ② 原核细胞结构的细菌、古生菌； ③ 真核细胞结构的真菌（酵母、霉菌、蕈菌等）、单细胞藻类、原生动物等。 研究内容及分科 微生物学已形成了基础微生物学和应用微生物学，其又可分为许多不同的分支学科，并且还在不断地形成新的学科和研究领域。其主要的分科见图1-1。 (a)基础微生物学
(b)应用微生物学 图1-1 微生物学的主要分支学科 三、微生物的发现和微生物学的发展 微生物的发现 荷兰商人安东·列文虎克利用自制的显微镜发现了微生物世界。 微生物学发展过程中的重大事件 由列文虎克揭示的多姿多彩的微生物世界吸引着各国学者去研究、探索，推动着微生物学的建立和发展，表l—1列出了发展过程中的重大事件。 表1-1 微生物学发展中的重大事件 微生物学发展的奠基者 巴斯德和柯赫是微生物学的奠基人。 （1）巴斯德的贡献 ① 彻底否定了“自生说” 著名的曲颈瓶实验彻底否定了“自生说”，并从此建立了病原学说，推动了微生物学的发展。 ② 免疫学―预防接种巴斯德研究了鸡霍乱，发现将病原菌减毒可诱发免疫性，以预防鸡霍乱病。他为人类防病、治病做出了重大贡献。 ③ 证实发酵是由微生物引起的。 ④ 其他贡献－巴斯德消毒法和家蚕软化病问题。 （2）柯赫的贡献 ① 证实了炭疽病菌是炭疽病的病原菌。 ② 发现了肺结核病的病原菌。
中科院2002年微生物学试题 一问答题（每题20分，共完成5题，1，2，3题必答，4，5，6题中任选2题）1 目前主要用什么分子作为进化指征，依据是什么，对生物分类学有什么影响？ 2 以噬菌体感染原核细胞为例，试述病毒与宿主的相互作用。 3 试述微生物在基因工程中的作用 4 何谓生物降解？何谓降解性质粒？如何确定降解基因是否在质粒上？ 5 以人类免疫缺陷病毒（HIV）感染为例，试述抗病毒药物的发展策略 6 何谓基因芯片？试述在微生物学研究中的应用 中科院2003年微生物学试题 一名词解释（每小题2.5分共25分） 1 viroceptor 2 IRES 3 Endospore 4 Vransduction 5 Viroid 6 Fertility factor 7 Mycoplasma 8 Selective medium 9 Vource of nitrogen 10 INF 二简答题 1 简述微生物同化CO2的方式
2为什么Ti质粒被广泛应用于构建转基因植物？ 3 对数生长期中微生物生长的数学模型是什么？并示出所有参数的意义 4何谓标记拯救？举例说明其在病毒学中的应用 5何谓抗原？并简述其特征 三论述题 1试述单克隆抗体（McAb）制备的原理和基本程序 2试述在微生物育种工作中，通过选育突变株获得高产、优质、低耗菌株的筛选策略 3 试设计一试验，测定病毒的毒力 中国科学院微生物研究所2004年硕士研究生入学考试微生物学试题 一、名词解释（共40分） 1、质粒和类核体 2、朊病毒和噬菌体 3、内毒素和外毒素 4、互生作用和拮抗作用 5、古生菌和极端环境微生物 6、初级代谢和次级代谢 7、操纵子和基因组 8、芽孢和分生孢子