Preparation and Evaluation of a Mixed-Bed Immunoaf?nity Column for Selective Puri?cation of Sixteen Sulfonamides in Pork Muscle
Yingguo Li 1,2?,Yiqiang Chen 3?,Zhengguo Li 1*,Lei Zhang 2,Xianliang Li 2,Cunxian Xi 2,Guomin Wang 1,2,Xiong Wang 4,Qi Guo 4and Na Li 5
1
College of Bioengineering,Chongqing University,Chongqing 400044,China,2Chongqing Engineering Research Center for Import and Export Food Safety,Chongqing 400020,China,3College of Animal Science and Technology,China Agricultural University,Beijing 100193,China,4Clover Technology Group,Inc.,Beijing 100044,China,and 5College of Veterinary Medicine,China Agricultural University,Beijing 100193,China
*Author to whom correspondence should be addressed.Email:zhengguoli@https://www.doczj.com/doc/398844065.html,
?The ?rst two authors contributed equally to this work.
This paper describes the preparation of a novel mixed-bed immu-noaf?nity chromatography (IAC)column by coupling four monoclo-nal antibodies against different sulfonamides (SAs)to Sepharose 4B.The IAC column can be used to simultaneously extract and purify 16SAs in pork muscle.The dynamic column capacities for all SAs in mixed standard solution were between 312and 479ng /mL gel.After simple extraction and IAC cleanup,the sample solu-tion can be directly injected for liquid chromatography-ultraviolet analysis.The recoveries of SAs from spiked samples at levels of 25,50and 100m g /kg ranged from 83.3to 103.1%with variation coef?cient less than 8.6%.The comparison of IAC with liquid–liquid extraction and solid phase extraction indicated that IAC has better puri?cation effect and needs less organic solution than con-ventional methods,thus it would be an ideal method for selective puri?cation of SAs in pork muscle.
Introduction
Sulfonamides (SAs,Figure 1)are a class of antibacterial com-pounds widely used in veterinary practice because of their in-expensiveness and wide spectrum of activity.They can be used to prevent or treat bacterial and protozoan infections in animals or added to animal feed to promote growth (1).Because improper use of SAs and insuf?cient withdrawal time for treated animals can result in SA residue of in edible tissues,thus posing potential carcinogenic risk to consumers (2),regu-lation 281/96of the EU Commission has set maximum residue limits (MRLs)of 100m g /kg for total SAs in target tissues and milk of all food-producing species (3).The Ministry of Agriculture of the People’s Republic of China also established a MRL of 100m g /kg for the sum of SAs and a MRL of 25m g /kg for sulfamethazine only (4).
Numerous methods for the detection of SAs in various ma-trixes have been reported in literature.These methods involved immunoassays (5–7),capillary electrophoresis (CE)(8,9),liquid chromatography (LC)(10–12)and liquid chromatog-raphy–tandem mass spectrometry (LC–MS-MS)(13–15).Immunoassay is generally used as screening method because of its susceptibility to environmental factors,and suspected non-compliant results detected by immunoassay should be further validated by instrument methods.For instrument methods,these approaches usually use solid phase extraction or liquid–liquid extraction to purify the samples and concentrate the
analytes of interest.They have the pitfall of requiring a lot of organic solvent and elaborate sample pretreatment.In contrast,immunoaf?nity chromatography (IAC)cleanup is a good alter-native method to cleanup samples (16).It is based on the spe-ci?c interaction of antigen-antibody and can provide a more simple and effective mean to purify extracts and reduce the use of organic solvent.IAC has been reported to successfully extract SAs from complex samples.Ma rtlbauer et al.described a monoclonal antibody-based IAC for the detection of sulfa-dimidine (SM2)and sulfadiazine (SDZ)in milk (16),Crabbe et al.developed an IAC for purifying sulfamethoxazole (SMZ)and its major metabolites in urinary samples (17),and Li et al.prepared a generic IAC for the cleanup of multiple SAs in meat using a group-speci?c polyclonal antibody (18).More recently,Li et al.reported an IAC–LC–MS-MS method for simultaneous determination of ?uoroquinolone and sulfonamide antibiotics in animal muscle tissues (19).However,all of these IAC columns can maximally trap eight SAs (18),which does not meet the requirement for monitoring the total amount of SAs.In the current study,we prepared a mixed-bed IAC column that can be used to purify the total of sixteen normally used SAs in pork muscle.The evaluation of the IAC column and the comparison of IAC puri?cation with conventional methods were also demonstrated.
Experimental
Chemicals and materials
Sulfacetamide (SA),sul?somindine (SIM2),SDZ,sulfathiazole (ST),sulfapyridine (SPD),sulfamerazine (SMR),sulfamethoxy-diazine (SMD),sulfamethiazole (SMT),SM2,sulfachloropyrida-zine (SCP),SMZ,sulfamonomethoxine (SMM),sul?soxazole (SIZ),sulfachloropyrazine (SCPA),sulfadimethoxine (SDM)and sulfaquinoxaline (SQX)were obtained from https://www.doczj.com/doc/398844065.html,Br-activated Sepharose 4B was purchased from Pharmacia Corporation (Uppsala,Sweden).High-performance liquid chro-matography (HPLC)grade methanol (MeOH)was obtained from Fisher Scienti?c (Pittsburgh,PA).All other chemicals and solvents were of analytical grade and were obtained from Beijing Chemical Reagent Co.(Beijing,P.R.C.).Deionized water was prepared using a Milli-Q water puri?cation system (Millipore,Bedford,MA).The monoclonal antibodies (Mab,
#The Author [2012].Published by Oxford University Press.All rights reserved.For Permissions,please email:journals.permissions@https://www.doczj.com/doc/398844065.html,
Journal of Chromatographic Science 2012;50:167–174doi:10.1093/chromsci /bms006
Article
Cloning No.:E3D5A1,B2F7E8,C9H5D4and C7A2F7)used in this study were provided by Clover Technology Group.By enzyme-linked immunosorbent assay,the IC50values of the four Mabs were11.2ng/mL(Mab E3D5A1against SIM2), 5.6ng/mL(Mab B2F7E8against SMM),15.5ng/mL(Mab C9H5D4against SQX)and8.9ng/mL(Mab C7A2F7against SMR).Individual stock standard solution of SAs(100m g/mL) was prepared by dissolving5.00mg of each SA standard and di-luting to a?nal volume of50mL with MeOH.The individual stock solutions were stored at48C in amber glass bottles and were stable for at least three months.Mixed standard solution (1and5m g/mL)was prepared by mixing and diluting appro-priate volumes of each standard solution to a?nal volume of 100mL with MeOH.
Apparatus
The vortex mixer was from Fischer Scienti?c(Norcross,GA) and the centrifuge was purchased from Hettich Co. (Kirchlengern,Germany).The LC equipment was a Shimadzu LC-10ATvp system(Shimadzu,Japan).The chromatography column was a Cloversil C18(4.6?250mm,5m m).
IAC column preparation
The immunosorbent was produced as described by the manu-facturer.Three grams of CNBr-activated Sepharose4B(1g powder gives approximately3.5mL?nal volume of gel)was added into15mL of0.001M HCl and poured to a sintered-glass funnel(40–60m m).After being washed with200mL of HCl(0.001M)and400mL of NaHCO3solution(0.1M),the gel was mixed with Mab(Mab E3D5A1 6.3mg,Mab B2F7E8 36.8mg,Mab C9H5D436.8mg and Mab C7A2F742mg)dis-solved in5mL of0.1M NaHCO3solution and stirred gently at 48C for24h.The mixture was then washed with50mL phos-phate buffer saline(PBS)to remove the uncombined Mabs.The eluant was collected to calculate the coupling ef?ciency and determine the antibody amount by Bradford protein assay method.The mixture was subsequently transferred to10mL of Tris-HCl buffer(0.1M,pH8.0)to block the unreacted sites on CNBr-activated Sepharose4B.After the sites were blocked at 48C for2h,the gel was washed with3cycles of20mL acetate buffer(0.1M,pH4.0)and20mL Tris-HCl buffer.Finally,1mL of gel was transferred to the glass column(10?0.8mm,i.d.), and stored in PBS containing0.01%(w/v)sodium azide at48C. Column capacity determination
One milliliter of mixed standard solution(1m g/mL)was dis-solved with20mL of PBS.The solutions were then transferred into the IAC column(pre-conditioned with10mL of PBS)at a ?ow rate of1mL/min.The saturated column was washed with 10mL of water.Finally,2mL of MeOH was used to elute the analytes.After?ltering through a0.2m m PTFE?lter(Jinteng Ltd,Tianjin,P.R.C.),50m L of the eluting solution(2mL)was injected into the LC system.The column was regenerated by equilibrating with10mL of water and10mL of PBS,and stored in PBS(containing0.01%sodium azide)at48C.
Sample preparation with IAC column
Five grams(+0.01g)of comminuted sample(200g)were added into a50mL polypropylene centrifuge tube.Twenty milliliters of ethanol–water(80:20)were added and the sample tube was then vortexed for2min and shaken for10min.After being centrifuged at8000rpm for5min,5mL of the super-natant was transferred to a50mL volumetric?ask and diluted to50mL with water.The mixed solution was?ltrated through glass cellulose membrane and20mL of the?ltrate was subse-quently added to IAC column with?ow rate of1mL/min.The column was then washed with10mL of water and eluted
with Figure1.Chemical structures of SAs.
168Li et al.
2mL of MeOH.The collected eluting solution was evaporated to dryness at508C under a gentle stream of nitrogen and then reconstituted with0.5mL of chromatographic mobile phase, which was?nally subjected to HPLC analysis.
HPLC analysis
The HPLC system consisted of a DGU-12A degasi?er,a LC-10ATvp pump and a7725sample injector?tted with a 100-m L loop.For each analysis,100m L of the sample solution was injected.Chromatographic separation was achieved using a Cloversil C18column(4.6?250mm,5m m).Detection was performed by an ultraviolet(UV)detector with the wavelength of270nm.Data analysis was carried out on Class VP 5.03 Chemstation.The mobile phase was the mixture of MeOH (phase A)and1.1%acetic acid in PBS(0.01M)(phase B),and it was delivered to the HPLC column at a?ow rate of1mL/ min.The run time was45min for one analysis.An isocratic elution(A:B?15:85)was used for the?rst15min of the chro-matographic program.Mobile phase A was then gradually increased to40%from15to40min.The solvent composition was then returned to the initial ratio at40.1min and equili-brated for another5min before the next injection.
Analysis of spiked samples
For control SAs,free pork muscle was obtained from piglets that had not been exposed to SAs.The tissue samples were minced and homogenized and then frozen at–208C until ana-lysis.For recovery study,mixed standard solution(1and5m g/ mL in MeOH)was added into homogenized muscle samples to produce spiked concentration of25,50and100m g/kg.For each spiked level,six replicates were analyzed for one assay and three assays were repeated for three consecutive days. Comparison of IAC puri?cation with conventional methods
To compare the puri?cation effect of IAC column with liquid–liquid extraction and solid phase extraction,12pork muscle samples spiked at100m g/kg of SAs were divided into three batches and were subjected to sample preparation by the three methods.Both of the two conventional methods have been employed as routine methods in our lab,and the procedures are brie?y described in the following.
For liquid–liquid extraction(20),1g of samples was mixed with2g of anhydrous sodium sulfate in a50-mL centrifuge tube and then extracted twice by40mL(20?2)of aceto-nitrile.After the extracts were combined,10mL of isopropanol was added and then rotary evaporated to dryness.The residue was redissolved with1mL of15%acentonitrile aqueous solu-tion and transferred to a10-mL centrifugation tube.Two millili-ters of hexane(saturated with acentonitrile)was subsequently added to degrease.After centrifugation,an aliquot of the lower solution was subjected to LC determination.
For solid phase extraction(21),1g of samples was mixed with2g of anhydrous sodium sulfate and then extracted twice by40mL(20?2)of acetonitrile.After the extracts were com-bined,10mL of hexane was added to degrease.After standing and partition,the hexane layer was discarded and10mL of isopropanol was added.The mixture was then rotary evapo-rated to dryness and re-dissovled with1mL of0.2%formic acid aqueous solution and1mL of5%acetic acid aqueous solution. The mixture was subsequently loaded to MCX column that was previously conditioned with3mL of MeOH and3mL of water, respectively.After being washed with2mL of2%formic acid aqueous solution and2mL of MeOH,the column was eluted with4mL of6%ammonia–MeOH(v/v).The collected elute was evaporated to dryness at408C under a gentle stream of ni-trogen and then reconstituted in1mL of15%acetonitrile aqueous solution.After being?ltered,the solution was?nally injected into the LC system for analysis.
For IAC cleanup,the samples were pretreated and deter-mined according to the method described previously.
Results and Discussion
Preparation of immunoaf?nity column
In previous reports,several groups have prepared IAC columns against SAs,but in these studies,only one antibody was coupled with Sepharose4B;thus,the prepared IAC column can only trap a maximum of eight SAs due to the limitation of anti-body speci?city(16,17,19).Because the MRLs for total SAs were set by EU(3)and China(4),an IAC column that can adsorb more SAs is preferred.To achieve this goal,two strat-egies were generally employed:to prepare more generic anti-body and to mix multiple antibodies using one IAC column. Although a generic antibody against15SAs has been reported Table I
Capacity(ng/mL gel)of Individual SAs for IAC Columns Coupled with Different Mabs
Column capacity(ng/mL gel)
Analytes E3D5A1B2F7E8C9H5D4C7A2F7 SA0002188 SIM21535000 SDZ022******* ST020******* SPD0221500 SMR1489232902367 SMD0230400 SMTZ006072269 SM2155462500 SCP03882462320 SMZ021******* SMM024******* SIZ0002311 SCPA0228810432304 SDM243010320 SQX0011792405 Table II
IAC Column Capacity for SAs in Mixed Standard Solution
Analytes Column capacity(ng/mL gel)Analytes Column capacity(ng/mL gel) SA312SM2407
SIM2359SCP336
SDZ448SMZ478
ST326SMM324
SPD398SIZ364
SMR405SPZ479
SMD357SDM367
SMTZ415SQX453
Preparation and Evaluation of a Mixed-Bed Immunoaf?nity Column for Selective Puri?cation of Sixteen Sulfonamides in Pork Muscle169
(5),this antibody was not available in our laboratory,thus the second protocol was carried out in our study.Four Mabs (E3D5A1,B2F7E8,C9H5D4and C7A2F7)against different SAs were used to couple with Sepharose4B,respectively.The amount for each Mab is3mg/mL gel and each IAC column was poured with1mL gel.The adsorption speci?city and capacity of the IAC columns are shown in Table1.The results indicated that Mabs E3D5A1,B2F7E8,C9H5D4and C7A2F7can strongly trap three,eight,four and10SAs,respectively.To obtain equal column capacities for all SAs in mixed standard solution,we adjusted the antibody amount and mixed the four Mabs before coupling.The?nal antibody amounts for Mab E3D5A1,
B2F7E8, Figure2.The elution curve of SA on an IAC column with different ratios of MeOH–
water.
Figure3.The IAC capacity and recovery(300m g/kg)variation curves after15cycles in45days for(A)SA,(B)SIM2,(C)SPD,(D)SQX.
Table III
Recoveries and CV of SAs from Pork Muscle(n?18)
SAs Spiked level(m g/kg)
2550100
Recovery(%)CV%Recovery(%)CV%Recovery(%)CV%
SA95.1 5.190.28.689.1 6.1
SIM289.6 6.786.7 6.4103.1 6.2
SDZ83.4 4.995.2 6.196.4 6.0
ST102.3 6.894.6 6.391.3 2.8
SPD87.4 5.386.3 5.286.3 6.3
SMR95.7 4.985.4 4.8100.3 5.3
SMD84.1 5.283.37.993.4 3.7
SMTZ100.27.391.5 5.588.3 4.2
SM2102.1 4.6101.4 5.6100.2 5.4
SCP84.9 3.383.57.3100.3 6.2
SMZ95.2 5.895.6 6.888.48.0
SMM86.3 4.892.4 4.886.77.6
SIZ96.7 3.187.3 4.999.3 5.4
SPZ99.0 4.688.2 6.597.5 6.3
SDM83.5 6.491.3 4.986.88.4
SQX97.38.183.3 4.985.6 5.4 170Li et al.
Figure4.Typical chromatograms of control and spiked samples:(A,B)puri?ed by IAC,(C,D)puri?ed by liquid–liquid extraction,(E,F)puri?ed by solid phase extraction;the spiked concentration was100m g/kg of SAs;the elution order of the SAs was SA(1,3.2min),SIM2(2,4.3min),SDZ(3,4.8min),ST(4,5.2min),SPD(5,6.3min),SMR(6, 7.5min),SMD(7,10.5min),SMTZ(8,11.4min),SM2(9,13.2min),SCP(10,17.1min),SMZ(11,18.8min),SMM(12,20.4min),SIZ(13,23.1min),SPZ(14,29.2min), SDM(15,33.6min)and SQZ(16,35.6min).
Preparation and Evaluation of a Mixed-Bed Immunoaf?nity Column for Selective Puri?cation of Sixteen Sulfonamides in Pork Muscle171
C9H5D4and C7A2F7
3.5,3.5and 4mg /mL gel.The capacity of this mixed-bed IAC column for all SAs was tested to be 312–478ng /mL gel (Table 2),which implies that the IAC column can maximally absorb SA amounts in samples with six-fold MRL level of sixteen SAs.To demonstrate that SA was specially bound to the immobilized Mab and there was no non-speci?c absorption,the control column (without coupled anti-body)was employed to measure the capacity as described previously.When the proposed sample preparation procedures were employed,none of the SAs wwere found to adsorb on the control Sepharose 4B column.
Optimization of the IAC conditions
Optimization of loading,washing,and elution conditions is necessary to IAC cleanup because these conditions have a strong in?uence on the association and dissociation of antigen-antibody complex (19).To investigate whether a loading buffer containing different ratios of ethanol has an effect on the recovery,0.1mL of mixed standard solution (5m g /mL)was loaded in 10mL of PBS–ethanol (95:5),PBS–ethanol (90:10)and PBS–ethanol (80:20),respectively.After these solutions were loaded,the columns were washed by 10mL of water followed by eluting with 2mL of MeOH and detecting by HPLC-UV.The results indicated that the average recovery has no signi?cant change when the ratio of ethanol was increased from 5to 10%,and has a slight decline from 99.1
to 96.3%when the ratio was increased up to 20%.Considering the solubility of SAs in PBS–ethanol,PBS–ethanol (90:10)was selected as loading medium.The effect of ?ow rate (0.5,1,1.5and 2mL /min)of the loading solution on recovery was also investigated.Increase of ?ow rate from 1to 2mL /min resulted in the decrease of average recovery from 98.3to 84.4%.However,the recoveries for SAs at ?ow rate of 0.5and 1mL /min have no signi?cant difference,thus the ?ow rate at 1mL /min was chosen for the subsequent study.
In IAC cleanup,the target analyte in samples could be selectively captured by speci?c antibodies immobilized on gel;at the same time,the interfering substance may also be retained because of nonspeci?c absorption.These interfer-ences could be largely removed by washing procedure.Generally,washing buffer consisted of water and organic solvent such as MeOH (18).Three ratios of water–MeOH (100:0,95:5and 90:10)were tested for washing effect.It was found that the recovery and washing effect is similar.To save organic solvent,pure water was used as washing solution in this study.
Following the washing procedure,the trapped analyte could then be released from the IAC column by dissociating the antibody-analyte complex with eluting buffer.In this study,2mL of different ratios of MeOH in water (from 50to 100%)were employed as eluting solution,respectively.The eluting curves (Figure 2)indicated that the recoveries of SA (as a rep-resentative drug)were dramatically increased from 38.5to
Figure 4.(Continued).
172Li et al.
96.8%when the MeOH ratio was elevated from50to80%. When the MeOH ratio further rose from80to100%,the recov-ery had no signi?cant change.Because pure MeOH is easy to be further concentrated,it was?nally selected as eluting solution.
The reusability of IAC was subsequently evaluated.For each use,more than60min for antibody revival is needed.The curves of column capacity and recoveries after15cycles of sample cleanup are shown in Figure3.Although the column capacity gradually decreased as the cycles increased,the recov-eries of SA,SIM2,SPD and SQX(as representative drugs)at spiked concentrations of300m g/kg in pork muscle were observed without any loss after15cycles in45days.
Method validation
The standard calibration curve was constructed by plotting the peak area versus concentration and used to determine the concentration of SAs in all subsequent analysis.It showed that the calibration curves for all SAs were linear in the range of20–2000ng/mL with satisfactory correlation coef?-cients(r2)of more than0.99.The limits of quanti?cation (LOQ)for SAs in pork muscle,which were de?ned as signal-to-noise ratio of10:1,respectively,were determined to be25m g/kg.The average recovery of18replicate blank tissues forti?ed at LOQ level was more than83.4%with coef?-cient of variation(CV)of less than8.1%(Table3).The accur-acy and precision of the method was evaluated at four levels according to recovery and coef?cient of variability.When the blank pork muscle samples were spiked at concentrations of 25,50and100m g/kg,the recoveries of SAs from forti?ed samples ranged from83.3to102.1%with intra-day and inter-day CVs of less than8.6%(Table3).The LOQ of this method was below or equal to current SA MRLs established by EU and China,and the accuracy and precision also met the require-ments for quantitative analysis;therefore,the developed method can be used to monitor SA residue in pork muscle. Typical chromatograms of blank and spiked samples puri?ed by IAC,liquid–liquid extraction and solid phase extraction are presented in Figure4.For IAC cleanup,the lack of interference to SAs peak in the chromatogram suggests a high speci?city of the IAC column and a good resolution of the chromatographic method.In contrast,sample preparation by liquid–liquid ex-traction and solid phase extraction brings obvious interferences to SAs peaks in the chromatogram.Also,as described previous-ly,IAC puri?cation is simpler and requires less organic solution than both liquid–liquid extraction and solid phase extraction. Thus,the IAC procedure can be a good alternative to conven-tional methods for sample preparation.
Conclusions
In this study,we prepared a mixed-bed IAC column for the puri?cation of SAs from pork muscle,which was then followed by LC separation and UV detection.The IAC extraction can give satisfactory recovery and leads to low detection limit in LC analysis.Furthermore,the IAC column can obtain better puri?-cation effects while requiring fewer puri?cation steps and con-suming less organic solution than liquid–liquid extraction and solid phase extraction.Therefore,the developed IAC column would be an ideal approach for the cleanup of SAs in pork muscle.
Acknowledgment
This work is?nancially supported by Chongqing Science and Technology Commission(NO.CSTC2009CB1012).
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Development of an immunoaf?nity column method using broad-speci?city monoclonal antibodies for simultaneous extraction and cleanup of?uoroquinolone and sulfonamide antibiotics in animal muscle tissues.Journal of Chromatography A2008,1209, 1–9.
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of seven sulfonamide residues in cow liver by ultra performance liquid chromatography and mass spectrometry.Chinese Journal of Analysis Laboratory2009,28,16–20.
174Li et al.
员工个人简历表/jianli/)查看。 员工个人简历表【一】 姓名：性别：男 民族：汉族出生年月：1984年7月28日证件号码：婚姻状况：未婚 身高：172cm体重：65kg 户籍：广东韶关现所在地：广东湛江
毕业学校：湛江师范学院学历：本科专业名称：法学毕业年份：2008年工作年限：三年以上职称： 求职意向 职位性质：全职 职位类别：行政/后勤 职位名称：助理; 文员; 普通员工
工作地区：湛江市麻章区; 湛江市赤坎区; 待遇要求：可面议; 不需要提供住房 到职时间：可随时到岗 技能专长 语言能力： 计算机能力：证书全国计算机等级考试一级; 教育培训
教育经历：时间所在学校学历 2004年9月- 2008年7月湛江师范学院本科培训经历：时间培训机构证书 2008年7月- 2009年7月韶关供电局培训中心工作经历 所在公司：韶关市擎能投资管理有限公司 时间范围：2008年7月- 2010年7月 公司性质：私营企业
所属行业：电力、能源、矿产业 担任职位：综合部法律专责 工作描述：2008.7-2010.7 1、制定了公司人事制度、股权管理办法、固定资产(含车辆)管理制度、综合部工作流程等制度; 2、修订公司及各子公司章程及股权管理办法，参与优化各公司管理层架构等工作; 3、专项负责工商登记变更工作，于一年的时间里，完成成立一家子公司，整合两家子公司，控股四家公司的验资、工商登记变更、组织机构代码变更登记及合计七家公司的年检工作; 4、专项负责各类合同的修订、审核工作，合计为公司填补经营漏洞十五处; 5、专项负责处理公司及各子公司法律事务，处理交通事故四起，其中两起和解，两起应诉;处理工伤事故三起，一起应诉，两起和解;处理劳动用工纠纷一起，取得和解;以上均得到妥善处理。(注：谈判及事故的前期处理均由本人专项处理，诉讼则由本人协助公司法律顾问处理。) 6、担任公司团委副主席，独自成立公司集团篮球、羽毛球、摄影三个协会，并担任三个协会的理事长，成功带领三个协会的代表队与外单位进行了多次交流; 7、提议并成功举办了公司集团第一届
西安郵電學院 计算机网络技术及应用实验 报告书 院部名称：管理工程学院 学生姓名：XXX 专业名称：信息管理与信息系统班级：10XX 学号：0210XXXX 时间：2012年 5 月 4 日
一、实验目的 1.掌握基本的网络知识。 2.掌握CMD一些基本命令，并学会运用这些命令排除一些基本问题。 二、具体实验内容及步骤 1．Ping命令的使用 点击―开始‖—〉―运行‖，在―运行‖对话框―打开‖后键入cmd，按―确定‖，到命令行方式下。 实验步骤： 1）回环测试。这个ping命令被送到本地计算机IP软件。这一命令可以用来检测TCP/IP的安装或运行存在的某些最基本的问题。 C:\>ping 127.0.0.1 2）Localhost是127.0.0.1的别名，我们也可以利用localhost来进行回环测试，每台计算机都能够将名称localhost转换成地址127.0.0.1。如果做不到这一点，则表示主机文件（host）中存在问题。 C:\>ping localhost
3）Ping本机IP。若无回复，说明本地计算机的TCP/IP安装或配置存在问题。 C:\>ping –t 192.168.2.37 在命令中加入参数-t，本地计算机应该始终对该ping命令做出应答，使用ctrl+C终止操作。 4）Ping局域网内其它主机IP。该命令对局域网内的其它主机发送回送请求信息。
如果能够收到对方主机的回送应答信息，表明本地网络中的网卡和传输媒体运行正常。 C:\>ping 192.168.2.55 5）Ping网关：如果能够收到应答信息，则表明网络中的网关路由器运行正常。 C:\>ping 192.168.2.1 6）Ping域名服务器:如果能够收到应答信息，则表明网络中的域名服务器运行正常。 C:\>ping 202.117.128.2
测试网速命令必须学会的几个网络测试命令 了解和把握下面几个命令将会有助于您更快地检测到网络故障所在，从而节省时间dota测试模式命令，进步效率。 Ping Ping是测试网络联接状况以及信息包发送和接收状况非常有用的工具，是网络测试最常用的命令。Ping向目标主机(地址)发送一个回送请求数据包显卡测试命令，要求目标主机收到请求后给予答复，从而判定网络的响应时间和本机是否与目标主机(地址)联通。假如执行Ping不成功，则可以猜测故障出现在以下几个方面：网线故障，网络适配器配置不正确，IP地址不正确。假如执行Ping成功而网络仍无法使用，那么题目很可能出在网络系统的软件配置方面，Ping成功只能保证本机与目标主机间存在一条连通的物理路径。 命令格式： ping IP地址或主机名 [-t] [-a] [-n count] [-l size] 参数含义： -t不停地向目标主机发送数据； -a 以IP地址格式来显示目标主机的网络地址； -n count 指定要Ping多少次测试网速的命令声卡测试命令，具体次数由count来指定； -l size 指定发送到目标主机的数据包的大小。 例如当您的机器不能访问Internet，首先您想确认是否是本地局域网的故障。假定局域网的代理服务器IP地址为202.168.0.1测试网络的命令，您可以使用Ping 202.168.0.1命令查看本机是否和代理服务器联通。又如，测试本机的网卡是否正确安装的常用命令是ping 127.0.0.1。 Tracert Tracert命令用来显示数据包到达目标主机所经过的路径，并显示到达每个节点的时间。命令功能同Ping类似测试网速命令，但它所获得的信息要比Ping命令具体得多，它把数据包所走的全部路径、节点的IP以及花费的时间都显示出来。该命令比较适用于大型网络。 命令格式： tracert IP地址或主机名 [-d][-h maximumhops][-j host_list] [-w timeout] 参数含义： -d 不解析目标主机的名字； -h maximum_hops 指定搜索到目标地址的最大跳跃数； -j host_list 按照主机列表中的地址开释源路由； -w timeout 指定超时时间间隔，程序默认的时间单位是毫秒。 例如大家想要了解自己的计算机与目标主机https://www.doczj.com/doc/398844065.html,之间具体的传输路径信息，可以在MS-DOS方式输进tracert https://www.doczj.com/doc/398844065.html,。 假如我们在Tracert命令后面加上一些参数，还可以检测到其他更具体的信息，例如使用参数-dping命令测试网速，可以指定程序在跟踪主机的路径信息时，同时也解析目标主机的域名。 Netstat Netstat命令可以帮助网络治理员了解网络的整体使用情况。它可以显示当前正在活动的网络连接的具体信息，例如显示网络连接、路由表和网络接口信息dota测试命令，可以
常用的网络测试命令 在进行各类网络实验和网络故障排除时，经常需要用到相应的测试工具。网络测试工具基本上分为两类：专用测试工具和系统集成的测试命令，其中，专用测试工具虽然功能强大， 但价格较为昂贵，主要用于对网络的专业测试。对于网络实验和平时的网络维护来说，通过熟练掌握由系统（操作系统和网络设备）集成的一些测试命令，就可以判断网络的工作状态和常见的网络故障。我们以 Windows XP 为例，介绍一些常见命令的使用方法。 1 Ping网络连通测试命令 1.1 Ping 命令的功能 Ping 是网络连通测试命令，是一种常见的网络工具。用这种工具可以测试端到端的连 通性，即检查源端到目的端网络是否通畅。该命令主要是用来检查路由是否能够到达，Ping 的原理很简单，就是通过向计算机发送Internet控制信息协议（ICMP ）从源端向目的端发 出一定数量的网络包，然后从目的端返回这些包的响应，以校验与远程计算机或本地计算机 的连接情况。对于每个发送网络包，Ping 最多等待 1 秒并显示发送和接收网络包的数量， 比较每个接收网络包和发送网络包，以校验其有效性。默认情况下，发送四个回应网络包。 由于该命令的包长非常小，所以在网上传递的速度非常快，可以快速的检测要去的站点是否可达，如果在一定的时间内收到响应，则程序返回从包发出到收到的时间间隔，这样根据时间间隔就可以统计网络的延迟。如果网络包的响应在一定时间间隔内没有收到，则程序认为包丢失，返回请求超时的结果。这样如果让Ping 一次发一定数量的包，然后检查收到相应 的包的数量，则可统计出端到端网络的丢包率，而丢包率是检验网络质量的重要参数。 一般在去某一站点是可以先运行一下该命令看看该站点是否可达。如果执行Ping不成功，则可以预测故障出现在以下几个方面： 网线是否连通 网络适配器配置是否正确 IP 地址是否可用 如果执行Ping 成功而网络仍无法使用，那么问题很可能出在网络系统的软件配置方面，Ping 成功只能保证当前主机与目的主机间存在一条连通的物理路径。它的使用格式是在命 令提示符下键入： ping IP 地址或主机名，执行结果显示响应时间，重复执行这个命令，可以 发现 Ping 报告的响应时间是不同的。 如果网络管理员和用户的Ping 命令都失败了， Ping 命令显示的出错信息是很有帮助的， 可以指导进行下一步的测试计划。这时可注意 Ping 命令显示的出错信息，这种出错信息通常分 为三种情况： (1) unknown host（不知名主机），该远程主机的名字不能被DNS（域名服务器）转换成ip 地址。网络故障可能为 DNS 有故障，或者其名字不正确，或者网络管理员的系统与远程 主机之间的通信线路有故障。 (2)network unreachable （网络不能到达），这是本地系统没有到达远程系统的路由，可 用 netstat-rn 检查路由表来确定路由配置情况。
公司员工应聘个人求职简历 【篇一】公司员工应聘个人求职简历 （女，22岁） 求职位：应聘公司设计职位 期望薪资：3000-5000元/月 目前职位：平面设计 学历：大专 工作经验：1-3年 现居住地：上海浦东 联系电话： 电子邮箱： 自我评价 1年印刷排版经验，半年设计经验，能适应加班，工作要有双休 工作经验 杨园印务 20xx-8至20xx-8任职排版设计/制作薪资20xx-3000元/月 工作职责：1、公司是个小型印刷厂，主要做的就是公安局的书籍和册子的排版，文字居多的那种；主要用Indesign排版，还有每期都有的《交易信息》有关混凝土内容的书籍的排版。 2、AI制作不干胶并且拼版有时候直接出硫酸纸有时候要发出去出菲林。
3、ps是辅助做封面时修图要用到，有时候也用cdr拼版，有时候外接的单页设计也是要做的，再就是接收文件。 世纪广告 20xx-9至现在任职平面设计薪资20xx-3000元/月 工作职责：排版企业书册、设计名片、易拉宝、贺卡、dm单页 教育经历 20xx-9至20xx-7鄂东职业技术学院电脑艺术设计专业【篇二】公司员工应聘个人求职简历 姓名：*** 国籍：中国 目前所在地：白云区 民族：汉族 户口所在地：江门 身材：168cm58kg 婚姻状况：已婚 年龄：41 培训认证： 诚信徽章： 求职意向及工作经历 人才类型：普通求职 应聘职位： 工作年限：19 职称：初级
求职类型：均可 可到职日期：两个星期 月薪要求：5000——8000 希望工作地区：广州东莞深圳 个人工作经历： 公司名称： 起止年月：20xx-06～20xx-07广州某物流公司 公司性质：私营企业 所属行业：交通/运输/物流 担任职务：财务经理 工作描述：财务管理 离职原因： 公司名称： 起止年月：20xx-04～20xx-06广州某工业开关制造有限公司 公司性质：民营企业 所属行业：学术/科研 担任职务：财务经理 工作描述：财务管理工作。 离职原因： 公司名称： 起止年月：20xx-03～20xx-04广州某实业有限公司 公司性质：私营企业 所属行业：文娱、体育、办公用品及设备
实验1常用网络命令 1．ping命令 ping是个使用频率极高的实用程序，主要用于确定网络的连通性。这对确定网络是否正确连接，以及网络连接的状况十分有用。简单的说，ping就是一个测试程序，如果ping运行正确，大体上就可以排除网络访问层、网卡、Modem的输入输出线路、电缆和路由器等存在的故障，从而缩小问题的范围。 ping能够以毫秒为单位显示发送请求到返回应答之间的时间量。如果应答时间短，表示数据报不必通过太多的路由器或网络，连接速度比较快。ping还能显示TTL（Time To Live，生存时间）值，通过TTL 值可以推算数据包通过了多少个路由器。 (1) 命令格式 ping主机名 ping域名 ping IP地址 如图所示，使用ping命令检查到I的计算机的连通性，该例为连接正常。共发送了四个测试数据包，正确接收到四个数据包。 (2) ping命令的基本应用 一般情况下，用户可以通过使用一系列ping命令来查找问题出在什么地方，或检验网络运行的情况。下面就给出一个典型的检测次序及对应的可能故障： ① 如果测试成功，表明网卡、TCP/IP协议的安装、IP地址、子网掩码的设置正常。如果测试不成功，就表示TCP/IP的安装或设置存在有问题。 ②ping 本机IP地址 如果测试不成功，则表示本地配置或安装存在问题，应当对网络设备和通讯介质进行测试、检查并排除。 ③ping局域网内其他IP 如果测试成功，表明本地网络中的网卡和载体运行正确。但如果收到0个回送应答，那么表示子网掩码不正确或网卡配置错误或电缆系统有问题。 ④ping 网关IP 这个命令如果应答正确，表示局域网中的网关路由器正在运行并能够做出应答。 ⑤ping 远程IP 如果收到正确应答，表示成功的使用了缺省网关。对于拨号上网用户则表示能够成功的访问Internet（但不排除ISP的DNS会有问题）。 ⑥ping localhost ⑦ping 对此域名执行Ping命令，计算机必须先将域名转换成IP地址，通常是通过DNS服务器。如果这里出现故障，则表示本机DNS服务器的IP地址配置不正确，或它所访问的DNS服务器有故障如果上面所列出的所有ping命令都能正常运行，那么计算机进行本地和远程通信基本上就没有问题了。但是，这些命令的成功并不表示你所有的网络配置都没有问题，例如，某些子网掩码错误就可能无法用这些方法检测到。
医务人员求职简历模板(一) 姓名： XXX 国籍：中国 目前所在地：广州 民族：汉族 户口所在地：广西 身材： 172 cm?65 kg 婚姻状况：未婚 年龄： 26 岁 求职意向及工作经历 人才类型：普通求职 应聘职位：医院/医疗/护理/美容保健类：临床各科医生、 工作年限： 4 职称：初级 求职类型：全职 可到职日期：随时 月薪要求： 3500--5000 希望工作地区：广东省广州佛山 个人工作经历： 公司名称：广西藤县象棋镇卫生院起止年月：2006-02 ～ 2009-08 公司性质：社会团体所属行业：医疗，卫生事业 担任职务：内儿科医生 工作描述： 离职原因： 教育背景 毕业院校：广西中医学院 最高学历：大专 毕业日期： 2005-07-01 所学专业一：中西结合 所学专业二：
受教育培训经历： 起始年月终止年月学校(机构) 专业获得证书证书编号 2002-09 2005-07 广西中医学院中医(中西结合) 毕业 2004-07 2005-07 广西民族医院(三甲) 实习 - 2005-09 2005-12 广西中医学院 B超、心电图诊断专修班结业 2007-12 取得中西结合执业助理医师中西结合 - 2008-07 2009-01 广西梧州市中医院(三乙) 骨伤肠科进修结业证书 2009-02 2009-08 广西梧州市红十字会医院(三乙) 急诊、儿科进修结业证书 语言能力 外语：英语一般 国语水平：优秀 粤语水平：优秀 工作能力及其他专长 熟练儿科/能处理内科、外科常见病/懂B超、心电图/ 详细个人自传 三年的学医生涯是我一生中最重要的一段时光，在校学习期间我刻苦认真，勤奋好学，能够遵守各项规章制度，热爱祖国、尊敬师长、团结同学、和周围人和睦相处，具有良好的团队合作精神。工作中认真负责、一丝不苟,严格要求自己不断提升及完善自己，努力成为一个吃苦耐劳的医务人员。 在进修学习期间，本人具有较强的上进心责任心，品德优秀，做事踏实，以最快的适应能力融入科室工作，刻苦认真，勤奋好学，虚心向学，对病人热情、负责。基本掌握了常见病、多发病及危重病的诊断治疗。在竞争激烈的今天，我深知自己的不足，仍需继续努力学习，更新知识，在以后的日子一定会做得更好。若能在贵院工作，我会竭尽所能，为贵院服务，并虚心向贵院各位领导学习，提高自己工作能力，一定给贵院一个满意回报。 月薪要求：3000元以上 个人联系方式 通讯地址： 联系电话：家庭电话： 手机： QQ号码：
常用网络测试命令 Ping Ping是测试网络联接状况以及信息包发送和接收状况非常有用的工具，是网络测试最 常用的命令。Ping向目标主机(地址)发送一个回送请求数据包，要求目标主机收到请求后给予答复，从而判断网络的响应时间和本机是否与目标主机(地址)联通。 如果执行Ping不成功，则可以预测故障出现在以下几个方面:网线故障，网络适配器配置不正确，IP地址不正确。如果执行Ping成功而网络仍无法使用，那么问题很可能出在网络系统的软件配置方面，Ping成功只能保证本机与目标主机间存在一条连通的物理路径。 命令格式: ping IP地址或主机名[-t] [-a] [-n count] [-l size] 参数含义: -t不停地向目标主机发送数据; -a 以IP地址格式来显示目标主机的网络地址; -n count 指定要Ping多少次，具体次数由count来指定; -l size 指定发送到目标主机的数据包的大小。 例如当您的机器不能访问Internet，首先您想确认是否是本地局域网的故障。假定局域网的代理服务器IP地址为202.168.0.1，您可以使用Ping避免202.168.0.1命令查看本机是否和代理服务器联通。又如，测试本机的网卡是否正确安装的常用命令是ping 127.0.0.1。 Tracert Tracert命令用来显示数据包到达目标主机所经过的路径，并显示到达每个节点的时间。命令功能同Ping类似，但它所获得的信息要比Ping命令详细得多，它把数据包所走的全部路径、节点的IP 以及花费的时间都显示出来。该命令比较适用于大型网络。 命令格式: tracert IP地址或主机名[-d][-h maximumhops][-j host_list] [-w timeout] 参数含义: -d 不解析目标主机的名字; -h maximum_hops 指定搜索到目标地址的最大跳跃数; -j host_list 按照主机列表中的地址释放源路由; -w timeout 指定超时时间间隔，程序默认的时间单位是毫秒。 例如大家想要了解自己的计算机与目标主机https://www.doczj.com/doc/398844065.html,之间详细的传输路径信息，可以在MS-DOS方式输入tracert https://www.doczj.com/doc/398844065.html,。 如果我们在Tracert命令后面加上一些参数，还可以检测到其他更详细的信息，例如使用参数-d，可以指定程序在跟踪主机的路径信息时，同时也解析目标主机的域名。 Netstat Netstat命令可以帮助网络管理员了解网络的整体使用情况。它可以显示当前正在活动的网络连接的详细信息，例如显示网络连接、路由表和网络接口信息，可以统计目前总共有哪些网络连接正在运行。
个人简历中的内容部分该怎么写呢?怎么写才既简洁又全面呢?下面是由XX为大家整理的“酒店员工个人简历模板”，欢迎大家阅读，仅供大家参考，希望对您有所帮助。更多文章在个人简历栏目，希望您能关注与阅读。 酒店员工个人简历模板【一】 个人信息 姓名：xxx 性别：男 出生年月：xxx年08月03日 所在地区：邢台 学历: 本科 专业：酒店管理 婚姻状况：未婚 联系电话： 最高学历：本科最高学历学校：xx科技学院 时间：20xx年7月至20xx年7月 教育情况描述： 20xx进入xx科技学院，在校期间经老师同学信任，有幸曾担任班长，团支书系，院学生会部长，有较强的组织能力。 工作经历： 20xx年9月----20xx年xxxx代理业务经理 个人能力： 在校期间学习努力刻苦，经常参加系院的，体育，文艺等各项活动，老师领导都给予好评。工作期间不怕苦，不怕脏，努力干好本职工作的同时，还参加单位组织的篮球赛，交谊舞等活动。 个人素质： 富有挑战和竞争意识，勤奋、能吃苦。 自我激励，学习认真，有很好的自学能力。 有很好的团队精神和协作精神，良好的沟通、协调能力，有责任感。 自我评价： 我是一个充满自信心且具有高度责任感的男孩，篮球，曾是学院系队成员，交谊舞，曾经参加过单位表演比赛。在学校期间曾经也是个风云人物，经常出现在学校学生会工作，体育文艺活动中。人多的地方就有我。曾获; 院优秀学生会干部，山东省优秀毕业生，入党积极分子，系班优秀五好学生等。 酒店员工个人简历模板【二】 姓名：xxx 性别：男 出生日期：xxx-4-29 婚姻状况：未婚 国籍：中国 民族：汉族 身高：180CM 政治面貌：团员
计算机网络经典命令大全 1 .最基本，最常用的，测试物理网络的 ping 192.168.0.8 －t ，参数－t是等待用户去中断测试 2.查看DNS、IP、Mac等 A.Win98：winipcfg B.Win2000以上：Ipconfig/all C.NSLOOKUP：如查看河北的DNS C:\>nslookup Default Server: https://www.doczj.com/doc/398844065.html, Address: 202.99.160.68 >server 202.99.41.2 则将DNS改为了41.2 > https://www.doczj.com/doc/398844065.html, Server: https://www.doczj.com/doc/398844065.html, Address: 202.99.160.68 Non-authoritative answer: Name: https://www.doczj.com/doc/398844065.html, Address: 202.99.160.212 3.网络信使（经常有人问的~） Net send 计算机名/IP|* (广播) 传送内容，注意不能跨网段 net stop messenger 停止信使服务，也可以在面板－服务修改 net start messenger 开始信使服务 4.探测对方对方计算机名，所在的组、域及当前用户名（追捕的工作原理） ping －a IP －t ，只显示NetBios名 nbtstat -a 192.168.10.146 比较全的 https://www.doczj.com/doc/398844065.html,stat -a 显示出你的计算机当前所开放的所有端口 netstat -s -e 比较详细的显示你的网络资料，包括TCP、UDP、ICMP 和 IP的统计等 6.探测arp绑定（动态和静态）列表，显示所有连接了我的计算机，显示对方IP和MAC地址arp -a 7.在代理服务器端
北京xxxxxxxxxx 有限公司 新入职员工履历表 （以下项目均为必填项目且如实填写） 个人基本资料 姓 名 性 别 身份证号码 照 片 出生日期 年 龄 民 族 政治面貌 身高（cm ） 体重（kg ） 婚姻状况 □已婚 □未婚 □离婚 首次参作时间 现家庭住址 家 庭 电 话 籍 贯 邮 政 编 码 户口所在地 户 口 性 质 □农业 □非农业 本人手机号 电 子 邮 箱 紧急联络人 电 话 号 码 社会保险状况(有无)：□无 □养老 □失业 □大病 □医疗 □住房公积金 身体健康状况： 档案所在单位： 入司渠道：□从报纸广告上得知招聘信息 □从网上得知招聘信息（网站名： ） □在招聘会上投简历 □公司内部员工介绍（姓名： 关系： ） □其他： 学历背景（由最高学历开始填写） 由年/月 至年/月 学 校 名 称 专 业 年 制 种 类 种类：统招、函授、电大、自考、专升本、成人、夜大 技能训练程度或职称 语言 能力 第一外语名称： 曾获取证书名称： 第二外语名称： 曾获取证书名称： 其他语言能力： 员工编号： 单位部门： 到岗时间： 由 人 事 部 填 写
曾得 到之 专业 证照 考试类别考试机构考试日期证照名称字号 家庭成员情况 姓名与本人关系年龄工作单位居住地联系电话 是否有亲属或朋友在本公司工作□是□否 如有在本公司任职请填写姓名：部门：职位：关系： 工作经历（由最近一次工作经历开始填写） 工作时间 （年/月—年/月） 单位名称岗位名称证明人姓名及职务证明人电话离职原因 最近一次工作 情况单位名称：离职时间是否与前工作单位约定有保密协议与竞业限制协议： 是否与前工作单位有未尽法律事宜： 员工本人声明： 1、本人确认，公司已如实告知工作内容、工作地点、工作条件、职业危害、安全生产状况、劳动报酬以及员工要求了 解的情况。 2、本人在此表格上所写的一切资料均真实，本人充分了解上述资料的真实性是双方订立劳动合同的前提条件，如有弄 虚作假或隐瞒的情况，属于严重违反公司规章制度，同意公司有权解除劳动合同或对劳动合同做无效认定处理，公司因此遭受的损失，本人有对此赔偿的义务。 3、本人确认，本表所填写的家庭现住址为邮寄送达地址，公司向该家庭现住址寄送的文件或物品，如果发生收件人拒 绝签收或其他无法送达的情形的，本人同意，从公司寄出之日起视为公司已经送达。 4、以上信息如发生更改，本人承诺更改后一个月内向公司说明，如因未履行上述行为而产生的后果由本人承担。 应聘人签章：年月日
普通员工个人简历表 姓名：xxx性别：女 婚姻状况：未婚民族：汉族 户籍：江西-赣州年龄： 30 现所在地：上海市身高： 168cm 希望地区：上海市-闵行区、上海市-其他 希望岗位：行政/人事类-人事经理/主管 行政/人事类-员工培训经理/主管 行政/人事类-招聘经理/主管 寻求职位：人力资源主管、招聘/培训主管 待遇要求： 6000元/月 最快到岗： 1个月之内 教育经历 2000-09 ～ 2004-07 西安交通大学信息工程专业本科 1997-09 ～ 2000-07 辽宁省锦州市第二中学无高中 培训经历 2008-01 ～ 2009-01 惠州市人才交流中心人事干部培训有证书工作经验至今7年6月工作经验，曾在2家公司工作 ***公司名称 (2011-06 ～至今) 公司性质：私营企业行业类别：农、林、牧、渔业 担任职位：培训主任岗位类别：员工培训经理/主管 工作描述： 1.主要负责培训中心培训体系的搭建，培训制度，流程制定. 2.统筹培训管理工作,培训计划制定,实施,内训及外训的开展. 3.培训课程的开发,教材制订,定期与培训机构的合作.在线培训系统的开发. 4.公司企业文化活动的开展.
***公司名称 (2007-12 ～ 2011-05) 公司性质：合资企业行业类别：互联网、电子商务 担任职位：招聘主管岗位类别：招聘经理/主管 工作描述： 1.人力资源开发，主导负责对中高层人员的招聘与选拔，组织开展网络招聘与现场招聘工作。 2.招聘效果的评估.人力资源报表的制作.招聘相关制度的编写与实施运用。 3.招聘渠道的拓展,与招聘机构.劳务派遣,中介机构联系,定时定量为公司输入员工。 4.人才培养和储备,发现企业内部各类人才并建立关键岗位储备人才档案，激励员工素质技能的不断提高。 5.负责公司职员及员工的档案办理工作.包括档案的调动,转正,定级等。 6.参与新进员工的培训工作。 离职原因：寻求更好的发展空间 ***公司名称 (2004-02 ～ 2007-06) 公司性质：外资企业行业类别：机械制造、机电设备、重工业 担任职位：人力资源主管岗位类别：招聘经理/主管 工作描述： 2006年2月提升为人力资源主管. 管理：人力资源平台建设，建立人力资源管理的各项程序与规章制度，用于指导人力资源各项工作的开展。 招聘： 1.主导招聘方面工作，熟练操作职员及员工招聘工作，以及相关人力资源工作的分析，制定。如年度招聘计划制定，招聘成本分析，招聘效果分析等。 2.建立稳定的的招聘渠道并建立有效的甄选制度，包括试库的建立，更新，职员花名册的建立。 3.跟进分析招聘人员任用情况及离职人员离职原因分析 4.建立企业人才库 业绩考核： 1.协助部门经理建立绩效管理运行制度，
计算机网络 实验报告 实验名称：《常用网络测试命令》 姓名：学号：专业：信息管理与信息系统专业班级：指导教师：
实验成绩： 批阅教师签字： 一、实验目的 （1）熟悉基本的网络测试命令操作：学会ping、tracert、route、ipconfig、arp、netstat、net等网络测试命令的功能与基本用法。 （2）为后续其他实验奠定基础。 二、实验内容与实验步骤 1. 使用ping命令测试网络的连通性 ?ping 127.0.0.1
?ping 本机IP ?ping 局域网内其他IP ?ping 网关IP ?ping 远程IP ?ping https://www.doczj.com/doc/398844065.html, ?连续ping6个包 ?发出去的每个包数据部分包含1000个字节 2. 使用ipconfig命令查看计算机的TCP/IP配置 在命令提示符状态分别输入ipconfig 、 ipconfig/all 命令格式，查看并记录当前计算机的基本TCP/IP参数设置，观察两次命 令所有显示的内容有什么不同 3. 使用arp命令显示和修改本地计算机上的ARP高速缓存 （1）在实验机上输入arp –a（或arp -g）命令显示当前计算机的ARP缓存。 （2）执行arp –d命令，再次用arp –a命令，观察显示结果。 （3）查找隔壁主机的ip地址，在实验机上输入ping 隔壁主机IP地址，再输入arp –a 命令，观察显示结果。 （4）用步骤2清空ARP缓存，然后输入arp –s 隔壁主机IP 地址以及错误的MAC 地址。用arp –a 命令显示结果。 （5）重复步骤3，再次观察显示结果。
4. 使用tracert命令跟踪路由 在实验机上输入tracert https://www.doczj.com/doc/398844065.html, 命令，跟踪数据报从本地机到达 https://www.doczj.com/doc/398844065.html, 所经过的路径。 5. 使用net命令进行网络配置 ?将计算机名为T090的主机中的share目录以及光驱等设置成共享，然后在实验机上输入net view\\ T090 查看名为**计算机的共享资源列表。 ?使用net user 命令： （1）新建一个名为“alice”，密码为“123456”的用户 （2）查看名为“alice”用户的信息 （3）新建一个登陆时间受限制的用户，比如，新建一个名为“edward”，密码为111111，登陆时间权限为每周一到周五早上8点到晚上6点。 （4）查看名为“edward”用户的信息 （5）删除刚才创建的这两个用户 三、实验环境 操作系统：windows XP 开发平台的名称及版本：cmd
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kg 人才类型：在校学生 应聘职位：/金融/投资，店员/营业员，市场营销总监/经理/主管 工作年限： 5 职称：初级 求职类型：实习可到职日期：随时 月薪要求：2000--3500 希望工作地区：江门,, 其他起止年月：2010-12～2011-01 公司性质：其它所属行业：其他行业 担任职位：雷州大学生联合会外联部委员 ：参加雷州大学生联合会义教的外联部，主要工作是与外部商家的交流和沟通，协助其他部门一些杂碎的工作，和早期对学生报名工作会场的秩序的维护 ：开学 江门太平财产保险起止年月：
2010-10～2010-11 公司性质：股份制企业所属行业：金融/投资/证券 担任职位：实习员工 工作描述：公司早会容的准备(以自己制作ppt来展示)，文参考写作网,教您怎样写文从这个方面我了解到文化对公司的作用;公司系统员工资料的录入与输出;公司文件资料的输送;一些发票的黏贴和打印;还有实习生的制作等。 离职原因：到 其他起止年月：2010-09～2010-09 公司性质：其它所属行业：其他行业 担任职位：老板兼员工 工作描述：在学校买并安装(包括一系列的服务)等;从中学习到商品如果是必须品的情况下，必须要学会先斩后奏的方法;也就是先把产品放在客户那里，然后登记客户房号和，也留下自己的，同时以服务第一的态度去对待。
网络诊断常用的几个常用命令 net 命令 net accounts 查阅当账号设置 net config server 查阅本网络配置信息统计 net share 查阅本地计算机上的共享文件 net user 查阅本地用户账号 net view 查阅网络上的可用计算机 ping 命令 一般情况下，用户可能通过使用一系列ping命令来查找问题出现在何处，或检验网络运行的情况，典型的检测次序及所对应的故障。 ping 127.0.0.1 如果测试成功，表明网卡，TCP/IP协议的安装和IP地址、子网掩码的设置正常。 如果测试不成功，则表示TCP/IP的安装或运行存在某些最基本的的问题。 PING 本地IP 如果测试不成功，则表示本地配置或安装存在问题，应当对网络设备和通介质进行测试、检查并排除故障。 PING 局域网内其他的IP 如果测试成功，表明本地网络中的网卡和网络电缆运行正确。但如果收到0个回送应答，那么表示子网掩码不正确或网卡配置错误或电缆有问题。 PING 网关IP 这个命令如果应答正确，表示局域网中的网关路由器正在运行并能做出应答。 PING 远程IP 如果收到正确应答，则表示成功地使用了默认网关；对于拨号上网用户，则表示能够成功地访问INTERNET。 ping localhost localhost 是系统的网络保留名，它是127.0.0.1的别名，每台计算机都能将该名字转换成该地址。如果没有做到这一转换，则表示主机文件（Windows/host）中存在问题。 ping https://www.doczj.com/doc/398844065.html,(一个著名网站域名) 对此域名执行PING命令。计算机须先将域名转换成IP 地址，通常是通过DNS服务器。如果这里出现故障，则表示本机DNS服务器的IP地址配置不正确，或NDS服务器有故障。如果上面列出的所有PING命令都能正常运行机制，那么计算机进行本地和远程通信基本上就没有问题了。但是，这些命令的成功并不表示所有网络配置就没问题，例如，某些子网掩码错误就可能无法用这些方法检测到。 PING命令的常用参数选项如下。 PING IP 地址（如192.168.1.10）-T：连续对IP地址执行PING命令，直到被用户按Ctrl+C键中断。 ping IP 地址-1 2000：指定PING 命令国的数据长度为2000B，而不是默认的32 B。 PING IP地址-N：执行特定的确次PING命令。 netstat命令 netstat -s -s选项能够按照各个协议分别显示其统计数据。 netstat -a:显示所有连接和侦听端口。 netstat -e:显示关于以太网的统计数据。 netstat -r:显示关于路由表的信息。
项目开发人员个人简历范文 个人简历在写作时一定要下功夫惟独如此才会有被选中的机会，有的老总对简历的要求很高，尤其是大企业，简历人数多别可能一一都能仔细看完，有的简历的纸张别符合要求就会直接扔掉，要求很苛刻。更别要说简历使用英文写的，中文的他们还都看别完呢! 不少人渴望进入进入该公司工作，因此就在个人简历中加了一份求职信，那个事实上全然没有必要实，他们决定一份简历是否经过也就那么几秒钟，因此说这种无用功依然省去吧!再说求职信基本上一具模子刻出来的没有必要再去白费时刻了。因此未来就别用在个人简历中写求职信了。 个人简历中的照片也是有一定学咨询，照片既别能太难看也别能过于好看。那么怎么样的照片才合格呢!尽管说我们别能以貌取人但是假如照片真的不行看依然别要往上贴，如此给人的感受不行，容易给自己造成一定的妨碍，导致扣分。为了让让你的简历在第一时刻让聘请者选中，那么你就要对简历下功夫，专心用脑去做。 个人信息 xx 目前所在：广州年龄：22 户口所在：汕头国籍：中国 婚姻状况：未婚民族：汉族 培训认证：未参加身高：163 cm 诚信徽章：未申请体重：53 kg 人才测评：未测评 我的特长： 求职意向 人才类型：应届毕业生 应聘职位：计算机软件：实施工程师，计算机软件：，计算机软件： 工作年限：0职称：无职称 求职类型：全职可到职日期：随时 月薪要求：1500--2000希翼工作地区：广州,汕头, 工作记忆 广州国研教育信息问有限公司起止年月：2010-04 ～2010-05 公司性质：民营企业所属行业：教育/培训/院校 担任职位：项目开辟人员 工作描述：参与学院治理系统项目开辟 离职原因：实习期满 广东荣晖信息工程有限公司起止年月：2009-08 ～2009-11 公司性质：民营企业所属行业：计算机/互联/通信/电子 担任职位：项目实施培训人员 工作描述：参与广东省质量技术监督局金质工程项目的实施和培训 离职原因：合同协议期满 志愿者记忆 教育背景 毕业院校：广东水利电力职业技术学院 最高学历：大专获得学位: 毕业日期：2010-07 专业一：计算机应用技术专业二： 起始年月终止年月学校(机构)所学专业获得证书证书编号
网络测试常用命令网络不通，求助于网管时，经常会看到网管检测和处理网络故障，用到一些命令，了解和掌握下面几个命令将会有助于你更快地检测到网络故障所在，从而节省时间，提高效率。 Ping Ping是测试网络联接状况以及信息包发送和接收状况非常有用的工具，是网络测试最常用的命令。Ping向目标主机（地址）发送一个回送请求数据包，要求目标主机收到请求后给予答复，从而判断网络的响应时间和本机是否与目标主机（地址）联通。 如果执行Ping不成功，则可以预测故障出现在以下几个方面：网线故障，网络适配器配置不正确，IP地址不正确。如果执行Ping成功而网络仍无法使用，那么问题很可能出在网络系统的软件配置方面，Ping成功只能保证本机与目标主机间存在一条连通的物理路径。 命令格式： ping IP地址或主机名[-t] [-a] [-n count] [-l size] 参数含义： -t不停地向目标主机发送数据； -a 以IP地址格式来显示目标主机的网络地址； -n count 指定要Ping多少次，具体次数由count来指定； -l size 指定发送到目标主机的数据包的大小。 例如当您的机器不能访问Internet，首先您想确认是否是本地局域网的故障。假定局域网的代理服务器IP地址为202.168.0.1，您可以使用Ping避免202.168.0.1命令查看本机是否和代理服务器联通。又如，测试本机的网卡是否正确安装的常用命令是ping 1 27.0.0.1。 Tracert Tracert命令用来显示数据包到达目标主机所经过的路径，并显示到达每个节点的时间。命令功能同Ping类似，但它所获得的信息要比Ping命令详细得多，它把数据包所走的全部路径、节点的IP以及花费的时间都显示出来。该命令比较适用于大型网络。 命令格式： tracert IP地址或主机名[-d][-h maximumhops][-j host_list] [-w timeout]
网络常用命令大全 来源:网络资源| 本文已影响人 IPConfig IPConfig实用程序和它的等价图形用户界面。这些信息一般用来检验人工配置的TCP/IP设置是否正确。但是，如果你的计算机和所在的局域网使用了动态主机配置协议(Dynamic Host Configuration Protocol，DHCP--Windows NT下的一种把较少的IP地址分配给较多主机使用的协议，类似于拨号上网的动态IP分配)，这个程序所显示的信息也许更加实用。这时，IPConfig可以让你了解你的计算机是否成功的租用到一个IP地址，如果租用到则可以了解它目前分配到的是什么地址。了解计算机当前的IP地址、子网掩码和缺省网关实际上是进行测试和故障分析的必要项目。 Ping Ping是测试网络联接状况以及信息包发送和接收状况非常有用的工具，是网络测试最常用的命令。Ping向目标主机(地址)发送一个回送请求数据包，要求目标主机收到请求后给予答复，从而判断网络的响应时间和本机是否与目标主机(地址)联通。 如果执行Ping不成功，则可以预测故障出现在以下几个方面：网线故障，网络适配器配置不正确，IP地址不正确。如果执行Ping成功而网络仍无法使用，那么问题很可能出在网络系统的软件配置方面，Ping成功只能保证本机与目标主机间存在一条连通的物理路径。 命令格式： ping IP地址或主机名[-t] [-a] [-n count] [-l size] 参数含义： -t不停地向目标主机发送数据; -a 以IP地址格式来显示目标主机的网络地址; -n count 指定要Ping多少次，具体次数由count来指定; -l size 指定发送到目标主机的数据包的大小。
Windows系统常用的网络测试命令 1. winipcfg（ipconfig） winipcfg和ipconfig都是用来显示主机内IP协议的配置信息。只是winipcfg适用于Windows 95/98，而ipconfig适用于Windows NT/2000/XP。 winipcfg不使用参数，直接运行它，它就会采用Windows窗口的形式显示具体信息。这些信息包括：网络适配器的物理地址、主机的IP地址、子网掩码以及默认网关等，点击其中的"其他信息"，还可以查看主机的相关信息如：主机名、DNS服务器、节点类型等。其中网络适配器的物理地址在检测网络错误时非常有用。 ipconfig的命令格式如下： ipconfig [/? | /all | /release [adapter] | /renew [adapter]] 其中的参数说明如下： /? 显示ipconfig的格式和参数的英文说明； /all 显示所有的配置信息； /release 为指定的适配器（或全部适配器）释放IP地址（只适用于DHCP）； /renew 为指定的适配器（或全部适配器）更新IP地址（只适用于DHCP）。 使用不带参数的ipconfig命令可以得到以下信息(如图二)：IP地址、子网掩码、默认网关。而使用ipconfig /all，则可以得到更多的信息：主机名、DNS服务器、节点类型、网络适配器的物理地址、主机的IP地址（IP Address）、子网掩码(Subnet Mask)以及默认网关(Default Gateway)等。 2. ping 这个程序用来检测一帧数据从当前主机传送到目的主机所需要的时间。它通过发送一些小的数据包,并接收应答信息来确定两台计算机之间的网络是否连通。当网络运行中出现故障时，采用这个实用程序来预测故障和确定故障源是非常有效的。 如果执行ping不成功，则可以预测故障出现在以下几个方面：网线是否连通，网络适配器配置是否正确，IP地址是否可用等；如果执行ping成功而网络仍无法使用，那么问题很可能出在网络系统的软件配置方面，ping成功只能保证当前主机与目的主机间存在一条连通的物理路径。它还提供了许多参数，如－t使当前主机不断地向目的主机发送数据，直到使用Ctrl－C中断；－n 可以自己确定向目的主机发送的次数等等。 ping命令的格式如下：（在命令行状态下输入ping即可显示其格式及参数的英文说明）ping [-t] [-a] [-n count] [-l size] [-f] [-i TTL] [-v TOS] [-r count] [-s count] [[-j host-list] | [-k host-list]] [-w timeout] destination-list 其中的常用参数参数说明如下: -t 使当前主机不断地向目的主机发送数据，直到使用Ctrl－C中断； -n count 指定要做多少次ping，其中count为正整数值； -l size 发送的数据包的大小；一般我们使用得较多的参数为-t、-n、-l。 如果ping某一网络地址https://www.doczj.com/doc/398844065.html,，(如图三)出现："Reply from 61.172.201.228: bytes=32 time=9ms TTL=53"则表示本地与该网络地址之间的线路是畅通的；如果出现"Request timed out"，则表示此时发送的小数据包不能到达目的地，此时可能有两种情况，