超高效液相色谱法测定大豆异黄酮胶囊中异黄酮的含量
【摘要】目的建立同时测定大豆异黄酮胶囊中6种异黄酮含量的超高效液相色谱法（HPLC）。方法采用Acquity UPLCTM BEH C18柱（1．7 μm，2．1 mm×50 mm），流动相为甲醇-0．05 mol/L乙酸胺（pH4．6），梯度洗脱，检测波长为260 nm，流速为0．4 ml/min，柱温为40℃，外标法测定。结果大豆苷、黄豆黄苷、染料木苷、大豆苷元、黄豆黄素和染料木素分别在0．026 00～0．260 0 mg/ml、0．026 25～0．262 5 mg/ml、0．026 75～0．267 5 mg/ml、0．012 650～0．126 50 mg/ml、0．012 525～0．125 25 mg/ml、0．012 750～0．127 50 mg/ml 范围内线性关系良好（r≥0．993 0），加样回收率（6例）分别为：98．5%、98．8%、98．2%、97．7%、98．0%、97．3%。结论本法快速、简便、准确、灵敏度高、成本低，适用于大豆异黄酮胶囊中异黄酮的含量测定及质量控制。
【关键词】大豆异黄酮胶囊;异黄酮;超高效液相色谱法;含量测定
大豆异黄酮是大豆生长中形成的一种次生代谢产物，是生物黄酮的一种，也是天然的植物雌激素，具有抗衰老、抗肿瘤、防治骨质疏松、预防心脑血管疾病，以及抗高血压、降血脂等功效。大豆异黄酮胶囊性质稳定，安全有效，在临床上和保健品领域上得到广泛应用[1-2]。大豆异黄酮又名类黄酮，目前发现的大豆异黄酮包括游离型苷元和结合型的糖苷两类共有12种，其主要成分有大豆苷、黄豆黄苷、染料木苷、大豆苷元、黄豆黄素和染料木素。采用传统HPLC法测定时，检验周期长，低含量组分的检出效果不理想[3]。UPLC 的速度、灵敏度及分离度分别是HPLC 的9、3及1．7倍[4]，本文采用超高效液相色谱法同时测定大豆异黄酮中6种有效成分的含量，快速、准确且成本低廉。
1 仪器与试药
Waters Acquity UPLC超高效液相色谱仪，紫外检测器，Empower 2色谱工作站。
大豆苷、黄豆黄苷、染料木苷、大豆苷元、黄豆黄素和染料木素对照品由中国药品生物制品检定所提供，含量测定用大豆异黄酮胶囊（20060501、20060502、20060503）由广东康雅生物制药公司提供。甲醇为色谱纯，实验用水为超纯水。
2 实验方法
2．1 色谱条件Acquity UPLC TM BEH C-18柱，1．7 μm，2．1 mm×50 mm，
甲醇-0．05 mol/L乙酸胺（pH4．6）为流动相，梯度洗脱，洗脱条件见表1；检测波长为260 nm；流速为1．0 ml/min；柱温为40℃；进样量为2 μl。对照品液、样品液及阴性对照液的色谱图如图1所示。
0．05 mol/L乙酸胺溶液（pH=4．6）∶准确称取3．85 g乙酸铵于烧杯中，
大豆异黄酮提取工艺 和药理功效 一、提取工艺 每100克大豆样品中含有异黄酮128毫克，可分离约102毫克。 大豆异黄酮的提取可以采用甲醇、乙醇、乙酸乙酯等溶剂进行浸提。 不同的溶剂其提取工艺也不同。现以乙醇为例，介绍其浸提工艺。 (1)原料制备将脱脂豆粕进行粉碎。如果采用大豆为原料，需要先进行脱脂，使豆粕残油率<1%，干燥后粉碎备用。 (2)提取采用乙醇为浸提液，先在豆粕粉中加入含0.1～1.0摩尔/升(mol/l)的盐酸，再在95%的乙醇溶液中进行回流提取，过滤收集滤液。 (3)回收提取溶剂将滤液进行减压蒸发，回收乙醇，得到大豆异黄酮的粗水溶液。 (4)纯化将粗水溶液中加入0.1摩尔/升的氢氧化钠溶液，调节pH值至中性。这时，中性溶液中将出现沉淀，然后过滤，得到的沉淀物即为含大豆异黄酮的产物。 (5)精制将上述产物溶解于饱和的正丁醇溶液中，加于氯化铝吸附柱上进行吸附，然后用饱和的正丁醇溶液淋洗，洗出大豆异黄酮的不同组分 各种大豆制品中异黄酮含量和种类分布不同，不仅与大豆品种和栽培环境有关，还与大豆制品的加工工艺密切相关。水处理、热处理、凝固、发酵等加工环节和方法显著地影响了大豆制品中异黄酮的含量和种类分布，特别是大豆浓缩蛋白和大豆分离蛋白的不同提取方法其中异黄酮含量影响极大。 1）水处理：浸泡使10%的异黄酮流失于浸泡水中，且水处理后的大豆中游离型异黄酮增加，这是因为豆类自身存在的β-glucosidases酶水解葡萄糖苷的结果。
2）加热：水煮加热增加了异黄酮向外渗透速率，使大量异黄酮因渗入加热水中而丢失，同时热处理还显著改变了豆制品中异黄酮种类的分布，因为热处理时β-glucosidases酶活性增强，使异黄酮葡萄糖苷水解为游离型异黄酮，因而制品中游离型异黄酮较原料大豆或大豆粉中的有所增加。 3）凝固：在豆腐生产中，凝固使一部分异黄酮丢失于乳清中，丢失率为44%。 4）发酵：发酵不影响异黄酮的含量，但改变了异黄酮种类的分布，发酵后的产品以游离型异黄酮为主要存在形式，这是因为在发酵过程中，真菌产生的大量β-glucosidases水解酶使异黄酮葡萄糖苷大量水解，从而导致游离型的异黄酮显著增加。 5）加工提取方法：提取方法对大豆浓缩蛋白和大豆分离蛋白中异黄酮含量的影响非常大。如用湿热水洗法去除可溶性碳水化合物所得浓缩蛋白的异黄酮含量与原料豆中的相近，而用60\%-65\%的酒精水溶液洗涤浓缩法提取的大豆浓缩蛋白的异黄酮仅为原料中的1/10。二、药理作用 延缓女性衰老、改善更年期症状、骨质疏松、血脂升高、乳腺癌、前列腺癌、心脏病、疏松症、心血管疾病等。 大豆提取物作为营养补充食品使用，此外，大豆异黄酮显著的降低了乳腺癌的发病率，产生这种结果被认为是与它的产物植物雌激素有关。研究还指出在平时多食用富含大豆异黄酮的食物有助于抑制前列腺癌细胞的生长，那些多吃低脂肪，富含大豆蛋白食品的人患(前列腺癌)的概率会更低。 抗氧化作用 金雀异黄素（genistein）含5.7.4三个酚羟基，大豆甙元含7.4二个酚羟基。酚羟基作为供氧体能与自由基反应使之生成相应的离子或分子，熄灭自由基，终止了自由基的连锁反应。大豆异黄酮对整体动物也有比较明确的抗氧化作用，大豆异黄酮提取物对阿霉素引起的小鼠过氧化水平提高和抗氧化酶活性的降低也有明显的抑制作用。 雌激素样作用
NANCHANG UNIVERSITY 功能食品学综述论文 学 院:生命科学与食品工程学院专业:食品科学与工程班 级:学号:学生姓名:廖杰 指导教师:王远兴
起讫日期: 2014年 3月至 2014年 4月 大豆异黄酮的测定方法 摘要 本文在参考国内外大量文献的基础上,对大豆异黄酮的测定方法进行了系统的总结和介绍 关键词:大豆异黄酮;测定方法 Abstract: In reference on the basis of a large number of literature at home and abroad, this paper method of the determination of soybean isoflavones were summarized and introduced Keywords:soy isoflavones method 目录 摘 要 ........................................................................................................................................... ........... I Abstract:................................................................................................................................. .............. I 目 录 ........................................................................................................................................... .......... II 1根据紫外吸收特性检测方 法 ......................................................................................................... 1 1.1紫外分光光度法(UV .. (1)
大豆异黄酮的生理功能 XXXX大学 摘要：本文主要介绍大豆异黄酮的结构、理化性质以及它的各种功能特性，最后再简要介绍了一下大豆异黄酮在国内外的应用前景。 关键词：大豆异黄酮生理功能应用前景 Abstract:The purpose of this paper is that introduces structure,physical and chemical properties,various of physiological functions about soy isoflavones;then,we can get some brief acknowledge which is about the applicational prospects of soy isoflavons at home and abroad markets. Key words:Soy isoflavones physiological functions applicational prospects 我国大豆产量仅次于美国、巴西，大豆是营养价值极高的农产品之一，它不仅含有丰富的油脂，还含有很多活性成分，如大豆异黄酮、大豆蛋白、大豆磷脂、、大豆皂甙、大豆甾醇、大豆低聚糖、大豆膳食纤维等。本文主要讨论的是大豆异黄酮的生理活性。目前有很多实验证明大豆异黄酮有抗癌、抗氧化、防止心血管疾病等各种功能。 1大豆异黄酮结构、理化性质和人体代谢 1.1大豆异黄酮的结构和理化性质 大豆异黄酮(soy-bean isoflavones)主要分布于大豆种子的子叶和胚轴中，种皮含量极少。80%一90%存在于子叶中，浓度为0.1%一0.3%。大豆及其加工制品中存在的一类异黄酮类植物雌激素，其中含量占优势的是大豆黄酮和染料木素两种。胚轴中所含异黄酮种类较多且浓度较高，为1%一2%。目前发现的12种大豆异黄酮中，游离型的糖苷配基(Agloycon)占总量的2%一3%，包括染料木素(又叫金雀异黄素)(Cenistein，5，7，4’一三羟基异黄酮)、大豆苷原(Daidzein，7，4’一二羟基异黄酮)和大豆黄素(Glyeitein，7，4’一二羟基一6一甲氧基异黄酮)。这些异黄酮类化合物在天然大豆中的主要存在方式为结合了糖基的糖苷大豆异黄酮，即糖苷大豆黄酮(daidzin)和糖苷染料木素(genistin)。结合型的糖苷(Glucoside)约占总量的97%一98%，主要以丙二酞染料木苷、丙二酞大豆苷、染料木苷(genistin)和大豆苷(daidsin)形式存在。 1931年，Walz用90%的甲醇从豆奶中提取出大豆异黄酮：5，7，4’一三羟
第一、二章 1.天然产物提取工艺学的特点：多学科性、多层次多方位性、复杂性。 2天然产物提取过程的选择：细胞破碎、初步纯化、高度纯化、成品加工。 3天然产物提取利用建议：1）要注意生物资源多样性和用途多功能性，进行综合利用2）充分利用先进科学技术，生产高技术天然产物产品3处理好利用与资源保护、环境保护的矛盾，使其处于良性循环状态4）面向市场生产适销对路产品 4破坏细胞膜和壁的方法：风干法、加热干燥法、机械法、非机械法。 5原料的前处理：除杂、干燥、粉碎、发酵、脱脂、水解。 7提取法原理：提取又称浸出、固液萃取，是应用有机或无机溶剂将固体原料中的可溶性组分溶解，使其进入液相，再将不溶性固体和溶液分开的操作。渗透溶解分配扩散 萃取法原理：是利用混合物中各成分在两种无不相容的溶剂中分配系数的不同进行分离的方法。 微波提取的原理和特点：由于物质分子偶极振动同微波振动具有相似的频率，在快速振动的微波磁场中，被辐射的极性物质分子吸收电磁能，以高速振动而产生热能。 特点：投资少、设备简单、适用范围广、重现性好、选择性高、操作时间短、溶剂耗量少、不产生噪声、不产生污染。 超声波提取的特点：1提取时不需要加热，2提取提高了药物有效成分的提取率3溶剂用量少，节约溶剂4提取时一个物理过程，不影响大多数药物有效成分的生理活性5提取物有效成分含量高有利于进一步精制。提取原理：机械效应空化效应热效应 8结晶的方法：盐析法有机溶剂法等电点结晶法利用温差结晶法 9为什么多孔性固体物质具有吸附能力？ 这是因为固体表面分子所处的状态与固体内部分子或原子所处的状态不同。固体内部分子受到邻近四周分子的作用力是对称的，作用力总和为零，所以分子处于平衡状态，但在界面上的分子同时受到不相等的两相等的两相分子的作用力，因此界面分子所受力是不对称的作用力不为零，合力方向指向固体内部，所以处于表面层的固相分子始终受到一种里的作用。 10吸附的三种类型：物理吸附化学吸附交换吸附 第三章 1.固体可分为多孔和非多孔性物质 3.吸附三种类型：物理吸附（吸附剂与吸附物之间作用力是分子间引力），化学吸附（通过生成化学键来吸附），交换吸附（也叫极性吸附，通过带相反电荷离子的交换来吸附） 5.吸附分离：利用适当吸附剂在一定条件下，使提取液中有效成分被吸附然后再用适当洗脱剂将其解吸下来，达到浓缩和提纯的目的。 6.吸附等温线：在等温情况下，吸附剂的吸附量与吸附物质的压力（或浓度）的关系曲线（图及类型见书79） 8.膜的性能：通常指膜的物化稳定性（膜的抗氧化、抗水解性能，膜的耐热性和机械强度）和膜的分离透过性（反渗透膜，超过滤膜，微孔过滤）。 9.膜过滤设备要求：具有尽可能大的有效过滤面积；为膜提供可靠的支撑装置；提供引出滤过液的路径；尽可能清除或减弱浓差极化现象。 11.分子蒸馏原理：依据液体分子受热会从液面逸出，不同种类分子逸出后在气相中其运动平均自由程不同这一性质实现。其特点是：操作温度低、无需沸腾，蒸馏压强低，受热时间短，分离程度高。 12.超临界流体萃取：利用超临界流体即温度和压力略超过或靠近超临界温度和压力，介于气体和液体之间的流体做萃取剂，从固体或液体中萃取成分以达到分离和纯化目的。最常用CO2，原因：临界温接近室温，临界压力处于中等，无毒无味不腐蚀价格便宜。 14.色谱：利用混合物中各组分的物化性质差异，基于被分离物质分子在两相中分配系数的差别进行分离。 15.层析法分类：吸附层析，分配层析，凝胶过滤层析，离子交换层析等。常用吸附剂：氧化铝，硅胶，活性炭，聚酰胺。 16.分配系数：当一种溶质分布在两互不相溶熔剂中在固定相和流动相的浓度之比。
大豆的营养价值及功效 大豆的营养价值及功效大豆营养分析 1. 增强机体免疫功能：大豆含有丰富的蛋白质，含有多种人体必需的氨基酸，可以提高人体免疫力; 2. 防止血管硬化：黄豆中的卵磷脂可除掉附在血管壁上的胆固醇，防止血管硬化，预防心血管疾病，保护心脏。大豆中的卵磷脂还具有防止肝脏内积存过多脂肪的作用，从而有效地防治因肥胖而引起的脂肪肝; 3. 通导大便：大豆中含有的可溶性纤维，既可通便，又能降低胆固醇含量; 4. 降糖、降脂：大豆中含有一种抑制胰酶的物质，对糖尿病有治疗作用。大豆所含的皂甙有明显的降血脂作用，同时，可抑制体重增加; 5. 大豆异黄酮是一种结构与雌激素相似，具有雌激素活性的植物性雌激素，能够减轻女性更年期综合征症状、延迟女性细胞衰老、使皮肤保持弹性、养颜、减少骨丢失，促进骨生成、降血脂等。 大豆补充信息 1. 应用于手足抽筋疼痛：黄豆100克，细米糠60克，加水煎至黄豆熟烂，一天分2次吃; 2. 应用于烧烫伤：治疗期间每天用黄豆适量煮汁服，可加快
治愈，愈后无疤痕。 3. 美国从事转基因农产品与人体健康研究的人士发现，吃豆奶长大的孩子，成年后引发甲状腺和生殖系统疾病的风险系数增大。据美国专门机构研究，这与婴儿对大豆中的植物雌激素的反应与成人完全不同有关，所以不要让婴儿多喝豆奶。 大豆适合人群：一般人群均可食用 1. 大豆是更年期妇女、糖尿病和心血管病患者的理想食品;脑力工作者和减肥的朋友也很适合; 2. 大豆在消化吸收过程中会产生过多的气体造成胀肚，故消化功能不良、有慢性消化道疾病的人应尽量少食; 3. 患有严重肝病、肾病、痛风、消化性溃疡、低碘者应禁食;患疮痘期间不宜吃黄豆及其制品。 大豆食疗作用 大豆味甘、性平，入脾、大肠经; 具有健脾宽中，润燥消水、清热解毒、益气的功效; 主治疳积泻痢、腹胀羸瘦、妊娠中毒、疮痈肿毒、外伤出血等。黄豆还能抗菌消炎，对咽炎、结膜炎、口腔炎、菌痢、肠炎有效。 大豆的营养价值，大豆的做法，大豆的作用与功效，大豆的吃法，菜谱之家为您提供大豆的各种菜肴的制作方法。 大豆的吃法素鸡 素鸡是一种汉族豆制食品，广泛分布中国中部和南方。以素仿荤，口感与味道与原肉难以分辨，风味独特，以豆腐皮(千张，非油皮)作主料，卷成圆棍形，捆紧煮熟，切片过油，加调料炒制
一、化学结构与理化性质 大豆异黄酮（soybean isoflavone）是大豆生长过程中形成的一类次生代谢产物，属天然黄酮类物质，具有异黄酮类化合物的典型结构，其基本骨架是3-苯基苯并二氢吡喃。大豆异黄酮是大豆中主要的植物雌激素（photoestrogen）之一。 目前已经发现的大豆异黄酮共12种，分为3种游离型的苷元（aglycon）和9 种结合型的糖苷（glucoside）。三种苷元即三羟异黄酮（genistein, CAS号为 446-72-0，亦称染料木素或金雀异黄素）、二羟异黄酮（daidzein,CAS号为486-66-8，亦称黄豆苷元）和二羟甲氧基异黄酮（glycitein，CAS号为40957-83-3，亦称大豆黄素）。这三种苷元分别与葡萄糖、乙酰基葡萄糖、丙二酰基葡萄糖结合形成9种异黄酮糖苷。一般而言，大豆异黄酮的苷元的形式比糖苷形式的活性要高，尤其是燃料木素的活性更高。通常大豆中的苷元占总量的2%~3%，糖苷占总量的97%~98%。 大豆异黄酮通常为淡黄色粉末，具有苦涩味和收敛性，大豆异黄酮苷元比糖苷具有更强大的不愉快风味。大豆异黄酮在常温下性质稳定，耐热（120℃加热30min不变，180℃加热30min残留80%），耐酸（pH2.0情况下仍稳定）。可溶于醇类、酯类和酮类，不溶于水，难溶于石油醚、正己烷等。异黄酮分子中有酚羟基，故显酸性，可溶于碱性水溶液及吡啶中。大豆异黄酮与钠汞齐在酸性条件下反应生成红色化合物，与醋酸镁甲醇溶液反应显褐色。 二、主要来源与生产制备方法 主要来源：自然界中异黄酮资源十分有限，大豆是唯一含较多异黄酮且其含量又营养学意义的食物资源，干大豆中含量为0.5~0.7mg/g，主要分布于大豆种子的子叶和胚轴中。不同品种大豆中的异黄酮含量及存在形式有所差异。 生产制备方法：大豆异黄酮的制备方法包括天热提取法（溶剂萃取法、碱提取酸沉淀法、活性炭吸附法、离子交换树脂法和柱层析法）、化学合成法和微生物发酵法等。 三、生理功能及作用 （抗）雌激素样活性：大豆异黄酮的双羟基酚结构与动物和人体内雌激素的结构类似，故具有弱雌性激素活性（约为内源性雌二醇活性的 1/100,000~1/1,000），可竞争性地与雌激素受体结合。大豆异黄酮还可表现出2种相反的生物学活性，即雌激素活性和抗雌激素活性的双相作用。当体内或细胞内雌激素活性较强时，它主要显示拮抗作用；而当体内或细胞内雌激素水平低下时，它则显示类雌激素活性。故大豆异黄酮能缓解妇女更年期因此激素分泌量的急剧下降而引起的更年期综合征症状。有报告表明，绝经后妇女每天摄入大豆类食品（异黄酮总量大于260mg/d），连续12周，其血中三羟异黄酮浓度增加22倍，绝经症状积分降低50%，“潮热”症状积分降低54%，阴道干燥症状积分降低60%。
九豆功效和作用 说起九豆很多人并不熟悉，其实它是一种非常常见的食物，有的地方也称为九爪豆，它在治腰脊酸痛和补中益气方面效果非常显著，人们可以多多了解相关的知识，如果多吃大豆可以减轻女性更年期综合征症状，同时还可以帮助美容养颜、抗衰老，有需要的朋友们可以多多食用。 一、简介 一年生缠绕草本茎疏被白色柔毛3出复叶互生顶生小叶广卵形长椭圆状卵形或菱状卵形侧生小叶基部极偏斜长7～14厘米宽5～8.5厘米先端钝或微凹具短针头两面均被白色疏毛小叶柄密被长毛小托叶刚毛状总状花序下垂苞片小线状披针形花萼阔钟状密被灰白色柔毛和有疏刺毛上部裂片极阔下部中间1枚线状披针形花冠深紫色或白色龙骨瓣长约4厘米翼瓣略短旗瓣长约2厘米荚果长8～10厘米宽约2厘米成熟时黑色毛较疏荚有隆起的纵棱1～2条种子6～8颗灰白色花期4月果期10～11月。 二、九豆的功效与作用 钙、磷、铁的含量均较高。狗爪豆的药用价值也得到了认可。《浙江天目山药植志》："温中益气。治腰脊酸痛。狗爪豆二至三两，炖猪腰子服。"《广西药植名录》记载"嫩叶(擦遍全身)，清热，凉血。 三、狗爪豆的制作技巧 传统做法是先将狗爪豆彻底漂干净，然后将其飞水煮透，再
将狗爪豆掰开，用清水泡。据说如果不漂的话会导致头晕。 四、多吃大豆好处 1.减轻女性更年期综合征症状 大豆异黄酮是一种结构与雌激素相似，具有雌激素活性的植物性雌激素，延迟女性细胞衰老、使皮肤保持弹性、养颜、减少骨丢失，促进骨生成、降血脂等。 2.防止血管硬化 防止血管硬化，预防心血管疾病，保护心脏，大豆中的卵磷脂还具有防止肝脏内积存过多脂肪的作用，从而有效地防治因肥胖而引起的脂肪肝。 3.让头脑聪明 在平时适量多吃黄豆，还能有效达到预防老年痴呆的功效。而且在黄豆中还含有一种叫甾醇的物质，它能有效的增加神经机能，从而促进其活力的功效。 4.降糖、降脂 大豆中含有一种抑制胰酶的物质，对糖尿病有治疗作用。大豆所含的皂甙有明显的降血脂作用，同时，可抑制体重增加。
大豆分离蛋白的提取 ——紫苏 摘要：本文综述述了大豆分离蛋白的碱提酸沉法、双极膜法、泡沫分离法的分离原理，并讨论了其生产中影响提取率的因素。 关键词：大豆分离蛋白碱提酸沉法双极膜法泡沫分离法 大豆蛋白含量较高而且营养丰富，含有8种人体必需氨基酸，且比例比较合理。目前大豆蛋白已成为一种重要的蛋白资源，特别是大豆分离蛋白含蛋白质90%以上，是一种优良的食品原料。 目前大豆分离蛋白的生产应用较多的是以下几种： 1. 碱提酸沉法 大豆分离蛋白的传统提取方法是碱提酸沉法，主要利用大豆蛋白在大豆蛋白在高pH时溶解度最大，在等电ｐＨ条件下溶解度最小的原理，使之凝聚沉淀。一般分3个步骤：弱碱萃取蛋白质、酸沉淀、喷雾干燥。如图[1] 影响等电沉淀的因素较多： ①原料——原料豆粕应是低温或闪蒸脱脂后的低变性豆粕。这种豆粕含杂质少，蛋白含量较高，蛋白变性程度低，适于大豆分离蛋白生产[2]。 ②水分——浸提时，加水量越多，蛋白质的提取率就越高；但是加水太多，酸沉时蛋白的损失量增高；加水太少，大豆蛋白的溶出率大大下降，还会增加后续各工序的难度。试验得出,浸提时脱脂豆粕与水的比例为1∶10~12最适合提取[3]。 ③pH——蛋白质的溶解度与浸提pH有很大的关系，pH太低的时候，蛋白组分解离; pH 太高，易发生“胱赖反应”，生成有毒物质。 ④温度——温度的高低对蛋白收率、纯度及色泽有显著影响。浸提温度过高，会使蛋白变性，而且粘度增加，分离困难，耗能提高[4]。经试验认为等电酸沉温度控制在40~45℃为宜[1]。 ⑤时间——一般来说浸提时间越长，蛋白的溶出率就越高。但一定的时间后，蛋白得率随浸提时间的延长而无显著的变化。生产中要综合考虑能源消耗、生产周期、工艺成本等各种因素来确定合理的时间[4]。 ⑥另外，当浆料粒度太细反而会使蛋白得率和浸提效果下降，同时增加了过滤分离的难度。加酸速度和搅拌速度控制不好容易出现虽到等电点,但蛋白质凝集下沉缓慢,上清液混浊[1]。 ⒉双极膜电解法 双极性膜是一种新型离子交换复合膜,它通常由阳离子交换层和阴离子交换层复合而成,中 间是亲水界面层,结构如图1所示[5]： 双极膜由3层组成：阴离子交换膜和阳离子交换膜以及阴阳离子交换膜中间的亲水层。在电流作用下，水分子在双极膜上电离为H+和OH-，离子在电势的驱动下，通过膜选择透过阴离子或阳离子，导致溶液的pH值降低，达到大豆蛋白质的等电点而使蛋白质沉淀。这种方法不需要加入酸或碱调整蛋白质溶液的pH值，避免分离得到的大豆蛋白质中混入盐离子，并且可保护大豆蛋白质的功能性。[3]
大豆异黄酮提取 【摘要】首先论述了大豆异黄酮8种提取与纯化工艺的原理和应用情况。它们分别是有机溶剂萃取法、超声波法、酸解法、酶解法、高效逆流色谱法、大孔树脂吸附法、高速离心分离法和超临界萃取法。指出了各技术目前存在的主要问题和今后的主要研究方向。在此基础上利用正交试验得到了乙醇溶液萃取大豆异黄酮的最佳工艺条件:乙醇浓度80%,萃取温度70℃,萃取时间4h,料液比1∶20。 异黄酮是黄酮类化合物的一种,主要存在于大豆科植物中,是大豆生长中形成的一类次生代谢物。大豆异黄酮主要存在于大豆种子的子叶和胚轴中,种皮含量极少。目前已经发现的大豆异黄酮共有12种,分为游离型的甙元和结合型的糖甙两类。甙元为其中的生物活性成分并且含量极少,占总含量的2%～3%,分别为大豆黄素、黄豆黄素及染料木素。对应的β-葡萄糖苷形式为:大豆黄苷、黄豆黄苷、染料木苷。 另外还有较少的葡萄糖苷的乙酰基化合物和丙二酰基化合物。研究表明,大豆异黄酮具有预防癌症、心血管疾病、骨质疏松症和降低妇女更年期综合症等生理功能。该产品具有广阔的开发前景和新的应用价值。目前最常见的异黄酮分离及纯化方法有:有机溶剂萃取法、超声波辅助法、酸解法、酶解法、高速逆流色谱法、大孔树脂吸附法、高速离心法、超临界萃取法。下面就这些方法的原理以及各自的特点分别进行介绍 有机溶剂萃取法 此法是国内外提取异黄酮使用最广泛的方法,常用的有机溶剂主要有:乙醇、甲醇、乙酸乙酯以及它们的水溶液。本法主要用于提取脂溶性基团占优势的黄酮类化合物,因为异黄酮的特殊分子结构,决定了其较大的分子极性,根据相似相溶的原理,该物质可以被这些极性溶剂溶出,进入溶液相,为下一步的纯化处理提供了条件。在有机溶剂萃取法中最常用的溶剂是乙醇,即醇提法。提取过程中, 乙醇的浓度对提取结果有较大的影响。一般认为,乙醇浓度的提高有利于异黄酮的提取,但这还跟异黄酮物质的某
大豆异黄酮（Isoflavone）编码食物英文名称食物名称Total黄豆苷原染料木黄铜6-甲氧基大豆素code English name foodname Daidzein Genistein Glycitein 19-grain bread全麦面包0.020.010.01 2Alfalfa seeds,sprouted,raw苜宿芽（紫花）0000 3Alfalfa seeds,sprouted,raw,mixed with clover seeds,sprouted,raw苜宿芽（紫花+三叶草）0000 4Beans,black,mature seeds,raw黑豆000 5Beans,great northern,mature seeds,raw大豆（北方）000 6Beans,kidney,all types,mature seeds,raw芸豆0.060.020.04 7Beans,kidney,all types,mature seeds,cooked,boiled,without salt芸豆（煮，不加盐）000 8Beans,kidney,red,mature seeds,raw芸豆（红）0.010.010 9Beans,kidney,red,mature seeds,cooked,boiled,without salt芸豆（红，煮，不加盐）000 10Beans,navy,mature seeds,raw菜豆0.210.010.20 11Beans,pink,mature seeds,raw豆（粉红色）000 12Beans,pinto,mature seeds,raw豆（杂色）0.270.010.26 13Beans,red,mature seeds,raw豆（红色）0.3100.31 14Beans,small white,mature seeds,raw小白豆0.7400.74 15Beans,snap,green,raw食荚菜豆（绿）000 16Beans,snap,green,cooked,boiled,drained,without salt食荚菜豆（绿，煮，不加盐）000 17Broadbeans(fava beans),mature seeds,raw蚕豆0.030.020 18Broadbeans,fried蚕豆（炸） 1.290 1.29 19Chickpeas(garbanzo beans,bengal gram),mature seeds,raw鹰嘴豆0.100.040.06 20Clover sprouts,raw苜宿芽（三叶草）0.3500.35 21Country rye bread,Finland黑麦面包（芬兰）000 22Cowpeas,common(blackeyes,crowder,southern),mature seeds,raw豇豆0.030.010.02 23Crackers,crispbread,rye黑麦薄脆饼干0.010.010.01 24Flax seed,raw亚麻籽000 25GREEN GLANT,HARVEST BURGER,Original Flavor,All Vegetable ProteinPatties,frozen大丰收肉饼（含植物蛋白，冷冻）9.30 2.95 5.28 1.07 26Infant formula,ENFAMIL NEXT STEP,powder,soy formula,notreconstituted美赞臣婴儿配方豆粉25.007.2314.75 3.00 27Infant formula,MEAD JOHNSON,GERBER soy,with iron,powder,notreconstituted美赞臣婴儿配方豆粉（强化铁）25.098.0813.90 3.12 美赞臣婴儿配方饮品（强化铁） 6.03 1.10 2.22 28Infant formula,MEAD JOHNSON,PROSOBEE,with iron,liquid concentrate,not reconstituted 29Infant formula,MEAD JOHNSON,PROSOBEE,with iron,powder,not reconstituted美赞臣婴儿配方粉（强化铁）24.947.0514.94 2.95 30Infant formula,MEAD JOHNSON,PROSOBEE,with iron,ready-to-feed美赞臣婴儿即食配方食品 3.89 1.71 2.18 31Infant formula,ROSS,ISOMIL,with iron,powder,not reconstituted罗氏婴儿配方粉（强化铁）20.99 6.0312.23 2.73 32Infant formula,ROSS,ISOMIL,with iron,powder,reconstituted frompowder,as fed罗氏婴儿配方粉（加铁） 2.710.78 1.580.35 33Infant formula,ROSS,ISOMIL,with iron,ready-to-feed罗氏婴儿即食配方粉（强化铁） 4.17 1.91 2.26 34Infant formula,WYETHAYERST,NURSOY,with iron,liquid concentrate,not reconstituted惠氏婴儿配方饮料（强化铁） 4.02 1.02 2.820.35 35Infant formula,WYETHAYERST,NURSOY,with iron,powder,notreconstituted惠氏婴儿配方粉（强化铁）26.00 5.7013.55 2.05 36Infant formula,WYETHAYERST,NURSOY,with iron,ready-to-feed惠氏婴儿即食配方食品（强化铁） 2.630.75 1.600.28 37Instant beverage,soy,powder,not reconstituted速溶豆粉饮料109.5140.0762.1810.90 38Lentils,mature seeds,raw小扁豆0.0100 39Lima beans,large,mature seeds,raw利马豆（大）0.030.020.01 40Lima beans,large,mature seeds,cooked,boiled,without salt利马豆（大，煮，不加盐）000 41Lima beans,thin seeded(baby),mature seeds,raw利马豆（小，嫩）000 42Miso豆面酱42.5516.1324.56 2.87 43Miso soup mix,dry豆面酱粉60.3924.9335.46 44Mung beans,mature seeds,raw绿豆0.190.010.18 45Natto(soybeans,boiled and fermented)大豆（煮，发酵）58.9321.8529.048.17 46Oil,canola and soybean豆油0000 47Oil,soybean,salad or cooking色拉油0000 48Peanut,all types,raw花生0.260.030.24 49Peas,split,mature seeds,raw豌豆 2.42 2.420 50Pigeon pess(red gram),mature seeds,raw鹰嘴豆（红）0.560.020.54 51Snacks,granola bars,hard,plain格兰诺拉麦片0.130.050.08 52Soybean butter,full fat,Worthington Foods,Inc大豆黄油（全脂）0.570.220.300.05 53Soy cheese,unspecified大豆干酪31.3211.2420.08 54Soy cheese,cheddar大豆干酪（切达）7.15 1.80 2.25 3.10 55Soy cheese,mozzarella大豆干酪（意大利干酪）7.70 1.10 3.60 3.00 56Soy cheese,parmesan大豆干酪（意大利干酪，脱脂） 6.40 1.500.80 4.10 57Soy drink大豆饮料7.01 2.41 4.60 58Soy fiber大豆纤维44.43NR21.687.90 59Soy flour(textured)大豆粉148.6159.6278.9020.19 60Soy flour,defatted大豆粉（脱脂）131.1957.4771.217.55 61Soy flour,full-fat,raw大豆粉（全脂）177.8971.1996.8316.18 62Soy flour,full-fat,roasted大豆粉（全脂，熟）198.9599.2798.7516.40 63Soy hot dog,frozen,unperpared热狗（豆粉，冷冻）15.00 3.408.20 3.40 64Soy meal,defatted,raw大豆粗粉（脱脂）125.8257.4768.35 65Soymilk,fluid豆浆9.65 4.45 6.060.56 66Soymilk,iced豆浆（冰冻） 4.71 1.90 2.81 67Soymilk skin or film(Foojook or yuba),cooked腐竹（熟）50.7018.2032.50 68Soymilk skin or film(Foojook or yuba),raw腐竹193.8879.88104.8018.40 69Soy noodles,flat豆粉面条8.500.90 3.70 3.90 70Soy paste豆粉空心面条31.5215.0315.217.70 71Soy protein concentrate,aqueous washed浓缩大豆蛋白（水洗）102.0743.0455.59 5.16 72Soy protein concentrate,produced bu alcohol extraction浓缩大豆蛋白（乙醇提取）12.47 6.83 5.33 1.57 73Soy protein isolate大豆蛋白提取物97.4333.5959.629.47 74Soy sauce made from hydrolyzed vegetable protein酱油（水解蔬菜蛋白）0.100.1000 75Soy sauce made from soy and wheat酱油（大豆、小麦） 1.640.930.820.45 76Soy-based liquid formula for adults,ROSS,ENGRICH罗氏成人大豆配方饮料0.540.140.40 77Soy-based liquid formula for adults,ROSS,GLUCERNA罗氏成人大豆配方饮料0.080.020.06 78Soy-based liquid formula for adults,ROSS,JEVITY ISOTONIC罗氏成人大豆配方饮料0.340.030.31 79Soybean chips豆片54.1626.7127.45 80Soybean curd,fermented腐乳39.0014.3022.40 2.30 81Soybeans Brazil,raw巴西大豆87.6320.1667.47 82Soybeans Japan,raw日本大豆118.5134.5264.7813.78 83Soybeans Korea,raw韩国大豆144.9972.6872.31 84Soybeans,Taiwan,raw台湾大豆59.7528.2131.54 85Soybeans,flakes,defatted豆片（脱脂）125.8236.9785.6914.23 86Soybeans,flakes,full-fat豆片（全脂）128.9948.2379.98 1.57 87Soybeans,immature,seeds,raw毛豆20.429.279.84 4.29 88Soybeans,immature,cooked,boiled,drained,without salt毛豆（煮，不加盐）13.79 6.85 6.94 89Soybeans,green,mature seeds,raw大豆（绿色）151.1767.7972.5110.88 90Soybeans,mature,cooked,boiled,without salt大豆（煮，不加盐）54.6626.9527.71 91Soybeans,mature seeds,dry roasted大豆（烤）128.3552.0465.8813.36 92Soybeans,mature seeds,raw(US,food quality)大豆（美国，标准的）128.3546.6473.7610.88 93Soybeans,mature seeds,raw(US,commodity grade)大豆（美国，普通的）153.4052.2091.7112.07 94Soybeans,mature seeds,sprouted,raw黄豆芽40.7119.1221.60 95Spices,fenugreek seed胡芦巴子0.020.010.01 96Sunflower seed kernels,dried葵花子仁（干）000 97Tea,green,Japan绿茶（日本）0.050.010.04 98Tea,jasmine,Twinings茉莉花茶0.040.010.03 99Tempeh印尼豆豉43.5217.5924.85 2.10 100Tempeh burger印尼豆豉馅饼29.00 6.4019.60 3.00 101Tempeh,cooked印尼豆豉（煮）53.0019.2531.55 2.20 102Tofu,MORI-NU,silken,firm豆腐27.9111.1315.58 2.40 103Tofu,dried-frozen(koyadofu,kori tofu,or tung tou-fo)豆腐干，（冻）67.4925.3442.15 104Tofu,AZUMAYA,extra firm,cooked(steamed)豆腐（蒸）22.708.0012.75 1.95 105Tofu,AZUMAYA,firm,cooked豆腐（煮）31.3512.8016.15 2.40 106Tofu,fried(aburage)豆腐（炸）48.3517.8328.00 3.37 107Tofu,pressed(Tau kwa),raw豆腐片29.5013.6013.90 2.00 108Tofu,raw,regular,prepared with calcium sulfate豆腐（用硫酸钙处理）23.619.0213.60 1.98 109Tofu,salted and fermented(fuyu)腐乳（加盐）33.1714.2916.38 5.00 110Tofu,soft,VITASOY-silken精致豆腐（强化维生素）29.248.5920.65 111Tofu,soft,prepared with calcium sulfate and nigari精致豆腐（用硫酸钙和nigari处理）31.1011.9918.23 2.03 112Tofu,yogurt豆腐酸奶16.30 5.709.40 1.20 113USDA Commodity,beef patties with VPP,frozen,cooked牛肉馅饼（含VPP，冷冻，熟） 1.860.67 1.090.10 114USDA Commodity,beef patties with VPP,frozen,raw牛肉馅饼（含VPP，冷冻，生） 1.140.350.770.02
不过，唯有一类蔬菜永远“应季”，这就是芽菜.生豆芽是我国地古老智慧，无论黄豆芽，黑豆芽，绿豆芽，豌豆苗，都是冬春“青黄不接”季节地真正美食.特别是在立春、春节地时候，都喜欢吃春饼，其中一定要有地配料就是豆芽，寓意为“咬春”. 豆子是植物地种子，它储藏大量地蛋白质、脂肪和碳水化合物，就是想在发芽地时候让种子能够利用，有足够地“力量”顶出土壤，成为一棵新地植株.种子里充满了植物对后代地深厚爱心和殷殷期待.人类以种子为食，正是想利用植物地生存智慧，来满足自己地营养需求.文档收集自网络，仅用于个人学习 说到豆芽地营养，和豆子本身地确有所不同.脂肪、蛋白质、淀粉等能量物质大多分解掉，“抗营养物质”如植酸、单宁、蛋白酶抑制剂之类妨碍营养素利用地物质大幅度下降，水分大幅度增加，维生素上升，这就是发豆芽过程中地变化.换句话说，发芽让豆子从“主食”或“蛋白质来源”变成了蔬菜，成了维生素地来源.比如说，绿豆中地维生素含量是零，蛋白质含量是，而变成绿豆芽之后，蛋白质含量变成了，而维生素含量变成了毫克克.文档收集自网络，仅用于个人学习 对于人类来说，这个变化真地合算么？答案多少有点纠结.人类当然需要维生素，但豆子中地蛋白质也是人类想要地成分.在过去缺乏蛋白质地时代，人们非常重视它；但在没有果蔬地冬春，维生素缺乏更加迫在眉睫之时，人们宁可用它来换成.文档收集自网络，仅用于个人学习 问题是，现在我们已经有了丰富地食物来源，冬天也有多种蔬菜水果可以选择，其实并不依赖于豆芽里面那一点维生素了.我们有鱼肉蛋奶和豆腐，也不再完全依赖黄豆里地蛋白质.这个时候，选择就在人类地手中，想要什么都可以.文档收集自网络，仅用于个人学习不过，最完美地选择，就是什么都要，而且口感更好，消化吸收率更高…这样贪心地选择也并非没有可能性，那就是——发豆嘴儿，或者说，自制发芽黄豆.文档收集自网络，仅用于个人学习 黄豆营养价值高，人们都知道.不过它也有很大地麻烦，其中妨碍营养素吸收利用地“抗营养物质”太多了.植酸和胰蛋白酶抑制剂是两个经典代表，分别干扰铁锌等矿物质和蛋白质地吸收；还有凝集素、皂甙和单宁，它们对消化道都有一定地刺激作用.直接吃黄豆地时候，人们往往会发生胀肚问题，一些低聚糖会引起胀气问题，胰蛋白酶抑制剂对胀气也有促进.同时，尽管黄豆含铁很高，但直接吃豆子时铁地吸收率特别低，因为有植酸和单宁地妨碍.文档收集自网络，仅用于个人学习 在发芽地时候，这些麻烦都会逐渐退去.因为植物自己也需要利用各种营养物质，它在发芽过程中会自动把各种“抗营养物质”分解掉.甚至，就在浸泡出芽地早期过程当中，豆子便产生了发芽地希望，感受到了萌动地激情，开始逐渐分解“抗营养物质”.测定表明，仅仅是室温浸泡小时，豆子中地植酸含量就从下降到.发芽长时，进一步下降到.而胰蛋白酶抑制剂（）地变化更为明显，室温浸泡小时，豆子中地含量从降到，发芽后更降低到（史海燕等，）.可以想见，在同样烹调时间下，发芽豆地营养素利用率会有明显增加.文档收集自网络，仅用于个人学习 另一方面，还有研究发现，在豆子发芽过程中，蛋白质含量地变化呈现先缓慢下降、再快速下降地过程.在发芽长度时，可溶性蛋白质含量从上升到了，游离氨基酸增加，脂肪含量未明显下降，而植酸含量却下降了将近一半.制作豆浆后地可溶性蛋白质含量从升高到（于立梅等，）.随着维生素含量持续增加，在发芽过程中，大豆中铁地存在形式也逐渐从三价铁转化为二价铁，有利于人体地吸收利用（徐茂军等，）.同时，大豆异黄酮地糖苷形式被水解，变成游离形式，而且含量有所上升.在浸泡过程当中，氨基丁酸这种神经递质含量也有上升（穆慧玲等，）.文档收集自网络，仅用于个人学习