1 清洗
在组织细胞培养中，体外细胞对任何有害物质都非常敏感,均能影响培养细胞的生长
微生物产品附带杂物
上次细胞残留物
非营养成分的化学物质
需要清洗的培养用品
玻璃器皿的清洗
胶塞的清洗
塑料制品的清洗
玻璃器皿的清洗
包括浸泡、刷洗、浸酸和冲洗四个步骤
清洗后的玻璃器皿
干净透明无油迹
不能残留任何物质
浸泡：初次使用和培养使用后的玻璃器皿均需先用清水浸泡，以使附着物软化
或被溶掉
新的初次使用的玻璃器皿，在生产及运输过程中，玻璃表面带有大量的干固的灰尘，且玻璃表面常呈碱性及带有一些对细胞有害的物质等
先用自来水简单刷洗，然后用5％稀盐酸液浸泡过夜，以中和其中的碱性物质
再次使用的玻璃器皿则常附有大量刚使用过的蛋白质，干固后不易洗掉
用后立即浸入水中，要求完全浸入，不能留有气泡或浮在液面上
刷洗：
用毛刷沾洗涤剂刷洗，以除去器皿表面附着较牢的杂质
刷洗要适度，过度会损害器皿表面光泽度
浸酸：玻璃器皿浸泡到清洁液中
清洁液对玻璃器皿无腐蚀作用，而其强氧化作用可除掉刷洗不掉的微量杂质
浸泡时器皿要充满清洁液，勿留气泡或器皿露出清洁液面
浸泡时间：一般为过夜，不应少于6 小时
清洁液常用三种：重铬酸钾（g）浓硫酸（ml）蒸馏水（ml）
强清洁液63∶1000∶200
次强清洗液120∶ 200∶1000
弱清洁液100∶ 100∶1000
配制时应注意安全，须穿戴耐酸手套和围裙，并要保护好面部及身体裸露部分配制过程中可使重铬酸钾溶于水中，然后慢慢加浓硫酸。并不停的用玻璃棒搅拌，使产生的热量挥发，配制溶液应选择塑料制品。配成后清洁液一般为棕红色
冲洗在使用后，刷洗及浸泡后都必须用水充分冲洗。使之尽量不留污染或清洁液的残迹
最好用洗涤装置
如用手工操作
需流水冲洗十次以上，每次水须灌满及倒干净，最好用蒸馏水清洗3-5 次，晾干备用
胶塞的清洗
新购置的瓶塞带有大量滑石粉及杂质，应先用自来水冲洗，再做常规处理
常规清洗方法
每次用后立即置入水中浸泡，用2% NaOH 或洗衣粉煮沸10-20 分钟（以除掉培养中的蛋白质），自来水冲洗，蒸馏水冲洗2-3次，晾干备用
塑料制品的清洗
塑料制品现多是采用无毒并已经特殊处理的包装，打开包装即可用，多为一次性物品
必要时用2% NaOH 浸泡过夜，用自来水充分冲洗，再用5%盐酸溶液浸泡30 分钟，最后用自来水和蒸馏水冲洗干净，晾干备用
消毒
细胞培养的最大危险是发生培养物的细菌、真菌和病毒等微生物的污染
常见原因：
操作间或周围空间的不洁
培养器皿和培养液消毒不合格或不彻底
由于有关培养的每个环节的失误均能导致培养失败，故细胞培养的每个环节都应严格遵守操作常规，防止发生污染
消毒灭菌方法
物理消毒灭菌法
紫外线：用于空气，操作台表面和不能使用其它法进行消毒的培养器皿，30min 湿热（高压蒸气灭菌法）：121℃，20min
干烤：160℃, 2 小时
过滤：0.22μm
化学消毒灭菌法
70%酒精
主要用于操作者的皮肤，操作台表面及无菌室内的壁面处理
1‰新洁尔灭
主要用于器械的浸泡及皮肤和操作室壁面的擦试消毒
抗生素
主要用于培养用液灭菌或预防培养物污染
2 细胞培养常用物品
水
水的制备：
细胞培养用水必须非常纯净，不含有离子和其他的杂质。
需要用新鲜的双蒸水、三蒸水或纯净
细胞培养基
市场上可提供干粉培养基和液体培养基
干粉培养基需使用者自己配制并灭菌，其优点是价格便宜。缺点是配制过程繁琐，质量不易控制
液体培养基是由专业厂家按标准规模化生产，不仅质量得到保证，而且使用十分方便
常用的培养基种类
RPMI-1640（标准型）、DMEM-高糖（标准型）、DMEM-低糖（标准型）、McCoys 5A、M199、F10等
细胞培养基应用选择
选择培养基没有一定的标准，有几点建议可供参考：
(1 ）建立某种细胞株所用的培养基应该是培养这种细胞首选的培养基。可以查阅参考文献，或在购买细胞株时咨询。
(2) 其它实验室惯用的培养基不妨一试，许多培养基可以适合多种细胞。
(3) 根据细胞株的特点、实验的需要来选择培养基。如小鼠细胞株多选RPMI1640 。
(4) 用多种培养基培养目的细胞，观察其生长状态，可以用生长曲线、集落形成率等指标判断，根据实验结果选择最佳培养基，这是最客观的方法，但比较繁琐。
制备1000mlRPMI 1640培养基
RPMI 1640 干粉培养基10.4g（1包）蒸馏水 400ml
↓
磁力搅拌至完全溶解
↓
加三蒸馏水定容至1000ml 在超净台内无菌条件下，用灭菌后的并置有0.22μm孔径滤膜的过滤器除菌，并分装成200ml/瓶，-20℃保存备用。
用前取一瓶溶解，每200ml培养液加灭活的小牛血清至终浓度为10%，即加22ml。再加青霉素和链霉素至终浓度各为100U/ml。------- 细胞培养液
血清
热灭活：56℃, 30 分钟加热已完全解冻的血清
热灭活目的：灭活血清中的补体成分。如果不做细胞因子和免疫相关的实验，建议血清不要灭活。
因为热处理会造成血清沉淀物显著增多，还会影响血清的质量。灭活后严重影响细胞生长速度，且细胞贴壁率降低。
血清中的沉淀物
絮状物：血清中的脂蛋白变性及解冻后血清中纤维蛋白造成，这些絮状物不会影响血清本身的质量。可用离心3000rpm, 5 分钟去除，也可不用处理
显微镜下“小黑点”：经过热处理过的血清，沉淀物的形成会显著增多。有些沉淀物在显微镜下观察象“小黑点”，常误认为血清受污染。一般情况下，此小黑点不会影响细胞生长，但如果怀疑血清质量，则应立即停止使用，更换另一批号的血清
平衡盐液体
组织细胞培养中常用的基本液体，可以维持渗透压、调节pH值、供给细胞生存所需的能量和无机离子成分
用于洗涤组织、细胞等
PBS（Phosphate-Buffered Sallines）
KCl 0.20g
KH2PO4 0.20g
NaCl 8.00g
Na2HPO4·7H2O 2.16g
DPBS（Dulbecco’s Phosphate-Buffered Sallines）标准型
CaCl2(anhyd.)(无水氯化钙) 0.10g
KCl 0.20g
KH2PO4 0.20g
MgCl2·6H2O 0.10g
NaCl 8.00g
Na2HPO4·7H2O 2.16g
D-Hanks’ 平衡盐溶液(D-Hanks Balanced Salt Solutions, D-HBSS)
KCl 0.40g
KH2PO4 0.06g
NaCl 8.00g
NaCO3 0.35g
Na2HPO4 0.048g
D-Glucose 1.00g
Phenol Red 0.01g
消化液
分离组织和分散细胞
常用的有胰蛋白酶和二乙胺四乙酸二钠(EDTA)两种溶液
单独或混合使用
胰蛋白酶溶液
主要作用：使细胞间的蛋白质水解，使细胞相互离散
消化细胞时，加入一些血清或含血清的培养液，能终止消化作用
胰蛋白酶溶液配制
称取胰蛋白酶粉末置烧杯中，用少许D-Hanks 平衡盐溶液调成糊状，再补足D-Hanks 平衡盐溶液，搅拌混匀，置室温4 小时或冰箱过夜，不断搅拌振荡
次日，先用滤纸粗滤，再进行过滤除菌，分装入瓶中，-20℃保存备用（以免分解失效），常用浓度为0.25% （0.1%-0.5%）
胰蛋白酶溶液偏酸，使用前可用碳酸氢钠溶液调pH 至7.2 左右
EDTA·4Na 溶液
一种化学螯合剂，对细胞有一定的离散作用，而且毒性小，价格低廉，使用方便
常用工作液浓度为0.02%。注意：使用EDTA 处理细胞后，要用平衡盐液冲洗干净，因残留的EDTA 会影响细胞生长
EDTA 溶液配制：用D-Hanks’ 平衡盐溶液溶解后，高压蒸汽灭菌，分装成小瓶，4℃冰箱保存
pH 调整液
NaHCO3 溶液
常用浓度为7.5%。配制时用三蒸水溶解后，过滤除菌或高压灭菌，分装，4℃保存
HEPES（分子量238.31）溶液
一种弱酸，中文名字是羟乙基哌秦乙硫磺酸，对细胞无毒性
主要作用:防止培养基pH迅速变动。在开放式培养条件下，观察细胞时培养基脱离了5%CO2的环境，CO2气体迅速逸出，pH迅速升高，若加了HEPES，此时可以维持pH7.0左右。一般在进行克隆化培养时要添加HEPES
使用终浓度一般为10-50mmol/L
常配成1M 储存液：用20ml 双蒸水溶解4.76克HEPES，过滤除菌或高压灭菌，分装小瓶，4℃保存。使用时可向100ml培养液中加入2ml HEPES浓缩液，终浓度为20mmol/L
谷氨酰胺补充液
谷氨酰胺在细胞代谢过程中起重要作用，合成培养基中都要添加，由于谷氨酰胺在溶液中很不稳定容易降解，4℃下放置7天即可分解约50%，所以都是在使用前添加
配制好的培养液（含谷氨酰胺）在4℃放置2周以上时，要重新加入原来量的谷氨酰胺，故需单独配制谷氨酰胺，以便临时加入培养液内
使用终浓度为1-4mmol/L
一般配制为100倍浓缩液，即浓度为200mmol/L（29.22g/L），配制方法为：
谷氨酰胺2.922g溶于三蒸水加至100ml即配成200mmol/L的溶液，充分搅拌溶解后（应加温30℃），过滤除菌，分装小瓶，-20℃保存，使用时可向100ml培养液中加入0.5-2ml谷氨酰胺浓缩液，终浓度为1-4mmol/L
酚红
大多数培养液中使用酚红作为pH 指示
红色表示中性pH，黄色代表酸性pH，紫色表示碱性pH
在一些特殊培养液中不含酚红
因为已有一些研究表明：酚红能模拟类固醇激素（尤其是雌激素）样作用
抗生素溶液
抗生素使用种类与浓度：
& nbsp; 工作浓度储存温度杀灭细菌
penicillin 100 u/ml -20℃G(+)
streptomycin 100 ug/ml -20℃G(+) 、G(-)
gentamicin 50 ug/ml - 20℃G(+) 、G(-)、支原体
amphotericin B 2.5 ug/ml -20℃真菌
nystatin 50 ug/ml -20℃真菌
器材和液体的准备
细胞培养用的玻璃器材
培养瓶、吸管等在清洗干净以后，装在铝盒和铁筒中，160℃，2小时干烤灭菌后备用
手术器材、瓶塞、配制好的PBS液
15磅，121℃，20分钟蒸气灭菌
MEM培养液、小牛血清、消化液
用G6滤器负压抽滤后备用
无菌操作中的注意事项
在无菌操作中，一定要保持工作区的无菌清洁
操作前无菌室及无菌操作台以紫外灯照射30-60 分钟灭菌，以70 % ethanol 擦拭无菌操作抬面，并开启无菌操作台风扇运转10 分钟
操作时，小心取用无菌之实验物品，避免造成污染。勿碰触吸管尖头部或容器瓶口，亦不要在打开之容器正上方操作实验。容器打开后，以手夹住瓶盖并握住瓶身，倾斜约45°角取用
在整个无菌操作过程中都应该在酒精灯的周围进行
哺乳动物细胞冷冻保存
冷冻保存要点
冷冻过程要缓慢。4℃30－60 分钟→-20℃30 分钟→-80℃16－18 小时（或过夜）→液氮长期保存
冻存细胞必须处在对数生长期，活力大于90％，无微生物污染。细胞浓度控制在：1×107－5×107/ml。
常用细胞冷冻保存液
10％DMSO ＋完全细胞生长培养液（20％血清＋基础培养液）
10％甘油＋完全细胞生长培养液（20％血清＋基础培养液）
冷冻保存细胞的解冻与复苏要点
快速解冻
冻存细胞从液氮中取出后，立即放入37℃水浴中，轻轻摇动冷冻管，使其在1 分钟内全部融化（不要超过3 分钟）
解冻后的细胞可直接接种到含完全生长培养液的细胞培养瓶中直接进行培养，24 小时后再用新鲜完全培养液替换旧培养液，以去除DMSO
如果细胞对冷冻保护剂特别敏感
解冻后的细胞应先通过离心去除冷冻保护剂，然后再接种到含完全生长培养液的培养瓶中解冻冷冻保存细胞的离心方法
从液氮中取出冻存的细胞，立即放入37℃水浴中快速解冻
将1－2ml 冻存细胞液加入到25ml 新鲜完全细胞生长培养液中，轻轻混匀
用80g 离心2－3 分钟，弃上清液
用完全生长培养液轻轻悬浮细胞团，并计数细胞
接种细胞到培养瓶中，起始密度为3×105/ml。
细胞培养系列二常用器材及处理方法
体外培养细胞使用的器材品种较多。由于离体细胞对各种毒物都很敏感，所以细胞培养所用器材的清洗、消毒处理是培养能否成功的关键之一。
一、玻璃器材
常用的玻璃器材有各种规格的玻璃瓶、培养瓶、培养皿、吸管、离心管等。
无论是初次使用还是培养后重复使用的玻璃器材均需要进行消毒处理。首次使用的玻璃器材应先用自来水初步刷洗，然后用稀盐酸溶液（1%）浸泡过夜，再用自来水冲洗，最后处理方法与重复使用的器皿的处理。重复使用的玻璃器皿的处理步骤：
（1）刷洗。用软毛刷和优质中性洗涤剂刷洗，去除器皿内外表面的杂质。刷洗时注意不要用力过重，以防损坏器皿内表面光洁度，影响细胞生长；也不能留有死角。器皿数量大时，可使用超声波清洁装置，冲洗干净后晾干。
（2）清洁液处理。将刷洗晾干后的玻璃器皿放入硫酸-重铬钾清洁液中。清洁液配方如下，见下表：
表清洁液配方
水(或去离子水)抽滤冲洗、包装、121℃高压蒸气灭菌20分钟。也可用5%洁消精浸泡20分钟后，再按上述方法冲洗和灭菌。
二、塑料器材
体外培养细胞中塑料器皿的使用越来越多，有进口的，也有国产的。主要有多孔培养板、培养皿、培养瓶及吸嘴。多孔培养板有4孔、6孔、24孔、96孔等规格可供选择。多数为进口产品，已消毒灭菌密封包装，使用时只需打开即可。有一次性使用的，也有反复使用的。在我国不少实验室，由于经费有限，经过清洗和消毒灭菌再使用的较多。
塑料器皿若使用后，先用自来水浸泡冲洗、晾干，再用3%HCl或2%N aOH溶液浸泡过夜，用自来水充分冲洗，或先用2%NaOH处理之后再用3%HCl浸泡30分钟，最后用自来水冲洗干净，并用双蒸水冲洗3
次以上，晾干。消毒采用紫外线直接照射或辐照灭菌办法。清洗时要防止产生划痕，以免影响细胞的贴附性。所以，培养要求较高的细胞的塑料器材，最好一次性使用。
三、橡皮器材
应选择质软、耐高温、毒性小的橡皮制品(最好是硅制品)做各种瓶或试管的塞子、盖子。新购置的橡皮制品，用自来水冲洗去除其表面粉粒和污物。先用5%氢氧化钠煮沸15分钟，用自来水冲洗8次，再用4%盐酸煮沸15分钟，用自来水冲洗8次，单蒸水冲洗3次，双蒸水(或去
离子水)冲洗一次，晾干后包装或置于铝盒内，用121℃高压蒸气灭菌2 0分钟。
已用过的橡皮制品，先用自来水冲洗干净，然后用洗衣粉加热煮沸10分钟后，用自来水边冲边用力搅动，以充分洗净残余洗衣粉，然后用蒸馏水煮沸2次，每次15分钟，再用单蒸水冲洗2次，必要时还要用双蒸水(或去离子水)冲洗一次，晾干后包装或放于铝盒内，用121℃高压蒸气灭菌20分钟。
四、金属器材
细胞培养中需用多种金属器材，用于解剖、取材、剪切组织及持取物件等，常用的有剪刀、镊子、手术刀、解剖刀、血管钳、组织镊、眼科镊及各种型号针头等。新的金属器材，先用纸擦去表面的油脂，再用洗衣粉煮沸，或用1%碳酸氢钠煮沸15分钟，擦干后再用95%酒精纱布擦干，包装或置铝盒内于121℃高压蒸气灭菌20分钟。已用过的金属器材，及时用酒精棉球擦干净，包装入铝盒内于121℃高压蒸气灭菌20分钟。
五、其他物品
纱布先用自来水洗净后，再用单蒸水冲洗，然后用单蒸水煮沸2次，每次15分钟，并经常用长镊子翻动，再用单蒸水洗2次，晾干后折成八层包装，用121℃高压蒸气灭菌20分钟。
注射器的针头使用后，立即用自来水（或来苏尔水）冲洗数次，冲洗出针头内的剩余物，以免堵塞针头，然后用单蒸水洗2~3次，再用95%酒精冲洗3次，包装或置铝饭盒内121℃高压蒸气灭菌20分钟。
用于细胞培养过程中的各种人工合成培养液、缓冲液和酶滤液等也需要进行除(灭)菌处理。缓冲液常用高压蒸气消毒。血清用56℃水浴灭活3 0分钟。人工合成培养液等酶溶液用过滤除菌。安装滤器时要防止滤膜装偏而导致过滤失效，过滤时力量不能过大、过猛，以免滤膜破裂。滤液量多，用抽滤式或加压式（正压式）过滤装置。滤液量少，可选用2. 5cm直径的小号滤器，直接套在小瓶（如青霉素瓶）上，以注射器推动压力过滤。
消毒灭菌前所用的包装材料可用牛皮纸、硫酸纸、棉布、铝饭盒和特制玻璃（或金属）消毒筒等，可根据器材大小、形态选用，采取局部包装或部分包装，并用线绳扎紧。
1 目的 为了保证实验分析所用玻璃器皿满足检测分析需要，规范玻璃器皿清洗管理，特制定本流程简图。 2 范围 适用于本检测中心所有常用玻璃器皿的清洗管理。 3 职责 实验助理负责常用玻璃器皿的清洗及各类洗液的配制。 综合室主任负责各类玻璃器皿清洗效果的检查，微生物检测室玻璃器皿的清洗效果由微生物检测室主任负责检查。 各室分析人员负责将使用后的玻璃器皿进行分类收集并做好标识后放至指定区域。 4 概念： 无 5玻璃器皿清洗方法 新购置玻璃器皿的清洗方法 新购置的玻璃器皿含游离碱较多，一般用2％的盐酸或洗涤液清洗，再用自来水冲洗干净，最后用蒸馏水冲洗，晾干。 常用玻璃器皿的清洗方法 根据实验，将实验室常用的玻璃器皿分为：一般性分析玻璃器皿、残留油类(皂化值实验)玻璃器皿、金属元素分析玻璃器皿(含消化杯)、糖类实验玻璃器皿、不溶性膳食纤维实验用坩埚、盛装指示剂或染料的玻璃器皿、盛装粘性较大日化原料的玻璃器皿等。
5.2.2特殊情况的清洗 当用碱性乙醇洗液润洗或铬酸洗液浸泡8小时以上均无法清洗干净油 污等有机物时，可加入碱性高锰酸钾洗液浸泡约30分钟后清洗，再用 酸性硫酸亚铁洗液或VC洗液洗涤，然后用自来水反复冲洗，最后蒸馏 水冲洗2～3次，晾干。 玻璃器皿洁净标准 实验助理要对清洗后的玻璃器皿进行自检。器皿内壁应能被水均匀地润湿而无水的条纹，且无水珠挂壁。 常用的干燥方法 5.4.1 晾干：将玻璃仪器洗净后，沥尽水分，倒置于无尘的干燥处，让其自 然晾干。 5.4.2烘干：一般玻璃仪器洗净并沥尽水分后，可置于电烘箱中，温度控制 在105～?110℃，烘1h左右。但带有刻度的量器不宜在高温下烘干， 应在60℃以下烘干。如带有盖(塞)的玻璃仪器，如容量瓶、称量瓶等， 应去掉盖(塞)。 微生物检测室玻璃器皿的清洗 微生物检测室玻璃器皿按5.2.1一般性分析玻璃器皿清洗流程进行清洗，无菌玻璃器皿需经180℃维持3h灭菌，于室温下保存，保存期应小于一周。 6 洗液的配制 铬酸洗液(用于洗涤油污)：称取10g K2Cr2O7置于烧杯中，加20mL水溶解后，
目的 为了保证实验分析所用玻璃器皿满足检测分析需要，规范玻璃器皿清洗管理， 特制定本流程简图。 范围 适用于本检测中心所有常用玻璃器皿的清洗管理。 职责 实验助理负责常用玻璃器皿的清洗及各类洗液的配制。 综合室主任负责各类玻璃器皿清洗效果的检查，微生物检测室玻璃器皿的 清洗效果由微生 物检测室主任负责检查。 各室分析人员负责将使用后的玻璃器皿进行分类收集并做好标识后放至指 定区域。 概念： 无 5玻璃器皿清洗方法 5.1新购置玻璃器皿的清洗方法 新购置的玻璃器皿含游离碱较多，一般用 2%的盐酸或洗涤液清洗，再用 自来水冲洗干净，最后用蒸馏水冲洗，晾干。 5.2常用玻璃器皿的清洗方法 根据实验，将实验室常用的玻璃器皿分为：一般性分析玻璃器皿、残留油 类（皂化值实验）玻璃器皿、金属元素分析玻璃器皿（含消化杯）、糖类实验玻 璃器皿、不溶性膳食纤维实验用坩埚、盛装指示剂或染料的玻璃器皿、盛 装粘性较大日化原料的玻璃器皿等。 清洗流程简图 3.1 3.2 3.3
5.2.2特殊情况的清洗 当用碱性乙醇洗液润洗或铬酸洗液浸泡 8小时以上均无法清洗干净油 污等有机物时，可加入碱性高锰酸钾洗液浸泡约 30分钟后清洗，再用 酸性硫酸亚铁洗液或VC 洗液洗涤，然后用自来水反复冲洗，最后蒸馏 水冲洗2?3 次，晾干。 5.3玻璃器皿洁净标准 实验助理要对清洗后的玻璃器皿进行自检。器皿内壁应能被水均匀地润湿 而无水的条纹，且无水珠挂壁。 5.4常用的干燥方法 5.4.1晾干：将玻璃仪器洗净后，沥尽水分，倒置于无尘的干燥处，让其自然 晾干。 5.4.2烘干：一般玻璃仪器洗净并沥尽水分后，可置于电烘箱中，温度控制在 105?110 C, 烘1h 左右。但带有刻度的量器不宜在高温下烘干， 应在60C 以下烘干。如带有盖 （塞）的玻璃仪器，如容量瓶、称量瓶等， 应去掉盖（塞）。 5.5微生物检测室玻璃器皿的清洗 微生物检测室玻璃器皿按5.2.1 一般性分析玻璃器皿清洗流程进行清洗，无 菌玻璃器皿需经180 C 维持3h 灭菌，于室温下保存，保存期应小于一周。 6洗液的配制 待清洗 器皿 待清洗 器皿 待清洗 器皿 待清洗 器皿 待清洗 坩埚 自来水 冲洗 I 洗衣粉或 洗洁精 清洗 自来水 冲洗 自来水 冲洗 待清洗器皿 自来水冲 洗 待清洗 自来水 反复冲洗 蒸馏水冲 洗2?3 次 干燥 定区放置 碱性乙醇洗 液（碱性高锰 酸钾洗液）浸 泡8小时以上 （酸性硫酸亚 铁或VC 洗液） 自来水 反复冲洗 蒸馏水冲 洗2?3次 干燥 定区放置 20%硝酸 浸泡8 小时以上 自来水反 复冲洗 超纯水冲 洗2?3次 干燥 定区放置 热水冲洗 酸性硫酸 亚铁或1 : 1 盐酸洗液 润洗 自来水冲洗 铬酸洗液 抽虑 热水抽虑 至无色 盐酸-乙醇 洗液浸泡 洗衣粉或 洗洁精 清洗 自来水反 复冲洗 蒸馏水冲 洗2?3次 干燥 定区放置 蒸馏水冲 洗2?3次 干燥 定区放置 自来水反 复冲洗 蒸馏水冲 洗2?3次 干燥 定区放置 石油醚等 有机溶剂 泡8小时 自来水 自来水 冲洗 洗衣粉或 洗洁精 清洗 自来水 反复冲洗 蒸馏水冲 洗2?3 干燥 定区放置
常见玻璃仪器的清洗方法 洗涤玻璃仪器不仅是一个实验前的准备工作，也是一个技术性的工作。仪器清洗如果不符合要求，对分析结果的准确度和精确度均有影响。不同分析工作(如工业分析、一般化学分析和微量分析等)有不同的仪器清洗要求，我们以一般定量化学分析为基础介绍玻璃仪器的清洗方法。 清洗仪器的一般步骤 1、用水刷洗：使用用于各种形状仪器的毛刷，如试管刷、瓶刷、滴定管刷等。首先用毛刷蘸水刷洗仪器，用水冲去可溶性物质及刷去表面粘附灰尘。 2、用合成洗涤水刷洗：市售的餐具洗涤灵是以非离子表面活性剂为主要成分的中性洗液，可配制成1—2%的水溶液，也可用5%的洗衣粉水溶液，刷洗仪器，它们都有较强的去污能力，必要时可温热或短时间浸泡。 清洗的仪器倒置时，水流出后，器壁应不挂小水珠。至此再用少许纯水冲仪器三次，洗去自来水带来的杂质，即可使用。 各种清洗剂的使用 针对仪器沾污物的性质，采用不同清洗液能有效地洗净仪器。各种洗涤液见表。要注意在使用各种性质不同的清洗时，一定要把上一种洗涤液除去后再用另一种，以免相互作用生成的产物更难洗净。 铬酸洗液因毒性较大尽可能不用，近年来多以合成洗涤剂和有机溶剂来除去油污，但有时仍要用到铬酸洗液，故也列入表内。 砂芯玻璃滤器清洗 1、新的滤器使用前应以热的盐酸或铬酸洗液边抽滤边清洗，再用蒸馏水洗净。 2、针对不同的沉淀物采用适当的洗涤剂先溶解沉淀，或反复用水抽洗沉淀物，再用蒸馏水冲洗干净，在110℃烘箱中烘干，然后保存在无尘的柜内或有盖的容器内。若不然积存的灰尘和沉淀堵塞滤孔很难洗净。表2 列出一些洗涤砂芯滤板的洗涤液可供选用。 表几种常用的洗涤清洗液 洗涤液及其配方使用方法 ①铬酸洗液用于去除器壁残留油污，用少量洗液刷洗或浸泡一夜，洗 液可重复使用。
1目的 为了保证实验分析所用玻璃器皿满足检测分析需要，规范玻璃器皿清洗管理，特制定本流程简图。 2范围 适用于本检测中心所有常用玻璃器皿的清洗管理。 3职责 3.1实验助理负责常用玻璃器皿的清洗及各类洗液的配制。 3.2综合室主任负责各类玻璃器皿清洗效果的检查，微生物检测室玻璃器皿的清洗效果由 微生物检测室主任负责检查。 3.3各室分析人员负责将使用后的玻璃器皿进行分类收集并做好标识后放至指 定区域。 4概念： 无 5玻璃器皿清洗方法 5.1新购置玻璃器皿的清洗方法 新购置的玻璃器皿含游离碱较多，一般用2%的盐酸或洗涤液清洗，再用 自来水冲洗干净，最后用蒸馏水冲洗，晾干。 5.2常用玻璃器皿的清洗方法 根据实验，将实验室常用的玻璃器皿分为：一般性分析玻璃器皿、残留油 类（皂化值实验）玻璃器皿、金属元素分析玻璃器皿（含消化杯）、糖类实验玻璃 器皿、不溶性膳食纤维实验用坩埚、盛装指示剂或染料的玻璃器皿、盛装粘性较大日化原料的玻璃器皿等。 5.2.1清洗流程简图
522特殊情况的清洗 当用碱性乙醇洗液润洗或铬酸洗液浸泡 8小时以上均无法清洗干净油 污等有机物时，可加入碱性高锰酸钾洗液浸泡约 30分钟后清洗，再用 酸性硫酸亚铁洗液或VC 洗液洗涤，然后用自来水反复冲洗，最后蒸馏 水冲洗2?3 次，晾干。 5.3玻璃器皿洁净标准 实验助理要对清洗后的玻璃器皿进行自检。器皿内壁应能被水均匀地润湿 而无水的条纹，且无水珠挂壁。 5.4常用的干燥方法 5.4.1晾干：将玻璃仪器洗净后，沥尽水分，倒置于无尘的干燥处，让其自然 晾干。 5.4.2烘干：一般玻璃仪器洗净并沥尽水分后，可置于电烘箱中，温度控制在 105?110 C,烘1h 左右。但带有刻度的量器不宜在高温下烘干， 应在60C 以下烘干。如带 有盖（塞）的玻璃仪器，如容量瓶、称量瓶等， 应去掉盖（塞）。 5.5微生物检测室玻璃器皿的清洗 微生物检测室玻璃器皿按5.2.1 一般性分析玻璃器皿清洗流程进行清洗，无 菌玻璃器皿需经180 C 维持3h 灭菌，于室温下保存，保存期应小于一周。 6洗液的配制 待清洗 器皿 自来水 冲洗 碱性乙醇洗 液（碱性咼锰 酸钾洗液）浸 泡8小时以上 （酸性硫酸亚 铁或VC 洗液） 自来水反 复冲洗 自来水 反复冲洗 待清洗 坩埚 待清洗器皿 待清洗 定区放置 自来水冲洗 铬酸洗液 抽虑 热水抽虑 至无色 石油醚等 有机溶剂 泡8小时 蒸馏水冲 洗2?3 20%硝酸 浸泡8 小时以上 定区放置 定区放置 超纯水冲 洗2?3次 蒸馏水冲 洗2?3次 定区放置 干燥 蒸馏水冲 洗2?3次 定区放置 自来水冲 洗 蒸馏水冲 洗2?3次 定区放置 自来水 自来水 洗衣粉或 洗洁精 清 洗 自来水 反复冲洗 定区放置
实验一定量分析中常用玻璃仪器的使用及洗涤 一、实验目的 1、熟悉化学实验室规划和安全守则。 2、清点仪器，熟悉仪器的名称、规格、用途和注意事项。 3、练习玻璃仪器和瓷质仪器的洗涤与干燥方法。 二、实验原理 1、化学实验室安全守则 ?实验前做好预习，熟悉每个实验的原理、规范操作要求、药品性质及安全注意事项。 ?实验时听从任课教师、实验指导教师或实验管理人员的指导，严格按照规定操作。未经教师同意，不得任意改变规定的操作方法和药品的用量。 ?加强个人防护意识，不得穿拖鞋进入实验室，严禁在实验室内饮食吸烟，或把食具带进实验室，实验完毕，必须洗净双手。 ?倾注药品或加热液体时，不要俯视容器，以防溅出。试管加热时，切记不要使管口向着自己或别人。 ?易挥发和易燃物质，应远离火源。 ?浓酸和浓碱具有强腐蚀性，不要让它们溅在皮肤或衣服上。 ?绝对不允许把各种化学药品任意混合，以免发生意外事故。 ?未经教师允许，严禁将药品带出实验室。 ?爱护实验仪器和设备，搞好实验室卫生。 2、认领仪器 ?按仪器清单逐个领取和认识化学实验中常用的仪器。 3、玻璃仪器的洗涤： ?洗刷仪器时，应首先将手用肥皂洗净，免得手上的油污附在仪器上，增加洗刷的困难。 ?一般的玻璃仪器(如烧瓶、烧杯等)洗涤： 先用自来水冲洗一下，然后用毛刷蘸洗衣粉或洗洁精刷洗，再用自来水清洗掉残留的洗涤剂，最后用纯化水冲洗3次(应顺壁冲洗并充分震荡，以提高冲洗效果)。 ?一些口径小而长的仪器，如滴定管、移液管、容量瓶等，不宜用刷子刷洗，可选用氧化能力和腐蚀能力很强的铬酸洗液来洗。 先用自来水洗去尘土和水溶性污物，然后尽可能倾掉残留液，再在仪器中加入少量的铬酸洗液，慢慢地转动仪器，使仪器内壁全部浸润(注意不能让洗液流出来)，旋转几周后，把洗液倒回原瓶，最后依次用自来水、纯化水冲洗干净。 铬酸洗液：研细的重铬酸钾20g溶于40mL水中，慢慢加入350 ml浓硫酸。 ?作痕量金属分析的玻璃仪器，应使用1:1~1:9 HNO3溶液浸泡，然后进行常法洗涤。 ?作邻苯二甲酸酯分析的玻璃仪器，应用分析纯试剂冲洗或400℃烘烤2-4h。
[分享] 微生物常用玻璃器皿清洁方法 清洁的玻璃器皿是得到正确的实验结果的重要条件之一。清洗的目的就在于除去玻璃器皿上的污垢（灰尘、油污、无机盐等物质），使其不能妨碍得到正确的实验结果。通常清洗方法有两种，一是机械清洗方法，即用铲、刮、刷等方法清洗；二是化学清洗方法，即用各种化学去污溶剂清洗。具体的清洗方法要依污垢附着表面的状况及污垢的性质决定。 1 实验室常用洗涤剂的种类及其应用 （1）肥皂使用时多用湿刷子（试管刷、瓶刷）沾肥皂刷洗容器，再用水洗去肥皂。热的肥皂水（5％）去污力很强，洗去器皿上的油脂很有效。 （2）去污粉用时将一般玻璃器皿或搪瓷器皿润湿，将去污粉涂在污点上，用布或刷子擦拭，再用水洗去去污粉。 （3）洗衣粉常用1％的洗衣粉溶液洗涤载玻片和盖玻片，能达到良好的清洁效果。 （4）洗涤液通常用的洗涤液是重铬酸钾（或重铬酸钠）的硫酸溶液。重铬酸钾（或重铬酸钠）与硫酸作用后形成铬酸。铬酸是一种强氧化剂，去污能力很强，实验室常用之洗去玻璃和瓷质器皿上的有机质。切不可用于洗涤金属器皿。 洗涤液分为浓溶液和稀溶液两种，配方如下： a 浓配方：重铬酸钾（工业用）50g，蒸馏水150mL，浓硫酸（粗）800mL。 b 稀配方：重铬酸钾（工业用）50g，蒸馏水850mL，浓硫酸（粗）100mL。 配法：将重铬酸钾溶解在温热蒸馏水中（可加热），待冷却后，再缓慢加入浓硫酸，边加边搅拌。配好的溶液呈棕红色或橘红色。应始终存储于有盖容器内，以防变质。此液可多次使用，直至溶液变成青褐色或墨绿色时失效。 2 各种玻璃器皿的洗涤方法 （1）新玻璃器皿的洗涤法新购置的玻璃器皿（包括载玻片、盖玻片、试管、吸管、平皿、三角瓶等）含有游离碱，应用2％的盐酸溶液浸泡数小时，以中和其碱质，再用水充分冲洗干净。 （2）载玻片及盖玻片的洗涤法用过的载玻片放入1％洗衣粉溶液中煮沸20～30min（注意溶液一定要浸没玻片，否则会使玻片钙化变质），待冷却后，逐个用自来水洗净，浸泡于95％的乙醇中备用。盖玻片散入1％的洗衣粉溶液中，煮沸1min，待稍冷后再煮沸1min，如此重复2～3次（如煮沸时间过长会使玻片钙化变白且变脆易碎）。待冷却后用自来水冲洗。洗净后于95％的乙醇中浸泡。带有活菌的载玻片或盖玻片可先浸在5％石炭酸，或2～3％来苏水，或0.1％升汞溶液中消毒24～48小时后，再按上述方法洗涤。使用前，可用干净纱布擦去酒精，并经火焰微热，使残余酒精挥发，再用水滴检查，如水滴在玻片上均匀散开，方可使用。 （3）血球计数板的清洗血球计数板（或Petrof Hausser细菌计数板）使用后应立即在水龙头下用水冲净，必要时可用95％酒精浸泡，或用酒精棉轻轻擦拭，切勿用硬物洗刷或抹擦，以免损坏网格刻度。洗涤完毕镜检计数区是否残留菌体或其他沉淀物，若不干净，则必须重复洗涤至洁净为止。洗净后自行晾干或用吹风机吹干，放入盒内保存。 （4）一般玻璃器皿的洗涤法三角瓶、培养皿、试管等可用毛刷蘸洗涤剂或去污粉或肥皂洗去灰尘、油污、无机盐等物质，然后用自来水冲洗干净。如果器皿要盛高纯度的化学药品或者做较精确的实验，可先在洗液中浸泡过夜，再用自来水冲洗，最后用蒸馏水洗2～3次。洗刷干净的玻璃器皿烘干备用。 染菌的玻璃器皿，应先经121℃高压蒸汽灭菌20～30min后取出，趁热倒出容器内的培养物，再用热的洗涤剂溶液洗刷干净，最后用水冲洗。染菌的移液管和毛细吸管，使用后应立即放入5％的石炭酸溶液中浸泡数小时，先灭菌，然后再冲洗。
1.Intended Use目的 规范玻璃器皿清洁的标准操作，保证实验室玻璃器皿清洁安全使用及检验工作质量。 2.Sphere of Application适用范围 适用于实验室使用的所有玻璃器皿清洗。 3.Instrument仪器 4.Start-up & shutdown Procedure开关机程序 5.Routine Operation常规操作程序 （1）新玻璃器皿的洗涤方法新购置的玻璃器皿含游离碱较多，应在酸溶液内先浸泡数小时。 酸溶液一般用2％的盐酸或洗涤液。浸泡后用自来水冲洗干净。 （2）使用过的玻璃器皿的洗涤方法 试管、培养皿、三角烧瓶、烧杯等可用瓶刷或海绵沾上肥皂或洗衣粉或去污粉等洗涤剂刷洗，然后用自来水充分冲洗干净。热的肥皂水去污能力更强，可有效地洗去器皿上的油污。洗衣粉和去污粉较难冲洗干净而常在器壁上附有一层微小粒子，故要用水多次甚至10次以上充分冲洗，或可用稀盐酸摇洗一次，再用水冲洗，然后倒置于铁丝框内或有空心格子的木架上，在室内晾干。急用时可盛于框内或搪瓷盘上，放烘箱烘干。 (3) 玻璃器皿经洗涤后，若内壁的水是均匀分布成一薄层，表示油垢完全洗净，若挂有水珠， 则还需用洗涤液浸泡数小时，然后再用自来水充分冲洗。 (4) 装有固体培养基的器皿应先将其刮去，然后洗涤。带菌的器皿在洗涤前先浸在2％煤酚皂 溶液（来苏尔）或0．25％新洁尔灭消毒液内24小时或煮沸半小时，再用上洗洗涤。带病原菌的培养物最好先行高压蒸汽灭菌，然后将培养物倒去，再进行洗涤。 (5) 盛放一般培养基用的器皿经上法洗涤后，即可使用，若需精确配制化学药品，或做科研用 的精确实验，要求自来水冲洗干净后，再用蒸馏水淋洗三次，晾干或烘干后备用。 (6) 玻璃吸管吸过指示液、指示剂、染料溶液等的玻璃吸管（包括毛细吸管），使用后应立即 投入盛有自来水的量筒或标本瓶内，免得干燥后难以冲洗干净。清洗后用蒸馏水淋洗。洗净后，放搪瓷盘中晾干，若要加速干燥，可放烘箱内烘干。 (7) 吸过含有微生物培养物的吸管亦应立即投入盛有2％煤酚皂溶液或0.25％新洁尔灭消毒 液的量筒或标本瓶内，24小时后方可取出冲洗。 吸管的内壁如果有油垢，同样应先在洗涤液内浸泡数小时，然后再行冲洗。 6. 5.2.3砂芯玻璃滤器的洗涤 7. 5.2.3.1新的滤器使用前应以热的盐酸或铬酸洗液边抽滤边清洗，再用蒸馏水洗净。 8. 5.2.3.2针对不同的沉淀物采用适当的洗涤剂先溶解沉淀，或反复用水抽洗沉淀物，再用蒸馏水 冲洗干净，在110℃烘箱中烘干，然后保存在无尘的柜内或有盖的容器内。若不然积存的灰尘和沉淀堵塞滤孔很难洗净。 5.3 洗涤液的配制与使用 9. 5.3.1洗涤液的配制洗涤液分浓溶液与稀溶液两种，配方如下： 浓溶液重铬酸钠或重铬酸钾（工业用）50g+自来水150ml+浓硫酸（工业用） 800ml 稀溶液重铬酸钠或重铬酸钾（工业用）50g+自来水 850ml+浓硫酸（工业用） 100ml 配法都是将重铬酸钠或重铬酸钾先溶解于自来水中，可慢慢加温，使溶解，冷却后徐徐加入浓硫酸，边加边搅动。 配好后的洗涤液应是棕红色或桔红色。贮存于有盖容器内。 5.3.2原理重铬酸钠或重铬酸钾与硫酸作用后形成铬酸，酪酸的氧化能力极强，因而此液具有
SOP 玻璃器皿的洗涤操作规程 1 目的 为了规范实验室的玻璃器皿洗涤程序，特制定此规程。 2 适用范围 本规程适用于本所（中心）样品预处理、样品检测用玻璃器具、盛放容器的清洁。 3 清洗方法 清洁的玻璃器皿是实验得到正确结果的先决条件，因此，玻璃器皿的清洗是实验前的一项重要准备工作。清洗方法根据实验目的、器皿种类、所盛放样品（物品）、洗涤剂类别和沾污程度等不同而有所区别，将本所（中心）主要玻璃器皿分为以下5种： 3.1常用玻璃器皿 实验室中常用的烧杯、锥形瓶、量筒、试剂瓶等玻璃器皿，一般先由实验人员倒掉里面的内容物（如有机溶剂倒入废液缸），再放到洗涤专用水槽内或指定位置。洗涤人员可用毛刷蘸些洗衣粉液刷洗，或浸泡在肥皂水中进行刷洗，待洗尽内外壁杂质后，用自来水冲掉洗涤剂至无泡沫为止，最后用纯化水冲洗2～3次。 洗干净的玻璃器皿倒置时，玻璃器皿中存留的水可以完全流尽而内壁不留水珠和油花，如果出现水珠或油花的器皿应重新洗涤。洗涤干净的器皿不能用纸或抹布擦干，以免将脏物或纤维留在器壁上而污染器皿。仪器倒置时应放在干净的仪器架上（不能倒置于实验台上）。锥形瓶、容量瓶等仪器可倒挂在沥干架或铁架台上，小口颈的试管等可倒插在干净的支架上。 新的玻璃器皿含游离碱较多，应在2％的盐酸溶液内先浸泡数小时。浸泡后
用自来水冲洗干净，然后用纯化水洗2～3次。 3.2 精确刻度的玻璃器皿 滴定管、移液管等涉及溯源信息，需进行计量检定的玻璃器皿，使用铬酸洗液洗涤前，凡能用毛刷洗刷的仪器必须先用自来水和毛刷洗刷，倾尽水，以免洗液被稀释后降低洗涤效果。再用铬酸洗液浸泡10min左右，再用自来水冲净残留在器皿上的洗液，然后用纯化水润洗2～3次。 容量瓶等大体积精确刻度的玻璃器皿，可采用3.1的方法进行洗涤，如无法彻底洗净，须按本方法规定重新进行洗涤。 3.3 顶空瓶 顶空瓶清洗步骤 1、 在通风橱内将铝盖撬开，瓶内能倒出的物质倒入废液瓶，然后 让瓶子在通风橱让溶剂挥发一段时间；2、 将瓶子放入盆中，加入洗洁精和自来水，浸泡，不宜过长时间， 瓶内残留物质能清洗下来即可；3、用试管刷将瓶子刷干净，自来水冲干净； 4、 尽量将瓶内水分沥干，用分析纯甲醇浸泡0.5-1h（浸泡过的甲 醇可以重复利用，如果甲醇过脏应该换新的）5、 将浸泡过的甲醇倒回原玻璃瓶中，下次继续使用。浸泡过的瓶 子用自来水冲干净，然后用超纯水冲洗2-3遍，冲干净后烘干即可。。 3.4 比色皿 比色皿是由光学玻璃制成的，不能用毛刷刷洗。通常视沾污的情况，选用铬酸洗液、HCl-乙醇等浸泡后，用自来水冲洗净，再用纯化水润洗2～3次。 3.5培养皿
********************** 质量管理标准操作规程 玻璃器皿的清洁标准操作规程 1. 目的：规玻璃器皿清洁的标准操作，保证检验工作质量 2. 引用标准：《药品生产质量管理规》《中国药典》2010年版二部 3. 适用围：玻璃器皿的清洁 4. 责任：质检部清洁员、质检部QC人员、质检部管理人员。
5. 容： 清洁的玻璃器皿是实验得到正确结果的先决条件，因此，玻璃器皿的清洗是实验前的一项重要准备工作。清洗方法根据实验目的、器皿的种类、所盛放的物品、洗涤剂的类别和沾污程度等的不同而有所不同。现分述如下： 5.1．新玻璃器皿的洗涤方法 新购置的玻璃器皿含游离碱较多，应在酸溶液先浸泡数小时。酸溶液一般用2％的盐酸或洗涤液。浸泡后用自来水冲洗干净。 5.2．使用过的玻璃器皿的洗涤方法 5.2.1试管、培养皿、三角烧瓶、烧杯等可用瓶刷或海绵沾上肥皂或洗衣粉或去污粉等洗涤剂刷洗，然后用自来水充分冲洗干净。热的肥皂水去污能力更强，可有效地洗去器皿上的油污。洗衣粉和去污粉较难冲洗干净而常在器壁上附有一层微小粒子，故要用水多次甚至10次以上充分冲洗，或可用稀盐酸摇洗一次，再用水冲洗，然后倒置于铁丝框或有空心格子的木架上，在室晾干。急用时可盛于框或搪瓷盘上，放烘箱烘干。 玻璃器皿经洗涤后，若壁的水是均匀分布成一薄层，表示油垢完全洗净，若挂有水珠，则还需用洗涤液浸泡数小时，然后再用自来水充分冲洗。 装有固体培养基的器皿应先将其刮去，然后洗涤。带菌的器皿在洗涤前先浸在2％煤酚皂溶液（来尔）或0．25％新洁尔灭消毒液24小时或煮沸半小时，再用上洗洗涤。带病原菌的培养物最好先行高压
玻璃仪器的洗涤及保管 一、洗涤液的配制 1、强酸性氧化剂洗液：将20g重铬酸钾（工业纯）溶于40ml热水中，冷却后，于搅拌下徐徐加入360ml浓的工业硫酸。 2、碱性高锰酸钾洗液：将4g高锰酸钾溶于少量水中，然后加入10%氢氧化钠溶液至100ml，碱性高锰酸钾洗液不应在所洗的玻璃器皿中长期存留。 3、碱性乙醇洗液：将25g氢氧化钾溶于最少量的水中，再用工业纯的乙醇稀释至1L。 4、纯碱洗液：纯碱洗液多采用10%以上的浓氢氧化钠、氢氧化钾或碳酸钠，用于浸泡或浸蒸玻璃器皿，煮沸可以加强洗涤效果。但在被洗的容器中停留不得超过20min，以免腐蚀玻璃。 5、纯酸洗液：可直接用1+1盐酸或1+1硫酸或1+1硝酸或浓硫酸的等体积混合液 6、合成洗涤液或洗衣粉配成的洗涤液： 7、有机溶剂： 二、洗涤方法 1、常规洗涤法：自来水冲洗1—2遍除去灰尘后，如用强酸性氧化剂洗涤时，应将水沥干。洗净的清洁玻璃仪器壁上应能被水均匀润湿（不挂水珠）。 2、不便刷洗的玻璃仪器的洗涤法：可根据污垢的性质选择不同的洗涤液进行浸泡或共煮，，再按常法用水冲净。 3、水蒸汽洗涤法： 4、特殊的清洁要求：分光度计上的比色皿，用于测定有机物之后，应以有机溶剂洗涤，必要时可用硝酸浸洗。但要避免用重铬酸钾洗液洗涤，以免重
铬酸盐附着在玻璃上。 5、对测定痕量铬的玻璃器皿，不应用铬酸洗液洗涤；最好以1+1硝酸或等容积的浓硝酸-硫酸混合液来清洗。对用于测侧磷酸盐的玻璃仪器，不得使用含磷的洗涤剂。对测氨和凯氏总氮的玻璃仪器，应以无氨水洗涤。 三、玻璃仪器的干燥 1、控干：将洗净的玻璃仪器倒置在滴水架上或专用柜内控水晾干。 2、烘干：将洗净的玻璃仪器置于110--120°C的清洁烘箱内烤烘1小时左右。任何量器均不得用烘干法干燥。 3、吹干：电吹风机快速吹干。 4、烤干：用酒精灯或红外线灯加热烘干。烤干法只适用于硬质玻璃仪器，有些玻璃仪器，如比色皿、比色管、称量瓶、试剂瓶等不宜用烤干法干燥。 四、玻璃仪器的保存 将干净的玻璃仪器倒置于专用柜内，柜的隔板上衬垫清洁滤纸，也可以在玻璃仪器上覆盖清洁纱布，关闭柜门防止落尘。 1、吸管可置于有盖的搪瓷盘、盒中，垫以清洁纱布。也可以置于移液管架上并罩以塑料薄膜。 2、滴定管可倒置于滴定架上，或盛满蒸馏水，上口加套指形管或小烧杯，使用中的滴定管（内装滴定液）在操作暂停时也应加套以防灰尘落入。 3、清洁的比色皿、比色管、离心管要放在专用盒内，或倒置于专用架上。 4、具磨口塞的清洁玻璃仪器，如量瓶、称量瓶、碘量瓶、试剂瓶等要衬纸加塞保存。 5、凡有配套塞、盖的玻璃仪器，如比重瓶、称量瓶、量瓶、分液漏斗、比色管、滴定管等都必须保持原装配套，不得拆散使用和存放。
北京金诺百泰生物技术有限公司标准管理文件 一、目的：建立实验室玻璃仪器清洗标准操作规程。 二、适用范围：适用于玻璃仪器清洗的标准操作规程的操作。 三、责任者：玻璃仪器清洗操作人员。 四、规程： 1．新购玻璃仪器的清洗新购玻璃仪器，其表面附有碱质，可先用肥皂水刷洗，再用流水冲净，浸泡于l～2％盐酸中过夜，再用流水冲洗，最后用蒸馏水冲洗2～3次，干燥备用。 2．使用过的玻璃仪器的清洗 (1)一般玻璃仪器：如试管、烧杯、锥形瓶等，先用自来水洗刷后，用肥皂水或去污粉刷洗，再用自来水反复冲洗，去尽肥皂水或去污粉，最后用蒸馏水淋洗2～3次。干燥备用。 (2)容量分析仪器：吸量管、滴定管、容量瓶等，先用自来水冲洗，待晾干后，再用铬酸洗液浸泡数小时，然后用自来水充分冲洗，最后用蒸馏水淋洗2～3次，干燥备用。 （一）量瓶的清洗洗涤容量瓶时，先用自来水洗几次，倒出水后，内壁不挂水珠，即可用蒸馏水荡洗三次后，备用。否则，就必须用铬
酸洗液洗涤。为此，先尽量倒出瓶内残留的水（以免损坏洗液），再加入10~20ml洗液，倾斜转动容量瓶，使洗液布满内壁，可放置一段时间，然后将洗液倒回原瓶中，再用自来水充分冲洗容量瓶和瓶塞，洗净后用蒸馏水荡洗三次。用蒸馏水荡洗时，一般每次用15~20ml 左右，不要浪费。 （二）移液管和吸量管的洗涤 1.清洗：使用前，移液管和吸量管都应洗至整个内壁和其下部的外壁不挂水珠。为此，可先用自来水净洗一次，再用铬酸洗液洗涤。用左手持洗耳球，将食指或拇指放在洗耳球的上方，其余手指自然握住洗耳球，用右手的拇指和中指拿住移液或吸量标线以上的部分，无名指和小指辅助拿住移液管，将洗耳球对准移液管口，管尖贴在吸水纸上，用洗耳球压气，吹去基中残留的水，然后排除洗耳球中的空气，将管尖伸入洗液瓶中，吸取洗液至移液管球部的四分之一处或吸量管全管的四分之一处。移开洗耳球，与此同时，用右手的食指堵住管口，把管横过来，左手扶住管的下端，松开右手食指，一边转动移液管，一边使管口降低，让洗液布满全管。然后，从管的上口将洗液放回原瓶，用自来水充分冲洗。再通过洗耳球，如上操作，吸取蒸馏水将整个管的内壁润洗三次，荡洗的水应从管尖放出。亦可用洗瓶从管的上口吹洗，并用洗瓶吹洗管的外壁。 2.润洗：移取溶液前，可用吸水纸将管的尖端内外的水除去，然后用待吸溶液润洗三次。方法是：按前述洗涤操作，将待吸液吸至球部的四分之一处（注意，勿使溶液流回，以免稀释溶液），如此反
洗涤仪器的一般步骤 1、用水刷洗：使用用于各种形状仪器的毛刷，如试管刷、瓶刷、滴定管刷等。首先用毛刷蘸水刷洗仪器，用水冲去可溶性物质及刷去表面粘附灰尘。 2、用合成洗涤水刷洗：市售的餐具洗涤灵是以非离子表面活性剂为主要成分的中性洗液，可配制成1—2%的水溶液，也可用5%的洗衣粉水溶液，刷洗仪器，它们都有较强的去污能力，必要时可温热或短时间浸泡。 洗涤的仪器倒置时，水流出后，器壁应不挂小水珠。至此再用少许纯水冲仪器三次，洗去自来水带来的杂质，即可使用。 二、各种洗涤液的使用 针对仪器沾污物的性质，采用不同洗涤液能有效地洗净仪器。各种洗涤液见表1。要注意在使用各种性质不同的洗液时，一定要把上一种洗涤液除去后再用另一种，以免相互作用生成的产物更难洗净。 铬酸洗液因毒性较大尽可能不用，近年来多以合成洗涤剂和有机溶剂来除去油污，但有时仍要用到铬酸洗液，故也列入表内。 三、砂芯玻璃滤器的洗涤 1、新的滤器使用前应以热的盐酸或铬酸洗液边抽滤边清洗，再用蒸馏水洗净。 2、针对不同的沉淀物采用适当的洗涤剂先溶解沉淀，或反复用水抽洗沉淀物，再用蒸馏水冲洗干净，在110℃烘箱中烘干，然后保存在无尘的柜内或有盖的容器内。若不然积存的灰尘和沉淀堵塞滤孔很难洗净。表2列出一些洗涤砂芯滤板的洗涤液可供选用。 表1几种常用的洗涤液 洗涤液及其配方使用方法 ①铬酸洗液 研细的重铬酸钾20g溶于40mL水中，慢慢加入360mL浓硫酸。用于去除器壁残留油污，用少量洗液刷洗或浸泡一夜，洗液可重复使用。 ②工业盐酸（浓或1：1）用于洗去碱性物质及大多数无机物残渣。 ③碱性洗液 10%氢氧化钠水溶液或乙醇溶液。水溶液加热（可煮沸）使用，其去油效果较好。注意：煮的时间太长会腐蚀玻璃，碱—乙醇洗液不要加热。
实验室玻璃器皿的洗涤 1. 清洁实施条件及频次 1.1 首次使用前,实验完毕后,贮存超过规定时限后。 2. 清洁地点 2.1 实验室清洗池 3. 清洁用设备、清洁剂及其配制 3.1 清洁工具：毛刷 3.2 洗衣粉水溶液配制方法:合成洗衣粉:水 = 1:200 ;溶解即得,(每4~6天重配一次) 3.3 铬酸洗液: 10gK 2Cr 2 O 4 +30ml热水冷却后+170ml浓H 2 SO4 边搅拌边慢慢加， 冷却装瓶备用(变成墨绿色失效,重配)。 3.4 清洁用水:饮用水、纯化水. 4. 清洁方法 4.1 一般烧杯、三角烧瓶、试剂瓶、表面皿、蒸发皿等玻璃仪器直接用毛刷蘸洗衣粉水溶液进行刷洗，然后用饮用水冲冼数次至无泡沫，在用纯化水荡洗3遍。如上法未洗干净，则加铬酸洗液浸泡4-6小时或过夜，倒出洗液，饮用水冲洗4~6次，纯化水荡洗3遍。 4.2 比色管、量筒、量杯不能用毛刷清洁，先用洗衣粉水溶液侵泡10min以后，饮用水冲洗4次，纯化水荡洗3遍。 4.2 精密的玻璃量器(如滴定管、移液管、吸管、容量瓶等)用铬酸洗液浸泡内壁后，用饮用水冲洗4~6次，再用纯化水冲洗3次以上。 4.3 分光光度计使用的吸收池（比色杯），通常用盐酸—乙醇（1：2）洗涤液浸泡内、外壁后，依次用自来水，纯水冲洗干净。 5.干燥与存放 5.1 玻璃仪器洗净后，倒置于烘箱中烘干;容量器具置于玻璃仪器架上晾干,不能烘干。 5.2 成套仪器用完要立即洗净，晾干，放在专门的盒子里保存。 6．注意事项 6.1 仪器清洗完毕后将其倒置、水流出后器壁不能挂水珠，否则重洗。 6.2 不能用铬酸洗液洗涤含有乙醚的仪器，乙醚遇到洗液易发生爆炸。
實驗室常用玻璃儀器洗滌方法 方法一 1．新购玻璃仪器的清洗 新购玻璃仪器，其表面附有碱质，可先用肥皂水刷洗，再用流水冲净，后浸泡于l～2％盐酸中二十四小時，再用流水冲洗，最后用蒸馏水冲洗2～3次，干燥备用。 2．經常使用的玻璃仪器的清洗：(1)一般玻璃仪器：如试管、烧杯、锥形瓶等，先用自来水洗刷后，用肥皂水或去污粉刷洗，再用自来水反复冲洗，去尽肥皂水或去污粉，最后用蒸馏水淋洗2～3次。干燥备用。(2)容量分析仪器：吸量管、滴定管、容量瓶等，先用自来水冲洗，待晾干后，再用1：1稀硝酸浸泡5小时，然后用自来水充分冲洗，最后用蒸馏水淋洗2～3次，干燥备用。 上述所有玻璃器材洗净(以倒置后器壁不挂水珠为干净的标准)后，根据需要晾干或烘干。 1.晾干：不急用的玻璃仪器洗净后，可沥尽水分。倒置于无尘的干燥处，让其自然风干 2．加热烘干：一般玻璃仪器洗净并沥尽水分后，可置于电烘箱中烘烤，温度控制在105～ 110℃，烘1h左右。但带有刻度的量器不宜在高温下烘烤。有盖(塞)的玻璃仪器，应去盖(塞)后烘烤。 方法二 1.新的玻璃器皿的清洗： （1）.自来水刷洗，除去灰尘。 （2）.烘干、泡盐酸：烤箱中烘干，然后再浸入5％稀盐酸中12小时以除去脏物、铅、砷等物。 （3）.刷洗、烘干：12小时后立即用自来水冲洗，再用洗涤剂刷洗，自来水冲干净后用烤箱烘干。 （4）.泡酸、清洗：用清洁液(重铬酸钾120g：浓硫酸200ml：蒸馏水1000ml)浸泡12小时，然后从酸缸内捞出器皿用自来水冲洗數次，最后蒸馏水冲洗3-5次和用双蒸水过3次。 （5）.烘干：加热烘干：一般玻璃仪器洗净并沥尽水分后，可置于电烘箱中烘烤，温度控制在105～ 110℃，烘1h左右。
常用玻璃仪器的洗涤与干燥 在实验室中,洗涤玻璃仪器不仅是一项必须做的实验前的准备工作,也是一项技术性的工作。仪器洗涤是否符合要求,对实验结果有很大影响。 洁净剂及使用范围 最常用的洁净剂是肥皂,肥皂液(特制商品,洗衣粉,去污粉,洗液,有机溶剂等。 肥皂,肥皂液,洗衣粉,去污粉,用于可以用刷子直接刷洗的仪器,如烧杯,三角瓶,试剂瓶等;洗液多用于不便用于刷子洗刷的仪器,如滴定管,移液管,容量瓶,蒸馏器等特殊形状的仪器,也用于洗涤长久不用的杯皿器具和刷子刷不下的结垢。用洗液洗涤仪器,是利用洗液本身与污物起化学反应的作用,将污物去除。因此需要浸泡一定的机间使其充分作用;有机溶剂是针对污物属于某种类型的油腻性,而借助有机溶剂能溶解油脂的作用洗除之,或借助某些有机溶剂能与水混合而又发挥快的特殊性,冲洗一下带水的仪器将水洗去。如,甲苯,二甲苯,汽油等可以洗油垢,酒精,乙醚,丙酮可以冲洗刚洗净而带水的仪器。洗涤液的制备及使用注意事项 洗涤液简称洗液,根据不同的要求有各种不同的洗液。将较常用的几种介绍如下。 1.强酸氧化剂洗液 强酸氧化剂洗液是用重铬酸钾(K2Cr2O7和浓硫酸(H2SO4配成。K2Cr2O7在酸性溶液中,有很强的氧化能力,对玻璃仪器又极少有侵蚀作用。所以这种洗液在实验室内使用最广泛。 酸性洗液的浓度可从5%~12%。配制方法为:取一定量的工业用K2Cr2O7,先用约1~2倍的水加热溶解,稍冷后,将所需体积的工业用浓H2SO4徐徐加入K2Cr2O7溶液中(千万不能将水或溶液加入H2SO4中,边加边用玻璃棒搅拌,并注意不要溅出,混合均匀,待冷却后,装入洗液瓶备用。新配制的洗液为红褐色,氧化能力很强。当洗液用久后变为黑绿色,即说明洗液无氧化洗涤力。
玻璃器皿的清洗方法 清洁的玻璃器皿是实验得到正确结果的先决条件，因此，玻璃器皿的清洗是实验前的一项重要准备工作。清洗方法根据实验目的、器皿的种类、所盛放的物品、洗涤剂的类别和沾污程度等的不同而有所不同。现分述如下： 1．新玻璃器皿的洗涤方法 新购置的玻璃器皿含游离碱较多，应在酸溶液内先浸泡数小时。酸溶液一般用2％的盐酸或洗涤液（见本小节“ 3”）。浸泡后用自来水冲洗干净。 2．使用过的玻璃器皿的洗涤方法 （1）试管、培养皿、三角烧瓶、烧杯等可用瓶刷或海绵沾上肥皂或洗衣粉或去污粉等洗涤剂刷洗，然后用蒸馏水充分冲洗干净。热的肥皂水去污能力更强，可有效地洗去器皿上的油污。洗衣粉和去污粉较难冲洗干净而常在器壁上附有一层微小粒子，故要用水多次甚至10 次以上充分冲洗，或可用稀盐酸摇洗一次，再用水冲洗，然后倒置于铁丝框内或有空心格子的木架（图I -10）上，在室内晾干。急用时可盛于框内或 搪瓷盘上，放烘箱烘干。 玻璃器皿经洗涤后，若内壁的水是均匀分布成一薄层，表示油垢完全洗净，若挂有水珠，则还需用洗涤液浸泡数小时，然后再用蒸馏水充分冲洗。 装有固体培养基的器皿应先将其刮去，然后洗涤。带菌的器皿在洗涤前先浸在2％煤酚皂溶液（来苏尔）或0．25％新洁尔灭消毒液内24 小时或煮沸半小时，再用上法洗涤。带病原菌的培养物最好先行高压蒸汽灭菌，然后将培养物倒去，再进行洗涤。 盛放一般培养基用的器皿经上法洗涤后，即可使用，若需精确配制化学药品，或做科研用的精确实验，要求自来水冲洗干净后，再用蒸馏水淋洗三次，晾干或烘干后备用。 （2）玻璃吸管吸过血液、血清、糖溶液或染料溶液等的玻璃吸管（包括毛细吸管），使用后应立即投入盛有自来水的量筒或标本瓶内，免得干燥后难以冲洗干净。量筒或标本瓶底部应垫以脱脂棉花，否则吸管投入时容易破损。待实验完毕，再集中冲洗。若吸管顶部塞有棉花，则冲洗前先将吸管尖端与装在水龙头上的橡皮管连接，用水将棉花冲出，然后再装入吸管自动洗涤器内冲洗，没有吸管自动洗涤器的实验室可用冲出棉花的方法多冲洗片刻。必要时再用蒸馏水淋洗。洗净后，放搪瓷盘中晾干，若要加速干燥，可放烘箱内烘干。 吸过含有微生物培养物的吸管亦应立即投入盛有2％煤酚皂溶液或0．25％新洁尔灭消毒液的量筒或标本瓶内，24 小时后方可取出冲洗。 吸管的内壁如果有油垢，同样应先在洗涤液内浸泡数小时，然后再行冲洗。 （3）载玻片与盖玻片用过的载玻片与盖玻片如滴有香柏油， 要先用皱纹纸擦去或浸在二甲苯内摇晃几次， 使油垢溶解，再在肥皂水中煮沸5—10分钟，用软布或脱脂棉花擦试，立即用自来水冲洗，然后在稀洗涤液中浸泡0．5—2 小时，自来水冲去洗涤液，最后用蒸馏水换洗数次，待干后浸于95％酒精中保存备用。 使用时在火焰上烧去酒精。用此法洗涤和保存的载玻片和盖玻片清洁透亮，没有水珠。 检查过活菌的载玻片或盖玻片应先在2％煤酚皂溶液或0．25％新洁尔灭溶液中浸泡24 小时，然后按 上法洗涤与保存。 3．洗涤液的配制与使用 （1 ）洗涤液的配制洗涤液分浓溶液与稀溶液两种，配方如下： 浓溶液重铬酸钠或重铬酸钾（工业用）50g 自来水150ml 浓硫酸（工业用）800ml 稀溶液重铬酸钠或重铬酸钾（工业用）50g 自来水850ml
. 实验室玻璃仪器的清洗规定 1.目的 正确清洗实验、分析用玻璃仪器，做好产品的QC/QA工作。 2.适用范围 适用于所有的实验、分析用玻璃仪器。 3.清洗 3.1一般的玻璃仪器（如烧瓶、烧杯等）：先用自来水冲洗一下，然后用肥皂、洗衣粉用毛刷刷洗，再用自来水清洗，最后用纯化水冲洗3次（应顺壁冲洗并充分震荡，以提高冲洗效果）。 3.2计量玻璃仪器（如滴定管、移液管、量瓶、量杯等）：也可用肥皂、洗衣粉液洗涤，但不能用毛刷刷洗。 3.3一般一试剂瓶、三角瓶：先用自来水冲洗一下，然后放进盛有清洁水的超声波中，加入溶化的洗衣粉（或洗衣液），超声清洗5分钟左右，水温保持在25-45度之间。再用自来水清洗，最后用纯化水冲洗3次（应顺壁冲洗并充分震荡，以提高冲洗效果，清洗后，可放在仪器架上在无尘处自然干燥。 3.3精密或难洗的玻璃仪器（滴定管、移液管、量瓶、比色管、玻璃垂熔漏斗等）：先用自来水冲洗后，沥干，再用铬酸清洁液处理一段时间（一般放置过夜），然后用自来水清洗，最后用纯化水冲洗3次。 3.4洗刷仪器时，应首先将手用肥皂洗净，免得手上的油污物沾附在仪器壁上，增加洗刷的困难。 3.5玻璃仪器清洗至仪器倒置时，内壁不挂水珠。 4.玻璃仪器的干燥 4.1晾干：不急等用的仪器，可放在仪器架上在无尘处自然干燥。 4.2急等用的一般玻璃仪器如烧杯、烧瓶可在温度60～70℃下干燥。 4.3计量玻璃仪器应自然沥干，不能在烘箱中烘烤；若急需用，可用分析纯无水乙醇漂洗后凉干使用。 5.玻璃仪器的保管 清洁的玻璃仪器要分门别类存放在试验柜中，要放置稳妥，高的、大的仪器放在里面。需长期保存的磨口仪器要在塞间垫一张纸片，以免日久粘住。 精选范本
玻璃器皿的清洁方法 清洁玻璃器皿的方法有很多，在实际工作当中应根据实验的要求、污物性质和污染的程度来选择合适的清洁剂和情节方法。 普通粘附在仪器上的污物，有可溶性物质，也有不溶性物质和尘土，还有油污和有机物质。针对各种情况，可以分别采用下列洗涤方法。 一、能用毛刷刷洗的玻璃器皿的清洗 能用毛刷刷洗的玻璃器皿有试管、烧杯、试剂瓶、锥形瓶、量筒等广口玻璃仪器，其清洗方法如下： （1）用水洗 根据要洗涤的玻璃仪器的性状选择合适的毛刷，如试管刷、烧杯刷、平刷、滴定管刷等。用毛刷蘸水洗刷，可使溶性物质溶去，也可使附着在玻璃仪器上的尘土和不溶物脱落下来，但往往洗不去油污和有机物质。 （2）用洗涤剂洗 可以用毛刷蘸取洗涤剂（如洗衣粉），仔细刷洗玻璃仪器内外壁（特别是内壁）。为了提高洗涤效率，可将洗涤剂配成1％～5％的水溶液，加温浸泡要洗的玻璃仪器。片刻后，再用毛刷反复刷洗。 对于污物粘附较紧的玻璃仪器，可在上述洗涤液中加入适量去污粉。刷洗后用自
来水冲洗干净。若仍有油污，可用铬酸洗液来浸泡，使用时先将要洗涤玻璃器皿内的水液倒尽，再将铬酸洗液倒入欲洗涤的玻璃器皿中浸泡数分钟至数十分钟，如将洗液预先温热，则收效更好。刷洗后的玻璃器皿和铬酸洗液浸泡后的玻璃器皿用自来水反复冲洗，彻底冲洗干净洗涤剂（如果洗涤剂没有洗净，装水后弯月面变平），再用蒸馏水或去离子水漱洗2～3次。将漱洗后的玻璃器皿置于器具架上自然沥干，或置100～130℃的烤箱中烘干。 二、不能用毛刷刷洗的玻璃器皿的清洗 （1）吸量管、移液管、容量瓶等小口玻璃量器，使用后应立即浸泡于凉水中，勿使沾污物质干涸。工作完毕后用流水冲洗，初步除去附着的试剂、蛋白质等物质。晾干后浸泡 于铬酸洗液中4～6h或过夜，然后用自来水充分冲洗干净，再用蒸馏水或去离子水漱洗2 -3次，置于量器架上自然干燥。急用时可置烤箱中在80℃以下烘干，或于量器中加入少 量无水乙醇或甲醇、乙醚之类溶剂，慢慢转动使其布满整个容器内壁，然后倒出，再吹 干或加负压抽干，即可达到快速干燥的目的。 （2）分光光度计用的比色皿，用毕应用自来水反复冲洗干净。如洗不干净时可
1 清洗 在组织细胞培养中，体外细胞对任何有害物质都非常敏感,均能影响培养细胞的生长 微生物产品附带杂物 上次细胞残留物 非营养成分的化学物质 需要清洗的培养用品 玻璃器皿的清洗 胶塞的清洗 塑料制品的清洗 玻璃器皿的清洗 包括浸泡、刷洗、浸酸和冲洗四个步骤 清洗后的玻璃器皿 干净透明无油迹 不能残留任何物质 浸泡：初次使用和培养使用后的玻璃器皿均需先用清水浸泡，以使附着物软化 或被溶掉 新的初次使用的玻璃器皿，在生产及运输过程中，玻璃表面带有大量的干固的灰尘，且玻璃表面常呈碱性及带有一些对细胞有害的物质等 先用自来水简单刷洗，然后用5％稀盐酸液浸泡过夜，以中和其中的碱性物质 再次使用的玻璃器皿则常附有大量刚使用过的蛋白质，干固后不易洗掉 用后立即浸入水中，要求完全浸入，不能留有气泡或浮在液面上 刷洗： 用毛刷沾洗涤剂刷洗，以除去器皿表面附着较牢的杂质 刷洗要适度，过度会损害器皿表面光泽度 浸酸：玻璃器皿浸泡到清洁液中 清洁液对玻璃器皿无腐蚀作用，而其强氧化作用可除掉刷洗不掉的微量杂质 浸泡时器皿要充满清洁液，勿留气泡或器皿露出清洁液面 浸泡时间：一般为过夜，不应少于6 小时 清洁液常用三种：重铬酸钾（g）浓硫酸（ml）蒸馏水（ml） 强清洁液63∶1000∶200 次强清洗液120∶ 200∶1000 弱清洁液100∶ 100∶1000 配制时应注意安全，须穿戴耐酸手套和围裙，并要保护好面部及身体裸露部分配制过程中可使重铬酸钾溶于水中，然后慢慢加浓硫酸。并不停的用玻璃棒搅拌，使产生的热量挥发，配制溶液应选择塑料制品。配成后清洁液一般为棕红色 冲洗在使用后，刷洗及浸泡后都必须用水充分冲洗。使之尽量不留污染或清洁液的残迹