第29卷第2期2010年3月 食品与生物技术学报Journal of Food Science and Biotechnology
Vol.29 No.2Mar. 2010 文章编号:167321689(2010)022*******
收稿日期:2009204213
基金项目:基金项目:教育部长江学者和创新团队发展计划项目(IR T0540)。
3通信作者:谢明勇(1957-),男,江西宜春人,博士,教授,博士生导师,主要从事天然产物研究与开发。Email :
myxie @https://www.doczj.com/doc/2317868837.html,
山楂提取物的抗氧化活性研究
黄优生1,2, 谢明勇31, 聂少平1, 李昌1
(1.食品科学与技术国家重点实验室,南昌大学,江西南昌330047;2.江西省分析测试研究所,
江西南昌330029)
摘 要:采用不同提取方法提取山楂活性成分,分别用DPP H 法、邻苯三酚自氧化法测定了不同提取物的抗氧化作用。结果表明,不同提取物均有抗氧化活性,提取物量与抗氧化活性呈正相关,不同提取物抗氧化活性强弱为:醇提物>超临界CO 2提取物>水提物。山楂提取物中乙酸乙酯萃取部分抗氧化活性最强。
关键词:山楂;抗氧化;DPP H ;邻苯三酚自氧化中图分类号:R 28412文献标识码:A
Anti 2Oxidative Activity of Extracts from H a w thorn
HUAN G Y ou 2sheng 1,2, XIE Ming 2yong 31, N IE Shao 2ping 1, L I Chang 1
(1.State Key Laboratory of Food Science and Technology ,Nanchang University ,Nanchang 330047,China ;2.Analytical and Testing Research Institute of Jiangxi Province ,Nanchang 330029,China )
Abstract :The anti 2oxidative effect of hawt horn ext ract s origin f rom different process were st udy by using DPP H and pyrogallol autooxidatio n met hods in t his manuscript.The result s showed t hat all of t hem had anti 2oxidative activity ,and exhibit a positive correlation wit h t he concent ration and t he anti 2oxidative activity of t he ext ract s.Amo ng of t hem ,t he order of anti 2oxidative effect was listed as follows :obtained from et hanol bat h >SFE 2CO 2>water.The et hyl acetate part of hawt horn ext ract s demonst rated t he st rongest anti 2oxidative activity.K ey w ords :hawt horn ,antioxidation ,DPP H ,pyrogallol autooxidation
自由基是指带有未成对电子的分子、原子或离子,其中与人体关系最为密切的是氧自由基,如超
氧自由基(O 22?)、羟基自由基(?O H )、脂自由基
(ROO ?)等,其中以O 22?形成最早,?O H 作用最强[1]。衰老、癌症及炎症等疾病与体内脂质过氧化和自由基有直接关系。因此,有关抗氧化剂清除自由基的研究得到普遍关注。抗氧化剂分为合成抗
氧化剂和天然抗氧化剂,目前,广泛使用的合成抗
氧化剂主要有B H T (2,62二叔丁基对甲酚)、B HA (叔丁基242羟基茴香醚)和TB HQ (2,4,52三羟基苯基丁酮)等,然而,动物实验表明它们有一定的毒性[223],因此天然抗氧化剂取代合成类抗氧化剂是一种必然的趋势,近年来,从天然动植物,尤其是从具有悠久历史的中草药中寻找高效的自由基清除剂,
引起国内外学者的极大兴趣[425]。
现代药理研究表明,山楂具有抗动脉粥样硬化,降低血压,抗癌、防癌等作用[627]。也有研究表明,山楂具有抗氧化作用,如赵二芳等[8]比较了山楂提取物、VC和槲皮素的抗氧化能力,结果表明,山楂提取物具有较强的抗氧化能力,抗氧化能力VC>槲皮素>山楂提取物。回瑞华等[9]用流动注射化学发光法测定了山楂果的抗氧化性能,发现山楂果具有较强的抗氧化性能,并且抗氧化性能随着浓度的增加而增加。
本文采用不同提取方法提取山楂活性成分,分别用DPP H法、邻苯三酚自氧化法测定了不同提取物的抗氧化作用,并与合成抗氧化剂B H T和抗坏血酸清除自由基能力进行比较,以此来评价其抗氧化能力,对于寻找新型高效的抗氧化剂及进一步开发利用山楂资源有一定意义。
1 材料与仪器
1.1 材料和试剂
山楂:山东莱芜产大金星品种;二苯基苦味酰基苯肼(DPP H);邻苯三酚;B H T乙醇溶液:Tris-HCl缓冲液;抗坏血酸、B H T均为食品级;其它试剂均为分析纯。
1.2 主要仪器和设备
TU21900双光束紫外可见分光光度计:北京普析通用仪器有限公司产品,Spe2ed SFE22超临界萃取仪:Applied separation,Inc.产品;FA1104电子天平:上海精天电子仪器厂产品;电子恒温不锈钢水浴锅:上海宏兴机械仪器实业制造公司产品;旋转蒸发仪:上海申生科技有限公司产品;D GG2 9140B电热恒温鼓风干燥箱:上海森信实验仪器有限公司产品。
2 实验方法
2.1 不同提取方法提取山楂活性成分
21111 乙醇回流提取法 准确称取干燥山楂20100g,于70℃按固液比1∶20加入体积分数70%乙醇回流提取2h,重复1次,合并提取液,滤液真空浓缩至浸膏,40℃真空干燥,称重,体积分数95%乙醇溶解,定容至一定浓度,备用。
21112 超临界CO2萃取法 选取100mL萃取釜,准确称取干燥山楂20100g,放入萃取釜,于3616 Mpa、4718℃下萃取4次,每次按1∶1加入体积分数95%乙醇作为夹带剂萃取30min,收集萃取液,真空干燥,称重,体积分数95%乙醇溶解,定容至一定浓度,备用。
21113 水提取法 准确称取干燥山楂20100g,按固液比1∶20加水提取2h,重复1次,合并提取液,滤液真空浓缩至浸膏,40℃真空干燥,称重,水溶解,定容至一定浓度,备用。
21114 不同极性部分的制备 称取干燥山楂适量,按21111和21112方法提取,提取液经真空浓缩至小体积,依次用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取,得到乙酸乙脂、正丁醇和萃余层三部分,各部分浓缩、干燥、称重,定容至一定浓度,备用。
212 山楂活性成分的抗氧化活性试验
21211 山楂提取物对DPP H?自由基的清除作用试验 将1mL不同浓度的样品溶液加入2mL011 mg/mL DPP H溶液中,用溶剂定容至5mL,迅速混匀,30min后于517nm下测定其吸光度A。根据下列公式计算清除率[10]:
清除率=[1-(A-A2)/A0]×100%
A0为未加样的DPP H吸光度;A为样品与DPP H反应后的吸光度;A2为样品的空白的吸光度。
21212 半清除率的测定 半清除率指清除率为50%时所需样品的浓度,根据不同浓度样品对有机自由基DPP H的清除率作曲线求出。所需浓度越低,表明半清除率越高。
21213 山楂提取物抑制邻苯三酚自氧化作用试验 在10mL容量瓶中加入5mL Tris2HCl缓冲液,一定量的待测液或B H T溶液,于25℃恒温水浴中放置20min后,加入011mL的25℃预热的邻苯三酚溶液,迅速混匀,在5min内,每隔30s于420 nm处测定溶液的吸光度(以Tris2HCl缓冲液为空白对照)。计算吸光度随时间的变化率,并与空白溶液比较,便可得出被测物抑制O22?作用的能力[11-12]。清除率计算式:
清除率=[(F0-F x)/F0]×100%
式中,F0和F x分别表示空白溶液和被测液的吸光度随时间的变化率。
3 结果与讨论
311 山楂提取物对DPPH?自由基的清除作用对自由基的清除能力以清除率表示,清除率越高,提取物抗氧化能力越强。按21211方法测定了不同提取方法所得山楂提取物、VC及B H T对DP2 P H?自由基的清除能力,结果如图1所示。
从图1可以看出,3种不同提取方法所得山楂提取物都具有一定的清除自由基活性的能力,且随
091食 品 与 生 物 技 术 学 报 第29卷
图1 不同提取方法所得山楂提取物对DPPH 自由基
的清除作用
Fig.1 Scavenging effect on DPPH radicals of ha w thorn
extracts origin from different process
着提取物浓度增加,清除率逐渐升高,当浓度增加到一定值后,清除率趋于平缓。在一定浓度范围内,醇提取物的抗氧化能力最强,超临界CO 2提取物次之,水提物的清除能力最弱。其原因可能是由于不同提取方法所得粗提物成分不同,所提取的抗氧化物质的总量和种类也不同,而且其中各物质的协同作用也不一致,导致了不同提取方法所得山楂提取物的抗氧化能力不同。对于DPP H ?自由基的清除率,当山楂醇提物和SFE 提取物浓度达到2mg/mL 时已超过4mg/mL B H T 的抗氧化效果,相当于015mg/mL 的抗坏血酸的抗氧化效果,表明山楂醇提物和SFE 提取物均具有较强的抗氧化能力。
半清除率浓度是自由基清除率在50%时的浓度,以EC 50表示,常用来比较清除DPP H 自由基的能力大小(图2)。图2从图中可见,对自由基清除能力以醇提物最强(EC 50=0139mg/mL ),超临界CO 2提取物略低,水提物最弱
。
图2 不同山楂提取物的EC 50比较
Fig.2 Comparison of EC 50of ha w thorn extracts origin
from different process
312 不同极性部分对DPPH ?自由基的清除作用
按21114方法将回流提取和超临界CO 2提取
物分成极性不同的3个部分:乙酸乙酯萃取部分、
正丁醇萃取部分及萃余物部分,各部分按方法21211测定,结果见图3、图4。
由图3、4可知,在乙酸乙酯、正丁醇和萃余物三个萃取部分中,乙酸乙酯萃取部分清除DPP H ?自由基能力最强。该极性部分含有黄酮类化合物、绿原酸和原花青素等[13],这类化合物具有较强的清除自由基和抗氧化活性,因此,山楂提取物中乙酸乙酯萃取部分抗氧化活性最强
。
图3 醇提物各萃取部分清除DPPH 自由基的作用
Fig.3 Scavenging effect of eth anol extracts fractions on
DPPH
radicals
图4 超临界CO 2提取物各萃取部分清除DPPH 自由
基的作用
Fig.4 Scavenging effect of different fractions of SFE 2
CO 2extracts on DPPH radicals
313 山楂提取物抑制邻苯三酚自氧化的作用
邻苯三酚(PR )在碱性条件下会发生自氧化,生
成有色中间产物和超氧阴离子自由基(O 22?
),O 22?自由基对自氧化有催化作用,提取物对邻苯三酚自氧化的抑制率可作为它对O 22?自由基的清除率的表征,据自氧化速率变化来计算提取物对O 22?自由基的清除率。
由图5可知,提取物能明显降低邻苯三酚自氧化的速率,随着提取物浓度增加,抑制率逐渐增高,但当浓度增加到一定值后,抑制率呈平缓趋势。
1
91 第2期黄优生等:山楂提取物的抗氧化活性研究
图5 不同山楂提取物抑制PR 自氧化的作用
Fig.5 Inhibition for PR of different ha w thorn extracts
如图5所示,不同提取方法提取物对O 22?自由基的清除能力不同,醇提物和SFE 提取物对O 22?自由基的清除能力与B H T 相当,其中醇提物略高于超临界CO 2提取物,水提物较低。由此可见,山楂醇提物和超临界CO 2提取物对O 22?自由
基也有较强的清除能力。
4 结 语
综上所述,山楂不同提取物抗氧化能力不同,
醇提物最高,超临界CO 2提取物次之,水提物较低。其原因可能是由于不同提取物成分不同,所提取的抗氧化物质的总量和种类也不同,而且其中各物质的协同作用也不一致,导致了不同方法提取的山楂提取物的抗氧化能力不同。其机理还有待进一步深入研究,这也是今后研究的目标。
山楂具有药食两用的特点,将山楂提取物添加至食品中即可以增加食品的营养成分,又可起到抗氧化的功效,从这一点可以看到山楂产品的开发具有广阔的应用前景。
参考文献(References ):
[1]王建英,任引哲,王迎新.氧自由基与人体健康[J ].化学世界,2006,(1):61-63.
WAN G Jian 2ying ,Ren yin 2zhe ,Wang ying 2xin.Oxygen 2derived f ree radical and human health[J ].Chemical World,2006,(1):61-63.(in Chinese )
[2]Jayalakshmi C P ,Sharma J D.Effect of butylated hydroxyanisole (B HA )and butylated hydroxytoluene (B H T )on rat e 2
rythrocytes[J ].E nvironmental R esearch ,1986,41(1):235-238.[3]Sang 2Hee Jeong ,Byung 2Y ong Kim ,Hwan 2G oo Kang ,et al.Effects of butylated hydroxyanisole on the development and
functions of reproductive system in rats[J ].Toxicology ,2005,208:49-62.
[4]SUN Jian ,YAO Jinyan ,HUAN G Shaoxi ,et al.Antioxidant activity of polyphenol and anthocyanin extracts f rom f ruits
of Kadsura coccinea (Lem.) A.C.Smith[J ].Food Chemistry ,2009,117(2):276-281.[5]许钢.红薯中黄酮提取及抗氧化研究[J ].食品与生物技术学报,2007,26(4):22-27.
XU G ang.Studies on the extracting and antioxidant activities of flavonoids in sweet potatoes [J ].Journal of Food Science and Biotechnology ,2007,26(4):22-27(in Chinese ).
[6]Ernesto Dalli ,Javier Milara ,J ulio Cortijo ,et al.Hawthorn extract inhibits human isolated neutrophil f unctions [J ].
Pharm acological R esearch ,2008,57(6):445-450.
[7]Vierling W ,Brand N ,G aedcke F ,et al.Investigation of the pharmaceutical and pharmacological equivalence of different
Hawthorn extracts[J ].Phytomedicine ,2003,10:8-16.
[8]赵二劳,王丽娟,李满秀.山楂提取物抗氧化能力的研究[J ].食品研究与开发,2008,29(11):19-21.
ZHAO Er 2lao ;WAN G Li 2juan ;L I Man 2xiu.Study on antioxidant activity of extracts of hawthorn [J ].Food R esearch and Development ,2008,29(11):19-21.(in Chinese )
[9]回瑞华,侯冬岩,刘晓媛等.山楂果中黄酮化合物的光谱分析及抗氧化性能测定[J ].食品科学,2006,27(1):199-202.HU I Rui 2hua ;HOU Dong 2yan ;L IU Xiao 2yuan ,et al.Determination of flavonoids and the antioxidation effect in C.pin 2natifida Bunge[J ].Food Science ,2006,27(1):199-202.(in Chinese )
[10]陈奕,谢明勇,弓晓峰.黑灵芝提取物清除DPP H 自由基的作用[J ].天然产物研究与开发,2006,18:917-921.
CH EN Y i ,XIE Ming 2yong ,GON G Xiao 2feng.DPP H radical scavenging effect of G anoderma atrum[J ].N atural Product R esearch and Development ,2006,18:917-921.(in Chinese )[11]L I Chang ,XIE Ming 2yong ,N IE Shao 2ping ,et al.Study on f ree radical scavenging in vitro and antioxidative activity of
Extracts f rom Cook Noni (Morinda citrifolia )J uice[J ].N at Prod R es ,2006,18:373-377.
[12]储鸿,程珊,倪忠斌等.白芷活性提取物清除自由基与抗氧化作用[J ].食品与生物技术学报,2009,28(2):201-205.
HON G Chu ,SHAN Cheng ,NI Zhong 2bin ,et al.Study on scavenging f ree radical and antioxidation effects of extracts from Angelica dahuica[J ].Journal of Food Science and Biotechnology ,2009,28(2):201-205.(in Chinese )
[13]Zhang Ze 2sheng ,Chang Qi ,Zhu Min ,et al.Characterization of antioxidants present in hawthorn f ruits[J ].Journal of
Nutritional Biochemistry.2001,12:144-152.
(责任编辑:杨萌)
291食 品 与 生 物 技 术 学 报 第29卷
A Abrine 相思豆碱 O-Acetyl-3,6-di-O-β-D-xylopy-rano- astragaloside O-乙烯3,6-双氧-β-D- 吡喃木糖基绵毛黄芪甙 Acetylastragaloside 乙酰黄芪甙 N-Acetyl-D-Glucosamine N-乙酰氨基葡萄糖糖 6''-acetylhyperoside 6''-乙酰氧基金丝桃甙 Acetylshikonin 乙酰紫草素 14-Acetyltalatisamine Achyranthan 牛膝多糖 Acobreting D 短距乌头碱丁 Acobreting E 短距乌头碱戊 Aconine 乌头原碱 Aconitine 乌头碱 Aconosine 爱康诺辛 Actein 黄肉楠碱 Actinodephnine Acuminatin Acuminatoside Adenanthin 腺华素 Adenine 腺嘌呤 Adenoside 腺苷 Adynerin 欧夹竹桃甙乙 Aescin 七叶皂甙 Aesculetin 七叶素（七叶内脂，秦皮乙素）马栗树皮素 Aesculin 七叶甙马栗树皮甙 Agaricic acid 落叶松覃酸 Agaricus blazei murrill P.E 姬松茸提取物 Agrimophol 仙鹤草酚 Ajmalicine(δ-Yohimbine) 阿吗碱,δ-育亨宾碱,阿吗里新 Ajmaline 阿马林 Akebia saponin D 木通皂甙D Alantolactone 土木香内酯 Albopilosin A Aleuritic acid 苏式-紫胶桐酸 Alfalfa P.E 紫苜蓿提取物 Alizarin 茜素 Alkaloids 罗勒生物碱 Allantoin 尿囊素 Allasecurinine 别一叶秋碱 Allantolin Allicin 大蒜素 α-Allocryptopine α-别隐品碱 Alloisoimperatorin 别异欧前胡素 Alloxanthoxyletin Allose 阿罗糖 Aloeemodin 芦荟大黄素 Aloe-saponol Aloin 芦荟甙 Aloesin 芦荟苦素 Aloperin 苦豆碱 Alpinetin 山姜素
第37卷 第11期2009年11月 西北农林科技大学学报(自然科学版) Journal of Northwest A&F University(Nat.Sci.Ed.) Vol.37No.11 Nov.2009 ABTS?+法测定葡萄酒抗氧化活性的研究3 李 华,李 勇,吴 莹,王 华 (西北农林科技大学葡萄酒学院,陕西省葡萄与葡萄酒工程技术研究中心,陕西杨凌712100) [摘 要] 【目的】确定AB TS?+法测定葡萄酒抗氧化活性的最佳反应时间和葡萄酒的最佳稀释倍数。【方法】应用福林肖卡比色法(FC)测定36种葡萄酒样品的总酚含量(Total phenol index,TPI),从中选出9种总酚含量具代表性的葡萄酒样品,并采用AB TS?+法测定反应不同时间和稀释不同倍数葡萄酒样品的抗氧化活性。【结果】AB TS?+法测定葡萄酒抗氧化活性的最佳反应时间为2～5min;红葡萄酒的最佳稀释倍数为0.2∶10～0.4∶10,桃红葡萄酒的最佳稀释倍数为1∶10～4∶10,白葡萄酒的最佳稀释倍数为3∶10～7∶10。【结论】得到了AB TS?+法测定葡萄酒抗氧化活性的最佳反应时间和葡萄酒的最佳稀释倍数,且无需事先测定总酚含量,简化了试验步骤。 [关键词] 葡萄酒;抗氧化活性;AB TS?+法;反应时间;稀释倍数 [中图分类号] TS262.6[文献标识码] A[文章编号] 167129387(2009)1120090208 Research of antioxidant activity of wine s determined by the ABTS?+method L I Hua,L I Y ong,WU Y ing,WAN G Hua (College of Enolog y,Engineering Research Center f or V iti2V i nicult ure,N ort hwest A&F universit y,Yangli ng,S haanx i712100,China) Abstract:【Objective】The p resent st udy aimed to confirm t he best reaction time and wine dilution of t he AB TS?+met hod.【Met hod】The Folin2Ciocalteu colorimetry was used to measure t he total p henol in2 dex of36kinds of wines and t hen9kinds of rep resentative samples were selected f rom t hem,AB TS?+ met hod was used to measure t he antioxidant activities of wines wit h different reaction time and different di2 lutio ns,and was analyzed t he experiment result.【Result】The result s showed t hat t he best reaction time of t he AB TS?+met hod is2to5minutes,t he best dilution range,0.2∶10to0.4∶10for red wines,1∶10to 4∶10for ro se wines,and3∶10to7∶10for white wines.【Conclusion】The st udy has obtained t he best re2 action time and wine dilution to measure antioxident activity of wines by AB TS?+met hod,and t here is no need to measure total p henol content beforehand,so t he test p rocedure is simplified. K ey w ords:wine;antioxidant activity;AB TS?+met hod;reaction time;dilution 经过研究和分析发现,葡萄酒中含有大量的多酚类物质,如白藜芦醇、儿茶酚、表儿茶精、槲皮酮和芸香苷等,这些多酚类物质具有抗氧化活性,除了抑制低密度脂蛋白的氧化、预防心血管疾病以外,还有抗癌、抗炎症和抗血小板凝聚等功能[1],但不同的品种、气候、地理条件和工艺措施,导致葡萄酒中酚类物质在数量和种类上都有明显不同[223]。因此,如何评价葡萄酒中酚类物质的抗氧化活性很有现实意义。 AB TS?+在414,645,734和815nm处均有特征吸收[4]。Miller等[5]在1993年首次介绍了用AB TS?+法来评价一些化合物的抗氧化活性,即根据待测化合物清除AB TS?+引起的吸光度变化来评价其抗氧化活性。此后,AB TS?+法成为一种被广泛采用的抗氧化活性测定方法,用于饮料和食 3[收稿日期] 2009203206 [基金项目] 陕西省“13115”科技创新工程重大科技专项“陕西省葡萄与葡萄酒产业关键研究”(2007ZD KG209) [作者简介] 李 华(1959―),男,重庆市梁平人,教授,博士生导师,主要从事葡萄与葡萄酒研究。 E2mail:lihuawine@https://www.doczj.com/doc/2317868837.html,
山楂，也称红果，蔷薇科山楂属植物，是起源于我国的特产果树，有3000多年的栽培历史。 山楂性酸、甘、味温，归脾、胃、肝经，全国各地均有栽培，为药食同源植物，具有消食化积、活血化瘀的功效。主产于山东、河南、河北等地者，习称“北山楂”，主产于浙江、江苏、安徽、湖北等者地，习称“南山楂”。 山楂片含多种维生素、山楂酸、酒石酸、柠檬酸、苹果酸等，还含有黄酮类、内酯、糖类、 蛋白质、脂肪和钙、磷、铁等矿物质，所含的解脂酶能促进脂肪类食物的消化，促进胃液分泌和 增加胃内酶素等功能。中医认为，山楂具有消积化滞、收敛止痢、活血化淤等功效，主治饮食积滞、胸膈脾满、疝气血淤闭经等症。山楂中含有三萜类及黄酮类等药物成分，具有显著的扩张血管及降压作用，有增强心肌、抗心律不齐、调节血脂及胆固醇含量的功能。适应范围：一般人皆可食用。儿童、老年人、消化不良尤其适合食用；伤风感冒、消化不良、食欲不振、儿童软骨缺钙症、儿童缺铁性贫血者可多食山楂片。 黄酮类物质 山楂的主要成分是黄酮类物质，对心血管系统有明显的药理作用。目前，从山楂中分离 得到60余种黄酮类化合物，其主要苷元为：芹菜素( Apigenin )、山奈酚类(Kaempferol )、木 犀草素(Luteolin )、牡荆素(Vitexin )、槲皮素类(Quercetin )及二氢黄酮类(Bi- hydroflav ono ids 、等。 有机酸类 草酸(Oxalic acid 、、苹果酸(Malic acid 、、枸橼酸(citricacid) 、柠檬酸(Citric acid ) 及其甲酯、绿原酸(Chlorogenic acid、、酒石酸(Tartaric acid、、棕榈酸(Palmitic acid )、硬脂酸(Stearic acid、、油酸(Oleic acid、、亚油酸(Linoleic acid、、亚麻酸(Linolenic acid、、琥珀酸(Succinic acid 、等。 三萜类化合物 三萜类物质有强心、增加冠脉血流、改善血流循环等重要作用。包含有山楂酸(Masli nic acid . I)、科罗索酸(Corosolic acid , II)、齐墩果酸(oleanlic acid , in)、熊果酸(ursolic acid , 1V) 山楂中原花青素 原花青素有较强的清除自由基和抑制脂质过氧化的能力，且对DNA损伤有保护作用。
猴头菌提取物抗氧化活性研究 分别采用还原力测定法、Fenton法、2,2-二苯基-1-苦肼基（DPPH）分析法和改良邻苯三酚自氧化法，对猴头菌子实体水提物和醇提物的总还原力，清 除?OH、DPPH?和O - 2?自由基的能力进行测定。结果表明：醇提物还原力 较强，且还原力大小与浓度成正比；猴头菌水提物和醇提物均有清除?OH、DPPH? 和O - 2?自由基的能力，且水提物的效果比醇提物好；水提物和醇提物对?OH、DPPH?和O - 2?的清除能力依次为DPPH?、?OH和O - 2?，并且在一定浓 度范围内，清除率与浓度成正比。 猴头菌；清除自由基；抗氧化活性 人体持续暴露在活性氧与促氧化剂中时，很容易引起机体组织产生氧化应激，导致代谢性功能紊乱以及一系列的慢性疾病［1］。食用一些富含具有抗氧化活性物质的功能性食品可以减轻机体组织氧化应激或预防损伤。一些合成抗氧化剂与天然抗氧化剂相比，尽管具有很强的清除自由基活性，但同时也具有强的毒副作用，因此人们倾向于从自然界中寻求更安全的抗氧化剂。LEE等［2］从桦褐孔菌（Inonotus obliquus）中分离到一些具有较强活性的抗氧化成分（多酚类化合物）。MAU等［3］研究表明灵芝(Ganoderma lucidum)是很好的天然抗氧化剂。同为食用菌的猴头菌(Hericium erinaceus)是著名的药膳两用真菌，具有抗溃疡、抗炎症、抗肿瘤、抗衰老、抗疲劳、提高机体耐缺氧能力、增加心肌血液输出量、加速机体血液循环、降血糖、保肝护肝和降血脂、降血压等作用［4］。笔者通过对猴头菌子实体的水提物和醇提物总还原力、清除?OH、2,2-二苯基-1-苦 肼基自由基（DPPH?）及O - 2?自由基的研究，旨在为其在医药保健方面的 利用提供理论依据。 1 材料与方法 1.1材料 猴头菌（H. erinaceus)子实体由上海市农业科学院食用菌研究所提供。 1.2主要试剂与仪器 柠檬酸、Na 2HPO 4、NaH 2PO 4、六氰合铁酸钾（铁氰化钾）、醋酸、三氯化铁、维生素C、FeSO 4?7H 2O、30％H 2O 2溶液、水杨酸、无水乙醇、95％乙醇等（国药集团化学试剂有限公司），DPPH（美国Sigma公司），实验用水（娃哈哈纯净水）；infinite M200 PRO酶标仪（瑞士TECAN公司）；UVmini-1240分光光度计（日本SHIMADZU 公司)。 1.3提取物的制备 1.3.1水提物 干燥猴头菌子实体，用粉碎机粉碎，称取50 g粉末，加1 L蒸馏水超声20 min，过滤，滤液减压浓缩，反复3次，合并浓缩液，转至蒸发皿中，60 ℃水浴蒸干，备用。 1.3.2醇提物 同样称取50 g猴头菌子实体粉末，加1 L 95％乙醇超声20 min，过滤，其
植物提取物抗氧化原理及成分研究 抗氧化是抗氧化自由基的简称。因为人体常与外界接触，平时的呼吸、外界污染、放射线照射等因素会导致人体内产生自由基，过量的自由基会导致人体癌症、衰老和其它疾病，而抗氧化自由基（以下简称“抗氧化”）可以有效克服这些危害。因此，抗氧化已成为保健品和化妆品市场的主要研究课题之一。 本文从多种类植物提取物抗氧化成分及其原理出发，阐述了各界近年来利用植物对抗自由基的研究进展。 一、植物提取物抗氧化原理 不同的植物提取的有效成分不尽相同，同样，抗氧化作用的植物提取物也有很多不同成分，其作用机理也有所区别，西安源森生物从以下几方面进行了总结阐述： （一）作用于与自由基有关的酶 与自由基有关的酶类分为氧化酶与抗氧化酶两类，植物提取物的抗氧化作用体现在抑制相关氧化酶的活性和增强抗氧化酶活性两方面。 1. 抑制氧化酶的活性 生物体内许多氧化酶，如P-450 酶、黄嘌呤氧化酶(XOD)、脂氧化酶、髓过氧化酶(MPO)和环氧酶等，与自由基的生成有关，能诱发大量的自由基。 另外，诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)在缺血再灌注时活性增加，产生大量NO而导致氧化损伤。 研究表明，许多植物提取物对上述各种氧化酶有抑制作用，从源头抑制自由基生成。黄酮类化合物中的槲皮素、姜黄素在缺血再灌注损伤时可抑制iNOS 的活性，从而起到抗氧化作用；绞股蓝皂苷可以降低异常增高的XOD 和MPO 的活性，改善糖尿病大鼠肾脏的氧化应激，延缓肾脏损害的进展。 2. 增强抗氧化酶活性 机体存在具有防护、清除和修复过量自由基伤害的抗氧化酶类，如过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化物酶等。SOD 是体内超氧阴离子的主要清除者，将其催化分解为H2O2，但H2O2也具有氧化损伤作用，CAT 将其转化为O2和H2O。同时H2O2也可通过GSH-Px 的催化和还原型谷胱甘肽(GSH)反应生成H2O，同时生成氧化型谷胱甘肽。 许多研究表明，植物提取抗氧化成分不仅能防护体内抗氧化酶，还能增强机体内抗氧化酶活性，如黄酮类中的槲皮素能减少胰岛β细胞的氧化损伤，同时还能恢复Fe2+致肾细胞损伤动物的SOD、GSH-Px 和CAT 的活力；皂苷类物质对氧自由基本身影响较少，但大多能提高体内SOD、CAT 等抗氧化酶的活性，从而增强机体抗氧化系统功能。 此外，一些天然物质可在基因与转录水平上诱导体内抗氧化酶如SOD 的表达，发挥其抗氧化作用。 （二）抗氧化成分之间互补和协同作用 植物提取物抗氧化成分之间存在相互补充、相互协调的关系，在体内通过电子和/ 或质子转移、作用于氧化酶和抗氧化酶、螯合钝化过渡金属离子、影响基因表达等途径联合发挥抗氧化作用。 研究发现不同浓度的茶多酚和西洋参之间均存在明显的协同增效作用，并且随着浓度上升，协同增效作用也相应增强。VE 和VC对鹰嘴豆抗氧化多肽的还原能力有显著的增效作用，且VC与鹰嘴豆抗氧化多肽的协同作用较VE更强，所有的协同作用随添加量和作用时间的增加而增强。 （三）直接清除或抑制自由基 植物提取物能够作为氢质子或电子的供给体，直接猝灭或抑制自由基，终止自由基的连
！：：：：：：＝＝：＝：２：：！垒曼型兰！蚤茎熊匹塞 菊花提取物的抗氧化活性研究 张尔贤方黎张捷俞丽君肖湘汕头大学理学院生物学系汕头５１５０６３摘要通过菊花提取物对Ｆｅ２＋诱发卵黄脂蛋白ＰｕＦＡ过氧化体系、ＴＢＡｓ生成体系和邻苯三酚一Ｌ吼ｉｎ。ｌ发光体 系的抑制作用，研究了菊花的不同提取物的抗氧化活性。结果表明．菊花黄酮类化合物有清除?ｏＨ、０?：的能力， 且有着较强的抗氧化活性，并且发现菊花抗氧化活性与黄酮类化合物含量相关。 关键词菊花黄酮类化合物抗氧化活性脂质过氧化硫代巴比妥酸反应物 ＡｂｓｔｒａｃｔＡｓｔＩｌｄ”ｖａｓｃａｒｒｉｅｄｏｎａｎｔｉ－ｏｘｉｄａｔｉｖｏａｃｔｉｖｉｔｙｏｆＦｌｏｓｃｈｒｙｓａｎｔｌｌｅｍｕｍｅｘｔｒａｃｔＣｈｒｙｓａｎｔｈｅｍｕｍｅｘｔｒａｃｔｗａｓ允】Ｉ ｏｔ、ｎａＶｏｎｅｓＳ０ｍｅｐｒｅｃｃｓｓｃｓｔｏｅｘｔｒａｃＩａａｖＯｎｅｓ打Ｏｍｃｈｌ）％ａｎｔｈｅｍｕｍｆｏｒｓｃａｖｅｎｇｉｎｇａｃｔｉｖｃｏｘｙｇｅｎｒａｄｉｃａｌｗｅｒｅｒｅｐｏｒｃｅｄ１兀 【ｈｌｓｐ印ｃｒＴｈｅｒｅｓｕｌｔｓｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｃｈｒｙｓａｎｔｈｅｍｕｍｎａｖｏｎｅｓｃｏｕｌｄｓｃａｖｅｎｇｅ?ＯＨ、Ｏ＝２ａｎｄａｆ诧ｃｔｔｈｃａｎｔｉ．ｏｘｊｄａｔｉｖｅ ａｃｔｎ７Ｉｔｙ ＫｅｙｗｏｒｄｓＦｌｏｓＣｈｒｙｓａｎｔｈｅｍｕｍＡｎ“Ｏ一０ｘｉｄａｔｉｖｅＦＪａｖｏｎｅｓＯｘｙ鼬ｎｒａｄｉｃａｌ 菊花是菊科植物菊（ｃｈｒｙ８ａｎｃｈｅｍｕｍｍｏｒｉｆ０１ｉｕｍＲａｍａｔ）的头状花序．为多年生草本，在我国大部分地区有栽培。传统医学认为菊花的功效包括清热、明目、解毒，治疗头疼、眩晕、心胸烦热、疗疮等作用，民间更以饮用菊花水来解暑热。菊花含黄酮类化合物，本研究通过对菊花的抗氧化作用的初步研究．为进一步开发菊花的保健效用提供理论依据。 １材料与方法 二．二材料、试剂与仪器 千杭自菊：购于市场．绞碎备用。 卵黄悬液：新鲜鸡蛋去卵清，卵黄用等体积的ｐＨ７．４５，ｏ二＿。一，Ｌ磷酸钠缓冲液（ＰＢｓ）配成１：ｉ的悬液，磁力搅拌１０ｍ址再用ｐＢｓ稀释成１：２５的悬液（置于冰箱中备用）。 次黄嘌呤【Ｆｌｕｋａ公司）、黄嘌呤氧化酶（酶活力５ｕ，ｍｌ，广卅１军事医学研究所）、２一脱氧一Ｄ核糖（ｆｅｉｎｂｉｏｃｈｅｍｉｃａ二ｅ二。÷一。ｅｒｇ，ｎｅｗｙｏｒｋ）、硫代巴比妥酸（生化试剂，上海试剂二厂。 ７５ｉ—Ｇｗ型分光光度计（上海分析仪器厂）、ＧＨＧ—ｃ型生物化学发光测量仪（上海市检测技术所检测仪器厂）、ＤＧＪｏ．５一Ｉ｜冷冻干燥机（军事医学科学院实验仪器厂）、旋转蒸发器（Ｒｏ＝ｊｒｙＥｖａｐｏｒａｔｏｒＲＥ一４７，ＹＡＭＡＴ０ＳＣＩＥＮＴＩＦＩＣｃ。，二二ｄＴｏｋｙ。，Ｊａｐａｎ）、ＢｅｃｋｍａｎＪ２—２１Ｍ高速冷冻离心机３ｅ：息ａｎ，ＵＳＡ）。 ：：方法 二．：二提取工艺。１。’ 干菊花绞碎，加入１５倍体积７ｏ％乙醇热浸提１２ｈ．抽滤，滤渣用热水冲洗，滤液减压浓缩．蒸去乙醇，３ｏｏｏｒ／ｍｉｎ离心：ｏ－二ｊ上清液保存待用（样品Ｉ）。取一定量样品Ｉ，用２倍 体积１００％的正丁醇萃取２次，萃取液蒸干溶剂，再用水定容，得样品ＩＩ。取一定量样品Ｉ，用２倍体积１００％的乙酸乙酯。萃取２次．萃取液蒸干溶剂，再用水定容，得样品ＩＩＩ。取一定量样品Ｉ，用２倍体积１００≈的氯仿，萃取２次．萃取液薰干溶剂，再用水定容，得样品Ⅳ。 干菊花绞碎，１５倍体积水直接浸提１２ｈ，低温浓缩获得样品Ｖ（作为对照）。 １．２．２Ｆｅｎ诱发卵黄脂蛋白ＰＵＦＡ过氧化体系…。 选用１：２５的卵黄悬液吸取ｏ．２ｍｌ，加入一定量的样品．加入ｏ，２ｍｌＦｅｓｏ．２５衄ｏｌ／Ｌ，用ｐＨ７．４，ｏ１ｍｏｌ／Ｌ的ＰＢｓ补充至２ｍ！，３７℃振荡１５ｍｉｎ，取出后加人ｏ．５ｍｌ三氧乙酸（简写ＴｃＡ），３５００ｒ／ｍｉｎ离心１０ｍｉｎ，吸取２ｍｌ上清液加入ｌｍｌ硫代巴比妥酸（简写ＴＢＡ）．加塞，放人沸水浴中１５ｍｉｎ，冷却后，于５３２ｎｍ处比色测出吸光度（Ａ）值：以不加样品管的吸光度为（Ａ．）。样品抗氧化活性（ＡｏＡ）用对卵黄脂蛋白ＬＰｏ的抑制率表示： ＡＯＡ（％）＝（Ａ０一Ａ）／Ａ。×１００％ １．２．３Ｆｅ“次黄嘌呤一黄嘌呤氧化酶一ＴＢＡｓ生成体系ｎ４加样顺序为：Ｆｅｓｏ．（２ｍｍ。１，Ｌ）ｏ．０４ｍｌ、黄嘌呤氧化酶（简写：ｘｏ）（５ｕ／ｍ１）３．５ｕｌ、脱氧核糖（３０ｍｍ０１，Ｌ）ｏ２ｍｌ、ＥＤＴＡ（５吼ｏｌ，Ｌ）Ｏ．０４ｍ１、Ｈ２０２（１７．６黝ｏｌ，Ｌ）ｏ０１ｍｌ、加入ｏ．１ｍｌ样品、ｐＨ７．４ＰＢｓ（Ｏ．１５ｍｏｌ／Ｌ）１．４８ｍｌ、次黄嘌呤（简写：ｘ）（２ｍｏｌ／Ｌ）ｏ．２ｍｌ总体积为２ｍｌ（除ＰＢｓ、Ｆｅ∞．用重蒸水配制外．其它试剂均用ｐＨ７．４ＰＢｓｏ．１５ｍｏｌ／Ｌ配制）。然后，３５℃温浴１５ｍｉｍ．取ｌｍｌ反应液加１％ｗ／ｖＴＢＡ（ＮａｏＨｏ０５ｍｏｌ／Ｌ配制）及冰醋酸ｌｍｌ，混匀后放人沸水浴３０ｍｉｎ，冷却。在５３２ｎｍ处测其吸光度Ａ，以不加样品管的吸光度为ｋ：清除活性以抑制ＴＢＡｓ生成量Ａｓ３２ｎ。值的抑制百分率表示即（Ａ。一Ａ）／Ａ。×ｌｏｏ％。１．２．４超氧阴离子的邻苯三酚“ｕＩｎｉｎ。ｌ发光体系 万方数据
山楂提取物一种功能性原料 山楂是常见的一种水果，具有开胃和降血压的作用。山楂种含有丰富的维生素和一些矿物质，这些物质都是身体所需要的。山楂提取物是提取山楂种的一些物质，主要用与保健或是医疗方面。山楂虽然有很多的好处，但是胃酸过多的人是不易食用的，小心引起反酸性胃炎。 药理作用 1、促进消化作用 山楂提取物能促进胃中消化酶的分泌，促进消化。所含脂肪酶可促进脂肪的分解消化；含有多种有机酸、维生素C可提高胃蛋白酶活性，促进蛋白的消化。山楂提取物对胃肠功能具有一定调节作用，对活动亢进的兔十二指肠平滑肌呈抑制作用，而对松弛的大鼠胃平滑肌有轻度的增加收缩作用。 2、抗菌作用 山楂提取物对志贺氏、福氏、宋内氏等痢疾杆菌及大肠杆菌有较强的抗菌作用。对金黄色葡萄球菌、乙型链球菌、大肠杆菌、变型杆菌、炭疽杆菌、白喉杆菌、伤寒杆菌、绿脓杆菌等也有抗菌作用。一般对革兰氏阳性细菌作用强于革兰氏阴性细菌。炮制方法对抗菌作用似无影响，生焦山楂对痢疾杆菌、变形杆菌、大肠杆菌的抗菌作用无明显差别。 3、免疫增强作用 实验证实山楂注射液具有显著增强家兔体液免疫及细胞免疫
的功能，对血清溶菌酶含量、血清血凝抗体高度、心血T淋巴细胞E玫瑰花环形成率及血T淋巴细胞转化率均有显著增强作用。 4、降血脂作用 山楂对乳幼大白鼠具明显的降血胆固醇作用。降低率可达30.8%。治疗高甘油三酯血症也有效。其降血脂作用，通过对胆固醇合成酶(HMGR)及其分解限速酶7α-羟化酶的研究发现，山楂使豚鼠肝细胞微粒体及小肠粘膜的HMGR活力降低，约降低60%以上，而对肝细胞微粒体7α-羟化酶活性无激动作用。说明主要抑制了胆固醇的合成。 5、抑制血小板聚集作用 实验表明，山楂水煎液在体外具有一定的抑制血小板聚集等作用，其IC50为1.388%，山楂与泽泻合用时，能明显提高泽泻的血小板聚集抑制作用。 6、对子宫收缩的作用 山楂提取物有收缩子宫作用，促进子宫复原，收缩子宫作用可促使宫腔内血块排出，加之有血管扩张作用，解除瘀血状态，并有一定的镇静作用。这些作用是其用于治疗产后瘀滞腹痛的药理学基础。 7其他作用 山楂提取液在pH为3.5条件下，310K恒温反应0.5、1、2和3小时，对二乙基亚硝酸胺合成阻断率为94.8%、92.7%、93.5%和94.6%。此外，本品尚有驱虫、解痉、镇静等作用。
山楂的现代研究 山楂有重要的药用价值，自古以来，就成为健脾开胃、消食化滞、活血化痰的良药。山楂含糖类、蛋白质、脂肪、维生素C、胡萝卜素、淀粉、苹果酸、枸橼酸、钙和铁等物质，具有降血脂、血压、强心和抗心律不齐等作用。山楂内的黄酮类化合物牡荆素，是一种抗癌作用较强的药物，山楂提取物对癌细胞体内生长、增殖和浸润转移均有一定的抑制作用。有关学者对其化学成分及临床作用进行了充分的研究，归纳如下： 一、化学成分 山楂含绿原酸、咖啡酸、山楂酸、齐菊果酸、槲皮素、熊果酸、齐墩果酸、金丝桃甙、表儿茶精等。山楂的主要成分是黄酮类物质，对心血管系统有明显的药理作用。到2012年，从山楂中分离的黄酮成分有30 余种，主要有含碳键的黄酮苷类、黄酮醇及其苷类、双氧黄酮苷类、聚合黄酮类。另一类较为重要的成分是三萜类物质，有强心、增加冠脉血流、改善血流循环等重要作用。此外，山楂中含有机酸如氯原酸、咖啡酸及鞣质、鞣酐、表儿茶酚、胆碱、乙酰胆碱、β谷甾醇、胡萝卜素及大量Vit C 等。 二、药理学及临床作用 1、对消化系统的作用。近代研究表明，山楂含维生素C、维生素B 2、胡萝卜素及多种有机酸，口服能增加胃中消化酶的分泌；并能增强酶的活性；促进消化。有报道指出：山楂醇提液对受刺激的大鼠胃平滑肌活动有双向调节作用，表明服山楂对胃肠功能紊乱有明显调整作用，达到健脾消食作用。重用山楂并配用健脾药治疗小儿泄泻可取得满意的疗效。用山楂为主药的山楂茶叶汤治疗酒精性肝病疗效满意。也可用于治疗急性痢疾、肠炎等。 2、降压作用。以小剂量山楂有缓慢而持久的降压作用，其降压原理以扩张外周血管为主。临床用山楂糖浆治疗高血压疗效达90%以上。 3、降血脂。现代研究证明，山楂不同提取部分对不同动物造成的各种高脂模型均有较肯定的降脂作用。山楂及山楂黄酮提取物能明显的降低实验性高脂血症的家兔和乳幼大鼠的血脂，并对实验性动脉粥样硬化有治疗作用。用菊花、双花、山楂以5：5：4配方代茶饮治疗血流变学异常的高脂性高血压病人、动脉硬化症患者，总有效率达95%。 4、强心、抗心绞痛作用。山植中含有的槲皮苷，具有扩张血管、促进气管纤毛运动、排痰平喘之功能，故山楂是防治心血管病的理想保健食品和有较好疗效的食品。经实验得知，山楂浸膏、水解物对家兔离体血管均有明显解痉作用，山楂黄酮能缩小心肌梗塞范围，并且山楂的多种提取物对蟾蜍心脏均有一定强心作用；总黄酮可增加冠脉流量、抗实验性心肌缺氧、抗心律不齐等作用
山楂叶提取物详细介绍 取山楂叶，粉碎成粗粉，加50% 乙醇提取两次（55 ～60 ℃），每次2 小时，第一次加10 倍量，第二次加8 倍量，滤过，合并滤液，回收乙醇至滤液无醇味，用等量水稀释，加于已处理好的D101 大孔吸附树脂上，依次用水及不同浓度的乙醇洗脱，收集相应的洗脱液，回收乙醇，浓缩至相对密度约 1.10 （60 ℃）的清膏，喷雾干燥，即得。【性状】本品为浅棕色至黄棕色的粉末；气特异，味苦，有引湿性。【检查】干燥失重取本品1g ，精密称定，置干燥至恒重的称量瓶中，在硫酸干燥器中干燥24 小时，减失重量不得过2.0% 。【特征图谱】照高效液相色谱法（附录VI D ）测定。色谱条件与系统适用性试验同1．对心、脑血管系统的作用山楂叶聚合黄酮一次给药或多次给药，均能对抗垂体后叶素诱发的家兔急性心肌缺血，缩小其心肌梗死范围。山楂叶提取物（0．1g/ml）0．4-8ml/kg静脉注入，能显着地降低或恢复垂体后叶素引起的豚鼠心电图S.T 段上移和T波增高，加快后叶素引起的心率减慢。牡荆素鼠李糖贰20ml/kg能明显降低犬在位心脏的心肌耗氧量，与金丝桃甙等有协同作用。山楂叶水提取物给大鼠灌胃能显着降低结扎冠脉大鼠的血清磷酸肌酸激酶（CPK）水平和心肌梗死面积。20%山楂提取物颈静脉注入5-7min，脑血管阻力下降1.064-10．91kp/a(8-82mmHg）。山楂叶 2．对凝血系统的影响山楂叶在体内、外均能非常显着地抑制胶原或ADP诱导的兔血小板聚集。此外，静脉注射山楂叶制剂30min后，全血比粘度显着下降。3．降血脂作用山楂叶对蛋黄乳剂快速形成的小鼠胆固醇血症，有非常显着的降低作用。 4.耐缺氧作用山楂叶与普萘洛尔一样，可显着延长低压缺氧或常压缺氧实验小鼠的存活时间，与显着减低小鼠整体耗氧量的作用一致。 5.利尿作用山楂叶浸膏具有明显的利尿作用，家兔给药60min后尿量较给药前增加44.2%，90min增加53.9%，120min增加63.7%，说明其利尿作用温和、缓慢而持久，而且山楂叶利尿时对电解质影响较小。 1.山楂叶能防治心血管疾病，具有扩张血管、增加冠脉血流量、改善心脏活力、兴奋中枢神经系统、降低血压和胆固醇、软化血管及利尿和镇静作用；山楂叶 2.山楂叶酸还有强心作用，对老年性心脏病也有益处； 3.它能开胃消食，特别对消肉食积滞作用更好，很多助消化的药中都采用了山楂叶； 4.山楂叶有活血化淤的功效，有助于解除局部淤血状态，对跌打损伤有辅助疗效； 5.山楂叶对子宫有收缩作用，在孕妇临产时有催生之效，并能促进产后子宫复原； 6.山楂叶所含的黄酮类和维生素C、胡萝卜素等物质能阻断并减少自由基的生成，能增强机体的免疫力，有防衰老、抗癌的作用； 7.山楂叶中有平喘化痰、抑制细菌、治疗腹痛腹泻的成分。
山楂的主要作用及在畜禽生产中的应用 山楂是蔷薇科落叶山楂属，主要有效成分为有机酸和黄酮等，具有促进消化、杀菌、降血脂、抗癌、抗氧化等作用且价格低廉，因此畜禽生产中常将山楂粉拌入饲料或将山楂汁加入饮水作消化剂、杀菌剂、降脂剂、动物保健增效剂来提高畜禽的采食量、饲料利用率、免疫力以及生产性能。无抗养殖已经成为当代畜牧业的潮流和趋势，因此寻找植物性绿色饲料添加剂迫在眉睫，本文从山楂的主要成分、主要作用及其在畜禽生产中的应用几个方面来介绍。 标签：山楂、主要成分、主要作用、畜禽生产、应用 1、主要成分 山楂中含有多种营养成分：蛋白质、维生素、矿物质元素、多糖，尤以维生素C、钙、镁、锌含量丰富，还含有大量的有机酸、黄酮类化合物、黄烷类化合物等。 2、主要作用 2.1 促进消化作用 山楂中浓厚的酸味能够增加畜禽的食欲，提高采食量。山楂还能够有效提高饲料利用率，其原因在于山楂可以调节肠道功能的紊乱，促进肠道蠕动，有助于消化，且其含多种有机酸，能增加动物胃肠中消化酶的分泌，增强脂肪酶、蛋白酶的活性，使消化更加迅速和充分[1-2]。 2.2 杀菌作用 大量研究表明，山楂能有效的对多种杆菌和球菌产生抵抗作用，促进肠道中乳酸杆菌和总厌氧菌的增殖。林玲[3]的试验表明，用稀释2倍的山楂液对白色念珠菌作用3 min，对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌作用1 min灭菌率均达99.90%以上。因此山楂可用作杀菌剂达到抗菌消炎的目的，有利于维持畜禽的健康。 2.3降血脂作用 山楂常被用来调节脂类代谢，预防高血脂症等。在刘国生[4]山楂不同极性提取物对高脂血症大鼠血脂及血液流变性的影响的研究试验中发现，山楂中的黄酮是降低胆固醇和甘油三酯水平以及提高高密度脂蛋白水平的有效成分，这与刘北林[5]对山楂黄酮降血脂机理的研究一致。 2.4抗癌作用 山楂中的有机酸、黄酮等有效成分具有抗癌作用。李成海[6]的研究发现，
山楂炮制方法的研究 摘要：了解生山楂及各种山楂炮制品炮制前后主要成分含量的比较，探讨山楂炮制的意义。方法：通过实验法对山楂炮制工艺及其炮制品的质量进行研究。结果：……结论：…… 关键词：山楂；炮制品；工艺；质量 山楂为蔷薇科植物山里Crataegus pinnatifida Bge.var.major N.E.Br．山楂Crataegus pinnatifida Bge．的干燥成熟果实［1］。山楂味酸、甘，微温；入脾胃、肝经，具有消食健胃、行气散瘀之功效［2］。临床上常用的山楂有生山楂、炒山楂、焦山楂和山楂炭等。山楂不同炮制品的功效和临床应用亦不同，如散瘀止痛用生品，消食化积用炒制品等。山楂的主要成分为有机酸和黄酮类化合物［3］。现代研究表明，山楂炮制后，其化学成分如总黄酮、总有机酸、磷脂和微量元素等的含量均发生了变化，从而会改变山楂的药理作用和临床疗效。本文就不同的生山楂及各种山楂炮制品炮制前后主要成分含量的比较，探讨山楂炮制的意义。 1药品、仪器及材料 1.1 药品 蒸馏水、酚酞指示液、氢氧化钠滴定液(0.1mol／L) 、枸橼酸(C 6H 8 7 ) 1.2 仪器 铁锅、蒸发皿、研钵、分析天平、天平、球形冷凝管、水浴锅、5 0 ml 圆底烧瓶、布氏漏斗、定性滤纸、玻璃棒、50 ml量筒、50 ml锥形瓶、超声仪、250ml 容量瓶、移液管25ml、电热恒温干燥箱 1.3 材料 生山楂除去杂质，筛去子核。 炒山楂取生山楂片，置锅内用中火炒至颜色加深，取出，放凉。 焦山楂取生山楂片置锅内用武火炒至表面呈焦褐色，内部呈黄褐色，取出，
放凉。 山楂炭取生山楂片置锅内用武火炒至起烟，立即盖上盖，继续加热至喷出黄白色烟气，取出、放凉。 2实验方法 2.1 样品炮制 生山楂取原药材，除去杂质及脱落的核及果柄，筛去碎屑。 炒山楂取生山楂片，置锅内用中火炒至颜色加深，取出，放凉。 焦山楂取生山楂片置锅内用武火炒至表面呈焦褐色，内部呈黄褐色，取出，放凉。 山楂炭取生山楂片置锅内用武火炒至起烟，立即盖上盖，继续加热至喷出黄白色烟气，取出、放凉。 2.2 含量测定 取生山楂（炒山楂、焦山楂）细粉约1g，精密称定，精密加入水100ml，室温下浸泡4小时，时时振摇，滤过。精密量取续滤液25ml，加水50ml，加酚酞指示液2滴，用氢氧化钠滴定液(0.1mol／L)滴定，即得。每lml氢氧化钠滴定液 (O.1mol／L)相当于6.404mg的枸橼酸(C 6H 8 7 )。 按干燥品计算，含有机酸以枸橼酸(C 6H 8 7 )计，生山楂不得少于5.0％；炒山 楂、焦山楂不得少于4.0％。 2.3 有机酸以枸橼酸含量测定 （1）分别取山楂生品及炒炭品，于乳钵内研成粗粉，精密称定约10g，加蒸馏水300ml，小火煮沸 30分钟，过滤。药渣再加水100ml复提2次，提尽枸橼酸，合并滤液，定容于500ml, 同上法用0.02mol/L氢氧化钠溶液滴定，消耗的氢氧化钠毫升数为“B”。 （２）山楂中枸橼酸含量汁算：以枸橼酸为标准，每毫升0.1mol/L高锰酸钾溶液,相当于0.004157g枸橼酸。 X：样品中枸橼酸含量（％）。 A：氢氧化钠的用量（毫升数）。
我们常见的有抗氧化成分植物的比较有哪几种？ 生活中大家都喜欢养生，保持年轻，通过食物（如植物提取物）来达到这个抗氧化的目的，那抗氧化到底是怎么来的呢？下面我们来比较一下。 一种比较是几种植物提取物不同的检验，在检测试验中抗氧化活性差异,采用ABTS法、FRAP法、β-胡萝卜素漂白法、鱼油氧化体系中的TBARS法以及对总酚含量的测定,评估了松树皮、葡萄籽、绿茶、蓝莓、苹果和丹参提取物的抗氧化活性.结果发现,无论是总酚含量,还是单一因素清除测得的抗氧化性活性(ABTS法,FRAP法),与在复杂的脂肪酸或真实食品体系中生成的氧化产物(β-胡萝卜素漂白法,TBARS法)的抑制能力的相关性较差.因此,植物提取物的抗氧化活性需要结合不同的检测方法进行综合评价，才能达到更好的结果。 另一种比较分析3种金花茶植物提取液的抗氧化活性。方法：通过测定过氧化值（POV）、羟自由基（.OH）清除率、超氧阴离子自由基（O2.-）清除率、DPPH.清除能力和还原能力来综合考察3种金花茶植物提取液的抗氧化活性。结果：3种金花茶提取液的抗氧化活性实验效果理想,且呈量效关系,毛瓣金花茶提取液的抗氧化活性较其他2种为好。结论：3种金花茶提取液具有良好的抗氧化活性,具有较高的开发利用价值。 而生姜根、番石榴叶、番石榴籽、橙皮、芝麻种皮、米糠和小麦胚芽等植物提取物的抗氧化活性和热稳定性.方法比较了乙醇、乙酸乙酯、三氯甲烷、正己烷和石油醚等不同溶剂提取物的抗氧化活性,分别采用Fo-lin-Ciocalteu法和三氯化铝比色法测定不同植物提取物的总多酚和总黄酮量,并进一步通过加热处理和Rancimat法研究了巴科医药植物提取物的热稳定性和对葵花籽油的诱导时间.结果生姜根的石油醚提取物具有最高的抗氧化活性,生姜根、橙皮、番石榴叶的提取物具有超过α-生育酚的抗氧化活性.不同植物提取物的抗氧化活性与它的总多酚和总黄酮量呈显著正相关.生姜根、番石榴叶和芝麻种皮显示比α-生育酚更好的热稳定性,而抗氧化性与α-生育酚类似.结论生姜根、番石榴叶和芝麻种皮可作为潜在的天然抗氧化剂来源,应用于食品和医药工业中。
抗氧化物活性测定方法（倾向于考虑DPPH法和ORAC法） 1.FRAP法:铁离子还原抗氧化能力测定法[1] FRAP(ferric ion reducing antioxidant power)方法，在低pH值的溶液中， Fe3+-TPTz(Fe3+-三吡啶三嗪)被抗氧化剂还原成有色的Fe2+-TPTZ。反应的结果常以Fe2+当量或标准物质的抗氧化能力表示。 该法快速简便、易于操作、重复性好，但FRAP反应属于电子转移(SET)反应，因此FRAP方法不能够测定氢转移反应(HAT)起作用的物质。而且该法实际测定的是待测生物活性物质将Fe3+还原为Fe2+的能力，因此没有抗氧化能力的生物学相关性。 2.TEAC法(trolox equivalent antioxidant capacity) ABTS(2,2'-amino-di(2-ethyl-benzothiazoline sulphonic acid-6)ammonium salt,2,2'氨基-二(3-乙基-苯并噻唑啉磺酸-6)铵盐)与过氧化物酶和氢过氧化物在一起形成ABTS+阳离子自由基。在抗氧化剂存在时，这种自由基混合物的光吸收值下降，下降程度取决于抗氧化剂的抗氧化能力，测得的结果以TEAC表示，即被测抗氧化剂清除ABTS·+的能力(吸光度大小的变化)与标准抗氧化剂trolox(VE的水溶性类似物)清除ABTS·+的能力的比值。 TEAC法十分简单，适用于大量样品的分析检测。但是，ABTS·+并非生理自由基，缺乏生理相关性，而且与FRAP方法相似，ABTS·+与不同抗氧化剂问的氧化反应时间不同，因此，只能定性不能定量评价样品的抗氧化能力。 3.DPPH法[2，3](2，2-diphenyt-l-picrylhydrazyl radical scavenging capacity) DPPH·(二苯代苦味肼基自由基)法是较常用的方法之一。DPPH·是一种稳定的以氮为中心的自由基，其醇溶液呈深紫色,在517nm 处有一吸收峰。当反应系统中存在自由基清除剂时，它可以和DPPH·的单电子配对而使517nm 处的吸收峰渐渐消退。而且，这种颜色变浅的程度与配对电子数成化学计量关系。因此，根据吸光度的变化可测得抗氧化剂的活性。通过计算DPPH自由基剩余一半时所需抗氧化剂的浓度(EC50)以及时间(TEC50)反应抗氧化物的活性。 DPPH法快速、简单，仅需要一台紫外分光光度计就可以测定，但DPPH方法存在的不足是，当被测物与DPPH紫外吸收有重叠时，将会影响测定结果，比如类胡萝卜素。此外，由于空间位阻决定反应的倾向，小分子化合物由于更易接近自由基而拥有相对较高的抗氧化能力。此外该方法线性范围也相对较窄，而且所有还原剂都能够对DPPH起作用，因此结果并不能完全代表抗氧化能力。
山楂的炮制研究进展 姓名：张传力学号：MZ11736 专业：中药学硕士 山楂为蔷薇科植物山里红或山楂的成熟果实。除此之外，大果山楂、野山楂等的成熟果实也作习用品使用。山楂味酸、甘，微温；入脾胃、肝经，具有消食健胃，行气散瘀之功效。临床上常用炮制品，规格有生山楂、炒山楂、焦山楂和山楂炭等。不同炮制品的功效和应用亦不同，如散瘀止痛用生品，消食化积用炒制品等。现代研究表明，山楂炮制后，其化学成分如有机酸、黄酮、磷脂和微量元素等的含量均发生了变化，从而改变了山楂的药理作用和临床疗效。为探讨炮制前后化学成分的变化、药理作用及临床应用的异同，从而为山楂炮制机理进一步深入研究提供思路，为山楂饮片炮制工艺的规范化及饮片质量的标准化打下基础，作者拟在参考古今文献的基础上，对山楂的炮制沿革及研究进展作一综述分析[1]。 1 山楂炮制历史沿革 参阅元代以前历代医籍文献，对山楂炮制鲜有记载，亦未见有对炮制作用的论述，只是到了元代以后才提出了“炒”和“蒸”的炮制方法。综合古代山楂炮制方法，主要有不加辅料的炮制（包括炒、蒸）和加辅料的炮制。历代所用辅料分单一辅料和复合辅料，前者主要有酒、姜汁、童便；后者仅见童便、姜汁制的记载，但加辅料炮制记载很有限。下面分别予以介绍。 1.1不加辅料炮制 1.1.1炒法：元代《丹溪心法》最早提出了“炒”法[2]明代《医学纲目》，清《良朋汇集》等书中有相同记载。《疮疡经验全书》中提到“炒磨去子”，《本草纲目拾遗》中提到“炒为末”，《外科证治全生集》中提到“炒炭”，《医宗说约》曰：“捣末用炒黑，炒黑能治血积”[3]。 1.2加辅料炮制 1.2.1 酒制：清《医宗金鉴》中提到“酒炙”[4]。 1.2.2姜汁制：最早见于清《温热暑疫》，提出“姜汁炒”，其后的清《本经逢源》中提出“姜汁拌炒黑”。 1.2.3童便制：清《本经逢源》中提到“去核童便浸”[5]。 1.2.4童便、姜汁制：仅见于清《得配本草》提到“童便浸，姜汁炒炭”。 2 山楂炮制的现代研究 2.1山楂的现代炮制法：参考历版药典和《全国中药炮制规范》，山楂的现代炮制法[6]为： 2.1.1山楂：北山楂拣去杂质，筛去脱落的柄及核；南山楂除去杂质，洗净、轧扁、簸去核、干燥。 2.1.2炒山楂：取净山楂至锅内，用文火加热，炒至颜色变深，取出放凉。
Botanical Research 植物学研究, 2018, 7(3), 233-240 Published Online May 2018 in Hans. https://www.doczj.com/doc/2317868837.html,/journal/br https://https://www.doczj.com/doc/2317868837.html,/10.12677/br.2018.73030 Study on Antioxidant Activity in Vitro of Extract from Phellodendron amurense Leaves Chunjing Wang, Yuhong Zhang* Key Laboratory of Forest Plant Ecology of Ministry of Education, Northeast Forestry University, Harbin Heilongjiang Received: Mar. 19th, 2018; accepted: Apr. 11th, 2018; published: Apr. 18th, 2018 Abstract Aim: To investigate antioxidant activities in vitro of different polarity fractions of extract from ethanol extract of Phellodendron amurense leaves. 4 extractions were obtained in different fractions by using different polarities of solvents such as petroleum ether, ethyl acetate, butanol and water. The antioxi-dant activity capacity of 4 different polarity fractions from ethanol extract of P. amurense leaves was evaluated by detecting scavenging abilities for 1,1-diphenyl-2-trinitrophenylhydrazine (DPPH) radi-cal, hydroxyl radical (?OH), ABTS+? radical and Ferric Reducing Antioxidant Power method(FRAP) assay. The results showed that the different fractions of extract from P. amurense leaves had re-vealed antioxidant activity and showed a significant concentration-effect relationship (p < 0.05). The antioxidant effects of 4 fractions from P. amurense leaves all had different antioxidant effects in different reaction systems. There were differences in antioxidant activities among 4 fractions. Ex-tracts of ethyl acetate fraction and butanol fraction had better scavenging effects than petroleum ether fra ction and water fraction for DPPH, ?OH, ABTS+? and FRAP. The extract from the ethyl ace-tate and butanol of P. amurense has a strong antioxidant activity and is a source of natural antioxi-dants. Keywords Phellodendron amurense Leaves, Antioxidant Activity, Ethanol Extract, DPPH, Hydroxyl Radical, ABTS, FRAP 黄檗叶提取物的体外抗氧化活性研究 王春晶，张玉红* 东北林业大学森林植物生态学教育部重点实验室，黑龙江哈尔滨