附件1
曲阜师范大学
国家级大学生创新创业训练计划项目
申报书
学院名称：
体育科学学院
项目名称：地塞米松磷酸钠和硫酸锌对獭兔肝脏金属硫蛋白含量影响的研究
项目类型：□创新训练项目□创业训练项目□创业实践项目
负责人：
刘月指导教师：
朱磊
曲阜师范大学教务处
二〇一三年五月
填写须知
一、项目分类说明
1.创新训练项目是本科生个人或团队，在校内导师指导下，自主完成创新性实验方法的设计、设备和材料的准备、实验的实施、数据处理与分析、总结报告撰写等工作。
2.创业训练项目是本科生团队，在校内导师指导下，团队中每个学生在项目实施过程中承担一个或多个具体的角色，通过编制商业计划书、开展可行性研究、模拟企业运行、进行一定程度的验证试验，撰写创业报告等工作。
3.创业实践项目是学生团队，在学校导师和企业导师共同指导下，采用前期创新训练项目（或创新性实验）的成果，提出一项具有市场前景的创新性产品或者服务，以此为基础开展创业实践活动。申报该类项目需额外提交企业导师合作指导协议书作为附件。
二、申报书请按顺序逐项填写，填写内容必须实事求是，表达明确严谨。空缺项要填“无”。
三、申请参加大学生创新创业训练计划项目团队的人数含负责人在内不得超过5人。
四、表格中的字体小四号仿宋体，1.5倍行距；需签字部分由相关人员用黑色钢笔或水笔签名。均用A4纸双面打印，于左侧装订成册。
五、推荐上报的计划项目由学院分管领导在申报书上签署意见、签字并加盖公章后，一式五份（均为原件），报送教务处。
项目名称地塞米松磷酸钠对硫酸锌合成金属硫蛋白的影响项目起止
时间
2013 年 5月至2014 年 5 月
负责人
姓名年级学院学号联系电话E-mail
刘月
2010
级
体育科学
学院
20104135
63
18766858
618
1484899883@https://www.doczj.com/doc/2316931424.html, 王倩倩
2010
级
体育科学
学院
20104135
93
18766858
589
635888283@https://www.doczj.com/doc/2316931424.html, 钱倩
2010
级
体育科学
学院
20104135
72
18766858
205
281043211@https://www.doczj.com/doc/2316931424.html, 徐晓阳
2011
级
体育科学
学院
20114135
59
15254795
756
1056858309@https://www.doczj.com/doc/2316931424.html, 安文雪
2012
级
体育科学
学院
20124136
13
18953772
970
523761667@https://www.doczj.com/doc/2316931424.html,
指导教师姓名朱磊职称讲师
所在
单位
曲阜师范大学体育科学学院
联系
电话
135******** E-mail zhulei316@https://www.doczj.com/doc/2316931424.html,
校外指导教师
姓名无职务/职称
所在
单位
联系
电话
一、项目简介（100字以内）
金属硫蛋白(MT)在生物学研究和医学临床的应用等方面都具有非常诱人的前
景。通过控制獭兔注射硫酸锌和地塞米松磷酸钠的量，研究硫酸锌和地塞米松磷酸钠对金属硫蛋白的合成的促进作用，以期找到两者的协同点，在不影响獭兔皮毛质量的前提下，尽可能多的提高獭兔肝脏内MT的含量，从而提高MT产量。
二、申请理由（包括研究意义、研究条件，以及研究者的知识储备、学业特长、前期准备等）
研究意义：
金属硫蛋白(MT)是一类低分子量、富含半胱氨酸的锌结合蛋白质。它涉及许多生理和病理学过程,其中包括体内必需金属元素的储存、代谢和转运以及重金属的解毒、自由基的清除以及参与机体的应急反应、胚胎发育和细胞代谢调控、内分泌系统的调节、肿瘤的形成等。因此,在生物学研究和医学临床的应用等方面都具有非常诱人的前景。本项目的完成，可以有效提高MT产量，降低生产成本，广泛的应用于医药。食品保健以及化妆品添加剂等，使更多的消费者受益。
研究条件：
已经和尼山镇獭兔养殖场建立合作伙伴关系，可提供优质獭兔，已确定两套獭兔养殖方案，实验结果优先供给尼山镇獭兔养殖场使用。该獭兔场常年养殖优质獭兔。体育科学学院生物化学实验室现有仪器、设备、药品可以保障课题顺利进行。研究者的知识储备：
我团队主要是大三本科生，在2011——2012上半学期，已经成功的进行了硫酸锌和地塞米松磷酸钠对獭兔肝脏中金属硫蛋白含量影响的初步研究，其研究成果为本项目的进行奠定了理论基础。在此过程中，我们通过知网查询、阅览了多篇主题词为“硫酸锌”和“硫蛋白”的文献，主题词为“地塞米松磷酸钠”和“硫蛋白”的文献，并且与曲阜尼山獭兔养殖场合作，以30只獭兔为实验对象进行了前期实验，积累了丰富的理论知识和实验经验。我们已经成功撰写《硫酸锌和地塞米松磷酸钠对獭兔肝脏中金属硫蛋白含量的研究》的实验论文，该稿件已被曲阜师范大学学报录用，定于2013年7月份发表。
三、项目方案（包括研究计划、技术路线、人员分工等）
研究目标：
在传统的獭兔饲养过程中注射特定浓度的试剂，制定出一套切实可行的、利益最大化的、同时可大量生产金属硫蛋白（MT）和优质獭兔皮毛的方法。
研究计划：
一、通过控制注射硫酸锌和地塞米松磷酸钠的量，进而研究硫酸锌和地塞米松磷酸钠对金属硫蛋白的合成的促进作用；
二、现行的硫酸锌和地塞米松磷酸钠注射方法对獭兔皮毛质量的影响。
技术路线：
一、实验方法
在尼山獭兔养殖场随机选取30只，成熟健康，不在褪毛期的24月獭兔，雌雄各半，体重2.6±0.2 kg。并随机分为三组。进行实验的30只獭兔与其它獭兔一样进行常规饲养。
第一组：硫酸锌和地塞米松磷酸钠组从第一天开始，隔天皮下注射已灭菌的硫酸锌5次(第1、3、5、7、9天)，注射量呈梯度上升，依次是：50，100，150,200，250mg/kg。从第3次（第5天）开始,将地塞米松磷酸钠加入硫酸锌中一起注射，3
次加入地塞米松磷酸钠的量依次是：5，10，15mg/kg(硫酸锌150,200,250mg/kg)。
第二组：硫酸锌组从第一天开始，只注射已灭菌的硫酸锌，隔天皮下注射5次(第1、3、5、7、9天)，依次是100，150，200，250，3O0mg/kg。
第三组：对照组常规饲养，不作任何实验处理，作对照试验。
于末次(第9天)给药24小时后静脉注射空气处死獭兔，迅速取出肝脏，去胆，生理盐水清洗两次，再用去离子水冲洗净残血。尽量控净水，用定量滤纸吸干，保存于-20℃冰箱中备用。
二、锌含量测定
1、玻璃器皿、试管、消化罐常规方法洗净后，经1:1的硝酸浸泡24h，用超声波清洗器清洗，再用去离子水冲洗干净，烘干备用。
2、原子吸收法测定条件空气/乙炔火焰,狭缝0.2 mm,锌灯电流5 mA,波长213.9 nm,空气压力2.00 kg/cm2,乙炔气压力0.30 kg/cm2。
3、标准曲线的制备精密量取1 mg/ml的锌标准储备液4 ml,用去离子水定容。
于100 ml容量瓶,分别精密吸取此溶液0,0.5,1.0,1.5,2.0,2.5 ml,用去离子水定容于100ml容量瓶中。即得浓度分别为0.00,0.20,0.40,0.60,0.80,1.00μg/ml的锌标准溶液,分别于原子吸收分光光度计上测得吸光度,得到锌吸光度的标准曲线。
4、兔肝的湿法消化和锌含量的测定精密称取兔肝约0.40 g(每只兔肝取3份)于消化罐中,精密加入2 ml优级纯HNO3,加盖放置过夜,再精密加入0.5 ml优级纯HClO4,盖好,用不锈钢架固定,置于90℃烘箱中12 h后,取出,冷却后,定量转移到10ml量瓶中,去离子水定容,摇匀。用可调微量移液器吸取上述溶液30μl置于试管中,精密加入4ml去离子水稀释,摇匀,分别于原子吸收分光光度计上测定吸收度,并做空白试验,按湿肝重计算锌含量(μg/g)。
人员分工：
刘月实验设计、论文撰写
刘月、王倩倩、钱倩实验操作
徐晓阳、安文雪数据采集、数据分析
四、项目特色与创新点
在保障獭兔肝脏锌含量的前提下，找到硫酸锌和地塞米松磷酸钠对金属硫蛋白合成的促进作用最适点，并应用到实际生产中，提高技术硫蛋白的生成率，同时保持优质獭兔皮毛质量，使金属硫蛋白实现大规模的生产。
五、项目进度安排
2013年5月——2013年7月购置实验动物，进行预实验2013年9月——2013年11月进行大量样本的正式实验2013年1月——2013年3月对实验数据进行统计学分析2013年4月——2013年5月撰写结题报告
六、项目经费使用计划（说明项目经费用途、数额等）
支出科目金额
（元）
计算根据及理由
购买实验对象3000元一只獭兔100元，需30只共3000元
购买实验药品2000元硫酸锌、地塞米松磷酸钠、优级纯硝酸等
购买实验器材15000元移液枪、恒温箱、消化罐等
其他3000元从尼山镇运输獭兔
总计23000元
七、预期成果（论文级别、专利、设计、产品、服务；创业实践项目需说明公司规模、营业额等）
顺利完成实验，使用数据分析软件对实验数据进行处理与分析，得出实验结论，撰写实验报告，在国家级的学术刊物上发表论文。并根据我们的实验结论制定出切实可行的饲养方案，进行大规模的生产。
指导教师意见：
课题选题能够切合实际，有一定的实际应用价值，建议抱着严谨、科学的态度进行该课题相关实验的操作。多向与课题相关的校内专家请教。另外，一定要保障所有实验必须进行预实验。
签名：
年月日学院推荐意见：
负责人签名：
单位公章
年月日专家评审意见：
组长签名：
年月日学校审批意见：
负责人签名：
单位公章
年月日