编号：URS（COS 03）-362-00 版本号 00 项目名称：头孢类原料药COS认证项目
生效日期：设备名称：完整性测试仪规格：
起草- -
审查
- - - - - -
审核
- -
批准- - - -
分发范围
部门数量部门数量
目录
1．简介： (3)
1.1文件说明 (3)
1.2项目说明 (3)
2．设备需求及技术要求： (4)
2.1设备描述： (4)
2.2工艺设备清单： (4)
3．项目实施的用户需求 (5)
3.1法律和常规需求 (5)
3.2维护与保养 (5)
3.3SAT验收： (6)
4．交货 (6)
4.1发货 (6)
4.2安装 (7)
4.3文件 (7)
4.4服务与培训 (9)
4.5付款要求 (9)
5．修订历史 (9)
1．简介：
1.1文件说明
1、本用户需求标准（URS）文件的技术规格中指出的工艺、材料和设备的标准以及参照的品牌或型号仅起说明作用，并没有任何限制性。投标人在投标中可以选用替代标准、品牌或型号，但这些替代要实质上满足或超过本用户需求标准（URS）文件的要求。项目招标评审时，由评标委员会负责对投标人提供的替代标准、品牌或型号的响应性进行审查。
2、本用户需求标准（URS）一般包括项目背景、技术要求、工艺要求、文件要求、商务要求等内容。其中技术要求主要包括采购项目名称、数量、技术规格和基本需求等；工艺要求主要包括系统配置、结构规格、设备材质、运行环境、布局接口、质量保证等内容；文件要求主要包括供应商资质证明、材质证明、环保安全证明、报价单、FAT（出厂测试）等一系列相应文件；商务要求主要包括交货期(完工期)、付款方式、货物安装调试、检验验收、保险、产品配送地点、服务响应、培训、质保期、售后服务及备品备件等。
3、投标人应充分结合本用户需求标准（URS）了解项目招标需求。
1.2项目说明
1.2.1 本设备位于无菌三楼膜过滤间，洁净级别为C级，是一种适用于单芯、三芯过滤器进行在线泡点、扩散流、压力保持、压力衰减测试的自动完整性测试仪。可以对亲水性滤膜和疏水性滤膜进行测试，测试的范围不局限于某一品
牌的过滤膜产品，自动完整性测试仪必须满足中国、欧盟CMP认证和CE认证。2．设备需求及技术要求：
2.1设备描述：
规格标准详细资料
1 放置地点COS原料车间无菌三楼膜过滤间洁净级别C级（1-2
轴D跨区域）
2 用途描述洁净区域内的过滤器滤膜完整性测试
3 清洁/维保设备外表面、外置阀门组件、管道耐消毒液擦拭。2.2工艺设备清单：
设备条件
序号No.
设计要求
Design Requirements
设计标准
Design Specifications
检查
Checked
1 材质适合于洁净室使用
3 使用条件操作温度18—26℃
相对湿度5至95%，无结露现象。入口保护IP22
4 气源要求最大进气压力小于120psi（8300mbar）
最小进气压力
进气压力要比测试压力高15psi
（1040mbar）
5 电源要求电源电压220伏，50/60Hz
6 安装
安装类型便携式
快接连接件（配套三种快
接接口）
符合ISO2037标准DN20快接接口
符合ISO2037标准DN15快接接口
符合ASME.BPE标准DN20快接接口
7 防水要求防溅水装置需要有防溅水装置
序号No.
设计要求
Design Requirements
设计标准
Design Specifications
检查
Checked
8 打印机内置打印机内置打印机，可打印数据包括但不限于以下内容：产品批号、过滤器名称及编号、测试日期、时间、操作者、测试结
果。
9 数据存储完整性测试仪可进行数据存储及输出
10 校验内部具有自动校验功能
11
触摸屏
系统安全3级密码保护
操作系统语言设置中英文
操作系统嵌入式windows XP 硬盘≥40GB
内存≥256MB（显卡占用16MB）
尺寸
主动矩阵彩色LCD，对角10.4inch
（26.4cm）
12 测试范围适用于单芯、三芯过滤器
可进行在线泡点、扩散
流、压力保持测试
扩散流分辨率≤1ml/min,
泡点分辨率≤68.9 mbar
压力衰减分辨率≤3.5mbar
13 一般性要求
易清洁性
各连接部位平滑、圆角
无明显的凸台和凹陷，不可避免时必须
圆角、平滑处理
随机附件
安装所需所有附件配备齐全，安装完毕
即可使用。
3．项目实施的用户需求
3.1法律和常规需求
符合中国、欧盟GMP认证和CE认证。
3.2维护与保养
供应商提供必要的维护保养知识手册。
3.3 SAT验收：
设计确认 Design qualification
设备生产商根据本URS内容完成各项确认工作，确保设计符合所有的URS 要求，最终的设计须经使用方确认并批准。
安装确认Installation qualification：
设备到达工厂使用现场并由设备生产商安装完成后须进行SAT（现场接受性测试），测试方案由设备生产商提供并预先经使用方确认批准。测试合格后方可进行下一步的测试验证。
IQ和OQ
SAT完成并通过后进行其余的IQ（安装确认）和OQ（操作确认）步骤，测试方案由设备生产商提供并预先经使用方确认批准。测试合格后才最终表明设备符合URS和DQ，设备可以由使用方接收进行后续其他的验证工作。
PQ
供应商要提供PQ要求的文件，至少是详尽的说明书以确保其提供设备操作的完整性。
4．交货
4.1 发货
货物应当根据协议发至：中华人民共和国黑龙江省哈尔滨市南岗区学府路109号哈药集团制药总厂
4.2 安装
供应商应当负责在供货范围内的所有的设备和材料的安装
供应商要提供所有要求的机械、管阀件的组装和安装
4.3 文件
项目进行期间和完成之后，乙方必须交付给甲方3份所要求的文档：一份原件和二份复印件，此外，项目完成后将所有文档写入一张光盘交付甲方。这一章所陈述的是最低要求。
序号文件描述解释
1 说明书/操作/维保手
册
提供使用维修手册，应包括中文版本，提供所有设备安装和拆卸手册，
提供故障查找指南，维修手册和安全手册。
2 FS（功能设计标准）提供设计文件，包括方案图纸工艺描述、工艺P&ID图、电气P&ID、机器安装图，机器装配图、项目和质量文件。
3 HDS(硬件设计标准) 无
4 SDS（软件设计标准）无
5 IQ测试方案及验证文
件
提供甲方IQ测试方案，程序文件模本，应由专业资质工程师提供全程
技术服务。
6 OQ测试方案及验证文
件
提供甲方OQ测试方案，程序文件模本，应由专业资质工程师提供全程
技术服务。
7 PQ测试方案及验证文
件
提供甲方PQ测试方案，程序文件模本，应由专业资质工程师提供全程
技术服务。
8 安装图纸所有的安装图、平面图、管道图，清晰标明所有需要的公共设施尺寸和位置，连同对公共设施的要求。
9 硬件清单／所有元件
的供应商
不仅包括较大的元件，还包括阀门、管道、仪器、接头、感应器、自
动器等，及遵循标准。提供完整的配件单，包括所有的机械电器元件
和控制系统。
10 公用设施／电力消耗
单
概述每个系统每个元件的全部消耗、电力。
11 检测证书内容包括元件、零件编号、证书号、仪器校验 . 提供相关证明材料，包括所有和产品接触的金属部分的材料证明、噪音等级证明或检测表。
12 校准证明可追溯原始数据的、按照国家标准仪器和校准程序校正的设备校准证
书。
13 仪器清单
列出所有的仪器、模型、商标、姓名、供应商、标识、目的、测量尺寸／容受性／精确性、校验证书、再校验的频次等
14 电气控制系统提供电器控制文件，包括电路图、连线图、电器设备和装置的分布图、电器设备和测量仪器的使用手册。
15 报警列出系统报警、设定参数值
16 备份系统（如适用）把适用的软件源码转给XXX
17 ISO或其它证书生产商ISO或其它证书的复制和陈述
18 备件清单及报价至少1年的备件清单及报价单，提供供货厂家联系方式，备用和/或者更换部件、耗材的清单及订购信息。
19 相应参照标准列表无
20 系统验证需符合GAMP5和FDA 21CFR part 11（如适用）。并提供满足FDA验证要求的Validation文件材料和服务。
根据新建国际认证车间的标准，所有的验证文件应当提供双语种（中英文）
4.4 服务与培训
由供应商提供本设备的相关服务项目及培训工作。
4.5 付款要求
根据哈药集团制药总厂相关规定，合同生效后，甲方支付合同总价30%的订金，自动完整性测试仪在IQ成功后，甲方支付合同总价的60%，并剩余10%为质保金。
5．修订历史
序号修订内容修订原因执行日期
1 无无年月日
细胞破碎技术——超声波破碎法 摘要： 细胞破碎技术的基本概念及其基本方法，重点介绍了从超声波破碎仪及超声波破碎常见的问题与解决方法上介绍了超声波破碎法。 关键词：细胞破碎方法超声波破碎仪常见问题 正文： 一、细胞破碎阻力 细菌——几乎所有细菌的细胞壁都是由肽聚糖（peptidoglycan）组成，它是难溶性的聚糖链（glycan chain），借助短肽交联而成的网状结构，包围在细胞周围，使细胞具有一定的形状和强度。短肽一般由四或五个胺基酸组成，如L-丙氨醯-D-谷氨醯-L-赖氨醯-D-丙氨酸。而且短肽中常有D-胺基酸与二氨基庚二酸存在。破碎细菌的主要阻力是来自于肽聚糖的网状结构，其网结构的致密程度和强度取决于聚糖链上所存在的肽键的数量和其交联的程度，如果交联程度大，则网结构就致密。 酵母菌——酵母细胞壁的最里层是由葡聚糖的细纤维组成，它构成了细胞壁的刚性骨架，使细胞具有一定的形状，覆盖在细纤维上面的是一层糖蛋白，最外层是甘露聚糖，由1,6一磷酸二酯键共价连接，形成网状结构。在该层的内部，有甘露聚糖-酶的复合物，它可以共价连接到网状结构上，也可以不连接。与细菌细胞壁一样，破碎酵母细胞壁的阻力主要决定于壁结构交联的紧密程度和它的厚度。 真菌——霉菌的细胞壁主要存在三种聚合物，葡聚糖（主要以β-1,3糖苷键连接，某些以β-1,6糖苷键连接），几丁质（以微纤维状态存在）以及糖蛋白。最外层是α-和β-葡聚糖的混合物，第2层是糖蛋白的网状结构，葡聚糖与糖蛋白结合起来，第3层主要是蛋白质，最内层主要是几丁质，几丁质的微纤维嵌入蛋白质结构中。与酵母和细菌的细胞壁一样，真菌细胞壁的强度和聚合物的网状结构有关，不仅如此，它还含有几丁质或纤维素的纤维状结构，所以强度有所提高。 植物细胞——对于已生长结束的植物细胞壁可分为初生壁和次生壁两部分。初生壁是细胞生长期形成的。次生壁是细胞停止生长后，在初生壁内部形成的结构。目前，较流行的初生细胞壁结构是由Lampert等人提出的“经纬”模型，依据这一模型，纤维素的微纤丝以平行于细胞壁平面的方向一层一层敷着在上面，同一层次上的微纤丝平行排列，而不同层次上则排列方向不同，互成一定角度，形成独立的网路，构成了细胞壁的“经”，模型中的“纬”是结构蛋白（富含羟脯氨酸的蛋白），它由细胞质分泌，垂直于细胞壁平面排列，并由异二酪氨酸交联成结构蛋白网，径向的微纤丝网和纬向的结构蛋白网之间又相互交联，构成更复杂的网路系统。半纤维素和果胶等胶体则填充在网路之中，从而使整个细胞壁既具有刚性又具有弹性。在次生壁中，纤维素和半纤维素含量比初生壁增加很多，纤维素的微纤丝排列得更紧密和有规则，而且存在木质素（酚类组分的聚合物）的沉积。因此次生壁的形成提高了细胞壁的坚硬性，使植物细胞具有很高的机械强度。 二、细胞破碎各类方法 目前已发展了多种细胞破碎方法，以便适应不同用途和不同类型的细胞壁破碎。破
大肠杆菌表达外源蛋白，在超声破碎的时候，用含有1%triton-X-100的PBS悬浮，然后超声的效果较好，1%triton-X-100的作用还是很明显的，对其他的一些细菌同样起作用，比如链霉菌。 细菌沉淀直接加样品1buffer，再加5ul的巯基乙醇，混匀，离心，煮沸10min，直接上样，染色脱色步骤如下:将胶放入适量的染色液微波炉里加热1min(下次适当补点醋酸即可),将染色液换成大量的水(自来水即可)在微波炉煮10min 就可以。在表达重组蛋白后超声波破碎细胞，采用冰浴，400w，破2s停1s，但是不一会就产生大量泡沫，影响了破碎功率，pbs和tris缓冲液都是这样，最后都是破碎不完全，而我的目的蛋白就在这些未破碎的细胞中。 1*会产生气泡是因为你的探头位置没放好。探头一定要接近底部，约1cm（我一般是距底部0.5mm）。功率根据仪器不同会有所不同，但你可以观察液面，有波动但不要太剧烈就好。 2*破3S停10S，破个二三十次看看。 3*变幅杆位置摆放也要注意，听声音如果不对的话就要及时调整。另外可以从菌浓度方面考虑。在破碎时试着加大体积,强度最好不要超过60%. 4*尝试超8s停8s,对有些菌体蛋白来说，你的方法很难散热，导致蛋白变性产生气泡，最好停顿时间稍长一些，这种情况多见于包涵体形式的蛋白。 链霉菌（放线菌）超声破碎的，用的方法条件是什么？前处理一般就是配置成一定浓度的菌悬液。 使用超声破碎时采用的具体条件是： (1)取细菌的24 h培养液于5 000 r／min 下离心5 min收集菌体． (2)用pH 7．5的Na2HPO -NaH2PO 缓冲液洗涤3次，再用该缓冲液将菌体配成1：3的菌悬液．置于40 mL 大塑料试管内． (3)将大塑料试管置于冰浴中，采用超声波破碎(功率200 W，1／2”探头，破碎30 s，间歇30 S)． (4)破碎液于12 000 r／min下高速冷冻离心30 min，收集细胞碎片和上清夜． 超声破菌流程与上述基本一致，就是洗涤菌体也可以用预冷的生理盐水或pH8的Tris－HCl，洗涤一次就可以。另外，超声剂量随样品量、菌体改变比较大，功率可以到400－600w，超5s，停5s，冰浴，要加终浓度1 mM的PMSF。为确定合适的超声强度和次数，有必要随时镜检观察菌体是否完全破碎。放线菌属于原核生物系统进化树上的（G＋C）摩尔百分含量（mol％）高的革兰氏阳性菌（Eubacteria）分枝类群，它虽然具有原核生物特有的分子生物学特性，但在其不同类群中，细胞壁的化学组分变化很大。 在做大肠杆菌超声时，采用的是400W，超5停5的方法，效果不错，但是用在链霉菌上，似乎没什么效果。会不会就是由于细胞壁组成差异造成的呢，因为大肠杆菌式属于革兰氏阴性菌的。 再有镜检是检验破碎效果,但是细胞破碎程度和我需要的酶获得之间有正比关系吗？破碎时间长也会影响到酶的活性。所以想问问anaisai战友，你提供的“功率200 W，1／2”探头，破碎30 s，间歇30 S”的条件好像是用于破碎链霉菌孢子的，也可以用于发酵离心后的菌泥吗？如果可以，你破碎的全程时间大概是多少呢？ 如果你需要的是胞内酶，细胞破碎程度和需要的酶获得之间基本上有正比关系。破碎时间长的确会影响到酶的活性。这就需要在最佳的破碎时间和酶活性之间做出判断，最直接的办法是先绘制相关曲线（酶
超声波细胞破碎仪使用注意事项： 1 、切记空载（一定要将超声变幅杆插入样品后才能开机,） 2、变幅杆（超声探头）入水深度：1.5Cm 左右，液面高度最好有30mm以上，探头要居中，不要贴壁。超声波是垂直纵波，插入太深不容易形成对流，影响破碎效率。 3、超声参数设置：设置键好仪器工作参数（具体设置见说明书或来电咨询），对于对温度要求比较敏感的样品（比如细菌）一般外面采用冰浴，实际温度肯定是低于25度，蛋白核酸肯定不会变性。 1）时间：超声时间每次最好不要超过5秒，间隙时间应大于或等于超声时间，以便于热量散发。时间设定应以超声时间短，超声次数多原则，可延长超声机子以及探头的寿命。 2）超声功率：不宜太大，以免样品飞溅或起泡沫，如小于10ml样品容量，功率应在200w以内,选用2mm超声探头，另将面板后面的变幅杆选择开关打到相应挡；10-200ml样品容量的功率在200－400w，选用6mm超声探头，另将面板后面的变幅杆打到相应挡；200ml以上的样品容量功率在300-600w之间，选用10mm超声探头，另将面板后面的变幅杆打到相应挡；（2MM的小探头功率严禁超过350W） 3）容器选择：有多少的样品就选多大的烧杯，这样也是有利样品在超声中对流，提高破碎效率。例如；20ML的处理量最好用20ML的烧杯。 如100ml大肠杆菌样品设置参数：超声5秒／间隙5秒次数70次（总时间为10分钟）。功率300W（仅供参考） 500ML左右的量，功率开到500W-800W左右 4、若样品放在1.5ml的EP管里请一定要将EP管固定好，以防冰浴融化后液面下降导致空载 5、日常保养：用完后用酒精擦洗探头或用清水进行超声！
超声波破碎细胞的常见问题 大肠杆菌表达外源蛋白，在超声破碎的时候，用含有1%triton-X-100的PBS悬浮，然后超声的效果较好，1%triton-X-100的作用还是很明显的，对其他的一些细菌同样起作用，比如链霉菌。 细菌沉淀直接加样品1buffer，再加5ul的巯基乙醇，混匀，离心，煮沸10min，直接上样，染色脱色步骤如下:将胶放入适量的染色液微波炉里加热1min(下次适当补点醋酸即可),将染色液换成大量的水(自来水即可)在微波炉煮10min 就可以。 在表达重组蛋白后超声波破碎细胞，采用冰浴，400w，破2s停1s，但是不一会就产生大量泡沫，影响了破碎功率，pbs和tris缓冲液都是这样，最后都是破碎不完全，而我的目的蛋白就在这些未破碎的细胞中。 1*会产生气泡是因为你的探头位置没放好。探头一定要接近底部，约1cm（我一般是距底部 0.5mm）。功率根据仪器不同会有所不同，但你可以观察液面，有波动但不要太剧烈就好。 2*破3S停10S，破个二三十次看看。 3*变幅杆位置摆放也要注意，听声音如果不对的话就要及时调整。另外可以从菌浓度方面考虑。在破碎时试着加大体积,强度最好不要超过60%. 4*尝试超8s停8s,对有些菌体蛋白来说，你的方法很难散热，导致蛋白变性产生气泡，最好停顿时间稍长一些，这种情况多见于包涵体形式的蛋白。 问：链霉菌（放线菌）超声破碎的，用的方法条件是什么？ 答：前处理一般就是配置成一定浓度的菌悬液。 使用超声破碎时采用的具体条件是： (1)取细菌的24 h培养液于5 000 r／min 下离心5 min收集菌体． (2)用pH 7．5的Na2HPO -NaH2PO 缓冲液洗涤3次，再用该缓冲液将菌体配成1：3的菌悬液．置于40 mL大塑料试管内． (3)将大塑料试管置于冰浴中，采用超声波破碎(功率200 W，1／2”探头，破碎30 s，间歇30 S)． (4)破碎液于12 000 r／min下高速冷冻离心30 min，收集细胞碎片和上清夜． 超声破菌流程与上述基本一致，就是洗涤菌体也可以用预冷的生理盐水或pH8的Tris－HCl，洗涤一次就可以。另外，超声剂量随样品量、菌体改变比较大，功率可以到400－600w，超5s，
XO非接触式超声波细胞裂解系统 主要技术参数： 型号Xianou-1500W Xianou-2500W Xianou-3500W Xianou-5000W 频率19.5-20.5KHz 19.5-20.5KHz 19.5-20.5KHz 19.5-20.5KHz 功率1500W 2500W 3500W 5000W 破碎容量（0.1-2ml）X4孔（0.1-2ml）X8孔（0.1-2ml）X16孔（0.1-2ml）X32孔占空比1-99% 1-99% 1-99% 1-99% 电源 220/110V 50Hz/60Hz 220/110V 50Hz/60Hz 220/110V 50Hz/60Hz 220/110V 50Hz/60Hz
非接触式超声波细胞裂解系统简介 非接触式超声波细胞裂解系统相比传统超声方法而言，该系统适用于具有特殊需要的反应体系，同传统接触式超声法相比在安全性、精密度、反应效率、反应边界条件和反应均匀度层面均表现突出的优势，作为样品前处理的新方法在分子生物学领域掀起了仪器行业新的革命。 该仪器用途广泛，主要针对细胞的破碎、裂解和细胞内容物颗粒的释放，以科研院所研究为例，本仪器尤其适用于腺病毒的微粒释放，制备高效价的重组腺病毒，还可以制备病毒DNA，DNA终端蛋白化合物，同时是土壤样品制备的理想仪器。已经成为CHIP（染色质免疫共沉淀）研究平台不可缺少的标准化工具。 特点： 1．无气雾浮质产生-增强生物安全性，用于无菌操作（如：分支杆菌，乙肝病毒，甲肝病毒，流感（包括H1N1），非典病毒ＳＡＲＳ)； 2．避免了样品交叉污染；非接触式打断染色体、破碎细胞； 3．消除了传统探头的手持或固定带来的操作负担，同时带有消音压紧装置； 4．可有效阻止样品泡沫的产生； 5．中文液晶显示，功率可以微调，击进方式可每次5W微调； 6．采用周期性的脉冲方式破碎细胞，脉冲的启动和终止时间可调，精确度为±0.1秒；7．可处理多种样品，样品处理范围广泛； 8．可使用标准地可抛弃式容器(PCR tubes Eppendorf, 1.5~50ml Corning/Falcon tubes)；9．可用于处理微量样品；最少至5uL； 10．根据不同仪器型号，可一次性处理4~32个样品； 11．采用自动、连续旋转离心管，使超声波的能量分布更为均匀，数据实时显示与记录,且可以重复； 12. 带冷却水循环槽，可选配低温冷却液循环机，避免了破碎过程中温度过高，影响反应的活力（如病毒的感染力）。 13.采用无损、低噪音、高性能、高品质材料的超声发生系统。 非接触式超声波细胞裂解系统优越性： 传统超声波破碎仪（Probe Sonicator），探头与样品直接接触，有金属离子污染，一次只能处理一个样品，实验周期长；对于多个样品，需要重复使用同一探头，容易造成样品交叉污染。由于每次探头插入样品的深度不用，每次超声的能量分布也不尽相同，影响实验结果的重复性和准确性。此外，由于不能采用封闭系统，在超声过程中产生的气雾或者泡沫会扩散到环境中，造成潜在的生物危险。XO非接触式超声波细胞裂解系统，一次可同时检测4-32个样品，实验效率高；无需更换操作探头，各样品均在单独的全封闭试管中，避免交叉污染；采用控温水浴，超声波能量分布均匀，超声作用完全；超声参数设置灵活，实验步骤标准化，实验重复性好，结果可靠性高。 总之，该设备主要的优点有以下： （1）多样品同时处理； （2）克服了传统法易造成污染的缺陷； （3）密闭式样品处理, 不产生感染性飞雾； （4）短时间内可获得最大的样品量；
大肠杆菌表达重组蛋白的超声破碎及纯化 一可溶性蛋白的纯化 （一）菌体的破碎 1. 仪器与材料：-80℃冰箱；超声波细胞破碎仪；50mM PBS或50mM Tris-HCl pH 7.5；50ml 离心管；冷冻高速离心机 2. 方法 2.1反复冻融 2.1.1收集菌液500ml，等分10份，4000 r/min 4℃离心15min，弃上清。 2.1.2 菌体沉淀中加入相同菌液体积的50mM PBS 或50mM Tris-HCl（选择使蛋白稳定的缓冲液和pH）重悬洗涤一次。 2.1.3 然后按原菌液体积的1/4加入缓冲液重悬菌体，并加入蛋白酶抑制剂PMSF 和EDTA(带His标签不加)，PMSF终浓度为100μg/ml, EDTA的终浓度为。取20μl重悬菌液进行电泳，检测蛋白表达的情况（是否表达，是可溶性表达还是包涵体表达）。 2.1.4 将菌液（经检测有表达）在-80度冰冻，室温融解，反复几次（反复冻融三次），由于细胞内冰粒形成和剩余细胞液的盐浓度增高引起溶胀，使细胞结构破碎。 2.2 超声波处理(对超声波及热敏感的蛋白慎用) 2.2.1 将反复冻融的菌液（必要时可加入1mg/ml 溶菌酶，缓冲液pH＞8.0，加入后需静置20min），进行超声破碎，超声条件：400W，工作5秒，间隔5秒，重复一定次数，（根据我们的仪器找出一个比较好的工作条件）。直至菌体溶液变清澈为止，大约花费时间。 2.2.2 取少量经超声破碎后的菌液，10000rpm离心10分钟，分别对上清和沉淀进行检测，并用全菌作为阳性对照，检测菌体破碎程度及目标条带占总蛋白的含量。 注意事项： （1）超声破碎具体条件可根据实验情况而定，要掌握好功率和每次超声时间，降低蛋白被降解的可能。 （2）功率大时，每次超声时间可缩短，不能让温度升高，应保持在4度左右，超声时保持冰浴。 （3）菌体破碎后总蛋白浓度的测定可用Bradford 法或者紫外吸收法。 （4）可通过SDS-PAGE 电泳观察菌体破碎程度及目标条带占总蛋白的含量。 二包涵体蛋白的纯化 1 菌体的破碎（加溶菌酶处理包涵体效果可能不好，包涵体中总是有残留的溶菌酶，你看看有没有不加溶菌酶的，这个先保留好了） 1.1仪器与材料：超声波细胞破碎仪；20mM PBS或20mM Tris-HCl pH 7.5；裂解液buffer A；溶菌酶10mg/ml；50ml ，15ml离心管；冷冻离心机 1.2 方法 (1) 收集菌液500ml，等分10份，4000 r/min 4℃离心15min，弃上清。
Autotune 系列高强度超声波细胞破碎仪使用说明及注意事项 800瓦特机型 一、安全注意事项: -确保超声波细胞破碎仪经过三芯插头座妥善接地。 -电源部分存在高电压，非合格技术人员不得打开机壳。 -打开机壳进行维修前拔下电源线以防止触电。 -电源部分未连接变换器时不得接通电源开关。 -探头上不得安装异物。 -除样品外不得让任何物品接触振动的探头 -不得让微端头或者说延长头在空气中振动超过10秒钟以上。 -使用微端头时，一定保持幅度在40以下（目前所装为微端头），超过40会使微端头和延长杆断裂。 -不要在螺纹端没有安装端头、延长头或者微端头的情况下开动探头。 -超过100°C的温度工作时用风冷冷却变换器。 -操作超声波细胞破碎仪时建议使用隔音罩（已配备）。 -不得随意拆卸探头、端头等机械部件，以免影响其连接造成电源控制部分失效，此外，机械部件连接不牢有可能造成共振频率的变化，影响破碎效果。-固体易于被超声波排开，应当放在大得足以容下探头，却小得足以限制样品移动的容器中。 -在每次使用前，把探头端头放在水或者酒精中并且通电源数秒以去除残余物。
按键、控制件、指示件和连接件的功能
使用步骤： 1.确认ON/OFF 电源开关置于OFF 。 2.把电源线插进电源插座。 3.检查变换器和探头或者直微端头配合表面的清洁度，以及螺杆螺孔的清洁度。检查螺杆是否拧紧。 4.用通/断开关接通电源。开关会发光并且液晶显示屏显示超声波细胞破碎仪的功率，注意事项及以下控制参数。 5. 把探头浸入到样品中约2英寸（5厘米）。如果使用微端头，则把探头浸入到样品中约1/2英寸（1厘米）。（注意：应当把探头浸入得足够深以防止空气注入样品中，并且防止气溶现象和泡沫现象。） 6. AMPL.幅度是操作该超声波细胞破碎仪时必须设定的唯一参照。对于连续工作，其它两个控制参数 TIME 和PULSE 不需要设定。 AMPL.显示由AMPLITUDE 控制钮设定的，意为最大幅度的百分比，例如 75%，按需要设定幅度。但是在使用微端头时须注意，不得超过40%。 这时液晶显示屏显示 7. 施加超声波能量请按停止施加超声波能量时请按 8. 需要设定破碎时间TIME 和PULSE 的请参阅详细说明书。 9. 用毕，把探头端头放在水或者酒精中并且通电源数秒以去除残余物。
实验八超声波细胞破碎机在生物工程中的应用 一、实验目的 学习超声波细胞破碎仪在不同细胞破碎中的应用。 二、原理 超声波细胞破碎仪就是将电能通过换能器转换为声能，这种能量通过液体介质而变成一个个密集的小气泡，这些小气泡迅速炸裂，产生的象小炸弹一样的能量，从而起到破碎细胞等物质的作用。 三、主要结构 包括超声波发生器、换能器和隔音箱等。 四、工作参数 包括超声时间、间隙时间、超声功率、保护温度等。 五、细胞超声破碎具体应用 1、大肠杆菌的超声破碎（革兰氏阴性菌） 大肠杆菌发酵后，经过离心收集菌体，菌体用磷酸盐缓冲液PBS按1：10的比例进行重悬菌体，冰浴。设定超声破碎仪的参数，超声功率700W，超声时间5s，间隙时间5s，全程时间25min，保护温度20℃，超声结束后，离心，取上清或沉淀进行后续实验。 2、芽孢杆菌的超声破碎（革兰氏阳性菌） 一般在缓冲液中加入溶菌酶以促进细胞的裂解。 3、酵母菌的超声破碎（大肠杆菌的超声破碎方法对酵母处理效果不好） 超声功率900W，超声时间5s，间隔时间5s，全程时间20-30分钟。操作时先取1克左右（湿重）离心收集的菌体，加10毫升裂解液（强裂解液或蜗牛酶），混匀后即可开始。超声结束后，离心，取上清进行后续实验。 六、超声波破碎仪的使用注意事项 1 、切记空载（一定要将超声变幅杆插入样品后才能开机）。 2、变幅杆（超声探头）入水深度：1.5cm左右，液面高度最好有30mm以上，探头要居中，不要贴壁。超声波是垂直纵波，插入太深不容易形成对流，影响破碎效率。 3、超声参数设置：设置键好仪器工作参数，对于对温度要求比较敏感的样品（比如细菌）一般外面采用冰浴，实际温度肯定是低于25度，蛋白核酸肯定不会变性。 4、时间：超声时间每次最好不要超过5秒，间隙时间应大于或等于超声时间，以便于热量散发。时间设定应以超声时间短，超声次数多为原则，可延长超声机子以及探头的寿命。 七、课后思考； 1、为什么革兰氏阴性菌的超声破碎效果比阳性菌要明显，而酵母菌破碎效果不明显呢？ 答：因为阴性菌的细胞壁比阳性菌的薄，所以容易进行细胞破碎，其效果就好；但是，酵母菌是真菌，因为其细胞壁和原生质膜令酵母菌在超声波破碎中的效果很不明显。 2、细菌超声破碎加入溶菌酶的目的是什么？超声破碎时为什么要冰浴？
欧诺仪器 超声波细胞破碎仪使用注意事项： 1 、切记空载（一定要将超声变幅杆插入样品后才能开机,） 2、变幅杆（超声探头）入水深度：1.5Cm 左右，液面高度最好有30mm以上，探头要居中，不要贴壁。超声波是垂直纵波，插入太深不容易形成对流，影响破碎效率。 3、超声参数设置：设置键好仪器工作参数（具体设置见说明书或来电咨询），对于对温度要求比较敏感的样品（比如细菌）一般外面采用冰浴，实际温度肯定是低于25度，蛋白核酸肯定不会变性。 1）时间：超声时间每次最好不要超过5秒，间隙时间应大于或等于超声时间，以便于热量散发。时间设定应以超声时间短，超声次数多原则，可延长超声机子以及探头的寿命。 2）超声功率：不宜太大，以免样品飞溅或起泡沫，如小于10ml样品容量，功率应在200w以内,选用2mm超声探头，另将面板后面的变幅杆选择开关打到相应挡；10-200ml样品容量的功率在200－400w，选用6mm超声探头，另将面板后面的变幅杆打到相应挡；200ml以上的样品容量功率在300-600w之间，选用10mm超声探头，另将面板后面的变幅杆打到相应挡；（2MM的小探头功率严禁超过350W） 3）容器选择：有多少的样品就选多大的烧杯，这样也是有利样品在超声中对流，提高破碎效率。例如；20ML 的处理量最好用20ML的烧杯。如100ml大肠杆菌样品设置参数：超声5秒／间隙5秒次数70次（总时间为10分钟）。功率300W（仅供参考）500ML左右的量，功率开到500W-800W左右 4、若样品放在1.5ml的EP管里请一定要将EP管固定好，以防冰浴融化后液面下降导致空载 5、日常保养：用完后用酒精擦洗探头或用清水进行超声. 创新优质超值诚信
超声破碎细胞问题汇总 2008年12月11日星期四 15:31 大肠杆菌表达外源蛋白，在超声破碎的时候，用含有1%triton-X-100的PBS悬浮，然后超声的效果较好，1%triton-X-100的作用还是很明显的，对其他的一些细菌同样起作用，比如链霉菌。 细菌沉淀直接加样品1buffer，再加5ul的巯基乙醇，混匀，离心，煮沸10min，直接上样，染色脱色步骤如下:将胶放入适量的染色液微波炉里加热1min(下次适当补点醋酸即可),将染色液换成大量的水(自来水即可)在微波炉煮10min 就可以. 在表达重组蛋白后超声波破碎细胞，采用冰浴，400w，破2s停1s，但是不一会就产生大量泡沫，影响了破碎功率，pbs和tris缓冲液都是这样，最后都是破碎不完全，而我的目的蛋白就在这些未破碎的细胞中。？ 1*会产生气泡是因为你的探头位置没放好。探头一定要接近底部，约1cm（我一般是距底部0.5mm）。功率根据仪器不同会有所不同，但你可以观察液面，有波动但不要太剧烈就好。 2*破3S停10S，破个二三十次看看。 3*变幅杆位置摆放也要注意，听声音如果不对的话就要及时调整。另外可以从菌浓度方面考虑。在破碎时试着加大体积,强度最好不要超过60%. 4*尝试超8s停8s,对有些菌体蛋白来说，你的方法很难散热，导致蛋白变性产生气泡，最好停顿时间稍长一些，这种情况多见于包涵体形式的蛋白。 链霉菌（放线菌）超声破碎的，用的方法条件是什么？ 前处理一般就是配置成一定浓度的菌悬液。 使用超声破碎时采用的具体条件是： (1)取细菌的24 h培养液于5 000 r／min 下离心5 min收集菌体．(2)用pH 7．5的Na2HPO -NaH2PO 缓冲液洗涤3次，再用该缓冲液将菌体配成1：3的菌悬液．置于40 mL大塑料试管内．(3)将大塑料试管置于冰浴中，采用超声波破碎(功率200 W，1／2”探头，破碎30 s，间歇30 S)．(4)破碎液于12 000 r／min下高速冷冻离心30 min，收集细胞碎片和上清夜． 超声破菌流程与上述基本一致，就是洗涤菌体也可以用预冷的生理盐水或pH8的Tris－HCl，洗涤一次就可以。另外，超声剂量随样品量、菌体改变比较大，功率可以到400－600w，超5s，停5s，冰浴，要加终浓度1 mM的PMSF。为确定合适的超声强度和次数，有必要随时镜检观察菌体是否完全破碎。 放线菌属于原核生物系统进化树上的（G＋C）摩尔百分含量（mol％）高的革兰氏阳性菌（Eubacteria）分枝类群，它虽然具有原核生物特有的分子生物学特性，但在其不同类群中，细胞壁的化学组分变化很大。 在做大肠杆菌超声时，采用的是400W，超5停5的方法，效果不错，但是用在链霉菌上，似乎没什么效果。会不会就是由于细胞壁组成差异造成的呢，因为大肠杆菌式属于革兰氏阴性菌的。
1.目的 规范超声波细胞粉碎仪的使用、维护与保养。 2.范围 3.职责 使用人员对本规程的实施负责，部门负责人监督实施。 4.规程 4.1安装 4.1.1搬运时应从底部抬起，倾斜面不可大于45度，轻搬轻放。 4.1.2将超声波发生器和隔音箱放在平稳，无振动的实验台面上，将变幅杆从隔音箱上部的 孔内插入，轻轻放下，接通电源。 4.2使用 4.2.1按样品量的多少选择适当的容器（试管或各种烧杯及离心管），固定或按放好后，调 节振动系统位置，使变幅杆末端插入样品液面10-15mm并使其在容器的中心位置，不得让变幅杆与容器相接触。变幅杆末端离容器底部一般应大于30mm。 4.2.2打开超声波发生器背后右下方的电源键，超声波发生器的液晶显示屏上会出现不停闪 烁的变幅杆参数，按下∧或∨键，设定所需变幅大小，按下确定键。 4.2.3进入设置界面，变幅杆参数不停闪烁，按下确定键即可。按下“设置键”，“时间” 参数会不停闪烁，按下∧或∨键，设置所需时间。 4.2.4时间设置好后，再按“设置键”，可以设置“超声开”的时间，按下∧或∨键，设置 所需时间。 4.2.5再按“设置键”，可以设置“超声关”的时间，按下∧或∨键，设置所需时间。4.2.6再按“设置键”，可以设置“功率”大小，按下∧或∨键，设置所需功率。 4.2.7按下键，超声开始。 4.3清洁、维护与保养 4.3.1清洁： 4.3.1.1清洁前断开电源。 4.3.1.2用湿温软布擦超声波细胞破碎仪的内外表面；污脏严重时，可用洗涤食具用的中性洗 涤剂擦拭，然后用洗净的软布擦净水渍。 4.3.1.3每次超声破碎完样品后，用20%的乙醇清洗变幅杆探头，擦干净。 4.4注意事项 4.4.1严禁在变幅杆未插入液体内（空载）时开机，否则会损坏换能器或超声波发生器。4.4.2对各种细胞量的多少，时间长短，功率大小，有待用户根据各种不同介质摸索确定， 选取最佳值。 4.4.3用一定时间后变幅杆末端会被空化腐蚀而发毛，可用油石或细什景锉刀锉平，否则会 影响工作效果。
使用说明： 1.旋转功率调节旋钮以调节输出功率大小；间隙时间和超声时间由超声时间设定旋钮 来调节，总工作时间由总时间设定置数码开关来设置。设置好后，按工作复位键进入超声工作； 2.按样品量的多少选择适当的容器（试管或各种烧杯及离心管），固定或安放好后，调 节振动系统位置，使变幅杆末端插入样品液面10-15mm并使其在容器的中心位置，不得让变幅杆与容器相接触。变幅杆末端离容器一般应大于30mm。量少时，功率开得较小的情况下可小于30mm； 3.将功率调节旋钮向逆时针方向转至最小位置，工作时间、超声时间和间隙时间调至 所需的合适时间（一般工作时间不宜开的过长，且间隙时间应大于工作时间）。上述准备就绪即可按电源开关开机，再按一次保护复位按钮及工作复位按钮，待设定的间隙时间过后即可进入振荡状态，显示屏开始显示工作时间，将功率调节旋钮慢慢向顺时针方向转动，调至所需的功率位置上，以达到理想的工作效果，待设定的工作时间过后，时间显示窗所设定的总时间。仪器处于停振状态，如需重复上述实验，可按工作复位键，如不需要重复，应关机并切断电源。 4.如在工作是保护指示灯亮（在保护复位键上），说明仪器的功率开得过大而进入保护 状态。减少功率，按一次保护复位键及工作复位键，即开始工作； 5.调换探头时，按探头的规格，相应调节变幅杆选择开关（机箱背面）；
注意事项 1.严禁在变幅杆未插入液体内（空载）时开机，否则会损坏换能器或超声波发生器； 2.换能器在支架上要固定牢靠，防止从立柱上突然下滑，变幅杆末端切勿碰撞，防止变形 或损伤； 3.对各种细胞量的多少、时间长短和功率大小，有待用户根据各种不同介质摸索确定，选 取最佳值； 4.用一定时间后变幅杆末端会被空化腐蚀而发毛，可用油石或细什景锉刀锉平，否则会影 响工作效果； 5.功率表显示的数值与电压、变幅杆插入页面深度及负载（被破碎样品的浓度、稠度）有 关，电源电压低于220V，变幅杆插入液面深，负载浓度太浓，显示数值可能要稍小；反之稍高。此数据为模拟参数，它的大小不影响超声波发射的实际功率； 6.本机不需预热，使用应有良好的接地； 7.在超声破碎时，由于超声波在液体中起空化效应，使液体温度会很快升高，用户对各种 细胞的温度要多加注意，建议采用短时间（每次不超过5秒）的多次破碎，同时可外加冰浴冷却； 8.本机采用无工频变压器的开关电源，在打开发生器机壳切勿乱摸，以防触电； 9.本机安放在干燥处，不可放置于潮湿、高温、灰尘较多及有腐蚀性气体等地方； 10.实验表明：短时间的多次工作比连续长时间的效果要好，为防止液体发热，可设定较长 的间隙时间。另外，不间断长时间工作容易造成空载，缩短仪器的使用寿命。 6. . . 7. 1.
细胞破碎-------综述 摘要：细胞破碎，细胞破碎技术是指利用外力破坏细胞膜和细胞壁，使细胞内容物包括目的产物成分释放出来的技术。细胞破碎分离提纯某一种蛋白质时，首先要把蛋白质从组织或细胞中释放出来并保持原来的天然状态，不丧失活性。所以要采用适当的方法将组织和细胞破碎。不同的生物体或同一生物体的不同部位的组织，其细胞破碎的难易不一，使用的方法也不相同，如动物脏器的细胞膜较脆弱，容易破碎，植物和微生物由于具有较坚固的纤维素、半纤维素组成的细胞壁 细胞破碎方法有：高压匀浆破碎法振荡珠击破碎法高速搅拌珠研磨破碎法超声波破碎法渗透压冲击破碎法酶溶破碎法等等，这篇综述主要讲的是超声波破碎法。 关键词：细胞破碎超声波破碎法原理应用超声波细胞破碎仪又叫超声波细胞粉碎仪是一种利用强超声在液体中产生空化效应，对物质进行超声处理的多功能、多用途的仪器。能用于多种动植物细胞、病毒细胞的破碎，同时超声波细胞破碎仪可用来乳化、分离、匀化、提取、消泡、清洗及加速化学反应等。 仪器原理： 超声波细胞破碎仪的原理并不是太神秘、太复杂。简单说就是将电能通过换能器转换为声能，这种能量通过液体介质而变成一个个密集的小气泡，这些小气泡迅速炸裂，产生的象小炸弹一样的能量，从而起到破碎细胞等物质的作用。超声波是物质介质中的一种弹性机械波，它是一种波动形式，因此它可以用于探测人体的生理及病理信息，既诊断超声。同时，它又是一种能量形式，当达到一定剂量的超声在生物体内传播时，通过它们之间的相互作用,能引起生物体的功能和结构发生变化，即超声生物效应。超声对细胞的作用主要有热效应，空化效应和机械效应。热效应是当超声在介质中传播时，摩擦力阻碍了由超声引起的分子震动，使部分能量转化为局部高热（42-43℃），因为正常组织的临界致死温度为45.7℃，而肿瘤组织比正常组织敏感性高，故在此温度下肿瘤细胞的代谢发生障碍，DNA、RNA、蛋白质合成受到影响，从而杀伤癌细胞而正常组织不受影响。空化效应是在超声照射下，生物体内形成空泡，随着空泡震动和其猛烈的聚爆而产生出机械剪切压力和动荡，使肿瘤出血、组织瓦解以致坏死。另外，空化泡破裂时产生瞬时高温（约5000℃）、高压（可达500×104Pa），可使水蒸气热解离产生.OH自由基和.H原子，由.OH自由基和.H原子引起的氧化还原反应可导致多聚物降解、酶失活、脂质过氧化和细胞杀伤。机械效应是超声的原发效应，超声波在传播过程中介质质点交替地压缩与伸张构成了压力变化，引起细胞结构损伤。杀伤作用的强弱与超声的频率和强度密切相关。 结构特点： ●超声探头采用进口钛合金材质 ●高能效换能器结构图片[1] ●振幅自动调节，在不同的负载状况时振幅保持一致 ●设置超声间歇时间
Bioruptor等超声破碎仪市场解析 目前在超声波破碎仪市场共有两种类型，一为传统的探头型接触式超声波破碎仪，如宁波新芝、必能信、Sonics产品都是常规的接触式细胞破碎仪。对于高通量测序和ChIP实验其中最关键步骤即为打断基因组或是染色质DNA，而且要求断裂的DNA片段大小的均一性、重复性、样本通量及样本质量都极高。 常规的探头型的接触式细胞破碎仪因为以下的缺点，总难以达到高通量测序实验的要求，导致实验失败的原因如下： 1.样本DNA破碎的片段大小很难掌控，样本片段的均一性与重复性很差，易产生大面积 无效的或是不合测序实验需求的DNA片段，让测序结果不易判读或是浪费。 2.超声波能量传导不均匀，一次只能处理一个样本，操作周期长，探头直接接触测序样本 时，样本DNA易局部受热导致双链解离成单链，造成样本降解或是错配，大大影响测序结果。 3.无法处理微量测序样本，尤其难取得或是来自于病人检体等珍贵小量样本(低于50ul)。 4.探头型超声波破碎仪往往造成大量样本的损失，又因为需开盖操作，如果样本属于感染 性样本，所产生的感染性飞雾，易造成操作人员或实验环境潜在的生物危险，或是造成样本间的相互污染，对样本质量要求极高与灵敏度极佳的测序实验而言，是一大风险。 除了上述传统的探头式超声仪外，另一种是非接触式超声波破碎仪，代表品牌有比利Diagenode的非接触式细胞破碎仪以及美国品牌Covaris或Qsonica品牌非接触式超声波破碎仪，以及中国的宁波新芝。 其中Covaris和Qsonica与宁波新芝品牌的其缺点如下： Covaris价格高昂，通量低，一台仪器动辄数十万人民币价格惊人；而且一次仅能处理一个测序样本，对需处理样本数量众多的实验室而言，非常耗时；同时当在优化样本的超声条件时，也需损耗相当长的时间摸索条件，为操作人员处理测序样本时带来巨大的不便；很重要的是需专用玻璃管耗材，一支成本约需6美元，长期使用下来，实验室开销非常大。Qsonica与宁波新芝是将传统的超声探头塔上一块金属板模拟成非接触式超声仪，其本质仍属于接触式超声仪，所以其效率低寿命短。在Qsonica官方网站上发表的DNA片断化超声参数可以了解到，将DNA片断化至200~300bp竟须花费几十分钟，除了极端费时之外，过长的超声时间会严重影响DNA的质量，得到的测序数据不正确性高。 比利时Diagenode生产的Bioruptor接触式细胞破碎仪正是针对高通量测序实验应运而生的，Bioruptor Pico更是Diagenode厂家中最高端的机型，是专为高通量测序量身订制的仪器。其独特的ACT( Adaptive Cavitation Technology) 聚焦超声技术以及高超声效能，能快速且温和地将DNA片段化到最适合进行测序实验的范围，完全符合市面上各品牌高通量测序仪如illumina、Life technologies等品牌的需求，超高DNA双链完整率以及精准的超声结果。 仪器中常规标配1.5ml适配器，可同时处理6个样本，适配器中每个样本的盛装体积以及浓度，更是特别针对ChIP或ChIP-seq技术特别优化过的，与实验室所需的上样量与上样浓度完全衔接，符合实验室需求。 自带电磁阀式冷循环机，与超声仪主机交错启动，可保在处理测序DNA或chromatin样本
1、目的 规范实验室超声波细胞破碎仪的操作维护方法，保证实验检测的有效性。 2、适用范围： 适用于实验室超声波细胞破碎仪的使用和维护。 3、职责 分子生物学实验室PCR检测岗位人员必须熟练掌握超声波细胞破碎仪的使用方法，并定期做好维护保养和状态检查工作。 4、作业程序 4.1操作规程 4.1.1确认ON/OFF电源开关置于ON。 4.1.2把电源线插进电源插座。 4.1.3如果使用选配的脚踏开关，把插头插入后面板上的插座中。确认插头插牢和插到位。 4.1.4检查变换器和探头或者直微端头配合表面的清洁度，以及螺杆螺孔的清洁度。检查螺杆是否拧紧。 4.1.5用手把探头或者直微端头组件（由连接器和直端头组成）组装到变换器上，用随机附送的搬手拧牢靠 4.1.6向探头上固定可更换端头、延长器或者锥形的微端头使用活搬子或者花搬子. 4.1.7把变换器电缆连接到电源单元上。 4.1.8把变换器、探头组件安装在实验室支架上。只把夹具固定到1/2英寸（63毫米）直径的变换器壳上。不要把夹具固定到变换器/探头组件的其它部分上 4.2 维护保养规程 4.2.1如果探头必须与固体样品接触，请使用切成70毫米长的20毫米直径不锈钢管。不要用玻璃管. 4.2.2微端头只能与液接触，不得与其它物体接触 4.2.3在每次使用前，把探头端头放在水或者酒精中并且通电源数秒以去除
残余物 4.2.4探头可以用高压蒸锅消毒，也可以浸入开水中消毒，也可以用消毒灭菌剂消毒. 4.2.5不得把锥形微端头用在连接器上。没有连接器不要用直端头。在处理低表面张力液体时不得使用带螺纹端和可更换的端头的探头.
超声波细胞破碎仪的用途 1、超声波提取生物纳米(超声波化学合成法) 超声波化学反应中，起关键作用的是声波的空化效应，在超声波的辐照过程中，在液体里将发生空化气泡的形成，长大和崩灭，当空化气泡崩灭时产 生一个覆盖着的强压力脉冲，产生许多独特的性质，例如产生高达5000K的高温，大于200Mpa的压力，这就是超声波化学合成的能量来源，利用这些能 量能在一些特殊粉末表面合成出纳米粒子。 2、超声波制药 (1)注射用医药物质的分散——将磷脂类与胆固醇混合用适当方法与药物混合在水溶液中，经超声分散，可以得到更小粒子供静脉注 射。 (2)草药提取——利用超声分散破坏植物组织，加速溶剂穿透组织作用，提高中草药有效成分提取率。如金鸡纳树皮中全部生物碱用一般方法侵出需 5小时以上，采用超声分散只要半小时即可完成。
(3)制备混悬剂——在超声空化和强烈搅拌下，将一种固体药物分散在含有表面活性剂的水溶液中，可以形成1um左右口服或静脉注射混悬剂。例“ 静注喜树碱混悬剂”“肝脏造影剂”、“硫酸钡混悬剂”。 (4) 制备疫苗——将细胞或病菌借助于超声分散将其杀死以后，再用适当方法制成疫苗。 3、超声波对化妆品的分散 为了更进一步提取药物精华和粒子微细化，并节约生产成本，达到分散、乳化效果，使化妆品更深入渗透到肌肤里层，让肌肤很好的吸收，发挥药物 的效力和作用，采用超声波乳化可达到非常理想的效果。采用超声分散，则不需要使用乳化剂，就能使蜡及石蜡乳化、化妆水等油的微粒子分散。石 腊在水中分散的粒子直径可达1um以下。 4、超声波对酒的醇化—催陈技术 一瓶美酒以它的酒味醇厚，绵软柔和、芳香浓郁为人青睐，人们常用陈年老酒来形容酒的珍贵，一瓶上世纪的陈酒，标价几万元，其价格的含义在于
UCD-200/300/400/600 专用于CHIP实验的超声波细胞破碎仪名称 产品名称：Bioruptor非接触式全自动超声波破碎仪 发布时间：比利时产地： 市场价格：面议，16000欧元元 产品简介 由比利时Diagenode 公司开发生产的Bioruptor?非接触式全自动超声破碎仪可获得传统超声方法无可 比拟的质量、效率和安全性。这一创新已在欧美广泛应用，被上百篇权威杂志引用，逐渐成为ChIP (染色 质免疫共沉淀) 研究平台不可缺少的标准化工具。 产品详细信息 Biorupto r?非接触式全自动超声破碎仪 由比利时Diagenode 公司开发生产的Bioruptor?非接触式全自动超声破碎仪可获得传统超声方法无可 比拟的质量、效率和安全性。这一创新已在欧美广泛应用，被上百篇权威杂志引用，逐渐成为ChIP (染色 质免疫共沉淀) 研究平台不可缺少的标准化工具。 Bioruptor?的优越性 传统的探头超声波破碎仪(Probe Sonicator) ，探头与样品直接接触，一次只能处理一个样品，实验周期长；对于多个样品，需要重复使用同一探头，容易造成样品交叉污染。由于每次探头插入样品的深度 不同，每次超声的能量分布也不尽相同，影响实验结果的重复性和准确性。此外，由于不能采用封闭系统， 在超声过程中产生的气雾或者泡沫会扩散到环境中，造成潜在的生物危险。 Bioruptor?非接触式全自动超声破碎仪，一次可同时检测 6 至12 个样品，实验效率高；无需频繁操作探头，各样品均在单独的全封闭试管中，避免交叉污染；采用 4 ℃水浴超声波，能量分布均匀，超 声作用完全；超声参数设置灵活，实验步骤标准化，实验重复性好，结果可靠性高。 Bioruptor?的巧妙工作原理 Bioruptor?采用在水槽底部安装超声波发生装置的设计( Fig.1 )，传统的探头超声波破碎仪，超声波引起的微流动现象只能在靠近探头的区域出现，而Bioruptor?由于在水槽底部安装了超声波发生器，使水槽 完全处于超声波的作用范围内，超声作用分布广泛而均衡，降低了泡沫的形成。在实验过程中，Bioruptor? 自动的连续旋转离心管则使超声波的能量分布更为均匀。 Bioruptor?在实验过程中，样品分别置于独立的全密封离心管中，样本之间不存在任何交叉污染，避免了气雾的传播，增强了实验的生物安全性。对于15ml 离心管的较大体系，Bioruptor?还设计了专利 的共振系统，通过插入离心管中与样品直接接触的金属棒传导超声波。这支金属棒能够反映水槽底部超声 发生装置产生的超声波，增强样品的超声破碎效果，但是与传统的探头不同，金属棒不直接产生超声波， 不会引起腐蚀等问题。 实验效率高、结果可靠、重复性佳 Bioruptor?使实验效率显著提高，一次实验可同时处理6-12 个样品。针对不同体积的样品，Bioruptor?可选择不同的适配器( adaptors )以配合相应的离心管。目前可供选择的离心管包括Eppendorf