参考答案
绪论
1. 你对现代分子生物学的含义和包括的研究范围是怎么理解的？
提示：分子生物学是从分子水平研究生命本质的一门新兴的学科，是研究核酸、蛋白质等生物大分子的结构与功能，并从分子水平阐述蛋白质与核酸、蛋白与蛋白之间相互作用的关系及其基因表达调控机理的学科。
2. 分子生物学发展前景如何？
提示：分子生物学是当前生命科学中发展最快并正与其他学科广泛交叉、渗透的重要前沿领域。分子生物学是一个非常年轻的学科，但是有丰富的历史，并且以惊人的速度发展。分子生物学的发展速度和其强有力的技术使很多学者认为它是一场革命。今后几十年药物和农业的发展很大程度上依赖于分子生物学家对基因的操纵，这场革命将涉及到每个人的生活。所以我们正在从事一项尖端的有重要意义的研究。哈佛大学的F.H.Westheimer教授说到：“后四十年的知识革命可能发生在生物学领域，今天如果有人对分子生物学一无所知，简直令人无法想象。”
3、谈一谈你对人类基因组计划完成的社会意义和科学意义的认识？
提示：人类基因组计划在科学上的目的，是测定组成人类基因组的30亿个核苷酸的序列。从而奠定阐明人类所有基因的结构与功能，解读人类的遗传信息，揭开人类奥秘的基础。由于生命物质的一致性与生物进化的连续性，这就意味着揭开生命最终奥秘的关键，也就是人类基因组计划的所有理论、策略与技术，是在研究人类这一最为高级、最为复杂的生物系统中形成的。
规模化就是随着人类基因组计划的启动而诞生，随着人类基因组计划的进展成功而发展的“基因组学”。生物学家第一次从整个基因组的规模去认识、去研究，而不是大家分头一个一个去发现，基因研究将是基因组学区别于基因组(genetics)与所有涉及基因的学科的主要地方。基因组规模也改变了经典的实验室规模，改变了原有的实验方式，这也许是“国际人类基因组计划”只有6个正式成员国与16个中心的原因之一。
生物的序列化即生命科学以序列为基础。这是新时代的生命科学区别于以前的生物学的最主要的特点。随着人类基因组序列图的最终完成，SNP(单核苷酸多态性，即序列差异)的发现以及比较基因组学古代DNA、“食物基因组计划”、“病原与环境基因组计划”(主要是致命致病学)以及与之有关的人类易感性有关序列的推进，有科学、经济、医学意义的主要物种的基因组序列图都将问世。我们从序列中得到的信息，已经比到现在为止的所有生物研究积累的信息还要多。生物学第一次成为以数据(具体的序列数据)为根据与导向，而不是再以假说与概念为导向的科学。即使进化这一生命最实质的特征以及进化的研究，都把因多种模式及其他生物的基因组序列为基础。古代DNA的研究，也不再是因时间与过去了的环境而惟一不能在实验室重复的进化研究，从而揭示生命进化的奥秘与古今生物的联系。这就帮助人们更好地认识人类在生物世界中的关系。
染色体与DNA
名词解释
半保留复制(简称复制)（semiconservative replication)：亲代双链DNA以每条链为模板，按碱基配对原则各合成一条互补链，这样一条亲代DNA双螺旋，形成两条完全相同的子代DNA螺旋，子代DNA分子中都有一条合成的“新”链和一条来自亲代的旧链，称为半保留复制。
2、解旋酶(helicase)：是一类通过水解ATP提供能量，使DNA双螺旋两条链分开的酶，每解开一对碱基，水解2分子ATP。
3、单链DNA结合蛋白(single-strand binding protein ,SSB)：是一类特异性和单链区DNA
结合的蛋白质。它的功能在于稳定DNA解开的单链，阻止复性和保护单链部分不被核酸酶降解。
4、DNA聚合酶(DNA polymerase)：指以脱氧核苷三磷酸为底物，按5’→ 3’方向合成DNA 的一类酶，反应条件：4种脱氧核苷三磷酸、Mg+、模板、引物。DNA聚合酶是多功能酶，除具有聚合作用外，还具有其它功能，不同DNA聚合酶所具有的功能不同。
5、DNA连接酶(DNA ligase)：是专门催化双链DNA中缺口共价连接的酶，不能催化两条游离的单链DNA链间形成磷酸二酯键。反应需要能量。
6、复制叉(replication fork)：复制中的DNA分子，末复制的部分是亲代双螺旋，而复制好的部分是分开的，由两个子代双螺旋组成，复制正在进行的部分呈丫状叫做复制叉。
7、前导链(1eading strand)：在DNA复制过程中，以亲代链(3’→ 5’为模板时，子代链的合成 (5’→ 3’)是连续的．这条能连续合成的链称前导链。
8、冈崎片段(Okazaki fragment)：在DNA复制过程中，以亲代链(5’→ 3’)为模板时，子代链的合成不能以3’→ 5’方向进行，而是按5’→ 3’方向合成出许多小片段，因为是冈崎等人研究发现，因此称冈崎片段。由许多冈崎片段连接而成的子代链称为后随链。
9、后随链(1agging strand)：由许多冈崎片段连接而成的子代链称为后随链。
10、逆转录(reverse transcription)：以RNA为模板合成DNA的过程。
11、突变(mutation)：基因组DNA顺序上的任何一种改变都叫做突变。分点突变和结构畸变。
12、光裂合酶修复(又称光复活)(photoreactivation)：可见光将光裂合酶激活，它分解DNA 上由紫外线照射而形成的嘧啶二聚体，使它们恢复成两个单独的嘧啶碱。
13、切除修复(excision repair)：在一系列酶的作用下，将DNA分子中受损伤部分切除，以互补链为模板，合成出空缺的部分，使DNA恢复正常结构的过程。
14、重组修复(recombination repair)：DNA在有损伤的情况下也可以复制，复制时子代链跃过损伤部位并留下缺口，通过分子间重组，从完整的另一条母链上将相应的核苷酸序列片段移至子链缺口处，然后用再合成的多核苷酸的序列补上母链的空缺，此过程称重组修复。
15、诱导修复和应急反应(induction repair and SOS response)(SOS修复)：由于DNA受到损伤或复制系统受到抑制所诱导引起的一系列复杂的应急效应，称为应急反应。
SOS反应主要包括两个方面：DNA损伤修复(SOS修复或称诱导修复)和诱变效应。SOS 修复是一种易出差错的修复过程，虽能修复DNA的损伤而避免死亡。但却带来高的变异率。问答题
试述Meselson和Stahl关于DNA半保留复制的证明实验。
提示：①将E．coli放入以15NH4Cl为唯一氮源的培养基中连续培养十几代，使所有DNA 分子标记上15N；②将15N标记的E．coli再放入普通的14N培养基中培养，在细胞生长一代、二代、…、n代的时间间隔内采样；③采用氯化铯密度梯度离心分离DNA，并用紫外照相技术检测DNA所在位置；④结果如下：其结果确切地证明DNA以半保留方式复制。
描述大肠杆菌DNA聚合酶I在DNA生物合成过程中的作用。
提示：E．coli DNA聚合酶I是多功能酶，具有：①DNA聚合酶活性，能按模板要求，以5’→ 3’方向合成DNA，在DNA复制中，常用以填补引物切除后留下的空隙；②5'→3’外切酶活性，DNA复制后期，用于切除RNA引物；③3'→5’外切酶活性，用以校对复制的正确性，当出现错配碱基时，切除错配碱基直到正确配对为止；DNA聚合酶I不是DNA复制和校正中的主要聚合酶，它的功能主要是修复。
试述DNA复制过程，总结DNA复制的基本规律。
提示：以E．coli为例，DNA复制过程分三个阶段；①起始：从DNA上控制复制起始的序列即起始点开始复制，形成复制叉，复制方向多为双向，也可以是单向，若以双向进行复制，两个方向的复制速度不一定相同。由于DNA聚合酶不能从无到有合成新链，所以DNA复制需
要有含3’-OH的引物，引物由含有引物酶的引发体合成一段含3一10个核苷酸的RNA片段；
②延长：DNA复制时，分别以两条亲代DNA链为模板，当复制叉沿DNA移动时，以亲代3’→5’链为模板时，子链的合成方向是5'→3'，可连续进行，以亲代5’→3’链为模板时，子链不能以3’→5’方向合成，而是先合成出许多5’→3’方向的冈崎片段，然后连接起来形成一条子链；③终止：当一个冈崎片段的3'-OH与前一个冈崎片段的5’-磷酸接近时，复制停止，由DNA聚合酶I切除引物，填补空隙，连接酶连接相邻的DNA片段。
DNA复制时，由DNA解旋酶(又称解链酶)通过水解ATP获得能量来解开DNA双链，并沿复制叉方向移动，所产生的单链很快被单链结合蛋白所覆盖，防止DNA的变性并保护其单链不被降解，复制叉前进过程中，双螺旋产生的应力在拓扑异构酶的作用下得到调整。
DNA复制基本规律：①复制过程为半保留方式；②原核生物单点起始，真核生物多点起始，复制方向多为双向，也有单向；③复制方式呈多样性，(直线型、Q型、滚动环型…等)；
④新链合成需要引物，引物RNA长度—般为几个～10个核苷酸，新链合成方向5’→ 3’，与模板链反向，碱基互补；⑤复制为半不连续的，以解决复制过程中，两条不同极性的链同时延伸问题，即…—条链可按5’→ 3’方向连续合成称为前导链，另一条链先按5’→ 3’方向合成许多不连续的冈崎片段(原核生物一般长1000-2000个核苷酸，真核生物一般长100--200个核苷酸)，再通过连接酶连接成完整链，称后随链，且前导链与后随链合成速度不完全—致，前者快，后者慢；⑥复制终止时，需切除前导链、冈崎片段的全部引物，填补空缺，连接成完整DNA链；⑦修复和校正DNA复制过程出现的损伤和错误，以确保DNA复制的精确性。
DNA的损伤原因是什么?
提示：①自身复制过程中发生的错误：②外界环境的影响，如物理因素(紫外线、X一射线辐射等)，化学因素(各种诱变剂、抗菌素等)。造成嘧啶碱基形成聚合体，发生碱基错配、缺失和插入。
试列表比较常染色质DNA与端粒DNA的复制。
常染色质DNA复制与端粒DNA复制的比较表：
第三章
一、1.前体分子；加工；内含子；外显子；5’； 3’； CCA；内含子；外显子；自动催化;
2.内切核酸酶；RNA；tRNA；5’端；前体RNA;
3.真核生物中的5SrRNA；原核生物中的mRNA；
4.核心启动子；上游启动子元件；
5.m7GpppNmNm； PolyA;
6. 自体催化，异体催化;
二、
选择性剪接（也叫可变剪接）：从一个mRNA前体中通过不同的剪接方式（选择不同的剪接位点组合）产生不同的mRNA剪接异构体的过程，而最终的蛋白产物会表现出不同或者是相互拮抗的功能和结构特性，或者，在相同的细胞中由于表达水平的不同而
导致不同的表型。
增强子：DNA上能使和它连锁的基因转录频率明显增加的序列。
转录单位：DNA链上从启动子直到终止子为止的长度称为一个转录单位。一个转录单位可以包括一个基因，也可以包括几个基因。
Pribnow区:原核生物转录起始区–10bp附近的一组5’–TATAT序列，是启动子的一部分，由Pribnow首先发现的。
RNA 的编辑：某些RNA，特别是mRNA前体中插入、删除或取代一些核苷酸，导致DNA 编码的遗传信息发生改变。
小分子RNA：是真核生物转录后加工过程中RNA剪接体（spilceosome）的主要成分，参与mRNA前体的加工过程。现在发现有五种snRNA，其长度在哺乳动物中约为100-215个核苷酸。snRNA一直存在于细胞核中，与40种左右的核内蛋白质共同组成RNA剪接体，在RNA转录后加工中起重要作用。
内含子：是基因内的非编码序列，不出现在成熟的RNA分子中，在转录后通过加工被切除。大多数真核生物的基因都有内含子。
核心酶：通常由5个亚基组成；σ，β，β′和两个α亚基，可写作α2ββ′σ。含有5个亚基的酶叫全酶α2ββ′σ,失去σ亚基的叫核心酶（α2ββ′）。
剪接体：由snRNA和蛋白质组成的核糖核酸蛋白(核蛋白)复合物。其功能是结合内含子两端的边界序列,协助RNA的剪接加工。
核酶:具有催化功能(酶的作用)的RNA分子。核酶能起作用的结构,至少含有3个茎(RNA分子内配对形成的局部双链),1至3个环(RNA分子局部双链鼓出的单链)和至少有13个一致性的碱基位点。
三、1. I型内含子、II型内含子、RnaseP、锤头型核酶
2.mRNA直接负责蛋白质的产生，翻译完成后即可降解，由于功能的差异，稳定性也不同，在不同的组织中半衰期也会有差别。rRNA参与核糖体的组装，而核糖体是一个相对稳定的结构，因此rRNA比较稳定；tRNA参与翻译过程，主要功能是携带氨基酸到达核糖体，在完成一次携带功能后不可能降解而需要继续下一轮的氨基酸的转运工作。
tRNA和rRNA分子的大多数碱基形成了分子内碱基配对，而mRNA较少分子内碱基配对，mRNA 的核苷酸长度远远大于tRNA和rRNA。
3．（1）四种方式：拼接产物缺失一个或几个外显子；
拼接产物保留一个或几个内含子作为外显子的编码序列；
外显子中存在5’剪接位点或3’剪接位点，从而部分缺失该外显子；
内含子中存在5’剪接位点或3’剪接位点，从而部分内含子变为编码序列
（2）选择性剪切是基因工程的基础方法，应用的是限制性内切酶，因为酶具有专业性，可以在一条DNA或RNA母链中根据人类意愿剪取一段目的基因，该过程既为选择性剪切。mRNA 既信使RNA，发生在翻译阶段，基因工程中通过剪切特定的DNA片段导入载体中再导入受体，再通过细胞培养技术，得到有特定性状个体。
4.真核生物mRNA有5’端帽子结构（m7G）和3’端的Poly(A)尾巴
真核细胞的前mRNA有许多内含子(会被加工剪接为成熟的mRNA翻译
真核细胞的mRNA多是单顺反子，即一条mRNA编码一条多肽
5.其前体是核内不均一RNA (hnRNA)。hnRNA分子中大约只有10%的部分转变成成熟的mRNA，其余部分将在转录后的加工过程中被降解掉。hnRNA加工过程包括：
（1）剪接；转录合成的hnRNA需经过剪接、切掉内含子部分，然后再将外显子部分拼接起来。该过程有多种酶活性物质(包括snRNA)参与。
（2）5′末端加"帽"；m7Gpp-pmnNp，称为"帽"。在细胞核内进行的，从真核生物帽子结构形成的复杂可以看出，生物进化程度越高，其帽子结构越复杂。
5’端帽子结构的重要性在于它是mRNA 做为翻译起始的必要的结构，对核糖体对mRNA的识别提供了信号，还可能增加mRNA的稳定性，保护mRNA 免遭5’外切核酸酶的攻击。（3）3′末端加"尾"
mRNA前体分子的3′末端有一段保守序列，由特异的核酸内切酶切去多余的核苷酸，然后在多聚A聚合酶的催化下，由ATP聚合生成多聚A尾。polyA可能与mRNA从细胞核转送到细胞质有关，对真核mRNA的翻译效率有促进作用，并能稳定mRNA结构，保持一定的生物半衰期。
（4）碱基修饰
mRNA分子中有少量稀有碱基(如甲基化碱基)是在转录后经化学修饰(如甲基化)而形成的。
6. 一般原核生物启动子主要由4个部分组成：–35序列、–10序列、转录起点、–35序列和–10序列间的距离。–35序列为RNA聚合酶σ因子的识别位点。–10序列为RNA聚合酶牢固结合位置并在此解链，形成开放起始复合物。
真核生物有3种转录方式：（1）RNA聚合酶Ⅰ的启动子，主要由两部分组成：核心启动子足以使转录起始，上游调控元件可以大大的提高核心启动子的转录起始频率。
（2）RNA聚合酶Ⅱ的启动子，主要负责蛋白质基因和部分核小RNA的转录。由转录起始位点、TATA box和CAAT box以及上游启动子成分，如增强子、沉默子等组成。
（3）RNA聚合酶Ⅲ基因的产物是tRNA，5SrRNA,U6RNA等，又可分3类：
①位于基因内部，没有TATA盒框，由内部转录控制区组成，如5SrRNA基因；
②位于基因上游，有两个基本成分近端顺序元件和TATA盒；
③混合启动子，既含有如5SrRNA基因的内控区，又有如U6RNA基因的上游启动子。
7.同：都以DNA为模板，都以核苷酸为原料，都是从5’→3’方向合成，都遵循碱基互补配对原则，产物都是多聚核苷酸
异：复制所需的底物为脱氧核苷三磷酸，转录的底物为核苷三磷酸；
复制中A–T配对，转录中是A–U配对；
RNA聚合酶与DNA聚合酶不同；
复制要引物，转录不要；
复制得到与模板链互补的DNA链，转录得到的是与模板互补的RNA链；
转录过程中，只有一条。
8.⑴、逆转录酶是一类存在于RNA病毒中具有RNA→DNA逆转录活性的特殊蛋白质。由它催化转录合成的DNA称为互补DNA(cDNA)。
⑵、通常情况下，细胞内的转录是由DNA到RNA的，所得RNA为信使RNA（mRNA）供蛋白质合成作模板用。而在部分RNA病毒中，要实现自身的扩增，必须具有DNA，因此先由RNA逆转录合成cDNA再由cDNA转录出RNA。
逆转录酶可用于RT-PCR，将RNA转变为DNA后扩增，以获得RNA的序列。
⑶、逆转录酶是多功能酶,具有RNA酶,连接酶,聚合酶活性.
9.RNA拼接的类型：
⑴类型Ⅰ自我剪接。特点是只要1价、2价阳离子和鸟苷存在即可自行发生，无需提供能量和酶的催化。
⑵类型Ⅱ自我剪接。特点是能自我剪接，但不需要鸟苷。
⑶核mRNA拼接体的拼接。特点是由内含子自我催化完成。
⑷核tRNA的酶促拼接。特点是需要内切酶和连接酶等，需要消耗能量。
10.DNA复制时，后随链的合成需要连接酶将一个冈崎片段的5’端与另一冈崎片段的3’端连接起来，而RNA的合成是从转录起点开始沿5’→3’一直合成的，因此不需要DNA连接酶。
11.提供转录终止信号的一段DNA序列，叫终止子。协助RNA聚合酶识别终止子的蛋白质辅助因子，叫终止因子。
Rho结合在新合成的RNA链上，借助消解NTP所获得能量沿RNA链移动。RNA酶遇到终止子发生暂停，使 Rho得以追上酶，并与之相互作用，造成释放RNA。
12. ⑴RNA聚合酶Ⅰ催化产生前体rRNA的合成；RNA聚合酶Ⅰ转录产物是45SrRNA，经过剪接修饰生产除5SrRNA外的各种rRNA。真核生物的rRNA基因是一类中度重复的基因，拷贝数都在数百个至数万个，人类rRNA基因约为300个拷贝。
⑵RNA聚合酶Ⅱ催化前体mRNA的合成。
⑶RNA聚合酶Ⅲ催化产生前体tRNA，经过加工后成为成熟tRNA。
13列举一个已知的DNA序列编码一种以上蛋白质的三种方法。
答案：给定的一段DNA序列可以以下述方式编码两种或两种以上的蛋白质： (1)可读框中在核糖体结合位点之后含有多重起始位点； (2)以一两个碱基的移码方式出现重叠的可读框； (3)不同的剪接方式，例如，选择不同的外显子组合成不同的mRNA。
14. mRNA只占总RNA的3％一5％，这主要是有以下两个原因：①由于需要大量的核糖体和稳定的tRNA群，因此mRNA合成量比其他RNA的量要少；②由于对内切酶与外切核酸酶敏感，mRNA容易自发地降解，所以在原核细胞中mRNA的半衰期只有2一15分钟，真核细胞中也只有4—24小时。
15. 此序列太长不可能是tRNA。如果它是rRNA，应该含有许多特殊元件，如：假尿嘧啶和5—甲基胞嘧啶；同时应具有可以形成发夹环的反向重复序列。如果是mRNA则应有AUG起始密码子、一段相应的氨基酸密码子和一个相应的终止密码子构成的可读框。
第四章.
一、名词解释
1、翻译：指将mRNA链上的核苷酸从一个特定的起始位点开始，按每3个核苷酸代
表一个氨基酸的原则，依次合成一条多肽链的过程
2、遗传密码：指信使RNA（mRNA）分子上从5'端到3'端方向，由起始密码子
AUG开始，每三个核苷酸组成的三联体。它决定肽链上某一个氨基酸或蛋
白质合成的起始、终止信号
3、开放阅读框：mRNA上由起始密码子开始，到终止密码子结束的氨基酸序列被称
为一个开放阅读框
4、遗传密码的简并性：由一种以上的密码子编码同一个氨基酸的现象
5、同义密码子：编码相同氨基酸的几个不同的密码子
6、起始密码子：指导蛋白质合成起始位点的密码子，最常见的起始密码是AUG
7、终止密码子：任何tRNA分子都不能正常识别的，但可被特殊的蛋白结合并引起
新合成的肽链从翻译机器上释放的密码子。存在三个终止密码子：UAG UAA UGA
8、摆动学说：密码子与反密码子的配对中，前两对严格遵守碱基配对原则，第三
对碱基有一定的自由度，可以摆动，因而使某些tRNA可以识别一个以上的密码
子
9、同工tRNA：结合相同氨基酸的不同tRNA
10、校正tRNA：通过反密码子区的改变将正确的氨基酸携带到肽链上，抵消突变效
应，合成正常的蛋白质
11、无义突变：是编码某一氨基酸地三联体密码经碱基替换后,变成不编码任何
氨基酸地终止密码UAA、UAG或UGA，使合成提前终止，形成一条不完整的
多肽链
12、中性突变：基因中一对碱基对发生改变，引起mRNA上密码子的改变，但多肽链
中相应位点发生的取代并不影响蛋白质的功能
13、移码突变：在正常地DNA分子中,碱基缺失或增加非3地倍数,造成这位置
之后的一系列编码发生移位错误的改变，产生无功能的蛋白质，这种现象
称移码突变
14、错义突变：是编码某种氨基酸地密码子经碱基替换以后,变成编码另一种氨
基酸地密码子,从而使多肽链的氨基酸种类和序列发生改变
15、回复突变：突变体(mutant)经过第二次突变又完全地或部份地恢复为原来
的基因型和表现型
16、起始因子：参与蛋白质合成起始阶段的特异性蛋白质，原核起始因子有3种（IF1、
IF2、IF3），真核起始因子有多种
17、释放因子：识别终止密码子引起完整的肽链和核糖体从mRNA上释放的蛋白
质
18、信号肽：引导蛋白质跨膜进入内质网的信号，通常指被运入内质网内腔的蛋白
质的氨基末端的一段序列
19、信号序列：在起始密码后面的一段编码疏水性氨基酸序列的RNA区域
20、分子伴侣：一类在序列上没有相关性但有共同功能的蛋白质，它们在细胞
内帮助其他含多肽的结构完成正确的组装，而且在组装完毕后与之分离，
不构成这些蛋白质结构执行功能时的组份
21、SD序列：在原核生物mRNA 起始密码子AUG上游10个碱基左右处，有一段
富含嘌呤的碱基序列，能与核糖体16SrRNA3’端识别，帮助从起始AUG处
开始翻译
22、泛素：是一种存在于大多数真核细胞中的小蛋白。它的主要功能是标记需
要分解掉的蛋白质，使其被水解。当附有泛素的蛋白质移动到桶状的蛋白
酶的时候，蛋白酶就会将该蛋白质水解
二、简答题
1、mRNA—传达DNA上的遗传信息，作为蛋白质合成的模板，占总RNA的1%~5%。其功能，一是把DNA上的信息准确无误的转录下来，另一是负责将它携带的遗传信息在多糖体上翻译成蛋白质
tRNA—在蛋白质合成过程中，将特定的氨基酸搬运到核糖体上，并根据mRNA的遗传密码依次准确地将它携带的氨基酸连结成多肽链
rRNA—与核糖体蛋白质结合在一起，形成核糖体，构成蛋白质合成的场所
2、连续性 mRNA的读码方向从5'端至3'端方向，两个密码子之间无任何核苷酸隔开。mRNA链上碱基的插入、缺失和重叠，均造成移码突变。
简并性指一个氨基酸具有两个或两个以上的密码子。密码子的第三位碱基改变往往不影响氨基酸翻译。
摆动性mRNA上的密码子与转移RNA上的反密码子配对辨认时，大多数情况遵守碱基互补配对原则，但也可出现不严格配对，尤其是密码子的第三位碱基与反密码子的第一位碱基配对时常出现不严格碱基互补，这种现象称为摆动配对。
通用性蛋白质生物合成的整套密码，从原核生物到人类都通用。但已发现少数例外，如动物细胞的线粒体、植物细胞的叶绿体。
3、tRNA的二级结构呈三叶草形，包括受体臂、Tψ C臂、反密码子臂和D臂
受体臂主要由练两端序列碱基配对形成，是一段含有3′末端的螺旋区，且3′-末端都是C-C-A-OH序列，可与氨基酸连接
反密码子臂顶端含有由三个碱基组成的反密码子，称为反密码环；反密码子可识别mRNA分子上的密码子，在蛋白质生物合成中起重要的翻译作用
TψC环上含有胸苷（T）、假尿苷（ψ）、胞苷（C），可能与结合核糖体有关
D环含有5，6二氢尿嘧啶，称为二氢尿嘧啶环（DHU环）
tRNA的三级结构成倒“L”型，这种结构靠氢键来维持
1、SD序列：在原核生物mRNA 起始密码子AUG上游10个碱基左右处，有一段富含嘌呤的碱基序列，能与核糖体16SrRNA3’端识别，帮助从起始AUG处开始翻译。这段序列就称之SD序列。
2、真核生物mRNA是在细胞核内合成的，而翻译是在细胞质中进行的，因此mRNA只有被运送到细胞质部分才能翻译生成蛋白质。真核生物中的mRNA开始合成时，是不成熟的hnRNA，需要通过一系列加工过程才能成为成熟的mRNA。这些过程包括，内含子的剪接、5’端加帽子结构，3’端加尾等。由于RNA转录后需要一系列的加工过程，因此，转录与翻译无法偶联。
3、氨酰tRNA合成酶是一类催化氨基酸与tRNA结合的特异性酶，由它决定氨基酸能否与对应的tRNA结合，既能识别tRNA，又能识别氨基酸，对两者都具有高度的专一性。
催化反应为：AA+tRNA+ATP→AA—tRNA+AMP+PPi
蛋白质合成的真实性主要决定于tRNA能否把正确的氨基酸放到新生多肽链的正确位置上，而这一步主要决定于AA—tRNA合成酶是否能使氨基酸与对应的tRNA结合。
4、蛋白质的生物合成包括翻译起始、延伸、终止
⑴起始阶段：①30S起动复合物的形成。在IF促进下，30S小亚基与mRNA的起动部位（即SD序列），起动tRNA（tRNAfmet），和GTP结合，形成复合体。②70S起动前复合体的形成。IF3从30S起动复合体上脱落，50S大亚基与复合体结合，形成70S 起动前复合体。③70S起动复合体的形成。GTP被水解，IF1和IF2从复合物上脱落。
⑵肽链延长阶段：①进位：与mRNA下一个密码相对应的氨基酰tRNA进入核蛋白体的受位。此步骤需GTP，Mg2+，和EF参与。②成肽：在转肽酶的催化下，将给位上的tRNA所携带的甲酰蛋氨酰基或肽酰基转移到受位上的氨基酰tRNA上，与其α-氨基缩合形成肽键。给位上已失去蛋氨酰基或肽酰基的tRNA从核蛋白上脱落。③移位：核蛋白体向mRNA的3'- 端滑动相当于一个密码的距离，同时使肽酰基tRNA从受体移到给位。此步骤需EF（EFG）、GTP和Mg2+参与。此时，核蛋白体的受位留空，与下一个密码相对应的氨基酰tRNA即可再进入，重复以上循环过程，使多肽链不断延长。
⑶肽链终止阶段：核蛋白体沿mRNA链滑动，不断使多肽链延长，直到终止信号进入受位。①识别：RF识别终止密码，进入核蛋白体的受位。②水解：RF使转肽酶变为水解酶，多肽链与tRNA之间的酯键被水解，多肽链释放。③解离：通过水解GTP，使核蛋白体与mRNA分离，tRNA、RF脱落，核蛋白体解离为大、小亚基。
5、（1）原核生物和真核生物翻译起始所需的起始因子不同，原核翻译起始因子为
IF1、IF2、IF3，而真核生物的起始因子为eIF，并有多种
（2）mRNA模板不同，真核生物分子5’端有帽子结构，3’端有poly(A)结构，原核生物则无
（3）真核生物40s起始复合物形成过程有帽子结合蛋白参与，而原核生物30s起始复合物形成不需要帽子蛋白
（4）核糖体不一样，原核生物翻译起始中是30s小亚基而真核生物中为40s小亚基。（5）真核生物起始复合物形成中需要Met—tRNAMet，而原核生物需要的是fMet—tRNAMet
10、tRNA在蛋白质合成中处于关键地位，它不但为每个三联体密码子翻译成氨基酸提供了接合体，还为准确无误地将所需氨基酸运送到核糖体上提供了运送载体，所以，它又被称为第二遗传密码。
种类：(1)起始tRNA和延伸tRNA：能特异识别mRNA模板上起始密码子的tRNA叫起始tRNA（原核为fMet—tRNAMet，真核为Met—tRNAMet），其它tRNA统称为延伸tRNA。
（2）同工tRNA：由于密码子具有简并性，我们将几个代表相同氨基酸的tRNA 称为同工tRNA。在一个同工tRNA组中，所有tRNA均专一于相同的氨酰—tRNA合成酶。同工tRNA有不同的反密码子识别该氨基酸的各种同义密码，又有某种结构上的共同性，内被AA—tRNA合成酶识别，一级结构无法解释。有证据说明tRNA的二级和三级结构对它的专一性起着重要的作用。
（3）校正tRNA：在蛋白质的结构基因中，一个核苷酸的改变可能使代表某种氨基酸的密码子变成终止密码子（UAG、UGA、UAA）→蛋白质合成提前终止→无义突变，而无义突变的校正tRNA可以通过改变反密码子区校正无义突变。错义突变是由于结构基因中某种核苷酸的变化使一种氨基酸的密码变成另一种氨基酸的密码。错义突变的校正tRNA通过反密码子的改变把正确的氨基酸加到肽链上，合成正常的蛋白质。
11、（1）原核生物和真核生物的核糖体不同，原核生物为70S型，而真核生物为80S 型。
（2）模板不同：原核生物的mRNA为多顺反子，而真核生物mRNA为单顺反子
（3）起始氨酰tRNA不同，原核为fMet—tRNAMet，真核为Met—tRNAMet
（4）原核生物mRNA上有能与16SrRNA配对的SD序列，而真核生物没有这样的序列（5）原核生物起始复合物的形成过程中，30S小亚基先与翻译起始因子IF-1，IF-3结合，通过SD序列与mRNA模板结合。而在真核生物翻译起始过程中，GTP首先与eIF-2结合，这一结合就增加了eIF-2与起始tRNA的亲和力，然后三者结合便成为一个三元复合物，三元复合物直接与40S亚基结合，此过程中需要ATP提供能量。
（6）延伸因子不一样，原核生物每次反应需要三个延伸因子，EF—Tu、EF—Ts
及EF—G；真核生物细胞需要EF—1及EF—2
（7）终止因子不同，细菌内部存在三种不同的终止因子，分别是RF1、RF2 和
RF3；真核细胞中只有一个终止因子RF
12、新生的多肽链是没有功能的，必须经过加工修饰才能转变为有活性的蛋白质
（1）N端fMet或Met的切除：细菌蛋白质氨基端的甲酰基能被脱甲酰化酶水解，不管是原核生物还是真核生物，N端的甲硫氨酸往往在多肽链合成完成之前就被切除（2）二硫键的形成：主要是通过多肽链上两个半胱氨酸的氧化作用生成的
（3）特定氨基酸的修饰：包括磷酸化、糖基化、甲基化、乙基化、羟基化和羧基化等
（4）切除新生肽链的中的非功能片段：不少肽类激素和酶的前体都要经过加工才能变为活性分子
13、（1）如果某一基因的编码序列中发生了一个碱基的突变，使得编码某一氨基酸的密码子变成另外一个氨基酸的密码子，即发生了错义突变，就会使蛋白产物的序列和结构发生变化。
（2）如果某一基因的编码序列中发生了一个碱基的突变，变成其同义密码子，编码相同的氨基酸，则不影响其蛋白产物的结构和功能
（3）如果某一基因的编码序列中发生了一个碱基的突变，变成终止密码子，即发生无义突变，提前终止蛋白的合成，其产物很可能没有活性
（4）如果某一基因的编码序列中插入或缺失某一碱基，则突变后的序列可读框发生改变，突变位点后的蛋白序列会发生变化，蛋白质失去活性
14、（1）肽链合成起始密码子是AUG，从题中可得出，两条链互补链分别为：
Ⅰ、3’GCGUCCUAGUCAGCUACAGGACAC5’
Ⅱ、5’CGCAGGAUCAGUCGAUGUCCUGUG3’
在Ⅰ中无起始密码子，而Ⅱ中具有起始密码子AUG，因此作为模板链的是与Ⅱ互补的链
（2）mRNA的序列为5’CGCAGGAUCAGUCGAUGUCCUGUG3’
第五章
名词解释
1.分子杂交（molecular hybridization）：分子杂交确定单链核酸碱基序列的技术。其基本原理是待测单链核酸与已知序列的单链核酸（叫做探针）间通过碱基配对形成可检出的双螺旋片段。这种技术可在DNA与DNA，RNA与RNA，或DNA与RNA之间进行，形成DNA-DNA，RNA-RNA或RNA-DNA等不同类型的杂交分子。
2.管家基因（housekeeping gene）：又称持家基因，是指所有细胞中均要表达的一类基因,其产物是对维持细胞基本生命活动所必需的。如微管蛋白基因、糖酵解酶系基因与核糖体蛋白基因等。
3.奢侈基因（luxury gene）：在特别细胞类型中大量(通常)表达并编码特殊功能产物的基因。
4.荧光共振能量转移（FRET）：荧光能量共振转移是距离很近的两个荧光分子间产生的一种能量转移现象。当供体荧光分子的发射光谱与受体荧光分子的吸收光谱重叠，并且两个分子的距离在10nm范围以内时，就会发生一种非放射性的能量转移，即FRET现象，使得供体的荧光强度比它单独存在时要低的多（荧光猝灭），而受体发射的荧光却大大增强。
5.单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism，SNP),主要是指在基因组水平上由单个核苷酸的变异所引起的DNA序列多态性。它是人类可遗传的变异中最常见的一种。占所有已知多态性的90%以上。SNP在人类基因组中广泛存在，平均每500～1000个碱基对中就有1个，估计其总数可达300万个甚至更多。
6. RT-PCR（reverse transcription PCR）：RT-PCR是将RNA的反转录（RT）和cDNA的聚合酶链式扩增（PCR）相结合的技术。首先经反转录酶的作用从RNA合成 cDNA，再以cDNA 为模板，扩增合成目的片段。RT-PCR技术灵敏而且用途广泛，可用于检测细胞中基因表达水平，细胞中RNA病毒的含量和直接克隆特定基因的cDNA序列。
7.报告基因 (report gene）：报告基因是一种编码可被检测的蛋白质或酶的基因，也就是说，是一个其表达产物非常容易被鉴定的基因。把它的编码序列和基因表达调节序列相融合形成嵌合基因，或与其它目的基因相融合，在调控序列控制下进行表达，从而利用它的表达产物来标定目的基因的表达调控，筛选得到转化体。
8.DNA探针（DNA probe）：DNA探针又称为DNA指纹,是已知结构的且含有放射性元素的DNA
片断。当这种片断遇到可配对的DNA时便相互结合,而放射性元素的射线可使胶片感光,并留下一道像指纹一样的黑色图案。
9.cDNA文库（DNA library）：以mRNA为模板，经反转录酶催化，在体外反转录成cDNA，与适当的载体（常用噬菌体或质粒载体）连接后转化受体菌，则每个细菌含有一段cDNA，并能繁殖扩增，这样包含着细胞全部mRNA信息的cDNA克隆集合称为该组织细胞的cDNA文库。
10.基因芯片（gene chip）：基因芯片技术是将大量特定的寡核苷酸(cDNA)片段或基因片段作为探针,有规律地排列固定于支持物上(无机或有机支持物),然后与待测的标记样品分子按碱基配对原理进行杂交,通过检测探针分子的杂交信号强度获取样品分子的表达数量和序列信息。
11.限制性片段多态性（Restriction Fragment Length Polymorphisms ，RFLP）限制片段长度多态性是指DNA限制性酶识别序列核苷酸结构发生改变，导致酶切位点产生、消失或移位，酶切所产生的限制性片断数目及长度发生改变所生呈现的DNA多态现象。
12.RNA干扰（RNA interference, RNAi）：RNA干扰是指在进化过程中高度保守的、由双链RNA（double-stranded RNA，dsRNA）诱发的、同源mRNA高效特异性降解的现象。RNAi是真核生物中普遍存在的抵抗病毒入侵、抑制转座子活动、调控基因表达的监控机制.
13.蛋白质组（Proteomics）：指由一个基因组，或一个细胞、组织表达的所有蛋白质. 蛋白质组学的研究内容主要有两方面，一是结构蛋白质组学，二是功能蛋白质组学。
14.分子标记（molecular marker）:广义的分子标记是指可遗传的并可检测的DNA序列或蛋白质。蛋白质标记包括种子贮藏蛋白和同工酶（指由一个以上基因位点编码的酶的不同分子形式）及等位酶（指由同一基因位点的不同等位基因编码的酶的不同分子形式）。狭义的分子标记是指能够用来作为指纹鉴定或区分个体特点的DNA片段。
15.DNase1足迹试验（DNA footprinting assay）：蛋白质结合在DNA片段上，能保护结合部位不被DNase破坏，DNA分子经酶切作用后遗留下该片段(亦称“足迹”)，进而可以确定它的序列。在电泳凝胶的放射性自显影图片上，相应于蛋白质结合的部位没有放射性标记条带。
16基因工程（gene engineer）：指在体外将核酸分子插入病毒，质粒或其他载体分子中，构成遗传物质的重新组合，使之进入原先没有这类分子的寄生细胞内并进行持续稳定的繁殖和表达的过程。
17.载体（vector）：是携带外源DNA进入寄主细胞进行扩增和表达的DNA，它们一般是通过改造质粒，噬菌体或病毒等构建的。
18.基因芯片（gene chip）：基因芯片又称为DNA微阵列，以基因序列为分析对象的微阵列是通过缩微技术，根据分子键特异性地相互作用的原理，将生命科学领域中不连续的分析过程集成于硅芯片或玻璃芯片表面的微型生物化学分析系统，以实现对细胞，蛋白质，基因及其他生物组分的准确，快速，大信息量的检测。
19.DNA文库（DNA library）：将某种生物的基因组DNA切割成一定大小的片段，并与合适的载体重组后导入寄主细胞，进行克隆。这些存在于所有重组体内的基因组DNA片段的集合，即基因组文库，它包含了该生物的所有基因。
20.扣除杂交（substractive hybridization）：就是用一般细胞的mRNA与特殊细胞的cDNA 杂交，先扣除一般共有的cDNA，再将剩下的特异的cDNA进行克隆，用此方法已成功克隆出控制动物发育和组织分化的基因。
简答题
1.分子克隆技术的步骤。
1）目的基因的获得。
2）目的基因与载体分子在体外进行连接反应。
3) 将人工重组的DNA分子导入能进行正常复制的寄主细胞，从而得到复制。
4) 重组体分子的转化子克隆的选择和筛选。
2.PCR 的反应原理和步骤。
PCR技术类似于DNA的天然复制过程，其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成：①模板DNA的变性：模板DNA经加热至93℃左右一定时间后，使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离，使之成为单链，以便它与引物结合，为下轮反应作准备；②模板DNA与引物的退火(复性)：模板DNA经加热变性成单链后，温度降至55℃左右，引物与模板DNA单链的互补序列配对结合；③引物的延伸：DNA模板--引物结合物在TaqDNA聚合酶的作用下，以dNTP为反应原料，靶序列为模板，按碱基配对与半保留复制原理，合成一条新的与模板DNA 链互补的半保留复制链重复循环变性--退火--延伸三过程，就可获得更多的“半保留复制链”，而且这种新链又可成为下次循环的模板。
3.实时定量PCR的原理。
所谓实时荧光定量PCR技术，是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。
4.请简述凝胶阻滞实验的原理。
又称DNA迁移率变动试验，是一种体外研究DNA与蛋白质相互作用的特殊的凝胶电泳技术。基本原理为：在凝胶电泳中，由于电场的作用，小分子DNA片段比其结合了蛋白质的DNA 片段向阳极移动的速度快，因此，可标记短的双链DNA片段，将其与蛋白质混合，对混合物进行凝胶电泳，若目的DNA与特异性蛋白质结合，其向阳极移动的速度受到阻滞，对凝胶进行放射性自显影，就找到DNA结合蛋白。
5.什么是双向电泳？相对于平常的电泳有何优势？
双向电泳第一向进行等电聚焦，蛋白质沿pH梯度分离，至各自的等电点；随后，再沿垂直的方向进行分子量的分离.
双向电泳能够更精确地分离蛋白质，随着技术的飞速发展，已能分离出10 000个斑点(spot). 当双向电泳斑点的全面分析成为现实的时候，蛋白质组的分析变得可行.
6. 请比较几种blotting有何区别。
Southern Blotting和Northern Blotting是基于DNA和RNA分子之间碱基互补配对的特异性识别能力，而Western Blotting则基于抗原抗体之间特异的免疫反应。Southern Blotting 和Northern Blotting时使用带有标记（如同位素标记或荧光标记）的DNA或RNA探针去识别并结合到待检测核酸上，然后直接显影；而Western Blotting时要先用待检测蛋白的“一抗”结合到待检测蛋白上，再用可识别“一抗”并偶联了某种酶的“二抗去检测”一抗“，最后通过显色反应的信号来显示待检测蛋白的存在与否及量的多少。另外，Southern Blotting和Northern Blotting两者比较容易混淆。这两种技术最关键的区别在于待检测核酸的属性，如果被检测的是DNA，则该技术就是Southern Blotting，其探针可以是DNA 也可以是RNA；类似地，如果被检测的是RNA，不管探针是RNA还是DNA，该方法就叫作Northern Blotting。
7.什么是原位杂交技术。
原位杂交技术的基本原理是利用核酸分子单链之间有互补的碱基序列，将有放射性或非放射性的外源核酸(即探针)与组织、细胞或染色体上待测DNA或RNA互补配对，结合成专一的核酸杂交分子，经一定的检测手段将待测核酸在组织、细胞或染色体上的位置显示出来。为显示特定的核酸序列必须具备3个重要条件：组织、细胞或染色体的固定、具有能与特定片段互补的核苷酸序列(即探针)、有与探针结合的标记物。原位杂交技术因其高度的灵敏性和准
确性而日益受到许多科研工作者的欢迎，并广泛应用到基因定位、性别鉴定和基因图谱的构建等研究领域。
8.酵母双杂交系统的原理是什么？有何作用？
典型的真核生长转录因子，如GAL4、GCN4、等都含有二个不同的结构域: DNA结合结构域和转录激活结构域。前者可识别DNA上的特异序列，并使转录激活结构域定位于所调节的基因的上游，转录激活结构域可同转录复合体的其他成分作用，启动它所调节的基因的转录。二个结构域不但可在其连接区适当部位打开，仍具有各自的功能。而且不同两结构域可重建发挥转录激活作用。酵母双杂交系统利用杂交基因通过激活报道基因的表达探测蛋白－蛋白的相互作用。酵母双杂交及其衍生系统是鉴定及分析蛋白质-蛋白质、蛋白质-DNA、蛋白质-RNA相互作用的最常用、最有效的工具之一。
9.什么是报告基因及其用途。
报告基因是一种编码可被检测的蛋白质或酶的基因，也就是说，是一个表达产物容易被鉴定的基因。
报告基因有以下一些用途：
1)用于启动子的鉴定。为了鉴定某个基因的基本启动子元件，将该基因5’侧翼序列的各缺失片段构建含有某报告基因的重组质粒。用这些携带报告基因的质粒转化受体细胞，然后检测报告该报告基因的产物即可；
2)可以了解细胞中基因的表达情况，便于分析分析基因的调节；
3)在转基因研究领域用于检测转基因是否成功。
10.列举几种研究DNA同蛋白质相互作用的方法
1. DNaseI足迹试验（DNaseI Footprinting）：是一类用于检测与特定蛋白质结合的DNA序列的部位及特性的专门的实验技术。
2. 凝胶阻滞试验(gel retartion assay)：又叫做DNA迁移率变动试验(DNA mobility shtft assay)，是在80年代初期出现的用于在体外研究DNA与蛋白质相互作用的一种特殊的凝放电泳技术。它具有简单、快捷等优点，也是当前被选作分离纯化特定DNA结合蛋白质的一种典型的实验方法。
3. 染色质免疫共沉淀和芯片结合技术（ChIP-chip）：是将免疫共沉淀（ChIP）技术同芯片技术相结合产生的一项新技术。染色质免疫共沉淀（ChIP）技术是研究蛋白与DNA之间在染色质环境下相互作用的一种常用方法，用于检测每个候选靶基因的启动子区域是否存在能与组蛋白及特定转录因子结合的特定DNA序列，能够充分反映生理条件下的DNA与蛋白质相互作用的真实情况；但是传统的免疫共沉淀（ChIP）技术仅仅适合于检测一个蛋白同一个基因之间的相互作用；为了在整个基因组水平研究蛋白质与DNA间的相互作用，采用ChIP-chip 这项新的高通量技术，可以用于筛选重要的转录因子靶位点、分析基因组范围内的甲基化和组蛋白修饰，这使得大规模的研究基因的转录调控，包括转录因子调控和表观遗传调控，成为可能；从而能够加速相关疾病的研究、新药的寻找和新的治疗手段的发展。
11.检验蛋白质相互作用的实验方法有哪些，并加以评述
1)酵母双杂交系统
酵母双杂交系统是当前广泛用于蛋白质相互作用组学研究的一种重要方法。其原理是当靶蛋白和诱饵蛋白特异结合后，诱饵蛋白结合于报道基因的启动子，启动报道基因在酵母细胞内的表达，如果检测到报道基因的表达产物，则说明两者之间有相互作用，反之则两者之间没有相互作用。将这种技术微量化、阵列化后则可用于大规模蛋白质之间相互作用的研究。在实际工作中，人们根据需要发展了单杂交系统、三杂交系统和反向杂交系统。此外，酵母双杂交系统的作用也已扩展至对蛋白质的鉴定。
2)噬茵体展示技术
在编码噬菌体外壳蛋白基因上连接一单克隆抗体的DNA序列，当噬菌体生长时，表面就表达出相应的单抗，再将噬菌体过柱，柱上若含目的蛋白，就会与相应抗体特异性结合，这被称为噬菌体展示技术。此技术也主要用于研究蛋白质之间的相互作用，不仅有高通量及简便的特点，还具有直接得到基因、高选择性的筛选复杂混合物、在筛选过程中通过适当改变条件可以直接评价相互结合的特异性等优点。目前，用优化的噬菌体展示技术，已经展示了人和鼠的两种特殊细胞系的cDNA文库，并分离出了人上皮生长因子信号传导途径中的信号分子。
3)荧光能量转移技术
荧光共振能量转移（FRET ）广泛用于研究分子间的距离及其相互作用; 与荧光显微镜结合，可定量获取有关生物活体内蛋白质、脂类、DNA 和RNA 的时空信息。随着绿色荧光蛋白（GFP）的发展，FRET 荧光显微镜有可能实时测量活体细胞内分子的动态性质。提出了一种定量测量FRET效率以及供体与受体间距离的简单方法，仅需使用一组滤光片和测量一个比值，利用供体和受体的发射谱消除光谱间的串扰。该方法简单快速，可实时定量测量FRET 的效率和供体与受体间的距离，尤其适用于基于GFP 的供体受体对。
4)抗体与蛋白质阵列技术
蛋白芯片技术的出现给蛋白质组学研究带来新的思路。蛋白质组学研究中一个主要的内容就是研究在不同生理状态下蛋白水平的量变，微型化，集成化，高通量化的抗体芯片就是一个非常好的研究工具，他也是芯片中发展最快的芯片，而且在技术上已经日益成熟。这些抗体芯片有的已经在向临床应用上发展，比如肿瘤标志物抗体芯片等，还有很多已经应用再眼就的各个领域里。
5)免疫共沉淀技术
免疫共沉淀主要是用来研究蛋白质与蛋白质相互作用的一种技术，其基本原理是，在细胞裂解液中加入抗兴趣蛋白的抗体，孵育后再加入与抗体特异结合的结合于Pansobin珠上的金黄色葡萄球菌蛋白A(SPA)，若细胞中有正与兴趣蛋白结合的目的蛋白，就可以形成这样一种复合物：“目的蛋白—兴趣蛋白—抗兴趣蛋白抗体—SPA\|Pansobin”，因为PA\|Pansobin 比较大，这样复合物在离心时就被分离出来。经变性聚丙烯酰胺凝胶电泳，复合物四组分又被分开。然后经Western blotting法，用抗体检测目的蛋白是什么，是否为预测蛋白。这种方法得到的目的蛋白是在细胞内天然与兴趣蛋白结合的，符合体内实际情况，得到的蛋白可信度高。
12.请简述Sanger双脱氧终止法的原理
利用一种DNA聚合酶来延伸结合在待定序列模板上的引物。直到掺入一种链终止核苷酸为止。每一次序列测定由一套四个单独的反应构成，每个反应含有所有四种脱氧核苷酸三磷酸(dNTP)，并混入限量的一种不同的双脱氧核苷三磷酸(ddNTP)。由于ddNTP缺乏延伸所需要的3-OH基团，使延长的寡聚核苷酸选择性地在G、A、T或C处终止。终止点由反应中相应的双脱氧而定。每一种dNTPs和ddNTPs的相对浓度可以调整，使反应得到一组长几百至几千碱基的链终止产物。它们具有共同的起始点，但终止在不同的的核苷酸上，可通过高分辨率变性凝胶电泳分离大小不同的片段，凝胶处理后可用X-光胶片放射自显影或非同位素标记进行检测。
13.简述cDNA文库的构建过程。
1）mRNA分离；
2）cDNA第一链合成；
3）cDNA第二链合成；
4）载体与cDNA的连接；
5）噬菌体的包装及转染；
6）cDNA文库的扩增和保存。
14.简述RACE技术的原理。
RACE，就是5’Rapid Amplification of cDNA Ends,快速扩增cDNA末端。5′-RACE的原理是先是利用mRNA的3′末端的poly(A)尾巴作为一个引物结合位点，以Oligo(dT)30 MN作为锁定引物在反转录酶MMLV作用下，反转录合成标准第一链cDNA。利用该反转录酶具有的末端转移酶活性，在反转录达到第一链的5′末端时自动加上3一5个(dC)残基，退火后(dC)残基与含有SMART寡核苷酸序列Oliogo(dG)通用接头引物配对后。然后用一个含有部分接头序列的通用引物UPM（Universal P段扩增出来。最终，从2个有相互重叠序列的3′ / 5′-RACE产物中获得全长cDNA，或者通过分rimer）作为上游引物，用一个基因特异引物2（Gene Specific Primer 2，GSP2）作为下游引物，以第一链cDNA为模板，进行PCR循环，把目的基因5′末端的cDNA片析RACE产物的3′和5′端序列，合成相应引物扩增出全长cDNA。
15.蓝白斑筛选的原理是什么？
是根据载体的遗传特征筛选重组子，如α-互补、抗生素基因等。现在使用的许多载体都带有一个大肠杆菌的DNA的短区段，其中有β-半乳糖苷酶基因（lacZ）的调控序列和前146个氨基酸的编码信息。在这个编码区中插入了一个多克隆位点（MCS），它并不破坏读框，但可使少数几个氨基酸插入到β-半乳糖苷酶的氨基端而不影响功能，这种载体适用于可编码β-半乳糖苷酶C端部分序列的宿主细胞。因此，宿主和质粒编码的片段虽都没有酶活性，但它们同时存在时，可形成具有酶学活性的蛋白质。这样，lacZ基因在缺少近操纵基因区段的宿主细胞与带有完整近操纵基因区段的质粒之间实现了互补，称为α-互补。由α-互补而产生的LacZ+细菌在诱导剂IPTG的作用下，在生色底物X-Gal存在时产生蓝色菌落，因而易于识别。然而，当外源DNA插入到质粒的多克隆位点后，几乎不可避免地导致无α-互补能力的氨基端片段，使得带有重组质粒的细菌形成白色菌落。这种重组子的筛选，又称为蓝白斑筛选。
16.克隆基因如何鉴定？
1）基于基因的结构和序列的鉴定法，如限制酶切图谱，分子图谱，测序等。
2）基于表型特征的鉴定法：如抗性，报告基因的形状等。
3）基于基因产物的性质：如与抗体反应，肽谱，蛋白质活性等等。
17. 如果从某一物种中分离到一种新蛋白，如何设计实验研究其编码基因的结构和生物学功能？
1. mRNA水平检测基因表达：选择表达目的基因的组织/细胞，提取RNA，反转录，做RT-PCR 或real time RT-PCR，检测基因的表达情况/变化。（或者以northern blot、Rnase protection assay方法，检测基因的mRNA表达情况/变化。
2. 蛋白质水平检测基因表达：选择相应的组织/细胞，以Western blot、免疫组化（OR 免疫荧光)检测目的蛋白的表达。
3. 检测目的蛋白的细胞定位：将目的基因克隆至带荧光标签（如GFP）的表达载体，在适合的模式细胞中表达，检测目的蛋白在细胞内的定位
4.检测目的蛋白与其他蛋白的相互作用。酵母双杂交系统，免疫共沉淀技术。
18.在一个重组蛋白纯化过程中发现以下现象：在分子筛纯化中，发现有两个独立的蛋白质峰但是这两个峰经过SDS凝胶电泳法相在原来的条带下方又出项了两条新的电泳条带。这是为什么？如何采用可行的实验手段证实之？并提出防止出现上述现象的解决方案。
1）由于不同的聚合态存在，可能是蛋白质的二聚体或更好的聚合体。这种情形往往是动态的，将其中一个峰重新经过分子筛，会再分为两个峰。加入盐，去垢剂或还原剂肯能让其中一个峰消失。
2）蛋白质被蛋白酶降解。将新鲜纯化的蛋白质进行部分酶解即可得到类似的电泳结果。在纯化过程中或纯化后加入蛋白酶抑制剂，并经蛋白质保存在较低温度下。
19.生产限制性内切酶的细菌如何保护自己的DNA不被降解？
细菌通过对自身DNA上的识别序列进行甲基化来保护自己的DNA不被限制性内切酶破坏。
20.cDNA文库与基因组文库有什么差别？
1）基因组文库中包含了所有的基因，而cDNA文库指包含表达的基因，缺乏内元和调节序列，因此在研究基因结构时没有多大用处。
2）cDNA文库代表了mRNA的来源，其中一些特定的转录本丰富而另一些很少，所以蹲在风度的差别；而基因组文库在理论上均等地代表了所有基因序列；
3）从不同细胞类型制备的cDNA文库包含一些共同序列和独特序列，可用于分离差别表达的基因；基因组文库中不能；
4）基因组文库由于含有不表达序列，因此比cDNA文库大；
5）mRNA在不同的组织之间存在丰度的差异，因此cDNA文库在构建时对mRNA含量较少的就比较困难，而基因组文库不存在这样的问题。
21．如何进行启动子的结构与功能分析？
1）足迹法研究RNA聚合酶与启动子的识别及结合末端标记的DNA+RNA聚合酶→用DNA 酶水解箭头→电泳→放射自显影，对照：DNA→用DNA酶水解→电泳→放射自显影，结果：启动子部位受RNA聚合酶保护，不被降解；
2）启动子功能的研究——启动子突变。使启动子碱基序列发生变化或采用修饰碱基的方法，可以改变启动子的强弱。使启动子的功能减弱或消失→下降突变，使启动子的功能增强→上升突变。
22.核酸原位杂交的步骤有哪些？
组织与细胞的固定→组织与细胞杂交前的预处理→探针的选择及标记→杂交→杂交结果的检测。
第六章基因的表达与调控（上）——原核基因表达调控模式
一．名词解释
1）是指在个体发育的任一阶段都能在大多数细胞中持续进行的基因表达。其基因表达产物通常是对生命过程必须的或必不可少的，一般只受启动序列或启动子与RNA聚合酶相互作用的影响，且较少受环境因素的影响及其他机制的调节，也称基本的基因表达。
2）在非诱导状态下有少量的lac mRNA合成，这种合成称为本底水平组成型表达。
3）是指在特定环境因素刺激下，基因被激活，从而使基因的表达产物增加。
4）是指在特定环境因素刺激下，基因被抑制，从而使基因的表达产物。
5）又称分子内作用元件，只存在于DNA分子上的一些与基因转录调控有关的特殊顺序。6）又称分子间作用因子，指一些与基因表达调控有关的蛋白质因子。它们由某一基因表达后通过与特异的顺式作用元件相互作用，反式激活另一基因的转录。
7）指一段非编码DNA序列对基因转录的调控作用，促进转录的称顺式正调控，如启动子，增强子等;抑制转录的称顺式负调控，如沉默子（静息子）等。
8）指一种转录因子（一般是蛋白质）作用于顺式调控元件对基因的转录进行调控，若促进基因转录的是反式正调控，如RNA聚合酶；若阻遏基因转录的称反式负调控，如阻遏蛋白。9）是指当操纵子被阻遏，RNA合成被终止时，起终止转录信号作用的那一段核苷酸。弱化子对基因活性的影响是通过影响前导序列mRNA的结构而起作用的，起调节作用的某种氨基酰-tRNA的浓度。
10）一种翻译调控机制。在该机制中核糖体沿着mRNA分子的移动速率决定转录是进行还是终止。
11）色氨酸操纵子中RNA的前导序列中有一个有效地核糖体结合位点，并能形成由前导RNA27～68号碱基所编码的14个氨基酸的多肽，这一多肽被称为前导肽。
12）能诱导基因表达的小分子物质。对于可诱导的负控制操纵子来说，小分子的诱导物和阻遏蛋白的结合是阻遏蛋白从操纵子基因上解离下来而引起基因的转录；而对于可诱导的正控制操作元件来说，诱导物与无辅基诱导蛋白结合才能生成有活性的诱导物去促进基因的转录。
13）指一类能诱导酶的合成但又不被降解的分子。如IPTG。
14）当诱导物在相应位点结合时，他改变了阻遏蛋白的构想，干扰了另一位点的活性，这种类型的调控叫变构调控。
15）当葡萄糖存在的情况下，即使在细菌培基中加入乳糖，半乳糖，阿拉伯糖或麦芽糖等诱导物，与其相对应的操纵子也不会启动，产生出代谢这些糖的酶来，这种葡萄糖的存在阻止了其他糖类利用的现象，也称为葡萄糖效应。其原理在于葡萄糖的代谢中间产物会间接降低细胞内腺苷酸环化酶的活性，导致胞内cAMP的含量降低，继而使正调控蛋白（CAP）不能活化，导致其他碳源利用基因不能表达。
16）在可阻遏系统中，产生阻遏作用的小分子物质叫辅阻遏物。若是辅阻遏物钝化了无辅基诱导蛋白或是活化了无活性的阻遏蛋白，那么操纵子就会转入被阻遏的状态。
17）是一类再转录水平对基因表达产生负控作用的蛋白质，在一定条件下与DNA结合，一般具有诱导和阻遏两种类型。在诱导类型中，信号分子（诱导物）使阻遏蛋白从DNA释放下来；在阻遏类型中，信号分子使阻遏蛋白结合DNA，不管是哪一种情况，只要阻遏蛋白与DNA 结合，基因的转录均将抑制。
18）这是一种二聚体蛋白，每个亚基含有209个氨基酸残基，可起转录起始因子的作用，在有cAMP时与，能使操纵子有效的进行转录。
19）是目前已知的最简单的信号转导系统，有两种不同的蛋白质组成：即位于细胞膜上具有激酶活性的传感蛋白（激酶）和位于细胞质中应答调节蛋白。传感蛋白（激酶）在于膜外的信号反应过程中被磷酸化，再将磷酰集团转移到应答调节蛋白上，磷酸化的应答调节蛋白即成为阻遏或诱导蛋白，通过对操纵子的阻遏或激活作用调控下游基因的表达。
20）在原核生物中，核糖体与mRNA结合位点位于16srRNA的3’端，mRNA中与核糖体16srRNA 结合的序列称SD序列。SD序列是mRNA中5’端富含嘌呤的短核苷酸序列,一般位于mRNA 的起始密码子的AUG的上游4-10碱基处，并且同16srRNA 3’的序列互补。
21）当细菌生长过程中，遇到氨基酸全面匮乏时，细菌将会产生一个应答反应，停止全部的基因表达。产生这一应激反应的信号分子是鸟苷四磷酸（ppGpp），鸟感五磷酸(pppGpp)，ppGPP与pppGpp的作用不只是一个或几个操纵子，而是影响一大批，所称它们是超级调控子或称为魔斑。
22）指大肠杆菌对放射性或其它DNA损伤反应而诱导许多酶，包括激活修复活性。其原因是RecA激活蛋白酶活性，从而切割LexA抑制因子。
二．简答
1）答： -35(RNA聚合酶结合位点)、-10(RNA荣合酶起始位点)启动子序列和终止子； 2）答：操纵基因和启动子突变只影响顺式基因的表达(反式隐性的)，这是因为它们是调控序列，仅仅调节相同DNA分子上的相邻基因的表达。阻遏物基因编码可以扩散的基因产物，因此既能影响顺式又能影响反式基因的表达。
3）答：A、要求外源基因的编码区不能含有内含子；B、表达的外源片段要位于大肠杆菌启动子的下游，并形成正确的阅读框架；C、转录出的mRNA必须有与大肠杆菌16S rRNA3，末端相匹配的SD序列，才能被有效的翻译成蛋白质。D、蛋白产物必须稳定，不易被细胞内蛋白酶快速降解，且对宿主无害
三．论述
1）大肠杆菌乳糖操纵子包括三个结构基因：Z,Y,A以及一个操纵序列O，一个启动序列P
及一个调节基因I等。转录时，RNA聚合酶首先与启动区结合，通过操纵向右转录。转录从启动区又开始，按Z-Y-A得方向进行，每次转录出来的一条mRNA上都带有这三个基因。转录的调控是在启动区和操纵区进行的。
正调控机制：cAMP-CAP复合物与DNA结合改变了这一区段DNA次级结构，促进RNA聚合酶结合区的解链。这可能是cAMP-CAP 通过与RNA聚合酶结合，再与DNA结合，因而促进了RNA聚合酶与启动基因的结合，从而增强了转录。cAMP-CAP复合物的形成取决于细胞内cAMP的浓度，当以葡萄糖为能源时，由于其限制腺苷酸环化酶的活性，AMP不能转化为cAMP，细胞内cAMP的浓度降低，形不成cAMP-CAP复合物，因而乳糖结构基因不被转录。
负调控机制:具有活性的阻遏物只要结合在操纵基因上，就可阻挠RNA聚合酶的转录活动，这是由于P和O位点有一定的重叠序列，O被阻遏物占据后，RNA聚合酶便不能结合到P位点上。阻遏物有无活性又受乳糖这种小分子诱导物的影响。阻遏物与乳糖结合后，由于发生构想变化而失活，不再同操纵基因结合，于是RNA聚合酶便能结合于启动基因，启动基因的表达，使乳糖利用的结构基因转录出相应的mRNA,进而在翻译除蛋白质。在没有到合成这个调节系统中，阻遏蛋白是主要的作用因子，而诱导物可以影响阻遏蛋白的活性，只有阻遏物被诱导失活，结构基因才得以表达。
不同生长条件下的协调调节:
是指lac操纵子阻遏蛋白的负性调节与CAP的正性调节机制协调合作。CAP不能激活被阻遏封闭蛋白的基因的转录；反之，没有CAP的存在来加强转录活性，即使阻遏蛋白从操纵基因上解离，基因仍无转录活性。具体涉及存在以下四种不同的组合状态，决定基因表达与否，以适应环境中葡萄糖（G）和乳糖（L）的有无状态。即有葡萄糖时，先利用葡萄糖；用完后，然后再利用乳糖作为能源。葡萄糖和乳糖都不存在：CAP可发挥作用；但无乳糖的诱导，阻遏蛋白与DNA结合，基因关闭。
葡萄糖存在、乳糖不存在：有G存在，CAP不起作用；无L存在，阻遏蛋白与DNA结合，基因关闭。葡萄糖和乳糖都存在：阻遏蛋白与DNA解离，但由于有G存在，CAP不起作用，基因仍然关闭。葡萄糖不存在、乳糖存在：阻遏蛋白与DNA解离，无G存在，CAP起协同作用，基因转录启动。
2）异乳糖是乳糖操纵子的天然诱导物，它是乳糖经过末诱导细胞中的少量β—半乳糖苷酶代谢产生的。在lac突变中完全不存在β—半乳糖苷酶，乳糖不能被代谢，在lacZ一中完全没有透过酶，因此乳糖不能进入细胞。这样，两种突变体中都不能产生异乳糖，因此操纵子中的其余基因都不能被培养基中的乳糖诱导表达。但是其他的基因能被像IPTG这样的安慰诱导物诱导，因为IPTG既能作为诱导物，又不需透过酶的帮助就能进入细胞。
3） cAMP受体蛋白CRP，cAMP与CRP结合后所形成的复合物称激活蛋白CAP。当大肠杆菌生长在缺乏葡萄糖的培养基中时，CAP合成量增加，CAP具有激活乳糖等启动子的功能。一些依赖于CRP的启动子缺乏一般启动子所具有的典型的-35区序列特征。因此RNA聚合酶难以与其结合。CAP的存在：能显著提高酶与启动子结合常数。主要表现在以下二方面：
①CAP通过改变启动子的构象以及与酶的相互作用帮助分子正确定向，以便与-10区结合，起到取代-35区功能的作用。
②CAP还能抑制RNA聚合酶与DNA中其他位点的结合，从而提高与其特定启动子结合的概率。4） cAMP环化酶基因突变，cAMP环化酶减少，不能有效的形成cAMP-CAP复合物，影响CAP 与启动基因的结合，也影响RNA聚合酶与启动基因的结合，因此，转录不能进行，不能合成利用乳糖的β-半乳糖苷酶等相关酶。
5） Trp操纵子是一种阻遏型操纵子，当无色氨酸时，阻遏蛋白不能结合0序列，操纵基因开放，开始转录;当细胞内有大量的色氨酸时，辅阻遏蛋白与色氨酸结合后，可结合O
序列，阻遏基因转录E.coli的trp操纵子的另一个调控方式是衰减调节机制。在色氨酸操
纵子的第一个结构基因与启动基因之间存在一弱化区域，当细胞内色氨酸浓度很高时，通过与转录想偶联的翻译过程，形成一个弱化子结构，使RNA聚合酶从DNA上脱落，导致转录终止。
6）在色氨酸操纵子前端有一段前导转录序列，不编码色氨酸利用相关基因。但编码一段前导肽，在前导转录序列中有四段碱基序列，四个序列段之间相邻的两段之间分别可配对形成发卡结构。在前导肽的编码区内部有两个串联的色氨酸密码子，在后面不远处有翻译终止密码子。当缺乏Trp-tRNA时，核糖体停在色氨酸密码子处。使中间两端RNA互补序列配对形成抗终止结构，RNA聚合酶能够顺利转录色氨酸操纵子。当细胞内又不缺乏Trp或Trp-tRNA 时，核糖体可翻译前导肽至终止密码子，这是最后两段RNA互补序列形成一个典型的不依赖Rho的终止结构。导致RNA聚合酶终止色氨酸操纵子的转录，此为衰减子调控。
7）
的代谢是有araB,araA和araD基因所编码的三种酶催化的。其特点是：
①AraC蛋白是双功能的，单纯的C 蛋白结合于araO1（-100～144），起到阻遏作用；当C 蛋白和诱导物Ara结合形成的复合体是Cind,即诱导型的C蛋白，它结合于araI区（-40～-78）是RNA Pol结合于PBAD位点（+140），转录B，A，D三个基因；
②C蛋白结合araO1时也反馈性阻遏了其本身的表达；
③C蛋白的两种状态（Cind和Crep）功能不同，结合的位点也不同Cind结合于araI;Crep 可结合于araO1和araO2;④ara操纵子的C蛋白还可以调节分散的基因araE和F，因此此转录单位也称调节子（regulon）
⑤本操纵子有两个启动子Pc 和PBAD，可以双向转录；
⑥Pc启动子和araO1重叠。
调节机制如表所示
9）应急调控是指细菌处于贫瘠的生长环境，缺乏氨基酸供给蛋白质合成，它们即关闭大量
代谢过程的紧急应答反应。应急调控过程中有两种重要的信号分子：ppGpp和pppGpp。这两种效应分子能与其目标蛋白结合，改变其活性，进而抑制转录，使rRNA和tRNA的合成下降。同时蛋白质的降解加速糖，脂类及核苷酸的合成下降。
10）（1）σ因子决定RNA聚合酶识别特异性。原核生物的RNA聚合酶有全酶和核心酶之分，两者仅差一个σ因子（或亚基）。核心酶参与转录的延长，全酶参与转录的起始。σ因子识别特异启动序列，不同的σ因子决定特异基因的转录激活，决定mRNA，rRNA,tRNA基因的转录。
（2）原核生物中操纵子模型的普遍性。原核生物绝大多数基因按功能相关性成簇串联，密集于染色体上，共同组成一个转录单位——操纵子。原核基因的协调表达就是通过调控每个操纵子中启动序列的活性来完成的。
（3）阻遏蛋白与阻遏机制的普遍性。原核基因调控普遍涉及特异阻遏蛋白参与的转录开，关调节机制。
11）在最初的一小时内没有诱导物（乳糖)的存在，所以lac操纵于是关闭的。加入乳糖后，因为没有葡萄糖，lac操纵子经诱导表达，使乳糖能够被利用，一段时间后加入的大量葡萄糖导致分解代谢阻遏使lac操纵子重新关闭。
12） RecA 蛋白识别损伤的DNA单链区，与单链DNA结合后，RecA蛋白活性被激活，将LexA 切割成没有阻遏和与DNA操纵区结合的两个区，导致SOS反应（包括RecA）的高效表达。但修复完成，RecA蛋白又回到非水解蛋白的形式，LexA蛋白逐渐积累，并重新建立阻遏作用。
13） (1)异乳糖是乳糖操纵子的天然诱导物，它是乳糖经过末诱导细胞中的少量β-半乳糖苷酶代谢产生的。在lac突变中完全不存在β-半乳糖苷酶，乳糖不能被代谢，在lacZ-中完全没有透性酶，因此乳糖不能进入细胞。这样，两种突变体中都不能产生异乳糖，因此操纵子中的其余基因都不能被培养基中的乳糖诱导表达。但是其它的基因能被像IPTG这样的安慰诱导物诱导，因为IPTG既能作为诱导物，又不需透性酶的帮助就能进入细胞。
14）在可诱导的系统中，操纵子只有在诱导物存在时才开放，没有诱导物时阻碍物结合在操纵子上阻止结构基因的转录。存在诱导物时，它与阻遏物结合，使之变构不再与操纵子结合，打开操纵子。酶的诱导是分解途径特有的，诱导物就是酶的底物或者底物的类似物。在可阻碍系统中操纵子被终产物所关闭。不存在终产物时，阻碍物不能结合到操纵子上，因此操纵子开放；存在终产物时，它结合到阻碍物上，改变后者的构象，使其能结合到操纵子上，关闭操纵子。酶阻碍是合成代谢的特点。
课后作业：完成题库1、4、7、8、9、10、12、25题 01利润的概述 02所得税费用 利润是指企业在一定会计期间的经营成果。利润包括收入减去费用后的净额、直接计入当期利润的利得和损失等。 2.利润的构成 ①营业利润＝营业收入－营业成本－税金及附加－销售费用－管理费用－财务费用＋投资收益（减损失）＋公允价值变动收益（减损失）－资产减值损失+其他收益 ②利润总额＝营业利润＋营业外收入-营业外支出 ③净利润＝利润总额-所得税费用 习题解惑 【例题?单选题】下列各项中，影响当期营业利润的是（）。 A.处置固定资产净损益 B.自然灾害导致原材料净损失 C.支付委托代销商品的手续费 D.溢价发行股票支付的发行费用 【答案】C 【解析】选项A计入营业外收支，选项B计入营业外支出，选项D冲减资本公积。 【例题?多选题】下列各项中，既影响营业利润又影响利润总额的业务有（）。 A.计提坏账准备计入资产减值损失科目中 B.转销确实无法支付的应付账款 C.出售单独计价包装物取得的收入 D.转让股票所得收益计入投资收益 【答案】ACD 【解析】选项B，计入营业外收入，不影响营业利润。 营业外收支的账务处理 （一）营业外收入账务处理 1.处置非流动资产利得
处置固定资产通过“固定资产清理”科目核算，其账户余额转入营业外收入或营业外支出； 2.确认盘盈利得、捐赠利得 盘盈利得应通过“待处理财产损溢”科目核算 【例题?计算题】某企业将固定资产报废清理的净收益8000元转作营业外收入 写出会计分录。 【答案】 借：固定资产清理8000 贷：营业外收入-非流动资产处置利得8000 习题解惑 【例题?计算题】某企业在现金清查中盘盈200元，按管理权限报经批准后转入营业外收入。写出下列情况时的会计录： ①发现盘盈时： ②经批准转入营业外收入时： 【答案】 ①发现盘盈时： 借：库存现金200 贷：待处理财产损溢200 ②经批准转入营业外收入时： 借：待处理财产损溢200 贷：营业外收入200 【例题?多选题】下列各项中应计入营业外收入的有（）。 A.出售持有至到期投资的净收益 B.无法查明原因的现金溢余 C.出售无形资产的净收益 D.出售投资性房地产的净收益 【答案】BC 【解析】选项A，计入投资收益；选项D，计入其他业务收入。 【例题?单选题】下列各项中，不应计入营业外收入的是（）。 A.债务重组利得 B.处置固定资产净收益 C.收发差错造成存货盘盈 D.确实无法支付的应付账款 【答案】C 【解析】存货盘盈冲减管理费用。 所得税费用 （一）所得税费用的构成 所得税费用是指企业确认的应从当期利润总额中扣除的所得税费用。包括当期所得税和递延所得税两部分。
osce 考试病例分析参考试题 病历分析 一般会有60个病历供考生选择，病历分析中重点抓分要注意三点： 1.诊断一定要写全，要主次有序。如慢支的病历诊断要写：1）慢性支气炎合并感染 2 ）阻塞性肺气肿3）肺原性心脏病4）心功能几级要注意病史及辅检中提供的每个线索，各个系统中的疾病并不多，很容易判断出来，特别是外科及妇产科，病种更少，一但抽到，则立刻可断定是什么疾病。总之，诊断一定要写全。一些基本化验值也应知道，如血钾低，则在诊断中应加上低钾血症；一些疾病的基本特征是要掌握的，如膈下游离气体，则为消化道穿孔；外伤后出现昏迷及中间清醒期，则为硬膜外血肿，如有瞳孔的改变则考虑有脑疝出现，注意诊断前面还要加上脑外伤；脾破裂可以有被膜下出血，可以在伤后一周才出现出血性休克症状，要加以注意。 2.诊断依据：一定要用病史及辅检中给的资料，按诊断的顺序对应列出。上面提到的一些具体疾病特征就是诊断的重要依据。 3.鉴别诊断：要围绕着病变的部位及特征写出几种疾病，一般有三、四种，如果你真是不了解，那就将相近的疾病多写几种吧。 4.近一步检查：举几个例子供大家体会一下： 胃癌：进一步作CT（看一下肝、腹腔转移）；胸片（有无肺转移）心绞痛：24小时动态心电图、动态监测血清心肌酶闭合性腹部损伤（脾破裂）：腹腔穿刺、腹部B超、腹部X线 5.治疗：重点写治疗原则，也要有主次。注意不要忘记支持治疗，及一些预防复发、健康教育等项目 病例摘要：男性，13 岁，因高热、头痛、频繁呕吐 4 天。 患者4 天前（1 月15日）突然高热达40℃，伴发冷，寒战，同时出现剧烈头痛，头痛为全头痛。频繁呕吐，呈喷射性，吐出食物和胆汁，无上腹部不适，进食少，二便正常。所在学校有类似病人发生。 查体：T39.5℃，P100 次/分，R22 次/分，Bp120/90mmHg，急性热病容，神清，皮肤散在少量出血点，浅表淋巴结未触及，巩膜无黄染，咽充血，扁桃体无肿大，颈强（），两肺叩清音，无啰音，心界叩诊不大，心率110 次/分，律齐，腹平软，肝脾肋下未触及，下肢不肿，Brudzinski 征（），Kernig 征（），Babinski 征（-） 化验：血WBC17.2×109/L，N86％，L14％。要求根据以上病史摘要，将诊断及诊断依据；鉴别诊断；进一步检查与治疗原则写在答题纸上。 标准答案： 一、诊断及诊断依据：8分（一）诊断流行性脑脊髓膜炎（普通型）可能性大。（4 分）（二）诊断依据 1.冬春季节发病（1 月15日），当地有本病发生（学校有类似病人）。（1 分） 2.急起高热，剧烈头痛，频繁喷射性呕吐，皮肤出血点和脑膜刺激征。（2 分） 3.化验血WBC 总数及中性粒细胞比例增高。（1 分） 二、鉴别诊断：5分 1.其他细菌引起的化脓性脑膜炎。（2 分） 2.结核性脑膜炎。（2 分） 3.病毒性 脑膜炎。（1 分）
高分子物理课后答案,何曼君,第三版 第三章 高分子的溶解过程与小分子相比有什么不同？ 高分子与溶剂分子的尺寸相差悬殊，两者运动分子运动速度差别很大，现是溶剂分子渗入高聚物内部，是高聚体膨胀，称为“溶胀”，然后高分子均匀分散在溶剂中，形成完全溶解的分子分散的均相体系。对于交联的高分子只停留在溶胀阶段，不会溶解。 第二维里系数A2的物理意义？ 第二维利系数的物理意义是高分子链段和链段间的内排斥与高分子链段和溶剂分子间能量上相互作用、两者相互竞争的一个量度。它与溶剂化作用和高分子在溶液里的形态有密切关系。良溶剂中，高分子链由于溶剂化作业而扩张，高分子线团伸展，A2是正值；温度下降或在非良溶剂，高分子线团收缩，A2是负值；当链段与链段、溶剂与高分子链段相互作业想等时，高分子溶液符合理想溶液的性质，A2为零，相当于高分子链处于无扰状态。 高分子的理想链和真实链有哪些区别？ ①理想链是一种理论模型，认为化学键不占体积，自由旋转，没有键角和位垒的限制，而真实链有键角限制和位垒的限制。 ②理想链没有考虑远程相互作用和近程相互作用，而真实链要考虑链节与链节之间的体积排除和链与周围环境的相互作用以及链与链之间的相互作用等。 高分子的稀溶液、亚浓溶液、浓溶液有哪些本质的区别？ 三种溶液最本质的区别体现在溶液中和高分子无规线团之间的相互作用和无规线团的形态结构不同： ① 稀溶液：高分子线团是相互分离的，溶液中高分子链段的分布也是不均一的；线团 之间的相互作用可以忽略。 ②浓溶液：大分子链之间发生相互穿插和缠结，溶液中链段的空间密度分布趋于均一。 ② 亚浓溶液：亚浓溶液介于稀溶液和浓溶液之间，高分子线团开始相互穿插交叠，整 个溶液中链段的分布趋于均一；高分子线团与临近线团开始相互作用。 第四章一般共混物的相分离与嵌段共聚物的微相分离在本质上有何差别？ 由于嵌段共聚物的嵌段间不相容而发生相分离，平均相结构微区的大小只有几十到几百纳米，即微相分离，两相之间的作用力是化学键。两种聚合物共混时，由于混合熵很小，混合晗决定于聚合物之间的相互作用，通常较小，所以两种聚合物混合自由能通常大于零，是分相的。而一般共混物两相界面之间的作用力是分子间作用力或氢键，其分相可能是宏观可
▲为08年6月考试题目 第一章概述 说出10种您在日常生活中遇到的高分子的名称。 答:涤纶、聚四氟乙烯、聚乙烯、聚丙烯、PET、蛋白质、核酸、涂料、塑料、合成纤维 写出下列高分子的重复单元的结构式:(1)PE;(2)PS;(3)PVC;(4)POM;(5)尼龙;(6)涤纶答:(1)PE——聚乙烯－CH2－CH2－ (2)PS——聚苯乙烯 (3)PVC——聚氯乙烯 (4)POM——聚甲醛－O－CH2－ (5)尼龙——聚酰胺－NH(CH2)5CO－ (6)涤纶——聚对苯二甲酸乙二醇酯P7 名称结构单元单体单元 H2 C C CH3 H3COOC 聚甲基丙烯酸甲酯一样一样 H2 C H C H3COOC 聚丙烯酸甲酯一样一样 —NH(CH2)6NHCO(CH)4CO—尼龙-66 —NH(CH2)6NH— —CO(CH)4CO— 无 H2 C C H3C H C C H2 聚异戊二烯一样一样 ▲ (1)高分子;(2)链节;(3)聚合度;(4)多分散度;(5)网状结构;(6)共聚物 答:(1)高分子也叫聚合物分子或大分子,具有高的相对分子量,其结构必须就是由多个重复单元所组成,并且这些重复单元实际就是或概念上就是由相应的小分子衍生而来的。 (2)链节就是指结构重复单元,重复组成高分子分子结构的最小结构单元。 (3)聚合度就是单个聚合物分子所含单体单元的数目。 (4)多分散性:除了蛋白质、DNA等外,高分子化合物的相对分子质量都就是不均一的 (5)网状结构就是交联高分子的分子构造。 (6)共聚物:由一种以上单体聚合而成的聚合物。 14、平均相对分子质量为100万的超高相对分子质量PE的平均聚合度就是多少？ P＝100×10000/28＝35700
1 文件系统阶段的数据管理有些什么缺陷试举例说明。 文件系统有三个缺陷： （1）数据冗余性（redundancy)。由于文件之间缺乏联系，造成每个应用程序都有对应的文件，有可能同样的数据在多个文件中重复存储。 （2）数据不一致性（inconsistency)。这往往是由数据冗余造成的，在进行更新操作时，稍不谨慎，就可能使同样的数据在不同的文件中不一样。 （3）数据联系弱(poor data relationship)。这是由文件之间相互独立，缺乏联系造成的。 2 计算机系统安全性 （1）为计算机系统建立和采取的各种安全保护措施，以保护计算机系统中的硬件、软件及数据； （2）防止其因偶然或恶意的原因使系统遭到破坏，数据遭到更改或泄露等。 3. 自主存取控制缺点 （1）可能存在数据的“无意泄露” （2）原因：这种机制仅仅通过对数据的存取权限来进行安全控制，而数据本身并无安全性标记 （3）解决：对系统控制下的所有主客体实施强制存取控制策略 4. 数据字典的内容和作用是什么 数据项、数据结构 数据流数据存储和加工过程。 5. 一条完整性规则可以用一个五元组（D，O，A，C，P）来形式化地表示。 对于“学号不能为空”的这条完整性约束用五元组描述 D：代表约束作用的数据对象为SNO属性； O（operation）：当用户插入或修改数据时需要检查该完整性规则； A（assertion）：SNO不能为空； C（condition）：A可作用于所有记录的SNO属性； P（procdure）：拒绝执行用户请求。 6.数据库管理系统（DBMS）
：①即数据库管理系统（Database Management System)，是位于用户与操作系统之间的 一层数据管理软件，②为用户或应用程序提供访问DB的方法，包括DB的建立、查询、更 新及各种数据控制。 DBMS总是基于某种数据模型，可以分为层次型、网状型、关系型、面 向对象型DBMS。 7.关系模型：①用二维表格结构表示实体集，②外键表示实体间联系的数据模型称为关系模 型。 8.联接查询：①查询时先对表进行笛卡尔积操作，②然后再做等值联接、选择、投影等操作。 联接查询的效率比嵌套查询低。 9. 数据库设计：①数据库设计是指对于一个给定的应用环境，②提供一个确定最优数据模 型与处理模式的逻辑设计，以及一个确定数据库存储结构与存取方法的物理设计，建立起 既能反映现实世界信息和信息联系，满足用户数据要求和加工要求，又能被某个数据库管 理系统所接受，同时能实现系统目标，并有效存取数据的数据库。 10．事务的特征有哪些 事务概念 原子性一致性隔离性持续性 11．已知3个域： D1=商品集合=电脑，打印机 D3=生产厂=联想，惠普 求D1，D2，D3的卡尔积为： 12.数据库的恢复技术有哪些 数据转储和和登录日志文件是数据库恢复的
第9章聚合物的流变性 1.什么是假塑性流体？绝大多数聚合物熔体和浓溶液在通常条件下为什么均呈现假塑性流体的性质？试用缠结理论加以解释。 答：（1）流动指数n<1的流体称为假塑性流体； （2）略 2.聚合物的粘性流动有何特点？为什么？ 3.为什么聚合物的粘流活化能与分子量无关？ 答：根据自由体积理论，高分子的流动不是简单的整个分子的迁移，而是通过链段的相继跃迁来实现的。形象的说，这种流动的类似于蚯蚓的蠕动。因而其流动 活化能与分子的长短无关。,由实验结果可知当碳链不长时，随碳数的增加而增加，但当碳数大于30时，不再增大，因此聚合物超过一定数值后，与相对分子质量无关。 4.讨论聚合物的分子量和分子量分布对熔体粘度和流变性的影响。 答：低切变速率下，当时，略依赖于聚合物化学结构和温度，当 时，与聚合物化学结构，分子量分布及温度无关；增大切变速率，链 缠结结构破坏程度增加，分子量对体系粘度影响减小。 聚合物熔体非牛顿流动时的切变速率随分子量加大向低切变速率移动，剪切引起的粘度下降，分子量低的试样也比分子量高的试样小一些。分子量相同时分子量分布宽的聚合物熔体出现非牛顿流动的切变速率比分布窄的要低的多。 5.从结构观点分析温度、切变速率对聚合物熔体粘度的影响规律，举例说明这一规律在成型加工中的应用。 答：a.温度升高，粘度下降，在较高温度的情况下，聚合物熔体内自由体积相当大，流动粘度的大小主要取决于高分子链本身的结构，即链段跃迁运动的能力，一般分子链越刚硬，或分子间作用力越大，则流动活化能越高，这类聚合物是温敏性的；当温度处于一定范围即Tg 第一章绪论 思考题 1. 举例说明单体、单体单元、结构单元、重复单元、链节等名词的含义，以及它们之间的相互关系和区别。答：合成聚合物的原料称做单体，如加聚中的乙烯、氯乙烯、苯乙烯，缩聚中的己二胺和己二酸、乙二醇和对苯二甲酸等。 在聚合过程中，单体往往转变成结构单元的形式，进入大分子链，高分子由许多结构单元重复键接而成。在烯类加聚物中，单体单元、结构单元、重复单元相同，与单体的元素组成也相同，但电子结构却有变化。在缩聚物中，不采用单体单元术语，因为缩聚时部分原子缩合成低分子副产物析出，结构单元的元素组成不再与单体相同。如果用2种单体缩聚成缩聚物，则由2种结构单元构成重复单元。 聚合物是指由许多简单的结构单元通过共价键重复键接而成的分子量高达104-106的同系物的混合物。 聚合度是衡量聚合物分子大小的指标。以重复单元数为基准，即聚合物大分子链上所含重复单元数目的平 X表示。均值，以DP表示；以结构单元数为基准，即聚合物大分子链上所含结构单元数目的平均值，以n 2. 举例说明低聚物、齐聚物、聚合物、高聚物、高分子、大分子诸名词的的含义，以及它们之间的关系和区别。 答：合成高分子多半是由许多结构单元重复键接而成的聚合物。聚合物（polymer）可以看作是高分子（macromolecule）的同义词，也曾使用large or big molecule的术语。 从另一角度考虑，大分子可以看作1条大分子链，而聚合物则是许多大分子的聚集体。 根据分子量或聚合度大小的不同，聚合物中又有低聚物和高聚物之分，但两者并无严格的界限，一般低聚物的分子量在几千以下，而高聚物的分子量总要在万以上。多数场合，聚合物就代表高聚物，不再标明“高”字。 齐聚物指聚合度只有几~几十的聚合物，属于低聚物的范畴。低聚物的含义更广泛一些。 3. 写出聚氯乙烯、聚苯乙烯、涤纶、尼龙-66、聚丁二烯和天然橡胶的结构式（重复单元）。选择其常用分子量，计算聚合度。 聚合物结构式（重复单元） 聚氯乙烯-[-CH2CHCl-]- n 聚苯乙烯-[-CH2CH(C6H5)-]n 涤纶-[-OCH2CH2O?OCC6H4CO-]n 尼龙66（聚酰胺-66）-[-NH(CH2)6NH?CO(CH2)4CO-]n 聚丁二烯-[-CH2CH=CHCH2 -]n 天然橡胶-[CH2CH=C(CH3)CH2-]n 聚合物分子量/万结构单元分子 DP=n 特征 量/万 第一章数据库系统概述 选择题 1实体-联系模型中，属性是指（C） A.客观存在的事物 B.事物的具体描述 C.事物的某一特征 D.某一具体事件 2对于现实世界中事物的特征，在E-R模型中使用（A） A属性描述B关键字描述C二维表格描述D实体描述 3假设一个书店用这样一组属性描述图书（书号，书名，作者，出版社，出版日期），可以作为“键”的属性是（A） A书号B书名C作者D出版社 4一名作家与他所出版过的书籍之间的联系类型是（B） A一对一B一对多C多对多D都不是 5若无法确定哪个属性为某实体的键，则（A） A该实体没有键B必须增加一个属性作为该实体的键C取一个外关键字作为实体的键D该实体的所有属性构成键 填空题 1对于现实世界中事物的特征在E-R模型中使用属性进行描述 2确定属性的两条基本原则是不可分和无关联 3在描述实体集的所有属性中，可以唯一的标识每个实体的属性称为键 4实体集之间联系的三种类型分别是1：1 、1：n 、和m：n 5数据的完整性是指数据的正确性、有效性、相容性、和一致性 简答题 一、简述数据库的设计步骤 答:1需求分析：对需要使用数据库系统来进行管理的现实世界中对象的业务流程、业务规则和所涉及的数据进行调查、分析和研究，充分理解现实世界中的实际问题和需求。 分析的策略：自下而上——静态需求、自上而下——动态需求 2数据库概念设计：数据库概念设计是在需求分析的基础上，建立概念数据模型，用概念模型描述实际问题所涉及的数据及数据之间的联系。 3数据库逻辑设计：数据库逻辑设计是根据概念数据模型建立逻辑数据模型，逻辑数据模型是一种面向数据库系统的数据模型。 4数据库实现：依据关系模型，在数据库管理系统环境中建立数据库。 二、数据库的功能 答：1提供数据定义语言，允许使用者建立新的数据库并建立数据的逻辑结构 2提供数据查询语言 3提供数据操纵语言 4支持大量数据存储 5控制并发访问 三、数据库的特点 答：1数据结构化。2数据高度共享、低冗余度、易扩充3数据独立4数据由数据库管理系统统一管理和控制：（1）数据安全性（2）数据完整性（3）并发控制（4）数据库恢复 第二章关系模型和关系数据库 选择题 1把E-R模型转换为关系模型时，A实体（“一”方）和B实体（“多”方）之间一对多联系在关系模型中是通过（A）来实现的 江西省住院医师规范化培训师资班试卷 姓名单位专业职称成绩住院医师规范化培训-临床技能考核评分表 本专业的考题： 患者，男，23岁，发热，咳嗽、咳痰3天 问题1-1：您作为接诊医师，应了解那些相关病史（问诊）—1站 问题1-2：体检的重点—1站 问题2：写出完整病历—2站 问题3：你应安排哪些必要的检查—3、4、5站（实验室、心电图、影像资料见后） 住院医生培训临床技能考核评分表—实验室检查 姓名＿＿＿＿单位＿＿＿＿＿＿＿＿准考证号＿＿＿＿＿成绩＿＿＿＿ 与本病例相关的假设临床检验报告单一，实验室参考诊断意见：（此化验单为病例本人化验结果）结合病史，此病例考虑感染，血常规白细胞正常多见于非典型病原体，结核等感染；嗜酸性细胞高，需考虑感染引起的变态反应。 贴临床检验报告单 与本病例相关的假设临床检验报告单二，实验室参考诊断意见：（与本病例无关）患者低热、乏力、咳嗽半月，胸片提示肺部感染，此化验单为T-SPOT检查，阳性需考虑结核感染。 贴临床检验报告单 考官签字：日期：年月日 住院医生培训临床技能考核评分表--心电图 姓名＿＿＿＿单位＿＿＿＿＿＿＿＿准考证号＿＿＿＿＿成绩＿＿＿＿心电图题目一： 心电图参考诊断意见： 窦性心动过速 贴临床心电图 心电图题目二： 心电图参考诊断意见： 窦性心律，频发房性早搏，呈二联律，P波改变，胸导联r波递增不良。 贴临床心电图 考官签字：日期：年月日 住院医生培训临床技能考核评分表--影像学检查 姓名＿＿＿＿单位＿＿＿＿＿＿＿＿准考证号＿＿＿＿＿成绩＿＿＿＿大放射学题目一： 临床影像学参考诊断： 右肺上叶肿块影并纵隔淋巴结转移，考虑肺癌，并周边阻塞性肺炎，两肺气肿，右侧少量胸腔积液贴临床影像图片 考官签字：日期：年月日 高分子物理答案详解（第三版） 第1章高分子的链结构 1.写出聚氯丁二烯的各种可能构型。 等。 2．构象与构型有何区别？聚丙烯分子链中碳—碳单键是可以旋转的，通过单键的内旋转是否可以使全同立构聚丙烯变为间同立构聚丙烯？为什么？ 答：（1）区别：构象是由于单键的内旋转而产生的分子中原子在空间位置上的变化，而构型则是分子中由化学键所固定的原子在空间的排列；构象的改变不需打破化学键，而构型的改变必须断裂化学键。 （2）不能，碳-碳单键的旋转只能改变构象，却没有断裂化学键，所以不能改变构型，而全同立构聚丙烯与间同立构聚丙烯是不同的构型。 3.为什么等规立构聚丙乙烯分子链在晶体中呈31螺旋构象，而间规立构聚氯乙烯分子链在晶体中呈平面锯齿构象？ 答（1）由于等归立构聚苯乙烯的两个苯环距离比其范德华半径总和小，产生排斥作用，使平面锯齿形（…ttt…）构象极不稳定，必须通过C-C键的旋转，形成31螺旋构象，才能满足晶体分子链构象能最低原则。 （2）由于间规聚氯乙烯的氯取代基分得较开，相互间距离比范德华半径大，所以平面锯齿形构象是能量最低的构象。 4.哪些参数可以表征高分子链的柔顺性？如何表征？ 答：（1）空间位阻参数（或称刚性因子），值愈大，柔顺性愈差； （2）特征比Cn，Cn值越小，链的柔顺性越好； （3）连段长度b，b值愈小，链愈柔顺。 5．聚乙烯分子链上没有侧基，内旋转位能不大，柔顺性好。该聚合物为什么室温下为塑料而不是橡胶？ 答：这是由于聚乙烯分子对称性好，容易结晶，从而失去弹性，因而在室温下为塑料而不是橡胶。 6.从结构出发，简述下列各组聚合物的性能差异： （1）聚丙烯睛与碳纤维； （2）无规立构聚丙烯与等规立构聚丙烯； （3）顺式聚1，4-异戊二烯（天然橡胶）与反式聚1，4-异戊二烯（杜仲橡胶）。（4）高密度聚乙烯、低密度聚乙烯与交联聚乙烯。 (1)线性高分子梯形高分子 (2 非晶高分子结晶性高分子 (3)柔性 (4)高密度聚乙烯为平面锯齿状链，为线型分子，模量高，渗透性小，结晶度高，具有好的拉伸强度、劲度、耐久性、韧性；低密度聚乙烯支化度高于高密度聚乙烯（每1000 个主链 C 原子中约含15～35 个短支链），结晶度较低，具有一定的韧性，放水和隔热性能较好；交联聚乙烯形成了立体网状的结构，因此在韧性、强度、耐热性等方面都较高密度聚乙烯和低密度聚乙烯要好。 高分子材料加工成型原理 课后练习题参考答案 2015-1-4 整理：二专业の学渣 第一章 1、请用粘弹性的滞后效应相关理论解释塑料注射成型制品的变形收缩现象以及热处理的作用。 答： （1）粘弹性滞后效应是指在外作用力下，聚合物分子链由于跟不上外力作用速度而造成的形变总是落后于外力作用速度的效应。 （2）当注射制件脱模时大分子的形变并非已经停止，在贮存和使用过程中，大分子重排运动的发展，以致密度增加，体积收缩。 （3）在Tg—Tf温度范围对成型制品进行热处理，可以缩短大分子形变的松弛时间，加速结晶聚合物的结晶速度，使制品的形状能加快的稳定下来。 2、比较塑性形变和粘弹性形变的异同点。 答：同：都是不可逆变形。 异：（1）温度区间不同，塑性形变温度区间为Tg—Tf；粘性形变温度区间为Tf以上。 （2）作用力和时间不同，塑性形变需较大外力和较长时间；粘性形变要很小的外力和瞬时。 3、什么是聚合物的力学三态，各自的特点是什么？各适用于什么加 工方法？ 答：玻璃态、高弹态、粘流态称为聚合物的力学三态。 （1）玻璃态：聚合物模量高，形变小，故不宜进行大形变的成型加工。适用：二次加工 （2）高弹态：产生较大的可逆形变；聚合物粘性大，且具有一定的强度。适用：较大变形的成型工艺。 （3）粘流态：很大的不可逆形变；熔体黏度低。适用：流动性要求较高的成型加工技术。 第二章 1、画出几种典型流体的剪切力-剪切速率流动曲线，并简单说明各自的流变行为特征。 答：宾汉流体：与牛顿流体相同，剪切速率～剪切应力的关系也是一条直线，不同处：它的流动只有当 高到一定程度后才开始。 假塑性流体：流体的表观粘度随剪切应力的增加而降低。也即切力变稀现象。 膨胀性流体：流体的表观粘度随剪切应力的增加而增加。也即切力增稠现象。 2、怎么样根据聚合物粘度的温敏特性以及切敏特性选择加工条件？ 答：（1）根据聚合物粘度的温敏特性，当聚合物处于粘流温度以上不宽的温度范围内时，用 Andrade公式：选择尽可能打 的温度作为加工条件。当温度包括从玻璃化温度到熔点这样打的温度范围时，用W.L.F方程： osce考试病例分析参考试题 病历分析 一般会有60个病历供考生选择，病历分析中重点抓分要注意三点： 1.诊断一定要写全，要主次有序。如慢支的病历诊断要写：1）慢性支气炎合并感 染2）阻塞性肺气肿3）肺原性心脏病4）心功能几级要注意病史及辅检中提供的每 个线索，各个系统中的疾病并不多，很容易判断出来，特别是外科及妇产科，病种更少，一但抽到，则立刻可断定是什么疾病。总之，诊断一定要写全。一些基本化验值也应知道，如血钾低，则在诊断中应加上低钾血症；一些疾病的基本特征是要掌握的，如膈下游离气体，则为消化道穿孔；外伤后出现昏迷及中间清醒期，则为硬膜外血肿，如有瞳孔的改变则考虑有脑疝出现，注意诊断前面还要加上脑外伤；脾破裂可以有被膜下出血，可以在伤后一周才出现出血性休克症状，要加以注意。 2.诊断依据：一定要用病史及辅检中给的资料，按诊断的顺序对应列出。上面提到的一些具体疾病特征就是诊断的重要依据。 3.鉴别诊断：要围绕着病变的部位及特征写出几种疾病，一般有三、四种，如果你真是不了解，那就将相近的疾病多写几种吧。 4.近一步检查：举几个例子供大家体会一下： 胃癌：进一步作CT（看一下肝、腹腔转移）；胸片（有无肺转移） 心绞痛：24小时动态心电图、动态监测血清心肌酶闭合性腹部损伤（脾破裂）：腹腔穿刺、腹部B超、腹部X线 5.治疗：重点写治疗原则，也要有主次。注意不要忘记支持治疗，及一些预防复发、健康教育等项目 病例摘要：男性，13岁，因高热、头痛、频繁呕吐4天。 患者4天前（1月15日）突然高热达40℃，伴发冷，寒战，同时出现剧烈头痛，头 痛为全头痛。频繁呕吐，呈喷射性，吐出食物和胆汁，无上腹部不适，进食少，二便正常。所在学校有类似病人发生。 查体：T39.5℃，P100次/分，R22次/分，Bp120/90mmHg，急性热病容，神清，皮 肤散在少量出血点，浅表淋巴结未触及，巩膜无黄染，咽充血，扁桃体无肿大，颈强（），两肺叩清音，无啰音，心界叩诊不大，心率110次/分，律齐，腹平软 ，肝脾肋下未触及，下肢不肿，Brudzinski征（），Kernig征（），Babinski 征（-） 化验：血WBC17.2×109/L，N86％，L14％。 要求根据以上病史摘要，将诊断及诊断依据；鉴别诊断；进一步检查与治疗原则写在答题纸上。 标准答案： 一、诊断及诊断依据：8分 （一）诊断流行性脑脊髓膜炎（普通型）可能性大。（4分） （二）诊断依据 高分子物理习题答案 第一章高分子链的结构 3．高分子科学发展中有二位科学家在高分子物理领域作出了重大贡献并获得诺贝尔奖，他们是谁？请列举他们的主要贡献。 答：（1）H. Staudinger（德国）：“论聚合”首次提出高分子长链结构模型，论证高分子由小分子以共价键结合。1953年获诺贝尔化学奖。 贡献：（1）大分子概念：线性链结构 （2）初探[η]=KMα关系 （3）高分子多分散性 （4）创刊《die Makromol.Chemie》1943年 （2）P. J. Flory（美国），1974年获诺贝尔化学奖 贡献：（1）缩聚和加聚反应机理 （2）高分子溶液理论 （3）热力学和流体力学结合 （4）非晶态结构模型 6．何谓高聚物的近程（一级）结构、远程（二级）结构和聚集态结构？试分别举例说明用什么方法表征这些结构和性能，并预计可得到哪些结构参数和性能指标。 答：高聚物的一级结构即高聚物的近程结构，属于化学结构，它主要包括链节、键接方式、构型、支化和交联结构等，其表征方法主要有：NMR, GC, MS, IR, EA, HPLC, UV等。而高聚物的二级结构即高聚物的远程结构，主要包括高分子链的分子量、分子尺寸、分子形态、链的柔顺性及分子链在各种环境中所采取的构象，其表征方法主要有：静态、动态光散射、粘度法、膜渗透压、尺寸排除色谱、中子散射、端基分析、沸点升高、冰点降低法等。高聚物的聚集态结构主要指高分子链间相互作用使其堆积在一起形成晶态、非晶态、取向态等结构。其表征方法主要有：x-射线衍射、膨胀计法、光学解偏振法、偏光显微镜法、光学双折射法、声波传播法、扫描电镜、透射电镜、原子力显微镜、核磁共振，热分析、力学分析等。 8．什么叫做高分子的构型？试讨论线型聚异戊二烯可能有哪些不同的构型。 答：由化学键所固定的原子或基团在空间的几何排布。 1，2：头-头，全同、间同、无规；头-尾，全同、间同、无规 3，4：头-头，全同、间同、无规；头-尾，全同、间同、无规 1，4：头-头，顺、反；头-尾，顺、反 9．什么叫做高分子构象？假若聚丙烯的等规度不高，能不能用改变构象的办法提高其等规度？说明理由。答：由于单键内旋转而产生的分子在空间的不同形态（内旋转异构体）称为构象。不能用改变构象的办法提高其更规度。等规度是指高聚物中含有全同和间同异构体的总的百分数，涉及的是构型问题，要改变等规度，即要改变构型。而构型是由化学键所固定的原子或基团在空间的几何排布，改变构型必须通过化学键的断裂和重组。 11．假定聚丙烯主链上的键长为0.154纳米，键角为109.5°，根据下表所列数据，求其等效自由结合链的链段长度l e及极限特征比C∞。 聚合物溶剂温度（℃）A×104（nm）σ 聚丙烯（无规）环已烷、甲苯30 835 1.76 在计算机局域网中，常用通信设备有（ABD） A集线器 B交换机 C调制解调器 D路由器 线缆标准化工作主要由哪一儿歌协会制定？（C） A OSI B ITU-T C EIA D IEEE 802协议族是由以下面那一个组织定义？（C） A OSI B EIA C IEEE D ANSI 衡量网络性能的两个主要指标为（AC） A带宽 B可信度 C延迟 D距离 局域网区别其他网络主要体现在以下（ABCD）方面。 A网络所覆盖的物理范围 B网络所使用的传输技术 C网络的拓扑结构 D带宽 会产生单点故障的是下列（ABC）拓扑结构 A总线型 B环型 C网状结构 D星型 数据交换技术包括（ABC） A电路交换 B报文交换 C分组交换 D文件交换 （B）拓扑结构会受到网络中信号反射的影响？ A网型 B总线型 C环型 D星型 OSI参考模型按照顺序有哪些层？（C） C应用层、表示层、会话层、传输层、网络层、数据链路层、物理层在OSI七层模型中，网络层的功能有（B） A确保数据的传送正确无误 B确定数据包如何转发与路由 C在信道上传比特流 D纠错与流控 在OSI七层模型中，（B）哪一层的实现对数据加密。 A传输层 B表示层 C应用层 D网络层 网络层传输的数据叫做（B） A比特 B包 C段 D帧 TCP/IP协议栈中传输层协议有（AC） A TCP B ICMP C UDP D IP 数据从上到下封装的格式为（B） A比特包帧段数据 B数据段包帧比特 C比特帧包段数据 D数据包段帧比特 物理层定义了物理接口的哪些特性？（ABCD） A机JIE特性 B电气特性 C功能特性 D接口特性 细同轴电缆（10Base2）传输距离约达（A）粗同轴电缆（10Base5）的传输距离为（B） A 200米 B 500米 C 150米 D 485米 通常在网吧里，LAN采用的拓扑结构和网线类型为（C） A总线型和STP B总心型和UTP C形型和UTP D环型和STP 双绞线电缆为什么能代替网络中的细同轴电缆。（D） A双绞线电缆可靠性高 B双绞线电缆抗噪性更好 C细同轴电缆更廉价 D双绞线电缆更便于安装 在布线时，细缆和粗缆通常应用在（D）拓扑结构中。 一、单项选择题 1．高分子的基本运动是（ B ）。 A．整链运动B．链段运动C．链节运动 2．下列一组高聚物分子中，柔性最大的是（ A ）。 A.聚氯丁二烯 B.聚氯乙烯 C.聚苯乙烯 3. 下列一组高聚物中，最容易结晶的是( A ). A.聚对苯二甲酸乙二酯 B. 聚邻苯二甲酸乙二酯 C. 聚间苯二甲酸乙二酯 4．模拟线性聚合物的蠕变全过程可采用（ C ）模型。 A.Maxwell B. Kelvin C. 四元件 5.在半晶态聚合物中，发生下列转变时，判别熵值变大的是（ A ）。（1）熔融（2）拉伸取向（3）结晶（4）高弹态转变为玻璃态 6.下列一组高聚物分子中，按分子刚性的大小从小到大的顺序是（ADBFC ）。 A.聚甲醛； B.聚氯乙烯； C.聚苯乙烯； D. 聚乙烯；F. 聚苯醚 7．.假塑性流体的特征是（ B ）。 A．剪切增稠B．剪切变稀C．粘度仅与分子结构和温度有关 8.热力学上最稳定的高分子晶体是（ B ）。 A．球晶B．伸直链晶体C．枝晶 9.下列高聚物中，只发生溶胀而不能溶解的是（ B ）。 A. 高交联酚醛树脂； B. 低交联酚醛树脂； C.聚甲基丙稀酸甲脂 10.高分子-溶剂相互作用参数χ1（ A ）聚合物能溶解在所给定的溶剂中 A. χ1<1/2 B. χ1>1/2 C. χ1=1/2 11.判断下列叙述中不正确的是（ C ）。 A．结晶温度越低，体系中晶核的密度越大，所得球晶越小； B．所有热固性塑料都是非晶态高聚物； C．在注射成型中，高聚物受到一定的应力场的作用，结果常常得到伸直链晶体。 12. 判断下列叙述中不正确的是（ C ）。 A．高聚物的取向状态是热力学上一种非平衡态； B．结晶高聚物中晶片的取向在热力学上是稳定的； C．取向使材料的力学、光学、热性能各向同性。 13.关于高聚物和小分子物质的区别，下列( D )说法正确 ⑴高聚物的力学性质是固体弹性和液体粘性的综合； ⑵高聚物在溶剂中能表现出溶胀特性，并形成居于固体和液体的一系列中间体系； ⑶高分子会出现高度的各向异性。 A. ⑴⑵对 B. ⑵⑶对 C. ⑴⑶对 D.全对 三、问答题： 学习资料月考试题目年6▲为08概述第一章 种你在日常生活中遇到的高分子的名称。说出10 、蛋白质、核酸、涂料、塑料、合成纤维答：涤纶、聚四氟乙烯、聚乙烯、聚丙烯、PET）（6；（5）尼龙；3）PVC；（4）POM写出下列高分子的重复单元的结构式：（1）PE；（2）PS；（涤纶CH2－－CH2－1（）PE——聚乙烯答： ——聚苯乙烯（2）PS ——聚氯乙烯PVC （3）－O－CH2）POM——聚甲醛－（4 －－NH(CH2)5CO （5）尼龙——聚酰胺 P7 ）涤纶——聚对苯二甲酸乙二醇酯（68. 写出下列重复单元的聚合物的一般名称，指出结构单元和单体单元。（手写） 名称结构单元单体单元 CH一样聚甲基丙烯酸甲酯一样3H2CCHCOOC3 聚丙烯酸甲酯一样一样HH2CCHCOOC3尼龙-66 —NH(CH)NH—无 NHCO(CH)—NH(CH)CO—64226—CO(CH)CO—4一样聚异戊二烯一样HH2CCCCH2HC39.用简洁的语言说明下列术语。▲（1）高分子；（2）链节；（3）聚合度；（4）多分散度；（5）网状结构；（6）共聚物 答：（1）高分子也叫聚合物分子或大分子，具有高的相对分子量，其结构必须是由多个重复单元所组成，并且这些重复单元实际是或概念上是由相应的小分子衍生而来的。 （2）链节是指结构重复单元，重复组成高分子分子结构的最小结构单元。 （3）聚合度是单个聚合物分子所含单体单元的数目。 （4）多分散性：除了蛋白质、DNA等外，高分子化合物的相对分子质量都是不均一的 （5）网状结构是交联高分子的分子构造。 （6）共聚物：由一种以上单体聚合而成的聚合物。 14、平均相对分子质量为100万的超高相对分子质量PE的平均聚合度是多少？仅供学习与参考． 学习资料 P＝100×10000/28＝35700 ▲21、高分子结构有哪些层次？各层次研究的内容是什么？ 答：高分子结构由4个层次组成： a、一级结构，指单个大分子内与基本结构单元有关的结构，包括结构单元的化学组成、链接方式，构型，支化和交联以及共聚物的结构 b、二级结构，指若干链节组成的一段链或整根分子链的排列形状。 c、三级结构在二级的基础上许多这样的大分子聚集在一起而形成的结构，包括结晶结构，非晶结构，液晶结构和取向结构。 d、四级结构，指高分子在材料中的堆砌方式。 27、试分析线形、支化、交联高分子的结构和性能特点。 《新视野大学英语读写教程（第二版）第三册》课后答案 https://www.doczj.com/doc/2b85820.html,/viewthread.php?tid=16&fromuid=191597 新视野大学英语读写教程（第二版）第一册》课后答案 https://www.doczj.com/doc/2b85820.html,/viewthread.php?tid=14&fromuid=191597 《马·克思主·义基本原理概论》新版完整答案 https://www.doczj.com/doc/2b85820.html,/viewthread.php?tid=37&fromuid=191597 《毛·泽东思想和中国特色社会主·义理论体系概论》习题答案（2008年修订版的） https://www.doczj.com/doc/2b85820.html,/viewthread.php?tid=48&fromuid=191597 21世纪大学实用英语综合教程（第一册）课后答案及课文翻译 https://www.doczj.com/doc/2b85820.html,/viewthread.php?tid=4&fromuid=191597 西方经济学（高鸿业版）教材详细答案 https://www.doczj.com/doc/2b85820.html,/viewthread.php?tid=60&fromuid=191597 《新视野大学英语读写教程（第二版）第二册》课后答案 https://www.doczj.com/doc/2b85820.html,/viewthread.php?tid=15&fromuid=191597 思想道德修养与法律基础课后习题答案 https://www.doczj.com/doc/2b85820.html,/viewthread.php?tid=63&fromuid=191597 《中国近代史纲要》完整课后答案（高教版） https://www.doczj.com/doc/2b85820.html,/viewthread.php?tid=81&fromuid=191597 《全新版大学英语综合教程》（第三册）练习答案及课文译文 https://www.doczj.com/doc/2b85820.html,/viewthread.php?tid=77&fromuid=191597 《全新版大学英语综合教程》（第一册）练习答案及课文译文 https://www.doczj.com/doc/2b85820.html,/viewthread.php?tid=75&fromuid=191597 《会计学原理》同步练习题答案 https://www.doczj.com/doc/2b85820.html,/viewthread.php?tid=305&fromuid=191597 《微观经济学》课后答案（高鸿业版） https://www.doczj.com/doc/2b85820.html,/viewthread.php?tid=283&fromuid=191597 《统计学》课后答案（第二版，贾俊平版） https://www.doczj.com/doc/2b85820.html,/viewthread.php?tid=29&fromuid=191597 《西方经济学》习题答案（第三版，高鸿业）可直接打印 https://www.doczj.com/doc/2b85820.html,/viewthread.php?tid=289&fromuid=191597 毛邓三全部课后思考题答案(高教版)/毛邓三课后答案 https://www.doczj.com/doc/2b85820.html,/viewthread.php?tid=514&fromuid=191597 新视野大学英语听说教程1听力原文及答案下载 https://www.doczj.com/doc/2b85820.html,/viewthread.php?tid=2531&fromuid=191597 西方宏观经济高鸿业第四版课后答案 https://www.doczj.com/doc/2b85820.html,/viewthread.php?tid=2006&fromuid=191597 《管理学》经典笔记（周三多，第二版） https://www.doczj.com/doc/2b85820.html,/viewthread.php?tid=280&fromuid=191597 《中国近代史纲要》课后习题答案 https://www.doczj.com/doc/2b85820.html,/viewthread.php?tid=186&fromuid=191597 《理论力学》课后习题答案 https://www.doczj.com/doc/2b85820.html,/viewthread.php?tid=55&fromuid=191597 《线性代数》（同济第四版）课后习题答案（完整版） https://www.doczj.com/doc/2b85820.html,/viewthread.php?tid=17&fromuid=191597 第1章 高分子链的结构 1. 写出聚氯丁二烯的各种可能构型。 略 2. 构型与构象有何区别？聚丙烯分子链中碳－碳单键是可以旋转的，通过单建的内旋转是否可以使全同立构的聚丙烯变为间同立构的聚丙烯？为什么? 答：构型：是指分子中由化学键所固定的原子在空间的几何排列。 构象：由于分子中的单键内旋转而产生的分子在空间的不同形态。 全同立构聚丙烯与间同立聚丙烯是两种不同构型，必须有化学键的断裂和重排。 3. 为什么等规立构聚苯乙烯分子链在晶体中呈31螺旋构象，而间规立构聚氯乙稀分子链在晶体中呈平面锯齿构象？ 答：因为等规PS 上的苯基基团体积较大，为了使体积较大的侧基互不干扰，必须通过C －C 键的旋转加大苯基之间的距离，才能满足晶体中分子链构象能量最低原则；对于间规PVC 而言，由于氢原子体积小，原子间二级近程排斥力小，所以，晶体中分子链呈全反式平面锯齿构象时能量最低。 4. 哪些参数可以表征高分子链的柔顺性？如何表征？ 答： 空间位阻参数δ 2 1 2,20??????=r f h h δ δ越大,柔顺性越差；δ越小，柔顺性越好； 特征比C n 220nl h c n = 对于自由连接链 c n =1 对于完全伸直链c n =n ，当n→∞时，c n 可定义为c ∞，c ∞越小，柔顺性越好。 链段长度b ：链段逾短，柔顺性逾好。 5. 聚乙烯分子链上没有侧基，内旋转位能不大，柔顺型好。该聚合物为什么室温下为塑料而不是橡胶？ 答：因为聚乙烯结构规整，易结晶，故具备了塑料的性质，室温下聚乙烯为塑料而不是橡胶。 6. 从结构出发，简述下列各组聚合物的性能差异： (1) 聚丙烯腈与碳纤维； 线性高分子 梯形高分子 (2)无规立构聚丙烯与等规立构聚丙烯； 非晶高分子 结晶性高分子 (3)顺式聚1,4-异戊二烯(天然橡胶)与反式聚1,4-异戊二烯; 柔性 (4)高密度聚乙烯、低密度聚乙烯与交联聚乙烯。高分子化学课后习题问题详解
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