头孢克洛干混悬剂中有关物质的研究
向世英1 林 波2 梁振益2
(1.海南通用三洋药业有限公司,海口 570008; 2.海南大学材料与化工学院,海口 570228)
摘要 建立HPLC法测定头孢克洛干混悬剂中的有关物质。色谱柱为Hype rsil C18BDS柱,流动相A为0.78%磷酸二氢钠溶液(pH4.0),流动相B为0.78%磷酸二氢钠溶液-乙腈(体积比为55∶45),流速为1mL/m i n,检测波长为220n m。该方法测定结果的相对标准偏差为0.01%(n=6),标示样品测定结果的相对误差不大于1.0%,可满足企业质量控制的检测要求。
关键词 HP LC法 头孢克洛 有关物质 干混悬剂 分析
头孢克洛为口服第3代头孢类抗菌素,抗菌谱广,对敏感革兰氏阳性菌及阴性菌均有抗菌活性,特别是革兰氏阳性菌中的链球菌(肠球菌除外)、肺炎球菌和革兰氏阴性菌中的淋球菌、布兰汉氏球菌等有较强的抗菌作用,其作用机制为阻止细菌细胞壁的合成,其作用点因细菌的种类而异,与青霉素结合蛋白(P B P)中的P B P(1a,1b,1c)以及P B P3有较高亲和性。对各种细菌产生的B2内酰胺酶具有较强的稳定性,对链球菌属(肠球菌除外)、肺炎球菌、淋球菌等引起的感染有效,如慢性支气管炎急性发作、急性支气管炎并发细菌感染、支气管扩张合并感染、肺炎、肾盂肾炎、膀胱炎等病症均适用[1]。头孢克洛遇光、热不稳定,易产生降解产物,合成时可能引入原料、中间体、副产物等杂质。为了更好地控制其质量,以保证人们用药安全,笔者建立了头孢克洛有关物质的HPLC测定方法,该方法简单、快速、重现性好。
1 实验部分
1.1 主要仪器与试剂
高效液相色谱仪:LC-10A型,配有LC-10A Tvp型高压输送泵,SP D-10Avp型紫外检测器, Ana star色谱工作站,日本岛津公司;
智能溶出试验仪:ZRS-8G型,天津大学精密仪器厂;
紫外/可见分光光度计:T U-1800型,北京普析通用仪器有限责任公司;
乙腈:色谱纯,美国Tedia公司;
磷酸二氢钾、磷酸二氢钠:分析纯,广州化学试剂厂;
头孢克洛对照品中国药品生物制品检定所;
头孢克洛δ232异构体对照品中国药品生物制品检定所;
超纯水:美国Poll公司。
1.2 色谱条件
色谱柱:Hypersil C18BDS柱(200mm×4.6mm i.d.,5μm);流动相A为0.78%磷酸二氢钠溶液(取磷酸二氢钠7.8g加水溶解并稀释至1000mL,用磷酸调节pH至4.0),流动相B为0.78%磷酸二氢钠溶液-乙腈(体积比为55∶45),流速为1.0mL/ m i n,线性梯度洗脱(见表1);检测波长:220nm。
表1 线性梯度洗脱时间与流动相
时间/m i n流动相A/%流动相B/%
0955
307525
450100
500100
51955
61955
1.3 实验方法[1]
(1)头孢克洛对照品溶液制备
取头孢克洛对照品适量,精密称定,加0.27%磷酸二氢钠溶液溶解并稀释成浓度为50μg/mL的头孢克洛对照品溶液,摇匀。
(2)头孢克洛δ232异构体对照品溶液制备
取头孢克洛δ232异构体对照品适量,精密称定,加0.27%磷酸二氢钠溶液溶解并稀释成浓度为每100μg/mL的头孢克洛δ232异构体对照品溶液,摇匀。
(3)混合溶液配制
分别取头孢克洛对照品溶液和头孢克洛δ232异构体对照品溶液适量,用0.27%磷酸二氢钠溶液溶解并稀释,制成25μg/mL头孢克洛-50μg/mL头孢克洛δ232异构体对照品的混合溶液,摇匀。
收稿日期22
24化学分析计量2009年,第18卷,第1期
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:20080927